JP2018510212A - 向上した半減期を有する改変したフォンヴィレブランド因子 - Google Patents
向上した半減期を有する改変したフォンヴィレブランド因子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018510212A JP2018510212A JP2017564946A JP2017564946A JP2018510212A JP 2018510212 A JP2018510212 A JP 2018510212A JP 2017564946 A JP2017564946 A JP 2017564946A JP 2017564946 A JP2017564946 A JP 2017564946A JP 2018510212 A JP2018510212 A JP 2018510212A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- vwf
- molecule
- amino acid
- factor viii
- fviii
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Ceased
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/37—Factors VIII
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Abstract
Description
血友病A及びBであり、夫々血液凝固因子、第VIII(FVIII)及びIX、の欠失がもたらす。もう一種の既知の出血性障害はフォンヴィレブランド病(VWD)である。
結合複合体として存在し、その凝固機能は、因子XからXaへの転換に依存する因子IXaを促進することである。
11)なされている。
[1] アミノ酸位置2298にO−グリコシル化部位を欠くC1ドメインを含む、第VIII因子に結合し得るフォン・ヴィレブランド因子(VWF)分子。好ましくは、VWF分子はマウスではない。より好ましくは、VWF分子はヒトである。
[2] 天然VWFに存在する2298位のO−グリコシル化部位が、VWFアミノ酸配列の2292位〜2303位の1つ又はそれ以上のアミノ酸を欠失又は置換することによって不活性化されている、[1]項に記載のVWF分子。
[3] 2298位のスレオニンが欠失しているか、又はスレオニン及びセリン以外のアミノ酸で置換されている、[2]項に記載のVWF分子。
[4] 前記スレオニン及びセリン以外のアミノ酸がグリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファン、チロシン、及びバリンからなる群から選択される、[3]項に記載のVWF分子。
[5] 配列番号10又は11に示されるアミノ酸配列を含む、前記1〜4項の何れか1項に記載のVWF分子。
[6] 2295位、2297位及び2302位のうちの1箇所にあるプロリンが欠失しているか、又は異なるアミノ酸で置換されている、[2]項に記載のVWF分子。
[7] 天然血漿由来のVWFよりも低減したインビボでのクリアランスを有する、前記1〜6項の何れか1項に記載のVWF分子。
[8] 半減期延長部分に連結した、好ましくはヒトアルブミンに融合した、アミノ酸位置2298にO−グリコシル化部位を含むVWF C1ドメイン。
[9] 天然血漿由来のVWFを同時投与した第VIII因子の半減期と比較したとき、前記のVWF分子を同時投与した方の第VIII因子の半減期を増加し得る、前記1〜8項の何れか1項に記載のVWF分子。
[10] 血液凝固障害の治療に使用するための、前記1〜9項の何れか1項に定義したVWF分子。
[11] 前記血液凝固障害が血友病A又はフォンビレブランド病である[10]項に記載した使用のためのVWF分子。
[12] 前記治療が更に第VIII因子分子を投与することを含む[10]項又は[11]項に記載した使用のためのVWF分子。
[13] 前記VWF分子と前記第VIII因子分子とを別々に投与する、[12]項に記載した使用のためのVWF分子。
[14] [1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子を含む医薬組成物。
[15] (i)[1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子と、(ii)第VIII因子分子とを含む医薬キット。
[16] 前記VWF分子と前記第VIII因子分子とを別々の組成物中に含む[15]項に記載の医薬キット。
[17] 血液凝固障害の治療において、同時に、別々に、又は逐次使用するための、(i)[1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子と、(ii)第VIII因子分子とを含む医薬キット。
[18] 第VIII因子の半減期をインビボで増加させるための[1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子の使用。
[19] 治療処置において第VIII因子の半減期を延長するのに使用するための[1]〜[9]項の何れか1項に定義したVWF分子。
[20] [1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子の有効量を被験者に投与することを含む、インビボでの第VIII因子の半減期を増加する方法。
[21] [1]〜[9]項の何れか1項に記載のVWF分子の有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む、血液凝固障害を治療する方法。
本明細書で使用する用語「フォンヴィレブランド因子」(VWF)とは、天然に存在する(天然)VWFを含むが、その変異体をも含み、例えば、断片、融合タンパク質又は、コンジュゲート、又は1種若しくはそれ以上の残基を挿入、欠失又は、置換した配列変異体であり、生物学的活性を保持している天然のVWFである。もし、VWF変異体が野生型の少なくとも1種の生物学的活性の少なくとも10%、好ましくは少なくとも25%、より好ましくは少なくとも50%、最も好ましくは少なくとも75%を保持しているならば、本発明の意味において生物学的活性が保持されていることになる。野生型VWF及びその変異体の生物学的活性は、リストセチン補因子活性に関する方法(Federici AB ら、2004.Haematologica 89:77−85)、血小板糖タンパク質複合体Ib−V−IXのGPIbαへのVWFの結合(Suckerら.2006.Clin Appl Thromb Hemost.12:305−310)、又は、コラーゲン結合アッセイ(Kallas&Talpsep.2001.Annals of Hematology 80:466−471)、又は第VIII因子結合アッセイ(Veyradier et al.(2011)Haemophilia,vol.17,pp944−951).を使用して、当業者により、決定することができる。
D1−D2−D’−D3−A1−A2−A3−D4−C1−C2−C3−C4−C5−C6−CK
・ Xaaが存在しない配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがグリシンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアラニンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアルギニンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアスパラギンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアスパラギン酸である配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがシステインである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがグルタミン酸である配列番号10に示されるアミノ酸配列。
・ Xaaがグルタミンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがヒスチジンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがイソロイシンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがロイシンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがリジンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがメチオニンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがフェニルアラニンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがプロリンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがトリプトファンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがチロシンである配列番号10に示されるアミノ酸配列、又は
・ Xaaがバリンである配列番号10に示されるアミノ酸配列を含む。
・ Xaaが存在しない配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがグリシンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアラニンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアルギニンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアスパラギンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがアスパラギン酸である配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがシステインである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがグルタミン酸である配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがグルタミンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがヒスチジンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがイソロイシンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがロイシンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがリジンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがメチオニンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがフェニルアラニンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがプロリンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがトリプトファンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、
・ Xaaがチロシンである配列番号11に示されるアミノ酸配列、又は
・ Xaaがバリンである配列番号11に示されるアミノ酸配列を含む又はからなる。
用語「第VIII因子」と「FVIII」とは、本明細書において同義語として使用する。 「FVIII」は、ある個体から別の個体に存在して発生し得るFVIIIの天然の対立遺伝子変異を含む。FVIIIは、周知の産生及び精製方法を用いて、血漿由来で又は、組換え的に産生しても良い。グリコシル化、チロシン硫酸化及び他の翻訳後改変の程度及び位置は、選択された宿主細胞及びその増殖条件に依存して変化し得る。
本発明の改変したVWF分子は、限定する訳ではないが、血友病及びフォンヴィレブランド病を含む凝固障害の治療に有用である。好ましくは、該疾患は、血友病A又は、フォンヴィレブランド病である。
好ましくは、本発明の改変したVWF分子を用いる治療を受けている患者は、又、従来の凝固障害の療法の治療も受ける。例えば、血友病に罹患している患者は、通常、血液凝固因子、VIII(第VIII因子)を用いる治療も受けている。
CLEC10Aは、マクロファージGal型レクチンとしても知られており、CLECファミリーのヒトII型膜貫通型受容体タンパク質である。更に、C型レクチンスーパーファミリーメンバー14、マクロファージレクチン2及びCD301は同義語である。CLEC10Aは、肝臓ASGPRタンパク質と密接に関連しているが、中間単球、マクロファージ及び樹状細胞によって発現される。 本明細書で使用される場合、用語「CLEC10A」は、識別子Q8IUN9−1、Q8IUN9−2、及びQ8IUN9−3の内の1つのもとでUniProtデータベース内に示されるようなアミノ酸配列を有するか又はそれからなるヒトタンパク質を意味する。最も好ましくは、CLEC10Aは、識別子Q8IUN9−1の1つでUniProtデータベース内に示されるようなアミノ酸配列を含むか又はそれからなる。
CLEC10Aに結合し得る化合物(以下、「化合物」という)の種類や分類は特に限定されない。然しながら、好ましくは、化合物はペプチド又は、ポリペプチドであり、最も好ましくは化合物は抗体又は、その断片である。
9−903)。
いくつかの実施形態において、抗CLEC10A抗体は、抗体コンジュゲートであり、これは例えば、任意のタイプの分子を抗体へ共有結合することにより改変し、CLEC10Aへの結合を共有結合が妨害しないようにしたものである。エフェクター部分を抗体に結合させる技術は、当該分野において周知である(例えば、Hellstromら、Controlled Drag Delivery、第2版、623−53頁(Robinsonら、eds.,1987)、Thorpeら、1982、Immunol.Rev.62:119−58及びDubowchikら、1999、Pharmacology and Therapeutics 83:67−123)。
本発明の別の態様は、(i)上記で定義した改変VWF分子及び(ii)第VIII因子、CLEC10Aに結合し得る化合物(好ましくは抗体)及び それらの組合わせからなる群より選択されるポリペプチドを含む医薬キットである。好ましくは、改変したVWF分子及びポリペプチドは、別々の組成物中に含まれる。
CLEC10Aに対するヒトVWF上の結合部位を確認するために、VWFのトリプシン断片を可溶性CLEC10Aと共にインキュベートした。洗浄後、結合したタンパク質断片をpH11で、かつ、GalNAc100mMを含む溶液を用いて、夫々、溶出した。溶出条件は、規定された条件下で、CLEC10Aに結合した全ての成分が完全に溶出することを示す予備のSPR実験に基づいて選択した。 続いて、夫々の溶出画分をMS分析に付した。
1)VWFの還元及びカルボキシメチル化
前章に記載した方法に従って精製したVWF溶液の30mLを、還元緩衝液(トリス50mM、NaCl 100mM、pH8.5)1Lに対して+4℃で一晩透析した。この手順を再度繰り返したが、但し、2回目の透析は室温で4時間行った。引続き、前記溶液に、穏やかな撹拌下(IKA、Staufen、Germany)、貯蔵溶液DTT 1Mを添加してDTT 15mMに調整した。VWFの還元を+37℃で60分間のインキュベーションにより実施した。 次いで、VWFをヨードアセトアミド40mMと共に、貯蔵溶液1Mを添加することにより、アルキル化し、溶液を室温で60分間インキュベートした。
前述の方法に基づく還元及びアルキル化の後、VWF単量体(タンパク質濃度1mg/mL)60mLを+4℃で一晩、Membra−Cel MD25−14透析チューブ(Serva社、Heidelberg、Germany)を介してNH4HCO3(pH7.8)50mM 20Lで透析した。透析工程を2回繰返した。固定化したトリプシン樹脂(Promega社、Mannheim、Germany)をNH4HCO3(pH7.8)50mMで洗浄し、タンパク質溶液に加え、タンパク質8mg当たりトリプシン樹脂1mLを得た。続いて、懸濁液を+37℃で24時間、回転混合機(Glaswarenfabrik Karl Hecht社、Sondheim、Germany)上でインキュベートした。反応後、固定化したトリプシンを遠心分離(Multifuge 3SR、Heraeus、Osterode、Germany)+20℃、2,000×gで、15分間分離した。更に濾過工程(孔径0.45μm、Sterivex−HV、Millipore、Cork、Ireland)の後、反応混合物をCentricon Plus−70装置(Merck Millipore、Darmstadt、Germany)に移し替え、次に及び遠心分離(Multifuge 3SR、Heraeus、Osterode、Germany)を、室温中、3,000×gで15分間実施した。成功した切断反応は、SDS−PAGEにより、実証した(データは示さず)。トリプシンの欠乏は、発色基質を適用することにより確認した(データは示さず)。トリプシン断片(タンパク質濃度約0.5mg/mL)をSpeedVac真空濃縮器システム(Thermo Scientific社、Langenselbold、Germany)中で最終濃度約40mg/mLまで濃縮した。最終的に、濃縮したVWF断片のペプチド特性をMS分析によって調べ、最初の遠心分離工程の前の中間画分として得られた特性と比較し、これにより両試料がVWF断片の同組成を有するという証拠を提供した。
VWF上に存在するグリカン鎖の何れがCLEC10Aとの相互作用に関与しているかを確認するために、トリプシンVWF断片を可溶性CLEC10A(R&D Systems社、Wiesbaden、Germany)と共にインキュベートした。凍結乾燥した受容体タンパク質1mgを、pH7.4のHEPES 10mM、NaCl 150mM及びCaCl225mMを含む反応緩衝液2mL中に溶解した。タンパク質含量0.5mg/mLを有するトリプシン消化後の濃縮VWF断片20mLを、20倍濃縮した貯蔵緩衝溶液を添加することにより、同じ緩衝液条件に調整し、次いで受容体タンパク質を含む溶液と混合した。インキュベーションは、穏やかな混合(Glaswarenfabrik Karl Hecht社、Sondheim、Germany)下、+37℃で一晩行った。その後、未結合VWF断片を3,000×g(Multifuge 3SR、Heraeus社、Osterode、Germany)での遠心分離(Amicon Ultra−15遠心フィルターユニット、NMWL 10kDa、Merck Millipore、Darmstadt、Germany)により、分離し、廃棄した。遠心分離は、残留容量が0.5mLに達するまで室温で行った。次に、VWF断片と相互作用する受容体タンパク質を含む濃縮反応混合物を反応緩衝液で洗浄し、再び濃縮した。この濃縮液の洗浄工程を2回繰り返した後、反応液を2等分し、次いで、異なる2種類の溶出緩衝液で処理した。一方では、結合したタンパク質断片をpH11(100mMグリシン/NaOH緩衝液、pH11.0)で溶出させ、他方では、GalNAc(100mM GalNAc、pH4.3)を含有する溶液を用いた。溶出緩衝液夫々を、洗浄し濃縮した溶液に添加し、穏やかに混合しながら室温で一晩インキュベートした。遠心分離により分離した後、溶出したVWF断片を含む得られた濾液を回収し、MSにより分析した。
単離したトリプシン断片をPNGaseF処理及びβ−脱離により脱グリコシル化し、次いでナノ液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化MS/MSを適用することによって分析した。更に、遊離のN−及びO−グリカンを、過メチル化し、MALDI−TOF−MS分析によって特徴付けた。分析は公開された方法に基づいて行った(Canisら(2010)Journal of Thrombosis and Haemostasis、8:137−145、 Canisら(2012)The Biochemical Journal、447:217−228)。
多重クローニング部位に全長VWF cDNA配列を含む発現プラスミドが従前より産生されている。このベクターに含まれるVWF cDNA配列は、配列番号1として、表示し、それに対応するタンパク質配列は配列番号2として表示する。
ヒトアルブミンに融合したアミノ酸残基2276〜2326を含むVWF断片の発現ベクターを産生するために、N末端シグナルペプチド及びC末端28アミノ酸グリシン/セリンリンカーを含むVWF断片のコード配列を、5’末端にNheI制限部位を、3’末端にBamH1部位を有する遺伝子合成(Eurofins MWG Synthesis、Ebersberg、Germany)により作製した。この断片を、NheI及びBamH1消化によって提供されるクローニングベクターから切り出し、精製し、次にNheI/BamHI消化発現ベクターpIRESneo3(同書)にクローニングした。
発現プラスミドを大腸菌TOP10(Invitrogen社、Carlsbad、CA、USA)で増殖させ、標準手順書(Qiagen、Hilden、Germany)を用いて精製した。CHO K1細胞を、Lipofectamine 2000試薬(Invitrogen)を用いて発現プラスミドでトランスフェクトした。単一クローンを単離し、ジェネテシン750μg/mlの存在下で無血清培地(CD−CHO、Life Technologies)中で増殖させた。クローンをT−フラスコを通して振盪フラスコ及びバイオリアクターに広げ、そこから上清を回収し、夫々の組換えVWFタンパク質を精製した。
培養上清中のVWF抗原を、当業者にはその性能が良く知られているELISAにより決定した。簡単に述べると、マイクロプレートを、ウェル当たりの捕捉抗体(ウサギ抗ヒトvWF−IgG、Dako A0082[Dako、Hamburg、Germany]100μL、緩衝液A [Sigma C3041、Sigma−Aldrich、ミュンヘン、ドイツ]で1:2000に希釈した)と共に、周囲温度で一晩インキュベートした。プレートを緩衝液B(Sigma P3563)で3回洗浄した後、各ウェルを緩衝液C(Sigma P3688)200μLと共に周囲温度(ブロッキング)で1.5時間インキュベートした。緩衝液Bで更に3回洗浄した後、緩衝液B中の試験試料の段階希釈液並びに緩衝液B(ウェルあたり:100μL)中の標準ヒト血漿(ORKL21、20-0.2mU/mL、Siemens Healthcare Diagnostics、Marburg、Germany)の段階希釈液を周囲温度で1.5時間インキュベートした。緩衝液Bによる3回洗浄工程の後、緩衝液B中での検出抗体(ウサギ抗ヒトvWF−IgG、Dako P0226、ペルオキシダーゼ標識)の1:16000希釈液100μLを各ウェルに添加し、室温で1時間インキュベートした。緩衝液Bによる3回洗浄工程の後、基質溶液(OUVF、Siemens Healthcare Diagnostics)100μLをウェルごとに添加し、暗所、周囲温度で30分間インキュベートした。希釈してない希釈停止液(OSFA、Siemens Healthcare Diagnostics)100μLを添加し、マイクロプレートリーダーにより、450nmの波長で適切に読める試料を調製した。そこで、試験試料の濃度を、標準的なヒト血漿を参考として用いる標準曲線を使用して計算した。
実施例4のVWF−T2298Q及び組換えVWF(野生型)をそれぞれ合計4匹のCDラットに静脈内投与した。用量は、100U(VWF:Ag)/kg体重、であり、一回の注射容量は4mL/kgである。
Claims (19)
- アミノ酸位置2298にO−グリコシル化部位を欠失したC1ドメインを含む、第VIII因子に結合し得るフォン・ヴィレブランド因子(VWF)分子。
- 天然VWF中に存在する2298位置のO−グリコシル化部位が欠失することにより、又はVWFアミノ酸配列の2292〜2303位置の1種又はそれ以上のアミノ酸を、置換することにより、不活性化した、請求項1に記載のVWF分子。
- 2298位置のスレオニンを欠失しているか、又はスレオニン及びセリン以外のアミノ酸で置換した、請求項2に記載のVWF分子。
- 前記スレオニン及びセリン以外のアミノ酸が、グリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファン、チロシン及びバリンからなる群から選択された、請求項3に記載のVWF分子。
- 配列番号10に示されるアミノ酸配列を含む、請求項1〜4の何れか1項に記載のVWF分子。
- 配列番号11に示されるアミノ酸配列を含む、請求項1〜5の何れか1項に記載のVWF分子。
- 2295位置、2297位置、又は2302位置のプロリンが欠失しているか、又は異なるアミノ酸で置換された、請求項2に記載のVWF分子。
- 天然の血漿由来VWFよりも低減したインビボクリアランスを有する、請求項1〜7の何れか1項に記載のVWF分子。
- 天然の血漿由来VWFと同時投与された第VIII因子の半減期と比較して、前記VWF分子と同時投与された第VIII因子の半減期を増加し得る、請求項1〜8の何れか1項に記載のVWF分子。
- 血液凝固障害の治療に使用するための、請求項1〜9の何れか1項に特定したVWF分子。
- 前記血液凝固障害が、血友病A又はフォン・ヴィレブランド病である、請求項10に記載した使用のためのVWF分子。
- 前記治療が第VIII因子分子を投与することを更に含む、請求項10又は11に記載した使用のためのVWF分子。
- 前記VWF分子及び前記第VIII因子分子を別々に投与する、請求項12に記載した使用のためのVWF分子。
- 請求項1〜9の何れか1項に記載のVWF分子を含む医薬組成物。
- (i)請求項1〜9の何れか1項に記載のVWF分子と、(ii)第VIII因子分子とを含む医薬キット。
- 前記VWF分子及び前記第VIII因子分子が別々の組成物に含まれる、請求項15に記載の医薬キット。
- 血液凝固障害の治療において、同時に、別々に又は逐次使用するための、(i)請求項1〜9の何れか1項のVWF分子及び(ii)第VIII因子分子を含む医薬キット。
- インビボで第VIII因子の半減期を増加させるための、請求項1〜9の何れか1項に記載のVWF分子の使用。
- 治療的処置において第VIII因子の半減期の延長に使用するための、請求項1〜9の何れか1項に特定したVWF分子。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP15158065.1 | 2015-03-06 | ||
EP15158065 | 2015-03-06 | ||
PCT/EP2016/054647 WO2016142288A1 (en) | 2015-03-06 | 2016-03-04 | Modified von willebrand factor having improved half-life |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018510212A true JP2018510212A (ja) | 2018-04-12 |
JP2018510212A5 JP2018510212A5 (ja) | 2019-04-04 |
Family
ID=52629450
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017564946A Ceased JP2018510212A (ja) | 2015-03-06 | 2016-03-04 | 向上した半減期を有する改変したフォンヴィレブランド因子 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11155601B2 (ja) |
EP (1) | EP3265483B1 (ja) |
JP (1) | JP2018510212A (ja) |
KR (1) | KR20170125941A (ja) |
CN (1) | CN107406493B (ja) |
AU (1) | AU2016231327B2 (ja) |
BR (1) | BR112017018468A2 (ja) |
CA (1) | CA2978374A1 (ja) |
DK (1) | DK3265483T3 (ja) |
ES (1) | ES2772933T3 (ja) |
HK (1) | HK1244292A1 (ja) |
SG (1) | SG11201706659WA (ja) |
WO (1) | WO2016142288A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20210020030A (ko) | 2018-05-18 | 2021-02-23 | 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. | A형 혈우병의 치료 방법 |
CA3128498A1 (en) * | 2019-02-01 | 2020-08-06 | Bjorn Mellgard | Methods of prophylactic treatment using recombinant vwf (rvwf) |
CN114072420A (zh) * | 2019-07-04 | 2022-02-18 | 康诺贝林伦瑙有限公司 | 用于增加凝血因子viii的体外稳定性的截短的血管性血友病因子(vwf) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010529155A (ja) * | 2007-06-13 | 2010-08-26 | ツェー・エス・エル・ベーリング・ゲー・エム・ベー・ハー | 出血性疾患の治療及び予防的処置における血管外投与のためのvwf安定化fviii製剤及びfviiiなしのvwf製剤の使用 |
WO2013167303A1 (en) * | 2012-05-08 | 2013-11-14 | Csl Behring Gmbh | Sugar compositions for treating hemophilia a and/or von willebrand disease |
Family Cites Families (82)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4444887A (en) | 1979-12-10 | 1984-04-24 | Sloan-Kettering Institute | Process for making human antibody producing B-lymphocytes |
US4716111A (en) | 1982-08-11 | 1987-12-29 | Trustees Of Boston University | Process for producing human antibodies |
GB8308235D0 (en) | 1983-03-25 | 1983-05-05 | Celltech Ltd | Polypeptides |
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US5807715A (en) | 1984-08-27 | 1998-09-15 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin |
GB8422238D0 (en) | 1984-09-03 | 1984-10-10 | Neuberger M S | Chimeric proteins |
US4970300A (en) | 1985-02-01 | 1990-11-13 | New York University | Modified factor VIII |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
GB8720833D0 (en) | 1987-09-04 | 1987-10-14 | Celltech Ltd | Recombinant dna product |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
GB8907617D0 (en) | 1989-04-05 | 1989-05-17 | Celltech Ltd | Drug delivery system |
US5413923A (en) | 1989-07-25 | 1995-05-09 | Cell Genesys, Inc. | Homologous recombination for universal donor cells and chimeric mammalian hosts |
GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
ATE139258T1 (de) | 1990-01-12 | 1996-06-15 | Cell Genesys Inc | Erzeugung xenogener antikörper |
GB9015198D0 (en) | 1990-07-10 | 1990-08-29 | Brien Caroline J O | Binding substance |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
EP0546073B1 (en) | 1990-08-29 | 1997-09-10 | GenPharm International, Inc. | production and use of transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
DE69233482T2 (de) | 1991-05-17 | 2006-01-12 | Merck & Co., Inc. | Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen |
MX9204374A (es) | 1991-07-25 | 1993-03-01 | Idec Pharma Corp | Anticuerpo recombinante y metodo para su produccion. |
ES2136092T3 (es) | 1991-09-23 | 1999-11-16 | Medical Res Council | Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados. |
PT1024191E (pt) | 1991-12-02 | 2008-12-22 | Medical Res Council | Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos |
US5685570A (en) | 1992-04-10 | 1997-11-11 | Sprintpak Pty Ltd | Postage stamps |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
WO1994015625A1 (en) | 1993-01-15 | 1994-07-21 | Enzon, Inc. | Factor viii - polymeric conjugates |
JP4312259B2 (ja) | 1995-04-27 | 2009-08-12 | アムジェン フレモント インク. | 免疫したゼノマウス(XenoMouse)に由来するヒト抗体 |
AU2466895A (en) | 1995-04-28 | 1996-11-18 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
AU6455896A (en) | 1995-07-11 | 1997-02-10 | Chiron Corporation | Novel factor viii:c polypeptide analogs with altered metal-binding properties |
SE9503380D0 (sv) | 1995-09-29 | 1995-09-29 | Pharmacia Ab | Protein derivatives |
US20040092442A1 (en) | 1996-04-24 | 2004-05-13 | University Of Michigan | Inactivation resistant factor VIII |
EP1754718B1 (en) | 1996-04-24 | 2011-03-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Inactivation resistant factor VIII |
US5916771A (en) | 1996-10-11 | 1999-06-29 | Abgenix, Inc. | Production of a multimeric protein by cell fusion method |
KR100643058B1 (ko) | 1996-12-03 | 2006-11-13 | 아브게닉스, 인크. | 복수의 Vн 및 Vк 영역을 함유하는 인간 면역글로불린 유전자좌를 갖는 트랜스제닉 포유동물 및 이로부터 생성된 항체 |
GB9625640D0 (en) | 1996-12-10 | 1997-01-29 | Celltech Therapeutics Ltd | Biological products |
DK0970126T3 (da) | 1997-04-14 | 2001-08-13 | Micromet Ag | Hidtil ukendt fremgangsmåde til fremstillingen af anti-humant antigen-receptorer og anvendelser deraf |
US6235883B1 (en) | 1997-05-05 | 2001-05-22 | Abgenix, Inc. | Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor |
CA2329768C (en) | 1998-04-27 | 2008-06-10 | Opperbas Holding B.V. | Pharmaceutical composition comprising factor viii and neutral liposomes |
PT1135498E (pt) | 1998-11-18 | 2008-04-30 | Genentech Inc | Variantes de anticorpos com maior afinidade de ligação em comparação com os anticorpos parentais |
AU2002248329B2 (en) | 2001-01-12 | 2007-06-28 | The American National Red Cross | Methods and compositions for reducing heparan sulfate proteoglycan-mediated clearance of factor VIII |
WO2002103024A2 (en) | 2001-06-14 | 2002-12-27 | The Scripps Research Institute | Stabilized proteins with engineered disulfide bonds |
ES2411007T3 (es) | 2001-10-10 | 2013-07-04 | Novo Nordisk A/S | Remodelación y glicoconjugación de péptidos |
DE60332011D1 (de) | 2002-04-29 | 2010-05-20 | Sanquin Bloedvoorziening | Antagonisten der interaktion zwischen faktor viii und lrp ("low-density lipoprotein receptor related protein") |
US7361740B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7217797B2 (en) | 2002-10-15 | 2007-05-15 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7365168B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-29 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7041635B2 (en) | 2003-01-28 | 2006-05-09 | In2Gen Co., Ltd. | Factor VIII polypeptide |
AU2004215912B2 (en) | 2003-02-26 | 2009-03-26 | Nektar Therapeutics | Polymer-factor VIII moiety conjugates |
PT1624891E (pt) | 2003-05-06 | 2010-01-05 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Proteínas quiméricas de factor de coagulação-fc destinadas ao tratamento da hemofilia |
CA2545539A1 (en) | 2003-10-15 | 2005-04-28 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of fc-fusion protein serum half-lives by mutagenesis of positions 250, 314 and/or 428 of the heavy chain constant region of ig |
WO2005123780A2 (en) | 2004-04-09 | 2005-12-29 | Protein Design Labs, Inc. | Alteration of fcrn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
GB0412181D0 (en) | 2004-06-01 | 2004-06-30 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
MX2007005466A (es) | 2004-11-12 | 2007-10-19 | Bayer Healthcare Llc | Modificacion dirigida al sitio del factor viii. |
CN101163506B (zh) | 2004-12-27 | 2012-09-26 | 巴克斯特国际公司 | 聚合物-von Willebrand因子偶联物 |
JP2008537680A (ja) | 2005-04-14 | 2008-09-25 | ツェー・エス・エル・ベーリング・ゲー・エム・ベー・ハー | 安定性の増大された改変型凝固第viii因子およびその誘導体 |
AU2007245190B2 (en) | 2006-03-31 | 2011-07-21 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Pegylated factor VIII |
US7982010B2 (en) | 2006-03-31 | 2011-07-19 | Baxter International Inc. | Factor VIII polymer conjugates |
US7985839B2 (en) | 2006-03-31 | 2011-07-26 | Baxter International Inc. | Factor VIII polymer conjugates |
US7645860B2 (en) | 2006-03-31 | 2010-01-12 | Baxter Healthcare S.A. | Factor VIII polymer conjugates |
WO2008077616A1 (en) | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Csl Behring Gmbh | Modified coagulation factors with prolonged in vivo half-life |
JP5702066B2 (ja) | 2006-12-27 | 2015-04-15 | ネクター セラピューティクス | 解離可能な連結を有するフォンウィルブランド因子および第viii因子のポリマー共役体 |
EP1988101A1 (en) | 2007-05-04 | 2008-11-05 | Novo Nordisk A/S | Improvement of factor VIII polypeptide titers in cell cultures |
AU2008274195B2 (en) | 2007-07-11 | 2013-09-05 | Novo Nordisk A/S | Purification of factor VIII using a mixed-mode or multimodal resin |
US8173597B2 (en) | 2007-11-09 | 2012-05-08 | Baxter International Inc. | Modified recombinant factor VIII and von Willebrand factor and methods of use |
EP2626080A3 (en) | 2008-02-27 | 2014-03-05 | Novo Nordisk A/S | Conjugated factor VIII molecules |
ES2531464T3 (es) | 2008-06-24 | 2015-03-16 | Csl Behring Gmbh | Factor VIII, factor de von Willebrand o sus complejos con semivida in vivo prolongada |
MX2011004085A (es) | 2008-10-17 | 2011-09-27 | Baxter International | Factores sanguineos modificados que comprenden un bajo grado de polimero soluble en agua. |
ES2401965T3 (es) | 2009-02-19 | 2013-04-25 | Novo Nordisk A/S | Modificación de Factor VIII |
WO2010115866A1 (en) | 2009-04-06 | 2010-10-14 | Novo Nordisk A/S | Targeted delivery of factor viii proteins to platelets |
NZ600278A (en) * | 2009-11-13 | 2014-04-30 | Grifols Therapeutics Inc | Von willebrand factor (vwf)-containing preparations, and methods, kits, and uses related thereto |
EP2536753B1 (en) | 2010-02-16 | 2017-12-20 | Novo Nordisk A/S | Factor viii molecules with reduced vwf binding |
CN102770450B (zh) | 2010-02-16 | 2015-12-02 | 诺沃—诺迪斯克有限公司 | 因子viii融合蛋白 |
CN102812039B (zh) | 2010-02-16 | 2016-01-20 | 诺沃—诺迪斯克有限公司 | 缀合蛋白质 |
US8859731B2 (en) | 2010-04-21 | 2014-10-14 | Novo Nordisk A/S | Selective modification of proteins |
US20130183280A1 (en) | 2010-07-15 | 2013-07-18 | Novo Nordisk A/S | Stabilized factor viii variants |
CN102161692B (zh) * | 2011-03-08 | 2013-10-02 | 中国人民解放军第三军医大学 | 改造的止血多肽及其运用 |
US20150080309A1 (en) | 2012-04-24 | 2015-03-19 | Nova Nordisk A/S | Compounds Suitable for Treatment of Haemophilia |
EP2796145B1 (en) * | 2013-04-22 | 2017-11-01 | CSL Ltd. | A covalent complex of von willebrand factor and faktor viii linked by a disulphide bridge |
JP2016522219A (ja) * | 2013-06-12 | 2016-07-28 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 血友病の治療に適する化合物 |
-
2016
- 2016-03-04 BR BR112017018468-0A patent/BR112017018468A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2016-03-04 SG SG11201706659WA patent/SG11201706659WA/en unknown
- 2016-03-04 WO PCT/EP2016/054647 patent/WO2016142288A1/en active Application Filing
- 2016-03-04 US US15/555,894 patent/US11155601B2/en active Active
- 2016-03-04 AU AU2016231327A patent/AU2016231327B2/en not_active Ceased
- 2016-03-04 JP JP2017564946A patent/JP2018510212A/ja not_active Ceased
- 2016-03-04 KR KR1020177028206A patent/KR20170125941A/ko unknown
- 2016-03-04 ES ES16712738T patent/ES2772933T3/es active Active
- 2016-03-04 EP EP16712738.0A patent/EP3265483B1/en active Active
- 2016-03-04 DK DK16712738.0T patent/DK3265483T3/da active
- 2016-03-04 CA CA2978374A patent/CA2978374A1/en not_active Abandoned
- 2016-03-04 CN CN201680014025.4A patent/CN107406493B/zh active Active
-
2018
- 2018-03-16 HK HK18103717.6A patent/HK1244292A1/zh unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010529155A (ja) * | 2007-06-13 | 2010-08-26 | ツェー・エス・エル・ベーリング・ゲー・エム・ベー・ハー | 出血性疾患の治療及び予防的処置における血管外投与のためのvwf安定化fviii製剤及びfviiiなしのvwf製剤の使用 |
WO2013167303A1 (en) * | 2012-05-08 | 2013-11-14 | Csl Behring Gmbh | Sugar compositions for treating hemophilia a and/or von willebrand disease |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
PLOS ONE, vol. 7, no. 5, JPN6019046203, 2012, pages 37508 - 1, ISSN: 0004226143 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HK1244292A1 (zh) | 2018-08-03 |
CN107406493B (zh) | 2021-08-13 |
KR20170125941A (ko) | 2017-11-15 |
BR112017018468A2 (pt) | 2018-04-17 |
DK3265483T3 (da) | 2020-03-02 |
EP3265483A1 (en) | 2018-01-10 |
CA2978374A1 (en) | 2016-09-15 |
SG11201706659WA (en) | 2017-09-28 |
WO2016142288A1 (en) | 2016-09-15 |
AU2016231327A1 (en) | 2017-10-26 |
AU2016231327B2 (en) | 2018-08-09 |
ES2772933T3 (es) | 2020-07-08 |
US11155601B2 (en) | 2021-10-26 |
EP3265483B1 (en) | 2019-12-11 |
US20180051067A1 (en) | 2018-02-22 |
CN107406493A (zh) | 2017-11-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR20170125977A (ko) | 응고 인자 및 다중특이적 항체의 조합 요법 | |
JP2016518378A (ja) | 複合体 | |
JP6573989B2 (ja) | 血友病を処置するための切断型フォン・ヴィルブランド因子ポリペプチド | |
US11890327B2 (en) | Truncated von Willebrand factor polypeptides for extravascular administration in the treatment or prophylaxis of a blood coagulation disorder | |
EP3538133B1 (en) | Truncated von willebrand factor polypeptides for treating hemophilia | |
US11155601B2 (en) | Modified von Willebrand factor having improved half-life | |
JP2019522962A (ja) | 改善された薬物動態を有する、グリコシル化vwf融合タンパク質 | |
JP6704420B2 (ja) | フォンヴィレブランド因子の半減期を改善するための化合物 | |
EP4058049A1 (en) | Polypeptides for inducing tolerance to factor viii | |
FVIII | A novel B-domain O-glycoPEGylated FVIII (N8-GP) demonstrates full efficacy and prolonged effect in hemophilic mice models |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20180904 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180904 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20181002 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181023 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181026 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20181026 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20181114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190220 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190220 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20191113 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191203 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200218 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200310 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200603 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20201124 |
|
A045 | Written measure of dismissal of application [lapsed due to lack of payment] |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A045 Effective date: 20210928 |