JP2018515500A - スキルプシンaおよびスキルプシンbを含む組成物ならびにその抗肥満能 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、2012年7月18日に出願された仮特許出願第61672849号の非仮出願である2013年7月17日に出願された米国特許出願第13944634号の一部継続特許出願である2015年5月6日に出願された米国特許出願第14705111号のPCT出願であり、これらはいずれも参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、一般に、脂肪生成抑制のための組成物に関する。より具体的には、本発明は、スキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物ならびにその抗脂肪生成/抗肥満能を開示する。
本発明の別の目的は、スキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物を用いて哺乳動物細胞における脂肪生成を抑制する方法を開示することである。
本発明の別の目的は、スキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物を用いて哺乳動物において肥満を管理する方法を開示することである。
本発明は、前記目的をかなえ、さらに関連する利点を提供する。
別の最も好ましい実施形態において、本発明は、哺乳動物細胞において脂肪生成を抑制する方法に関し、前記方法はそれぞれSTR#1およびSTR#2で表わされるスキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物を脂肪生成性哺乳動物細胞と接触させるステップを含む。
別の最も好ましい実施形態において、本発明は、哺乳動物において脂肪生成により引き起こされる肥満を治療的に抑制する方法に関し、前記方法はそれぞれSTR#1およびSTR#2で表わされるスキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物を、前記治療的抑制を必要とする哺乳動物に食事補給するステップを含む。
別の最も好ましい実施形態において、本発明は、STR#1およびSTR#2で表わされるスキルプシンAおよびスキルプシンBを含む組成物の、哺乳動物細胞における脂肪生成を抑制するための使用に関する。
1)ハマスゲの根茎を乾燥し、これを粉砕して粗い粉末を形成する;
2)ステップ1の粉末を3容量のヘキサンで抽出し、続いて加熱還流を
3)3時間行い、ろ過してヘキサン可溶性画分および使用済材料(spent material)を得る;
4)ステップ2の使用済材料を3容量のメタノールで抽出し、続いて3時間加熱還流し、ろ過してメタノール可溶性活性画分および使用済材料を得る;
5)ステップ3のメタノール可溶性活性画分を水性メタノールに可溶化し、クロロホルム(CHCl3)、酢酸エチル(EtOAc)およびメタノールで連続して分別して、それぞれクロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層を得る;
6)クロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層をさらなる生物活性指針分画に供する、ここで生物活性パラメーターはクロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層の、3T3−L1マウス脂肪細胞(哺乳動物脂肪細胞)内での脂肪生成を抑制する能力である;
7)クロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層により示される脂肪生成抑制に対するIC50(μg/ml)値(それぞれ0、9.39および66.42)を計算する;
8)カラム分画を用いて酢酸エチル層を分画して生物活性(脂肪生成抑制)バイオマーカーを同定する、前記分画は増大する極性のメタノール:クロロホルムで画分を溶出して酢酸エチル層(画分)の副画分を得るステップを含む;
9)ステップ7の副画分を生物活性(抗脂肪生成)分析に供する;
10)ステップ8の最も生物活性の高い副画分を同定し、これをLC−MS分析に供して生物活性成分スキルプシンAおよびスキルプシンBを同定する;
11)ステップ7の副画分を分取用HPLCに供して精製された二量体を得る、これを高分解能質量分析(HRMS)、液体クロマトグラフィー−質量分析(LC−MS/MS)および核磁気共鳴分光分析(NMR)に供してスキルプシン生物活性成分の質量および構造を確認する。
本明細書の以下の欄は、本発明の最も好ましい実施形態の例示的な例からなる。
方法:
ハマスゲの乾燥した根茎を粉砕して粗い粉末を形成した。粉砕した粉末を次に3容量のヘキサンで抽出し、続いて3時間加熱還流し、ろ過してヘキサン可溶性画分および使用済材料を得た。この使用済材料をさらに3容量のメタノールで抽出し、続いて3時間加熱還流し、ろ過してメタノール可溶性活性画分および使用済材料を得る。メタノール可溶性画分を水性メタノールに可溶化し、クロロホルム(CHCl3)、酢酸エチル(EtOAc)およびメタノールで連続して分別して、それぞれクロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層を得る。クロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層をさらなる生物活性指針分画に供する。ここで、生物活性パラメーターは、クロロホルム層、酢酸エチル層および水性メタノール層の、3T3−L1マウス脂肪細胞(哺乳動物脂肪細胞)内で脂肪生成を抑制する能力であった。脂肪生成抑制の程度を研究するためにSalazar Olivo et al (1995)、Wu Z et al (1998)、Fu M et al (2005)から適合させたオイルレッドO染色技術のステップは以下の例1Aで説明する。結果は表Aに示す。
結果は、グラフパッドプリズムソフトウェアを用いてIC50値として表す。脂肪生成の抑制パーセントは次式で計算される。
%抑制=C−T/T*100
ここで、Cは分化/未分化細胞におけるオイルレッドOの吸光度であり、Tはサンプルの処理した分化/未分化細胞におけるオイルレッドOの吸光度である。
次に、いずれの画分もピセアタンノール二量体のスキルプシンAおよびスキルプシンBが富化されている副画分IIIおよびIVをLC−MSに供した(図2および3)。LC−MS/MS分析は、RP C18カラム(250×4.6mm、5μ粒径)を用いてThermo Electronics Finnigan LCQ Advantage MAX分光計で行った。この系は、Thermo−Finnigan surveyor PDA検出器、LCポンプおよびオートサンプラーからなっていた。移動相は、水中0.1%酢酸の溶媒(A)およびアセトニトリルの溶媒(B)を用いた35分間の勾配流(Gradient run)を含んでいた。溶媒Bの濃度は、0〜5分で5%から、5〜20分で5〜60%に、20〜25分で60〜100%に増大し、25〜27分で100〜5%に、27〜35分は5%で一定のままであった。固定相はThermo BDS hypersil、C18カラム(寸法−250mm×4.6mm)を含んでいた;流量:1ml/分;検出範囲:260nm。
データ解釈:スキルプシンAの質量は470.13と報告されている。上記プロトコルを用いて陽イオン化モードにおいて18.77分で観察された質量[M+H]は471.08である。スキルプシンBの質量は486と報告されている。陽イオン化モードにおいて17.94分で観察された質量[M+H]は487.05である。
ハマスゲ(Cyperus)抽出物中のピセアタンノールの二量体の存在の第1のレベルの確認は質量に関するこの予備情報に基づいていた。スキルプシンAは、スキルプシンAの真正のサンプルとの直接比較によって直接確認した。
マウスにおけるCYPRO−AF(活性な酢酸エチル画分)およびCYPRO−D1(ピセアタンノール二量体のスキルプシンAおよびスキルプシンBが天然に富化された酢酸エチル副画分)抽出物の抗肥満効果の有効性評価
試験の目的:この研究の目的は、C57マウスにおける抗肥満効果に対するCypro−AFおよびCypro−D1抽出物の有効性を評価することであった。
飼育
研究デザイン:動物を6つの群、すなわち、各々10匹の動物(5匹のオスおよび5匹のメス)からなる群1、2、3、4、5および6に分けた。群の詳細、用量および群当たりの動物の数/性別を次の表に示す:
試験品Cypro−AFおよびCypro−Dlを、異なる用量を製剤化するための蒸留水に溶解させた。新しく製剤化された試験品を強制飼養により経口経路で投与した。動物当たりの投与量の容量は研究期間を通じて全ての動物で10ml/kg体重に維持した。次表に試験製剤の詳細を示す。
肥満誘発:G1対照群の動物に10kcal%の脂肪を含有する標準の対照食飼料D12450Bを給餌し、G2〜G6群の動物には肥満誘発中および主研究中に60kcal%の脂肪を含有する高脂肪食飼料D12492を給餌した。
肥満の誘発後主研究を開始した。28日目から27日の期間毎日連続して3用量のCypro−AFおよび1用量のCypro−D1を動物に投与した。主研究において続けた食餌の給餌は肥満の誘発で行った。G1対照およびG2高脂肪食対照群の動物には蒸留水を投与する一方、他の群の動物は28日〜54日の研究期間の間試験品を受けた。投与の容量は個々の動物の1週間の体重に応じて維持した。研究の合計持続時間は61日であった(7日の順化期間+27日の肥満誘発+27日の主研究)。
観察
研究期間中次の観察を行った。
飼料摂取量
個々の動物の飼料摂取量を記録した。1週間の平均飼料摂取量を計算し、記録した。
体重
個々の動物の体重を1日目の受け取った日に記録し、その後研究期間中1週間(±1日)毎に記録した。
全ての動物を研究期間中毎日二回臨床観察した。
臨床病理学
研究期間の終了時、動物から血液サンプルを、血液学のためにはエチレンジアミン四酢酸カリウム(K2−EDTA)抗凝固剤を含有するチューブに、また臨床化学のためには抗凝固剤なしでチューブに集めた。抗凝固剤なしでチューブに集めた血液サンプルを3000rpmで10分間遠心分離して血清を得た。血液サンプルは微細な毛細管を用いて軽いエーテル麻酔下で後眼窩叢穿刺法で人道的に集めた。以下の血液学および臨床化学パラメーターを分析した。
Sysmex、KX−21(Transasia Bio−Medicals Ltd.、India)を用いて以下の血液学パラメーターを評価した:
「Erba Mannheim Chern Touch アナライザー」(Transasia Bio−Medicals Ltd.、India)を用いて、血清サンプルから次の臨床化学パラメーターを分析した。
研究期間の終了後、55日目に、全ての動物をガス室で過剰の二酸化炭素に曝露することにより人道的に屠殺し、以下の外的および内的全体解剖(gross necropsy)に供した。
全体解剖
動物を外的および内的全体病理検査(gross pathological examination)に供した。
全ての動物の次の臓器から必要に応じてあらゆる付着組織を取り除き、乾燥を避けるためにできるだけ早く湿ったまま秤量した:脳、胸腺、肝臓、副腎、腎臓(対臓器)、脾臓、心臓、卵巣/睾丸(対臓器)。
脂肪沈着重量
全ての動物の次の脂肪沈着を集め、秤量した。
1.副睾丸脂肪
2.褐色脂肪
3.卵巣脂肪
本研究で得られた生のデータをコンピューターによる統計処理に供した。データのコンピュータープリントアウト(付属書の形)を元の生のデータで検証した。検証後、データを、GraphPad Prismバージョン5.01、GraphPad Softwareを用いて体重、血液学および臨床化学パラメーター、臓器重量に関するデータに対するDunnettの事後検定で一元配置ANOVA(分散分析)に供した。全ての分析および比較は、以下に述べる報告全体に亘って、G1をG3、G4、G5、およびG6と比較する場合の上付き文字aならびにG2をG3、G4、G5、およびG6と比較する場合の上付き文字bによる表示により示された95%の信頼性レベル(P<0.05)で評価される:*:適用できる場合は常に統計的に有意である(P<0.05)。
データを以下のように比較することにより一元配置ANOVA統計解析に供した:
結果
飼料摂取量
オスおよびメスの動物の週平均飼料摂取量の要約をそれぞれ表1および表2に示す。研究期間中動物の飼料摂取量に統計的有意差はなかった。
オスおよびメスの動物の1週間の体重の要約をそれぞれ表3および表4に示す。
オスの動物において、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1−10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}で、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して、28日目の平均週間体重値に統計的に有意な増大があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
メスの動物において、G3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1−10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}で、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して、28日目の平均週間体重値に統計的に有意な増大があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
オスおよびメスの動物の臨床兆候の要約をそれぞれ表−5および表−6に示す。動物は、研究期間中の臨床観察の間健康状態が健常で正常であることが分かった。
オスおよびメスの動物の血液学パラメーター評価の要約をそれぞれ表−7および表−8に示す。
平均赤血球ヘモグロビン濃度(MCHC)
オスの動物において、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較してG4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均MCHC値に統計的に有意な増大があった。これらの変化は、容量依存性応答がなかったので偶発的であったと考えることができる。
メスの動物において、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較してG3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}で平均MCVおよびMCH値に統計的に有意な増大があった。これらの変化は、容量依存性応答がなかったので偶発的であったと考えることができる。
メスの動物において、G2群{高脂肪食対照群(脂肪60kcal%)}と比較してG5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均MCHおよびMCHC値に統計的に有意な増大があった。この変化は、容量依存性応答がなかったので偶発的であったと考えることができる。
オスおよびメスの動物の臨床化学パラメーター評価の要約をそれぞれ表−9および表−10に示す。
総タンパク質
メスの動物において、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して、G3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均総タンパク質値に統計的に有意な低下があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
トリグリセリド
メスの動物において、G3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1−10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均トリグリセリド値に、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して統計的に有意な低下があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
オスの動物において、G3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1 10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均総コレステロール値に、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して統計的に有意な増大があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
メスの動物において、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均総コレステロール値に統計的に有意な増大があった。この変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えることができる。
高密度脂質
オスの動物において、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均高密度脂質値に統計的に有意な低下があった。この変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えることができる。
オスの動物において、G3群{CYPRO−AF−50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1−10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均低密度脂質値に、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して統計的に有意な増大があった。これらの変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えられた。
超低密度脂質
メスの動物において、G5群{CYPRO−AF−200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均超低密度脂質値に、G1群{対照群(脂肪10kcal%)}と比較して統計的に有意な増大があった。この変化は飼料の脂肪含有量の差に起因すると考えることができる。
トリグリセリド
オスの動物において、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1 10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均トリグリセリド値が低下した。この平均トリグリセリド値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均トリグリセリド値が低下した。これらの平均トリグリセリド値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
オスの動物において、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均総コレステロール値が低下した。この平均総コレステロール値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
高密度脂質
オスの動物において、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1 10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均高密度脂質値に、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して統計的に有意な低下があった。
平均高密度脂質値の統計的に有意な低下の変化は試験品の効果であることができよう。
低密度脂質
オスの動物において、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均低密度脂質値が低下した。この平均低密度脂質値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
オスの動物において、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF−100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G5群{CYPRO−AF200mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}およびG6群{CYPRO−D1 10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均超低密度脂質値が低下した。この平均超低密度脂質値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
メスの動物において、G2群の高脂肪食対照(脂肪60kcal%)と比較して、G3群{CYPRO−AF50mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、G4群{CYPRO−AF100mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}、およびG6群{CYPRO−D1 10mg/kg+高脂肪食(脂肪60kcal%)}の平均超低密度脂質値がわずかに低下した。これらの平均超低密度脂質値が低下した変化は試験品の効果であることができよう。
ピセアタンノールならびにその二量体のスキルプシンAおよびスキルプシンBを含むハマスゲの酢酸エチル画分の、ヒトにおける体重管理に対する効果−有効性、安全性および許容性の研究。
研究の詳細
基本的な目的には、(i)肥満した患者の体重管理に対するハマスゲ抽出物の有効性を研究すること;ならびに(ii)肥満した患者の体重管理に対するハマスゲ抽出物の安全性および許容性を研究することがあった。
二次的な目的には、肥満した患者の体重管理におけるハマスゲ抽出物の活性の発現の研究があった。
基本的な測定結果には、(i)体重および肥満度指数の低下;(ii)腹囲およびウエスト:ヒップの比(身体計測値)の低下;(iii)コレステロール、トリグリセリド、LDLおよびVLDL値のベースラインからの低下;(iv)HDL値のベースラインからの増大;ならびに(v)基準時および最後の来院時に被検者から得られた写真による証拠(身元は示さない)が含まれた。
二次的な測定結果には、研究対象における有害事象およびその他の身体的兆候または症状に関する研究材料の許容性を評価することが含まれていた。
被検者の人口統計(表11)
本明細書中上記した活性な研究材料およびプラセボを、充填質量(fill weight)560mgのサイズ「00」のブラウン/ブラウンハードゼラチンカプセルとして製剤化した。二重盲検研究として、活性な研究材料カプセルおよびプラセボカプセルは両方とも、大きさ、形状および質量のような全ての物理的な側面が同じであった。活性な研究材料のランダムに選択したバッチは分析するとカプセル当たり平均して36.18mgのピセアタンノールおよびスキルプシンBを示した。より具体的な実施形態において、ハマスゲ抽出物を含む具体的な製剤は、ピセアタンノール、スキルプシンAおよびスキルプシンBを含む総スチルベンを3%より多く含有するように規格化した。表12に明記された例示的な例においては、ピセアタンノール、スキルプシンAおよびスキルプシンBを含む総スチルベンを5%含有するように規格化されたハマスゲ抽出物が示されている。
これはパイロット研究であったので、正式のサンプルサイズは計算されなかった。各参加者は6桁のランダム化コードが割り当てられ、臨床試験用製品は独立した統計学者により作成されたランダム化コードリストに従って施設要員によって投薬された。臨床試験用製品に対する二重盲検は投薬キットの独立盲検(independent blinding)により行われ、従って臨床施設職員および参加者はいずれも研究期間の間中受けた処置について知らないままであった。被検者の人口統計は全ての登録された被検者に対してスクリーニング来院時に記録した(表11)。過去3カ月に他の処置を何も受けていない肥満した患者をこの研究に登録した。全ての登録された被検者は研究の事象スケジュール(表14)を順守するように勧告された。登録された被検者は1:1の割合で活性群およびプラセボ群に割り振られた。被検者はこの製品を通院ベースで使用し、毎日活性またはプラセボの2つのゼラチンカプセル(各々重量560mg)を、食事の少なくとも30分前に、好ましくは朝晩、食事成分として90日の期間自分で服用するように求められ、臨床評価のために15日目、30日目、60日目および90日目に戻る予定にされた。電話による追跡調査は最後の予定された来院から少なくとも15日後に被検者の健康状態について行われた。日々の食生活および身体活動は来院1に患者に提供された患者のスケジュール帳に記録された。これは次の来院時に研究者によってチェックされ検証された。研究補遺の順守は各来院時戻った補遺の検査によって確かめた。この臨床研究の間のデータ収集および統計解析はそれぞれ別の機能性群および認証された独立した統計学者によって行われた。試験開始後は承認されたプロトコルに変化または修正がなされたことはなく、試験期間中は暫定的な分析は行われなかった。安全性の結果は、1)身体検査およびバイタル、2)ある場合は、報告された有害事象(AE)の評価、2)ある場合は、有害事象によって測定された。有効性の結果は、1)体重、BMI、腹囲、ヒップ周りおよびウエストヒップ比によって測定された。
バージョン9.2ソフトウェアの統計解析ソフトウェア(SAS)をヒトの臨床研究のデータ分析のために使用した。適当なデータセット可変量が活性およびプラセボ受容群間で最良の可能な統計的結論に達するように対応のあるt検定、共分散分析(ANCOVA)およびウィルコクソン符号順位和検定を使用した。「p」値<0.05は統計的に有意と考えられた。ベースライン記述子は連続可変量に対する平均および標準偏差として、ならびにカテゴリー変数に対する頻度およびパーセント割合として要約した。被検者の有効性評価のために方法を処理する目的であるLast Observation Carry Forward(LOCF)に従った。
登録された被検者のいずれも、スクリーニングのための来院時または研究のための来院中異常な病歴も異常な身体所見も観察されなかった。研究のための来院時のいずれも、処置群間で、バイタルの統計的に有意な変化は観察されなかった。30人のランダム化された患者のうち、26人が研究を完結した。全ての研究のための来院を完結した男性対女性の被検者の比は7:19であり、3人の女性が様々な時点で研究から脱落した。ここで、研究終了時の分析で、4人の脱落した被検者のうちの3人はプラセボを受けていたことが明らかになった。研究を完結した26人の患者の処置順守のパーセント割合は良好であった。最小は87.22%で、最大は19人の研究対象による100%の処置順守であった。試験は時期尚早に終了されることはなく、30の目標のサンプルサイズに到達した後に停止した。最終の来院時までのベースラインから、また処置群間で、バイタルの統計的に有意な変化も(表15)、臨床的に有意な異常な実験室値も(表16および17)観察されなかった。全研究期間中単一のAEが報告され、研究者の見解によると、この事象は研究製品と「関係がなかった」。この研究では重篤な有害事象も有意な有害事象も認められなかった。これらの基本的なパラメーターの有効性分析によって、質量、BMIおよび腹囲は研究終了までに2つの処置群間で統計的有意性に到達したが、他の2つのパラメーター(ヒップ周りおよびウエストヒップ比)は2つの処置群間でいかなる有意性も示さなかったことが明らかになる。総コレステロール、トリグリセリド、低密度リポタンパク質、高密度リポタンパク質および超低密度リポタンパク質のようないくつかの生化学的な評価(表18)は、2つの処置群の患者間で比較したとき統計的に有意である(p<0.01)ことが判明した(表18)。研究期間の前後の被検者の写真は製品の有効性を明瞭に示している。
Claims (8)
- ヒトにおいて肥満を低減する方法であって、総スチルベンを5%含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物を前記ヒトに経口で一日二回投与して、体重、肥満度指数および腹囲の低下の効果を達成するステップを含む、方法。
- ヒトにおいて高コレステロール血症を治療する方法であって、総スチルベンを5%含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物を前記ヒトに経口で一日二回投与して、(a)総コレステロール、低密度リポタンパク質(LDL)、超低密度リポタンパク質(VLDL)および血清トリグリセリドの全身性レベルの低下ならびに(b)高密度リポタンパク質(HDL)の全身性レベルの増進の効果を達成するステップを含む、方法。
- 総スチルベンを5%含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物がピセアタンノールおよびその二量体から本質的になる、請求項1および2に記載の方法。
- 総スチルベンを5%含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物が、ピセアタンノール、スキルプシンBおよびスキルプシンAの組合せから本質的になる、請求項3に記載の方法。
- ヒトにおいて肥満を低減する方法であって、3%より多い総スチルベンを含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物を前記ヒトに経口で一日二回投与して、体重、肥満度指数および腹囲の低下の効果を達成するステップを含む、方法。
- ヒトにおいて高コレステロール血症を治療する方法であって、3%より多い総スチルベンを含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物を前記ヒトに経口で一日二回投与して、(a)総コレステロール、低密度リポタンパク質(LDL)、超低密度リポタンパク質(VLDL)および血清トリグリセリドの全身性レベルの低下ならびに(b)高密度リポタンパク質(HDL)の全身性レベルの増進の効果を達成するステップを含む、方法。
- 3%より多い総スチルベンを含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物がピセアタンノールおよびその二量体から本質的になる、請求項5および6に記載の方法。
- 3%より多い総スチルベンを含有するように規格化されたハマスゲ根茎抽出物の酢酸エチル画分を含む組成物が、ピセアタンノール、スキルプシンBおよびスキルプシンAの組合せから本質的になる、請求項7に記載の方法。
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