JP2018523837A - 固体電極、その製造方法、及び感知におけるその使用方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2015年8月14日に出願された米国仮特許出願第62/205,380号、2015年11月12日に出願された米国仮特許出願第62/254,402号、2016年2月3日に出願された米国仮特許出願第62/290,501号、及び2016年4月14日に出願された米国仮特許出願第62/322,273号の優先権を主張し、これらの各内容は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
表面の少なくとも一部にコーティングされたナノ複合材料とを備え、ナノ複合材料は、
電極において使用されている金属の化合物と、ナノ粒子、タンパク質、ポリマ、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせとを含み、固体電極が作用電極及び導電性物質と電気的に接続すると、固体電極は、導電性物質の化学組成の変化を検出でき、固体電極の電位は安定する。一実施形態では、固体電極の電位は、20分間に亘って、5ミリボルト以内、好ましくは3ミリボルト以内で安定する。一例として、1mV、又は0.5mV、又は0.1mV/分の電位変化が一定期間に亘って安定する。一実施形態では、0.1mV/分以下の電位変化が20分以上に亘って安定する。一実施形態では、0.1mV/分以下の電位変化が30分以上に亘って安定する。一実施形態では、システムは、本明細書で更に説明するように、生体認識要素による電流測定による検出を使用する。
現在、腎機能は、カリウム、塩化物、炭酸塩、及びナトリウム等を含む幾つかのバイオマーカを測定する血液採取によって判定されている。これらのバイオマーカは、ここに開示するセンサによって、汗から検出でき、低コストの用途で使用でき、様々な患者、特に重要な患者として、腎臓病及び心臓病患者、並びに透析患者又は移植を受けた患者について、腎機能を継続的に追跡し、これらの個々のニーズに応じて、透析量、投薬量、その他の治療量を調整でき、並びに、腎疾患、腎不全、脳卒中又は心臓事象の前又は間の状態の早期診断を提供できる。
汗は、アンチドーピング試験のための理想的な体液である。人間が1日で汗をかく量は、300〜700mLである。多くの違法物質は、定量化可能な量で、汗から排泄されると報告されており、ここに記載されているセンサで測定できる物質は、アヘン剤、ブプレノルフィン、アンフェタミン、ガンマヒドロキシブチラート、エタノール、及びコカイン等を含む。多くの薬物の検出期間は、尿中では、僅か2〜3日であるが、これらの薬物は、汗中で数週間検出できる。更に、これらの分析物は、汗中で時間の関数として測定できる。例えば、時間の関数として測定された汗中のエタノール濃度を使用して、アルコール摂取及び吸収レベルを分析できる。
多くの有毒な金属及び物質が発汗によって排泄される。これらの金属の多くは、体内の異種代謝物(陽イオン又は塩)に変換され、続いて汗に可溶化する。幾つかの金属(例えば、カドミウム及び鉛)の排泄された汗濃度は、尿に匹敵することがあり、したがって、汗は、尿検査の代替として使用できる。ここに記述するセンサは、金属イオンを検出できるので、鉛、水銀、カドミウム、並びに他の毒性物質、例えば、シアン化物、及び他の毒性物質を検出するように適合化できる。
汗腺は、腎臓及び肺のように、薬物やその代謝産物のための排泄器官として機能する。多くの薬物は、塩基性のpKaを有し、汗の酸性度が高いために、血中よりも汗中に蓄積することが知られている。汗中の薬物の濃度は、投与過剰、投与不足、並びに過剰摂取、薬物挙動及び効果等の投与量情報を決定するために使用できる。これは、臨床試験、薬物動態学、法医学、及び薬物試験における用途を有する。
糖尿病マーカは、汗中に存在することが知られており、これは、汗の組成及び汗のグルコースと血糖値との間の相関関係を含む。幾つかの研究によって、肺癌患者の汗代謝産物と健康な被験者の汗代謝産物との間に差異があることが観察されている。デルマシジン(DCD)、47のアミノ酸を含むペプチド及びプロラクチン誘発性タンパク質(PIP)は、汗内に存在する予後マーカとして使用できることが知られている。DCDは、腫瘍形成における細胞増殖を促進し、浸潤性乳癌及びリンパ節転移の存在下で過剰発現することが知られている。PIPは、転移性乳癌及び前立腺癌において過剰発現されることが知られている。汗中の他の予後バイオマーカは、統合失調症及び嚢胞性線維症の診断に使用され、近年では、パーキンソン病とも関連付けられている。
[物理的堆積]
固体電極を準備するための物理的堆積プロセスは、包括的に以下のステップを含む。金属電極において使用されている金属の化合物と共にナノ粒子を金属電極表面上に堆積させ、固体電極を形成する。ナノ粒子を化学的に修飾して表面電荷を減少させ、次に、金属電極において使用されている金属の化合物と共にナノ粒子を金属電極表面上に堆積させ、固体電極を形成する。そして、タンパク質、強く接着するタンパク質、1種以上のポリマ、例えば、アミロイド型ナノフィブリル、又はPVBを付着させて、拡散障壁として作用させる。幾つかの実施形態では、タンパク質、及びナノ粒子、例えば、二酸化チタン(TiO2)ナノ粒子のナノ複合材料を使用して、固体電極を保護できる。例えば、土壌サンプル等、幾つかのサンプル媒体又はデバイスの設定によって、又はセンサが摩擦に晒され若しくは外部表面と直接接触して配置される場合、センサが摩耗することがあるため、タンパク質及びナノ粒子の「強靭な」ナノ複合材料で固体電極を保護することが望ましい場合がある。この保護がなければ、例えば、土壌粒子又は摩擦によって、固体電極が侵食されることがある。固体電極浸食は、そのデバイスが、浸食されない固体電極ほどの耐久性を有さないことを意味する。固体電極の保護は、例えば、薬物懸濁液及び環境水サンプル等、電極を損傷するおそれがある粒子を含む可能性がある他の分析物に対しても使用できる。センサを摩耗させる性質がある土壌のpH検出の場合、イガイ接着タンパク質等のタンパク質、及び二酸化チタン(TiO2)ナノ粒子等のナノ粒子のナノ複合材料を使用して固体電極を保護できる。このような保護がなければ、土壌粒子が固体電極を侵食する可能性がある。固体電極浸食は、そのデバイスが、浸食されない固体電極ほどの耐久性を有さないことを意味する。
電気化学的堆積
上に概説した方法によって生成された固体電極は、顕微鏡イメージング及び分光法を用いて特徴付けられる。イメージングのための顕微鏡技術には、原子間力顕微鏡(atomic force microscopy:AFM)及び走査型電子顕微鏡(scanning electron microscopy:SEM)が含まれる。AFMは、2ナノメートルほどの小さい構造の画像を提供する。AFMイメージングの詳細は、堆積中に生成される非常に小さなナノ複合材料に関する情報を提供する。一方、SEMは、生成されるマイクロサイズの構造体及びナノ構造体の分布に関する情報を提供する。分光法は、固体電極の表面上にある化学基を同定するために使用される。電極に取り付けられた材料は、既知であるが、堆積中に化学変化が起こる可能性があり、この結果、これらの材料の化学的性質が変化することがある。分光技術には、赤外分光法(infra-red spectroscopy:IR)、X線光電子分光法(x-ray photoelectron spectroscopy:XPS)、ラマン分光法、及び蛍光分光法が含まれる。
ここに記述する固体電極は、バイオセンサに使用できる。バイオセンサの有用性に影響を及ぼす幾つかの要因には、安定性、感度/分解能、流体輸送、生体適合性材料、使用期間、耐久性、外部の影響要因に対する耐性、及び製造可能性等が含まれる。
実施形態1:固体参照電極であって、表面を有する金属電極と、表面の少なくとも一部にコーティングされたナノ複合材料とを備え、ナノ複合材料は、電極において使用されている金属の化合物と、ナノ粒子、タンパク質、ポリマ、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせとを含み、固体参照電極が作用電極及び導電性物質と電気的に接続すると、電極は、分析物の変化を検出でき、電極の電位は、20分間に亘って、5ミリボルト以内、例えば、3ミリボルト以内で安定する。
Claims (37)
- 固体電極において、
表面を有する金属電極と、
前記表面の少なくとも一部にコーティングされたナノ複合材料とを備え、前記ナノ複合材料は、
前記電極において使用されている金属の化合物と、
ナノ粒子、タンパク質、ポリマ、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせとを含み、
前記固体電極が作用電極及び導電性物質と電気的に接続すると、前記固体電極は、前記導電性物質の化学組成の変化を検出でき、前記固体電極の電位は、20分間に亘って、5ミリボルト、好ましくは、3ミリボルト以内で安定する固体電極。 - 請求項1において、前記導電性物質は、流体、金属、材料又はゲルである固体電極。
- 請求項1において、前記金属電極と流体連通する流体を更に備え、前記流体は、体液である固体電極。
- 請求項1において、前記固体電極は、0.5pH単位以下、一実施形態では0.1pH単位以下のpHの変化を検出できる固体電極。
- 請求項1において、前記ナノ粒子は、カーボンナノ粒子又は金属ナノ粒子である固体電極。
- 請求項1において、前記ナノ粒子は、修飾されており、アミン基とチオール基とを含む疎水性化合物が前記ナノ粒子に共有結合している固体電極。
- 請求項6において、前記疎水性化合物は、4−アミノチオフェノール又は5−アミノ−2−メルカプトベンズイミダゾールである固体電極。
- 請求項1において、前記ナノ粒子は、20ナノメートル以下の平均直径を有する固体電極。
- 固体電極を製造する方法において、
表面を有する金属電極を準備することと、
前記電極において使用されている金属の化合物と、ナノ粒子、タンパク質、ポリマ、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせとを含むナノ複合材料を前記電極表面の少なくとも一部に付着させることとを含む方法。 - 請求項9において、前記付着は、物理的堆積又は電気化学的堆積である方法。
- 請求項9において、
酸溶液中で前記表面に電圧を印加して、前記電極において使用されている金属の化合物を含むコーティングされた表面を形成することと、
前記電極において使用されている金属の化合物を含むコーティングされた表面上にナノ複合材料を電気化学的に堆積させることとを更に含む方法。 - 請求項9において、前記ナノ複合材料は、カーボンナノ粒子を含む方法。
- 請求項9において、前記ナノ複合材料は、金属ナノ粒子を含む方法。
- 請求項9において、前記ナノ複合材料は、硫酸銅及びナノ粒子を含む方法。
- 請求項9において、前記ナノ複合材料は、塩化水銀及びナノ粒子を含む方法。
- 請求項9において、ナノ複合材料は、塩化銀及びナノ粒子を含む方法。
- 請求項9において、前記付着は、
前記表面に塩化カリウム及びナノ粒子の水溶液を接触させることと、
前記表面に電圧を印加して、前記金属電極において使用されている金属の化合物−ナノ粒子複合材料によってコーティングされた表面を形成することとを含む方法。 - 請求項9において、前記ナノ複合材料は、ナノ粒子を含み、前記付着は、
溶液内で前記ナノ粒子を酸化剤と混合し、酸化剤及びナノ粒子の溶液を形成することと、
前記表面に前記酸化剤及びナノ粒子の溶液を塗布し、前記金属電極において使用されている金属の化合物−ナノ粒子複合材料を堆積させることとを含む方法。 - 請求項9において、前記ナノ複合材料は、接着タンパク質及びナノ粒子を含み、前記方法は、更に、前記表面に前記ナノ複合材料を付着させる前に、前記接着タンパク質及びナノ粒子を酸化剤と混合することを含む方法。
- 請求項9において、前記ナノ粒子は、修飾されたナノ粒子であり、アミン基とチオール基とを含む疎水性化合物が前記ナノ粒子に共有結合している方法。
- 導電性物質のパラメータを判定するためのバイオセンサであって、
上面及び底面を有する基板と、
前記基板の上面に配置され、膜、選択膜、イオン選択膜又は金属酸化物を含む作用電極と、
前記基板の表面に配置され、請求項1に記載の固体電極を含む参照電極とを備え、導電性物質と接触すると、前記作用電極と前記参照電極が電気的に接続されるバイオセンサ。 - 請求項21において、前記選択膜の下の前記作用電極の表面に、疎水性導電性ポリマ、疎水性金属酸化物層、ナノ粒子、又は疎水性リガンドで修飾されたナノ粒子、又はこれらの1つ以上を含む組み合わせを含む中間層がコーティングされているバイオセンサ。
- 請求項22において、前記中間層は、導電性ポリマを含むバイオセンサ。
- 請求項23において、前記導電性ポリマは、ポリ(3,4−ジエチレンジオキシチオフェン)(PEDOT)、ポリピロール、ポリアニリン、ポリチオフェン、ポリオクチルチオフェン(POT)、P3HT、ポリテトラフルオロエチレン、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせを含むバイオセンサ。
- 請求項22において、前記疎水性配位子がチオフェノール、2−ナフタレンチオール、9−アントラセンチオール、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせを含むバイオセンサ。
- 請求項21において、前記作用電極の前記膜上に生体認識要素がコーティングされているバイオセンサ。
- 請求項21において、前記膜は、分析物でインプリントされたポリマと混合される。バイオセンサ。
- 請求項21において、前記導電性物質は、体液であり、前記バイオセンサは、ヒト又は哺乳動物の皮膚に取り付けることができるバイオセンサ。
- 請求項28において、前記体液のパラメータは、H+、Na+、Mg2 +、NO3 −、K+、NH4 +、Ca2 +、Cl−、炭酸塩、重炭酸塩、タンパク質、脂質、DNA、RNA、ホルモン、エストロゲン、プロゲステロン、テストステロン、アンドロステンジオン、ベータ−ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)、コルチゾール、クレアチニン、尿素、グルコース、乳酸、酸、塩、カチオン、サイトカイン、ドーパ、ドーパミン、薬物、アヘン剤、ブプレノルフィン、アンフェタミン、ガンマヒドロキシブチラート、エタノール、コカイン、アルコール、代謝産物、異化代謝産物、ダイオキシン類、生体異物、有機化合物、マイコトキシン、金属、亜鉛、鉛、水銀、カドミウム、プタラート、ヒ素、シアン化物、BPA、環境毒素、工業用金属、毒素、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせを含むバイオセンサ。
- 請求項21において、前記導電性物質は、汗であるバイオセンサ。
- 請求項21において、前記バイオセンサの厚さは0.5〜10ミリメートルであるバイオセンサ。
- 請求項21において、1又は複数の電極上のイオン濃度を低減するためのフラッシングシステムを更に備えるバイオセンサ。
- 請求項21において、前記参照電極は、スクリーン印刷、ロールツーロール印刷、エアロゾル堆積、インクジェット印刷、薄膜堆積、又は電気メッキによって前記基板に堆積されるバイオセンサ。
- 請求項1において、前記ポリマは、強く結合するポリマ、好ましくはPVB(ポリビニルブチラール)であるバイオセンサ。
- 請求項1において、前記タンパク質は、強く結合するタンパク質であり、好ましくは接着タンパク質、イガイタンパク質、フィブリノーゲン、プロトフィラメント、アミロイドフィブリル、アミロイドナノフィブリル、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせであるバイオセンサ。
- 請求項21において、前記作用電極及び前記参照電極は、それぞれ個別に貴金属であり、好ましくは銀、金、白金、パラジウム、銅又は炭素であり、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせであるバイオセンサ。
- 請求項21において、前記参照電極において用いられる金属の化合物は、塩化水銀、塩化銀、ヨウ化銀、硫酸銅、硫酸水銀、又はこれらの少なくとも1つを含む組み合わせであるバイオセンサ。
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