JP2017088617A

JP2017088617A - Ｐｄ−１アゴニストからなる自己免疫疾患治療剤

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Publication number: JP2017088617A
Application number: JP2017024163A
Authority: JP
Inventors: 史朗柴山; Shiro Shibayama; 雅道今井; Masamichi Imai
Original assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ono Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-08-11
Filing date: 2017-02-13
Publication date: 2017-05-25
Anticipated expiration: 2032-08-10
Also published as: EP2742953B1; US20170320949A1; US20140220021A1; JP6094486B2; US9701749B2; US10647770B2; WO2013022091A1; EP2742953A4; EP2742953A1; EP3939613A1; ES2893855T3; JPWO2013022091A1; JP6278224B2

Abstract

【課題】感染症の罹患リスクが低く、しかも患者への投薬負担を軽減した自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤を提供する。【解決手段】ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、（ａ）最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、（ｃ）最後の投与から３カ月以上投与の必要のないことを特徴とする自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤。【選択図】なし

Description

本発明は、ＰＤ−１アゴニストを有効成分として含む自己免疫疾患治療剤に関する。具体的には、ＰＤ−１アゴニストを特定の用量及び用法で投与することを特徴とする自己免疫疾患治療剤に関する。

自己免疫疾患とは、自己の組織に対する免疫反応が異常に亢進してしまう疾患であり、その治療には一般的にステロイド投与、さらにはシクロスポリンやメトトレキサート等の免疫抑制剤の持続的な投与による治療が行われている。しかしながら、これらの薬剤は、自己に対する免疫反応を抑えるだけでなく、病原体感染に対する免疫反応をも抑制してしまうため、それらの投薬管理は患者並びに医療関係者の負担となっている。

ところで、ＰＤ−１は免疫グロブリンファミリーに属する免疫抑制受容体であり、抗原レセプターからの刺激により活性化したＴ細胞の免疫活性化シグナルを抑制する機能を持つ分子である。ＰＤ−１ノックアウトマウスの解析等から、ＰＤ−１シグナルは、自己免疫性拡張型心筋症、ループス様症候群、自己免疫性脳脊髄炎、全身性ループスエリテマトーデス、移植片対宿主病、Ｉ型糖尿病およびリウマチ性関節炎などの自己免疫疾患の抑制に重要な役割を果たすことが知られている。したがって、ＰＤ−１シグナルを増強するＰＤ−１アゴニストは自己免疫疾患の予防または治療剤となり得ることが指摘されている。

これまでにＰＤ−１アゴニストとしてＰＤ−１二重特異性抗体が知られている（特許文献１ないし３）。この二重特異性抗体は、Ｔ細胞受容体複合体のメンバーであるＣＤ３を認識する抗体の抗原認識部位とＰＤ−１を認識する抗体の抗原認識部位とを遺伝子工学的に連結されたものであり、ＰＤ−１をＴ細胞受容体複合体近傍に位置させる頻度を上げることによって、Ｔ細胞受容体複合体に対するＰＤ−１の抑制シグナルを増強する作用をもつ。さらに、同特許文献には、ＰＤ−１二重特異性抗体が自己免疫疾患の予防または治療に使用できることも記載されている。

しかしながら、感染症の罹患リスクを低減させつつ、一方で少数回の投与のみで治療効果を持続でき、患者への投薬負担を軽減するＰＤ−１アゴニストの処方については知られていない。

国際公開第０１／０１４５５７号パンフレット国際公開第０３／０１１９１１号パンフレット国際公開第０４／０７２２８６号パンフレット

本発明の目的は、感染症の罹患リスクが低く、しかも患者への投薬負担を軽減した自己免疫疾患に対する予防、症状進展抑制または治療剤を提供することにある。

本発明の発明者らは鋭意検討した結果、かかる課題を解決し得る物質としてＰＤ−１アゴニストに着目し、さらにこれを特定の用量および用法で処方することによって上記課題を解決することを見出して、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、以下のとおりである。
［１］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から３カ月以上投与の必要のないことを特徴とする自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から３カ月以上投与を行わないことを特徴とする自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３］自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病、全身性エリテマトーデス、乾癬、関節リウマチ、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病）、甲状腺機能亢進症、自己免疫性副腎機能不全、自己免疫性溶血性貧血、多発性硬化症、乾癬性関節炎、シェーグレン症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎または強皮症である前記［１］または［２］記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４］自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病）である前記［１］または［２］記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５］自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病である前記［４］記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６］Ｉ型糖尿病の患者が、発症初期の患者もしくは症状軽度の患者である前記［５］記載の症状進展抑制および／または治療剤。
［７］発症が確認されていないＩ型糖尿病の素因保有者に投与される前記［５］記載の予防剤。
［８］Ｉ型糖尿病の発症初期の患者あるいは症状軽度の患者が、インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存している患者である前記［６］記載の症状進展抑制および／または治療剤。
［９］発症が確認されていないＩ型糖尿病の素因保有者が、
（Ｉ）糖尿病の臨床診断基準における境界型である者、
（ＩＩ）発症前診断において、抗ランゲルハンス氏島抗体、抗ＧＡＤ抗体、抗インスリン抗体および抗ＩＡ−２抗体から選択される１種以上が陽性の者、あるいは
（ＩＩＩ）一または二親等以内の血族に自己免疫疾患の家族歴を持つ者である前記［７］記載の予防剤。
［１０］最後の投与から３カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上を維持できる前記［３］〜［６］のいずれかに記載または［８］記載の症状進展抑制剤。
［１１］最後の投与から４カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１２］最後の投与から５カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１３］最後の投与から６カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１４］最後の投与から７カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１５］最後の投与から８カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１６］最後の投与から９カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１７］最後の投与から１２カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１８］最後の投与から１５カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［１９］最後の投与から１８カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２０］最後の投与から２１カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２１］最後の投与から２４カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２２］最後の投与から３６カ月以上投与の必要のない前記［１］または［３］〜［１０］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２３］最後の投与から４カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２４］最後の投与から５カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２５］最後の投与から６カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２６］最後の投与から７カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２７］最後の投与から８カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２８］最後の投与から９カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［２９］最後の投与から１２カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３０］最後の投与から１５カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３１］最後の投与から１８カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３２］最後の投与から２１カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３３］最後の投与から２４カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３４］最後の投与から３６カ月以上投与を行わない前記［２］〜［９］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３５］最初の投与から１９日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３６］最初の投与から１７日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３７］最初の投与から１５日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３８］最初の投与から１３日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［３９］最初の投与から１１日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４０］最初の投与から９日間に１〜１０回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４１］最初の投与から８日間に１〜９回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４２］最初の投与から７日間に１〜８回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４３］最初の投与から６日間に１〜７回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４４］最初の投与から５日間に１〜６回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４５］最初の投与から４日間に１〜５回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４６］最初の投与から３日間に１〜４回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４７］最初の投与から２日間に１〜３回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４８］最初の投与日に１回投与される前記［１］〜［３４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［４９］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５０］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、４８μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５１］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、４８μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５２］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、４８μｇ／ｋｇ〜１６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５３］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、１６０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５４］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、１６０μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５５］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、４８０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５６］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５７］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３０μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５８］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３０μｇ／ｋｇ〜１００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［５９］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、１００μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６０］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、１００μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６１］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、１００μｇ／ｋｇ〜１６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６２］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３００μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６３］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３００μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６４］ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が、３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである前記［１］〜［４８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６５］ＰＤ−１アゴニストが、ＰＤ−１二重特異性抗体、ＰＤ−１アゴニスト抗体またはＰＤ−１二重特異性タンパクである前記［１］〜［６４］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６６］ＰＤ−１二重特異性抗体が、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体である前記［６５］記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６７］ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体が、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２である前記［６６］記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６８］ＰＤ−１二重特異性抗体を構成するＰＤ−１抗体の抗原結合部位が、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載のハイブリドーマ１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、４Ａ１１、７Ｄ３もしくは５Ｆ４クローン由来のモノクローナル抗体の抗原結合部位である前記［６５］〜［６７］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［６９］ＰＤ−１二重特異性抗体を構成するＣＤ３抗体の抗原結合部位が、ＯＫＴ３、ＯＫＴ３γ１（ａｌａ−ａｌａ）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３（国際公開第９３／１９１９６号）またはＨＵＭ２９１の抗原結合部位である前記［６５］〜［６８］のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［７０］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、１回投与もしくは最初の投与から２４時間〜１１日間に２〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）Ｃペプチド反応が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上を維持できることを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
［７１］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、１回投与もしくは最初の投与から２４時間〜１１日間に２〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上投与を行わないことを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
［７２］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）Ｃペプチド反応が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上を維持できることを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
［７３］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上投与を行わないことを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
［７４］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）（Ｉ）糖尿病の臨床診断基準における境界型である者、
（ＩＩ）発症前診断において、抗ランゲルハンス氏島抗体、抗ＧＡＤ抗体、抗インスリン抗体および抗ＩＡ−２抗体から選択される１種以上が陽性の者あるいは
（ＩＩＩ）一または二親等以内の血族に自己免疫疾患の家族歴を持つ者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上発症させないＩ型糖尿病の予防剤。
［７５］ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）（Ｉ）糖尿病の臨床診断基準における境界型である者、
（ＩＩ）発症前診断において、抗ランゲルハンス氏島抗体、抗ＧＡＤ抗体、抗インスリン抗体および抗ＩＡ−２抗体から選択される１種以上が陽性の者あるいは
（ＩＩＩ）一または二親等以内の血族に自己免疫疾患の家族歴を持つ者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上発症させないＩ型糖尿病の予防剤。
［７６］ＰＤ−１アゴニストが、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２である前記［７０］〜［７５］のいずれかに記載のＩ型糖尿病の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
［７７］ＰＤ−１アゴニストを自己免疫疾患患者に対して、１〜１０回、最初の投与から１カ月以内の期間に投与し、該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、最後の投与から３カ月以上、該自己免疫疾患の症状進展を抑制および／または治療効果が持続する方法。
［７８］自己免疫疾患患者に対して最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、その合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、最後の投与から３カ月以上、該自己免疫疾患の症状進展を抑制すること、および／または治療効果を持続させることにおける使用のためのＰＤ−１アゴニスト。
［７９］ＰＤ−１アゴニストを発症が確認されていないＩ型糖尿病の素因保有者に対して最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与し、該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、最後の投与から３カ月以上、Ｉ型糖尿病の発症を予防する方法。
［８０］発症が確認されていないＩ型糖尿病の素因保有者に対して、最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、その合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、最後の投与から３カ月以上、Ｉ型糖尿病の発症を予防するためのＰＤ−１アゴニスト。

本発明にかかる自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤は、感染症の罹患リスクを低減しつつ、少数回の投与のみで、自己免疫疾患の予防効果、症状進展抑制効果および／または治療効果を一定期間持続させることができるため、自己免疫疾患の発症リスクを有する者もしくは患者あるいはその医療関係者の投薬管理負担を軽減することができる。

自然発症Ｉ型糖尿病動物モデル（ＮＯＤマウス）における、対照群（リン酸緩衝液投与群）での血糖値の推移を表わす。ここで、図中の各グラフは各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（０．３μｇ／日）の５回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（１μｇ／日）の５回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（６μｇ／日）の５回連日投与の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（６μｇ／日）の週３回（８週間）投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、対照群とＰＤ−１アゴニスト（０．３、１または６μｇ／日）の５回連日投与群の糖尿病発症状態を発症率で表わす。図中、○、□および△印は各々のＰＤ−１アゴニスト投与群を表わし、◇印は対照群を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、リン酸緩衝液１回投与である対照群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフは各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（３μｇ／日）の１回投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（３μｇ／日）の２回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（３μｇ／日）の３回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（３μｇ／日）の４回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。自然発症Ｉ型糖尿病動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニスト（３μｇ／日）の５回連日投与群の血糖値降下作用を表わす。ここで、図中の各グラフはＰＤ−１アゴニストを投与された各々の個体の結果を表わす。多発性硬化症動物モデル（実験的自己免疫性脳脊髄炎：ＥＡＥ）における、免疫処置日から５回連日（３μｇ／日）投与したＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。図中、○印はＰＤ−１アゴニスト投与群を表わし、×印は対照群（リン酸緩衝液投与群）を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、免疫処置日当日あるいは６日目から５回連日投与したＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。図中、□印は６μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを免疫処置日から５回連日投与した群を表わし、△印は６μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを免疫処置日から６日目より５回連日投与した群を表わし、×印は対照群（リン酸緩衝液投与群）を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、免疫処置日から６日目より５回連日投与したＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。図中、□印は１μｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを５回連日投与した群を表わし、△印は３μｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを５回連日投与した群を表わし、×印は対照群（リン酸緩衝液投与群）を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、免疫処置日から７日目より５回連日投与したＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。△印は６μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを免疫処置日から７日目より５回連日投与した群を表わし、×印は対照群（リン酸緩衝液投与群）を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、免疫処置日から１３日目より５回連日投与したＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症治療効果を表わす。△印は０．３μｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを免疫処置日から１３日目より５回連日投与した群を表わし、×印は対照群（リン酸緩衝液投与群）を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。図中、○印は、惹起剤による最初の免疫処置日を０日目としたとき、０日目と２２日目に惹起剤で２回免疫処置して、その間の７日目から連日５日間に０．２２ｍｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを投与した群を表わし、□印は、上記０日目は惹起剤による免疫処置を行い、７日目から連日５日間、リン酸緩衝液を投与した群を表わし、△印は、上記０日目に惹起剤による免疫処置を行わず、２２日目に惹起剤により免疫し、７日目から連日５日間にリン酸緩衝液を投与した群を表わす。多発性硬化症動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニストによる多発性硬化症発症抑制効果を表わす。図中、○印は、図１８の実験における０日目には惹起剤による免疫を行わず、７日目から連日５日間に０．２２ｍｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを投与し、２２日目に惹起剤により免疫した群を表わし、□印は、０日目に惹起剤による免疫処置を行わず、２２日目に惹起剤により免疫し、７日目から連日５日間にリン酸緩衝液を投与した群を表わす。大腸炎動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニストによる大腸炎発症抑制効果を表わす。図中、●印は６μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを週に２〜３回（２週間）投与した群を表し、×印は１０ｍｇ／ｋｇ／日のプレドニゾロンを一日一回投与した群を表わし、▲印は対照群を表し、□印は健常対照群を表わす。大腸炎動物モデルにおける、ＰＤ−１アゴニストによる大腸炎発症抑制効果を表わす。図中、○印は１μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与した群を表わし、●印は３μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与した群を表わし、▲印は対照群を表し、□印は健常対照群を表わす。

本発明明細書において特に限定しないかぎり、ＰＤ−１はヒトＰＤ−１を意味し、免疫活性化受容体、その免疫受容体複合体を構成する膜タンパクおよび免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクはヒト由来のものを意味する。

ここで、免疫活性化受容体としては、例えば、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）、サイトカイン受容体、ＬＰＳ受容体、補体受容体およびＦｃ受容体であり、免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクとしては、例えば、ＣＤ３およびＣＤ７９等であり、免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクとしては、例えば、ＣＤ２およびＣＤ１９等が挙げられる。

本発明明細書において、ＰＤ−１アゴニストとしては、例えば、ＰＤ−１二重特異性抗体、ＰＤ−１アゴニスト抗体およびＰＤ−１二重特異性タンパク等が挙げられる。

ＰＤ−１二重特異性抗体とは、ＰＤ−１および免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクもしくは免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクの両者を認識する抗体を意味し、例えば、ＰＤ−１を認識する抗体の抗原結合部位と免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクもしくは免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクを認識する抗体の抗原結合部位を少なくとも含む改変抗体あるいは改変低分子化抗体である。ここで、ＰＤ−１を認識する抗体の抗原結合部位は、抗ＰＤ−１抗体がＰＤ−１上のエピトープに結合する部位であって、抗ＰＤ−１抗体の重鎖可変領域（以下、Ｖ_Ｈと略記する。）と軽鎖可変領域（以下、Ｖ_Ｌと略記する。）に相当する部分から構成される。一方、免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクまたは免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクを認識する抗体の抗原結合部位は、その抗体が上記免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクまたは免疫活性化受容体と同じ免疫シナプスに位置する膜タンパク上のエピトープに結合する部位であって、その抗体のＶ_ＨとＶ_Ｌに相当する部分から構成される。

ＰＤ−１二重特異性抗体の形態には、例えば、ダイアボディ、二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２、二重特異性ミニボディ、二重特異性Ｆ（ａｂ′）_２、二重特異性ハイブリッド抗体、共有結合型ダイアボディ（二重特異性ＤＡＲＴ）（国際公開第２００６／１１３６６５号または国際公開第２００８／１５７３７９号）、二重特異性（ＦｖＣｙｓ）_２（J. Immunol.,1992, Vol.149, No.1, p.120-126）、二重特異性Ｆ（ａｂ′−ジッパー）_２（J. Immunol.,1992, Vol.148, No.5, p.1547-1553）、二重特異性（Ｆｖ−ジッパー）_２（Biochemistry, 1992, Vol.31, No.6, p.1579-1584）、二重特異性三鎖抗体（Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1993, Vol.90, No.14, p.6444-6448）および二重特異性ｍＡｂ^２（www.f-star.com/technology_mab.html）等がある。

ダイアボディとは、異なる抗原を認識するＶ_Ｈ、Ｖ_Ｌ同士をペプチドリンカーで連結された一本鎖ペプチドの二量体である（Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1993, Vol.90, No.14, p.6444-6448）。例えば、２つの異なる抗原ａおよび抗原ｂを認識する各々の抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌを各々Ｖ_ＨａおよびＶ_ＬａならびにＶ_ＨｂおよびＶ_Ｌｂと表わし、ペプチドリンカーを（Ｌ）と表わす場合、Ｖ_ＨａおよびＶ_Ｌａの会合ならびにＶ_ＨｂおよびＶ_Ｌｂの会合によって、Ｖ_Ｌａ−（Ｌ）−Ｖ_ＨｂおよびＶ_Ｌｂ−（Ｌ）−Ｖ_Ｈａが会合した二量体である。各々のＶ_ＨおよびＶ_Ｌとペプチドリンカーはペプチド結合によって結合されており、ダイアボディで選択されるペプチドリンカーは、その両末端に結合するＶ_ＨおよびＶ_Ｌの発現ならびにダイアボディの形成を阻害するものでなければ特に限定されないが、例えば、Ｓｅｒ、（Ｇｌｙ）_ｎ−Ｓｅｒ、Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_ｎ、（（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ）_ｎ、（Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_４）_ｎ［ｎは１〜６の整数を表わし、Ｓｅｒはセリンを表わし、Ｇｌｙはグリシンを表わす。］などを選択することができる（J. Immunol. Meth., 1999, Vol.231, p.177-189）。

二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２とは、異なる抗原を認識する２つの抗体の２組のＶ_Ｈ／Ｖ_Ｌがペプチドリンカーを介して連続する一本鎖の形態で産生されるよう改変された低分子化抗体である（J. Biological Chemistry, 1994, 269: 199-206）。ここで、二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の形態には、２つの異なる抗原ｃおよび抗原ｄを認識する各々の抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌを各々Ｖ_ＨｃおよびＶ_ＬｃならびにＶ_ＨｄおよびＶ_Ｌｄと表わし、ペプチドリンカーを各々（Ｌ_１）、（Ｌ_２）および（Ｌ_３）と表わす場合、Ｎ末端側から、
（１）Ｖ_Ｈｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｌｃ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｈｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｌｄで配列されているタイプ、
（２）Ｖ_Ｌｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｈｃ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｈｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｌｄで配列されているタイプ、
（３）Ｖ_Ｈｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｌｃ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｌｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｈｄで配列されているタイプ、
（４）Ｖ_Ｈｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｈｄ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｌｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｌｃで配列されているタイプ、
（５）Ｖ_Ｌｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｌｄ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｈｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｈｃで配列されているタイプおよび
（６）Ｖ_Ｌｃ−（Ｌ_１）−Ｖ_Ｈｄ−（Ｌ_２）−Ｖ_Ｌｄ−（Ｌ_３）−Ｖ_Ｈｃで配列されているタイプ等が挙げられ、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌとペプチドリンカーはペプチド結合によって結合されている。二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２は、Ｖ_ＨｃおよびＶ_Ｌｃが会合し、Ｖ_ＨｄおよびＶ_Ｌｄが会合することによって形成される。ここで、選択されるペプチドリンカーは、二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の発現ならびに形成を阻害するものでなければ特に限定されないが、例えば、Ｓｅｒ、（Ｇｌｙ）_ｎ−Ｓｅｒ、Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_ｎ、（（Ｇｌｙ）_４−Ｓｅｒ）_ｎ、（Ｓｅｒ−（Ｇｌｙ）_４）_ｎ［各記号は上記と同じ意味を表わす。］などを挙げることができる。また、３つのペプチドリンカー（Ｌ_１）、（Ｌ_２）および（Ｌ_３）は同じでも異なっていてもよい。

二重特異性ハイブリッド抗体とは、異なる２つの抗原を認識する抗体の重鎖／軽鎖複合体がジスルフィド結合等によって共有結合したインタクトな抗体である。二重特異性ハイブリッド抗体は、例えば、ハイブリッドハイブリドーマ法（米国特許第４４７４８９３号）で作製されたハイブリドーマから産生させることができる。また、異なる抗原を認識する抗体の重鎖および軽鎖を各々コードする計４種類のｃＤＮＡを哺乳動物細胞に共発現ならびに分泌させて製造することができる。

二重特異性Ｆ（ａｂ′）_２とは、異なる２つの抗原を認識する抗体のＦａｂ′断片が、ジスルフィド結合等により共有結合した低分子化抗体である。ここで、Ｆａｂ′断片は、インタクトな抗体をペプシンで消化したＦ（ａｂ′）_２の２つの重鎖間のジスルフィド結合の切断により調製される抗体断片である。二重特異性Ｆ（ａｂ′）_２は、例えば、一方の抗体から調製したＦａｂ′断片をｏ−フェニレンジマレイミドにてマレイミド化し、もう一方の抗体から調製したＦａｂ′断片を反応させることにより作製することができる（Cancer Research 1997, 57: 4008-4014）。また、Ｆａｂ′断片−チオニトロ安息香酸誘導体と一方のＦａｂ′−ＳＨ等の抗体断片を化学的に結合する方法も知られている（Science 1985, 229: 81-83）。

二重特異性ミニボディとは、各々異なる抗原を認識するｓｃＦｖに抗体の定常領域ＣＨ３ドメインが連結されるよう改変された低分子抗体断片を、そのＣＨ３ドメイン上のジスルフィド結合等によって共有結合した低分子化抗体である（Biochemistry, 1992, Vo.31, No.6, p.1579-1584）。ここで、ｓｃＦｖとは、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌがペプチドリンカー等によって連結された形態を有する一本鎖の改変低分子抗体断片である（J. Immunol. Meth., 1999, Vol.231, p.177-189）。

本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体は、ＰＤ−１抗体、免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクおよび／または免疫活性化受容体を同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクを認識する抗体が非ヒト由来である場合、これをヒト化あるいはキメラ抗体としたものを用いて作製することができる。さらに、各々の抗体がヒト型抗体のものを用いて作製することもできる。ここで、ヒト化抗体とは、例えば、マウスのような別の哺乳動物に由来する抗体の相補性決定領域（以下、ＣＤＲと記載する。）をヒト抗体のフレームワーク（以下、ＦＲと記載する。）配列上に移植した抗体を言うが、例えば、米国特許第４８１６５６７号、米国特許第５２２５５３９号および米国特許第５５３０１０１号ならびに米国特許第５５８５０８９号および米国特許第６１８０３７０号に記載された方法に基づき製造することができる。また、ヒト化抗体のＣＤＲが適切な抗原結合部位を形成するように抗体の可変領域中のＦＲのアミノ酸を置換してもよい(Cancer Research, Vol.53, p.851-856(1993))。また、キメラ抗体とは、抗体の可変領域配列がヒト以外の哺乳動物由来であって、定常領域配列がヒト由来である抗体を言い、例えば、可変領域配列がマウス抗体またはラット抗体に由来し、定常領域配列がヒト抗体に由来する抗体である。ヒト型抗体とは、可変領域のＣＤＲおよびＦＲならびに定常領域のすべての構成がヒトに由来する抗体であり、ＨｕＭＡｂマウス（商品名）（米国特許第５５４５８０６号、米国特許第５５６９８２５号、米国特許第５６２５１２６号および米国特許第５６３３４２５号など参照）、ＫＭマウス（商品名）（国際公開第２００２／４３４７８号参照）、ゼノマウス（商品名）（米国特許第５９３９５９８号、米国特許第６０７５１８１号、米国特許第６１１４５９８号、米国特許第６１５０５８４号および米国特許第６１６２９６３号参照）、ＴＣマウス（商品名）（Proc.Natl.Acad.Sci.USA, Vol.97, No.2,p.722-727(2000)）またはヒト免疫細胞を再構築したＳＣＩＤマウス（米国特許第５４７６９９６号および米国特許第５６９８７６７号参照）を用いて製造することができる。また、ヒト型抗体は、ヒトイムノグロブリン遺伝子ライブラリースクリーニングのためのファージディスプレイ法（米国特許第５５６５３３２号、米国特許第５７３３７４３号もしくは米国特許第５８５８６５７号などまたは米国特許第５２２３４０９号、米国特許第５４０３４８４号もしくは米国特許第５５７１６９８号など参照）でも調製できる。

本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体の形態として挙げられる一連の改変抗体は、その抗原認識部位を構成するＶ_ＨおよびＶ_Ｌに相当する部分を各々コードする遺伝子の改変によって製造することができる。Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌに相当する部分を各々コードする遺伝子は、主に抗体遺伝子ライブラリーから、あるいはモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマから遺伝子クローニングして取得することがでできる。

抗体遺伝子ライブラリーから取得する方法、例えば、抗体ファージライブラリー（EMBO J., 1993, Vol.12, No.2, p.725-34, 米国特許第５５６５３３２号）はよく知られており、GE Healthcare社のRecombinant Phage Antibody SystemやStratagene社のSurfZAP（商品名） Phage Display Kitを用いて実施することができる。

モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマから遺伝子クローニングして取得する方法も既によく知られており、ミルステインらの方法(Methods Enzymol., 1981, Vol.73, p.3-46)等に準じて取得したハイブリドーマから、周知の方法により、産生される抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌに相当する部分を各々コードするｃＤＮＡをクローニングすることができる。

本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体は、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌに相当する部分を各々コードする単離ｃＤＮＡを発現ベクターに挿入し、発現細胞で発現・分泌させて製造することができる。例えば、ダイアボディの場合、ダイアボディを構成する各々の一本鎖ペプチドを発現するベクターは、ペプチドリンカーをコードするＤＮＡを挟むように、異なる抗原を認識するＶ_Ｈ、Ｖ_Ｌに相当する部分を各々コードするｃＤＮＡをインフレームで連結し、これを発現ベクターに挿入して作製することができる。各々の一本鎖ペプチドを発現するＤＮＡは同一の発現ベクターに挿入されてもよく、また、別々の発現ベクターに挿入されてもよい。この発現ベクターを適当な発現細胞に導入して発現させると、発現細胞からダイアボディを直接分泌させることができる。また、二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２を発現するベクターは、二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の場合、例えば、異なる抗原を認識するＶ_ＨおよびＶ_ＬをコードするｃＤＮＡを各々ｄＶ_ＨａおよびｄＶ_ＬａならびにｄＶ_ＨｂおよびｄＶ_Ｌｂと表わし、ペプチドリンカーをコードするＤＮＡを各々ｄＬ_１、ｄＬ_２およびｄＬ_３と表わすとき、５′末端からｄＶ_Ｈａ−（ｄＬ_１）−ｄＶ_Ｌａ−（ｄＬ_２）−ｄＶ_Ｈｂ−（ｄＬ_３）−ｄＶ_Ｌｂ等の順序で、ペプチドリンカーをコードするＤＮＡを挟むようにインフレームで連結し、これを発現ベクターに挿入して作製することができる。この発現ベクターを適当な発現細胞に導入して発現させると、発現細胞から二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２を直接分泌させることができる。ここで、ダイアボディあるいは二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の発現に使用できる発現ベクターとしては、例えば、ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）などが挙げられる。

本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体を作製する上で使用できるＰＤ−１抗体としては、例えば、国際公開第２０１０／０８９４１１号に記載のＰＤ１．３で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体（CNCM寄託番号1-4122で特定されるハイブリドーマ由来）、国際公開第２０１０／０６３０１１号に記載のＥＨ１２−１５４０で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２０１０／０３６９５９号に記載のＥＨ−１２．２Ｈ７で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２０１０／０２９４３５号に記載の各々クローン２（HPA Culture Collection番号08090903）、クローン１０（同番号08090902）およびクローン１９（同番号08090901）で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２００９／１１４３３５号に記載の各々１Ｂ８、２８．１１、１．８Ａ１０、１Ｇ７、２０Ｂ３．１、７Ｇ３、３Ｈ４、６Ｄ１０および２．３Ａ９で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２００８／１５６７１２号に記載の各々ｈＰＤ−１．０８ＡおよびｈＰＤ−１．０９Ａで特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２００３／０４２４０２号に記載の各々１０Ｆ．９Ｇ２および１０Ｆ．２Ｈ１１で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体、国際公開第２００４／０７２２８６号に記載のＪ１１０（国際受託番号:FERM BP-8392）で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体およびImmunology Letters, 2002, Vol.83, Issue 3, p.215-220に記載の各々Ｊ１０５、Ｊ１０８およびＪ１１６で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体などが挙げられる。なお、本発明明細書において特に限定しない限り、ＰＤ−１抗体は抗ヒトＰＤ−１モノクローナル抗体を意味する。

ところで、免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクとして挙げられるＴ細胞受容体はαサブユニットおよびβサブユニットからなり、Ｔ細胞受容体複合体は、Ｔ細胞受容体にε、δ、γおよびζサブタイプから構成されるＣＤ３が会合した複合体である。

本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体がＣＤ３を認識する場合、本明細書において、これをＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体と言い、本発明におけるＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体が認識するＣＤ３は、ε、δ、γおよびζサブタイプであってもよい。

ここで、本発明におけるＰＤ−１二重特異性抗体を作製する上で使用できるＣＤ３抗体としては、例えば、ＯＫＴ３（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ８００１）（米国特許第４６５８０１９号）、７Ｄ６、１２Ｆ６、３８．１、８９ｂ１、１３１Ｆ２６、ＢＬ−Ａ８、ＢＷ２３９／３４７、ＢＷ２６４／５６、ＣＤ３−４Ｂ５、ＣＬＢ−Ｔ３／３、ＣＲＩＳ−７、Ｆ１１１−４０９、Ｇ１９−４．１、ＨＩＴ３ａ、ＩＣＯ−９０、ＩＰ３０、Ｌｅｕ−４、ＬＹ１７．２Ｇ３、Ｍ−Ｔ３０１、Ｍ−Ｔ３０２、ＭＥＭ−５７、ＭＥＭ−９２、ＮＵ−Ｔ３、ＯＫＴ３Ｄ、ＳＭＣ２、Ｔ３、Ｔ３（２Ａｄ２）、Ｔ３／２Ａｄ２Ａ２、Ｔ３／２ＡＤ、Ｔ３（２ＡＤＡ）、Ｔ３／２Ｔ８−２Ｆ４、Ｔ３／ＲＷ２−４Ｂ６、Ｔ３／ＲＷ２−８Ｃ８、Ｔ１０Ｂ９、Ｔ１０１−０１、ＵＣＨＴ１、ＶＩＴ３、ＶＩＴ３ｂ、Ｘ３５−３、ＸＸＩＩＩ．４６、ＸＸＩＩＩ．８７、ＸＸＩＩＩ．１４１、ＹＴＨ１２．５、ＹＴＨ１２．５、ＣＬＢ−Ｔ３．４．２、ＷＴ３１、ＷＴ３２、ＳＰｖ−Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、Ｍ２９１、Ｌｅｕ４、５００Ａ２、ＳＰ３４、ＲＩＶ−９、ＢＨ１１、Ｔ２／３０、ＡＧ３およびＢＣ３などが挙げられる。

また、ＣＤ３抗体については、ＯＫＴ３γ１（ａｌａ−ａｌａ）（米国特許第６４９１９１６号）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３（国際公開第９３／１９１９６号）およびＨＵＭ２９１（国際公開第９７／４４３６２号）等のヒト化抗体が知られている。なお、本発明明細書において特に限定しない限り、ＣＤ３抗体は抗ヒトＣＤ３モノクローナル抗体を意味する。

一方、ＰＤ−１抗体については、例えば、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載の１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、４Ａ１１、７Ｄ３もしくは５Ｆ４で特定される抗体や国際公開第２００４／０５６８７５号に記載の各々ＰＤ１−１７、ＰＤ１−２８、ＰＤ１−３３およびＰＤ１−３５で特定される抗体等のヒト型抗体が知られている。

ＰＤ−１アゴニスト抗体とは、ＰＤ−１二重特異性抗体を除き、ＰＤ−１の免疫抑制シグナルを増強する作用を有するインタクトな抗体であり、例えば、国際公開第２０１０／０２９４３５号に記載の各々クローン２（HPA Culture Collection番号08090903）、クローン１０（同番号08090902）およびクローン１９（同番号08090901）で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体等が挙げられる。本発明において、複数のＰＤ−１アゴニスト抗体を同時にあるいは併用して用いてもよい。

ＰＤ−１二重特異性タンパクとは、ＰＤ−１並びに免疫活性化受容体、その免疫活性化受容体複合体を構成する膜タンパクもしくは免疫活性化受容体を同じ免疫シナプスに位置する膜タンパクの両者を認識する非免疫グロブリンタンパクであり、その形態としては、例えば、アドネクチン（Ａｄｎｅｃｔｉｎ）（国際公開第２００１／６４９４２号）、アフィボディ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ）（商品名）（国際公開第９５／１９３７４号、国際公開第２０００／６３２４３号）、アンチカリン（Ａｎｔｉｃａｌｉｎ）（商品名）（国際公開第９９／１６８７３号）、アビマー（Ａｖｉｍｅｒ）（Nature Biotechnology (2005), Vol.23, pp.1556-1561）、ＤＡＲＰｉｎ（Nature Biotechnology (2004), Vol.22, pp.575-582）、ＬＲＲＰ（Nature (2004), Vol.430, No.6996, pp.174-180）、アフィチン（Ａｆｆｉｔｉｎ）（Journal of molecular biology (2008), Vol.383, No.5, pp.1058-1068）、フィノマー（Ｆｙｎｏｍｅｒ）（国際公開第２０１１／０２３６８５号）等が挙げられる。

本発明におけるＰＤ−１アゴニストが予防、症状進展抑制および／または治療可能な自己免疫疾患としては、例えば、ベーチェット病、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症（全身性強皮症、進行性全身性硬化症）、強皮症、多発性筋炎、皮膚筋炎、結節性動脈周囲炎（結節性多発動脈炎、顕微鏡的多発血管炎）、大動脈炎症候群（高安動脈炎）、悪性関節リウマチ、関節リウマチ、ウェゲナー肉芽腫症、混合性結合組織病、シェーグレン症候群、成人スティル病、アレルギー性肉芽腫性血管炎、過敏性血管炎、コーガン症候群、ＲＳ３ＰＥ、側頭動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、線維筋痛症、抗リン脂質抗体症候群、好酸球性筋膜炎、ＩｇＧ４関連疾患（例えば、原発性硬化性胆管炎、自己免疫性膵炎など）、ギラン・バレー症候群、重症筋無力症、慢性萎縮性胃炎、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、大動脈炎症候群、グッドパスチャー症候群、急速進行性糸球体腎炎、巨赤芽球性貧血、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、特発性血小板減少性紫斑病、バセドウ病（甲状腺機能亢進症）、橋本病、自己免疫性副腎機能不全、原発性甲状腺機能低下症、特発性アジソン病（慢性副腎皮質機能低下症）、Ｉ型糖尿病、慢性円板状エリテマトーデス、限局性強皮症、乾癬、乾癬性関節炎、天疱瘡、類天疱瘡、妊娠性疱疹、線状ＩｇＡ水疱性皮膚症、後天性表皮水疱症、円形脱毛症、尋常性白斑、原田病、自己免疫性視神経症、特発性無精子症、習慣性流産、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病）などが挙げられる。また、本発明の処方は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の予防または治療にも応用することができる。

本発明におけるＰＤ−１アゴニストによる予防、症状進展抑制および／または治療剤が有効な自己免疫疾患患者としては、例えば、その診断が確定した患者および急性増悪期の患者に加えて、発症が確認されていない自己免疫疾患の素因保有者、発症初期の患者もしくは症状軽度の患者または再発した患者が含まれる。

ここで、発症が確認されていない自己免疫疾患の素因保有者については、
（Ｉ）各疾患の発症前診断において、各種診断マーカーが陽性であって将来的に発症するリスクのある者、
（ＩＩ）各疾患の診断基準を満たさないが、いわゆる境界領域にある者、
（ＩＩＩ）一または二親等以内の血族に自己免疫疾患の家族歴のある者等が対象となる。

例えば、Ｉ型糖尿病の場合では、
（Ｉ）発症前診断において、例えば、抗ランゲルハンス氏島抗体（抗ＩＣＡ５１２抗体）、抗ＧＡＤ６５抗体および抗ＧＡＤ６７抗体等の抗グルタミン酸脱炭酸酵素抗体（抗ＧＡＤ抗体）、抗インスリン抗体ならびに抗ＩＡ−２抗体から選択される１種以上が陽性である者、
（ＩＩ）２０１０年７月１日に施行された日本糖尿病学会による糖尿病の臨床診断基準（２０１０年）により糖尿病型とも正常型とも判断されない、いわゆる境界型にある者、
（ＩＩＩ）一または二親等以内の血族にＩ型糖尿病を含む自己免疫疾患の家族歴を持つ者、さらには
（ＩＶ）ＨＬＡ型ＤＲ７を有する白人系、ＨＬＡ型ＤＲ４を有する黒人系もしくはＨＬＡ型ＤＲ９を有する日本人、あるいは
（Ｖ）幼児期ウイルス（例えば、コクサッキーＢウイルス、腸内ウイルス、アデノウイルス、風疹、サイトメガロウイルス、エプスタイン・バーウイルス）に感染歴のある者等が挙げられる。

一方、抗ランゲルハンス氏島抗体（抗ＩＣＡ５１２抗体）、抗ＧＡＤ６５抗体および抗ＧＡＤ６７抗体等の抗グルタミン酸脱炭酸酵素抗体（抗ＧＡＤ抗体）、抗インスリン抗体ならびに抗ＩＡ−２抗体から選択される１種以上が陽性である者、あるいは一または二親等以内の血族にＩ型糖尿病を含む自己免疫疾患の家族歴を持つ者には、既にＩＩ型糖尿病と診断されている患者も含まれる場合がある。

一方、自己免疫疾患の症状発症初期の患者あるいは症状軽度の患者としては、例えば、Ｉ型糖尿病の場合では、上記糖尿病臨床診断基準により初めて糖尿病と診断されたかあるいは既にインスリン投与等の治療を開始している患者であって、β細胞機能が健常人の１０％以上残存している者が挙げられる。なお、β細胞機能は、血中Ｃペプチド濃度を測定することによって評価することができ、血中Ｃペプチド濃度測定は公知の方法で実施できる。また、Ｉ型糖尿病発症初期の患者あるいは症状軽度の患者には、いわゆる、緩徐進行Ｉ型糖尿病（ＳＰＩＤＤＭ）もしくは成人性潜伏型自己免疫性糖尿病（ＬＡＤＡ）と分類される患者も含まれる。

一方、多発性硬化症の場合では、その素因保有者あるいは発症初期もしくは症状軽度の患者としては、例えば
（Ｉ）ＨＬＡ−ＤＲＢ１、ＩＬ７Ｒ−αまたはＩＬ２Ｒ−αをコードする遺伝子上に変異を有する者、
（ＩＩ）エプスタイン・バーウイルス等に感染歴のある者、
（ＩＩＩ）２００５年改定ＭｃＤｏｎａｌｄ基準において、多発性硬化症とは診断されないが、Ｍｉｌｌｅｒらが示す鑑別診断法（Mult Scler, 2008, Vol.14, p.1157-1174）において定義される多発性硬化症に移行する可能性がある状態である「Clinically isolated syndrome」あるいは「最初の臨床症状からなる症候群」の患者、もしくは２回以上の臨床症状および２個以上の臨床的他覚的病巣が確認されていない脱髄性疾患患者、
（ＩＶ）視神経脊髄炎患者、抗アクアポリン抗体陽性患者もしくはＭＲＩにおいて３椎体以上に及ぶ長大な脊髄病巣が観察される患者（NMO spectrum disorder）、
（Ｖ）厚生労働省免疫性神経疾患調査研究班による多発性硬化症診断基準（２００３年）において、最初の臨床症状は認められるが、再発が確認できない者等が挙げられる。

ここで、最初あるいは再発される臨床症状としては、例えば、視神経炎の臨床症状、視覚のぶれ、複視、不随意性の早い目の動き、失明、平衡の欠如、振戦、運動失調、めまい、肢のおぼつかなさ、協調の欠如、１以上の四肢の虚弱、筋緊張の変化、筋硬直、攣縮、刺痛、感覚異常、焼けつくような感じ、筋肉の痛み、顔の痛み、三叉神経痛、刺すような鋭い痛み、焼けつくような三叉神経の痛み、発語の遅延、言語不明瞭、発語のリズムの変化、嚥下障害、疲労、膀胱の問題（切迫、頻尿、不完全な排尿および失禁が含まれる）、腸の問題（便秘、腸のコントロールの損失が含まれる）、インポテンス、性的欲求の低下、感覚の欠如、熱に対する敏感さ、短期記憶の損失、集中力の損失、または判断もしくは推論の損失等が挙げられる。

また、臨床的他覚的病巣としては、例えば、大脳、小脳、脳幹、脊髄、視神経および末梢神経である。

本発明において、「最初の投与」とは、本発明にかかる薬剤を過去に全く処方されていない場合における最初の投与を意味するが、さらに本発明にかかる薬剤を過去に１回以上処方されることによって、少なくとも１回以上の予防、症状進展抑制あるいは治療効果が一定期間認められたが、その後、本発明にかかる薬剤の再投与が必要になった場合における再投与のうちの最初の投与をも含む。仮に、最初の投与から１カ月以内の期間における投与が単回投与である場合には、その投与が最初の投与を意味する。

本発明において、「最後の投与」とは、直近の最初の投与から１カ月以内の期間に複数回投与されたうちの最後の投与を意味し、単回投与の場合にはその投与が最後の投与を意味する。

本発明において、「投与の必要のない」状態とは、ＰＤ−１アゴニストを本発明の用法および用量で投与後、さらに追加投与あるいは他の薬剤を投与もしくは増量しなくても、自己免疫疾患の臨床症状が認められないか、症状が進展しないかあるいは疾患が治癒されていることを意味する。

例えば、Ｉ型糖尿病においては、発症が確認されていないＩ型糖尿病の素因保有者の場合、上記日本糖尿病学会による糖尿病の臨床診断基準（２０１０年）により糖尿病型と診断されない状態にあることを意味する。一方、Ｉ型糖尿病発症初期もしくは症状軽度の患者の場合には、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量がＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持されているか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度がＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上である状態、さらには
（ｖ）Ｉ型糖尿病が治癒されていると診断される状態を意味する。

一方、本発明にかかる薬剤の再投与の必要のある状態とは、例えば、Ｉ型糖尿病の場合、本発明にかかる薬剤の最後の投与後一定期間（３ヶ月以上）の後に、上記糖尿病の臨床診断基準（２０１０年）により糖尿病型と診断される状態になると推測される状態を意味し、Ｉ型糖尿病発症初期もしくは症状軽度の患者の場合には、該状態は、ＰＤ−１アゴニストの投与後一定期間の後に、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量がＰＤ−１アゴニストの最初の投与前における量から増加せざるを得ないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下が維持できないか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％以上であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度が最初の投与前の９０％未満である状態になることを意味する。

また、多発性硬化症の場合、その素因保有者に対して、本発明におけるＰＤ−１アゴニストの再投与が必要になる状態とは、例えば、（Ｉ）２００５年改定ＭｃＤｏｎａｌｄ基準において、多発性硬化症とは診断されないが、多発性硬化症に移行する可能性がある状態である「Clinically isolated syndrome」あるいは「最初の臨床症状からなる症候群」と診断された患者、もしくは（ＩＩ）厚生労働省免疫性神経疾患調査研究班による多発性硬化症診断基準（２００３年）において、最初の臨床症状が認められた場合が挙げられる。

また、改定ＭｃＤｏｎａｌｄ基準あるいは厚生労働省免疫性神経疾患調査研究班による多発性硬化症診断基準（２００３年）において、多発性硬化症と診断された患者、多発性硬化症と診断されていない脱髄性疾患患者、Clinically isolated syndromeと診断された患者もしくは視神経脊髄炎あるいはNMO spectrum disorderと診断された患者であって、本発明におけるＰＤ−１アゴニストの投与によって臨床症状の再発あるいは進行が抑制されていたが、再発の兆候が認められる場合も挙げられる。ここで、臨床症状の２回目の発症あるいは再発の兆候は、例えば、頭部ＭＲＩ画像もしくは脊髄ＭＲＩ画像、ＩｇＧインデックスおよびオリゴクローナルバンド等の髄液所見、視覚誘発電位測定、体性感覚誘発電位測定、聴性脳幹反応測定および磁気誘発電位測定等、脱髄による伝導速度の遅延を誘発脳波でとらえる方法で検査できる。

なお、本発明において「治療」とは自己免疫疾患もしくはその症状を治癒させることまたは改善させることを意味し、「治療効果の持続」とは、ＰＤ−１アゴニストの投与により、最初の投与前よりもその症状が増悪しないか改善されている状態が続いていることを意味し、「予防」とは自己免疫疾患もしくは症状の発現を未然防止するあるいは一定期間遅延させることを意味し、「症状進展抑制」とは自己免疫疾患の症状の進展または悪化を抑制して病態の進行を止めることを意味する。なお、「予防」の意味には再発予防も含まれる。

本発明において、「投与の必要のない」期間、言いかえれば、本発明にかかる薬剤の最後の投与から再投与を必要とするまでの期間は、少なくとも３カ月以上である。例えば、４カ月以上、５カ月以上、６カ月以上、７カ月以上、８カ月以上、９カ月以上、１２カ月以上、１５カ月以上、１８カ月以上、２１カ月以上、２４カ月以上または３６カ月以上である。当該期間は、本発明にかかる薬剤の投与を行わないことができる。但し、ＰＤ−１アゴニストの最後の投与から、その効果が平坦域（プラトー域）に達するまでの期間（具体的には、例えば、１〜２カ月間）もＰＤ−１アゴニスト投与の必要のない期間に含まれるものとする。

本発明におけるＰＤ−１アゴニストの投与回数は、最初および最後の投与を含め１〜１０回であるが、患者の年齢、体重、自己免疫疾患のうちの各疾患もしくはその症状、投与量、投与方法、投与期間あるいは患者への負担を考慮して適宜決定することができ、例えば、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回または１０回のうちで選択できる。通常、１日における投与回数は１回である。

本発明におけるＰＤ−１アゴニストの投与期間は、最初の投与から１カ月以内の期間であるが、自己免疫疾患のうちの各疾患もしくはその症状、患者への負担、投与量あるいは投与回数を考慮して適宜決定することができ、例えば、複数回投与が必要な場合には、「１カ月以内の期間」は、最初の投与から２４時間、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１１日間、１３日間、１５日間、１７日間、１９日間または１カ月間から選択できる。ここで、最後の投与日は投与期間の最終日である。

最初の投与から１カ月以内の期間における複数回の投与間隔は同じであっても各々異なっていてもよい。

本発明におけるＰＤ−１アゴニストの「合計投与量」とは、「最初の投与から１カ月以内の期間」における１〜１０回投与（すなわち、最初の投与から最後の投与までの全投与）の総量であるが、患者の年齢、各疾患もしくはその症状、投与方法あるいは投与時間に応じて、２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇの範囲から適宜決定することができる。例えば、３０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇの範囲から選択される量、具体的には、（ｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、３８４μｇ／ｋｇ、４８０μｇ／ｋｇもしくは６００μｇ／ｋｇ以上、かつ、９６０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、３８４μｇ／ｋｇもしくは４８０μｇ／ｋｇ以上、かつ、６００μｇ／ｋｇ以下である量、（ｉｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇもしくは３８４μｇ／ｋｇ以上、かつ、４８０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｉｖ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇもしくは３００μｇ／ｋｇ以上、かつ、３８４μｇ／ｋｇ以下である量、（ｖ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇもしくは２８８μｇ／ｋｇ以上、かつ、３００μｇ／ｋｇ以下である量、（ｖｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇもしくは２４０μｇ／ｋｇ以上、かつ、２８８μｇ／ｋｇ以下である量、（ｖｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇもしくは１９２μｇ／ｋｇ以上、かつ、２４０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｖｉｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇもしくは１８０μｇ／ｋｇ以上、かつ、１９２μｇ／ｋｇ以下である量、（ｉｘ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇもしくは１６０μｇ／ｋｇ以上、かつ、１８０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｘ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇもしくは１２０μｇ／ｋｇ以上、かつ、１６０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｘｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇもしくは１００μｇ／ｋｇ以上、かつ、１２０μｇ／ｋｇ以下である量、（ｘｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇもしくは９６μｇ／ｋｇ以上、かつ、１００μｇ／ｋｇ以下である量、（ｘｉｉｉ）３０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇもしくは６０μｇ／ｋｇ以上、かつ、９６μｇ／ｋｇ以下である量、（ｘｉｖ）３０μｇ／ｋｇもしくは４８μｇ／ｋｇ以上、かつ、６０μｇ／ｋｇ以下である量、または（ｘｖ）３０μｇ／ｋｇ〜４８μｇ／ｋｇである量から適宜選択することができる。さらに具体的には、例えば、４８μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜３８４μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜２８８μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜１９２μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜１６０μｇ／ｋｇ、４８μｇ／ｋｇ〜９６μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜３８４μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜２８８μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜１９２μｇ／ｋｇ、９６μｇ／ｋｇ〜１６０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ〜３８４μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ〜２８８μｇ／ｋｇ、１６０μｇ／ｋｇ〜１９２μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ〜３８４μｇ／ｋｇ、１９２μｇ／ｋｇ〜２８８μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇ、２８８μｇ／ｋｇ〜３８４μｇ／ｋｇ、３８４μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇ、３８４μｇ／ｋｇ〜４８０μｇ／ｋｇもしくは４８０μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇまたは３０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜２４０μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜１８０μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜１２０μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜１００μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ〜６０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜２４０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜１８０μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ〜１２０μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ〜２００μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ〜２４０μｇ／ｋｇ、１２０μｇ／ｋｇ〜１８０μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇ、１８０μｇ／ｋｇ〜２４０μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇ、２４０μｇ／ｋｇ〜３００μｇ／ｋｇもしくは３００μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇの範囲における任意の投与量を選択することができ、１〜１０回投与における各々の投与量は同じであっても各々異なっていてもよい。

本発明において、ＰＤ−１アゴニストとして好ましくは、ＰＤ−１二重特異性抗体であり、より好ましくはＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体であり、さらに好ましくはＰＤ−１およびＣＤ３εを同時に認識する二重特異性抗体（以下、ＰＤ−１−ＣＤ３ε二重特異性抗体と記載することがある。）であり、より好ましくはＰＤ−１およびＣＤ３εを同時に認識する二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２（以下、ＰＤ−１−ＣＤ３ε二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２と記載することがある。）である。

ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体の製造に使用されるＰＤ−１抗体として好ましくは、ヒト化またはヒト型ＰＤ−１抗体であり、より好ましくはヒト型ＰＤ−１抗体である。ヒト化ＰＤ−１抗体の作製に使用されるＰＤ−１非ヒト抗体として好ましくは、Ｊ１１０（国際受託番号:FERM BP-8392）で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体およびImmunology Letters, 2002, Vol.83, Issue 3, p.215-220に記載の各々Ｊ１０５、Ｊ１０８およびＪ１１６で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体であり、より好ましくはＪ１１０（国際受託番号:FERM BP-8392）で特定される抗ヒトＰＤ−１抗体である。ここで、Ｊ１１０のＶ_ＨおよびＶ_Ｌのアミノ酸配列は、各々配列番号１および配列番号２で表わされる。

一方、ヒト型ＰＤ−１抗体として好ましくは、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載の１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、４Ａ１１、７Ｄ３もしくは５Ｆ４で特定されるヒト型ＰＤ−１抗体であり、より好ましくは、５Ｃ４で特定されるヒト型ＰＤ−１抗体である。ここで、５Ｃ４のＶ_ＨおよびＶ_Ｌのアミノ酸配列は、各々配列番号３および配列番号４で表わされ、Ｖ_ＨのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は各々配列番号５、配列番号６および配列番号７で表わされ、Ｖ_ＬのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は各々配列番号８、配列番号９および配列番号１０で表わされる。

一方、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体の製造に使用されるＣＤ３抗体として好ましくは、ヒト化またはヒト型ＣＤ３抗体である。ヒト化ＣＤ３抗体として好ましくは、ＯＫＴ３のヒト化抗体であり、より好ましくはＯＫＴ３γ１（ａｌａ−ａｌａ）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３またはＨＵＭ２９１である。ここで、ＯＫＴ３のＶ_ＨおよびＶ_Ｌのアミノ酸配列は、各々配列番号１１および配列番号１２で表わされ、そのＶ_ＨのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は各々配列番号１３、配列番号１４および配列番号１５で表わされ、Ｖ_ＬのＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は各々配列番号１６、配列番号１７および配列番号１８で表わされる。

本発明にかかる薬剤が予防、症状進展抑制および／または治療により効果的な自己免疫疾患としては、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬、関節リウマチ、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎、クローン病）、甲状腺機能亢進症、自己免疫性副腎機能不全、自己免疫性溶血性貧血、乾癬性関節炎、シェーグレン症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎または強皮症であり、さらに効果的であるのはＩ型糖尿病、多発性硬化症または炎症性腸疾患である。

本発明にかかる薬剤の投与回数として好ましくは１〜６回であり、より好ましくは４〜６回であり、さらに好ましくは５回である。一方、前記の至適な複数投与回数における投与期間として好ましくは、最初の投与から２４時間〜１１日間であり、より好ましくは最初の投与から３日間、４日間、５日間、７日間、９日間または１１日間であり、さらに好ましくは最初の投与から４日間または９日間である。

本発明にかかる薬剤におけるＰＤ−１アゴニストの投与量として好ましくは、３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、より好ましくは３００μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇであり、さらに好ましくは４８０μｇ／ｋｇ〜６００μｇ／ｋｇである。

本発明においてＰＤ−１アゴニストは、注射剤または点滴のための輸液として製剤化されて用いられる。注射剤または輸液は、水溶液、懸濁液または乳濁液のいずれの形態であってもよく、また用時に溶剤を加えることにより、溶解、懸濁または乳濁して使用されるように固形剤として製剤化されていてもよい。注射剤または点滴のための輸液に使用される溶剤として、例えば、注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖溶液および等張液（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、ホウ酸、ホウ砂、プロピレングリコール等の溶液）等を用いることができる。

ここで、薬学的に許容できる担体としては、例えば、安定剤、溶解補助剤、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤、防腐剤、ｐＨ調整剤および抗酸化剤等が挙げられる。安定剤としては、例えば、各種アミノ酸、アルブミン、グロブリン、ゼラチン、マンニトール、グルコース、デキストラン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、アスコルビン酸、亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ジブチルヒドロキシトルエン等を用いることができる。溶解補助剤としては、例えば、アルコール（例えば、エタノール等）、ポリアルコール（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０（商品名）、ＨＣＯ−５０等）等を用いることができる。懸濁化剤としては、例えば、モノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ラウリル硫酸ナトリウム等を用いることができる。乳化剤としては、例えば、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、トラガント等を用いることができる。無痛化剤としては、例えば、ベンジルアルコール、クロロブタノール、ソルビトール等を用いることができる。緩衝剤としては、例えば、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス緩衝液、グルタミン酸緩衝液、イプシロンアミノカプロン酸緩衝液等を用いることができる。保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ホウ酸、ホウ砂等を用いることができる。防腐剤としては、例えば、塩化ベンザルコニウム、パラオキシ安息香酸、クロロブタノール等を用いることができる。ｐＨ調整剤としては、例えば、塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸等を用いることができる。抗酸化剤として、例えば、（１）アスコルビン酸、システインハイドロクロライド、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム等のような水溶性抗酸化剤、（２）アスコルビルパルミテート、ブチル化ハイドロキシアニソール、ブチル化ハイドロキシトルエン、レシチン、プロピルガレート、α−トコフェロール等のような油溶性抗酸化剤および（３）クエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、リン酸等のような金属キレート剤等を用いることができる。

注射剤または点滴のための輸液は、その最終工程において滅菌するかあるいは無菌操作法、例えば、フィルター等で濾過して滅菌し、次いで無菌的な容器に充填することによって製造することができる。また、注射剤または点滴のための輸液は、真空乾燥および凍結乾燥による無菌粉末（薬学的に許容できる担体の粉末を含んでいてもよい。）を、適切な溶剤に用時溶解して使用することもできる。

さらに、本発明にかかる薬剤において、その有効成分としてのＰＤ−１アゴニストは、自己免疫疾患の予防および／または治療に使用される他の薬剤とともに組み合わせて使用してもよい。ＰＤ−１アゴニストとの併用により、その他の薬剤の予防および／または治療効果を補完したり、投与量あるいは投与回数を維持ないし低減することができる。本発明においてＰＤ−１アゴニストと他の薬剤を別々に投与する場合には、一定期間同時投与し、その後、他の薬剤のみを投与してもよい。また、本発明にかかる薬剤におけるＰＤ−１アゴニストを先に投与し、その投与終了後に他の薬剤を投与してもよいし、他の薬剤を先に投与し、本発明にかかる薬剤におけるＰＤ−１アゴニストを後に投与してもよく、それぞれの投与方法は同じでも異なっていてもよい。本発明においては、ＰＤ−１アゴニストを含む製剤と他の薬剤を含む製剤のキットとして提供することもできる。ここで、他の薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、他の薬剤は任意の２種以上を適宜の割合で組み合わせて投与してもよい。また、前記他の薬剤には、現在までに見出されているものだけでなく今後見出されるものも含まれる。

例えば、本発明にかかる薬剤をＩ型糖尿病の予防、症状進展抑制および／または治療に適用する場合、その有効成分としてのＰＤ−１アゴニストをインスリン製剤（例えば、ヒトインスリン、インスリングラルギン、インスリンリスプロ、インスリンデテミル、インスリンアスパルト等）、スルホニルウレア剤（例えば、グリベンクラミド、グリクラジド、グリメピリド等）、速攻型インスリン分泌促進薬（例えば、ナテグリニド等）、ビグアナイド製剤（例えば、メトホルミン等）、インスリン抵抗性改善薬（例えば、ピオグリタゾン等）、α−グルコシダーゼ阻害薬（例えば、アカルボース、ボグリボース等）、糖尿病性神経症治療薬（例えば、エパルレスタット、メキシレチン、イミダプリル等）、ＧＬＰ−１アナログ製剤（例えば、リラグルチド、エクセナチド、リキシセナチド等）、ＤＰＰ−４阻害剤（例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチン等）等と組み合わせて使用してもよい。

また、例えば、本発明にかかる薬剤を多発性硬化症の予防および／または治療に適用する場合、その有効成分としてのＰＤ−１アゴニストをステロイド薬（例えば、酢酸コルチゾン、ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、酢酸フルドロコルチゾン、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、コハク酸プレドニゾロンナトリウム、ブチル酢酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、酢酸ハロプレドン、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、トリアムシノロン、酢酸トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、デキサメタゾン、酢酸デキサメタゾン、リン酸デキサメタゾンナトリウム、パルミチン酸デキサメタゾン、酢酸パラメタゾン、ベタメタゾン等）、インターフェロンβ−１ａ、インターフェロンβ−１ｂ、酢酸グラチラマー、ミトキサントロン、アザチオプリン、シクロホスファミド、シクロスポリン、メトトレキサート、クラドリビン、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、コルチコトロピン、ミゾリビン、タクロリムス、フィンゴリモドおよびアレムツズマブ等と組み合わせて使用してもよい。

また、例えば、本発明にかかる薬剤を全身エリテマトーデスの予防および／または治療に適用する場合、その有効成分としてのＰＤ−１アゴニストをステロイド薬（例えば、上記記載のステロイド薬）あるいは免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、フィンゴリモド等）と組み合わせて使用してもよい。

例えば、本発明にかかる薬剤を関節リウマチの予防および／または治療に適用する場合、その有効成分としてのＰＤ−１アゴニストをステロイド薬（例えば、上記記載のステロイド薬）、抗リウマチ薬（例えば、メトトレキサート、スルファサラジン、ブシラミン、レフルノミド、ミゾリビン、タクロリムス等）あるいは抗サイトカイン薬（例えば、インフリキシマブ、アダリムマブ、トシリズマブ、エタネルセプト、アバタセプト）等と組み合わせて使用してもよい。

本発明を以下の実施例によってさらに詳しく説明するが、本発明の範囲はこれに限定されない。本発明の記載に基づき種々の変更、修飾が当業者には可能であり、これらの変更、修飾も本発明に含まれる。

実施例１：自然発症Ｉ型糖尿病動物モデル（ＮＯＤマウス）におけるＰＤ−１アゴニストの血糖降下作用の評価
ＮＯＤマウスを１６週齢より週に１回、尾静脈より１〜５μＬ採血し、採取した血液中のグルコース濃度をＡＣＣＵ−ＣＨＥＣＫａｃｔｉｖｅ（ロシュダイアグノスティックス株式会社）を用いて測定した。血中グルコース濃度２００ｍｇ／ｄＬ以上を連続２回計測された個体を糖尿病発症個体と判断して、各群に割り付けた。

割り付け当日から、ＰＤ−１アゴニスト０．３、１または６μｇ／日（対照群はリン酸緩衝液）を腹腔内又は静脈内に５日間連日投与した。その後、週１回上記と同様に採血し、血液中のグルコース濃度を測定した。なお、ＰＤ−１アゴニストは、国際公開第２００３／０１１９１１号に記載された実施例１〜９に基づいて作製されたものを用いた。

投与量０．３、１および６μｇ／日（合計投与量：１．５、５および３０μｇ）の何れの場合においても、対照群（図１）と比較して、最初の投与から２３週以上にわたる血糖降下作用ないし正常血糖維持作用が確認された（図２〜４および図６）。投与量６μｇ／日の場合では、最初の投与から２７週まで観察したところ、血糖降下作用ないし正常血糖維持作用が維持されており（図４）、１２〜２７週にかけての作用の固体差は少なかった。ＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与したときの作用は、ＰＤ−１アゴニストを６μｇ／日の用量での週３回投与を８週間継続した場合と同等であった（図５）。

さらに、ＰＤ−１アゴニストを３μｇ／日の用量で各々１回投与ならびに２回、３回、４および５回連日投与した場合でも、対照群（図７）と比較して、図２〜４に示される作用と同等の血糖降下作用ないし正常血糖維持作用が確認された（図８〜１２）。投与から最長５２週まで観察したところ、投与量３μｇ／日を１回投与した群において、血糖降下作用ないし正常血糖維持作用が確認された。

実施例２：多発性硬化症動物モデル（実験的自己免疫性脳脊髄炎：ＥＡＥ）におけるＰＤ−１アゴニストの治療効果の評価（１）
４ｍｇ／ｍＬのミエリン・オリゴデンドロサイト・糖タンパク質（ＭＯＧ）のリン酸緩衝溶液と等量の完全アジュバンドＨ３７Ｒａ（日本ベクトン・ディッキンソン株式会社）を混合してエマルジョンを調製し、これを惹起剤とした。調製した惹起剤１００μＬをマウスの尾根部に皮下投与した。惹起剤による最初の免疫処置日及びその２日目に１μｇ／ｍＬのＰ百日咳毒素（ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ）のリン酸緩衝溶液を２００μＬ尾静脈内投与した。

惹起剤による最初の免疫処置日から、各々３μｇ／日および６μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを５回連日投与した（図１３及び１４）。また、惹起剤による最初の免疫処置日を０日として、その６あるいは７日目から、各々１μｇ／日、３μｇ／日および６μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを５回連日投与した（図１４〜１６）。一方、惹起剤による免疫処置後、全ての個体がＥＡＥを発症した１３日目から０．３μｇ／日のＰＤ−１アゴニストを５回連日投与した（図１７）。

なお、免疫処置日以降の神経症状の評価は大貫らの方法（Microscopy research and technique, 2001, Vol.252, P.731-739）に準じて行った。即ち、麻痺の程度をスコア化し（正常：０、尾弛緩：１、後肢部分麻痺：２、後肢麻痺：３、前肢麻痺：４、瀕死または死亡：５）、複数の症状が認められる場合は高い値を評価日の神経症状スコアとして採用した。死亡例は観察終了まで神経症状スコアを５とし、瀕死となった動物は炭酸ガスにて安楽死させた。

惹起剤による最初の免疫処置日からＰＤ−１アゴニストを投与した場合、いずれの投与量においても完全なＥＡＥ発症抑制が観察され、６μｇ／日投与では免疫３０日まで観察しても抑制効果が維持された。また、最初の免疫処置日から６あるいは７日目からＰＤ−１アゴニストを投与した場合には、その対照群（リン酸緩衝液投与群）が１０日目付近で発症してＥＡＥ症状を悪化させたのとは対照的に、ＰＤ−１アゴニスト投与群は２０〜２２日目まで発症を抑制した。同様に、最初の免疫処置日から１３日目からＰＤ−１アゴニストを投与した場合でも、ＥＡＥ症状の悪化は顕著に抑制された。なお、最初の免疫処置日から１３日目より、ＰＤ−１アゴニストを投与した場合における治療的効果は、一日当たり同用量のＰＤ−１アゴニストを４３日目まで継続して週３回投与を実施した場合と同等のものであった。

以上から、ＰＤ−１アゴニストの少数回投与によってもＥＡＥの発症に対して予防ならびに治療的効果を示すことが確認された。

実施例３：多発性硬化症動物モデルにおけるＰＤ−１アゴニストの治療効果の評価（２）
実施例２と同様の操作によって作製された多発性硬化症動物モデルに対するＰＤ−１アゴニストの効果を以下に示した方法で評価した。なお、神経症状の評価も実施例２で示した方法で実施した。

惹起剤による最初の免疫処置日を０日目としたとき、０日目と２２日目に惹起剤で２回免疫処置して、その間の７日目から連日５日間に０．２２ｍｇ／ｋｇ／日のＰＤ−１アゴニストを投与した群をＡ群（図１８中、○印で表わされる群）とした。上記０日目には惹起剤による免疫を行わず、Ａ群と同様にＰＤ−１アゴニストを投与した後、２２日目に惹起剤により免疫した群をＢ群（図１９中、○印で表わされる群）とした。上記０日目は惹起剤による免疫処置を行い、７日目から連日５日間、リン酸緩衝液を投与した群をＣ群（図１８中、□印で表わされる群）とした。上記０日目に惹起剤による免疫処置を行わず、２２日目に惹起剤により免疫し、７日目から連日５日間にリン酸緩衝液を投与した群をＤ群（図１８中では△印、図１９中では□印で表わされる群）とした。なお、ＰＤ−１アゴニストは実施例１に記載された文献に基づいて作製されたものを用いた。

図１８に示されるように、０日目の免疫処置により１１日目付近からＥＡＥ症状を発症するＣ群に比較して、ＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与したＡ群は、１１日目付近からの発症が完全に抑制された。また、２２日目の免疫処置により３０日目付近から発症するＤ群に比較して、Ａ群は２回目の免疫処置に対して神経症状が有意に改善した。従って、０日目の免疫処置に対して発症抑制を示したＰＤ−１アゴニストは、１０日間以上後の同じ免疫処置に対しても、免疫抑制効果を有する。一方、図１９に示されるように、免疫惹起前にＰＤ−１アゴニストを投与したＢ群では、１０日間以上後の免疫処置に対して、Ｄ群と同様に神経症状の改善は示さなかった。

以上の結果から、ＰＤ−１アゴニストは、抗原惹起による免疫反応に対して抗原特異的な抑制効果とその持続を示すが、抗原非特異的な免疫抑制効果は示さないことが示唆された。

実施例４：大腸炎動物モデルにおけるＰＤ−１アゴニストの治療効果の評価
ＣＤ４＋ＴｃｅｌｌアイソレーションキットＩＩ（マウス）（Miltenyi Biotec）、ＣＤ２５マイクロビーズキット（Miltenyi Biotec）、ＰＥ標識抗マウスＣＤ４５ＲＢ抗体（BD Biosciences）および抗ＰＥマイクロビーズ（Miltenyi Biotec）を用いて、ａｕｔｏＭＡＣＳ（Miltenyi Biotec）による細胞分離を行い、ＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓細胞からＣＤ４＋ＣＤ２５−ＣＤ４５ＲＢ^ｈｉｇｈＴ細胞を精製した。ＣＤ４＋ＣＤ２５−ＣＤ４５ＲＢ^ｈｉｇｈＴ細胞細胞をＳＣＩＤマウスに養子移入（４×１０^５細胞／匹腹腔投与）して大腸炎を惹起した。ＰＤ−１アゴニストは養子細胞移入後４〜５週間目に大腸炎の発症が確認された個体に腹腔内投与した。

大腸炎の評価はCooperらの方法（Laboratory Investigation, 1993, vol.69, No.2, p.238-249)に従って行った。すなわち、体重スコア（減少率０〜１％；０点，１〜５％；１点，５〜１０％；２点，１０〜２０％；３点，＞２０％；４点）、下痢スコア（正常：０点，軟便：２点，下痢：４点）および血便スコア（正常：０点，潜血：２点，目に見える出血：４点）の合計を大腸炎症状スコアとした。

図２１に示されるように、３μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与した群は、６μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを週に２〜３回（２週間）投与した群（図２０）と同等の治療効果を示した。また、その効果は１μｇ／匹のＰＤ−１アゴニストを５日間連日投与した群でも維持された。

本発明の自己免疫疾患の予防または治療剤は、感染症の懸念を低減しつつ治療効果の持続を達成することができるため、該患者並びに医療関係者の投薬管理負担を軽減できる点で有用である。

Claims

ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から３カ月以上投与の必要のないことを特徴とする自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１アゴニストを有効成分とする薬剤であって、
（ａ）最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から３カ月以上投与を行わないことを特徴とする自己免疫疾患の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病、全身性エリテマトーデス、乾癬、関節リウマチ、炎症性腸疾患、甲状腺機能亢進症、自己免疫性副腎機能不全、自己免疫性溶血性貧血、多発性硬化症、乾癬性関節炎、シェーグレン症候群、多発性筋炎、皮膚筋炎または強皮症である請求項１または２記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症または炎症性腸疾患である請求項１または２記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
自己免疫疾患が、Ｉ型糖尿病である請求項１または２記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
Ｉ型糖尿病の患者が、発症初期の患者もしくは症状軽度の患者である請求項５記載の症状進展抑制および／または治療剤。
Ｉ型糖尿病の発症初期の患者あるいは症状軽度の患者が、インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存している患者である請求項６記載の症状進展抑制および／または治療剤。
最後の投与から３カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上を維持できる請求項６または７記載の症状進展抑制剤および／または治療剤。
最後の投与から１２カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度が該ＰＤ−１アゴニストの最初の投与前の９０％以上を維持できる請求項６または７記載の症状進展抑制および／または治療剤。
最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与される請求項１〜９のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇである請求項１〜１０のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１アゴニストが、ＰＤ−１二重特異性抗体、ＰＤ−１アゴニスト抗体またはＰＤ−１二重特異性タンパクである請求項１〜１１のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１二重特異性抗体が、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体である請求項１２記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性抗体が、ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２である請求項１３記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１二重特異性抗体を構成するＰＤ−１抗体の抗原結合部位が、国際公開第２００６／１２１１６８号に記載のハイブリドーマ１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、４Ａ１１、７Ｄ３もしくは５Ｆ４クローン由来のモノクローナル抗体の抗原結合部位である請求項１３または１４記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１二重特異性抗体を構成するＣＤ３抗体の抗原結合部位が、ＯＫＴ３、ＯＫＴ３γ１（ａｌａ−ａｌａ）、ＣｈＡｇｌｙＣＤ３またはＨＵＭ２９１の抗原結合部位である請求項１３〜１５のいずれかに記載の予防、症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２を有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上、
（ｉ）インスリンの平均１日投与量が該ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の最初の投与前から増加しないか、
（ｉｉ）インスリンの平均投与量が０．２５ＩＵ／ｋｇ／日以下に維持できるか、
（ｉｉｉ）ＨｂＡ_１ｃが７．５％未満であるか、あるいは
（ｉｖ）血中Ｃペプチド濃度が該ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の最初の投与前の９０％以上を維持できることを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２を有効成分とする薬剤であって、
（ａ）インスリン分泌能あるいはβ細胞機能が健常人の１０％以上残存しているＩ型糖尿病患者に対して、最初の投与から３〜１１日間に４〜６回投与され、
（ｂ）該ＰＤ−１−ＣＤ３二重特異性ｓｃ（Ｆｖ）_２の合計投与量が３００μｇ／ｋｇ〜９６０μｇ／ｋｇであり、
（ｃ）最後の投与から１２カ月以上投与を行わないことを特徴とするＩ型糖尿病の症状進展抑制および／または治療剤。
自己免疫疾患患者に対して最初の投与から１カ月以内の期間に１〜１０回投与され、その合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、最後の投与から３カ月以上、該自己免疫疾患の症状進展を抑制すること、および／または治療効果を持続させることにおける使用のためのＰＤ−１アゴニスト。
自己免疫疾患の症状進展を抑制および／または治療効果を持続させる方法であって、
ＰＤ−１アゴニストを自己免疫疾患患者に対して、１〜１０回、最初の投与から１カ月以内の期間に投与することを含み、
該ＰＤ−１アゴニストの合計投与量が２０μｇ／ｋｇ〜１２５０μｇ／ｋｇであり、
該ＰＤ−１アゴニストの最後の投与から３カ月以上、該自己免疫疾患の症状進展を抑制および／または治療効果が持続する方法。