JP2016538307A - チエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む医薬製剤を使用する非小細胞肺癌の治療方法 - Google Patents

Abstract

式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物若しくはその医薬上許容される塩又はその水和物若しくはその溶媒和物である医薬上許容される量の化合物を患者に投与することにより哺乳動物における非小細胞肺癌の治療方法：［式中、Ｒ１は、１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ２は、水素原子；ハロゲン原子；又はハロゲン原子又はヒドロキシル基で置換されていてもよい１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ３は、ハロゲン原子；ハロゲン原子、１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ又はシアノで置換されていてもよいフェニル；−ＮＲ５−（ＣＨ２）ｍ−Ｒ６（式中、Ｒ５は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ６は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）；又は−ＮＲ７−ＣＯ−（ＣＨ２）ｎ−Ｒ８（式中、Ｒ７は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｎは、０〜２の整数であり、Ｒ８は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）であり、Ｒ４は、−（ＣＨ２）ａ−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ９（式中、ａは、１〜４の整数であり、Ｒ９は、１〜４の炭素数を有するアルキル；１〜４の炭素数を有するヒドロキシアルキル；１〜４の炭素数を有するアルコキシ；又は１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ、アミノ又はヒドロキシル基で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）又は−（ＣＨ２）ｂ−ＣＯＯＲ１０（式中、ｂは、１〜４の整数であり、Ｒ１０は、１〜４の炭素数を有するアルキルである。）である。］。【選択図】 図１

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１３年１１月２７日に出願された米国仮出願シリアル番号６１／９０９，５９９、２０１４年６月１３日に出願された米国仮出願シリアル番号６２／０１２，０４２、及び２０１４年１１月１７日に出願された米国仮出願シリアル番号６２／０８０，７７９の利益を主張し、それぞれその全体が組み込まれる。

（発明の分野）
本開示は、固体分散体の形態で提供され得る、向上した溶解度及び生物学的利用能を有するチエノトリアゾロジアゼピン化合物を用いる非小細胞肺癌の治療方法を記載する。

本明細書の下記に記載される式（１）の化合物は、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３及びＢＲＤ４を含むＢＥＴ（ｂｒｏｍｏｄｏｍａｉｎｓ ａｎｄ ｅｘｔｒａｔｅｒｍｉｎａｌ）タンパク質として知られるタンデムブロモドメイン（ＢＲＤ）を含有する転写制御因子ファミリーに対するアセチル化ヒストンＨ４の結合を阻害することが示された。米国特許出願公開２０１０／０２８６１２７ Ａ１号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照。ＢＥＴタンパク質は、増殖及び分化のエピジェネティックな主要な制御因子として出現し、また、脂質異常症又は脂肪生成の不適切な調節、高い炎症性プロファイル及び心血管疾患及び２型糖尿病のリスク、及び関節リウマチ及び全身性エリテマトーデスのような自己免疫疾患に対する感受性の増大の傾向に関連している。これは、Ｄｅｎｉｓ， Ｇ．Ｖ．により「癌、肥満症、２型糖尿病及び炎症におけるブロモドメイン共活性化因子」Ｄｉｓｃｏｖ Ｍｅｄ ２０１０；１０：４８９-４９９（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）で報告されている。従って、式（ＩＩ）の化合物は、様々な癌、心血管疾患、２型糖尿病及び自己免疫障害（例えば、関節リウマチ及び全身性エリテマトーデス）の治療に有用であり得る。

本明細書の下記に記載される式（１）の化合物は、ＢＲＤ２、ＢＲＤ３及びＢＲＤ４を含むＢＥＴ（ｂｒｏｍｏｄｏｍａｉｎｓ ａｎｄ ｅｘｔｒａｔｅｒｍｉｎａｌ）タンパク質として知られるタンデムブロモドメイン（ＢＲＤ）を含有する転写制御因子ファミリーに対するアセチル化ヒストンＨ４の結合を阻害することが示された。米国特許出願公開２０１０／０２８６１２７ Ａ１号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照。ＢＥＴタンパク質は、増殖及び分化のエピジェネティックな主要な制御因子として出現し、また、脂質異常症又は脂肪生成の不適切な調節、高い炎症性プロファイル及び心血管疾患及び２型糖尿病のリスク、及び関節リウマチ及び全身性エリテマトーデスのような自己免疫疾患に対する感受性の増大の傾向に関連している。これは、Ｄｅｎｉｓ， Ｇ．Ｖ．により「癌、肥満症、２型糖尿病及び炎症におけるブロモドメイン共活性化因子」Ｄｉｓｃｏｖ Ｍｅｄ ２０１０；１０：４８９-４９９（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）で報告されている。従って、式（ＩＩ）の化合物は、様々な癌、心血管疾患、２型糖尿病及び自己免疫障害（例えば、関節リウマチ及び全身性エリテマトーデス）の治療に有用であり得る。

本明細書の下記に記載される式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、一般的な投与及びガレヌス組成物の調製が非常にとりわけ困難である。それは、特に、薬物の生物学的利用能の特定の問題及び患者間及び患者内の用量反応の違いの特定の問題を含む。チエノトリアゾロジアゼピンのほぼ水に溶けない性質から、従来にない剤形の開発が必要とされている。

これまでに、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物を、担体アクリル酸エチル-メタクリル酸メチル-トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリド共重合体（オイドラギット ＲＳ，ローム社製）を用いて製剤化して、炎症性腸疾患（例えば潰瘍性大腸炎及びクローン病）の治療のために腸管下部で優先的に医薬成分を放出する経口製剤が提供可能であることが明らかとなった。これは、米国特許出願公開２００９００１２０６４ Ａ１号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる。）で報告されている。動物実験を含む様々な実験によって、炎症性腸疾患に対しては、病変における式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の放出及び炎症性病変に対するその直接的な作用が、胃腸管からの循環への式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の吸収と比較して、より重要であることが明らかとなった。しかしながら、多くの他の疾患状態に対しては、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の胃腸管から循環への高い吸収が必要である。従って、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の胃腸管から循環への高い吸収を実現できる式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の製剤に対する要求がある。

ＢＥＴプロテインの活性を標的とする様々な阻害剤が最近開発されており、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）を含むいくつかの腫瘍で強力な抗増殖効果を示した。棘皮動物微小管結合タンパク質様４（ＥＭＬ４）と未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）遺伝子の融合は、キメラ癌遺伝子ＥＭＬ４-ＡＬＫをもたらし、ＡＬＫ阻害剤に対して高い治療活性率を示す異なる実体のＮＳＣＬＣを特定する。しかし、必ずほとんどの患者が数カ月以内に耐性を獲得する。ここで、我々はＮＳＣＬＣ細胞株パネル（その一部は融合タンパク質ＥＭＬ４−ＡＬＫを担持している）におけるＯＴＸ０１５、新規経口ｐａｎ-ＢＥＴ-ＢＲＤ阻害剤を用いて得られた前臨床の知見を報告する。

ある実施形態では、本開示は、本明細書に記載の組成物を用いるＮＳＣＬＣの治療方法を提供する。

ある実施形態では、本開示は、セクションＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ及びＶＩＩに記載の組成物に従う医薬上許容される量の固体分散体を含む組成物を、必要とする患者に投与することを含む哺乳動物における非小細胞肺癌の治療方法を提供する。

いくつかの実施形態では、方法は、さらに、ｍＴＯＲ阻害剤を患者に投与することを含む。一つのこのような実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤は、ラパマイシン、テムシロリムス、リダフォロリムス及びエベロリムスからなる群から選ばれる。一つのこのような実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤はエベロリムスである。チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びｍＴＯＲ阻害剤は、同時に又は順次投与することができる。いくつかの実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びｍＴＯＲ阻害剤のこのような組み合わせは、相乗効果をもたらす。

いくつかの実施形態では、方法は、さらに、ＡＬＫ阻害剤を患者に投与することを含む。一つのこのような実施形態では、ＡＬＫ阻害剤はセリチニブ及びクリゾチニブからなる群から選ばれる。一つのこのような実施形態では、ＡＬＫ阻害剤はクリゾチニブである。チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びＡＬＫ阻害剤は、同時に又は順次投与することができる。いくつかの実施形態では、チエノトリゾロジアゼピン化合物及びＡＬＫ阻害剤のこのような組み合わせは、相乗効果をもたらす。

ある実施形態では、非小細胞肺癌がＥＭＬ４-ＡＬｋ陽性である。一つのこのような実施形態では、非小細胞肺癌が、治療後にＮ-ＭＹＣｍＲＮＡ量のダウンレギュレーションを示した。他のこのような実施形態では、非小細胞肺癌が、ＢＲＤ４／３／２、ｃ-ＭＹＣ、ＢＣＬ-２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した。さらに他の実施形態では、治療は、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導した。

さらに他の実施形態では、非小細胞肺癌はＥＭＬ４-ＡＬｋ陰性である。一つのこのような実施形態では、非小細胞肺癌が、ＢＲＤ４／３／２、ｃ-ＭＹＣ、ＢＣＬ-２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した。他のこのような実施形態では、治療は、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導した。

ある実施形態では、本開示は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（その任意の塩、その異性体、そのエナンチオマー、そのラセミ化合物、その水和物、その溶媒和物、その代謝物及びその多形体を含む。）を用いるＮＳＣＬＣの治療方法を提供する：

［式中、Ｒ_１は、１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ_２は、水素原子；ハロゲン原子；又はハロゲン原子又はヒドロキシル基で置換されていてもよい１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ_３は、ハロゲン原子；ハロゲン原子、１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ又はシアノで置換されていてもよいフェニル；-ＮＲ_５-（ＣＨ_２）_ｍ-Ｒ_６（式中、Ｒ_５は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ_６は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）；又は-ＮＲ_７-ＣＯ-（ＣＨ_２）_ｎ-Ｒ_８（式中、Ｒ_７は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｎは、０〜２の整数であり、Ｒ_８は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）であり、Ｒ_４は、-（ＣＨ_２）_ａ-ＣＯ-ＮＨ-Ｒ_９（式中、ａは、１〜４の整数であり、Ｒ_９は、１〜４の炭素数を有するアルキル；１〜４の炭素数を有するヒドロキシアルキル；１〜４の炭素数を有するアルコキシ；又は１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ、アミノ又はヒドロキシル基で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）又は-（ＣＨ_２）_ｂ-ＣＯＯＲ_１０（式中、ｂは、１〜４の整数であり、Ｒ_１０は、１〜４の炭素数を有するアルキルである。）である。］。

いくつかの実施形態では、式（１）は、式（１Ａ）、その医薬上許容される塩又はその水和物；及び医薬上許容されるポリマーから選ばれる：

［式中、Ｘはハロゲンであり、Ｒ^１がＣ_１-Ｃ_４アルキルであり、Ｒ^２がＣ_１-Ｃ_４アルキルであり、ａは１〜４の整数であり、Ｒ^３がＣ_１-Ｃ_４アルキル、Ｃ_１-Ｃ_４ヒドロキシアルキル、Ｃ_１-Ｃ_４アルコキシ、置換基を有していてもよいフェニル又は置換基を有していてもよいヘテロアリールである。］。一つのこのような実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む固体分散体として製剤化される。

ある実施形態では、式（１Ａ）は、（ｉ）（Ｓ）-２-［４-（４-クロロフェニル）-２，３，９-トリメチル-６Ｈ-チエノ［３，２-ｆ］［１，２，４］トリアゾロ-［４，３-ａ］［１，４］ジアゼピン-６-イル］-Ｎ-（４-ヒドロキシフェニル）アセトアミド又はその二水和物、（ｉｉ）メチル（Ｓ）-｛４-（３’-シアノビフェニル-４-イル）-２，３，９-トリメチル-６Ｈ-チエノ［３，２-ｆ］［１，２，４］トリ-アゾロ［４，３-ａ］［１，４］ジアゼピン-６-イル｝アセテート、（ｉｉｉ）メチル（Ｓ）-｛２，３，９-トリメチル-４-（４-フェニルアミノフェニル）-６Ｈ-チエノ［３，２-ｆ］［１，２，４］トリアズ-オロ［４，３-ａ］［１，４］ジアゼピン-６-イル｝アセテート；及び（ｉｖ）メチル（Ｓ）-｛２，３，９-トリメチル-４-［４-（３-フェニルプロピオニルアミノ）フェニル］-６Ｈ-チエノ［３，２-ｆ-］［１，２，４］トリアゾロ［４，３-ａ］［１，４］ジアゼピン-６-イル｝アセテートからなる群から選ばれる。一つのこのような実施形態では、式（１）は（Ｓ）-２-［４-（４-クロロフェニル）-２，３，９-トリメチル-６Ｈ-チエノ［３，２-ｆ］［１，２，-４］トリアゾロ［４，３-ａ］［１，４］ジアゼピン-６-イル］-Ｎ-（４-ヒドロキシフェニル）アセトアミドである。

いくつかの実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートである。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）に対して１：３ないし１：１の重量比でチエノトリアゾロジアゼピン化合物を有する。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、約１３０℃ないし約１４０℃の範囲内でガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかのこのような実施形態では、少なくとも１か月間４０℃で相対湿度７５％に曝露した後のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度は、このような曝露前の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度の少なくとも９０％である。

他の実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＰＶＰである。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、ＰＶＰに対して１：３ないし１：１の重量比でチエノトリアゾロジアゼピン化合物を有する。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、約１７５℃ないし約１８５℃の範囲内でガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかのこのような実施形態では、少なくとも１か月間４０℃で相対湿度７５％に曝露した後のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度は、このような曝露前の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度の少なくとも９０％である。

他の実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥により得られる。

他の実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。

さらに他の実施形態では、固体分散体は、同等な量の式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む静脈投与された対照組成物により提供される対応するＡＵＣ値の少なくとも０．５倍の曲線下面積（ＡＵＣ）値を提供する。

なおさらに他の実施形態では、固体分散体は、５．０ないし７．０のｐＨの対照ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地におけるポリマーを伴わない式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度の少なくとも５倍の、５．０ないし７．０のｐＨの水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地における非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度を提供する。

さらに他の実施形態では、１．０ないし２．０のｐＨを有する水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地における固体分散体に対する非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度は、５．０ないし７．０のｐＨを有するｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地におけるポリマーを伴わない式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度よりも少なくとも５０％高い。

ある実施形態では、非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の固体分散体、及びヒプロメロースフタレート及びアクリル酸エチル-メタクリル酸メチル-トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリドコポリマーからなる群から選ばれる医薬上許容されるポリマーからの式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度と比較して少なくとも５０％高い（各固体分散体は、１．０ないし２．０のｐＨを有する水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地に置いた。）。

ある実施形態では、式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の固体分散体、及びヒプロメロースフタレート及びアクリル酸エチル-メタクリル酸メチル-トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリドコポリマーからなる群から選ばれる医薬上許容されるポリマーに対する式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度と比較して少なくとも５０％高い（各固体分散体は、１．０ないし２．０のｐＨを有する水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地に置いた。）。

本開示は、さらに、スプレー乾燥した本明細書に記載の固体分散体、及びラクトース一水和物；微結晶性セルロース；クロスカルメロース ナトリウム；コロイド状二酸化ケイ素；ステアリン酸マグネシウム；及びその組み合わせからなる群から選ばれる１以上の医薬上許容される賦形剤を含む医薬製剤を提供する。いくつかの実施形態では、医薬製剤は０．５５ｇ／ｃｃないし０．６０ｇ／ｃｃの範囲内の嵩密度を有する。いくつかの実施形態では、医薬形体は医薬カプセル剤であってもよい。いくつかの実施形態では、医薬形体は医薬錠剤であってもよい。

本開示は、さらに、１０〜１５重量％のスプレー乾燥した本明細書に記載の固体分散体、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）を含む医薬製剤を提供する。ここで、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、分散体中で非晶質であり、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）に対して１：３ないし１：１の重量比のチエノトリアゾロジアゼピン化合物；４５〜５０重量％のラクトース一水和物；３５〜４０重量％の微結晶性セルロース；４〜６重量％のクロスカルメロースナトリウム；０．８〜１．５重量％のコロイド状二酸化ケイ素；及び０．８〜１．５重量％のステアリン酸マグネシウムを有する。

本発明のチエノトリアゾロジアゼピン製剤を含む医薬組成物及び本発明の方法の実施形態の上述の要約及び以下の詳細な説明は、代表的な実施形態の添付図面と併せて読むことによりよく理解されるであろう。しかしながら、本発明が、図示された厳密な配置及び手段に限定されるものではないということを理解されたい。

図面において：
用語ＯＴＸ０１５は明細書及び図面を通して化合物（１-１）と同義である。

図１Ａは、２５％の化合物（１-１）及びオイドラギットＬ１００-５５を含む固体分散体を含む比較製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｂは、５０％の化合物（１-１）及びオイドラギットＬ１００-５５を含む固体分散体を含む比較製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｃは、２５％の化合物（１-１）及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｄは、５０％の化合物（１-１）及びＰＶＰを含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｅは、２５％の化合物（１-１）及びＰＶＰ-酢酸ビニル（ＰＶＰ-ＶＡ）を含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｆは、５０％の化合物（１-１）及びＰＶＰ-ＶＡを含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｇは、２５％の化合物（１-１）及びヒプロメロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ-Ｍ）を含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｈは、５０％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-Ｍを含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｉは、２５％の化合物（１-１）及びヒプロメロースフタレート（ＨＰＭＣＰ-ＨＰ５５）を含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図１Ｊは、５０％の化合物（１-１）及びＨＭＣＰ-ＨＰ５５を含む固体分散体を含む実施例製剤の溶解プロファイルを説明する。 図２Ａは、２５％の化合物（１-１）及びＰＶＰの固体分散体を含む実施例製剤のｉｎ ｖｉｖｏスクリーニングの結果を説明する。 図２Ｂは、２５％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-Ｍの固体分散体を含む実施例製剤のｉｎ ｖｉｖｏスクリーニングの結果を説明する。 図２Ｃは、５０％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-Ｍの固体分散体を含む実施例製剤のｉｎ ｖｉｖｏスクリーニングの結果を説明する。 図３は、化合物（１-１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。 図４Ａは、周囲条件下で平衡化させた２５％の化合物（１-１）及びＰＶＰの固体分散体の改良型示差走査熱量計のトレースを説明する。 図４Ｂは、周囲条件下で平衡化させた２５％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-Ｍの固体分散体の改良型示差走査熱量計のトレースを説明する。 図４Ｃは、周囲条件下で平衡化させた５０％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-Ｍの固体分散体の改良型示差走査熱量計のトレースを説明する。 図５は、２５％の化合物（１-１）及びＰＶＰ又はＨＭＰＣＡＳ-Ｍの固体分散体、及び５０％の化合物（１-１）及びＨＰＭＣＡＳ-ＭＧの固体分散体についてのガラス転移温度（Ｔｇ）の相対湿度（ＲＨ）に対するプロットを説明する。 図６は、７５％の相対湿度下で平衡化させた２５％の化合物（１-１）及びＰＶＰの固体分散体の改良型示差走査熱量計のトレースを説明する。 図７Ａ及び７Ｂは、１ｍｇ／ｋｇ静脈内投与（黒四角）後、及び２５％の化合物（１-１）：ＰＶＰ（白丸）、２５％の化合物（１-１）：ＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ（白三角）、及び５０％の化合物（１-１）：ＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ（白逆三角）としての３ｍｇ／ｋｇ経口投与後の化合物（１-１）の血漿濃度の時間に対する曲線を説明する。挿入図は、片対数目盛に対してプロットされた同じデータを示す。 図８Ａ及び８Ｂは、２５％の化合物（１-１）：ＰＶＰ（白丸）、２５％の化合物（１-１）：ＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ（白三角）及び５０％の化合物（１-１）：ＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ（白逆三角）としての３ｍｇ／ｋｇ経口投与後の化合物（１-１）の血漿濃度の時間に対する曲線を説明する。挿入図は、片対数目盛に対してプロットされた同じデータを示す。 図９は、ＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ中の化合物（１-１）の固体分散体の安定性試験のゼロ時間における粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。 図１０は、４０℃及び相対湿度７５％での１か月後におけるＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ中の化合物（１-１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。 図１１は、４０℃及び相対湿度７５％での２か月後におけるＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ中の化合物（１-１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。 図１２は、４０℃及び相対湿度７５％での３か月後におけるＨＰＭＣＡＳ-ＭＧ中の化合物（１-１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。 図１３は、７２時間後の化合物（１-１）の抗増殖効果、及びＮＳＣＬＣ細胞で見られる一般的な突然変異の特性を説明する。 図１４は、化合物（１-１）に曝露した後２４時間のＳ相細胞フラクションの減少を説明する。 図１５Ａは、化合物（１-１）感受性（ＧＩ_５０値）の順に分類されたＮＳＣＬＣ細胞におけるＢＲＤ、Ｃ-ＭＹＣ、Ｎ-ＭＹＣ、ＢＣＬ２及びＰ２１のｍＲＮＡ量を説明する。 図１５Ｂは、ＮＳＣＬＣ細胞におけるＢＲＤ２、ＢＲＤ３、Ｃ-ＭＹＣ、Ｎ-ＭＹＣ、Ｐ２１、ＢＣＬ２及びサイクリンＤ１の基底たんぱく質の発現を説明する。 図１６Ａは、５００ｎＭの化合物（１-１）への暴露後のＨＯＰ６２、ＨＯＰ９２、Ｈ２２２８、Ｈ３１２２、及びＡ５４９細胞におけるＣ-ＭＹＣのｍＲＮＡ量を説明する。 図１６Ｂは、５００ｎＭの化合物（１-１）への曝露後のＨＯＰ６２、ＨＯＰ９２、Ｈ２２２８、Ｈ３１２２、及びＡ５４９細胞におけるＮ-ＭＹＣのｍＲＮＡ量を説明する。 図１６Ｃは、５００ｎＭの化合物（１-１）への暴露後のＨＯＰ６２、ＨＯＰ９２、Ｈ２２２８、Ｈ３１２２、及びＡ５４９細胞におけるＣ-ＭＹＣタンパク質及びＮ-ＭＹＣタンパク質の調節を説明する。 図１７は、ＮＳＣＬＣ細胞株におけるエベロリムス又はクリゾチニブとの併用の組み合わせでの化合物（１-１）の効果を説明する。 図１８Ａは、化合物（１-１）が、ビヒクル対照処置マウス、クリゾチニブと比較してＨ３１２２腫瘍を有するマウスにおいて腫瘍の進行を遅くしたことを説明する。 図１８Ｂは、化合物（１-１）での処置の３週間で体重減少が観察されなかったことを説明する。

発明の詳細な説明

本主題は、以下において、代表的な実施形態が示される添付の図面及び実施例を参照することによって、直ちにより十分に開示されるであろう。しかしながら、本主題は異なる形式で実施可能であり、本明細書に明記される実施形態に限定されると解釈されるべきではない。むしろ、これらの実施形態は、開示し、当業者が実施可能とするために提供される。別段の定めがない限り、本明細書で用いられている全ての技術用語及び科学用語は、主題が属する技術分野の当業者に一般的に理解されるものと同様の意味を有する。本明細書で言及される全ての刊行物、特許出願、特許及びその他の参考文献は、それらの全体が参照により組み込まれる。

（Ｉ．定義）
本明細書で用いられる用語「アルキル基」とは、直鎖又は分枝鎖の飽和炭化水素を言う。

用語「置換されたアルキル基」とは、炭化水素骨格の水素又は１以上の炭素において置換した１個以上の置換基を有するアルキル部分を言う。

用語「アルケニル基」が単独で或いは置換基群の一部として用いられるかどうかにかかわらず、例えば、「Ｃ_１-４アルケニル（アリール）」とは、少なくとも１個の炭素-炭素二重結合を有する分枝鎖又は直鎖の一価の部分不飽和炭化水素基を言う。そのような二重結合は、元のアルキル分子の隣接した２個の炭素原子それぞれから１個の水素原子を除去することにより誘導される。その基は、１個の炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導される。原子は、二重結合の周りをｃｉｓ（Ｚ）又はｔｒａｎｓ（Ｅ）配座の何れによっても配置していてもよい。代表的なアルケニル基としては、エテニル、プロぺニル、アリル（２-プロぺニル）、ブテニル等が挙げられるが、これらに限定されない。実施例は、Ｃ_１-４アルケニル基又はＣ_２-４アルケニル基を含む。

用語「Ｃ_{（ｊ-ｋ）}」（ｊ及びｋは指定された炭素原子の数を示す整数である）とは、全部でｊないしｋ個の炭素原子を含む、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基又はシクロアルキル基、或いは、アルキルが接頭語語幹に付く基のアルキル部分を言う。例えば、Ｃ_{（１-４）}は、１、２、３又は４個の炭素原子を含む基を示す。

本明細書で用いられる用語「ハロ」又は「ハロゲン」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、又はＩを言う。

用語「医薬上許容される塩」は、当該技術分野で認識されているものであって、化合物の比較的無毒性の無機及び有機の酸付加塩、又は無機又は有機の塩基付加塩を言う。例えば、本発明の組成物に含まれるものが挙げられる。

本明細書で用いられる用語「固体分散体」とは、少なくとも２つの異なる成分、一般的に親水性の担体及び疎水性の薬剤（活性成分）からなる固体生成物の群を言う。

用語「キラル」は、当該技術分野で認識されているものであって、鏡像の相手と重ね合わせることができない性質を有する分子を言う。その一方で、用語「アキラル」とは、それらの鏡像の相手と重ね合わせることができる分子を言う。「プロキラル分子」は、特定のプロセスでキラル分子になる能力を有する分子である。

記号「」は、単結合であっても、二重結合であっても、或いは三重結合であってもよい結合を示すために用いられる。

本明細書で用いられる用語「エナンチオマー」及びエナンチオマーを示す構造式は、その光学異性体を含まない「純粋な」エナンチオマー、及びエナンチオマーが鏡像体過剰率（例えば、少なくとも１０％、２５％、５０％、７５％、９０％、９５％、９８％又は９９％の鏡像体過剰率）で存在しているエナンチオマーとその光学異性体の混合物を含むことを意味する。

用語「立体異性体」は、本明細書で用いられる場合に、全ての幾何異性体、エナンチオマー又はジアステレオマーからなる。本発明は、これらの化合物及びその混合物の様々な立体異性体を包含する。また、開示された化合物の配座異性体及び回転異性体も考慮される。

本明細書で用いられる用語「立体選択的合成」は、単一の反応物質が、新たな立体中心が形成され或いは予め存在するものを変換する間に不均等な立体異性体の混合物を形成する化学反応或いは酵素反応を示し、それは、当技術分野でよく知られている。立体選択的合成は、エナンチオ選択的変換及びジアステレオ選択的変換の両方を包含する。１５例えば、Ｃａｒｒｅｉｒａ， Ｅ． Ｍ． ａｎｄ Ｋｖａｅｒｎｏ， Ｌ．， Ｃｌａｓｓｉｃｓ ｉｎ Ｓｔｅｒｅｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｗｉｌｅｙ-ＶＣＨ： Ｗｅｉｎｈｅｉｍ， ２００９を参照のこと。

用語「噴霧乾燥」とは、供給された懸濁液又は溶液を噴霧化して小さな液滴にし、蒸発に強い促進力（例えば、高温乾燥ガス又は部分真空又はその組み合わせ）を備えた処理装置室内の混合物から急速に溶媒を除去することを含むプロセスを言う。

本明細書で用いられる用語「治療有効量」とは、その量のチエノトリアゾロジアゼピン又は他の薬学的に活性な薬剤を受け入れていない対応する患者と比較して、疾患、障害又は副作用の、改善処置、治癒、予防又は向上、或いは疾患又は障害の進行の減速をもたらす、本発明のチエノトリアゾロジアゼピン又は任意の他の薬学的に活性な薬剤の任意の量を言う。

用語「約」は＋／−１０％を意味する。

本出願及び後述する特許請求の範囲を通じて、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、語句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」又は「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」又は「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」のような変形は、定められた完全体の段階又は完全体若しくは段階の集合を包含することを意味すると理解されるべきであるが、いかなる他の完全体若しくは工程又は完全体若しくは工程の集合も排除されることを意味すると理解するべきではない。

今回、本明細書の以下に記載の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、医薬上許容されるポリマーと共に固体分散体として製剤化し、胃腸管から循環への医薬成分を高吸収で提供する経口製剤を提供することができることが見出された。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシネート（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート又はＨＰＭＣＡＳともいう）である。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）である。

いくつかの実施形態では、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）としては、９％アセチル／１１％スクシノイルを有するＭグレード（例、５μｍの平均粒径１０を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＦ、微粉末グレード）又は１ｍｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧ、顆粒グレード））、１２％アセチル／６％スクシノイルを有するＨグレード（例、５μｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ、微粉末グレード）又は１ｍｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ、顆粒グレード））、及び８％アセチル／１５％スクシノイルを有するＬグレード（例、５μｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＬＦ、微粉末グレード）又は１ｍｍの１５平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＬＧ、顆粒グレード））が挙げられ得る。

いくつかの実施形態では、ポリビニルピロリドンは、約２，５００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）１２ＰＦ、２，０００ないし３，０００の範囲の量平均分子量）、約９，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）１７ＰＦ、７，０００ないし１１，０００の範囲の量平均分子量）、約２５，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）２５、２８，０００ないし３４，０００の範囲の量平均分子量）、約５０，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）３０、４４，０００ないし５４，０００の範囲の量平均分子量）、及び約１，２５０，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）９０又はＫｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）９０Ｆ、１，０００，０００ないし１，５００，０００の範囲の量平均分子量）を有していてもよい。

（ＩＩ．治療方法）
ある実施形態では、本開示は、セクションＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ及びＶＩＩに記載の組成物に従う医薬上許容される量の固体分散体を含む組成物を必要とする患者に投与することを含む哺乳動物における非小細胞２５肺癌の治療方法を提供する。ある実施形態では、非小細胞肺癌はＥＭＬ４−ＡＬｋ陽性である。一つのこのような実施形態では、非小細胞肺癌が、治療後にＮ−ＭＹＣのｍＲＮＡ量のダウンレギュレーションを示した。他のこのような実施形態では、非小細胞肺癌は、ＢＲＤ４／３／２、ｃ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した。さらに他の実施形態において、治療は、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露の２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導した。

いくつかの実施形態では、方法は、さらに、ｍＴＯＲ阻害剤を患者に投与することを含む。一つのこのような実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤は、ラパマイシン、テムシロリムス、リダフォロリムス及びエベロリムスからなる群から選ばれる。一つのこのような実施形態では、ｍＴＯＲ阻害剤はエベロリムスである。チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びｍＴＯＲ阻害剤は、同時に又は順次投与することができる。いくつかの実施形態では、チエノトリゾロジアゼピン化合物及びｍＴＯＲ阻害剤のこのような組み合わせは、相乗効果をもたらす。

いくつかの実施形態では、方法は、さらに、ＡＬＫ阻害剤を患者に投与することを含む。一つのこのような実施形態では、ＡＬＫ阻害剤は、セリチニブ及びクリゾチニブからなる群から選ばれる。一つのこのような実施形態では、ＡＬＫ阻害剤は、クリゾチニブである。チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びＡＬＫ阻害剤は、同時に又は順次投与することができる。いくつかの実施形態では、チエノトリゾロジアゼピン化合物及びＡＬＫ阻害剤のこのような組み合わせは、相乗効果をもたらす。

さらに他の実施形態では、非小細胞肺癌はＥＭＬ４−ＡＬｋ陰性である。一つのこのような実施形態では、非小細胞肺癌は、ＢＲＤ４／３／２、ｃ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した。他のこのような実施形態では、治療は、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露の２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導した。

ある実施形態では、非小細胞肺癌は、ＫＲＡＳ遺伝子に突然変異を有する。ある実施形態では、非小細胞肺癌は、ＬＫＢ１遺伝子に突然変異を有する。いくつかの実施形態では、非小細胞肺癌は、ＫＲＡＳ及びＬＫＢ１遺伝子両方に突然変異を有する。

ある実施形態では、ＮＭＹＣは、ダウンレギュレートされる。ある実施形態では、ＨＥＸＩＭは、アップレギュレートされる。

いくつかの実施形態では、方法は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（その任意の塩、その異性体、そのエナンチオマー、そのラセミ化合物、その水和物、その溶媒和物、その代謝物、及びその多形体を含む）を使用する：

［式中、Ｒ_１は、１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ_２は、水素原子；ハロゲン原子；又はハロゲン原子又はヒドロキシル基で置換されていてもよい１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ_３は、ハロゲン原子；ハロゲン原子、１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ又はシアノで置換されていてもよいフェニル；−ＮＲ_５−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｒ_６（式中、Ｒ_５は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ_６は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）；又は−ＮＲ_７−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｒ_８（式中、Ｒ_７は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｎは、０〜２の整数であり、Ｒ_８は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）であり、Ｒ_４は、−（ＣＨ_２）_ａ−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ_９（式中、ａは、１〜４の整数であり、Ｒ_９は、１〜４の炭素数を有するアルキル；１〜４の炭素数を有するヒドロキシアルキル；１〜４の炭素数を有するアルコキシ；又は１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ、アミノ又はヒドロキシル基で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）又は−（ＣＨ_２）_ｂ−ＣＯＯＲ_１０（式中、ｂは、１〜４の整数であり、Ｒ_１０は、１〜４の炭素数を有するアルキルである。）である。］。

いくつかの実施形態では、式（１）は式（１Ａ）、その医薬上許容される塩又はその水和物；及び医薬上許容されるポリマーから選ばれる：

［式中、Ｘはハロゲンであり、Ｒ^１はＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、Ｒ^２はＣ_１−Ｃ_４アルキルであり、ａは１〜４の整数であり、Ｒ^３はＣ_１−Ｃ_４アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４ヒドロキシアルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ、置換基を有していてもよいフェニル、又は置換基を有していてもよいヘテロアリールである。］。一つのこのような実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む固体分散体として製剤化される。

（ＩＩＩ．チエノトリアゾロジアゼピン化合物）
ある実施形態では、本発明の製剤で用いられるチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、式（１）：

［式中、Ｒ^１は、１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ^２は、水素原子；ハロゲン原子；又はハロゲン原子又はヒドロキシル基で置換されていてもよい１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ^３は、ハロゲン原子；ハロゲン原子、１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ又はシアノで置換されていてもよいフェニル；−ＮＲ^５−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｒ^６（式中、Ｒ^５は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ^６は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）；又は−ＮＲ^７−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｒ^８（式中、Ｒ^７は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｎは、０〜２の整数であり、Ｒ^８は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）であり、Ｒ^４は、−（ＣＨ_２）_ａ−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ^９（式中、ａは、１〜４の整数であり、Ｒ^９は、１〜４の炭素数を有するアルキル；１〜４の炭素数を有するヒドロキシアルキル；１〜４の炭素数を有するアルコキシ；又は１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ、アミノ又はヒドロキシル基で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）又は−（ＣＨ_２）_ｂ−ＣＯＯＲ^１０（式中、ｂは、１〜４の整数であり、Ｒ^１０は、１〜４の炭素数を有するアルキルである。）である。］
で表され、その任意の塩、その異性体、そのエナンチオマー、そのラセミ化合物、その水和物、その溶媒和物、その代謝物及びその多形体を含む。

ある実施形態では、適切なアルキル基としては、１個の炭素原子から４個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル基が挙げられる。ある実施形態では、適切なアルキル基としては、１個の炭素原子から３個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル基が挙げられる。ある実施形態では、適切なアルキル基としては、１個の炭素原子から２個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖のアルキル基が挙げられる。ある実施形態では、代表的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルが挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、代表的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、２−メチル−１−プロピル及び２−メチル−２−プロピルが挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態において、本発明は、本明細書に記載のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物（水和物を含む）及び同位体標識体を提供する。ある実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物の医薬上許容される塩としては、無機酸類と形成する酸付加塩が挙げられる。ある実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピンの医薬上許容される無機酸付加塩としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸及び硫酸の塩が挙げられる。ある実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物の医薬上許容される塩としては、有機酸類と形成する酸付加塩が挙げられる。ある実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピンの医薬上許容される有機酸付加塩としては、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、マレイン酸、コハク酸、カンファースルホン酸、イソチオン酸、粘液酸、ゲンチジン酸、イソニコチン酸、サッカリン酸、グルクロン酸、フロ酸、グルタミン酸、アスコルビン酸、アントラニル酸、サリチル酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、パントテン酸、ステアリン酸、スルファニル酸、アルギン酸、ガラクツロン酸及びアリールスルホン酸（例えばベンゼンスルホン酸及び４−メチルベンゼンスルホン酸）の塩が挙げられる。

式（１）の代表的なチエノトリアゾロジアゼピン化合物としては、以下の表Ａで挙げられるチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）〜（１−１８）が挙げられるが、これらに限定されない。

表Ａの化合物（１−１）は、ＯＴＸ−０１５、ＯＴＸ０１５又はＹ８０３として本明細書で言及されるだろう。

表Ａ：代表的な本発明の化合物：

いくつかの実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物としては、（ｉ）（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ−［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド又はその二水和物、（ｉｉ）メチル（Ｓ）−｛４−（３’−シアノビフェニル−４−イル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリ−アゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテート、（ｉｉｉ）メチル（Ｓ）−｛２，３，９−トリメチル−４−（４−フェニルアミノフェニル）−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアズ−オロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテート；及び（ｉｖ）メチル（Ｓ）−｛２，３，９−トリメチル−４−［４−（３−フェニルプロピオニルアミノ）フェニル］−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ−］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテートが挙げられる。

いくつかの実施形態において、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物としては、（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，−４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド二水和物が挙げられる。

いくつかの実施形態において、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物としては、（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，−４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミドが挙げられる。

（ＩＶ．製剤）
式（１）の化合物は、一般的な投与及びガレヌス組成物の調製が非常にとりわけ困難である。特に、薬物の生物学的利用能の特定の問題及び患者間及び患者内の用量反応の違いの特定の問題を含む。化合物のほぼ水に溶けない性質から従来にない剤形の開発が必要とされている。

これまでに、式（１）の化合物を、担体アクリル酸エチル−メタクリル酸メチル−トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリド共重合体（オイドラギット ＲＳ，ローム社製）を用いて固体分散体として製剤化して、炎症性腸疾患（例えば潰瘍性大腸炎及びクローン病）の治療のために腸管下部で優先的に医薬成分を放出する経口製剤が提供できることが明らかとなった（米国特許出願２００９００１２０６４ Ａ１（２００９年１月８日公開））。動物実験を含む様々な実験により、炎症性腸疾患において、病変における薬剤の放出及び炎症性病変に対するその直接的な作用が、胃腸管から循環への薬剤の吸収と比較してより重要であることが明らかとなった。

今回、意外なことに、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、その医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー異性体及びその同位体標識体は、医薬上許容されるポリマーと共に、固体分散体として製剤化して、炎症性腸疾患以外の疾患の治療のための胃腸管から循環への医薬成分の高吸収をもたらす経口製剤を提供することができるということが明らかとなった。イヌ及びヒト両方の研究によって、これらの固体分散体は、これまでに炎症性腸疾患の治療のために開発されたオイドラギット固体分散体製剤と比較して、経口生物学的利用能が高いことが確認された。

固体分散体は、難水溶性薬剤の経口生物学的利用能を向上させる方策である。

本明細書で用いられる用語「固体分散体」とは、少なくとも２つの異なる成分である一般的な親水性担体及び疎水性薬剤の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む固体生成物の一群を言う。分散体中の薬剤の分子配置に基づいて、６つの異なる形態の固体分散体に区分することができる。一般的に、固体分散体は、単純共融混合物、固体溶液、ガラス溶液及び懸濁液、並びに結晶質担体中の非晶質沈殿物として分類される。さらに、特定の組み合わせとしては、例えば、同一試料内で、ある分子がクラスターとして存在する一方で、ある分子が分子として分散しているような組み合わせがあり得る。

ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、非晶質粒子（クラスター）内で分子として分散していてもよい。他の実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、結晶質粒子として分散していてもよい。ある実施形態では、担体が結晶質であってもよい。他の実施形態では、担体が非晶質であってもよい。

ある実施形態では、本発明は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナート（ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート又はＨＰＭＣＡＳとも言う）である。ある実施形態では、分散体は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）に対して１：３ないし１：１の重量比でチエノトリアゾロジアゼピン化合物を有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃ないし１４０℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回析線が存在しないことを意味するものとする。いくつかの実施形態において、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）としては、９％アセチル／１１％スクシノイルを有するＭグレード（例、５μｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＦ，微粉末グレード）、又は１ｍｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧ，顆粒グレード））、１２％アセチル／６％スクシノイルを有するＨグレード（例、５μｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＨＦ，微粉末グレード）、又は１ｍｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＨＧ，顆粒グレード））、及び８％アセチル／１５％スクシノイルを有するＬグレード（例、５μｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＬＦ，微粉末グレード）、又は１ｍｍの平均粒径を有するＨＰＭＣＡＳ（即ち、ＨＰＭＣＡＳ−ＬＧ，顆粒グレード））が挙げられ得る。

ある実施形態では、本発明は、医薬上許容されるポリマー中、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体の固体分散体を含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ポリビニルピロリドン（ポビドン又はＰＶＰとも言う）である。ある実施形態では、分散体は、ＰＶＰに対して１：３ないし１：１の重量比でチエノトリアゾロジアゼピン化合物を有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃ないし約１８５℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１７９℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。いくつかの実施形態では、ポリビニルピロリドンは、約２，５００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）１２ＰＦ，２，０００〜３，０００の範囲の量平均分子量）、約９，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）１７ＰＦ，７，０００〜１１，０００の範囲の量平均分子量）、約２５，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）２５，２８，０００〜３４，０００の範囲の量平均分子量）、約５０，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）３０，４４，０００〜５４，０００の範囲の量平均分子量）、及び約１，２５０，０００の分子量（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）９０又はＫｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）９０Ｆ，１，０００，０００〜１，５００，０００の範囲の量平均分子量）を有していてもよい。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナートである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のヒプロメロースアセテートスクシナートに対する重量比は１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃から１４０℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ポリビニルピロリドンである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のポリビニルピロリドンに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃から約１８５℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１７９℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナートである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のヒプロメロースアセテートスクシナートに対する重量比は１：３から１：１の範囲内である。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはポリビニルピロリドンである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のポリビニルピロリドンに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。

いくつかの実施形態では、固体分散体を含む医薬組成物は、噴霧乾燥により調製される。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び薬学的に許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナートである。ある実施形態では、化合物（１）のヒプロメロースアセテートスクシナートに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃から１４０℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体及び医薬上許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはポリビニルピロリドンである。ある実施形態では、化合物（１）のポリビニルピロリドンに対する重量比は１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃から１８５℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１７９℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体、及び医薬上許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナートである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のヒプロメロースアセテートスクシナートに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃から１４０℃の範囲内である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体、及び医薬上許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ポリビニルピロリドンである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のポリビニルピロリドンに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃から１８５℃の範囲内である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１７９℃である。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体、及び医薬上許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ヒプロメロースアセテートスクシナートである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のヒプロメロースアセテートスクシナートに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体、及び医薬上許容されるポリマーの噴霧乾燥した固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ポリビニルピロリドンである。ある実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物のポリビニルピロリドンに対する重量比は、１：３から１：１の範囲内である。

ある好ましい実施形態において、本発明は、化合物（１−１）：

の２−［（６Ｓ）−４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノール［３，２−ｆ］−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド二水和物又は医薬上許容される塩、溶媒和物（水和物を含む）、ラセミ化合物、エナンチオマー、異性体、又は同位体標識体、及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＨＰＭＣＡＳである。ある実施形態では、分散体は、１：３ないし１：１の重量比で化合物（１−１）及びＨＰＭＣＡＳを有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃から１４０℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

他の実施形態では、医薬組成物は、化合物（１−１）又は医薬上許容される塩、溶媒和物（水和物を含む）、ラセミ化合物、エナンチオマー、異性体、又は同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＰＶＰである。ある実施形態では、分散体が、１：３〜１：１の重量比で化合物（１−１）及びＰＶＰを有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃から１８５℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１７９℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＨＰＭＣＡＳである。ある実施形態では、分散体は、１：３ないし１：１の重量比で化合物（１−１）及びＨＰＭＣＡＳを有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１３０℃から１４０℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１３５℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、非晶質型のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＰＶＰである。ある実施形態では、分散体は、１：３ないし１：１の重量比で化合物（１−１）及びＰＶＰを有する。ある実施形態では、少なくともいくらかのチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。他の実施形態では、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体中で均質に分散している。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。いくつかの実施形態では、固体分散体は、ガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す。いくつかの実施形態では、単一のＴｇは、１７５℃ないし１８５℃の範囲内である。他のこのような実施形態では、単一のＴｇは、約１８９℃である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体は、７５％の相対湿度、４０℃で少なくとも１か月間曝露された。いくつかの実施形態では、固体分散体は、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す。本出願の目的において「実質的に含まない」とは、結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）に関連する２シータの２１°近傍の非晶質のハローを超える回折線が存在しないことを意味するものとする。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーは、ＨＰＭＣＡＳである。ある実施形態では、分散体は、１：３ないし１：１の重量比で化合物（１−１）及びＨＰＭＣＡＳを有する。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、結晶質型のチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及び医薬上許容されるポリマーの固体分散体を含む。ある実施形態では、医薬上許容されるポリマーはＰＶＰである。ある実施形態では、分散体は、１：３ないし１：１の重量比で化合物（１−１）及びＰＶＰを有する。ある実施形態では、固体分散体は噴霧乾燥される。

本明細書に記載の本発明の固体分散体は、経口投与の際に特に有利な性質を示す。固体分散体の有利な性質の例としては、動物又はヒトにおける標準的な生物学的利用能試験で投与された場合の、一定の高いレベルの生物学的利用能が挙げられるが、これに限定されない。本発明の固体分散体としては、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物及びポリマー及び添加剤を含む固体分散体が挙げられ得る。いくつかの実施形態では、固体分散体は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の薬剤の水及び殆どの水性媒体に対する溶解度がわずかであることから、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物を添加剤と単に混合するだけでは成し遂げられない、血流中への式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の吸収を達成することができる。式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の生物学的利用能は、さまざまなｉｎ ｖｉｔｒｏ及び／又はｉｎ ｖｉｖｏ研究を用いて測定され得る。ｉｎ ｖｉｖｏ研究は、例えば、ラット、イヌ又はヒトを用いて行ってもよい。

生物学的利用能は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の血清濃度又は血漿濃度を、縦座標（Ｙ軸）に、横座標（Ｘ軸）の時間に対してプロットすることにより得られる曲線下面積（ＡＵＣ）値によって測定してもよい。次いで、固体分散体の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）のＡＵＣ値を、ポリマーを伴わない当量濃度の式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）のＡＵＣ値と比較する。いくつかの実施形態では、固体分散体は、イヌに経口投与した場合に、等量の式Ｉの結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物を含む対照組成物をイヌに静脈投与することによって提供される対応するＡＵＣ値の少なくとも０．４倍、０．５倍、０．６倍、０．８倍、１．０倍から選ばれる曲線下面積（ＡＵＣ）値を提供する。

生物学的利用能は、胃の環境及び腸の環境のｐＨ値を模したｉｎ ｖｉｔｒｏ試験により測定してもよい。測定は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の固体分散体を、１．０〜２．０の範囲のｐＨを有する水性のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地に分散させ、次いで、ｐＨを、対照ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地中で５．０及び７．０の範囲のｐＨに調整することにより行ってもよい。式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度は、ｐＨ調整に続く最初の二時間はいつでも測定してもよい。いくつかの実施形態では、固体分散体は、５．０〜７．０の範囲のｐＨの水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地中で、ポリマーを伴わない式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度に比べて、少なくとも５倍濃い濃度、少なくとも６倍濃い濃度、少なくとも７倍濃い濃度、少なくとも８倍濃い濃度、少なくとも９倍濃い濃度、又は少なくとも１０倍濃い濃度から選ばれる、式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度を提供する。

他の実施形態では、１．０〜２．０のｐＨを有する水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地中に置かれた固体分散体の式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度は、ポリマーを伴わない式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度と比べて少なくとも４０％、少なくとも５０％高く、少なくとも６０％、少なくとも７０％；少なくとも８０％である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体のポリマーはＨＰＭＣＡＳである。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体のポリマーは、ＰＶＰである。

他の実施形態では、固体分散体の式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又は非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、及びヒプロメロースフタレート及びアクリル酸エチル−メタクリル酸メチル−トリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリド共重合体からなる群から選ばれる医薬上許容されるポリマーの固体分散体の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の濃度と比べて、それぞれの固体分散体を１．０〜２．０のｐＨを有する水性ｉｎ ｖｉｔｒｏ試験培地に置いた場合に、少なくとも４０％、少なくとも５０％高く、少なくとも６０％、少なくとも７０％；少なくとも８０％である。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体のポリマーは、ＨＰＭＣＡＳである。いくつかのこのような実施形態では、固体分散体のポリマーは、ＰＶＰである。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の固体分散体は、湿度及び温度に長時間曝された場合に、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の再結晶化に対して安定性を示す。ある実施形態では、非晶質のままである式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物又はチエノトリアゾロジアゼピン化合物（１−１）の濃度は、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％及び少なくとも９９％から選ばれる。

（Ｖ．剤形）
本発明の固体分散体で用いることができる適切な剤形としては、カプセル剤、錠剤、ミニ錠剤、ビーズ剤、ビードレット剤、ペレット剤、顆粒剤、粒剤及び散剤が挙げられるが、これらに限定されない。適切な剤形はコーティングされていてもよく、例えば、腸溶コーティングでコーティングされていてもよい。適切なコーティング剤には、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリメチルアクリル酸コポリマー又はヒドロキシルプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）が含まれてもよいが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、例えば、同一試料において、本発明のチエノトリアゾロジアゼピンのある分子は、クラスターとして存在してよい一方で、ある分子は、担体と共に分子として分散しているような特定の組み合わせがなされ得る。

いくつかの実施形態では、本発明の固体分散体は、錠剤、カプレット剤又はカプセル剤として製剤化されてもよい。１つのいくつかの実施形態では、本発明の固体分散体は、ミニ錠剤又は口腔内に流し込む顆粒剤、又は構成用経口散剤として製剤化してもよい。いくつかの実施形態では、本発明の固体分散体は、他の賦形剤（例、再結晶／沈殿阻害ポリマー、矯味成分等）と組み合わせて適切な希釈剤中で分散させ、すぐに使える懸濁製剤を得ることができる。いくつかの実施形態では、本発明の固体分散体 は、小児治療のために製剤化してもよい。

ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、経口投与として製剤化される。ある実施形態では、医薬組成物は、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、又はその医薬上許容される塩、その溶媒和物（水和物を含む）、そのラセミ化合物、そのエナンチオマー、その異性体、又はその同位体標識体；及びポリマー担体を含む、本明細書に記載の様々な実施形態に従う固体分散体を含む。ある実施形態では、さらに、医薬組成物は、１以上の添加剤（例えば崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、結合剤及びフィラー）を含む。

医薬組成物で用いるための適切な医薬上許容される滑沢剤及び医薬上許容される流動促進剤の例としては、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、デンプン、タルク、三塩基性リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ポリエチレングリコール、粉末セルロース、ベヘン酸グリセリル、ステアリン酸、水素化ひまし油、モノステアリン酸グリセリル及びフマル酸ステアリルナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。

医薬組成物で用いるための適切な医薬上許容される結合剤の例としては、デンプン；セルロース及びその誘導体、例えば、微結晶性セルロース（例、ＦＭＣのＡＶＩＣＥＬ ＰＨ）、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース及びヒドロキシルプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ、例、ダウ・ケミカル製のＭＥＴＨＯＣＥＬ）；スクロース、デキストロース、コーンシロップ；多糖類；及びゼラチンが挙げられるが、これらに限定されない。

医薬組成物で用いられる適切な医薬上許容されるフィラー及び医薬上許容される希釈剤の例としては、粉砂糖、圧縮糖、デキストレート、デキストリン、デキストロース、ラクトース、マンニトール、微結晶性セルロース（ＭＣＣ）、粉末セルロース、ソルビトール、スクロース及びタルクが挙げられるが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態では、賦形剤は医薬組成物において１つ以上の機能を果たしてもよい。例えば、フィラー又は結合剤は、崩壊剤、流動促進剤、抗被着剤、滑沢剤、甘味料等であってもよい。

いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、さらに、酸化防止剤（例、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシルアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、α−トコフェロール、没食子酸プロピル及びフマル酸）、抗菌剤、酵素阻害剤、安定剤（例、マロン酸）及び／又は保存剤のような添加剤又は成分を含んでいてもよい。

一般的に、本発明の医薬組成物は、任意の適切な固形剤に製剤化してもよい。いくつかの実施形態では、本発明の固体分散体は、投与のために、例えば、カプセル剤又は錠剤のような単位剤形、又は顆粒剤又は粒剤又は散剤のような複粒子系で調合される。

ある実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載の固体分散体の様々な実施形態に従う、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）の固体分散体を含み、チエノトリアゾロジアゼピン化合物は、固体分散体において非晶質であり、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）に対して１：３ないし１：１の重量比でチエノトリアゾロジアゼピン化合物を有し；４５〜５０重量％のラクトース一水和物；３５〜４０重量％の微結晶性セルロース；４〜６重量％のクロスカルメロースナトリウム；０．８〜１．５重量％のコロイド状二酸化ケイ素；及び０．８〜１．５重量％のステアリン酸マグネシウムを有する。

（ＶＩ．用量）
ある実施形態では、本発明は、任意の適切な固形剤に製剤化されていてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、本発明に従う医薬組成物は、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲の用量である本明細書に記載の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピンの様々な実施形態の１以上を含む。ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約７０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３０ｍｇ、及び約１０ｍｇ〜約２０ｍｇからなる群から選ばれる用量である本明細書に記載の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピンの様々な実施形態の１以上を含む。ある実施形態では、本発明の医薬組成物は、約１０ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇからなる群から選ばれる用量の本明細書に記載の式（１）のチエノトリアゾロジアゼピンの様々な実施形態の１以上を含む。

いくつかの実施形態では、本発明の方法は、週一回、六日ごとに一日一回、五日ごとに一日一回、四日ごとに一日一回、三日ごとに一日一回、一日おきに一日一回、一日一回、一日二回、一日三回、一日四回及び一日五回からなる群から選ばれる剤形で、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約７．５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ及び約１５０ｍｇからなる群から選ばれる用量である本明細書に記載の式（Ｉ）のチエノトリアゾロジアゼピンの様々な実施形態の１以上を、それを必要とする被験体に投与することを含む。他の実施形態では、上述の用量又は剤形のいずれかは、一定期間ごとに減少し、又は一定期間ごとに増加する。

いくつかの実施形態では、本発明の方法は、週一回、六日ごとに一日一回、五日ごとに一日一回、四日ごとに一日一回、三日ごとに一日一回、一日おきに一日一回、一日一回、一日二回、一日三回、一日四回及び一日五回からなる群から選ばれる剤形で、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約７．５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ及び約１５０ｍｇからなる群から選ばれる用量である、化合物（１−１）、（１−２）、（１−３）、（１−４）、（１−５）、（１−６）、（１−７）、（１−８）、（１−９）、（１−１０）、（１−１１）、（１−１２）、（１−１３）、（１−１４）、（１−１５）、（１−１６）、（１−１７）及び（１−１８）からなる群から選ばれるチエノトリアゾロジアゼピンを、それを必要とする対象に投与することを含む。他の実施形態では、上述の用量又は剤形の何れかは、一定期間ごとに減少し、又は一定期間ごとに増加する。

このような単位剤形は、個々の治療目的、治療段階等に応じて一日１ないし５回投与することが好適である。ある実施形態では、剤形は、少なくとも二日間続けて少なくとも一日一回それを必要とする被験体に投与してもよい。ある実施形態では、剤形は、一日おきに少なくとも一日一回それを必要とする被験体に投与してもよい。ある実施形態では、剤形は、それを必要とする被験体に、少なくとも週ごとに投与してもよいし、均等及び／又は不均等な用量に分割して投与してもよい。ある実施形態では、剤形は、週ごとに、三日おきに及び／又は週に６回としてそれを必要とする被験体に投与してもよい。ある実施形態では、剤形は、一日おき、三日ごと、四日ごと、五日ごと、六日ごと及び／又は週ごとに分割された用量を、それを必要とする被験体に投与してもよい。ある実施形態では、剤形は、月ごとに２以上に均等に又は不均等に分割した用量を、それを必要とする被験体に投与してもよい。

例えば、カプセル剤、錠剤、ミニ錠剤、ビーズ剤、ビードレット剤、ペレット剤、顆粒剤、粒剤又は散剤で用いられる剤形はコーティングされていてもよく、例えば、腸溶コーティングでコーティングされていてもよい。適切なコーティング剤には、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリメチルアクリル酸共重合体又はヒドロキシルプロピルメチルセルロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ）が含まれてもよいが、これらに限定されない。

（ＶＩＩ．プロセス）
本明細書で開示されたチエノトリアゾロジアゼピン化合物は、遊離塩基として存在してもよく、又は酸付加塩として存在してもよく、それらは、米国特許出願公開番号２０１０／０２８６１２７号（その全体が参照により本明細書に又は本出願に組み込まれる）に記載の手順に従って得ることができる。本発明のチエノトリアゾロジアゼピン化合物の個々のエナンチオマー及びジアステレオマーは、不斉中心又は立体中心を含む市販の出発原料からの合成により、或いはラセミ混合物を調製し、続いて当業者によく知られている方法で分割することにより調製することができる。

いくつかの実施形態では、式（１）のチエノトリアゾロジアゼピンの製剤に関する１以上の様々な実施形態は、溶媒エバポレーション法により調製される。ある実施形態では、溶媒エバポレーション法は、揮発性溶媒中に式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物、担体を溶解し、次いでその揮発性溶媒を留去させることを含む。ある実施形態では、揮発性溶媒は、１以上の賦形剤であってもよい。ある実施形態では、１以上の賦形剤としては、固着防止剤、不活性フィラー、界面活性剤、湿潤剤、ｐＨ調整剤及び添加剤が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、賦形剤は、揮発性溶媒中に、溶解してもよいし、或いは懸濁状態又は膨潤状態にしてもよい。

ある実施形態では、本発明に従う固体分散体の調製には、揮発性溶媒中に懸濁した１以上の賦形剤を乾燥させることが含まれる。ある実施形態では、乾燥には、真空乾燥、低温での揮発性溶媒の低速留去、ロータリーエバポレーターの使用、噴霧乾燥、噴霧造粒、凍結乾燥、又は超臨界流体の使用が含まれる。

ある実施形態では、式（１）に従うチエノトリアゾロジアゼピン組成物の製剤の噴霧乾燥調製は、小滴に組成物の懸濁液又は溶液を噴霧して、続いて、製剤から溶媒を迅速除去することを含むことが用いられる。ある実施形態では、本発明に従う製剤の調製は、溶媒中の組成物の溶液又は懸濁液を、適切な化学的に及び／又は物理的に不活性なフィラー（例えば、ラクトース又はマンニトール）に噴霧する噴霧造粒が含まれる。ある実施形態では、組成物の溶液又は懸濁液の噴霧造粒は、二方向ノズル又は三方向ノズルを介して達成される。

一般的に、化合物の半最大阻害濃度（ＩＣ−５０値）は、生物学的機能又は生化学的機能の阻害における化合物の有効性の尺度である。したがって、ＩＣ−５０値は、特定の薬剤又は任意の化学物質が所定の生物学的プロセス方法を半分（５０％）阻害するためにどの程度必要かを示す定量的な尺度とみなすことができる。しかしながら、時として、ＧＩ−５０は、５０％増殖阻害をもたらすの濃度の値を表すために用いられる。ＧＩ−５０の使用は、ゼロ時間で細胞数の補正がなされたことを示している。ＧＩ−５０値を計算する１つの式の例は、１００ｘ（Ｔ−Ｔ０）／（Ｃ−Ｔ０）＝５０（式中、Ｔは、試験薬剤の曝露４８時間の期間の後の試験ウェルの光学濃度である。）である場合に、試験化合物の濃度がＴであるとしてＧＩ−５０を定義する（例えば；Ｔ０は、ゼロ時間での試験ウェルの光学濃度である。）。

本発明は、以下の非限定的な実施例で説明される。

（ＶＩＩＩ．実施例）
本発明は、以下の非限定的な実施例で説明される。

実施例１：化合物（１−１）の固体分散体のｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニング
１０種の固体分散体は、化合物（１−１）、並びにヒプロメロースアセテートスクシナート（ＨＰＭＣＡＳ−Ｍ）、ヒプロメロースフタレート（ＨＰＭＣＰ−ＨＰ５５）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ＰＶＰ−酢酸ビニル（ＰＶＰ−ＶＡ）、及びオイドラギットＬ１００−５５を含む５種のポリマーのうち１種を用い、各ポリマーに対して２５％及び５０％両方の化合物（１−１）を加えて調製した。固体分散体は、噴霧乾燥し、続いて低温コンベクションオーブン内で二次乾燥することを用いる溶媒エバポレーション法により調製された。それぞれの固体分散体のパフォーマンスは、薬剤の総量と、長時間溶液中に存在するフリーの薬剤の量の両方で測定する非沈降溶解パフォーマンス試験によって評価した。非沈降溶解が選択されたのは、低い溶解性の化合物のｉｎ ｖｉｖｏ条件を最もよく表現するためである。この試験は、ｉｎ ｖｉｖｏ条件を模倣して、分散体を試験培地に導入してからおよそ３０ないし４０分後の胃のｐＨ（０．１Ｎ ＮａＣｌ， ｐＨ １．０）から腸内のｐＨ（ＦａＦＳＳＩＦ， ｐＨ ６．５）への分散体の「胃の移動」を含む［ＦａＦＳＳＩＦは絶食状態の腸内を模した溶液（Ｆａｓｔｅｄ Ｓｔａｔｅ Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｆｌｕｉｄ）であり、３ｍＭタウロコール酸ナトリウム、０．７５ｍＭレシチン、０．１７４ｇ ＮａＯＨペレット、１．９７７ｇ ＮａＨ_２ＰＯ_４・Ｈ_２Ｏ、３．０９３ｇ ＮａＣｌ及び精製水５００ｍＬからなる］。溶解した薬剤の量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法及びアジレント１１００シリーズＨＰＬＣを用いて定量化した。製剤の溶解プロファイル（図１Ａ−１Ｊ）は、同じ溶媒中の製剤化していない化合物と比較して全ての分散体候補中の薬剤の溶解度が大きく増加したことを示した。固体分散体の中で、ＰＶＰにおける２５％化合物（１−１）、ＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける２５％化合物（１−１）、及びＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける５０％化合物（１−１）の分散体は、腸内のｐＨで放出されたフリーの薬剤のレベルが高まったという知見に基づけば、製剤化されていない化合物に比べて経口吸収を高める最も有望な候補である。

実施例２：化合物（１−１）の固体分散体のｉｎ ｖｉｖｏスクリーニング
三つの最も有望な化合物（１−１）の固体分散体、即ち、ＰＶＰにおける２５％化合物（１−１）、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける２５％化合物（１−１）、及びＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける５０％化合物（１−１）の分散体を、ｉｎ ｖｉｖｏ研究のためにより大きなスケールで調製した。それぞれの製剤を、実施例１に記載のｉｎ ｖｉｔｒｏ溶解試験で評価した。これらの分散体が非晶質であること及び均質であること両方を確認するために、それぞれの分散体を、粉末Ｘ線回析（ＰＸＲＤ）及び変調示差走査熱量計（ｍＤＳＣ）で評価した。さらに、それぞれの分散体のガラス転移温度（Ｔｇ）に対する水の影響を理解するために、予め設定相対湿度（即ち、２５％、５０％及び７５％ＲＨ）で少なくとも１８時間平衡化した試料についてｍＤＳＣを実行した（水は、固体分散体に対して可塑剤として作用することができ、活性化合物又はポリマーによる系の吸湿性は、これらの系による水の取り込み量に影響し得る。）。

非沈降溶解の結果（図２Ａ〜２Ｃ）は、実施例１における分散体で見られるものに匹敵した。ＰＸＲＤ結果（図３）は、分散体の何れでも結晶質の化合物の存在を示さず、ｍＤＳＣ結果（図４Ａ〜４Ｃ）は、それぞれの分散体について単一のガラス転移温度（Ｔｇ）であり、それぞれ分散体が均質であることを示した。Ｘ線回折計はＢｒｕｋｅｒ Ｄ−２ Ｐｈａｓｅｒであった。それぞれについて、Ｔｇ及び相対湿度の間で逆相関が観察された（図５）。とりわけ、７５％ＲＨで平衡化したＰＶＰ固体分散体における２５％化合物（１−１）については、２つのＴｇが存在し、相分離が生じていることを示した。また、この分散体は、７５％ＲＨでの溶融を示し、ＲＨの平衡化時に結晶化が起きることを示唆した（図６）。この発見は、ＰＶＰ分散体における２５％化合物（１−１）が、ＨＰＭＣＡＳ−Ｍ分散体より不安定であってもよいことを示唆する。

３種の分散体の生物学的利用能を評価するために、雄のビーグル犬のグループ（グループ毎に３頭）に、３ｍｇ／ｋｇの用量の化合物（１−１）の固体分散体の水性懸濁液を経口強制投与し、或いは水：エタノール：ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）４００（６０：２０：２０）に１ｍｇ／ｋｇの用量の化合物（１−１）を溶解して橈側皮静脈に静脈内ボーラスとして投与した。血液試料を、静脈内投与の０（投与前）、５、１５及び３０分後、並びに１、２、４、８、１２及び２４時間後に、経口強制投与の０（投与前）、１５及び３０分後、並びに１、２、４、８、１２及び２４時間後に各動物の頸静脈から回収した。それぞれ試料に存在する化合物（１−１）の量を、定量下限０．５ｎｇ／ｍＬの適切なＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いて検出した。血漿濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）は、末端排出相を無限に外挿することなく最終の測定可能濃度までの直線台形公式の使用により決定した。排出半減期（ｔ_１／２）は、対数の濃度時間曲線の末端直線部分の最小二乗回帰分析により計算した。最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに対する時間（ｔ_ｍａｘ）を、血漿濃度データから直接得た。経口生物学的利用能（Ｆ）を、経口投与後の投与標準化ＡＵＣを静脈投与後の投与標準化ＡＵＣで割って計算し、百分率（％）として報告した。下記表１でまとめた結果から、ＰＶＰにおける２５％化合物（１−１）、ＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける２５％化合物（１−１）、並びにＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける５０％化合物（１−１）の固体分散体のそれぞれ５８％、４９％及び７４％の平均経口生物学的利用能が得られた。

表１：イヌへの経口（ｐｏ）投与及び静脈内（ｉｖ）投与後の化合物（１−１）の薬物動態パラメーター（値は３頭のイヌからの平均である）

ＡＵＣ：血漿濃度時間曲線下面積；Ｃ_ｍａｘ：最大血漿濃度；Ｆ：生物学的利用能；ＨＰＭＣＡＳ：ヒプロメロースアセテートナトリウム；ＩＶ：静脈内；ＰＥＧ：ポリエチレングリコン；ＰＯ；ｐｅｒ ｏｓ、経口；ＰＶＰ：ポリビニルピロリドン；ｔ_ｍａｘ：Ｃ_ｍａｘの時間；ｔ_１／２：血漿排出半減期

実施例３：化合物（１−１）の固体分散体を含むカプセルの調製及び臨床使用
１０ｍｇ力価のゼラチンカプセルを、血液系悪性腫瘍を患う患者における初期臨床研究のために調製した。実施例１及び２に記載された化合物（１−１）の固体分散体のｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ試験の結果に基づいて、ＨＰＭＣＡＳ−Ｍにおける５０％化合物（１−１）の固体分散体が、カプセル開発のために選択された。サイズ３のゼラチンハードカプセル中で１９０ｍｇの充填量を目標にカプセル開発を開始した。これは、この構造が、医薬組成物を維持させることができる一方で、より大きなサイズのカプセルを充填することで潜在的にカプセル力価を増加させることができるためである。経験に基づき、異なる量の崩壊剤を伴い且つ湿潤剤を伴って及び伴わずに、４種のカプセル製剤を設計した。全ての４種の製剤で同様の崩壊試験及び溶解試験の結果を示したため、最も単純な製剤（湿潤剤及び最小崩壊剤を伴わないもの）が、製造の観点から選択された。製造プロセスの開発及びスケールアップの研究が行われ、固体分散体の噴霧乾燥プロセス及び乾燥後の時間；混合パラメーター；目的の嵩密度のおよそ０．６０ｇ／ｃｃを達成するための混合物の乾式圧縮造粒及び製粉；及びカプセルの充填条件を確認した。

結晶質の化合物（１−１）及びポリマーのヒプロメロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ−Ｍ）を、アセトンに溶解し、噴霧乾燥し、装填する５０％化合物（１−１）を含む固体分散体中間体（ＳＤＩ）顆粒剤を製造した。ＳＤＩは、非晶質を示すＰＸＲＤ分析、及び均質を示すｍＤＳＣ分析（即ち、周囲条件下で単一のＴｇ）により示された。ＨＰＭＣＡＳ−Ｍ固体分散体（１０００ｇ）における５０％化合物（１−１）、及び賦形剤（微結晶性セルロースフィラー結合剤（４４２８ｇ）、クロスカルメロースナトリウム崩壊剤（６３６ｇ）、コロイド状二酸化ケイ素分散剤／滑沢剤１５６ｇ）、ステアリン酸マグネシウム分散剤／滑沢剤（１５６ｇ）及びラクトース一水和物フィラー（５３６４ｇ）を含む）が、段階的にＶ−ブレンダーで配合された。次いで、混合物を、圧縮し、顆粒化し、およそ０．６ｇ／ｍＬの嵩密度を得た。混合物を、自動充填機を用いてサイズ３のゼラチンハードカプセル（目的の充填量：１９０ｍｇ）に分配し、出来上がったカプセルを、カプセル研磨機を用いて研磨した。

薬物動態評価を、ＨＰＭＣＡＳにおける５０％化合物（１−１）の固体分散体を含む１０ｍｇのカプセルを経口投与した後に行い、結果を、化合物（１−１）のオイドラギット固体分散体を含む４ｘ１０ｍｇのカプセルを健康なボランティアに経口投与した後に行われた薬物動態評価と比較した。

２種の医薬組成物の比較を下記の表２Ａ及び２Ｂに示す。オイドラギット製剤は、以前に、２００９年１月８日公開の米国特許出願２００９／００１２０６４Ａ１の実施例５に記載されていた。その出願には、水及びエタノールの混合液中で、式（Ａ）のチエノトリアゾロジアゼピン、及びアンモニオメタクリレート共重合体ｔｙｐｅＢ（オイドラギットＲＳ）、メタクリル酸共重合体ｔｙｐｅＣ（オイドラギットＬ１００−５５）、タルク及びケイ酸アルミン酸マグネシウムを含むコーティング賦形剤を溶解すること及び／又は分散することにより、オイドラギット固体分散体製剤を調製することが記載されていた。次いでこの不均質混合物を、遠心流動床造粒機を用いて、微結晶性セルロース球（Ｎｏｎｐａｒｅｉｌ１０１，Ｆｒｅｕｎｄ）に塗布し、顆粒剤を製造し、サイズ２のヒドロキシプロピルメチルセルロースカプセルに分配した。

両方の臨床研究において、化合物（１−１）の血液レベルを、有効なＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を用いて決定し、薬物動態分析を、カプセル投与後２４時間にわたる様々な時点で測定した化合物（１−１）の血漿濃度に基づいて行った。以下の表３にまとめた結果は、ＨＰＭＣＡＳ−Ｍ固体分散体製剤が、ヒトにおいて、ＡＵＣに基づくオイドラギット固体分散体製剤よりも３倍以上高い生物学的利用能を有することを示した（９２４＊４／１１４０，投与された用量の差に対して調整）。さらに、観察されたＴ_ｍａｘに基づけば、ＨＰＭＣＡＳ製剤は、オイドラギット製剤と比較してより急速に吸収する（１時間のＴ_ｍａｘに対して４〜６時間）。ＨＰＭＣＡＳ−Ｍの固体分散体製剤を用いた全身曝露における顕著な改善は予想外であった。

表２Ａ：臨床使用のための化合物（１−１）の固体分散体カプセル
化合物（１−１）の５０％ＨＰＭＣＡＳの固体分散体を含む医薬組成物：１０ｍｇ力価，サイズ３のゼラチンハードカプセル

表２Ｂ：化合物（１−１）のオイドラギットＬ１００−５５固体分散体を含む医薬組成物：１０ｍｇ力価，サイズ２のゼラチンハードカプセル

表３：ヒトに対する化合物（１−１）の固体分散体の経口投与後の薬物動態パラメーター

ＡＵＣ_{０−２４ｈ}：２４時間にわたるＯＴＸ０１５血漿濃度対時間曲線下面積
Ｃ_ｍａｘ：血漿中の最大濃度
ｈｒ：時間
ＨＰＭＣＡＳ：ヒプロメロースアセテートスクシナート
ｍＬ：ミリリッター
ｎｇ：ナノグラム
ＰＯ：ｐｅｒ ｏｓ，経口
Ｔ_ｍａｘ：Ｃ_ｍａｘの時間

実施例４．ラットにおける経口曝露
化合物（１−１）の固体分散体の３製剤の経口生物学的利用能をラットで決定した。選択された３種の分散体は、ＰＶＰにおける化合物（１−１）の２５％分散体、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の２５％分散体、及びＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の５０％分散体である。研究に用いた動物は、トゥルク大学（フィンランド）の中央動物実験室から入手した特定の病原体を有さない（ＳＰＦ）Ｈｓｄ：Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ Ｒａｔであった。ラットは、もともとＨａｒｌａｎ（オランダ）から購入された。ラットは１０週齢の雌だった。１２匹のラットが研究に用いられた。動物を、ポリカーボネート製のＭａｋｒｏｌｏｎ ＩＩケージに入れた（１ケージあたり３匹の動物）。動物室の温度は２１±３℃であり、動物室の相対湿度は５５±１５％であり、動物室の照明は人工的であり、１２時間明暗期間のサイクルとした（１８：００時と０６：００時の間の暗期）。Ａｓｐｅｎ ｃｈｉｐ（Ｔａｐｖｅｉ Ｏｙ，エストニア）を寝床として使用し、寝床を少なくとも週一回交換した。食事及び水を動物に投与する前に供給したが、投与後はじめの２時間で除去した。

ＰＶＰにおける化合物（１−１）の２５％分散体、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の２５％分散体、及びＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の５０％分散体を含む経口投与液剤は、適切な量を用いた分散体を入れた容器に予め計算された量の滅菌注射用水を加えて調製し、化合物（１−１）を０．７５ｍｇ／ｍＬの濃度とした。経口投与液剤は、各投与の２０秒前に渦流混合した。０．２５ｍｇ／ｍＬの化合物（１−１）を含む静脈内投与用の投与溶液は、４ｍＬの平均分子量４００Ｄａ（ＰＥＧ４００）のポリエチレングリコール、４ｍＬのエタノール（９６％純度）及び１２ｍＬの滅菌注射用水を含む混合物に５ｍｇの化合物（１−１）を溶解することにより調製した。ＰＶＰにおける化合物（１−１）の２５％分散体を含む投与溶液を、水の添加後３０分以内に使用した。ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の２５％分散体、及びＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の５０％分散体を含む投与溶液を、水の添加後６０分以内に使用した。４ｍＬ／ｋｇの用量容積を用いて、静脈内投与のための１ｍｇ／ｋｇ及び経口投与のための３ｍｇ／ｋｇの化合物（１−１）の用量レベルを得た。用量設定を表４に示す。

表４．ラットの経口曝露研究のための投与設定

投与後０．２５、０．５、１、２、４、８、１２及び２４時間の時点で、５μＬのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）溶液を含むエッペンドルフチューブに、およそ５０μＬの血液試料を採取した。それぞれの試料を前述の時点から５分以内の時間幅で採取した。分析のために、それぞれの試料から、２０μＬの血漿を得、ドライアイスの温度で保存した。化合物（１−１）の各試料の濃度分析を、定量下限０．５ｎｇ／ｍＬの有効な液体クロマトグラフ−タンデム型質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）法を用いて行った。

薬物動態パラメーターを、標準的なノンコンパーメント法を用いてＰｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ ｐａｃｋａｇｅ（ｖｅｒｓｉｏｎ ６．２．１，ファーサイト社，米国カリフォルニア州）で計算した。排出相半減期（ｔ_１／２）を、濃度時間対数曲線の末端の線形部の最小二乗回帰分析により計算した。血漿濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を、最終測定可能濃度までの線形台形公式を用い、その後、無限に末端排出相の外挿を用いて決定した。化合物がコンパートメント又は全身に滞留している時間の平均量を示す平均滞留時間（ＭＲＴ）を、薬剤濃度プロファイルを無限に外挿することにより計算した。最大血漿濃度（Ｃ_ｍａｘ）及びＣ_ｍａｘに対する時間（ｔ_ｍａｘ）を血漿濃度データから直接導いた。試験的な経口生物学的利用能（Ｆ）を、経口投与後の用量標準化ＡＵＣを静脈内投与後の用量標準化ＡＵＣで割って計算し（即ち、Ｆ＝（ＡＵＣ（経口）／Ｄｏｓｅ（経口））／（ＡＵＣ（静脈内）／Ｄｏｓｅ（静脈内）））、百分率（％）として報告する。

薬物動態パラメーターを表５に示す。時間プロットに対する血漿濃度を図７及び８に示す。

表５．経口投与及び静脈内投与後の化合物（１−１）の薬物動態パラメーター。値は三匹の動物の平均である。

実施例５．噴霧乾燥分散体の調製
化合物（１−１）の噴霧乾燥分散体を、５種の選択されたポリマー（ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧ（信越化学株式会社）、ＨＰＭＣＰ−ＨＰ５５（信越化学株式会社）、ＰＶＰ（ＩＳＰ、アシュランド社の一部門）、ＰＶＰ−ＶＡ（ＢＡＳＦ社）、及びオイドラギットＬ１００−５５（エボニック インダストリーズＡＧ））を用いて調製した。全ての噴霧乾燥溶液を、各ポリマーに対して２５重量％及び５０重量％で調製した。全ての溶液は、エタノール中で調製したＰＶＰ溶液を除いて、アセトン中で調製した。それぞれの溶液において、１．０ｇの固体（ポリマー及び化合物（１−１））を１０ｇの溶媒中で調製した。溶液を１．５ｍｍノズル及びＢｕｃｈｉ Ｂ−２９５，Ｐ−００２濃縮装置を備えたＢｕｃｈｉ Ｂ−２９０，ＰＥ−０２４スプレードライヤーを用いて噴霧乾燥した。スプレードライヤーのノズル圧力を８０ｐｓｉに設定し、目標吹出温度を４０℃に設定し、チラー温度を−２０℃に設定し、ポンプ速度を１００％に設定し、アスピレーターを１００％に設定した。噴霧乾燥後、固体分散体を回収し、低温コンベクションオーブン内で終夜乾燥し、残留溶媒を除去した。

実施例６：湿度及び温度に対する安定性

ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の噴霧乾燥分散体を、高温で水分に曝すことにより安定性を評価した。相対湿度に応じたガラス転移温度（Ｔｇ）を、１、２及び３カ月間において７５％相対湿度、４０℃で決定した。噴霧乾燥分散体は、量産品の包装を模してＨＤＰＥ製のボトルに入れたＬＤＰＥ製の袋の中で保管した。データを表６にまとめる。ゼロ時間でＴｇは１３４℃であり、１カ月でＴｇは１３４℃であり、２カ月でＴｇは１３５℃であり、３カ月でＴｇは１３４℃であった。それぞれの測定で単一の変曲点のみが観察された。また、各試料でＸ線回析パターンを得た。図９は、安定性試験のゼロ時間でのＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。図１０、１１及び１２は、ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。ＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の噴霧乾燥分散体を、高温で水分に曝すことにより安定性を評価した。相対湿度に応じたガラス転移温度（Ｔｇ）を、１、２及び３カ月間において７５％相対湿度、４０℃で決定した。噴霧乾燥分散体は、量産品の包装を模してＨＤＰＥ製のボトルに入れたＬＤＰＥ製の袋の中で保管した。データを表６にまとめる。ゼロ時間でＴｇは１３４℃であり、１カ月でＴｇは１３４℃であり、２カ月でＴｇは１３５℃であり、３カ月でＴｇは１３４℃であった。それぞれの測定で単一の変曲点のみが観察された。また、各試料でＸ線回析パターンを得た。図９は、安定性試験のゼロ時間でのＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。図１０、１１及び１２は、相対湿度７５％、４０℃で曝露してから１か月後、２か月後、３か月後それぞれでのＨＰＭＣＡＳ−ＭＧにおける化合物（１−１）の固体分散体の粉末Ｘ線回析プロファイルを説明する。そのパターンは、化合物（１−１）に関連するいかなる回折線も示さなかった。

実施例７．ＮＳＣＬＣ細胞株のＩｎ ｖｉｔｒｏ治療
５つの樹立ＮＳＣＬＣ細胞株（即ち、Ｈ２２２８、Ｈ３１２２、Ａ５４９、ＨＯＰ６２及びＨＯＰ９２）を、増加する用量の化合物（１−１）（ＯｎｃｏＥｔｈｉｘ ＳＡ、スイス）にさらした。細胞生存率の効果を７２時間曝した後のＭＴＴアッセイで測定した。増殖阻害（ＧＩ）５０％値を、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウエアで測定した。タンパク質レベルを、市販の抗体を用いてウエスタンブロットで分析した。ＲＮＡをＱｉａｇｅｎ ＲＮＡＥａｓｙキットで抽出し、製造業者の説明書に従ってＲＴ−ＰＣＲキットに対してＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔ Ｆｉｒｓｔ−Ｓｔｒａｎｄ合成系を用いて逆転写した。ＲＴ−ＰＣＲを、ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＲ ＳｙｓｔｅｍでＦａｓｔ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを用いて行った。

化合物（１−１）は、Ｈ２２２８及びＨ３１２２細胞において、それぞれ６２９及び６２７ｎＭのＧＩ５０値で７２時間の曝露後のＥＭＬ４−ＡＬＫ陽性ＮＳＣＬＣ細胞で共に抗増殖効果を示した。興味深いことに、化合物（１−１）は、４３２ｎＭのＧＩ５０でＥＭＬ４−ＡＬＫ陰性（Ａ４９）細胞株において活性であった。ＢＲＤ４／３／２、ｃ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２、ｐ２１及びサイクリンＤ１の発現は、全ての細胞株におけるタンパク質及びｍＲＮＡ量で特徴づけられた。化合物（１−１）の感受性及び耐性の株は、両方、前述のタンパク質に対して同様の基礎発現量を示した。ＥＭＬ４−ＡＬＫ変異体１及び３は、それぞれ、Ｈ３１２２及びＨ２２２８細胞において同定された。抗増殖活性の細胞シグナル伝達経路の評価は、化合物（１−１）がＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露の２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導することを示した。この経路は、クリゾチニブ耐性細胞株において頻繁にアップレギュレートされるＡＬＫの重要な下流エフェクターである。興味深いことに、Ｃ−ＭＹＣタンパク質及びｍＲＮＡ量は、２５化合物（１−１）により変化しないようであった。ＥＭＬ４−ＡＬＫ−陽性Ｈ３１２２細胞は、化合物（１−１）での治療後、Ｎ−ＭＹＣのｍＲＮＡ量のダウンレギュレーションを示した。

これらの結果は、ゲノムのＡＬＫ変化を有するＮＳＣＬＣ細胞株が、ＡＬＫ陽性ＮＳＣＬＣ患者における抗がん剤としてのその臨床開発を示唆する下流のシグナル伝達経路の阻害と共に見出される明白な抗増殖効果を伴う化合物（１−１）によるＢＥＴ−ＢＲＤ阻害に対する影響を受けることを示す。

実施例８
物質及び方法。ＫＲＡＳ、ＬＫＢ１、ＴＰ５３及びＡＬＫに対する異なる癌遺伝子突然変異を有する５つの樹立ＮＳＣＬＣ細胞株、ＨＯＰ６２、ＨＯＰ９２、Ａ５４９、Ｈ２２２８、及びＨ３１２２（図１９）を、増加する用量の化合物（１−１）（ＯｎｃｏＥｔｈｉｘ ＳＡ、スイス）に７２時間曝し、細胞増殖をＭＴＴアッセイで評価した。結果は、三回行われた少なくとも３つの独立した実験の平均±９５％ＣＩを示す。タンパク質レベルを、市販の抗体を用いてウエスタンブロットにより分析した。細胞周期解析のために、細胞をＰＩで染色し、治療２４時間後にＦＡＣＳｃａｎフローサイトメーターを用いて解析した。ＲＴ−ＰＣＲを、ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＲシステムでＦａｓｔ ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを用いて行った。結果は、Ａｎｏｖａ続いてダネット多重比較検定を用いる少なくとも２つの独立した実験の平均±ＳＤ（^＊対照細胞（０．１％ＤＭＳＯ）に対してｐ＜０．０５）を示す。同時の化合物（１−１）の組み合わせ研究を、増加する用量の化合物（１−１）単独又はエベロリムス又はクリゾチニブとの組み合わせに４８時間曝した細胞株で行い、Ｃｈｏｕ ＆ Ｔａｌａｌａｙ法を用いて評価した。コンビネーションインデックス（ＣＩ）を、ＣａｌｃｕＳｙｎソフトウエアを用いて中央値効果プロット解析により測定した（ＣＩ＜１相乗作用、ＣＩ＝１相加効果及びＣＩ＞１拮抗効果）。結果は、３回行った３つの独立した実験の中央値及び範囲を示す。

Ｉｎ ｖｉｖｏ研究：５．１０^６Ｈ３１２２細胞を雄の無胸腺ＮＭＲＩヌードマウスの脇腹に注射した。腫瘍容積が１００ｍｍ^３に達する場合にマウスを３つのグループ（８匹のマウス／グループ）に割り付けた；ビヒクル（ＰＢＳ、一日一回、経口連続）、化合物（１−１）（５０ｍｇ／ｋｇ／２日、強制飼養、連続）、又はクリゾチニブ（２５ｍｇ／ｋｇ／日、強制飼養、連続）。

結果。化合物（１−１）は、５つのうち４つでＮＳＣＬＣ細胞株（そのうち２つは融合タンパク質ＥＭＬ４−ＡＬＫ＋を有する）において細胞静止作用を示す。Ａ５４９細胞おける、ＫＲＡＳ及びＬＫＢ１遺伝子の同時の突然変異は、化合物（１−１）の影響を排除する。我々の細胞株パネルにおける、０．１〜０．７μＭの範囲内の化合物（１−１）に７２時間曝した後のＧＩ５０値は、化合物（１−１）がＮＳＣＬＣ細胞で広く活性であることを示す（図１３）。また、化合物（１−１）での治療は、Ｓ相における細胞の割合の減少をもたらした（図１４）。ＮＳＣＬＣ細胞株において、タンパク質及びｍＲＮＡ量でのＢＲＤ２／３／４、Ｃ−ＭＹＣ、Ｎ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２又はＰ２１及びサイクリンＤ１の発現特性は、これらのタンパク質の基礎レベルと化合物（１−１）の感受性の間でいかなる相関も示さない（図１５Ａ及び１５Ｂ）。すなわち、化合物（１−１）の感受性は、ＮＳＣＬＣ細胞におけるＢＲＤｓ、Ｃ−ＭＹＣ、Ｎ−ＭＹＣ、ＢＣＬ２又はＰ２１の基礎レベルと相関しない。化合物（１−１）感受性細胞株において、我々は、４時間後に、ＨＯＰ９２細胞におけるＣ−ＭＹＣのｍＲＮＡ量及びタンパク質レベル、及びＨＯＰ６２及びＨ３１２２細胞におけるＮ−ＭＹＣのｍＲＮＡ量の急速なダウンレギュレーションを観察し、それは２４時間後にも維持されている（図１６Ａ〜１６Ｃ）。ＡＬＫ＋阻害剤クリゾチニブと組み合わされた化合物（１−１）は、Ｈ２２２８細胞において４８時間の同時曝露後の相加効果（ＣＩ＝０．９）、及びＨＯＰ６２、ＨＯＰ９２、Ａ５４９及びＨ２２２８細胞株においてエベロリムスとの相加／相乗効果を有する（図１７）。Ｈ３１２２担癌マウスにおいて、化合物（１−１）は、クリゾチニブ、ＥＭＬ４−ＡＬＫ阻害剤と同程度に腫瘍増殖を阻害した（図１８）。我々のデータは、ＥＭＬ４−ＡＬＫ融合遺伝子又はＫＲＡＳ突然変異を有するものを含むＳＮＣＬＣ細胞株が、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏで化合物（１−１）のＢＥＴ阻害に感受性であることを示す。

その広い発明の概念から逸脱することなく上記に示され且つ記載された代表的な実施形態で、変更がなされもよいということが当業者によって理解されるであろう。従って、本発明は、示され且つ記載された代表的な実施形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲によって定義された本発明の精神及び範囲内で変更を網羅することを意図していると理解される。例えば、代表的な実施形態の具体的な特徴は、特許請求の範囲に係る発明の一部であってもよいし、或いは一部でなくてもよく、開示された実施形態の特徴を組み合わせてもよい。具体的に本明細書に記載されていない限り、用語「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、１つの要素に限定されるものではなく、その代わりに、「少なくとも１つ」を意味するものとして解釈されるべきである。

本発明の図及び詳細な説明の少なくとも一部は、本発明の明確な理解に関連する要素に焦点を合わせるために簡略化され、その一方で、明確にするため、当業者が発明の一部を含んでいてもよいと理解するであろう他の要素が除外されていると理解される。しかしながら、これらの要素が当技術分野でよく知られていること、そして、本発明をより理解することを必ずしも容易にしないことを理由として、そのような要素の説明は本明細書で提供されない。

さらに、方法が本明細書に記載された工程の特定の順序に依存しないという範囲のために、工程の特定の順序が特許請求の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本発明に方法に関する請求項は、記載の順序のこれらの工程の実施に限定するべきではなく、当業者は、工程を変えることができ、本発明の精神及び範囲に留まると容易に理解することができる。

Claims (25)

1. 式（１）のチエノトリアゾロジアゼピン化合物若しくはその医薬上許容される塩又はその水和物若しくはその溶媒和物である医薬上許容される量の化合物を患者に投与する工程を含む哺乳動物における非小細胞肺癌の治療方法：
   
   ［式中、Ｒ^１は、１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ^２は、水素原子；ハロゲン原子；又はハロゲン原子又はヒドロキシル基で置換されていてもよい１〜４の炭素数を有するアルキルであり、Ｒ^３は、ハロゲン原子；ハロゲン原子、１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ又はシアノで置換されていてもよいフェニル；−ＮＲ^５−（ＣＨ_２）_ｍ−Ｒ^６（式中、Ｒ^５は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ^６は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）；又は−ＮＲ^７−ＣＯ−（ＣＨ_２）_ｎ−Ｒ^８（式中、Ｒ^７は、水素原子又は１〜４の炭素数を有するアルキルであり、ｎは、０〜２の整数であり、Ｒ^８は、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）であり、Ｒ^４は、−（ＣＨ_２）_ａ−ＣＯ−ＮＨ−Ｒ^９（式中、ａは、１〜４の整数であり、Ｒ^９は、１〜４の炭素数を有するアルキル；１〜４の炭素数を有するヒドロキシアルキル；１〜４の炭素数を有するアルコキシ；又は１〜４の炭素数を有するアルキル、１〜４の炭素数を有するアルコキシ、アミノ又はヒドロキシル基で置換されていてもよいフェニル又はピリジルである。）又は−（ＣＨ_２）_ｂ−ＣＯＯＲ_１０（式中、ｂは、１〜４の整数であり、Ｒ^１０は、１〜４の炭素数を有するアルキルである。）である。］。
2. 式Ｉで表されるチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、（ｉ）（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド又はその二水和物、（ｉｉ）メチル（Ｓ）−｛４−（３’−シアノビフェニル−４−イル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテート、（ｉｉｉ）メチル（Ｓ）−｛２，３，９−トリメチル−４−（４−フェニルアミノフェニル）−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテート；及び（ｉｖ）メチル（Ｓ）−｛２，３，９−トリメチル−４−［４−（３−フェニルプロピオニルアミノ）フェニル］−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ−］［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル｝アセテートからなる群から選ばれる請求項１に記載の方法。
3. 式Ｉで表されるチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，−４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド二水和物である請求項１又は２に記載の方法。
4. 式Ｉで表されるチエノトリアゾロジアゼピン化合物が、（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，−４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミドである請求項１又は２に記載の方法。
5. チエノトリアゾロジアゼピン化合物が、固体分散体として形成する請求項１〜４の何れか１項に記載の方法。
6. 固体分散体が、式（１）の非晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物及びその医薬上許容される塩又はその水和物；及び医薬上許容されるポリマーを含む請求項５に記載の方法。
7. 固体分散体が、式（１）の結晶質チエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す請求項５又は６に記載の方法。
8. 固体分散体が、（Ｓ）−２−［４−（４−クロロフェニル）−２，３，９−トリメチル−６Ｈ−チエノ［３，２−ｆ］［１，２，−４］トリアゾロ［４，３−ａ］［１，４］ジアゼピン−６−イル］−Ｎ−（４−ヒドロキシフェニル）アセトアミド二水和物の結晶質のチエノトリアゾロジアゼピン化合物に関連する回折線を実質的に含まない粉末Ｘ線回折パターンを示す請求項５又は６に記載の方法。
9. 医薬上許容されるポリマーが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（ＨＰＭＣＡＳ）に対して、１：３ないし１：１の重量比で、チエノトリアゾロジアゼピン化合物を有するヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネートである請求項６〜８の何れか１項に記載の方法。
10. 固体分散体が、約１３０℃ないし約１４０℃の範囲内でガラス転移温度（Ｔｇ）の単一の変曲点を示す請求項５〜９の何れか１項に記載の方法。
11. さらにｍＴＯＲ阻害剤を患者に投与することを含む請求項１〜１０の何れか１項に記載の方法。
12. ｍＴＯＲ阻害剤が、エベロリムスである請求項１１に記載の方法。
13. さらにＡＬＫ阻害剤を患者に投与することを含む請求項１〜１２の何れか１項に記載の方法。
14. ＡＬＫ阻害剤が、クリゾチニブである請求項１３に記載の方法。
15. 非小細胞肺癌が、ＥＭＬ４−ＡＬＫ陽性である請求項１〜１４の何れか１項に記載の方法。
16. 非小細胞肺癌が、治療後にＮ−ＭＹＣのｍＲＮＡ量のダウンレギュレーションを示した請求項１〜１５の何れか１項に記載の方法。
17. 非小細胞肺癌が、ＢＲＤ４／３／２、ｃ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した請求項１〜１６の何れか１項に記載の方法。
18. 治療が、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露の２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導する請求項１〜１７の何れか１項に記載の方法。
19. 非小細胞肺癌が、ＥＭＬ４−ＡＬｋ陰性である請求項１〜１８の何れか１項に記載の方法。
20. 非小細胞肺癌が、ＢＲＤ４／３／２、ｃ−ＭＹＣ、ＢＣＬ−２、ｐ２１及びサイクリンＤ１を発現した請求項１９に記載の方法。
21. 治療が、ＳＴＡＴ３の一時的なアップレギュレーション、それに続く曝露の２４時間後７２時間までのダウンレギュレーションを誘導する請求項１９〜２０の何れか１項に記載の方法。
22. 非小細胞肺癌が、ＫＲＡＳ遺伝子において突然変異を有する請求項１〜２１の何れか１項に記載の方法。
23. 非小細胞肺癌が、ＬＫＢ１遺伝子において突然変異を有する請求項１〜２２の何れか１項に記載の方法。
24. ＮＭＹＣが、ダウンレギュレートされる請求項１〜２３の何れか１項に記載の方法。
25. ＨＥＸＩＭが、アップレギュレートされる請求項１〜２４の何れか１項に記載の方法。