JP2017536458A - ポリリン酸ヒドロゲル並びにその製造及び使用方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、2014年11月18日にいずれも出願された米国仮特許出願第62/081,051号明細書及び同第62/081,473号明細書に対する優先権を請求する。これらの出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
(式中、Rが水素であるとき、これはアクリロイル基であり、Rがメチルであるとき、これはメタクリロイル基である)
で表されるアクリロイル基又はメタクリロイル基を含む任意の化合物である。
a.(1)複数のリン酸基と複数のペンダントアクリロイル基、ペンダントメタクリロイル基、又はそれらの組合せとを含むポリリン酸プレポリマーを含む第2ポリマー網目構造、及び(2)遊離ラジカル開始剤の存在下で、(メト)アクリルモノマーを重合して、第1ポリマー網目構造を生成するステップであって、第1網目構造及び第2網目構造が互いに共有結合的に架橋されて、第1ヒドロゲルを生成する、ステップと、
b.第1ヒドロゲルを多価カチオン、ポリカチオン、又はそれらの組合せと接触させて、第2ポリマー網目構造をさらに非共有結合的に架橋するステップと
により製造される。
(式中、R4は、水素又はアルキル基であり、及びnは、1〜10である)
を有する。一態様では、式I中、R4はメチルであり、nは2である。
(式中、R4及びnは、上に定義した通りである)
の複数の単位を有する。
(式中、xは、ポリリン酸プレポリマーの40〜90mol%であり、yは、ポリリン酸プレポリマーの1〜30mol%であり、且つzは、ポリリン酸プレポリマーの1〜30mol%であり、及び
各R1は、独立して水素又はメチルである)
で示される単位を有するランダムコポリマーである。
(式中、R5は、水素又はアルキル基であり、
nは、1〜10であり、
Yは、酸素、硫黄、又はNR6であり、ここで、R6は、水素、アルキル基、又はアリール基であり、
Zは、硫酸塩、スルホン酸塩、カルボン酸塩、ホウ酸塩、ボロン酸塩、又はリン酸塩である)
のモノマーで置換することができる。
(式中、R7は、水素又はアルキル基であり、
nは、1〜10であり、
Yは、酸素、硫黄、又はNR8であり、ここで、R8は、水素、アルキル基、又はアリール基であり、及び
Zは、フェノール基又はフェノール基を有する基である)
を有する少なくとも1つの断片を有するポリマーである。
(式中、リンカーLが存在しないとき、フェノール基は、式IのCH2基に直接結合している)
である。Lが存在する(例えば、酸素若しくは窒素などのヘテロ原子、又は別の有機基である場合)、Zは、フェノール基を含む基である。
オキシ塩化リン(V)、メタクリル酸2−ヒドロキシエチル、トリエチルアミン、及びメタクリル酸グリシジルは、Alfa Aesar(Ward Hill,MA)から購入した。4−メトキシフェノールは、東京化成工業株式会社(東京、日本国)から購入した。メタクリル酸、2,2’−アゾビス(2−メチルプロピオニトリル)、アクリルアミド、N,N0−メチレンビスアクリルアミド、及びN,N,N’,N’−テトラメチルエチレンジアミンは、Sigma Aldrich(St Louis,MO)から購入した。硫酸アンモニウムは、Fischer Scientific(Pittsburgh,PA)から購入した。
リン酸2−(メタクリロイルオキシ)エチル(MOEP)を以下のように合成した。アルゴン流の下、ドライトルエン(480ml)中でオキシ塩化リン(33.9g、220mmol)をヒドロキシ−エチル−メタクリルアミド(HEMA)と0.7:1モル比で混合した。反応物を4℃で攪拌しながら、トリエチルアミン(TEA)(77ml)を10分かけてゆっくりと添加した。TEAの添加後、反応物をアルゴンガス下、22℃で6時間攪拌した後、濾過することにより、沈殿した塩を除去した。反応物を4℃まで冷却させた後、DI水(480ml)を添加し、続いて、アルゴン下、22℃で15時間攪拌した。反応物をジエチルエーテル(100ml)で2回抽出した。有機層を廃棄した。テトラヒドロフラン(THF)及びジエチルエーテル(1:2、12×225ml)を用いて水層を抽出した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。1H及び31P NMRによりモノマーを確認した。
メタノール(12.5mlmg−1 MOEP)中のMOEP(85mol%)、及びメタクリル酸(15mol%)の遊離ラジカル重合により、ポリMOEPを合成した。55℃において、アゾ−ビスイソブチロニトリル(AIBN、4.5mol%)で反応を開始し、15時間にわたり進行させた。生成物をアセトンで沈殿させた後、水(17gのpMOEPにつき200mlのH2O)に溶解させた。続いて、メタクリレート基(MA)を、メタクリレート側鎖に対して9倍モル過剰量のメタクリル酸グリシジルと一緒に、メタクリル酸側鎖にグラフト化した。Ultracel 10kD膜を備えるMillipore Pellicon 3カセットフィルタを用いたタンジェンシャルフローフィルトレーションにより、メタクリレート化pMOEP(pMOEP−MA)を精製した。濾過中、ポリマーを10容量の水で洗浄した。NaOHでpHを7.3に調節し、生成物を凍結乾燥した後、−20℃で保存した。得られたリン酸プレポリマーは、1H及び31P NMRにより決定して、62.6mol%のリン酸側鎖、10.9mol%のヒドロキシエチルメタクリレート(HEMA)、及び26.5mol%のMA側鎖を含有しており、HEMAの供給源は、共重合中のMOEPのリン酸基の部分的加水分解からのものである。pMOEP−MAの分子量(Mm)及び多分散指数(PDI)は、Wyatt MiniDawn Treos(光分散)及びWyatt Optilab rEX(屈折率)検出器を装備したAmersham Pharmacia AKTAFPLCシステムを用いたサイズ排除クロマトグラフィー(SEC)により決定した。Superose 6 HR 10/30カラムは、30%(vol/vol)アセトニトリルを含有する0.1M酢酸ナトリウム(pH6.5)で平衡させた。Wyatt MiniDawn ASTRAソフトウェアを用いて、平均Mm及びPDIを計算すると、それぞれ89kgmol−1及び2.6が得られた。
ヒドロゲルは、アクリルアミド(Aam)及びN,N’−メチレンビスアクリルアミド(ビス−Aam)と、150mM NaCl及び5mMトリス(pH8.0)中のpMOEP−MAプレポリマーとの遊離ラジカル重合により形成した(図1)。プレポリマーの量は、0.5%wt/vol%〜7.0wt/vol%で変動したが、Aam、ビス−Aam及びMOEP−MAプレポリマーの合計wt%は、7.5wt/vol%に一定に保持された。Aamとビス−Aamとのモル比は60:1であった。10%過酸化アンモニウム(APS)及びテトラメチルエチレンジアミン(TEMED)をそれぞれ最終濃度70mgml−1及び2.4mlml−1まで添加することにより、重合を開始した。重合をドッグボーン形状の型内で重合を22℃において90分間進行させた。厚さ2mmのシリコーンゴムシートから型をレーザカットし、これらを2つのアクリルプレートの間に固定して、完全な成形品を形成した。鉱油層を重合反応物の上に広げることにより、酸素への曝露を制限した。150mM NaCl、5mMトリス(pH8)中に、溶液を繰返し交換しながら24時間にわたり重合ゲルを浸漬して、非反応材料を除去した。
ヒドロゲルを150mM NaCl、5mMトリス(pH8.0)中に浸漬し、24時間かけて金属イオン(Ca2+、Mg2+、又はZn2+)を5mMずつ増加しながら50mMまで添加した。金属イオンの段階的添加は、解膨潤したヒドロゲルの均質性を改善した。次に、50mM金属イオン及び5mMトリス(pH8.0)中に、溶液を頻繁に交換しながら、さらに24時間ヒドロゲルを浸漬した。体積平衡中、解剖顕微鏡法を用いて、ヒドロゲルの画像を記録し、ImageJを用いてそれらの寸法を測定した。等方性収縮を仮定して体積変化を計算した。ヒドロゲルは、体積が定常状態に達したとき、完全な平衡状態であると考えられた。分析用平衡密度キット(Mettler Toledo,Inc.)を用いた浮力法によりヒドロゲル密度を測定し、式:
を用いて算出した。
Bluehillソフトウェア(Instron,Inc.)で制御されるInstron3342材料試験システムで5mMの試験金属イオンを含む5mMトリス(pH8.0)に浸漬しながら、ヒドロゲルを引っ張った。Ca2+平衡ヒドロゲルを0.01〜1.0s−1の範囲の速度で引っ張った。破壊歪及び繰返し歪試験を0.15s−1で実施した。
ナトリウム平衡ヒドロゲルを10mM Na+EDTA中で一晩インキュベートすることにより、重合及びプロセシング中に収集された赤色の(rouge)二価金属イオンを除去した。微量の二価金属イオンの結合を阻止するために、Na+ゲルを1mM EDTA中に保存した。前述したように、二価金属イオンヒドロゲルをそれぞれの金属イオンで平衡させた。体積平衡後、サンプルを水ですすいでから、凍結乾燥することにより水を除去し、めのう乳鉢と乳棒とを用いて粉末に粉砕した後、ダイアモンドATRクリスタルに適用した。ポリメタクリルアミド骨格中のアミド基による吸収に対応する、1665cm−1に集中する吸収バンドの強度にIRスペクトルを正規化した。800〜1300cm−1の強度正規化スペクトルに線形ベースライン補正を適用し、これは、いくつかのリン酸振動モードを含む。ダイアモンドSmart iTR付属装置、重水素化硫酸トリグリシン検出器、及びKBr/Ge中赤外域最適化ビームスプリッターを備えるNicolet6700分光計(Thermo Scientific,FL)を用いて、ATR−FTIR吸光スペクトルを収集した。スペクトルを4cm−1の分解能及び512平均走査で記録した。
データはmatlab(MathWorks)で処理した。応力−歪曲線の初期部分に対する線形フィットを用いて、初期モジュラスを推定した。曲線の初期線形部分からの5%歪オフセットを用いて、降伏点を決定した。繰返し試験の順方向(forward)曲線から背向(reverse)曲線の台形積分を差し引くことにより、エネルギー散逸、すなわち歪サイクルヒステリシスを計算した。ベースラインから応力−歪曲線の初期線形部分(つま先部分は無視する)を延長することにより、残留歪を測定した。
リン酸エチル(MOEP)、エチル−ヒドロキシ(HEMA)側鎖、及びカルボキシレート(MAA)側鎖(図1)のmol%を変えながら、ポリメタクリレートランダムコポリマーを合成した。次に、架橋器としてのメタクリル酸グリシジルでMAA基をグラフト化した。ヒドロゲルを製造するために、メタクリレート化ポリリン酸(pMOEP−MA)プレポリマーのナトリウム塩をアクリルアミド(AAM)及びビスアクリルアミド(ビス−AAM)モノマーと混合し、150mM NaCl、及び5mMトリス(pH8.0)中で共重合した。ヒドロゲル中のポリマーの総wt/vol%は、7.5wt/vol%に維持した。重合中、pMOEP−MAプレポリマーは、MA側鎖を介してpAAM網目構造に架橋された(図1)。こうして得られたNa+対イオンを有するドッグボーン形状のヒドロゲルは、濁りがなく透明であった。
Ca2+ヒドロゲルの降伏様応答は、塑性永久変性ではなかった。そうではなく、50%まで引っ張られたヒドロゲルの初期長さ、モジュラス、及び降伏ストレスは、除荷後90分以内にその初期値の約90%を回復した(図5及び6)。従って、この現象を擬降伏と呼ぶ。高度ヒステリシスサイクルの順方向及び背向曲線内の面積は、散逸した歪エネルギーを表しており、これも90分以内に初期サイクル値の約90%まで回復した。この回復は、1回の指数関数的過程に一致しなかった。対照的に、Mg2+ヒドロゲルは、繰返し歪に対する線形弾性応答を有し、ほとんどヒステリシスを示さなかった(図5A、緑色の曲線)。Zn2+で平衡したヒドロゲルは、擬降伏点を超えて、より脆性であり、50%伸びまで確実に引っ張ることができなかった。従って、リフォールディング速度は測定しなかった。
3桁に及ぶ歪速度で100%まで引っ張ったCa2+平衡ヒドロゲルの擬降伏応力は5倍増大した(図6B)。同様に、初期モジュラス、伸張の仕事、及び散逸エネルギーも、それぞれ60%、2倍、及び2.3倍増大した(図示せず)。擬降伏応力は、歪速度に対して対数依存性を有した(図6B)。歪速度は、残留歪に対してほとんど影響を及ぼさず、残留歪は、歪速度の範囲にわたって5%のみ変動した。
Na+対イオンを含有するヒドロゲルは、柔軟な直鎖状エラストマーであり、これは、破断するまで約250%伸張することができた(図4及び表1)。二価金属イオンとの交換により、擬降伏応力は次の順で増大した:Mg2+<Ca2+<Zn2+。Mg2+と交換したヒドロゲルは、Na+ヒドロゲルと同様に、柔軟で、歪に対する応力の線形依存を示したのに対し、Ca2+及びZn2+ヒドロゲルはいずれも、20%前後の歪で、顕著な歪軟化(降伏様)挙動を示した。Zn2+ヒドロゲルは、降伏点の後まもなく、Ca2+ヒドロゲルの90%の平均歪に対して40%の歪で破断したが、破断に要するCa2+及びZn2+の仕事はほぼ同じであり、それぞれ10.4及び10.5MJm−3であり、Mg2+の3倍であった(表1)。
リン酸側鎖と二価金属イオンとの相互作用をIR分光学により評価した(図8)。変性P−O−対称伸縮モードに対応するバンドが950〜1050cm−1に存在する。980cm−1に集中するNa+吸収バンドは、二塩基性リン酸塩の2つのP−O−結合の吸収合計に相当する。980cm−1に集中するNa+吸収バンドは、二塩基性リン酸塩の2つのP−O−結合の吸収合計に相当する。962cm−1バンドは、pH滴定に基づくリン酸塩振動によるものではない(図示せず)。980cm−1は、Ca2+、Mg2+、及びZn2+についてそれぞれ、B11、17及び21cm−1青方偏移した。偏移したバンドの吸光度は、次の順で増大した:Mg2+<Ca2+<Zn2+。
3つのヒドロゲル(6.5wt/vol%pMOEP、1wt/vol%pAAm)を5mlの5mMトブラマイシン、pH12の150mM NaClに浸漬し、2時間にわたって撮影した。次に、溶液をpH7.5に調節してから、ヒドロゲルを72時間撮影した。ImageJを用いて、体積変化を画像から測定した(図11)。ヒドロゲルは、体積が定常状態に達したとき、完全に平衡状態にあると考えられた。
3つのヒドロゲル(6.5wt/vol%pMOEP、1wt/vol%pAAm)をpH7.5の150mM NaCl中の5mlの10mMトブラマイシンに24時間インキュベートした。添加溶液は、0.64%NaCl、0.075%KCl、0.048%CaCl2、0.03%MgCl2を含有する5mlの平衡塩類溶液(BSS)pH7.5に取り換えた。BSS溶液は24時間毎に取り換え、ヒドロゲルから溶液に放出されるトブラマイシンの量を、ニンヒドリンを用いて定量した。4日にわたるヒドロゲル1ml当たりの蓄積放出mgを図12に示す。
Claims (71)
- (a)(メト)アクリルモノマーから得られたポリマーを含む第1ポリマー網目構造と、(b)ポリリン酸塩を含む第2ポリマー網目構造とであって、互いに共有結合的に架橋している、第1ポリマー網目構造及び第2ポリマー網目構造と、(c)前記第2ポリマー網目構造を非共有結合的に架橋する複数の多価カチオン、ポリカチオン、又はそれらの組合せとを含むヒドロゲル。
- a.(1)複数のリン酸基と複数のペンダントアクリロイル基、ペンダントメタクリロイル基、又はそれらの組合せとを含むポリリン酸プレポリマーを含む第2ポリマー網目構造、及び(2)遊離ラジカル開始剤の存在下で、(メト)アクリルモノマーを重合して、第1ポリマー網目構造を生成するステップであって、前記第1ポリマー網目構造及び前記第2ポリマー網目構造が互いに共有結合的に架橋されて、第1ヒドロゲルを生成する、ステップと、
b.前記第1ヒドロゲルを多価カチオン、ポリカチオン、又はそれらの組合せと接触させて、前記第1第2ポリマー網目構造を非共有結合的に架橋するステップと
を含む方法により製造されるヒドロゲル。 - 前記ポリカチオンがアミノグリコシド抗生物質を含む、請求項1に記載のヒドロゲル。
- 前記ポリカチオンがアミノグリコシド抗生物質を含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記アミノグリコシド抗生物質がストレプトマイシン、トブラマイシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン、アミカシン、デベカシン、シソマイシン、ネチルマイシン、ネオマイシンB、ネオマイシンC、ネオマイシンE、又はそれらの任意の組合せである、請求項3に記載のヒドロゲル。
- 前記アミノグリコシド抗生物質がストレプトマイシン、トブラマイシン、カナマイシン、ゲンタマイシン、ネオマイシン、アミカシン、デベカシン、シソマイシン、ネチルマイシン、ネオマイシンB、ネオマイシンC、ネオマイシンE、又はそれらの任意の組合せである、請求項4に記載のヒドロゲル。
- 前記ポリリン酸プレポリマーが1,000Da〜200,000Daの分子量を有する、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記ポリリン酸プレポリマーが、(1)リン酸(メト)アクリルモノマーを1つ又は複数の(メト)アクリルモノマーと重合して、第1ポリマーを生成するステップと、(2)アクリロイル基、メタクリロイル基、又はそれらの組合せを前記第1ポリマーとグラフト化するステップとにより製造される、請求項2に記載のヒドロゲル。
- R4がメチルであり、及びnが2である、請求項9に記載のヒドロゲル。
- 式Iの前記リン酸(メト)アクリルモノマーがアクリル酸、メタクリル酸、メタクリル酸ヒドロキシアルキル、アクリル酸ヒドロキシアルキル、ヒドロキシル置換(低級アルキル)アクリレート、ヒドロキシアルキルアクリルアミド、ヒドロキシアルキルメタクリルアミド、ヒドロキシル置換(低級アルキル)メタクリレートアクリルアミド、メタクリルアミド、(低級アルキル)アクリルアミド、(低級アルキル)メタクリルアミド、ヒドロキシル置換(低級アルキル)アクリルアミド、ヒドロキシル置換(低級アルキル)メタクリルアミド、又はそれらの任意の組合せと重合される、請求項9に記載のヒドロゲル。
- 式Iの前記リン酸(メト)アクリルモノマーがアクリル酸又はメタクリル酸と重合される、請求項9に記載のヒドロゲル。
- xが前記ポリリン酸プレポリマーの50〜70mol%であり、yが前記ポリリン酸プレポリマーの5〜20mol%であり、且つzが前記ポリリン酸プレポリマーの20〜30mol%であり、及び各R1がメチルであり、且つ分子量が1,000Da〜100,000Daである、請求項13に記載のヒドロゲル。
- 前記(メト)アクリルモノマーがアクリル酸、メタクリル酸、メタクリル酸ヒドロキシアルキル、アクリル酸ヒドロキシアルキル、アクリルアミド、メタクリルアミド、(低級アルキル)アクリルアミド、(低級アルキル)メタクリルアミド、ヒドロキシル置換(低級アルキル)アクリルアミド、ヒドロキシル置換(低級アルキル)メタクリルアミド、又はそれらの任意の組合せである、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記(メト)アクリルモノマーがアクリルアミド又はメタクリルアミドを含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- ステップ(a)において、2つ以上のアクリロイル基、メタクリロイル基、又はそれらの組合せを含む架橋剤をさらに含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記架橋剤がジアクリレート又はジメタクリレートを含む、請求項17に記載のヒドロゲル。
- 前記架橋剤がポリアルキレンオキシドグリコールジアクリレート又はポリアルキレンオキシドグリコールジメタクリレートを含む、請求項17に記載のヒドロゲル。
- 前記架橋剤がN,N’−メチレンビスアクリルアミド又はN,N’−メチレンビスメタクリルアミドを含む、請求項17に記載のヒドロゲル。
- 前記(メト)アクリルモノマーがアクリルアミドであり、及び前記架橋剤がN,N’−メチレンビスアクリルアミドである、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記ラジカル開始剤が有機過酸化物、アゾ化合物、又は過硫酸塩を含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記多価カチオンが二価カチオン又は三価カチオンである、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記多価カチオンがCa+2、Mg+2、Fe+2、Fe+3、Zn+2、Al+3、Cu+2、Cu+3、希土類金属、又はそれらの任意の組合せを含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記ヒドロゲルが多価カチオン及びアミノグリコシド抗生物質を含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 前記多価カチオンがCu+2イオンを含む、請求項25に記載のヒドロゲル。
- 前記ヒドロゲルが生物活性剤をさらに含む、請求項1に記載のヒドロゲル。
- 前記ヒドロゲルが生物活性剤をさらに含む、請求項2に記載のヒドロゲル。
- 請求項1〜28のいずれか一項に記載のヒドロゲルを含むミクロゲル又はナノゲル。
- 請求項29に記載のミクロゲル又はナノゲルと、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
- 請求項1〜28のいずれか一項に記載のヒドロゲルを含む成形品。
- (1)第1面と第2面とを有する、請求項1〜27のいずれか一項に記載のヒドロゲルを含む層と、(2)前記ヒドロゲル層の前記第1面に隣接する接着層とを含み、粘着剤が、(a)マクロマーであって、前記マクロマーに共有結合した複数のフェノール基を含むマクロマーと、(b)前記マクロマー中の前記フェノール基と基質に存在するフェノール基との間の共有結合的架橋を触媒するための酵素とを含む、接着ヒドロゲル。
- 前記フェノール基が1つのヒドロキシル基を有する、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記フェノール基が2つ以上のヒドロキシル基を有する、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記マクロマーがペプチド又はタンパク質である、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記マクロマーが、1つ又は複数のチロシン基を含むペプチド又はタンパク質である、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記マクロマーがフルボ酸又はフミン酸である、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記マクロマーが合成ポリマーである、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記合成ポリマーが、1つ又は複数のペンダントフェノール基を含むポリアクリレートを含む、請求項38に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記ポリマーが、酸化を受けることができる少なくとも1つのジヒドロキシル芳香族基を含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記ジヒドロキシル芳香族基がDOPA又はカテコール部分を含む、請求項41に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素がペルオキシダーゼ又はカテコールオキシダーゼを含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素がセイヨウワサビペルオキシダーゼを含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素が前記マクロマー内に物理的に閉じ込められる、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素が前記マクロマーに共有結合される、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素が前記マクロマー内に物理的に閉じ込められ、且つ前記マクロマーに共有結合される、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素が前記酵素自体に共有結合的に架橋されて、自己架橋網目構造を形成する、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素が前記マクロマーへの添加前に凍結乾燥される、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記接着層が粘着付与剤をさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記粘着付与剤がアクリル樹脂、ブチルゴム、エチレン−酢酸ビニル、天然ゴム、ニトリル、シリコーンゴム、スチレンブロックコポリマー、ビニルエーテル、グリコシル化タンパク質、炭水化物、又はそれらの任意の組合せを含む、請求項50に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記接着層が酵素安定剤をさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素安定剤が糖である、請求項52に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記酵素安定剤がトレハロースである、請求項52に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記接着層が1つ又は複数の生物活性剤をさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記接着層が、前記接着層内及び/又は前記接着層の表面上に閉じ込められた銀イオンをさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記接着層が過酸化物供給源をさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記過酸化物供給源がスーパーオキシドディスムターゼ(SOD)、グルコースオキシダーゼ、又はそれらの組合せを含む、請求項57に記載の接着ヒドロゲル。
- 第2接着層が補強層の第2表面に接着される、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 除去可能な保護層が前記接着層に隣接している、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記ヒドロゲル層の前記第2面に補強層をさらに含む、請求項32に記載の接着ヒドロゲル。
- 前記補強層が水不溶性シート若しくはフィルム、織物、分解性フィルム、再生セルロースシート、脱細胞組織スカフォールド、金属プレート又はホイルを含む、請求項61に記載の接着ヒドロゲル。
- 請求項32に記載の接着ヒドロゲルを、第1表面を有する基質に接着させる方法であって、前記接着ヒドロゲルを前記基質の前記第1表面に適用するステップを含み、前記接着ヒドロゲル上の前記接着層が前記基質の前記第1表面と接触しており、及び前記第1表面が水で湿潤している、方法。
- 前記基質が骨、筋肉、軟骨、靭帯、腱、軟組織、臓器、又は皮膚である、請求項63に記載の方法。
- 前記基質が移植可能なデバイスである、請求項63に記載の方法。
- 前記基質の前記第1表面に前記接着ヒドロゲルを適用する前に、マクロマーであって、前記マクロマーに共有結合した複数のフェノール基を含むマクロマーを前記基質の前記第1表面に適用する、請求項63に記載の方法。
- 前記基質の前記第1表面に前記接着ヒドロゲルを適用する前に、前記基質の前記第1表面に過酸化物を適用する、請求項63に記載の方法。
- 前記過酸化物が過酸化水素である、請求項67に記載の方法。
- 前記基質の前記第1表面に前記接着ヒドロゲルを適用する前に、(1)マクロマーであって、前記マクロマーに共有結合した複数のフェノール基を含むマクロマーを前記基質の前記第1表面に適用し、続いて(2)前記基質の前記第1表面及びマクロマーに過酸化物を適用する、請求項63に記載の方法。
- (1)請求項32に記載の接着ヒドロゲルと、(2)過酸化物供給源とを含むキット。
- (a)マクロマーであって、前記マクロマーに共有結合した複数のフェノール基を含むマクロマーと、(b)前記マクロマー中の前記フェノール基と基質に存在するフェノール基との間の共有結合的架橋を触媒する酵素とを含む粘着剤。
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