JP2018008937A - バイオフィルムの処置 - Google Patents
バイオフィルムの処置 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2018008937A JP2018008937A JP2017120358A JP2017120358A JP2018008937A JP 2018008937 A JP2018008937 A JP 2018008937A JP 2017120358 A JP2017120358 A JP 2017120358A JP 2017120358 A JP2017120358 A JP 2017120358A JP 2018008937 A JP2018008937 A JP 2018008937A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- peptidomimetic
- biofilm
- group
- lipophilic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0815—Tripeptides with the first amino acid being basic
- C07K5/0817—Tripeptides with the first amino acid being basic the first amino acid being Arg
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/06—Tripeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/07—Tetrapeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/22—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
- A61L15/32—Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/42—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L15/44—Medicaments
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L15/00—Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
- A61L15/16—Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
- A61L15/42—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L15/46—Deodorants or malodour counteractants, e.g. to inhibit the formation of ammonia or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/16—Otologicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
- A61L2300/252—Polypeptides, proteins, e.g. glycoproteins, lipoproteins, cytokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
- A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
- A61L2300/404—Biocides, antimicrobial agents, antiseptic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Description
a)正味の正電荷を帯び、
b)1〜6アミノ酸の長さ、好ましくは、少なくとも1もしくは2アミノ酸の長さで、最大で4、5もしくは6アミノ酸の長さ、例えば、2〜5もしくは2〜6アミノ酸の長さであるか、または同等の大きさのペプチド模倣薬であり、
c)両親媒性の性質を持ち、1つ以上の親油基を有し、当該親油基の1つが少なくとも7個の非水素原子を含む、ペプチドまたはペプチド模倣薬を提供する。
AA−AA−AA−X−Y−Z (I)
ここで、任意の順で、上記AA(アミノ酸)部分の2つはカチオン性アミノ酸であり、好ましくは、リジンまたはアルギニンであるが、ヒスチジンまたはpH7.0の正に帯電した任意の非遺伝的にコードされたアミノ酸もしくは修飾アミノ酸であってもよく、上記AAの1つは、大きな親油R基を有するアミノ酸であり、当該R基は、14〜27個の非水素原子を有するとともに、好ましくは、2以上、例えば、2または3個の縮合または結合し得る環状基を含有し、これらの環状基は、典型的には、5または6個の非水素原子、好ましくは、6個の非水素原子を含み;
Xは、分岐鎖または非分岐鎖C1〜C10アルキルまたはアリール基、例えば、メチル、エチルまたはフェニルと置換されてもよいが、好ましくは、非置換のN原子であり、この基は、N、OおよびSから選択されたヘテロ原子を最大で2個組み込んでもよく;
Yは、−Ra−Rb−、−Ra−Rb−Rb−、および−Rb−Rb−Ra−から選択された基を表し、ここで、
Raは、C、O、S、NまたはF、好ましくはCであり、
Rbは、Cであり;RaおよびRbの各々は、例えば、C1〜C4アルキル基またはカルボキシル基と置換されるかまたは非置換であり、好ましくは、Yは、−Ra−Rb−であり(RaはCであることが好ましい)、好ましくは、この基は非置換であり、Yが−Ra−Rb−Rb−、またはRb−Rb−Ra−である場合、好ましくは、RaとRbの1つ以上が置換され;
Zは、各々が5または6個の非水素原子(好ましくはC原子)の1〜3個の環状基を含む基であり、上記環状基の2つ以上は縮合していてもよく;当該環の1つ以上は置換されてもよく、これらの置換は、極性基を含んでもよいが、典型的には含んでおらず、適切な置換基は、ハロゲン類、好ましくは、フッ素、およびC1〜C4アルキル基を含み、上記Z部分は、非水素原子を最大で15個、好ましくは、5〜12個組み込み、最も好ましくは、フェニルであり;
上記YとZ間の結合は、YのRaまたはRbとZの上記環状基の1つの非水素原子との共有結合である。
AA1−AA2−AA1−X−Y−Z (II)
ここで、
AA1はカチオン性アミノ酸、好ましくは、リジンまたはアルギニンであるが、ヒスチジンまたはpH7.0の正に帯電した任意の非遺伝的にコードされたアミノ酸または修飾アミノ酸であってもよく;
AA2は、大きな親油R基を有するアミノ酸であり、当該R基は、14〜27個の非水素原子を有するとともに、好ましくは、2以上、例えば、2または3個の縮合または結合し得る環状基を含有し、これらの環状基は、典型的には、5または6個の非水素原子、好ましくは、6個の非水素原子を含み;
X、YおよびZは上記で規定したとおりである。
AA2−AA1−AA1−X−Y−Z (III)
AA1−AA1−AA2−X−Y−Z (IV)
AA1、AA2、X、YおよびZは、上記で規定したとおりである。
AA−AA−AA−R1−R2 (V)
ここで、任意の順で、上記AA(アミノ酸)部分の2つはカチオン性アミノ酸であり、好ましくは、リジンまたはアルギニンであるが、ヒスチジンまたはpH7.0の正に帯電した任意の非遺伝的にコードされたアミノ酸もしくは修飾アミノ酸であってもよく、上記AAの1つは、大きな親油R基を有するアミノ酸であり、当該R基は、14〜27個の非水素原子を有するとともに、好ましくは、2以上、例えば、2または3個の縮合または結合し得る環状基を含有し、これらの環状基は、典型的には、5または6個の非水素原子、好ましくは、6個の非水素原子を含み;
R1は、分岐鎖または非分岐鎖C1〜C10アルキルまたはアリール基、例えば、メチル、エチルまたはフェニルと置換されてもよいが、好ましくは、非置換のN原子であり、この基は、N、O、S、およびF(Fが最も優先度が低い)から選択されたヘテロ原子を最大で2個組み込んでもよく;
R2は、2〜20個の非水素原子を有する脂肪族部分であり、好ましくは、これらは炭素原子であるが、酸素、窒素、または硫黄原子を組み込んでもよく、好ましくは、R2は、3〜10、最も好ましくは、3〜6個の非水素原子を含み、上記部分は、直鎖、分岐鎖、または環状であってもよい。上記R2基が環状基を含む場合、これは、R1の窒素原子に直接固定されることが好ましい。
環状基を含むR2基のうち、R2がシクロヘキシルまたはシクロペンチルである分子が好ましい。
AA1−AA2−AA1−R1−R2 (VI)
ここで、
AA1は、カチオン性アミノ酸、好ましくは、リジンまたはアルギニンであるが、ヒスチジンまたはpH7.0の正に帯電した任意の非遺伝的にコードされたアミノ酸もしくは修飾アミノ酸であってもよく;
AA2は、大きな親油R基を有するアミノ酸であり、当該R基は、14〜27個の非水素原子を有するとともに、好ましくは、2以上、例えば、2または3個の縮合または結合し得る環状基を含有し、これらの環状基は、典型的には、5または6個の非水素原子、好ましくは、6個の非水素原子を含み;
R1およびR2は上記で規定したとおりである。
AA2−AA1−AA1−R1−R2 (VII)
AA1−AA1−AA2−R1−R2 (VIII)
ここで、AA1、AA2、R1、およびR2は上記で規定したとおりである。
適切なペプチド模倣薬は、還元剤、例えば、ボラン、または水素化アルミニウムリチウム等のヒドリド試薬を用いた処理によりアミド結合がメチレンアミンに還元された還元ペプチドを含む。そのような還元には、分子の全体的なカチオン性を増大させるという利点がさらにある。
ペプチド合成
化学物質
保護アミノ酸Boc−Arg−OHおよびBoc−4−フェニル−Pheをバッヘム・アーゲー(Bachem AG)から購入し、Boc−4−ヨードフェニルアラニンをアルドリッチ(Aldrich)から購入した。ペプチドのC末端を構成するイソプロピルアミン、プロピルアミン、ヘキシルアミン、ブチルアミン、ヘキサデシルアミン、イソブチルアミン、シクロヘキシルアミン、およびシクロペンチルアミンをフルカ(Fluka)から購入した。ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)、1−ヒドロキシベンゾトリアゾール(1−HOBt)、クロロトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート(PyCloP)、およびO−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−N,N,N',N'テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート(HBTU)をフルカから購入した。4−n−ブチルフェニルボロン酸、4−t−ブチルフェニルボロン酸、4−ビフェニルボロン酸、2−ナフチルボロン酸、トリオルソ−トリルホスフィン、臭化ベンジル、および酢酸パラジウムをアルドリッチから購入した。溶剤をメルク(Merck)、リーデル・デ・ヘーン(Riedel−de Haen)、またはアルドリッチから購入した。
Boc−2,5,7−トリ−tert−ブチルトリプトファン−OHの調製:H2N−Trp−OH(1.8g、8.8mmol)、t−BuOH(4.7g、63.4mmol)のトリフルオロ酢酸(19mL)混合液を70℃で3時間撹拌する。その結果得られた中間的な褐色系の半透明の溶液を室温で30分間ロータリーエバポレーターにかけて還元させた後、60mLの7%(重量)NaHCO3を滴下して粉末にする。次いで、得られた灰色/白色粒状固体を真空ろ過により回収し、室温で24時間かけて真空乾燥させる。生成物を結晶化により近沸点40%エタノール混合水から分離する。体積は、典型的には、粗生成物1グラムあたり20mL程度である。
Boc−Phe(4−4'−ビフェニル)−OHの調製:脱エステル化の基本手順を用いて、Boc−Phe(4−4'−ビフェニル)−OBnから61%の収率で標記化合物を調製した。
本研究において用いた6つのブドウ球菌株(2つの表皮ブドウ球菌、2つの溶血性連鎖球菌、および2つの黄色ブドウ球菌)は、それらの以前より公知のバイオフィルム形成能(表1)に基づいて選択した。
陽イオン調整ミューラーヒントンII液体培地(MHIIB)で細菌を37℃で一晩成長させた。
我々は、E−test(アーベー・バイオディスク(AB Biodisk)、ソルナ(Solna)、スウェーデン(Sweden))を用いて、オキサシリン、ゲンタマイシン、テトラサイクリン、バンコマイシン、およびリネゾリドのMICを判定するとともに、微量液体希釈アッセイを用いてリファンピシンのMICを判定した。ブレイクポイントは、EUCASTの基準に従ってに解釈した。我々は、以前より公知の抗菌活性に基づいて3つの異なるSAMP(化合物A、B、およびC;リティクス・バイオファーマ(Lytix Biopharma)、トロムソ(Tromsoe)、ノルウェー(Norway)、図1参照)選択し、微量液体希釈アッセイでそれらの正確なMICを判定した。3つのSAMPの全てがそれらのカチオン性部分を提供する2つのアルギニン残基を有するトリペプチドである(図1)。親油性バルクが修飾トリプトファン誘導体により提供される。上記化合物間の相違点は、C末端修飾の大きさであり、化合物Aは、C末端修飾が最小であり、化合物Bは最大である(図1)。SAMPの分子量は、700〜800ダルトンの範囲である。
96ウェル平底マイクロタイタープレート(ヌンクロン・サーフェス(Nunclon Surface)、ヌンク(NUNC)、ロスキレ(Roskilde)、デンマーク(Denmark))中でバイオフィルム形成を誘発した。まず、一晩培養物をMHIIB(表皮ブドウ球菌および溶血性連鎖球菌)またはトリプティックソイブロス(TSB)において、5%ブドウ糖および5%NaCl(黄色ブドウ球菌)で1:100に希釈した。各ウェルにこの細菌懸濁液(107cfu/ml)を200μl加え、37℃で24時間かけて培養した。24時間後、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)でウェルを入念に2度洗浄してプランクトン様細菌を除去した。この洗浄手順を、下記で詳述するアラマーブルー法でPBSの代謝活性を測定して評価した。DNA抽出およびicaオペロンのマーカーとしてのicaDのPCRを、以前より報告されているように実施した(デ・シルバら(de Silva)著、ジャーナル・オブ・クリニカル・マイクロバイオロジー(J.Clin.Microbiol.)、[2002年]、第40巻:p.382−388)。洗浄したバイオフィルムを異なる濃度の抗生物質またはSAMPで処理した。テトラサイクリン(シグマ・アルドリッチ(Sigma Aldrich)、バンコマイシン(アルファーマ(Alpharma))およびリネゾリド(ファイザー(Pfizer))の原液をMHIIBで5mg/L、50mg/L、および500mg/Lに希釈し、リファンピシン(シグマ・アルドリッチ)をMHIIBで0.01mg/L、0.1mg/L、および1mg/Lに希釈した。上記SAMPのトリフルオロ酢酸塩を滅菌水中に溶解し、MHIIBで5mg/L、50mg/L、および500mg/Lに希釈した。各ウェルに200μlの抗生物質またはSAMPを異なる濃度で加え、37℃で24時間かけて培養した。陽性対照は、200μlのMHIIBのみを加えた未処理のバイオフィルムであった。陰性対照は、200μlのMHIIBのみで、細菌は加えなかった。
MHHBで希釈した一晩培養物の1mlアリコートを用いて溶血性連鎖球菌TUH 51−07バイオフィルムを24ウェルディッシュ(Falcon3047、ベクトン・ディッキンソン(Becton Dickinson)、ニュージャージー(NJ)、米国(USA))中のプラスティックカバースライド(Thermanox、片側を細胞培養処理、ヌンク、ロスキレ、デンマーク)上に24時間かけて成長させた。次いで、このカバースライドをPBSで入念に洗浄し、新たなプレートに移し、24時間かけて50mg/Lと500mg/Lのテトラサイクリン、50mg/Lと500mg/Lのバンコマイシン、または50mg/Lと500mg/Lの化合物Aで処理した。カバースライドを9%NaClで再度洗浄し、製造者の使用説明書に従ってLIVE/DEADキット(インビトロジェン・モレキュラー・プローブズ(Invitrogen Molecular Probes)、ユージーン(Eugene)、オレゴン(Oregon)、米国(USA))で染色した。この染色剤は、SYTO9(緑色蛍光)およびヨウ化プロピジウム(PI;赤色蛍光)を含有し、これらはともにDNAと結合する。単独で用いる場合、SYTO9は、一般に、個体群中の全ての細菌(膜が無傷のものと、膜が損傷しているものの両方)を染色する。対照的に、PIは、膜が損傷した細菌だけに浸透し、両方の染料が存在する場合には、SYTO9染色剤の緑色蛍光を低減させる。我々は、処理したバイオフィルムおよび未処理のバイオフィルムをLeica TCS SP5(ライカ・マイクロシステムズ・ツェーエムエス・ゲーエムベーハー(Leica Microsystems CMS Gmbh)、マンハイム(Mannheim)、ドイツ(Germany))共焦点レーザー走査顕微鏡(CLSM)で観察した。63X 1.2 NA HCXPL APO水浸レンズを用いて画像を得た。SYTO9(緑色チャネル)の検出のために、我々は、488nmラインのアルゴンレーザーおよび495〜515nmの検出帯域幅を用いた。PI検出(赤色チャネル)については、我々は、561nmラインおよび615〜660nmの検出帯域幅を用いた。これら2つの蛍光信号を400Hzで連続して採取した。Leica LAS AFバージョン1.8.2を用いて画像の解析および出力を行った。
製造者の公式(インビトロジェン、カールズバッド、米国)に従ってABの低減パーセントを計算した。我々は、反復測定全ての平均値および標準偏差(SD)を計算した。6つのブドウ球菌株全ての平均データに基づいてピアソンの両側相関をAB法とCV法(図2)間に関して計算した。SPSS for Windowsのソフトウェアバージョン14.0を用いて統計的分析を行った。
上記表1は、抗生物質およびSAMPのMICをまとめたものである。6つの株全てがバンコマイシン、リネゾリド、リファンピシン、バンコマイシン、およびテトラサイクリンに対して感受性を示した。2つの黄色ブドウ球菌株は、ゲンタマイシンおよびオキサシリンに対して感受性を示したが、他の4つのブドウ球菌株はこれらの薬剤に耐性があった。SAMPのMICは、一般に、抗生物質のMICより高かった。
CV染色で定量化した生物量と形成後24時間のバイオフィルムにおけるAB低減で定量化したバイオフィルム代謝活性(図2)との間には強い相関関係(R0.939、p=0.002)があった。洗浄後のPBSにおける代謝活性はごくわずかしかなく、プランクトン様細菌がウェルからほぼ完全に除去されたことを示す(データの記載なし)。
図3および図4は、未処理および処理済のバイオフィルムにおけるAB低減のパーセンテージを示す。ほとんど例外なく、試験を行った抗生物質は、MIC近傍の濃度で全ての株の代謝活性を低減させた。抗生物質濃度を高くする(概ね10〜20×MIC)ことで、全ての抗生物質が黄色ブドウ球菌PIA9を除いて代謝活性を強く抑制した。しかしながら、1つの株(黄色ブドウ球菌PIA90)における代謝活性を完全に抑制したのはテトラサイクリンだけであった。黄色ブドウ球菌PIA9バイオフィルムにおいてABを≧50%低減した抗生物質はなかった。この株は、バンコマイシンに対して完全な耐性を持つバイオフィルムを生成したようであった。
図5は、LIVE/DEAD染色を用いた溶血性連鎖球菌TUH51−07バイオフィルムの共焦点顕微鏡写真を示す。予想どおり、未処理のバイオフィルムは、無傷の細胞膜を有する緑色の細胞を示した。50mg/L、特には、500mg/Lの濃度の化合物Aで処理したバイオフィルムでは、ほぼ全ての細胞が赤色に染色され、細菌が死んでいることが示される。500mg/Lテトラサイクリンで処理したバイオフィルムでは、細胞のかなりの部分がなお緑色であり、細胞膜が無傷である細菌が生きていることが示される。臨床診療で得られたピーク値近傍の濃度のバンコマイシン(50mg/L)を用いたバイオフィルムの処理(図5d)では、大部分が緑色の細胞(生きた生物)が示された。
試験を行ったSAMPの全ては、抗生物質と比べて低い濃度で、ブドウ球菌バイオフィルムにおける代謝活性の低減に明らかにより効果的であったが、一般には、プランクトン様成長条件下ではMICが高かった。プランクトン様成長条件では、本研究に用いられた全ての株が、バンコマイシン、リネゾリド、リファンピシン、およびテトラサイクリンに対して感受性があった。ブドウ球菌バイオフィルム上のバンコマイシンは抗菌活性が低いことが以前より報告されている。我々の研究では、50mg/Lのバンコマイシンは、試験を行った6株中4つにおいて成熟バイオフィルムにおける代謝活性に対して強い抑制力を発揮した。それでもなお、この濃度では多くの細菌が殺されなかったことがCLSMで確認された。一般に、抗生物質は、代謝活性を完全に抑制することはほとんどない。対照的に、SAMPは、代謝活性を完全に抑制できることが多く、効果的に殺菌できることが示されている。CLSMによって得られた画像は、この知見をさらに裏付けている。500mg/Lの化合物Aを用いた処理では、全ての細胞の膜が損傷し、溶血性連鎖球菌バイオフィルムにおける細胞溶解が示されている。500mg/Lテトラサイクリンで処理したバイオフィルムは、LIVE/DEAD染色で記録される、かなりの数の生きた細胞をなおも含有していたが、対応するバイオフィルムアッセイでは、測定可能な代謝活性はほとんどなかった。
被覆粒子の調製
1.
20mLペプチド反応装置に、560mg(0.5mmol)のアミノメチル化ポリスチレンHL粒子(100〜200メッシュ、0.90mmol/g置換)を加えた後、8mLのDCMで10分間ずつ2回洗浄した。次いで、さらに8mLのDCMを加え、上記粒子を1時間かけて膨張させた後、最初の結合の前に反応装置の内部を排出した。
8mLのDMFに、3等量のBocアミノ酸および683mg(3.6等量)のO−(ベンゾトリアゾール−1−イル)−N,N,N',N'−テトラメチルウロニウム(HBTU)カップリング試薬を加えた。この混合液を反応装置に移す直前に、0.855mL(10等量)のN−エチルジイソプロピルアミン(DIPEA)を加え、その混合液を上記反応装置に一度で移した。次いで、反応装置を適度に掻き混ぜながら、一晩の間室温で反応を行った。
次いで、粒子を8mLのDMFで15分間ずつ3回洗浄するとともに、8mLのDCMで10分間ずつ2回洗浄した。
この時点で、小サンプルを反応装置から取り出し、結合していないアミンが残っていないかを判断するためにカイザーテストを行った。
カイザーテストの結果が陽性であった場合、上記ポイント2から、それを含む手順を同じアミノ酸で繰り返した。テストが陰性(結合していないアミンが残っていない)の場合には、8mLのTFA/DCM(1:1)を反応装置に加えて、新たに結合したアミノ酸からBoc基を除去し、反応装置を1時間適度に掻き混ぜた。
次いで、粒子を8mLのDCMで15分ずつ3回洗浄するとともに、8mLのDMFで10分ずつ2回洗浄した。
ここで、上記ポイント2からポイント6までを含む上記手順を次に結合すべきアミノ酸に対して繰り返した。
最後のアミノ酸単位が上記手順のステージ5を終えると、粒子を8mLのDCMで15分ずつ4回洗浄し、反応装置内において窒素気流下で30分間かけて乾燥させた後、真空下において室温で24時間かけて乾燥させた。次いで、上記粒子を、密閉したバイアル内において4℃で貯蔵した。
上記の方法で、下記のペプチド被覆粒子をほぼ定量的収率で調製したが、これには以下の適切なアミノ酸を用いた:
アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−ポリスチレン(本発明に係るペプチド)
アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−アミノヘキサノイル−ポリスチレン(本発明に係るペプチド)
アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル−ポリスチレン(本発明に係るペプチド)
アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル−アミノヘキサノイル−ポリスチレン(本発明に係るペプチド)
表面被覆粒子の細菌コロニー形成の低減
表皮ブドウ球菌を用いて上記で調製した粒子を24時間かけて培養した。標準的な手順に従ってSyto9によりバイオフィルムを形成する細菌を染色した後、細菌表面上の細菌コロニー形成量を蛍光顕微鏡法(励起周波数485nm、放射周波数498nm)により判定した。
A)非被覆アミノメチル化ポリスチレンHL粒子
B)表皮ブドウ球菌との24時間培養後の非被覆アミノメチル化ポリスチレンHL粒子
C)表皮ブドウ球菌との24時間培養後のアルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−ポリスチレン粒子
D)表皮ブドウ球菌との24時間培養後のアルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−アミノヘキサノイル−ポリスチレン粒子
E)表皮ブドウ球菌との24時間培養後のアルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル−ポリスチレン粒子
F)表皮ブドウ球菌との24時間培養後のアルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル−アミノヘキサノイル−ポリスチレン粒子
図B)のポリスチレン粒子のバイオフィルムコロニー形成は、図A)のポリスチレン粒子の滑らかな表面と比較して、粒子の表面がふわふわしたような線毛のようなもの(Fluffy)により容易に観察できる。図C)、図D)、図E)および図F)は、表皮ブドウ球菌によるコロニー形成に対する4つのペプチド被覆の効果を示す。アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル(図C))、アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−アミノヘキサノイル(図D)、アルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル(図E))、およびアルギニニル−(2,5,7−トリ−tert−ブチル)トリプトファニル−アルギニニル−フェニルアラニニル−アミノヘキサノイル(図F))での被覆は、それぞれ、細菌コロニー形成を妨げることにより、バイオフィルム形成の予防に効果的であることが示されている。
96ウェル平底マイクロタイタープレート(ヌンクロン・サーフェス、ヌンク)中でバイオフィルム形成を誘発した。まず、一晩培養物をMHIIB(表皮ブドウ球菌および溶血性連鎖球菌)またはトリプティックソイブロス(TSB)において、5%ブドウ糖および5%NaCl(黄色ブドウ球菌)で1:100に希釈した。各ウェルにこの細菌懸濁液(107cfu/ml)を200ml加え、37℃で24時間かけて培養した。24時間後、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)でウェルを入念に2度洗浄してプランクトン様細菌を除去した。この洗浄手順を、下記で詳述するアラマーブルー法でPBSの代謝活性を測定して評価した。
Claims (22)
- バイオフィルム関連感染症の治療に用いるペプチドまたはペプチド模倣薬であって、該ペプチドまたはペプチド模倣薬は、
a)正味の正電荷を帯び、
b)1〜6アミノ酸の長さであるか、または同等の大きさのペプチド模倣薬であり、
c)1つ以上の親油基を有する両親媒性の性質を持ち、該親油基の1つが少なくとも7個の非水素原子を含む、ペプチドまたはペプチド模倣薬。 - 被験体のバイオフィルム関連感染症を治療する方法であって、該被験体にペプチドまたはペプチド模倣薬を投与する工程を包含し、該ペプチドまたはペプチド模倣薬は、
a)正味の正電荷を帯び、
b)1〜6アミノ酸の長さであるか、または同等の大きさのペプチド模倣薬であり、
c)1つ以上の親油基を有する両親媒性の性質を持ち、該親油基の1つが少なくとも7個の非水素原子を含む、方法。 - バイオフィルム関連感染症の治療薬の製造における、
a)正味の正電荷を帯び、
b)1〜6アミノ酸の長さであるか、または同等の大きさのペプチド模倣薬であり、
c)1つ以上の親油基を有する両親媒性の性質を持ち、該親油基の1つが少なくとも7個の非水素原子を含む、ペプチドまたはペプチド模倣薬の使用。 - 前記感染は、慢性創傷感染、自然弁心内膜炎、急性中耳炎、慢性細菌性前立腺炎、肺炎、歯垢、歯周炎、呼吸器疾患におけるバイオフィルム感染、または埋め込み型もしくは人工医療器具に関連した器具による感染である、請求項1に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、請求項2に記載の方法、あるいは請求項3に記載の使用。
- バイオフィルム形成を抑制するかまたはバイオフィルムを除去する方法であって、該バイオフィルムをペプチドまたはペプチド模倣薬に接触させる工程を包含し、該ペプチドまたはペプチド模倣薬は、
a)正味の正電荷を帯び、
b)1〜6アミノ酸の長さであるか、または同等の大きさのペプチド模倣薬であり、
c)1つ以上の親油基を有する両親媒性の性質を持ち、該親油基の1つが少なくとも7個の非水素原子を含む、方法。 - 前記バイオフィルムは医療器具上に存在する、請求項5に記載の方法。
- 前記ペプチドまたはペプチド模倣薬は少なくとも+2の正味電荷を有する、請求項1〜6のいずれか1項先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドもしくはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記ペプチドは3アミノ酸の長さであるか、または前記ペプチド模倣薬は同等の大きさである、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基は9〜12個の非水素原子を有する、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基は、随意に芳香族となる環状基を含む、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基は、随意に縮合される2つ以上の環状基を含む、請求項10に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基はアミノ酸のR基である、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記アミノ酸は、フェニルアラニン、トリプトファン、チロシン、トリブチルトリプトファン(Tbt)、ビフェニルアラニン、ジフェニルアラニン、およびビフェニルアラニン誘導体を含む群から選択される、請求項12に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基は極性基を2つ以下含む、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記親油基は極性基を含まない、請求項14に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記ペプチドは3つのアミノ酸部分を含み、任意の順で、該アミノ酸部分の2つはカチオン性アミノ酸であり、該アミノ酸の1つは、親油R基を有するアミノ酸であり、該R基は、14〜27個の非水素原子を有する、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチド、方法、あるいは使用。
- 前記ペプチドは下記式(V)を有し、
AA−AA−AA−R1−R2 (V)
任意の順で、該AA(アミノ酸)部分の2つはカチオン性アミノ酸であり、該AAの1つは、親油R基を有するアミノ酸であり、該R基は、14〜27個の非水素原子を有し;
R1は、分岐鎖または非分岐鎖C1〜C10アルキルまたはアリール基と置換され得るN原子であり、該基は、N、O、およびSから選択されたヘテロ原子を最大で2個組み込んでもよく;
R2は、2〜20個の非水素原子を有する脂肪族部分であり、該部分は、直鎖、分岐鎖、または環状である、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチド、方法、または使用。 - 前記バイオフィルムはグラム陽性細菌を含む、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 前記グラム陽性細菌はブドウ球菌を含む、請求項18に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬。
- 前記ブドウ球菌は溶血性連鎖球菌である、請求項19に記載のペプチドまたはペプチド模倣薬。
- 前記ペプチドまたはペプチド模倣薬は固形支持体に付着する、先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬、方法、あるいは使用。
- 先行する請求項のいずれか1つに記載のペプチドまたはペプチド模倣薬を含む固形支持体。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
GB0818074.7 | 2008-10-02 | ||
GBGB0818074.7A GB0818074D0 (en) | 2008-10-02 | 2008-10-02 | Treatment of biofilms |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011529620A Division JP6440342B2 (ja) | 2008-10-02 | 2009-10-02 | バイオフィルムの処置 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2018008937A true JP2018008937A (ja) | 2018-01-18 |
Family
ID=40019964
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011529620A Active JP6440342B2 (ja) | 2008-10-02 | 2009-10-02 | バイオフィルムの処置 |
JP2017120358A Pending JP2018008937A (ja) | 2008-10-02 | 2017-06-20 | バイオフィルムの処置 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011529620A Active JP6440342B2 (ja) | 2008-10-02 | 2009-10-02 | バイオフィルムの処置 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9085608B2 (ja) |
EP (2) | EP2350116B1 (ja) |
JP (2) | JP6440342B2 (ja) |
CN (2) | CN107233564A (ja) |
AU (1) | AU2009299579B2 (ja) |
CA (1) | CA2739174C (ja) |
DK (1) | DK2350116T3 (ja) |
ES (1) | ES2753886T3 (ja) |
GB (1) | GB0818074D0 (ja) |
PL (1) | PL2350116T3 (ja) |
PT (1) | PT2350116T (ja) |
WO (1) | WO2010038040A1 (ja) |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB2463181B (en) | 2007-05-14 | 2013-03-27 | Univ New York State Res Found | Induction of a physiological dispersion response in bacterial cells in a biofilm |
GB0818072D0 (en) * | 2008-10-02 | 2008-11-05 | Lytix Biopharma As | Compounds |
US9480669B2 (en) | 2015-01-06 | 2016-11-01 | The Regents Of The University Of California | Method of destroying and preventing bacterial and fungal biofilm by amino acid infusion |
US9549904B2 (en) | 2012-06-06 | 2017-01-24 | Thomas Bryan | Method of destroying bacterial biofilm using sterile intravenous or intracavernous glycerin |
AU2013235336B2 (en) * | 2012-03-23 | 2016-09-08 | Amicrobe, Inc. | Compositions and uses of antimicrobial materials with tissue-compatible properties |
WO2014191789A1 (en) * | 2013-05-27 | 2014-12-04 | Universite Pierre Et Marie Curie (Paris 6) | New cationic amino acids, pharmaceutical compositions containing the same and their use for the treatment of bacterial infections |
JP6516758B2 (ja) * | 2014-01-22 | 2019-05-22 | エイジェンシー・フォー・サイエンス,テクノロジー・アンド・リサーチ | 抗菌ペプチド模倣物 |
US10563069B2 (en) | 2017-03-30 | 2020-02-18 | International Business Machines Corporation | Prevention of biofilm formation |
US10507267B2 (en) | 2017-04-25 | 2019-12-17 | International Business Machines Corporation | Highly hydrophobic antifouling coatings for implantable medical devices |
US11382885B2 (en) | 2017-06-07 | 2022-07-12 | The Regents Of The University Of California | Compositions for treating fungal and bacterial biofilms and methods of using the same |
US10696849B2 (en) | 2017-08-08 | 2020-06-30 | International Business Machines Corporation | Tailorable surface topology for antifouling coatings |
US10745586B2 (en) | 2017-08-08 | 2020-08-18 | International Business Machines Corporation | Fluorinated networks for anti-fouling surfaces |
US11541105B2 (en) | 2018-06-01 | 2023-01-03 | The Research Foundation For The State University Of New York | Compositions and methods for disrupting biofilm formation and maintenance |
GB202008978D0 (en) * | 2020-06-12 | 2020-07-29 | Amicoat As | Antimicrobial formulation |
GB202008980D0 (en) * | 2020-06-12 | 2020-07-29 | Amicoat As | Medical devices and materials |
DE102020211389A1 (de) | 2020-09-10 | 2022-03-10 | Beiersdorf Aktiengesellschaft | Wirkstoffhaltige Wundverschlusszubereitung |
DE102020211387A1 (de) * | 2020-09-10 | 2022-03-10 | Beiersdorf Aktiengesellschaft | Wirkstoffhaltige Wundverschlusszubereitung |
DE102021200975B4 (de) | 2021-02-03 | 2022-11-24 | Beiersdorf Aktiengesellschaft | Biologisch-basierte Wundverschlusszubereitung |
GB202109626D0 (en) * | 2021-07-02 | 2021-08-18 | Amicoat As | Method |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004501166A (ja) * | 2000-06-16 | 2004-01-15 | ハーキュリーズ・インコーポレーテッド | 化学修飾ペプチド、組成物、並びに製造方法および使用 |
JP2004514644A (ja) * | 2000-03-09 | 2004-05-20 | アルファーマ エイ エス | 抗菌化合物および処方物 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69120821T2 (de) * | 1990-08-31 | 1997-01-23 | Univ Minnesota | Polyethylenglykol-Derivate für Festphasenanwendungen |
CN1313333A (zh) * | 2000-03-15 | 2001-09-19 | 上海博德基因开发有限公司 | 一种新的多肽——人nad-依赖的2-羟酸脱氢家族蛋白16和编码这种多肽的多核苷酸 |
US7592008B2 (en) * | 2000-11-20 | 2009-09-22 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois, A Body Corporate And Politic Of The State Of Illinois | Membrane scaffold proteins |
AU2002317071B2 (en) * | 2001-06-22 | 2008-01-31 | The Hospital For Sick Children | Antimicrobial peptides |
JP3834655B2 (ja) * | 2002-12-16 | 2006-10-18 | 国立大学法人広島大学 | 抗菌性材料、及びその製造方法 |
JP4486893B2 (ja) * | 2002-12-22 | 2010-06-23 | ザ スクリップス リサーチ インスティテュート | タンパク質アレイ |
US7220405B2 (en) * | 2003-09-08 | 2007-05-22 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Peptide-based conditioners and colorants for hair, skin, and nails |
GB0404374D0 (en) * | 2004-02-27 | 2004-03-31 | Univ Manchester | Treatment of bacterial infections |
JP2005318829A (ja) * | 2004-05-07 | 2005-11-17 | Shigeru Kinoshita | 抗菌性ペプチド、該抗菌性ペプチドをコードするポリヌクレオチド、並びに該抗菌性ペプチドを含有する抗菌剤、抗菌性医薬、点眼薬及び眼感染症疾患検査薬 |
EP1853620B1 (en) * | 2005-02-09 | 2012-01-11 | Helix Biomedix, Inc. | Antimicrobial hexapeptides |
JPWO2007074747A1 (ja) * | 2005-12-26 | 2009-06-04 | 株式会社クラレ | 細胞培養用材料 |
EP1991245A2 (en) | 2006-02-15 | 2008-11-19 | Massachusetts Institute of Technology (MIT) | Medical devices and coatings with non-leaching antimicrobial peptides |
CA2653748A1 (en) | 2006-05-02 | 2007-11-15 | Allozyne, Inc. | Non-natural amino acid substituted polypeptides |
EP2027257A4 (en) * | 2006-05-24 | 2010-10-20 | Agency Science Tech & Res | BIOACTIVE SURFACE FOR HEPATOCYTE-BASED APPLICATIONS |
US20090053278A1 (en) * | 2006-11-03 | 2009-02-26 | Fatora S Robert | Anti-microbial compositions and devices and methods of using the same |
GB0724951D0 (en) | 2007-12-20 | 2008-01-30 | Lytix Biopharma As | Compounds |
GB0724953D0 (en) | 2007-12-20 | 2008-01-30 | Lytix Biopharma As | Methods of peptide modification |
GB0818072D0 (en) * | 2008-10-02 | 2008-11-05 | Lytix Biopharma As | Compounds |
-
2008
- 2008-10-02 GB GBGB0818074.7A patent/GB0818074D0/en not_active Ceased
-
2009
- 2009-10-02 PL PL09745077T patent/PL2350116T3/pl unknown
- 2009-10-02 JP JP2011529620A patent/JP6440342B2/ja active Active
- 2009-10-02 WO PCT/GB2009/002364 patent/WO2010038040A1/en active Application Filing
- 2009-10-02 PT PT97450779T patent/PT2350116T/pt unknown
- 2009-10-02 US US13/122,177 patent/US9085608B2/en active Active
- 2009-10-02 DK DK09745077T patent/DK2350116T3/da active
- 2009-10-02 ES ES09745077T patent/ES2753886T3/es active Active
- 2009-10-02 EP EP09745077.9A patent/EP2350116B1/en active Active
- 2009-10-02 CA CA2739174A patent/CA2739174C/en active Active
- 2009-10-02 EP EP19191972.9A patent/EP3594223B1/en active Active
- 2009-10-02 CN CN201710409290.9A patent/CN107233564A/zh active Pending
- 2009-10-02 AU AU2009299579A patent/AU2009299579B2/en active Active
- 2009-10-02 CN CN2009801392638A patent/CN102171238A/zh active Pending
-
2017
- 2017-06-20 JP JP2017120358A patent/JP2018008937A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2004514644A (ja) * | 2000-03-09 | 2004-05-20 | アルファーマ エイ エス | 抗菌化合物および処方物 |
JP2004501166A (ja) * | 2000-06-16 | 2004-01-15 | ハーキュリーズ・インコーポレーテッド | 化学修飾ペプチド、組成物、並びに製造方法および使用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
HAUG, B.E., ET AL., J. MED. CHEM., vol. 47, JPN6014012128, 2004, pages 4159 - 4162 * |
HAUG, B.E., ET AL., J. MED. CHEM., vol. 51, JPN6014012130, 21 June 2008 (2008-06-21), pages 4306 - 4314 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN107233564A (zh) | 2017-10-10 |
AU2009299579A1 (en) | 2010-04-08 |
CA2739174C (en) | 2018-08-21 |
US9085608B2 (en) | 2015-07-21 |
EP2350116B1 (en) | 2019-08-21 |
DK2350116T3 (da) | 2019-11-18 |
GB0818074D0 (en) | 2008-11-05 |
PL2350116T3 (pl) | 2020-03-31 |
JP2012504587A (ja) | 2012-02-23 |
EP2350116A1 (en) | 2011-08-03 |
EP3594223B1 (en) | 2021-12-22 |
JP6440342B2 (ja) | 2018-12-19 |
PT2350116T (pt) | 2019-11-20 |
US20110236453A1 (en) | 2011-09-29 |
AU2009299579B2 (en) | 2015-03-12 |
EP3594223A1 (en) | 2020-01-15 |
ES2753886T3 (es) | 2020-04-14 |
WO2010038040A1 (en) | 2010-04-08 |
CN102171238A (zh) | 2011-08-31 |
CA2739174A1 (en) | 2010-04-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6440342B2 (ja) | バイオフィルムの処置 | |
AU2016210742B2 (en) | Inhibition of biofilm organisms | |
US11548912B2 (en) | Antimicrobial compounds | |
KR101955636B1 (ko) | 항생제 그리고 분산제 또는 항-부착제를 포함하는 조성물 | |
US20130102524A1 (en) | Compounds And Their Use | |
US11680088B2 (en) | Bioactive peptides derived from snakes | |
US20220153786A1 (en) | Peptides for preventing biofilm formation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20180518 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180518 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180717 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20181004 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20190326 |