JP2018513156A - コバルトポルフィリン・リン脂質コンジュゲート及びポリヒスチジンタグを含むナノ構造体 - Google Patents
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Abstract
Description
(a)Hisタグ(緑色)を有するペプチドが、水溶液中で、あらかじめ形成されたCoPoPリポソームに結合することを示す図。(b)CoPoPを含む二重層内への、Hisタグ化ポリペプチドの挿入。二重層の一片のみが示されている。(c)本研究で使用された金属-PoPの化学構造。
(a)ビーナス(V)に融合したセルリアン(C)を含むHisタグ(7)化蛍光タンパク質は、PoP二重層への結合を証明する。Cが励起すると、FRETが発生しVが蛍光を発する(左)が、PoP-二重層に結合すると、FRETがフォトニック二重層と競合するため、これは抑制される(中央)。タンパク質が二重層に結合したときでさえ、C蛍光は直接的に探索できる(右)。(b)表示の金属-PoPリポソームとインキュベーションした後の、融合タンパク質電気泳動移動度シフトのマルチスペクトル蛍光画像。(c)C−V FRETの減少に基づく、表示の金属-PoPリポソームへの融合タンパク質の結合キネティクス。(d)CoPoPのビニル基の下線付きプロトンのNMRピーク幅は、重水素化クロロホルム(CDCl3)中でCo(II)の常磁性の幅広化を実証するが、重水中ではCoPoP-リポソーム形成後のCo(III)の非常磁性のピークを実証する。棒グラフの各セットは、左から右に、CoPoP、及び2H-PoPの棒グラフである。(e)2Mの硫酸ナトリウムを添加した後の、CoPoPリポソームへのHisタグ化ペプチド結合の逆転。リポソームは10モル%のCoPoP又はNi-NTAリン脂質とともに形成された。棒グラフの各セットは、左から右に、水、及び+2M亜硫酸塩の棒グラフである。
(a)表示した脂質を含むリポソームとインキュベートされた蛍光性レポータータンパク質のマルチスペクトル電気泳動移動度シフトの画像。(b)表示のリポソームに結合したレポータータンパク質の結合安定性(1:1血清)。(c)表示のリポソームに結合したレポータータンパク質の結合安定性(過剰の遊離イミダゾール中)。平均値±標準偏差(n=3)
(a)FAMで標識された短ペプチドの、金属-PoPリポソームへの結合。(b)CoPoPリポソームへの結合半減期に対する、Hisタグ長の影響。結合なし(N.B.)は、Hisタグ化されていないペプチドで観察された。PBS中(c)又は5mg/mLのBSA中(d)でインキュベートした際の、表示組成のCoPoPリポソームへの結合半減期に対するリポソーム組成の影響。三回の測定に関する平均値±標準偏差。(c)及び(d)において、棒グラフの各セットは、左から右に、50及び0の棒グラフである。
(a)ペプチド結合の間の、POPリポソーム中に封入されたスルホローダミンBの放出。棒グラフの各セットは、左から右に、8時間及び24時間の棒グラフである。(b)スルホローダミンBを含むリポソームの標的化取り込み。細胞を表示のコンディションでインキュベートし、スルホローダミンBの蛍光を試験することによって取り込みを評価した。棒グラフの各セットは、左から右に、MCF7細胞及びU87細胞の棒グラフである。(c)リポソームの取り込みを示す共焦点顕微鏡写真。細胞を、表示のリポソーム溶液と2時間インキュベートし、洗浄し、画像化した。全ての画像は同じ設定で取得した。(d)皮下U87腫瘍を有するヌードマウスへの注射後45分目の、CoPoPリポソームに封入されたスルホローダミンBの体内分布(Hisタグ化環状RGD標的指向性ペプチドの付着がある場合又は無い場合)。平均±標準偏差(n=3)。棒グラフの各セットは、左から右に、非標的化及び+cRGD-Hisの棒グラフである。
(a)BALB/c又は胸腺欠損ヌードマウスを、MPL25μgとHIV gp41エンベロープタンパク質由来のHisタグ化MPERペプチド25μgを含むCoPoPリポソームを用いて免疫化した。血清力価は、Hisタグを有さないビオチン化MPERペプチドを使用するELISAを用いて評価し、抗-IgG二次抗体で探索した。矢印は、ワクチン接種の時間を示す。(b)表示のようにワクチン接種したBALB/cマウスにおける抗-MPER力価。0週目と2週目にマウスにワクチン接種を行い、4週目に血清を集めた。(c)MPLを含むCoPoPリポソームをワクチン接種したマウスにおける、持続性の抗-MPER力価。平均値±標準偏差(グループあたりn=4マウス)。左側の最初の2つの棒グラフ(連結している)は、CoPoP及びNi-NTAである。(d)表示の抗体の存在下における293細胞のHIV感染の中和。プロテインAを使用してマウス血清からIgGを精製した。平均値±標準偏差(n=3)。
(a)10モル%のNi-NTA-脂質、Co-NTA-脂質又はCoPoPを含むリポソームへのFAM-標識化RGD-Hisペプチド結合。(b)ペプチド結合後のゲルろ過。CoPoPリポソームのみが、安定な結合を維持した。(c)ウシ胎児血清による1:1希釈でインキュベーションした後のペプチド安定性。CoPoPリポソームのみが、安定な結合を維持した。
レポータータンパク質を、CoPoP、遊離Co-ポルフィリン又は2H-PoPを含むリポソームとともにインキュベートし、その後、血清中でインキュベートし、EMSAにかけた。その後、前記タンパク質をFRETチャネル(ex:430 nm、em:525 nm)を使用して画像化した。CoPoPレーンにシグナルが無いことは、リポソームへの安定な結合を実証する。Co-ポルフィリンのレーンの減弱したシグナルは、Hisタグ化タンパク質のリポソームへのいくらかの結合を実証する。
RGD-HisペプチドとともにPBS中でインキュベートした際の、表示した成分を含むCoPoPリポソーム(10モル%のCoPoP)への90%ペプチド結合の時間に対するリポソーム組成の影響。棒グラフの各セットは、左から右に、(+)コレステロールと(−)コレステロールの棒グラフである。
表示の組成のリポソームを、50%ウシ胎児血清又は50mg/mLのウシ血清アルブミンの存在下で、RGD-Hisペプチドとともにインキュベートした。FAM-標識ペプチドの発光は、CoPoPリポソームへの結合時のぺプチド発光を、2H-PoPリポソームと比較することによって正規化した。
スルホローダミンBを積んだリポソームを、表示のペプチド(5μg/mL)とともに、室温でインキュベートし、蛍光を使用して放出を評価した。棒グラフの各セットは、左から右に8時間及び24時間の棒グラフである。
(a)1モル%のCoPoPを含むCoPoPリポソームとともにインキュベートした際の正規化ペプチド蛍光。CoPoPサンプルと2H-PoPとを比較することによって発光を正規化した。(b)表示のように細胞とインキュベートされた、1モル%のCoPoPを含むスルホローダミンBリポソームの細胞取り込み。棒グラフの各セットは、左から右に、MCF7細胞及びU87細胞の棒グラフである。
(a)金ナノ粒子を分散するコーティングプロトコルの写真。POPコーティングが無い場合、クエン酸塩で安定化した金は、遠心ステップを繰り返した後に凝集する(矢印)。(b)脂質コーティング前後のナノ粒子のサイズ。挿入図は、CoPoP金の透過型電子顕微鏡写真を50nmのスケールバーとともに示す。(c)RGD-His結合後の、クエン酸塩で安定化した金とCoPoP金の吸収スペクトル。(d)標的ナノ粒子の取り込みを示す共焦点反射画像。細胞を2時間、表示の金ナノ粒子とともにインキュベートし、洗浄し、その後画像化した。全ての画像は同じ設定で取得した。
マウスに、筋肉内注射の後、CoPoP/MPL又はISA70中のPsf25をワクチン接種した。(A)追加免疫前及び(B)追加免疫後(週三回の抗原刺激/週三回の追加免疫[一注射あたり、5、0.5、又は0.05ugのPfs25) CoPoP(Psf25)リポソーム、又は遊離Psf25タンパク質(ISA70有り又は無し)をワクチン接種されたマウスから得た96ウェルプレートでELISAによってIgG力価を測定した。データは平均値±標準偏差を示す(グループあたりn=5マウス)。
力価は、バックグラウンドに比べて0.5より大きい吸光度を生じる血清希釈率の逆数として定義される。
(A)7×ヒスチジン(His)タグを含む、様々な数のNANP反復ペプチド。(B)様々な長さのNANPペプチドとコンジュゲートしたCoPoPリポソームの平均径及び多分散性(PDI)を、動的光散乱で算出した(n=3)。エラーバー、標準偏差。(C)CoPoPリポソーム及び2HCoPoPリポソームへのNANPペプチドのペプチド結合を、微量遠心ろ過プロセス及びBCA分析で測定した(n=3)。
1.ナノ構造体(例えば、リポソーム)であって、
a)単層又は二重層であって、i)任意でリン脂質、及びii)コバルトに配位して、コバルトポルフィリンを形成しているポルフィリン、を有する単層又は二重層;及び
b)任意で、ポリヒスチジン-タグ化提示分子、ここで、当該ポリヒスチジン-タグの少なくとも一部は、単層又は二重層の疎水性部分に存在し、及びポリヒスチジン-タグの一以上のヒスチジンは、前記コバルトポルフィリンのコバルトに配位しており、ポリヒスチジン-タグ化提示分子の少なくとも一部は、ナノ構造体(例えば、リポソーム)の外側に露出しており、且つリポソームである場合、当該リポソームは水性区画を取り囲んでいる;
を含むナノ構造体。
2.前記コバルトポルフィリンがリン脂質にコンジュゲートして、コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートを形成している、上記1に記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
3.前記コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートが、単層又は二重層の1〜25モル%を構成する、上記2に記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
4.前記コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートが、単層又は二重層の5〜10モル%を構成する、上記3に記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
5.前記二重層が、ステロール(例えば、コレステロール)をさらに含む、上記1〜4のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
6.前記二重層が、ホスファチジルセリン、及び、任意でコレステロールをさらに含む、上記1〜4のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
7.前記ポリヒスチジン-タグが、6〜10のヒスチジン残基を含む、上記1〜4のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
8.前記リポソームの大きさが50nm〜200nmである、上記1〜4のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
9.前記ナノ構造体(例えば、リポソーム)がカーゴを含み、且つリポソームである場合、前記カーゴの少なくとも一部が、リポソームの水性区画内に存在する、上記1〜4のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
10.前記提示分子が、4〜50のアミノ酸からなるペプチドである(前記アミノ酸の数には、Hisタグのヒスチジンは含まれない)、上記1〜9のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
11.前記提示分子が、4〜500kDaのタンパク質である、上記1〜10のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
12.前記提示分子が抗原分子であり、及び、前記単層又は二重層が、そこに取り込まれているアジュバントをさらに含む、上記1〜11のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
13.前記アジュバントが、弱毒化リピドA誘導体である、上記12に記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
14.前記弱毒化リピドA誘導体が、モノホスホリルリピドA又は3-脱アシル化モノホスホリルリピドAである、上記13に記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)。
15.ナノ構造体であって、
a)コア;及び
b)前記コア上の単層又は二重層であって、i)任意でリン脂質モノマー、及びii)コバルトに配位して、コバルトポルフィリンを形成しているポルフィリン(例えば、CoPoP)、を有する単層又は二重層;及び
c)任意で、ポリヒスチジン-タグ化提示分子、ここで、当該ポリヒスチジン-タグの少なくとも一部は、単層又は二重層の疎水性部分に存在し、ポリヒスチジン-タグの一以上のヒスチジンは、前記コバルトポルフィリンのコバルトに配位しており、ポリヒスチジン-タグ化提示分子の少なくとも一部は、ナノ構造体の外側に露出している;
を含むナノ構造体。
16.前記コアが金ナノ粒子である、上記15に記載のナノ構造体。
17.カーゴの標的化送達方法であって、
a)医薬キャリア中に、上記9〜16のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)、又は上記9〜16のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)の組み合わせを含む組成物を、個体に投与すること;及び
b)ナノ構造体(例えば、リポソーム)を前記個体の所望の位置に到達させるために適切な時間が経過した後、前記リポソームを、波長650〜1000nmの近赤外線にさらして、リポソームからカーゴを放出させる
ことを含む、方法。
18.前記個体が、ヒト又は非ヒト動物である、上記17に記載の方法。
19.宿主個体において免疫応答を発生させる方法であって、医薬キャリア中に上記1〜16のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)、又は上記1〜16のいずれか1つに記載のナノ構造体(例えば、リポソーム)の組み合わせを含む組成物を個体に投与することを含み、前記提示分子が免疫原性エピトープを含むものである、方法。
20.前記提示分子が、病原微生物由来のペプチド、ポリペプチド又はタンパク質である、上記19に記載の方法。
21.前記個体が、ヒト又は非ヒト動物である、上記19又は20に記載の方法。
材料は、特に断りの無い限り、Sigma社から入手した。ペプチドは商業ベンダーから入手し、HPLCで純度を測定し、質量分析で同一性を確認した。
遊離塩基(2H)PoP sn-1-パルミトイル sn-2-ピロフェオホルビド ホスファチジルコリンを、上述したように合成した。CoPoPは、100 mgの2H-PoPと、10倍モル過剰の酢酸コバルト(II)四水和物とを、4 mLのメタノール中で、17時間、暗所で撹拌することによって生成した。反応の完了と生成物の純度はTLCでモニターした(>90%純度)。その後溶媒を、回転エバポレーターによって除去し、PoPを、クロロホルム:メタノール:水(1:1.8:1)で三回抽出した。クロロホルム層を集め、溶媒を回転エバポレーターによって除去し、tert-ブタノール中に20%の水を含む溶液中で生成物を凍結乾燥し、81.5 mgの生成物を得た(収率77%)(同一性は質量分析で確認した)。他の金属-PoPを、同じ方法を使用して合成した。Ni-PoPについては、酢酸Ni(II)四水和物を使用し、17時間インキュベートした。Zn-PoPについては、無水酢酸Zn(II)を使用し、17時間インキュベートした。Mn-PoPについては、酢酸Mn(II)を使用し、30時間インキュベートした。Cu-PoPについては、酢酸Cu(II)を使用し、テトラヒドロフラン中で、3時間インキュベートした。
1μgの蛍光性レポータータンパク質を、96ウェルプレートで、200μLのPBS中のリポソーム20μgとともにインキュベートした。FRETチャネルの蛍光(ex:430 nm、em:525 nm)を、蛍光マイクロプレートリーダー(Tecan Infinite II)を用いて周期的に測定した。リポソームを添加していないタンパク質中のFRETシグナルを基準として、データを正規化した。50μgのリポソームとインキュベートした2.5μgのタンパク質を用いてEMSA実験を行い、続いて、50Vを90分間適用する0.75%アガロースゲル中での電気泳動、及び表示の励起及び発光フィルターを用いるIVIS Lumina IIシステムによって画像処理した。血清安定性試験のために、3 mgのタンパク質を、40ul PBS中のリポソーム60mgとともにプレインキュベートした。24時間のインキュベーション後、40uLのFBSを添加し、さらに8時間インキュベートした。イミダゾール置換実験のために、1μgのレポータータンパク質を、PBS中で20μgのリポソームに結合させた。その後イミダゾールを滴定し、蛍光により結合を評価した。血清安定性のために、1μgのレポータータンパク質を、100μLのPBS中で20μgのリポソームに結合させ、その後、等容積のウシ胎児血清(VWR #82013-602)を添加して、蛍光で結合をモニターした。20μgのリポソームとともに500 ngのペプチドをインキュベートした後、ペプチド結合を、RGD-His FAMフルオロフォア・クエンチングで評価した。
U-87及びMCF-7細胞株をATCCから入手し、供給者のプロトコルに従って培養した。2×104細胞を、96ウェルプレート中のウェルに一晩播種した。500 ngのRGD-Hisペプチドを、スルホローダミンBを積んだリポソーム20μgと結合させ、リポソームを細胞とともに2時間インキュベートした。培地を除去し、細胞をPBSで三回洗浄し、その後細胞とリポソームを、1%Triton X-100溶液で溶解した。リポソームの取り込みは、スルホローダミンBの蛍光を測定することによって評価した。
特に断わりのない限り、8週齢のメスのBALB/cマウス(Harlan Laboratories)に、0日目と14日目に、50μLの無菌PBS中に25μgのMPERペプチドを含む注射を、後方腹部の足蹠に注射した。表記されている場合、注射は、リポソーム中に、25μgのMPL(Avanti #699800P)又はTDB(Avanti #890808P)も含み、リポソームはDOPC:コレステロール:MPL:PoPを、50:30:5:5のモル比で含んだ。フロイントアジュバントのために、ペプチドを、フロイント完全アジュバント(Fisher #PI-77140)中で直接混合し、注射した。最初の注射から4週間、又は表記の期間後、血液を顎下の静脈から採取し、血液凝固と2000rcf・15分間の遠心分離後に血清を得て、−80℃で保存した。
上述したようにして、ウイルス侵入実験を実施した。簡単に説明すると、HIV-1は、293T細胞にpHXB2-envとpNL4-3.HSA.R-Eを共トランスフェクションすることにより、産生した。トランスフェクションの2日後、細胞培地を、0.45μmのフィルターに通し、遠心した。ウイルスペレットを乾燥し、600μLのPBS中に再懸濁し、−80℃で貯蔵した。HIV-1ストックの感染力価を、上述したようにして、X-Gal染色によって決定した。
遷移金属であるCo、Cu、Zn、Ni及びMnを用いて、一連のsn-1-パルミトイルsn-2-ピロフェオホルビド ホスファチジルコリンのキレートを作製した(図1c)。その後、10モル%の金属PoPを用いて、85モル%のジオレオイルホスホコリン(DOPC)と5モル%のポリエチレングリコール-コンジュゲート型ジステアロイルホスホエタノールアミン(PEG-脂質)とともに、PoP二重層を形成し、押出により100 nmのリポソームとした。PoP二重層に結合しているHisタグ化タンパク質を、蛍光タンパク質レセプターを用いて評価した。図2aに示すように、このシステムは、2つの連結された蛍光タンパク質であるセルリアン(青色発光)及びビーナス(緑色発光)からなる融合タンパク質を含んだ。それらが近接して連結しており、スペクトルが重複していることにより、セルリアンは、ビーナスのフェルスター共鳴エネルギー転移(FRET)ドナーとして働き、セルリアンの励起がビーナスからのFRET発光をもたらす。セルリアンのC末端をヘプタヒスチジンタグで標識した。しかしながら、PoP二重層に結合した場合、セルリアンからのエネルギー転移は、二重層それ自体に回され、セルリアン発光範囲で消滅し、それゆえビーナスへのFRETと競合する。他方では、ビーナスが、フォトニック二重層に直接付着していないため、それは、直接励起により完全には消光せず、結合融合タンパク質の追跡を可能にする。
固定化金属へのHisタグ結合の基礎となるメカニズムは、ヒスチジン残基の窒素含有イミダゾール基の金属配位を含む。Ni(II)、Cu(II)、Zn(II)及びMn(II)PoPを用いて形成されたリポソームへのHisタグ結合の欠損は、ポルフィリン内の軸配位子の結合親和性又は配位数に関与すると思われる。例えば、Ni(II)及びCu(II)ポルフィリンキレートは、軸配位子なしで、周囲の4つの大環状窒素原子に完全に配位できることが提唱されてきた。Zn(II)及びMn(III)ポルフィリンについては、配位子結合強度は、安定なポリヒスチジン結合を与えるのに不十分と思われる。
その後、CoPoP又はNi-NTA-脂質のどちらかを包含するリポソームへのHisタグ化タンパク質の結合を比較するために、蛍光レポータータンパク質を使用した(図3a)。FRETに基づいてタンパク質の結合を定量可能にするために、Ni-NTAリポソームは10モル%の2H-PoPを含んだ。EMSAによると、リポソーム無しでインキュベートされたとき、又は2H-PoPリポソームとともにインキュベートされたとき、タンパク質はFRETチャネル及びタンパク質チャネルの両方で、妨げられずに移動した。Ni-NTAリポソームとともにインキュベートしたとき、タンパク質の移動は、わずかに阻害されただけであり、タンパク質の結合が、電気泳動のコンディションに抵抗しないことを示唆した。FRETチャネルは消光されず、Ni-NTAリポソームへの結合がないことを確認した。これに対して、CoPoPリポソームとともにインキュベートした場合、タンパク質は安定に結合し、FRETチャネルの完全な消滅と、電気泳動移動度の減少(これはリポソームに結合したままのタンパク質と一致する)を伴った。
リポソームへのHisタグ化ペプチドの結合活性を前提として、ペプチド結合が膜の不安定化を誘発するかどうかを判定するために、二重層の完全性を評価した。リポソームの水性コアに、フルオロフォアスルホローダミンB、水様性色素を自己消光濃度で積み込み、膜透過性を調べた。図5aに示すように、色素を含むリポソームは、8時間にわたって相当量の色素を放出せず、ペプチドはリポソームに完全に結合していた。24時間時点で、ペプチドと結合したCoPoPリポソームは、10%未満の色素を放出した。このように、Hisタグの挿入と結合プロセスは、二重層の完全性及び封入したカーゴを無傷に保つのに十分に穏やかで非破壊的であった。類似したパルミトイル化リポペプチドは、インキュベーションすると、カーゴ-含有リポソームの透過性をもたらし(図11)、Hisタグアプローチの頑強さをさらに実証した。
HIVウイルス侵入を広域中和するモノクローナル抗体の多くが(例えば、2F5、Z13及び4E10)、gp41エンベロープタンパク質の膜近位外部領域(MPER)における保存線状エピトープを標的とし、MPERをHIVペプチドワクチンの主要ターゲットにしている。しかしながら、それはウイルス侵入中にのみ露出し、中和抗体を産生するためにMPERペプチドを使用する試みは課題に直面してきた。これは、ワクチン接種戦略はMPERが中に存在する脂質二重層と抗体の相互作用を考慮すべきだとするパラダイムを生じていた。我々は、リポソーム-結合MPERペプチド配列と組み合わせた、Toll様レセプター4(TLR-4)アゴニスト・モノホスホリルリピドA(MPL)を含むリポソームを使用した。しかしながら、Ni-NTAリポソームへのMPER Hisタグ化ポリペプチドの結合をベースとする単純なアンカー技術の使用は、低い抗体価を生じさせた。我々は、同じアプローチが、CoPoPリポソームを用いて強化できるかどうかを試験した。
CoPoPと2H-PoPリポソームを生成するために、1,2-ジミリストイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DMPC)、コレステロール(CHOL)、モノホスホリルリピドA(MPLA)、及びCoPoP(あるいは2H-PoP)を、表示のモル比でクロロホルム中に溶解した(表2)。一晩のN2流と減圧後、形成された乾燥脂質フィルムをPBS中で再水和し、最終脂質濃度を3 mg/mLとした。このリポソーム懸濁液を、氷冷CO2/アセトン及び水浴を使用して、11回の冷凍/解凍サイクルにかけ、続いて200 nmのポリカーボネート膜を通して、60℃で10回押し出した。
CoPoPとPsf25タンパク質、基準PoP(コバルト無し)とPsf25タンパク質、及び水とPsf25タンパク質を、Nanosep遠心装置(100K, OMEGA)内に置いた。使用前に装置をQH2Oですすぎ、1100 rpmで3分間遠心した。各サンプルを加え、1400 rpmで3分間回転した。装置をQH2Oで二回洗浄し、1400 rpmで3分間遠心した。底のろ液からサンプルを集め、562 nmで吸光度を測定するBCA分析(Thermo cat.23235)で、タンパク質濃度を分析した。
0日目及び21日目に、CD-1マウス(8週齢のメス、Envigo)に、5、0.5、0.05μgのPsf25タンパク質を筋肉内注射(i.m.)した。表示がある場合、この注射は、リポソーム内に取り込まれた20μgのMPLAも含んだ(Avanti No.699800P)。ISA720も、5μgのPsf25タンパク質とインキュベートしたアジュバントとして使用した。処置グループ及びフローチャートを表3に示す。
抗-Psf25力価を、96-ウェルプレート(Thermo, Maxisorp)で、酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)によって評価した。100μLのコーティングバッファー(3.03 g Na2CO3及び6.0 g NaHCO3/1L蒸留水、pH 9.6)中のHisタグ化Psf25(0.1μg)を、ウェル中で一晩4℃でインキュベートした。ウェルを0.1%のTweenを含むPBS(PBS-T)で三回洗浄し、0.1%のカゼインを含むPBS(PBS-C)でブロックし、その後2時間インキュベートした。ウェルをその後PBS-Tで三回洗浄し、ヤギ抗-マウスIgG-HRP(GenScript No.A00160)を1μg/mLになるまでPBS-Cで希釈し、各ウェルに添加した。テトラメチルベンジジン(Amresco No.J644)を添加する前に、ウェルを再度PBS-Tで六回洗浄した。
動的光散乱によって測定した、Psf25タンパク質が結合する前後のCoPoPリポソームの平均径は、それぞれ122.9及び139 nmであり(図14A)、多分散指標は約0.05で同程度であり、結合後も望ましいリポソームのサイズを高い単分散度とともに示した。さらに、Psf25タンパク質が効率的及び特異的にCoPoPリポソームに結合するかどうかを調べるために、Pfs25をCoPoPリポソーム又は2H-PoPリポソームとともに4℃で一晩インキュベートし、続いて、リポソームへのタンパク質結合を微小遠心ろ過によって測定した。BCA分析によって検出されたろ液中のPfs25の量によると、Psf25の大部分がCoPoPリポソームに結合したが(99.27%)、2H-PoPリポソームには結合しなかった(12.33%)。CoPoPリポソームへのPfs25の結合は、〜99%であった(図14A)。
HHHHHHHGRKKRRQRRRPPQ(配列番号13)(TATペプチド);
HHHHHHHRRRRRRRR(配列番号14)(R8ペプチド):
HHHHHHHRQIKIWFQNRRMKWKK(配列番号15)(PENペプチド)。
図19に示すように、[PoP:CoP:CHOL:DMPC][2:5:30:63]を含むCoPoPリポソームと直接水性インキュベーションした後、これらのリポソームは、U87細胞との1時間のインキュベーション後に、結合し取り込まれることができた。
Claims (21)
- リポソームであって、
a)以下のi)及びii)を有する二重層;
i)リン脂質、
ii)コバルトに配位して、コバルトポルフィリンを形成しているポルフィリン
及び
b)ポリヒスチジン-タグ化提示分子、ここで、当該ポリヒスチジン-タグの少なくとも一部は、単層又は二重層の疎水性部分に存在し、ポリヒスチジン-タグの一以上のヒスチジンは、前記コバルトポルフィリンのコバルトに配位している;
を含み、
前記ポリヒスチジン-タグ化提示分子の少なくとも一部が、リポソームの外側に露出しており、且つ、当該リポソームが水性区画を取り囲んでいる、リポソーム。 - 前記コバルトポルフィリンがリン脂質にコンジュゲートして、コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートを形成している、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートが、単層又は二重層の1〜25モル%を構成する、請求項2に記載のリポソーム。
- 前記コバルトポルフィリン-リン脂質コンジュゲートが、単層又は二重層の5〜10モル%を構成する、請求項3に記載のリポソーム。
- 前記二重層が、コレステロールをさらに含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載のリポソーム。
- 前記二重層が、ホスファチジルセリン、及び、任意でコレステロールをさらに含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載のリポソーム。
- 前記ポリヒスチジン-タグが、6〜10のヒスチジン残基を含む、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記リポソームの大きさが50nm〜200nmである、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記リポソームがカーゴを含み、カーゴの少なくとも一部が水性区画内に存在する、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記提示分子が、4〜50のアミノ酸からなるペプチドである(前記アミノ酸の数には、Hisタグのヒスチジンは含まれない)、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記提示分子が、4〜500kDaのタンパク質である、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記提示分子が抗原分子であり、及び、前記二重層がそこに取り込まれているアジュバントをさらに含む、請求項1に記載のリポソーム。
- 前記アジュバントが、弱毒化リピドA誘導体である、請求項12に記載のリポソーム。
- 前記弱毒化リピドA誘導体が、モノホスホリルリピドA又は3-脱アシル化モノホスホリルリピドAである、請求項13に記載のリポソーム。
- ナノ構造体であって、
a)コア;及び
b)以下のi)及びii)を有する、前記コア上の単層又は二重層;
i)リン脂質モノマー、
ii)コバルトに配位して、コバルトポルフィリンを形成しているポルフィリン
及び
c)ポリヒスチジン-タグ化提示分子、ここで、当該ポリヒスチジン-タグの少なくとも一部は、単層又は二重層の疎水性部分に存在し、ポリヒスチジン-タグの一以上のヒスチジンは、前記コバルトポルフィリンのコバルトに配位しており、ポリヒスチジン-タグ化提示分子の少なくとも一部は、ナノ構造体の外側に露出している;
を含むナノ構造体。 - 前記コアが金ナノ粒子である、請求項15に記載のナノ構造体。
- カーゴの標的化送達方法であって、
a)医薬キャリア中に請求項9に記載のリポソームを含む組成物を、個体に投与すること;
b)前記リポソームを前記個体の所望の位置に到達させるために適切な時間の経過後、前記リポソームを、波長650〜1000nmの近赤外線にさらして、リポソームからカーゴを放出させること
を含む、方法。 - 前記個体が、ヒト又は非ヒト動物である、請求項17に記載の方法。
- 宿主個体において免疫応答を生じさせる方法であって、医薬キャリア中に請求項1に記載のリポソームを含む組成物を個体に投与することを含み、前記提示分子が免疫原性エピトープを含むものである、方法。
- 前記提示分子が、病原微生物由来のペプチド、ポリペプチド又はタンパク質である、請求項19に記載の方法。
- 前記個体が、ヒト又は非ヒト動物である、請求項20に記載の方法。
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WO2022072654A1 (en) * | 2020-09-30 | 2022-04-07 | The Research Foundation For The State University Of New York | Particle based formulations of sars-cov-2 receptor binding domain |
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH08510749A (ja) * | 1993-05-25 | 1996-11-12 | アメリカン・サイアナミド・カンパニー | 呼吸器シンシチウムウイルスに対するワクチンのためのアジュバント |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9720585D0 (en) * | 1997-09-26 | 1997-11-26 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
JP2004307404A (ja) | 2003-04-08 | 2004-11-04 | Nipro Corp | 人工酸素運搬体を含む医薬組成物 |
US20050008687A1 (en) * | 2003-07-07 | 2005-01-13 | Makoto Yuasa | Metal-porphyrin-complex-embedded liposomes, production process thereof, and medicines making use of the same |
JP4970035B2 (ja) * | 2003-08-21 | 2012-07-04 | リポテック・プロプライエタリー・リミテッド | invivoにおける樹状細胞の標的化 |
US20060166861A1 (en) * | 2005-01-25 | 2006-07-27 | Yoshinori Kida | Inclusion compound of porphyrin metal complex and albumin |
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