JP2019022828A - 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法 - Google Patents

細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2019022828A
JP2019022828A JP2018218486A JP2018218486A JP2019022828A JP 2019022828 A JP2019022828 A JP 2019022828A JP 2018218486 A JP2018218486 A JP 2018218486A JP 2018218486 A JP2018218486 A JP 2018218486A JP 2019022828 A JP2019022828 A JP 2019022828A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
extracellular matrix
matrix material
solubilized
gel
naoh
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2018218486A
Other languages
English (en)
Inventor
ケントナー,キンバリー,エー.
A Kentner Kimberly
スチュアート,キャサリン,エー.
A Stuart Katherine
ジャニス,アブラム,ディー.
D Janis Abram
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Acell Inc
Original Assignee
Acell Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Acell Inc filed Critical Acell Inc
Publication of JP2019022828A publication Critical patent/JP2019022828A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3604Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix characterised by the human or animal origin of the biological material, e.g. hair, fascia, fish scales, silk, shellac, pericardium, pleura, renal tissue, amniotic membrane, parenchymal tissue, fetal tissue, muscle tissue, fat tissue, enamel
    • A61L27/3633Extracellular matrix [ECM]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18Growth factors; Growth regulators
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1825Fibroblast growth factor [FGF]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1858Platelet-derived growth factor [PDGF]
    • A61K38/1866Vascular endothelial growth factor [VEGF]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14Macromolecular materials
    • A61L27/22Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3687Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by the use of chemical agents in the treatment, e.g. specific enzymes, detergents, capping agents, crosslinkers, anticalcification agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3691Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by physical conditions of the treatment, e.g. applying a compressive force to the composition, pressure cycles, ultrasonic/sonication or microwave treatment, lyophilisation
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/52Hydrogels or hydrocolloids
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/22Urine; Urinary tract, e.g. kidney or bladder; Intraglomerular mesangial cells; Renal mesenchymal cells; Adrenal gland
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/252Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A61L2300/414Growth factors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

【課題】煩雑な調製及び精製工程を避けつつ、当初の材料の生理活性を保つゲルを生じる、ECMからの生理活性ゲルの製造が必要とされている。
【解決手段】本発明は、ECM材料から生理活性ゲル、すなわち、生理活性を保ち、かつ前臨床及び臨床組織工学並びに組織再建への再生医療アプローチのための足場として働くことのできるゲルを製造する方法を対象とする。本製造方法は、アルカリ性環境で微粒子化されたECM材料を消化し、中和して生理活性ゲルを得ることにより、ECM材料からの生理活性ゲルを作製できるという新しい認識を利用している。
【選択図】 図1

Description

本発明は、細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法及び患者の組織の復元のためのその使用に関する。
細胞外マトリックス材料(ECM: extracellular matrix material)から構成される生物学的足場は、下部尿路、食道、心筋及び筋腱組織を含む様々な組織の修復のために使用されており、これにより、瘢痕組織の形成が最小限、又は全く形成されない、組織特異的で有益な再形成が導かれることが多い。
前臨床及び臨床組織工学並びに組織再建への再生医療アプローチのために、ECMを足場として使用することは非常に有望であるが、生理活性を保っている生理活性ゲルをECMから製造するプロセスには、課題が残っている。
先行技術に記載されたECMから生理活性ゲルを製造する方法では、酵素の使用が必要であり、かつ過度の精製工程が必要であるため時間がかかる。これにより、ゲルの生理活性が低下することがあり、また上市に対する追加の規制障壁を生じさせることがある。
よって、煩雑な調製及び精製工程を避けつつ、当初の材料の生理活性を保つゲルを生じる、ECMからの生理活性ゲルの製造が必要とされている。
本発明は全体として、積極的に組織修復の助けとなるように、十分な生理活性を保つ、ECMから生理活性ゲルを製造する改善された方法に関する。本発明は、本ゲル発明の上市の承認又は認可のための更なる規制負担を招かない試薬を利用する。よって、本発明は、ECMから生理活性ゲルを製造する方法であって、(a)小腸粘膜下組織(SIS: smallintestine submucosa)、膀胱粘膜下組織(UBS: urinary bladder submucosa)、膀胱マトリックス(UBM: urinary bladder matrix)(上皮基底膜を含む)、ブタ真皮(PD: porcine dermis)、及び肝臓基底膜(LBM: liver basement membrane)からなるが、これらに限定されない群の中の1つ又は複数からECMを用意することと、(b)ECMを、約1μm〜約1000μmの範囲の粒子サイズに微粒子化することと、(c)0.1〜1.0Mの範囲の水酸化ナトリウム(NaOH)中で、濃度が約0.5〜11重量/体積(w/v)%の範囲の微粒子化された粉末を、約1時間〜約48時間の範囲の時間、4℃で可溶化することと、(d)工程(c)で調製された可溶化されたECMを、0.1〜1Mの範囲の塩酸(HCl)で、任意選択によりNaOHに対して等モルの塩酸で中和して、ゲルを形成することと、(e)任意選択により、工程(d)で調製された、可溶化され中和されたECMを凍結することと、任意選択により(f)工程(e)で調製された凍結したECMを凍結乾燥することと、任意選択により(f)凍結乾燥したゲルを水又は食塩水で戻すこととを含む、方法を示す。
上記のように生理活性ゲルを製造する方法により提供される利点は、生理活性に有害であるか、実施するには冗長であるか、又は時間がかかり、かつ規制負担(例えばFDA承認)を増大させる、過度の精製工程が避けられることである。
本発明の実施形態による、NaOH中での様々な可溶化条件に従うゲルのFGF−2含有量(pg/mg)を示す図である。%w/vで示されていない全てのゲルは、NaOHに対して7.0%w/vのUBMで行った。図1の全てのゲルは、NaOHに対して7.0%w/vのUBMで行った。 本発明の実施形態による、NaOH中での様々な可溶化条件に従うゲルのVEGF含有量(pg/mg)を示す図である。%w/vで示されていない全てのゲルは、NaOHに対して7.0%w/vのUBMで行った。図1の全てのゲルは、NaOHに対して7.0%w/vのUBMで行った。
本発明は、ECMから生理活性ゲルを製造する方法を対象とする。すなわち、本発明による生理活性ゲルで処理されていない損傷組織と比較して、修復に必要な時間を減少させること、瘢痕組織の形成を減少させること、並びに損傷組織の損傷前の天然の構造及び機能への復元を改善することにより、積極的に組織修復の助けとなるように、十分な生理活性を保つゲルを製造する方法を対象とする。ゲルの発明及び本明細書に記載の作製方法は、前臨床及び臨床組織工学並びに組織再建への再生医療アプローチのための足場として働く。本発明によるECMゲル中の生理活性は、ゲルが由来した天然のECM中の1つ又は複数の生理活性分子の生理活性の約0〜100%、25〜75%、10〜25%、10%未満、5%未満又は1%未満の範囲にある。以下で詳細に記載されるように、これらの製造方法は、塩基性(pH7を超える)環境で微粒子化されたECMを可溶化することで、ECMからの生理活性ゲルを作製できるという新しい認識を利用しているが、その塩基性環境を酸で中和すると生理活性ゲルが得られる。
本発明の方法によると、ECMは、粘膜下組織、真皮、上皮基底膜を含むがこれらに限定されない天然の哺乳動物組織の層、又は腱膜、筋膜、腱、靱帯、平滑筋及び骨格筋並びに治療部位特異的ECMなどの組織に由来し得る。天然の哺乳動物組織源は例えば、ブタ、ウシ、ヒツジ、同種、又は自家であってもよい。例えば、ECMは、米国特許第6,576,265号、米国特許第6,579,538号、米国特許第5,573,784号、米国特許第5,554,389号、米国特許第4,956,178号、及び米国特許第4,902,508号に記載されるSIS(小腸粘膜下組織)、UBS(膀胱粘膜下組織)若しくはUBM(膀胱マトリックス)又は肝臓基底膜(LBM)であってもよく、上記特許文献のそれぞれは、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の一実施形態において、ECMは哺乳動物組織に由来し、天然型の組織のものと同様の量で同様に配置されている細胞外マトリックス材料の生理活性成分を含む。
本発明の方法によると、上記組織源のいずれか1つに由来するECMは、微粒子化されている、すなわち、ECM粒子のサイズは、約1μm〜約1000μmの範囲にある。一実施形態において、ECMを塩基性環境下に置く前に、ECMを微粒子化することにより、ECMが均質になる、すなわち、個々の動物からのECMよりも均一な組成物が得られ、これによりドナー間の変動性の影響が減少する。別の実施形態において、ECMを微粒子化することで、体積に対する表面積の比率が増大し、マトリックスの塩基性環境下での可溶化が容易になる。
微粒子のECM製品、例えば、微粒子化されたECMは、典型的に、ただし限定せずに、最初はシート状で提供されるECMに対して、摩砕/粉砕又はサイズを小さくする他のプロセスを行うことにより製造される。結果として得られる微粒子は、任意の所望の密度の範囲、例えば約0.1g/cm〜10g/cm、約0.10.1g/cm〜1g/cm又は約1g/cmの範囲、及び粒子サイズの範囲、例えば約1ミクロン〜1000ミクロン、約200〜700ミクロン、約300〜600ミクロン、又は約400ミクロンの範囲にすることができる。
塩基性環境は、アルカリ性化合物の溶液により提供される。本発明に従って使用できるアルカリ性化合物は金属水酸化物であり、LiOH、NaOH、KOH、RbOH、及びCsOHを含むが、これらに限定されない。本発明に従って使用できるアルカリ性化合物は弱塩基も含み、アンモニア(NH)、ピリジン(CN)、ヒドロキシルアミン(HNOH)、メチルアミン(NHCH)及びこれに類するものなどがあるが、これらに限定されない。アルカリ性化合物は通常、0.1モル〜1.0モルの範囲の濃度で使用されるが、0.1モルより低い濃度又は1.0モルより高い濃度も、本発明の実施形態で考慮される。
微粒子化されたECMのNaOHに対する濃度(w/v)は、0.1%〜約20%、特に0.5%〜11%の範囲にあり、より具体的には、7%である。
微粒子化されたECMの4℃での可溶化工程(すなわち、消化)は、数分〜数時間(例えば、30分〜48時間)又は数日間(例えば、3〜7日間)、30分〜12時間、12〜24時間、24〜36時間、36〜48時間、又は2〜7日間の範囲の時間にわたってもよい。本発明の実施形態において、消化工程に必要な時間は、微粒子化された細胞外マトリックス材料のサイズ及び/又は可溶化に使用される金属水酸化物の濃度によって決定されると考えられる。例えば、NaOHなどのアルカリ性化合物の濃度が低い場合、長時間の培養、すなわち、長時間の可溶化が必要であってもよい。塩基性溶液中での可溶化工程の後、可溶化されたECM(すなわち、ゲル状)を、モル濃度、例えば、可溶化されたECMがpH6.8〜7.4に達するのに十分な容量の等モルの濃度の酸を使用して、中性pHに中和する。ECMゲルの中和の助けとなる酸は、弱酸又は強酸から選択できる。中和工程のための酸の選択性は、中和中に酸が塩基性環境と反応する際に生成される塩に依存する。生じる塩は、生体適合性とすべきである。例えば、本発明の実施形態において、塩酸(HCl)は、塩基NaOHにより形成された塩基性環境を中和するために使用されるが、これは、生じる塩(すなわち、NaCl)が臨床上許容できるからである。
変性した生理活性成分のリフォールディングを促進するために、中和の後、任意選択により、ゲルは、様々な滞留時間、1〜48時間、12〜36時間、又は36〜48時間に従うことができる。滞留時間は通常、ゲルを振とう若しくは撹拌して、又は振とう若しくは撹拌せずに、低温室(すなわち、約4℃の温度)で、又は室温で行われる。滞留時間は、ゲルの再構築を促進するために、48時間〜数日間、例えば、3〜7日間を超えてもよい。
本発明の方法によると、一旦ゲルが中和されれば、中和されたゲルを粉末(中性pHを有する)に容易に転換するために、任意選択により1つ又は複数の凍結乾燥サイクルの工程を行ってもよい。粉末は、水などの液体、又はゲルの中性pHを維持する緩衝溶液と粉末を混合することにより、生理活性を変えずにゲルに戻すことができる。更に、ECMの生理活性は、凍結乾燥を通じて保存され得る。
本発明に従う一実施形態において、凍結乾燥され、可溶化されたECMは、水及び2本の3mLシリンジを使用して、戻される。一方のシリンジは凍結乾燥したゲルを含有し、他方は水を含有し、これらを2本のシリンジの間のコネクタを通して混合する。混合を達成するため、混合物を、前後に数回注入する。2本のシリンジシステムを使用して、NaOH中の様々な濃度のECMの取扱い性(すなわち、注入性、粘着性、粘度)を試験することができ、適用可能性を決定できる。全てのゲルの最終粘稠度は泡状であり、それぞれが、適用される表面に付着しながら、粘稠度も維持するが、これは、無重力条件、例えば、宇宙において望ましいことがある。したがって、ゲルの発明は、宇宙探査中の組織修復に使用できる。
一実施形態において、ゲルの粘度又は生理活性を増大するために、可溶化され、かつ中和されたECMゲルに対し、微粒子化されたECMが加えられる。例えば、サイズ範囲が約1ミクロン〜1000ミクロン、約200〜700ミクロン、約300〜600ミクロン、約100〜400ミクロン、約200ミクロン又は約400ミクロンのUBM粉末を、上記方法により調製されたUBMゲルに加えて、ゲルの粘度又は生理活性を向上する、すなわち、ゲルの取扱い性を良好にし、又はゲルがより高濃度の生理活性分子、例えば、FGFなどの成長因子、例えば、FGF−2、CTGF、若しくはVEGFを生成できるようにする。ECM粉末は、ゲルの中和前、中和中、又は中和後に加えることができる。
特定の実施形態において、生理活性ゲルを製造するために、4℃で可溶化された、100mMのNaOHに対して7.0%のUBMが使用される。滞留時間は使用しても使用しなくてもよい。粘度及び/又は生理活性を増大するために、UBM粉末をゲルに加えてもよい。
例証
下記の例証では、例えば分離された膀胱粘膜下組織、小腸粘膜下組織、真皮のうちの1つ又は複数などの、ただしこれらに限定されない任意の数のECM製品を使用できる。下記の例証では、膀胱から分離され、上皮基底膜を有するECMであるUBMが、代表的なECMとして使用される。しかし、本明細書で開示される発明はUBMに限定されず、任意の分離されたECMに適用可能である。
例証において、様々な濃度のNaOH(0.1〜1.0M)中に可溶化された、様々な濃度の微粒子化されたUBM(0.5〜11%w/v)を使用して、ゲルを作製した。UBMを、様々な時間(1〜48時間)、UBM及びNaOHのそれぞれの濃度で、4℃で可溶化した。UBMが可溶化後に再構築できるか試験するために、中和後、様々な滞留時間(1〜48時間)も使用して、ゲルを作製した。
上記のように作製したUBMゲルを、生理活性分子含有量について、in vitroで試験した。この研究において、成長因子(例えば、FGF-2、CTGF、VEGF)の含有量を分析した。各ゲル構造の可溶化後のFGF−2及びVEGF含有量のデータを、図1及び図2に示す。より低濃度のゲル(1〜6%)は示さないが、同様の結果であった。図1及び図2に示すように、これらの研究において、FGF−2及びVEGF、特にVEGFレベルが増大した。
1つの研究において、様々な範囲のNaOHに対して、7.0%w/vのUBMを使用して、24時間、4℃で可溶化し、滞留時間を設けないことで、ゲル中のFGF−2及びVEGF含有量が著しく影響を受けることが見出された。FGF−2及びVEGF含有量は、標準ELISA法による値とした。

Claims (15)

  1. 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法であって、
    a)哺乳動物組織に由来し、天然型の前記組織で見出される量で配置されている、細胞外マトリックス材料の生理活性成分を含む、細胞外マトリックス材料を用意することと、
    b)a)の前記細胞外マトリックス材料を微粒子化することと、
    c)b)の前記微粒子化された細胞外マトリックス材料を、アルカリ性溶液中で可溶化することと、
    d)酸の添加により、工程c)の前記溶液を中和することと
    を含む、方法。
  2. e)工程d)で調製された、前記可溶化され中和された細胞外マトリックス材料を凍結することと、
    f)工程e)で調製された、前記凍結した材料を凍結乾燥することと
    を更に含む、請求項1に記載の方法。
  3. 前記凍結乾燥したゲルを水溶液中で戻すことを更に含む、請求項2に記載の方法。
  4. 工程d)の後、4℃で最大48時間の滞留時間を更に含む、請求項1に記載の方法。
  5. 工程c)の時間が、30分〜48時間、及び3〜7日間からなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
  6. 前記細胞外マトリックス材料が、小腸粘膜下組織、膀胱粘膜下組織、上皮基底膜を含む膀胱マトリックス、及び肝臓基底膜からなる群に由来する、請求項1に記載の方法。
  7. 前記微粒子化された細胞外マトリックス材料の粒子範囲サイズが、1μm〜約1000μmである、請求項1に記載の方法。
  8. 前記細胞外マトリックス材料が、モル濃度範囲約0.1M〜約1.0MのNaOH中に、微粒子化された細胞外マトリックス材料の濃度約0.5%〜11%w/vで可溶化される、請求項1に記載の方法。
  9. 前記可溶化された細胞外マトリックス材料が、塩酸中で中和される、請求項1に記載の方法。
  10. 前記塩酸が、0.1M〜1.0Mの濃度を含む、請求項9に記載の方法。
  11. 前記生理活性成分が、FGF−2、CTGF及びVEGFからなる群から選択される、請求項1に記載の方法。
  12. 前記細胞外マトリックスが2時間を超えて可溶化される際、前記可溶化された細胞外マトリックス材料中の前記FGF−2の濃度が、前記細胞外マトリックス材料が1.0MのNaOH中に可溶化される場合、100mMのNaOH中に可溶化される場合よりも高い、請求項11に記載の方法。
  13. 前記細胞外マトリックス材料が2時間を超えて可溶化される際、前記可溶化された細胞外マトリックス材料中の前記VEGFの濃度が、前記細胞外マトリックス材料が1.0MのNaOH中に可溶化される場合、100mMのNaOH中に可溶化される場合よりも高い、請求項11に記載の方法。
  14. 前記微粒子化された細胞外マトリックス材料がUBMを含み、前記UBMが、100mMのNaOH中に、微粒子化されたUBMの濃度7%で、4℃で24時間可溶化される、請求項1に記載の方法。
  15. 工程(b)の前記微粒子化された材料が、200〜700ミクロンの範囲にある、請求項1に記載の方法。
JP2018218486A 2013-02-08 2018-11-21 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法 Pending JP2019022828A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361762437P 2013-02-08 2013-02-08
US61/762,437 2013-02-08

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017119295A Division JP6622253B2 (ja) 2013-02-08 2017-06-19 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2020137567A Division JP2020185450A (ja) 2013-02-08 2020-08-17 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2019022828A true JP2019022828A (ja) 2019-02-14

Family

ID=50238445

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2015557083A Expired - Fee Related JP6164782B2 (ja) 2013-02-08 2014-02-07 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法
JP2017119295A Expired - Fee Related JP6622253B2 (ja) 2013-02-08 2017-06-19 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法
JP2018218486A Pending JP2019022828A (ja) 2013-02-08 2018-11-21 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法
JP2020137567A Pending JP2020185450A (ja) 2013-02-08 2020-08-17 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2015557083A Expired - Fee Related JP6164782B2 (ja) 2013-02-08 2014-02-07 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法
JP2017119295A Expired - Fee Related JP6622253B2 (ja) 2013-02-08 2017-06-19 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2020137567A Pending JP2020185450A (ja) 2013-02-08 2020-08-17 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Country Status (10)

Country Link
US (7) US8802436B1 (ja)
EP (2) EP3610895A1 (ja)
JP (4) JP6164782B2 (ja)
KR (5) KR101874819B1 (ja)
AU (2) AU2014214819B2 (ja)
CA (1) CA2899931C (ja)
DK (1) DK2953659T3 (ja)
ES (1) ES2764146T3 (ja)
HK (1) HK1218887A1 (ja)
WO (1) WO2014124203A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2020185450A (ja) * 2013-02-08 2020-11-19 アセル,インコーポレイテッド 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008109407A2 (en) 2007-03-02 2008-09-12 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Extracellular matrix-derived gels and related methods
HUE033504T2 (en) 2008-09-30 2017-12-28 Univ California Compositions comprising a decellularized extracellular matrix extracted from cardiac tissue
WO2012027514A2 (en) 2010-08-24 2012-03-01 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for cardiac therapy
EP3119448B1 (en) 2014-03-21 2020-04-22 University of Pittsburgh- Of the Commonwealth System of Higher Education Methods for preparation of a terminally sterilized hydrogel derived from extracellular matrix
JP6499278B2 (ja) * 2014-09-25 2019-04-10 アセル,インコーポレイテッド 細胞外マトリックス由来の多孔質フォーム、多孔質フォームecm医療装置、並びに、それらの使用及び製造方法
US20160303281A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 Rochal Industries, Llc Composition and kits for pseudoplastic microgel matrices
CA3017747A1 (en) 2016-03-14 2017-09-21 Regentys Corporation Method and composition for treating inflammatory bowel disease
US10150115B2 (en) * 2016-07-21 2018-12-11 Spacepharma SA System and method for rehydrating powder and delivering the rehydrated powder to a reactor
ES2931299T3 (es) 2017-03-02 2022-12-28 Univ Pittsburgh Commonwealth Sys Higher Education Hidrogel de matriz extracelular (ECM) y fracción soluble del mismo para su utilización en el tratamiento del cáncer
ES2957291T3 (es) 2017-03-02 2024-01-16 Univ Pittsburgh Commonwealth Sys Higher Education Hidrogel de ECM para el tratamiento de la inflamación esofágica
WO2018183181A1 (en) * 2017-03-31 2018-10-04 Acell, Inc. Extracellular matrix compositions with bactericidal or bacteriostatic characteristics useful for protecting and treating patients with bacterial infections
CA3067558A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Avery Therapeutics, Inc. Three dimensional tissue compositions and methods of use
WO2020081604A2 (en) * 2018-10-15 2020-04-23 Avery Therapeutics, Inc. Cell-free compositions and methods for restoration or enhancement of tissue function
WO2021138399A1 (en) * 2019-12-30 2021-07-08 Renerva, Llc Extracellular matrix systems, devices, and methods of deployment
US11826490B1 (en) 2020-12-29 2023-11-28 Acell, Inc. Extracellular matrix sheet devices with improved mechanical properties and method of making

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4902508A (en) 1988-07-11 1990-02-20 Purdue Research Foundation Tissue graft composition
US4956178A (en) 1988-07-11 1990-09-11 Purdue Research Foundation Tissue graft composition
US5281422A (en) 1991-09-24 1994-01-25 Purdue Research Foundation Graft for promoting autogenous tissue growth
US5800537A (en) 1992-08-07 1998-09-01 Tissue Engineering, Inc. Method and construct for producing graft tissue from an extracellular matrix
US5554389A (en) 1995-04-07 1996-09-10 Purdue Research Foundation Urinary bladder submucosa derived tissue graft
DE19908318A1 (de) * 1999-02-26 2000-08-31 Michael Hoffmann Hämokompatible Oberflächen und Verfahren zu deren Herstellung
US6579538B1 (en) 1999-12-22 2003-06-17 Acell, Inc. Tissue regenerative compositions for cardiac applications, method of making, and method of use thereof
US6576265B1 (en) 1999-12-22 2003-06-10 Acell, Inc. Tissue regenerative composition, method of making, and method of use thereof
NZ536564A (en) * 2002-05-02 2008-05-30 Purdue Research Foundation Vascularization enhanced graft constructs which comprise a matrix composition consisting of liver basement membrane
DE112004001553T5 (de) * 2003-08-25 2006-08-10 Cook Biotech, Inc., West Lafayette Verpflanzungsmaterialien, die bioaktive Substanzen enthalten, und Methoden zu deren Herstellung
US8741352B2 (en) * 2003-08-25 2014-06-03 Cook Biotech Incorporated Graft materials containing ECM components, and methods for their manufacture
EP1833384B1 (en) * 2004-12-30 2017-08-16 Cook Medical Technologies LLC Inverting occlusion devices and systems
US9138445B2 (en) * 2005-03-09 2015-09-22 Cook Biotech Incorporated Medical graft materials with adherent extracellular matrix fibrous mass
US8568761B2 (en) * 2005-07-15 2013-10-29 Cormatrix Cardiovascular, Inc. Compositions for regenerating defective or absent myocardium
US20070027460A1 (en) * 2005-07-27 2007-02-01 Cook Incorporated Implantable remodelable materials comprising magnetic material
WO2007016251A2 (en) * 2005-07-28 2007-02-08 Cook Incorporated Implantable thromboresistant valve
US20070269476A1 (en) * 2006-05-16 2007-11-22 Voytik-Harbin Sherry L Engineered extracellular matrices control stem cell behavior
WO2008060377A2 (en) * 2006-10-04 2008-05-22 Anthrogenesis Corporation Placental or umbilical cord tissue compositions
JP5769925B2 (ja) * 2006-10-06 2015-08-26 アントフロゲネシス コーポレーション ヒト胎盤コラーゲン組成物、並びにそれらの製造方法及び使用方法
US8343536B2 (en) * 2007-01-25 2013-01-01 Cook Biotech Incorporated Biofilm-inhibiting medical products
WO2008109407A2 (en) * 2007-03-02 2008-09-12 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Extracellular matrix-derived gels and related methods
WO2009086499A2 (en) 2007-12-28 2009-07-09 Cook Biotech Incorporated Medical composition including an extracellular matrix particulate
US8652500B2 (en) * 2009-07-22 2014-02-18 Acell, Inc. Particulate tissue graft with components of differing density and methods of making and using the same
MX354068B (es) * 2010-01-14 2018-02-09 Organogenesis Inc Construcciones de tejido bio-diseñadas por ingenieria y metodos para la produccion y uso de las mismas.
US9687764B2 (en) 2012-12-20 2017-06-27 Haier Us Appliance Solutions, Inc. Filter with audible notification features
US20140174980A1 (en) 2012-12-24 2014-06-26 Exxonmobil Research And Engineering Company Hydrotreated hydrocarbon tar, fuel oil composition, and process for making
KR101874819B1 (ko) * 2013-02-08 2018-07-05 아셀, 인크. 세포외 기질 재료로부터의 생리활성 조직 손상 치료 재료

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2020185450A (ja) * 2013-02-08 2020-11-19 アセル,インコーポレイテッド 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法

Also Published As

Publication number Publication date
KR101750349B1 (ko) 2017-06-23
US20180043057A1 (en) 2018-02-15
US20150335786A1 (en) 2015-11-26
US8802436B1 (en) 2014-08-12
KR102223440B1 (ko) 2021-03-05
US9119831B2 (en) 2015-09-01
US9474829B2 (en) 2016-10-25
US20170043056A1 (en) 2017-02-16
US9238091B2 (en) 2016-01-19
US20140227362A1 (en) 2014-08-14
EP3610895A1 (en) 2020-02-19
HK1218887A1 (zh) 2017-03-17
AU2014214819B2 (en) 2017-04-27
US9795713B2 (en) 2017-10-24
US20160129153A1 (en) 2016-05-12
JP2017164562A (ja) 2017-09-21
JP6164782B2 (ja) 2017-07-19
KR101874819B1 (ko) 2018-07-05
ES2764146T3 (es) 2020-06-02
EP2953659B1 (en) 2019-10-16
AU2014214819A1 (en) 2015-08-27
AU2017203983A1 (en) 2017-07-06
DK2953659T3 (da) 2019-11-25
JP6622253B2 (ja) 2019-12-18
CA2899931C (en) 2019-01-15
KR20170070268A (ko) 2017-06-21
KR20200039834A (ko) 2020-04-16
KR20190095558A (ko) 2019-08-14
KR102101689B1 (ko) 2020-04-17
CA2899931A1 (en) 2014-08-14
KR20180074818A (ko) 2018-07-03
JP2016510240A (ja) 2016-04-07
US20140342007A1 (en) 2014-11-20
AU2017203983B2 (en) 2018-09-13
EP2953659A1 (en) 2015-12-16
US20140227364A1 (en) 2014-08-14
KR20150118122A (ko) 2015-10-21
JP2020185450A (ja) 2020-11-19
WO2014124203A1 (en) 2014-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6622253B2 (ja) 細胞外マトリックス材料から生理活性ゲルを製造する方法
ES2443045T3 (es) Hidrogeles de fibroína de seda y usos de éstos
US9655948B1 (en) Non-surgical, localized delivery of compositions for placental growth factors
JP2021522938A (ja) 細胞及び組織の送達のためのナノファイバー−ハイドロゲル複合体
AU2017378904A1 (en) Injectable hydrogels and applications thereof
TW201900185A (zh) 新穎的再吸收性生物可降解醫藥及化粧品組合物
KR101590313B1 (ko) 콜라겐으로 구성된 주입형 피하조직재생용 바이오소재
Gold Development of an Injectable, Cellulose-Based Hydrogel System for Soft Tissue Reconstruction
Kentner et al. Methods of manufacturing bioactive gels from extracellular matrix material

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20181122

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20181220

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20181220

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20191025

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20200124

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20200416

C60 Trial request (containing other claim documents, opposition documents)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60

Effective date: 20200817

A521 Written amendment

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20200821

C116 Written invitation by the chief administrative judge to file amendments

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C116

Effective date: 20200827

C22 Notice of designation (change) of administrative judge

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22

Effective date: 20200827

C22 Notice of designation (change) of administrative judge

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C22

Effective date: 20210819

C13 Notice of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C13

Effective date: 20211006

C141 Inquiry by the administrative judge

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C141

Effective date: 20211006

C23 Notice of termination of proceedings

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C23

Effective date: 20220204

C03 Trial/appeal decision taken

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C03

Effective date: 20220302

C30A Notification sent

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C3012

Effective date: 20220302