JP2019210271A - 抗i型アレルギー剤 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)花粉やダニなどの抗原(アレルゲン)が生体内に侵入すると、ヘルパーT細胞(Th2細胞)が指令を出しB細胞を免疫グロブリンE(IgE)抗体産生細胞へと分化させる。
(2)IgE抗体産生細胞からその抗原に特異的なIgE抗体が産生される。
(3)IgE抗体が肥満細胞又は好塩基球に結合し、そこに再び抗原が結合することによりヒスタミン、ロイコトリエン等の化学伝達物質が分泌(脱顆粒)され、アレルギー症状が発現する。
[製造例1]
サトウキビの搾りかすであるバガス15kg(含水率50質量%)及び0.5%(w/w)水酸化ナトリウム水溶液100Lを混合し、150℃の条件でアルカリ処理を行った。アルカリ処理後の混合液を固形分と液分に分離して、液分を約100L得た。分画分子量2500のUF膜(GEウォーター&プロセス・テクノロジー社、GH8040F30)を用いて限外濾過を行い、濾過液80Lを得た。合成吸着剤(三菱ケミカル株式会社製、HP−20)1Lを樹脂塔(内径80mm、高さ400mm)に充填し、これに上記の濾過液を、pHを6に調整してから流速10L/時間(SV=10.0(時間−1))で通液した。
サトウキビの搾りかすであるバガス30kg(含水率50質量%)を、200℃、1.8MPaの熱水100Lで水熱処理を行った。前処理後の混合液を固形分と液分とに分離して、液分を約88L得た。分画分子量2500のUF膜(GEウォーター&プロセス・テクノロジー社、GH8040F30)を用いて限外濾過を行い、濾過液70Lを得た。合成吸着剤(三菱ケミカル株式会社製、SP−850)1Lを樹脂塔(内径80mm、高さ400mm)に充填し、これに上記の濾過液のうち25Lを、流速20L/時間(SV=20.0(時間−1))で通液した。
、溶出溶媒として60%エタノール水溶液(エタノール/水=60/40(体積/体積))2Lを、流速2L/時間(SV=2.0(時間−1))で樹脂塔に通液した。続けて、2Lの精製水を流速2L/時間(SV=2.0(時間−1))で樹脂塔に通液し、合成吸着剤に吸着した成分を溶出させた。樹脂塔から溶出した画分を、ロータリーエバポレーターにて約10倍の濃度に減圧濃縮したのち、一晩凍結乾燥して、バガスの分解抽出物として、茶褐色の粉末40gを得た。これを抽出物Wとした。
[試験液の調製]
抽出物Aを水に溶解させて、50mg/mLの試験液原液を調製した。この試験液原液を以下の表1に示す緩衝溶液で希釈し、検体濃度2000、1000及び500μg/mLの試験液をそれぞれ調製した。
ラット好塩基球性白血病細胞であるRBL−2H3細胞(国立研究開発法人 医薬基盤・健康・栄養研究所)を96ウェルプレートに播種後、一晩培養した。表1に示す組成を有し、更に抗DNP−IgE抗体を含む培地を添加し、37℃で2時間反応させた後、細胞を緩衝溶液で洗浄した。さらに、調製した2000、1000及び500μg/mLの試験液を、終濃度がそれぞれ1000μg/mL(実施例1)、500μg/mL(実施例2)及び250μg/mL(実施例3)となるように添加した。その後、37℃で10分間反応させてから、DNP標識ヒト血清アルブミンを加え、37℃で更に3時間反応させた。また、試験液を添加せず、緩衝溶液のみを添加したものを未処置対照(比較例1)、ウォルトマンニン(和光純薬(株))を終濃度25nmol/Lとなるように添加したものを陽性対照として同様に試験を行った。また、抗DNP−IgE抗体を含まない培地を添加した後、緩衝溶液及びDNP標識ヒト血清アルブミンを順次加えて、同様に反応させたものを抗原未刺激対照とした。
実施例1〜3、比較例1、陽性対照、抗原未刺激対照及びサンプルブランクの各サンプルについて、マイクロプレートリーダー(SpectraMax M2e、モレキュラーデバイス社)を用いて、顆粒中に存在するβ−ヘキソサミニダーゼと基質との反応により生じたp−ニトロフェノールの吸光度を測定した(測定波長:405nm、対照波長:650nm)。
放出率(%)=細胞上清側の吸光度/(細胞上清側の吸光度+細胞溶液側の吸光度)
脱顆粒率(%)={(試験液の放出率−抗原未刺激対照の放出率)/(未処置対照の放出率−抗原未刺激対照の放出率)の平均値}×100
[試験液の調製]
抽出物Wをエタノールに溶解させて、50mg/mLの試験液原液を調製した。この試験液原液を上述の表1に示す緩衝溶液で希釈し、検体濃度1000、500及び250μg/mLの試験液をそれぞれ調製した。
調製した抽出物Wを含む試験液を用い、上述の試験例1における試験操作中、試験液の終濃度が500μg/mL(実施例4)、250μg/mL(実施例5)及び125μg/mL(実施例6)となるように試験液を添加した以外は、試験例1と同様の方法によって脱顆粒率を算出した。比較例1は、試験例1と同様の未処置対照である。
Claims (9)
- バガスの分解抽出物を有効成分として含有する、抗I型アレルギー剤。
- 前記バガスの分解抽出物は、アルカリ処理、水熱処理、酸処理、亜臨界水処理、微粉砕処理及び爆砕処理からなる群より選ばれる少なくとも1種の分解処理により得られる分解処理液である、請求項1に記載の抗I型アレルギー剤。
- 前記バガスの分解抽出物は、前記分解処理液を、固定担体を充填したカラムに通液することより得られる画分である、請求項2に記載の抗I型アレルギー剤。
- 前記固定担体は、合成吸着剤又はイオン交換樹脂である、請求項3に記載の抗I型アレルギー剤。
- 前記固定担体が合成吸着剤であり、前記バガスの分解抽出物は、該合成吸着剤に吸着された成分を、水、メタノール、エタノール及びこれらの混合物からなる群より選ばれる少なくとも1種の溶媒で溶出させることにより得られる画分である、請求項3に記載の抗I型アレルギー剤。
- 前記合成吸着剤は、芳香族系樹脂、アクリル酸系メタクリル樹脂、又はアクリロニトリル脂肪族系樹脂である、請求項4又は5に記載の抗I型アレルギー剤。
- 前記バガスの分解抽出物は、前記分解処理液を、固定担体としての合成吸着剤を充填したカラムに通液し、該合成吸着剤に吸着された成分を、エタノール及び水の混合溶媒で溶出させて得られる画分であり、
前記合成吸着剤は、無置換基型の芳香族系樹脂であり、
前記カラムの温度は20〜60℃であり、
前記混合溶媒のエタノール及び水の体積比(エタノール/水)は50/50〜60/40である、請求項2に記載のI型アレルギー剤。 - 肥満細胞又は好塩基球の脱顆粒抑制作用に基づくものである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の抗I型アレルギー剤。
- バガスの分解抽出物を有効成分として含有する、肥満細胞又は好塩基球の脱顆粒抑制剤。
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JP2003137803A (ja) * | 2001-10-30 | 2003-05-14 | Ryuukyuu Cement Kk | サトウキビポリフェノール含有物を有効成分とする医薬剤並びにその用途 |
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三菱ケミカル: "合成吸着剤", [ONLINE], JPN6019025437, 4 April 2017 (2017-04-04), ISSN: 0004803156 * |
古田到真 他: "国内製糖工場廃棄物からの有価物製造におけるGHG削減技術実証", 精糖技術研究会誌, vol. 63, JPN6019025436, 2017, pages 7 - 10, ISSN: 0004803155 * |
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