JP2017509323A - NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインから構成されるキメラタンパク質 - Google Patents
NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインから構成されるキメラタンパク質 Download PDFInfo
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-
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- C07K—PEPTIDES
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- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
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Abstract
Description
「一つの(a)」または「一つの(an)」の実体の語は、その実体の1つまたはそれ以上を意味することに留意されたい。したがって、「一つの(a)」(または「一つの(an)」、「1つまたはそれ以上」、および「少なくとも1つ」の語は、本明細書において交換可能に用いることができる。
本開示は、NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む二機能性ポリペプチドを提供する。ある態様において、本明細書に提供する二機能性ポリペプチドの有効量の投与は、単独で投与する等量のNGFアンタゴニストまたはTNFαアンタゴニストを含む二機能性ポリペプチドよりも効果的に、それを必要とする対象における疼痛をコントロールすることができる。本明細書に提供する二機能性ポリペプチドは、あらゆる順序、構造、またはコンフォメーションにおける、NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含むことができる。あらゆる適切なNGFアンタゴニストまたはTNFαアンタゴニストが、本明細書に提供する二機能性ポリペプチドの一部であり得る。例示的なNGFアンタゴニストおよびTNFαアンタゴニストを、本開示の他所に記載する。
本明細書に提供するポリペプチド、例えば、NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む多機能性ポリペプチド、またはNGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインをそれぞれ含む個々のポリペプチドは、天然のポリペプチドに由来する組換えポリペプチドでも、または合成のポリペプチドでもよい。当技術分野において、いくつかのアミノ酸配列は、タンパク質の構造または機能の大幅な影響なく変動し得ることが認識されよう。よって、本開示は、実質的な活性を有する、またはNGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む、本明細書に提供するポリペプチドのバリエーションをさらに提供する。このような変異体は、欠失、挿入、逆位(inversion)、反復、および型置換(type substitution)を含む。
本開示は、NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む多機能性ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む核酸分子を提供する。本開示は、NGFアンタゴニストおよびTNFαアンタゴニストをそれぞれ含む個々のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む核酸分子をさらに提供する。ある態様において、このようなポリヌクレオチドは、NGFまたはそのフラグメントに特異的に結合し、TNFαまたはそのフラグメントにも結合する、ペプチドドメインをコードする。例えば、本開示は、抗NGF抗体またはその抗原結合性フラグメントを含むポリペプチドドメイン、およびTNFαアンタゴニスト(例えば、抗TNFα抗体またはその抗原結合性フラグメント、もしくはTNFR2などのTNF受容体の可溶性TNFα結合性ポーション)を含むポリペプチドドメインをコードするポリヌクレオチドを提供する。ポリヌクレオチドは、RNAの形態でも、またはDNAの形態でもよい。DNAは、cDNA、ゲノムDNA、および合成DNAを含み;二本鎖でも、または一本鎖でもよく、一本鎖である場合はコード鎖でも、または非コード(アンチセンス)鎖でもよい。
上記に記載した通り形質転換された宿主が生成したタンパク質を、任意の適切な方法にしたがって精製することができる。このような標準的な方法には、クロマトグラフィー(例えば、イオン交換、アフィニティ、およびサイジングカラムクロマトグラフィー)、遠心分離、溶解度差、またはタンパク質を精製するためのあらゆる他の標準的な技術によるものが含まれる。アフィニティタグ、例えば、ヘキサヒスチジン、マルトース結合性ドメイン、インフルエンザコート配列、およびグルタチオン−S−トランスフェラーゼをタンパク質に付着させて、好適なアフィニティカラム上を通過させることにより、容易に精製することができる。単離したタンパク質を、タンパク質分解、核磁気共鳴分析法、およびエックス線結晶構造解析などの技術を用いて、物理的に特徴付けることもできる。
本開示は、治療有効量のTNFαおよびNGFアンタゴニスト多機能性ポリペプチド、例えば、本明細書に提供する多特異的結合性分子を投与することを含み、またはTNFαアンタゴニストおよびNGFアンタゴニストを同時投与することを含む、対象における疼痛をコントロールまたは処置するための方法を提供する。ある態様において、対象はヒトである。
「疼痛」は、最も広い用法において、それを経験する個体にとって極めて自覚的であり、環境および文化的背景を含めた個体の精神状態による影響を受ける、経験的な現象を意味する。「身体的な」疼痛は通常、実際の、または潜在的な組織損傷の原因となる、非当事者にとって知覚できる刺激に関連し得る。この意味では、疼痛は、国際疼痛学会(International Association for the Study of Pain)(IASP)によると、「実際の、または潜在的な組織損傷に関連し、このような損傷に関して記述される、感覚的および感情的な経験」とみなすことができる。しかし、疼痛には知覚できる原因がない場合がある。例えば、ときに持続性の心理学的要因または症候群による既存の身体的疼痛の増悪を含めた心因性疼痛、知覚できる疼痛の原因のいかなる証拠のない精神的障害を有するヒトにおいて知覚される疼痛。
疼痛には、侵害受容性疼痛、神経因性疼痛/神経原性疼痛、突出痛、異痛症、痛覚過敏、知覚過敏、異常感覚、錯感覚、ヒペルパチー、幻肢痛、心因性疼痛、有痛性感覚脱失、神経痛、神経炎が含まれる。他の範疇には、悪性疼痛、狭心痛、および/または特発性疼痛、複合性局所性疼痛症候群I、複合性局所性疼痛症候群IIが含まれる。疼痛のタイプおよび症状が相互に排他的である必要はない。これらの語はIASPによって規定されるものとされる。
本開示は、本明細書に記載する方法を行うのに用いることができる、TNFαおよびNGFアンタゴニスト多機能性ポリペプチド、例えば、本明細書に提供する多特異的結合性分子、または本明細書に提供するTNFαアンタゴニストおよびNGFアンタゴニストの組合せを含むキットを提供する。ある態様において、キットは、TNFαアンタゴニストおよびNGFアンタゴニストを含む少なくとも多機能性融合ポリペプチド、例えば、配列番号14もしくは17のアミノ酸配列を含むポリペプチドを、1つもしくはそれ以上の容器中に、またはNGFアンタゴニスト(例えばMEDI−578)およびTNFαアンタゴニスト(例えばインフリキシマブもしくはアダリムマブなどの抗TNFα抗体)の組合せ、またはTNF受容体のTNFα結合性可溶性フラグメント、例えばTNFR2−Fcを含む。当業者であれば、本明細書に提供する、開示されたTNFαおよびNGFアンタゴニストは、当技術分野ではよく知られている確立されたキットフォーマットの1つの中に容易に組み入れることができることを容易に認められよう。
多機能性分子、具体的に抗NGF抗体ドメインおよびTNFR2−Fcドメインを含む多特異的結合性分子を、以下の通り生成した。Dimasi,N.ら、J Mol Biol.、393:672〜92頁(2009)、およびPCT公開第WO2013/070565号に記載されるBs3Abフォーマットにしたがって、抗NGF抗体scFvフラグメントを、TNFR2−Fc融合タンパク質(配列番号13)のC末端に、重鎖CH3ドメインを介して融合した。構造図を図1に示す。TNFR2−Fcポリペプチドおよび多特異的結合性分子をコードするDNA構築物を、GeneArt(Invitrogen)により合成した。多特異的結合性分子には、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3(配列番号15)を介して1つに連結される、MEDI−578のVHドメイン(配列番号3)およびVLドメイン(配列番号7)を含む抗NGF scFvを構築した。scFvのN末端を、アミノ酸10個のリンカー配列(GGGGS)2を介して、配列番号13のC末端に融合した。この多特異的結合性分子を、本明細書においてTNFR2−Fc_VH#4と呼ぶ。多特異的結合性分子をコードするDNA構築物を、Bs3Ab発現ベクターにクローニングするために、3’終端に終止コドンおよびEcoRI制限部位を含むように操作した。TNFR2−Fc_VH#4をコードするDNA配列を配列番号16に表し、そのアミノ酸配列を配列番号14に表す。
ウエスタンブロット分析を、標準のプロトコールを用いて行った。タンパク質を、フッ化ポリビニリデン膜(Life Technologies)上に、Xcell SureLock(商標)システム(Invitrogen)を用いて、製造元の指示にしたがって移した。膜を、リン酸緩衝食塩水(PBS)中3%(w/v)スキムミルク粉末で、室温で1時間ブロックした。ウエスタンブロットを、標準のプロトコールを用いて、HRPコンジュゲート抗ヒトIgGFc特異的抗体(Sigma)で展開した。
精製したTNFR2−Fc_VH#4およびTNFR2−Fcタンパク質を、SEC−HPLCにより、凝集、モノマー、およびタンパク質フラグメンテーションのレベルに対してプロファイリングした(図2Aおよび2B)。モノマーを含む主ピークは、存在する全タンパク質のおよそ90%を構成し、残りのおよそ10%のタンパク質の質量はカラム保持時間がより短く、より高次の種または凝集物が存在することが示された。しかし、SEC−HPLCからのモノマーのピークには顕著なショルダーが2つあり、このピーク内のタンパク質は単一の種ではないことが示された。クーマシー染色したSDS−PAGE分析は、還元条件下、TNFR2−Fc_VH#4では明確な2本のバンドを(およそ100および75kDに)示し、TNFR2−Fc融合タンパク質でも同様に明確な2本のバンドを(およそ70および45kDに)示した(図2B)。非還元条件下では、TNFR2−Fc_VH#4ではメジャーバンドが3本存在し(150と250kDとの間)、TNFR2−Fc融合タンパク質ではメジャーバンド1本およびマイナーバンド1本がそれぞれ、およそ150および120kDに存在した。還元条件下の2本のバンド間の分子量の差は、scFvフラグメントのサイズにおよそ等しかったため(約26.5kD)、何の形態の多特異的結合性分子が産生されているかを理解するために、さらなる分析を行った。天然の条件下の質量分光分析により、精製された2つの別々のタンパク質調製物に対して、精製したTNFR2−Fc_VH#4調製物中に、およそ125、152、および176kDの3つの分子量が存在したSDS−PAGEデータが確認された(図2C)。
自動MicroCal VP−Capillary DSC(GE Healthcare、USA)を熱量測定に用いた。ヒスチジン/ヒスチジン−HClバッファーpH6.0 25mM中1mg/mLのタンパク質試料を試験した。タンパク質試料およびバッファーを、25℃から100℃まで、1時間あたり95℃の速度の直線状の熱傾斜にかけた。バッファーを、Origin7ソフトウエアを用いて、タンパク質試料からの基準として差引き、熱転移を決定した。
A.ELISAによる単一および二重の抗原結合
Nunc Maxisorpウエルを、PBS(pH7.4)中5μg ml−1に希釈したTNFα(R&D Systems)50μlで、4℃で一夜コーティングした。翌日、コーティング溶液を除去し、ウエルをブロッキングバッファー[3%スキムミルク−PBS]150μlで、室温で1時間ブロックした。ウエルをPBS中で3回すすいだ後、ブロッキングバッファー中で作成したTNFR2−Fc_VH#4の希釈段階50μlを加えた。室温で1時間後、ウエルを、PBS−Tween20(0.1%v/v;PBS−T)中で3回洗浄した。次いで、ビオチン化NGF50マイクロリットルをウエルに加え、室温でさらなる1時間インキュベートした後、上記の通り洗浄し、ストレプトアビジン−HRP50μlを加えた(1:100)。室温で1時間後、ウエルをPBS−Tで洗浄し、3,3’,5,5’−テトラメチルベンチジン基質50μlを加え、色を発色させた。1M H2SO4を加えることによって反応を止め、450nmの吸光度を、マイクロタイタープレートリーダーを用いて測定した。得られたデータを、Prism5ソフトウエア(GraphPad、San Diego、CA)を用いて分析した。単一抗原結合ELISAに対して、ウエルをTNFαまたはNGF−ビオチンのいずれかで上記の通りコーティングし、抗体の結合を抗ヒトIgGFc特異的HRPコンジュゲート抗体(1:5000)で検出し、色を上記の通り発色させた。
同時の抗原結合実験を、BIAcore2000装置(GE Healthcare)を用いて、実質的にDimasi,N.ら、J Mol Biol.、393:672〜92頁(2009)に記載されている通りに行った。簡潔に述べると、CM5センサーチップを用いて、100nMのおよそ1500共鳴単位のTNFR2−Fc_VH#4を固定化した。次いで、TNFαおよびNGFに対する同時発生的な結合(concurrent binding)に、センサーチップ表面を用いた。抗原を、HBS−EPバッファー[10mM HEPES(pH7.4)、150mM NaCl、3mMエチレンジアミン四酢酸(EDTA)、0.005%P20]中で調製した。流速30μl/分を、全ての結合の測定に用いた。多特異的抗体のTNFαおよびNGFに対する同時の結合(simultaneous binding)を決定するために、TNFα(分子量、17.5kD)1μMを、センサーチップ表面上に注入し、注入が完了したら、次いで、ともに1μMのTNFαおよびNGF(分子量、13.5kD)の混合物を注入した。NGF結合段階の間にTNFαが解離してシグナルが喪失するのを防ぐために、NGFとの混合物中にTNFαを含めた。対照として、同様の結合手順を行い、最終の注入時はTNFαだけを加え、この注入に対して共鳴単位におけるさらなる増大がなかったことで、飽和レベルのTNFαが結合したことが示された。TNFαおよびNGFの注入の順序を逆転した、同様の結合および対照実験を行った。
TF−1細胞(ECACCカタログ番号93022307)を、96ウエル組織培養プレート(Corning Costar)において、無血清培養培地50μl中1.5×104細胞/ウエルに接種し、5%CO2、37℃で18時間インキュベートした。組換えヒト(Sigma)またはマウスNGF(R&D Systems)を、TNFR2−Fc_VH#4、MEDI−578 IgG1 TM YTE、MEDI−578に対する非結合性IgG1 TM YTEアイソタイプ対照、または非結合性二特異的アイソタイプ対照R347 Bs3Abの希釈物と、96ウエル丸底プレート(Greiner)中、37℃で30分間、プレインキュベートした。次いで、各試料50マイクロリットルを細胞プレートに加え、37℃で48時間インキュベートした。インキュベーション期間後、細胞TITRE GLO(登録商標)アッセイバッファー(Promega)100μlを加え、プレートを、5%CO2、37℃で10分間インキュベートした。次いで、発光を、標準の発光プロトコールを用いて測定した。抗体の非存在下の標準のNGF誘発性TF−1増殖を、図7Aに示す。
U937細胞(ECACCカタログ番号85011440)を、96ウエル黒壁組織培養プレート(Corning Costar)において、培養培地50μl中、8×105細胞/ウエルの濃度に塗抹した。U937細胞を、EC80濃度に相当する組換えヒトTNFαで刺激した。細胞を、希釈段階の抗体とリガンドと2時間インキュベートし、その後、カスパーゼ3活性を、カスパーゼ3アッセイ反応バッファーと2時間培養することによって定量した。TNFR2−Fc_VH#4、非結合性二特異的アイソタイプ対照であるR347 Bs3Ab、およびエタネルセプトを、37℃で30分間、細胞とプレインキュベートした。この後、組換えヒトTNFα(R&D Systems)50μlを加えて、20ng/mlの最終アッセイ濃度を得、引き続き37℃で2時間インキュベートした。インキュベーション期間後、カスパーゼ3アッセイ反応バッファー(0.2%w/v CHAPS、0.5%v/v Igepal CA−630、200mM NaCl、50mM HEPES、20μM DEVD−R110基質(Invitrogen))50μlを加え、細胞を37℃で2.5時間インキュベートした。蛍光を、励起475nmおよび発光512nmにより測定した。TNFαアンタゴニスト非存在下のカスパーゼ活性を図8Aに示す。
in vivo手順は全て、UK内務省動物(科学手順)法(Animals(Scientific Procedures)Act)(1986年)にしたがって行い、地域の倫理員会によって認可された。C57B1/6メスマウス(Charles River、UK)を一貫して用いた。マウスを、個々に換気したケージ(IVC)中、1ケージあたり5/6の群において収容し、12時間の明暗周期(7:00〜19:00照明オン)下、食餌および水を自由に摂取させた。収容し、手順を行う部屋を24℃に維持し、従来の無線局による一定のバックグラウンドノイズを維持した。全てのマウスに、各試験を始める少なくとも5日前に、同定の目的で、麻酔下(酸素中3%イソフルラン)応答器(transponder)の挿入を施した。
機械的痛覚過敏を、鎮痛作用測定装置(Randall LO、Selitto JJ、Arch Int Pharmacodyn Ther.、111:409〜19頁(1957))(Ugo Basile)を用いて決定した。中止の応答が観察されるまで、順番に各後ろ足の背側表面に増大性の力を適用した。力の適用をこの点で停止し、体重をグラムで記録した。データを、同側および反対側の足に対する中止の閾値としてグラムで表した。ベースラインの読みが確立した後、およそ等しい同側/反対側比でマウスを2群に分け、外科手術を施した。マウスを3%イソフルランで麻酔した。この後、鈍的切開によって中央大腿レベルを切開することにより、左坐骨神経およそ1cmを曝露した。次いで、縫合(10/0 Virgin Silk:Ethicon)を、背側3番目の神経を通過させ、きつく縛った。のりを用いて切開を閉じ、マウスを少なくとも7日間回復させた後、試験を開始した。偽手術マウスに同じプロトコールを施したが、神経の曝露後、傷口をのり付けし、回復させた。手術7日および10日後、痛覚過敏に対してマウスを試験した。10日目の試験後、手術したマウスを、CAT251 IgG1アイソタイプ対照(0.03mg/kg s.c.)、エタネルセプト(0.01mg/kg s.c.)、MEDI−578(0.03mg/kg s.c.)、またはエタネルセプト(0.01mg/kg s.c.)およびMEDI−578(0.03mg/kg s.c.)の組合せを投与する群にさらに再分割した。偽手術したマウスには全てCAT251(0.03mg/kg s.c.)を投与した。機械的痛覚過敏を、投薬後4時間、1、2、3、4、および7日に測定した。
機械的痛覚過敏を、マウスインキャパシタンステスター(incapacitance tester)(Linton Instrumentation)を用いて決定した。マウスの後足を別々のセンサー上に載せてマウスを装置に配置し、体重分布を4秒の期間をかけて計算した。データを、同側および反対側の体重保持の比としてグラムで表した。
フロイント完全アジュバント(FCA)を足底内(intraplantar)注射すると炎症反応を引き起こし、炎症反応は過敏症および浮腫を誘発し、臨床的な炎症性疼痛のいくつかの側面を擬する。これらの効果は、体重負荷を測定するための機器を用いて調べることができる。体重負荷方法を用いたTNFR2−Fc_VH#4 FCA誘発性過敏症の、潜在的な抗痛覚過敏性質の評価。ナイーブラットは、自身の体重を2本の後足間に等しく分配する。しかし、注射した(左の)後足が炎症を起こし、かつ/または痛む場合、罹患している足上により少ない体重をかけるように、体重を再分配する(損傷した足上への体重負荷の低減)。各後足による体重負荷を、ラットインキャパシタンステスター(Linton Instruments、UK)を用いて測定した。ラットをインキャパシタンステスターに配置し、後足を別々のセンサー上に置き、両方の後足によって行使された力の平均を4秒かけて記録した。
文献によると、p38リン酸化は、神経因性疼痛の発症において重要な役割を果たすことが示唆される。例えば、p38インヒビターでの処置は、神経部分損傷モデルにおいて(Wen YRら、Anesthesiology、2007、107:312〜321頁)、および坐骨の炎症性神経障害モデルにおいて(Milligan EDら、J Neurosci、2003、23:1026〜1040頁)、神経因性疼痛の症状の発症を防ぐことが示されている。本実験において、TNFα、NGF、およびTNFαおよびNGFの組合せの、p38リン酸化における役割を、細胞培養アッセイにおいて調べた。簡潔に述べると、Neuroscreen−1細胞(PC−12ラット神経内分泌細胞のサブクローン)を、増加する量のTNFα、NGF、またはTNFαおよびNGFの組合せとインキュベートした。20分のインキュベート期間後、均一時間分解蛍光(homogeneous time resolved fluorescence)(HTRF)アッセイ(Cisbio)を用いてホスホ−p38を定量した。
APK(Thr180/Tyr182)を、2つの異なる特異的な抗体:ユーロピウムクリプテート(ドナーフルオロフォア)にコンジュゲートしている抗ホスホ−p38抗体、およびd2(アクセプタフルオロフォア)にコンジュゲートしている抗p38(総)抗体を用いてサンドイッチアッセイのフォーマットにおいて可溶化液中で検出した。抗体を細胞可溶化液とインキュベートし、HTRF比は、EnVision Multilabel Plate Reader(Perkin Elmer)を用いて行った665nmおよび620nmでの蛍光測定から算出した。
p38同様、ERKも、神経因性疼痛の発生の間に活性化される(Zhuang ZYら、Pain 2005、114:149〜159頁)。本実験において、TNFα、NGF、ならびにTNFαおよびNGFの組合せのERKリン酸化における役割を、細胞培養アッセイにおいて調べた。簡潔に述べると、Neuroscreen−1細胞(PC−12ラット神経内分泌細胞のサブクローン)を、増加する量のTNFα、NGF、またはTNFαおよびNGFの組合せとインキュベートした。20分のインキュベーション期間の後、ホスホ−ERKを、HTRFアッセイ(Cisbio)を用いて定量した。
配列番号1 NP_002497.2|ベータ−神経成長因子前駆体[ヒト]
1 MSMLFYTLIT AFLIGIQAEP HSESNVPAGH TIPQAHWTKL QHSLDTALRR ARSAPAAAIA
61 ARVAGQTRNI TVDPRLFKKR RLRSPRVLFS TQPPREAADT QDLDFEVGGA APFNRTHRSK
121 RSSSHPIFHR GEFSVCDSVS VWVGDKTTAT DIKGKEVMVL GEVNINNSVF KQYFFETKCR
181 DPNPVDSGCR GIDSKHWNSY CTTTHTFVKA LTMDGKQAAW RFIRIDTACV CVLSRKAVRR
241 A
配列番号2 NP_000585.2|腫瘍壊死因子[ヒト]
1 MSTESMIRDV ELAEEALPKK TGGPQGSRRC LFLSLFSFLI VAGATTLFCL LHFGVIGPQR
61 EEFPRDLSLI SPLAQAVRSS SRTPSDKPVA HVVANPQAEG QLQWLNRRAN ALLANGVELR
121 DNQLVVPSEG LYLIYSQVLF KGQGCPSTHV LLTHTISRIA VSYQTKVNLL SAIKSPCQRE
181 TPEGAEAKPW YEPIYLGGVF QLEKGDRLSA EINRPDYLDF AESGQVYFGI IAL
配列番号3 MEDI−578 VH(1256A5 VH)
1 QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFS TYGISWVRQA PGQGLEWMGG IIPIFDTGNS
61 AQSFQGRVTI TADESTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARSS RIYDLNPSLT AYYDMDVWGQ
121 GTMVTVSS
配列番号4 MEDI−578 VHCDR1
1 TYGIS
配列番号5 MEDI−578 VHCDR2
1 GIIPIFDTGN SAQSFQG
配列番号6 MEDI−578 VHCDR3
1 SSRIYDLNPS LTAYYDMDV
配列番号7 MEDI−578 VL(1256A5 VL)
1 QSVLTQPPSV SAAPGQKVTI SCSGSSSNIG NNYVSWYQQL PGTAPKLLIY DNNKRPSGIP
61 DRFSGSKSGT SATLGITGLQ TGDEADYYCG TWDSSLSAWV FGGGTKLTVL
配列番号8 MEDI−578 VLCDR1
1 SGSSSNIGNN YVS
配列番号9 MEDI−578 VLCDR2
1 DNNKRPS
配列番号10 MEDI−578 VLCDR3
1 GTWDSSLSAW V
配列番号11
1 SSRIYDFNSA LISYYDMDV
配列番号12
1 SSRIYDMISS LQPYYDMDV
配列番号13 可溶性TNFR2アミノ酸配列
1 LPAQVAFTPY APEPGSTCRL REYYDQTAQM CCSKCSPGQH AKVFCTKTSD TVCDSCEDST
61 YTQLWNWVPE CLSCGSRCSS DQVETQACTR EQNRICTCRP GWYCALSKQE GCRLCAPLRK
121 CRPGFGVARP GTETSDVVCK PCAPGTFSNT TSSTDICRPH QICNVVAIPG NASMDAVCTS
181 TSPTRSMAPG AVHLPQPVST RSQHTQPTPE PSTAPSTSFL LPMGPSPPAE GSTGDEPKSC
241 DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD
301 GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK
361 GQPREPQVYT LPPSREEMTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS
421 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK
配列番号14 TNFR2−Fc_VH#4−アミノ酸配列
1 GGGGSGGGGS GGGGS
配列番号16 TNFR2−Fc_VH#4−ヌクレオチド配列
1 CTGCCCGCCC AGGTGGCCTT TACCCCTTAT GCCCCCGAGC CCGGCAGCAC CTGTCGGCTG
61 AGAGAGTACT ACGACCAGAC CGCCCAGATG TGCTGCAGCA AGTGCTCTCC TGGCCAGCAT
121 GCCAAGGTGT TCTGCACCAA GACCAGCGAC ACCGTGTGCG ACAGCTGCGA GGACAGCACC
181 TACACCCAGC TGTGGAACTG GGTGCCCGAG TGCCTGAGCT GCGGCAGCAG ATGCAGCAGC
241 GACCAGGTGG AAACCCAGGC CTGCACCAGA GAGCAGAACC GGATCTGCAC CTGTAGACCC
301 GGCTGGTACT GCGCCCTGAG CAAGCAGGAA GGCTGCAGAC TCTGCGCCCC TCTGCGGAAG
361 TGCAGACCCG GCTTTGGCGT GGCCAGACCC GGCACCGAGA CAAGCGACGT GGTCTGTAAG
421 CCCTGCGCTC CTGGCACCTT CAGCAACACC ACCAGCAGCA CCGACATCTG CAGACCCCAC
481 CAGATCTGCA ACGTGGTGGC CATCCCCGGC AACGCCAGCA TGGATGCCGT CTGCACCAGC
541 ACTAGCCCCA CCAGAAGTAT GGCCCCTGGC GCCGTGCATC TGCCCCAGCC TGTGTCCACC
601 AGAAGCCAGC ACACCCAGCC CACCCCTGAG CCTAGCACCG CCCCCTCCAC CAGCTTTCTG
661 CTGCCTATGG GCCCTAGCCC TCCAGCCGAG GGAAGCACAG GCGACGAGCC CAAGAGCTGC
721 GACAAGACCC ACACCTGTCC CCCCTGCCCT GCCCCTGAAC TGCTGGGCGG ACCCAGCGTG
781 TTCCTGTTCC CCCCAAAGCC CAAGGACACC CTGATGATCA GCCGGACCCC CGAAGTGACC
841 TGCGTGGTGG TGGACGTGTC CCACGAGGAC CCTGAAGTGA AGTTCAATTG GTACGTGGAC
901 GGCGTGGAAG TGCACAACGC CAAGACCAAG CCCAGAGAGG AACAGTACAA CTCCACCTAC
961 CGGGTGGTGT CCGTGCTGAC CGTGCTGCAC CAGGACTGGC TGAACGGCAA AGAGTACAAG
1021 TGCAAGGTCT CCAACAAGGC CCTGCCTGCC CCCATCGAGA AAACCATCAG CAAGGCCAAG
1081 GGCCAGCCCC GCGAGCCTCA GGTGTACACA CTGCCCCCCA GCCGGGAAGA GATGACCAAG
1141 AACCAGGTGT CCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTACC CCAGCGATAT CGCCGTGGAA
1201 TGGGAGAGCA ATGGCCAGCC CGAGAACAAC TACAAGACCA CCCCCCCTGT GCTGGACAGC
1261 GACGGCTCAT TCTTCCTGTA CAGCAAGCTG ACCGTGGACA AGAGCCGGTG GCAGCAGGGC
1321 AACGTGTTCA GCTGCAGCGT GATGCACGAG GCCCTGCACA ACCACTACAC CCAGAAGTCC
1381 CTGAGCCTGA GCCCCGGAAA GGGCGGTGGC GGATCCGGAG GTGGGGGATC TCAGGTGCAG
1441 CTGGTGCAGT CTGGCGCCGA AGTGAAGAAA CCCGGCTCTA GCGTGAAGGT GTCCTGCAAG
1501 GCCAGCGGCG GCACCTTCTC CACCTACGGC ATCAGCTGGG TCCGCCAGGC CCCTGGACAG
1561 GGCCTGGAAT GGATGGGCGG CATCATCCCC ATCTTCGACA CCGGCAACAG CGCCCAGAGC
1621 TTCCAGGGCA GAGTGACCAT CACCGCCGAC GAGAGCACCT CCACCGCCTA CATGGAACTG
1681 AGCAGCCTGC GGAGCGAGGA CACCGCCGTG TACTACTGCG CCAGAAGCAG CCGGATCTAC
1741 GACCTGAACC CCAGCCTGAC CGCCTACTAC GACATGGACG TGTGGGGCCA GGGCACCATG
1801 GTCACAGTGT CTAGCGGAGG CGGCGGATCT GGCGGCGGAG GAAGTGGCGG GGGAGGATCT
1861 GCCCAGAGCG TGCTGACCCA GCCCCCTTCT GTGTCTGCCG CCCCTGGCCA GAAAGTGACC
1921 ATCTCCTGCA GCGGCAGCAG CAGCAACATC GGCAACAACT ACGTGTCCTG GTATCAGCAG
1981 CTGCCCGGCA CCGCCCCTAA GCTGCTGATC TACGACAACA ACAAGCGGCC CAGCGGCATC
2041 CCCGACCGGT TTAGCGGCAG CAAGAGCGGG ACTTCTGCTA CACTGGGCAT CACAGGCCTG
2101 CAGACCGGCG ACGAGGCCGA CTACTACTGC GGCACCTGGG ACAGCAGCCT GAGCGCTTGG
2161 GTGTTCGGCG GAGGCACCAA GCTGACAGTG CTG
配列番号17−TNFR2−Fc_varB−アミノ酸配列
1 CTGCCCGCCC AGGTGGCCTT TACCCCTTAT GCCCCCGAGC CCGGCAGCAC CTGTCGGCTG
61 AGAGAGTACT ACGACCAGAC CGCCCAGATG TGCTGCAGCA AGTGCTCTCC TGGCCAGCAT
121 GCCAAGGTGT TCTGCACCAA GACCAGCGAC ACCGTGTGCG ACAGCTGCGA GGACAGCACC
181 TACACCCAGC TGTGGAACTG GGTGCCCGAG TGCCTGAGCT GCGGCAGCAG ATGCAGCAGC
241 GACCAGGTGG AAACCCAGGC CTGCACCAGA GAGCAGAACC GGATCTGCAC CTGTAGACCC
301 GGCTGGTACT GCGCCCTGAG CAAGCAGGAA GGCTGCAGAC TCTGCGCCCC TCTGCGGAAG
361 TGCAGACCCG GCTTTGGCGT GGCCAGACCC GGCACCGAGA CAAGCGACGT GGTCTGCAAG
421 CCCTGCGCTC CTGGCACCTT CAGCAACACC ACCAGCAGCA CCGACATCTG CAGACCCCAC
481 CAGATCTGCA ACGTGGTGGC CATCCCCGGC AACGCCAGCA TGGATGCCGT GTGCACCAGC
541 ACCAGCCCCA CCAGAAGTAT GGCCCCTGGC GCCGTGCATC TGCCCCAGCC TGTGTCCACC
601 AGAAGCCAGC ACACCCAGCC CACCCCTGAG CCTAGCACCG CCCCCTCCAC CAGCTTTCTG
661 CTGCCTATGG GCCCTAGCCC TCCAGCCGAG GGAAGCACAG GCGACGAGCC CAAGAGCTGC
721 GACAAGACCC ACACCTGTCC CCCCTGCCCT GCCCCTGAAC TGCTGGGCGG ACCCAGCGTG
781 TTCCTGTTCC CCCCAAAGCC CAAGGACACC CTGATGATCA GCCGGACCCC CGAAGTGACC
841 TGCGTGGTGG TGGACGTGTC CCACGAGGAC CCTGAAGTGA AGTTCAATTG GTACGTGGAC
901 GGCGTGGAAG TGCACAACGC CAAGACCAAG CCCAGAGAGG AACAGTACAA CTCCACCTAC
961 CGGGTGGTGT CCGTGCTGAC CGTGCTGCAC CAGGACTGGC TGAACGGCAA AGAGTACAAG
1021 TGCAAAGTCT CCAACAAGGC CCTGCCTGCC CCCATCGAGA AAACCATCAG CAAGGCCAAG
1081 GGCCAGCCCC GCGAGCCTCA gGTGTACACA CTGCCCCCCA GCCGGGAAGA GATGACCAAG
1141 AACCAGGTGT CCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTACC CCAGCGATAT CGCCGTGGAA
1201 TGGGAGAGCA ACGGCCAGCC CGAGAACAAC TACAAGACCA CCCCCCCTGT GCTGGACAGC
1261 GACGGCTCAT TCTTCCTGTA CAGCAAGCTG ACCGTGGACA AGAGCCGGTG GCAGCAGGGC
1321 AATGTCTTCA GCTGTAGCGT GATGCACGAG GCCCTGCACA ACCACTACAC CCAGAAGTCC
1381 CTGAGCCTGA GCCCCGGAAA GGGCGGAGGC GGATCCGGAG GTGGGGGATC TCAGGTGCAG
1441 CTGGTGCAGT CTGGCGCCGA AGTGAAGAAA CCCGGCTCTA GCGTGAAGGT GTCCTGCAAG
1501 GCCAGCGGCG GCACCTTCTC CACCTACGGC ATCAGCTGGG TCCGCCAGGC CCCTGGACAG
1561 TGTCTGGAAT GGATGGGCGG CATCATCCCC ATCTTCGACA CCGGCAACAG CGCCCAGAGC
1621 TTCCAGGGCA GAGTGACCAT CACCGCCGAC GAGAGCACCT CCACCGCCTA CATGGAACTG
1681 AGCAGCCTGC GGAGCGAGGA CACCGCCGTG TACTACTGCG CCAGAAGCAG CCGGATCTAC
1741 GACCTGAACC CCAGCCTGAC CGCCTACTAC GACATGGACG TGTGGGGCCA GGGCACCATG
1801 GTCACAGTGT CTAGCGGAGG CGGAGGCAGC GGAGGTGGTG GATCTGGTGG CGGAGGAAGT
1861 GGCGGCGGAG GCTCTCAGAG CGTGCTGACC CAGCCCCCTT CTGTGTCTGC CGCCCCTGGC
1921 CAGAAAGTGA CCATCTCCTG CAGCGGCAGC AGCAGCAACA TCGGCAACAA CTACGTGTCC
1981 TGGTATCAGC AGCTGCCCGG CACCGCCCCT AAGCTGCTGA TCTACGACAA CAACAAGCGG
2041 CCCAGCGGCA TCCCCGACCG GTTTAGCGGC AGCAAGAGCG GGACTTCTGC TACACTGGGC
2101 ATCACAGGCC TGCAGACCGG CGACGAGGCC GACTACTACT GCGGCACCTG GGACAGCAGC
2161 CTGAGCGCTT GGGTGTTCGG CTGCGGCACC AAGCTGACAG TGCTG
配列番号19−(Gly4Ser)4アミノ酸20個のリンカー配列
1 GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS
配列番号20−ヌディマブvarB−L鎖アミノ酸配列
1 EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVY SYLAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRAIGIPA
61 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPPFTFG PGTKVDIKRT VAAPSVFIFP
121 PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL
181 TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC
配列番号21−ヌディマブvarB−L鎖ヌクレオチド配列
1 GAAATCGTGC TGACCCAGAG CCCCGCCACC CTGTCTCTGA GCCCTGGCGA GAGAGCCACC
61 CTGAGCTGCA GAGCCAGCCA GAGCGTGTAC TCCTACCTGG CTTGGTATCA GCAGAAGCCC
121 GGCCAGGCCC CCAGACTGCT GATCTACGAC GCCAGCAACC GGGCCATCGG CATCCCTGCC
181 AGATTTTCTG GCAGCGGCAG CGGCACCGAC TTCACCCTGA CCATCAGCAG CCTGGAACCC
241 GAGGACTTCG CCGTGTACTA CTGCCAGCAG CGGAGCAACT GGCCCCCCTT CACCTTCGGC
301 CCTGGCACCA AGGTGGACAT CAAGCGTACG GTGGCTGCAC CATCTGTCTT CATCTTCCCG
361 CCATCTGATG AGCAGTTGAA ATCTGGAACT GCCTCTGTTG TGTGCCTGCT GAATAACTTC
421 TATCCCAGAG AGGCCAAAGT ACAGTGGAAG GTGGATAACG CCCTCCAATC GGGTAACTCC
481 CAGGAGAGTG TCACAGAGCA GGACAGCAAG GACAGCACCT ACAGCCTCAG CAGCACCCTG
541 ACGCTGAGCA AAGCAGACTA CGAGAAACAC AAAGTCTACG CCTGCGAAGT CACCCATCAG
601 GGCCTGAGCT CGCCCGTCAC AAAGAGCTTC AACAGGGGAG AGTGT
配列番号22−ヌディマブvarB−H鎖アミノ酸配列
1 CAGGTGCAGC TGGTGGAAAG CGGCGGAGGC GTGGTGCAGC CCGGCAGAAG CCTGAGACTG
61 AGCTGCGCTG CCAGCGGCTT CATCTTCAGC AGCTACGCCA TGCACTGGGT CCGCCAGGCC
121 CCTGGCAACG GACTGGAATG GGTGGCCTTC ATGAGCTACG ACGGCAGCAA CAAGAAGTAC
181 GCCGACAGCG TGAAGGGCCG GTTCACCATC AGCCGGGACA ACAGCAAGAA CACCCTGTAC
241 CTGCAGATGA ACAGCCTGCG GGCTGAGGAC ACCGCCGTGT ACTACTGCGC CAGAGACCGA
301 GGCATCAGTG CTGGCGGCAA CTACTACTAC TACGGCATGG ACGTGTGGGG CCAGGGCACC
361 ACCGTGACCG TGTCTAGCGC GTCGACCAAG GGCCCATCCG TCTTCCCCCT GGCACCCTCC
421 TCCAAGAGCA CCTCTGGGGG CACAGCGGCC CTGGGCTGCC TGGTCAAGGA CTACTTCCCC
481 GAACCGGTGA CGGTGTCCTG GAACTCAGGC GCTCTGACCA GCGGCGTGCA CACCTTCCCG
541 GCTGTCCTAC AGTCCTCAGG ACTCTACTCC CTCAGCAGCG TGGTGACCGT GCCCTCCAGC
601 AGCTTGGGCA CCCAGACCTA CATCTGCAAC GTGAATCACA AGCCCAGCAA CACCAAGGTG
661 GACAAGAGAG TTGAGCCCAA ATCTTGTGAC AAAACTCACA CATGCCCACC GTGCCCAGCA
721 CCTGAACTCC TGGGGGGACC GTCAGTCTTC CTCTTCCCCC CAAAACCCAA GGACACCCTC
781 ATGATCTCCC GGACCCCTGA GGTCACATGC GTGGTGGTGG ACGTGAGCCA CGAAGACCCT
841 GAGGTCAAGT TCAACTGGTA CGTGGACGGC GTGGAGGTGC ATAATGCCAA GACAAAGCCG
901 CGGGAGGAGC AGTACAACAG CACGTACCGT GTGGTCAGCG TCCTCACCGT CCTGCACCAG
961 GACTGGCTGA ATGGCAAGGA GTACAAGTGC AAGGTCTCCA ACAAAGCCCT CCCAGCCCCC
1021 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AGCCAAAGGG CAGCCCCGAG AACCACAGGT CTACACCCTG
1081 CCCCCATCCC GGGAGGAGAT GACCAAGAAC CAGGTCAGCC TGACCTGCCT GGTCAAAGGC
1141 TTCTATCCCA GCGACATCGC CGTGGAGTGG GAGAGCAATG GGCAGCCGGA GAACAACTAC
1201 AAGACCACGC CTCCCGTGCT GGACTCCGAC GGCTCCTTCT TCCTCTATAG CAAGCTCACC
1261 GTGGACAAGA GCAGGTGGCA GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCTCCGTGAT GCATGAGGCT
1321 CTGCACAACC ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTAAAGG CGGAGGGGGA
1381 TCCGGCGGAG GGGGCTCTCA GGTGCAGCTG GTGCAGTCTG GCGCCGAAGT GAAGAAACCC
1441 GGCTCTAGCG TGAAGGTGTC CTGCAAGGCC AGCGGCGGCA CCTTCTCCAC CTACGGCATC
1501 AGCTGGGTCC GCCAGGCCCC TGGACAGTGT CTGGAATGGA TGGGCGGCAT CATCCCCATC
1561 TTCGACACCG GCAACAGCGC CCAGAGCTTC CAGGGCAGAG TGACCATCAC CGCCGACGAG
1621 AGCACCTCCA CCGCCTACAT GGAACTGAGC AGCCTGCGGA GCGAGGACAC CGCCGTGTAC
1681 TACTGCGCCA GAAGCAGCCG GATCTACGAC CTGAACCCCA GCCTGACCGC CTACTACGAC
1741 ATGGACGTGT GGGGCCAGGG CACCATGGTC ACAGTGTCTA GCGGAGGCGG AGGCAGCGGA
1801 GGTGGTGGAT CTGGTGGCGG AGGAAGTGGC GGCGGAGGCT CTCAGAGCGT GCTGACCCAG
1861 CCCCCTTCTG TGTCTGCCGC CCCTGGCCAG AAAGTGACCA TCTCCTGCAG CGGCAGCAGC
1921 AGCAACATCG GCAACAACTA CGTGTCCTGG TATCAGCAGC TGCCCGGCAC CGCCCCTAAG
1981 CTGCTGATCT ACGACAACAA CAAGCGGCCC AGCGGCATCC CCGACCGGTT TAGCGGCAGC
2041 AAGAGCGGGA CTTCTGCTAC ACTGGGCATC ACAGGCCTGC AGACCGGCGA CGAGGCCGAC
2101 TACTACTGCG GCACCTGGGA CAGCAGCCTG AGCGCTTGGG TGTTCGGCTG CGGCACCAAG
2161 CTGACAGTGC TG
配列番号24−NGF−NG VHアミノ酸配列
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFWFGAFTWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGLTNLAQNFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTAVYYCARSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号25−NGF−NG VHヌクレオチド配列
caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cctctggagg caccttctgg ttcggcgcgt tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gacttgagtg gatgggaggg attattccta tcttcgggtt gacgaacttg 180
gcacagaact tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagtctac 240
atggagctga gcagcttgag atctgaagac acggccgtat attattgtgc acgttcaagt 300
cgtatctacg atctgaaccc gtccctgacc gcctactacg atatggatgt ctggggccag 360
gggacaatgg tcaccgtctc gagt 384
配列番号26−NGF−NG VLアミノ酸配列
QSVLTQPPSVSAAPGQKVTISCSGSSSDIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号27−NGF−NG VLヌクレオチド配列
cagtctgtgc tgactcagcc gccatcagtg tctgcggccc caggacagaa ggtcaccatc 60
tcctgctctg gaagcagctc cgacattggg aataattatg tatcgtggta ccagcagctc 120
ccaggaacag cccccaaact cctcatttat gacaataata agcgaccctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag tgcttgggtg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330
配列番号28−ndimab VHアミノ酸配列
1 QVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCAASGFIFS SYAMHWVRQA PGNGLEWVAF MSYDGSNKKY
61 ADSVKGRFTI SRDNSKNTLY LQMNSLRAED TAVYYCARDR GISAGGNYYY YGMDVWGQGT
121 TVTVSS
配列番号29−ndimab VLアミノ酸配列
1 EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCRASQSVY SYLAWYQQKP GQAPRLLIYD ASNRAIGIPA
61 RFSGSGSGTD FTLTISSLEP EDFAVYYCQQ RSNWPPFTFG PGTKVDIK
配列番号30−1126F1 VHアミノ酸配列
EVQLVQTGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDANRQAVPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号31−1126F1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQMVTISCSGSSSDIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号32−1126G5 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFTSGLAPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号33−1126G5 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPPGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSTWVFGGGTKLTVL
配列番号34−1126H5 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDAGNSAQSFQGRVTITADESTSTAHMEVSSLRSEDTAVYYCASSSRIYDHHIQKGGYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号35−1126H5 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号36−1127D9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDYHTIAYYD
配列番号37−1127D9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号38−1127F9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMKVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDYIPGMRPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号39−1127F9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGNSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSRSGTLATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号40−1131D7 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFNSSLIAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号41−1131D7 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDETDYYCGTWDSSLSAWVFSGGTKLTVL
配列番号42−1131H2 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSTVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号43−1131H2 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGTSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号44−132A9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFGTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFEPSLIYYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号45−132A9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号46−1132H9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号47−1132H9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSDIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPTGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号48−1133C11 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号49−1133C11 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号50−1134D9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVAITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号51−1134D9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSGLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号52−1145D1 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTSNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFRTLYSTYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号53−1145D1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGISDRFSGSKSGTSATLGIAGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号54−1146D7 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号55−1146D7 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQEVTISCSGSSTNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号56−1147D2 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVRISCKASGGTFSTYGVSWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号57−1147D2 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGVPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号58−1147G9 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSAYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFNTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTV
配列番号59−1147G9 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTVSCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号60−1150F1 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQDRVTITADESTSTAYMEVGSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGHGTMVTVSS
配列番号61−1150F1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号62−1152H5 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLVWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDMISSLQPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号63−1152H5 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKATISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号64−1155H1 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFHLANKGYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号65−1155H1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKATISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLDITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号66−1158A1 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFGTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDHHNHVGGYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号67−1158A1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYASWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDGSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号68−1160E3 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSAKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号69−1160E3 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSNSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTV
配列番号70−1165D4 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号71−1165D4 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIENNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号72−1175H8 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQRLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDATTGLTPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号73−1175H8 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLRTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号74−1211G10 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKAYGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWVGGIIPIFDTRNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDMVSTLIPYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号75−1211G10 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号76−1214A1 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEVKKPGSSVRVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDAHLQAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号77−1214A1 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPPGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTRDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号78−1214D10 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAEAKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGRGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVAITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDAHLNHHGYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号79−1214D10 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQAGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号80−1218H5 VHアミノ酸配列
EVQLVQSGAVVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGSSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDLNPSLTAYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号81−1218H5 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNTGNNYVSWYQQLSGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTVL
配列番号82−1230H7 VHアミノ酸配列
EMQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGGTFSTYGISWVRQAPGQGLEWIGGIIPIFDTGNSAQSFQGRVTITADESTSTAYMEVSSLRSDDTAVYYCASSSRIYDFNSALISYYDMDVWGQGTMVTVSS
配列番号83−1230H7 VLアミノ酸配列
QAVLTQPSSVSTPPGQKVTISCSGSSSNIGNNYVSWYQQLPGTAPKLLIYDNNKRPSGIPDRFSGSKSGTSATLGITGLQTGDEADYYCGTWDSSLSAWVFGGGTKLTV
配列番号84−1083H4 VHアミノ酸配列
QMQLVQSGAEVKKTGSSVKVSCKASGYTFAYHYLHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTTNYAQRFQDRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCASADYVWGSYRPDWYFDLWGRGTMVTVSS
配列番号85−1083H4 VLアミノ酸配列
QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGSNTVNWYQRLPGAAPQLLIYNNDQRPSGIPDRFSGSKSGTSGSLVISGLQSEDEADYYCASWDDSLNGRVFGGGTKLTVL
配列番号86−1227H8 VHアミノ酸配列
QMQLVQSGAEVKKTGSSVKVSCKASGHTFAYHYLHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTTNYAQRFQDRVTITADESTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCASADYAWESYQPPQINGVWGRGTMVTVSS
配列番号87−1227H8 VLアミノ酸配列
QSVLTQPPSVSAAPGQKVTITCSGSTSNIGNNYVSWYQQHPGKAPKLMIYDVSKRPSGVPDRFSGSKSGNSASLDISGLQSEDEADYYCAAWDDSLSEFFFGTGTKLTVL
配列番号88−NGF−NG HCDR1
FGAFT
配列番号89−NGF−NG HCDR2
GIIPIFGLTNLAQNFQG
配列番号90−NGF−NG HCDR3
SSRIYDLNPSLTAYYDMDV
配列番号91−NGF−NG LCDR1
SGSSSDIGNNYVS
配列番号92−NGF−NG LCDR2
DNNKRPS
配列番号93−NGF−NG LCDR3
GTWDSSLSAWV
配列番号94−G→Cを有するMEDI−578 VHアミノ酸配列
QVQLVQSGAE VKKPGSSVKV SCKASGGTFS TYGISWVRQA PGQCLEWMGG IIPIFDTGNS
AQSFQGRVTI TADESTSTAY MELSSLRSED TAVYYCARSS RIYDLNPSLT AYYDMDVWGQ
GTMVTVSS
配列番号95−G→Cを有するMEDI−578 VLアミノ酸配列
QSVLTQPPSV SAAPGQKVTI SCSGSSSNIG NNYVSWYQQL PGTAPKLLIY DNNKRPSGIP
DRFSGSKSGT SATLGITGLQ TGDEADYYCG TWDSSLSAWV FGCGTKLTVL
配列番号96−1230D8 VHアミノ酸配列
QMQLVQSGAEVKKTGSSVKVSCKASGYTFPYHYLHWVRQAPGQGLEWMGGIIPIFGTTNYAQRFQDRVTITADESTSTAYMEFSSLRSEDTAVYYCASADYVWESYHPATSLSLWGRGTMVTVSS
配列番号97−1230D8 VLアミノ酸配列
QSVLTQPPSVSAAPGQKVTISCPGSTSNIGNNYVSWYQQRPGKAPKLMIYDVSKRPSGVPDRFSGSKSGNSASLDISELQSEDEADYYCAAWDDSLSEFLFGTGTKLTVL
配列番号98
GGGGSGGGGS
配列番号99−TNFR2−Fc_varB−コドン最適化ヌクレオチド配列
1 CTGCCCGCCC AGGTGGCCTT TACCCCTTAT GCTCCTGAGC CCGGCTCTAC CTGCCGGCTG
61 AGAGAGTACT ACGACCAGAC CGCCCAGATG TGCTGCTCCA AGTGCTCTCC TGGCCAGCAC
121 GCCAAGGTGT TCTGCACCAA GACCTCCGAT ACCGTGTGCG ACTCCTGCGA GGACTCCACC
181 TACACCCAGC TGTGGAACTG GGTGCCCGAG TGCCTGTCCT GCGGCTCCAG ATGTTCCTCC
241 GACCAGGTGG AAACCCAGGC CTGCACCAGA GAGCAGAACC GGATCTGCAC CTGTCGGCCT
301 GGCTGGTACT GCGCCCTGTC TAAGCAGGAA GGCTGCAGAC TGTGCGCCCC TCTGCGGAAG
361 TGTAGACCTG GCTTTGGCGT GGCCAGACCC GGCACCGAGA CATCTGATGT CGTGTGCAAG
421 CCTTGCGCCC CTGGCACCTT CTCCAACACC ACCTCCTCCA CCGACATCTG CCGGCCTCAC
481 CAGATCTGCA ACGTGGTGGC CATCCCTGGC AACGCCTCTA TGGACGCCGT GTGCACCTCT
541 ACCTCCCCCA CCAGAAGTAT GGCCCCTGGC GCTGTGCATC TGCCCCAGCC TGTGTCTACC
601 AGATCCCAGC ACACCCAGCC CACCCCTGAG CCTTCTACCG CCCCTTCTAC CAGCTTCCTG
661 CTGCCTATGG GCCCTAGCCC TCCTGCTGAG GGATCTACAG GCGACGAGCC CAAGTCCTGC
721 GACAAGACCC ACACCTGTCC CCCTTGTCCT GCCCCTGAAC TGCTGGGCGG ACCTTCCGTG
781 TTCCTGTTCC CCCCAAAGCC CAAGGACACC CTGATGATCA GCCGGACCCC TGAAGTGACC
841 TGCGTGGTGG TGGATGTGTC CCACGAGGAT CCCGAAGTGA AGTTCAATTG GTACGTGGAC
901 GGCGTGGAAG TGCACAACGC CAAGACCAAG CCCAGAGAGG AACAGTACAA CTCCACCTAC
961 CGGGTGGTGT CCGTGCTGAC CGTGCTGCAC CAGGATTGGC TGAACGGCAA AGAGTACAAG
1021 TGCAAGGTGT CCAACAAGGC CCTGCCTGCC CCCATCGAAA AGACCATCTC CAAGGCCAAG
1081 GGCCAGCCCC GGGAACCCCA GGTGTACACA CTGCCCCCTA GCCGGGAAGA GATGACCAAG
1141 AACCAGGTGT CCCTGACCTG TCTCGTGAAG GGCTTCTACC CCTCCGATAT CGCCGTGGAA
1201 TGGGAGTCCA ACGGCCAGCC TGAGAACAAC TACAAGACCA CCCCCCCTGT GCTGGACTCC
1261 GACGGCTCAT TCTTCCTGTA CTCCAAGCTG ACAGTGGACA AGTCCCGGTG GCAGCAGGGC
1321 AACGTGTTCT CCTGCTCCGT GATGCACGAG GCCCTGCACA ACCACTACAC CCAGAAGTCC
1381 CTGTCCCTGA GCCCTGGAAA AGGCGGCGGA GGATCTGGCG GAGGCGGATC TCAGGTGCAG
1441 CTGGTGCAGT CTGGCGCTGA AGTGAAGAAA CCCGGCTCCT CCGTGAAGGT GTCCTGCAAG
1501 GCTTCTGGCG GCACCTTCTC TACCTACGGC ATCTCCTGGG TGCGACAGGC CCCTGGCCAG
1561 TGCCTGGAAT GGATGGGCGG CATCATCCCC ATCTTCGACA CCGGCAACTC CGCCCAGAGC
1621 TTCCAGGGCA GAGTGACCAT CACCGCCGAC GAGTCTACCT CCACCGCCTA CATGGAACTG
1681 TCCTCCCTGC GGAGCGAGGA CACCGCCGTG TACTACTGCG CCCGGTCCTC TCGGATCTAC
1741 GACCTGAACC CTTCCCTGAC CGCCTACTAC GACATGGACG TGTGGGGCCA GGGCACAATG
1801 GTCACCGTGT CATCTGGTGG TGGCGGCTCT GGTGGCGGAG GAAGTGGGGG AGGGGGTTCT
1861 GGGGGGGGAG GATCTCAGTC TGTGCTGACC CAGCCTCCTT CCGTGTCTGC TGCCCCAGGC
1921 CAGAAAGTGA CAATCTCCTG CAGCGGCTCC AGCTCCAACA TCGGCAACAA CTACGTGTCC
1981 TGGTATCAGC AGCTGCCCGG CACCGCTCCC AAACTGCTGA TCTACGATAA CAACAAGCGG
2041 CCCTCCGGCA TCCCCGACAG ATTCTCCGGC TCTAAGTCCG GCACCTCTGC CACCCTGGGC
2101 ATCACCGGAC TGCAGACAGG CGACGAGGCC GACTACTACT GTGGCACCTG GGACTCCTCC
2161 CTGTCCGCTT GGGTGTTCGG CTGCGGCACC AAACTGACTG TGCTG
Claims (110)
- NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む結合性分子。
- TNFαアンタゴニストは、配列番号2のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する、請求項1に記載の結合性分子。
- NGFアンタゴニストは、配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する、請求項1に記載の結合性分子。
- NGFアンタゴニストは、抗NGF抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項1に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、TrkA、p75NRT、またはTrkAおよびP75NRTの両方に対するNGFの結合を阻害することができる、請求項4に記載の結合性分子。
- NGFのp75NRTに対する結合よりも、NGFのTrkAに対する結合を優先的にブロックする、請求項5に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、約0.25〜0.44nMの親和性でヒトNGFに結合する、請求項4から6のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、MEDI−578と同じエピトープに対して結合する、請求項4から6のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、MEDI−578のヒトNGFに対する結合を競合的に阻害する、請求項4から6のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、HCDR1、HCDR2、HCDR3のCDRのセットを含む抗体VHドメイン、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3のCDRのセットを含む抗体VLドメインを含み、該HCDR1は、配列番号4、または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号4のアミノ酸配列を有し、該HCDR2は、配列番号5、または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号5のアミノ酸配列を有し、該HCDR3は、配列番号6、もしくは最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号6のアミノ酸配列、SSRIYDFNSALISYYDMDV(配列番号11)、またはSSRIYDMISSLQPYYDMDV(配列番号12)を有し、該LCDR1は、配列番号8、または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号8のアミノ酸配列を有し、該LCDR2は、配列番号9、または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号9のアミノ酸配列を有し、該LCDR3は、配列番号10、または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号10のアミノ酸配列を有する、請求項4から9のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号3のアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項10に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項10または11に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号3のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項10に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号7のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVLを含む、請求項10に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、H2L2抗体全体、Fabフラグメント、Fab’フラグメント、F(ab)2フラグメント、または単鎖Fv(scFv)フラグメントである、請求項4から14のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、ヒト化、キメラ、霊長類化、または完全ヒトのものである、請求項4から15のいずれか一項に記載の結合性分子。
- NGFアンタゴニストは、抗NGF scFvフラグメントである、請求項15に記載の結合性分子。
- scFvはSS安定化されている、請求項17に記載の結合性分子。
- 抗NGF scFvフラグメントは、N末端からC末端へ、配列番号3のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3(配列番号15)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項17に記載の結合性分子。
- 抗NGF scFvフラグメントは、N末端からC末端へ、配列番号94のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸20個のリンカー配列(GGGGS)4(配列番号19)、および配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項17に記載の結合性分子。
- TNFαアンタゴニストは、細胞の表面上でTNF受容体(TNFR)に対するTNFαの結合を阻害し、それによりTNFα活性をブロックする、請求項1から20のいずれか一項に記載の結合性分子。
- TNFαアンタゴニストは、抗TNFα抗体、またはその抗原結合性フラグメントを含む、請求項21に記載の結合性分子。
- 抗TNFα抗体またはそのフラグメントは、HCDR1、HCDR2、およびHCDR3のCDRのセットを含む抗体VHドメイン、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3のCDRのセットを含む抗体VLドメインを含み、該CDRは、インフリキシマブのHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、およびLCDR3、またはアダリムマブのHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、およびLCDR3と同一である、請求項22に記載の結合性分子。
- 完全な抗TNFα抗体、および抗TNFα抗体の重鎖のC末端に融合している抗NGF scFvを含む、請求項23に記載の結合性分子。
- 配列番号20のアミノ酸配列を含む軽鎖、および配列番号22のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項24に記載の結合性分子。
- TNFαアンタゴニストは、TNFRの可溶性TNFα結合性フラグメントを含む、請求項21に記載の結合性分子。
- TNFRはTNFR−2である、請求項26に記載の結合性分子。
- TNFR−2の可溶性フラグメントは75kDフラグメントである、請求項27に記載の結合性分子。
- TNFR−2フラグメントは、免疫グロブリンFcドメインに融合している、請求項26から28のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 免疫グロブリンFcドメインは、ヒトIgG1Fcドメインである、請求項29に記載の結合性分子。
- TNFαアンタゴニストは、配列番号13に記載するアミノ酸配列、またはその機能的なフラグメントを含む、請求項26から30のいずれか一項に記載の結合性分子。
- リンカーを介してTNFαアンタゴニストに融合しているNGFアンタゴニストを含む融合タンパク質を含む、請求項1から31のいずれか一項に記載の結合性分子。
- 融合タンパク質のホモ二量体を含む、請求項32に記載の結合性分子。
- NGFアンタゴニストは抗NGF scFvドメインであり、TNFαアンタゴニストは、そのカルボキシ末端で免疫グロブリンFcドメインに融合している、TNFR−2の可溶性TNFα結合性フラグメントである、請求項33に記載の結合性分子。
- scFvは、リンカーを介して免疫グロブリンFcドメインのカルボキシ末端に融合している、請求項34に記載の結合性分子。
- N末端からC末端へ、TNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー配列(GGGGS)2、配列番号3のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3、(配列番号15)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項35に記載の結合性分子。
- N末端からC末端へ、配列番号13のアミノ酸1〜235に相当する配列と同一のアミノ酸配列を含むTNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー配列(GGGGS)2、配列番号3のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3、(配列番号15)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項35に記載の結合性分子。
- 配列番号14のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項36または37に記載の結合性分子。
- 配列番号14のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項36または37に記載の結合性分子。
- N末端からC末端へ、TNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー配列(GGGGS)2、配列番号94のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸20個のリンカー配列(GGGGS)4(配列番号19)、および配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項35に記載の結合性分子。
- N末端からC末端へ、配列番号13のアミノ酸1〜235に相当する配列と同一のアミノ酸配列を含むTNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー配列(GGGGS)2、配列番号94のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸20個のリンカー配列(GGGGS)4(配列番号19)、および配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項35に記載の結合性分子。
- 配列番号17のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項40または41に記載の結合性分子。
- 配列番号17のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項40または41に記載の結合性分子。
- 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子をコードする、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号99のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一のヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号99のアミノ酸配列と同一のヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号18のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一のヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号18のアミノ酸配列と同一のヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号16のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一のヌクレオチド配列を含む、単離されたポリヌクレオチド。
- 配列番号16のアミノ酸配列と同一のヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチド。
- プロモーターに作動可能に関連している、請求項44から50のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
- 請求項44から50のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、または請求項51に記載のベクターを含む宿主細胞。
- 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子を生成する方法であって、
請求項52に記載の宿主細胞を、該結合性分子の発現を促進する条件下で培養することと、
該結合性分子を回収することと
を含む前記方法。 - 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子、および担体を含む組成物。
- 疼痛を処置するための、TNFαアンタゴニスト、NGFアンタゴニスト、および担体を含む組成物であって、
有効量の該組成物の投与は、単独で投与する等量のNGFアンタゴニストまたはTNFαアンタゴニストの投与よりも効果的に、処置を必要とする対象における疼痛をコントロールすることができる、前記組成物。 - 組成物は医薬組成物であり、担体は薬学的に許容される賦形剤である、請求項54または55に記載の組成物。
- 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子を含む凍結乾燥組成物。
- 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子を含む、復元された凍結乾燥組成物。
- 請求項1から43のいずれか一項に記載の結合性分子、請求項44から50のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項51に記載のベクター、または請求項54から58のいずれか一項に記載の組成物を含むキット。
- 対象における疼痛をコントロールするための方法であって、
有効量の神経成長因子(NGF)アンタゴニスト、および腫瘍壊死因子アルファ(TNFα)アンタゴニストを、それを必要とする対象に投与することを含み、
前記投与は、単独で投与する等量のNGFアンタゴニストまたはTNFαアンタゴニストよりも効果的に、対象における疼痛をコントロールすることができる、前記方法。 - TNFαアンタゴニストおよびNGFアンタゴニストの同時投与を含む、請求項60に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストは、配列番号2のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する、請求項60に記載の方法。
- NGFアンタゴニストは、配列番号1のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する、請求項60に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストおよびNGFアンタゴニストを逐次的または同時に投与する、請求項61に記載の方法。
- NGFアンタゴニストドメインおよびTNFαアンタゴニストドメインを含む結合性分子の投与を含む、請求項60に記載の方法。
- NGFアンタゴニストは、抗NGF抗体またはその抗原結合性フラグメントである、請求項60から65のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、TrkA、p75NRT、またはTrkAおよびp75NRTの両方に対するNGFの結合を阻害することができる、請求項66に記載の方法。
- NGFのp75NRTに対する結合よりも、NGFのTrkAに対する結合を優先的にブロックする、請求項67に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、約0.25〜0.44nMの親和性でヒトNGFに結合する、請求項66から68のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、MEDI−578と同じエピトープに対して結合する、請求項66から69のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、MEDI−578のヒトNGFに対する結合を競合的に阻害する、請求項66から70のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、HCDR1、HCDR2、HCDR3のCDRのセットを含む抗体VHドメイン、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3のCDRのセットを含む抗体VLドメインを含み、該HCDR1は、配列番号4または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号4のアミノ酸配列を有し、該HCDR2は、配列番号5または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号5のアミノ酸配列を有し、該HCDR3は、配列番号6、最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号6、SSRIYDFNSALISYYDMDV(配列番号11)、またはSSRIYDMISSLQPYYDMDV(配列番号12)のアミノ酸配列を有し、該LCDR1は、配列番号7または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号7のアミノ酸配列を有し、該LCDR2は、配列番号9または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号9のアミノ酸配列を有し、該LCDR3は、配列番号10または最高2個のアミノ酸置換を有する配列番号10のアミノ酸配列を有する、請求項66から71のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号3のアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項72に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項72または73に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号3のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項72に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号7のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVLを含む、請求項72または75に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号94のアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項72に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項72または77に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号94のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVHを含む、請求項72に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、配列番号95のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を有するVLを含む、請求項72または79に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、H2L2抗体全体、Fabフラグメント、Fab’フラグメント、F(ab)2フラグメント、または単鎖Fv(scFv)フラグメントである、請求項66から80のいずれか一項に記載の方法。
- 抗NGF抗体またはそのフラグメントは、ヒト化、キメラ、霊長類化、または完全ヒトのものである、請求項66から81のいずれか一項に記載の方法。
- NGFアンタゴニストは抗NGF scFvフラグメントである、請求項82に記載の方法。
- scFvはSS安定化されている、請求項83に記載の方法。
- 抗NGF scFvフラグメントは、N末端からC末端へ、配列番号3のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3(配列番号15)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項83に記載の方法。
- 抗NGF scFvフラグメントは、N末端からC末端へ、配列番号94のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸20個のリンカー配列(GGGGS)4(配列番号19)、および配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む、請求項83に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストは、TNFαのTNF受容体(TNFR)に対する結合を阻害し、それによりTNFα活性をブロックする、請求項60から86のいずれか一項に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストは、抗TNFα抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、請求項87に記載の方法。
- 抗TNFα抗体またはそのフラグメントは、HCDR1、HCDR2、およびHCDR3のCDRのセットを含む抗体VHドメイン、ならびにLCDR1、LCDR2、およびLCDR3のCDRのセットを含む抗体VLドメインを含み、該CDRは、インフリキシマブのHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、およびLCDR3、またはアダリムマブのHCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、およびLCDR3と同一である、請求項88に記載の方法。
- 結合性分子は、完全な抗TNFα抗体、および抗TNFα抗体の重鎖のC末端に融合している抗NGF scFvを含む、請求項88または89に記載の方法。
- 結合性分子は、配列番号20のアミノ酸配列を含む軽鎖、および配列番号22のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、請求項90に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストは、TNFRの可溶性TNFα結合性フラグメントを含む、請求項60から87のいずれか一項に記載の方法。
- TNFRはTNFR−2である、請求項92に記載の方法。
- TNFR−2の可溶性フラグメントは75kDフラグメントである、請求項93に記載の方法。
- TNFR−2フラグメントは免疫グロブリンFcドメインに融合している、請求項93または94に記載の方法。
- 免疫グロブリンFcドメインはヒトIgG1Fcドメインである、請求項95に記載の方法。
- TNFαアンタゴニストは、配列番号13に記載するアミノ酸配列またはその機能的なフラグメントを含む、請求項92から96のいずれか一項に記載の方法。
- 結合性分子は、リンカーを介してTNFαアンタゴニストに融合しているNGFアンタゴニストを含む融合タンパク質を含む、請求項60から97のいずれか一項に記載の方法。
- 結合性分子は、融合タンパク質のホモ二量体を含む、請求項98に記載の方法。
- NGFアンタゴニストは抗NGF scFvドメインであり、TNFαアンタゴニストは、そのカルボキシ末端で免疫グロブリンFcドメインに融合している、TNFR−2の可溶性TNFα結合性フラグメントである、請求項98または99に記載の方法。
- scFvは、リンカーを介して免疫グロブリンFcドメインのカルボキシ末端に融合している、請求項100に記載の方法。
- 結合性分子は、N末端からC末端へ、TNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー(GGGGS)2、配列番号3のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸15個のリンカー配列(GGGGS)3(配列番号15)、および配列番号7のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項99から101のいずれか一項に記載の方法。
- 結合性分子は、配列番号14のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項102に記載の方法。
- 結合性分子は、配列番号14のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項99から101のいずれか一項に記載の方法。
- 結合性分子は、N末端からC末端へ、TNFR−2のTNFα結合性75kDフラグメント、ヒトIgG1Fcドメイン、アミノ酸10個のリンカー(GGGGS)2、配列番号94のアミノ酸配列を含むVH、アミノ酸20個のリンカー配列(GGGGS)4(配列番号19)、および配列番号95のアミノ酸配列を含むVLを含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項99から101のいずれか一項に記載の方法。
- 結合性分子は、配列番号17のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項105に記載の方法。
- 結合性分子は、配列番号17のアミノ酸配列と少なくとも80%、85%、90%、95%、または99%同一であるアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドのホモ二量体を含む、請求項99から101のいずれか一項に記載の方法。
- 投与は、対象における疼痛を、防ぎ、低減し、軽減し、または除去するのに十分である、請求項60から107のいずれか一項に記載の方法。
- 疼痛は、急性疼痛、短期間の疼痛、持続性の侵害受容性疼痛、または持続性もしくは慢性の神経因性疼痛である、請求項60から108のいずれか一項に記載の方法。
- 投与は、対象における疼痛をコントロールするのに、単独で投与する等量のNGFアンタゴニストまたはTNFαアンタゴニストよりも少なくとも5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、または100%効果的である、請求項60から109のいずれか一項に記載の方法。
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2012162561A2 (en) * | 2011-05-24 | 2012-11-29 | Zyngenia, Inc. | Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses |
JP5096167B2 (ja) * | 2005-01-24 | 2012-12-12 | メドイミューン リミテッド | Ngfに対する特異的結合メンバー |
JP2013507928A (ja) * | 2009-10-15 | 2013-03-07 | アボット・ラボラトリーズ | 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用 |
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JP2013507928A (ja) * | 2009-10-15 | 2013-03-07 | アボット・ラボラトリーズ | 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用 |
JP2013512674A (ja) * | 2009-12-02 | 2013-04-18 | アクセルロン ファーマ, インコーポレイテッド | Fc融合タンパク質の血清半減期を増加させるための組成物および方法 |
WO2012162561A2 (en) * | 2011-05-24 | 2012-11-29 | Zyngenia, Inc. | Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses |
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