JP2018534252A - 腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換するための医薬的連合体及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
・特により短時間のうちに、腫瘍細胞を変換又は再コード化して、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善すること。
・特により高い変換収率で、腫瘍細胞を変換又は再コード化して、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善すること。
・特により短時間のうちに、腫瘍細胞の生理学的機能細胞及び/又は健常細胞への変換能を回復すること。
・特により短時間のうちに、腫瘍細胞の分化能を回復すること。
・特により短時間のうちに、がん細胞等の循環性又は非循環性腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換及び/又は再コード化すること。
・特により短時間のうちに、がん等の腫瘍性疾患、障害、異常、若しくは病変、又はこれらの任意の症状から被験者を保護すること。
・特により短時間のうちに、腫瘍細胞から、骨細胞、及び/又は軟骨細胞、及び/又は脂肪細胞、及び/又は筋細胞、及び/又は角化細胞、及び/又は線維細胞、及び/又は有足細胞、及び/又は神経細胞、及び/又は成熟内皮細胞、及び/又は骨芽細胞、及び/又は軟骨芽細胞、及び/又は神経芽細胞、及び/又はセルトリ細胞、及び/又はライディッヒ細胞、及び/又は胚細胞、及び/又は内皮細胞、及び/又は血管芽細胞、及び/又は線維芽細胞等の生理学的機能細胞及び/又は健常細胞を供給及び/又は生成すること。
・腫瘍細胞の細胞接着チェックポイントを再構築、回復、及び/又は再活性化すること。
・特により短時間のうちに、腫瘍細胞の分化を誘導、及び/又は促進、及び/又は増強すること。
・サイクリンD遺伝子及びタンパク質の発現低下を誘導、及び/又は促進、及び/又は増強すること。
・G1〜G0細胞周期の周期移動を誘導、及び/又は促進、及び/又は増強すること。
・サイクリンDと、サイクリン依存性キナーゼ(CDK)4及び6の少なくとも一方とのタンパク質複合体の不活化を誘導、及び/又は促進、及び/又は増強すること。
・網膜芽細胞腫(Rb)タンパク質のリン酸化を防止又は低減することで、その腫瘍抑制機能を活性化すること。
・p53タンパク質のリン酸化を増大させることで、その分解を低減させ且つその腫瘍抑制機能を活性化すること。
・Ras/MAPキナーゼシグナル伝達カスケードの活性化を防止又は低減すること。
・腫瘍細胞の特徴及び/又はマーカーを同定及び/又は分析すること。
・腫瘍細胞の成長因子受容体を制御及び/又は活性化すること。
・細胞(特に腫瘍細胞)と、その微小環境、すなわち周囲の細胞外基質との接着を調節及び/又は制御すること。
・一時的又は永続的に腫瘍細胞を損傷又は死滅させることなく、且つ/又はその静止状態を永続的に誘導することなく、該腫瘍細胞を治療、再コード化、又は変換すること。
・腫瘍細胞の細胞分裂及び/又は細胞増殖を減衰、及び/又は低減、又は抑制すること。
・腫瘍細胞における抗分裂促進因子活性及び/又は腫瘍抑制経路を活性化、及び/又は促進、及び/又は制御すること。
・腫瘍細胞における抗発がん活性を阻害及び/又は低減すること。
・腫瘍細胞を変換又は再コード化して、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善すること、並びに/又は細胞外手段を用いてがん等の腫瘍性疾患、障害、異常、又は病変から被験者を保護すること。
・腫瘍細胞を変換又は再コード化して、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善すること、該細胞のゲノムを修飾することなく、がん等の腫瘍性疾患、障害、異常、又は病変から被験者を保護すること。
・被験者の腫瘍性疾患を診断するための診断ツールを提供すること。
当業者であれば、通常の実験を採用するだけで、本明細書で記載した本発明に係る具体的な実施形態の均等物を数多く認識、確認できるであろう。本発明の範囲は、本明細書に限定されるものではなく、添付した特許請求の範囲に記載した通りである。
本明細書中、「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語は交換可能に使用されており、100アミノ酸長以下、例えば、約2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、又は100アミノ酸長のポリマーを意味する。当該用語は、1個以上のアミノ酸残基が対応する天然アミノ酸の合成化学模倣物であるアミノ酸ポリマーや、天然アミノ酸ポリマー、非天然アミノ酸ポリマー、ペプチド類似体、ペプチド変異体、及びペプチド模倣物に適用される。ペプチドを合成する従来の技術では、カップリング剤を用いてアミノ酸又はペプチドのカルボン酸官能基を活性化する。その後、このように活性化した酸をアミノ酸、又はN末端アミノ酸が保護されていないペプチドと接触させることで、ペプチド結合とも呼ばれるアミド結合を形成する。カップリング剤を用いたカップリング反応条件は当該技術分野で周知であり、例えば、Greene,「Protective Groups in Organic Synthesis」,Wiley,New York,2007,4th edition等に記載されている。更に、Hojo H.,「Recent progress in the chemical synthesis of proteins」,Curr Opin Struct Biol.2014;26C:16−23、及びSaranya Chandrudu,et al.,「Chemical Methods for Peptide and Protein Production」,Molecules,2013,18,4373−4388等には、好適なペプチド合成経路が記載されている。各文献は参照によりその全体が本願に組み込まれる。ペプチド合成の戦略としては、液相ペプチド合成、及び現在最も一般的に使用されているペプチド合成法である固相ペプチド合成(SPPS)の2つが主流である。化学基によってC末端を保護する代わりに、第1アミノ酸のC末端をポリスチレン又はポリアクリルアミド等の活性化固体担体に結合させる。このような手法では二重の機能が得られる。すなわち、樹脂がC末端保護基として作用するとともに、合成中に成長しているペプチド生成物を他の反応混合物から分離できる迅速な方法を提供する。多くの異なる生物学的製造プロセスと同様に、ペプチド製造の自動化及びハイスループット化を目的としたペプチド合成装置が開発されてきた。SPPSによれば、細菌で発現するのが難しい天然ペプチドの合成、非天然アミノ酸の導入、ペプチド/タンパク質骨格の改変、及びD−アミノ酸からなるD−タンパク質の合成が可能となる。定量的収率で2つのペプチドを結合するネイティブ・ケミカル・ライゲーションによって、非常に長いペプチド得ることができる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「ペプチド類似体」という用語は、親又は開始ペプチドの特性を1つ以上依然として維持している1つ以上のアミノ酸変化(アミノ酸残基の置換、付加、又は欠失等)により異なっているポリペプチド変異体を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「ペプチド変異体」という用語は、天然又は参照化合物配列と一定の同一性を有するペプチドを意味する。一例示において、ペプチド変異体は、任意の投与、塗布、注射後修飾ペプチドを意味する。このような投与、塗布、注射後修飾としては、リン酸化、アセチル化、グルタミル化、チロシン化、パルミトイル化、グリコシル化、ミリストイル化、パルミトイル化、イソプレニル化、グリコシルホスファチジルイノシトール化(glypiation)、リポイル化、ホスホパンテテイニル化(phosphopantetheinylation)、アシル化、アルキル化、アミド化、アルギニル化、ポリグルタミル化、ポリグリシル化、ブチリル化、ガンマカルボキシル化、グリコシル化、ポリシアリル化、マロニル化、ヒドロキシル化、ヨウ素化、ヌクレオチド付加、酸化、アデニリル化、プロピオニル化、ピログルタミン酸形成、S−グルタチオン付加、S−ニトロシル化、スクシニル化、硫酸化、糖化、ビオチン化、ペグ化、ISG化、SUMO化、ユビキチン化、NEDD化、PUP化、シトルリン化、脱アミド、脱離化(eliminylation)、カルバミル化、及びラセミ化等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「ペプチド模倣体」又は「ペプチド模倣体」という用語は、アミノ酸を有するだけでなく、ペプチドの生物学的作用を模倣できる合成化学化合物を意味する。模倣できる理由は、模倣体が、多くの場合、ペプチドの基本構造を模倣した基本構造を有しており、及び/又は当該ペプチドの顕著な生物学的特性を有しているためである。具体的な一例示において、ペプチド模倣体は、少なくとも1種のペプチドと、少なくとも1種の多糖、ポリヌクレオチド又は直鎖若しくは分岐状の飽和若しくは不飽和炭化水素鎖との両方を含むハイブリッド分子である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「直鎖ペプチド」という用語は、C末端及びN末端アミノ酸残基が共有結合的に相互作用しておらず、C末端及びN末端アミノ酸残基がどれもペプチド鎖の他のアミノ酸残基と共有結合的に相互作用していないペプチドを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「環状ペプチド」という用語は、C末端及びN末端アミノ酸残基が共有結合的に相互作用しているか、あるいはC末端及び/又はN末端アミノ酸残基がペプチド鎖の少なくとも1つの他のアミノ酸残基と共有結合的に相互作用して環状構造を形成しているペプチドを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「アミノ酸」という用語は、アミノ酸類似体を含む天然及び非天然のアミノ酸を意味する。天然アミノ酸は、遺伝暗号によってコード化されるものや、ヒドロキシプロリン、ガンマカルボキシグルタミン酸及びO−ホスホセリン等の後修飾されたアミノ酸である。天然にコード化されたアミノ酸は、グリシン(Gly、G)、アラニン(Ala、A)、バリン(Val、V)、ロイシン(Leu、L)、イソロイシン(Ile、I)、セリン(Ser、S)、スレオニン(Thr、T)、フェニルアラニン(Phe、F)、チロシン(Tyr、Y)、トリプトファン(Trp、W)、システイン(Cys、C)、メチオニン(Met、M)、プロリン(Pro、P)、アスパラギン酸(Asp、D)、アスパラギン(Asn、N)、グルタミン(Gln、Q)、グルタミン酸(Glu、E)、ヒスチジン(His、H)、アルギニン(Arg、R)、及びリジン(Lys、K)という20種の一般アミノ酸、並びにピロリジン及びセレノシステインである。非天然アミノ酸としては、上述した天然アミノ酸の右旋性(D)異性体が挙げられるが、これらに限定されない。アミノ酸類似体とは、天然アミノ酸と同じ基本化学構造、すなわち、水素、カルボキシ基、アミノ基及びR基(すなわち側鎖)に結合したアルファ炭素を有しており、それが属するペプチドの全体的機能に実質的に影響を及ぼすことなく置き換えて使用できる化合物を意味する。本発明の実施形態を実施するのに好適であり得るアミノ酸類似体(又は非天然アミノ酸)としては、光活性化架橋剤を含むアミノ酸、スピン標識アミノ酸、蛍光アミノ酸、金属結合アミノ酸、金属含有アミノ酸、放射性アミノ酸、新規な官能基を有するアミノ酸、他の分子と共有結合的又は非共有結合的に相互作用するアミノ酸、光ケージ化及び/又は光異性化アミノ酸、ビオチン又はビオチン類似体を含むアミノ酸、糖置換セリン等のグリコシル化アミノ酸、その他の糖修飾アミノ酸、ケト含有アミノ酸、ポリエチレングリコール又はポリエーテルを含むアミノ酸、重原子置換アミノ酸、化学分解性及び/又は光分解性アミノ酸、天然アミノ酸よりも延長された側鎖(これらに限定されないが、ポリエーテル又は長鎖炭化水素等(これらに限定されないが、炭素数約5超又は約10超等))を有するアミノ酸、炭素結合糖含有アミノ酸、レドックス活性アミノ酸、アミノ酸を含有するアミノチオ酸、及び1つ以上の毒性部位を含むアミノ酸等が挙げられるが、これらに限定されない。「AAI(AAローマ数字1)」という用語は、本明細書において使用されるが、上で定義した任意のアミノ酸、特に任意の天然及び非天然アミノ酸であってもよいアミノ酸を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「アミノ酸側鎖」という用語は、他のアミノ酸と区別させるアミノ酸の官能基を意味する。すべてのアミノ酸構造は、カルボキシ基、アミン基、及び特定の側鎖を有している。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「極性アミノ酸」又は「AAII」という用語は、極性無電荷基含有側鎖を有するアミノ酸を意味する。極性アミノ酸は生理学的pH(約7)でプロトン化される。極性アミノ酸としては、Cys(C)、Asn(N)、Gln(Q)、Ser(S)、Thr(T)、及びTyr(Y)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「酸性アミノ酸」又は「AAIII」という用語は、酸性基含有側鎖を有するアミノ酸を意味する。酸性アミノ酸は生理学的pH(約7)で脱プロトン化型が優勢である。酸性アミノ酸としては、Asn(N)及びGlu(E)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「脂肪族アミノ酸」又は「AAIV」という用語は、脂肪族側鎖を有するアミノ酸を意味する。脂肪族アミノ酸としては、Ala(A)、Leu(L)、Ile(I)、Gly(G)、Val(V)、並びにこれらの類似体及び誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「無極性アミノ酸」又は「AAV」という用語は、無極性側鎖を有するアミノ酸を意味する。無極性アミノ酸としては、Ala(A)、Phe(F)、Gly(G)、Ile(I)、Leu(L)、Met(M)、Pro(P)、Val(V)、及びTrp(W)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「芳香族アミノ酸」又は「AAVI」という用語は、芳香族基含有側鎖を有するアミノ酸を意味する。芳香族アミノ酸としては、Trp(W)、Tyr(Y)、及びPhe(F)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「塩基性アミノ酸」又は「AAVII」という用語は、塩基性基含有側鎖を有するアミノ酸を意味する。塩基性アミノ酸は、生理学的pH(約7)でプロトン化型が優勢である。塩基性アミノ酸としては、Arg(R)、His(H)、及びLys(K)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「AAVIII」という用語は、Leu(L)及びIle(I)、並びにこれらの類似体及び誘導体を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「荷電アミノ酸」又は「AAIX」という用語は、酸性基含有側鎖又は塩基性基含有側鎖のいずれかを有するアミノ酸を意味する。荷電アミノ酸は、生理学的pH(約7)で荷電型が優勢である。荷電アミノ酸としては、Asn(N)、Glu(E)、His(H)、Lys(K)、及びArg(R)が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「AAn」(式中、nは、ペプチドの一次配列内の具体的な位置を特定するよう任意に選択された正の整数を表す)という用語。例えば、AA13は、13位のアミノ酸を意味している。「アミノ酸」及び「AA」という用語は、本明細書において交換可能に使用される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「N末端」という用語は、タンパク質又はポリペプチドの一(末)端に位置するアミン(−NH2)官能基/基/部分を意味する。この官能基は、アミドペプチド結合に結合していない唯一のアミン基である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「C末端」という用語は、タンパク質又はポリペプチドの一(末)端に位置するカルボキシレート(−CO2H)官能基/基/部分を意味する。この官能基は、アミドペプチド結合に結合していない唯一のカルボン酸基である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「天然ペプチド」という用語は、ヒトの直接的介入(抽出及び/又は単離を除く)なく自然界に見られるペプチドを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「合成ペプチド」又は「非天然ペプチド」という用語は、ヒトの直接的介入(抽出及び/又は単離を除く)がなければ自然界に見られることはないペプチドを意味する。例えばある実施形態において、合成ペプチドは、天然の配列に対して少なくとも1個のアミノ酸が欠失又は置換していること以外は、天然ペプチドのアミノ酸配列を有していてもよい。置換の場合、天然配列のアミノ酸が他の異なる天然又は非天然アミノ酸と置き換えられる。例えばある実施形態において、合成ペプチドは、酢酸基、リン酸基、脂質又は炭水化物の付加やジスルフィド橋の形成といった天然ペプチドの翻訳後修飾を有していなくてもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「共有結合的に相互作用する」、「共有結合的相互作用」、及び「共有結合」という用語は、交換可能に使用されており、原子間での電子対の共有を伴う化学結合又は相互作用を意味する。このような相互作用としては、σ結合及びπ結合が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「非共有結合的に相互作用する」、「非共有結合的相互作用」、及び「非共有結合」という用語は、交換可能に使用されており、原子間での電子対の共有は伴わないが、分子間又は分子内でより分散した様々な電磁的相互作用を伴う化学結合又は相互作用を意味する。非共有結合的相互作用は、一般的に、静電的相互作用、π相互作用、ファンデルワールス力、及び疎水性相互作用という4つのカテゴリーに分類される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「求電子剤」という用語は、電子に引きつけられる有機分子であって、電子対を受け取ることで化学反応に関与して求核剤に結合する有機分子を意味する。大半の求電子剤は正に荷電しており、部分正電荷を有する原子、又は電子の八重項を有していない原子を有する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「求核剤」という用語は、電子対を求電子剤に供与して反応に関する化学結合を形成する有機分子を意味する。遊離電子対又は少なくとも1つのパイ結合を有するあらゆる分子又はイオンが求核剤として作用できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「多糖」という用語は、グリコシド結合によって互いに結合した単糖単位の長鎖で構成されており、加水分解時に単糖又はオリゴ糖を供給する高分子炭水化物分子を意味する。構造的には、直鎖状から多分岐ポリマーにまで及ぶ。
本明細書中、「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は、交換可能に使用されており、1本鎖型又は二重鎖らせんのいずれかであるリボヌクレオシド(「RNA分子」)若しくはデオキシリボヌクレオシド(「DNA分子」)、又はその任意のリン酸エステル類似体(ホスホロチオエート及びチオエステル等)のリン酸エステルポリマー型を意味する。「核酸」という用語には、二本鎖環状DNA、特に直鎖状(制限酵素断片等)又は環状DNA分子中のものが含まれる。なかでも、本明細書で使用する核酸は、本明細書で定義される成長因子受容体のアゴニストをコードするRNA等の核酸を意味する。
本明細書中、「ヌクレオシド」という用語は、糖分子(ペントース若しくはリボース等)又はその誘導体を有機塩基(プリン若しくはピリミジン等)又はその誘導体(本明細書中、「核酸塩基」ともいう)と組み合わせて含む化合物を意味する。
本明細書中、「ヌクレオチド」という用語は、リン酸基を有するヌクレオシドを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「デンドリマー」という用語は、任意の繰り返し分岐状分子を意味する。デンドリマーとしては、リン含有デンドリマー、ポリリジンデンドリマー、ポリプロピルエニミンデンドリマー、及びPAMAMデンドリマー等が挙げられ、例えば、Scientific World Journal.2013;2013:732340、Curr Opin Chem Biol.1998;2(6):733−42、J Pept Sci.1999;5(5):203−20、及びJ Pept Sci.2008;14(1):2−43等に記載のものが挙げられる。これらは本発明の実施形態を実施するのに使用でき、参照によりその全体が本願に組み込まれる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「合成分子」という用語は、ヒトの直接的介入(抽出及び/又は単離を除く)がなければ自然界に見られることはない分子を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「合成高分子」という用語は、ヒトの直接的介入(抽出及び/又は単離を除く)がなければ自然界に見られることはない高分子又はポリマーを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生体適合性」という用語は、生体の細胞、組織、器官、又は系と適合するため、損傷、毒性、又は免疫系による拒絶のリスクがほとんど又は全くないことを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生物活性」という用語は、生物学的系及び/又は生体において活性を有する任意の物質の特徴を意味する。例えば、生体に投与した場合にその生体に対して生物学的効果を有する物質は、生物活性であると考えられる。特定の例示においては、本開示の化合物、物質、又は医薬組成物は、その一部が生物活性であるか、あるいは生物学的に関連すると考えられる活性を模倣する場合でも、生物活性であると考えられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「幹細胞」という用語は、当該分野で一般的に理解されるような用語を意味する。例えばある実施形態において、幹細胞は、その由来にかかわらず、長期にわたって自身を分裂、再生できる細胞であり、少なくともある程度は非特殊的(未分化)であり、特殊化した細胞型を生み出せる(に分化できる)(すなわち、各種の異なる特殊化した細胞型に対する前駆体又は前駆細胞である)。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「間葉系幹細胞」という用語は、一般に、骨芽細胞、軟骨細胞、及び脂肪細胞等の各種細胞型に分化できる成体多能性間質細胞を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「幹細胞様」という用語は、その由来から幹細胞ではないものの、幹細胞のように機能する細胞であって、Stro−1等の幹細胞性マーカーの発現等の類似した特徴を示し、及び/又は多能性であって、各種の細胞型に分化できる細胞を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「前駆細胞」という用語は、一般に、任意の幹細胞と同様、特定の細胞型に分化する傾向のある生物学的細胞であるが、既に幹細胞よりも特異的であって、その「標的」細胞へ分化するよう駆り立てられた細胞を意味する。一般に、幹細胞は無制限に複製できるが、前駆細胞は限られた回数しか分裂できない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「成体幹細胞」という用語は、発生後の全身で見られる未分化細胞であって、細胞分裂によって増殖して、死細胞を補充し、損傷した組織を再生する細胞を意味する。体性幹細胞としても知られており、動物やヒトの成体に加えて若年段階にも見られる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「分化」という用語は、特殊化程度の低い細胞がより特殊化された細胞型になるプロセスであって、一つの遺伝子発現パターンから別のパターンへの転換を伴うプロセスを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「分化細胞」という用語は、一般に、幹細胞特異的マーカーを含む細胞を除き、特定の系列の任意の細胞を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「非終末分化」という用語は、細胞に関して使用した場合、本明細書で定義される分化細胞のうち、分化の最終状態に到達していないものを意味する。例えばある実施形態において、骨芽細胞系列の場合、非終末分化細胞は、骨細胞を除く当該系列の任意の分化細胞である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「終末分化」という用語は、細胞に関して使用した場合、本明細書で定義される分化細胞のうち、分化の最終状態に到達したものを意味する。例えばある実施形態において、骨芽細胞系列の場合、終末分化細胞は骨細胞である。
上記幹細胞を得て、液体培地又は半固体培地等の初期培養条件を提供する方法が当該分野で公知である。最初に、幹細胞源と、組織源又は培地中で該細胞を増殖又は濃縮するのに好適な試薬とを接触させることで、細胞をインビボ又はインビトロで増殖させる。成体幹細胞を組織源から単離し、好適な試薬に曝露してインビトロで増殖又は濃縮することが好ましい。動物から細胞サンプルを得る任意の好適な方法によって個体から細胞を得る。この方法としては、骨髄採取、体液(血液等)採取、臍帯血採取、組織パンチ、及び組織切開等が挙げられるが、これらに限定されない。具体的には、皮膚、腸、角膜、脊髄、脳組織、頭皮、胃、乳房、肺(洗浄及び気管支鏡検査等を含む)のバイオプシーや、骨髄、羊水、胎盤、及び卵黄嚢の穿刺吸引等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞系列」という用語は、特定の細胞について、受精卵又は胚の一次状態から完全に分化した状態までの成長履歴を意味する。細胞の成長に伴う各工程及び段階では多くの中間細胞(本明細書中ではこれらを前駆体又は前駆細胞とも呼ぶ)が生成され、細胞系列に不可欠な部分を形成する。
成熟骨芽細胞は、骨形成に関与する細胞であり、骨芽細胞前駆体に由来することが従来から知られている。ヒト骨髄間葉系幹細胞及び骨芽細胞前駆体の分化は、骨再生における重要なプロセスの一つである。骨芽細胞は間葉系幹細胞から分化する。成熟骨芽細胞は骨芽細胞前駆体から分化して、非分裂細胞である骨細胞となる。骨関連腫瘍性疾患としては、骨腫、類骨腫、骨軟骨腫、骨芽細胞腫、内軟骨腫、骨の巨細胞腫、動脈瘤様骨のう腫、骨の線維性骨異形成症、骨肉腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、及び線維肉腫等の骨原発腫瘍(良性腫瘍又はがん)、並びに二次性腫瘍(すなわち転移)、例えばある実施形態において、前立腺、乳房、肺、甲状腺、及び腎臓の癌腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「骨芽細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の骨細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、骨芽細胞、骨細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
天然の軟骨細胞は、軟骨細胞に栄養拡散環境を提供し且つ関節表面に生体力学的応答能を提供する軟骨細胞外基質(ECM)の合成及び代謝回転に関与する。軟骨形成細胞は、一連の分化経路を介して成体多能性間葉系幹細胞(MSC)から発生する。MSCの軟骨形成分化は、各種の内因子及び外因子によって誘導される。成長因子は、このプロセスにおいて重要な役割を担う。例えば、硝子軟骨の場合、成長因子は恒常性及び統合性、並びに発生を制御する。軟骨関連腫瘍性疾患としては、軟骨腫/外軟骨腫/内軟骨腫(内軟骨腫症、骨外性軟骨腫)、軟骨肉腫(間葉系軟骨肉腫、粘液性軟骨肉腫)、骨軟骨腫(骨軟骨腫症)、軟骨粘液線維腫、及び軟骨芽細胞腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「軟骨細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の軟骨細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、軟骨芽細胞、軟骨細胞、又はこれらの任意の前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
骨格筋は、生体内で多くの機能を担う非常に複雑且つ異質な組織である。筋肉を生成するプロセス(筋形成)は、いくつかの異なる段階に分割できる。胚性筋形成では、中胚葉由来構造が身体の第一の筋線維を適切に生成し、その後の波で、これらのテンプレート線維に沿って追加の線維が生成される。出生段階では、最初に、筋肉に存在する筋前駆細胞が過剰に増殖するが、その後、筋核数が定常状態に到達して筋原線維タンパク質の合成が最大量になると減少する。筋肉が成熟したら、これらの前駆細胞は静止状態に入り、これ以降は衛星細胞として内部に存在することになる。全ての再生する器官と同様に、成体骨格筋は、終末分化細胞の代謝回転を補償して組織恒常性を維持するメカニズムに頼っている。このような筋形成は、新しい線維に分化し得る衛星細胞の活性化に依存している。成熟した筋肉が損傷した場合に最も包括的に研究された形態の筋形成が起こり、衛星細胞の大コホートが有糸分裂的に増殖、分化することにより、組織を修復し、恒常性を回復させる。現在、衛星細胞が体節由来の前駆細胞と密接に関連していると一般的に受け入れられている。骨格筋発生を制御する転写因子ネットワークの活性化は、神経管、脊索、表皮外胚葉及び側板中胚葉等の隣接組織から放出されるパラクリン因子に依存している。筋形成の空間的及び時間的開始を決定する分泌因子がいくつか同定されている。トランスフォーミング成長因子−β(TGFβ)スーパーファミリーの受容体をそれぞれ不活化、活性化するノギン及び骨形成タンパク質(BMP)等のシグナル伝達分子は、筋形成の活性化の指揮に関与することが報告されている。筋肉関連腫瘍性疾患としては、横紋筋肉腫及び平滑筋肉腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「筋肉細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の筋肉細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、筋芽細胞、筋細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
人体の脈管構造は、2つの異なるプロセスである脈管発生及び血管新生によって形成される。脈管発生は、内皮前駆細胞(血管芽細胞)が遊走して内皮細胞へと分化した際に起こる新規な血管形成プロセスと定義され、それにより新しい血管が形成される。その後、これらの血管樹は、既存の血管の内皮細胞の増殖に続発する新規な血管形成として定義される血管新生によって伸長する。脈管発生も血管新生も、循環系の胎生発育中に起こるだけでなく、成人生体内でも末梢血血管内皮前駆細胞(幹細胞の誘導体)で起こり、程度は異なれど、新血管形成に貢献できる。血管関連腫瘍性疾患としては、血管肉腫、カポジ肉腫、リンパ管肉腫、及び乳児血管外皮腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「血管細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の血管細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、血管芽細胞、周皮細胞、内皮細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
近年、神経細胞を神経幹細胞(NSC)から再生できることが報告された。これらは、神経系の主要な表現型を産生する自己再生性多能性成体幹細胞である。これらは非対称細胞分裂によって2つの娘細胞となるが、一方は特殊化していない細胞であり、他方は特殊化した細胞である。NSCは主にニューロン、アストロサイト、及び乏突起膠細胞に分化する。NSCは、神経発生プロセスによって成人期を通して生成される。NSCは分化して、喪失又は損傷したニューロン、又は多くの場合はグリア細胞にさえ置き換わることができる。NSCは、微小環境又は神経幹細胞ニッチからの外因性刺激により刺激されて分化を開始する。このニッチは、胚発生後に幹細胞が神経系の新規細胞の生成のために保持される領域を画定する。そして、このように連続して新規ニューロン及びグリアを供給することで、出生後及び成体の脳に細胞可塑性の追加能力を提供する。幹細胞ニッチの維持に重要なのは、幹細胞の静止と増殖とを釣り合わせると共に、神経発生−グリア新生系列の決定に向わせるように作用する微小環境刺激及び細胞間相互作用である。各種成長因子等のいくつかのタンパク質は、神経幹細胞ニッチのメカニズムや、新規に形成されたニューロンの維持及び成長に関与する。これらの例としては、BMP、FGF、PDGF、VEGF、TGFβ、BDNF等が挙げられる。ニューロン関連腫瘍性疾患としては、未分化星状細胞腫、星状細胞腫、中枢神経細胞腫、脈絡叢細胞腫、脈絡叢乳頭腫、脈絡叢腫瘍、胚芽異形成性神経上皮腫瘍、上衣腫瘍、線維性星細胞腫、巨細胞膠芽腫、多形神経膠芽腫、大脳神経膠腫症、膠肉腫、血管外皮腫、髄芽腫、髄上皮腫、髄膜癌腫症、神経芽腫、神経細胞腫、乏突起星細胞腫、乏突起神経膠腫、視神経鞘髄膜腫、小児上衣腫、毛様細胞性星状細胞腫、松果体芽腫、松果体細胞腫、多形未分化神経芽細胞腫、多形黄色星状細胞腫、原発性中枢神経系リンパ腫、蝶形骨縁髄膜腫、上衣下巨細胞性星状細胞腫、上衣下腫、及び三側性網膜芽細胞腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「神経細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の脳細胞を意味し、従って、神経幹細胞、神経芽細胞、神経細胞、神経膠細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
脊椎動物の網膜は組織の光感受性層であり、目の内面を覆っている。網膜発生には、組織誘導、網膜前駆細胞(RPC)群の増殖、及びこれらの細胞から特定の機能型への終末分化という複雑な進行が伴う。骨形成タンパク質(BMP)は、網膜細胞発生の重要な役割を担っているシグナル分子のトランスフォーミング成長因子(TGF)−βファミリーの一員である。BMP−2、BMP−4、及びBMP−7並びにこれらの受容体(BMPR)は胚発生中に眼内で発現されるものであり、網膜発生の複数の局面において必須である。網膜関連腫瘍性疾患としては、網膜芽細胞腫等が挙げられるが、これらに限定されない。なお、眼がんは、原発性(眼内で発生)の場合も転移性(他の器官から眼への伝播)の場合もある。他の器官から眼へと伝播し得る最も一般的な2つのがんとしては、乳がん及び肺がんが挙げられる。その他、これらほど一般的ではないが、由来する部位としては、前立腺、腎臓、甲状腺、皮膚、結腸、及び血液又は骨髄等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「網膜細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の網膜細胞を意味し、従って、視細胞、双極細胞、桿体及び錐体細胞、並びにこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
腎臓は、糸球体足細胞、内皮細胞、メサンギウム細胞、間質細胞、尿細管上皮細胞、及び結合管細胞を含むいくつかの異なる細胞型からなる複雑な組織で構成されている。これらの細胞型は相互作用して、効率的な組織として機能する精密な細胞環境を構築する。腎臓関連腫瘍性疾患としては、有棘細胞がん、傍糸球体細胞腫瘍(レニノーマ(reninoma))、血管筋脂肪腫、腎膨大細胞腫、ベリーニ管がん、腎臓の淡明細胞肉腫、中胚葉腎腫、ウィルムス腫瘍、上皮性間質性混合腫瘍、淡明細胞腺がん、移行上皮がん、内反性乳頭腫、腎リンパ腫、奇形腫、癌肉腫、及びカルチノイド腫瘍等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腎細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の腎細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、有足細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
腱及び靱帯(T/L)は、中胚葉由来の密性結合組織である。これらはそれぞれ、筋肉と骨、骨と骨を結合してその間で力を伝達する。いずれの組織も弾性エネルギーを貯蔵し、高張力に耐えることができ、自発運動はこれらに完全に依存している。T/Lは、T/Lに特徴的な極めて階層的な形態で組織されたI型コラーゲン線維で主に構成されている。その他のコラーゲン(III−VI、XI、XII、XIV、及びXV型)や各種プロテオグリカン(デコリン、軟骨オリゴマー基質タンパク質(COMP)、バイグリカン、ルミカン、フィブロモジュリン、テネイシンC等)が残りのT/L物質を構築している。T/Lの細胞含量は、腱細胞と呼ばれる腱特異的線維芽細胞によって決定される。胚発生時、腱特異的細胞は、硬節の背外側領域である靱帯節(syndetome)に集中した間葉系前駆細胞の小集団から発生する。L/T関連腫瘍性疾患としては、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、及び皮膚線維肉腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「靱帯及び腱細胞系列」又は「L/T細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の骨又は軟骨細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、線維芽細胞、線維細胞、及びこれらの前駆体等が含まれるが、これらに限定されない。
皮膚は成体期を通して絶えず新生する。表皮に存在する幹細胞(SC)は、成体皮膚の恒常性を確実に維持するが、一方で損傷した表皮の修復にも関与する。皮膚は身体を脱水、損傷及び感染から保護している。皮膚は、基底膜によって下部の真皮がそれを覆う多層表皮から分離されて構成される。真皮は中胚葉胚に由来し、成体幹細胞として線維芽細胞間葉系幹細胞様細胞を含んでいる。これらの細胞は多系列分化能を有し、脂肪組織又は骨を形成することもできる。皮膚関連腫瘍性疾患としては、基底細胞がん、有棘細胞がん、悪性黒色腫、隆起性皮膚線維肉腫、メルケル細胞がん、カポジ肉腫、角化棘細胞腫、紡錘細胞腫瘍、脂腺がん、微小嚢胞性付属器がん、乳房のパジェット病、異型線維黄色腫、平滑筋肉腫、及び血管肉腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「線維芽細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の皮膚細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、線維芽細胞、角化細胞、メルケル細胞、メラニン形成細胞、ランゲルハンス細胞、及びこれらの前駆細胞等が含まれるが、これらに限定されない。
生殖(又は繁殖)は、両親から新たな個体子孫生物が生み出される生物学的プロセスである。有性生殖は、種の(通常は)異なる2構成員に由来する遺伝子材料の組み合わせを有する子孫を生物が生み出す生物学的プロセスである。哺乳類の生殖器系における基礎構造の発生及び生理学的機能は、異なる成長因子ファミリー(BMPファミリー等)のメンバーの組織特異的発現に影響を受ける。生殖系列の確立は生殖の基本的な側面である。生殖細胞決定は、胚外外胚葉のエピブラスト細胞で誘導されるものであり、事前に形成された生殖質の遺伝によって得られるものではない。胚で始原生殖細胞(PGC)の形成を決定するのに、BMP−4及びBMP−8bが中心的な役割を担っているという強力な証拠がいくつか存在している。BMP−4及びBMP−8bをコードする遺伝子は、原腸形成前、すなわちPGCが見られる前に胚外外胚葉において重複する発現を示す。従って、PGC形成にはBMP−4発現が必要である。また、ノックアウト哺乳類において、PGC形成にはBMP−8bが必要であるという証拠も存在している。更に、局所的に産生されたBMPが、下垂体の性腺刺激ホルモン分泌細胞の分化において主要な役割を担っているという証拠も増加している。生殖関連腫瘍性疾患としては、前立腺の細胞腫又は前立腺上皮内腫瘍としても知られている前立腺がん及び卵巣がん(腺がん、腺性がん)等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生殖器系系列」という用語は、その発生の任意の段階のセルトリ細胞、ライディッヒ細胞、及び生殖細胞、特に間葉系幹細胞を意味する。
血液は動物の体液であり、栄養素及び酸素等の必要な物質を細胞へ送達し、それらの細胞から代謝老廃物を取り除いて輸送する。血液が肺に到達すると、気体交換が起こって、二酸化炭素が血液から肺胞へと拡散し、酸素が血液へと拡散する。このように酸素を含んだ血液は、肺静脈で心臓の左手側へと汲み上げられて左心房に入る。ここから二尖弁を通過し、心室を通過して、大動脈によって全身に運ばれる。血液は、抗体、栄養素、酸素の他、身体の働きを助けるものを数多く含有している。脊椎動物の場合、血漿に懸濁している血液細胞で構成されている。血液の55%を占める血漿は、大半(92体積%)が水であり、消散したタンパク質、グルコース、無機イオン、ホルモン、二酸化炭素(血漿は、排泄物を輸送する際の主要な媒体である)、及び血液細胞自体を含有している。血漿中の主要なタンパク質はアルブミンであり、血液の膠質浸透圧を制御する機能を有する。造血幹細胞(HSC)は、他の全ての血液細胞を生成する血液細胞であり、中胚葉に由来する。この細胞は、大半の骨の中心部に含まれている赤色骨髄中に位置している。HSCは、骨髄系列(単核球及びマクロファージ、好中球、好塩基球、好酸球、赤血球、巨核球/血小板、樹状細胞)やリンパ系列(T細胞、B細胞、NK細胞)を生成する。脊椎動物の血液で最も豊富な細胞は赤血球(RBSともいう)である。赤血球は、含鉄タンパク質であるヘモグロビンを含有しており、呼気に可逆的に結合して血液中のその溶解度を大きく向上させることによって酸素輸送を促進する。血液関連腫瘍性疾患としては、急性リンパ性白血病(ALL)、急性骨髄性白血病(AML)、慢性リンパ性白血病(CLL)、及び慢性骨髄性白血病(CML)等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「血液細胞系列」という用語は、その骨髄細胞又はリンパ球細胞系列からの発生の任意の段階の血液細胞を意味し、従って、造血幹細胞(HSC)、骨髄前駆細胞、リンパ球前駆細胞、マスト細胞、骨髄芽球、単核球、マクロファージ、好中球、好塩基球、好酸球、赤血球、巨核球、血小板、樹状細胞、小リンパ球、Tリンパ球(T細胞)、Bリンパ球(B細胞)、ナチュラルキラー(NK)細胞、及びこれらの前駆細胞等が挙げられるが、これらに限定されない。
脂肪組織は、主に脂肪細胞で構成された疎性結合組織である。脂肪組織は、脂肪細胞に加えて、前脂肪細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞及び各種の免疫細胞(すなわち、脂肪組織マクロファージ(ATM))等の細胞の間質血管細胞群(SVF)を含む。脂肪組織は前脂肪細胞に由来する。身体への衝撃を和らげ、身体を防護する働きもあるが、その主な役割は、エネルギーを脂質の形で貯蔵することである。前脂肪細胞は、刺激を受けて脂肪細胞を形成することができる未分化の線維芽細胞であると考えられる。前脂肪細胞は間葉系幹細胞に由来する。輪紋状結合組織は脂肪細胞で構成されている。「脂肪芽細胞」という用語は、成体細胞の前駆体を表すのに使用される。「脂肪芽細胞腫」という用語は、この細胞型の腫瘍を表すのに使用される。脂肪組織関連腫瘍性疾患としては、脂肪腫、腺脂肪腫、血管脂肪平滑筋腫、血管脂肪腫、脳梁脂肪腫、小脳橋角部・内耳道脂肪腫、類軟骨脂肪腫、褐色脂肪腫、皮内紡錘細胞脂肪腫、神経線維脂肪腫、多形性脂肪腫、紡錘細胞脂肪腫、表在性皮下脂肪腫、脂肪芽細胞腫、及び脂肪肉腫等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「脂肪細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の脂肪細胞を意味し、従って、間葉系幹細胞、輪紋状結合細胞、脂肪細胞、前脂肪細胞/脂肪芽細胞、及びこれらの前駆細胞等が含まれるが、これらに限定されない。
ヒト消化器系は、主として消化管(食道、胃、小腸、大腸、直腸、及び肛門等)及び付属消化腺(肝臓、胆嚢、及び膵臓)で構成されている。エネルギー及び栄養素を体に供給するという目的を達成するため、消化器系では6つの主要な機能、すなわち、摂取、分泌、混合及び移動、消化、吸収、並びに排泄が起こる。胃腸管壁は、消化管腔を囲む特殊化した組織層群を意味する。一般的な構造は、(管腔から外側へ順番に)粘膜、粘膜下層、外筋層、及び漿膜(組織が腹腔内の場合)/外膜(組織が後腹膜の場合)という4層を含む。消化管がんは、消化管(GI管)及び付属の消化器官の悪性異常を意味する。症状は、影響を受ける器官に関係し、閉塞(嚥下や排便が困難になる)、不正出血やその他の関連問題が挙げられる。胃腸管組織関連腫瘍性疾患としては、食道がん、胃がん、膵がん、肝がん、胆嚢がん、MALTリンパ腫、消化管間質腫瘍、及び胆管細胞がん等の胆管のがん等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「消化管細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の消化管細胞及び消化付属器官の細胞を意味し、従って、カハールの間質細胞、消化管上皮細胞、壁細胞、腺房細胞、主細胞、粘液細胞、杯状細胞、G細胞、内分泌I細胞、内分泌S細胞、内分泌K細胞、内分泌M細胞、ECL(腸クロム親和性)細胞、D細胞、腸内分泌細胞、APUD細胞、肝細胞、肝類洞内皮細胞、クッパー細胞、肝星細胞、腺房中心細胞、膵星細胞、α細胞、γ細胞、β細胞、δ細胞、腺房中心細胞、好塩基性細胞、管細胞、円柱細胞、胆嚢細胞(cholecystocyte)、及びこれらの前駆細胞等が挙げられるが、これらに限定されない。
肺は、多くの空気呼吸動物において必要不可欠な呼吸器官である。哺乳類の場合、心臓の両側の背骨近くに2つの肺が位置している。その主な働きは、酸素を大気から血流へと輸送すること及び血流から大気へ二酸化炭素を放出することである。このように気体を交換するには大きな表面積が必要であるが、小さくて桁外れに壁の薄い肺胞と呼ばれる気嚢を数百万個形成する特殊化した細胞の寄せ集めによって達成される。肺細胞としては、I型肺細胞、II型肺細胞、クララ細胞及び杯状細胞が挙げられるが、これらに限定されない。肺組織関連腫瘍性疾患としては、肺の細胞腫又は肺癌としても知られている肺がん、上皮細胞又は小細胞肺がん(SCLC)、及び非小細胞肺がん(NSCLC)等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「肺細胞系列」という用語は、その発生の任意の段階の肺細胞を意味し、従って、上皮細胞、赤血球、肺胞細胞、及びこれらの前駆細胞等が含まれるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「頭頸部がん」という用語は、通常は口唇、口腔、鼻腔、副鼻腔、咽頭、及び喉頭から始まるがんの一群を意味する。頭頸部がんの約90%が有棘細胞がんである。従って、頭頸部がん等の腫瘍性疾患としては、口腔がん、上咽頭がん、中咽頭がん、下咽頭がん、及び喉頭がん等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「比」という用語は、本明細書で開示した医薬的連合体又は組成物における生理活性担体に対するGFR結合化合物について使用される場合、GFR結合化合物の量と生理活性担体の量との(規定したモル、重量又は部の)比を意味する。上記比は、モル比であっても、重量比であっても、部比であってもよく、ケースバイケースで必要に応じて規定される。従来通り、量の単位はモル、ミリモル、グラム、ミリグラム又は部であってもよい。例えばある実施形態において、GFR結合化合物と生理活性担体との相対量は密度を用いて表すのが便利である。この比は、治療する腫瘍細胞型によって変化することを理解されたい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「密度」という用語は、本明細書で開示した医薬的組成物における生理活性担体に対するGFR結合化合物について使用される場合、平方ミリメートル(mm2)、平方マイクロメートル(μm2)、又は平方ナノメートル(nm2)等の一標準化面積単位に対するモル、ミリモル、グラム又はミリグラム等で表したGFR結合化合物の量を意味する。例えばある実施形態において、本明細書で開示した医薬的連合体又は組成物におけるGFR結合化合物と生理活性担体との比は、mm2あたりのpmol(pmol/mm2)で表してもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞周期」という用語は、脊椎動物細胞が自己複製するプロセスを意味する。真核生物細胞の場合、細胞周期は4つの異なる期間であるG1、S、G2、及びMで構成される。G1、S、及びG2期は、共に間期と呼ばれる期間を構成する。S又は「合成」期では、細胞は自身のDNAを複製してその染色体全ての正確なコピーを生成する。M又は「有糸分裂」期では、実際に細胞分裂が起こり、細胞核中の染色体が2つの核の2つの同じ組に分離される。間期の第1期(その前のM期の終わりからDNA合成の開始まで)はG1と呼ばれる。この期間では、M期ではかなり低下していた細胞の生合成活性が高率で再開される。この期間の特徴としては、数百万のタンパク質及びその後S期で必要となる酵素(主にDNA複製に必要とされるもの)が形成されることが挙げられる。G2期又は前有糸分裂期は、有糸分裂の直前に位置する細胞周期の間期の3番目の最後の副期である。その後、S期が順調に完了したら終了となり、前期、すなわち有糸分裂の第1期が始まる。細胞周期の一つの期間から次の期間へ移行するために、細胞は多数のチェックポイントを「検証」しなければならない。各チェックポイントでは、特殊化したタンパク質が、必要な条件が存在しているか否かを決定する。存在している場合、細胞は次の期間へ自由に入ることができる。存在していない場合、細胞周期の進行は停止される。例えばある実施形態において、G1期では、制限ポイント(R)によって区切られた「検証」ウインドウを細胞が通過する。「検証」期では、環境条件が複製に有利であることを各種チェックポイントによって確保する。条件が有利でない場合、細胞はG0として知られる静止状態に入ることができる。G0期又は静止期は、細胞周期において細胞が静止状態で存在する期間である。G0期は、細胞が分裂も分裂の準備もしないG1期の延長として、あるいは細胞周期外で起こる別個の静止段階として見なされる。典型的には、脊椎動物の健常細胞は、損傷した組織を再生したり、単に古くなった組織を新しいものに交換したりするなどの必要がある場合に、細胞周期のG0静止状態からG1状態へと切り替えて細胞分裂を再開することで細胞分裂を行う。一方、腫瘍細胞(がん細胞等)は、細胞分裂を中止してG0期に切り替える能力を喪失しており、そのために細胞分裂が永続的に行われる。これは一般に制御不能な細胞分裂又は増殖といわれる。別の「検証」ウインドウが、細胞周期の後期、すなわち細胞がG2から有糸分裂へ移行する直前に起こる。ここでは、複数のタンパク質によって細胞DNAを精査して、適切な複製が起こったことを確保する。最後に、別の細胞周期「検証」ウインドウが有糸分裂中に起こり、染色体が紡錘体や、細胞分裂中にそれらを分離する微小管ネットワークへ正しく付着しているかどうかを各種チェックポイントによって決定する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「静止状態」という用語は、細胞について使用される場合、細胞が分裂、複製、又は増殖しない静止状態を意味する。この状態はG0状態ともいう。従って、本明細書中、「腫瘍細胞の静止状態の誘導」とは、通常はG1からG0へ移行する能力を喪失した腫瘍細胞のそのような移行を引き起こすことを意味する。G1からG0への移行を検出する方法としては、例えば、ウェスタンブロッティングによりタンパク質Rbのリン酸化状態をモニタリングする方法が挙げられる。Rbタンパク質は、正常であればG0期ではリン酸化されないものの、細胞周期の他の期間ではリン酸化、更には高リン酸化されるようになる。結果として、ウェスタンブロッティングにおいてリン酸化Rbタンパク質が存在しない(あるいは実質的に減少している、すなわちG1期における存在量に対して少なくとも90%減少している)こと確認した場合、(ある時点で)腫瘍細胞がG0期へと切り替わったことが分かる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞分裂」又は「細胞増殖」という用語は、細胞が自己複製する、複製する、又は複製させられるプロセスを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「増殖」という用語は、成長、拡大、若しくは増加すること、又は成長、拡大、若しくは増加させられることを意味する。「増殖性」とは、増殖能を有することを意味する。「抗増殖性」とは、増殖に対して抵抗、低減、又は阻害する特性を有することを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「過剰増殖」及び「制御不能な増殖」という用語は、異常な成長、拡大、若しくは増加、又は異常な成長、拡大、若しくは増加を引き起こすことを意味する。異常な成長は、典型的には、細胞がG0期へ到達して細胞分裂及び複製を停止するのを防止するような細胞周期の異常制御に由来する。過剰又は制御不能な増殖の結果としては、腫瘍及びがん等の腫瘍性疾患の発生が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「過剰増殖性疾患」という用語は、「腫瘍性疾患」と交換可能に使用されており、制御不能な細胞増殖及び/又はプログラム細胞死の崩壊を特徴とする疾患を意味する。細胞の細胞増殖制御能の喪失は、細胞機能(例えばある実施形態においては、代謝、細胞周期進行、細胞接着、血管機能、アポトーシス、及び血管新生等が挙げられるが、これらに限定されない。)の制御を担う細胞経路が遺伝的に損傷することが原因であることが多い。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「抗分裂促進因子活性」という用語は、細胞の有糸分裂、すなわち細胞分裂を下方制御し、部分的に阻害又は抑制する生物学的経路を意味する。従って、本明細書中、抗分裂促進因子活性を促進、誘導、又は助長する物質又は医薬的連合体は、治療対象である腫瘍細胞の有糸分裂を下方制御し、部分的に阻害又は抑制することで、その有効な生物学的又は治療的作用を少なくとも部分的に提供する物質又は医薬的連合体を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腫瘍抑制経路」という用語は、腫瘍活性を下方制御し、部分的に阻害又は抑制する、すなわち腫瘍又はがんを引き起こし得る細胞欠陥から細胞を保護する生物学的経路を意味する。従って、本明細書中、腫瘍抑制経路を促進、誘導、又は助長する物質又は医薬的連合体は、治療対象である腫瘍細胞の腫瘍抑制遺伝子又はタンパク質を上方制御、活性化、又は促進することで、その有効な生物学的又は治療的作用を少なくとも部分的に提供する物質又は医薬的連合体を意味する。細胞周期の制御を減衰又は抑制する効果を有する、又はアポトーシスを促進する公知の腫瘍抑制タンパク質としては、p53、pRb、pVHL、APC、CD95、ST5、YPEL3、ST7、及びST14等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「抗発がん活性」という用語は、発がん遺伝子の遺伝子又はタンパク質発現を阻害、抑制、又は下方制御できる任意の分子を意味する。発がん遺伝子は、がん等の腫瘍性疾患を引き起こし得る遺伝子である。抗発がん遺伝子分子としては、腫瘍抑制タンパク質等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「非変異原性」という用語は、療法又は治療に関して使用した場合、細胞のゲノムの変化又は修飾を伴わない療法を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「再コード化」又は「変換」という用語は、細胞(特にがん細胞等の腫瘍細胞)に関して使用した場合、好適な細胞外微小環境(本明細書で定義される医薬的連合体又は組成物等として)を治療対象の腫瘍細胞に提供することで、適当な細胞外シグナルを提供して、細胞が自己修復又は自己治癒し、部分的又は完全に分化した非腫瘍細胞へと変換されるようにする行為を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「再コード化療法」という用語は、正確な微小環境再コード化シグナルを統合することで自身の運命を再指示できるという細胞が自然に有する能力を促進及び刺激する療法を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞外微小環境」という用語は、特定の細胞を囲む(特定の細胞と機能的に近接している)環境であって、各組織に特異的な生物物理学的、力学的、及び生化学的特性を特徴とし、細胞の挙動を制御できる環境を意味する。本明細書で定義される医薬的連合体又は組成物等を用いて腫瘍細胞の細胞外微小環境を修飾すると、この腫瘍細胞を健常で機能的な非腫瘍細胞へと変換又は再コード化できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「自己修復」及び「自己治癒」という用語は、がん細胞等の腫瘍細胞に関して使用した場合、本明細書で定義される医薬的連合体又は組成物を用いて腫瘍細胞を再コード化又は治療したら、該腫瘍細胞が自身の内部で生物学的変化を起こして、機能的健常非腫瘍細胞となることを意味する。腫瘍細胞を強制的に死滅させたり、一時的に低減した状態又は非増殖状態に保持したりする従来報告されてきた方法とは対照的に、本明細書で定義される医薬組成物又は連合体と接触した場合、細胞は自己治癒する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生理学的機能細胞」という用語は、特定の細胞型に関連し、細胞の正常な生理機能に必要な全ての細胞機能を正常に実施できる細胞を意味する。このような機能としては、全ての細胞内分子機構だけでなく、細胞とその微小環境との間の正常な伝達に必要な全ての活性が含まれる。細胞が生理学的機能性を有しているかを確認できる方法としては、蛍光マーカーを導入した後、マウスモデル等の他の哺乳類生体モデルに細胞をグラフト化する方法が挙げられる。細胞は、その細胞型に対応した組織にグラフト化される。一定時間後、インビボ顕微鏡観察又は組織学的染色等の各種方法で細胞の特徴及び正常な機能をモニタリングする。「機能(性)」という用語は、分子、化合物、又は物質に関して使用した場合、生物学的分子が、それを特徴付ける特性及び/又は活性を示す状態にあることを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「健常細胞」という用語は、腫瘍性疾患によって損傷、変化、又は不活化していない正常な形態、正常な細胞機能、及び正常な細胞成長を示す細胞を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「より短時間」という用語は、変換又は再コード化の期間に関して使用した場合、治療を受けた患者が実質的な利益を享受するまでの時間が、既存の治療と比較して実質的に短いことを意味する。ある実施形態において、より短時間とは、既存の治療に対して少なくとも1.5分の1、少なくとも2分の1、少なくとも2.5分の1、少なくとも3分の1、少なくとも3.5分の1、少なくとも4分の1、少なくとも4.5分の1、少なくとも5分の1、少なくとも6分の1、少なくとも7分の1、少なくとも8分の1、少なくとも9分の1、又は少なくとも10分の1に短縮されることが含まれる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「外因性」という用語は、細胞、器官、又は個体等の生体系の外部から来た物質を意味する。例えばある実施形態において、医薬品の外因子としては病原体及び治療薬が挙げられる。遺伝子導入又はウイルス感染によって細胞に導入されたDNAは、外因子として考えられる。発がん性物質も通常は外因子とされる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「内因性」という用語は、生体、組織、又は細胞内に由来する物質を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞内」という用語は、一般に、「細胞の内部」を意味する。動物等の脊椎動物の場合、細胞膜は細胞の内部と細胞の外部(細胞外環境)との間の障壁である。従って、少なくとも1つの物質、化合物、医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物が、処理する細胞の細胞壁を貫通してその(有効な)生物学的効果を発揮/供給する処置法及び治療法は、細胞内処置法及び治療法であると考えられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞外」という用語は、「細胞の外部」を意味する。動物等の脊椎動物の場合、細胞膜は細胞の内部(細胞内環境)と細胞の外部との間の障壁である。従って、物質、化合物、医薬的連合体、組み合わせ又は組成物がいずれも細胞膜を貫通することなく、(例えば、膜貫通受容体との相互作用により)その(有効な)生物学的効果を発揮/供給する処置法及び治療法は、細胞外処置法及び治療法であると考えられる。すなわち、所望の生物学的効果を得るために複数の物質を使用する療法であって、これらの物質のうち1種以上が、その生物学的効果を提供(又は供給)するために細胞内部へと進入する必要がある療法は、本開示の意味においては細胞外療法とは考えられない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞分裂抑制性」という用語は、細胞(哺乳類細胞(ヒト細胞)等)、細菌、ウイルス、真菌、原虫、寄生虫、プリオン、又はこれらの組み合わせの成長、分裂、又は増殖を阻害、低減、又は抑制することを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「細胞毒性」という用語は、細胞(哺乳類細胞(ヒト細胞)等)、細菌、ウイルス、真菌、原虫、寄生虫、プリオン、又はこれらの組み合わせを死滅させたり、それらに対して傷害性、毒性、又は致命的な効果を与えたりすることを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「インビトロ」という用語は、生体(動物、植物、又は微生物等)内ではなく、試験管、反応容器、細胞培地、ペトリ皿等の人工環境において起こる事象を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「インビボ」という用語は、生体(動物、植物、微生物、又はその細胞若しくは組織等)内において起こる事象を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「エクスビボ」という用語は、生体(動物、植物、又は微生物等)外で天然の生存条件を再現することを目指して、外部環境において該生体に由来する組織で起こる事象を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「シンデカン」という用語は、特にGタンパク質結合受容体の共受容体として作用すると考えられる単一の膜貫通ドメインタンパク質を意味する。これらのコアタンパク質は、3〜5個のヘパラン硫酸及びコンドロイチン硫酸鎖を有しており、これにより線維芽細胞成長因子、血管内皮成長因子、トランスフォーミング成長因子ベータ、フィブロネクチン、及びアンチトロンビン−1等の多様なリガンドと相互作用できる。フィブロネクチンといくつかのシンデカンとの相互作用は、細胞外基質タンパク質テネイシンCで調節できる。シンデカンタンパク質ファミリーにはシンデカン1及び3とシンデカン2及び4という4種のメンバーが含まれており、単一の先祖遺伝子からの遺伝子複製及び分岐進化によって生じた別々のサブファミリーを構成する。シンデカン数には、各ファミリーメンバーのcDNAがクローニングされた順番が反映されている。全てのシンデカンは、N末端シグナルペプチド、外部ドメイン、単一の疎水性膜貫通ドメイン、及び短鎖C末端細胞質ドメインを有する。全てのシンデカンは、24〜25個のアミノ酸長の疎水性膜貫通ドメインを介して細胞膜に固定されている。哺乳類細胞の場合、シンデカンは、各種染色体上に位置する特有の遺伝子によって発現される。シンデカンファミリーの全てのメンバーは5エクソンを有する。シンデカンの大きさの違いは、スペーサードメインをコードするエクソン3の長さが可変であることによると考えられる。ヒトの場合、シンデカン1、2、3、及び4のアミノ酸長は、それぞれ310、201、346、及び198である。ヘパラン硫酸基のメンバーであるグリコサミノグリカン鎖は、シンデカンの重要な成分であり、多様なシンデカン機能を担う。シンデカンへのグリコサミノグリカンの付加は、一連の翻訳後事象によって制御される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「サイクリン依存性キナーゼ」及び「CDK」という用語は、細胞周期の制御に関与するタンパク質の一ファミリーを意味する。公知のあらゆる真核生物中に存在し、細胞周期でのそれらの制御機能は進化的に保存されてきた。定義上、CDKはサイクリンと呼ばれる制御タンパク質と結合する。サイクリンがなければCDKはほとんどキナーゼ活性を持たないことが報告されており、サイクリン−CDK複合体のみが活性キナーゼであると考えられる。CDKはその基質をセリン及びスレオニン上でリン酸化するので、セリン−スレオニンキナーゼファミリーに属すると言える。従って、CDK及びサイクリンは、種を超えて高度に保存されており、腫瘍性表現型(がん細胞等)を有するものを含む全ての細胞型に存在する。公知のサイクリン−CDK複合体の大半は、細胞周期を通じて進行(progression)を制御する。動物細胞は少なくとも9種のCDKを含み、そのうちの4種、CDK1、2、3、4、及び6は、細胞周期の制御に直接関与することが報告されている。CDK1はサイクリンA及びサイクリンBで制御される。CDK2はサイクリンA及びサイクリンEで制御される。CDK3はサイクリンCで制御される。CDK4はサイクリンD1、サイクリンD2、及びサイクリンD3で制御される。CDK5はCDK5R1及びCDK5R2で制御される。CDK6はサイクリンD1、サイクリンD2、及びサイクリンD3で制御される。CDK7はサイクリンHで制御される。CDK8はサイクリンCで制御される。CDK9はサイクリンT1、サイクリンT2a、サイクリンT2b、及びサイクリンKで制御される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「サイクリン」という用語は、サイクリン依存性キナーゼ(CDK)酵素を活性化することにより細胞周期を通じて細胞の進行(progression)を制御するタンパク質の一ファミリーを意味する。サイクリンDは、その機能的重要性の点で産生される主要なサイクリンの一種であり、4種のCDK、すなわちCDK2、4、5、及び6と相互作用することが知られている。増殖している細胞では、サイクリンD−CDK4/6複合体の蓄積が細胞周期の進行に大きな重要性を持っている。例えば、サイクリンD−CDK4/6複合体は、網膜芽細胞腫腫瘍抑制タンパク質(Rb)を部分的にリン酸化する。このタンパク質を阻害することで、S期の進行に重要ないくつかの遺伝子の発現を誘導できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「患者」及び「被験者」という用語は、交換可能に使用されており、実験、診断、予防、及び/又は治療等の目的で本発明に係る組成物を投与できる任意の生体を意味する。典型的な被験者としては、動物(マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類、及びヒト等の哺乳類等)及び/又は植物が挙げられる。本明細書中、患者/被験者としては、治療を求める又は必要とする可能性のある個体、治療を要する個体、治療を受けている個体、治療を受けるつもりの個体、及び特定の疾患又は異常のために訓練を受けた専門家の世話を受けている被験者が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「精製する」、「精製した」、「精製」という用語は、望ましくない成分、材料の汚染、混合、又は欠陥を実質的に純粋に又は汚れのない状態にすることを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「標的細胞」という用語は、対象となる1種以上の細胞を意味する。細胞は、インビトロ、インビボ、生体内原位置、又は生体の組織若しくは器官に見られてもよい。生体は動物であってもよく、好ましくは哺乳類であり、より好ましくはヒトであり、最も好ましくは患者である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、分子又はペプチドの「長さ」又は「サイズ(大きさ)」という用語は、分子内で測定され得る最も長い2D又は3Dの距離を意味する。環状分子の場合、「長さ」又は「サイズ(大きさ)」という用語は、環状構造を横切る測定可能な最も長い距離を意味する。本開示を通じて、分子のサイズ又は長さが与えられている場合(一般的にはナノメートル(nm)単位)、以下の手順を用いて算出した。
・いわゆる「2D」手順
ChemDraw(登録商標)ソフトウェア等で2D化学構造を描画した。次いで、利用可能なChemDrawの長さ測定ツールでサイズを測定した。本明細書中に記載した長さは、2D結合サイズ及び角度についてソフトウェアのデフォルト設定を用いた分子の最も長い2D長さに相当する。
・あるいは、いわゆる「3D」手順を実施してもよい。
(1)好適なソフトウェア(ChemDraw等)を用いて、分子の化学構造を描画する。
(2)SCWRL(Protein Sci.2003;12(9):2001−14)又はMODELLER(Current Protocols in Bioinformatics.15:5.6:5.6.1−5.6.30)(いずれも参照によりその全体が本願に組み込まれる)を用いて、描画した分子の3D構造モデルを生成する。
(3)AMBER(J.Computat.Chem.2005;26,1668−1688)(参照によりその全体が本願に組み込まれる)を用いて、得られた3D構造モデルを水を含有するボックスシミュレーションにおいて数ミリ秒インキュベートする。
(4)Pymol(登録商標)等のソフトウェアを用いて、利用可能なPymol長さ測定ツール(DeLano Scientific LLC、http://www.pymol.org)により、得られた分子のサイズを測定する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「平均二乗偏差」及び「RMSD」という用語は、当該分野で周知であり、マッチさせた特定の原子の間の距離を二乗したものの算術平均の平方根を意味する。分子立体構造は、分子を構成する原子のデカルト座標を成分とするベクトルとして表せる。従って、N個の原子を有する分子の立体構造は、実数の3N寸法ベクトルとして表せる。ペプチド又はペプチド模倣体のペア(x及びy等)のRMSDを算出するには、それぞれを座標の3N長さベクトル(原子がN個の場合)として表す必要がある。従って、RMSDは、対応する原子x及びy間の距離を二乗したものの算術平均の平方根である。これは、2つの構造の立体構造間の平均原子変位の尺度である。
以下によって、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の3次元モデルを作成する(すなわち、その3D構造座標を得る)。
以下の手順に従い、BLASTアルゴリズムを用いて、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の配列とのアラインメントに基づいてポリペプチド3D構造座標セットを得る。
http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM=blastp&PAGE_TYPE=BlastSearch&LINK_LOC=blasthome
2.対象となるペプチド又はペプチド模倣体のアミノ酸配列を「Enter QuerySequence」セクションに入力する。各配列のアラインメントを順次実行する(多重アラインメントツールではない)。
3.「Choose Search Set」セクションは、Protein Data Bank Proteins(pdb)データベースを選択する。
4.「Choose Search Set」セクションでは、「Models(XM/XP)」を除外せず、「Uncultured/environmental sample sequences」を除外しない。
5.「Program Selection」セクションでは、blastp(Protein−Protein BLAST)アルゴリズムを選択する。
6.他の領域は、図20のスクリーンショットに示したようにしておく。
7.BLASTを実行する。
8.クエリで得られた結果が、複数のPDBファイルの形式で示される。
9.この出力結果から、最も良好な配列アラインメントに相当する最初の10個のPDBファイルが保持される。この10個で1セットのPDBファイル又は構造を次工程(工程2:STAMPとの構造アラインメント)で使用する。
10.最後に、例えば別の小分子、受容体又はその一部、二量体又はその一部等をすべて除去して10個のPDBファイルに含まれる10個の構造をクリーンアップして、対象のポリペプチド鎖のみを保持する。
以下の手順に従い、STAMP(Structural Alignment of Multiple Proteins Version 4.2)を用いて、STEP1.1で得られた3D構造座標セットの構造アラインメントを実施することで、アラインメント済みポリペプチド3D構造座標セットを得る。
http://www.russelllab.org/cgi−bin/pdc/stamp.pl
2.「Structure A」というセクションにおいて、STEP1.1で得られた10個で1セットの3次元構造座標のうち、BLASTによる最良の配列アラインメントに相当する第一の構造に対応するPDBファイルを入力する。
3.「Structure B」というセクションにおいて、STEP1.1で得られた10個で1セットの3D構造座標のうち、BLASTによる2番目に良い配列アラインメントに相当する第二の構造に対応するPDBファイルを入力する。
4.STAMPを実行する。
5.STEP1.1で同定された10個で1セットの3D構造座標の他の8個のPDBファイルについて、「Structure B」領域にPDBファイルを順次入力して、工程2〜4を繰り返す。
6.その結果、STEP1.1で得られたPDBファイルセットに含まれる10個の構造の構造アラインメントが、アラインメント済みポリペプチド3D構造ペア(構造1と構造2、構造1と構造3、構造1と構造4、…、構造1と構造10)をそれぞれ含む9個の異なるPDBファイルとして得られる。
7.これら9個の「ペア」PDBファイルから、構造1〜10のうち1個をそれぞれ含む10個のPDBファイルが作成される。
8.こうして、STEP1.2によって、アラインメント済み3D構造座標を含む10個のPDBファイルが得られ、次の工程で使用する。
以下の手順に従い、SCWRL(参照:「SCWRL and MolIDE:computer programs for side−chain conformation prediction and homology modeling」,Nature Protocols VOL.3 NO.12 2008,Qiang Wang et al.、参照によりその全体が本願に組み込まれる。)を用いて、STEP1.2で得られたアラインメント済みポリペプチド3D構造座標セットに対して、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の配列をモデリングして、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の3D構造座標セットを得る。
2.STEP1.2で得られたアラインメント済みポリペプチド3D構造座標を含む第一のPDBファイルをインポートする。
3.「scwrl_path/scwrl3 −i inputpdbfile −o outputpdbfile −s sequencefile 4 logfile」というコマンドをUnixベースシステムにタイプしてSCWRLを実行する。
4.その結果、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の予測3D構造座標を含む第一のPBDファイルが得られる。
5.STEP1.2で得られた残り9個のPDBファイルを用いて、工程1〜3を繰り返す。
6.STEP1.3によって、10個のPDBファイルが得られ、次のSTEP1.4で使用する。
以下の手順に従い、GROMACS(参照:Hess B,Kutzner C,Van Der Spoel D,Lindahl E(2008).「GROMACS 4:Algorithms for Highly Efficient,Load−Balanced,and Scalable Molecular Simulation」,J Chem Theory Comput 4(2):435、参照によりその全体が本願に組み込まれる。)を用いて、STEP1.3で得られたRMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の3D構造座標セットの自由エネルギー(ΔG)を最小化する。
2.「editconf −f conf.gro −bt cubic d 0.7 o box.gro」というコマンドを用いて、インポートしたペプチド又はペプチド模倣体モデルの周囲にボックスを作成する。
3.「genbox −cp box.gro −cs spc216.gro −p topol.top − o solvated.gro」というコマンドを用いて、ボックス内に溶媒(水)分子を加える。
4.「vim em.mdp」コマンドで実行される分子動態(MD)の入力値を準備する。デフォルト実行は1000nstepsに設定される。
5.「grompp −f em.mdp −p topol.top −c solvated.gro −o em.tpr」というコマンドを用いて、MD実行の入力値を作成する。
6.「mdrun −v −deffnm em」コマンドを実行して、実際のエネルギー最小化を実施する。
7.「g energy −f em.edr −s em.tpr −o em.xvg」というコマンドを実行した後、オプション「7」を実行する。
8.その結果、第一のXMGファイルが得られる。XMGファイルを見るには、「xmgrace em.xvg」コマンドを実行する。
9.STEP1.3で得られた残り9個の構造について工程1〜8を繰り返す。こうして、10個のXMGファイルが得られる。
10.各XMGファイルから、PDBファイル形式で最低エネルギーの構造が得られる。こうして、STEP1.4によって、最低エネルギーの構造をそれぞれ1個含む10個のPDBファイルが得られ、次の工程で使用する。
以下の手順に従い、FATCAT(Flexible structure AlignmenT by Chaining Aligned fragment pairs allowing Twists)を用いて、STEP1.4で得られたペプチド又はペプチド模倣体の3D構造座標とPEPREFの3D構造座標とを比較することにより、RMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体のRMSDを算出し、考えられる最も低いRMSDを得る。
http://fatcat.burnham.org
2.「pairwise alignment」ツールを開く。
3.「Get the 1st structure」セクションにおいてPEPREFの構造座標を含むPDBファイルをインポートする。
4.STEP1.4で得られた最小エネルギーを有するRMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の第一のPDBファイルをインポートする。
5.FATCATを実行する。
6.その結果、STEP1.4で得られたRMSDを算出するペプチド又はペプチド模倣体の第一の構造の第一のRMSDが出力レポートで得られる。
7.STEP1.4で得られた残り9個の構造(PDBファイル)について工程1〜5を繰り返す。
8.(順次得られた10個のRMSDのうち)最小のRMSDを有するペプチド又はペプチド模倣体の構造が、本出願で考慮される値である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、PEPREFの3D構造座標は以下の通りである。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「構造座標」という用語は、結晶型のタンパク質、タンパク質複合体、又はペプチドの原子(散乱中心)によるX線単色ビームの回折において得られたパターンに関する数式に由来するデカルト座標を意味する。回折データは、結晶の繰り返し単位の電子密度マップを算出するのに使用される。その後、電子密度マップを用いて、分子又は分子複合体の個々の原子の位置を確定する。
STAMP(Structural Alignment of Multiple Proteins)は、3次元構造に基づいてタンパク質配列をアラインメントするツールである。そのアルゴリズムは、剛体の回転及び平行移動を包括的に最適化することで、各分子のアラインメントされた残基間の距離Cαを最小化する。このプログラムによって、選択したモデル間の残基の同等性に関する情報がいくらか得られる。
このプログラムは、タンパク質の側鎖立体構造を予測及び最適化する。支持タンパク質の骨格及び骨格依存性回転異性体ライブラリを使用することである。側鎖間、及び側鎖と骨格の間の立体障害を最小化することで、考えられる立体構造を調査する。
GROMACSは分子動態パッケージである。GROMACSに含まれる「gmx rms」ツールは、平均二乗偏差(RMSD)をコンピュータで算出することで、2つの構造を比較する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「成長因子受容体」又は「GFR」という用語は、細胞成長、増殖、治癒、及び細胞分化等を刺激できる天然物質である成長因子に結合する受容体である。本発明の実施形態を実施するために好適な成長因子受容体としては、上皮成長因子受容体(EGFR)、線維芽細胞成長因子受容体(FGFR)、血管内皮成長因子受容体(VEGFR)、神経成長因子受容体(NGFR)、インスリン受容体ファミリー、Trk受容体ファミリー、Eph受容体ファミリー、AXL受容体ファミリー、LTK受容体ファミリー、TIE受容体ファミリー、ROR受容体ファミリー、DDR受容体ファミリー、RET受容体ファミリー、KLG受容体ファミリー、RYK受容体ファミリー、MuSK受容体ファミリー、肝細胞成長因子受容体(HGFR)、ソマトメジン又はインスリン様成長因子受容体(SGFR)、血小板由来成長因子受容体(PDGFR)、トランスフォーミング成長因子ベータ(TGF−β)スーパーファミリータンパク質(AMH、ARTN、BMP10、BMP15、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8A、BMP8B、GDF1、GDF10、GDF11、GDF15、GDF2、GDF3、GDF3A、GDF5、GDF6、GDF7、GDF8、GDF9、GDNF、INHA、INHBA、INHBB、INHBC、INHBE、LEFTY1、LEFTY2、MSTN、NODAL、NRTN、PSPN、TGFB1、TGFB2、及びTGFB3等)、並びにこれらの組み合わせ等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「成長因子」という用語は、成長因子受容体へ結合し、該成長因子受容体を活性化して生物学的効果又は反応(組織成長の促進等)を生じさせることができる任意の物質を意味する。成長因子の例としては、血小板由来成長因子(PDGF)、血小板由来血管新生因子(PDAF)、血管内皮成長因子(VEGF)、血小板由来上皮成長因子(PDEGF)、トランスフォーミング成長因子ベータ(TGF−β)、トランスフォーミング成長因子A(TGF−A)、上皮成長因子(EGF)、線維芽細胞成長因子(FGF)、酸性線維芽細胞成長因子(FGF−A)、塩基性線維芽細胞成長因子(FGF−B)、インスリン様成長因子1及び2(IGF−I及びIGF−2)、ケラチノサイト成長因子(KGF)、腫瘍壊死因子(TNF)、線維芽細胞成長因子(FGF)及びインターロイキン1(IL−I)、ケラチノサイト成長因子2(KGF−2)、及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「活性化する」又は「の活性化」という用語は、成長因子受容体に関して使用した場合、該成長因子受容体のチロシンキナーゼドメインのリン酸化を意味する。
一例示において、上記(非環状)GFR結合化合物は、分子量が8,000ダルトン未満である。具体的な一例示において、上記(非環状)GFR結合化合物は、分子量が6,000ダルトン未満である。具体的な一例示において、上記(非環状)GFR結合化合物は、分子量が2,000〜8,000ダルトンである。具体的な一例示において、上記(非環状)GFR結合化合物は、分子量が2,000〜6,000ダルトンである。2,000〜6,000ダルトンが特に好ましい。
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)はPEP1を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(Ia)又はペプチド(Ia)ともいう)。
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)はPEP12を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(Ia)又はペプチド(Ia)ともいう)。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(C)の一端は、PEP1の一端を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、PEP11の一端を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜11個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IIa)又はペプチド(IIa)ともいう)。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IIIa)又はペプチド(IIIa)ともいう)。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IVa)又はペプチド(IVa)ともいう)。
−AA27−AA28−AA29−VVEAXGXRではない。PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP9:PEP10はSTPPTXXVPT−AA11−AA12−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVESXGXRではない。PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はHVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXHではない。PEP1がKPLS、PEP2がDHHKDである場合、PEP9:PEP10はRVPSTXXAPV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VEEXGXLではない。PEP1がEPLP、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASAAPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VRSXKXSではない。PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、ASASPXXVSQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXS。PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASASPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXSではない。PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−QHNKXEXRではない。PEP1がSNIT、PEP2がLGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EHSQXEXRではない。PEP1がRSVK、PEP2がKEVQVである場合、PEP9:PEP10はSSVKXQPSRV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EEHLEXAXAではない。PEP1がRPVQ、PEP2がKKATVである場合、PEP9:PEP10はRNVQXRPTQV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EDHLAXKXEではない。
:DHHKD:VVD、VPA:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:VVE、VPQ:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:VRS、VSQ:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:VKS、VPQ:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:VKS、VPT:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:QHN、VPT:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:EHS、SRV:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:EEH、TQV:KPLS−AA17−LYV:DHHKD:EDH、VPQ:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VRS、VPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VVE、VPE:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:TVE、APT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VVR、APT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VVK、VPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VAE、VPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:AVS、TPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VVD、VPA:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VVE、APV:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VEE、VSQ:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VKS、VPQ:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:VKS、VPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:QHN、VPT:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:EHS、SRV:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:EEH、TQV:EPLP−AA17−VYY:EQLSN:EDH、VSQ:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VKS、VPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VVE、VPE:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:TVE、APT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VVR、APT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VVK、VPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VAE、VPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:AVS、TPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VVD、VPA:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VVE、APV:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VEE、VPQ:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VRS、VPQ:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:VKS、VPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:QHN、VPT:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:EHS、SRV:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:EEH、TQV:EPLT−AA17−LYY:EQLSN:EDH、VPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:QHN、VPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VVE、VPE:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:TVE、APT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VVR、APT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VVK、VPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VAE、VPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:AVS、TPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VVD、VPA:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VVE、APV:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VEE、VPQ:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VRS、VSQ:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VKS、VPQ:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:VKS、VPT:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:EHS、SRV:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:EEH、TQV:SNIT−AA17−QIM:IGEMS:EDH、VPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:EHS、VPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VVE、VPE:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:TVE、APT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VVR、APT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VVK、VPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VAE、VPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:AVS、TPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VVD、VPA:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VVE、APV:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VEE、VPQ:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VRS、VSQ:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VKS、VPQ:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:VKS、VPT:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:QHN、SRV:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:EEH、TQV:SNIT−AA17−QIM:LGEMS:EDH、SRV:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:EEH、VPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VVE、VPE:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:TVE、APT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VVR、APT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VVK、VPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VAE、VPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:AVS、TPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VVD、VPA:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VVE、APV:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VEE、VPQ:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VRS、VSQ:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VKS、VPQ:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:VKS、VPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:QHN、VPT:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:EHS、TQV:RSVK−AA17−AKV:KEVQV:EDH、TQV:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:EDH、VPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VVE、VPE:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:TVE、APT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VVR、APT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VVK、VPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VAE、VPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:AVS、TPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VVD、VPA:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VVE、APV:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VEE、VPQ:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VRS、VSQ:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VKS、VPQ:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:VKS、VPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:QHN、VPT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:EHS、及びSRV:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:EEH(式中、AA17は、G、A、V、L、I、P、F、M、W、T、及びSからなる群より選択され、特にM、I、L、V、及びTからなる群より選択される。)からなる群より選択される。
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−RKI:KKATV:RLEDH、VPTEL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:DMVVE、VPEKM:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:NMTVE、VPTEL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:EMVVE、APTKL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:NMVVR、APTQL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:NMVVR、APTKL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:NMVVK、VPTKL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:EGMSVAE、VPTKL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:GMAVS、TPTKM:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:GMVVD、VPARL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:DMVVE、VPTRL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:DMVVE、APVKT:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:MIVEE、VPQAL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:MIVRS、VSQDL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:MIVKS、VPQDL:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:MVVKS、VPTEE:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:FLQHN、VPTGQ:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:LEEHS、及びSRVHH:RPVQ−AA17−RKI:KKATV:RLEEH(式中、AA17は、G、A、V、L、I、P、F、M、W、T、及びSからなる群より選択され、特にM、I、L、V、及びTからなる群より選択される。)からなる群より選択される。より具体的には、PEP5:PEP12:PEP2:PEP6の4つ組は、VPTKM:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVE、VPTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVE、VPTQL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVE、VPTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:EGMSVVE、VPTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:GMVVE、VPTKM:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:GMVVE、VPTRL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:DMVVE、VPTKT:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVVE、VPTAL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVVE、VPTDL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVVE、VPTDL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MVVVE、VPEKM:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMTVE、APTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVR、APTQL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVR、APTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:NMVVK、VPTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:EGMSVAE、VPTKL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:GMAVS、TPTKM:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:GMVVD、VPARL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:DMVVE、APVKT:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVEE、VPQAL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVRS、VSQDL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MIVKS、VPQDL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:MVVKS、VPTEE:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:FLQHN、VPTGQ:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:LEEHS、SRVHH:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:RLEEH、TQVQL:SAIS−AA17−LYL:LKNYQ:TLEDH、VPEEL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:DMTVE、VPEEL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:EMTVE、VPEKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:NMTVE、VPEQL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:NMTVE、VPEKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:EGMSTVE、VPEKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:GMTVE、VPEKM:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:GMTVE、VPERL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:DMTVE、VPEKT:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MITVE、VPEAL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MITVE、VPEDL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MITVE、VPEDL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MVTVE、VPTEL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:DMVVE、VPTEL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:EMVVE、APTKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:NMVVR、APTQL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:NMVVR、APTKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:NMVVK、VPTKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:EGMSVAE、VPTKL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:GMAVS、TPTKM:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:GMVVD、VPARL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:DMVVE、VPTRL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:DMVVE、APVKT:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MIVEE、VPQAL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MIVRS、VSQDL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MIVKS、VPQDL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:MVVKS、VPTEE:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:FLQHN、VPTGQ:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:LEEHS、SRVHH:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:RLEEH、TQVQL:SSLS−AA17−LFF:LKVYP:TLEDH、APTEL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:DMVVR、APTKM:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:NMVVR、APTEL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:EMVVR、APTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:NMVVR、APTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:EGMSVVR、APTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:GMVVR、APTKM:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:GMVVR、APTRL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:DMVVR、APTKT:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVVR、APTAL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVVR、APTDL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVVR、APTDL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MVVVR、VPTEL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:DMVVE、VPEKM:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:NMTVE、VPTEL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:EMVVE、APTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:NMVVK、VPTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:EGMSVAE、VPTKL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:GMAVS、TPTKM:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:GMVVD、VPARL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:DMVVE、VPTRL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:DMVVE、APVKT:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVEE、VPQAL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVRS、VSQDL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MIVKS、VPQDL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:MVVKS、VPTEE:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:FLQHN、VPTGQ:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:LEEHS、SRVHH:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:RLEEH、TQVQL:NAIS−AA17−LYF:LKKYR:TLEDH、APTEL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:DMVVK、APTKM:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMVVK、APTEL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:EMVVK、APTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMVVK、APTQL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMVVK、APTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:EGMSVVK、APTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:GMVVK、APTKM:SATS−AA17−LYY:LRKHR:GMVVK、APTRL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:DMVVK、APTKT:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVVK、APTAL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVVK、APTDL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVVK、APTDL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MVVVK、VPTEL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:DMVVE、VPEKM:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMTVE、VPTEL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:EMVVE、APTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMVVR、APTQL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:NMVVR、VPTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:EGMSVAE、VPTKL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:GMAVS、TPTKM:SATS−AA17−LYY:LRKHR:GMVVD、VPARL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:DMVVE、VPTRL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:DMVVE、APVKT:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVEE、VPQAL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVRS、VSQDL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MIVKS、VPQDL:SATS−AA17−LYY:LRKHR:MVVKS、VPTEE:SATS−AA17−LYY:LRKHR:FLQHN、VPTGQ:SATS
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体的には、PEP7:PEP3:PEP1:PEP2:PEP4:PEP8の6つ組は、GIPEPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXAXR、HVTKPTX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、YVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、TVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXH、AVPKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XGXR、KASKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:EXGXR、GSAGPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:RXGXS、AAPASXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXR、HVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、RVPSTXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XGXL、ASAAPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XKXS、ASASPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XKXS、GIPEPXX:VPE:SAIS:LKNYQ:TVE:SXAXR、HVTKPTX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:AXGXH、AVPKAXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SAIS:LKNYQ:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXR、HVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SAIS:LKNYQ:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SAIS:LKNYQ:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SAIS:LKNYQ:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SAIS:LKNYQ:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SAIS:LKNYQ:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SAIS:LKNYQ:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SAIS:LKNYQ:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SAIS:LKNYQ:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:GXGXR、SIPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:GXGXR、HVTKPTX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、YVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、TVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXH、AVPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXH、KVGKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XGXR、KASKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:EXGXR、GSAGPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:RXGXS、AAPASXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXR、STPPTXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXR、HVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、RVPSTXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XGXL、ASAAPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XKXS、ASASPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XKXS、KIPKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:GXGXR、SIPKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:AXGXH、AVPKAXX:APT:SSLS:LKVYP:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SSLS:LKVYP:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SSLS:LKVYP:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:SXGXR、HVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SSLS:LKVYP:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SSLS:LKVYP:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SSLS:LKVYP:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SSLS:LKVYP:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SSLS:LKVYP:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SSLS:LKVYP:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SSLS:LKVYP:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SSLS:LKVYP:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:GXGXR、GIPEPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:SXAXR、SIPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:GXGXR、AVPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:AXGXH、KVGKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XGXR、KASKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:EXGXR、GSAGPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:RXGXS、AAPASXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:AXGXR、STPPTXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:SXGXR、RVPSTXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XGXL、ASAAPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XKXS、ASASPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XKXS、KIPKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:NAIS:LKKYR:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:GXGXR、AVPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:NAIS:LKKYR:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:NAIS:LKKYR:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:SXGXR、RVPSTXX:APV:NAIS:LKKYR:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:NAIS:LKKYR:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:NAIS:LKKYR:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:NAIS:LKKYR:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:NAIS:LKKYR:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:NAIS:LKKYR:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:NAIS:LKKYR:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:NAIS:LKKYR:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:GXGXR、GIPEPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXAXR、SIPKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:GXGXR、HVTKPTX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、YVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、TVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:AXGXH、KVGKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XGXR、KASKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:EXGXR、GSAGPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:RXGXS、AAPASXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:AXGXR、STPPTXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXR、HVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、RVPSTXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XGXL、ASAAPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XKXS、ASASPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XKXS、KIPKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:SATS:LRKHR:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SATS:LRKHR:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SATS:LRKHR:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SATS:LRKHR:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:SXGXR、HVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SATS:LRKHR:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SATS:LRKHR:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SATS:LRKHR:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SATS:LRKHR:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SATS:LRKHR:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SATS:LRKHR:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SATS:LRKHR:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SATS:LRKHR:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:GXGXR、GIPEPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:GXGXR、HVTKPTX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、YVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、TVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXH、AVPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXH、KASKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:EXGXR、GSAGPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:RXGXS、AAPASXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXR、HVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、RVPSTXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XGXL、ASAAPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XKXS、ASASPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XKXS、KIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:SPIS:LKYHY:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SPIS:LKYHY:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SPIS:LKYHY:VVR:SXGXH、TVPKPXX: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EGLEX:VPTGQ:SNIT−AA17−QIM:RIKPHQGQH:IGEMS:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SNIT−AA17−QIM:EYVRKKPKL:IGEMS:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SNIT−AA17−QIM:EIVRKKPIF:IGEMS:TLEDH:LAXKXE、NDEGLEX:VPTEE:SNIT−AA17−QIM:RIKPHQGQH:LGEMS:FLEHS:KXEXR、KIPKAXX:VPTEL:SNIT−AA17−QIM:DENEKVV:LGEMS:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:SNIT−AA17−QIM:DENKNVV:LGEMS:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:SNIT−AA17−QIM:DEYDKVV:LGEMS:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SNIT−AA17−QIM:DDSSNVI:LGEMS:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SNIT−AA17−QIM:DDSSNVI:LGEMS:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SNIT−AA17−QIM:DDSSNVI:LGEMS:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:SNIT−AA17−QIM:DSSNNVI:LGEMS:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SNIT−AA17−QIM:DDMGVPT:LGEMS:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SNIT−AA17−QIM:DKGVVTY:LGEMS:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SNIT−AA17−QIM:NDKQQII:LGEMS:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SNIT−AA17−QIM:DAANNVV:LGEMS:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SNIT−AA17−QIM:DSANNVV:LGEMS:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SNIT−AA17−QIM:DDSSNVI:LGEMS:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SNIT−AA17−QIM:DNGRVLL:LGEMS:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SNIT−AA17−QIM:VGRKPKV:LGEMS:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SNIT−AA17−QIM:IGKTPKI:LGEMS:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SNIT−AA17−QIM:VGRTPKV:LGEMS:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:SNIT−AA17−QIM:RIKPHQGQH:LGEMS:FLQHN:KXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SNIT−AA17−QIM:EYVRKKPKL:LGEMS:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SNIT−AA17−QIM:EIVRKKPIF:LGEMS:TLEDH:LAXKXE、RNVQXRP:SRVQL:RSVK−AA17−AKV:EIVRKKPIF:KEVQV:TLEEH:LAXKXE、KIPKAXX:VPTEL:RSVK−AA17−AKV:DENEKVV:KEVQV:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:RSVK−AA17−AKV:DENKNVV:KEVQV:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:RSVK−AA17−AKV:DEYDKVV:KEVQV:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:RSVK−AA17−AKV:DDSSNVI:KEVQV:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:RSVK−AA17−AKV:DDSSNVI:KEVQV:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:RSVK−AA17−AKV:DDSSNVI:KEVQV:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:RSVK−AA17−AKV:DSSNNVI:KEVQV:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:RSVK−AA17−AKV:DDMGVPT:KEVQV:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:RSVK−AA17−AKV:DKGVVTY:KEVQV:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:RSVK−AA17−AKV:NDKQQII:KEVQV:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:RSVK−AA17−AKV:DAANNVV:KEVQV:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:RSVK−AA17−AKV:DSANNVV:KEVQV:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:RSVK−AA17−AKV:DDSSNVI:KEVQV:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:RSVK−AA17−AKV:DNGRVLL:KEVQV:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:RSVK−AA17−AKV:VGRKPKV:KEVQV:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:RSVK−AA17−AKV:IGKTPKI:KEVQV:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:RSVK−AA17−AKV:VGRTPKV:KEVQV:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:RSVK−AA17−AKV:RIKPHQGQH:KEVQV:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:RSVK−AA17−AKV:RIKPHQGQH:KEVQV:LEEHS:QXEXR、RNVQXRP:TQVQL:RSVK−AA17−AKV:EIVRKKPIF:KEVQV:TLEDH:LAXKXE、SSVKXQP:TQVHH:RPVQ−AA17−RKI:EYVRKKPKL:KKATV:RLEDH:LEXAXA、KIPKAXX:VPTEL:RPVQ−AA17−RKI:DENEKVV:KKATV:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:RPVQ−AA17−RKI:DENKNVV:KKATV:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:RPVQ−AA17−RKI:DEYDKVV:KKATV:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:RPVQ−AA17−RKI:DDSSNVI:KKATV:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:RPVQ−AA17−RKI:DDSSNVI:KKATV:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:RPVQ−AA17−RKI:DDSSNVI:KKATV:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:RPVQ−AA17−RKI:DSSNNVI:KKATV:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:RPVQ−AA17−RKI:DDMGVPT:KKATV:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:RPVQ−AA17−RKI:DKGVVTY:KKATV:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:RPVQ−AA17−RKI:NDKQQII:KKATV:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:RPVQ−AA17−RKI:DAANNVV:KKATV:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:RPVQ−AA17−RKI:DSANNVV:KKATV:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:RPVQ−AA17−RKI:DDSSNVI:KKATV:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:RPVQ−AA17−RKI:DNGRVLL:KKATV:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:RPVQ−AA17−RKI:VGRKPKV:KKATV:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:RPVQ−AA17−RKI:IGKTPKI:KKATV:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:RPVQ−AA17−RKI:VGRTPKV:KKATV:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:RPVQ−AA17−RKI:RIKPHQGQH:KKATV:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:RPVQ−AA17−RKI:RIKPHQGQH:KKATV:LEEHS:QXEXR、及びSSVKXQP:SRVHH:RPVQ−AA17−RKI:EYVRKKPKL:KKATV:RLEEH:LEXAXA(式中、AA17は、G、A、V、L、I、P、F、M、W、T、及びSからなる群より選択され、特にM、I、L、V、及びTからなる群より選択される。)からなる群より選択される。
具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約28〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約75〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約150〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約150〜約1,500Daである。最も具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約300〜約1,000Daである。
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209** (XXXV)
で表されるペプチドを含む(又はである)。式(XXXV)のペプチドは、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAVI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAIV−AAIV−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAII−AAI−AAII−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAIII−AAII−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAV−AAV−AAVII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAVIII−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、及び*AAV−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**(式中、AAIは、本明細書で定義される任意のアミノ酸である。AAIIは、本明細書で定義される任意の極性アミノ酸である。AAIIIは、本明細書で定義される任意の酸性アミノ酸である。AAIVは、本明細書で定義される任意の脂肪族アミノ酸である。AAVは、本明細書で定義される任意の無極性アミノ酸である。AAVIは、本明細書で定義される任意の芳香族アミノ酸である。AAVIIは、本明細書で定義される任意の塩基性アミノ酸である。AAVIIIは、本明細書で定義されるL又はIである。AAXIIは、G、A、V、L、I、P、M、K、R、H、Y、及びEからなる群より選択されるアミノ酸である。AAXIIIは、存在しないか又はAAII又はAAVIIであり、好ましくは存在しない。)からなる群より選択できる。断片AA201、AA201−AA202、AA201−AA202−AA203、AA201−AA202−AA203−AA204、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207、AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA206−AA207−AA208−AA209、AA207−AA208−AA209、AA208−AA209、及びAA209のいずれか1つは存在していなくてもよい。式(XXXV)のペプチドにおいて、「*」及び「**」が付してあるアミノ酸のいずれか1つはN末端アミノ酸であり、それ以外はC末端アミノ酸である。
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208**(XXXV−1);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207**(XXXV−2);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206**(XXXV−3);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205**(XXXV−4);
*AA201−AA202−AA203−AA204**(XXXV−5);
*AA201−AA202−AA203**(XXXV−6);
*AA201−AA202**(XXXV−7);
*AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−8);
*AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−9);
*AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−10);
*AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−11);
*AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−12);
*AA207−AA208−AA209**(XXXV−13);
*AA208−AA209**(XXXV−14)
(従って、式中、例えば、式(XXXV−1)のペプチドは、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAVI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAIV−AAIV−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAII−AAI−AAII−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAIII−AAII−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAV−AAV−AAVII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAVIII−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、及び*AAV−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**からなる群より選択されてもよい。)のいずれか1つであってもよい。
一例示において、上記環状GFR結合化合物は、分子量が5,000ダルトン未満である。具体的な一例示において、上記環状GFR結合化合物は、分子量が4,000Da未満である。具体的な一例示において、上記環状GFR結合化合物は、分子量が1,500〜5,000Daである。具体的な一例示において、上記環状GFR結合化合物は、分子量が1,500〜4,000Daである。
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)はPEP1を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(Ia)又はペプチド(Ia)ともいう)を含む。
PEP(A)−LINKER−PEP(B)−LINKER (Ib)
(式中、第一のLINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP(B)の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEP(A)の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)はPEP1を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(Ib)又はペプチド(Ib)ともいう)を含む。
一態様において、本開示は、一般式(Ia)又は(Ib)(式中、PEP(A)はPEP1を含む。PEP(B)はPEP2を含む。PEP(A)はPEP3を更に含む。PEP(B)はPEP4を更に含む。)で表される化合物を含む環状GFR結合化合物を提供する。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(C)の一端は、PEP1の一端を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、PEP11の一端を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜11個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIa)又はペプチド(IIa)ともいう)を含む。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D)−LINKER (IIb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(C)の一端は、PEP1の一端を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの一端は、PEP11の一端を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP(D)の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEPC(C)の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜11個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIb)又はペプチド(IIb)ともいう)を含む。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIIa)又はペプチド(IIIa)ともいう)を含む。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8−LINKER (IIIb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。第一のLINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP8の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEP7の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIIb)又はペプチド(IIIb)ともいう)を含む。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IVa)又はペプチド(IVa)ともいう)を含む。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38−LINKER (IVb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。第一のLINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、AA38と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、AA1と共有結合的に相互作用する。AA1は、N末端アミノ酸又はC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IVb)又はペプチド(IVb)ともいう。)を含む。
具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約28〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約75〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約150〜約2,000Daである。具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約150〜約1,500Daである。最も具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約300〜約1,000Daである。さらにより具体的な一例示において、上記LINKERは、Mwが約300〜約800Daである。
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209** (XXXV)
で表されるペプチドを含む(又はである)。式(XXXV)のペプチドは、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAVI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAIV−AAIV−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAII−AAI−AAII−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAIII−AAII−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAV−AAV−AAVII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAVIII−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、及び*AAV−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**(式中、AAIは、本明細書で定義される任意のアミノ酸である。AAIIは、本明細書で定義される任意の極性アミノ酸である。AAIIIは、本明細書で定義される任意の酸性アミノ酸である。AAIVは、本明細書で定義される任意の脂肪族アミノ酸である。AAVは、本明細書で定義される任意の無極性アミノ酸である。AAVIは、本明細書で定義される任意の芳香族アミノ酸である。AAVIIは、本明細書で定義される任意の塩基性アミノ酸である。AAVIIIは、本明細書で定義されるL又はIである。AAXIIは、G、A、V、L、I、P、M、K、R、H、Y、及びEからなる群より選択されるアミノ酸である。AAXIIIは、存在しないか又はAAII又はAAVIIであり、好ましくは存在しない。)からなる群より選択できる。断片AA201、AA201−AA202、AA201−AA202−AA203、AA201−AA202−AA203−AA204、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207、AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA206−AA207−AA208−AA209、AA207−AA208−AA209、AA208−AA209、及びAA209のいずれか1つは存在していなくてもよい。式(XXXV)のペプチドにおいて、「*」及び「**」が付してあるアミノ酸のいずれか1つはN末端アミノ酸であり、それ以外はC末端アミノ酸である。
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208**(XXXV−1);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207**(XXXV−2);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206**(XXXV−3);
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205**(XXXV−4);
*AA201−AA202−AA203−AA204**(XXXV−5);
*AA201−AA202−AA203**(XXXV−6);
*AA201−AA202**(XXXV−7);
*AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−8);
*AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−9);
*AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−10);
*AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−11);
*AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV−12);
*AA207−AA208−AA209**(XXXV−13);
*AA208−AA209**(XXXV−14)
(従って、式中、例えば、式(XXXV−1)のペプチドは、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAVI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAIV−AAIV−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAII−AAI−AAII−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAIII−AAII−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAV−AAV−AAVII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII**、*AAVIII−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**、及び*AAV−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII**からなる群より選択されてもよい。)のいずれか1つであってもよい。
(骨細胞系列)
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から骨細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から軟骨細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から血管細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞からニューロン系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から網膜細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から腎細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から靱帯及び腱細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から線維芽細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から生殖器系系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から肺細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から筋肉細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から血液細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
本発明の特定の実施形態は、腫瘍細胞から脂肪細胞系列の(任意の)細胞への変換を誘導するのに特に有用である。
GFR結合化合物は、分子内非共有結合的相互作用を少なくとも1つ形成してもよい。この相互作用は、静電的相互作用、π−相互作用、ファンデルワールス力、疎水性相互作用、及びこれらの任意の組み合わせのうちの1つであってもよい。上記相互作用は、2つ以上のアミノ酸の側鎖間、2つ以上のアミノ酸の主鎖間、又はアミノ酸の側鎖及び主鎖間で形成できる。上記相互作用は、GFR結合化合物の安定性をインビトロ及び/又はインビボで向上させて、生理学的分解を低減又は防止できる。一例示において、GFR結合化合物は、AA20///AA206、AA19///AA207、AA18///AA21、AA17///AA22、AA16///AA23、AA15///AA24、AA15///AA25(式中、///は非共有結合的相互作用を表す。)のうち少なくとも1つ、好ましくは2つ以上の分子内非共有結合的相互作用を形成できる。
本発明は、少なくとも2種の生理活性物質、すなわち、本明細書に記載した少なくとも1種の(非環状又は環状等)GFR結合化合物と生理活性担体との機能的な組み合わせ(又は連合)によって、腫瘍細胞の細胞外非変異原性再コード化又は変換を介して意図した治療作用、すなわち腫瘍性疾患の治療を達成する。
(a)生体高分子:(a1)コラーゲン、(a2)フィブリン等、
(b)合成高分子:(b1)超高分子量ポリエチレン(UHMWPE)、(b2)ポリウレタン(PE)、(b3)ポリウレタン(PU)、(b4)ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、(b5)ポリアセタール(PA)、(b6)ポリメチルメタクリレート(PMMA)、(b7)ポリエチレンテレフタレート(PET)、(b8)シリコーンゴム(SR)、(b9)ポリエーテルエーテルケトン(PEEK)、(b10)ポリ乳酸(PLA)、(b11)ポリスルホン(PS)、(b12)PLLA、(b13)PLGA、(b14)PLDA等、
(c)金属及び金属酸化物:(c1)金及び金合金、(c2)銀及び銀合金、(c3)白金及び白金合金、(c4)タンタル、(c5)Ti6Al4V、(c6)316Lステンレス鋼、(c7)Co−Cr合金、(c8)a型、β型、a+b型Ti合金やTi−Nb合金(Ti29Nb13Ta4.6Zr、Ti35Nb4Sn等)などのチタン合金等、
(d)金属ガラス、
(e)非晶質合金:Zr系合金等、
(f)多孔質金属:Ryan et al.,2006,Biomaterials,27,2651;Lopez−Heredia et al.,2008,Biomaterials,29,2608;Ryan et al.,2008,Biomaterials,29,3625;Li et al.,2007,Biomaterials,28,2810;Hollander et al.,2006,Biomaterials,27,955(それぞれ参照によりその全体が本願に組み込まれる)に記載されたもの等、
(g)ゲル又は固体セラミック:(g1)アルミナ、(g2)ジルコニア、(g3)カーボン、(g4)チタニア、(g5)バイオガラス、(g6)ヒドロキシアパタイト(HA)等、
(h)複合材:(h1)シリカ/SR、(h2)CF/UHMWPE、(h3)CF/PTFE、(h4)HA/PE、(h5)CF/エポキシ、(h6)CF/PEEK、(h7)CF/C、(h8)Al2O3/PTFE等、
(i)ヒドロゲル:(i1)例えば、Van Buul,et al.,Chem.Sci.4,2357−2363(2013)(参照によりその全体が本願に組み込まれる)に記載されたオリゴ(エチレン)グリコールポリイソシアノペプチド等のポリイソシアノペプチドヒドロゲル、(i2)アルギン酸塩、キトサン、キチン、グアーガム、ペクチン、ゲランガム、ヘパリン、カラギーナン、ヒアルロナン、デンプン、寒天、キサンタンガム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の多糖類、(i3)ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール等のポリグリコール、(i4)ポリビニルピロリドン、(i5)ポリ(ビニルアルコール)、(i6)ポリアクリル酸、(i7)グリセロリン酸、(i8)2−アクリルアミド−2−メチルプロパンスルホン酸、(i9)ポリホスファゼン等、
(j)脱灰骨基質等の他の好適な材料、
並びにこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生体不活性生体材料」という用語は、人体内に置かれても周辺組織と最小限にしか相互作用しない任意の材料を意味する。これらの例としては、ステンレス鋼、チタン、アルミナ、部分安定化ジルコニア、及び超高分子量ポリエチレンが挙げられる。一般に、生体不活性インプラントの周辺には線維被膜が形成され得るので、その生物機能性はインプラントによる組織統合に依存する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生理活性生体材料」という用語は、人体内に置かれたら、周辺の骨や場合によっては軟組織とも相互作用する材料を意味する。これは、生体骨に埋め込むことで発生する表面の時間依存的動的修飾によって起こる。生理活性インプラントと周辺体液とのイオン交換反応によって、骨の無機相と化学的且つ結晶学的に等価な生物活性炭酸アパタイト(CHAp)層がインプラント上に形成される。このような材料の例としては、合成ヒドロキシアパタイト[Ca10(PO4)6(OH)2]、ガラスセラミックA−W、及びバイオガラス(登録商標)が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生体吸収性生体材料」という用語は、人体内に置かれたら、溶解し(吸収され)始め、進行する組織(骨等)と緩やかに置き換わる材料を意味する。生体吸収性材料の例としては、リン酸三カルシウム[Ca3(PO4)2]、ポリ乳酸−ポリグリコール酸共重合体、酸化カルシウム、炭酸カルシウム、及び石膏が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「遊離水酸基」又は「有効水酸基」という用語は、−OH、ラジカル(−O・)、又は完全若しくは部分的にイオン化したアニオン(−O−)であってもよく、以下で定義する化合物(A)又は化合物(B)等の求電子剤との反応において求核剤として作用できる水酸基を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「有効水酸基含有表面」又は「遊離水酸基含有表面」という用語は、本明細書で定義される遊離又は有効水酸基を少なくとも1個含む表面を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「セラミック」という用語は、1000℃を超える高融点の無機材料を意味する。最も典型的には、「セラミック」といわれる材料は、原料固体粒子を加熱して焼結するプロセスで得られるものである。「セラミック」といわれる材料は、広義で2つのグループ、すなわち「酸化物セラミック」及び「非酸化物セラミック」に分けられる。「酸化物セラミック」としては、MgO及びBaO等のアルカリ土類金属酸化物、Al2O3及びアルミン酸塩、TiO2及びチタン酸塩、ZrO2及びジルコニウム酸塩、並びにクレイ及びクレイ由来材料等のケイ酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。「セラミック」という用語は結晶性、部分非晶質、及び完全非晶質材料を包含するので、「酸化物セラミック」という用語は、完全非晶質ケイ酸塩ガラスを包含するとも解釈できる。「非酸化物セラミック」としては、炭化ケイ素及び窒化ケイ素等の炭化物、窒化物、ホウ化物、及びケイ化物、並びに金属の炭化物及び窒化物等が挙げられるが、これらに限定されない。具体的な一例示において、骨関連用途において本開示に係る生理活性担体として顆粒化粉末又はスキャフォールド状等の固体セラミックが使用される。具体的な一例示において、骨関連用途において本開示に係る生理活性担体としてゲルセラミックが使用される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「金属酸化物」という用語は、少なくとも1個の酸素原子と少なくとも1個の別の元素を化学式中に有する化学化合物を意味する。金属酸化物は、典型的には酸化状態が−2である酸素のアニオンを含む。これは加水分解又は空気/酸素酸化によって得られる。このような金属酸化物としては、酸化チタン(TiO、Ti2O3、TiO2等)、酸化ケイ素(SiO2)、酸化アルミニウム(Al2O3)、酸化鉄(II、III)(Fe2O3等)、及び酸化亜鉛(ZnO)等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「生体高分子」という用語は、生体によって産生されるポリマーを意味し、ポリペプチド及びタンパク質(コラーゲン及びフィブリン等)、多糖(セルロース、デンプン、キチン、及びキトサン等)、核酸(DNA及びRNA等)、並びにこれらの水素化物等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「ヒドロゲル」という用語は、水性媒体中で膨潤するが、水中では溶解しない高分子材料群を意味する。ヒドロゲルは、高吸収性(水を99%以上含有できる)天然又は合成高分子である。また、ヒドロゲルは、その顕著な含水量から、天然組織と非常に近い柔軟度を有する。例えば、米国特許第6,475,516号明細書には、インプラント等の内在性医療機器の表面に共有結合的に結合するヒドロゲルが開示されており、本明細書で記載したプロセス等によって本開示のGFR結合化合物で機能化できる。具体的な一例示において、生分解性ヒドロゲルは、本開示に係る生理活性担体として使用される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「コラーゲン」という用語は、大半が腱、靱帯、及び皮膚等の線維組織に見られ、角膜、軟骨、骨、血管、消化管、及び椎間円板にも豊富に見られる動物の各種結合組織の主要な構造タンパク質を意味する。コラーゲンは、典型的には三重らせんで構成されており、一般にヒドロキシプロリン含量が高い。アミノ酸配列中の最も一般的なモチーフはグリシン−プロリン−X及びグリシン−X−ヒドロキシプロリンであり、Xはグリシン、プロリン及びヒドロキシプロリン以外の任意のアミノ酸を表す。コラーゲンとしては28種が同定され、文献に記載されており、現在のところいずれも本発明の実施形態を実施するのに好適であると考えられる。最も一般的な5種類は、皮膚、腱、血管結紮糸、器官、骨(骨の有機部分の主成分)に見られるコラーゲンI型;軟骨(軟骨の主成分)に見られるコラーゲンII型;網状組織(細網線維の主成分)に見られるコラーゲンIII型;基底層、基底膜の上皮分泌層に見られるコラーゲンIV型;及び細胞表面、毛髪、及び胎盤に見られるコラーゲンV型である。例えばある実施形態において、本発明の実施形態を実施するのに好適なコラーゲンとしては、特にコラーゲンI型及びIV型が挙げられる。具体的な一例示において、コラーゲンI型、II型、III型、及びXI型等のコラーゲンが、本開示に係る生理活性担体として軟骨関連用途に使用される。具体的な一例示において、コラーゲンI型及びIII型等のコラーゲンが、本開示に係る生理活性担体として筋肉関連用途、皮膚関連用途、及びT/L関連用途に使用される。具体的な一例示において、任意の種類のコラーゲンが、本開示に係る生理活性担体として血管、ニューロン、網膜、腎臓、創傷治癒、毛髪、受胎能及び生殖、肺、及び脂肪関連用途に使用される。
ある実施形態において、本明細書で既に定義した上記GFR結合化合物は、少なくとも1個の生理活性担体親和性基で修飾又は機能化されている。上記少なくとも1個の生理活性担体親和性基によって、上記GFR結合化合物は、本明細書で定義される生理活性担体(特に、本明細書で定義される生体材料)と共有結合的又は非共有結合的に相互作用又は結合できるようになる。
従って、一態様において、本開示は、修飾GFR結合化合物と生理活性担体とを含む医薬的連合体又は組み合わせであって、上記修飾GFR結合化合物は、本開示で定義されるGFR結合化合物と、同じく本開示で定義される生理活性担体親和性基とを含む、医薬的連合体又は組み合わせを提供する。
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)は、PEP1又はPEP12を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(Ia)又はペプチド(Ia)ともいう)。上記生理活性担体親和性基は、PEP(A)又はPEP(B)へ共有結合的又は非共有結合的に付着する。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、式PEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。AA17、PEP1、PEP2、PEP12、及びPEP11は、本明細書で既に定義した通りである。PEP(C)の一端は、AA13を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、AA25を介してPEP2と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2と共有結合的に相互作用する。AA13及びAA21は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA25及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IIa)又はペプチド(IIa)ともいう)。上記生理活性担体親和性基は、PEP(C)又はPEP(D)へ共有結合的又は非共有結合的に付着し、特にAA8を介してPEP3へ、AA32を介してPEP4へ、AA8を介してPEP5へ、AA32を介してPEP6へ、AA1、AA2、AA3、AA4、AA5、又はAA6を介してPEP9へ、あるいはAA33、AA34、AA35、AA36、AA37、又はAA38を介してPEP10へ共有結合的又は非共有結合的に付着する。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IIIa)又はペプチド(IIIa)ともいう)。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表される本明細書で定義されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体である(以下、化合物(IVa)又はペプチド(IVa)ともいう)。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
従って、一態様において、本開示は、修飾環状GFR結合化合物と生理活性担体とを含む医薬的連合体又は組み合わせであって、上記修飾環状GFR結合化合物は、本開示で定義される環状GFR結合化合物と、同じく本開示で定義される生理活性担体親和性基とを含む、医薬的連合体又は組み合わせを提供する。
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)は、PEP1又はPEP12を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(Ia)又はペプチド(Ia)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP(A)−LINKER−PEP(B)−LINKER (Ib)
(式中、第一のLINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP(B)の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEP(A)の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)はPEP1を含む。PEP(B)はPEP2を含む。LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(Ib)又はペプチド(Ib)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、式PEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。AA17、PEP1、PEP2、PEP12、及びPEP11は、本明細書で既に定義した通りである。PEP(C)の一端は、AA13を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、AA25を介してPEP2と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2と共有結合的に相互作用する。AA13及びAA21は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA25及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIa)又はペプチド(IIa)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D)−LINKER (IIb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(C)の一端は、PEP1の一端を介してPEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの一端は、PEP11の一端を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP(D)の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEPC(C)の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜12個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチド、特に5〜11個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIb)又はペプチド(IIb)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIIa)又はペプチド(IIIa)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8−LINKER (IIIb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP12は、本明細書で定義されるPEP1−AA17−PEP11で表される8個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP2は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP5は、本明細書で既に定義した5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP6は、本明細書で既に定義した5〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP7は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP8は、本明細書で既に定義したアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。第一のLINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、PEP8の他端と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、PEP7の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IIIb)又はペプチド(IIIb)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IVa)又はペプチド(IVa)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38−LINKER (IVb)
(式中、LINKERはそれぞれ独立して、分子量(Mw)が約28〜約2,000Da、特に約300〜約1,000Da、より具体的には約300〜約800Daである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は本明細書で定義される通りである。第一のLINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。第一のLINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの一端は、AA38と共有結合的に相互作用する。第二のLINKERの他端は、AA1と共有結合的に相互作用する。AA1は、N末端アミノ酸又はC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体(以下、化合物(IVb)又はペプチド(IVb)ともいう)を含む。上記生理活性担体親和性基は、チオール含有基(特にチオール含有ペプチド)、システイン含有基(特にシステイン含有ペプチド、より具体的にはシステイン)、及び芳香族アミノ酸含有ペプチド又はペプチド模倣体からなる群より選択される。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「(生理)活性素」又は「(生理)活性成分」という用語は、一般に、所望の生物学的効果の提供を担う分子、化合物、又は物質を意味する。上記活性成分がなければ、それを含む製剤又は組成物は所望の生物学的効果を提供しない。例えばある実施形態において、製剤賦形剤は、本明細書で定義される医薬組成物の活性成分とはみなさない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腫瘍性疾患薬」という用語は、被験者において腫瘍性疾患を治療又は予防するのに好適な物質、化合物、医薬的連合体、組み合わせ、組成物、又は製剤を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腫瘍細胞を有する被験者」という用語は、被験者の構成細胞の少なくとも1つが本明細書で定義される腫瘍細胞であることを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「脱離基」という用語は、不均一結合開裂において電子対を有しつつ離れることができる分子断片を意味する。脱離基はアニオン又は中性分子であり、不均一結合開裂によって追加された電子密度を安定化できる。通常のアニオン性脱離基は塩素(Cl)、臭素(Br)、及びヨウ素(I)等のハロゲン原子であり、それぞれ塩化物イオン(Cl−)、臭化物イオン(Br−)、ヨウ化物イオン(I−)として脱離する。他の脱離基としては、トシレート(TsO−)等のスルホン酸エステルが挙げられる。従来の中性分子脱離基としては水及びアンモニアが挙げられる。本発明の実施形態を実施するのに好適な脱離基としては、好ましくはハロゲンからなる基、置換又は非置換のアルコキシ基(−OR)、置換又は非置換のアリールオキシ又はヘテロアリールオキシ基(−OAr)、置換又は非置換のアルキルカルボニルオキシ基(−O2CR)、置換又は非置換のアリールカルボニルオキシ又はヘテロアリールカルボニルオキシ基(−O2CAr)、置換又は非置換のアルキルスルホニルオキシ基(−O3SR)、及び置換又は非置換のアリールスルホニルオキシ又はヘテロアリールスルホニルオキシ基(−O3SAr)が挙げられる。脱離基の置換基としては、ハロゲン、アルキル(好ましくは炭素数1〜5のアルキル)基、及びアルコキシ(好ましくは炭素数1〜5のアルコキシ)基が挙げられる。
本開示において、Y基は特に限定されるものではなく、少なくとも1個の原子を含み、本明細書で定義されるX基及びA基と共有結合的又は非共有結合的に、好ましくは共有結合的に連結又は相互作用して、活性物質Aと本明細書で定義されるX基との間に安定した結合を形成できる任意の部分が、文脈と矛盾しない限り又は不適合でない限り、本開示の実施形態を実施するのに好適であり、本発明の範囲に含まれる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「好適な共有結合形成条件」という用語は、出発材料が接触し、該出発材料間に少なくとも1つの共有結合が形成されることで少なくとも1種の追加材料が得られるような圧力、温度、試薬量、溶媒の種類及び量、又は撹拌等の反応条件を意味する。本発明の実施形態を実施するのに好適な共有結合形成条件としては、好ましくは実質的な大気条件が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り、「空間形成有機化合物」という用語は、本開示の(修飾)GFR結合化合物の直近で立体効果/障害及び/又は電子効果/障害を生じさせることができる有機化学基(好ましくは一官能基)を意味する。好適な空間形成有機化合物としては、長さが20ナノメートル(nm)以下、好ましくは10nm、5nm、1nm、0.5nm、0.1nm、0.05nm、又は0.01nm以下である飽和又は不飽和炭化水素鎖からなる群より独立して選択される1価の有機基が挙げられるが、これらに限定されない。上記炭化水素鎖は、必要に応じて、1個以上、好ましくは適宜1〜16個、1〜12個、又は1〜8個の非炭素原子で分断されていてもよく、上記非炭素原子は、−O−、−S−、−C(=O)、−SO2−、−N(Ri)(C=O)−、及び−N(Ri)−(式中、Riは、水素原子、炭素数1〜6のアルキル基、及びアリール基からなる群より選択される。)からなる群より選択され、上記炭化水素鎖は、非置換であるか、あるいはハロゲン、水酸基、炭素数1〜20のアルキル基、及びアリール基からなる群より選択される少なくとも1つの基で置換されている。特に、空間形成有機化合物としては、炭素原子を1〜80個含む飽和又は不飽和炭化水素鎖、炭素原子を1〜60個含む飽和又は不飽和炭化水素鎖、炭素原子を1〜40個含む飽和又は不飽和炭化水素鎖、炭素原子を1〜20個含む飽和又は不飽和炭化水素鎖、炭素原子を1〜10個含む飽和又は不飽和炭化水素鎖、炭素原子を1、2、3、4、5、又は6個含む飽和炭化水素鎖が挙げられ、いずれも、具体的に且つ独立して好ましい。一例示において、上記飽和炭化水素鎖は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、又はペンチルであってもよい。一例示において、上記不飽和炭化水素鎖は、エチレン、プロペン、1−若しくは2−ブテン、1−、2−若しくは3−ペンテン、アセチレン、プロピン、1−若しくは2−ブチン、又は1−、2−若しくは3−ペンチンであってもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り、「飽和炭化水素鎖」という用語は、単結合によって互いに連結された炭素原子鎖を意味し、炭素原子の他の結合軌道は全て水素原子で満たされている。
本明細書中、別段の指示がない限り、「不飽和炭化水素鎖」という用語は、アルケン、アルキン等でそれぞれ見られるような炭素炭素二重結合又は三重結合を含む炭素鎖を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「大気条件」及び「周囲条件」という用語は、交換可能に使用されており、実験場所で自然に見られる条件を意味する。例えばある実施形態において、化学/生物学実験室に典型的な大気条件は、温度が約15℃〜約35℃、圧力が約1atmである。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「溶液」という用語は、1相のみで構成される均一な混合物であって、安定しており、光線を散乱させず、溶質粒子が肉眼では見えず、濾過しても溶質を分離できない混合物を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「懸濁液」という用語は、充分に沈降できる大きさの固体粒子を含有する不均一な混合物を意味する。典型的には、上記固体粒子は、1マイクロメートルより大きい。一般に、内相(固体)は、特定の賦形剤又は懸濁剤を用いた機械的攪拌によって外相(流体)全体に分散している。
・孔径がナノメートルを超える範囲の場合は走査型電子顕微鏡観察で、孔径がナノメートル範囲の場合は原子力顕微鏡観察で測定した多孔度(又は平均孔径)が1nm〜1000μmであり、及び/又は
・動的機械分析で測定した硬度が少なくとも5kPa、好ましくは少なくとも35kPaであり、及び/又は
・生体高分子(コラーゲン、フィブリン等)、合成高分子(PEEK、PET等)、固体材料(チタン、金属等)、及びセラミック(ヒドロキシアパタイト、ベータ−リン酸三カルシウム、二相性リン酸カルシウム等)からなる群より選択され、及び/又は
・従来の蛍光顕微鏡観察で測定した又はペプチドサイズに基づいて理論的に算出した連合化合物(I)の密度又は濃度が0.05×10−12mol/mm2〜50×10−12mol/mm2であり、及び/又は
・ポリシロキサンの層を含まない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「多孔度」という用語は、物質又は材料の空隙の尺度を意味しており、総体積に対する間隙の体積分率を0〜1又は0%〜100%で表したものである。物質又は材料の多孔度を試験、測定する方法は数多く存在しているが、本開示の目的のため、及び疑義を回避するため、多孔度は、孔径が小さい(100nm以内)場合は原子力顕微鏡観察で、それより孔径が大きい場合は走査型電子顕微鏡観察で得られたナノメートル(nm)単位で表す。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「硬度」という用語は、物質又は材料の剛性、すなわち、負荷された力に対して変形に耐える程度を意味する。物質又は材料の硬度を試験、測定する方法は数多く存在しているが、本開示の目的のため、及び疑義を回避するため、硬度は、動的機械分析(DMA)を用いて得られたパスカル(Pa)単位で表す。特に好ましい硬度は、細胞が再コード化される組織に応じて、1kPa〜100kPaであり、5GPa以下である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「薬学的有効量」及び「治療有効量」という用語は、薬剤(核酸、タンパク質、ペプチド、医薬品、治療剤、診断剤、予防剤等)を感染症、疾患、障害、異常、及び/又は病変を有する又は有しやすい被験者に投与した場合、治療上有効な結果を得るのに充分なその送達量を意味する。従って、「薬学的有効量」は、それが適用される文脈によって異なる。組成物の薬学的有効量は、少なくとも部分的には、標的組織、標的細胞型、投与手段、医薬的連合体若しくは組成物の物理的特徴(大きさ、3D形状等)、及びその他の決定要因に基づいて提供される。例えばある実施形態において、がんを治療する薬剤を投与する場合、薬剤の薬学的有効量は、例えばある実施形態において、薬剤を投与しないで得られた応答と比較した際に、がんに対して本明細書で定義される治療を達成するのに充分な量である。例えばある実施形態において、本明細書で使用される治療有効量は、(修飾)GFR結合化合物、生理活性担体、又はその連合体/組み合わせについて本明細書で開示した重量、モル量、比、又は範囲のいずれかである。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「治療上有効な結果」という用語は、感染症、疾患、障害、異常、及び/又は病変を有する又は有しやすい被験者において、該感染症、疾患、障害、異常、及び/又は病変の治療、その症状の改善、診断、予防、及び/又はその発生の遅延を達成するのに充分な結果を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「治療剤」という用語は、被験者/患者/個体に投与した場合、治療、診断、及び/又は予防効果、及び/又は所望の生物学的及び/又は薬理学的効果を示す薬剤を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「医薬的に許容される」という用語は、正当な医学的判断の範囲内において、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又はその他の問題若しくは合併症を引き起こすことなくヒト及び動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、合理的なベネフィット/リスクの比に見合っている化合物、材料、組成物、及び/又は剤形を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「医薬的に許容される賦形剤」という用語は、本明細書で記載した化合物(すなわち、本明細書で定義されるGFR結合化合物及び生理活性担体、又は追加の活性成分)以外の任意の成分であって、患者に対して本明細書で定義される「医薬的に許容される」の定義を満たすものを意味する。賦形剤としては、例えば、不活性希釈剤、分散及び/又は顆粒化剤、界面活性剤及び/又は乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存料、緩衝剤、滑沢剤、オイル、印刷インキ、甘味料、及び/又は水和水等が挙げられる。賦形剤は、主として具体的な投与形態、溶解性及び安定性に対する賦形剤の効果、及び剤形の性質等の要因に基づいて選択される。一実施形態において、医薬的に許容される賦形剤は、天然賦形剤ではない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、希釈剤としては、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、粉糖、及び/又はこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、緩衝剤としては、クエン酸緩衝溶液、酢酸緩衝溶液、リン酸緩衝溶液、塩化アンモニウム、酢酸カリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、リン酸、リン酸水酸化カルシウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、発熱物質非含有水、等張食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール、及びこれらの任意の組み合わせ等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、顆粒化及び/又は分散剤としては、馬鈴薯デンプン、コーンスターチ、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、シトラスパルプ、寒天、ベントナイト、セルロース及び木材製品、天然スポンジ、カチオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリ(ビニルピロリドン)、カルボキシメチルスターチナトリウム、カルボキシメチルセルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、アルファ化デンプン、微結晶デンプン、非水溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、第四級アンモニウム化合物、及び/又はこれらの任意の組み合わせ等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、界面活性剤及び/又は乳化剤としては、コロイド粘土(ケイ酸アルミニウム及びケイ酸アルミニウムマグネシウム等)、天然乳化剤(アカシア、寒天、アルギン酸ナトリウム、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、コレステロール、ワックス、及びレシチン等)、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール(ステアリル、セチル、及びオレイルアルコール、モノステアリン酸トリアセチン、ジステアリン酸エチレングリコール、及びモノステアリン酸グリセリル等)、カルボマー(カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマー、及びカルボキシビニルポリマー等)、モノラウリン酸ジエチレングリコール、オレイン酸トリエタノールアミン、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドクサートナトリウム、カラギーナン、セルロース誘導体(カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、及びメチルセルロース等)、ソルビタン脂肪酸エステル(モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレンソルビタン、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、及びモノオレイン酸グリセリル等)、ポリオキシエチレンエステル、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンエーテル、ポリ(ビニルピロリドン)、及びこれらの任意の組み合わせ等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、結合剤としては、天然及び合成ゴム(アカシア、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶セルロース、酢酸セルロース、及びポリ(ビニルピロリドン)等)、ゼラチン、デンプン、糖(スクロース、ブドウ糖、グルコース、デキストリン、ラクトース、及びマンニトール等)、アルギン酸塩、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、無機カルシウム塩、水、アルコール、ケイ酸、ワックス、及びこれらの任意の組み合わせ等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、保存料としては、酸化防止剤、キレート剤、抗真菌保存料、抗菌保存料、酸性保存料、及びアルコール保存料等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、酸化防止剤としては、α−トコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、プロピオン酸、メタ重亜硫酸カリウム、没食子酸プロピル、メタ重亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、及び亜硫酸ナトリウム等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、キレート剤としては、エチレンジアミン四酢酸(EDTA)、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、クエン酸一水和物、及び酒石酸等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、抗菌保存料としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、ベンジルアルコール、ブロノポール、塩化セチルピリジニウム、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノキシエタノール、硝酸フェニル水銀、フェニルエチルアルコール、フェノール、及びプロピレングリコール等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、抗真菌保存料としては、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸カリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、及び/又はソルビン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、アルコール保存料としては、フェノール、フェノール系化合物、ビスフェノール、エタノール、ポリエチレングリコール、クロロブタノール、及びヒドロキシ安息香酸エステル等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、酸性保存料としては、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、β−カロテン、酢酸、クエン酸、デヒドロ酢酸、及びソルビン酸等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、シリカ、タルク、麦芽、ベヘン酸グリセリル、水素化植物油、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸マグネシウム、及びこれらの任意の組み合わせ等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、甘味料としては、任意の天然又は合成代替糖等が挙げられるが、これらに限定されない。天然代替糖としては、ブラゼイン、クルクリン、エリスリトール、グリチルリチン、グリセロール、水素化デンプン加水分解物、イヌリン、イソマルト、ラクチトール、モグロシド混合物、マビンリン、マルチトール、マルトオリゴ糖、マンニトール、ミラクリン、モナチン、モネリン、オスラジン、ペンタジン、ソルビトール、ステビア、タガトース、タウマチン、及びキシリトール等が挙げられるが、これらに限定されない。合成代替糖としては、アセスルファムカリウム、アドバンテーム、アリテーム、アスパルテーム、アスパルテーム/アセスルファム塩、サイクラミン酸ナトリウム、ズルチン、グルチン(glucin)、ネオヘスペリジンジヒドロカルコン、ネオテーム、P−4000、サッカリン、及びスクラロース等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「医薬的に許容される担体」、「医学的に許容される担体」、及び「担体」という用語は、本発明の治療方法及び使用に有用な医薬又は治療組成物を好適なインビボ又はエクスビボ部位へと送達するのに好適な医薬的に許容される賦形剤及び/又は送達増量剤を意味する。好ましい医薬的に許容される担体は、本明細書で定義される(修飾)GFR結合化合物及び生理活性担体の有効な組み合わせ又は連合体を含む組成物が標的細胞、部位、又は組織へ到着した際に、その細胞又は組織部位のタンパク質に対して生物学的機能を1つ以上発揮できるような形態に当該組成物を維持できる。医薬的に許容される担体の1種として、動物体内へ組成物又は組み合わせを緩やかに放出できる徐放製剤が挙げられる。一例示において、徐放製剤は、徐放性増量剤中に本明細書で定義される有効な組み合わせ又は連合体を含む。好適な徐放性増量剤としては、微粒子、生体適合性ポリマー、他のポリマーマトリクス、カプセル、マイクロカプセル、浸透圧ポンプ、ボーラス製剤、拡散装置、リポソーム、リポスフィア、及び経皮デリバリーシステム等が挙げられるが、これらに限定されない。これらの好適な徐放性増量剤は、少なくとも1つの標的部分と組み合わせてもよい。一実施形態において、医薬的に許容される担体は天然担体ではない。
一例示において、本明細書に開示した医薬的連合体又は組み合わせは、インビボ、エクスビボ、又はインビトロで細胞を特定の組織空間に標的化する又は特定の部分と相互作用する機能を有する結合パートナーを少なくとも1種含む。好適な結合パートナーとしては、抗体及びその機能化断片、スキャフォールドタンパク質、並びにペプチド等が挙げられる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「医薬的に許容される塩」という用語は、開示した物質及び化合物の誘導体であって、存在する酸又は塩基部分を(例えば遊離塩基基を好適な有機酸と反応させて)塩型に変換することによって親物質又は化合物が修飾されているものを意味する。塩のイオン化度は、完全なイオン化状態から略非イオン化状態までの間で変化してもよい。医薬的に許容される塩の例としては、アミン等の塩基性残基の無機又は有機酸塩、及びカルボン酸等の酸性残基のアルカリ又は有機塩等が挙げられるが、これらに限定されない。代表的な酸付加塩としては、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重硫酸、ホウ酸、酪酸、カンファー酸、カンファースルホン酸、クエン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グリセロリン酸、ヘミ硫酸、ヘプトン酸、ヘキサン酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、2−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ラクトビオン酸、乳酸、ラウリン酸、ラウリル硫酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、2−ナフタレンスルホン酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、ペクチン酸、過硫酸、3−フェニルプロピオン酸、リン酸、ピクリン酸、ピバル酸、プロピオン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、チオシアン酸、トルエンスルホン酸、ウンデカン酸、及び吉草酸の塩等が挙げられる。代表的なアルカリ又はアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、及びマグネシウム等、並びに無毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、及びアミンカチオン(アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含むが、これらに限定されない)が挙げられる。本開示の医薬的に許容される塩としては、例えばある実施形態においては無毒性無機又は有機酸から形成された親化合物の従来の無毒性塩が挙げられる。本開示の医薬的に許容される塩は、従来の化学的方法によって塩基性又は酸性部分を含む親化合物から合成できる。通常、このような塩は、遊離酸又は塩基型である上記化合物を化学量論量の適当な塩基又は酸の水溶液、又は有機溶媒溶液、又は両者の混合液と反応させることで調製できる。通常、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリル等の非水性媒体が好ましい。通常、好適な塩は、「Remington’s Pharmaceutical Sciences」,17th ed.,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,1985,p.1418及び「Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use」,P.H.Stahl and C.G.Wermuth(eds.),Wiley−VCH,2008(それぞれ参照によりその全体が本願に組み込まれる)に列挙されている。一実施形態において、医薬的に許容される塩は、天然塩ではない。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「医薬的に許容される溶媒和物」という用語は、好適な溶媒の分子が結晶格子に組み込まれる化合物、物質、連合体、又は組み合わせを意味する。好適な溶媒は、投与量では生理学的に許容される。例えばある実施形態において、溶媒和物は、結晶化、再結晶、又は析出によって、有機溶媒、水、又はこれらの混合物を含む溶液から調製できる。好適な溶媒の例としては、エタノール、水(例えばある実施形態において、一、二、及び三水和物)、N−メチルピロリジノン(NMP)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、ジメチルホルムアミド(DMF)、[Nu],[Nu]’−ジメチルアセタミド(DMAC)、1,3−ジメチル−2−イミダゾリジノン(DMEU)、1,3−ジメチル−3,4,5,6−テトラヒドロ−2−(1H)−ピリミジノン(DMPU)、アセトニトリル(ACN)、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、2−ピロリドン、及び安息香酸ベンジル等が挙げられる。溶媒が水である場合、溶媒和物は、「水和物」といわれる。一実施形態において、医薬的に許容される溶媒和物は天然溶媒和物ではない。
一例示において、本発明はまた、天然に通常見られる原子量又は質量数とは異なる原子量又は質量数を持つ原子で1個以上の原子が置換されていることを除けば、本明細書に記載した化合物、物質、組み合わせ、又は連合体と同一である全ての医薬的に許容される同位体標識誘導体を含む。本明細書で定義されるGFR結合化合物に導入できる同位体の例としては、水素、炭素、塩素、フッ素、ヨウ素、窒素、酸素、及び硫黄の同位体(それぞれ2H、3H、11C、13C、14C、36Cl、18F、123I、13N、15N、17O、18O、及び35S等)が挙げられる。なお、上記同位体及び/又は他の原子の同位体を含む本明細書に記載された化合物、物質、組み合わせ、連合体、プロドラッグ、及びその医薬的に許容される塩も本発明の範囲に包含される。例えばある実施形態においては放射性同位体(3H及び14C等)を導入したもの等の特定の同位体標識化合物、物質、組み合わせ、連合体、プロドラッグ、及びその塩は、薬剤及び/又は基材組織分布の研究に有用である。トリチウムすなわち3H及び炭素−14すなわち14Cは、調製及び検出が容易なので特に好ましい。更に、重水素すなわち2H等のより重い同位体との置換は、代謝安定性がより高くなることによる特定の治療上の利点、例えばある実施形態においてはインビボ半減期の増大又は投与要件の減少などが得られるため、いくつかの条件下では好ましい場合がある。同位体標識化合物、物質、組み合わせ、連合体、プロドラッグ、及びその塩は、通常、容易に入手できる非同位体標識試薬を同位体標識試薬で置換してスキーム及び/又は実施例で開示した手順を実施することで調製できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「プロドラッグ」という用語は、インビボで変換されることで、本明細書で定義される化合物、物質、組み合わせ、若しくは連合体、又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物が得られるような化合物、物質、組み合わせ、又は連合体を意味する。変換は、血液中での加水分解等、各種の機構によって起こり得る。本明細書で定義される化合物、物質、組み合わせ、又は連合体のプロドラッグは、アミノ、ヒドロキシ、又はカルボキシ基等の化合物中の1個以上の官能基を用いて従来の方法で形成できる。例えばある実施形態において、本明細書で定義される化合物がカルボン酸官能基を有している場合、プロドラッグは、(1)酸基の水素を炭素数1〜6のアルキル又は炭素数6〜10のアリール等の基で置換して形成されたエステル、(2)酸基の水素を−(CR2)COOR’(式中、CR2はスペーサである。Rは、H又はメチル等の基であってもよい。R’は、炭素数1〜6のアルキル又は炭素数6〜10のアリール等の基であってもよい。)等の基で置換して形成された活性化エステル、及び/又は(3)酸の水素をCHROCOOR’(式中、Rは、H又はメチル等の基であってもよい。R’は、炭素数1〜6のアルキル又は炭素数6〜10のアリール等の基であってもよい。)等の基で置換して形成された炭酸エステルを含んでいてもよい。同様に、本明細書で定義される化合物がアルコール官能基を有している場合、プロドラッグは、アルコールの水素を(C1−C6)アルカノイルオキシメチル又は(C1−C6)アルカノイルオキシアリール等の基で置換すること、又は、例えばある実施形態においてはアミノ酸等で縮合してエステルを形成することで形成できる。本明細書で定義される化合物が1級又は2級アミノ基を有する場合、プロドラッグは、例えばある実施形態において、アミノ基の水素原子の一方又は両方を炭素数1〜10のアルカノイル又は炭素数6〜10のアロイルと置換して形成されたアミドを含んでいてもよい。アミンの他のプロドラッグも当業者に周知である。あるいは、本明細書で定義される特定の化合物はそれ自体が、本明細書で定義される他の化合物のプロドラッグとして作用してもよい。プロドラッグ及びその使用に関する考察は、例えばある実施形態において、「Prodrugs as Novel Delivery Systems」,T.Higuchi and W.Stella,Vol.14 of the ACS Symposium Series及び「Bioreversible Carriers in Drug Design」,Pergamon Press,1987(ed.E B Roche,American Pharmaceutical Association)等に見られる。他の種類のプロドラッグの例としては、上述の引用文献(参照により本願に組み込まれる)に見られる。
送達される本開示に係る化合物、物質、及び医薬的連合体若しくは組み合わせ、及び/又はその医薬的、皮膚科学的、予防的、診断的、若しくは造影用組成物若しくは製剤は、疾患、障害、及び/又は異常の予防、治療、診断、又は造影、及び/又はその少なくとも1つの症状の治療又は軽減に効果的な任意の投与経路で投与できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「エクスビボ投与」という用語は、診断、分析、及び/又は学術目的等で被験者/患者から取り出した細胞(腫瘍細胞等)の集団に本明細書で定義される医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物を投与することなど、被験者/患者の外部で制御工程を実施することを意味する。
一例示において、医薬的、予防的、診断的、又は造影用連合体、組み合わせ、又は組成物は、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、直腸内、膣内、くも膜下腔内、皮下、脳室内、経皮、皮内、腹腔内、局所(例えば軟膏、クリーム、粉末、ローション、ゲル、及び/又は滴薬による)、頬側、経腸、粘膜、経鼻、硝子体、腫瘍内、舌下、口腔スプレー、経鼻スプレー、及び/又はエアロゾルとして気管内投与、気管支投与、及び/又は吸入、及び/又は門脈カテーテル等の各種経路を1つ以上用いて投与される。一例示において、医薬的、予防的、診断的、又は造影用連合体、組み合わせ、又は組成物は、全身性静脈注射によって投与される。一例示において、医薬的、予防的、診断的、又は造影用連合体、組み合わせ、又は組成物は、血液−脳関門、血管関門、又はその他の上皮関門を通過できる方法で投与できる。最も具体的な一例示において、医薬的、予防的、診断的、又は造影用連合体、組み合わせ、又は組成物は、腫瘍内投与によって局所投与されてもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「デリバリー」又は「送達」という用語は、化合物、物質、連合体、組み合わせ、組成物、実体、部分、カーゴ、又はペイロードを送達する行為又は方法を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「送達剤」という用語は、本明細書で定義される医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物の標的細胞へのインビボ送達を少なくとも部分的に促進する任意の物質を意味する。
本発明の使用及び方法のための医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物は、例えばある実施形態において、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、徐放製剤、溶液、又は懸濁物等の経口投与に好適な形態や、無菌溶液、懸濁液、又は乳液等の非経口注射に好適な形態を含む。本明細書で定義される医薬的連合体又は組み合わせの送達に好適な医薬組成物及びその調製方法は、当業者には明らかである。このような組成物及びその調製方法は、例えばある実施形態において、「Remington’s Pharmaceutical Sciences」,19th Edition(Mack Publishing Company,1995)(参照によりその全体が本願に組み込まれる)に見られる。経口投与は嚥下を伴うものであってもよく、この場合、化合物又は連合体は消化管に進入する。あるいは、化合物が口から直接血流へ進入する頬側又は舌下投与を採用してもよい。経口投与に好適な製剤としては、微粒子、液体又は粉末を含有する錠剤及びカプセル等の固体製剤;のど飴(液体充填したものを含む)及び咀嚼錠;多成分微粒子及びナノ微粒子;ゲル、固溶体、リポソーム、フィルム(粘膜付着性のものを含む)、オビュール剤、スプレー、並びに液体製剤が挙げられる。液体製剤としては、懸濁液、溶液、シロップ、及びエリキシル剤が挙げられる。これらの製剤は軟又は硬カプセルの充填剤として使用してもよく、典型的には、担体、例えばある実施形態においては水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、又は好適なオイルと、1種以上の乳化剤及び/又は懸濁剤とを含む。また、液体製剤は、例えばある実施形態においては分包の固体を再構成することで調製してもよい。また、本明細書で定義される医薬的連合体は、当該分野で記載されたもの等の速溶性速崩壊性剤形で使用してもよい。
一例示において、本発明の使用及び方法のための医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物は、非経口注射で投与できる。非経口投与形態の例としては、例えばある実施形態においては水性プロピレングリコール又はブドウ糖等の無菌水性媒体に本明細書で定義される医薬的連合体を添加した無菌溶液、懸濁液、又は乳液が挙げられる。別の実施形態において、非経口投与形態は溶液である。このような非経口剤形は、所望により好適に緩衝化できる。好ましい無菌溶液としては、塩化ナトリウムの0.9%UPS溶液が挙げられる。例えばある実施形態において、細菌保持フィルターを用いて濾過すること、及び/又は使用前に無菌水又は他の無菌注射媒体に溶解又は分散できる無菌固体組成物の形態に無菌化剤を導入することで注射製剤を無菌化できる。
直腸内又は膣内投与用組成物は、典型的には、周囲温度では固体であるが体温では液体となるため直腸又は膣腔内で溶けて活性成分を放出するカカオバター、ポリエチレングリコール、又は坐薬ワックス等の好適な非刺激性賦形剤と組成物とを混合して調製できる坐薬である。
組成物の局所及び/又は経皮投与用剤形としては、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入薬、及び/又はパッチが挙げられる。通常、活性成分は、医薬的に許容される賦形剤及び/又は任意の必要な保存料及び/又は緩衝液と無菌条件下で必要に応じて混合される。
頬側口腔を介した肺投与用剤形は、活性成分(本明細書で定義される医薬的連合体等)を含む粒子径が約0.5nm〜約7nmの範囲の乾燥粒子を含んでいてもよい。このような組成物は、噴霧剤が流れ込んで粉末を分散させることができる乾燥粉末貯蔵部を有する装置、及び/又は、密閉した容器内の低沸点噴霧剤中で溶解及び/又は懸濁させた活性成分を含む装置等の自己噴射溶媒/粉末分注容器を用いて投与するための乾燥粉末であることが便利である。肺送達用に処方した医薬組成物は、活性成分を溶液及び/又は懸濁液の液滴として提供してもよい。このような製剤は、活性成分を含有する無菌であってもよい水性及び/又は希釈アルコール溶液及び/又は懸濁液として調製、パッケージング、及び/又は販売してもよく、任意の吸入及び/又は噴霧装置を用いて簡便に投与できる。このような製剤はまた、1種以上の追加成分を含んでいてもよく、該追加成分としては、サッカリンナトリウム等のフレーバー剤、揮発オイル、緩衝剤、界面活性剤、及び/又はヒドロキシ安息香酸メチル等の保存料等が挙げられるが、これらに限定されない。
本明細書に肺送達に有用なものとして記載した製剤はまた、医薬組成物の鼻腔内送達にも有用である。経鼻投与に好適な製剤は、例えばある実施形態において、活性成分(本明細書で定義される医薬的連合体等)を少なくとも約0.1%(w/w)、最大で100%(w/w)含んでいてもよく、本明細書に記載した追加成分を1種以上含んでいてもよい。医薬組成物は、頬側投与に好適な製剤として調製、パッケージング、及び/又は販売してもよい。このような製剤は、例えばある実施形態において、従来の方法を用いて作製された錠剤及び/又はのど飴であってもよく、例えばある実施形態において、活性成分を0.1〜20%(w/w)含み、残りは経口溶解性及び/又は分解性組成物と、必要に応じて本明細書に記載した1種以上の追加成分とを含んでいてもよい。あるいは、頬側投与に好適な製剤は、活性成分を含む粉末、及び/又はエアロゾル化及び/又は噴霧溶液及び/又は懸濁液を含んでいてもよい。このような粉末、エアロゾル化、及び/又はエアロゾル化製剤は、分散させた場合、平均粒径及び/又は液滴径が約0.1nm〜約200nmの範囲であってもよく、本明細書に記載した追加成分を1種以上更に含んでいてもよい。
例えばある実施形態において、点眼投与用剤形としては、点眼薬が挙げられ、例えばある実施形態においては、水性又は油性液体賦形剤に活性成分(本明細書で定義される医薬的連合体等)を添加した0.1/1.0%(w/w)溶液及び/又は懸濁液が挙げられる。このような点眼薬は、緩衝剤、塩、及び/又は本明細書に記載した1種以上の追加成分を更に含んでいてもよい。他の有用な点眼投与製剤としては、微結晶状及び/又はリポソーム製剤に活性成分を含むものが挙げられる。点耳薬及び/又は点眼薬は、本開示の範囲に含まれるものと考慮される。
本明細書で定義される医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物を送達するのに好ましい投与方法の一つは、局所投与、特に直接注射である。直接注射技術は、特に体表面又はその近傍にある手術によって到達できる細胞又は組織への組成物の投与に特に有用である。標的細胞領域内への組成物の局所投与とは、標的細胞又は組織から数センチメートル、好ましくは数ミリメートルの場所に組成物を注射することを意味する。
本明細書で定義される医薬的連合体若しくは組み合わせ及び/又は医薬組成物の投与計画は、所望の応答が最適に得られるように調整できる。例えばある実施形態において、1回のボーラス投与であってもよく、経時的な複数回の分割投与であってもよく、あるいは用量を治療状況の緊急性に応じて低減又は増大させてもよい。適当な投与計画、各投与量、及び/又は投与間隔は、使用する医薬的連合体、医薬組成物の種類、治療を必要とする被験者の特性、及び治療する異常の重症度によって異なる。従って、本明細書の開示に基づき、用量及び投与計画が当該治療分野で周知の方法に従って調整されることを熟練した技術者は理解するだろう。すなわち、最大許容用量を容易に確立でき、検出可能な治療上の利点を患者に提供できる有効量も決定でき、検出可能な治療上の利点を患者に提供するための各薬剤の投与の時間的要件も決定できる。従って、本明細書では特定の用量及び投与計画を例示したが、これらの例示は、本発明の実施において患者に提供できる用量及び投与計画を何ら限定するものではない。通常、本開示に係る医薬組成物は、1日あたり被験者体重に対して約0.0001mg/kg〜約100mg/kg、約0.01mg/kg〜約50mg/kg、約0.1mg/kg〜約40mg/kg、約0.5mg/kg〜約30mg/kg、約0.01mg/kg〜約10mg/kg、約0.1mg/kg〜約10mg/kg、又は約1mg/kg〜約25mg/kgを1日1回以上送達して、所望の治療的、診断的、予防的、又は造影的効果を充分に得られる投与量レベルで投与できる。所望の投与量は、1日3回、1日2回、1日1回、1日おき、3日に1回、毎週、2週間に1回、3週間に1回、又は4週間に1回送達してもよい。ある実施形態において、所望の投与量は、複数回投与(例えば2回、3回、4回、5回、6回、7回、8回、9回、10回、11回、12回、13回、14回、又はそれ以上の回数の投与)によって送達してもよい。なお、各被験者について、具体的な投与計画は、個々の必要性、及び組成物の投与を管理又は監督する専門家の判断に応じて経時的に調整されるべきであり、本明細書に記載の投与量範囲は単なる例示に過ぎず、本発明の範囲又は実施を限定するものではない。例えばある実施形態において、用量は、毒性効果及び/又は臨床検査値等の臨床効果などといった薬物動態又は薬力学的パラメータに基づいて調整できる。従って、本発明は、熟練技術者によって決定される患者内用量漸増を包含する。化学治療剤の投与における適当な投与量及び計画の決定は、関連技術において周知であり、本明細書で開示した教示を提供された熟練技術者であれば達成できることが理解される。
本明細書で定義される医薬的連合体若しくは組み合わせ及び/又は医薬組成物の投与計画を調整して、有効量パラメータを得ることができる。有効量パラメータは、具体的な疾患又は異常に対して当該分野で標準的な方法を用いて決定できる。特に、本明細書で定義される治療組成物の用量パラメータの有効性は、がんを治療する場合、奏功率を評価することで決定できる。この奏功率は、患者群のうち部分又は完全寛解の応答を示す治療された患者の割合を意味する。寛解は、例えばある実施形態において、腫瘍サイズを測定すること、又は組織試料中のがん細胞の有無を顕微鏡検査することで決定できる。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「単位用量」という用語は、活性成分を所定量含む医薬組成物の個別量を意味する。活性成分の量は、通常、被験者に投与されることになる活性成分の投与量に等しいか、あるいは該投与量の簡便な分割量、例えばある実施形態においては該投与量の半分又は1/3等である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「単回単位用量」という用語は、1用量/1回/単一経路/1接点、すなわち単一の投与事象で投与される治療連合体又は組成物の用量を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「分割用量」という用語は、単回単位用量又は1日総量を2つ以上の用量に分割することを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「1日総量」という用語は、24時間で与えられる又は処方される量を意味する。単回単位用量として投与してもよい。
本明細書で定義される化合物、連合体、組成物、又は製剤は、1種以上の他の治療剤、予防剤、診断剤、又は造影剤と組み合わせて使用してもよい。本明細書中、「と組み合わせて」という用語は、薬剤を同時に投与しなければならないこと、及び/又は一緒に送達するように製剤化しなければならないことを意味するものではないが、これらの送達方法も本開示の範囲には含まれる。化合物、連合体、組成物、又は製剤は、1種以上の他の所望の治療法又は医療的手順と同時に、それより前に、又はその後に投与できる。いくつかの実施形態においては、それぞれの約90、60、30、15、10、5、又は1分以内に投与される。いくつかの実施形態において、薬剤は、組み合わせ効果(相乗効果等)が得られるような充分に近い間隔で投与される。一般に、各薬剤は、その薬剤に対して決定された用量及び/又はタイムスケジュールで投与される。一例示において、本開示は、医薬的、予防的、診断的、又は造影用組成物を、その生物学的利用能を向上させ、その代謝を低減及び/又は変化させ、その排泄を阻害し、及び/又はその体内での分布を変化させる薬剤と組み合わせて送達することを包含する。なお、組み合わせて使用される治療的、予防的、診断的、又は造影的に活性な薬剤は、単一の組成物としてまとめて投与してもよく、あるいは異なる組成物として別々に投与してもよい。一般に、組み合わせて使用される薬剤は、個別に使用される際の量を超えない量で使用されると考えられる。一例示において、組み合わせて使用する量は、個別に利用される量より少ない。組み合わせ計画において採用する療法の具体的な組み合わせは、所望の治療法及び/又は手順の適合性と、達成したい治療効果とを考慮して決定する。なお、採用した療法は、同じ障害に対して所望の効果を達成してもよく(例えばある実施形態において、本開示に係るがんの治療に有用な組成物を化学療法剤と同時に投与してもよい)、あるいは異なる効果(副作用の制御等)を達成してもよい。
予防又は治療される腫瘍性疾患が皮膚細胞系列(主に線維芽細胞系列)に属する腫瘍細胞に関係する場合、本明細書で定義される医薬組成物は、いずれも本明細書で定義されるGFR結合化合物と生理活性担体との医薬的連合体又は組み合わせと、少なくとも1種の皮膚科学的に許容される賦形剤とを含む皮膚科学的組成物であってもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「皮膚科学的に許容される」という用語は、使用する化合物又は医薬的連合体が、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応等を起こすことなく、ヒトの皮膚と接触して使用されるように適合されていることを意味する。
本発明の皮膚科学的実施形態を実施するのに好適な製剤としては、通常は広口瓶又はチューブに入っている水性又は油性溶液、水性クリーム又はゲル、及び油性ゲル、具体的にはシャワージェル、シャンプー、乳汁、乳液、マイクロエマルション、及びナノエマルション(具体的には油中水若しくは水中油、又は各種シリコーン系);ローション、具体的にはスプレーのガラス若しくはプラスチック瓶、又はエアロゾル瓶に入ったもの、ブリスターパック液体石鹸、皮膚科学的棒状石鹸、ポマード、ムース、無水物、好ましくは液体、クリーム、又は固体のもの(例えばスティック状、特にリップスティック状)、パップ剤、及びパッチが挙げられる。
本発明の実施形態を実施するために好適な皮膚科学的に許容される賦形剤としては、保存料、皮膚軟化剤、乳化剤、界面活性剤、保湿剤、増粘剤、調整剤、テカリ防止剤、安定化剤、酸化防止剤、質感調整剤、光沢剤、膜形成剤、可溶化剤、顔料、着色料、香料、及び日光フィルター等が挙げられるが、これらに限定されない。これらの賦形剤は、アミノ酸及びその誘導体、ポリグリセロール、エステル、ポリマー、及びセルロース誘導体、ラノリン誘導体、リン脂質、ラクトフェリン、ラクトペルオキシダーゼ、スクロース系安定化剤、ビタミンE及びその誘導体、天然及び合成ワックス、植物油、トリグリセリド、不ケン化物、フィトステロール、植物エステル、シリコーン及びその誘導体、タンパク質加水分解物、ホホバオイル及びその誘導体、脂/水溶性エステル、ベタイン、アミノオキシド、ショ糖エステル植物抽出物、二酸化チタン、グリシン、並びにパラベンからなる群より選択されることが好ましく、ブチレングリコール、グリコール−15ステアリルエーテル、セテアリルアルコール、フェノキシエタノール、メチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、ブチレングリコール、天然トコフェロール、グリセリン、ジヒドロキシセチルリン酸ナトリウム、イソプロピルヒドロキシセチルエーテル、ステアリン酸グリコール、トリイソノナノイン、ヤシ脂肪酸オクチル、ポリアクリルアミド、イソパラフィン、ラウレス−7、カルボマー、プロピレングリコール、グリセロール、ビサボロール、ジメチコン、水酸化ナトリウム、ジポリヒドロキシステアリン酸PEG−30、カプリン酸/カプリル酸トリグリセリド、オクタン酸セテアリル、アジピン酸ジブチル、グレープシードオイル、ホホバオイル、硫酸マグネシウム、EDTA、シクロメチコン、キサンタンガム、クエン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、ミネラルワックス及びオイル、イソステアリン酸イソステアリル、ジペラルゴン酸プロピレングリコール、イソステアリン酸プロピレングリコール、PEG8、蜜蝋、水素化パーム核油のグリセリド、ラノリン油、ごま油、乳酸セチル、ラノリンアルコール、二酸化チタン、ラクトース、ショ糖、低密度ポリエチレン、並びに等張塩溶液からなる群より選択されることがより好ましい。
・創傷治癒特性:エチルパンテノール等のパンテノール及びその誘導体、アロエベラ、パントテン酸及びその誘導体、アラントイン、ビサボロール、及びグリチルリチン酸二カリウム等;
・抗炎症特性:ステロイド系及び非ステロイド系抗炎症薬、特にサイトカイン及びケモカイン、シクロオキシゲナーゼ、一酸化窒素(NO)、及び一酸化窒素合成酵素(NOS)の産生阻害剤等。抗炎症物質の例としては、血小板活性化因子(PAF)拮抗特性で知られるイチョウ抽出物、トリラクトンテルペン、例えばギンコライド(特にギンコライドB)及びビロバライド等が挙げられる。
眼腫瘍性疾患、障害、又は異常を治療するための本明細書で定義される医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物の好ましい剤形としては、例えばある実施形態において、点眼薬及び眼軟膏が挙げられる。これらは従来の技術で調製できる。例えば、点眼薬は、塩化ナトリウム等の等張剤、リン酸ナトリウム等の緩衝剤、及び塩化ベンザルコニウム等の保存料を用いて調製できる。好適なpHは、眼科学的に許容される範囲内である。好ましいpHは4〜8である。
一態様において、本明細書で定義される医薬的連合体、組み合わせ、又は組成物は、腫瘍又はがん等の腫瘍性疾患を治療又は予防するのに好適な外科的方法で使用できる。
本発明は、腫瘍細胞(がん細胞等)の細胞外非変異原性変換又は再コード化によって、該腫瘍細胞を非腫瘍細胞(非がん細胞等)に変換する使用及び方法、又はそのような変換又は再コード化を誘導する使用及び方法を提供する。すなわち、本開示は、腫瘍細胞をより機能的な健常非腫瘍細胞へと自己治癒又は自己修復させる方法を提供する。
本明細書中、「細胞変換収率」とは、非腫瘍細胞へ形質転換した腫瘍細胞の割合を意味する。10%を超える場合に顕著であるとみなす。細胞変換収率を測定する方法は数多く存在しているが、本開示の目的のため、且つ疑義を回避するため、本明細書中の細胞変換収率は、Baxter Scientific社の血球計算盤等の精密細胞カウント用血球計算盤を用いて以下の標準的な手順により測定する。
(a)チャンバ及びカバーガラスをアルコールで洗浄する。カバーガラスを乾燥させ、所定の位置に固定する。
(b)細胞を回収する。細胞10μLを血球計算盤に添加する。
(c)対物レンズ10倍の倒立顕微鏡にチャンバを設置する。位相差を利用して細胞を識別する。
(d)中央にある大型の正方形(1mm2)格子内の細胞数をカウントする。下記図中、正方形格子を円で囲んだ。104を掛けて、1mLあたりの細胞数を概算する。
(e)複製試料を調製し、カウント数を平均化する。
本明細書中、「均一」とは、本明細書で定義される方法により得られた非腫瘍細胞集団に関して使用した場合、得られた集団内における実質的に全ての非腫瘍細胞がG0期であることを意味する。細胞集団の均一度を試験及び測定する方法としては数多く存在しているが、本開示の目的のため、且つ疑義を回避するため、本明細書中における細胞均一度は、細胞蛍光免疫染色を用いてRbタンパク質のリン酸化を検出することで測定する。リン酸化が起こっていない場合、実質的に全ての細胞がG0期であることを意味する。
分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ又はMAPキナーゼ(又はMAPK)には、増殖、遺伝子発現、分化、有糸分裂、細胞生存、及びアポトーシス等の細胞制御機能を有する関連セリン/スレオニン真核生物タンパク質キナーゼの大きなグループが含まれる。いずれも、チロシン及びスレオニンアミノ酸でリン酸化された場合に活性化することが報告されている。MAPキナーゼは、塩基型では触媒的に不活性である。活性化するためには、その活性化ループにおいて(潜在的には複数の)リン酸化事象が起こる必要がある。MAPキナーゼは、典型的には多段階経路を形成し、実際のMAPキナーゼを超えるいくつかのレベルで入力シグナルを受け取る。これらの経路によれば、細胞膜から核又は他の多くの細胞内標的へと刺激を効果的に伝達できる。
・FAK遺伝子及びタンパク質、並びに/又はMAPキナーゼの発現を下方制御(特に、実質的に低減)すること;及び/又は
・GTPアーゼRas、Rho(Rho、Rac、Cdc42)の発現又は活性を低減(特に、実質的に低減)すること;及び/又は
・Ras/MAPキナーゼ、FAK/Srcキナーゼ、及び/又はPIP2シグナル伝達経路を下方制御(特に、低減、顕著に低減、又は抑制)すること;及び/又は
・少なくとも1種のサイクリンDと、CDK4及びCDK6の少なくとも一方とを含む少なくとも1種、特に複数のタンパク質複合体の形成を実質的に阻害すること;及び/又は
・少なくとも1種、特に複数のサイクリンDタンパク質の遺伝子発現又は形成を実質的に阻害、下方制御、又は減衰させること;及び/又は
・パキシリンの発現を下方制御し、且つ/又は(好ましくは且つ)ビンキュリンの発現を上方制御すること;及び/又は
・ADIPOQ(ACRP30)、FABP4、PPARG、ACAN(AGC1)、COL10A1、COMP、Sox9、IBSP(シアロタンパク質II)、COL4、CDH5、KDR(VEGFR3)、PECAM1、DLL4、EFNB2、NRP1、LYVE1、PROX1、NR2F2、NRP2、KRT1、KRT10、KRT14、PMEL(SILV)、TYR、TYRP1、MMP−9、α−SMA、ビメンチン、BGLAP、COL2A1、IBSP、RANK−L、OCN、DMP−1、スクレロスチン、MEPE、CALCR、CTSK、ITGB4、KRT19、ALB、G6PC、TAT、CD79A、CD3E、PTCRA、CCR5、CXCR4、EMR1、ITGAM、GALC、GFAP、MAP2、NEFH、TUBB3、CHAT、TH、GAD1、SLC32A1、SLC17A6、SLC17A7、ISL1、MBP、POU4F2、RLBP1、PDE6B、RCVRN、NPHS2、AQP1、CYP27B1、MIOX、AQP2、UMOD、SFTPB、SFTPC、SFTPD、MYH6、MYH7、NPPA、CAV3、MYH1、MYOD1、GATA4、MLC1、MYH11、SMTN、TAGLN、GCG、MAFB、POU3F4、INS、MAFA、SLC2A2、SST、GHRL(グレリン、オベスタチン)、PPY、及び/又はCPA1等の分化遺伝子及びタンパク質のうち少なくとも1種の発現を上方制御(特に、実質的に増加)すること;及び/又は
・タンパク質p53のリン酸化を増大させること;及び/又は
・タンパク質pRbのリン酸化を下方制御(特に、実質的に低下又は抑制)すること;及び/又は
・Src遺伝子及びタンパク質の発現を下方制御(特に、実質的に低減又は抑制)すること;及び/又は
・上記腫瘍細胞の死滅を誘導しないこと;及び/又は
・上記腫瘍細胞の細胞分裂又は細胞増殖を減衰又は停止させること。
・上記腫瘍細胞は非終末分化細胞であり、上記方法は、上記非終末分化細胞を分化させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、腫瘍細胞を変換及び/又は再コード化することで、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、腫瘍細胞の分化能を回復させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、転移性又は非転移性がん細胞等の循環性又は非循環性腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換及び/又は再コード化する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、腫瘍細胞から骨、軟骨細胞、血管、線維芽細胞、腎臓、網膜、神経細胞、靱帯、腱、生殖器系、肺、血液、脂肪細胞系列の生理学的に機能的な及び/又は健常な細胞を提供、及び/又は産生、及び/又はその形成を誘導する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、腫瘍細胞分化を誘導、及び/又は促進、及び/又は増強する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、被験者を腫瘍性疾患から非変異原性保護する、すなわち、治療した腫瘍細胞のゲノムを修飾する又は変化させることなく保護する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、腫瘍性疾患、障害、異常、病変、又はその任意の症状を細胞外治療する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、インビトロ又はインビボでFAK遺伝子及びタンパク質、並びに/又はMAPキナーゼの発現を下方制御(特に、実質的に低減)し、且つ/又はGTPアーゼRas、Rho(Rho、Rac、Cdc42)の発現又は活性を低減(特に、実質的に低減)する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、上記腫瘍細胞の細胞接着チェックポイントを回復させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、少なくとも1種、特に複数のサイクリンDタンパク質の遺伝子発現又は形成を実質的に阻害、下方制御、又は減衰させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、少なくとも1種のサイクリンDと、CDK4及びCDK6の少なくとも一方とを含む少なくとも1種、特に複数のタンパク質複合体の形成を実質的に阻害する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、上記腫瘍細胞の死滅を誘導しない工程を有し;及び/又は
・上記方法は、上記腫瘍細胞の細胞分裂及び/又は細胞増殖を減衰又は停止させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、上記腫瘍細胞の抗分裂促進因子活性、及び/又は腫瘍抑制経路、及び/又は抗発がん活性を活性化及び/又は促進する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、インビトロ又はインビボでパキシリンの遺伝子発現を下方制御し、且つ/又は(好ましくは且つ)ビンキュリンの遺伝子発現を上方制御する又はその代謝回転を増大させる工程を有し;及び/又は
・上記方法は、ADIPOQ(ACRP30)、FABP4、PPARG、ACAN(AGC1)、COL10A1、COMP、Sox9、IBSP(シアロタンパク質II)、COL4、CDH5、KDR(VEGFR3)、PECAM1、DLL4、EFNB2、NRP1、LYVE1、PROX1、NR2F2、NRP2、KRT1、KRT10、KRT14、PMEL(SILV)、TYR、TYRP1、MMP−9、α−SMA、ビメンチン、BGLAP、COL2A1、IBSP、RANK−L、OCN、DMP−1、スクレロスチン、MEPE、CALCR、CTSK、ITGB4、KRT19、ALB、G6PC、TAT、CD79A、CD3E、PTCRA、CCR5、CXCR4、EMR1、ITGAM、GALC、GFAP、MAP2、NEFH、TUBB3、CHAT、TH、GAD1、SLC32A1、SLC17A6、SLC17A7、ISL1、MBP、POU4F2、RLBP1、PDE6B、RCVRN、NPHS2、AQP1、CYP27B1、MIOX、AQP2、UMOD、SFTPB、SFTPC、SFTPD、MYH6、MYH7、NPPA、CAV3、MYH1、MYOD1、GATA4、MLC1、MYH11、SMTN、TAGLN、GCG、MAFB、POU3F4、INS、MAFA、SLC2A2、SST、GHRL(グレリン、オベスタチン)、PPY、及び/又はCPA1等の分化遺伝子及びタンパク質の発現をインビトロ又はインビボで上方制御(特に、実質的に増加)する工程を有し;及び/又は
・上記方法は、タンパク質p53、pRb、及び/又はSrcの遺伝子発現を下方制御(特に、実質的に低下又は抑制)する工程を有する。
(a)転移性又は非転移性腫瘍細胞;
(b)少なくとも1種の腫瘍抑制遺伝子、又はその少なくとも1種の遺伝子コード化産物(Rb及び/又はp53遺伝子、又は遺伝子産物等)の少なくとも1つの変化、変異、及び/又は調節解除を有する細胞;
(c)少なくとも1種のがん原遺伝子又はその少なくとも1種の遺伝子コード化産物(Src(チロシンキナーゼ)及び/又はRas(低分子量GTPアーゼ)等)の少なくとも1つの変化、変異、及び/又は調節解除を有する細胞;
(d)DNA修復機構(BRCA1及びBRCA2等)が損なわれた細胞;
(e)少なくとも1種の分裂促進因子及び/又は抗分裂促進因子遺伝子、又はその少なくとも1種の遺伝子コード化産物(TGF−ベータ等)の少なくとも1つの変化、変異、及び/又は調節解除を有する細胞;
(f)細胞周期又は細胞周期制御が欠損、変化、又は損なわれた細胞であって、上記欠損した細胞周期は、少なくとも1種の細胞周期遺伝子又は遺伝子コード化産物(サイクリンE1、サイクリンD1、CDK4/6等)の少なくとも1つの変化、変異、及び/又は調節解除、少なくとも1種の細胞周期チェックポイントの少なくとも1つの変化、変異、及び/又は調節解除、又はチェックポイント感受性及び/又は応答性の減少又は低減によるものである細胞;
(g)Stro−1陽性マーカーを含み、多分化能を有する幹細胞様細胞;
(h)ADIPOQ(ACRP30)、FABP4、PPARG、ACAN(AGC1)、COL10A1、COMP、Sox9、IBSP(シアロタンパク質II)、COL4、CDH5、KDR(VEGFR3)、PECAM1、DLL4、EFNB2、NRP1、LYVE1、PROX1、NR2F2、NRP2、KRT1、KRT10、KRT14、PMEL(SILV)、TYR、TYRP1、MMP−9、α−SMA、ビメンチン、BGLAP、COL2A1、IBSP、RANK−L、OCN、DMP−1、スクレロスチン、MEPE、CALCR、CTSK、ITGB4、KRT19、ALB、G6PC、TAT、CD79A、CD3E、PTCRA、CCR5、CXCR4、EMR1、ITGAM、GALC、GFAP、MAP2、NEFH、TUBB3、CHAT、TH、GAD1、SLC32A1、SLC17A6、SLC17A7、ISL1、MBP、POU4F2、RLBP1、PDE6B、RCVRN、NPHS2、AQP1、CYP27B1、MIOX、AQP2、UMOD、SFTPB、SFTPC、SFTPD、MYH6、MYH7、NPPA、CAV3、MYH1、MYOD1、GATA4、MLC1、MYH11、SMTN、TAGLN、GCG、MAFB、POU3F4、INS、MAFA、SLC2A2、SST、GHRL(グレリン、オベスタチン)、PPY、及び/又はCPA1等の特定の分化マーカーを少なくとも1種含む細胞;
(i)細胞質及び核硬度が増加した細胞;
(j)細胞骨格動態が高い細胞;及び
(k)これらの任意の組み合わせ
からなる群より選択される腫瘍細胞であり、細胞Yは、
(a)終末分化状態の細胞;
(b)非終末分化状態であり、X細胞よりは分化している細胞;
(c)生理学的に正常に増殖する細胞;及び
(d)健常又は正常な遺伝子発現及びタンパク質活性を有する生理学的に機能的な細胞
からなる群より選択される非腫瘍細胞である、方法を提供する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「治療する」又は「治療」という用語は、具体的な疾患、障害、病変、及び/又は異常の1つ以上の症状又は特徴について部分的又は完全に軽減、寛解、改善、緩和、発症遅延、進行阻害、重症度低減、及び/又は発生頻度低下させることを意味する。例えばある実施形態において、がんを「治療する」及びがんの「治療」とは、腫瘍の生存、成長、及び/又は伸展を阻害することを意味する場合がある。治療は、疾患、障害、及び/又は異常に関連する病変が発生するリスクを低減させる目的で、疾患、障害、及び/又は異常の兆候を示していない被験者、及び/又は疾患、障害、病変、及び/又は異常の初期兆候のみ示している被験者に適用してもよい。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「予防」という用語は、感染症、疾患、障害、及び/又は異常の発生を部分的又は完全に遅延させること、具体的な感染症、疾患、障害、及び/又は異常の1つ以上の症状、特徴、又は臨床所見の発生を部分的又は完全に遅延させること、具体的な感染症、疾患、障害、及び/又は異常の1つ以上の症状、特徴、又は徴候の発生を部分的又は完全に遅延させること、感染症、具体的な疾患、障害、及び/又は異常の進行を部分的又は完全に遅延させること、及び/又は感染症、疾患、障害、及び/又は異常に関連する病変が発生するリスクを低減することを意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「実質的に減少された」、「実質的に阻害された」という語は、細胞の活性及び/又は機能、タンパク質の発現、又は複合体の形成に関する場合、正常又は健常細胞(非腫瘍細胞等)の活性及び/又は機能と比較して、活性又は機能が1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%、50%、51%、52%、53%、54%、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、又は99%、特に50%〜99%、55%〜99%、60%〜99%、65%〜99%、70%〜99%、75%〜99%、80%〜99%、85%〜99%、又は90%〜99%減少又は低減していることを意味する。反対に、「実質的に増大(増加)した」という語も同様である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「疾患」という用語は、患者の正常な健康状態からの逸脱を意味しており、疾患症状が存在している状態、及び逸脱が発生しているが、症状はまだ顕在化していない状態も含む。腫瘍細胞等の欠損、機能不良、機能不全、機能障害、及び/又は有害細胞は、疾患の原因となり得る。「異常」、「障害」、及び「病変」も同様である。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「新生物」(腫瘍ともいう)という用語は、組織の異常な増殖を意味する。このような異常増殖は、常にではないが、通常、塊を形成する。世界保健機関によれば、新生物は4つの主要なグループである良性新生物、上皮内新生物、悪性新生物、及び挙動が不定又は未知の新生物に分類される。悪性新生物はがんである。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腫瘍細胞」という用語は、通常は細胞周期の欠損により異常増殖を行う細胞や、がん幹細胞等の腫瘍性となり得る細胞を意味する。これらの定義は、「Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin」,White AC,Lowry WE,Trends Cell Biol.2014 Sep 18.pii:S0962−8924(14)00145−7及び「review article Stem cells,cancer,and cancer stem cells」,Tannishtha Reya et al.,Nature 414,105−111(1 November 2001)(参照によりその全体が本願に組み込まれる)において示されている。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「腫瘍性疾患」という用語は、通常は腫瘍細胞の存在による組織の異常増殖に関連した疾患を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「循環性」という用語は、腫瘍細胞に関して使用した場合、原発性腫瘍部位から離れ、体内の別の位置へと移動して、転移性腫瘍となる腫瘍細胞を意味する。
本明細書中、別段の指示がない限り又は文脈に矛盾しない限り、「がん」という用語は、肉腫、癌腫、リンパ腫、白血病、奇形腫、中皮腫、骨髄腫、及び胚細胞腫等の悪性型の新生物を意味する。がんとしては、急性リンパ芽球性白血病(ALL)、急性骨髄性白血病、副腎皮質細胞腫、AIDS関連がん、AIDS関連リンパ腫、肛門がん、虫垂がん、小児小脳又は大脳の星状細胞腫、基底細胞腫、胆管がん、膀胱がん、骨腫瘍、骨肉腫/悪性線維性組織球腫、脳幹神経膠腫、脳がん、乳がん、気管支腺腫/カルチノイド、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍、中枢神経系リンパ腫、小脳星状細胞腫、大脳星状細胞腫/悪性神経膠腫、子宮頸がん、小児がん、慢性気管支炎、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性障害、慢性閉塞性肺疾患(COPD)、結腸がん、皮膚T細胞リンパ腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、肺気腫、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、ユーイングファミリー腫瘍におけるユーイング肉腫、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管がん、眼がん、胆嚢がん、胃がん、胃腸管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍(GIST)、胚細胞腫瘍(頭蓋外、性腺外、又は卵巣)、妊娠性絨毛性腫瘍、脳幹の神経膠腫、神経膠腫、胃カルチノイド、ヘアリー細胞白血病、頭頸部がん、心臓がん、肝細胞(肝臓)がん、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、視床下部及び視覚路神経膠腫、小児眼内黒色腫、島細胞腫(膵島)、カポジ肉腫、腎臓がん(腎細胞がん)、喉頭がん、白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、ヘアリー細胞白血病、口唇及び口腔がん、脂肪肉腫、肝がん、肺がん、AIDS関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚T細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、マクログロブリン血症、男性乳がん、骨の悪性線維性組織球腫/骨肉腫、髄芽腫、眼内(眼)黒色腫、メルケル細胞がん、中皮腫、原発不明の転移性扁平上皮頸部がん、口腔がん、多発性内分泌腺腫症候群、多発性骨髄腫/形質細胞新生物、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成/骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄増殖性障害、鼻腔及び副鼻腔がん、上咽頭細胞腫、神経芽腫、口腔がん、中咽頭がん、骨肉腫/骨の悪性線維性組織球腫、卵巣がん、卵巣上皮がん、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵がん、膵臓がん、島細胞副鼻腔及び鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、咽頭がん、褐色細胞腫、松果体星状細胞腫、松果体胚細胞腫、松果体芽腫及びテント上原始神経外胚葉腫瘍、下垂体腺腫、形質細胞新生物/多発性骨髄腫、胸膜肺芽腫、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺がん、直腸がん、腎細胞腫(腎臓がん)、腎盂尿管移行上皮がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、カポジ肉腫、軟組織肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、皮膚がん(非黒色腫)、皮膚がん(黒色腫)、メルケル細胞皮膚細胞腫、小腸がん、軟組織肉腫、原発不明の転移性扁平上皮頸部がん、胃がん、テント上原始神経外胚葉腫瘍、皮膚T細胞リンパ腫、精巣がん、咽頭がん、胸腺腫及び胸腺細胞腫、甲状腺がん、腎盂尿管移行上皮がん、絨毛性腫瘍、移行上皮がん、尿道がん、子宮がん、子宮肉腫、膣がん、視覚路及び視床下部神経膠腫、外陰がん、ワルデンストレームマクログロブリン血症、並びにウィルムス腫瘍(腎臓がん)等が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態において、本明細書に開示した再コード化療法によって治療できるがんは、骨肉腫、骨腫、軟骨肉腫、軟骨腫、平滑筋肉腫、平滑筋腫、横紋筋肉腫、横紋筋腫、中皮腫、線維肉腫、線維腫、悪性組織球腫、組織球腫、血管肉腫、血管肉腫、血管腫、血管外皮腫、リンパ管肉腫、リンパ管腫、脂肪肉腫、脂質細胞腫瘍、脂肪腫、粘液肉腫、脊索腫、葉状嚢胞肉腫、線維腺腫、精上皮腫、未分化胚細胞腫、セルトリ−ライディッヒ細胞腫瘍、男化腫瘍、顆粒膜−卵胞膜細胞腫瘍、門細胞腫、前立腺がん、前立腺肥大、ウィルムス腫瘍、黒色腫、母斑、神経線維肉腫、神経膠腫、未分化神経膠腫、膠芽腫、神経芽腫、髄芽腫、神経節腫、悪性髄膜腫、髄膜腫、悪性シュワン腫、シュワン腫、神経鞘腫、神経線維腫、及び間葉系腫瘍等の肉腫;扁平上皮細胞腫、メルケル細胞新生物、類表皮細胞腫、悪性皮膚付属器腫瘍、腺がん、肝細胞細胞腫、腎細胞腫、絨毛がん、グラヴィッツ腫瘍、胆管細胞がん、移行上皮がん、精上皮腫、胚性がん腫、乳頭腫、脂漏性角化症、皮膚付属器腫瘍、肝細胞がん、腺腫、肝腺腫、尿細管腺腫、胆管腺腫、移行上皮乳頭腫、胞状奇胎、副甲状腺がん、副甲状腺腺腫、甲状腺の髄様がん、C細胞過形成、悪性褐色細胞腫、褐色細胞腫、膵島細胞がん、膵島細胞腺腫、インスリノーマ、ガストリノーマ、悪性カルチノイド、カルチノイド、悪性傍神経節腫、ケモデクトーマ、及び傍神経節腫等の細胞腫;骨髄腫;骨髄性白血病、リンパ性白血病、赤血球増加症、非白血病性白血病、前白血病、及び骨髄増殖性疾患等の白血病;骨髄腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、形質細胞腫、及び形質細胞増加症等のリンパ腫;並びに腺扁平上皮がん、中胚葉性腫瘍、癌肉腫、及び奇形腫からなる群より選択される。
一例示において、本発明は、急性扁桃炎、徐呼吸、呼吸困難、漸進的な両目の視力変化、漸進的な片目の視力変化、頭部症状、胸焼け、筋肉症状、神経症状、穿孔性胃潰瘍、穿孔性潰瘍、浅呼吸、性的症状、体重減少、食道症状、体重症状、貧血、口臭、呼気臭、灼熱足、灼熱脚、小児口蓋裂を伴う又は伴わない唇裂、意思疎通症状、下痢、胃腸障害、疲れやすさ、肝腫大、顔面症状、足部痛、胃炎、妊娠中の胃食道逆流症、舌炎、毛舌、高脂血症、高トリグリセリド血症、性交不能、エネルギー欠乏、呼吸遅延、男性不妊症、メニエール病、運動症状、筋骨格症状、小児寝汗、浅呼吸の無呼吸性原因、携帯式24時間pH上昇モニタリング、頻拍、呼吸遅延、睡眠症状、不眠、言語症状、発汗症状、外傷関連症状、音声症状、嘔吐、白舌、腹部症状、血液検査異常症状、妊娠中の急性逆流様閉鎖不全症、妊娠中の急性逆流様症状、妊娠中の急性逆流様嘔吐、妊娠中の急性胃潰瘍様症状、出生時症状、指の脱色、出血症状、血液症状、血管損傷、複数の筋肉における慢性疼痛、消化症状、妊娠中の血圧上昇、突発性動脈性血管痙攣、女性不妊症、女性生殖器症状、受胎能症状、心肥大、食道裂孔ヘルニア、慢性消化障害に関連した食道裂孔ヘルニア、高血圧、妊娠中の高血圧様症状、心筋収縮力の低下、収縮期圧の上昇、感染、不妊症、間欠性跛行、両下肢の間欠性跛行、片側下肢の間欠性跛行、下肢の間欠痛、下腹部症状、腕部より脚部の血圧が低い状態、口部症状、心筋虚血、不履行、腎動脈の閉鎖、疼痛、末梢動脈性外傷、食欲不振、創傷治癒不良、妊娠症状、拍動性腹部膨満、赤血球症状、逆流様症状、呼吸症状、知覚症状、複数の骨における重症慢性疼痛、咽頭痛、発汗、咽頭部症状、尿失禁、静脈不全、女性の健康症状、先天性欠損、摂食症状、1時間あたり1リットルの発汗、妊娠中の異常行動、異常な眼球運動、妊娠中の異常肝機能検査、妊娠中の異常思考、長期欠勤、収縮期圧の顕著な低下、アシドーシス、動作時振戦、急性てんかん様症状、妊娠中の急性失念、急性出血性膵炎、妊娠中の急性間欠性失念、日中の急な眠気の発生、成人における日中の急な眠気の発生、高齢者における日中の急な眠気の発生、急性膵炎、中毒症状、攻撃性、アルコール乱用、アルコール呼気臭、アルコール使用、妊娠中の膀胱習慣の変化、精神状態の変化、バイタルサインの変化、妊娠中の不安障害、妊娠中の不安、妊娠中の憂慮、不整脈、心房細動、平衡症状、学校での行動異常、職場での行動異常、成人の行動異常、小児の行動異常、10代の行動異常、行動学的症状、妊娠中の行動変化、ブラックアウト、小脳失調、慢性下痢、慢性起立性低血圧、小児口蓋裂、不器用さ、小児CNSうつ、認知障害、昏睡、混乱、小児混乱、協調問題、離人症、意識レベルの低下、深い昏迷、脱水、射精遅延、せん妄、妄想、認知症、抑うつ精神状態、うつ症状、糖尿病性網膜症、足部発汗、前頭部発汗、手掌発汗、足底発汗、成人の集中力欠如、混乱状態、多尿、血圧の劇的な低下、眠気、薬物乱用、退薬による初発発作、薬物、薬物性下痢、薬物性大赤血球症、薬物性持続性低血糖、青年期の薬物性持続性低血糖、小児の薬物性持続性低血糖、乳児の薬物性持続性低血糖、食道炎による嚥下障害、感情症状、エネルギー症状、てんかん様症状、突発性発汗、真性糖尿病におけるような突発性発汗、多幸症、過剰発汗、眼症状、失神、肺高血圧におけるような失神エピソード、転倒、疲労、心拍知覚、紅潮、失念、妊娠中の失念、妊娠中の排尿頻度、頻尿、妊娠中の頻尿、全身発汗、蒸発による熱損失を伴う全身発汗、幻覚、頭痛、心臓不整脈、心臓粗動、高ALP、高ALT、高AST、高浸透圧、血流低下状態、低体温、低体温発作、不均衡、血行不良、不充分な血管内圧、不注意、不注意症状、ビリルビン増大、GGT増大、プロトロンビン時間増大、発汗増加、性交症状、間欠性発汗、間欠性てんかん様症状、幼児期の間欠性発作、不随意性緊張性行動、不正心拍、易刺激性、妊娠中の黄疸、意識レベル症状、妊娠中の肝圧痛、低アルブミン、妊娠中の低血小板レベル、低血圧、低血糖、低体温、妊娠中の大うつ病、男性性交不能、記憶障害、妊娠中の記憶障害、妊娠中の記憶喪失、記憶症状、妊娠中の記憶症状、妊娠中の精神変化、精神的うつ、妊娠中の精神的うつ、精神的問題、妊娠中の精神的問題、妊娠中の軽症うつ病、妊娠中の軽症うつ病様症状、軽度の人格変化、妊娠中の中等度うつ病、気分変動、筋痛、筋力低下、ミオクローヌス、神経損傷、神経過敏、妊娠中の神経過敏、神経筋易刺激性、下肢神経筋易刺激性、ニューロパチー、妊娠中の夜間排尿、妊娠中の夜間多尿、両足の痺れ、片足の痺れ、眼振、眼性ミオキミア、起立性低血圧、聴覚毒性薬物療法、動悸、膵炎、錯感覚、陰茎灼熱感、持続性疼痛性勃起、人格変化、人格症状、恐怖症、進行性の精神機能低下、寒さへの長期曝露、精神症状、妊娠中の不整脈、赤面、免疫応答低下、血管内圧低下、精子数低下、網膜症、学校での問題、発作、乳幼児発作、自尊心症状、重度のてんかん様症状、妊娠中の性機能低下、短期記憶喪失、循環虚脱の兆候、腸出血に見られる循環虚脱の兆候、睡眠問題、不明瞭発語、社会的問題、社会問題、足底の痺れ、起立性症状、昏迷、低妊孕率、学校での成績不振や学業不振を引き起こす物質乱用、せん妄を引き起こす乱用物質、小児の突発性混乱、失神エピソード、大腿の灼熱感、血小板減少症、妊娠中の血小板減少症、両足のピリピリ感、両手のピリピリ感、片足のピリピリ感、片手のピリピリ感、強直間代痙攣、嘔吐を引き起こす毒物、振戦、小児の異常な体臭、泌尿器の灼熱感、尿意切迫、尿閉、血管虚脱、めまい、暴力行為、歩行症状、妊娠中の体重減少、異常な子宮出血、流産、妊娠中の胎盤早期剥離、歯膿瘍、妊娠中の呑酸、後天性精神遅滞、妊娠時の口内への急性呑酸、急性喘息発作、急性大脳梗塞、急性季節性喘息様症状、アフタ性潰瘍、腕部灼熱感、腕部冷感、腕部感染症、腕部炎症、腕の痺れ、腕部異常知覚、腕部発赤、腕部鋭敏、腕部攣縮、腕部膨脹、無気肺、二頭筋灼熱感、二頭筋冷感、二頭筋感染症、二頭筋炎症、二頭筋の痺れ、二頭筋発赤、二頭筋攣縮、二頭筋膨脹、二頭筋のピリピリ感、両側性口唇口蓋裂、両側性完全唇裂、両側性脳卒中、黒毛舌、膀胱症状、血餅、血中鉛濃度、血圧症状、血管症状、紫色の唇、骨変化、呼吸音症状、呼吸症状、気管支がん、気管支炎、茶色の爪、がん関連症状、心血管症状、頸部症状、慢性気管支炎、慢性咳嗽、青年期慢性咳嗽、循環器症状、跛行、群発性頭痛、定常性脚部疼痛、鳥口腕筋感染症、鳥口腕筋発赤、鳥口腕筋膨脹、咳嗽、痙攣性脚部疼痛、両脚の痙攣痛、歯の黒斑、黒舌、死、死関連症状、唾液機能の低下、指の灼熱感、指の冷感、指感染症、指炎症、指の痺れ、指発赤、指鋭敏、指攣縮、指膨張、指のピリピリ感、椎間板ヘルニア、椎間板脱出、小児の変色歯、乾性咳、乾性壊疽、シェーグレン症候群におけるような粘膜乾燥、乾燥肌、心電図変化、げっぷ、運動症状、女性性器症状、女性性機能症状、大腿骨灼熱感、大腿骨の痺れ、大腿骨のピリピリ感、胎児性症状、腓骨灼熱感、腓骨の痺れ、腓骨のピリピリ感、手指灼熱感、指腹灼熱感、爪灼熱感、手指灼熱感、手指冷感、手指感染症、手指炎症、手指の痺れ、手指発赤、手指鋭敏、手指攣縮、手指膨張、手指のピリピリ感、前腕灼熱感、前腕冷感、前腕感染症、前腕炎症、前腕の痺れ、前腕発赤、前腕鋭敏、前腕攣縮、前腕膨張、前腕のピリピリ感、不潔な口臭、性器症状、成長症状、心損傷、心疾患、心拍リズム症状、心臓症状、妊娠中の食後胸焼け、妊娠中の運動後胸焼け、妊娠中の胸焼け、妊娠中の治療に対する胸焼け疼痛、食後横になると悪化する妊娠中の胸焼け、摂食とは関係のない妊娠中の胸焼け、呑酸を伴う妊娠中の胸焼け、逆流を伴わない妊娠中の胸焼け、椎間板ヘルニア、しゃっくり、高レベルリポタンパク質、嗄声、上腕骨灼熱感、上腕骨の痺れ、上腕骨のピリピリ感、妊娠中の低酸素症、毛細血管再充満時間の増大、肺分泌の増大、妊娠中の消化不良、乳児症状、炎症症状、不規則なリズム、腎臓症状、膝関節灼熱感、膝関節冷感、膝関節の痺れ、膝関節鋭敏、膝関節のピリピリ感、膝蓋灼熱感、膝蓋冷感、及びこれらの任意の組み合わせから選択される症状のうち少なくとも1つを治療又は緩和する。
一態様において、本開示は、これらの基準に基づいて被験者を同定、診断、及び必要に応じて分類する方法であって、当該分野で公知の臨床診断、バイオマーカー濃度、及び他の方法を含んでいてもよい方法を提供する。
一態様において、本開示は、本明細書で定義される生理活性担体と連合した又は組み合わせた(従って、本明細書で定義される医薬的連合体又は組み合わせを形成した)後に腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換又は再コード化できるGFR結合化合物を選択するためのスクリーニング方法を提供する。
本開示は、本発明の方法及び使用を簡便及び/又は効果的に実施するための様々なキットを提供する。典型的には、キットは、使用者が被験者の複数の処置を実施できるように、及び/又は複数の実験を実施できるように充分な量及び/又は数の構成要素を含んでいる。
本明細書で定義される(修飾)非環状GFR結合化合物の例は、本願に不可欠な部分を構成する添付の配列表に列挙されている。
・増強された及び/又はより実用的な及び/又はより効率的な及び/又はより経済的な及び/又は最終使用者のニーズにより適合したものであること;
・特に短時間のうちに、腫瘍細胞を変換又は再コード化して、その自己治癒及び/又は自己修復を誘導、及び/又は促進、及び/又は改善すること;
・非変異原性手段を用いて、腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換し、且つ/又はがん等の腫瘍性疾患、障害、異常、病変、又はその症状から被験者を保護すること;
・細胞外手段を用いて、腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換し、且つ/又はがん等の腫瘍性疾患、障害、異常、病変、又はその症状から被験者を保護すること;
・特に短時間のうちに、腫瘍細胞の分化能を回復させること;
・特に短時間のうちに、転移性又は非転移性がん細胞等の循環性又は非循環性腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換及び/又は再コード化すること;
・特に短時間のうちに、がん等の腫瘍性疾患、障害、異常、若しくは病変、及び/又はその任意の症状から被験者を保護すること;
・特に短時間のうちに、生理学的に機能的な及び/又は健常な骨芽細胞、骨細胞、軟骨芽細胞、軟骨細胞、神経芽細胞、神経細胞、セルトリ細胞、ライディッヒ細胞、胚細胞、筋芽細胞、筋細胞、角化細胞、内皮細胞、血管芽細胞、線維芽細胞、線維細胞、又は有足細胞を腫瘍細胞から提供及び/又は産生すること;
・腫瘍細胞の細胞接着チェックポイントを再構築、再活性化、又は回復させること;
・実質的に細胞死を誘導することなく、腫瘍細胞を治療すること;
・腫瘍細胞の静止状態を誘導すること;
・腫瘍細胞の細胞分裂/増殖を減衰、低減、又は抑制すること;
・腫瘍細胞の抗分裂促進因子活性、及び/又は腫瘍抑制経路、及び/又は抗発がん活性を活性化、及び/又は促進、及び/又は上方制御すること;
・任意の腫瘍細胞の治療に適合すること;
・有害な副作用が少ない又は全くないので、治療を受ける患者にとってより安全であること;
・腫瘍性疾患の局所治療の可能性を提供すること;及び
・本明細書で定義される療法の一般的安全性を高める生理学的細胞機構の活性化に主に又はそれのみに頼っていること。
・アパタイトセラミック(本発明のアパタイト又はセラミックともいう):Mater Res.2004;7(4):625−630に記載の通り合成した。
・チタン:Goodfellow(登録商標)製
・ヒドロゲル(アクリルアミド・アクリル酸共重合体ゲル):Langmuir 2011;27(22):13635−42に記載の通り合成した。
・PEEK:Goodfellow(登録商標)製
・PET(ポリ(エチレンテレフタレート)):Goodfellow(登録商標)製
・I型コラーゲンスポンジ:Sigma(登録商標)製
・ヘキサン:Sigma(登録商標)製
・3−スクシンイミジル−3−マレイミドプロピオナート(SMP):Sigma(登録商標)製
・DMF:Sigma(登録商標)製
・PBS1X:Gibco(登録商標)製
・3−(エトキシジメチルシリル)プロピルアミン:Sigma(登録商標)製
・過硫酸アンモニウム:Biorad(登録商標)製
・N,N,N’,N’−テトラメチルエチレンジアミン:Aldrich(登録商標)製
・アクリルアミド:Merck(登録商標)製
・アクリル酸:Merck(登録商標)製
・N,N−メチレン−ビス−アクリルアミド:Merck(登録商標)製
・NaOH:Aldrich(登録商標)製
・N,N,N’,N’−テトラメチルエチレンジアミン:Aldrich(登録商標)製
・ジメチルアミノプロピル−3−エチルカルボジイミドハイドロクロライド:Aldrich(登録商標)製
・N−ヒドロキシスクシンイミド:Aldrich(登録商標)製
・2−(N−モルホリノ)−エタンスルホン酸:Aldrich(登録商標)製
・MilliQ水:比抵抗の点で特徴的な水(典型的には25℃で18.2MΩ・cm)
・低グルコースダルベッコ変法イーグル培地(DMEM):Invitrogen(登録商標)製
・アスコルビン酸非含有イーグル最小必須培地(αMEM):Invitrogen(登録商標)製
・全ての細胞培養実験において、最初の8時間は培地に血清を添加しないで培養した。
・骨肉腫細胞:ATCC(登録商標)製のMG63細胞。該細胞を、10%ウシ胎児血清(FCS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したDMEM(イーグル最小必須培地)培地で培養。いずれの細胞も低継代数(10継代)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数104個/cm2で播種して実験を行った。
・軟骨肉腫細胞:ATCC(登録商標)製のHs819.T細胞。該細胞を、10%ウシ胎児血清(FCS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したDMEM(イーグル最小必須培地)培地で培養。いずれの細胞も低継代数(10継代)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数104個/cm2で播種して実験を行った。
・横紋筋肉腫細胞:ATCC(登録商標)製のA−673細胞。該細胞を、10%ウシ胎児血清(FCS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したDMEM(イーグル最小必須培地)培地で培養。いずれの細胞も低継代数(10継代)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数104個/cm2で播種して実験を行った。
・腺がん細胞:ATCC(登録商標)製のHCC4006細胞。該細胞を、10%ウシ胎児血清(FCS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したRPMI−1640培地(ATCC(登録商標)製)で培養。いずれの細胞も低継代数(10継代)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数104個/cm2で播種して実験を行った。
・CMFDA:Invitrogen(登録商標)製Cell Tracker Green
・DAPI:Sigma(登録商標)製
・ウシ胎児血清(FBS):Gibco(登録商標)製
・ペニシリン/ストレプトマイシン:Invitrogen(登録商標)製
・AlamarBlue(登録商標)アッセイ:Molecular Probes(登録商標)製
・抗phospho−p53抗体:Santa Cruz Biotechnology(登録商標)製
・抗pRB抗体:Santa Cruz Biotechnology(登録商標)製
・モノクローナル抗インテグリン(細胞外ドメイン)αv、α5、α3、α4、β1、β3、β5、及びβ9抗体:Santa Cruz Biotechnology(登録商標)製
・細胞骨格線維状アクチン(F−アクチン):Sigma(登録商標)製Alexa Fluor(登録商標)488ファロイジン標識により可視化
・モノクローナル抗ビンキュリン抗体(クローンhVIN−1、マウス体内で産生):Sigma(登録商標)製
・サイクリンD1用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CCGTCCATGCGGAAGATC−3’(順方向)及び5’−GAAGACCTCCTCCTCGCACT−3’(逆方向)
・サイクリンD2用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CATCCAACCGTACATGCGCAG−3’(順方向)及び5’−CATGGCCAGAGGAAAGACCTC−3’(逆方向)
・サイクリンD3用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−TGATTTCCTGGCCTTCATTC−3’(順方向)及び5’−CGGGTACATGGCAAAGGTAT−3’(逆方向)
・パキシリン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−AATTCCAGTGCCTCCAACAC−3’(順方向)及び5’−GAGCTCATGACGGTAGGTGA−3’(逆方向)
・ビンキュリン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−GCCAAGCAGTGCACAGATAA−3’(順方向)及び5’−TTCCTTTCTGGTGTGTGAAGC−3’(逆方向)
・DMP−1用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−AGCATCCTGCTCATGTTCCTTT−3’(順方向)及び5’−GAGCCAAATGACCCTTCCATT−3’(逆方向)
・スクレロスチン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CTTAGTTTTCTCAGTCTGTGGTTGAAAT−3’(順方向)及び5’−AGAGTACCCCGAGCCTCC−3’(逆方向)
・RANK−L用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CTCAGCCTTTTGCTCATCTCACT−3’(順方向)及び5’−CCAAGAGGACAGACTCACTTTATGG−3’(逆方向)
・MLC−1用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−AGAAGGGCTCCATGTCTGACA−3’(順方向)及び5’−AAGATTTCAGGACCCGAGCAG−3’(逆方向)
・GATA−4用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−AGGCCTCTTGCAATGCGGA−3’(順方向)及び5’−CTGGTGGTGGCGTTGCTGG−3’(逆方向)
・α−サルコメアアクチン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−GACCACAGCTGAACGTGAGA−3’(順方向)及び5’−CATAGCACGATGGTCGATTG−3’(逆方向)
・Sox9用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−GACTTCCGCGACGTGGAC−3’(順方向)及び5’−GTTGGGCGGCAGGTACTG−3’(逆方向)
・IBSP用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−TGCCTTGAGCCTGCTTCC−3’(順方向)及び5’−GCAAAATTAAAGCAGTCTTCATTTTG−3’(逆方向)
・IV型コラーゲン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CCTGGTCTTGAAAGGTGATAAG−3’(順方向)及び5’−CCCGCTATCCCTTGATCTC−3’(逆方向)
・ビメンチン用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−TGTCCAAATCGATGTGGATGTTTC−3’(順方向)及び5’−TTGTACCATTCTTCTGCCTCCTG−3’(逆方向)
・MMP−9用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−AATCTCTTCTAGAGACTGGGAAGG AG−3’(順方向)及び5’−AGCTGATTGACTAAAGTAGCTGGA−3’(逆方向)
・α−SMA用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−CCGACCGAATGCAGAAGGA−3’(順方向)及び5’−ACAGAGTATTTGCGCTCCGAA−3’(逆方向)
・GAPDH用プライマー:Invitrogen(登録商標)製の5’−GCAGTACAGCCCCAAAATGG−3’(順方向)及び5’−ACAAAGTCCGGCCTGTATCCAA−3’(逆方向)
・いずれのペプチドも、従来の溶液及び/又は固体相ペプチド合成法を用いて合成した。
・いずれの実験も、本明細書で定義されるGFR結合化合物の濃度を400ng/mLとして実施した。
・いずれの細胞培養実験も、I型コラーゲンで被覆したプラスチック上の培地で行って、人体の生理的条件を模倣した。
X線光電子分光法では、AVG Scientific社製ESCALAB光電子分光装置を用いて、100Wの非単色化MgK1253.6eV源で表面解析を実施した。試料表面の解析X線スポットの面積は約200μm2であった。入射角は、解析深さ約5nmに相当する45°とした。フラッドガンを用いて電荷補償した。パスエネルギーを20eV一定として高解像度スペクトルを得た。
まず、細胞を4%パラホルムアルデヒド/PBSを用いて4℃で20分間固定した。固定後、細胞を1%Triton X−100含有PBS中で15分間透過処理した。最初に、1%(v/v)特異的モノクローナル抗体を用いて細胞を37℃で1時間処理して、タンパク質を免疫蛍光可視化した。その後、Alexa fluor(登録商標)568又は647(IgG(H+L)のF(ab’)2断片)を用いて試料を室温で30分間インキュベートした。20ng/mL DAPIを用いて細胞核を室温で10分間、対比染色した。
この定量には、画像解析フリーウェアであるImageJ(登録商標)ソフトウェアを使用した。まず、raw画像を8−bitファイルに変換した後、アンシャープマスク機能(settings 1:0.2)を用いて画像背景を除去した(rolling ball radius=10)。スムージング後、元の顕微鏡写真と同様に見えるが背景が最小限となっている処理画像を、閾値を設定することで二値画像に変換した。閾値は、設定を選択して経験的に決定し、これにより、ランダムに選択した顕微鏡写真のサブセットに対して最も正確な二値画像を得た。細胞面積は、raw蛍光画像を用いて手動で描写して測定した。総接触面積及び細胞当たり平均接触面積は、ImageJ(登録商標)の「Analyze Particules」で算出した。1条件当たり最小で50個の細胞を解析した。
24時間培養後、RNeasy Total RNA Kit(Qiagen(登録商標))を用いて製造業者の指示書に従って全RNAを抽出した。精製した全RNAをテンプレートとして、ランダムプライマー(Invitrogen(登録商標))を用いた逆転写反応(Gibco Brl(登録商標))によってcDNAを作製した。その後、cDNAをテンプレートとして、SYBR green試薬(Bio−Rad(登録商標))の存在下、サーマルサイクラー(iCycler、Biorad(登録商標))を用いてリアルタイムPCR増幅した。データをiCycler IQTM(登録商標)ソフトウェアで解析し、ΔΔCt法で比較した。簡潔に言うと、標的遺伝子の平均Ct値をそのハウスキーピング遺伝子(GAPDH)の平均Ct値で規格化して、ΔCt値を得た。これをコントロール試料で規格化してΔΔCt値を得た。結果は、3回繰り返して実施した2群の実験から得た。
24時間培養後、細胞を透過処理し(10%SDS、25mM NaCl、10nMペプスタチン、及び10nMロイペプチンの蒸留水+添加液溶液)、10分間沸騰させて、還元PAGE(Invitrogen)により分離させた。タンパク質をニトロセルロース上に移し、ブロッキングし、HRP結合抗体(Invitrogen)で標識した。ニトロセルロースをモノクローナル抗インテグリン(細胞外ドメイン)αv、α5、α3、α4、β1、β3、β5、及びβ6抗体(Santa Cruz Biotechnology)で処理することで、インテグリンαv、α5、α3、α4、β1、β3、β5、及びβ9をブロッティングした。ニトロセルロースをモノクローナル抗p−Smad1/5/8(Santa Cruz Biotechnology)で処理することで、Phosphor−Smad1/5/8をブロッティングした。全ての実験について、ウェスタンブロッティングは3回繰り返して実施し、アクチン及びクーマシーブルー染色用のブロットを追加して、サンプル間でタンパク質負荷量が確実に一定となるようにした。
シンチレーション測定とは対照的に、感受性、直線性、及び空間分解能の分野におけるベータイメージャーの性能により、固体表面用の新規なイメージング装置として本システムは非常に興味深いものである。検出原理は、もはやガス中で生じる電子雪崩のカウントに基づくものではなく、相互作用時に放出される光の分析に基づいている。定性的及び定量的オートラジオグラフィーに特に好適な平行板雪崩チャンバを用いて、ベータ放射活性を直接検出する。
C=A×C0/A0
式中、Aは、as−treated試料の活性(分/mm2あたりのカウント)を表す。C0は、インキュベート溶液中のペプチド濃度(g/L)を表す。A0は、母液1mLの活性(cpm/L)を表す。b−VisionTM Biospaceソフトウェアを用いて後者の活性を較正して、μCiとcpm/L単位との関係を決定した。このフィッティングは、所定の希釈溶液の活性を測定することで実施した。10個の溶液の放射活性をベータイメージャーで測定したところ、A0は1.0 1010cpm/Lであった。
リアルタイムPCRアッセイに関しては、全てのデータを平均±標準誤差として表し、対応のあるスチューデントのt検定によって統計的に解析した。
アクリルアミド・アクリル酸共重合体ゲル基材の調製を例として、本明細書で定義されるGFR結合化合物の効果を示す。ヒドロゲルは、アクリルアミド及びアクリル酸を用いて、架橋剤としてのN,N’−メチレン−ビス−アクリルアミドの存在下、水性媒体中での重合によって合成する。実際には、アクリルアミド(AM、Merck)0.3gをPBS1X(Invitrogen)5mLに溶解させた。アクリル酸(AA、Merck)30μL、次いでN,N−メチレン−ビス−アクリルアミドxg(硬度の関数)を攪拌下で添加した。その後、NaOH溶液(1M、Aldrich)を滴下してpHを8にした。フリーラジカル重合によって、ヒドロゲル形成を進行させた。窒素をバブリングして開始溶液を10分間脱気することで、フリーラジカル重合プロセスの阻害剤として作用する酸素を除去した。溶液の上部は窒素雰囲気を維持し、10%過硫酸アンモニウム(Biorad)(フリ−ラジカル開始剤)50μL(総体積の1/100に相当)、次いでN,N,N’,N’−テトラメチルエチレンジアミン(触媒、Aldrich)5μL(総体積の1/1000に相当)を添加した。重合溶液を穏やかにボルテックス撹拌した。重合前にこのゲル溶液0.5mLを迅速にスライドガラス上に配置し、この構成体の上部に別のスライドガラスを配置した。Finemann−Ross法及びKelen−Tudos法で算出した反応性比から、共重合体はランダムであり、反応性比rAM=3.76及びrAA=0.28であることが分かった。ここで得られた材料は、0.1〜600kPaの様々な硬度を有している。
制御雰囲気下(Ar雰囲気、グローブボックス)で材料を修飾した。本明細書で定義されるGFR結合化合物を共有結合的に修飾する戦略では、(1)(3−アミノプロピル)−トリエトキシシラン(濃度1×10−2M、4時間)を生体高分子表面にグラフト化し、(2)ヘテロ二官能性架橋剤である3−スクシンイミジル−3−マレイミドプロピオナート(濃度1×10−3M、4時間)で末端アミンを置換して、(3)「外部」マレイミド基と本明細書で定義されるGFR結合化合物(濃度1×10−3M、18時間)とを末端システインに存在するチオール基を介して反応させた。グラフト化後、修飾した材料をPBS1Xバッファで5日間洗浄した。
本試験で使用したポリマーはポリ(エチレンテレフタレート)(PET)である。まず、ポリマーを処理して、PET表面に−OH(ヒドロキシ)官能基から−COOH(カルボキシ)官能基を形成した。次いで、PET−COOH試料を、ジメチルアミノプロピル−3−エチルカルボジイミドハイドロクロライド(EDC、0.2M)+N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS、0.1M)を2−(N−モルホリノ)−エタンスルホン酸(MES)バッファ(0.1M MilliQ水溶液)に添加した溶液に浸漬し、試料をMilliQ水(50mLで30分間)で洗浄した。最外表面に−OH(ヒドロキシ)官能基を有するポリマーにいずれも同じプロトコルを採用した。最後に、ペプチド/1X PBS(濃度=10−3M)溶液を室温で18時間インキュベートして、ペプチドを共有結合的に固定した。グラフト化後、材料をMilliQ水(100ml)で1週間洗浄した。
制御雰囲気(Ar雰囲気、グローブボックス)下で生理活性担体を修飾した。GFR結合化合物を共有結合的に連合又は固定化する戦略では、(1)(3−アミノプロピル)−トリエトキシシラン(濃度1×10−2M、4時間)を生理活性担体の表面に連合又はグラフト化し、(2)ヘテロ二官能性架橋剤である3−スクシンイミジル−3−マレイミドプロピオナート(濃度1×10−3M、4時間)で末端アミンを置換して、(3)「外部」マレイミド基とGFR結合化合物(濃度1×10−3M、24時間)とを末端システインに存在するチオール基を介して反応させた。共有結合的に連合させた後、共有結合的医薬的連合体をリン酸緩衝生理食塩水(PBS1X)バッファで5日間洗浄した。PBSは生物学的研究で一般的に使用される緩衝液であり、リン酸ナトリウム及び塩化ナトリウムと、処方によっては塩化カリウム及びリン酸カリウムを含む水系塩溶液である。溶液のモル浸透圧濃度及びイオン濃度は人体とマッチする(等張)ので、生理学的であり、細胞無毒性である。
ポリエーテルエーテルケトン(PEEK)をエチレンジアミン(NH2=NH2)で処理して、PEEK表面にケトン(=O)官能基から−NH2(アミン)官能基を形成した。続いて、ヘテロ二官能性架橋剤である3−スクシンイミジル−3−マレイミドプロピオナート(濃度1×10−3M、4時間)の溶液にPEEK−NH2試料を浸漬して、「外部」マレイミド基と配列番号7のGFR結合化合物(濃度1×10−3M、24時間)とを末端システインに存在するチオール基を介して反応させた。共有結合的に連合させた後、医薬的連合体をPBS1Xで5日間洗浄した。
PLLA(ポリ乳酸)を、ジメチルアミノプロピル−3−エチルカルボジイミドハイドロクロライド(EDC、0.2M)+N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS、0.1M)を(2−(N−モルホリノ)−エタンスルホン酸(MESバッファ、0.1M MilliQ水)に添加した溶液に浸漬した後、MilliQ水(30分間)で洗浄した。配列番号8のGFR結合化合物の溶液(濃度1×10−3M、18時間、室温)を用いて共有結合的に連合させた。共有結合的に連合させた後、医薬的連合体をPBS1Xで5日間洗浄した。
大気条件(空気)下、室温(約22℃)で生理活性担体を非共有結合的に連合させた。非共有結合的連合は、配列番号9のGFR結合化合物(濃度1×10−3M)とアパタイトセラミックとの混合物又は配列番号10のGFR結合化合物(濃度1×10−3M)とI型コラーゲンスポンジとの混合物を用いて実施した。非共有結合的医薬的連合体は、配列番号9及び10の蛍光GFR結合化合物(フルオレセインイソチオシアネート(FITC)と共有結合的に結合、図1)の共有結合的連合によって特徴付けた。アパタイトセラミック及びI型コラーゲンスポンジを用いた実験から図1に示す結果が得られたが、3日、7日、又は10日後にGFR結合化合物の顕著な放出は観察されなかったことから(図2a及びb)、GFR結合化合物とアパタイトセラミック又はI型コラーゲンとの相互作用は安定していることが分かった。
上述の方法により、選択したGFR結合化合物(配列番号11〜20)をPETと共有結合的に連合させ、ヒト骨肉腫細胞(ATCC(登録商標)製)と接触させた。この腫瘍細胞/医薬的連合体混合物を、10%(v/v)ウシ胎児血清(FBS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地(DMEM、Invitrogen(登録商標))で培養し、5%(v/v)CO2を含む湿潤雰囲気下、37℃でインキュベートした。全ての細胞培養実験において、最初の8時間は培地に血清を添加しないで培養した。いずれの細胞も低継代数(10継代以下)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数10000個/cm2で播種して実験を行った。
上述の方法により、選択したGFR結合化合物(配列番号21〜30)をPETと共有結合的に連合させ、ヒト横紋筋肉腫細胞(ATCC(登録商標)製)と接触させた。この腫瘍細胞/医薬的連合体混合物を、10%(v/v)ウシ胎児血清(FBS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地(DMEM、Invitrogen(登録商標))で培養し、5%(v/v)CO2を含む湿潤雰囲気下、37℃でインキュベートした。全ての細胞培養実験において、最初の8時間は培地に血清を添加しないで培養した。いずれの細胞も低継代数(10継代以下)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数10000個/cm2で播種して実験を行った。
上述の方法により、選択したGFR結合化合物(配列番号31〜40)をPETと共有結合的に連合させ、ヒト横紋筋肉腫細胞(ATCC(登録商標)製)と接触させた。この腫瘍細胞/医薬的連合体混合物を、10%(v/v)ウシ胎児血清(FBS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地(DMEM、Invitrogen(登録商標))で培養し、5%(v/v)CO2を含む湿潤雰囲気下、37℃でインキュベートした。全ての細胞培養実験において、最初の8時間は培地に血清を添加しないで培養した。いずれの細胞も低継代数(10継代以下)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数10000個/cm2で播種して実験を行った。
上述の方法により、選択したGFR結合化合物(配列番号41〜50)をPETと共有結合的に連合させ、ヒト腺がん細胞(ATCC(登録商標)製)と接触させた。この腫瘍細胞/医薬的連合体混合物を、10%(v/v)ウシ胎児血清(FBS)及び1%ペニシリン/ストレプトマイシンを添加したRPMI−1640培地で培養し、5%(v/v)CO2を含む湿潤雰囲気下、37℃でインキュベートした。全ての細胞培養実験において、最初の8時間は培地に血清を添加しないで培養した。いずれの細胞も低継代数(10継代以下)で使用し、サブコンフルエントに培養し、細胞数10000個/cm2で播種して実験を行った。
腫瘍細胞(本実施例の場合、骨肉腫細胞)を、生理活性担体としてのPETと配列番号11〜14、24〜26、及び51〜63のGFR結合化合物のうち1種とを含む医薬的連合体上で培養した。腫瘍マーカーの迅速な(24時間)低下が観察された(図7)。次いで、接着チェックポイントにより、腫瘍抑制タンパク質p53及びpRBが活性化する。本発明の医薬的連合体上で培養した腫瘍細胞では、タンパク質発現量の定量(一般的な方法の項で記載した蛍光免疫染色及びImageJによる定量)で示されるように、p53の発現が低下し(図7A)、タンパク質リン酸化量の定量(一般的な方法の項で記載した蛍光免疫染色及びその後のImageJソフトウェアによる定量)で示されるように、pRBが脱リン酸化される(図7B)ことが分かった。
腫瘍細胞(本実施例の場合、骨肉腫細胞)を、生理活性担体としてのPETと配列番号12、19、30、及び39のGFR結合化合物のうち1種とを含む医薬的連合体上で培養した。主なシグナル伝達経路としては、Ras/MAPキナーゼ、FAK/Srcキナーゼ、及びPIP2が挙げられ、これらは、ウェスタンブロッティングによる定量で示されるように、24時間後に低下する(図8)。これは、ERKにおいてThr202及びTyr204でリン酸化が見られないことから分かる(図8A)。更に、Srcキナーゼにおいては、Thr416ではリン酸化が見られないが、Tyr527ではリン酸化が観察された(図8B)。最後に、3−ホスホイノシチド依存性タンパク質キナーゼ1(PDK1)のタンパク質発現の低下も見られた(図8C)。
腫瘍細胞(本実施例の場合、骨肉腫細胞)を、生理活性担体としてのPETと配列番号12、19、30、及び39のGFR結合化合物のうち1種とを含む医薬的連合体上で培養した。24時間後、RT−PCRで示されるように、パキシリン及びビンキュリンの遺伝子発現が低下した(図9)。
腫瘍細胞(本実施例の場合、骨肉腫細胞)を、生理活性担体としてのPETと配列番号12、19、30、及び39のGFR結合化合物のうち1種とを含む医薬的連合体上で培養した。RT−PCRで示されるように、細胞培養の最初の30分後にサイクリンD(サイクリンD1、サイクリンD2、及びサイクリンD3の算術平均)の遺伝子発現が低下した(図10)。これらのデータは、細胞がG0静止期に入ったことを示している。
方法の項で記載した手順に従い、放射標識分子を用いて、生理活性担体上のGFR結合化合物の密度を測定したところ、GFR結合化合物(配列番号13、20、又は56)の大きさに応じて0.3〜2.8pmol/mm2であった(図11)。
以下の表4にまとめたデータから、本開示のある実施形態に係る医薬的連合体の腫瘍細胞再コード化作用(本実施例の場合、pRBの定量によるヒト骨肉腫細胞MG63)は、Smad1/5/8シグナル伝達経路の活性化(phospho−smad1/5/8のウェスタンブロッティング定量による)で示されるように成長因子受容体の活性化を伴うことが分かった。
本明細書で定義される任意の生理活性担体親和性基を除いたGFR結合ペプチド配列についてRMSD値を常に算出する。生理活性担体親和性基は、生物学的に試験する場合にGFR結合ペプチドに添加するだけである。以下の表5にまとめたデータから、RMSD値が2.45Å以下である本明細書に記載したGFR結合化合物を含む本開示のある実施形態に係る医薬的連合体は、腫瘍細胞(本実施例の場合、ヒト骨肉腫細胞MG63)から健常細胞への特に効率的な再コード化(pRbの定量で示す)を誘導することが分かった。
腫瘍細胞の再コード化プロセスにおける接着タンパク質阻害の重要性を示すため、本明細書で既に記載した方法を用いて、RGDペプチド(多くのECMタンパク質(フィブロネクチン等)に存在する一次インテグリン認識部位)及び本開示に係るGFR結合化合物の一例でPET基材を共有結合的に機能化した。
実施例16と同様の設定(腫瘍細胞、並びにRGDペプチド及びGFR結合化合物の一例で機能化したPET)により、shRNAを用いてインテグリンα3及びインテグリンβ1の発現をサイレンシングしたところ、24時間後にインテグリンα3及びインテグリンβ1のmRNA量がそれぞれ60〜70%及び50〜60%、インテグリンα3及びインテグリンβ1のタンパク質量が60〜70%低下したことが分かった。更に、インテグリンα3及びβ1のshRNAは、いずれもRGD修飾基材上の骨肉腫の接着及び伸展を変調させたことが分かった(図13A及びB)。
A.骨肉腫モデル
本試験のモデルとしては、免疫不全マウスのOSRGaラット骨肉腫同所性異種移植モデルを選択した。このモデルは、実際、腫瘍の経時的な形成の点及びその生物学的特徴の点の両方で、ヒト骨肉腫腫瘍と非常に類似した骨肉腫腫瘍が形成することを特徴とする。ヒト骨肉腫と同様に、OSRGaモデルは、肺転移及び骨の過剰な再構築を伴った腫瘍増殖を特徴とする。実際に、骨と接触して増殖するOSRGa腫瘍細胞は、骨基質を産生し、成熟及び未成熟骨(網状骨)の形成や悪性骨溶解の増大を誘導する。更に、ヒト骨肉腫と同様に、OSRGa腫瘍は、細胞核の顕著な異常及び多数の有糸分裂を示す腫瘍骨芽細胞で構成されている。また、このモデルは再現性が高く、非常に高い頻度で局所同所性腫瘍形成を誘導する。
B.1.同所性異種移植手順
5日間の適応期間後、3〜4週齢の雌性免疫不全マウス(Rj:NMRIヌード系)に対してラット骨肉腫OSRGa細胞を同所性異種移植した。骨肉腫モデルを確立するため、骨膜を引っ掻いた後、10μL懸濁液としてOSRGa細胞2×106個を筋内注射して、ヌードマウスの右脛骨と接触させた。注射中は鎮痛剤を投与した。
OSRGa細胞注射から24日後に、GFR結合ペプチド(配列番号198及び197)をセラミックゲルと1:1で非共有結合的に混合した10−3M混合物を腫瘍内に注射した。効率的に分布させるため、平均腫瘍体積に応じて注射量を90μlとした。コントロール条件は、腫瘍に化合物を注射しない「投与なし」条件、及び非グラフト化セラミックゲルインプラント(コントロール1)とする。各種の実験条件及び結果を以下に詳述する。
全ての実験条件について、腫瘍を取り除いてパラフィン包埋した後、連続的な横断切片を作製した。その後、これらの切片について徹底的な病理組織学的分析を実施して、以下の染色によって組織及び細胞構造、結果として腫瘍進行及び腫瘍細胞再コード化を評価した。
・ヘマトキシリン・エオシン(HE)染色:組織形態を定性的に分析する。
・マッソントリクローム(TM)染色:細胞を周辺の結合組織と区別する。
・免疫組織化学的アッセイ:E11抗原、スクレロスチン、DMP1、CD44
腫瘍細胞から骨細胞への細胞形質転換を分析することで、骨肉腫細胞の再コード化を評価した。徹底的な病理組織的分析を実施することで、3つの実験条件について、更に各条件の2つのエンドポイントについて、各種のパラメータを用いて骨肉腫細胞の再コード化率を測定することができた。
セラミックゲルと混合した代表的なGFR結合化合物を用いた場合、ヒト骨肉腫の全ての特徴を示す骨肉腫動物モデルにおいて骨肉腫細胞を効率的に再コード化できることが分かった。
Claims (139)
- 腫瘍性疾患の治療、予防、及び/又は診断に使用するための医薬的連合体であって、
腫瘍細胞の少なくとも1種の成長因子受容体を活性化させる少なくとも1種の成長因子受容体結合化合物、及び
前記少なくとも1種の成長因子受容体結合化合物と少なくとも1つの共有結合的又は非共有結合的な相互作用を形成する少なくとも1種の生理活性担体を含み、
前記腫瘍細胞において、少なくとも1種のサイクリンDの遺伝子発現を低減若しくは抑制し、且つ/又は該少なくとも1種のサイクリンDと、サイクリン依存性キナーゼ4及び6の少なくとも一方とによる少なくとも1種の複合体の形成を低減若しくは抑制する、連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体活性化能を有する分子量が8,000ダルトン未満の非環状成長因子受容体結合化合物である、請求項1に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体活性化能を有する分子量が7,000ダルトン未満の環状成長因子受容体結合化合物である、請求項1に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、4個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP1と5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP2とを含んでおり、前記PEP1は、SAIS、SSLS、NAIS、SATS、SPIS、EPIS、SPIN、KPLS、EPLP、EPLT、SNIT、RSVK、及びRPVQからなる群より選択され、前記PEP2は、LKNYQ、LKVYP、LKKYR、LRKHR、LKYHY、KFKYE、YGKIP、YKQYE、DHHKD、EQLSN、IGEMS、LGEMS、KEVQV、及びKKATVからなる群より選択される、請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体は、上皮成長因子受容体、線維芽細胞成長因子受容体、血管内皮成長因子受容体、神経成長因子受容体、インスリン受容体ファミリー、Trk受容体ファミリー、Eph受容体ファミリー、AXL受容体ファミリー、LTK受容体ファミリー、TIE受容体ファミリー、ROR受容体ファミリー、DDR受容体ファミリー、RET受容体ファミリー、KLG受容体ファミリー、RYK受容体ファミリー、MuSK受容体ファミリー、肝細胞成長因子受容体、ソマトメジン又はインスリン様成長因子受容体、血小板由来成長因子受容体、及びトランスフォーミング成長因子βスーパーファミリータンパク質からなる群より選択される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記サイクリンDの遺伝子発現は、前記腫瘍細胞の細胞周期におけるG1期で低減又は抑制される、請求項1〜5のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記サイクリンDの遺伝子発現は、前記腫瘍細胞の細胞周期におけるG1期全体を通じて低減又は抑制される、請求項6に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、少なくとも1つの損傷した細胞周期チェックポイントの機能を回復させる、請求項1〜7のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記細胞周期チェックポイントは、細胞接着チェックポイントである、請求項8に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療は、GTPアーゼの発現又は活性を下方制御することを含む、請求項1〜9のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療は細胞外治療である、請求項1〜10のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療は非変異原性治療である、請求項1〜11のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換する、請求項1〜12のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、前記腫瘍細胞の分化を誘導する、請求項1〜13のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、前記腫瘍細胞の静止状態を誘導する、請求項1〜14のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、前記腫瘍細胞の細胞分裂及び/又は細胞増殖を阻害する、請求項1〜15のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記治療により、前記腫瘍細胞における抗分裂促進因子活性、腫瘍抑制因子活性、抗発がん活性、又はこれらの任意の組み合わせを促進する、請求項1〜16のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、8個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP12と5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP2とを含んでおり、前記PEP12は、一般式PEP1−AA17−PEP11{式中、AA17は、G、A、V、L、I、P、F、M、W、T、及びSからなる群より選択される。PEP11は、一般式AA18−AA19−AA20(式中、AA18は、L、V、Q、A、及びRからなる群より選択される。AA19は、F、W、H、Y、I、及びKからなる群より選択される。AA20は、L、F、Y、K、I、V、及びMからなる群より選択される。)で表される3個のアミノ酸を有するペプチドである。}で表されるペプチドである、請求項1〜17のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP11は、LYL、LFF、LYF、LYY、LYK、LYI、LFI、LYV、VYY、QIM、AKV、及びRKIからなる群より選択される、請求項18に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4とを含んでおり、前記PEP3は、VPT、VPE、APT、TPT、VPA、APV、VPQ、VSQ、SRV、及びTQVからなる群より選択され、前記PEP4は、VVE、TVE、VVR、VVK、VAE、AVS、VVD、VEE、VRS、VKS、QHN、EHS、EEH、及びEDHからなる群より選択される、請求項4〜19のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6とを含んでおり、前記PEP5は、一般式PEP3−AA11−AA12(式中、PEP3は、VPT、VPE、APT、TPT、VPA、APV、VPQ、VSQ、SRV、及びTQVからなる群より選択される。AA11は、E、K、Q、R、A、D、G、及びHからなる群より選択される。AA12は、L、M、T、E、Q、及びHからなる群より選択される。)で表されるペプチドであり、PEP6は、一般式AA26−AA27−AA28−AA29−PEP4(式中、PEP4は、VVE、TVE、VVR、VVK、VAE、AVS、VVD、VEE、VRS、VKS、QHN、EHS、EEH、及びEDHからなる群より選択される。AA26は、存在しないか又はAAIIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくは存在しないか又はEである。AA27及びAA28は、それぞれ独立に、AAIII及びAAVアミノ酸からなる群より選択される。AA29は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくは存在しないか又はSである。)で表されるペプチドである、請求項4〜20のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP5は、VPTEL、VPEKM、APTKL、APTQL、VPTKL、TPTKM、VPARL、VPTRL、APVKT、VPQAL、VSQDL、VPQDL、VPTEE、VPTGQ、SRVHH、及びTQVQLからなる群より選択される、請求項21に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP6は、DMVVE、NMTVE、EMVVE、NMVVR、NMVVK、EGMSVAE、GMAVS、GMVVD、MIVEE、MIVRS、MIVKS、MVVKS、FLQHN、LEEHS、RLEEH、及びTLEDHからなる群より選択される、請求項21又は22に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、6〜12個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP9と6〜11個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP10とを含んでおり、
前記PEP9は、一般式PEP7−PEP5{式中、PEP5は、式PEP3−AA11−AA12(式中、PEP3は、VPT、VPE、APT、TPT、VPA、APV、VPQ、VSQ、SRV、及びTQVからなる群より選択される。AA11は、E、K、Q、R、A、D、G、及びHからなる群より選択される。AA12は、L、M、T、E、Q、及びHからなる群より選択される。)で表されるペプチドである。PEP7は、一般式AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7(式中、AA1、AA2、AA3、AA4、及びAA5は、それぞれ独立に、存在しないか又は本明細書で定義されるAAIである。AA6は、存在しないか又はS、T、C、E、Q、P、及びRからなる群より選択される。AA7は、存在しないか又はS、T、C、E、Q、P、及びRからなる群より選択される。)で表されるアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドである。}で表されるペプチドであり、
前記PEP10は、一般式PEP6−PEP8{式中、PEP6は、式AA26−AA27−AA28−AA29−PEP4(式中、PEP4は、VVE、TVE、VVR、VVK、VAE、AVS、VVD、VEE、VRS、VKS、QHN、EHS、EEH、及びEDHからなる群より選択される。AA26は、存在しないか又はAAIIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくは存在しないか又はEである。AA27及びAA28は、それぞれ独立に、AAIII及びAAVアミノ酸からなる群より選択される。AA29は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくは存在しないか又はSである。)で表されるペプチドである。PEP8は、一般式AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38(式中、AA33は、存在しないか又はAAIアミノ酸(ただし、AAVIアミノ酸を除く)からなる群より選択される。AA34は、存在しないか又はAAIII及びAAIVアミノ酸からなる群より選択される。AA35は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくはS又はCである。AA36は、存在しないか又はAAIII及びAAIVアミノ酸からなる群より選択される。AA37は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくはS又はCである。AA38は、存在しないか又はAAIからなる群より選択される。)で表されるアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである。}で表されるペプチドである、請求項4〜23のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記PEP9は、KIPKAXXVPTEL、GIPEPXXVPEKM、SIPKAXXVPTEL、HVTKPTXAPTKL、YVPKPXXAPTKL、TVPKPXXAPTQL、AVPKAXXAPTKL、KVGKAXXVPTKL、KASKAXXVPTKL、GSAGPXXTPTKM、AAPASXXVPARL、STPPTXXVPTRL、HVPKPXXAPTKL、RVPSTXXAPVKT、ASAAPXXVPQAL、ASASPXXVSQDL、ASASPXXVPQDL、NDEGLEXVPTEE、NDEGLEXVPTGQ、SSVKXQPSRVHH、及びRNVQXRPTQVQL(式中、XはC又はSである。)からなる群より選択される、請求項24に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP10は、DMVVEGXGXR、NMTVESXAXR、EMVVEGXGXR、NMVVRSXGXH、NMVVRAXGXH、NMVVKAXGXH、EGMSVAEXGXR、GMAVSEXGXR、GMVVDRXGXS、DMVVEAXGXR、DMVVESXGXR、MIVEEXGXL、MIVRSXKXS、MIVKSXKXS、MVVKSXKXS、FLQHNKXEXR、LEEHSQXEXR、RLEEHLEXAXA、及びTLEDHLAXKXE(式中、XはC又はSである)からなる群より選択される、請求項24又は25に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と6〜11個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP10とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、6〜12個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP9と3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と6〜11個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP10とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、6〜12個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP9と5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6とを含む、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4とを含んでおり、
前記PEP7は、一般式AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7(式中、AA1、AA2、AA3、AA4、及びAA5は、それぞれ独立に、存在しないか又はAAIである。AA6は、存在しないか又はS、T、C、E、Q、P、及びRからなる群より選択される。AA7は、存在しないか又はS、T、C、E、Q、P、及びRからなる群より選択される。AA1、AA2、AA3、AA4、AA5、AA6、及びAA7のうち少なくとも1つは存在している。)で表されるアミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであり、
前記PEP8は、一般式AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38(式中、AA33は、存在しないか又はAAIアミノ酸(ただし、AAVIアミノ酸を除く)からなる群より選択される。AA34は、存在しないか又はAAIII及びAAIVアミノ酸からなる群より選択される。AA35は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくはS又はCである。AA36は、存在しないか又はAAIII及びAAIVアミノ酸からなる群より選択される。AA37は、存在しないか又はAAIIアミノ酸からなる群より選択され、好ましくはS又はCである。AA38は、存在しないか又はAAIからなる群より選択される。AA33、AA34、AA35、AA36、AA37、及びAA38のうち少なくとも1つは存在している。)で表されるアミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドである、請求項4〜26のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記PEP7は、KIPKAXX、GIPEPXX、SIPKAXX、HVTKPTX、YVPKPXX、TVPKPXX、AVPKAXX、KVGKAXX、KASKAXX、GSAGPXX、AAPASXX、STPPTXX、HVPKPXX、RVPSTXX、ASAAPXX、ASASPXX、NDEGLEX、SSVKXQP、及びRNVQXRP(式中、XはC又はSである)からなる群より選択される、請求項33に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP8は、GXGXR、SXAXR、SXGXH、AXGXH、XGXR、EXGXR、RXGXS、AXGXR、SXGXR、XGXL、XKXS、KXEXR、QXEXR、LEXAXA、及びLAXKXE(式中、XはC又はSである)からなる群より選択される、請求項33又は34に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、6〜11個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP10とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP3と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、6〜11個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP10とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP5と、アミノ酸又は2〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP7と、5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、6〜12個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP9と、3個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP4と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、6〜12個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP9と、5〜7個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP6と、アミノ酸又は2〜6個のアミノ酸を有するペプチドであるPEP8とを含む、請求項4〜35のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(Ia):
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)は、PEP1又はPEP12と、PEP3、PEP5、PEP7、及びPEP9からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸とを含む。PEP(B)は、PEP2と、PEP4、PEP6、PEP8、及びPEP10からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸とを含む。LINKERは、分子量が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体を含む、請求項1〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(Ia):
PEP(A)−LINKER−PEP(B) (Ia)
(式中、LINKERの一端は、PEP(A)の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP(B)の一端と共有結合的に相互作用する。PEP(A)は、PEP1、PEP12、PEP3、PEP5、PEP7、及びPEP9からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸を含む。PEP(B)は、PEP2、PEP4、PEP6、PEP8、及びPEP10からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸を含む。LINKERは、分子量が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。)で表される、請求項1、2、及び4〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(IIa):
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP(C)の一端は、PEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、PEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、PEP3、PEP5、PEP7、及びPEP9からなる群より選択されるペプチドの少なくとも1種を含む少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、PEP4、PEP6、PEP8、及びPEP10からなる群より選択されるペプチドの少なくとも1種を含む少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体を含む、請求項1〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(IIa):
PEP(C)−PEP12−LINKER−PEP2−PEP(D) (IIa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基、部分、又は化合物である。PEP(C)の一端は、PEP12と共有結合的に相互作用する。PEP(D)の一端は、PEP2の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの一端は、PEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、PEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP(C)は、PEP3、PEP5、PEP7、及びPEP9からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸を含む少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチドである。PEP(D)は、PEP4、PEP6、PEP8、及びPEP10からなる群より選択される少なくとも1種のペプチド又はアミノ酸を含む少なくとも5個のアミノ酸を有するペプチドである。)で表される、請求項1、2、及び4〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記PEP(C)はPEP5であり、前記PEP(D)はPEP6である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP9であり、前記PEP(D)はPEP10である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP3を含み、前記PEP(D)はPEP6である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP3を含み、前記PEP(D)はPEP10である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP5であり、前記PEP(D)はPEP4を含む、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP9であり、前記PEP(D)はPEP4を含む、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP5であり、前記PEP(D)はPEP10である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP9であり、前記PEP(D)はPEP6である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP3及びPEP7を含み、前記PEP(D)はPEP6である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記PEP(C)はPEP3及びPEP7を含み、前記PEP(D)はPEP10である、請求項50に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(IIIa):
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基である。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体を含む、請求項1〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(IIIa):
PEP7−PEP5−PEP12−LINKER−PEP2−PEP6−PEP8 (IIIa)
(式中、LINKERは、分子量が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基である。LINKERの一端は、AA20を介してPEP12の一端と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21を介してPEP2の一端と共有結合的に相互作用する。PEP5の一端は、AA12を介してPEP12の他端と共有結合的に相互作用する。PEP5の他端は、AA8を介してPEP7の一端と共有結合的に相互作用する。PEP6の一端は、AA26を介してPEP2の他端と共有結合的に相互作用する。PEP6の他端は、AA32を介してPEP8の一端と共有結合的に相互作用する)で表される、請求項1、2、及び4〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般式(IVa):
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は、本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体を含む、請求項1〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 下記一般式(IVa):
AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7−AA8−AA9−AA10−AA11−AA12−AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20−LINKER−AA21−AA22−AA23−AA24−AA25−AA26−AA27−AA28−AA29−AA30−AA31−AA32−AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38 (IVa)
(式中、LINKERは、分子量(Mw)が約28〜約2,000ダルトンである直鎖状又は分枝状の2価の有機基である。AA1−AA2−AA3−AA4−AA5−AA6−AA7は、本明細書で定義されるPEP7である。AA13−AA14−AA15−AA16−AA17−AA18−AA19−AA20は、本明細書で定義されるPEP12である。AA21−AA22−AA23−AA24−AA25は、本明細書で既に定義したPEP2である。AA8−AA9−AA10は、本明細書で定義されるPEP3である。AA30−AA31−AA32は、本明細書で定義されるPEP4である。AA33−AA34−AA35−AA36−AA37−AA38は、本明細書で定義されるPEP8である。AA11、AA12、AA26、AA27、AA28、及びAA29は、本明細書で定義される通りである。LINKERの一端は、AA20と共有結合的に相互作用する。LINKERの他端は、AA21と共有結合的に相互作用する。AA1及びAA21の両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。AA38及びAA20は、両方がN末端アミノ酸であってもよく、両方がC末端アミノ酸であってもよい。)で表されるペプチド、その変異体若しくは類似体、又はペプチド模倣体を含む、請求項1、2、及び4〜46のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、下記一般図式(V)〜(XXVIII):
- 前記成長因子受容体結合化合物は、下記環状一般図式(XXIX)〜(XXXIV):
- 前記LINKERは、2〜16個のアミノ酸を有するペプチドである、請求項47〜66のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記LINKERは、一般式(XXXV):
*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209** (XXXV)
で表されるペプチドを含み、
前記ペプチドは、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAVI−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAII−AAIV−AAIV−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAII−AAI−AAII−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAIII−AAII−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAIII−AAI−AAI−AAII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAV−AAV−AAVII−AAVII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、*AAVIII−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**、及び*AAV−AAV−AAVII−AAII−AAXII−AAXII−AAXIII−AAXIII**(式中、AAIは、アミノ酸である。AAIIは、極性アミノ酸である。AAIIIは、酸性アミノ酸である。AAIVは、脂肪族アミノ酸である。AAVは、無極性アミノ酸である。AAVIは、芳香族アミノ酸である。AAVIIは、塩基性アミノ酸である。AAVIIIは、L又はIである。AAXIIは、G、A、V、L、I、P、M、K、R、H、Y、及びEからなる群より選択されるアミノ酸である。AAXIIIは、存在しないか又はAAII又はAAVIIである。)からなる群より選択され、AA201、AA201−AA202、AA201−AA202−AA203、AA201−AA202−AA203−AA204、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206、AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207、AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA205−AA206−AA207−AA208−AA209、AA206−AA207−AA208−AA209、AA207−AA208−AA209、AA208−AA209、及びAA209のいずれか1つは、存在していなくてもよく、「*」及び「**」が付してあるアミノ酸は、N末端アミノ酸及びC末端アミノ酸のいずれかである、請求項47〜67のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記LINKERは、*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207−AA208−AA209**(XXXV)、*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205−AA206−AA207**(XXXV−2)、及び*AA201−AA202−AA203−AA204−AA205**(XXXV−4)からなる群より選択されるペプチドを含む、請求項68に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記LINKERは、DENEKVV、DENKNVV、DEYDKVV、DDSSNVI、DSSNNVI、DDMGVPT、DKGVVTY、NDKQQII、DAANNVV、DSANNVV、DDSSNVI、DNGRVLL、VGRKPKV、IGKTPKI、VGRTPKV、RIKPHQGQH、EYVRKKPKL、EIVRKKPIF、EYVRKKP、EIVRKKP、ポリアラニン(A1−9)、及びポリグリシン(G1−9)からなる群より選択されるペプチドを含む、請求項68に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記LINKERは、DENEKVV、DENKNVV、DEYDKVV、DDSSNVI、DSSNNVI、DDMGVPT、DKGVVTY、NDKQQII、DAANNVV、DSANNVV、DDSSNVI、DNGRVLL、VGRKPKV、IGKTPKI、VGRTPKV、RIKPHQGQH、EYVRKKPKL、EIVRKKPIF、EYVRKKP、EIVRKKP、ポリアラニン(A1−9)、及びポリグリシン(G1−9)からなる群より選択されるペプチドである、請求項68に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記LINKERは、ポリアラニンペプチド(A)n及び/又はポリグリシン(G)nを含み、nは2〜16の整数である、請求項47〜67のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記LINKERは、1〜22個含む飽和又は不飽和の炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖は、1個以上の非炭素原子で分断されていてもよく、該非炭素原子は、−O−、−S−、−C(=O)、−SO2−、−N(Ri)(C=O)−、及び−N(Ri)−(式中、Riは、水素原子、炭素数1〜6のアルキル基、及びアリール基からなる群より選択される。)からなる群より選択され、前記炭化水素鎖は、非置換であるか、あるいはハロゲン、単糖、多糖(1〜6単位)、ヌクレオチド、ポリヌクレオチド(1〜6単位)、炭素数1〜10のアルキル基、及びアリール基からなる群より選択される少なくとも1つの基で置換されている、請求項47〜66のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP1:PEP2ペアは、SAIS:LKNYQ、SSLS:LKVYP、NAIS:LKKYR、SATS:LRKHR、SPIS:LKYHY、EPIS:KFKYE、SPIN:YGKIP、SPIS:YKQYE、KPLS:DHHKD、EPLP:EQLSN、EPLT:EQLSN、SNIT:IGEMS、SNIT:LGEMS、RSVK:KEVQV、及びRPVQ:KKATVからなる群より選択される、請求項4〜73のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP12:PEP2ペアは、SAIS−AA17−LYL:LKNYQ、SSLS−AA17−LFF:LKVYP、NAIS−AA17−LYF:LKKYR、SATS−AA17−LYY:LRKHR、SPIS−AA17−LYK:LKYHY、EPIS−AA17−LYL:KFKYE、SPIN−AA17−LYF:YGKIP、SPIS−AA17−LYI:YKQYE、SPIS−AA17−LFI:YKQYE、KPLS−AA17−LYV:DHHKD、EPLP−AA17−VYY:EQLSN、EPLT−AA17−LYY:EQLSN、SNIT−AA17−QIM:IGEMS、SNIT−AA17−QIM:LGEMS、RSVK−AA17−AKV:KEVQV、及びRPVQ−AA17−RKI:KKATV(式中、AA17は、G、A、V、L、I、P、F、M、W、T、及びSからなる群より選択される。)からなる群より選択される、請求項4〜74のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP3:PEP4ペアは、VPT:VVE、VPE:TVE、APT:VVR、APT:VVK、VPT:VAE、VPT:AVS、TPT:VVD、VPA:VVE、APV:VEE、VPQ:VRS、VSQ:VKS、VPQ:VKS、VPT:QHN、VPT:EHS、SRV:EEH、及びTQV:EDHからなる群より選択される、請求項4〜75のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP5:PEP6ペアは、VPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVE、VPE−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−TVE、APT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVR、APT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVK、VPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VAE、VPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−AVS、TPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVD、VPA−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVE、APV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VEE、VPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VRS、VSQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKS、VPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKS、VPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−QHN、VPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EHS、SRV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EEH、及びTQV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EDHからなる群より選択される、請求項4〜76のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP5:PEP6ペアは、VPTEL:DMVVE、VPEKM:NMTVE、VPTEL:EMVVE、APTKL:NMVVR、APTQL:NMVVR、APTKL:NMVVK、VPTKL:EGMSVAE、VPTKL:GMAVS、TPTKM:GMVVD、VPARL:DMVVE、VPTRL:DMVVE、APVKT:MIVEE、VPQAL:MIVRS、VSQDL:MIVKS、VPQDL:MVVKS、VPTEE:FLQHN、VPTGQ:LEEHS、SRVHH:RLEEH、及びTQVQL:TLEDHからなる群より選択される、請求項4〜77のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP7:PEP8ペアは、KIPKAXX:GXGXR、GIPEPXX:SXAXR、SIPKAXX:GXGXR、HVTKPTX:SXGXH、YVPKPXX:SXGXH、TVPKPXX:AXGXH、AVPKAXX:AXGXH、KVGKAXX:XGXR、KASKAXX:EXGXR、GSAGPXX:RXGXS、AAPASXX:AXGXR、STPPTXX:SXGXR、HVPKPXX:SXGXH、RVPSTXX:XGXL、ASAAPXX:XKXS、ASASPXX:XKXS、NDEGLEX:KXEXR、NDEGLEX:QXEXR、SSVKXQP:LEXAXA、及びRNVQXRP:LAXKXEからなる群より選択される、請求項4〜78のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP9:PEP10ペアは、KIPKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEGXGXR、GIPEPXXVPE−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−TVESXAXR、SIPKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEGXGXR、HVTKPTXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXH、YVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXH、TVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRAXGXH、AVPKAXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVKAXGXH、KVGKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VAEXGXR、KASKAXXVPT−AA11−AA12−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−AVSEXGXR、GSAGPXXTPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVDRXGXS、AAPASXXVPA−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEAXGXR、STPPTXXVPT−AA11−AA12−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVESXGXR、HVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXH、RVPSTXXAPV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VEEXGXL、ASAAPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VRSXKXS、ASASPXXVSQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXS、ASASPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXS、NDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−QHNKXEXR、NDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EHSQXEXR、SSVKXQPSRV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EEHLEXAXA、及びRNVQXRPTQV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EDHLAXKXEからなる群より選択される、請求項4〜79のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP9:PEP10ペアは、KIPKAXXVPTEL:DMVVEGXGXR、GIPEPXXVPEKM:NMTVESXAXR、SIPKAXXVPTEL:EMVVEGXGXR、HVTKPTXAPTKL:NMVVRSXGXH、YVPKPXXAPTKL:NMVVRSXGXH、TVPKPXXAPTQL:NMVVRAXGXH、AVPKAXXAPTKL:NMVVKAXGXH、KVGKAXXVPTKL:EGMSVAEXGXR、KASKAXXVPTKL:GMAVSEXGXR、GSAGPXXTPTKM:GMVVDRXGXS、AAPASXXVPARL:DMVVEAXGXR、STPPTXXVPTRL:DMVVESXGXR、HVPKPXXAPTKL:NMVVRSXGXH、RVPSTXXAPVKT:MIVEEXGXL、ASAAPXXVPQAL:MIVRSXKXS、ASASPXXVSQDL:MIVKSXKXS、ASASPXXVPQDL:MVVKSXKXS、NDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXR、NDEGLEXVPTGQ:LEEHSQXEXR、NDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXR、NDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXR、SSVKXQPSRVHH:RLEEHLEXAXA、及びRNVQXRPTQVQL:TLEDHLAXKXEからなる群より選択される、請求項4〜80のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTEL:DMVVEではなく、PEP1がSSLS、PEP2がLKVYPである場合、PEP5:PEP6ペアはVPEKM:NMTVEではなく、PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTEL:EMVVEではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP5:PEP6ペアはAPTKL:NMVVRではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP5:PEP6ペアはAPTQL:NMVVRではなく、PEP1がSATS、PEP2がLRKHRである場合、PEP5:PEP6ペアはAPTKL:NMVVKではなく、PEP1がSPIS、PEP2がLKYHYである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTKL:EGMSVAEではなく、PEP1がEPIS、PEP2がKFKYEである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTKL:GMAVSではなく、PEP1がSPIN、PEP2がYGKIPである場合、PEP5:PEP6ペアはTPTKM:GMVVDではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP5:PEP6ペアはVPARL:DMVVEではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTRL:DMVVEではなく、PEP1がKPLS、PEP2がDHHKDである場合、PEP5:PEP6ペアはAPVKT:MIVEEではなく、PEP1がEPLP、PEP2がEQLSNである場合、PEP5:PEP6ペアはVPQAL:MIVRSではなく、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、PEP5:PEP6ペアはVSQDL:MIVKSではなく、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、PEP5:PEP6ペアはVPQDL:MVVKSではなく、PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTEE:FLQHNではなく、PEP1がSNIT、PEP2がLGEMSである場合、PEP5:PEP6ペアはVPTGQ:LEEHSではなく、PEP1がRSVK、PEP2がKEVQVである場合、PEP5:PEP6ペアはSRVHH:RLEEHではなく、PEP1がRPVQ、PEP2がKKATVである場合、PEP5:PEP6ペアはTQVQL:TLEDHではない、請求項4〜81のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP9:PEP10ペアはKIPKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEGXGXRではなく、PEP1がSSLS、PEP2がLKVYPである場合、PEP9:PEP10はGIPEPXXVPE−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−TVESXAXRではなく、PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP9:PEP10はSIPKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEGXGXRではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はHVTKPTXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXHではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はYVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXHではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はTVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRAXGXHではなく、PEP1がSATS、PEP2がLRKHRである場合、PEP9:PEP10はAVPKAXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVKAXGXHではなく、PEP1がSPIS、PEP2がLKYHYである場合、PEP9:PEP10はKVGKAXXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VAEXGXRではなく、PEP1がEPIS、PEP2がKFKYEである場合、PEP9:PEP10はKASKAXXVPT−AA11−AA12−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−AVSEXGXRではなく、PEP1がSPIN、PEP2がYGKIPである場合、PEP9:PEP10はGSAGPXXTPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVDRXGXSではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP9:PEP10はAAPASXXVPA−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVEAXGXRではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP9:PEP10はSTPPTXXVPT−AA11−AA12−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVESXGXRではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はHVPKPXXAPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VVRSXGXHではなく、PEP1がKPLS、PEP2がDHHKDである場合、PEP9:PEP10はRVPSTXXAPV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VEEXGXLではなく、PEP1がEPLP、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASAAPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VRSXKXSではなく、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、ASASPXXVSQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXS、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASASPXXVPQ−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−VKSXKXSではなく、PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−QHNKXEXRではなく、PEP1がSNIT、PEP2がLGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPT−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EHSQXEXRではなく、PEP1がRSVK、PEP2がKEVQVである場合、PEP9:PEP10はSSVKXQPSRV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EEHLEXAXAではなく、PEP1がRPVQ、PEP2がKKATVである場合、PEP9:PEP10はRNVQXRPTQV−AA11−AA12:AA26−AA27−AA28−AA29−EDHLAXKXEではない、請求項4〜82のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP9:PEP10はKIPKAXXVPTEL:DMVVEGXGXRではなく、PEP1がSSLS、PEP2がLKVYPである場合、PEP9:PEP10はGIPEPXXVPEKM:NMTVESXAXRではなく、PEP1がSAIS、PEP2がLKNYQである場合、PEP9:PEP10はSIPKAXXVPTEL:EMVVEGXGXRではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はHVTKPTXAPTKL:NMVVRSXGXHではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はYVPKPXXAPTKL:NMVVRSXGXHではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はTVPKPXXAPTQL:NMVVRAXGXHではなく、PEP1がSATS、PEP2がLRKHRである場合、PEP9:PEP10はAVPKAXXAPTKL:NMVVKAXGXHではなく、PEP1がSPIS、PEP2がLKYHYである場合、PEP9:PEP10はKVGKAXXVPTKL:EGMSVAEXGXRではなく、PEP1がEPIS、PEP2がKFKYEである場合、PEP9:PEP10はKASKAXXVPTKL:GMAVSEXGXRではなく、PEP1がSPIN、PEP2がYGKIPである場合、PEP9:PEP10はGSAGPXXTPTKM:GMVVDRXGXSではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP9:PEP10はAAPASXXVPARL:DMVVEAXGXRではなく、PEP1がSPIS、PEP2がYKQYEである場合、PEP9:PEP10はSTPPTXXVPTRL:DMVVESXGXRではなく、PEP1がNAIS、PEP2がLKKYRである場合、PEP9:PEP10はHVPKPXXAPTKL:NMVVRSXGXHではなく、PEP1がKPLS、PEP2がDHHKDである場合、PEP9:PEP10はRVPSTXXAPVKT:MIVEEXGXLではなく、PEP1がEPLP、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASAAPXXVPQAL:MIVRSXKXSではなく、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、ASASPXXVSQDL:MIVKSXKXS、PEP1がEPLT、PEP2がEQLSNである場合、PEP9:PEP10はASASPXXVPQDL:MVVKSXKXSではなく、PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXRではなく、PEP1がSNIT、PEP2がLGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPTGQ:LEEHSQXEXRではなく、PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXRではなく、PEP1がSNIT、PEP2がIGEMSである場合、PEP9:PEP10はNDEGLEXVPTEE:FLQHNKXEXRではなく、PEP1がRSVK、PEP2がKEVQVである場合、PEP9:PEP10はSSVKXQPSRVHH:RLEEHLEXAXAではなく、PEP1がRPVQ、PEP2がKKATVである場合、PEP9:PEP10はRNVQXRPTQVQL:TLEDHLAXKXEではない、請求項4〜83のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP1:PEP11ペアは、SAIS:LYL、SSLS:LFF、NAIS:LYF、SATS:LYY、SPIS:LYK、SPIS:LYI、SPIS:LFI、EPIS:LYL、SPIN:LYF、KPLS:LYV、EPLP:VYY、EPLT:LYY、SNIT:QIM、RSVK:AKV、及びRPVQ:RKIからなる群より選択される、請求項4〜84のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEP5:PEP1:PEP2:PEP6の4つ組は、VPTKM:SAIS:LKNYQ:NMVVE、VPTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVE、VPTQL:SAIS:LKNYQ:NMVVE、VPTKL:SAIS:LKNYQ:EGMSVVE、VPTKL:SAIS:LKNYQ:GMVVE、VPTKM:SAIS:LKNYQ:GMVVE、VPTRL:SAIS:LKNYQ:DMVVE、VPTKT:SAIS:LKNYQ:MIVVE、VPTAL:SAIS:LKNYQ:MIVVE、VPTDL:SAIS:LKNYQ:MIVVE、VPTDL:SAIS:LKNYQ:MVVVE、VPEKM:SAIS:LKNYQ:NMTVE、APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVR、APTQL:SAIS:LKNYQ:NMVVR、APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVK、VPTKL:SAIS:LKNYQ:EGMSVAE、VPTKL:SAIS:LKNYQ:GMAVS、TPTKM:SAIS:LKNYQ:GMVVD、VPARL:SAIS:LKNYQ:DMVVE、APVKT:SAIS:LKNYQ:MIVEE、VPQAL:SAIS:LKNYQ:MIVRS、VSQDL:SAIS:LKNYQ:MIVKS、VPQDL:SAIS:LKNYQ:MVVKS、VPTEE:SAIS:LKNYQ:FLQHN、VPTGQ:SAIS:LKNYQ:LEEHS、SRVHH:SAIS:LKNYQ:RLEEH、TQVQL:SAIS:LKNYQ:TLEDH、VPEEL:SSLS:LKVYP:DMTVE、VPEEL:SSLS:LKVYP:EMTVE、VPEKL:SSLS:LKVYP:NMTVE、VPEQL:SSLS:LKVYP:NMTVE、VPEKL:SSLS:LKVYP:EGMSTVE、VPEKL:SSLS:LKVYP:GMTVE、VPEKM:SSLS:LKVYP:GMTVE、VPERL:SSLS:LKVYP:DMTVE、VPEKT:SSLS:LKVYP:MITVE、VPEAL:SSLS:LKVYP:MITVE、VPEDL:SSLS:LKVYP:MITVE、VPEDL:SSLS:LKVYP:MVTVE、VPTEL:SSLS:LKVYP:DMVVE、VPTEL:SSLS:LKVYP:EMVVE、APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVR、APTQL:SSLS:LKVYP:NMVVR、APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVK、VPTKL:SSLS:LKVYP:EGMSVAE、VPTKL:SSLS:LKVYP:GMAVS、TPTKM:SSLS:LKVYP:GMVVD、VPARL:SSLS:LKVYP:DMVVE、VPTRL:SSLS:LKVYP:DMVVE、APVKT:SSLS:LKVYP:MIVEE、VPQAL:SSLS:LKVYP:MIVRS、VSQDL:SSLS:LKVYP:MIVKS、VPQDL:SSLS:LKVYP:MVVKS、VPTEE:SSLS:LKVYP:FLQHN、VPTGQ:SSLS:LKVYP:LEEHS、SRVHH:SSLS:LKVYP:RLEEH、TQVQL:SSLS:LKVYP:TLEDH、APTEL:NAIS:LKKYR:DMVVR、APTKM:NAIS:LKKYR:NMVVR、APTEL:NAIS:LKKYR:EMVVR、APTKL:NAIS:LKKYR:NMVVR、APTKL:NAIS:LKKYR:EGMSVVR、APTKL:NAIS:LKKYR:GMVVR、APTKM:NAIS:LKKYR:GMVVR、APTRL:NAIS:LKKYR:DMVVR、APTKT:NAIS:LKKYR:MIVVR、APTAL:NAIS:LKKYR:MIVVR、APTDL:NAIS:LKKYR:MIVVR、APTDL:NAIS:LKKYR:MVVVR、VPTEL:NAIS:LKKYR:DMVVE、VPEKM:NAIS:LKKYR:NMTVE、VPTEL:NAIS:LKKYR:EMVVE、APTKL:NAIS:LKKYR:NMVVK、VPTKL:NAIS:LKKYR:EGMSVAE、VPTKL:NAIS:LKKYR:GMAVS、TPTKM:NAIS:LKKYR:GMVVD、VPARL:NAIS:LKKYR:DMVVE、VPTRL:NAIS:LKKYR:DMVVE、APVKT:NAIS:LKKYR:MIVEE、VPQAL:NAIS:LKKYR:MIVRS、VSQDL:NAIS:LKKYR:MIVKS、VPQDL:NAIS:LKKYR:MVVKS、VPTEE:NAIS:LKKYR:FLQHN、VPTGQ:NAIS:LKKYR:LEEHS、SRVHH:NAIS:LKKYR:RLEEH、TQVQL:NAIS:LKKYR:TLEDH、APTEL:SATS:LRKHR:DMVVK、APTKM:SATS:LRKHR:NMVVK、APTEL:SATS:LRKHR:EMVVK、APTKL:SATS:LRKHR:NMVVK、APTQL:SATS:LRKHR:NMVVK、APTKL:SATS:LRKHR:EGMSVVK、APTKL:SATS:LRKHR:GMVVK、APTKM:SATS:LRKHR:GMVVK、APTRL:SATS:LRKHR:DMVVK、APTKT:SATS:LRKHR:MIVVK、APTAL:SATS:LRKHR:MIVVK、APTDL:SATS:LRKHR:MIVVK、APTDL:SATS:LRKHR:MVVVK、VPTEL:SATS:LRKHR:DMVVE、VPEKM:SATS:LRKHR:NMTVE、VPTEL:SATS:LRKHR:EMVVE、APTKL:SATS:LRKHR:NMVVR、APTQL:SATS:LRKHR:NMVVR、VPTKL:SATS:LRKHR:EGMSVAE、VPTKL:SATS:LRKHR:GMAVS、TPTKM:SATS:LRKHR:GMVVD、VPARL:SATS:LRKHR:DMVVE、VPTRL:SATS:LRKHR:DMVVE、APVKT:SATS:LRKHR:MIVEE、VPQAL:SATS:LRKHR:MIVRS、VSQDL:SATS:LRKHR:MIVKS、VPQDL:SATS:LRKHR:MVVKS、VPTEE:SATS:LRKHR:FLQHN、VPTGQ:SATS:LRKHR:LEEHS、SRVHH:SATS:LRKHR:RLEEH、TQVQL:SATS:LRKHR:TLEDH、VPTEL:SPIS:LKYHY:DMVAE、VPTKM:SPIS:LKYHY:NMVAE、VPTEL:SPIS:LKYHY:EMVAE、VPTKL:SPIS:LKYHY:NMVAE、VPTQL:SPIS:LKYHY:NMVAE、VPTKL:SPIS:LKYHY:GMVAE、VPTKM:SPIS:LKYHY:GMVAE、VPTRL:SPIS:LKYHY:DMVAE、VPTKT:SPIS:LKYHY:MIVAE、VPTAL:SPIS:LKYHY:MIVAE、VPTDL:SPIS:LKYHY:MIVAE、VPTDL:SPIS:LKYHY:MVVAE、VPTEL:SPIS:LKYHY:DMVVE、VPEKM:SPIS:LKYHY:NMTVE、VPTEL:SPIS:LKYHY:EMVVE、APTKL:SPIS:LKYHY:NMVVR、APTQL:SPIS:LKYHY:NMVVR、APTKL:SPIS:LKYHY:NMVVK、VPTKL:SPIS:LKYHY:GMAVS、TPTKM:SPIS:LKYHY:GMVVD、VPARL:SPIS:LKYHY:DMVVE、VPTRL:SPIS:LKYHY:DMVVE、APVKT:SPIS:LKYHY:MIVEE、VPQAL:SPIS:LKYHY:MIVRS、VSQDL:SPIS:LKYHY:MIVKS、VPQDL:SPIS:LKYHY:MVVKS、VPTEE:SPIS:LKYHY:FLQHN、VPTGQ:SPIS:LKYHY:LEEHS、SRVHH:SPIS:LKYHY:RLEEH、TQVQL:SPIS:LKYHY:TLEDH、VPTEL:EPIS:KFKYE:DMAVS、VPTKM:EPIS:KFKYE:NMAVS、VPTEL:EPIS:KFKYE:EMAVS、VPTKL:EPIS:KFKYE:NMAVS、VPTQL:EPIS:KFKYE:NMAVS、VPTKL:EPIS:KFKYE:EGMSAVS、VPTKM:EPIS:KFKYE:GMAVS、VPTRL:EPIS:KFKYE:DMAVS、VPTKT:EPIS:KFKYE:MIAVS、VPTAL:EPIS:KFKYE:MIAVS、VPTDL:EPIS:KFKYE:MIAVS、VPTDL:EPIS:KFKYE:MVAVS、VPTEL:EPIS:KFKYE:DMVVE、VPEKM:EPIS:KFKYE:NMTVE、VPTEL:EPIS:KFKYE:EMVVE、APTKL:EPIS:KFKYE:NMVVR、APTQL:EPIS:KFKYE:NMVVR、APTKL:EPIS:KFKYE:NMVVK、VPTKL:EPIS:KFKYE:EGMSVAE、TPTKM:EPIS:KFKYE:GMVVD、VPARL:EPIS:KFKYE:DMVVE、VPTRL:EPIS:KFKYE:DMVVE、APVKT:EPIS:KFKYE:MIVEE、VPQAL:EPIS:KFKYE:MIVRS、VSQDL:EPIS:KFKYE:MIVKS、VPQDL:EPIS:KFKYE:MVVKS、VPTEE:EPIS:KFKYE:FLQHN、VPTGQ:EPIS:KFKYE:LEEHS、SRVHH:EPIS:KFKYE:RLEEH、TQVQL:EPIS:KFKYE:TLEDH、TPTEL:SPIN:YGKIP:DMVVD、TPTKM:SPIN:YGKIP:NMVVD、TPTEL:SPIN:YGKIP:EMVVD、TPTKL:SPIN:YGKIP:NMVVD、TPTQL:SPIN:YGKIP:NMVVD、TPTKL:SPIN:YGKIP:EGMSVVD、TPTKL:SPIN:YGKIP:GMVVD、TPTRL:SPIN:YGKIP:DMVVD、TPTKT:SPIN:YGKIP:MIVVD、TPTAL:SPIN:YGKIP:MIVVD、TPTDL:SPIN:YGKIP:MIVVD、TPTDL:SPIN:YGKIP:MVVVD、VPTEL:SPIN:YGKIP:DMVVE、VPEKM:SPIN:YGKIP:NMTVE、VPTEL:SPIN:YGKIP:EMVVE、APTKL:SPIN:YGKIP:NMVVR、APTQL:SPIN:YGKIP:NMVVR、APTKL:SPIN:YGKIP:NMVVK、VPTKL:SPIN:YGKIP:EGMSVAE、VPTKL:SPIN:YGKIP:GMAVS、VPARL:SPIN:YGKIP:DMVVE、VPTRL:SPIN:YGKIP:DMVVE、APVKT:SPIN:YGKIP:MIVEE、VPQAL:SPIN:YGKIP:MIVRS、VSQDL:SPIN:YGKIP:MIVKS、VPQDL:SPIN:YGKIP:MVVKS、VPTEE:SPIN:YGKIP:FLQHN、VPTGQ:SPIN:YGKIP:LEEHS、SRVHH:SPIN:YGKIP:RLEEH、TQVQL:SPIN:YGKIP:TLEDH、VPAEL:SPIS:YKQYE:DMVVE、VPAKM:SPIS:YKQYE:NMVVE、VPAEL:SPIS:YKQYE:EMVVE、VPAKL:SPIS:YKQYE:NMVVE、VPAQL:SPIS:YKQYE:NMVVE、VPAKL:SPIS:YKQYE:EGMSVVE、VPAKL:SPIS:YKQYE:GMVVE、VPAKM:SPIS:YKQYE:GMVVE、VPARL:SPIS:YKQYE:DMVVE、VPAKT:SPIS:YKQYE:MIVVE、VPAAL:SPIS:YKQYE:MIVVE、VPADL:SPIS:YKQYE:MIVVE、VPADL:SPIS:YKQYE:MVVVE、VPTEL:SPIS
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- 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PEP7:PEP3:PEP1:PEP2:PEP4:PEP8の6つ組は、GIPEPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXAXR、HVTKPTX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、YVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、TVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXH、AVPKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XGXR、KASKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:EXGXR、GSAGPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:RXGXS、AAPASXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXR、HVPKPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:SXGXH、RVPSTXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XGXL、ASAAPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XKXS、ASASPXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VVE:XKXS、GIPEPXX:VPE:SAIS:LKNYQ:TVE:SXAXR、HVTKPTX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:AXGXH、AVPKAXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SAIS:LKNYQ:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SAIS:LKNYQ:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SAIS:LKNYQ:VVE:AXGXR、HVPKPXX:APT:SAIS:LKNYQ:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SAIS:LKNYQ:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SAIS:LKNYQ:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SAIS:LKNYQ:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SAIS:LKNYQ:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SAIS:LKNYQ:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SAIS:LKNYQ:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SAIS:LKNYQ:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SAIS:LKNYQ:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:GXGXR、SIPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:GXGXR、HVTKPTX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、YVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、TVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXH、AVPKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXH、KVGKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XGXR、KASKAXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:EXGXR、GSAGPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:RXGXS、AAPASXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:AXGXR、STPPTXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXR、HVPKPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:SXGXH、RVPSTXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XGXL、ASAAPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XKXS、ASASPXX:VPE:SSLS:LKVYP:TVE:XKXS、KIPKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:GXGXR、SIPKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:AXGXH、AVPKAXX:APT:SSLS:LKVYP:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SSLS:LKVYP:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SSLS:LKVYP:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SSLS:LKVYP:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SSLS:LKVYP:VVE:SXGXR、HVPKPXX:APT:SSLS:LKVYP:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SSLS:LKVYP:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SSLS:LKVYP:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SSLS:LKVYP:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SSLS:LKVYP:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SSLS:LKVYP:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SSLS:LKVYP:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SSLS:LKVYP:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SSLS:LKVYP:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:GXGXR、GIPEPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:SXAXR、SIPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:GXGXR、AVPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:AXGXH、KVGKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XGXR、KASKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:EXGXR、GSAGPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:RXGXS、AAPASXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:AXGXR、STPPTXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:SXGXR、RVPSTXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XGXL、ASAAPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XKXS、ASASPXX:APT:NAIS:LKKYR:VVR:XKXS、KIPKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:NAIS:LKKYR:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:GXGXR、AVPKAXX:APT:NAIS:LKKYR:VVK:AXGXH、KVGKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:NAIS:LKKYR:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:NAIS:LKKYR:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:NAIS:LKKYR:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:NAIS:LKKYR:VVE:SXGXR、RVPSTXX:APV:NAIS:LKKYR:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:NAIS:LKKYR:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:NAIS:LKKYR:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:NAIS:LKKYR:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:NAIS:LKKYR:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:NAIS:LKKYR:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:NAIS:LKKYR:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:NAIS:LKKYR:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:GXGXR、GIPEPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXAXR、SIPKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:GXGXR、HVTKPTX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、YVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、TVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:AXGXH、KVGKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XGXR、KASKAXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:EXGXR、GSAGPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:RXGXS、AAPASXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:AXGXR、STPPTXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXR、HVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:SXGXH、RVPSTXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XGXL、ASAAPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XKXS、ASASPXX:APT:SATS:LRKHR:VVK:XKXS、KIPKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:SATS:LRKHR:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:AXGXH、KVGKAXX:VPT:SATS:LRKHR:VAE:XGXR、KASKAXX:VPT:SATS:LRKHR:AVS:EXGXR、GSAGPXX:TPT:SATS:LRKHR:VVD:RXGXS、AAPASXX:VPA:SATS:LRKHR:VVE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SATS:LRKHR:VVE:SXGXR、HVPKPXX:APT:SATS:LRKHR:VVR:SXGXH、RVPSTXX:APV:SATS:LRKHR:VEE:XGXL、ASAAPXX:VPQ:SATS:LRKHR:VRS:XKXS、ASASPXX:VSQ:SATS:LRKHR:VKS:XKXS、ASASPXX:VPQ:SATS:LRKHR:VKS:XKXS、NDEGLEX:VPT:SATS:LRKHR:QHN:KXEXR、NDEGLEX:VPT:SATS:LRKHR:EHS:QXEXR、SSVKXQP:SRV:SATS:LRKHR:EEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQV:SATS:LRKHR:EDH:LAXKXE、KIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:GXGXR、GIPEPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:GXGXR、HVTKPTX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、YVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、TVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXH、AVPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXH、KASKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:EXGXR、GSAGPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:RXGXS、AAPASXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:AXGXR、STPPTXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXR、HVPKPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:SXGXH、RVPSTXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XGXL、ASAAPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XKXS、ASASPXX:VPT:SPIS:LKYHY:VAE:XKXS、KIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VVE:GXGXR、GIPEPXX:VPE:SPIS:LKYHY:TVE:SXAXR、SIPKAXX:VPT:SPIS:LKYHY:VVE:GXGXR、HVTKPTX:APT:SPIS:LKYHY:VVR:SXGXH、YVPKPXX:APT:SPIS:LKYHY:VVR:SXGXH、TVPKPXX:APT:S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PEP7:PEP5:PEP1:PEP2:PEP6:PEP8の6つ組は、GIPEPXX:VPTKM:SAIS:LKNYQ:NMVVE:SXAXR、HVTKPTX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVE:SXGXH、YVPKPXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVE:SXGXH、TVPKPXX:VPTQL:SAIS:LKNYQ:NMVVE:AXGXH、AVPKAXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVE:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:EGMSVVE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:GMVVE:EXGXR、GSAGPXX:VPTKM:SAIS:LKNYQ:GMVVE:RXGXS、AAPASXX:VPTRL:SAIS:LKNYQ:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SAIS:LKNYQ:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVE:SXGXH、RVPSTXX:VPTKT:SAIS:LKNYQ:MIVVE:XGXL、ASAAPXX:VPTAL:SAIS:LKNYQ:MIVVE:XKXS、ASASPXX:VPTDL:SAIS:LKNYQ:MIVVE:XKXS、ASASPXX:VPTDL:SAIS:LKNYQ:MVVVE:XKXS、GIPEPXX:VPEKM:SAIS:LKNYQ:NMTVE:SXAXR、HVTKPTX:APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SAIS:LKNYQ:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SAIS:LKNYQ:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SAIS:LKNYQ:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SAIS:LKNYQ:DMVVE:AXGXR、HVPKPXX:APTKL:SAIS:LKNYQ:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SAIS:LKNYQ:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SAIS:LKNYQ:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SAIS:LKNYQ:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SAIS:LKNYQ:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:SAIS:LKNYQ:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:SAIS:LKNYQ:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SAIS:LKNYQ:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SAIS:LKNYQ:TLEDH:LAXKXE、KIPKAXX:VPEEL:SSLS:LKVYP:DMTVE:GXGXR、SIPKAXX:VPEEL:SSLS:LKVYP:EMTVE:GXGXR、HVTKPTX:VPEKL:SSLS:LKVYP:NMTVE:SXGXH、YVPKPXX:VPEKL:SSLS:LKVYP:NMTVE:SXGXH、TVPKPXX:VPEQL:SSLS:LKVYP:NMTVE:AXGXH、AVPKAXX:VPEKL:SSLS:LKVYP:NMTVE:AXGXH、KVGKAXX:VPEKL:SSLS:LKVYP:EGMSTVE:XGXR、KASKAXX:VPEKL:SSLS:LKVYP:GMTVE:EXGXR、GSAGPXX:VPEKM:SSLS:LKVYP:GMTVE:RXGXS、AAPASXX:VPERL:SSLS:LKVYP:DMTVE:AXGXR、STPPTXX:VPERL:SSLS:LKVYP:DMTVE:SXGXR、HVPKPXX:VPEKL:SSLS:LKVYP:NMTVE:SXGXH、RVPSTXX:VPEKT:SSLS:LKVYP:MITVE:XGXL、ASAAPXX:VPEAL:SSLS:LKVYP:MITVE:XKXS、ASASPXX:VPEDL:SSLS:LKVYP:MITVE:XKXS、ASASPXX:VPEDL:SSLS:LKVYP:MVTVE:XKXS、KIPKAXX:VPTEL:SSLS:LKVYP:DMVVE:GXGXR、SIPKAXX:VPTEL:SSLS:LKVYP:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SSLS:LKVYP:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SSLS:LKVYP:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SSLS:LKVYP:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SSLS:LKVYP:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SSLS:LKVYP:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SSLS:LKVYP:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SSLS:LKVYP:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SSLS:LKVYP:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SSLS:LKVYP:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SSLS:LKVYP:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SSLS:LKVYP:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:SSLS:LKVYP:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:SSLS:LKVYP:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SSLS:LKVYP:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SSLS:LKVYP:TLEDH:LAXKXE、KIPKAXX:APTEL:NAIS:LKKYR:DMVVR:GXGXR、GIPEPXX:APTKM:NAIS:LKKYR:NMVVR:SXAXR、SIPKAXX:APTEL:NAIS:LKKYR:EMVVR:GXGXR、AVPKAXX:APTKL:NAIS:LKKYR:NMVVR:AXGXH、KVGKAXX:APTKL:NAIS:LKKYR:EGMSVVR:XGXR、KASKAXX:APTKL:NAIS:LKKYR:GMVVR:EXGXR、GSAGPXX:APTKM:NAIS:LKKYR:GMVVR:RXGXS、AAPASXX:APTRL:NAIS:LKKYR:DMVVR:AXGXR、STPPTXX:APTRL:NAIS:LKKYR:DMVVR:SXGXR、RVPSTXX:APTKT:NAIS:LKKYR:MIVVR:XGXL、ASAAPXX:APTAL:NAIS:LKKYR:MIVVR:XKXS、ASASPXX:APTDL:NAIS:LKKYR:MIVVR:XKXS、ASASPXX:APTDL:NAIS:LKKYR:MVVVR:XKXS、KIPKAXX:VPTEL:NAIS:LKKYR:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:NAIS:LKKYR:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:NAIS:LKKYR:EMVVE:GXGXR、AVPKAXX:APTKL:NAIS:LKKYR:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:NAIS:LKKYR:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:NAIS:LKKYR:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:NAIS:LKKYR:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:NAIS:LKKYR:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:NAIS:LKKYR:DMVVE:SXGXR、RVPSTXX:APVKT:NAIS:LKKYR:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:NAIS:LKKYR:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:NAIS:LKKYR:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:NAIS:LKKYR:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:NAIS:LKKYR:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:NAIS:LKKYR:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:NAIS:LKKYR:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:NAIS:LKKYR:TLEDH:LAXKXE、KIPKAXX:APTEL:SATS:LRKHR:DMVVK:GXGXR、GIPEPXX:APTKM:SATS:LRKHR:NMVVK:SXAXR、SIPKAXX:APTEL:SATS:LRKHR:EMVVK:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVK:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVK:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SATS:LRKHR:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:APTKL:SATS:LRKHR:EGMSVVK:XGXR、KASKAXX:APTKL:SATS:LRKHR:GMVVK:EXGXR、GSAGPXX:APTKM:SATS:LRKHR:GMVVK:RXGXS、AAPASXX:APTRL:SATS:LRKHR:DMVVK:AXGXR、STPPTXX:APTRL:SATS:LRKHR:DMVVK:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVK:SXGXH、RVPSTXX:APTKT:SATS:LRKHR:MIVVK:XGXL、ASAAPXX:APTAL:SATS:LRKHR:MIVVK:XKXS、ASASPXX:APTDL:SATS:LRKHR:MIVVK:XKXS、ASASPXX:APTDL:SATS:LRKHR:MVVVK:XKXS、KIPKAXX:VPTEL:SATS:LRKHR:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:SATS:LRKHR:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:SATS:LRKHR:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SATS:LRKHR:NMVVR:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SATS:LRKHR:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SATS:LRKHR:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SATS:LRKHR:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SATS:LRKHR:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SATS:LRKHR:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SATS:LRKHR:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SATS:LRKHR:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SATS:LRKHR:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SATS:LRKHR:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SATS:LRKHR:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:SATS:LRKHR:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:SATS:LRKHR:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SATS:LRKHR:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SATS:LRKHR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PLT:EQLSN:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:EPLT:EQLSN:MIVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTGQ:SNIT:IGEMS:LEQHN:QXEXR、KIPKAXX:VPTEL:SNIT:IGEMS:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:SNIT:IGEMS:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:SNIT:IGEMS:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SNIT:IGEMS:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SNIT:IGEMS:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SNIT:IGEMS:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:SNIT:IGEMS:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SNIT:IGEMS:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SNIT:IGEMS:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SNIT:IGEMS:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SNIT:IGEMS:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SNIT:IGEMS:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SNIT:IGEMS:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SNIT:IGEMS:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SNIT:IGEMS:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SNIT:IGEMS:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SNIT:IGEMS:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTGQ:SNIT:IGEMS:LEEHS:QXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SNIT:IGEMS:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SNIT:IGEMS:TLEDH:LAXKXE、NDEGLEX:VPTEE:SNIT:LGEMS:FLEHS:KXEXR、KIPKAXX:VPTEL:SNIT:LGEMS:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:SNIT:LGEMS:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:SNIT:LGEMS:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:SNIT:LGEMS:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:SNIT:LGEMS:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:SNIT:LGEMS:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:SNIT:LGEMS:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:SNIT:LGEMS:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:SNIT:LGEMS:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:SNIT:LGEMS:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:SNIT:LGEMS:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:SNIT:LGEMS:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:SNIT:LGEMS:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:SNIT:LGEMS:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:SNIT:LGEMS:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:SNIT:LGEMS:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:SNIT:LGEMS:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:SNIT:LGEMS:FLQHN:KXEXR、SSVKXQP:SRVHH:SNIT:LGEMS:RLEEH:LEXAXA、RNVQXRP:TQVQL:SNIT:LGEMS:TLEDH:LAXKXE、RNVQXRP:SRVQL:RSVK:KEVQV:TLEEH:LAXKXE、KIPKAXX:VPTEL:RSVK:KEVQV:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:RSVK:KEVQV:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:RSVK:KEVQV:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:RSVK:KEVQV:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:RSVK:KEVQV:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:RSVK:KEVQV:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:RSVK:KEVQV:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:RSVK:KEVQV:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:RSVK:KEVQV:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:RSVK:KEVQV:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:RSVK:KEVQV:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:RSVK:KEVQV:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:RSVK:KEVQV:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:RSVK:KEVQV:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:RSVK:KEVQV:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:RSVK:KEVQV:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:RSVK:KEVQV:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:RSVK:KEVQV:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:RSVK:KEVQV:LEEHS:QXEXR、RNVQXRP:TQVQL:RSVK:KEVQV:TLEDH:LAXKXE、SSVKXQP:TQVHH:RPVQ:KKATV:RLEDH:LEXAXA、KIPKAXX:VPTEL:RPVQ:KKATV:DMVVE:GXGXR、GIPEPXX:VPEKM:RPVQ:KKATV:NMTVE:SXAXR、SIPKAXX:VPTEL:RPVQ:KKATV:EMVVE:GXGXR、HVTKPTX:APTKL:RPVQ:KKATV:NMVVR:SXGXH、YVPKPXX:APTKL:RPVQ:KKATV:NMVVR:SXGXH、TVPKPXX:APTQL:RPVQ:KKATV:NMVVR:AXGXH、AVPKAXX:APTKL:RPVQ:KKATV:NMVVK:AXGXH、KVGKAXX:VPTKL:RPVQ:KKATV:EGMSVAE:XGXR、KASKAXX:VPTKL:RPVQ:KKATV:GMAVS:EXGXR、GSAGPXX:TPTKM:RPVQ:KKATV:GMVVD:RXGXS、AAPASXX:VPARL:RPVQ:KKATV:DMVVE:AXGXR、STPPTXX:VPTRL:RPVQ:KKATV:DMVVE:SXGXR、HVPKPXX:APTKL:RPVQ:KKATV:NMVVR:SXGXH、RVPSTXX:APVKT:RPVQ:KKATV:MIVEE:XGXL、ASAAPXX:VPQAL:RPVQ:KKATV:MIVRS:XKXS、ASASPXX:VSQDL:RPVQ:KKATV:MIVKS:XKXS、ASASPXX:VPQDL:RPVQ:KKATV:MVVKS:XKXS、NDEGLEX:VPTEE:RPVQ:KKATV:FLQHN:KXEXR、NDEGLEX:VPTGQ:RPVQ:KKATV:LEEHS:QXEXR、及びSSVKXQP:SRVHH:RPVQ:KKATV:RLEEH:LEXAXAからなる群より選択される、請求項4〜88のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。 - 前記成長因子受容体結合化合物は、少なくとも1種の生理活性担体親和性基を含み、該少なくとも1種の生理活性担体親和性基によって、前記成長因子受容体結合化合物は、生理活性担体と共有結合的又は非共有結合的に相互作用できるようになる、請求項1〜89のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記生理活性担体親和性基は、生体材料親和性基である、請求項90に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記生体材料親和性基は、生体材料と少なくとも1つの共有結合を形成するように適合されている、請求項91に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記生体材料親和性基は、生体材料と少なくとも1つの非共有結合を形成するように適合されている、請求項91に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記生体材料親和性基は、チオール含有基である、請求項92に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記チオール含有基は、システイン含有基である、請求項94に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記生体材料親和性基は、Phe、Trp、及びTyrのうち1つ以上を含む3〜25個のアミノ酸を有するペプチドである、請求項93に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ25〜60個のアミノ酸を有するペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1、2、及び4〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、25〜50個のアミノ酸を有するペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1、2、及び4〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、25〜45個のアミノ酸を有するペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1、2、及び4〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有するペプチド模倣体であり、該ペプチド模倣体は、分子量が2,000〜8,000ダルトンである、請求項1、2、及び4〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有するペプチド模倣体であり、該ペプチド模倣体は、分子量が2,000〜6,000ダルトンである、請求項1、2、及び4〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- PEPREFに対する前記ペプチド模倣体の原子構造座標のRMSDが2.45Å(オングストローム)以下である、請求項102又は103に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ20〜50個のアミノ酸を含むペプチド模倣体である、請求項102〜104のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ20〜45個のアミノ酸を含むペプチド模倣体である、請求項102〜104のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ23〜60個のアミノ酸を含むペプチド模倣体である、請求項102〜104のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ23〜50個のアミノ酸を含むペプチド模倣体である、請求項102〜104のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、成長因子受容体結合能を有し且つ23〜45個のアミノ酸を含むペプチド模倣体である、請求項102〜104のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5〜20個のアミノ酸を有するペプチド断片を少なくとも1つ含むペプチド模倣体である、請求項102〜109のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5〜20個のアミノ酸を有するペプチド断片を少なくとも2つ含むペプチド模倣体である、請求項102〜109のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、15〜60個のアミノ酸を有し且つ成長因子受容体結合能を有する環状ペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、15〜55個のアミノ酸を有する環状ペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、19〜60個のアミノ酸を有する環状ペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、19〜55個のアミノ酸を有する環状ペプチド、又はその変異体若しくは類似体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、15〜60個のアミノ酸を含み且つ成長因子受容体結合能を有する環状ペプチド模倣体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、15〜55個のアミノ酸を含む環状ペプチド模倣体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、19〜60個のアミノ酸を含む環状ペプチド模倣体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、19〜55個のアミノ酸を含む環状ペプチド模倣体である、請求項1及び3〜97のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5〜20個のアミノ酸を有するペプチド断片を少なくとも1つ含む環状ペプチド模倣体である、請求項116〜119のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、5〜20個のアミノ酸を有するペプチド断片を少なくとも2つ含む環状ペプチド模倣体である、請求項116〜119のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、分子量が6,000ダルトン未満の環状ペプチド、その変異体若しくは類似体、又は環状ペプチド模倣体である、請求項1、3〜97、及び112〜121のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、分子量が1,500〜7,000ダルトンの環状ペプチド、その変異体若しくは類似体、又は環状ペプチド模倣体である、請求項1、3〜97、及び112〜121のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、分子量が1,500〜6,000ダルトンの環状ペプチド、その変異体若しくは類似体、又は環状ペプチド模倣体である、請求項1、3〜97、及び112〜121のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記成長因子受容体結合化合物は、配列番号1〜100330のペプチドのいずれか1つからなる群より選択される、請求項1〜124のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 前記連合体は局所投与される、請求項1〜125のいずれか1項に記載の使用のための医薬的連合体。
- 請求項1〜126のいずれか1項に記載の少なくとも1種の医薬的連合体と、少なくとも1種の医学的に許容される賦形剤、担体、又は増量剤とを含む、腫瘍性疾患の治療、予防、及び/又は診断に使用するための医療組成物。
- 少なくとも1種の他の抗がん剤を更に含む、請求項127に記載の医療組成物。
- 生理活性担体と連合した後に腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換できる成長因子受容体結合化合物を選択するためのスクリーニング方法。
- PEPREFの3次元構造座標の分子モデルを作成する工程と、RMSDが2.45Å以下である類似体候補を同定する工程とを有する請求項129に記載のスクリーニング方法。
- 生理活性担体と連合した後に腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換できる成長因子受容体結合化合物を製造する方法であって、
(a)PEPREFの3次元構造座標の分子モデルを作成する工程と、
(b)RMSDが2.45Å以下である類似体候補を同定する工程と、
(c)工程(b)で同定した類似体候補を製造する工程と
を有する方法。 - 前記工程(c)で製造した化合物が腫瘍細胞再コード化活性を有するかどうか決定する工程を更に有する、請求項131に記載の成長因子受容体結合化合物を製造する方法。
- 前記工程(a)及び(b)は、電子プロセッサを用いて実施する、請求項131又は132に記載の成長因子受容体結合化合物を製造する方法。
- 前記工程(a)は、PEPREFの前記原子座標の表示をコンピュータメモリに保存する工程を有する、請求項131〜133のいずれか1項に記載の成長因子受容体結合化合物を製造する方法。
- 腫瘍性疾患薬を製造するプロセスであって、いずれも請求項1〜125のいずれか1項で定義される生理活性担体及び成長因子受容体結合化合物を調製する工程を有し、
該生理活性担体及び成長因子受容体結合化合物の調製により、前記腫瘍性疾患薬を製造するプロセス。 - 腫瘍性疾患薬前駆体を製造するプロセスであって、いずれも請求項1〜125のいずれか1項で定義される成長因子受容体結合化合物又は生理活性担体を調製する工程を有し、
該生理活性担体又は成長因子受容体結合化合物の調製により、前記腫瘍性疾患薬前駆体を製造するプロセス。 - インビトロ又はエクスビボで腫瘍細胞を非腫瘍細胞に変換する方法であって、請求項1〜128のいずれか1項で定義される医薬的連合体又は組成物を腫瘍細胞に有効量投与する工程を有する方法。
- いずれも請求項1〜125のいずれか1項で定義される少なくとも1種の生理活性担体及び少なくとも1種の成長因子受容体結合化合物を含む、腫瘍性疾患の治療、予防、及び/又は診断に使用するためのパーツキット(kit−of−parts)。
- 腫瘍性疾患、特にがんの治療又は予防のための医療組成物の調製のための請求項1〜126のいずれか1項で定義される医薬的連合体の使用。
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