JP2016530266A - デオキシシチジンキナーゼ阻害因子 - Google Patents

デオキシシチジンキナーゼ阻害因子 Download PDF

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Abstract

本明細書は、ｄＣＫに結合する化合物及び癌の治療方法を提供する。具体的には、４，６−ジアミノピリミジン部分に連結する２−フェニルチアゾール誘導体が、デオキシシチジンキナーゼ活性の阻害物質として開示される。立体中心を有する阻害化合物も提供される。これらの化合物は、癌治療において治療的有用性を有する。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１３年，８月１３日出願の米国特許仮出願第６１／８６５，４６８号の利益を主張し、すべての目的において、その全体が、参照によって援用される。
合衆国政府によって支援された研究または開発において行われた本発明の権利に関する陳述
本発明は、米国国立保健研究所によって授与された認可番号第ＣＡ０８６３０６号、第Ｒ０１ ＥＢ０１３６８５号において、政府支援の下でなされた。米国政府は、本発明において一定の権利を有する。
デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）は、ホスホリル供与体としてＡＴＰまたはＵＴＰのいずれか一方を使用して、デオキシシチジン、デオキシアデノシン、及びデオキシグアノシンをそれらの一リン酸塩形態にホスホリル化することができるデオキシリボヌクレオシドキナーゼである。１ｄＣＫによるリン酸化は、サルベージデオキシシチジンのｄＣＴＰへ、ある特定の細胞型ではｄＴＴＰへの転換を担う生化学的経路における律速ステップであり、これによりＤＮＡポリメラーゼの基質とする。ｄＮＴＰが発生する生理学的役割以外に、ｄＣＫは、広範にわたって抗癌剤中に使用される複数のヌクレオシド類似体プロドラッグ（「ｎｕｃｓ」）を活性化するにあたって非常に重要な役割を担う。２したがって、ｄＣＫを標的とする治療薬を特定することは重要な価値を有する。本明細書は、当該技術分野においてこれらの問題及び他の問題の解決法を提供する。
以下の式を有する化合物が本明細書において提供される：
Figure 2016530266
 式（Ｉ）の化合物では、ＹはＣ（Ｒ８）またはＮであり、ＺはＣ（Ｒ９）またはＮであり、ＸはＣＨ２、Ｏ、Ｎ（Ｒ１０）、Ｓ、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２である。Ｒ１は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１Ｒ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ２は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ３は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ４Ａ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ５は、独立して水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり、式中、Ｒ５及びＲ６は、任意に組み合わされて、置換若しくは非置換のシクロアルキル基を形成し、Ｒ６は、非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基またはハロゲン基（例えば、Ｆである）。Ｒ７はＨ、Ｄ、Ｆまたは−ＣＨ３である。Ｒ８は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ８Ａ、−ＯＲ８Ａ、−ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８Ｒ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＯＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ９は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ９Ａ、−ＯＲ９Ａ、−ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９Ｒ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＯＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＮＲ９ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ９ＡＲ９Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ１０はＨ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５である。Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ８Ａ、Ｒ８Ｂ、Ｒ９Ａ及びＲ９Ｂは独立して水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。記号ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ８及びｎ９は独立して１，２，または３である。
本明細書では、医薬組成物も提供する。一態様では、本明細書に記載の化合物及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物がある。
本明細書では更には、本明細書に記載の有効量の化合物と接触させることによるデオキシシチジンキナーゼの阻害方法を提供し、これによってデオキシシチジンキナーゼが阻害される。
更に、本明細書に記載される、化合物の有効量を投与することによって、疾患を治療することを、それを必要とする対象において行う方法を提供する。一態様では、有効量の本明細書に記載の化合物を対象に投与することによってそれを必要とする対象における癌の治療方法である。
ｄＣＫ阻害因子リード化合物。（Ａ）リード化合物Ｉａ及びＩｂの略図である。これらの化合物類は、４つの部分から構成される：部分Ａはピリミジン環を示し、部分Ｂは、５置換−チアゾール環（部分Ｃ）連結しているリンカーであり、フェニル環（部分Ｄ）が続く。化合物Ｉａ及びＩｂは、フェニル基のメタ位に存在する置換基（Ｒｍ）で異なる。（Ｂ）Ｉａ及びＩｂのインビトロ（ＩＣ５０ａｐｐ．及びＫｉ ａｐｐ）及び細胞（ＩＣ５０）特性。 ピリミジン環への修飾。（Ａ）単一の環外アミノ基を有する化合物１及び２つの環外アミノ基の間に環状窒素原子を有する化合物２の略図である。（Ｂ）１及び２のインビトロ（ＩＣ５０ ａｐｐ．及びＫｉ ａｐｐ）及び細胞（ＩＣ５０）特性。（Ｃ）ピリミジン環に焦点をあてたＣＫ−２及びｄＣＫ−Ｉａ構造体との重なり。注記：水分子（球体）の存在により、Ｉａに対して、２の位置が約０．４Å移動。この水分子の結合は、おそらく、化合物２中において環Ｎ原子によって行われる。 フェニル環メタ位の修飾。（Ａ）メタ位の置換基の性質によって異なる化合物３及び４の略図である。（Ｂ）３及び４のインビトロ（ＩＣ５０ ａｐｐ．及びＫｉ ａｐｐ）及び細胞（ＩＣ５０）特性。（Ｃ）フェニル環メタ位に焦点をあてたＣＫ−３及びｄＣＫ−４構造体との重なり。３と比較してより固い４の結合は、より長いメタ置換基とｄＣＫのＳ１４４／Ｓ１４６との相互作用によって理論的に説明され得る。 フェニル環パラ位への修飾。（Ａ）パラ位の置換基の性質によって異なる化合物５及び６の略図である。（Ｂ）５及び６のインビトロ（ＩＣ５０ ａｐｐ．及びＫｉ ａｐｐ）及び細胞（ＩＣ５０）特性。（Ｃ）フェニル環パラ位に焦点をあてたＣＫ−５（ティール）及びｄＣＫ−６（ベージュ）構造体との重なり。阻害因子は、かなり類似して結合し、メタ位置換基は、酵素と直接相互作用するが、パラ位置換基は、相互作用しない。５及び６のかなり類似しているＩＣ５０ａｐｐ 値及びＫｉ ａｐｐ値は、パラ位を介する酵素との直接相互作用がないことによって、説明される。それに対して、パラ位置換基が存在することにより、細胞に基づいて測定されるＩＣ５０値が低下する。 リンカーへの修飾。（Ａ）化合物７及び８の略図である。いずれの化合物もラセミ混合物（Ｒ／Ｓ）として合成された。メチル基をメチレンリンカー基に付加（矢印）することによって、これらの化合物をキラル体にすることができる。７は、チアゾール環５位（Ｒｔ）にプロピル基を有するが、８はメチル基を有する。（Ｂ）７及び８のインビトロ（ＩＣ５０ ａｐｐ．及びＫｉ ａｐｐ）及び細胞（ＩＣ５０）特性。（Ｃ）チアゾール環のプロピル基により、７は単一の分子としてＣＫの結合部位１位（詳細は、本文を参照されたい）に結合される。特に、ラセミ体７により酵素−阻害物質が形成されるにもかかわらず、結晶構造において、Ｒ異性体のみを観察する（化合物７、Ｆｏ−Ｆｃオミットマップ（シグマ２））。Ｓ異性体の理論上のモデルから、Ｒ異性体のみが電子密度に適合することがわかる。（Ｄ）チアゾール環のメチル基により８つのうちの２つの分子がｄＣＫに結合され、１つは１位に結合され、１つは２位に結合される。１位では、Ｒ異性体（８Ｒ−Ｐ１；Ｆｏ−Ｆｃオミットマップ（シグマ２））のみが観察される。１位のＳ異性体の理論上のモデルから、Ｒ異性体のみが電子密度（矢印）に適合することがわかる。（Ｅ）２位では、Ｓ異性体（８Ｓ−Ｐ２；Ｆｏ−Ｆｃオミットマップ（シグマ１．５））のみが観察される。２位のＲ異性体の理論上のモデルから、Ｓ異性体のみが電子密度（矢印）に適合することがわかる。 Ｒ異性体は、ｄＣＫ阻害の関連異性体である。（Ａ）化合物９Ｓ、９Ｒ及び１０Ｒ（ＲまたはＳは、リンカーメチレン炭素鏡像異性体を示し、矢印は添加したメチル基を指す）略図である。（Ｂ）９Ｓ、９Ｒ及び１０Ｒのインビトロ特性（ＩＣ５０ ａｐｐ 及びＫｉ ａｐｐ）並びに細胞特性（ＩＣ５０）を示す。９及び１０の両者のＲ異性体は、観察される酵素阻害に関与している。（Ｃ）ｄＣＫは鏡像異性的純粋１０Ｒの存在下で結晶化し、酵素−阻害物質複合体構造を解明した。１位結合部位のＦｏ−Ｆｃオミットマップ（シグマ１．６）から１０Ｒの存在が明らかにわかる。（２位にも結合している分子と相溶性がある）１０Ｒ中においてチアゾールメチル基にかかわらず、２位にて第２の１０Ｒ分子は観察されていない。これは、Ｓ異性体のみが２位に結合することを示す化合物８（図５）による結果と一致する。 キラル選択性は、酵素の結合部位によるコンフォメーションの選択性による。（Ａ）観察される１位で結合する阻害物質８Ｒ（８Ｒ−Ｐ１）は、１位結合部位により決定されるコンフォメーションを取る。このコンフォメーションでは、キラルリンカーメチル基とチアゾール環メチル基との間の距離は４．２Åである。（Ｂ）１位内の８Ｒ（８Ｓ−Ｐ１）と同一のコンフォメーションを有する８Ｓ結合の理論上のモデルから、相同距離が２．５Åにまで減少したことがわかる。（Ｃ）観察される２位で結合する阻害物質８Ｓ（８Ｓ−Ｐ２）は、２位結合部位により決定されるコンフォメーションを取る。このコンフォメーションでは、キラルリンカーメチル基とチアゾール環メチル基との間の距離は４．２Åである。（Ｄ）２位内の８Ｓ（８Ｒ−Ｐ２）と同一のコンフォメーションを有する８Ｒ結合の理論上のモデルから、相同距離が２．６Åにまで減少したことがわかる。（Ｅ）８Ｒ−Ｐ１については、チアゾール環とリンカーとの観察されたねじれ角は−５９°である。可能性のあるねじれ角をスキャンすることによって、この値が８Ｒの低エネルギーコンフォメーションを表すことがわかる。（Ｆ）８Ｓ−Ｐ１については、観察されたねじれ角は１８９°である。この値は、高エネルギーコンフォメーションに対応している。（Ｇ）８Ｓ−Ｐ２については、観察されたねじれ角は−３２６°である。可能性のあるねじれ角をスキャンすることによって、この値が８Ｓの低エネルギーコンフォメーションであることがわかる。（Ｈ）８Ｒ−Ｐ２については、観察されたねじれ角は１４７°である。この値は、高エネルギーコンフォメーションに対応している。 化合物１０のインビボ評価。（Ａ）腹腔内注入を介して化合物１０（２５ｍｇ／ｋｇ）で処置したＣ５７Ｂｌ／６雌マウスの肝臓中におけるＰＥＴプローブである１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの取り込み定量。投与配合物：５０％ＰＥＧ／トリス、ｐＨ７．４。データは、少なくともｎ＝５マウス／時間の平均値±標準誤差である。（Ｂ）化合物１０のプラズマ薬物動態学的特性。Ｃ５７Ｂｌ／６雌マウスは、腹腔内注射を介して５０％ＰＥＧ／トリス（ｐＨ７．４）中に配合された化合物１０（５０ｍｇ／Ｋｇ）を投与した。データは、少なくとも、ｎ＝４マウス／時間の平均値±標準誤差である。 ＩａのヒトｄＣＫへの結合。Ａ）観察された活性部位で結合されたＩａ分子（球体）を有するｄＣＫモノマーのリボン図。ヌクレオチドＵＤＰも、複合体中に存在した。Ｂ）ＩａとｄＣＫとの間の相互作用。Ｉａ（スティック）との相互作用に寄与するｄＣＫ残基は、スティックとして示す。極性相互作用は、黒い破線で示す。 プロトマーＡの化合物２周囲のシグマ３でのＦｏ−Ｆｃを作成した。化合物２は、モデルから取り除き、いくつかの精密化ラウンドを行い、モデルのバイアスを取り除いた。この阻害物質は、２つの分子として、１位及び２位のｄＣＫの活性部位で、それぞれ標識２−Ｐ１及び２−Ｐ２と結合する。 プロトマーＡの化合物３及び４周囲のシグマ２．５でのＦｏ−Ｆｃマップを作成した。Ａ）化合物３は、モデルから取り除き、いくつかの精密化ラウンドを行い、モデルのバイアスを取り除いた。（Ｂ）化合物４について同様に行った。 プロトマーＡ由来の化合物５及び６周囲のシグマ２．０でのＦｏ−Ｆｃマップを作成した。Ａ）化合物５は、モデルから取り除き、いくつかの精密化ラウンドを行い、モデルのバイアスを取り除いた。（Ｂ）化合物６について同様に行った。 プロトマーＡ由来の化合物７及び８周囲のシグマ２．０でのＦｏ−Ｆｃマップを作成した。Ａ）化合物７は、モデルから取り除き、いくつかの精密化ラウンドを行い、モデルのバイアスを取り除いた。（Ｂ）化合物８について同様に行った。この阻害物質は、ｄＣＫの活性部位で２つの分子として結合する。リンカー内でのキラル炭素の存在及びラセミ混合物の使用により、１位で結合するＲ鏡像異性体（８Ｒ−Ｐ１）及び２位で結合するＳ鏡像異性体（８Ｓ−Ｐ２）を観察する。 ＣＫ結合時の８Ｒ環及び８Ｓ環の相対的配向を示す。（Ａ）構造体に見られるとおり、８Ｒ／８Ｓ。（Ｂ）ピリミジン環に基づいて、８Ｒに重ね合わせた８Ｓ。８Ｒと８Ｓとの間のチアゾール環及びフェニル環の異なる相対的配向に留意されたい。 結晶構造中の１位で結合された８Ｒのポーズ（ｐｏｓｅ）に比較した溶液中で最適化された８Ｒ及び８Ｓの相対的配向。構造体は、チアゾール環にしたがって位置合わせされる。これにより、溶液から移動させて、タンパク質に結合するために分子に発生させる必要があるコンフォメーションの変化が示される。８Ｒ及び８Ｓは双方とも、このコンフォメーション変化を受けるとエネルギー損失が発生するが、８Ｒでの損失は、８Ｓでの損失よりも大幅に少ない。 ｄＣＫを介するデオキシシチジン（ｄＣ）サルベージにより、Ｔ−ＡＬＬ細胞中のチミジン（ｄＴ）誘発致命的複製ストレスを阻害する。（Ａ）ｄＴＴＰを介してｄＴによるＤＮＰ ｄＣＴＰ生成物のアロステリック制御。ＲＮＲ：リボヌクレオチドレダクターゼ（Ｂ）ｄＴ処理（２４時間）がｄＣＴＰ及びｄＴＴＰプールに及ぼす影響。数値は、平均±標準誤差を示す。（Ｃ）ビヒクルまたはｄＴ（５０μＭ）−／＋２．５μＭ ｄＣで２４時間処理後のＣＥＭ細胞サイクルの解析。（Ｃ）ヒドロキシウレア（５０μＭ）、５−フルオロウラシル（１５μＭ）またはシスプラチン（１．６μＭ）を−／＋ｄＣ ２．５μＭで２４時間処理後のＣＥＭ細胞サイクルの解析。（Ｅ）ｄＣＫ及びアクチンの発現の代表的イムノブロット及び（Ｆ）ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ（スクランブルｓｈＲＮＡ）細胞及びｄＣＫｌｏｗ（ｄＣＫに対するｓｈＲＮＡ）細胞におけるｄＣＫキナーゼアッセイ。数値は、平均±標準誤差であり、＊＊＊Ｐ＜０．００１である。（Ｇ）ヒビクルまたはｄＴ（５０μＭ）−／＋ｄＣ（２．５μＭ）により２４時間処理したＣＭＥｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ細胞におけるｄＣＴＰレベル。数値は、平均値±標準誤差、＊＊＊Ｐ＜０．００１（Ｈ）ヒビクルまたはｄＴ（５０μＭ）−／＋ｄＣ（２．５μＭ）で２４時間処理したＣＭＥ ｄＣＫｌｏｗ細胞の細胞サイクル解析（Ｉ）２．５μＭ ｄＣの存在下において２４時間、４８時間及び７２時間、ヒビクルまたはｄＴ（５０μＭ）で処理されたＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ細胞中のＣｈｋ１、ｐＣｈｋ１（Ｓｅｒ３４５）、Ｃｈｋ２、ｐＣｈｋ２（Ｔｈｒ６８）、ｄＣＫ及びアクチンを検出する代表的イムノブロット、（Ｊ）２．５μＭ ｄＣの存在下において２４時間ヒビクルまたはｄＴ（５０μＭ）で処理されたＣＥＭ ｄＣＫｗｔ細胞及びｄＣＫｌｏｗ細胞におけるｐＨ２Ａ．Ｘ（Ｓｅｒ１３９）及びＤＮＡ含有量（ＤＡＰＩ）、（Ｋ）２．５μＭ ｄＣの存在下で、ヒビクルまたはｄＴ（５０μＭ）処理の４８時間後、ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ細胞及びｄＣＫｌｏｗ細胞で実施したＣＯＭＥＴアッセイの代表的画像及び定量。数値は、１００細胞／画像ｘ４画像／群のＯｌｉｖｅ Ｔａｉｌ Ｍｏｍｅｎｔ平均±標準誤差を示す；ｎ＝２独立した実験。＊＊＊Ｐ＜０．００１。倍率：４ｘ。（Ｌ）ヒビクル、ｄＣ（２．５μＭ）、ｄＴ（５０μＭ）またはｄＣ＋ｄＴで７２時間処理後の、ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ細胞及びｄＣＫｌｏｗ細胞のアネキシンＶ染色。すべての数値は、少なくとも３つの反復／データポイントの平均±標準誤差であり、＊＊＊Ｐ＜０．００１である。図１のすべてのデータは、他に指示がない限り、代表的ｎ＝３の独立した実験である。 ｄＴでの処理によりＴ−ＡＬＬ細胞においてＮＳＰ−媒介ｄＣＴＰ生合成への代謝スイッチが起動され、ＮＳＰを上方制御する。（Ａ）さまざまなｄＴ濃度で処理されたＣＥＭ細胞のＤＮＡに導入された遊離ｄＣＴＰプール及びｄＣＴＰの供給源（ＤＮＰまたはＮＳＰ）を判定するために使用する［Ｕ−１３Ｃ］−グルコース及び［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−デオキシシチジン（ｄＣ）安定アイソトープ標的法の略図である。（Ｂ）遊離ｄＣＴＰプール中で、［Ｕ−１３Ｃ］−グルコース（ＤＮＰ）及び［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣ（ＮＳＰ）から誘導されたｄＣＴＰまたはｄＴの存在下または不存在下にて、安定アイソトープ標識ＤＮＰ及びＮＳＰ前駆体でインキュベーションした１２時間後、ＣＥＭ細胞のＤＮＡに導入されたｄＣＴＰ。数値は、絶対ピーク面積／１０３細胞の平均±標準誤差である。Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１（０μＭ ｄＴ対照群と比較）。データは、ｎ＝２の独立した実験の代表値である。（Ｃ）ベースライン時及び５０μＭ ｄＴでの処理の８時間後の時点でのＣＥＭ細胞におけるＣＫキナーゼ活性の定量。データは、ｎ＝２の独立した実験の代表値である。数値は、平均±標準誤差であり、＊＊＊Ｐ＜０．００１である。（Ｄ）ベースライン時及び５０μＭ ｄＴでの処理の４時間後の時点でのＣＥＭ細胞による３Ｈ標識デオキシシチジン（ｄＣ）の取り込みの定量化。データは、ｎ＝２の独立した実験の代表値である。数値は、平均±標準誤差を示す。＊＊＊Ｐ＜０．００１。 内因性ｄＣのインビボサルベージにより、ｄＴ処置によって誘発されたＲＳからＴ−ＡＬＬ細胞が救済される。（Ａ）左軸：ｄＴ（２ｇ／ｋｇ、単回投与）で処置されたＮＳＧマウスでのプラズマｄＴレベル。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝３マウス／時点での平均±標準誤差である。右軸：ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）単回処理後のさまざまな時点でのＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍のｄＴＴＰレベルである。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝４マウス／時点での平均値±標準誤差である。（Ｂ）ｄＴ（２ｇ／ｋｇ、単回投与）で処置されたＮＳＧマウスに両側皮下移植されたＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍における、さまざまな時点でのｐＣｈｋ１（Ｓｅｒ３４５）レベルを示す代表的イムノブロット（ｎ＝３独立した実験）である。（Ｃ）ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）単回処理後のさまざまな時点でのＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍のｄＣＴＰ濃度である。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝５マウス／時点の平均±標準誤差であり、＊＊＊Ｐ＜０．００１である。（Ｄ）２ｇ／ｋｇ ｄＴまたはビヒクルで単回処理から４時間後の［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣのｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ ＣＥＭ腫瘍のＤＮＡへの取り込みを定量するための実験的設計の略図である。（Ｅ）標識ｄＣＴＰのＤＮＡへの取り込みに関するＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭデータの定量である。データは、ｎ＝２の独立した実験におけるｎ＝６マウス／群の平均±標準誤差であり、＊＊Ｐ＜０．０１である。（Ｆ）ｄＣＫ活性のインビボＰＥＴアッセイの略図である。（Ｇ）ビヒクルまたはｄＴ注入から４時間後の皮下ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍異種移植片における１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの取り込みである。数値は、ｄＣＫｗｔヒビクルに対する１８Ｆ−ＦＡＣシグナルの平均減少％±標準誤差を示す。ｎ＝４マウス／群、ｎ＝２独立した実験。＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。 ｄＣＫは、インビボにおいてＴ−ＡＬＬ細胞中でのｄＴへの耐性を媒介する。（Ａ）腫瘍移植後第７日に開始し、第１３日まで１２時間ごとにビヒクルまたはｄＴ（２ｇ／ｋｇ）で処理したＣＥＭｄＣＫｗｔまたはｄＣＫｌｏｗ皮下腫瘍を担持しているＮＳＧマウス（ｎ＝６マウス／条件）の末梢血の分泌型ガウシアルシフェラーゼの連続測定値である。数値は、ｎ＝２の独立した実験の平均±標準誤差である。指示された時点でのｄＣＫｌｏｗヒビクルと比較して＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｂ）ヒビクルまたは（Ａ）でｄＴ−処置されたマウスのＣＥＭ ｄＣＫｗｔ腫瘍及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍である。（Ｃ）（Ａ）の腫瘍重量（ｍｇ）である。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差を示す。＊＊＊Ｐ＜０．００１。 ＤＩ−３９、白血病細胞内の新規ｄＣＴＰ生合成の阻害と協同する低分子ｄＣＫ阻害物質の開発。（Ａ）９０，０００の化合物ライブラリーのＨＴＳ（ハイスループットスクリーニング）から始まり、最初のヒットＤＩ−０１２０がもたらされた、ＤＩ−３９の開発を示す概略図である。更なる構造活性相関（ＳＡＲ）により、ＤＩ−３９を含む８０の新規化合物が得られた。（Ｂ）ＤＩ−３９の化学的構造。（Ｃ）指示された時間、１μＭ薬物にさらしたＣＥＭ細胞中でのＤＩ−３９のＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭ測定値。６０分後、細胞を３回洗浄し（縦線にて示す）、細胞の薬物保持を６０分後再び測定した。数値は、平均±標準誤差を示す。（Ｄ）ＣＥＭ細胞によって取り込まれる３Ｈ−ｄＣの阻害率（％）によって決定するＤＩ−３９のＩＣ５０値。数値は、平均±標準誤差を示す。（Ｅ）結合したＤＩ−３９及びウリジン二リン酸（ＵＤＰ）を有するｄＣＫの２．１Å結晶構造。（Ｆ）ヒビクル、ｄＴ（５０μＭ）、ＤＩ−３９（１μＭ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで２４時間処理された培養ＣＥＭｄＣＫｗｔ細胞中での細胞内のｄＣＴＰ濃度。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差を示す。＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｇ）２．５μＭ ｄＣの存在下において２４時間、ヒビクル、ｄＴ（１ｍＭ）、ＤＩ−３９（１００ｎＭ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処理されたＣＥＭ細胞中においてＣｈｋ１、ｐＣｈｋ１（Ｓｅｒ３４５）及びアクチンを検出する代表的イムノブロットである。（Ｈ）２．５μＭ ｄＣの存在下においてＤＩ−３９及びｄＴの指示された濃度で７２時間処理したＣＥＭ細胞のアネキシンＶ染色である。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差である。＊＊＊５０μＭ ｄＴと比較した場合、Ｐ＜０．００１。（Ｈ）ＤＩ−３９の指示された濃度で７２時間処理したＬ１２１０−１０ ｄＣＫヌル細胞のアネキシンＶ染色である。数値は、ｎ＝２独立した実験の、アネキシンＶに対して陽性陽性を示す平均細胞％±標準誤差を示す。（Ｊ）２．５μＭ ｄＣの存在下で、２４時間（ＮＡＬＭ−６）または７２時間（Ｊｕｒｋａｔ、ＭＯＬＴ−４、ＲＳＲ４；１１、ＴＦ−１）ヒビクル、ｄＴ（１ｍＭ）、ＤＩ−３９（１００ｎＭ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処理されたＪｕｒｋａｔ、ＭＯＬＴ−４、ＲＳＲ４；１１、ＮＡＬＭ−６及びＴＦ−１白血病細胞の代表的イムノブロットである。（Ｋ）（Ｊ）と同様に７２時間、ヒビクル、ｄＴ（１ｍＭ）、ＤＩ−３９（１００ｎＭ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処理した白血病細胞株の同一パネルのアネキシンＶ染色である。培養液には２．５μＭ ｄＣを補充した。数値は、ｎ＝３独立した実験の、アネキシンＶに対して陽性陽性を示す平均細胞％±標準誤差を示す；。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。 ＤＩ−３９は、１８Ｆ−ＦＡＣ ＰＥＴによって判定されるように、ｄＴと組み合わせると、インビボにおいてｄＣＫ活性を阻害し、ＲＳを促進する。（Ａ）ＤＩ−３９の薬物動態学的特性である。腹腔内注射によりＣ５７Ｂｌ／６マウスにＤＩ−３９を投与した。投与配合物：１０％ＤＭＳＯ及び４０％カプチソール（ＳＢ−β−ＣＤ、β−シクロデキストリンのポリアニオン性可変性置換スルホブチルエーテル（Ｓｔｅｌｌａ ａｎｄ Ｈｅ， ２００８）／水。曲線下面積（ＡＵＣ）の近似値、クリアランス率（ＣＬ）、半減期（Ｔ１／２）、最大血漿中濃度（Ｃｍａｘ）及び最大濃度到達時間（Ｔｍａｘ）は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ ＥｘｃｅｌのＢｏｏｍｅｒ／Ｍｕｌｔｉ−Ｆｏｒｔｅ ＰＫ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓを使用して計算した。数値は、ｎ＝２独立した実験での、ｎ＝４／時点の平均±標準偏差を示す。（Ｂ）処理後のさまざまな時点での血漿中及びＣＥＭ腫瘍中の、ＤＩ−３９のＬ／Ｍ＋／ＭＳ−ＭＲＭ定量である。詳細については、方法を参照されたい。数値は、ｎ＝４／群の平均±標準偏差を示す。（Ｃ）ＣＥＭ皮下異種移植片中でのＤＩ−３９によるインビボｄＣＫ阻害を測定する１８Ｆ−ＦＡＣ ＰＥＴ／ＣＴ検査の概略図である。（Ｄ）ＤＩ−３９（単回腹腔内注射、５０ｍｇ／ｋｇ）によるｄＣＫ阻害を判定するためのインビボ１８Ｆ−ＦＡＣ ＰＥＴ／ＣＴスキャンの経過。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝４マウス／群の１８Ｆ−ＦＡＣシグナルの平均低下％±標準偏差を示す。（Ｅ）ビヒクル、ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）、ｄＴ （２ｇ／ｋｇ）またはＤＩ−３９＋ｄＴの単回投与から５．５時間後の異種移植片のＤＮＡへの［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣ取り込み率％である。マウスは、屠殺前に、安定アイソトープ標識ｄＣで３０分間パルス印加した。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝４／群の平均±標準誤差を示す。＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｆ）ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）または両方の薬剤を投与して６時間後のマウスから採取した腫瘍組織中でのｐＣｈｋ１（Ｓｅｒ３４５）、Ｃｈｋ１、及びアクチンの代表的イムノブロット、ｎ＝３独立した実験。 ＤＮＰ及びＮＳＰ ｄＣＴＰ産生物の薬理学的共標的は、インビボにおいてＴ−ＡＬＬ細胞に対して有効である。（Ａ）接種第７日目に開始して、１２時間ごとに第１４日目まで継続してヒビクル、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）、ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処置されたマウスから単離したＣＥＭ異種移植片の代表的画像。ｎ＝６マウス／群、ｎ＝２の独立した実験。（Ｂ）（Ａ）の腫瘍重量。数値は、ｎ＝２独立した実験における、ｎ＝６マウス／群の平均±標準誤差を示す。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｃ）（Ａ）の腫瘍試料のＴＵＮＥＬ染色の代表的画像及び定量。倍率：２０倍。数値は、平均±標準誤差を示す。ｎ＝６マウス／群。＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ａ）ヒビクル、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）、ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処置されたＮＳＧマウスの骨髄における、ｅＧＦＰ＋ＣＥＭ白血病細胞の代表的ＦＡＣＳプロット及び定量化である。マウス（ｎ＝６／群）を、１．０ｘ１０６ＣＥＭ細胞を接種して第３日目に開始し、１２時間ごとに処置した。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差を示す。＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。 ＤＮＰ及びＮＳＰの薬理学的共標的は、造血前駆プールを損なわずに、初代マウスｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ Ａｒｆ−／−Ｐｒｅ−Ｂ ＡＬＬ細胞に対して有効である。Ａ）２．５μＭ ｄＣの存在下で、ヒビクル、ｄＴ （２００μＭ）、ＤＩ−３９（１００ｎＭ）、またはＤＩ−３９＋ｄＴで処理４８時間後のｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ Ａｒｆ−／−前駆Ｂ細胞のアネキシンＶ染色。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差である。＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｂ）２．０ｘ１０４前Ｂ白血病細胞／マウスを静注投与後第１４日目のビヒクル、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）、ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）またはＤＩ−３９＋ｄＴで処置したマウス（ｎ＝６／群）の代表的生物発光画像（ＢＬＩ）。（Ｃ）ＢＭ及び脾臓中のＢＬＩの定量。＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｄ）処置したマウスのＢＭ中の代表的ＦＡＣＳ分析及びＣＤ１９＋白血病細胞の定量。＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｅ）処置したマウスの系統−Ｓｃａ−１＋ｃ−Ｋｉｔ＋（ＬＳＫ）個体群の定量。＊＊Ｐ＜０．０１。（Ｆ）ＣＤ３４及びＦｌｔ３の発現については、長期（ＬＴ、ＣＤ３４−、Ｆｌｔ３−）、短期（ＳＴ、ＣＤ３４＋、Ｆｌｔ３−）及び多能性前駆細胞（ＭＰＰ、ＣＤ３４＋、Ｆｌｔ３＋）幹細胞を同定し、定量するために処置したマウスのＢＭのＬＳＫ細胞を分析した。（Ｇ）ビヒクル、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）、ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）またはＤＩ−３９＋ｄＴを１２時間ごとに７日間投与したＮＳＧマウス（ｎ＝６／群）の体重並びにＲＢＣ、ヘモグロビン、血小板及び好中球測定値（Ｈ）。データは、平均±標準誤差を示す。データはいずれも少なくとも２つの独立した実験の代表値である。 ＤＩ−３９／ｄＴ併用療法及びモデルの潜在的毒性の評価。（Ａ）内因性（ｄＣＫ−／−マウス、ｎ＝４マウス／群）または潜在的薬理学的誘導（ＤＩ−３９＋ｄＴ）遺伝毒性ストレスを評価するためのｐＨ２Ａ．Ｘの代表的ＦＡＣＳ染色及びＥｒｙＡ（ＣＤ７１＋／高前方散乱）赤芽球中のデータ定量。ＮＳＧマウス（ｎ＝５マウス／群）を、ヒビクルまたはＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）とｄＴ（２ｇ／ｋｇ）とを組み合わせたもので１２時間ごとに８日間処置した。値は平均±標準誤差である。＊＊Ｐ＜０．０１である。（Ｂ）内因性（ｄＣＫ−／−マウス）または潜在的薬理学的誘導（ＤＩ−３９＋ｄＴ）遺伝毒性ストレスを示す代表的ＦＡＣＳプロット及び微小核赤血球の定量。数値は、ｎ＝２独立した実験の平均±標準誤差である。＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊Ｐ＜０．００１。（Ｃ、Ｄ）正常な造血前駆体に対する白血病細胞用の併用療法の選択性を説明するための提唱される原理（詳細は、本文を参照のこと）。 図２３、Ｅ及びＦにおいて定量された造血前駆体集団を識別するためのＦＡＣＳゲート戦略。 最初のＨＴＳヒット（１及び２）及び同様の構造足場を含む市販の化合物（３〜７）用のＬ１２１０細胞における３Ｈ−ｄＣ取り込みアッセイを用いて決定した構造及びＩＣ５０値。 化合物１５ａのヒトｄＣＫへの結合。（Ａ）活性部位で結合された１５ａ（球体）の２つの観察された分子を有するｄＣＫモノマーのリボン図。ヌクレオチドＵＤＰも、複合体中に存在した。（Ｂ）１５ａとｄＣＫとの相互作用。極性相互作用を破線で示す。ＵＤＰの２つのリン酸塩基（右上隅）により、ヌクレオチドに対する１５ａ−Ｉ及び１５ａ−ＩＩの相対的配向を示す。（Ｃ）１５ａ−Ｉ及び１５ａ−ＩＩチアゾール環のメチル基（矢印）は互いに積み重なり、疎水性ポケットを占有する。 （Ａ）分子Ａの分子Ｂへの摂動を結合エネルギーに関連付ける完全な熱力学的サイクルである。ΔＧタンパク質（Ａ−＞Ｂ）は、溶媒和阻害物質−タンパク質複合体中のＡからＢへの摂動時の自由エネルギーの変動を示し、ΔＧ水（Ａ−＞Ｂ）は、水のみで摂動が生じたときの自由エネルギーの変動を示す。結合自由エネルギーの差であるΔΔＧ結合は、分子Ａがタンパク質と結合するときの自由エネルギーの変動［ΔＧ結合（Ａ）］を分子Ｂが結合するときの自由エネルギーの変動［ΔＧ結合（Ｂ）］から引いたものと等しい。完全な熱力学的サイクルにおいてすべての成分の合計はゼロに等しくなるる必要があるので、ΔΔＧ結合は、ΔＧタンパク質（Ａ−＞Ｂ）−ΔＧ水（Ａ−＞Ｂ）とも等価である。（Ｂ）ｄＣＫと複合体化した化合物１５ｃの計算モデル。結合ポケット残基であるＧｌｕ５３、Ｇｌｎ９７、Ａｒｇ１１４及びＡｓｐ１３３を明示的に示し、タンパク質の残部をリボン構造として示す。（Ｃ）チアゾールの５位でのアルキル鎖の摂動に関連する自由エネルギー変化（ｋｃａｌ／ｍｏｌ）である。ΔＧタンパク質は、溶媒和阻害物質−プロテイン複合体の自由エネルギーの変化である。ΔＧ水は水のみ中での阻害物質の自由エネルギーの変化である。結合時の自由エネルギーの変化は、ΔΔＧ結合として示す。 ＰＥＴ分析によるｄＣＫ阻害物質のインビボ評価である。（Ａ）ｄＣＫ発現細胞において１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣが累積するメカニズムの概略図である。（Ｂ）化合物１５ａ、化合物３６及び化合物３７で処置したＣ５７Ｂｌ／６マウスの１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ ＰＥＴ／ＣＴ肝スキャンの代表的横断画像である。（Ｃ）低ナノモル濃度インビトロ力価を有する阻害物質試料の肝臓における１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ取り込みの定量である。データは少なくともｎ＝３マウス／群の平均値±標準誤差である。＊Ｐ＜０．０３。（Ｄ）ビヒクルまたは化合物３６で処置したＣＣＲＦ−ＣＥＭ腫瘍担持ＮＳＧマウスの１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ ＰＥＴ／ＣＴスキャンの代表的画像及び定量である。データは少なくともｎ＝４マウス／群のデータについての箱ひげ図として示す。＊Ｐ＜０．００１２。 化合物３６の薬物動態学的プロファイルである。Ｃ５７Ｂｌ／６雌マウスに腹腔内注射を介して化合物３７を投与した。投与配合物：１０％ ＤＭＳＯ及び４０％ カプチソール／水。データは、ｎ＝４マウス／時間の平均値±標準誤差である。 ｄＣＫ：３６複合体の結晶構造である。（Ａ）活性部位で結合された３６（球体）のうち１つの観察された分子を有するｄＣＫモノマーのリボンダイヤグラムである。ヌクレオチドＵＤＰ（球体）も、また、複合体中に存在した。（Ｂ）３６とｄＣＫとの相互作用の詳細である。ｄＣＫ残基は、極性及び３６との疎水性相互作用に関与した。極性相互作用は、黒い破線で示す。
本明細書で使用される省略形は、化学分野及び生物学分野内での従来の意味を有する。本明細書に記載の化学構造及び化学式は、化学技術において周知の標準の化学結合価に従ってて構築される。
置換基が従来の化学式（左から右に記述）によって特定される場合、左から右に記述した構造式を記述したものから生じるであろう化学的に同一の置換基を同様に包含し、例えば、−ＣＨ２Ｏ−は−ＯＣＨ２−と等価である。
「アルキル」という用語は、それ自体または別の置換基の一部として、他に指示がない限り、直鎖（すなわち、非分岐鎖）または分岐鎖またはそれらを組み合わせたものであり、完全飽和、単価飽和または多価不飽和であってもよく、指定された数の炭素原子を有する単価飽和、二価または多価ラジカルを含むことができるものを意味する（すなわち、Ｃ１〜Ｃ１０は、１個〜１０個の炭素を意味する）。アルキルは、非環式鎖である。飽和炭化水素ラジカルの例としては、限定されないが、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、（シクロヘキシル）ｎ−メチル基、例えば、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基などの相同体及び異性体などの基が挙げられる。不飽和アルキル基は、１つ以上の二重結合または三重結合を有する基である。不飽和アルキル基の例としては、限定されないが、ビニル基、２−プロペニル基、クロチル基、２−イソペンテニル基、２−（ブタジエニル）基、２，４−ペンタジエニル基、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル基、１−及び３−プロピニル基、３−ブチニル基、及び高級相同体及び異性体が挙げられる。アルコキシは、酸素リンカー（−Ｏ−）を介して分子の残部に付着されるアルキルである。
「アルキレン」という用語はそれ自体または別の置換基の一部として、他に指示がない限り、アルキルから誘導される二価のラジカル（例えば、限定するものではないが、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−など）を意味する。典型的には、アルキル基（またはアルキレン基）は、１個から２４個の炭素原子を有し、本発明では、１０個以下の炭素原子を有するこれらの基が好ましい。「低級アルキル」または「低級アルキレン」は、より短い鎖のアルキル基またはアルキレン基であり、概ね８個以下の炭素原子を有する。「アルケニレン基」という用語は、それ自体または別の置換基の一部として、他に指示がない限り、アルケン基から誘導される二価のラジカルを意味する。
「ヘテロアルキル基」という用語は、それ自体または別の用語と組み合わせて、他に指示がない限り、少なくとも１つの炭素原子ならびにＯ、Ｎ、Ｐ、Ｓｉ及びＳからなる群から選択される少なくとも１つのへテロ原子を含む、安定鎖または分岐鎖またはこれ組み合わせたものを意味し、また、窒素原子及び硫黄原子は必要に応じて酸化されてもよく、窒素へテロ原子は必要に応じて四級化されてもよい。へテロ原子（複数可）Ｏ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、Ｂ、Ａｓ及びＳｉは、ヘテロアルキル基の任意の内側位置、またはアルキル基が分子の残部に付着する位置に配置されてもよい。ヘテロアルキル基は、非環式鎖である。その例としては、限定されないが、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｓ（Ｏ）−ＣＨ３、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ（Ｏ）２−ＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｏ−ＣＨ３、−Ｓｉ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２−ＣＨ＝Ｎ−ＯＣＨ３、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ３、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ３、及び−ＣＮが挙げられる。２つまた３つ以下のヘテロ原子は、例えば、−ＣＨ２−ＮＨ−ＯＣＨ３及び‐−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）３などのように連続していてもよい。
同様に、「ヘテロアルキレン基」という用語は、それ自体または別の置換基の一部として、他に指示がない限り、例えば、限定されないが、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−及び−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−などのようにヘテロアルキルから誘導された二価のラジカルを意味する。ヘテロアルキレン基の場合、ヘテロ原子は、鎖末端の一方または両方（例えば、アルキレンオキシ、アルキレンジオキシ、アルキレンアミノ、アルキレンジアミノなど）を占有することもできる。さらに、アルキレン及びヘテロアルキレン連結基の場合、連結基の配向は、連結基の式が記述される方向によって示されるものではない。例えば、式−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−は、−Ｃ（Ｏ）２Ｒ’−及び−Ｒ’Ｃ（Ｏ）２−のいずれをも示す。上記のように、，ヘテロアルキル基は、本明細書で使用するとき、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＯＲ’、−ＳＲ’、及び／または−ＳＯ２Ｒ’などへテロ原子を介して分子の残部に付着する基が挙げられる。「ヘテロアルキル基」およびそれに続いて特定のヘテロアルキル基が列挙される場合（−ＮＲ’Ｒ’’など）、ヘテロアルキル基及び−ＮＲ’Ｒ’’という用語は重複していない、または互いに排他的ではないことが理解されよう。むしろ、明確にするために特定のヘテロアルキル基が列挙される。このため、本明細書において、「ヘテロアルキル基」という用語は、特定のヘテロアルキル基（例えば、ＮＲ’Ｒ’’）を除外するものと解釈されるべきではない。
「シクロアルキル基」及び「ヘテロシクロアルキル基」という用語は、それらによってまたは他の用語と組み合わせて、他に指示がない限り、それぞれ環式「アルキル基」及び環式「ヘテロアルキル基」を意味する。シクロアルキル基及びヘテロアルキル基は芳香族ではない。加えて、ヘテロシクロアルキル基については、へテロ原子は、複素環が分子残基に付着する位置を占有し得る。シクロアルキル基の例としては、限定されないが、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、１−シクロヘキセニル基、３−シクロヘキセニル基、シクロヘプチル基などが挙げられる。ヘテロシクロアルキル基の例としては、限定されないが、１−（１，２，５，６−テトラヒドロピリジル）、１−ピペリジニル、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−モルホリニル、３−モルホリニル、テトラヒドロフラン−２−イル、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロチエン−２−イル、テトラヒドロチエン−３−イル、１−ピペラジニル、２−ピペラジニルなどが挙げられる。「シクロアルキレン基」及び「ヘテロシクロアルキル基」は、単独でまたは別の置換基の一部として、それぞれシクロアルキル基及びヘテロシクロアルキル基から誘導される二価のラジカルを意味する。
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、それ自体または別の置換基の一部として、他に指示がない限り、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。さらには、「ハロアルキル」などの用語は、モノハロアルキル及びポリハロアルキルを包含することが意図される。例えば、「ハロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル」という用語は、限定されないが、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピルなどが挙げられる。
「アシル」という用語は、他に指示がない限り、−Ｃ（Ｏ）Ｒを意味し、Ｒは置換若しくは非置換アルキル基、置換または非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
「アリール」という用語は、他に指示がない限り、多価不飽和芳香族炭化水素置換基を意味し、単一の環または共に縮合する複数の環（好ましくは、１〜３の環）（すなわち、縮合環アリール）であってもよいかまたは共有結合により連結され得る。縮合環アリール基は、縮合環のうちの少なくとも１つがアリール環である共に縮合された複数の環を指す。「ヘテロアリール」という用語は、少なくとも１つのへテロ原子（Ｎ、ＯまたはＳ）を含むアリール基（または環）を指し、窒素原子及び硫黄原子は、任意により酸化され、窒素原子（複数可）は、任意により四級化される。したがって、「ヘテロアリール」という用語は、縮合環ヘテロアリール基（すなわち、縮合環のうち少なくとも１つは、芳香族複素環である縮合された複数の環）を含む。５，６−縮合環ヘテロアリーレン基は、共に縮合された２つの環を指し、一方の環は５つの員を有し、他方の環は６つの員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。同様に、６，６−縮合環ヘテロアリーレンは、共に縮合した２つの環を指し、一方の環は６つの員を有し、他方の環は６つの員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。また、６，５−縮合環ヘテロアリーレンは、共に縮合される２つの環を指し、一方の環は６つの員を有し、他方の環は５つの員を有し、少なくとも１つの環はヘテロアリール環である。ヘテロアリール基は、炭素またはへテロ原子を介して分子残基に付着され得る。アリール基及びヘテロアリール基の非限定的例としては、フェニル、ナフチル、ピロリル、ピラゾール、ピリダジニル、トリアジニル、ピリミジニル、イミダゾリル、ピラジニル、プリニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、フリル、チエニル、ピリジル、ピリミジル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾイル（ｂｅｎｚｏｘａｚｏｙｌ）、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラン、イソベンゾフラニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾチオフェニル、イソキノリル、キノキサリニル、キノリル、１−ナフチル、２−ナフチル、４−ビフェニル、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル、３−ピラゾール、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル、ピラジニル、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、２−フェニル−４−オキサゾリル、５−オキサゾリル、３−イソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル、５−イソオキサゾリル、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル、２−フリル、３−フリル、２−チエニル、３−チエニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、２−ピリミジル、４−ピリミジル、５−ベンゾチアゾリル、プリニル、２−ベンズイミダゾリル、５−インドリル、１−イソキノリル、５−イソキノリル、２−キノキサリニル、５−キノキサリニル、３−キノリル及び６−キノリルが挙げられる。上述のアリール環系及びヘテロアリール環系のそれぞれの置換基は、後述の許容可能な置換基からなる群から選択される。「アリーレン」及び「ヘテロアリーレン」は、単独または別の置換基の一部として、それぞれアリール及びヘテロアリールから誘導される二価のラジカルを意味する。ヘテロアリール置換基は、環へテロ原子窒素に結合する‐Ｏ−であってもよい。
「縮合環アリール−ヘテロシクロアルキル基」は、ヘテロシクロアルキル基に縮合されているアリール基である。「縮合環ヘテロアリール−ヘテロシクロアルキル基」は、ヘテロシクロアルキル基に縮合されているヘテロアリール基である。「縮合環ヘテロシクロアルキル基−シクロアルキル基」は、シクロアルキル基に縮合されているヘテロシクロアルキル基である。「縮合環ヘテロシクロアルキル基−ヘテロシクロアルキル基」は、別のヘテロシクロアルキル基に縮合されているヘテロシクロアルキル基である。縮合環アリール−ヘテロシクロアルキル基、縮合環ヘテロアリール−ヘテロシクロアルキル基、縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキル基、または縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ独立して、非置換であってもよいか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換されてもよい。縮合環アリール−ヘテロシクロアルキル基、縮合環ヘテロアリール−ヘテロシクロアルキル基、縮合環ヘテロシクロアルキル−シクロアルキル基、または縮合環ヘテロシクロアルキル−ヘテロシクロアルキル基は、それぞれ独立して、非置換であってもよいか、または本明細書に記載の１つ以上の置換基で置換されてもよい。したがって、例えば、６，５アリール−ヘテロシクロアルキル縮合環は、５員ヘテロシクロアルキル基に縮合された６員アリール部分を指す。スピロ環式環は２つ以上の環であり、隣接する環が１つの原子を介して付着している。スピロ環式環内の個々の環は同一であっても、異なっていてもよい。スピロ環式環内の個々の環は、置換されていても、非置換であってもよく、また、一組のスピロ環式環内の他の個々の環の異なる置換基を有してもよい。スピロ環式環の一部でない（例えば、シクロアルキル環またはヘテロシクロアルキル環の置換基である）場合、スピロ環式環内の個々の環に関して考えられ得る置換基は、同一の環に関して考えられ得る置換基である。スピロ環式環は、置換または非置換シクロアルキル環、置換または非置換シクロアルキレン環、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル環、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキレン環であってもよく、１つの型のすべての環（例えば、置換ヘテロシクロアルキレン環であり、それぞれの環が、同一または異なる置換ヘテロシクロアルキレン環であり得るすべての環）を有するものなど、スピロ環式環基内の個々の環は、直前に列挙した任意のものであってもよい。スピロ環式環系を指す場合、複素環式スピロ環は、少なくとも１つの環が複素環式環であるスピロ環式環及びそれぞれの環が異なる環であってもよいスピロ環式環を意味する。スピロ環式環系を指す場合、置換スピロ環式環は、少なくとも１つの環が置換されており、各置換基は任意により異なってもよいことを意味する。
「オキソ」という用語は、本発明で使用する場合、炭素原子に二重結合している酸素を意味する。
上記のそれぞれの用語（例えば、「アルキル」、「ヘテロアルキル」、「アリール」及び「ヘテロアリール」には、指示されたラジカルの置換形態及び非置換形態をいずれも含む。ラジカルのそれぞれの型の好ましい置換基は、本明細書に記載される。
アルキルラジカル及びヘテロアルキルラジカルの置換基（多くの場合、アルキレン、アルケニル、ヘテロアルキレン、ヘテロアルケニル、アルキニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルケニル及びヘテロシクロアルケニルと称されるこれらの基など）は、限定されないが、−ＯＲ’、＝Ｏ、＝ＮＲ’、＝Ｎ−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’’、−ＮＲ’ＯＲ’’から選択されるさまざまな基の１つ以上であってもよく、数値は、ゼロから（２ｍ’＋１）の範囲内である（式中、ｍ’はこうしたラジカル内での炭素原子の総数である）。Ｒ’、Ｒ’’及びＲ’’’は、好ましくは独立して、水素、置換または非置換ヘテロアルキル基、置換または非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基（例えば、１−３ハロゲンで置換されたアリール基）、置換若しくは非置換アルキル基、アルコキシ基またはチオアルコキシ基またはアリールアルキル基を指す。例えば、本発明の化合物が１つより多いＲ基を含む場合、各Ｒ基は独立して選択され、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基も、これらの基のうち１より多くが存在する場合、同様である。Ｒ’及びＲ’’ 基が同じ窒素原子に付着する場合、窒素原子と組み合わせて、４、５、６、または７員環を形成することができる。例えば、−ＮＲ’Ｒ’’としては、限定されないが、１−ピロリジニル及び４−モルホリニルが挙げられる。上記の置換基の考察から、当業者は、理解するであろう。「アルキル」という用語は、ハロアルキル（例えば、−ＣＦ３及び−ＣＨ２ＣＦ３）並びにアシル（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＦ３、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＯＣＨ３など）など水素基以外の基に結合される炭素原子などの基を包含することを意図する。
アルキルラジカルに関して記述した置換基と同様に、アリール基及びヘテロアリール基の置換基は異なってもよく、例えば−ＯＲ’、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＳＲ’、−ハロゲン、−ＳｉＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＣＯ２Ｒ’、−ＣＯＮＲ’Ｒ’’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−ＮＲ’−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＮＲ’’Ｃ（Ｏ）２Ｒ’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’）＝ＮＲ’’’’、−ＮＲ−Ｃ（ＮＲ’Ｒ’’）＝ＮＲ’’’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲＳＯ２Ｒ’、−ＮＲ’ＮＲ’’Ｒ’’’、−ＯＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）ＮＲ’’ＮＲ’’’Ｒ’’’’、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｒ’、−Ｎ３、−ＣＨ（Ｐｈ）２、フルオロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ及びフルオロ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル、−ＮＲ’ＳＯ２Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ＝（Ｏ）Ｒ’’、−ＮＲ’Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’’、−ＮＲ’ＯＲ’’から選択され、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’は、好ましくは独立して、水素、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基から選択される。例えば、本発明の化合物が１つより多いＲ基を含む場合、各Ｒ基は独立して選択され、Ｒ’、Ｒ’’、Ｒ’’’及びＲ’’’’基も、これらの基のうち１より多くが存在する場合、同様である。
環の置換基（例えば、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレン）は、環の特定の原子（一般に遊走置換基と称される）というよりも環の置換基と示してもよい。このような場合、置換基は、環原子のいずれかに付着されてもよく（化学的価数の規則に従って）、縮合環またはスピロ環式環の場合、縮合環またはスピロ環式環の１つの員と関連しているように示される置換基（１つの環の遊走置換基）は、縮合環またはスピロ環式環のいずれかの置換基（複数の環の遊走置換基）であってもよい。置換基が特定の原子（遊走置換基）ではない環に付着され、置換基の添字が１を超える整数である場合、複数の置換基は、同一の原子、同一の環、異なる原子、異なる縮合環、異なるスピロ環式環上にあってもよく、各置換基は任意により異なってもよい。環が分子残基に付着する点が１つの原子（遊走置換基）に限定されない場合、付着点は、環の任意の原子であってもよく、縮合環またはスピロ環式環の場合、化学的価数の規則に従って、任意の縮合環またはスピロ環式環の任意の原子であってもよい。環、縮合環またはスピロ環式環が１つ以上の環ヘテロ原子を含み、環、縮合環またはスピロ環式環を１つ以上の浮游置換基（限定されないが、分子残基に付着する点が挙げられる）と共に示す場合、遊走置換基は、ヘテロ原子に結合されていてもよい。浮游置換基を有する構造または式中において環ヘテロ原子が１つ以上の水素に結合していることがわかっている場合（例えば、２つが環原子と結合し、水素に３番目に結合している環窒素）、へテロ原子が浮游置換基に結合していれば、置換基は、化学的価数の規則に従って水素に置換されることが理解されよう。
２つ以上の置換基は、任意により結合されて、アリール基、ヘテロアリール基、シクロアルキル基またはヘテロシクロアルキル基を形成してもよい。こうしたいわゆる環形成置換基は、必須ではないが、典型的には環式塩基構造に付着することがわかっている。一実施形態では、環形成置換基は、塩基構造の近接する員に付着している。例えば、環式塩基構造の近接員に付着している２つの環形成置換基により縮合環構造が形成される。別の実施形態では、環形成置換基は塩基構造の１つの員に付着される。例えば、環式塩基構造の１つの員に付着している２つの環形成置換基によりスピロ環構造が形成される。更に別の実施例では、環形成置換基は、塩基構造の近接していない員に付着する。
アリール環またはヘテロアリール環の近接する原子上の置換基の２つは、任意により、式−Ｔ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＲＲ’）ｑ−Ｕ−の環を形成してもよい（式中、Ｔ及びＵは、独立して−ＮＲ−、−Ｏ−、−ＣＲＲ’−または単結合であり、ｑは０〜３の整数である）。あるいは、アリール環またはヘテロアリール環の近接原子上の２つの置換基は任意により式−Ａ−（ＣＨ２）ｒ−Ｂ−（式中、Ａ及びＢは、独立して−ＣＲＲ’−、−Ｏ−、−ＮＲ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−、または単結合であり、ｒは１〜４の整数である）の置換基と置換してもよい。こうして形成された新規環の単結合のうちの１つは、任意により二重結合に置換することができる。あるいは、アリール環またはヘテロアリール環の近接原子上の２つの置換基は任意により式−（ＣＲＲ’）ｓ−Ｘ’−（Ｃ’’Ｒ’’Ｒ’’’）ｄ−（式中、ｓ及びｄは１〜３の整数であり、Ｘ’は独立して−Ｏ−、−ＮＲ’−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−または−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−である）の置換基と置換してもよい。置換基Ｒ、Ｒ’、Ｒ’’及びＲ’’’は、好ましくは、独立して水素、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基及び置換若しくは非置換ヘテロアリール基から選択される。
本発明で使用する場合、「へテロ原子」または「環へテロ原子」という用語は、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、リン（Ｐ）、ホウ素（Ｂ）、ヒ素（Ａｓ）及びケイ素（Ｓｉ）を含むことを意図する。
本発明で使用する場合、「置換基」は、以下の部分から選択される基を意味する：
（Ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換アルキル基、非置換ヘテロアルキル基、非置換シクロアルキル基、非置換ヘテロシクロアルキル、非置換アリール基、非置換ヘテロアリール基、及び
（Ｂ）以下から選択される少なくとも１つの置換基と置換されるアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリールであって、
（ｉ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換アルキル基、非置換ヘテロアルキル基、非置換シクロアルキル基、非置換ヘテロシクロアルキル基、非置換アリール基、非置換ヘテロアリール基、及び
（ｉｉ）以下から選択される少なくとも１つの置換基で置換されるアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール及びヘテロアリール：
（ａ）オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換アルキル基、非置換ヘテロアルキル基、非置換シクロアルキル基、非置換ヘテロシクロアルキル基、非置換アリール基、非置換ヘテロアリール基、及び
（ｂ）以下から選択される少なくとも１つの置換基と置換されるアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−ＳＯ２Ｃｌ、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ４Ｈ、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ＝（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳＯ２Ｈ、−ＮＨＣ＝（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、非置換アルキル基、非置換ヘテロアルキル基、非置換シクロアルキル基、非置換ヘテロシクロアルキル基、非置換アリール基及び非置換ヘテロアリール基。
本発明で使用する場合、「サイズ限定置換」または「サイズ限定置換基」は、「置換基」に関して上述のすべての置換基から選択される基であって、各置換または非置換アルキル基は、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ２０のアルキル基であり、各置換または非置換ヘテロアルキル基は、置換若しくは非置換２員〜２０員ヘテロアルキル基であり、各置換または非置換シクロアルキル基は、置換若しくは非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル基であり、各置換または非置換ヘテロシクロアルキル基は置換若しくは非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であるものを意味する。
本発明で使用する場合、「低級置換」または「低級置換基」は、「置換基」に関して上述のすべての置換基から選択される基であって、各置換または非置換アルキル基は、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ８のアルキル基であり、各置換または非置換ヘテロアルキル基は、置換若しくは非置換２〜８員ヘテロアルキル基であり、各置換または非置換シクロアルキル基は置換若しくは非置換３〜７員シクロアルキル基であり、各置換または非置換ヘテロシクロアルキル基は置換若しくは非置換３〜７員ヘテロシクロアルキル基であるものを意味する。
いくつかの実施形態では、本明細書の化合物において記述された各置換基は、少なくとも１つの置換基で置換される。より具体的には、いくつかの実施形態では、本明細書の化合物に記述されている各置換アルキル、置換ヘテロアルキル、置換シクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、置換アリール、置換ヘテロアリール、置換アルキレン、置換ヘテロアルキレン、置換シクロアルキレン、置換ヘテロシクロアルキレン、置換アリーレン及び／または置換ヘテロアリーレンは、少なくとも１つの置換基で置換されている。他の実施形態では、これらのすべての基の少なくとも１つまたはすべてが少なくとも１つのサイズ限定置換基で置換されている。他の実施形態では、これらのすべての基の少なくとも１つまたはすべてが少なくとも１つの低級置換基で置換されている。
本明細書の化合物の他の実施形態では、各置換または非置換アルキルは、置換若しくは非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよく、各置換または非置換ヘテロアルキルは、置換若しくは非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であり、各置換または非置換シクロアルキルは、置換若しくは非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル基であり、かつ／または各置換または非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基である。本明細書の化合物のいくつかの実施形態では、各置換または非置換アルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ２０のアルキレンであり、各置換または非置換ヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換２員〜２０員ヘテロアルキレンであり、各置換または非置換シクロアルキレンは、置換若しくは非置換Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキレンであり、かつ／または各置換または非置換ヘテロシクロアルキレンは置換若しくは非置換３〜８員ヘテロシクロアルキレンである。
いくつかの実施形態では、各置換または非置換アルキルは置換若しくは非置換Ｃ１〜Ｃ８アルキル基であり、各置換または非置換ヘテロアルキルは、置換若しくは非置換２員〜８員ヘテロアルキル基であり、各置換または非置換シクロアルキルは置換若しくは非置換Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル基であり、かつ／または各置換または非置換ヘテロシクロアルキルは置換若しくは非置換３〜７員ヘテロシクロアルキル基である。いくつかの実施形態では、各置換または非置換アルキレンは、置換若しくは非置換のＣ１〜Ｃ８のアルキレンであり、各置換または非置換ヘテロアルキレンは、置換若しくは非置換２員〜８員ヘテロアルキレンであり、各置換または非置換シクロアルキレンは置換若しくは非置換Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキレンであり、かつ／または各置換または非置換ヘテロシクロアルキレンは置換若しくは非置換３〜７員ヘテロシクロアルキレンである。
本明細書に記載のある特定の化合物は、非対称炭素原子（光心若しくはキラル中心）または二重結合を有し、アミノ酸については、（Ｒ）−または（Ｓ）−として、または（Ｄ）−若しくは（Ｌ）−として、絶対立体化学に関して規定され得るエナンチオマー形態、ラセミ体形態、ジアステレオマー形態、互変異性体形態、幾何異性体形態、立体異性体形態形状及び個々の異性体は、本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物には、合成及び／または単離に非常に不安定であることが当該分野で公知であるものを含まない。本発明は、ラセミ形態及び任意により学的に純粋な形態内に化合物を包含することを意味する。光学的活性（Ｒ）−及び（Ｓ）−または（Ｄ）−及び（Ｌ）−異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して調製するか、または従来技術を使用して分解させてもよい。本明細書に記載の化合物がオレフィン結合または幾何学的非対称の他の中心を含む場合、特に指示がない限り、化合物が、Ｅ幾何異性体及びＺ幾何異性体をいずれも含むことを意図する。
本明細書で使用するとき、「異性体」という用語は、同一の数及び種類の原子を有し、したがって同一の分子量を有するが、原子の構造的配置または構成は異なる化合物を意味する。
本明細書で使用するとき、「互変異性体」という用語は、平衡状態で存在し、１つの異性体形状から別の形状に速やかに変化する２つ以上の構造的異性体のうちの１つを意味する。
当業者は、本発明のある特定の化合物は互変異性形態で存在する可能性があり、化合物のすべてのこうした互変異性形態は本発明の範囲内であることを理解するであろう。
他に指示がない限り、本明細書で示される構造体も、本構造体のすべての立体化学的形状（すなわち、各非対称中心の（Ｒ）配置及び（Ｓ）配置）を含むことを意味する。したがって、１つの立体化学的異性体並びに本発明の化合物のエナンチオマー及びジアステレオマー混合物は、一般に、当業者によって、安定していて、かつ本発明の範囲内であると認識される。
他に指示がない限り、本明細書に示す構造体も、１つ以上の同位体濃縮原子の存在においてのみ異なる化合物を含むことを意図する。例えば、重水素またはトリチウムによる水素の置換、１８Ｆによるフルオライドの置換、または１３Ｃ−若しくは１４Ｃ−富化炭素による炭素の置換を除いては本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内である。
また、本発明の化合物は、こうした化合物を構成する１つ以上の原子で原子同位体の非天然割合を含む。例えば、化合物は、例えば、トリチウム（３Ｈ）、フッ化物（ｆｌｕｒｏｉｄｅ）（１８Ｆ）、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）などの放射性同位体により放射線標識されてもよい。本明細書に開示されている化合物のすべての同位体変化形態は、放射性であるか否かにかかわらず、意図された範囲内に包含される。
Figure 2016530266
 という記号は、化学的部分を分子または化学式の残部に付着させる点を意味する。
部分が、Ｒ置換基で置換されている場合、基は「Ｒ置換された」と呼ばれ得る。部分がＲ置換されている場合、その部分は、少なくとも１つのＲ置換基で置換され、それぞれのＲ置換基は任意により異なる。特定のＲ基は、化学属（式（Ｉ）など）の説明に存在する場合、ローマ数字を使用して、特定のＲ基のそれぞれの外観を区別することができる。例えば、複数のＲ１３置換基が存在する場合、各Ｒ１３置換基は、Ｒ１３．１、Ｒ１３．２、Ｒ１３．３、Ｒ１３．４などとして区別させてもよく、各Ｒ１３．１、Ｒ１３．２、Ｒ１３．３、Ｒ１３．４などはＲ１３の定義の範囲内で定義され、及び任意により異なる。
本発明の化合物の説明は、当業者に既知の化学結合の原理によって限定される。したがって、基がいくつかの置換基の１つ以上によって置換されてもよい場合、こうした置換基は、化学的結合の原理に準拠し、また、本来の不安定性ではなく、及び／または周囲条件下（例えば水性条件、中性条件及びいくつかの公知の生理学的条件など）にて不安定である可能性が高いことが当業者に既知である化合物をもたらすように選択される。例えば、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、当業者に既知の化学結合の原理に準拠して環へテロ原子を介して分子残部に接着し、これによって、固有の不安定性を示す化合物を回避する。
「類似体」は、化学及び生物学での明白な通常の意味にしたがって使用され、構造的に別の化合物（すなわち、「標準物質」とも称される）に類似しているが、例えば、異なる元素の原子による１つの原子の置換において、または特定の官能基の存在において、または別の官能基による１つの官能基の置換において、または標準物質の１つ以上のキラル中心の絶対立体化学において組成が異なる化学化合物と称される。したがって、類縁体は、機能及び外観が類似しているまたは比較可能であるが、構造または起源は標準物質が類似していないまたは同等ではでない化合物である。
「デオキシシチジンキナーゼ」「ＤＣＫ」及び「ｄＣＫ」という用語は本明細書では同義的にかつ共通な通常の意味に従って用いられ、同一のまたは類似した名前及び機能的断片及びこれらの相同体のタンパク質を指す。この用語には、組換え形態または天然形態のｄＣＫ（ＮＰ０００７７９．１ ＧＩ：４５０３２６９）またはｄＣＫ活性（例えば、ｄＣＫと比較して少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％または１００％の活性）を保持するこれらの変異体を含む。
「薬学的に許容可能な塩」という用語は、本明細書に記載の化合物上で見出される特定の置換基に依存して、比較的毒性のない酸または塩基を用いて調整される活性化合物の塩を含むことを意図する。本発明の化合物が比較的酸性である官能基を含む場合、未希釈であるか、または好適な不活性溶媒中のいずれかにおいてこうした化合物の中性形態を十分な量の所望の塩基と接触させることによって、塩基添加塩を得ることができる。薬学的に許容可能な塩基添加塩の例としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ若しくはマグネシウム塩、または類似の塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性である官能基を含む場合、未希釈であるか、または好適な不活性溶媒中のいずれかにおいてこうした化合物の中性形態を十分な量の所望の酸と接触させることによって酸性添加塩を得ることができる。薬学的に許容可能な酸性添加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、一水素炭酸、リン酸、一水素リン酸、二水素リン酸、硫酸、一水素硫酸、ヨウ水素酸、または亜リン酸などの無機酸から誘導されるようなものを含む塩、並びに酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、シュウ酸、メタンスルホン酸などの比較的無毒である有機酸から誘導される塩が挙げられる。また、アルギン酸塩などのアミノ酸塩、及びグルクロン酸またはｇａｌａｃｔｕｎｏｒｉｃ ａｃｉｄなどの有機酸も含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １９７７，６６，１〜１９を参照されたい）。本発明のある特定の化合物は、化合物を塩基性添加塩または酸性添加塩に変換させることができる塩基性官能基及び酸性官能基をいずれも含む。
したがって、本発明の化合物は、薬学的に許容可能な酸とともに等の、塩として存在し得る。本発明は、こうした塩類を含む。このような塩の例としては、臭化水素酸塩、サルフェート、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸、酒石酸塩（例えば、（＋）−酒石酸塩、（−）−酒石酸塩若しくはラセミ体などこれらの混合物）、コハク酸塩、安息香酸塩及びグルタミン酸などのアミノ酸を含む塩が挙げられる。これらの塩は、当業者に既知の方法にて調製され得る。
化合物の中性形態は、好ましくは、従来の方法で塩を塩基または酸と接触させることによって及び親化合物を単離させることによって再生することができる。化合物の親形態は、ある物理的性質（極性溶媒中での溶解度など）において種々の塩形態とは異なる。
塩形態に加えて、本発明は、プロドラッグ形態である化合物を提供する。本明細書に記載の化合物のプロドラッグとしては、生理学的条件下で速やかに化学的変化または酵素的変化が起こり、本発明の化合物を提供するような化合物が挙げられる。さらに、プロドラッグは、エクスビボ環境下で化学的方法または生化学的方法で本発明の化合物へ変換することができる。例えば、プロドラッグは、好適な酵素または化学試薬を有する経皮パッチリザーバ内に配置されると、ゆっくりと本発明の化合物に変換し得る。
本発明のある特定の化合物は、非溶媒形態並びに溶媒形態（水和物形態など）で存在することができる。一般に、溶媒形態は非溶媒和形態に等しく、本発明の範囲内に包含される。本発明のある化合物は、複数の結晶形態または無定形形態に存在し得る。一般に、本発明によって意図される使用には、すべての物理的形態は等しく、また本発明の範囲内であることが意図される。
本発明で使用する場合、「塩」は、本発明の方法において使用される化合物の酸性塩または塩基性塩を指す。許容可能な塩の例示的例としては、鉱酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸など）、塩、有機酸（酢酸、プロピオン酸、グルタミン酸、クエン酸など）塩、四級アンモニウム（ヨウ化メチル、ヨウ化エチルなど）塩である。
「治療」及び「治療する」という用語は、寛解、症状軽減、損傷、病状または病態を、患者に対してさらに耐性があるようにすること、変性速度または低下速度を示すこと、変性の最終ポイントがより悪化が少なくなるようにすること、患者の身体的または精神的健康状態を改善することなどの任意の主観的パラメータまたは客観的パラメータなど、損傷、症状または病態の治療または改善が奏功した任意の兆候を指す。症候の治療または改善は、身体検査、神経精神病学的検査及び／または精神医学的評価の結果など、主観的パラメータまたは客観的パラメータに基づく。「治療」という用語及びその活用形は、傷害、病理学、病態または疾患の予防を含む。
「有効量」は、所定の目的を達成する（例えば、投与するため、疾患の治療、酵素活性の低下、酵素活性の増加、疾患または病態の１つ以上の症状の減少のための効果を達成する）のに十分な量である。「有効量」の例は、疾患の症状（複数可）の治療、防止または減少の寄与に十分な量であり、「治療的有効量」とも称され得る。疾患の症状（複数可）（及び文法的にこの語句と同等のもの）の「減少」は、症状（複数可）の重症度または頻度の減少または症状（複数可）の消失を意味する。薬剤の「予防的有効量」は、対象に投与されるとき、例えば、障害、疾患、病理または病態の発症（または再発）を防止または遅延させる、もしくは、障害、疾患、病理または病態の発症（または再発）の可能性を低下させるなど、目的の予防的効果を有する薬剤の量である。完全な予防的効果は、１回の投与により必ずしも発生するものではなく、一連の投与を行った後のみ発生することもある。したがって、１回以上の投与で、予防的有効量を投与することができる。正確な量は治療目的に依存し、当業者が既知の技術を使用して確認できる（例えば、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ． １−３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；ａｎｄ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓを参照されたい）。
本明細書に記載の化合物に関して、治療的有効量は、最初は細胞培養アッセイから決定され得る。目的とする濃度は、本明細書記載の方法または当該技術分野において公知の方法を用いて測定して、本明細書記載の方法を行うことができる活性化合物（複数可）のこれらの濃度である。
当該技術分野において周知であるように、ヒトに使用するための治療的有効量を動物モデルからでも決定することができる。例えば、ヒトの投与量は、動物において効果的であることが判明している濃度を達成するために調合し得る。ヒトでの用量は、化合物の有効性を監視し、前述のとおり用量を上方調整または下方調整することによって調整することができる。上述の方法に基づいてヒトにおいて最大効果を得るために投与量を調整することは、十分に当事者の能力の範囲内である。
用量は、患者の要件及び使用する化合物に依存して変動し得る。本発明の文脈において、患者に投与される用量は、時間の経過とともに患者において有益な治療的応答を得るのに十分でなければならない。また、用量サイズは、任意の有害な副作用の存在、性質及び程度によって決定することになる。特定の状況に適切な投与量を決定することは、施術者の技能の範囲内である。通常、治療は、化合物の適量より少ない投与量で開始する。その後、投与量は、この環境で最適な効果に到達するまで、わずかずつ増量させて増加させる。
用量及び投与間隔は、個々に調整して、治療対象である特定の臨床的適応症に有効である投与された化合物の濃度とすることができる。これによって、個々の病気の状態の重症度に相応する治療計画が提供される。
本明細書に提供された教示を用いて、その用量により、実質的に毒性が引き起こされることがなく、特定の患者に現れる臨床症状治療に有効である効果的な予防的または治療的治療計画を立てることができる。この計画には、化合物の効力、相対的生物学的利用能、患者の体重、有害な副作用の存在及び重症度、好ましい投与態様、及び選択された薬剤の毒性特性などの要因を考慮することによって、活性化合物を注意深く選択することを伴う必要がある。
「対照」または「対照実験」という用語は、その明白な通常の意味に従って使用され、実験の手順、試薬または変数を省略する以外は、並列実験として実験対象または実験試薬が処理される実験を指す。場合によっては、対照は、実験効果を評価する比較基準として使用される。実施形態では、対照は、本明細書（実施形態及び実施例など）に記載されるように、化合物の不在下でのタンパク質の活性の測定値である。
「接触すること」という用語は、明白な通常の意味に従って使用され、少なくとも２つの異なる種（例えば、生体分子または細胞などの化学的化合物）が十分に近位であり、反応するか、相互作用するか、または物理的に接触するようにする工程を指す。しかし、得られた反応生成物は、添加した試薬間の反応から、または反応混合物中で生成され得る１つ以上の添加した試薬の中間体から直接産生し得ることは理解するべきである。
「接触すること」という用語は、２つの種を反応させる、相互作用させるまたは物理的に接触させることを含んでもよく、２つの種は、本明細書に記載の化合物及びタンパク質または酵素であってもよい。接触することは、本明細書に記載の化合物をシグナル伝達経路に関与するタンパク質または酵素と相互作用させることを含んでもよい。
本明細書で定義するとおり、「阻害」「阻害する」「阻害すること」などの用語は、タンパク質−阻害物質相互作用に関して、阻害物質の不在下でのタンパク質の活性または機能に対して、タンパク質の活性または機能に負の影響を与える（例えば減少など）ことを意味する。阻害は、疾患または疾患の症状の減少を指すこともある。阻害は、特定のタンパク質または核酸標的の活性の減少を指すこともある。タンパク質は、デオキシシチジンキナーゼであってもよい。したがって、阻害としては、活性化若しくは不活化、脱感作若しくは下方制御シグナル伝達、若しくは酵素活性、若しくはタンパク質の量の少なくとも一部、部分的若しくは完全な刺激、減少、防止、若しくは遅延を遮断することが挙げられる。
「修飾物質」という用語は、標的分子または標的分子の機能または分子の標的の物理的状態を増減させる組成物を指す。
「修飾する」という用語はその明白な通常の意味に従って使用され、１つ以上の性質を変化または変動させる行為を指す。「修飾」は、１つ以上の性質を変化または変動させるプロセスを指す。例えば、標的タンパク質の修飾物質は、標的分子の性質もしくは機能または標的分子の量の増減によって変化する。疾患の修飾物質により、症状、原因または標的疾患の特性が減少する。
化合物の「選択的」または「選択性」などは、分子の標的間を区別する化合物の能力を指す。化合物の「特定の」、「特異的に」、「特異性」などは、細胞内での他のタンパク質に対して、最低限の活性、またはまったく活性がなく、特定の分子標的に対して特定の活動（阻害など）を引き起こす化合物の能力を指す。
「薬学的に許容可能な賦形剤」及び「薬学的に許容可能な担体」は、有効成分の患者への投与、または患者による吸収を補助する物質を指し、患者に有意な悪影響を及ぼす毒性効果を引き起こすことなく、本発明の組成物に含むことができる。薬学的に許容可能な賦形剤な非限定的例としては、水、ＮａＣｌ、生理食塩水、乳酸加リンゲル液、通常のショ糖、通常のグルコース、バインダー、増量剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、甘味剤、着香料、食塩水（リンゲル液など）、アルコール、油、ゼラチン、炭化水素（ラクトース、アミロース、またはデンプン）、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチセルロース、ポリビニルピロリジン及び着色剤などが挙げられる。こうした調製物は、滅菌させることができ、所望する場合、本発明の化合物に有害な反応を示さない助剤（滑沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を及ぼす塩、緩衝剤、着色及び／または芳香族物質など）と混合することができる。当業者は、その他の薬学的賦形剤が本発明において有用であることは理解するであろう。
「調整物」という用語は、活性成分とカプセル化材料（他の担体の有無にかかわらず、活性成分が担体に取り囲まれ、このため担体と共同しているカプセルを提供する担体としての）との配合物を包含することを意図している。同様に、カシェ剤及びロゼンジ剤も含まれる。錠剤、粉末剤、カプセル、丸剤、カシェ剤及びロゼンジ剤は、経口投与に好適な固形投薬形態として使用され得る。
本発明で使用する場合、「投与すること」という用語は、対象への経口投与、座薬、局所接触、静脈内投与、非経口投与、腹腔内投与、筋肉内投与、病巣内投与、くも膜下腔内投与、経鼻投与若しくは皮下投与、または徐放デバイスの植込み（例えば、ミニ浸透圧ポンプなど）としての投与を意味する。投与は、非経口及び経粘膜（例えば、頬側、舌下、口蓋、歯肉、経鼻、膣内、直腸または経皮的）などの任意の経路によるものである。非経口的投与としては、例えば、静脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、心室内及び頭蓋内が挙げられる。他の送達様式は、限定されないが、リポソーム製剤、静脈内注射、経皮的パッチなどの使用が挙げられる。
本明細書にて開示される組成物は、経皮的に、局所経路によって、送達させることができ、またアプリケータ、スティック、溶液、懸濁液、乳剤、ゲル、クリーム、軟膏、ペースト類、ゼリー剤、塗料、及びエアゾールとして配合され得る。経口調製物としては、患者によって経口摂取に好適な錠剤、丸剤、粉末剤、糖剤、カプセル剤、液剤、ロゼンジ剤、カシェ剤、ゲル剤、シロップ剤、スラリー、懸濁液などが挙げられる。固形形態調製物としては、粉末剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、座剤及び分散性顆粒剤が挙げられる。液体形態調製物としては、例えば、水またはプロピレングリコール水溶液などの溶液、懸濁液及び乳剤が挙げられる。本発明の組成物は、持続放出性及び／または快適性を提供するための成分を更に含んでもよい。こうした成分としては、高分子量、アニオン性粘液模倣（ｍｕｃｏｍｉｍｅｔｉｃ）ポリマー、ゲル化多糖及び微細薬剤担体物質が挙げられる。これらの成分は、米国特許明細書第４，９１１，９２０号、同第５，４０３，８４１号及び同第４，８６１，７６０号で更に詳細に考察されている。これらの特許の全内容は、すべての目的において、参照によって本明細書に援用される。本明細書に開示の組成物は、体内での持続放出のための微粒子としても送達され得る。例えば、微粒子は、薬剤含有微粒子の皮内注入を介して（Ｒａｏ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３〜６４５，１９９５）、生分解性及び注射用ゲル配合物として（例えば、Ｇａｏ Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７〜８６３，１９９５を参照されたい）、または、経口投与用の微粒子（例えば、Ｅｙｌｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９〜６７４，１９９７を参照されたい）として投与され、皮下でゆっくりと放出され得る。別の実施形態では、本発明の組成物の配合物は、細胞膜と融合するか、または、取り込まれる（すなわちリポソームに付着した受容体リガンドを用いて、細胞表膜のタンパク質受容体に結合してエンドサイトーシスとなる）リポソームを使用することによって送達させることができる。リポソームを使用することにより、特にリポソーム表面が標的細胞に特異的な受容体リガンドを担持する場合、またはさもなければ特定の器官を優先的に目的とする場合、インビボで本発明の組成物を標的細胞に送達することに注力することができる（例えば、Ａｌ−Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３−３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８−７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６〜１５８７，１９８９を参照されたい）。組成物は、ナノ粒子として送達することもできる。
医薬組成物は、有効成分（例えば、実施形態または実施例など本明細書に記載の化合物）が治療的有効量（すなわち、その使用目的を達成するのに効果的な量）で含まれる組成物を挙げることができる。特定用途に有効な実際の量は、とりわけ、治療対象の状態に依存することになる。疾患の治療方法において投与される場合、こうした組成物には所望の結果（例えば、標的分子の活性を調節する、かつ／または疾患の症状の進行を低下、消失または緩徐化するなど）を達成するのに有効な任意の量の活性成分を含むことになる。
哺乳類に投与する用量及び回数（単回投与または反復投与）は、例えば哺乳類が別の疾患を患っているか否か、受容個体の寸法その投与経路、大きさ、年齢、性別、健康、体重、ＢＭＩ、及び食事、治療対象の疾患の性質及び症状の範囲、併用治療の種類、治療対象または他の健康関連問題による合併症など、さまざまな要因に依存して変化し得る。出願人らの発明の方法及び化合物と共に、他の治療用レジメンまたは薬剤を使用可能である。確定された用量の調整及び操作（例えば、頻度及び持続時間）は、十分に当業者の能力の範囲内である。
本明細書に記載の化合物は、互いに別のものと組み合わせて、疾患の治療に有用であることが公知の他の活性薬剤（例えば、抗癌剤）、または単独では有効でない可能性があるが、有効成分の効力に寄与し得る補助薬と組み合わせて使用可能である。したがって、本明細書に記載の化合物は、互いにまたは他の疾患の治療に有用であることが公知である活性剤同時投与してもよい。
「同時投与すること」は、本明細書に記載されるような１つ以上の追加の治療（例えば、抗癌剤）を付与する直前または直後に、本明細書に記載の化合物が同時に投与されることを意味する。本明細書に記載の化合物は、患者に単独で投与することができるか、または同時投与することができる。同時投与は、化合物の個別のまたは組み合わせた（２つ以上の化合物または薬剤）同時投与または連続投与を含むことを意味する。このため、調製物も必要に応じて他の活性成分（例えば、抗癌剤など）と混合することができる。同時投与としては、１つの活性薬剤（例えば、本明細書に記載の複合体）第二の有効成分（例えば、抗癌剤など）の０．５時間、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１６時間、２０時間または２４時間以内に投与することを含む。また、本明細書では同時投与に、１つの有効成分を第二の有効成分の０．５時間、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１６時間、２０時間、または２４時間以内に投与することを含む実施形態が企図される。同時投与には、２つの有効成分を同時に、ほぼ同時に（例えば、互いに約１分、５分、１０分、１５分、２０分、若しくは３０分以内に）、または任意の順序で連続して投与することを含む。同時投与は、同時配合（すなわち、両方の有効成分を含む１つの医薬組成物を調整すること）によって達成することができる。その他の実施形態では、有効成分は別途に調合することができる。有効成分及び／または補助剤は、互いに連結するか、または共役し得る。本明細書に記載の化合物は、化学療法または放射線治療などの癌治療と組み合わせてもよい。
「関連した」「に関連する」という用語は、疾患に関連する物質または物質の活性若しくは機能の文脈において、物質または物質の活性もしくは機能によって疾患が引き起こされる（全体または一部）、物質または物質の活性もしくは機能によって疾患の症状が引き起こされる（全体または一部）、または物質または物質の活性もしくは機能によって化合物の副作用（例えば、毒性）が引き起こされる（全体または一部）ことを意味する。
「患者」「対象」「それらを必要とする患者」及び「それらを必要とする対象」は、本明細書において同義的に使用され、本明細書に記載のとおり医薬組成物を投与することによって治療することができる疾患または病態に罹患している生体またはその傾向にある生体を指す。非限定例としては、ヒト、他の哺乳類、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、雌ウシ、シカ及び他の非哺乳類動物が挙げられる。いくつかの実施形態では、患者はヒトである。「癌患者」は、癌が発現しているか、またはその傾向にある患者である。
「疾患」または「病態」は、本明細書に記載の化合物または方法により治療可能な患者若しくは対象の状態若しくは健康状態を指す。本発明で使用する場合、疾患は、癌を指すこともある。
本発明で使用する場合、「癌」は、哺乳類において発見されるすべての癌、新生物、または悪性腫瘍若しくは良性腫瘍（白血病、癌及び肉腫など）を指す。例示的癌としては、急性骨髄性白血病（「ＡＭＬ」）、慢性骨髄性白血病（「ＣＭＬ」）及び脳腫瘍、乳癌、膵癌、大腸癌、肝癌、腎癌、肺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、卵巣癌、肉腫、前立腺癌が挙げられる。更なる例としては、頸部癌、胃癌、頭頸部癌、子宮癌、中皮腫、転移性骨癌、髄芽腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発骨髄腫、神経芽細胞腫、卵巣癌、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性高分子グロブリン血症、原発性脳腫瘍、癌、悪性脾インスリノーマ（ｉｎｓｕｌａｎｏｍａ）、悪性カルチノイド、膀胱癌、妊娠前皮膚病変、精巣癌、リンパ腫、甲状腺癌、神経芽細胞腫、食道癌、尿生殖路癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌、並びに内分泌腫瘍及び外分泌腫瘍が挙げられる。
「白血病」は、広く造血器官の進行性悪性疾患を指し、一般に血液中及び骨髄中においてゆがめられた白血球及びこれらの前駆体の増殖及び発現を特徴とする。白血病は、概して、臨床的に、（１）疾患の持続時間及び形質−急性または慢性、（２）関与する細胞の型、骨髄（骨髄性）、リンパ様（リンパ性）、または単球性及び（３）血液中における異常細胞の増加または非増加−白血性または非白血性（亜白血性）に基づいて分類される。マウス白血病モデルは、インビボ白血病性活性の予測として、広範にわたって認められている。Ｐ３８８細胞アッセイにおいて試験結果が陽性である化合物は、一般に、治療対象である白血病の型と関係なく、わずかなレベルの抗白血病性活性が示されると考えられている。したがって、本発明は、急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球白血病、慢性顆粒球性白血病、急性前骨髄球白血病、成人性Ｔ細胞白血病、無白血性白血病、白血球細胞血液白血病、好塩基球性白血病（ｂａｓｏｐｈｙｌｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ）、芽球性白血病、ウシ白血病、慢性骨髄球白血病、皮膚白血病、胎生細胞性白血病、好酸性白血病、グロス白血病、有毛細胞性白血病、血芽球性白血病、血球芽細胞性白血病、組織球性白血病、幹細胞白血病、急性単球性白血病、白血球減少症白血病、リンパ性白血病、リンパ芽球性白血病、リンパ性白血病、リンパ行性白血病、リンパ様白血病、リンパ肉腫細胞白血病、肥満細胞性白血病、巨核球性白血病、小骨髄芽球性白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄球性白血病、骨髄性顆粒球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ白血病、形質細胞性白血病、多発性骨髄腫、プラズマ細胞性白血病、前骨髄球性白血病、リーダー細胞性白血病、球性単球性白血病、幹細胞白血病、亜白血性白血病、及び未分化細胞性白血病を治療することを含む白血病の治療方法を含む。
「肉腫」という用語は、一般に、胚性結合組織などの物質で構成されている腫瘍を指し、一般に、筋原線維または均質な物質に埋め込まれ、密接に詰まった細胞から構成される。抗新生物チオール結合性ミトコンドリアオキシダントと抗癌剤と組み合わせて治療可能な肉腫としては、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒色肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、アバネシー肉腫（Ａｂｅｍｅｔｈｙ’ｓ ｓａｒｃｏｍａ）、脂肪性肉腫（ａｄｉｐｏｓｅ ｓａｒｃｏｍａ）、脂肪肉腫（ｌｉｐｏｓａｒｃｏｍａ）、胞状軟部肉腫、エナメル芽細胞の肉腫、ブドウ状肉腫、緑色腫肉腫、絨毛癌、胎児性肉腫、ウィルムス腫瘍肉腫、子宮内膜肉腫、間質性肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞免疫芽球性肉腫、イェンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉腫肉腫、傍骨性肉腫、網状赤血球肉腫、ラウス肉腫、漿液嚢胞性肉腫、滑膜肉腫、及び毛細管拡張性肉腫が挙げられる。
「黒色腫」という用語は、皮膚のメラニン細胞系及び他の器官から発生する腫瘍を意味する。抗新生物チオール結合性ミトコンドリアオキシダントと抗癌剤と組み合わせて治療可能な黒色腫としては、例えば、末端性ほくろ性黒色腫、メラニン欠乏性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫（Ｃｌｏｕｄｍａｎ’ｓ ｍｅｌａｎｏｍａ）、Ｓ９１黒色腫、ハーディングパッセー黒色腫、若年性黒色腫、悪性黒子黒色腫、悪性黒色腫、結節性黒色腫、爪下黒色腫、及び表在拡大型黒色が挙げられる。
「癌」という用語は、周囲組織浸潤し、転移を起こす傾向にある上皮細胞から構成される悪性新生物を指す。抗新生物チオール結合性ミトコンドリアオキシダントと抗癌剤との組み合わせにより治療可能な例示的癌としては、例えば、腺房癌腫、小葉癌、腺嚢癌腫、腺様嚢胞癌、腺癌、副腎皮質の癌腫、肺胞癌腫、細気管支肺胞上皮癌、基底細胞癌、基底細胞性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｂａｓｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、類基底細胞癌、基底鱗状細胞癌腫、肺胞上皮癌、細気管支癌、気管支癌、大脳様癌腫、胆管細胞癌、絨毛癌、膠様癌、コメド癌、子宮体部癌、篩状癌、鎧状癌、皮膚癌、円筒状癌腫、円柱細胞癌腫、腺管癌、癌腫デューラム、胎生期癌、髄様癌、扁平上皮癌、腺様上皮癌、外向発育癌、潰瘍癌、線維癌、ゼラチン状癌腫、コロイド腺癌、巨細胞癌、巨細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｇｉｇａｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、腺癌、顆粒膜細胞癌腫、毛母癌、血様癌、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子様癌腫、副腎様癌（ｈｙｐｅｍｅｐｈｒｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、小児胎生期癌、上皮内癌、表皮内癌、上皮内癌腫、クロムペッヘル癌（Ｋｒｏｍｐｅｃｈｅｒ’ｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、クルチツキー細胞癌（Ｋｕｌｃｈｉｔｚｋｙ−ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、大細胞癌腫、レンズ形癌腫、レンズ状癌、脂肪腫様癌、リンパ上皮癌、髄様癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｅｄｕｌｌａｒｅ）、髄様癌（ｍｅｄｕｌｌａｒｙ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、黒色癌、軟癌、粘液癌、粘液分泌癌、粘液細胞癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｍｕｃｏｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、粘液性類表皮癌、粘液癌、粘液癌腫、粘液腫様癌、上咽頭癌、燕麦細胞癌、骨化性癌、類骨癌腫、乳頭癌、門脈周囲癌、上皮内癌、有棘細胞癌腫、髄質様の癌腫、腎臓の腎細胞癌、予備細胞癌、肉芽腫様癌腫（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｓａｒｃｏｍａｔｏｄｅｓ）、総排泄腔癌、硬癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソラノイド癌腫（ｓｏｌａｎｏｉｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、球状細胞癌、紡錘細胞癌、海綿様癌、扁平上皮癌、扁平上皮細胞癌、紐様癌（ｓｔｒｉｎｇ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、血管拡張癌、血管拡張性癌（ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｔｅｌａｎｇｉｅｃｔｏｄｅｓ）、移行上皮癌、結節癌、結節癌、疣贅性癌（Ｖｅｒｒｕｃｏｕｓ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、及び絨毛癌が挙げられる。
「抗癌剤」は、明白な通常の意味に従って使用され、抗腫瘍性特性または細胞の成長若しくは増殖を阻害する能力を有する組成物（例えば、化合物、薬剤、拮抗物質、阻害物質、修飾物質）を指す。いくつかの実施形態では、抗癌剤は化学療法薬である。抗癌剤は、癌の治療用としてＦＤＡまたは米国以外の同様の国の規制機関に認可された薬剤であってもよい。
抗癌剤の例としては、限定されないが、以下が挙げられる：ＭＥＫ（例えば、ＭＥＫ１、ＭＥＫ２またはＭＥＫ１及びＭＥＫ２）阻害物質（例えば、ＸＬ５１８、ＣＩ−１０４０、ＰＤ０３５９０１、セルメチニブ／ＡＺＤ６２４４、ＧＳＫ１１２０２１２／トラメチニブ、ＧＤＣ−０９７３、ＡＲＲＹ−１６２、ＡＲＲＹ−３００、ＡＺＤ８３３０、ＰＤ０３２５９０１、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＴＡＫ−７３３、ＰＤ３１８０８８、ＡＳ７０３０２６、ＢＡＹ ８６９７６６）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、イホスファミド、クロラムブシル、ブスルファンメルファラン、 メクロレタミン、ウラムスチン、チオテパ、ニトロソ尿素、ナイトロジェンマスタード（例えば、ｍｅｃｈｌｏｒｏ）、ｔｈａｍｉｎｅ、シクロホスファミド、クロラムブシル、メルファラン（ｍｅｉｐｈａｌａｎ））、エチレンイミン（ｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅｓ）及びメチルメラミン（ｍｅｔｈｙｌｍｅｌａｍｉｎｅｓ）（例えば、（ヘキサメチルメラミン（ｈｅｘａｍｅｔｈｙｌｍｅｌａｍｉｎｅ）、チオテパ）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン）、ニトロソ尿素（例えば、カルムスチン、ロムスチン（ｌｏｍｕｓｉｔｎｅ）、セムスチン、ストレプトゾシン）、トリアゼン（ダカルバジン（ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）））、抗−代謝産物（例えば、５−アザチオプリン、ロイコボリン、カペシタビン、フルダラビン、ゲムシタビン、ペメトレキセド、ラルチトレキセド（ｒａｌｔｉｔｒｅｘｅｄ）、葉酸類縁体（例えば、メトトレキサート）、またはピリミジン類縁体（例えば、フルオロウラシル、フロクスウリジン、シタラビン）、プリン類縁体（例えば、メルカプトプリン、チオグアニン、ペントスタチン）など）、植物アルカロイド（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン、ポドフィロトキシン、パクリタキセル、ドセタキセルなど）、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド（ＶＰ１６）、エトポシドリン酸塩、テニポシドなど）、抗腫瘍性抗生物質（例えば、ドキソルビシン、アドリアマイシン、ダウノルビシン、エピルビシン、アクチノマイシン、ブレオマイシン、マイトマイシン、ミトキサントロン、プリカマイシンなど）、白金系化合物（例えば、シスプラチン、オキサロプラチン（Ｏｘａｌｏｐｌａｔｉｎ）、カルボプラチン）、アントラセンディオン（例えば、ミトキサントロン）、置換ウレア（例えば、ヒドロキシウレア）、メチルヒドラジン誘導体（例えば、プロカルバジン）、副腎皮質抑制剤（例えば、ミトタン及びアミノグルテチミド）、エピポドフィロトキシン（例えば、エトポシド）、抗生物質（例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、ブレオマイシン）、酵素（例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ）、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ阻害剤（例えば、Ｕ０１２６、ＰＤ９８０５９、ＰＤ１８４３５２、ＰＤ０３２５９０１、ＡＲＲＹ−１４２８８６、ＳＢ２３９０６３、ＳＰ６００１２５、ＢＡＹ ４３−９００６、ワートマニンまたはＬＹ２９４００２、Ｓｙｋ阻害因子、ｍＴＯＲ阻害剤、抗体（例えば、リツキシマブ）、ゴシポール（ｇｏｓｓｙｐｈｏｌ）、ｇｅｎａｓｅｎｓｅ、ポリフェノールＥ、クロロフシン（Ｃｈｌｏｒｏｆｕｓｉｎ）、オールトランス−レチノイン酸（ＡＴＲＡ）、ブリオスタチン、腫瘍壊死因子関連アポトーシス−誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、５−アザ−２’−デオキシシチジン、すべてのトランスレチノイン酸、ドキソルビシン、ビンクリスチン、エトポシド、ゲムシタビン、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ．ＲＴＭ．）、ゲルダナマイシン、１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ）、フラボピリドール、ＬＹ２９４００２、ボルテゾミブ、トラスツズマブ、 ＢＡＹ １１−７０８２、ＰＫＣ４１２、ＰＤ１８４３５２、２０−エピ−１、２５ジヒドロキシビタミンＤ３、５−エチニルウラシル；アビラテロン；アクラルビシン； アシルフルベン（ａｃｙｌｆｕｌｖｅｎｅ）；アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン；アルデスロイキン；ＡＬＬ−ＴＫアンタゴニスト；アルトレタミン；アンバススチン；アミドックス（ａｍｉｄｏｘ）；アミフォスチン；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレライド；アナストロゾール；アンドログラホライド；血管新生阻害剤；アンタゴニストＤ；アンタゴニストＧ；アンタレリクス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）；抗背方化形態形成タンパク質−１；抗男性ホルモン、前立腺癌腫；抗エストロゲン；アンチネオプラストン；アンチセンスオリゴヌクレオチド；アフィジコリングリシネート；アポトーシス遺伝子モジュレーター；アポトーシスレギュレータ；アプリン酸；アラ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン（ａｔａｍｅｓｔａｎｅ）；アトリムスチン（ａｔｒｉｍｕｓｔｉｎｅ）；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）１；アキシナスタチン２；アキシナスタチン３；アゼセトロン；アザトキシン（ａｚａｔｏｘｉｎ）；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノール（ｂａｌａｎｏｌ）；バチマスタット；ＢＣＲ／ＡＢＬアンタゴニスト；ベンゾクロリン（ｂｅｎｚｏｃｈｌｏｒｉｎｓ）；ベンゾイルスタウロスポリン；βラクタム誘導体；β−アレチン；βクラマイシンＢ；ベツリン酸；ｂＦＧＦ阻害剤；ビカルタミド；ビサントレン；ビスアジリジニルスペルミン；ビスナフィド；ビストラテンＡ；ビゼレシン；ブレフラート；ブロピリミン；ブドチタン；ブチオニンスルホキシイミン；カルシポトリオール；カルフォスチンＣ；カンプトセシン誘導体；カナリアポックスＩＬ−２；カペシタビン；カルボキサミド−アミノトリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール；ＣａＲｅｓｔ Ｍ３；ＣＡＲＮ ７００；軟骨由来阻害剤；カルゼレシン；カゼインキナーゼ阻害剤（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロレリクス；クロリン（ｃｈｌｏｒｉｎ）；クロロキノキサリンスルホンアミド；シカプロスト；シス−ポルフィリン；クラドリビン；クロミフェン類似体；クロトリマゾール；コリスマイシンＡ；コリスマイシンＢ；コンブレタスタチンＡ４；コンブレタスタチン類似体；コナゲニン；クランベシジン８１６；クリスナトール；クリプトフィシン８；クリプトフィシンＡ誘導体；クラシンＡ；シクロペントアントラキノン（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅ）；シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シペマイシン；シタラビンオクホスファート；細胞溶解因子；シトスタチン；ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）；デシタビン；デヒドロジデムニンＢ；デスロレリン；デキサメタゾン；デックスイフォスファミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；デクスラゾキサン；デクスベラパミル；ジアジクォン；ジデムニンＢ；ジドックス；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ５‐アザシチジン；９−ジオキサマイシン；ジフェニルスピロムスチン；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロロキシフェン；ドロナビノール；デュオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロルニチン；エレメン；エミテフル；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチン類似体；エストロゲンアゴニスト；エストロゲンアンタゴニスト；エタニダゾール；エトポシドホスファート；エクセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン；フェンレチニド；フィルグラスチム；フマステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン；フルアステロン；フルダラビン；塩酸フルオロダウノルニシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ホルフェニメクス；ホルメスタン；ホストリエシン；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリクス；ゼラチナーゼ阻害剤；ゲムシタビン；グルタチオン阻害剤；ヘプスルファム；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン；イロマスタット；イミドアゾアクリドン；イミキモド；免疫賦活ペプチド；インスリン様成長因子−１受容体阻害剤；インターフェロンアゴニスト；インターフェロン；インターロイキン；ヨーベングアン；ヨードドキソルビシン；イポメアノール，４−；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン；イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）；イソホモハリコンドリンＢ（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ Ｂ）；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリドＦ；ラメラリンＮトリアセタート；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；硫酸レンチナン；レプトルスタチン；レトロゾール；白血病阻害因子；白血球αインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；リュープロレリン；レバミゾール；リアロゾール；直鎖ポリアミン類似体；親油性ジサッカリドペプチド；親油性白金化合物；リッソクリナミド７；ロバプラチン；ロンブリシン；ロメトレキソール；ロニダミン；ロソキサントロン；ロバスタチン；ロキソリビン；ルルトテカン；ルテチウムテキサフィリン；リソフィリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）；溶解ペプチド；マイタンシン；マンノスタチンＡ；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリライシン阻害剤；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤；メノガリル；メルバロン；メテレリン；メチオニナーゼ（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎａｓｅ）；メトクロプラミド；ＭＩＦ阻害剤；ミフェプリストーン；ミルテホシン；ミリモスチム；不適正二本鎖ＲＮＡ；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシン類似体；ミトナフィド；マイトトキシン（ｍｉｔｏｔｏｘｉｎ）線維芽細胞成長因子−サポリン；ミトキサントロン；モファロテン；モルグラモスチム；モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリル脂質Ａ＋ミオバクテリウム細胞壁ｓｋ；モピダモール；多剤耐性遺伝子阻害剤；多発性腫瘍抑制因子１ベースの療法；マスタード抗癌剤；ミカペルオキシドＢ；マイコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスチプ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）；ナフテルピン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン；ネリドロン酸；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン；一酸化窒素モジュレーター；ニトロキシド（ｎｉｔｒｏｘｉｄｅ）抗酸化剤；ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン；経口サイトカイン誘導剤；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン；パラウアミン（ｐａｌａｕａｍｉｎｅ）；パルミトイルリゾキシン；パミドロン酸；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン；パゼリプチン；ペガスパルガーゼ；ペルデシン；ペントサンポリスルフェートナトリウム；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン；ペルホスファミド；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；酢酸フェニル；ホスファターゼ阻害剤；ピシバニール；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム；プラセチン（ｐｌａｃｅｔｉｎ）Ａ；プラセチンＢ；プラスミノーゲンアクチベーター阻害剤；白金複合体；白金化合物；白金−トリアミン複合体；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニゾン；プロピルビスアクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害剤；プロテインＡベースの免疫モジュレーター；タンパク質キナーゼＣ阻害剤；タンパク質キナーゼＣ阻害剤（微細藻類）；タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤；プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤；プルプリン；ピラゾロアクリジン；ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン抱合体；ｒａｆアンタゴニスト；ラルチトレキセド；ラモセトロン；ｒ
ａｓフェネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；ｒａｓ阻害剤；ｒａｓＧＡＰ阻害剤；脱メチル化レテリプチン；レニウムＲｅ １８６エチドロン酸；リゾキシン；リボザイム；ＲＩＩレチンアミド；ログレチミド；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメクス；ルビギノンＢｌ；ルボキシル；サフィンゴール；サイントピン；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ１模倣物；セムスチン；老化由来阻害剤１；センスオリゴヌクレオチド；シグナル伝達阻害剤；シグナル伝達モジュレーター；単鎖抗原結合性タンパク質；シゾフィラン；ソブゾキサン；ナトリウムボロカプタート（ｓｏｄｉｕｍ ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）；フェニル酢酸ナトリウム；ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン（ｓｏｎｅｒｍｉｎ）；スパルホス酸；スピカマイシンＤ；スピロムスチン；スピロムスチン；スポンギスタチン１；スクアラミン；幹細胞阻害剤；幹細胞分裂阻害剤；スチピアミド；ストロメライシン阻害剤；スルフィノシン（ｓｕｌｆｉｎｏｓｉｎｅ）；スーパーアクティブ（ｓｕｐｅｒａｃｔｉｖｅ）血管作用性腸管ペプチドアンタゴニスト；スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）；スラミン；スワインソニン；合成グリコサミノグリカン；タリムスチン；タモキシフェンｍｅｔｈｉｏｄｉｄｅ；タウロムスチン；タザロテン；テコガランナトリウム；テガフル；テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメレース阻害剤；テモポルフィン；テモゾロマイド；テニポシド；テトラクロロデカオキシド（ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｏｄｅｃａｏｘｉｄｅ）；テトラゾミン；タリブラスチン；チオコラリン；トロンボポエチン；トロンボポイエチン模倣物；チマルファシン；サイモポイエチン受容体アゴニスト；チモトリナン；甲状腺刺激ホルモン；スズエチルエチオプルプリン（ｔｉｎ ｅｔｈｙｌ ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）；チラパザミン；チタノセンジクロリド（ｔｉｔａｎｏｃｅｎｅ ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）；トポテカン；トレミフェン；全能性幹細胞因子；翻訳阻害剤；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン；トリメトレキセート；トリプトレリン；トロピセトロン；ツロステリド；チロシンキナーゼ阻害剤；チルホスチン；ＵＢＣ阻害剤；ウベニメクス；尿生殖洞由来成長阻害因子；ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト；バプレオチド；バリオリンＢ；ベクター系（赤血球遺伝子療法）；ベラレソール；ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）；ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）；ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）；ボロゾール；ザノテロン；ゼニプラチン；ジラスコルブ；ジノスタチンスチマラマー、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ、Ｄａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ、Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ、Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ、Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、アシビシン；アクラルビシン；塩酸アコダゾール；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アムボマイシン（Ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）；酢酸アメタントロン；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン；バチマスタット；ベンゾデパ；ビカルタミド；塩酸ビサントレン；ビスナフィドジメシラート；ビゼレシン；硫酸ブレオマイシン；ブレキナルナトリウム；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ；カラセミド；カルベチマー；カルボプラチン；カルムスチン；カルビシン塩酸塩カルゼレシン；セデフィンゴール；クロラムブシル；シロレマイシン；クラドリビン；クリスナトールメシラート；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダウノルビシン塩酸塩；デシタビン；デキソルマプラチン；デザグアニン；デザグアニンメシラート；ジアジクォン；ドキソルビシン；ドキソルビシン塩酸塩；ドロロキシフェン；ドロロキシフェンシトラート；ドロモスタノロンプロピオナート；ダウゾマイシン；エダトレキサート；エフロルニチン塩酸塩；エルサミトルシン；エンロプラチン；エンプロマート；エピプロピジン；エピルビシン塩酸塩；エルブロゾール；エソルビシン塩酸塩；エストラムスチン；エストラムスチンリン酸ナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；エトポシドリン酸塩；エトプリン；ファドロゾール塩酸塩；ファザラビン；フェンレチニド；フロクスウリジン；フルダラビンリン酸塩；フルオロウラシル；フルロシタビン；ホスキドン；ホストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビン塩酸塩；ヒドロキシウレア；イダルビシン塩酸塩；イホスファミド；イルモホシン；インターロイキンＩＩ（組換えインターロイキンＩＩ（すなわち、ｒＩＬ２）を含む）；インターフェロンα−２ｂ；インターフェロンα−ｎ１；インターフェロンα−ｎ３；インターフェロンβ１ａ；インターフェロンγ−１ｂ；イプロプラチン；イリノテカン塩酸塩；ランレオチドアセテート；レトロゾール；ロイプロリドアセタート；リアロゾール塩酸塩；ロメトレキソールナトリウム；ロムスチン；ロソキサントロン塩酸塩；マソプロコール；マイタンシン；メクロレタミン塩酸塩；メクロレタミン塩酸塩；メレンゲストロールアセタート；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン；ミトクロミン；ミトギリン；ミトマルシン；マイトマイシン；ミトスペル；ミトタン；ミトキサントロン塩酸塩；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン；ペガスパルガーゼ；ペリオマイシン；ペンタムスチン；ペプロマイシン硫酸塩；ペルホスファミド；ピポブロマン；ピポスルファン；ピロキサントロン塩酸塩；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン；プロカルバジン塩酸塩；ピューロマイシン；ピューロマイシン塩酸塩；ピラゾフリン；リボプリン；ログレチミド；サフィンゴール；サフィンゴール塩酸塩；セムスチン；シムトラゼン；スパルホサートナトリウム；スパルソマイシン；スピロゲルマニウム塩酸塩；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル；タリソマイシン；テコガランナトリウム；テガフル；トロキサントロン塩酸塩；テモポルフィン；テニポシド；テロキシロン；テストラクトン；チアミプリン；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；クエン酸トレミフェン；トレミフェンシトラート；トリシリビンリン酸塩；トリメトレキセート；トリメトレキサートグルクロナート；トリプトレリン；ツブロゾール塩酸塩；ウラシルマスタード；ウレデパ；バプレオチド；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸塩；ビンクリスチン硫酸塩；ビンデシン；ビンデシン硫酸塩；ビネピジン硫酸塩；ビングリシナート硫酸塩；ビンロイロシン硫酸塩；ビノレルビンタルタラート；ビンロシジン硫酸塩；ビンゾリジン硫酸塩；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；ゾルビシン塩酸塩；Ｇ２期〜Ｍ期において細胞を停止させる及び／または微小管の形成または安定化を調節する薬剤としては、エルブロゾール（すなわち、Ｒ−５５１０４）；ドラスタチン１０（すなわち、ＤＬＳ−１０及びＮＳＣ−３７６１２８）；イセチオン酸ミボブリン（ＣＩ−９８０として）；ビンクリスチン；ＮＳＣ−６３９８２９；ジスコデルモリド（すなわち、ＮＶＰ−ＸＸ−Ａ−２９６として）、ＡＢＴ−７５１（アボット（Ａｂｂｏｔ）すなわち、Ｅ−７０１０）；アルトリルチン（Ａｌｔｏｒｈｙｒｔｉｎ）（アルトリルチンＡ及びアルトリルチンＣなど）；スポンギスタチン（例えば、スポンギスタチン１、スポンギスタチン２、スポンギスタチン３、スポンギスタチン４、スポンギスタチン５、スポンギスタチン６、スポンギスタチン７、スポンギスタチン８、スポンギスタチン９など）；セマドチン塩酸塩（すなわち、ＬＵ−１０３７９３及びＮＳＣ−Ｄ−６６９３５６）；エポチロン類（例えば、エポチロンＡ、エポチロンＢ、エポチロンＣ（すなわち、デスオキシエポチロンＡまたはｄＥｐｏＡ）、エポチロンＤ（すなわち、ＫＯＳ−８６２、ｄＥｐｏＢ及びデスオキシエポチロンＢ）、エポチロンＥ、エポチロンＦ、エポチロンＢ Ｎ−オキシド、エポチロンＡ Ｎ−オキシド、１６−アザエポチロンＢ、２１−アミノエポチロンＢ（すなわち、ＢＭＳ−３１０７０５）、２１−ヒドロキシエポチロンＤ（すなわち、デスオキシエポチロンＦまたはｄＥｐｏＦ）、２６−フルオロエポチロン、オーリスタチンＰＥ（すなわち、ＮＳＣ−６５４６６３）、ソブリドチン（すなわち、ＴＺＴ−１０２７）、ＬＳ−４５５９−Ｐ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、すなわち、ＬＳ−４５７７）、ＬＳ−４５７８（Ｐｈａｒｍａｃｉａ、すなわち、ＬＳ−４７７−Ｐ）、ＬＳ−４４７７（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、ＬＳ−４５５９（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）、ＲＰＲ−１１２３７８（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ビンクリスチン硫酸塩、ＤＺ−３３５８（Ｄａｉｉｃｈｉ）、ＦＲ−１８２８７７（Ｆｕｊｉｓａｗａ、すなわち、ＷＳ−９８８５Ｂ）、ＧＳ−１６４（Ｔａｋｅｄａ）、ＧＳ−１９８（Ｔａｋｅｄａ）、ＫＡＲ−２（ハンガリー科学アカデミー）、ＢＳＦ−２２３６５１（ＢＡＳＦ、すなわち、ＩＬＸ−６５１及びＬＵ−２２３６５１）、ＳＡＨ−４９９６０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＳＤＺ−２６８９７０（Ｌｉｌｌｙ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＭ−９７（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ）、ＡＭ−１３２（Ａｒｍａｄ）、ＡＭ−１３８（Ａｒｍａｄ／Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ）、ＩＤＮ−５００５（Ｉｎｄｅｎａ）、クリプトフィシン５２（すなわち、ＬＹ−３５５７０３）、ＡＣ−７７３９（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ、すなわち、ＡＶＥ−８０６３Ａ及びＣＳ−３９．ＨＣｌ）、ＡＣ−７７００（Ａｊｉｎｏｍｏｔｏ、すなわち、ＡＶＥ−８０６２、ＡＶＥ−８０６２Ａ、ＣＳ−３９−Ｌ−Ｓｅｒ．ＨＣｌ及びＲＰＲ−２５８０６２Ａ）、ビチレブアミド、ツブリシンＡ、カナデンソール、センタウレイジン（すなわち、ＮＳＣ−１０６９６９）、Ｔ−１３８０６７（Ｔｕｌａｒｉｋ、すなわち、Ｔ−６７、ＴＬ−１３８０６７及びＴＩ−１３８０６７）、ＣＯＢＲＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ Ｈｕｇｈｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、すなわち、ＤＤＥ−２６１及びＷＨＩ−２６１）、Ｈ１０（（Ｋａｎｓａｓ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、Ｈ１６（（Ｋａｎｓａｓ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、オンコシジンＡ１（すなわち、ＢＴＯ−９５６及びＤＩＭＥ（Ｋａｎｓａｓ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、ＤＤＥ−３１３（Ｐａｒｋｅｒ Ｈｕｇｈｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、フィジアノリドＢ、ラウリマリド、ＳＰＡ−２（Ｐａｒｋｅｒ Ｈｕｇｈｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＳＰＡ−１（Ｐａｒｋｅｒ Ｈｕｇｈｅｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、すなわち、ＳＰＩＫＥＴ−Ｐ）、３−ＩＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｔｏｎ／Ｍｔ． Ｓｉｎａｉ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、すなわち、ＭＦ−５６９）、ナルコシン（ＮＳＣ−５３６６としても公知）、ナスカピン、Ｄ−２４８５１（Ａｓｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、Ａ−１０５９７２（Ａｂｂｏｔｔ）、ヘミアステルリン、３−ＢＡＡＢＵ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｔｏｎ／Ｍｔ． Ｓｉｎａｉ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、すなわち、ＭＦ−１９１）、ＴＭＰＮ（Ａｒｉｚｏｎａ Ｓｔａｔｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、バナドセンアセチルアセトナート、Ｔ−１３８０２６（Ｔｕｌａｒｉｋ）、モンサトロール、イナノシン（すなわち、ＮＳＣ−６９８６６６）、３−ＩＡＡＢＥ（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｔｏｎ／Ｍｔ． Ｓｉｎａｉ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、Ａ−２０４１９７（Ａｂｂｏｔｔ）、Ｔ−６０７（Ｔｕｌａｒｉｋ、すなわち、Ｔ−９００６０７）、ＲＰＲ−１１５７８１（Ａｖｅｎｔｉｓ）、エロイテロビン類（例えば、デスメチルエロイテロビン、デスアセチルエロイテロビン、イソエロイテロビンＡ及びＺ−エロイテロビンなど）、カリバエ
オシド、カリバエオリン、ハリコンドリンＢ、Ｄ−６４１３１（Ａｓｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８１４４（Ａｓｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、ジアゾナミドＡ、Ａ−２９３６２０（Ａｂｂｏｔｔ）、ＮＰＩ−２３５０（Ｎｅｒｅｕｓ）、タッカロノリドＡ、ＴＵＢ−２４５（Ａｖｅｎｔｉｓ）、Ａ−２５９７５４（Ａｂｂｏｔｔ）、ジオゾスタチン、（−）−フェニルアヒスチン（すなわち、ＮＳＣＬ−９６Ｆ０３７）、Ｄ−６８８３８（Ａｓｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、Ｄ−６８８３６（Ａｓｔａ Ｍｅｄｉｃａ）、ミオセベリンＢ、Ｄ−４３４１１（Ｚｅｎｔａｒｉｓ、すなわち、Ｄ−８１８６２）、Ａ−２８９０９９（Ａｂｂｏｔｔ）、Ａ−３１８３１５（Ａｂｂｏｔｔ）、ＨＴＩ−２８６（すなわち、ＳＰＡ−１１０、トリフルオロ酢酸塩）（Ｗｙｅｔｈ）、Ｄ−８２３１７（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、Ｄ−８２３１３（Ｚｅｎｔａｒｉｓ）、ＳＣ−１２９８３（ＮＣＩ）、レスベラスタチンリン酸ナトリウム、ＢＰＲ−０Ｙ−００７（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｈｅａｌｔｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ）、及びＳＳＲ−２５０４１１（Ｓａｎｏｆｉ）が挙げられる。ステロイド（例えば、ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）、フィナステリド、アロマターゼ阻害剤、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト（ＧｎＲＨ）（例えばゴセレリン、またはロイプロリド）副腎皮質ステロイド（例えば、プレドニゾン）、プロゲスチン（例えば、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸メドロキシプロゲステロン）、エストロゲン（例えば、エチルスチルベストロール（ｄｉｅｔｈｌｙｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ）、エチニルエストラジオール）、抗エストロゲン剤（例えばタモキシフェン）、アンドロゲン（例えばテストステロンプロピオナート、フルオキシメステロン）、抗男性ホルモン例えばフルタミド）、免疫賦活薬（例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ（ＢＣＧ）、レバミゾール、インターロイキン２、α−インターフェロンなど）、モノクローナル抗体（例えば、抗ＣＤ２０、抗ＨＥＲ２、抗ＣＤ５２、抗ＨＬＡ−ＤＲ、及び、抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体）、免疫毒素（（例えば、抗ＣＤモノクローナル抗体−カリケアマイシン抱合体、抗ＣＤモノクローナル抗体−シュードモナス外毒素抱合体など）、放射免疫療法（例えば、１１１Ｉｎ、９０Ｙまたは１３１Ｉなどに抱合した抗体ＣＤ２０モノクローナル抗体）、トリプトリド、ホモハリングトニン（ｈｏｍｏｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ）、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、トポテカン、イトラコナゾール、ビンデシン、セリバスタチン、ビンクリスチン、デオキシアデノシン、セルトラリン、ピタバスタチン、イリノテカン、クロファジミン、５−ノニルオキシトリプタミン、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、ＥＧＦＲ阻害剤、上皮成長因子レセプター（ＥＧＦＲ）−標的治療または治療法（例えば、ゲフィチニブ（商品名）、エルロチニブ（タルセバ（商品名））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（商品名））、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（商品名））、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（商品名））、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（商品名））、アファチニブ／ＢＩＢＷ２９９２、ＣＩ−１０３３／カネルチニブ、ネラチニブ／ＨＫＩ−２７２、ＣＰ−７２４７１４、ＴＡＫ−２８５、ＡＳＴ−１３０６、ＡＲＲＹ３３４５４３、ＡＲＲＹ−３８０、ＡＧ−１４７８、ダコミチニブ／ＰＦ２９９８０４、ＯＳＩ−４２０／デスメチルエルロチニブ、ＡＺＤ８９３１、ＡＥＥ７８８、ペリチニブ／ＥＫＢ−５６９、ＣＵＤＣ−１０１、ＷＺ８０４０、ＷＺ４００２、ＷＺ３１４６、ＡＧ−４９０、ＸＬ６４７、ＰＤ１５３０３５、ＢＭＳ−５９９６２６）、ソラフェニブ、イマチニブ、スニチニブ、ダサチニブなど。
「化学療法的」または「化学療法剤」は明白な通常の意味に従って使用され、抗腫瘍性特性または細胞の成長若しくは増殖を阻害する能力を有する化学的組成物または化合物を指す。
本発明で使用する場合「癌モデル有機体」は、癌の表現型または有機体内で成分を引き起こす癌の活性を示す有機体である。用語癌は、上記に定義している。多種多様な有機体は、癌モデル有機体として機能することができ、例えば、癌細胞及び哺乳類の有機体（例えばマウスまたはラットなどのげっ歯類など）及び霊長類（ヒトなど）が挙げられる。癌細胞株は、当業者によって広範にわたって、インビボ癌と類似している表現型または遺伝子型を示す細胞として理解される。本発明で使用する場合、癌細胞株としては、動物（例えばマウス）及びヒトの細胞株が挙げられる。
Ｉ．組成
本明細書では次式を有する化合物を提供する：
Figure 2016530266
ＹはＣ（Ｒ８）またはＮである。ＺはＣ（Ｒ９）またはＮである。Ｘは−ＣＨ２−、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ１０）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）２−である。Ｒ１は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１Ｒ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ２は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ３は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ４Ａ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ５は、独立して水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である（式中、Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換のシクロアルキル基を形成し、Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であって、Ｒ７はＨ、Ｄ、Ｆまたは−ＣＨ３である）。Ｒ８は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ８Ａ、−ＯＲ８Ａ、−ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８Ｒ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＯＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ９は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ９Ａ、−ＯＲ９Ａ、−ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９Ｒ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＯＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＮＲ９ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ９ＡＲ９Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。Ｒ１０はＨ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５である。Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ８Ａ、Ｒ８Ｂ、Ｒ９Ａ、及びＲ９Ｂは、独立して水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、 置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。記号ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ８及びｎ９は独立して１，２，または３である。
Ｒ１は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１Ｒ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂであってもよい。Ｒ１は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１Ａであってもよい。Ｒ１は水素であってもよい。Ｒ１はハロゲンであってもよい。Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい。Ｒ１Ａは本明細書に記載されるとおりである。
Ｒ１は、水素、ハロゲン、−ＯＲ１Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい（式中、Ｒ１Ａは本明細書に記載されるとおりである）。Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい（式中、Ｒ１Ａは水素、置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）。Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい（式中、Ｒ１Ａは置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）。
Ｒ１は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１Ａ置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１Ａ置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１Ａ置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１Ａ置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１Ａ置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ１は、メチル基であってもよい。Ｒ１は、エチル基であってもよい。Ｒ１は、プロピル基であってもよい。
Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１はＲ１Ａ置換アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換またはＲ１Ａ置換または非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってよい。Ｒ１は、置換または非置換５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換またはＲ１Ａ置換または非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ１は、置換またはＲ１Ａ置換または非置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ１は、置換または非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、置換または非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１は、置換またはＲ１Ａ置換または非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５または６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換５または６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ１は、Ｒ１Ａ置換または非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１は、‐Ｏ−Ｌ１Ａ−Ｒ１Ａであってもよい。Ｌ１Ａは置換若しくは非置換アルキレン基または置換または非置換ヘテロアルキル基である。Ｌ１Ａは、置換または非置換アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは‐（ＣＨ２）ｍ−Ｒ１Ａであってもよく、ｍは、１、２、３、４または５から選択される整数である。記号ｍは１であってもよい。記号ｍは２であってもよい。記号ｍは３であってもよい。記号ｍは４であってもよい。記号ｍは５であってもよい。
Ｌ１Ａは、置換または非置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換２〜２０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換２〜２０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換または非置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは、非置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ１Ａは‐（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ１−Ｒ１Ａであってもよく、ｍ１は、１、２、３、または４の整数である。記号ｍ１は１であってもよい。記号ｍ１は２であってもよい。記号ｍ１は３であってもよい。記号ｍ１は４であってもよい。
Ｒ１は−Ｏ−Ｌ１Ａ−Ｎ（Ｒ１Ｃ）−Ｓ（Ｏ）ｎ１−Ｒ１Ａであってもよい。Ｒ１Ａは本明細書に記載されるとおりである。Ｒ１Ａは、水素または置換若しくは非置換アルキル基（例えば、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基）であってもよい。
Ｒ１Ａは、水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＲ１２、−Ｎ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＣＯＯＲ１２、−ＣＯＮ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｒ１２）、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１２、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ１２、−Ｓ（Ｏ）４Ｒ１２、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＮＨＮ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＯＮ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１２．１）（Ｒ１２．２）、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１２、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１２、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＲ１２、−ＮＨＯＲ１２、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１１置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１１置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１１置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１１置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１１置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１１置換若しくは非置換ヘテロアリール基である、化合物。
Ｒ１１は、水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１２置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１２置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ１２、Ｒ１２．１、及びＲ１２．２は、独立して水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ１Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）３Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）ＳＯ２ＣＨ３、
Figure 2016530266
 −（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ａまたは−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ｂであってもよい。記号は、２〜２０である。Ｇ１ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、−Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、
Figure 2016530266
 であってもよく；
Ｇ１ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 である。記号ｎは２〜１０であってもよい。記号ｎは２〜８であってもよい。記号ｎは２〜５であってもよい。記号ｎは２、３または４であってもよい。記号ｎは３であってもよい。
Ｒ１Ａは−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、２〜５である）であってもよい。
Ｒ１Ｂ及びＲ１Ｃは、独立して水素、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ１Ｂは、水素または置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。
Ｒ１Ｃは独立して水素、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、Ｒ１２置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１２置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１２置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
式（Ｉ）の化合物は次式を有してもよい：
Figure 2016530266
記号ｎは本明細書に記載されるとおりである。記号ｎは１、２、３または４であってもよい。記号ｎは１であってもよい。記号ｎは２であってもよい。記号ｎは３であってもよい。記号ｎは４であってもよい。
Ｒ２は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂである。Ｒ２は、水素、ハロゲン、−ＣＦ３，−ＯＲ２Ａ，または−ＮＲ２ＡＲ２Ｂであってもよい。Ｒ２は水素であってもよい。Ｒ２は、ハロゲン基であってもよい。Ｒ２は、‐ＣＦ３基であってもよい。Ｒ２は、−ＯＲ２Ａ基であってもよい。Ｒ２は、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ基であってもよい。Ｒ２及びＲ３は、水素であってもよい。
Ｒ２は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ２は置換アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ５置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換Ｃ１−Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ２は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ２は、メチル基であってもよい。Ｒ２は、エチル基であってもよい。Ｒ２は、プロピル基であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ２は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ２は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ２は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ２は、置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ２は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ２は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ２は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ２は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ２は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ３は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂである。Ｒ３は、水素、ハロゲン、−ＣＦ３，−ＯＲ３Ａ、または−ＮＲ３ＡＲ３Ｂであってもよい。Ｒ３は水素であってもよい。Ｒ３は、ハロゲン基であってもよい。Ｒ３は、‐ＣＦ３基であってもよい。Ｒ３は、−ＯＲ３Ａ基であってもよい。Ｒ３は、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ基であってもよい。Ｒ２及びＲ３は、水素であってもよい。
Ｒ３は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ３は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ５置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ３は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ３は、メチル基であってもよい。Ｒ３は、エチル基であってもよい。Ｒ３は、プロピル基であってもよい。
Ｒ３は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ３は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ３は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ３は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ３は置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ３は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ３は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ３は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ３は置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ３は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ３は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ３は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ３は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ３は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ４Ａ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂであってもよい。Ｒ４は水素またはハロゲンであってもよい。Ｒ４は水素であってもよい。Ｒ４はハロゲンであってもよい。
Ｒ４は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ４は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ４は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ５置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ４は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ４は、メチル基であってもよい。Ｒ４は、エチル基であってもよい。Ｒ４は、プロピル基であってもよい。
Ｒ４は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ４は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ４は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ４は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ４は置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ４は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ４は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ４は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ４は置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ４は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ４は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ４は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ４は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ４は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ５は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂであってもよい。
Ｒ５は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ５は置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ５は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ４は、置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ５は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ５は、メチル基であってもよい。Ｒ５は、エチル基であってもよい。Ｒ５は、プロピル基であってもよい。
Ｒ５は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ５は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ５は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ５は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ５は置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ５は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ５は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ５は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ５は置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ５は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ５は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ５は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ５は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ５は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換３〜１０員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換３〜１０員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換３〜１０員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換３〜８員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換３〜８員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換３〜８員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換３〜６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換３〜６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換３〜６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換３員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換４員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換５員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換６員シクロアルキル基を形成してもよい。
Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換を形成してもよく、Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換３〜１０員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換３〜１０員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換３〜８員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換３〜８員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換３〜６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換３〜６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換３員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換３員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換３員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換４員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換４員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換４員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換５員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換５員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換５員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換若しくは非置換６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、Ｒ５Ａ置換６員シクロアルキル基を形成してもよい。Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、非置換６員シクロアルキル基を形成してもよい。
Ｒ５及びＲ６は独立して非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ５及びＲ６は独立して非置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基であってもよい。Ｒ５及びＲ６は独立してメチル基、エチル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ５及びＲ６は独立してメチル基であってもよい。Ｒ５はメチル基またはプロピル基であるとき、Ｒ６はメチル基であってもよい。
Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ６は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ６は、非置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基であってもよい。Ｒ６は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ６はメチル基、エチル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ６は、メチル基であってもよい。Ｒ６は、エチル基であってもよい。Ｒ６は、プロピル基であってもよい。Ｒ６はメチル基であってもよく、Ｒ５はメチル基、エチル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ６はメチル基であってもよく、Ｒ５はメチル基であってもよい。Ｒ６はメチル基であってもよく、Ｒ５はエチル基であってもよい。Ｒ６はメチル基であってもよく、Ｒ５はプロピル基であってもよい。Ｒ６はハロゲンであってもよい。
Ｒ６は本明細書のように記載されてもよく、（Ｒ）立体化学体を有する炭素に付着してもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−メチル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−エチル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｒ）−プロピル基であってもよい。
Ｒ６は本明細書のように記載されてもよく、（Ｓ）立体化学体を有する炭素に付着してもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ４アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−メチル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−エチル基であってもよい。Ｒ６は、（Ｓ）−プロピル基であってもよい。Ｒ５はメチル基またはプロピル基であるとき、Ｒ６は（Ｒ）−メチル基であってもよい。
Ｒ７は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ７Ａ、−ＯＲ７Ａ、−ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７Ｒ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７ＯＲ７Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ７ＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＮＨＮＲ７ＡＲ７Ｂ、−ＯＮＲ７ＡＲ７Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ７ＡＲ７Ｂであってもよい。Ｒ７は水素、ハロゲン、‐ＣＦ３、−ＯＲ７Ａまたは−ＮＲ７ＡＲ７Ｂであってもよい。Ｒ７は水素であってもよい。Ｒ７はハロゲンであってもよい。Ｒ７は、‐ＣＦ３であってもよい。Ｒ７は、−ＯＲ７Ａであってもよい。Ｒ７は−ＮＲ７ＡＲ７Ｂであってもよい。
Ｒ７は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ７は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換アルキル基であってもよく、Ｒ７は置換アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ７は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ５置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ７は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ７は、メチル基であってもよい。Ｒ７は、エチル基であってもよい。Ｒ７は、プロピル基であってもよい。
Ｒ７は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ７は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ７は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ７は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ７は置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ７は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ７は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ７は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ７は置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ７は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ７は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ７は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ７は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ７は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
ＹはＮであってもよい。ＹはＣ（Ｒ８）であってもよい。ＺはＮであってもよい。ＺはＣ（Ｒ９）であってもよい。Ｙ及びＺはＮであってもよい。ＹはＣ（Ｒ８）であってもよく（式中、Ｒ８は本明細書に記載されているとおりである）、ＺはＣ（Ｒ９）であってもよい（式中、Ｒ９は本明細書に記載されているとおりである）。ＹはＣ（Ｒ８）であってもよく（式中、Ｒ８は本明細書に記載の通りである）、ＺはＣ（Ｒ９）であってもよい（式中、Ｒ９は独立して水素である）。ＹはＮであってもよく、ＺはＣ（Ｒ９）であってもよい（式中、Ｒ９は本明細書に記載のとおりである）。ＹはＮであってもよく、ＺはＣ（Ｒ９）であってもよい（式中、Ｒ９は独立して水素である）。
Ｘは−ＣＨ２であってもよい。ＸはＯ、Ｎ（Ｒ１０）またはＳであってもよく、Ｒ１０は本明細書に記載のとおりである。ＸはＳ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であってもよい。ＸはＳであってもよい。ＸはＯであってもよい。ＸはＮ（Ｒ１０）であってもよい（式中、Ｒ１０は本明細書に記載のとおりである）。
Ｒ１０は水素であってもよい。Ｒ１０は、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であってもよい。Ｒ１０は水素またはメチルであってもよい。Ｒ１０は水素または−Ｃ２Ｈ５であってもよい。Ｒ１０は水素または−Ｃ３Ｈ７であってもよい。Ｒ１０は水素または−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であってもよい。Ｒ１０は−ＣＨ３であってもよい。Ｒ１０は−Ｃ２Ｈ５であってもよい。Ｒ１０は−Ｃ３Ｈ７であってもよい。Ｒ１０は−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であってもよい。
Ｒ８は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ８Ａ、−ＯＲ８Ａ、−Ｏ−Ｌ８Ａ−Ｒ８Ｃ、−ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８Ｒ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＯＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ８ＡＲ８Ｂ、または−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂであってもよい。Ｒ８は、水素、ハロゲン、−ＯＲ８Ａであってもよい。Ｒ８は水素であってもよい。Ｒ８はハロゲンであってもよい。Ｒ８は、−ＯＲ８Ａであってもよい。Ｒ８Ａは本明細書に記載されるとおりである。
Ｒ８は、水素、ハロゲン、−ＯＲ８Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ８は−ＯＲ８Ａであってもよい（式中、Ｒ８Ａは本明細書に記載されるとおりである）。Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい（式中、Ｒ１Ａは水素、置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）。Ｒ８は−ＯＲ８Ａであってもよい（式中、Ｒ８Ａは置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）。
Ｒ８は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ８Ａ置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ８Ａ置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ８Ａ置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ８Ａ置換若しくは非置換アリール基、またはＲ８Ａ置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ８は、メチル基であってもよい。Ｒ８は、エチル基であってもよい。Ｒ８は、プロピル基であってもよい。
Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ８はＲ８Ａ置換アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜２０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、置換またはＲ８Ａ置換または非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜１０員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜１０員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ８は、置換またはＲ８Ａ置換または非置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜１０員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５または６員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ８は、置換または非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、置換または非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ８は、置換またはＲ８Ａ置換または非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜１０員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５または６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換５または６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、非置換５〜６員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は、Ｒ８Ａ置換または非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ８は‐Ｏ−Ｌ８Ａ−Ｒ８Ａであってもよい。Ｌ８Ａは置換若しくは非置換アルキレン基または置換または非置換ヘテロアルキレン基である。Ｌ８Ａは、置換または非置換アルキレン基であってもよい。Ｒ８Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｒ８Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは‐（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８Ａであってもよく、ｍは、１、２、３、４または５の整数である。
Ｌ８Ａは、置換または非置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換または非置換２〜２０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換２〜２０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換２〜１０員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換または非置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは、非置換２〜６員ヘテロアルキレン基であってもよい。Ｌ８Ａは‐（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ１−Ｒ８Ａであってもよく、ｍ１は、１、２、３または４から選択される整数である。
Ｒ８は−Ｏ−Ｌ８Ａ−Ｎ（Ｒ８Ｃ）−Ｓ（Ｏ）ｎ８−Ｒ８Ａであってもよく、Ｒ８Ａは本明細書に記載されているとおりである。Ｒ８は、−Ｏ−Ｌ８Ａ−Ｎ（Ｒ８Ｃ）−Ｓ（Ｏ）ｎ８−Ｒ８Ａであってもよく、Ｒ８Ａは、水素または置換若しくは非置換アルキル基（例えば、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基）である。
Ｒ８Ａは水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＲ１５、−Ｎ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＣＯＯＲ１５、−ＣＯＮ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＮＯ２、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）３Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）４Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＮＨＮ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＯＮ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１５．１）（Ｒ１５．２）、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＲ１５、−ＮＨＯＲ１５、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１５置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１５置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ１５、Ｒ１５．１、及びＲ１５．２独立して水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、Ｒ１６置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１６置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１６置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１６置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１６置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１６置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ１６は水素、ハロゲン、オキソ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ８Ｃは水素、ハロゲン、オキソ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、Ｒ１５置換若しくは非置換アルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換シクロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、Ｒ１５置換若しくは非置換アリール基、またはＲ１５置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
Ｒ８は、水素、ハロゲン、−ＯＲ８Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ８は−ＯＲ８Ａであってもよい（式中、Ｒ８Ａは水素、置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）。Ｒ８Ａは置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ８Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、
Figure 2016530266
 −（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ａまたは−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ｂ（式中、ｎは２〜２０である）であってもよい。
Ｇ８ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ
Figure 2016530266
 であり；
Ｇ８ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 である。
Ｒ８Ａは−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ，または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５である）であってもよい。
Ｒ１Ａ及びＲ８Ａは置換または、独立して、本明細書に記載されるような非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ１Ａは、‐Ｏ−Ｌ１Ａ−Ｒ１Ａ（式中、Ｌ１Ａは本明細書に記載のとおりである）であってもよく、Ｒ８Ａは‐Ｏ−Ｌ８Ａ−Ｒ８Ａ（式中、Ｌ８Ａは本明細書に記載のとおりである）であってもよく、Ｌ１Ａは独立して‐（ＣＨ２）ｍ−Ｒ１Ａであってもよく、Ｒ８Ａは‐（ＣＨ２）ｍ−Ｒ８Ａ（式中、Ｒ１Ａ、Ｒ８Ａ及びｍは本明細書に記載のとおりである）であってもよい。Ｒ１Ａは‐（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ１−Ｒ１Ａであってもよく、Ｌ８Ａは‐（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｍ１−Ｒ８Ａ（式中、Ｒ１Ａ、Ｒ８Ａ及びｍは本明細書に記載のとおりである）であってもよい。記号ｍは独立して１、２または３であってもよい。記号ｍ１は独立して１、２、３または４であってもよい。
Ｒ１は、本明細書に記載されるような−Ｏ−Ｌ１Ａ−Ｎ（Ｒ１Ｃ）−Ｓ（Ｏ）ｎ１−Ｒ１Ａであってもよく、Ｒ８ＡはＯＲ８Ａであってもよい（式中、Ｒ８Ａは置換または非置換アルキル基である）。Ｒ１は本明細書に記載されるような−Ｏ−Ｌ１Ａ−Ｎ（Ｒ１Ｃ）−Ｓ（Ｏ）ｎ１−Ｒ１Ａであってもよく、Ｒ８Ａは−ＯＲ８Ａであってもよい（Ｒ８Ａは非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基である）。
Ｒ９は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ９Ａ、−ＯＲ９Ａ、−ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９Ｒ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＯＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＮＲ９ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ９ＡＲ９Ｂであってもよい。Ｒ９は水素、ハロゲン、‐ＣＦ３、−ＯＲ９Ａまたは−ＮＲ９ＡＲ９Ｂであってもよい。Ｒ９は水素であってもよい。Ｒ９はハロゲンであってもよい。Ｒ９は、‐ＣＦ３であってもよい。Ｒ９は、−ＯＲ９Ａであってもよい。Ｒ９は−ＮＲ９ＡＲ９Ｂであってもよい。
Ｒ９は置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ９は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換アルキル基であってもよく、Ｒ９は置換アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ２０アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ９は非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基であってもよい。Ｒ９は、Ｃ１〜Ｃ５置換若しくは非置換アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換Ｃ１〜Ｃ５アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ９は、飽和Ｃ１〜Ｃ３アルキル基であってもよい。Ｒ９は、メチル基であってもよい。Ｒ９は、エチル基であってもよい。Ｒ９は、プロピル基であってもよい。
Ｒ９は、置換または非置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、置換ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換２〜１０員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換２〜６員ヘテロアルキル基であってもよい。
Ｒ９は、置換または非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換３〜８員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換３〜６員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換３員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換４員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ２は、５員シクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、６員シクロアルキル基であってもよい。
Ｒ９は、置換または非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換３〜８員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、非置換３〜６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換３員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換４員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、５員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。Ｒ９は、６員ヘテロシクロアルキル基であってもよい。
Ｒ９は置換または非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ９は、置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換５〜８員アリール基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ９は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換５員アリール基であってもよい。Ｒ９は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換６員アリール基（例えば、フェニル基）であってもよい。
Ｒ９は置換または非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ９は、置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換５〜８員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ９は、置換または非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ９は、置換５員アリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換５員ヘテロアリール基であってもよい。Ｒ９は、置換６員アリール基であってもよい。Ｒ９は、非置換６員ヘテロアリール基であってもよい。
Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ７Ａ、Ｒ７Ｂ、Ｒ８Ｂ、Ｒ９Ａ及びＲ９Ｂは独立して水素、ハロゲン、置換または非置換アルキル基であってもよい。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
 式中、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｙ及びＸは本明細書に記載されるとおりである。
式（ＩＩ）で示される化合物では、Ｒ４は水素またはハロゲンであってもよい。式（ＩＩ）で示される化合物では、Ｒ５は、置換または非置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ５非置換アルキル基であってもよい。Ｒ５は、メチル基であってもよい。Ｒ５は、エチル基であってもよい。Ｒ５は、プロピル基であってもよい。Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ４非置換アルキル基であってもよい。Ｒ６は、メチル基であってもよい。Ｒ６は、エチル基であってもよい。Ｒ６は、プロピル基であってもよい。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
 Ｙ、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は本明細書に記載されるとおりである。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
 Ｒ１Ａ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ８Ａは本明細書に記載されるとおりである。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
Ｙ、Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は本明細書に記載されるとおりである。Ｒ１は−ＯＲ１Ａであってもよい（式中、Ｒ１Ａは−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３であり、ｎは２〜５である）。Ｒ４は水素またはハロゲンであってもよい。Ｒ５はメチル基またはプロピル基であってもよい。Ｒ６は、メチル基であってもよい。Ｒ８は−ＯＲ８Ａであってもよい（式中、Ｒ８Ａは、‐ＯＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ，または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３であり、ｎは２〜５である）。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
 Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｃ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ８Ａは本明細書に記載されるとおりである。記号ｎ及びｍ１は独立して１、２、３または４であってもよい。Ｒ１Ａは、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１Ａは、メチル基であってもよい。Ｒ１Ａは水素であってもよい。Ｒ５はメチル基、エチル基またはプロピル基であってもよく、Ｒ６はメチル基であってもよい。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
 Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｃ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ８Ａは本明細書に記載されるとおりである。記号ｎ及びｍ１は独立して１、２、３または４であってもよい。Ｒ１Ａは、非置換アルキル基であってもよい。Ｒ１Ａは、メチル基であってもよい。Ｒ１Ａは水素であってもよい。Ｒ５はメチル基、エチル基またはプロピル基であってもよく、Ｒ６はメチル基であってもよい。
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい：
Figure 2016530266
式（Ｉ）の化合物は、次式を有してもよい。
Figure 2016530266
ＩＩ．医薬組成物
本明細書においては、医薬製剤も提供される。一態様は、本明細書に記載の化合物及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物である。
１．製剤
医薬組成物は調製され、投与され得る。多種多様の投与形態で投与され得る。したがって、記述された化合物は、経口投与、直腸投与（例えば、静脈内、筋肉内、皮内、皮下、十二指腸内または腹腔内）注入によって投与され得る。
本明細書に記載の化合物から医薬組成物を調製する場合に、薬学的に許容可能な担体は個体または液体のいずれかであってもよい。固形形態調製物としては、粉末剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、座剤及び分散性顆粒剤が挙げられる。固形担体は、希釈剤、香料添加剤、バインダー、防腐剤、錠剤崩壊剤またはカプセル封入材料としても作用し得る１つ以上の物質であってもよい。
散剤では、担体は微粉化活性成分との混合物中において微粉化固形であってもよい。錠剤では、活性成分は好適な比率で必要な結合特性を有し、かつ所望の形状及び寸法に成形された担体と混合してもよい。
散剤及び錠剤は好ましくは５％〜７０％の活性化合物を含む。好適な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、乳糖、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、カカオバターなどである。「調製」という用語は、他の担体を有するまたは他の担体を有さない活性成分が担体によって取り囲まれ、したがって、関連する、カプセルを提供する、担体としてカプセル封入材料と共に活性化合物の製剤を含むことを意図する。同様に、カシェ剤及びロゼンジ剤も含まれる。錠剤、粉末剤、カプセル、丸剤、カシェ剤及びロゼンジ剤は、経口投与に好適な固形投薬形態として使用され得る。
座剤を調製するにあたって、低融点ワックス（脂肪酸グリセリドまたはカカオバターの混合物など）をまず融解させ、攪拌されるように活性成分をその中に均質に分散させる。次いで、溶融した均質混合物を簡便なサイズの型に入れ、冷却し、これらによって固化させる。
液体形態調製物としては、例えば、水またはプロピレングリコール水溶液などの溶液、懸濁液及び乳剤が挙げられる。非経口注入の場合、液体調製物をポリエチレングリコール水溶液中で配合することができる。
経口使用に好適な水溶液は、活性成分を水中に溶解し、所望のとおり好適な着色剤、着香料、安定剤及び増粘剤することにより調製することができる。経口使用に好適な水性懸濁液は、天然または合成ゴム、樹脂、メチルセルロース及び他の周知の沈殿防止剤などの粘稠材料を含む水中に微粉化活性成分を分散することによって作製され得る。
経口投与用に、使用する少し前に、液体形態調製物に変換されることが意図される固形形態調製物も含む。こうした液体形態としては、溶液、懸濁液及び乳剤が挙げられる。これらの調製物は、活性成分に加えて、着色剤、着香料、安定剤、緩衝剤、人工甘味剤並びに天然甘味剤、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含んでもよい。
医薬調製物は、好ましくは単位剤形である。こうした形態では、調製物は、適切な量の活性成分を含む単位投与に細分化する。単位投与形態は、包装調製物であってもよく、包装は、パック入り錠剤、カプセル剤及びバイアルまたはアンプルに入った散剤など、個別の量の調製物を含む。また、単位剤形は、カプセル剤、錠剤、カシェ剤、それ自体がロゼンジ剤であるか、またはいずれの剤形も包装形態において、適切な数であってもよい。
単位剤形調製物における活性成分の量は、特定用途及び活性成分の力価に応じて、０．１ｍｇ〜１００００ｍｇで変動させるか、または調節してもよい。所望する場合、組成物は他の適合する治療薬を含んでもよい。
いくつかの化合物は、制限された水中での溶解度を有し得、またこのため、組成物内に界面活性剤または他の適切な助溶剤を必要とし得る。こうした助溶剤としては、ポリソルベート２０、６０及び８０、プルロニックＦ−６８、Ｆ−８４及びＰ−１０３、シクロデキストリン及びポリオキシル３５ヒマシ油が挙げられる。こうした助溶剤は、典型的には約０．０１重量％〜約２重量％の量で使用される。単一水溶液を超える粘度が、配合物の分散の変動性を低下させるため、懸濁液の成分、配合物の乳剤の物理的分離を減少させるため及び／または他の方法で配合物を改善するために望ましくあり得る。こうした粘度ビルダーとしては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸及びそれらの塩、ヒアルロン酸並びにそれらの塩及び前述の組み合わせが挙げられる。このような剤は、典型的には、約０．０１重量％〜約２重量％のレベルで使用され得る。
医薬組成物は、持続放出性及び／または快適性を提供するための成分を更に含んでもよい。こうした成分としては、高分子量、アニオン性ムコ擬ポリマー、ゲル化多糖及び微細薬物単体基質が挙げられる。これらの成分は、米国特許明細書番号４，９１１，９２０、同第５，４０３，８４１号、同第５，２１２，１６２号及び同第４，８６１，７６０号にて検討されている。これらの特許の全内容は、すべての目的において、参照によって本明細書に援用される。
医薬組成物は、静脈内使用を意図してもよい。薬学的に許容可能な賦形剤は、緩衝剤を含んで、静脈内使用のために所望な範囲にｐＨを調節してもよい。リン酸塩、ホウ酸塩及び硫酸塩などの無機酸の塩を含む多くの緩衝剤が周知である。
２．有効用量
医薬組成物は、治療的有効量、すなわち、その使用目的を達成するために有効な量の活性成分が含まれる組成物を含み得る。特定用途に有効な実際の量は、とりわけ、治療対象の状態に依存することになる。
投与される化合物の用量及び回数（単回投与または反復投与）は、投与経路、受容個体の寸法、年齢、性別、健康、体重、ＢＭＩ、及び食事、治療対象の疾患の性質及び症状の範囲、他の疾患または他の健康関連問題による合併症の存在、併用治療の種類、及び任意の疾患または投与計画による合併症などのさまざまな要因に依存して変化し得る。他の治療計画または薬剤は、本明細書に開示の方法及び化合物と共に使用することができる。
本明細書に記載の化合物に関して、治療的有効量は、まず細胞培養アッセイから決定され得る。標的濃度は、例えば、当該技術分野において既知の方法を使用して測定されたとおり、癌細胞死の程度を増大することができる活性化合物（複数可）のこれらの濃度であってもよい。
ヒトに使用するための治療的有効量は動物モデルから求めてもよい。例えば、ヒトの投与量は、動物において効果的であることが判明している濃度を達成するために調合し得る。ヒトにおける用量は、前述のとおり、癌の処置に対する応答を監視すること及び用量を上方または下方調節することによって調節することができる。
用量は、対象の要件及び使用する化合物に依存して変動してもよい。患者に投与される量は、本明細書に開示される方法の文脈において、時間の経過とともに対象において有益な治療的応答を達成するにあたって十分であるべきである。用量サイズは任意の有害な副作用の存在、性質、程度によっても求められる。概して、処置は、化合物の最適用量よりも少ない少用量で開始される。その後、投与量は、この環境で最適な効果に到達するまで、わずかずつ増量させて増加させる。
用量及び投与間隔は、個々に調整して、治療対象である特定の臨床的適応症に有効である投与化合物の濃度とすることができる。これによって、個々の病気の状態の重症度に相応する治療計画が提供される。
本明細書に記載の教示を用いることで、その用量によって実質的に毒性を引き起こすことのない有効な予防的処置計画及び治療用処置計画を立てることができ、更に、特定の患者が示す臨床症状の処置に完全に有効である。この計画には、化合物の力価、相対的バイオアビリティ、患者の体重、有害な副作用の存在及び重症度、好ましい投与態様、選択された薬剤の毒性プロファイルなどの要因を考慮することによって活性化合物を慎重に選択することを伴うべきである。
３．毒性
特定の化合物の毒性と治療的効果の比率は、その治療指数であり、ＬＤ５０（集団の５０％が致死する化合物の量）とＥＤ５０（集団の５０％が有効な量）との比率として示し得る。高治療指数を示す化合物が好ましい。細胞培養アッセイ及び／または動物試験から得られた治療指数データは、ヒト用の用量の範囲での配合に使用され得る。こうした化合物の用量は、毒性をほどんどまたはまったく有さないＥＤ５０を伴う血漿濃度の範囲内である。この用量は、使用される投与形態及び利用される投与経路に依存してこの範囲内で変動し得る。例えば、Ｆｉｎｇｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ：Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｃｈ．１，ｐ．ｌ，１９７５を参照されたい。正確な配合物、投与経路及び用量は、患者の状態及び化合物が使用される特定の方法の観点からそれぞれの医師が選択することができる。
非経口投与が必要であるか、または所望される場合、医薬組成物に含まれる化合物の特定の好適な混合物は、注射用滅菌液、油性または水溶液並びに懸濁液、乳剤またはインプラント（座剤を含む）であり得る。特に、非経口的投与用担体としては、デキストロース水溶液、生理食塩水、純水、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ピーナッツオイル、ゴマ油、ポリオキシエチレンブロックポリマーなどが挙げられる。アンプルは簡便な単位用量である。本明細書で提示された医薬組成物での使用に好適な薬学的混加物としては、例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１７ｔｈ Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂ． Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）及びＷＯ９６／０５３０９（そのいずれもの教示が参照によって援用される）に記述されているものを含む。
ＩＩＩ.阻害方法
本明細書に提示する方法は、デオキシシチジンキナーゼの阻害方法である。一態様では、本方法は、デオキシシチジンキナーゼと本明細書に記載の有効量の化合物とを接触させて、これによってデオキシシチジンキナーゼを阻害することを含む。接触させることは、インビトロで実施され得る。接触させることは、インビボで実施され得る。
ＩＶ.治療方法
本明細書において更に提供されるものは、疾患の治療をその必要のある対象において行う方法である。一態様では、有効量の本明細書に記載の化合物を対象に投与することによる、癌の治療を、それを必要とする対象において行う方法である。
癌は、白血病またはリンパ腫であってもよい。癌は白血病であってもよい。癌は急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）であってもよい。癌はリンパ腫であってもよい。癌は固形腫瘍癌であってもよい。固形腫瘍癌は、ｇａｍｍａ Ｈ２Ａ．Ｘ発現を測定することによって決定されるとおり、高レベルの複製によって特徴づけられてもよい。癌は、卵巣癌、膵癌、肺癌、グリア芽細胞腫、肝細胞癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、前立腺癌または頭頸部癌、であってもよい。癌は卵巣癌であってもよい。癌は膵癌であってもよい。癌は肺癌であってもよい。癌はグリア芽細胞腫であってもよい。癌は肝細胞癌であってもよい。癌は乳癌であってもよい。癌はトリプルネガティブ乳癌であってもよい。癌は前立腺癌であってもよい。癌は頭頸部癌であってもよい。
Ｖ．別の態様
態様の対応において、本明細書に提供されるのは、疾患の治療の組成物及び方法である。次の定義及び実施形態は、式（ｐＩ）、本項（すなわち、Ｖ項）の化合物、及び以下に列挙される実施形態Ｐ１〜Ｐ２５のみに適用される。
本項の目的のために、「アルキル」は、直鎖または分枝一価炭化水素構造体及びこれらの組み合わせを指し、及びこれらを含み、指定された炭素原子数（すなわち、Ｃ１〜Ｃ１０は１個から１０個の炭素を意味する）を有する完全飽和、単価飽和または多価不飽和であってもよい。特定のアルキル基は炭素原子１個から２０個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ２０のアルキル基」）を有する基である。更に特定のアルキル基は、１個から８個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ８アルキル基」）、３個から８個の炭素原子（「Ｃ３〜Ｃ８アルキル基」）、１個から６個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ６アルキル基」）、１個から５個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ５アルキル基」）または１個から４個の炭素原子（「Ｃ１〜Ｃ４アルキル基」）を有する基である。飽和炭化水素ラジカルの例としては、限定されないが、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、例えば、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、オクチル基などの相同体及び異性体が挙げられる。不飽和アルキル基は、１つ以上の二重結合または三重結合を有する基である。不飽和アルキル基の例としては、限定されないが、ビニル基、２−プロペニル基、クロチル基、２−イソペンテニル基、２−（ブタジエニル）基、２，４−ペンタジエニル基、３−（１，４−ペンタジエニル）基、エチニル基、１−及び３−プロピニル基、３−ブチニル基、及びさらに高級の相同体及び異性体が挙げられる。プロピルＣ１〜Ｃ４アルキル基の例としては、メチル（ＣＨ３）、エチル（Ｃ２Ｈ５）、プロピル（Ｃ３Ｈ７）及びブチル（Ｃ４Ｈ９）が挙げられる。飽和Ｃ１〜Ｃ６アルキル基の例としては、メチル（ＣＨ３）、エチル（Ｃ２Ｈ５）、プロピル（Ｃ３Ｈ７）、ブチル（Ｃ４Ｈ９）、ペンチル（Ｃ５Ｈ１１）及びヘキシル（Ｃ６Ｈ１３）が挙げられる。
アルキル基は、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシル、アルコキシ、チオ、アミノ、アシルアミノ、アルコキシカルボニルアミド、カルボキシ、アシル、アルコキシカルボニル、スルホニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル及びヘテロアリール及び当業者に公知の他の官能基など本明細書に記載のラジカルなど、１つ以上の置換基と置換され得る（すなわち、１つ以上の水素原子は一価または二価のラジカルにより置換される）。「ペルフルオロアルキル」は、各水素原子がフッ素原子と置換されるアルキル基を指す。飽和Ｃ１〜Ｃ６ペルフルオロアルキルの例としては、トリフルオロメチル（ＣＦ３）、ペンタフルオロエチル（Ｃ２Ｆ５）、ヘプタフルオロプロピル（Ｃ３Ｆ７）、ノナフルオロブチル（Ｃ４Ｆ９）、ウンデカフルオロペンチル（Ｃ５Ｆ１１）及びトリデカフルオロヘキシル（Ｃ６Ｆ１３）が挙げられる。
本項の目的のために、「シクロアルキル」は、指定された炭素原子数を有する完全飽和、単価または多価不飽和（すなわち、Ｃ１〜Ｃ１０は１個から１０個の炭素を意味する）であってもよい環式一価炭化水素構造体を示し、含む。シクロアルキルは、シクロヘキシルなどの１つ環またはアダマンチルなどの複数の環（アリール基は除く）から構成され得る。２つ以上環を含むシクロアルキルは、縮合されていてもよく、スピロ環状または橋架環またはこれらを組み合わせたものであってもよい。好ましいシクロアルキルは、３個から１３個の環状炭素原子を有する環式炭化水素である。より好ましいシクロアルキルは、３個から８個の環状炭素原子を有する環式炭化水素である（「Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル」）。シクロアルキル基の例としては、限定されないが、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、１−シクロヘキセニル基、３−シクロヘキセニル基、シクロヘプチル基、ノルボルニル基などが挙げられる。
本項の目的のために、「ヘテロ環」または「ヘテロシクリル」は、１個から１０個の環状炭素原子及び１個から４個のヘテロ原子（窒素、硫黄または酸素など）を有する飽和または不飽和芳香族基を指し、窒素原子及び硫黄原子は、任意により酸素化され、窒素原子（複数可）は任意により四級化される。ヘテロシクリル基は、単環または複数の縮合環を有してもよいが、ヘテロアリール基を除く。２つ以上の環を含むヘテロ環は、縮合環、スピロ環または橋架環、またはこれらの任意の組み合わせであってもよい。縮合環系では、１つ以上の縮合環はアリールまたはヘテロアリールであってもよい。ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｃｙｃｌｙｌ）基の例としては、限定されないが、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル、４−アミノ−２−オキソピリミジン−１（２Ｈ）−イルなどが挙げられる。
本項の目的のために、「アリール」は、多価不飽和芳香族炭化水素置換基を示し、含む。アリールは、追加の縮合アリール環、ヘテロアリール環、シクロアルキル環及び／またはヘテロシクリル環など、追加の縮合環（例えば、１個から３個の環）を含んでもよい。１つの変化形態では、アリール基は環６個から１４個の環状炭素原子を含む。限定されないが、アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、ビフェニルなどが挙げられる。
本項の目的のために、「ヘテロアリール」は、１〜１０の環状炭素原子、を有する不飽和芳香族環基及び少なくとも１つの環状へテロ原子（限定されないが、窒素、酸素及び硫黄などのヘテロ原子が挙げられる）を指し、窒素原子及び硫黄原子は任意により酸化し、窒素原子（複数可）は任意により四級化される。ヘテロアリール基は、環状炭素または環状へテロ原子で分子残基に結合され得る。ヘテロアリールは、追加の縮合アリール環、ヘテロアリール環、シクロアルキル環及び／またはヘテロシクリル環など、追加の縮合環（例えば、１つ〜３つの環）を含んでもよい。限定されないが、ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリミジル、チオフェニル、フラニル、チアゾリルなどが挙げられる。
本項にて言及したとおり、シクロアルキル基、アリール基、ヘテロシクリル基及びヘテロアリール基は、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード、ヒドロキシル、アルコキシ、チオ、アミノ、アシルアミノ、アルコキシカルボニルアミド、カルボキシ、アシル、アルコキシカルボニル、スルホニル、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクリル（ｈｅｔｅｒｃｙｃｌｙｌ）及びヘテロアリール及び当業者に既知の他の官能基など、本明細書に詳細に記述したラジカルなど、１つ以上の置換基で置換してもよい。
本項の目的のために、「薬学的に許容可能な担体」は、対象にとって非毒性である、活性成分以外の薬学的配合物中の成分を示す。薬学的に許容可能な担体としては、限定されないが、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ． Ｅｄ．（１９８０）に記述されている例えば当該技術分野において公知のものなどの緩衝液、賦形剤、安定剤または防腐剤が挙げられる。
本項において使用されるとおり、「処置」または「処置すること」は、有益または所望の結果、好ましくは臨床結果を得る方法である。例えば、有益または所望の結果としては、限定されないが、１つ以上の以下が挙げられる：疾患を起因とする症状の減少、該疾患に罹患しているもののＱＯＬを上昇すること、疾患の治療に必要な他の薬物治療の用量を減少させること、疾患の進行を遅延させること、及び／または個体の生存を延長させること。
本項で使用されるとおり、「疾患の発現を遅延させること」という表現は、疾患（癌など）の発現の延期、妨害、緩徐、遅延、安定化及び／または延期を意味する。こうした遅延は、処置対象の疾患及び／または個体の経歴に依存して、時間の長さを変化させることであってもよい。当業者に明らかなとおり、十分なまたは有意な遅延は、事実上、防止を含み、個体は疾患を発現させることはない。例えば、転移の発現などの後期癌が遅延され得る。
本項で使用されるように、薬物、化合物または医薬組成物の「有効用量」または「有効量」は、有益または所望の結果を達成するのに十分な量である。予防的使用としては、有益または所望の結果としては、リスクの消失または低減、重症度の低下、または疾患発症の遅延（生化学的症状、組織学的症状、及び／または行動上の症状、その合併症及び疾患の発現中に現れる中間的病理学的表現型）などの結果が挙げられる。治療的用途として、有益または所望の結果としては、該疾患に起因する１つ以上の症状の減少、該疾患に罹患している場合のＱＯＬ（クオリティオブライフ）の向上、該疾患に治療に必要な他の薬物治療用量の減少、標的を介するなど別の薬物治療効果の向上、該疾患の進行の遅延及び／または生存率の延長などの臨床結果が挙げられる。癌または腫瘍の場合、有効量の薬物は、癌細胞数の減少、腫瘍サイズの減少、周辺器官への癌細胞湿潤の阻害（すなわち、ある範囲まで緩徐になり、好ましくは停止する）、腫瘍転移の阻害（すなわち、ある範囲まで緩徐になり、好ましくは停止する）、ある範囲までの腫瘍増殖、及び／または疾患に関連する１つ以上の症状のある範囲までの軽減において効果を有し得る。１回以上の投与で、有効用量を投与することができる。本項の目的のために、薬物、化合物または医薬組成物の有効用量は、直接または非直接的に予防的処置または治療用処置を達成するのに十分な量である。臨床上の文脈において理解されるように、薬物、化合物または医薬組成物の有効用量は、別の薬物、化合物または医薬組成物と共に得られても得られなくてもよい。このため、１つ以上の治療薬を投与する文脈において、１つ以上の他の薬剤と共に所望の結果を達成し得るか、または達成される場合、「有効用量」であると考えることができ、また、単剤は有効量で与えられると考えられ得る。
本項で使用するように、「と共に」は、別の処置様式に加えて、１つの処置様式を投与することを指す。したがって、「と共に」は、他の処置様式を個体に投与前、投与間または投与後に１つの処置様式を投与することを指す。
他に明記されていない限り、本項の目的のために、本明細書で使用されているとおり「個体」という用語は、限定されないが、ウシ、ウマ、ネコ科動物、ウサギ、イヌ、げっ歯類または霊長類（例えば、ヒト）などの哺乳類を指す。いくつかの実施形態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、個体は、チンパンジーなどの非ヒト霊長類及び他の類人猿及びサル種である。いくつかの実施形態では、個体は畜牛、ウマ、ヒツジ、ヤギ及びブタなどの家畜、ウサギ、イヌ及びネコなどのペット、げっ歯類（ラット、マウス及びモルモットなど）などの実験動物である。本項に記載の態様は、ヒト医学及び獣医学の双方において使用が見出され得る。
本項で使用されるとおり、及び添付の実施形態Ｐ１〜Ｐ２５において、文脈により別に明示されていない場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、複数の対象を含む。
本項に記述される態様及び態様の変化形態は、態様及び変化形態「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」及び／または「から本質的にからなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」を含むことが理解される。
治療方法
本項の別の態様では、本明細書に提供される化合物はデオキシシチジンキナーゼポリペプチドに結合し、その活性を阻害する。したがって、本項には、ｄＣＫ活性の阻害方法並びにｄＣＫ活性が関与している疾患及び障害の処置方法が提供される。
化合物のｄＣＫ阻害活性の効力は、細胞基質の取り込み及びリン酸化、例えば、［３Ｈ］−デオキシシチジン（ｄＣｙｄまたはｄＣ）のＣＥＭ（ヒト）またはＬ１２１０（マウス）細胞への取り込みを測定することによって、試験を行うことができる。化合物は、他のヌクレオシドキナーゼ（例えば、チミジンキナーゼチミジンキナーゼ）を超える低オフターゲット毒性（例えば、ｄＣＫ陰性細胞の成長及び増殖の阻害）及び選択性のためにさらにスクリーニングしてもよい。
本項のいくつかの実施形態では、インビトロ（例えば、酵素系アッセイまたは細胞系アッセイの設定において）またはインビボ（例えば、動物モデルにおいてまたは処置の必要のある個体対象）のいずれかにおいて、Ｖ項に詳細に記述した化合物（例えば、式（ｐＩ）の化合物）とデオキシシチジンキナーゼと接触させることを含む、デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）活性の阻害方法が提供される。
本項のいくつかの実施形態では、個体にＶ項に詳細に記述した有効量の化合物（例えば、式（ｐＩ）の化合物）その薬学的に許容可能な塩及びチミジンを投与することを含む、個体を対象にした癌の治療方法を提供する。チミジンと共に化合物を投与する。いくつかの実施形態では、チミジンの投与前、投与後または投与後に化合物を投与する。処置される癌の例としては、限定されないが、白血病、リンパ腫、乳癌、卵巣癌、肺癌、膵癌、肝細胞癌、黒色腫、肉腫、頭頸部癌、グリオーム、グリア芽細胞腫、及びゲノムの不安定性及び／またはＤＮＡ損傷応答の活性化を特徴とする器官の組織に依存しない癌が挙げられる。本明細書に詳細に記述した化合物によるｄＣＫの阻害（例えば、式（ｐＩ）の化合物）またはその薬学的に許容可能な塩は、チミジンと相乗作用を付与し、腫瘍中に細胞周期停止を誘導する。
理論に束縛されるものではないが、本項の実施形態では、薬理学的方法により、細胞周期のＳ期において停止させることによってこれらの増殖を阻止するために、高増殖性腫瘍において不十分なヌクレオチドを誘導する。例えば、デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）阻害物質と混合したチミジンによってデオキシシチジン三リン酸（ｄＣＴＰ）プールを枯渇させる。チミジンの機能は、デオキシリボヌクレオチド合成における律速酵素であるリボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＲ）の能力を阻止して、４つのＤＮＡビルディングブロックのうちの１つであるデオキシシチジン三リン酸（ｄＣＴＰ）を産生することである。癌細胞中でｄＣＴＰを精製する唯一の別の方法は、細胞外環境からあらかじめ形成されたデオキシシチジンを再利用することによるものであり、デオキシシチジンキナーゼは再利用プロセスに必須であり、小分子阻害物質はｄＣＫ活性を阻止し、チミジンと組み合わせて、ｄＣＴＰの癌細胞を餓死させ、このためその増殖を妨害する。
本項のいくつかの実施形態では、本明細書に詳細に記述した有効量の化合物（例えば、式（ｐＩ）の化合物）またはその薬学的に許容可能な塩を個体に投与することを含む、免疫不全の治療をその必要のある個体において行う方法を提供する。免疫不全は、自己免疫疾患または移植拒絶であり得る。本項のいくつかの実施形態では、自己免疫疾患はＴ細胞媒介自己免疫疾患である。本項のいくつかの実施形態では、自己免疫疾患は、多発性硬化症、狼瘡（全身性エリテマトーデスなど）、炎症性腸疾患、関節リウマチ及びＩ型糖尿病からなる群から選択される。
また、医薬組成物など、本項に記載の化合物（例えば、式（ｐＩ））またはその塩を含む及び薬学的に許容可能な担体を含む組成物も提供される。本項による医薬組成物は、経口投与、頬側投与、非経口投与、経鼻投与、局所投与、直腸投与に好適な形態または注射、ｉ．ｖ．、注入または吸入による投与に好適な形態を取る。
本項に記載の化合物（式（Ｉ）の化合物など）並びに同使用方法は、他に記載がない限り、化合物のすべての塩形態を含む。また、本項に記載の化合物の任意の塩のすべての非塩形態並びに本項に記載の化合物の任意の塩の他の塩を含む。本項のいくつかの実施形態では、化合物の塩は薬学的に許容可能な塩である。化合物の塩基性官能基の所望の塩は、当業者に周知の方法により酸で化合物を処理することによって、調製され得る。化合物の酸性官能基の所望の塩は、当業者に周知の方法により塩基で化合物を処理することによって、調製することができる。酸の無機塩の例としては、限定されないが、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、ビスマス塩、カルシウム塩、アンモニウム塩及びアルミニウム塩類などのアルカリ金属塩及びアルカリ土類塩が挙げられる。酸性化合物の有機塩の例としては、限定されないが、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、トリメチルアミン及びトリエチルアミン塩が挙げられる。塩基性化合物の無機塩の例としては、限定されないが、ハイドロフッ化物、ハイドロ塩化物、ハイドロヨウ化物、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、リン酸水素、ニ水素リン酸塩、重炭酸塩、及び硝酸塩が挙げられる。塩基性化合物の有機塩の例としては、限定されないが、酒石酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩及びコハク酸が挙げられる。
ＰＥＴプローブ及びイメージング
本項では、本明細書に記載のＰＥＴプローブを生体物質に接触させることと、ＰＥＴイメージングを用いて、生体物質中の化合物の局所濃度を決定することと、化合物の局所濃度を局所免疫応答または新生物組織の存在と相関させることとを含むイメージング方法を提供する。本項のいくつかの実施形態では、化合物と生体物質とを接触させることには、任意の量の化合物を動物またはヒトに投与することと、動物またはヒト中の化合物の局所濃度を動物またはヒトにおける局所免疫応答または新生物組織と相関させることとを含む。本項のいくつかの実施形態では、本方法は、化合物の局所濃度を使用して癌を診断することかつ／または癌治療を監視すること更に含む。本項のいくつかの実施形態では、動物またはヒトは、癌、自己免疫疾患、発育障害、ウイルス感染、細菌感染、寄生虫感染、感染、代謝性疾患及び炎症からなる群から選択される状態を有する。本項のいくつかの実施形態では、動物またはヒトは、リンパ節症、黒色腫、白血病及びグリオームからなる群から選択される状態を有する。本項のいくつかの実施形態では、動物またはヒトは、関節リウマチ、炎症性腸疾患、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される状態を有する。本項のいくつかの実施形態では、動物またはヒトは、癌免疫療法、免疫療法、インターフェロン療法、ワクチン接種、放射線治療、化学療法及び抗生物質療法からなる群から選択される療法を受ける。本項のいくつかの実施形態では、化合物を生体物質に接触することは、任意の量の化合物を動物またはヒトに投与することと、例えば、リンパ節または脾臓など、器官またはリンパ系の一部に異常な活性を有する動物またはヒト中の化合物の局所濃度を相関させることとを含む。本項の方法の１つの変化形態では、本方法は、化合物の局所濃度とリンパ腫病変または悪性リンパ様疾患と相関させることを更に含む。本項のいくつかの実施形態では、局所免疫応答は、活性化されたＴリンパ球が累積したものである。本項の方法の１つの変化形態では、本方法は、活性化Ｔリンパ球は、非活性化Ｔリンパ球よりも１個の細胞当たりの化合物をより多く吸収する。
また、本項では、以下を含む任意の腫瘍崩壊剤に対する耐性を予測する方法を提供する：本明細書で詳細に記述するＰＥＴプローブを新生物と接触させることと、ＰＥＴイメージングを使用し、新生物中の化合物の局所濃度を測定することと、化合物の局所濃度をベースライン値と比較することと、ベースライン値よりも大幅に低い化合物の局所濃度を低ｄＣＫの発現の新生物と相関させることと、低ｄＣＫ発現新生物と腫瘍崩壊性ヌクレオシド類似体の耐性とを相関させることとを含み、ベースライン値は、ｄＣＫを発現させる代表的新生細胞中の化合物の測定濃度、ｄＣＫが発現していない代表的新生細胞中の化合物の濃度かまたは重み付き平均に対応している。本項でのいくつかの実施形態では、新生物はＴリンパ球系列のものである。本項でのいくつかの実施形態では、新生物は、白血病細胞、急性非リンパ性白血病細胞、急性リンパ性白血病細胞、慢性骨髄性白血病の急性転化期の細胞、髄膜白血病細胞、膵癌細胞、卵巣癌細胞、乳癌細胞、非小細胞肺癌細胞、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病細胞、毛様細胞性白血病細胞、再発急性リンパ性白血病細胞及び治療抵抗性急性リンパ性白血病細胞からなる群から選択される。
本項では、ＰＥＴ工程において化合物の使用を検査する方法を提供し、本方法は、
a 規定された位置の「コールド」フッ素１９原子を本明細書で詳細に述べたＰＥＴプローブの化合物に取り込むステップと、
b 「コールド」フッ素１９原子を「ホット」フッ素１８原子に置き換えるステップと、
c ステップ（ｂ）の化合物を哺乳類へ投与するステップと、
d ＰＥＴイメージングにより、哺乳類の体内全体のステップ（ｂ）の化合物を検出する及び／または定量するステップとを含む。
本項のいくつかの実施形態では、本方法は、
e ＰＥＴデータを用いて、インビボ薬物体内分布の動態モデルを構築するステップと、
f ステップ（ａ）から（ｅ）を繰り返して、ＰＥＴイメージングによって特定された、マウス及び／またはヒトにおいて好ましくない体内分布を有する化合物のＰＫを更に変更し、改善するステップとを更に含む。
本項において、ｄＣＫ阻害化合物の効果の評価方法も提供し、本方法は、ｄＣＫ阻害化合物を個々に投与することと、１８Ｆ−ＰＥＴプローブを個々に提供することと、１８Ｆ−ＰＥＴプローブの局所濃度を測定するために画像取得することと、１８Ｆ−ＰＥＴプローブの局所濃度とｄＣＫ阻害化合物の効果を相関させることとを含む。本項のいくつかの実施形態では、個々は、ｄＣＫ阻害を調べるための動物モデルに使用される実験マウスなどの哺乳類である。本方法は、動物モデルにおける化合物のインビボ有効性の効率的なスクリーニング方法を提供する。本方法は、本明細書で詳細に述べる任意のｄＣＫ阻害化合物またはその薬学的に許容可能な塩へと適用してもよい。
本項の態様のある特定の実施形態は、以下に更に述べる。記述する実施形態では、明瞭にするために特定の用語を使用する。しかし、本項の態様は、そのようにして選択された特定の用語に制限されることを意図するものではない。当業者は、他の同等の部分及び本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく開発された他の方法も使用できることを理解するであろう。本明細書に引用されるすべての参考文献は、それぞれが個々に組み込まれるように、参照によって援用される。
上記のとおり、ｄＣＫは、例えば、細胞部分（例えば、デオキシリボヌクレオシドサルベージ代謝における律速酵素として）並びに薬物耐性及び／または薬物感受性とのその関連におけるその役割により臨床上重要なポリペプチド標的である。我々のグループによって開発されたｄＣＫノックアウトマウスモデルを用いた試験により、リンパ球及び特定の型の癌におけるＤＮＡ修復に使用される必須ヌクレオチドであるデオキシシチジン三リン酸（ｄＣＴＰ）の形成にはｄＣＫ活性を必要とすることがわかる。この試験からは、ｄＮＴＰを生成するために、癌細胞の急速な増殖を支持するのにあたって、細胞が使用する主要代謝経路の産出が不十分となると、ｄＣＫは、ＤＮＡ複製のためにデオキシリボヌクレオチド（ｄＮＴＰ）を生成するためのバックアップ機構として機能し得ることもわかる。この開示は、このポリペプチド（小分子阻害物質を含む）と結合する化合物の発現を示す。
本項に記載の小分子阻害物質を含むｄＣＫと結合する化合物は、さまざまな状況（例えば、ポジトロン断層撮影法のプローブとして）で有用である。加えて、これらの化合物は、特定の病態（癌及び細胞性自己免疫疾患など）の新規治療薬の開発において有用である。本明細書にて開示のｄＣＫの小分子阻害物質も、正常組織及び悪性組織において核酸の代謝を調べるためにデザインされた工程において有用である。このような工程は、例えば、ＤＮＡの修復及び複製のために、病原性細胞を急速に増殖させる能力に選択的に干渉することによって作用する癌及び自己免疫疾患の新規療法の開発を支援するのに使用することができる。
本項に記載のｄＣＫ阻害物質の開発に使用される１つの例証となる戦略は、ポジトロン断層撮影（ＰＥＴ）法を利用するものである。本文脈では、フッ素１９原子を容易に取り込むために例証的治療用候補化合物がデザインされた。本明細書に開示の化合物の足場（ｓｃａｆｆｏｌｄ）内に含まれるフッ素１９原子は、容易にフッ素１８放射性同位体に置き換えて放射線標識された化合物を作製することができ、これは、ＰＥＴイメージング法を用いて、生体の体内全体にわたり非侵襲的に検出及び定量化することができる。このようにデザインされた化合物を用いることによって（例えば、ＰＥＴイメージング法を利用するために）、当業者は、さまざまな非侵襲性薬物動態学的（ＰＫ）方法を用いて、これらの化合物（例えば、動物モデルにおける）の治療可能性を調べることができる。この戦略は、一般に、薬物の研究及び開発に適用可能であり、この工程を加速しつつ費用を削減することができる（例えば、急速な最適なＰＫ特性の治療候補物を特定することができることによって）。
上記のとおり、本項に開示の小分子ｄＣＫ阻害物質は、動物モデル及びヒトにおける薬物ＰＫのＰＥＴイメージング試験用に容易に一段階フッ素１８放射標識され得るように設計されている。この設計により、放射性標識に複数のステップを必要とする化学的に異なる小分子ｄＣＫ阻害物質に勝る有意な利点を有するこれらの化合物が提供される。重要な追加の要素が、米国特許出願第１２／２３４，４７８号に記載され、その内容が参照によって援用されるＰＥＴイメージングプローブのＦＡＣ系によってもたらされる。これらのＦＡＣプローブにより、当業者は、さまざまな動物種（例えば、マウス及びヒト）において、治療用候補化合物の薬力学的（ＰＤ）特性の特徴を非侵襲的に明らかにすることができる。
上記のとおり、本項に記載の化合物は、デオキシリボヌクレオシドのサルベージ代謝において、律速酵素であるデオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）の小分子阻害物質を提供する。ＰＥＴプローブを開発し、その妥当性を検証して、インビボにおけるｄＣＫ活性を測定した（例えば、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２００８ Ｊｕｌ；１４（７）：７８３〜８；ＪＮＭ．２０１０ Ｊｕｌ；５１（７）：１０９２〜８を参照されたい）。その結果として、これらの妥当性が検証されたＰＥＴプローブを薬力学的バイオマーカーとして使用し、本明細書に開示の新規ｄＣＫ結合化合物の有効性の妥当性検証を行うことができる。
記述されたとおり、本項の化合物のある特定実施形態では、１つ以上の細胞生理学態様を監視するために設計されたイメージング法においてプローブとして使用される。本文脈中、この項の実施形態は、例えば、体内全体の免疫機能を監視するために使用することができ、監視法は免疫疾患の診断及び治療評価に大きな影響を及ぼし得る。本項のある実施形態では、化合物は、診断法または治療法の一部として、生体物質の１つ以上の特徴を画像取得する工程においてＰＥＴプローブとして使用される。例えば、ＰＥＴプローブは、関節リウマチ、炎症性腸疾患、Ｉ型糖尿病、ＥＡＥ（実験的自己免疫性脳脊髄炎）、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化症、自己免疫疾患及び癌からなる群から選択される状態の診断及び治療に使用可能である。加えて、ＰＥＴプローブを使用して、癌の治療において、ヌクレオシド輸送及びデオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）−媒介リン酸化を介して細胞に取り込まれる抗癌剤の有効性を評価することができる。当業者に明らかなように、化合物に加えて、本項の組成物には、１つ以上の薬学的に許容可能な担体及び／または賦形剤を含んでもよい。当業者は、想定用途に基づいて、適切な薬学的に許容可能な担体及び／または賦形剤を選択することができる。
本項に記載された態様において例証的イメージング方法は、典型的には、以下のステップを１つ以上含む。ＰＥＴプローブは、生体物質に接触させ得る。次にＰＥＴイメージングを使用して、生体物質中のＰＥＴプローブの局所濃度を測定することができる。また、ＰＥＴプローブの局所濃度は、例えば、活性化Ｔリンパ球の累積など、局所的ヌクレオチド代謝と相関させることができる（例えば、非活性化Ｔリンパ球と比べて、より多くの細胞当たりのＰＥＴプローブを取り込むとき）。このようにして、ＰＥＴイメージングを使用して、動物またはヒトに投与したＰＥＴプローブの局所濃度を測定することができ、ＰＥＴプローブの局所濃度と、例えば、局所免疫応答または異常な細胞増殖を有するヌクレオチド代謝の態様とを相関させることができる。例えば、ＰＥＴプローブの局所濃度は、器官またはリンパ系の一部、例えば、リンパ節または脾臓での異常な細胞活動と相関させることができる。同様に、ＰＥＴプローブの局所濃度は、リンパ腫病変または悪性リンパ様疾患と相関させることができる。
本明細書にて開示された化合物を使用する動物またはヒトでは、例えば、例えば癌、リンパ節症、黒色腫、白血病、グリオーム、自己免疫疾患、発育障害、ウイルス感染、細菌感染、寄生虫感染、感染、代謝性疾患、炎症、関節リウマチ、炎症性腸疾患、Ｉ型糖尿病、実験自己免疫の脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症及び／またはアテローム性動脈硬化症の状態を有し得る。こうした文脈では、こうした状態の診断及び／または処置の手順においてＰＥＴプローブを使用することができる。例えば、動物またはヒトは、例えば、癌免疫療法、免疫療法、インターフェロン療法、ワクチン接種、放射線治療、化学療法及び／または抗生物質治療などの治療を受けることができる。本項の例証的実施形態では、ＰＥＴプローブの局所濃度を使用して、癌の診断及び／または癌治療の監視を行うことができる。
本項の特定の例証的実施形態では、リンパ球の活性化は、対象動物またはヒトに本明細書に開示の微量のＰＥＴプローブを注入することによって非侵襲的に監視することができ、これにより、プローブを局所免疫活性化部位に累積させ、次に、ＰＥＴスキャナーを用いて、全身レベルで対象を監視することができる。このようなＰＥＴプローブは、疾患または障害（例えば、癌、自己免疫疾患、発達障害、ウイルス感染、細菌感染、寄生虫感染、他の感染症、代謝性疾患、または炎症）の存在または範囲を決定するためなど、診断目的として動物またはヒトに投与することができる。本項の実施形態では、ＰＥＴプローブを投与して、癌または他の疾患の進行をベースとした種類の免疫療法、インターフェロン療法、ワクチン接種、放射線治療及び抗生物質療法を監視することができる。
本項の実施形態は、ヌクレオシド輸送及びデオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）−媒介リン酸化を介して細胞に取り込まれるものなど、癌治療において特定の分類の抗癌剤の使用効果を評価する方法を更に提供する。例えば、ＰＥＴプローブを使用して、例えば、ヌクレオシド輸送及びデオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）−媒介リン酸化を介して細胞に取り込まれる、シタラビンまたは２’−ジフルオロデオキシシチジンなど、抗癌剤の癌治療の有効性を評価することができる。本項の追加の態様は、細胞を高デオキシリボヌクレオシドサルベージ経路活性（例えば、リンパ球細胞、骨髄細胞及び腸細胞）と結び付ける病態の診断方法及び治療方法に関する。本項の別の態様は、本明細書に開示の化合物を取り込む組成物である。本項の更に別の態様は、本項の任意の実施形態を含むキットである。
本項の他の実施形態としては、例えば、画像診断法に有用な材料を含むものなど、製造物品及び／またはキットを含む。あるいは、本項の製造物品及び／またはキットは、免疫不全または癌などの病態の治療に有用な材料を含み得る。本項の典型的な実施形態では、キットは、典型的にはラベルの付いている少なくとも１つの容器を備える。好適な容器としては、例えば、ブリスター包装、ボトル、バイアル瓶及び試験管が挙げられる。容器は、金属（例えば、金属箔）、ガラスまたはプラスチックなどさまざまな材料で形成されていてもよい。本項のいくつかの実施形態では、１つ以上の容器は、画像診断法において有効な活性剤を有する１つ以上の組成物を保持する。本項の他の実施形態では、１つ以上の容器は、免疫不全または癌などの病気の治療に有効な活性剤を有する１つ以上の組成物を保持する。本項のある特定の実施形態では、組成物中の活性剤は本明細書にて開示するようなｄＣＫ結合化合物である。本項のいくつかの実施形態では、キットは、本項で記載のとおりのｄＣＫ結合化合物及びチミジン（例えば、混合製剤または「カクテル」中で）などの組成物を含む。本項のいくつかの実施形態では、キットは、第１の容器にｄＣＫ結合化合物などの第１の組成物及び第２の容器にチミジンなどの第２の組成物を含む。典型的には、１つ以上の容器のラベルは、画像診断法または免疫不全及び／または癌などの病態の治療に１つ以上の組成物が使用されていることを示す。また、こうしたラベルには、本明細書に記載のもののように、インビボまたはインビトロのいずれかで使用するための指示が示されてもよい。また、本項のキットは、上述の１つ以上の容器及び更に緩衝液を含む容器を含んでもよい。本項のキットは、商業的観点または使用者の観点から望ましい他の材料（他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、シリンジ及び使用上の注意が記述されている添付文書など）をさらに含んでもよい。
また、本項は、正常組織及び悪性組織中の核酸代謝物を調べるための本項の組成物を含む調査ツールも提供する。本項のある実施形態では、ＰＥＴ撮像プローブのＦＡＣシリーズは、参照によって本明細書に援用される米国特許出願第１２／２３４，４７８号に記述されているとおり、マウス、他の動物種及びヒトにおける治療的候補物の薬力学的（ＰＤ）特性を非侵襲性的に決定するために使用することができる。
本項のある特定の実施形態にて、本明細書にて開示した化合物を含む物質の組成物は、癌の治療薬として使用され得る。本項の他の実施形態では、組成物は、自己免疫疾患の治療薬として使用される。場合によっては、組成物は、それらのＤＮＡを修復し、複製するために、病原体細胞が急速に増殖する能力を選択的に干渉する方法でｄＣＫを結合することによって癌及び／または自己免疫疾患の治療薬として使用してもよい。本項の方法に使用される治療薬は、典型的には、薬学的に許容可能な担体と混ぜ合わせる。本項で使用される「薬学的に許容可能な担体」という用語は、当業者に受け入れられている意味で使用され、薬剤の投与と適合性のある任意の及びすべての溶媒、分散媒体、コーティング材、抗菌及び抗カビ剤、等張及び吸収遅延剤などを含むことが意図されている。薬学的活性物質のこうした媒体及び薬剤を使用することは当分野において周知されている。任意の従来の媒体または薬剤が活性化合物と適合しない場合を除き、本項の組成物中にこうした媒体を使用することができる。また、補助的活性化合物も組成物中に取り込むことができる。本項の医薬組成物は、その意図された投与経路と適合するように配合される。
本明細書の実施例により、本項の態様及び実施形態に関する開示を更に提供する。
前述の項では、明瞭に理解されることを目的として、例証及び実施例によって少し詳細に記述したが、当業者には、上記教示を踏まえてあるわずかな変化及び変更が生じる点は明かである。このため、説明及び実施例は、本明細書に記載の任意の発明の範囲を制限しているものと解釈すべきではない。
本明細書で引用した特許明細書及び公開を含むすべての参照文献は、それらの全体が参照によって本明細書に援用される。
ＶＩ．実施例
１．実施例１
デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）は、ホスホリルドナーとしてＡＴＰまたはＵＴＰのいずれかを用いて、デオキシシチジン、デオキシアデノシン、及びデオキシグアノシンをリン酸化してその一リン酸形態にすることができるデオキシリボヌクレオシドキナーゼである。１ｄＣＫによるリン酸化は、サルベージデオキシシチジンのｄＣＴＰへ、ある細胞型ではｄＴＴＰへの転換を担う生化学的経路における律速ステップであり、これによりＤＮＡポリメラーゼの基質とする。ｄＮＴＰを産生する生理学的役割とは別に、ｄＣＫは、抗癌剤において幅広く使用される複数のヌクレオシド類似体プロドラッグ（「ｎｕｃｓ」）の活性化において重要な役割を担う。２近年では、ｄＣＫはリンパ液及び赤血球系始原細胞中での造血中に同定された。同キナーゼは癌細胞中のＤＮＡ損傷に応答したＧ２／Ｍ移行期の調節にも関連づけられている。６さらに近年では、デノボ合成経路のヌクレオチドの摂動と合わせてｄＣＫ活動の一部阻害は、合成する上で、急性リンパ性白血病細胞にとって致死的であるが、正常な造血細胞にとっては致死的とならないことがわかった。７これらのｄＣＫの生物学の態様及び癌における新規治療標的としてのその潜在的役割により、その酵素活性の小分子阻害物質の発現が促された。
ハイスループットスクリーニングからヒット化合物が開発され、その後の分子の最適化により化合物Ｉａ及びＩｂが誘導された８。この作業では、化合物の構造活性相関（ＳＡＲ）、すなわち、小分子の構造とそれらの阻害効力との関係を詳細に示した。酵素標的と小分子との間の複合体の結晶構造が欠失することにより、従来のＳＡＲ研究では、関連のある分子間での阻害効力の観察された相違に関する理解が不完全となっている。これにより、結合親和力の増大及び／または代謝安定性の増大のために調整することができる、確信を持って、これまでに同定されたヒット上の部位を同定することが困難になっている。リード化合物Ｉａ及びＩｂは、４つの異なる構造部分に分割することができる（図１Ａ）。部分Ａはピリミジン環であり、リンカー（部分Ｂ）によって、５置換基−チアゾール環（部分Ｃ）に連結され、次にフェニル環（部分Ｄ）に連結される。概念的には、これらの部分をそれぞれ調節して、所望の「薬物のような」性質を得ることができる。チアゾール環に注目していたこれまでの研究では、初期の化合物の１つを有するｄＣＫの結晶構造から、環５位は疎水性置換基に適応することが示唆され、これにより、５位のプロピル基はメチル基よりもかなり好ましいことがわかった。８，９
分子の他の部分における医薬品化学的努力を誘導し、理論的裏付けするために、開発したいくつかの阻害物質を有するヒトｄＣＫの結晶構造を解析した。結晶構造により、酵素構造、小分子構造及びその阻害効力との関係が明らかになる。この努力により、最終的にリード化合物Ｉａ及びＩｂがもたらされた。残念なことに、リード化合物のｄＣＫのナノモル親和性にもかかわらず、肝臓ミクロソームアッセイの試験を行った場合に、これらの化合物は、低代謝安定性を示した。この弱点は、マウスにおける薬物動態学的研究によって繰り返された。８，７
改善されたインビボ特性を有する阻害物質を同定するために、追加の化学修飾、特に、リード化合物の低ナノモル結合親和性が保持されるものに関する調査を試みた。ｄＣＫに結合される本明細書に記載のキラル化合物の結晶構造は、阻害物質の活性形態の鏡像異性を明らかにするにあたって重要な役割を担う。有機化学的直感と標的−阻害物質複合体の詳細な構造情報と掛け合わせて、ｄＣＫのナノモル親和性を保持しているが有意なインビボ代謝安定性が増大したリード化合物を同定した。この化合物が癌細胞のｄＮＴＰプールによるＤＮＡ複製ストレスの過負荷の誘導に基づくあらゆる治療戦略において、極めて重要な役割を担っていると考えられる。
ピリミジン環（分子の部分Ａ、図１Ａ）は、分子の、改善するのが難しい部分であることが予測される。これは、リード化合物Ｉａ及びＩｂ（ＰＤＢコードは、それぞれ４Ｌ５Ｂ及び４ＫＣＧ）を有する複合体中のｄＣＫの結晶構造において見られるように、阻害物質のピリミジン環は、生理学的物質ｄＣのピリミジン環によって取り入れられるものとほぼ同一である位置でｄＣＫに結合し、いくつかの水素結合、疎水性のπ−πスタッキング相互作用を産み出すためである。（図９）。この結合様式により、すでに最適化された酵素−ピリミジン環相互作用が示唆される。化合物Ｉａ及びＩｂについては、いずれのピリミジン環外アミノ基も側鎖Ｇｌｕ５３、Ｇｌｎ９７及びＡｓｐ１３３との水素結合相互作用を産み出した。したがって、当然のことながら、アミノ基をいずれも同時に除去することにより、ｄＣＫの阻害が完全になくなった。８その一方で、１つのアミノ基を除去して、ピリミジン環内に１つの環外アミノ基を有する点を除いて（図１）Ｉａと同一である化合物１（図２Ａ）を産生することによってＩｂに関して測定されたとおり（図１Ｂ＆２Ｂ）、同様の強力な結合親和性が得られた。環外アミノ基を１つのみ有する親和性が１のｄＣＫがどのように保持されているのかを説明するために、複合体の結晶構造を探求したが、残念なことに、回折レベルの結晶（ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｒｙｓｔａｌ）を得ることはできなかった。特定の理論に束縛されるものではないが、化合物１中に存在する１つの環外アミノ基は、Ａｓｐ１３３とのその相互作用が保持されるようにｄＣＫ活性部位で配向され、これは、その配向が可能な範囲でのみ、近傍のピリミジン環Ｎ−原子が側鎖Ｇｌｎ９７とのその相互作用を維持することができるためである（図９）と推測している。環外アミノ基によって行われるＧｌｕ５３との相互作用は、存在する場合には、中程度の追加の結合エネルギーのみが提供される可能性が高い。１つの環外ピリミジン環アミノ基がｄＣＫとの強固な相互作用に十分であるが、我々のＣＥＭ細胞系アッセイでは、化合物１は、化合物Ｉｂ（４．９ｎＭ、図１Ｂ）と比較して、ＩＣ５０値の大幅な上昇を示した（２１．８ｎＭ、図２Ｂ）。この結果から、酵素的インビトロアッセイ及び細胞系アッセイのいずれを用いた場合でも阻害物質とその標的との相互作用を評価することが重要であることがわかる。細胞系アッセイにおいて１のｄＣＫ活性阻害が減少することにより、すべての更なる化合物が２つの環外アミノ基を含んだ。
化合物２を合成することによって、ピリミジン環Ｎ原子の位置が重要であるか否かを調べた（図２Ａ）。この化合物を計測したところ、非常に類似するリード化合物Ｉａと比較してほぼ５０倍高いＩＣ５０ ａｐｐ（図１Ａ）で結合し、１つのピリミジン環窒素原子の位置のみ異なっている。わずかな変更がどのようにして酵素との相互作用に非常に大きな影響を与えるかを理解するために、ｄＣＫ化合物２の複合体の２．０Å解像度結晶構造を解析した、（データ収集及び精密化統計に関しては、表１を参照されたい）。
調査対象の化合物はすべて開状態の酵素に結合し、また、触媒的には不完全な状態である（ｄＣＫの開状態及び閉状態を検討するには、１０，１１を参照されたい）。阻害物質は、深い腔内で結合し、阻害物質のピリミジン環は最も深いところに位置し、ヌクレオシド基質のピリミジン環によって占有された同じ位置を占有する８， ９。ヌクレオシド基質の結合を阻害する一方で、本阻害物質は、ヌクレオチドとホスホリル供与体−結合部位との結合に干渉することはない。実際に、阻害物質を有する複合体中でのｄＣＫのすべての結晶構造には、供与体部位にＵＤＰが含まれる。
化合物Ｉａ（１４．５ｎＭ）と化合物２（７５４ｎＭ）との間でＩＣ５０ ａｐｐ値が大幅に異なるにもかかわらず、これらの関連のある分子のピリミジン環は小さい疎水性の極性相互作用を介して酵素と相互作用する。後者は、Ｇｌｕ５３、Ｇｌｎ９７及びＡｓｐ１３３を含む。しかし全分子２は、化合物Ｉａに対して、結合キャビティ下部から約０．４Å離れて置換される（図２Ｃ及び図１０）。結晶構造から、この転位を担う要因は、化合物２に存在するピリミジン環Ｎによって水分子が動員されることであることが示唆される（オレンジ色の球体、図２Ｃ）。その一方で、化合物Ｉａについては、この位置におけるＣＨ基により水素結合の可能性がなくなる。また、この水分子は、Ａｒｇ１０４及びＡｓｐ１３３との相互作用を介して所定の位置に保持される。したがって、この酵素との追加の水分子媒介相互作用が形成されるにもかかわらず、水分子がその位置での結合によって引き起こすことができる酵素からの置換により、最終的に２の結合親和性が減少する。
これらの結果に基づいて、元のピリミジン環の構造を保持し、潜在的な修飾部位として分子の他の部分に注目することを決定した。異なるフェニル基の位置でのさまざまな置換基の効果を調査した（分子の部分Ｄ、図１Ａ）。
Figure 2016530266
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フェニル環環置換基を有さないが、それ以外では化合物Ｉａと同一である化合物は、我々のＣＥＭ細胞系アッセイ（ＩＣ５０、３７ｎＭ８）において中程度の効力を示した。そのアッセイにおいてメタ位にヒドロキシル基を付加することによって、ＩＣ５０がほぼ半分低下した（化合物３、従来の化合物３１３、図３）。さらに長いヒドロキシエトキシ基をその位置に付加することによって（化合物４、従来の化合物３２３）、ＩＣ５０がほぼ１ｎＭとなった（図３）。一級ヒドロキシル基（４など）は、酸化またはグルクロン酸抱合する傾向にある１２が、これらの研究では、フェニル基のメタ位での置換基の型の重要性についてはわかっていない。
化合物３と化合物４とのｄＣＫ親和性の差を理解するために、これらの分子との複合体中のｄＣＫ構造を決定し、それぞれ解像度２．０９Å及び１．９Åで解析した（表１）。この構造から、化合物４中に存在するようなヒドロキシエトキシ基はＳｅｒ１４４及びＳｅｒ１４６の側鎖と相互作用しているが、化合物３の同じ位置でのヒドロキシル基では、任意の阻害物質−酵素相互作用とすることはできない（図３Ｃ及び図１１）ことは明らかである。化合物３に対して、化合物４の優れた結合のためにこの更なる相互作用に寄与する。
フェニル基のメタ位での置換基の重要性に関しては、ヒドロキシル基（化合物３）などの短い１つを有するかまたは全く有さない場合、ｄＣＫとの相互作用が減少することは明かである。一方、より大きい置換基のインビトロ動力学的アッセイ及び細胞系ＣＥＭアッセイの双方によって測定された結合親和性（化合物Ｉａ、Ｉｂ及び４に存在するような）は同等である。また、化合物Ｉａ（ＰＤＢ ＩＤ ４Ｌ５Ｂ）及びＩｂ（ＰＤＢ ＩＤ ４ＫＣＧ）との複合体中における従来のｄＣＫの結晶構造により、フェニル基のメタ位での置換基と酵素（この場合Ｓｅｒ１４４に対する）との相互作用が示される。２−フルオロエトキシポリ（エチレングリコール）（ｎ＝２）（ＰＥＧ）２（Ｓ１６、Ｓ１７、Ｓ１９）、２−ヒドロキシエチル（ＰＥＧ）２（Ｓ１１）、２−メトキシエチル（ＰＥＧ）２（Ｓ２０、Ｓ２２〜２３、Ｓ２５〜２８、Ｓ２９）、及び２−（４，６−ジアミノピリミジン−２−チオ）エチル（ＰＥＧ）２（Ｓ１０）置換基など更なる側鎖は、メタ位で十分に容認されたがあった（表３）。
Figure 2016530266
 ａＣＥＭ細胞内での３Ｈ−デオキシシチジン（ｄＣｙｄ）の取り込みの阻害に基づくＩＣ５０値報告された値は、少なくともｎ＝２の独立した実験の平均±標準偏差である。ｂｎ＝１に関して報告された値ｃＲ２＝Ｎ（ＳＯ２Ｍｅ）（ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｍｅ）ｄ２，４−二置換ピリジン環ｅ３，５−ジアミノピリミジンチオールｆＲ２＝Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３． ｇＣｐｒ＝シクロプロピルｈ Ｒ２＝ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｍｅ
Ｓｅｒ１４４／Ｓｅｒ１４６の近位に延在し得る極性基を含む限り、フェニル基のメタ位での置換基の正確な性質は決定的でない可能性がある。
化合物５（従来の化合物２８３）を調製し、これはパラ位の置換基を欠くことでのみ化合物Ｉｂと異なる（図４Ａ）。化合物５のインビトロで計測した結合親和力性（ＩＣ５０ ａｐｐ、Ｋｉ ａｐｐ）は、ほぼＩｂ（図４Ｂ）の値と同じである。このことから、パラ位の置換基は、強固な結合には必要とされないということがわかり、また、ほぼ同一の結合態様を示し、その１つは、化合物Ｉｂ（図４Ｃ及び図１２）で観察されたものに非常に類似している化合物５及び化合物６（前述の化合物３０３）との複合体におけるｄＣＫの結晶構造によって、このことが説明される。また、結晶構造からは、パラ位置換基（存在する場合）を介して、有意な阻害物質−酵素相互作用は発生しないことも明らかになっている。この結論は、化合物６の特性によって裏付けられ、それは化合物Ｉａ及び化合物Ｉｂ中のメトキシ基と対照的に、長いが結合親和力が類似しているヒドロキシエトキシ基を有するというものである。従って、フェニル基パラ位に置換基を有さないものと、メトキシ基を有するか、または長いヒドロキシエトキシ基を有するものとの間に、インビトロ結合親和力の大きな変動はない。しかし、ＣＥＭ細胞を用いたアッセイにおいて化合物５と化合物６との間に約１０倍の差があり、化合物５の作用は小さい点に注目した。さらに、フェニル環のパラ位での置換基は、例えば２−フルオロエトキシ（Ｓ４、Ｓ１４、Ｓ１８）、フルオロ（Ｓ５、Ｓ６）、メトキシ−メチル末端（ＰＥＧ）２（Ｓ２１、Ｓ２４）及びＮ置換メタンスルホンアミド（Ｓ２９、Ｓ３０）は、比較的良好に容認されたる（表３）。また、チアゾール様４−ピリジニル（Ｓ７）、メタ一置換フェニル基（Ｓ１７）、及び３，５−二置換フェニル環（Ｓ３１）置換基に付着させる基も容認性を示した。したがって、結合親和力にとって直接的に重要であるものではないが、フェニル基パラ位でのわずかな置換であっても、置換を有することにより、関連のある細胞を用いた測定値が向上する。その結果、その後のほどんどの化合物は、その位置にメトキシ基を含む。
チアゾール環５位（分子の部分Ｃ、図１Ａ）での置換基の性質が結合親和力において重要な役割を担うことがわかった９。要するに、その位置に置換基を有さない場合と、メチル基、エチル基またはプロピル基を有する場合とを比較した。結合親和力が劇的に改善するのは後者であり、その結果として、５位にプロピル基を有する化合物は、リード化合物となった（すなわち、化合物Ｉａ及びＩｂ、図１）。興味深いことに、チアゾール５位にわずかな置換を有する／置換を有さない化合物が１つのｄＣＫ活性部位当たり、２つの阻害物質分子を結合していることが観察された。その一方で、更に結合の強いプロピル基含有分子が、１つのｄＣＫ活性部位あたり、１つの阻害物質分子に結合していることが観察された。９これまでの報告において、阻害物質分子のｄＣＫへの単一／二重結合二重結合の意味を考察する。要するに、強固な結合には２つの分子の結合を必要としないこと、及び１位と称される場所で結合された阻害物質分子は、観察されたｄＣＫ活性の阻害を担い、２位で結合された分子によるｄＣＫ阻害の明らかな改善は認められないことが結論付けられている。
しかし、代謝的安定性を試験した場合、プロピル基を含有する化合物Ｉａ及び化合物Ｉｂは、例えば、化合物１５ａなど短いメチル基を有するものと比較して安定性が低いことがわかった（表２）。また、チアゾリル５位のシクロプロピル基及びフェニル基の活性を調べた（表３）。シクロプロピル類似体（Ｓ２７）は、良好なＩＣ５０値を有したが、ＰＥＴ Ｌ−ＦＡＣアッセイでは上手くいかず、８に記述されている。フェニル類似体の（Ｓ２８）親和性は高くないことが判明した。従って、ｄＣＫとの相互作用が弱くても、メチルチアゾール環置換基に戻させた。チアゾールプロピル基によってもたらされた親和力の損失を補償するために、インビトロ結合親和力を回復し、同時に許容可能な代謝安定性を維持する、補償修飾を検索した。その目的のために、リンカー部分の修飾を調査することを決定した（化合物の部分Ｂ、図１）。
Figure 2016530266
−Ｓ−ＣＨ２−基が作用して、本化合物のピリミジン及びチアゾール環に連結する。動力学的アイソトープ試験を目的として、種々の異なるリンカー、例えばその重水素化類似体（−Ｓ−ＣＤ２−）などの試験を行った。特定の理論に束縛されるものではないが、リンカーが加水分解性代謝に関与するならば、動力学的アイソトープ作用によって、重水素化（−Ｓ−ＣＤ２−）類似体では、代謝安定性の改善が認められるであろうと仮定した。重水素類似体（Ｓ１、Ｓ８、Ｓ９、Ｓ１３）は、予想されたとおり、それらの同位体種（ｉｓｏｔｏｐｏｌｏｇｕｅｓ）に類似した親和力を有した（表３）。しかし、重水素化化合物は、ＰＥＴ Ｌ−ＦＡＣ肝臓アッセイにおいて改善を示さず、これにより、おそらく加水分解のメカニズムが−Ｓ−ＣＨ２−リンカーの代謝に関与していないことわかる。また、−Ｓ−ＣＨ２−の基硫黄原子とメチレン基（−ＣＨ２ＣＨ２−）との置換の試験を行った。リンカーの硫黄原子を炭素原子に置換することによって、ｄＣＫ親和力及び代謝安定性が低下した（表３）。メチレンが置換され、メチル基を含有するリンカーの試験を行った（−Ｓ−ＣＨ（ＣＨ３）−）。これらのラセミ体メチルリンカー化合物は、有望な生物学的結果及び代謝安定性の上昇を示した（化合物７及び化合物８の合成については、スキーム１及びスキーム２を参照されたい）。したがって、合成ステップを減し、全収率を向上させる試みにおいて合成経路を注意深く調べた。９への６ステップの合成経路を、全収率が４３％で開発することに成功した（スキーム３）。市販の３−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾニトリルＡを塩基性条件下で硫化アンモニウム水溶液にさらし、チオアミドＢを得た。還流エタノール中において、４−ブロモペンタン−２，３−ジオンによるチオアミドＢの縮合を介して、Ｃのチアゾールコアを形成するための環化を得た１。１３−クロロ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカンにより１４、塩基性条件下でＰＥＧ鎖の化合物Ｄのフェニル環への導入を収率８９％で達成した。得られたケトン含有化合物を水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ）を用いて還元することにより、高収率でラセミ体第二級アルコールＥが得られた。塩化チオニルを用いて、アルコールＥをそれぞれの塩化物Ｆに変換させた。塩化アシルを粗形態で４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジンと反応させて、生成物９Ｒ／Ｓを産生した。
スキーム１。ラセミ体メチルリンカー化合物７の合成経路。
Figure 2016530266
試薬及び条件：（ａ）ジイソブチルアルミニウム水素化物、テトラヒドロフラン（事前作業）；（ｂ）デスマーチンペルヨージナン、ジクロロメタン、２３℃、８０％；（ｃ）メチルマグネシウムヨウ化物、テトラヒドロフラン０℃、８６％；（ｂ）塩化チオニル、ジクロロメタン、２３℃、９６％；（ｅ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、炭酸カリウム、ＤＭＦ、８０℃、６６％。
スキーム２。ラセミ体メチルリンカー化合物８の合成経路。
Figure 2016530266
試薬及び条件：（ａ）ジイソブチルアルミニウム水素化物、テトラヒドロフラン（事前作業）；（ｂ）デスマーチンペルヨージナン、ジクロロメタン、２３℃、７０％；（ｂ）塩化チオニル、ジクロロメタン、２３℃、６９％；（ｂ）塩化チオニル、ジクロロメタン、２３℃、９４％；（ｅ）４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、炭酸カリウム、ＤＭＦ、８０℃、６４％。
スキーム３。メチルリンカー化合物９Ｒ／Ｓの合成経路。
Figure 2016530266
ａ試薬及び条件：（ａ）（ＮＨ４）２Ｓ （２０％Ｈ２Ｏ）、ピリジン、Ｅｔ３Ｎ、６０℃、８５％；（ｂ） ４−ブロモペンタン−２，３−ジオン、ＥｔＯＨ、還流、９５％；（ｃ） １３−クロロ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン、Ｃｓ２ＣＯ３，、ＤＭＦ、５０℃、８９％；（ｄ）ＤＩＢＡＬ−Ｈ、ＤＣＭ， −７８℃、９２％；（ｅ） ＳＯＣｌ２、ＤＣＭ、０℃〜ｒｔ；（ｆ）最後の２つのステップにおいて４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン、Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、７５ ｏＣ、６５％
−Ｓ−ＣＨ（ＣＨ３）−リンカーを、チアゾール環５位（化合物）にプロピル基を含む化合物及びプロピル基の代わりにメチル基を含む化合物（化合物８）に導入された（図５Ａ）。上述のように、化合物８の理論的根拠は、予測された代謝安定性の改善であった。興味深いことに、プロピル−チアゾール環を有する従来の化合物は、メチル−チアゾール類似化合物と比較して、ｄＣＫへの更に強固な結合を示したが、ここでは、メチル含有化合物７とプロピル含有化合物８との結合によるさらに良好な結合を測定した（図５Ｂ）。したがって、メチル基−リンカー置換基がチアゾール環置換基に近接（プロピル基またはメチル基）することにより、ｄＣＫ活性部位では適応しない、より大きいプロピル基となった。７よりも８でインビトロ結合パラメータが改善されたにもかかわらず、細胞系アッセイでは、同程度のＩＣ５０値を示し、それでも良好な８と一致している（図５Ｂ）。
化合物７及び８はいずれもラセミ体混合物として調製され、導入されたリンカーメチル基により、この位置は新たなキラル中心となる（矢印、図５Ａ）。２つの光学異性体のいずれかが活性ｄＣＫ阻害物質であることを明らかにするために、化合物７＆８を有する複合体中のｄＣＫの結晶構造を決定した（それぞれ分解能２．０Å及び１．８５Åで解析した、表１）。化合物７は、単一の分子としてｄＣＫ、具体的には１位で結合している。興味深いことに、ラセミ混合物７を使用して、ｄＣＫに対する複合体を形成するという事実にかかわらず、結晶構造により１位に結合するＲ異性体に関する明確な証明が提供される（図５Ｃ及び図１３）。同様に、ラセミ体８とｄＣＫとの複合体の構造を調べることによって、これは最適な１位結合部位を占有するＲ異性体であることがわかる（図５Ｄ及び図１３）。化合物８はチアゾール環にメチル置換基を含むため、分子は２位を占有することができ、実際にその位置にも化合物８が観察される。しかし、それが１位に結合する８のＲ異性体である場合、それは２位に結合するＳ異性体である（図５Ｅ及び図１３）。
１位は、この系統の阻害物質の結合部位を示し得る。これによりラセミ体８の測定されたインビトロ阻害値がＲ異性体の優先的結合を反映していることを示唆するであろう。この予測を調べるために、８をわずかに変更した（フェニル基置換基の性質）が、特に、純粋な異性体９Ｒ及び９Ｓを産生するために分離したラセミ体を有する化合物９を合成した（図６Ａ）。鏡像異性的に純粋な化合物のインビトロ結合親和性を測定し、９Ｓが９Ｒに対してほぼ４００倍弱い結合親和性を有することを明かにした（図６Ｂ）。構造体ｄＣＫとの強固な相互作用を担うＲ体であることを示す明らかな証拠を提供することに加えて、この結果により、位１はｄＣＫ阻害のための最適な阻害物質結合部位の１つであり、位２は、結晶化機構において使用される高濃度の阻害物質が原因で占有される我々の構造をベースにした解釈を検証する。
化合物７、８及び９のＲ異性体であることが見出されたことにより、ｄＣＫ阻害を担うと考えられ、不斉合成を開発する試みを行った（スキーム２）。化合物８とかなり類似している、我々のグループによって開発された化合物の１０Ｒのキラル合成は、ケトンＤのキラル・コーリー・バクシ・柴田還元（ＣＢＳ）反応１５を特徴とする。本方法によって、キラルＨＰＬＣを介して測定したときに鏡像異性が９６％超であるキラルアルコールＥを合成した。Ｅｔ３Ｎ、ピリジンまたはＤＭＡＰなどの異なる塩基性条件下においてスルホネートを得るためにメタンスルホン酸無水物またはｐ−トルエンスルホン酸無水物を用いることにより、おそらく副次的なベンジル様カルボカチオンが安定することにより、アルケンの消失となった。トリフルオロ無水酢酸（ＴＦＡＡ）を０℃で使用することにより、エステルの鏡像体過剰率％の有意な減少なくアルコールＥを対応するトリフルオロアセテート（ＴＦＡ）Ｆに変換させた。最終的に、化合物Ｆを４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジンと反応させて、収率６１％で１０Ｒを生成した。これは、鏡像異性が４０％を超える２つのステップを上回る。おそらく、反応の一部は直接的なＳＮ２経路を介して発生し、別の部分はＳＮ１経路を介して発生し、これによって部分的ラセミ化材料が得られた。再結晶を介するキラル分割により、鏡像異性が９０％を超える１０Ｒが産生された。同様に、ＣＢＳ還元において（Ｓ）−（−）−２−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジンを使用して、１０Ｓを合成した。
化合物１０Ｒ（図６Ａ）を測定したところ、９Ｒの場合よりも非常に類似するインビトロ結合親和性を有していた（図６Ｂ）。重要なことに、９Ｒに対して９Ｓの親和性は大幅に低下し、１０Ｒに対して１０ＳのｄＣＫに対する親和性は大幅に低下した。これにより、リンカーのＲ異性体を含む化合物について、ｄＣＫの優先度が繰り返された。
ｄＣＫ−１０Ｒ複合体結晶構造の解析を行った。化合物９（１位に結合される９Ｒが観察される）を有するこれまでの構造及び鏡像異性的に純粋な９Ｓ、９Ｒ、１０Ｓ及び１０Ｒ（Ｒ異性体の親和性がより高いことが観察されている）を用いた我々の動力学的結果に基づいて、また、鏡像異性的に純粋な１０Ｒにより結晶が形成されるため、１０Ｒは、適切な１位のみに結合すると予測した。さらには、Ｓ異性体がないので２位結合部位は占有されていないと予測した。実際に、ｄＣＫ−１０Ｒ複合体の結晶構造から、１位での１つの阻害物質分子が明らかになった（図６Ｃ）。この結果から、Ｒ異性体は、２位の結合部位に対して非常に低い親和性を有することが示唆される。特に、Ｒ異性体とｄＣＫとの相互作用は１位結合部位に制限されるが、このために酵素の結合親和性が低下するものではない。
特定の理論に束縛されるものではないが、我々は、１つの異性体の場合、他の提供された抗力ではなく、リンカーのキラルメチル基は酵素残基と衝突するとする阻害物質及び酵素に関連する立体化学的考察を仮定した。しかし、化合物８（Ｒ／Ｓ）及び１０Ｒにより解析した結晶構造を調べても、この解釈を裏付けられるものではなく、明らかな衝突のない１位で結合されるＳ異性体（図５Ｄ）及び２位で結合されるＲ異性体（図５Ｅ）をモデル化することができた。
８Ｒと８Ｓとの結合様式を比較して、環の相対配向が大きく異なることを明らかにする（図１４）。すなわち、各異性体はそのコンフォメーションを調節して、その結合部位に最適に適合させる（すなわち、誘導適合）。特定の理論に束縛されるものではないが、このことにより酵素によってピリミジン環、リンカー、チアゾール環及びフェニル環間の相対配向が決定することが示唆される。８Ｒと同じ方法で配向されるＳ異性体の理論モデルを調べた。実際に、１位の８Ｒについては、リンカーのキラルメチル基とチアゾール環メチル基との間の観察された距離は４．２Å（図７Ａ）であり、１位に結合されたモデル化８Ｓでは、２．５Å（図７Ｂ）であってこの距離は好ましくないものである。同様に、２位の８Ｓについてはリンカーのキラルメチル基とチアゾール環メチル基との間の観察された距離は４．４Å（図７Ｃ）であり、８Ｓと同じコンフォメーションを適用しているモデル化Ｒ異性体については、その距離は２．６Åであり好ましくないものである（図７Ｄ）。したがって、１位または２位に対するキラルの厳密な選択は、結合部位間で大きく異なる特定の阻害物質配向を決定する酵素に基づく。１位の場合、その配向は、Ｓ異性体と適合するものではなく、２位の場合、その配向はＲ異性体と適合するものではない。
コンピュータシミュレーションを用いて、８Ｒ及び８Ｓが受けるタンパク質との結合時のコンフォメーション上のペナルティの定性的推定を得る。コンフォメーション上のペナルティは、物質の好ましい溶液相形状と結合時に想定される形状との間のエネルギー差である。ΔＥ ＝ Ｅ溶液 − Ｅ結合。１位で各エナンチオマーを溶媒和タンパク質とドッキングさせ、平衡化することができた（実施例の項及び図１５の詳細を参照のこと）。平衡化させ、ドッキングさせた阻害物質の構造をタンパク質から除去して、半経験的ＰＤＤＧ／ＰＭ３法によりそれらのエネルギーを評価した１６−２１。８Ｒ及び８Ｓの非結合構造体を暗溶媒中で最適化させ、これらの低エネルギー溶液相コンフォメーションを決定した。結合構造体と同様に、非結合構造体のエネルギーはＰＤＤＧ／ＰＭ３により評価した。得られたエネルギーを使用して、各エナンチオマーのコンフォメーション上の定性的ペナルティを得た。８Ｓのコンフォメーション上のペナルティは、８Ｒのコンフォメーション上のペナルティのほぼ２倍であり（８Ｓのペナルティより４５ｋｃａｌ／ｍｏｌ多い）、８Ｒは、そのタンパク質と結合するために、かなりより少ない構造上の再配置を受ける必要があることが更にわかった。
この問題を考察する別の方法は、チアゾール環がキラルリンカー原子に結合する結合部周囲の回転の関数として阻害物質のエネルギーを調べることである（結合部には図７Ａ〜Ｄに＊でマークしている）。１位でｄＣＫに結合する８Ｒについては、観察された二面角からこの回転が−５９°であり、低エネルギーコンフォメーションに適合することがわかる（図７Ｅ）。その一方で、この結合部位のモデル化Ｓ異性体は、ねじれ角が１８９°であり、明らかに高エネルギーコンフォメーション（図７Ｆ）である。同じパターンが２位で観察され、Ｓ異性体はねじれ角−３２６°でｄＣＫに結合し、これは低エネルギーコンフォメーションであり、２位でモデル化Ｒ異性体は、高エネルギーコンフォメーション（図７Ｈ）である。したがって、キラル選択性は、他の異性体よりも直接立体化学的に好ましい１つの異性体の酵素により生じるものではない。むしろ、酵素により、特定のコンフォメーションが決定し、その選択性は特定のコンフォメーションを用いることが可能な１つの異性体から生じ、他の異性体ではエネルギーペナルティによりその結合が不可能となる。
本明細書に記載のキラル選択制の説明に加えて、この認識を用いて、いずれかの結合部位に結合するキラル分子の設計を行うことができる。具体的には、チアゾールメチル基を水素原子に置換することによって、いかなる立体化学的衝突もなくなり、このため、いずれかの異性体がいずれかの阻害物質結合部位に結合され得ることが予測される。
ミクロソーム肝の標準クリアランスアッセイにおいて、１０Ｒの代謝安定性を測定した。ＮＡＤＰＨ依存性１０ＲのＴ１／２は、従来のリード化合物Ｉｂよりもほぼ３７倍長い（表２）。次いで、前述のポジトロン放射形断層撮影（ＰＥＴ）アッセイを用いてマウスを対象として化合物１０の試験を行った８。初期のリード化合物Ｉｂでは、腹腔内投与４時間でわずかにほぼ２５％のｄＣＫ活性阻害が保持されたが３、化合物１０（ラセミ混合物として提供）は、この時点で５０％超のｄＣＫ活性阻害を示した（図８Ａ）。さらに、化合物１０による処置から８時間後であっても、ｄＣＫ阻害は３０％を上回っていた。次に、化合物１０の薬物動態学的特性を測定して、従来のリード化合物Ｉａ及びＩｂと比較した７，８。図８Ｂに示すとおり、化合物１０の薬物動態学的特性は、化合物Ｉａ及びＩｂのこれまでに公開された値に対して、有意に改善した７，８。総じて、これらの所見により、キラルリンカーを導入し、チアゾール環プロピル置換基をメチル基に置換することによって、代謝安定性の改善されたｄＣＫ阻害物質が生成されることがわかる。
精製組換え酵素及び細胞系アッセイのいずれも用いて実施した本明細書で考察される化合物の構造試験及び阻害試験により、ｄＣＫへの結合に必須の決定因子が明かになり、理論的に説明され、また、置換基の型及び置換が誘導された。これにより、最初のリード化合物Ｉａ及びＩｂの発現が明らかになった。前述のとおりであるために、これらの化合物は、チアゾール環５位にプロピル基を含み、プロピル置換基により、その位置にメチル基を有する化合物と比較して、ｄＣＫに対して向上された親和性がもたらされる。こうした親和性強化プロピル基では、その位置にメチル基を含む化合物と比較して、代謝安定性が損なわれた。このため、より結合は弱いが、そのチアゾール環のメチル基の代謝的に更に安定している足場に戻した。代謝安定性を改善することを目的に、チアゾール部分とピリミジン部分との間のキラルメチレンメチル硫黄リンカーの試験を行った。このリンカーにより２つの明白な効果が付与されることがわかっている。１つ目は、ｄＣＫの親和性に関して、修飾リンカーがチアゾールプロピル基の欠失を補償することであって、２つ目は化合物により代謝安定性の改善が示されることである。ｄＣＫとこのリンカーを含む化合物との相互作用は、Ｒ異性体に特異的である。このことは、ｄＣＫ−阻害物質結晶構造によって及びＲ光学異性体とＳ光学異性体との結合親和性を比較することによって明らかであった。新規リード化合物１０Ｒは、有望なｄＣＫ阻害物質であり、ｄＮＴＰプールの摂動及びＤＮＡ複製ストレス過負荷の誘導によって、他の薬剤と組み合わせて使用して、癌細胞中の合成致死を特異的に引き起こすことができる。
材料。一般的実験用試薬は、Ｆｉｓｈｅｒ（Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，ＵＳＡ）及びＳｉｇｍａ‐Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ，ＵＳＡ）から購入した。ヌクレオチドはＳｉｇｍａから購入した。いずれの阻害物質もＵＣＬＡ Ｃｈｉｒａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．（８００ Ｎｏｒｔｈ Ｆｉｖｅ Ｐｏｉｎｔｓ Ｒｏａｄ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ １９３８０ ＵＳＡ）にて合成し、Ｒ光学異性体及びＳ光学異性体の分離を行った。
化学。基本手順。別途注記のない限り、市販の無水溶媒を用いて、窒素雰囲気下において、オーブン乾燥ガラス器中で反応させた。抽出及びクロマトグラフィーに使用された溶媒は、無水物ではなかった。水和物を動的真空下にて、１１０℃で２０時間乾燥させて、４，６−ジアミノ−２−メルカプト−ピリミジンを得た。市販の業者より入手した他の試薬はすべて試薬等級であり、指定がない限り、更なる精製を行わずに使用した。反応物及びクロマトグラフィー分画は、Ｍｅｒｃｋ ｐｒｅｃｏａｔｅｄ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０Ｆ２５４ガラスプレート（２５０μｍ）を用いて、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により解析した。紫外線、バニリン染色、過マンガン酸塩染色またはｐ−アニスアルデヒド染色により可視化を行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーはＥ．Ｍｅｒｃｋ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０（２３０〜４００メッシュ）により、圧縮空気を用いて行った。ＡＲＸ５００（５００ＭＨｚ）、Ａｖａｎｃｅ５００（５００ＭＨｚ）またはＡｖａｎｃｅ３００（３００ＭＨｚ）分光器で１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを記録した。化学シフトは、１０００万分率（ｐｐｍ、δ）にて報告し、対照として残留溶媒ピークを用いる。結合定数Ｊはヘルツ（Ｈｚ）にて報告し、共鳴パターンは次のような表記法で報告される：ｂｒ（ブロード）、ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）及びｍ（多重線）。ＭａｓｓＬｙｎｘ ４．１ソフトウェアにより制御した飛行時間計器（Ｗａｔｅｒｓ ＬＣＴ Ｐｒｅｍｉｅｒ ＸＥ）により、エレクトロスプレー質量分析データを収集した。試料は、メタノールに溶解し、直接ループ注入（Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ）でマルチモードイオン化源に注入した。全最終化合物の純度は、９５％超であるようにした。Ｋｎａｕｅｒ Ｓｍａｒｔｌｉｎｅ ＨＰＬＣシステムによりＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ逆相カラム（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）を用いて、ｉｎｌｉｎｅ Ｋｎａｕｅｒ ＵＶ（２５４ｎｍ）検出器を用いて、分析用ＨＰＬＣ法を実施した。気相：Ａ：０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ。記述されたかく化合物の溶離液勾配を明記する。鏡像体過剰率（％ｅｅ）は、キラルＨＰＬＣを介して、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＩＡ−３／ＩＡ多糖類系不動型カラム（３μｍ、４．６ｘ１５０ｍｍ）、ｉｎｌｉｎｅ Ｋｎａｕｅｒ ＵＶ（３１０ｎｍ）検出器を用いて測定した。気相：Ａ：０．１％ＴＦＡ／ヘキサン、Ｂ：０．１％ＴＦＡ／プロパノール。溶離液勾配：５０％Ａ相及び５０％Ｂ相。クロマトグラムは、ＧｉｎａＳｔａｒ （Ｒａｙｔｅｓｔ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．；Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ， ＮＣ， ＵＳＡ）ＡＤ変換器、及びＧｉｎａＳｔａｒソフトウェア（Ｒａｙｔｅｓｔ ＵＳＡ， Ｉｎｃ．）により収集した。
スキーム１：
３−エトキシ−４−ヒドロキシベンゾチオアミド（Ｂ）。３−エトキシ−４−ヒドロキシベンゾニトリルＡ（２．５０ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）／トリエチルアミン（３５ｍＬ）／トリエチルアミン（２．５ｍＬ）の混合物に硫化アンモニウム溶液（Ｈ２Ｏ中２０重量％、１５．６５ｍＬ、４６．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１８時間、６０℃で攪拌した。反応混合物を冷却し、真空中で濃縮し、残留溶媒を除去した。得られた残留物をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによりシリカゲルで精製（３：１ エチルアセテート：ヘキサン）し、黄色固体のＢ（２．５６ｇ、１３．０ｍｍｏｌ、８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．６８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４８ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１１ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ６．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０３ （ｓ， １Ｈ）， ４．２１ （ｑ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ ２００．５， １５０．３， １４５．８， １３１．０， １２１．０， １１４．０， １１２．６， ６４．３， １４．１。
エタノール中の１−（２−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エタン−１−オン（Ｃ）。チオアミドＢ（１．５０ｇ、７．６ｍｍｏｌ）及び４−ブロモペンタン−２，３−ジオン（２．０４ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）混合物（４０ｍＬ）を還流条件下で４時間攪拌した。得られた混合物を冷却し、減圧濃縮し、残留溶媒を除去した。粗残渣はフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（１０：３ヘキサン：酢酸エチル）を用いて精製し、所望の白色固体のチアゾール中間体Ｃ（２．００ｇ、７．２ｍｍｏｌ、９５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （３００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４７ （ｄ， Ｊ ＝ １．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， １．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．９３ （ｓ， １Ｈ）， ４．２３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．２ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．７７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７１ （ｓ， ３Ｈ）， １．５０ （ｔ， Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １９６．０， １６２．８， １４８．９， １４８．０， １４６．３， １４２．９， １２５．９， １２０．５， １１４．８， １０９．４， ６４．９， ２９．５， １４．９， １３．６。
１−（２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エタン−１−オン（Ｄ）。ＤＭＦ（３５ｍＬ）中のチアゾール中間体Ｃ（１．６６ｇ、６．０ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（３．１３ｇ，９．６ｍｍｏｌ）及び１３−クロロ−２，５，８，１１−テトラオキサトリデカン（２．１９ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１８時間、５０℃で攪拌した。濃縮後、残留溶媒を除去し、得られた残留物をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、粗残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（１：１酢酸エチル：ヘキサン）を用いて精製し、所望の白色固体のケトンＤ（２．２６ｇ、５．３ｍｍｏｌ、８９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４８ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２４ ‐ ４．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１７ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９３ ‐ ３．８９ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７９ ‐ ３．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７０ ‐ ３．６３ （ｍ， ４Ｈ）， ３．５７ ‐ ３．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７１ （ｓ， ３Ｈ）， １．４７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １９６．０， １６２．５， １５０．８， １４９．４， １４９．０， １４３．１， １２６．９， １１９．８， １１４．０， １１１．４， ７２．１， ７１．１， ７０．８， ７０．７， ６９．７， ６９．０， ６４．９， ５９．２， ２９．５， １５．０， １３．６。
１−（２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エタン−１−オール（Ｅ）。攪拌したＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍＬ）中のケトンＤ（１．０６ｇ、２．５ｍｍｏｌ）／溶液を−７８℃まで冷却し、ゆっくりと水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍ／ＴＨＦ、１０ｍｍｏｌ、１０ｍＬ）を添加した。反応物は２３℃まで加温して１時間攪拌した。混合物を０℃まで冷却して、ロッシェル塩飽和水溶液でゆっくりクエンチした。混濁液を１時間２３℃で溶液が再び透明になるまで攪拌した。得られた溶液を酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧濃縮し、所望の淡黄色固体のアルコールＥ（９７８ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ、９２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３３ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８９ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．９１ （ｑ， Ｊ ＝ ６．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２２ ‐ ４．１７ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１３ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９１ ‐ ３．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７６ ‐ ３．７２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６９ ‐ ３．６１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．５５ ‐ ３．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．３７ （ｓ， ３Ｈ）， １．５２ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．４４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １６４．３， １５５．１， １５０．０， １４９．０， １２７．２， １２５．８， １１９．３， １１３．８， １１１．０， ７１．８， ７０．８， ７０．６， ７０．４， ６９．５， ６８．７， ６４．６， ６４．４， ５８．９， ２４．０， １４．７， １０．７。
４−（１−クロロエチル）−２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール（Ｆ）。攪拌したアルコールＥ（４２５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）／ＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）溶液に塩化チオニル（０．７８ｍＬ、１０．０ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり添加した。反応物は２３℃まで加温して１時間攪拌した。減圧濃縮後、残留溶媒を除去し、得られた粗残渣を次のステップに更に精製することなく直接使用した。これは塩素Ｆが不安定であるためであった。
２−（（１−（２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（（±）−９）。ＤＭＦ（７ｍＬ）中の前ステップにより得た粗塩素Ｆ、４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン（６２５ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（５５２ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃で１時間攪拌した。その溶液を冷却し、減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（２５：１ ジクロロメタン：メタノール）を用いて、所望の白色固体の生成物（±）−９（３５７ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ、２つのステップにおいて６５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２４ （ｓ， １Ｈ）， ５．０２ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５８ （ｓ， ４Ｈ）， ４．２２ ‐ ４．１８ （ｍ， ２Ｈ）， ４．１５ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９１ ‐ ３．８７ （ｍ， ２Ｈ）， ３．７８ ‐ ３．７５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．６９ ‐ ３．６３ （ｍ， ４Ｈ）， ３．５６ ‐ ３．５３ （ｍ， ２Ｈ）， ３．３７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５０ （ｓ， ３Ｈ）， １．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．４６ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １７０．７， １６３．８， １６３．２ （２）， １５３．３， １４９．９， １４９．１， １２７．９， １２６．８， １１９．４， １１４．０， １１１．３， ８０．６， ７１．９， ７０．９， ７０．７， ７０．６， ６９．７， ６８．９， ６４．７， ５９．１， ３７．７， ２２．０， １４．８， １１．６； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ＋Ｈ］＋ ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ２５Ｈ３５Ｎ５Ｏ５Ｓ２ Ｈに対する計算値：５５０．２１５８、実測値：５５０．２１６９。
スキーム２：
３−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾチオアミド（Ｂ）。ピリジン（３０ｍＬ）及びトリエチルアミン（３ｍＬ）中の３−ヒドロキシ−４−メトキシ−ベンゾニトリルＡ（３．００ｇ、２０．１１ｍｍｏｌ）の混合物に硫化アンモニウム溶液（Ｈ２Ｏ中２０重量％、２０．７ｍＬ、６０．３ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を１８時間、６０℃で攪拌した。反応混合物を冷却し、減圧濃縮し、残留溶媒を除去した。得られた残留物をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによりシリカゲルで精製（３：１ エチルアセテート：ヘキサン）し、黄色固体のＢ（３．１３ｇ、１７．１ｍｍｏｌ、８５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ ８．７７ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ８．６５ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．８５ （ｓ， １Ｈ）， ７．５９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ ２００．７， １５０．５， １４５．７， １３２．４， １１９．５， １１４．８， １１０．２， ５５．５。
１−（２−（３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エタン−１−オン（Ｃ）。エタノール（７０ｍＬ）中のチオアミドＢ（２．７５ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）及び４−ブロモペンタン−２，３−ジオン（４．０３ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）の混合物を還流条件下で４時間攪拌した。得られた混合物を冷却し、減圧濃縮し、残留溶媒を除去した。粗残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（１０：３ ヘキサン：酢酸エチル）を用いて精製し、所望の白色固体のチアゾール中間体Ｃ（３．７９ｇ、１４．４ｍｍｏｌ、９６％）を産生した。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ ９．５３ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．２６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５７ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １９５．２， １６２．５， １５０．１， １４８．５， １４７．１， １４２．７， １２５．６， １１８．２， １１２．９， １１２．５， ５５．９， ２９．４， １３．２。
Ｎ−（２−（５−（４−アセチル−５−メチルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタンスルホンアミド（Ｄ）。ＤＭＦ（３５ｍＬ）中のチアゾール中間体Ｃ（１．５８ｇ、６．０ｍｍｏｌ）溶液にＣｓ２ＣＯ３（３．１３ｇ、９．６ｍｍｏｌ）及びＮ−（２−ブロモエチル）メタンスルホンアミド（２．１８ｇ、１０．８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を７２時間、５０℃で攪拌した。濃縮後、残留溶媒を除去し、得られた残渣をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、粗残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（３：２酢酸エチル：ヘキサン）を用いて精製し、所望の白色固体のケトンＤ（１．８９ｇ、４．９ｍｍｏｌ、８２％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ８．００ （ｓ， １Ｈ）， ７．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５ ‐ ４．２０ （ｍ， ２Ｈ）， ３．９０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．６０ ‐ ３．５５ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０３ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７０ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １９５．８， １６２．５， １５１．５， １４８．９， １４７．８， １４３．１， １２６．４， １２１．１， １１２．４， １１１．７， ６９．１， ５５．９， ４２．７， ４０．６， ２９．４， １３．４。
（Ｓ）−Ｎ−（２−（５−（４−（１−ヒドロキシエチル）−５−メチルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタン−スルホンアミド（Ｅ）。Ａｒ下で−７８℃で攪拌したＴＨＦ（２６ｍＬ）中の（Ｒ）−（＋）−２−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジン（６．７ｍＬの１．０Ｍ／トルエン溶液、６．７ｍｍｏｌ）溶液に、ボラン−テトラヒドロフラン複合体（４．４ｍＬ１．０Ｍ／ＴＨＦ溶液、４．４ｍｍｏｌ）、次いでＴＨＦ（１４ｍＬ）中のＤ（２８４ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）溶液を添加した。Ｄ溶液をシリンジポンプで６時間添加した後、反応混合物を更に２０分、−７８℃で攪拌した。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５ｍＬ）を添加し、混合物を室温まで加温した。濃縮後、残留溶媒を除去し、得られた残渣をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、粗残渣はフラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（３：２酢酸エチル：ヘキサン）及び洗浄系として別に４０：１ジクロロメタン：メタノールを用いて精製し、白色固体として．降伏収率アルコールＥ（２２１ｍｇ、０．５７ｍｍｏ、７７％、ｅｅ９６％）を産生した。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ ７．５７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．０２ ‐ ４．９５ （ｍ， １Ｈ）， ４．２１ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８８ （ｓ， ３Ｈ）， ３．５７ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５．５， ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０４ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４８ （ｓ， ３Ｈ）， １．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ １６２．９， １５６．１， １５１．３， １４８．４， １２７．１， １２６．８， １１９．７， １１２．１， １１１．４， ６８．６， ６４．１， ５５．３， ４２．６， ３９．６， ２３．０， １０．０。
（Ｓ）−１−（２−（４−メトキシ−３−（２−（メチルスルホンアミド）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エチル２，２，２−トリフルオロアセテート（Ｆ）。攪拌したＣＨ２Ｃｌ２（１３ｍＬ）中のアルコールＥ（２２１ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）溶液にトリフルオロ無水酢酸（０．６６ｍＬ、２．９ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくり添加した。０℃で３０分間攪拌後、反応物は２３℃まで加温して、停止するまで更に３０分間攪拌した。減圧濃縮後、残留溶媒を除去し、得られた粗残渣を更なる精製を行わずに次のステップに直接使用した。これは所望のトリフルオロアセテートＦの不安定性によるためである。
（Ｒ）−Ｎ−（２−（５−（４−（１−（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）エチル）−５−メチルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタンスルホンアミド（１０Ｒ）及び（Ｓ）−Ｎ−（２−（５−（４−（１−（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）エチル）−５−メチルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタン−スルホンアミド（１０Ｓ）。ＤＭＦ（５ｍＬ）中の前ステップにより得た粗塩化物Ｆ及び４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン（１１２ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）を８０℃で１時間攪拌した。その溶液を冷却し、減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（２５：１ ジクロロメタン：メタノール）を用いて、所望の白色固体の光学異性体１０Ｒ及び１０Ｓの対（１７８ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１０Ｒのｅｅ ４０％、２つのステップにおいて総収率６５％）を得た。光学異性体がＭｅＯＨ＼アセトン溶媒系と再結晶することにより、９３％ｅｅ超の１０Ｒを得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ，アセトン−ｄ６） δ ７．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２６ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ５．６０ ‐ ５．５５ （ｍ， ４Ｈ）， ５．３７ （ｓ， １Ｈ）， ５．３０ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２３ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２ Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．５８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５．５， ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｓ， ３Ｈ）， ２．５２ （ｓ， ３Ｈ）， １．７４ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １６８．０， １６３．５ （２）， １６２．９， １５３．６， １５０．６， １４７．８， １２６．６， １２６．２， １１９．５， １１２．３， １１０．４， ７９．０， ６７．９， ５５．７， ４１．９， ３６．１， ３０．７， ２２．２， １１．２； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２６Ｎ６Ｏ４Ｓ３ Ｈに対する計算値：５１１．１２５６、実測値：５１１．１２５９； １０Ｒ ［α］１９ Ｄ ＝ ＋３４０．０ （ｃ ＝ ０．１２アセトン） （ｅｅ ＝ ９３％）。
タンパク質の発現及び精製。タンパク質の発現及び精製を我々が記述しているように正確に行った。９簡潔に述べると、４つの溶媒曝露システインがセリンに変異した（Ｃ４Ｓ）ヒトｄＣＫタンパク質であるＳ７４Ｅ−Ｃ４Ｓ−ｄＣＫバリアントを使用した。Ｃ４Ｓ突然変異遺伝子により、酵素の三次元コンフォメーションまたはその酵素活性が変動することなく、更に良質の結晶が生成されることがわかった２２。加えて、酵素はＳｅｒ７４からグルタミン酸（Ｓ７４Ｅ）への突然変異体を含み、この突然変異体は、この残留物のリン酸化状態を模倣する働きをする。本報告にてｄＣＫを示す場合、Ｃ４Ｓ−Ｓ７４Ｅ−ｄＣＫバリアントを意味する。ｄＣＫは、ｐＥＴ−１４ｂベクトルを使用して、大腸菌ＢＬ２１Ｃ４１（ＤＥ３）細胞中に発現させ、細胞は、２ｘＹＴ培地内で増殖させ、４時間３１０Ｋで０．１ｍｍ ＩＰＴＧにより誘導した。細胞を収集して、音波処理によりペレットを溶解した。遠心分離により３００００ｒｅｖ／分で１時間、２７７Ｋで溶解産物を透明化し、上清を５ｍｌ ＨｉｓＴｒａｐ ｎｉｃｋｅｌ−ａｆｆｉｎｉｔｙ ｃｏｌｕｍｎ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に充填した。カラムを２５ｍＭ Ｔｒｉｓ‐ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５００ｍＭ ＮａＣｌ、３０ｍＭイミダゾールから構成されている３００ｍｌ緩衝液で洗浄した。結合したタンパク質を同じだが更に２５０ｍＭイミダゾールを含む緩衝液で溶出し、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２００ｍＭクエン酸ナトリウム、２ｍＭ ＥＤＴＡ、３ｍＭ ＤＴＴからなる緩衝液中でＳ−２００カラムを用いたゲル濾過で更に生成した。タンパク質分画をプールし、濃縮し、アリコート化し、液体窒素内で瞬間凍結し、使用するまで１９３Ｋで保管した。
動態アッセイ。分光学的ＮＡＤＨ−依存性酵素カップリングアッセイを用いてｄＣＫのリン酸化活性を測定した２，２３。すべての測定値を１００ｍＭトリス（ｐＨ７．５）、２００ｍ ＭＫＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ＥＤＴＡ、０．８ｍＭ ホスホエノールピルビン酸、０．４ｍＭ ＮＡＤＨ、５０ｎＭ ｄＣＫ及び１ｍＭ ＡＴＰからなる緩衝液中、３１０ Ｋで３回取った。ＩＣ５０ａｐｐ及びＫｉａｐｐは、ここで記述したとおりに測定し９、すべてのデータをＫａｌｅｉｄａＧｒａｐｈソフトウェアを用いてフィッティングさせた。
ＩＣ５０の測定。上述のようにＣＣＲＦ−ＣＥＭ急性リンパ性白血病細胞においてこの測定を行った８，９。
ＰＥＴ検査。ｄＣＫ活性のインビボ阻害率（％）を測定するＰＥＴ検査を上述のとおり実施した８， ９。
ヒトミクロソーム安定性アッセイ。これらのアッセイは、標準操作プロトコールに従って、Ｃｙｐｒｏｔｅｘ（Ｗａｔｅｒｔｏｗｎ，ＭＡ）によって行った。
マウスにおける化合物８及び化合物１０の血漿薬物動態。これらの測定は、前述のとおり行った８，９。要約すると、腹腔内注入を介して、Ｃ５７Ｂｌ／６雌マウスにｄＣＫ阻害物質を処置した。薬剤は、５０％ポリエチレングリコール（ＰＥＧ４００）／５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）に入れて投与した。薬物投与の５分後、さまざまな時点での全血（ほぼ７５μＬ）をヘマトクリット毛細管を用いて、眼窩後静脈叢から採取した。試料を、２０，０００ｘｇで５分間遠心分離にかけて、上清（５μＬ）を無菌管に入れた。未処理マウスの血漿の５μＬ上清にさまざまな量の９及び１０を添加して校正標準液を調製して、最終濃度０．００１〜１００ｐｍｏｌ／μＬとした。試料及び校正標準液を内部標準液（Ｉａ）を含む５００μＬ氷冷アセトニトリル／水（５０／５０、ｖ／ｖ）と混合した。試料をすべて蒸発させて、真空遠心分離で乾燥させた。残留物は、１００μＬアセトニトリル／水（５０／５０ｖ／ｖ）中で再構成した。試料（５μＬ）は水／アセトニトリル／ギ酸（９５／５／０．１）中で平衡化した逆相カラム（Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸ Ｒａｐｉｄ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｈｉｇｈ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８、２．１ｘ５０ｍｍ、１．８μｍ）に注入し、溶媒Ｂ（アセトニトリル／ギ酸１００／０．１ｖ／ｖ：分／％アセトニトリルの濃度を上昇させて（０／５、２／５、８／８０、９／８０、１０／５、１２／５）溶出した（２００μＬ／分）。カラム溶出物は、陽イオンＭＲＭモードで操作するトリプル四重極質量分析計（Ａｇｉｌｅｎｔ ６４６０ ＱＱＱ）に接続したエレクトロスプレーイオン源（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｊｅｔ Ｓｔｒｅａｍ）に誘導させた。化合物Ｉａ、化合物９及び化合物１０のイオン遷移は、それぞれ４７６．２〜３３４．５、５５０．２〜４０８．２、５１１．１〜３６９．１である。化合物９及び化合物１０のピーク面積を内部標準のピーク面積に正規化し、未処理マウスの血漿中に添加した校正標準液によって作成した標準曲線を用いて血漿濃度を算出した。曲線下面積（ＡＵＣ）近似値、半減期（Ｔ１／２）、最高血中濃度（Ｃｍａｘ）及び最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）は、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ ＥｘｃｅｌのＢｏｏｍｅｒ／Ｍｕｌｔｉ−Ｆｏｒｔｅ ＰＫ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓを用いて算出した２４，２５。
結晶化、Ｘ線データ収集及び精密化。阻害物質とＵＤＰと複合体化したヒトｄＣＫの結晶を、ハンギングドロップ‐蒸気拡散法を用いて、２８５Ｋで成長させた。ｄＣＫ阻害物質複合体はいずれも、以下のとおり調製した。阻害物質の２．５倍モルを有する複合体中で１０〜１７ｍｇ／ｍＬの１μＬ ｄＣＫタンパク質、２ｍＭ ＵＤＰ及び５ｍＭ ＭｇＣｌ２を１μＬリザーバ緩衝溶液と混合した。リザーバ溶液は、０．９〜１．５Ｍクエン酸三ナトリウム水和物及び２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）から成った。データ収集前に、結晶を凍結保護のために鉱油に浸漬させた。化合物２〜６と複合体化したｄＣＫの回折データを、Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ａｃｃｅｓｓ Ｔｅａｍ（ＬＳ−ＣＡＴ）ｂｅａｍｌｉｎｅ ２１−ＩＤ−Ｇで収集した。他のすべての複合体（化合物７〜１０）のデータは、Ｒ−Ａｘｉｓ ＩＶ＋＋ イメージプレート検出器を備えたインハウスＸ線発生装置（回転対陰極型Ｒｉｇａｋｕ ＲＵ−２００）により収集した。データは、ＸＤＳ及びＸＳＣＡＬＥで処理し、基準化した２６。構造は、検索モデルとして、ｄＣＫ構造（ＰＤＢ ｅｎｔｒｙ ４ＪＬＮ９）を用いて、ＭＯＬＲＥＰ２７による分子の置換によって同定した。精密化はＲＥＦＭＡＣ２８を用いて行って、モデル構築はＣｏｏｔ２９を用いて行った。ＰＲＯＤＲＧサーバーを用いて、すべての阻害物質座標及びライブラリー説明書を作成した３０。すべてのデータセットを完全に対にして、双晶オプションが有効であるＲＥＦＭＡＣを用いて繰り返し精密化を実施した。データ収集及び精製統計は、表１に示す。構造図は、ＰｙＭＯＬ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒａｐｈｉｃｓ Ｓｙｓｔｅｍ（ｖ．１．６．０；Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ）を使用して作製した。
モデル化。１位のＳ異性体及び２位のＲ異性体は、Ｍａｅｓｔｒｏ ｖ．９．１，Ｓｃｈｒｏｅｄｉｎｇｅｒ，ＬＬＣ２０１０を用いて、リンカー炭素のキラル体を反転させて産生した。また、このプログラムを使用して、キラルリンカー炭素及びチアゾール環（ＣＡＣ−ＣＢＣ−ＣＢＢ−ＮＡＯによって画定されたねじれ角）と接続する結合基周囲にねじれスキャンを作製した。
平衡シミュレーションは、３１ＯＰＬＳ−ＡＡ１７力場を用いて、ＭＣＰＲＯ ２．０ソフトウェアパッケージにより実施した。タンパク質をＴＩＰ４Ｐ水分子の３０Åキャップで溶媒和した１６。タンパク質主鎖及びタンパク質の合計結合長さを固定した。結合分子の中心部の１１Åの角度及びねじれは変動できるようにした。結合分子のすべての自由度をサンプリングした。溶媒のみ移動させる５ｘ１０６構造から平衡を開始し、その後タンパク質及び結合分子のサンプリングを行う１０ｘ１０６構造で行い、追加の溶媒は１０番目の構造ごとにサンプリングして行った。平衡化はＭｅｔｒｏｐｏｌｉｓ Ｍｏｎｔｅ Ｃａｒｌｏを用いて、ＮＰＴアンサンブル中で、１気圧、２５℃で行った。非結合構造では、ＯＰＬＳ−ＡＡを使用して最適化を行った。暗溶媒のシミュレーションは、ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ Ｂｏｒｎ／ｓｕｒｆａｃｅ ａｒｅａ（ＧＢ／ＳＡ）法用いて行った１９，２１。エネルギーは、３２ＰＤＤＧ／ＰＭ３法を使用してＢＯＳＳソフトウェアパッケージで評価した３１。
ＰＤＢ ＩＤコード
Figure 2016530266
化合物１、化合物２、化合物７、化合物８、化合物９Ｒ、化合物９Ｓ及び化合物１０Ｓのスペクトル
１−（５−（４−（（（４−アミノピリミジン−２−イル）チオ）メチル）−５−プリピルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）−２−メチルプロパン−２−オール（１＝ＤＩ−４８）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ，アセトン−ｄ６） δ ７．９９ （ｄ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４５ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．３１ （ｂｒ ｓ， ２Ｈ）， ６．２８ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．４８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．８８ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８８ （ｓ， ２Ｈ）， ２．９３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．７３ ‐ １．６４ （ｍ， ２Ｈ）， １．３２ （ｓ， ６Ｈ）， ０．９９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ １７０．４， １６３．８， １６３．５， １５５．３， １５１．５， １４９．３， １４８．４， １３４．７， １２６．９， １１９．４， １１２．２， １１１．３， １０１．０， ７７．７， ６９．２， ５５．５， ２８．３， ２８．１， ２６．０ （２）， ２５．２， １３．１； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２２Ｈ２８Ｎ４Ｏ３Ｓ２ Ｈに対する計算値：４６１．１６８１、実測値：４６１．１６６７．
１−（５−（４−（（（２，６−ジアミノピリミジン−４−イル）チオ）メチル）−５−プロピルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）−２−メチルプロパン−２−オール（２＝ＤＩ−４９）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４０ ‐ ７．３５ （ｍ， ２Ｈ）， ７．０４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．２１ （ｓ， ２Ｈ）， ５．９９ （ｓ， ２Ｈ）， ５．６７ （ｓ， １Ｈ）， ４．６０ （ｓ， １Ｈ）， ４．３９ （ｓ， ２Ｈ）， ３．８２ （ｓ， ３Ｈ）， ３．７６ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６０ ‐ １．５２ （ｍ， ２Ｈ）， １．２２ （ｓ， ６Ｈ）， ０．９２ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ １６３．８， １６３．４， １６２．４， １５０．８， １４８．７， １４８．１， １３４．８， １２６．０， １１９．２， １１２．４， １１０．３， ９０．２， ７７．０， ６８．８， ５５．９， ５４．９， ２７．７， ２６．７ （２）， ２６．１， ２４．９， １３．５； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２２Ｈ２９Ｎ５Ｏ３Ｓ２ Ｈに対する計算値：４７６．１７９０、実測値４７６．１７９８。
２−（（１−（２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−プロピルチアゾール−４−イル）エチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（７＝ＤＩ−６８）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．５５ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．２５ （ｓ， １Ｈ）， ５．２４ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．６， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７７ （ｄｄ， Ｊ ＝５．６， ２．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．５５ （ｓ， ４Ｈ）， ４．４７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．０， ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３４ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．０， ３．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．９０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９８ ‐ ２．７９ （ｍ， ２Ｈ）， １．８１ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）， １．７５ ‐ １．５８ （ｍ， ２Ｈ）， １．００ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １７０．８， １６３．８， １６３．２ （２）， １５３．０， １５０．９， １４８．０， １３３．０， １２７．４， １２０．３， １１１．７， １１１．６， ８１．９ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １７０．６ Ｈｚ）， ８０．６， ６８．４ （ｄ， ＪＣＦ ＝ ２０．６ Ｈｚ）， ５６．１， ３７．８， ２８．５， ２５．３， ２２．４， １３．９； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２１Ｈ２６ＦＮ５Ｏ２Ｓ２ Ｈに対する計算値：４６４．１５９０、実測値：４６４．１５６７。
２−（（１−（２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（８＝ＤＩ−７２）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ ７．５３ （ｓ， １Ｈ）， ７．４３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．４ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．３４ ‐ ５．３０ （ｍ， ２Ｈ）， ４．８２ ‐ ４．８０ （ｍ， １Ｈ）， ４．７２ ‐ ４．７０ （ｍ， １Ｈ）， ４．３５ ‐ ４．３４ （ｍ， １Ｈ）， ４．３０ ‐ ４．２８ （ｍ， １Ｈ）， ２．５２ （ｓ， ３Ｈ）， １．７５ （ｄ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤ３ＯＤ） δ １７０．４， １６５．８， １６５．２， １５４．８， １５２．７， １４９．７， １２８．６， １２８．１， １２１．５， １１３．３， １１２．８， ８３．８， ８２．５， ８０．６， ７０．１， ７０．０， ５６．５， ３８．４， ２２．２０， １１．５； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ＋Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２２ＦＮ５Ｏ２Ｓ２ Ｈに対する計算値：４３６．１２７７、実測値：４３６．１２７０。
（Ｒ）−２−（（１−（２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン。（９Ｒ ＝ Ｒ−ＤＩ−７５）。 ［α］２１ Ｄ ＝ ＋２６５．７ （ｃ ＝ ０．２２ アセトン） （ｅｅ ＝ ９９％）．
（Ｓ）−２−（（１−（２−（３−エトキシ−４−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）エチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（９Ｓ ＝ Ｓ−ＤＩ−７５）。［α］２０ Ｄ ＝ −２２８．６ （ｃ ＝ ０．１４アセトン） （ｅｅ ＝ ９９％）．
（Ｓ）−Ｎ−（２−（５−（４−（１−（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）エチル）−５−メチルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタン−スルホンアミド（１０Ｓ ＝ Ｓ−ＤＩ−８２）。［α］１９ Ｄ ＝ −５３６．４ （ｃ ＝ ０．１１ アセトン） （ｅｅ ＝ ９９％）．
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５． Ｃｈｏｉ， Ｏ．；Ｈｅａｔｈｃｏｔｅ， Ｄ． Ａ．；Ｈｏ， Ｋ． Ｋ．；Ｍｕｌｌｅｒ， Ｐ． Ｊ．；Ｇｈａｎｉ， Ｈ．；Ｌａｍ， Ｅ． Ｗ．；Ａｓｈｔｏｎ−Ｒｉｃｋａｒｄｔ， Ｐ． Ｇ．；Ｒｕｔｓｃｈｍａｎｎ， Ｓ． Ａ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎ ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｓａｌｖａｇｅ ｉｍｐａｉｒｓ ｍｕｒｉｎｅ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ， ａｎｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１２， １８８， ３９２０〜７。
６． Ｙａｎｇ， Ｃ．；Ｌｅｅ， Ｍ．；Ｈａｏ， Ｊ．；Ｃｕｉ， Ｘ．；Ｇｕｏ， Ｘ．；Ｓｍａｌ， Ｃ．；Ｂｏｎｔｅｍｐｓ， Ｆ．；Ｍａ， Ｓ．；Ｌｉｕ， Ｘ．；Ｅｎｇｌｅｒ， Ｄ．；Ｐａｒｋｅｒ， Ｗ． Ｂ．；Ｘｕ， Ｂ． Ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｈｅ Ｇ２／Ｍ ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｙｃｌｉｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｋｉｎａｓｅ １ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ． Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ ２０１２， ４０， ９６２１〜３２。
７． Ｎａｔｈａｎｓｏｎ， Ｄ． Ａ．；Ａｒｍｉｊｏ， Ａ． Ｌ．；Ｔｏｍ， Ｍ．；Ｌｉ， Ｚ．；Ｄｉｍｉｔｒｏｖａ， Ｅ．；Ａｕｓｔｉｎ， Ｗ． Ｒ．；Ｎｏｍｍｅ， Ｊ．；Ｃａｍｐｂｅｌｌ， Ｄ． Ｏ．；Ｔａ， Ｌ．；Ｌｅ， Ｔ． Ｍ．；Ｌｅｅ， Ｊ． Ｔ．；Ｄａｒｖｉｓｈ， Ｒ．；Ｇｏｒｄｉｎ， Ａ．；Ｗｅｉ， Ｌ．；Ｌｉａｏ， Ｈ． Ｉ．；Ｗｉｌｋｓ， Ｍ．；Ｍａｒｔｉｎ， Ｃ．；Ｓａｄｅｇｈｉ， Ｓ．；Ｍｕｒｐｈｙ， Ｊ． Ｍ．；Ｂｏｕｌｏｓ， Ｎ．；Ｐｈｅｌｐｓ， Ｍ． Ｅ．；Ｆａｕｌｌ， Ｋ． Ｆ．；Ｈｅｒｓｃｈｍａｎ， Ｈ． Ｒ．；Ｊｕｎｇ， Ｍ． Ｅ．；Ｃｚｅｒｎｉｎ， Ｊ．；Ｌａｖｉｅ， Ａ．；Ｒａｄｕ， Ｃ． Ｇ． Ｃｏ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ｃｏｎｖｅｒｇｅｎｔ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｐａｔｈｗａｙｓ ｆｏｒ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ． Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２０１４， ２１１， ４７３〜８６。
８． Ｍｕｒｐｈｙ， Ｊ． Ｍ．；Ａｒｍｉｊｏ， Ａ． Ｌ．；Ｎｏｍｍｅ， Ｊ．；Ｌｅｅ， Ｃ． Ｈ．；Ｓｍｉｔｈ， Ｑ． Ａ．；Ｌｉ， Ｚ．；Ｃａｍｐｂｅｌｌ， Ｄ． Ｏ．；Ｌｉａｏ， Ｈ． Ｉ．；Ｎａｔｈａｎｓｏｎ， Ｄ． Ａ．；Ａｕｓｔｉｎ， Ｗ． Ｒ．；Ｌｅｅ， Ｊ． Ｔ．；Ｄａｒｖｉｓｈ， Ｒ．；Ｗｅｉ， Ｌ．；Ｗａｎｇ， Ｊ．；Ｓｕ， Ｙ．；Ｄａｍｏｉｓｅａｕｘ， Ｒ．；Ｓａｄｅｇｈｉ， Ｓ．；Ｐｈｅｌｐｓ， Ｍ． Ｅ．；Ｈｅｒｓｃｈｍａｎ， Ｈ． Ｒ．；Ｃｚｅｒｎｉｎ， Ｊ．；Ａｌｅｘａｎｄｒｏｖａ， Ａ． Ｎ．；Ｊｕｎｇ， Ｍ． Ｅ．；Ｌａｖｉｅ， Ａ．；Ｒａｄｕ， Ｃ． Ｇ． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎｅｗ ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｕｓｉｎｇ ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ． Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２０１３， ５６， ６６９６〜７０８。
９． Ｎｏｍｍｅ， Ｊ．；Ｍｕｒｐｈｙ， Ｊ． Ｍ．；Ｓｕ， Ｙ．；Ｓａｎｓｏｎｅ， Ｎ． Ｄ．；Ａｒｍｉｊｏ， Ａ． Ｌ．；Ｏｌｓｏｎ， Ｓ． Ｔ．；Ｒａｄｕ， Ｃ．；Ｌａｖｉｅ， Ａ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｗ ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｒａｔｉｏｎａｌｉｚｅｓ ｔｈｅ ａｆｆｉｎｉｔｙ−ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｍｏｉｅｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ． Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２０１４， ７０， ６８〜７８。
１０． Ｇｏｄｓｅｙ，Ｍ． Ｈ．；Ｏｒｔ，Ｓ．；Ｓａｂｉｎｉ，Ｅ．；Ｋｏｎｒａｄ，Ｍ．；Ｌａｖｉｅ，Ａ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ＵＴＰ ｏｖｅｒ ＡＴＰ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ： ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｉｎ−ｃｈａｉｎ ｒｅｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ． Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００６，４５，４５２〜６１。
１１． Ｓａｂｉｎｉ，Ｅ．；Ｈａｚｒａ，Ｓ．；Ｏｒｔ，Ｓ．；Ｋｏｎｒａｄ，Ｍ．；Ｌａｖｉｅ，Ａ． Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｐｒｏｍｉｓｃｕｉｔｙ ｏｆ ｄＣＫ． Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２００８，３７８，６０７〜２１。
１２． Ｓｈｕ，Ｙ． Ｚ．；Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｂ． Ｍ．；Ｙａｎｇ，Ｔ． Ｊ． Ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ ｍｉｎｉｍｉｚｉｎｇ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ−ｒｅｌａｔｅｄ ｌｉａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ． ＡＡＰＳ Ｊ ２００８，１０，１７８〜９２。
１３． Ｍｉｋｈａｉｌｏｖｓｋｉｉ，Ｄ． Ｉ．；Ｍｉｋｈａｉｌｏｖｓｋａｙａ，Ｖ． Ｎ． Ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ａｃｅｔｙｌｅｎｉｃ Ｋｅｔｏ Ａｌｃｏｈｏｌｓ ｕｎｄｅｒ Ｍｅｙｅｒ−Ｓｃｈｕｓｔｅｒ Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ． Ｉｚｖ． Ｖｙｓｓｈ． Ｕｃｈｅｂｎ． Ｚａｖｅｄ．，Ｋｈｉｍ．Ｋｈｉｍ．Ｔ １９８７，３０，２９〜３１。
１４． Ｇｕｄｉｐａｔｉ，Ｖ．；Ｃｕｒｒａｎ，Ｄ． Ｐ．；Ｗｉｌｃｏｘ，Ｃ． Ｓ． Ｓｏｌｕｔｉｏｎ−ｐｈａｓｅ ｐａｒａｌｌｅｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｗｉｔｈ ｏｌｉｇｏｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ｓｏｒｔｉｎｇ ｔａｇｓ． Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｌｌ ｆｏｕｒ ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｅｎｏｌｉｄｅ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｏｆ ｍｕｒｉｓｏｌｉｎ ａｎｄ ｒｅｌａｔｅｄ ａｃｅｔｏｇｅｎｉｎｓ． Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ ２００６，７１，３５９９〜６０７。
１５． Ｃｏｒｅｙ，Ｅ． Ｊ．；Ｂａｋｓｈｉ，Ｒ． Ｋ．；Ｓｈｉｂａｔｅ，Ｓ． Ｈｉｇｈｌｙ ｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｂｏｒａｎｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｋｅｔｏｎｅｓ ｃａｔａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｃｈｉｒａｌ ｏｘａｚａｂｏｒｏｌｉｄｉｎｅｓ． Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ａｎｄ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ． Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９８７；ｐｐ ５５５１〜５５５３。
１６． Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｗ． Ｌ．；Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋｈａｒ，Ｊ．；Ｍａｄｕｒａ，Ｊ． Ｄ．；Ｉｍｐｅｙ，Ｒ． Ｗ．；Ｋｌｅｉｎ，Ｍ． Ｌ． Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ Ｓｉｍｐｌｅ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ Ｌｉｑｕｉｄ Ｗａｔｅｒ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈｙｓｉｃｓ １９８３，７９，９２６〜９３５。
１７． Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｗ． Ｌ．；Ｍａｘｗｅｌｌ，Ｄ． Ｓ．；ＴｉｒａｄｏＲｉｖｅｓ，Ｊ． Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ＯＰＬＳ ａｌｌ−ａｔｏｍ ｆｏｒｃｅ ｆｉｅｌｄ ｏｎ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ ｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ｌｉｑｕｉｄｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ １９９６，１１８，１１２２５〜１１２３６。
１８． Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｗ． Ｌ．；Ｔｉｒａｄｏ−Ｒｉｖｅｓ，Ｊ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｙｓｔｅｍｓ ｕｓｉｎｇ ＢＯＳＳ ａｎｄ ＭＣＰＲＯ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００５，２６，１６８９〜１７００。
１９． Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｗ． Ｌ．；Ｕｌｍｓｃｈｎｅｉｄｅｒ，Ｊ． Ｐ．；Ｔｉｒａｄｏ−Ｒｉｖｅｓ，Ｊ． Ｆｒｅｅ ｅｎｅｒｇｉｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ａ ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ Ｂｏｒｎ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ａｎ ＡＬＬ−ａｔｏｍ ｆｏｒｃｅ ｆｉｅｌｄ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｂ ２００４，１０８，１６２６４〜１６２７０。
２０． Ｒｅｐａｓｋｙ，Ｍ． Ｐ．；Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋｈａｒ，Ｊ．；Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ，Ｗ． Ｌ． ＰＤＤＧ／ＰＭ３ ａｎｄ ＰＤＤＧ／ＭＮＤＯ： ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｅｍｉｅｍｐｉｒｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ． Ｊ Ｃｏｍｐｕｔ Ｃｈｅｍ ２００２，２３，１６０１〜２２。
２１． Ｓｔｉｌｌ，Ｗ． Ｃ．；Ｔｅｍｐｃｚｙｋ，Ａ．；Ｈａｗｌｅｙ，Ｒ． Ｃ．；Ｈｅｎｄｒｉｃｋｓｏｎ，Ｔ． Ｓｅｍｉａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｏｌｖａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｃｈａｎｉｃｓ ａｎｄ Ｄｙｎａｍｉｃｓ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ １９９０，１１２，６１２７〜６１２９。
２２． Ｓａｂｉｎｉ，Ｅ．；Ｈａｚｒａ，Ｓ．；Ｋｏｎｒａｄ，Ｍ．；Ｌａｖｉｅ，Ａ． Ｎｏｎｅｎａｎｔｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｅｘｐｌａｉｎｅｄ ｂｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｗｉｔｈ Ｌ− ａｎｄ Ｄ−ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ． Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ ２００７，５０，３００４〜１４。
２３． Ａｇａｒｗａｌ，Ｋ． Ｃ．；Ｍｉｅｃｈ，Ｒ． Ｐ．；Ｐａｒｋｓ，Ｒ． Ｅ．，Ｊｒ． Ｇｕａｎｙｌａｔｅ ｋｉｎａｓｅｓ ｆｒｏｍ ｈｕｍａｎ ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ，ｈｏｇ ｂｒａｉｎ，ａｎｄ ｒａｔ ｌｉｖｅｒ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ １９７８，５１，４８３〜９０。
２４． Ｂｏｕｒｎｅ， Ｄ． Ｗ． ＭＵＬＴＩ−ＦＯＲＴＥ， ａ ｍｉｃｒｏｃｏｍｐｕｔｅｒ ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ ａｎｄ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ｄａｔａ． Ｃｏｍｐｕｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ １９８６， ２３， ２７７〜８１。
２５． Ｂｏｕｒｎｅ， Ｄ． Ｗ． ＢＯＯＭＥＲ， ａ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ ｄａｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ． Ｃｏｍｐｕｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ １９８９， ２９， １９１〜５。
２６． Ｋａｂｓｃｈ， Ｗ． Ｘｄｓ． Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２０１０， ６６， １２５〜３２。
２７． Ｖａｇｉｎ， Ａ．； Ｔｅｐｌｙａｋｏｖ， Ａ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ＭＯＬＲＥＰ． Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２０１０， ６６， ２２〜５。
２８． Ｍｕｒｓｈｕｄｏｖ， Ｇ． Ｎ．； Ｓｋｕｂａｋ， Ｐ．； Ｌｅｂｅｄｅｖ， Ａ． Ａ．； Ｐａｎｎｕ， Ｎ． Ｓ．； Ｓｔｅｉｎｅｒ， Ｒ． Ａ．； Ｎｉｃｈｏｌｌｓ， Ｒ． Ａ．； Ｗｉｎｎ， Ｍ． Ｄ．； Ｌｏｎｇ， Ｆ．； Ｖａｇｉｎ， Ａ． Ａ． ＲＥＦＭＡＣ５ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ ｏｆ ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ． Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２０１１， ６７， ３５５〜６７。
２９． Ｅｍｓｌｅｙ， Ｐ．； Ｌｏｈｋａｍｐ， Ｂ．； Ｓｃｏｔｔ， Ｗ． Ｇ．； Ｃｏｗｔａｎ， Ｋ． Ｆｅａｔｕｒｅｓ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｏｏｔ． Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２０１０， ６６， ４８６〜５０１。
３０． Ｓｃｈｕｔｔｅｌｋｏｐｆ， Ａ． Ｗ．； ｖａｎ Ａａｌｔｅｎ， Ｄ． Ｍ． ＰＲＯＤＲＧ： ａ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒａｐｈｙ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ−ｌｉｇａｎｄ ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ。Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ Ｄ Ｂｉｏｌ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ ２００４， ６０， １３５５〜６３。
３１． Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ， Ｗ． Ｌ．； Ｔｉｒａｄｏ−Ｒｉｖｅｓ， Ｊ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ａｎｄ ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｙｓｔｅｍｓ ｕｓｉｎｇ ＢＯＳＳ ａｎｄ ＭＣＰＲＯ． Ｊ Ｃｏｍｐｕｔ Ｃｈｅｍ ２００５， ２６， １６８９〜７００。
３２． Ｒｅｐａｓｋｙ， Ｍ． Ｐ．； Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋｈａｒ， Ｊ．； Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ， Ｗ． Ｌ． Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｅｍｉｅｍｐｉｒｉｃａｌ ｈｅａｔｓ ｏｆ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ｂｏｎｄ ａｎｄ ｇｒｏｕｐ ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｓ． Ｊ Ｃｏｍｐｕｔ Ｃｈｅｍ ２００２， ２３， ４９８〜５１０。
２．実施例２
癌の特徴である、細胞代謝を再プロミングする能力は、かなり以前に最初に明らかになっており（Ｗａｒｂｕｒｇ ｅｔ ａｌ．、１９２７）、かつ近年再認識されており、腫瘍の進行に必須である（Ｈａｎａｈａｎ ａｎｄ Ｗｅｉｎｂｅｒｇ， ２０１１）。癌を発症させる代謝の再プログラミング過程は、有望な治療標的であり（Ｖａｎｄｅｒ Ｈｅｉｄｅｎ，２０１１）、代替的代償生合成経路が存在することにより、こうした治療法を立てるにあたって大きな問題となる。例えば、脂質代謝では、エネルギーを要するｄｅ ｎｏｖｏ脂質生合成の代替として癌細胞は細胞外脂質を除去する（Ｋａｍｐｈｏｒｓｔ ｅｔ ａｌ．，２０１１）。アミノ酸代謝では、腫瘍の成長に必要なグリシン及びセリンはｄｅ ｎｏｖｏで産生することができ、また、細胞外環境から除去され得る（Ｊａｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｍａｄｄｏｃｋｓ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
ヌクレオチド代謝は重複性及び収束的生合成経路にも関与する。ＤＮＡ複製及び修復に必要なデオキシリボヌクレオチド三リン酸（ｄＮＴＰ）プールは、ｄｅ ｎｏｖｏ経路（ＤＮＰ）によって、またはヌクレオシドサルベージ経路（ＮＳＰ）（図１６Ａ）によって産生され得る（Ｒｅｉｃｈａｒｄ， １９８８）。ＤＮＰでは、グルコース及びアミノ酸を使用して、リボヌクレオチド二リン酸（ＮＤＰ）を産生し、リボヌクレオチドレダクターゼ（ＲＮＲ）によってデオキシリボヌクレオチド二リン酸塩（ｄＮＤＰ）に変換される。専用の輸送体を介して細胞中に移入される細胞外デオキシリボヌクレオシド（ｄＮ）から開始して、ＮＳＰを介して同一のｄＮＤＰを産生することもできる（Ｒｅｉｃｈａｒｄ，１９８８）。細胞質ゾルのＮＳＰ内の第１の酵素的ステップは、２つのキナーゼによって触媒され、チミジンキナーゼ１（ＴＫ１）はチミジン（ｄＴ）をリン酸化し、デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）はデオキシシチジン（ｄＣ）、デオキシアデノシン（ｄＡ）及びデデオキシグアノシン（ｄＧ）をリン酸化する（Ｒｅｉｃｈａｒｄ，１９８８）。正常細胞及び悪性細胞におけるｄＮＴＰの産生のためのこれらの２つのＮＳＰキナーゼの関連性は依然として定義されていないままである。ＮＳＰキナーゼのｄＮ基質はほどんどの細胞培養培地には含まれないため、ＤＮＡの複製には、ＮＳＰがなくてもよいこと想定した（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，１９９５）。しかし、近年のインビボ所見では、この想定に意義を唱えている。例えば、造血前駆体において複製ストレス（ＲＳ）、Ｓ期停止及びＤＮＡ損傷を招くｄＣＴＰプールの欠失により、ｄＣＫ−／−マウスにおいて障害の生じた造血が報告された（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｔｏｙ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。ｄＣＫ／ＴＫ１ダブルノックアウトマウスの分析により、ＮＳＰ−誘導ｄＣＴＰ合成が、ｄｅ ｎｏｖｏによるｄＣＴＰ産生の阻害を補償のに必要とされることが明らかになった（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．， ２０１２）（図１６Ａ）。ＤＮＰ阻害のメカニズムは、シチジン二リン酸塩（ＣＤＰ）からデオキシシチジン二リン酸塩（ｄＣＤＰ）への内因性ｄＴからＴＫ１を介したｄＴＴＰ産生によるＲＮＲ媒介還元のアロステリック制御が関与する（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．， ２０１２）（図１６Ａ）。
ＮＳＰによるｄＮＴＰの産生は、癌において治療的関連があり得る。例えば、ｄＣＴＰ合成をＤＮＰからＮＳＰに切換える癌細胞の能力によって、単一のｄＣＴＰ除去剤として与えられるｄＴが、治験において有効性が制限される理由を説明することができる（Ｃｈｉｕｔｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９８０；Ｋｕｆｅ ｅｔ ａｌ．， １９８０；Ｋｕｆｅ ｅｔ ａｌ．，１９８１）。この仮説により、それが正しいならば、特定の理論によって束縛されないが、ｄＴ（ＤＮＰ媒介ｄＣＴＰ産生を阻害するための）とｄＣＫ阻害物質（ＮＳＰによる共標的ｄＣＴＰ産生に対して）との組み合わせは、腫瘍細胞の死において、いずれか一方の単独処置に比べてより有効となることが示唆される。ここでは、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）の文脈においてこの可能性を調べる。ｄＣＴＰ生合成のｄｅ ｎｏｖｏ経路及びサルベージ経路をいずれも共標的とすることがマウスにおいて良好に忍容され、Ｔ−ＡＬＬモデル及びＢ−ＡＬＬモデルにおいて有効であることを示す。癌細胞中におけるｄＣＴＰ生合成の薬理学的インビボ標的を非侵襲的に監視するためのポジトロン放射形断層撮影（ＰＥＴ）系アッセイについても記述する。
ｄＣＫを介するデオキシシチジンサルベージによりＴ−ＡＬＬ細胞におけるｄＴ誘導致死複製ストレスが阻害される。ｄＴによる処置により、細胞質ゾルｄＴＴＰ濃度が増大し、その結果 ＤＮＰを介してｄＣＴＰの産生がアロステリック阻害される（図１６Ａ）（Ｒｅｉｃｈａｒｄ，１９８８）。したがって、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ（ＣＥＭ）ヒトＴ−ＡＬＬ細胞において、ｄＴは用量依存様式でｄＴＴＰを増加させて、ｄＣＴＰを減少させた（図１６Ｂ）。初期Ｓ期停止（図１６Ｃ）は、ｄＴの５０μＭほどの低濃度によって誘導され、これにより、ｄＴＴＰがほぼ２０倍増加し、ｄＣＴＰがほぼ５倍減少した（図１６Ｂ）。ＣＥＭ培養液に２．５μＭ ｄＣを補充することにより、ｄＴ誘導Ｓ期の停止を完全に阻害した（図１６Ｃ）。ｄＣを追加しても、ＲＮＲ阻害物質ヒドロキシウレア、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）またはシスプラチン（図１６Ｄ）によって処置されたＣＥＭ細胞においてＳ期停止が阻止されることはなく、これは、ｄＴ誘導Ｓ期の停止を妨害する場合に、ｄＣサルベージが特定の役割を担うことがわかる。
ｄＣを追加することによるｄＴ誘導Ｓ期の停止の阻害におけるｄＣＫの役割を調べるために、ｄＣＫ標的ｓｈＲＮＡベクターを用いて、ＣＥＭ ｄＣＫｌｏｗ細胞（図１６Ｅ）を産生した。ノックダウンｄＣＫにより、３Ｈ−デオキシシチジンの取り込みが約９５％（図１６Ｆ）減少し、細胞質ゾルｄＣＴＰレベルが約３０％（図１６Ｇ）低下したが、正常細胞サイクルの進行を摂動させなかった（図１６Ｈ）。細胞培養培地に２．５μＭ ｄＣを補充することによって、ｄＴ処置ｄＣＫｗｔ細胞中のｄＣＴＰプールをそのベースライン値の約５５％まで回復させたが、ｄＣＫｌｏｗ細胞においてｄＴ誘導ｄＣＴＰプールの欠失に及ぼす影響は認められなかった（図１６Ｇ）。その結果として、ｄＣを追加することにより、ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ細胞中でのみｄＴ誘導Ｓ期の停止を阻害した（図１６Ｃ）が、ＣＥＭ ｄＣＫｌｏｗ細胞中では阻害されなかった（図１６Ｈ）。したがって、ｄＴ及びｄＣが両方とも存在するなかで、ｄＣＫｌｏｗのみ（ｄＣＫｗｔＣＥＭ細胞ではなく）が、（ｉ）Ｓｅｒ３４５（ｐＣｈｋ１）でリン酸化されたＲＳ応答マーカーＣｈｋ１の活性化（図１６Ｉ）、（ｉｉ）Ｔｈｒ６８（ｐＣｈｋ２）でリン酸化されたＣｈｋ２の活性化（図１６Ｉ）、フローサイトメトリーによるｐＨ２Ａ．Ｘ染色（図１６Ｊ）並びにコメット法（図１６Ｋ）によって測定されたとおりＤＮＡ阻害の誘導及び（ｉｉｉ）アポトーシス（図１６Ｌ）を示した。このため、ＣＥＭ細胞におけるｄＣＫ発現の下方制御により、ＤＮＰを介してｄＣＴＰ産生のｄＴ媒介阻害を代償する能力が消失し、ｄＣＴＰの消失、ＤＮＡ複製の機能停止、ＲＳ、ＤＮＡ損傷及びアポトーシスとなった。
Ｔ−ＡＬＬ細胞において、ｄＴは代謝スイッチをＮＳＰ ｄＣＴＰ産生及びｄＣサルベージの上方制御に作動させる。ＮＳＰがｄＴ媒介ＤＮＰ阻害を代償する生化学的メカニズムを調べるために、各ｄＣＴＰ生合成経路の、遊離細胞質ゾルｄＣＴＰ及びＤＮＡに導入されたｄＣＴＰの双方にに対する寄与を定量化した。ＣＥＭ細胞は、１２時間、ＤＮＰの基質である［Ｕ−１３Ｃ］−グルコース、ＮＳＰの基質である［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣを用いてインキュベートした（図１７Ａ）。重同位体標識ｄＣＴＰ種を、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭによって検出した。３〜８の質量を付加することによって、ＤＮＰを介して、［Ｕ−１３Ｃ］−グルコースから産生されたｄＣＴＰが同定され、１１〜１２の質量を付加することにより、ＮＳＰを介して［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣから産生されたｄＣＴＰが同定された（図１７Ａ）。
未処置ＣＥＭ細胞において、標識時間１２時間にわたってＮＳＰを介してｄＣから産生される遊離ｄＣＴＰプールは、ＤＮＰを介するグルコースの遊離ｄＣＴＰプールよりも５倍多かった（図１７Ｂ）。しかし、ＮＳＰによって産生されたものよりも、ＤＮＡに導入された約２．５倍のｄＣＴＰがＤＮＰによって産生された（図１７Ｂ）。ｄＴによる処置により、遊離細胞質ゾルプール及びＤＮＡ ｄＣＴＰプールのいずれにおいてもＤＮＰを介してグルコースからｄＣＴＰの産生が減少した（図１７Ｂ）。さらに、ＤＮＡ合成にあたってｄＴによりＮＳＰ産生ｄＣＴＰの利用がベースライン値の３倍以上、増加した（図１７Ｂ）。これらの所見により、基本条件下で、ＤＮＡ合成は主にＤＮＰ産生ｄＣＴＰに依存するというこれまでの観察結果が裏付けられる（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，１９９５）。したがって、未処置ＣＥＭ細胞における、ＮＳＰ誘導遊離ｄＣＴＰプール（図１７Ｂ）の大きなサイズは、おそらく基本条件下でＤＮＡ複製のためにそれが十分に利用されていないことを反映している。特に、ＤＮＡ合成のためにこのプールの利用が有意に増大したが、ｄＴ処置細胞におけるＮＳＰ誘導遊離ｄＣＴＰプールは減少することはなかった（図１７Ｂ）。この所見から、ｄＴがＮＳＰを介してｄＣＴＰの産生を上方制御し、ｄＣＫ活性（図１７Ｄ）及びｄＴ処置ＣＥＭ細胞中のｄＣの取り込みの著しい増加（図１７Ｃ）と一致することが示唆される。
インビボでは、内因性ｄＣのサルベージにより、Ｔ−ＡＬＬ細胞がｄＴ処置によって誘導されたＲＳを受けないようになる。細胞培養試験の所見（図１６、図１７）からインビボ、皮下（ｓ．ｃ．）を再利用できるか否かを判断するために、ＮＯＤ ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウスにおいてＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ異種移植片を確立した。ｄＴの単回投与（２ｇ／ｋｇ、腹腔内）による処置の２時間後の約１．５ｍＭでの血漿ｄＴピークを示し、次いで、８時間で急速にベースライン値まで低下した（約１０μＭ）（図１８Ａ）。腫瘍内ｄＴＴＰは、ｄＴ投与の少なくとも４時間後ｄＣＫｗｔ腫瘍及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍のいずれにおいても低下した（図１８Ａ）。ｄＣＫｗｔ腫瘍では、２時間及び４時間の時点でｄＴによりｐＣｈｋ１のわずかな一過性上方制御が誘導された（図１８Ｂ）。明らかに対照的に、ｄＣＫｌｏｗ腫瘍では、ｄＴ処置によりさらに顕著にかつ持続してｐＣｈｋ１の上方制御が誘導された（図１８Ｂ）。これらの所見により、ＣＥＭ細胞がインビボにおいてｄＴ処置により誘導されたＲＳに抵抗を示すには、ｄＣＫを必要とすることが示唆される。
ｄＴ処置マウスの腫瘍におけるｄＣＴＰの産生及び利用でのｄＣＫの役割を理解するために、遊離ｄＣＴＰプール及びＮＳＰ産生ｄＣＴＰのＤＮＡへの導入を測定した。０〜４時間の時間枠で、ＣＥＭｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ異種移植片のいずれにおいてもｄＣＴＰは数倍減少し、次いで、血漿ｄＴがベースライン値まで低下したときに回復を開始した（図１８Ｃ）。腫瘍内ｄＣＴＰ回復は、野生型の対照物においてよりもｄＣＫｌｏｗ異種移植片においてはかなりゆっくりと発生した（図１８Ｃ）。ＤＮＡ合成のために、ｄＴ処置のＮＳＰ産生ｄＣＴＰの利用への影響を定量化するために、腫瘍担持マウスを対象にｄＴまたはビヒクルを３．５時間投与し、その後、［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−標識ｄＣでパルスした。３０分後、マウスを屠殺して、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭにより標識ｄＣから産生されたｄＣＴＰの腫瘍ＤＮＡへの導入を測定した（図１８Ｄ）。ヒビクル処置マウスの腫瘍では、ｄＣＫｗｔ対照物のＤＮＡよりも［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−標識ｄＣから産生された２倍少ないｄＣＴＰが、ｄＣＫｌｏｗ腫瘍のＤＮＡに導入された（図１８Ｅ）。ｄＴ処置マウスでは、ＤＮＡに導入された標識ｄＣＴＰは、ｄＣＫｗｔ腫瘍において３倍増加したが、ｄＣＫｌｏｗ異種移植片では変化のないままであった（図１８Ｅ）。図１８Ｂに示すｐＣｈｋ１上方制御パターンと共に、これらの所見により、インビボでのｄＴ処置時に、腫瘍性ＤＮＡ複製を維持し、これによってＲＳ誘導を阻害するためにｄＣＫ活性を必要とすることがわかる。さらに、インビトロの所見（図１７Ｂ）と同様に、インビボｄＴ処置により、ＮＳＰ産生ｄＣＴＰの腫瘍性ＤＮＡへの導入が増加する。
ｄＴ処置マウスの腫瘍においてＤＮＡ合成にＮＳＰ産生ｄＣＴＰの利用の増加していることが、インビトロで示されるように（図１７Ｃ及びＤ）ＮＳＰの上方制御に関連しているかを決定するために、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ（１−Ｌ−（２’デオキシ−２’、−１８フルオロアラビノフラノシル）シトシン）、フッ素化ｄＣ類縁体を利用した（Ｒａｄｕ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｓｈｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣはヌクレオシド輸送体を介して細胞膜を通過し、リン酸化依存メカニズムによってｄＣＫ発現細胞内に特異的に累積し（図１８Ｆ）、生存動物におけるｄＣＫ−依存リン酸化１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの保持を非侵襲的にポジトロン放射形断層撮影（ＰＥＴ）により、撮影し、定量することができる。予測したとおり、ｄＣＫｌｏｗ腫瘍では、ｄＣＫｗｔ腫瘍よりも約４０％少ない１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣが蓄積された（図１８Ｆ）。ｄＴ処置の４時間後、ｄＣＫｗｔ腫瘍では、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ累積が約２０％増加した（図１８Ｇ）。ｄＣＫｌｏｗ腫瘍内では１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの累積も増加したが（図１８Ｇ）、おそらくこれは、残存しているｄＣＫ活性のためである。しかし、ｄＣＫｌｏｗ腫瘍内のＮＳＰ上方制御は、ｄＴ処置マウスのｄＣＫｌｏｗ腫瘍内のＣｈｋ１上方制御（図１８Ｂ）が顕著であり、かつ持続していることによって及びｄＣＫｌｏｗ腫瘍内での安定同位体標識ｄＣＴＰのＤＮＡへの導入が少ない（図１８Ｅ）ことによって示されるように、ＤＮＡ合成の維持及びＲＳ誘導の阻止には十分ではなかった。
ＮＳＰによりインビボにおいてｄＴ処置に対するＴ−ＡＬＬ細胞の耐性が媒介される。ＮＳＰは、培養液中のＴ−ＡＬＬ細胞内（図１６Ｉ）及びインビボ（図１８Ｃ）でのｄＴ−誘導ＲＳを阻止するために必要とするため、ｄＣＫの発現の下方制御によりｄＴ処置と相乗作用になり、マウスにおいて腫瘍の退縮を誘導するか否かを測定した。ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びｄＣＫｌｏｗ皮下腫瘍担持マウスを、ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）により６日間２回処置した。持続してｄＴを投与することにより、（ｉ）末梢血において全身腫瘍組織量の指標の役割をした分泌Ｇａｕｓｓｉａルシフェラーゼの連続測定（Ｔａｎｎｏｕｓ，２００９）（図１９Ａ）及び（ｉｉ）腫瘍径（図１９Ｂ）及び腫瘍重量（図１９Ｃ）のエンドポイント測定で示すとおり、ｄＣＫｗｔ異種移植片に影響を与えることなくＣＥＭ ｄＣＫｌｏｗ腫瘍の成長を阻止した。ｄＴ処置とｓｈＲＮＡ媒介ｄＣＫ下方制御との相乗作用により、ｄＴ投与と組み合わせて薬理学的にｄＣＫを阻害することにより、ＡＬＬにおいて新しい治療戦略をもたらされ得ることがわかる。
ＤＩ−３９（小分子であり、高親和性ｄＣＫ阻害分子）の発現により、キナーゼの基質結合部位を占有する。薬理学的ｄＣＫ阻害を介して治療上ＮＳＰを活用できるかを調べるために、約９０，０００の小分子から構成される選択された化学ライブラリーのスクリーニングを行った。ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）により、ＣＥＭ細胞において、ＩＣ５０１．４μＭのｄＣＫ阻害物質であるＤＩ−０１２０（図２０Ａ）を同定した。その後の構造活性相関（ＳＡＲ）研究により、細胞浸透性（図２０Ｃ）リード候補物であるＩＣ５０ ５ｎＭのＤＩ−３９（図２０Ｂ）を産生し、ＤＩ−０１２０（図２０Ｄ及び（Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３）よりもほぼ３００倍低かった）。ＤＩ−３９がｄＣＫを阻害する方法を調べるために、２．１Å共結晶構造を得て、ＤＩ−３９がキナーゼのヌクレオシド結合部位を占有しているが、ヌクレオチドホスホリル供与体−結合部位は占有していないことがわかった（図２０Ｅ、表４）。この結合様式から、ＤＩ−３９は、非常に特異的なｄＣＫ阻害物質であることがわかる。
ＤＩ−３９を更に評価するために、ＣＥＭ細胞のｄＣＴＰプールに及ぼす影響を測定した。ＤＩ−３９（１μＭ）またはｄＴ（５０μＭ）のいずれかで処置することによって、ｄＣＴＰが約３０％低下させたが、ＤＩ−３９／ｄＴの組み合わせは相乗的であり、ＣＥＭ細胞内のｄＣＴＰが約７０％減少させた（図２０Ｆ）。ｄＴもしくはＤＩ−３９のいずれかのみではなくｄＣが存在する中で、ＣＥＭ細胞中でＲＳまたはアポトーシスが誘導され、ＤＩ−３９／ｄＴの併用により、ＲＳ（ｐＣｈｋ１の上方制御によって測定されたとおり（図２０Ｇ））及びアポトーシス（アネキシンＶ染色（図２０Ｈ）がいずれも発生した。特に、ｄＣＫ−ヌル白血病細胞株Ｌ１２１０−１０Ｋ（Ｊｏｒｄｈｅｉｍ ｅｔ ａｌ．，２００４）をｄＣＫ活性を阻害するため、または、ｄＴと組み合わせてＣＥＭ細胞を死滅させるために必要な濃度を大きく上回る濃度までＤＩ−３９を増加して投与した場合、アポトーシスが誘導されることはなく、ｄＣＫのＤＩ−３９選択性の更なる裏付けとなる（図２０Ｉ）。また、ＤＩ−３９／ｄＴの併用により、４つの他のＡＬＬ細胞株（Ｊｕｒｋａｔ，ＭＯＬＴ−４、ＲＳ４；１１、ＮＡＬＭ−６）並びに赤白血病細胞株（ＴＦ−１）においてＲＳ（図２０Ｊ）及びアポトーシス（図２０Ｋ）が誘導された。要するに、ＤＩ−３９が細胞内に入り、ＮＳＰ−依存ｄＣＴＰ産生を阻害し、ｄＴと相乗作用を有し、複数の白血病細胞株において致死的ＲＳを誘導する。
ＤＩ−３９は、ｄＴと組み合わせたとき、インビボにおいて腫瘍ｄＣＫ活性を阻害し、ＲＳを促進する。インビボにおいてＤＩ−３９を評価するために、血漿中及び腫瘍組織中の薬物動態（ＰＫ）を求めた。ＤＩ−３９の血漿中半減期は約５０分（図２１Ａ）であり、単回投与８時間後、腫瘍組織中に検出可能量の薬物（約１５ｎＭ）が存在した（図２１Ｂ）。薬物投与２時間、４時間、８時間及び１２時間後の血漿及び腫瘍中のＤＩ−３９量をＤＩ−３９の薬力学的（ＰＤ）影響（すなわち、腫瘍性ｄＣＫ活性の阻害）と相関させるために、ＣＥＭ腫瘍担持マウスを対照にこれらの時点で１８Ｆ−ＦＡＣ ＰＥＴ／ＣＴスキャンを実施した（図２１Ｃ）。ＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内投与）により、８時間までに腫瘍中の１８Ｆ−ＦＡＣの累積が約３０％減少した（図２１Ｄ）。この減少レベルをｄＣＫノックダウンモデルで得られたレベルと比較した（図１８Ｅ）。ＰＥＴによって決定されるＤＩ−３９後の腫瘍ｄＣＫ活性の回復タイミングは、持続性標的阻害が、ＤＩ−３９を１２時間ごとに投与することによって得られることがわかった。特に、この情報は、従来の血漿ＰＫ測定からは得ることができなかった（図２１Ａ）。
ＤＩ−３９が腫瘍性ｄＣＴＰ代謝に及ぼす影響を更に調べるために、ｄＴ及び／またはＤＩ−３９の投与５．５時間後に、ＣＥＭ腫瘍担持マウスを対照に３０分間［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣでパルスした。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭを使用して、ＤＮＡへの標識導入を定量した。我々のｄＣＫノックダウン結果（図１８Ｆ）と同様に、ＤＩ−３９は、ＣＥＭ細胞のＤＮＡへの［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−ｄＣの導入を大幅に減少させた（図２１Ｅ）。さらに、ＤＩ−３９／ｄＴの併用により、ｐＣｈｋ１の上方制御によって示されるように、ＣＥＭ腫瘍中のＲＳが促進された（図２１Ｆ）。また、これらの所見により、（ｉ）インビボで１２時間までは、ＤＩ−３９が効率よく腫瘍性ｄＣＫ活性を阻害すること、（ｉｉ）ＤＩ−３９／ｄＴの併用により、インビボでＣＥＭ細胞においてＲＳが減少すること及び（ｉｉｉ）ＰＥＴイメージングにより、ＤＩ−３９の有用なＰＤコンパニオンバイオマーカーが提供されることがわかる。
ＤＩ−３９及びｄＴを用いてＤＮＰ及びＮＳＰ ｄＣＴＰの生合成を薬理学的に共標的することで、マウスにおけるＴ−ＡＬＬ異種移植片の成長を阻止する。まず、構築されたマウス担持皮下ＣＥＭ異種移植片においてＤＩ−３９／ｄＴ併用の治療的有効性の試験を行った。エンドポイント腫瘍径（図２２Ａ）及び腫瘍重量（図２２Ｂ）によって示すとおり、これらのマウスにおいて併用療法のみにより劇的に全身腫瘍組織量が減少した。加えて、採取された細胞のＴＵＮＥＬ染色により、ＤＩ−３９／ｄＴの併用のみによりＤＮＡ破壊が大幅に誘導されたことがわかった（図２２Ｃ）。図１９に示す所見と対照的に、ｄＴ処置のみＣＥＭ腫瘍のサイズ及び重量においてわずかではあるが有意な影響が認められた（図２２Ａ及びＢ）。この差異は、おそらくＤＩ−３９とｄＴとの併用投与に使用されるカプチソール／ＤＭＳＯ配合物によってｄＴ ＰＫがわずかに増加し、ＤＩ−３９の食塩水への溶解性が制限されていることによって説明される。ＤＩ−３９／ｄＴ併用の治療的有効性は、ＣＥＭ細胞が静脈内投与された全身Ｔ−ＡＬＬモデルにおいて更に確認された。全身Ｔ−ＡＬＬモデルにおいては、ビヒクル及びＤＩ−３９処置群に対してｄＴの単独投与により、骨髄（ＢＭ）において白血病細胞の割合の約７倍の低下が誘導された（図２２Ｄ）。この所見から、ＢＭ−抵抗性白血病細胞は、細胞培養液によるよりもインビボにおいて、よりｄＴの影響を受けやすいことが示唆される。しかし、ｄＴ単独の場合と比較して、ＤＩ−３９／ｄＴの併用により、全身腫瘍組織量が更に１００倍減少しており、これによりこれらの２つの治療薬間の強力な相乗作用が明らかである（図２２Ｄ）。このため、ＤＮＰ及びＮＳＰ ｄＣＴＰ生合成経路の双方の薬理学的共標的は、インビボでのＣＥＭ白血病細胞に対して非常に効果が高い。
併用療法は、原発Ｂ−ＡＬＬ全身モデルに対して有効であり、かつ、正常な造血前駆体プールに及ぼす影響は最小である。次に、マウスＢＣＲ−ＡＢＬ（ｐ１８５）、Ａｒｆ−／−前−Ｂ ＡＬＬ細胞（ｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−）の短期培養に対するＤＩ−３９／ｄＴ併用療法の有効性を評価した（Ｂｏｕｌｏｓ ｅｔ ａｌ．，２０１１；Ｗｉｌｌｉａｍｓ ｅｔ ａｌ．，２００６）。原発Ｂ−ＡＬＬ細胞は、培養液においてＤＩ−３９／ｄＴの併用に対して感受性があったが、アポトーシスを最適に誘導するには、ＣＥＭ Ｔ−ＡＬＬ細胞株の４倍以上のｄＴを必要とした（図２３Ａ）。この所見は、ｄＴ処置に対する感受性がＴ−ＡＬＬよりもＢ−ＡＬＬが低いこれまでの臨床観察結果と一致する（Ｋｕｆｅ ｅｔ ａｌ．，１９８０）。インビボＢ−ＡＬＬモデルにおけるｄＴ及び／またはＤＩ−３９の有効性を評価するために、ＮＳＧマウスにおいてホタルルシフェラーゼマークｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−細胞を静脈内接種した。接種後１１日目に、ビヒクルまたはＤＩ−３９（５０ｍｇ／ｋｇ）を処置したホタルルシフェラーゼマークｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−ＡＬＬ−担持ＮＳＧマウスの生物発光イメージング（ＢＬＩ）により、巣状ＢＭ及び脾臓において局在化（図２３Ｂ）を有する実質的な全身性疾患が明らかになった。ｄＴ（２ｇ／ｋｇ）で処置することにより、ＢＭ及び脾臓においてＢＬＩシグナルが有意に減少したが、ＤＩ−３９を添加することにより、ｄＴ単独の場合よりもより顕著な影響を有した（図２３Ｂ及びＣ）。ＢＬＩの所見を確認するために、ＣＤ１９（ＮＳＧマウスにおいて、Ｂ細胞マーカーは白血病細胞のみに存在する）を用いてフローサイトメトリーによりＢＭにおける白血病組織量も分析した（図２３Ｄ）。ビヒクル処置マウスに対して、ｄＴによる処置により、ｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−ＡＬＬ細胞の割合の有意な減少を誘導した（図２３Ｄ）。ＤＩ−３９を添加することにより、ｄＴ単独に比較して、白血病細胞が更に２倍減少した（図２３Ｄ）。原発ｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−細胞を用いるこれらの所見により、ＤＩ−３９／ｄＴの併用が攻撃的インビボＢ−ＡＬＬモデルに対して有効であることがわかる。
ＢＭ常駐白血病細胞の分析と並行して、併用療法の造血前駆体プールへの影響も評価した。系列−Ｓｃａ−１＋ｃ−Ｋｉｔ＋（ＬＳＫ）ＨＳＣ集団並びに短期（ＳＴ）、長期（ＬＴ）及び多能性前駆細胞（ＭＰＰ）造血前駆体細胞を分析した。ｄＴ処置時のＬＳＫの割合のわずかな減少を除き（図２３Ｅ）、対照群と処置群において有意な変化はなかった（図２３Ｅ及びＦ、図２５Ａ及びＢ）。したがって、併用療法は優先的にＢＭ常駐白血病細胞を標的とし、正常な造血前駆体を保持する。さらに、ＮＳＧマウスを対象に７日間、２回／日投与した場合、ＤＩ−３９単独でまたはｄＴと組み合わせることにより、体重に影響を及ぼすことはなく（図２３Ｇ）、また、ＲＢＣ、ヘモグロビン、血小板または好中球への検出可能な影響も認められなかった（図２３Ｈ）。
造血組織中でｄＣＫが部分的に阻害されることにより、ｄＴ及びＤＩ−３９の血液学的毒性が阻止される。併用療法の潜在的血液学的毒性を更に調べるために、ｄＣＫ−／−マウスを用いた（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。この方法により、ｄＣＫ−／−マウスにおいてｄＣＫ機能の完全な欠失によって誘導される造血系に及ぼす影響とＤＩ−３９及びｄＴによって、ｄＣＫ野生型マウス（ｄＣＫ＋／＋）において薬理学的に誘導される影響とを直接比較することができた。赤血球系系譜では、それぞれｐＨ２Ａ．Ｘ染色（図２４Ａ）及び小核アッセイ（図２４Ｂ）で測定されるとおり、ｄＣＫ−／−マウスでのｄＣＫ遺伝子の消失のみと比較して、ｄＣＫ＋／＋マウスにおいてＤＩ−３９／ｄＴの併用により、非常にわずかなＤＮＡ損傷及び遺伝毒性が誘導された。これらの所見により、ＤＩ−３９（単独またはｄＴとの併用）によるｄＣＫ活性の薬理学的阻害は、遺伝性ｄＣＫ遺伝の不活性化によりｄＣＫ酵素活性が完全に消失するよりも、より良好な抵抗性を示すことが示唆される。
Ｔ−ＡＬＬ細胞及びＢ−ＡＬＬ細胞において、ｄＣＴＰプールの阻止が不十分である機能的ヌクレオシドサルベージ経路、ｄｅ ｎｏｖｏ ｄＣＴＰ合成の薬理学的阻害後のＲＳ及びアポトーシスの要件を本明細書に記載する。ｄＣＫの新規小分子阻害物質であるＤＩ−３９を導入し、ｄＣＫは、ｄＴ−媒介ＤＮＰ阻害によってＮＳＰ依存ｄＣＴＰ生合成に切り換わる代償的代謝スイッチに必要なキナーゼである。ＤＩ−３９は阻害物質−ｄＣＫ複合体の解像度結晶構造を得ることによって、ｄＣＫを阻害する方法を解明する。Ｔ−ＡＬＬ及びＢ−ＡＬＬのインビボモデルを用いて、正常な造血前駆体に対する検出可能な毒性のない、共標的ＤＮＰ及びＮＳＰ ｄＣＴＰ生合成経路の治療的有効性を明らかにする。また、ｄＣＴＰ生合成を標的にしている薬理学的介入の非侵襲性インビボイメージングが可能であるｄＣＫ酵素活性のコンパニオン薬力学的ＰＥＴアッセイについて記述する。
正常な造血前駆体と比較した白血病細胞のＤＩ−３９／ｄＴの併用療法の選択性。図２４Ｃ及びＤに、特定の理論により束縛されることなく、正常な造血前駆体に対する白血病細胞の併用療法のメカニズム及び観察された選択性を説明するための実際の研究モデルを概略的に示す。このモデルにしたがうと、ＤＮＰ（ｄＴによる）及びＮＳＰ（ＤＩ−３９による）の薬理学的共標的は、Ｔ−ＡＬＬ細胞及びＢ−ＡＬＬ細胞に対して致死的なＲＳの誘導に非常に効率的であり、正常な造血細胞に対して最小の影響を有する。ｄＣＫ活性の１８Ｆ−ＦＡＣＰＥＴ撮像によって示されるように（図２１Ｄ、図２４Ｄ）、ＤＩ−３９は、ｄＣＫ−／−マウスにおけるｄＣＫ活性の完全欠失と比較して正常なＢＭ細胞においてｄＣＫの部分的阻害が誘導された（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｔｏｙ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。ＢＭ細胞においてＤＩ−３９処理後残存しているｄＣＫ活性は、ｄＣＫ−／−マウスにおいて造血前駆体のｄＣＴＰプールで観察された、より多くの実質的な減少を阻止するのに十分であってもよい。治療標的の部分的阻害により毒性が低いか、または毒性のないこのモデルは、低次形態ＡＴＲ抑制は、発癌性ストレスに晒された腫瘍組織に対しては致死的であるが、正常組織に対しては最低限の毒性の有するものとする近年の研究に似ている（Ｂａｒｔｅｋ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｓｃｈｏｐｐｙ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。さらに、ｄＣＴＰの供給不足に対するＡＬＬ細胞の感受性が向上することにより、これらの白血病細胞の遺伝的無能性が明らかになり、効率の良いＲＳ応答を備えさせることができる。正常な造血前駆体細胞と比較したときに、ｄＮＴＰ不全によって誘導されるＲＳに対するＡＬＬ細胞の感受性が増大する細胞周期チェックポイントの欠陥を正確に識別するには、更なる研究が必要であり、いくつかの試験対象のＡＬＬ細胞株における不活性化ＴＰ５３突然変異体の存在について述べる。本文脈中、野生型ｐ５３を含む正常細胞では、Ｎ−（ホスホノアセチル）−Ｌ−アスパラギン酸（ＰＡＬＡ）によりｄｅ ｎｏｖｏピリミジン合成を阻害することによって誘導されるｄＮＴＰプールにおける歪み（ｓｋｅｗｉｎｇ）により、ｐ５３の活性化に十分であり、かつ複数の細胞周期チェックポイントで保護的停止をもたらすタンパク質の発現を誘導する可逆性ＤＮＡ損傷が発生することが示唆された（Ｈａｓｔａｋ ｅｔ ａｌ．， ２００８）。ｐ５３に欠陥を有する癌細胞、その下流エフェクタ−では、ピリミジンｄＮＴＰプールがないときにＤＮＡ合成の停止ができないために、最終的にはアポトーシスを引き起こす不可逆性ＤＮＡ損傷となる（Ｈａｓｔａｋ ｅｔ ａｌ．，２００８）。
潜在的臨床的意義。ｄＴの高結合活性は、特定の癌の潜在的代謝不安定性としてこれまでに定義されており、潜在的療法として高ｄＴ用量を用いる臨床試験が行われた（Ｏ’Ｄｗｙｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８７）。持続性（５日にわたる）ｄＴ注入により、耐容性がある、管理可能である、可逆性があるといった副作用を有する前治療歴を有するＴ−ＡＬＬ患者及び皮膚Ｔ細胞リンパ腫患者での応答が明らかになった（Ｃｈｉｕｔｅｎ ｅｔ ａｌ．，１９８０；Ｋｕｆｅ ｅｔ ａｌ．，１９８０； Ｋｕｆｅ ｅｔ ａｌ．，１９８１）。しかし、こうした患者のｄＴに対する治療的応答は、概して、限定され、一過性であり、場合によりｄＣＫを介するＮＳＰの能力を反映し、ｄＴのｄＣＴＰ−除去効果を代償する。ｄＣＫの強力な小分子阻害物質が近年記述されているので（Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３；Ｙｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０）、更なる臨床試験により、Ｔ−ＡＬＬ及び皮膚Ｔ細胞リンパ腫患者において報告されているｄＴの抗白血病性活性がデオキシシチジンサルベージ経路の薬理学的遮断によって有意に向上し得るか否か判断することができる。
癌においてｄＣＴＰ生合成経路を標的とする治療のコンパニオン診断。本明細書に提示されるデータにより、ＤＩ−３９／ｄＴ併用療法の臨床解釈を補助し得るインビボ及びインビトロコンパニオン診断（またはバイオマーカー）のいずれものいくつかの例が提示される。一例として、インビボにおいて、ＤＩ−３９／ｄＴ併用療法（図２１）の最適な予定を決定するために、ＰＥＴによる腫瘍ｄＣＫ活性の一時性変化の直接的な評価は、従来の血漿薬物動態的測定よりも更に有用であることと考えられる。ｄＣＫ活性を監視するための我々のＰＥＴアッセイは、すでにヒトに転用しているので（Ｓｃｈｗａｒｚｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，２０１１）、インビボにおいて標的組織におけるｄＣＫ阻害を非侵襲的に監視するために、前臨床実験に記述されているものと同様の方法を更なる臨床試験に使用することができ得る。ＰＡＲＰ阻害物質に関して以前示したとおりＤＩ−３９／ｄＴ処置時の白血病細胞によるｐＣｈｋ１及びｐＨ２Ａ．Ｘレベルの上方制御（図２１Ｆ）により、ＤＮＡ損傷の追加の薬力学的バイオマーカーを提供することができる（Ｆｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００９）。さらに、ＤＩ−３９／ｄＴ治療の有効性は細胞が大量のｄＴを取り込み、ｄＴＴＰに転換する能力に依存するので、ｄＴ代謝用プローブである１８Ｆ−ＦＬＴ（３’−デオキシ−３’−フルオロチミジン）を用いるＰＥＴ撮像により（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，１９９８）ｄＴに関して異常な高結合活性を有する腫瘍を特定することができる。したがって、ｄＴ系治療については、１８Ｆ−ＦＬＴ ＰＥＴは、予測的または富化バイオマーカーの提唱されている定義に一致し得る（ｄｅ Ｂｏｎｏ ａｎｄ Ａｓｈｗｏｒｔｈ，２０１０）。
ＤＮＡ損傷応答経路によるＮＳＰの制御。我々のインビトロデータ（図２１Ｃ）及びインビボデータ（図１８Ｅ及びＦ）から、ＣＥＭ Ｔ−ＡＬＬ細胞においてｄＴ処置によりＮＳＰの活性が上方制御されたことがわかる。ｄＴ処置によるＮＳＰの上方制御は、ｄＣＴＰによるｄＣＫ活性への負のフィードバックによるものであり得るが（Ｄａｔｔａ ｅｔ ａｌ．，１９８９）、更なるメカニズムが関与している可能性もある。例えば、ｄＣＫ活性は、ＤＮＰを介するｄＣＴＰの産生に影響を及ぼさないＤＮＡ損傷剤による処置によって増大する（Ｃｓａｐｏ ｅｔ ａｌ．，２００３；Ｏｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９９６）。さらに、ＤＮＡ損傷後のｄＣＫ活性化は、セリン７４でのキナーゼのリン酸化を伴う（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２０１２）。このセリンは、ＤＮＡ損傷応答（ＤＤＲ）経路におけるＡＴＭ及びＡＴＲキナーゼの典型的なリン酸化部位であるＳＱ／ＴＱモチーフの一部である。実際に、ｄＣＫは、これらのキナーゼの直接標的として同定されている（Ｍａｔｓｕｏｋａ ｅｔ ａｌ．， ２００７）。したがって、高用量ｄＴによって及び場合により他の遺伝毒性治療によって誘導されるＤＮＡ損傷後、ｄＮＴＰプールを拡張し、ＤＮＡ修復を促進するために、ＤＤＲ経路により、ｄＣＫの翻訳後制御を介してＮＳＰ上方制御が促進され得る。正しければ、このモデルにより放射線治療及び他の遺伝毒性療法と組み合わせて、ｄＣＫ阻害物質を試験するための理論的根拠がもたらされる。
要するに、我々の結果から、白血病細胞のヌクレオチド代謝への新たな見識がもたらされ、また、ＡＬＬ及びおそらくｄＴ治療によるｄＴＴＰプールの制御できない拡張が潜在的代謝不安定となる他の悪性血液疾患における過剰なヌクレオチド代謝及び適応度を克服するための新たな治療戦略を示す。非癌遺伝子依存（ｎｏｎ−ｏｎｃｏｇｅｎｅ ａｄｄｉｃｔｉｏｎ）を標的にする概念的枠組み内で適合する同様な方法（Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ．，２００９）は、腫瘍細胞に対して生存上の利点を提供する他の過剰な生合成経路に適用され得る。
細胞株及び培養条件。ヒト細胞株ＣＣＲＦ−ＣＥＭ、Ｊｕｒｋａｔ、ＭＯＬＴ−４、ＲＳＲ４；１１及びＴＦ−１細胞は、ＡＴＣＣから入手した。すべての細胞株を５％ ＦＢＳ／ＲＰＭＩ−１６４０中で維持し、３７℃、２０％Ｏ２及び５％ＣＯ２で成長させた。
マウスを特定の病原体非含有条件下で飼育及び収容し、ＵＣＬＡ動物実験委員会プロトコールガイドラインに従って処置した。前述のとおりｄＣＫ−／−を産生し、飼育し、ｎ＝７世代に対して、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに戻し交配した（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２；Ｔｏｙ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。年齢を適合（５〜１２週齢）ＷＴ及びｄＣＫ−／−同腹子を用いて、ＢＭ骨髄性細胞においてｄＴによるＲＳ過剰を評価した。
チミジン、２’−デオキシシチジン、ヒドロキシウレア、５−ＦＵ及びシスプラチンは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから購入して、ＤＭＳＯまたは水中で調製した。ｄＣＫに対するレンチウイルスｓｈＲＮＡ構成体及び非標的対照は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから得た。細胞培養アッセイでは、ｄＣＫ阻害物質をＤＭＳＯ中で再懸濁させた。上述したように免疫ブロット法を実施した（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。免疫ブロット用の抗体及び試薬は、以下の供給業者から購入した。Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、ｐｈｏｓｐｈｏ−Ｃｈｋ１ Ｓｅｒ３４５、ｐｈｏｓｐｈｏ−Ｃｈｋ２ Ｔｈｒ６８、Ｃｈｋ１、Ｃｈｋ２、抗マウスＨＲＰ−共役ＩｇＧ、抗ウサギＨＲＰ−共役ＩｇＧ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ｄＣ、Ｂｅｔａ−Ａｃｔｉｎ； Ａｂｃａｍ、ＴＫ１。化学発光免疫ブロット検出試薬（Ｐｉｅｒｃｅ）を用いて、結合抗体を検出した。前述のとおり、造血幹細胞、ＥｒｙＡ及び骨髄の単離及びＦＡＣＳ表現決定を行った（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。抗−ＣＤ１９（ＡＰＣ）抗体を用いて、ｐ１８５ＢＣＲ−ＡＢＬ／Ａｒｆ−／−細胞を特定した。細胞周期分析については、５μｇ／ｍＬ ＲＮＡａｓｅ Ａ含有１μｇ／ｍＬ ＤＡＰＩまたは２０μｇ／ｍＬヨウ化プロピジウムを用いて全ＤＮＡ含量を求めた。アネキシンＶ染色は、製造業者のプロトコールに従って実施した（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）。小核アッセイでは、単離骨髄細胞を以下の抗体（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）で染色した：Ｔｅｒ１１９ ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５（ＴＥＲ−１１９）、ＣＤ７１ ＡＰＣ（Ｒ１７２１７）、ＣＤ４５ ＰＥ−Ｃｙ７（３０−Ｆ１１）、ＣＤ６１ ＰＥ（２Ｃ９．Ｇ３）、ＣＤ１１ｂ ＡＰＣ−ｅＦｌｕｏｒ７８０（Ｍ１／７０）。細胞を染色、洗浄し、Ｃｙｔｏｆｉｘ／ Ｃｙｔｏｐｅｒｍ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に固定した。次に細胞を洗浄して、１μｇ／ｍＬ ＤＡＰＩ／ＰＢＳ／２％ ＦＢＳで染色した。全フローサイトメトリーデータをｆｏｕｒ−ｌａｓｅｒ ＬＳＲＩＩ ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で取得して、ＦｌｏｗＪｏ（Ｔｒｅｅ Ｓｔａｒ）で分析した。
ＮＯＤ ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウスに２ｇ／ｋｇ ｄＴを腹腔内注入し、ヘマトクリット毛細管を用いて、眼窩後静脈叢の出血を介して０時間、２時間、４時間及び８時間の時点で全血７５μＬを得た。全血を直ちに３０００ｘｇで５分間遠心分離にかけて、血清を単離し、３０μＬ血清を１ｍＬメタノール：アセトニトリル（１：９）と混合し、２分間ボルテックスし、１４，０００ｘｇ、４分間、４℃で遠心分離した。抽出を繰り返し行い、貯留した上清を減圧遠心分離下で乾燥させた。残留物を１００μＬ水中に溶解し、濾過し、ｍｉｃｒｏＢｏｎｄａｐａｋ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）を介して、２％メタノールから５０％メタノールへ１．５ｍＬ／分の流速で１０分かけて勾配移動相で溶出した。吸光度強度（２５４ｎｍ）でチミジンを検出し、濃度を標準曲線に内挿した。
ＤＩ−３９の薬物動態学的プロファイルを求めるために、前述のプロトコールに従ってＣ５７Ｂｌ／６雌マウスにＤＩ−３９を腹腔内注射により投与した（Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。投与用配合物には、１０％ＤＭＳＯ及び４０％カプチソール（β−シクロデキストリンのポリアニオン性可変置換スルホブチルエーテルであるＳＢＥ−β−ＣＤ（Ｓｔｅｌｌａ ａｎｄ Ｈｅ，２００８））水溶液を含む。５〜３６０分から始めてさまざまな時点で、ヘマトクリット毛細管を用いて、眼窩後静脈叢の出血から全血約７５μＬを得た。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ ＥｘｃｅｌのＢｏｏｍｅｒ／Ｍｕｌｔｉ−Ｆｏｒｔｅ ＰＫ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓを用いて、曲線下面積（ＡＵＣ）の近似値、クリアランス率（ＣＬ）、半減期（Ｔ１／２）、最高血中濃度（Ｃｍａｘ）及び最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）を算出した。
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ−ＭＲＭを用いたＤＩ−３９腫瘍及び血漿取り込み試験では、腫瘍担持ＮＳＧマウスに屠殺０時間前、２時間前、４時間前、８時間前及び１２時間前に５０ｍｇ／ｋｇ ＤＩ−３９を腹腔内投与した。全腫瘍を摘出し、重量を計測して、等容積の２ｍｍ径ステンレス鋼ビーズ（Ｎｅｘｔ Ａｄｖａｎｃｅ）を用いて、０．５ｐｍｏｌ／μＬ内部標準液ＤＩ−７０（２−（（（２−（４−メトキシ−３−（２−（２−（２−メトキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）フェニル）−５−プロピルチアゾール−４−イル）メチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン、Ｃ２５Ｈ３５Ｎ５Ｏ５Ｓ２、ＭＷ＝５４９．２ｇ／ｍｏｌ、自家合成ＤＩ−３９類似体）含有１ｍＬ氷冷アセトニトリル／水（５０／５０ｖ／ｖ）中でＢｕｌｌｅｔ Ｂｌｅｎｄｅｒ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ（Ｎｅｘｔ Ａｄｖａｎｃｅ）により均質化した。組織ホモジネートを振とう器で一晩４℃にて放置し、次の日、２０，０００ｘｇで１０分間遠心分離にかけた。上清（７００μＬ）を無菌管に入れ、減圧遠心分離器で蒸発乾燥させた。残留物は、１００μＬアセトニトリル／水（５０／５０、ｖ／ｖ）で再構成した。血漿測定では、毛細管採血管を用いて、眼窩後静脈叢の出血から約１００μＬの血を採取した。試料を５分間、２０，０００ｘｇで遠心分離にかけ、上清３０μＬを無菌管に入れた。試料は内部標準液含有５００μＬ氷冷アセトニトリル／水（５０／５０、ｖ／ｖ）と混合し、腫瘍性ホモジネートと同じ方法で処理した。校正標準液は、未処置マウスの腫瘍ホモジネート及び血漿中でＤＩ−３９原液をスパイクして調製し、０．０２〜２０ｐｍｏｌ／μＬの範囲を得た。試料（５μＬ）を水／アセトニトリル／ギ酸９５／５／０．１で平衡化し、溶媒Ｂで溶出し（２００μＬ／分）、濃度を上昇させた（アセトニトリル／ギ酸、１００／０．１ｖ／ｖ：分／％アセトニトリル；０／５、０／５、２／５、８／８０、９／８０、１０／５、１２／５）逆相カラム（Ａｇｉｌｅｎｔ ＺＯＲＢＡＸＲａｐｉｄ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｈｉｇｈ Ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ（ＲＲＨＤ）Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｐｌｕｓ Ｃ１８、２．１ｘ５０ｍｍ、１．８μｍ）に注入した。カラム溶出物は、陽イオンＭＲＭモードで操作するトリプル四重極質量分析計（Ａｇｉｌｅｎｔ ６４６０ ＱＱＱ）に接続したエレクトロスプレーイオン源（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｊｅｔ Ｓｔｒｅａｍ）に誘導させた。あらかじめ最適化した条件下でＤＩ−３９及びＤＩ−７０のイオン移行（それぞれ、５２５．２−＞３８３．３及び５５０．２−＞４０８．２）を記録した。内部標準液及び腫瘍重量に対して、ＤＩ−３９ピーク面積を正規化した。
細胞培養中のＤＩ−３９の取り込みを測定するためのＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞を用いた実験は、上述のものと同様のプロトコールに従って行った。ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞は、細胞抽出前の１０分間、３０分間、４０分間及び６０分間、１μＭ ＤＩ−３９を補充した５％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ−１６４０培地で培養した。いくつかの試料では、１μＭ ＤＩ−３９含有培地を除去し、細胞をＤＩ−３９を含有しない新鮮培地を加える前に、６０分間、ＰＢＳで３回洗浄した。細胞を抽出し、前述と同じ内部標準液０．５ｐｍｏｌ／μＬを含有する１ｍＬ氷冷アセトニトリル／水（５０／５０、ｖ／ｖ）で均質化した。細胞抽出物を振とう器で一晩４℃にて放置し、次の日、２０，０００ｘｇで１０分間遠心分離にかけた。上清を無菌管に入れ、減圧遠心分離器で蒸発乾燥させた。残留物は、１００μＬアセトニトリル／水（５０／５０、ｖ／ｖ）で再構成した。前述のとおり、ＤＩ−３９を定量化した。
ＣＥＭ細胞を、５％透析ＦＣＳを補充した１０μＭ均一標識［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−デオキシシチジン（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ）、２ｇ／Ｌ均一標識［Ｕ−１３Ｃ］−グルコース（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ）及び０、５０または２５０μＭ ｄＴ含有ＲＰＭＩに入れた。ｄＮＴＰ分析では、細胞を一晩、−２０℃で７５％メタノールにて抽出した。次に、抽出物を熱湯で３分間加熱し、ペレットに入れ、上清を移して、減圧遠心分離で乾燥させた。ＤＮＡ分析では、細胞を採取して、Ｑｕｉｃｋ−ｇＤＮＡ ＭｉｎｉＰｒｅｐ ｋｉｔ（Ｚｙｍｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を用いてゲノムＤＮＡを抽出した。次に、ＤＮＡ Ｄｅｇｒａｄａｓｅ Ｐｌｕｓ ｋｉｔ （Ｚｙｍｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）を用いて、ゲノムＤＮＡを消化させてヌクレオシドとした。
インビボ試験では、屠殺３０分前に、腫瘍担持マウスに２００μＬ２．５ ｍＭ［Ｕ−１３Ｃ／１５Ｎ］−デオキシシチジンを投与した。腫瘍を採取して、機械的に単一細胞に消化させて、細胞数を数えた。ＤＮＡの抽出は、上述のとおり行った。
ＤＮＡ加水分解試料を溶媒Ａで１／１希釈し（水／ギ酸、１００／０．２、ｖ／ｖ）、これまでに報告された方法（Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）の改訂版を用いて分析し、この方法では、一定分量の溶液（１０μＬ）を多孔黒鉛炭素カラム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｈｙｐｅｒｃａｒｂ、１００ｘ２．１ｍｍ、粒径３ミクロン）溶媒Ａで平衡化し、溶出し（３００μＬ／分）、溶媒Ｂの濃度を上昇させて（アセトニトリル／分／％ Ｂ；０／０、６／６０、６．１／１００、９／１００、９．１／０、１０／０）に入れた。カラムの溶出物を陽イオンＭＲＭモードで操作するＡｇｉｌｅｎｔ ６４６０ ＱＱＱに接続したＡｇｉｌｅｎｔ Ｊｅｔ Ｓｔｒｅａｍに配向させた。信頼できる標準液を用いて保持時間を検証後、ｄＣアイソトポマーのＭＨ＋−＞フラグメントイオン移行（Ｍ０、２２８．１−＞１、１２．１；Ｍ１、２２９．１−＞１１２．１；Ｍ２、２３０．１−＞１１２．１；Ｍ３、２３１．１−＞１１２．１；Ｍ４、２３２．１−＞１１２．１；Ｍ５、２３３．１−＞１１２．１；Ｍ６、２３４．１−＞１１３．１；Ｍ７、２３５．１−＞１１４．１；Ｍ８、２３６．１−＞１１５．１；２３６．１−＞１１５．１；Ｍ１１、２３９．１−＞１１８．１；及びＭ１２、２４０．１−＞１１９．１）のピーク面積を器具製造業者により供給されたソフトウエア（Ａｇｉｌｅｎｔ ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ）を用いて記録し、細胞数に対して正規化した。ＤＮＰのＭ３〜Ｍ８のｄＣアイソトポマー及びＮＳＰのＭ１１〜Ｍ１２を検出し、データ分析に使用した。
遊離ｄＮＴＰ分析では、これまでに報告された同じ方法の改訂版を使用した（Ｃｏｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００９）。そこでは、乾燥させた試料を、溶媒Ｃ（１００μＬ、５ ｍＭヘキシルアミン、０．５％ｍＭジエチルアミン、ｐＨ１０．０に再度溶解し、一定分量（１０μＬ）を多孔黒鉛炭素カラム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｈｙｐｅｒｃａｒｂ、１５０ｘ２．１ｍｍ、粒径３ミクロン）溶媒Ｃで平衡化し、溶出し（１５０μＬ／分）、溶媒Ｄの濃度を上昇させて（アセトニトリル／分／％ Ｄ；０／０、５／０、２５／４０、２５．１／１００、３０／１００、３０．１／０、４０／０）に入れた。カラムの溶出物は、陰イオンで操作する上述の同じ器具に配向させた。信頼できる標準液を用いて保持時間の検証後、再び、器具製造業者から供給されたソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ ＭａｓｓＨｕｎｔｅｒ）でさまざまなｄＣＴＰアイソトプマーの事前に選択した（Ｍ−Ｈ）−−＞フラグメントイオン移行の輝度（Ｍ０、４６６．０−＞１５９．０；Ｍ１、４６７．０−＞１５９．０；Ｍ２、４６８．０−＞１５９．０；Ｍ３、４６９．０−＞１５９．０；Ｍ４、４７０．０−＞１５９．０；Ｍ５、４７１．０−＞１５９．０；Ｍ６、４７２．０−＞１５９．０；Ｍ７、４７３．０−＞１５９．０；Ｍ８、４７４．０−＞１５９．０；Ｍ１０、４７８．０−＞１５９．０；Ｍ１１、４７９．０−＞１５９．０；及びＭ１２、４７８．０−＞１５９．０）を記録し、細胞数に対して正規化した。ＤＮＰのＭ５〜Ｍ８及びＮＳＰのＭ１２のｄＣＴＰアイソトポマーを検出して、データ分析に用いた。Ｍ３及びＭ４のアイソトポマーは検出されなかった。
前述のとおり、細胞内ｄＮＴＰプールの測定を行った（Ａｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。
コメットアッセイは、アルカリ条件下で、Ｔｒｅｖｉｇｅｎ ＣｏｍｅｔＡｓｓａｙ ｒｅａｇｅｎｔ ｋｉｔプロトコールに従って実施した。定量を行う場合、１００を超える細胞を含む各スライドの４つの無作為切片をイメージングし、ＴｒｉＴｅｋ Ｃｏｍｅｔｓｃｏｒｅ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いてＯｌｉｖｅ Ｔａｉｌ Ｍｏｍｅｎｔを得た。
[0430] ヒト化分泌Ｇａｕｓｓｉａルシフェラーゼ（ｓＧｌｕｃ）、ｐＣＭＶ−ＧＬｕｃ−１（Ｎａｎｏｌｉｇｈｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）をコードする遺伝子をサブクローン化してＭＳＣＶ−ＩＲＥＳ−ＧＦＰレトロウイルスベクトルとした。Ｐｈｅｏｎｉｘ−Ａｍｐｈｏ細胞をＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｇｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ，ＮＹ）を用いて、産生ベクターで形質移入した。形質移入４８時間後、ウイルスを採取して、ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ及びＣＥＭ ｄＣＫｌｏｗ細胞の形質導入に用いた。ＦＡＣＳＡｒｉａ ＩＩ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｅｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いてＧＦＰ陽性細胞を選別した。
別途記述したとおり、結晶学試験に使用したＣ４Ｓ Ｓ７４Ｅ ｄＣＫ変異体を発現させ、精製した（Ｎｏｍｍｅ ｅｔ ａｌ．，２０１４）。Ｎｏｍｍｅ ｅｔ ａｌが記述しているとおり、結晶化Ｘ線データの収集及び精密化も実施した。要約すると、懸滴蒸気拡散方法を用いて、１２℃でＵＤＰと複合体化したｄＣＫ、ＭｇＣｌ２及び２．５倍を超えるＤＩ−３９阻害物質の結晶を成長させた。リザーバ溶液は、０．９〜１．５Ｍクエン酸三ナトリウム水和物及び２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）を含むものとした。回折データは、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｐｈｏｔｏｎ Ｓｏｕｒｃｅ，Ａｒｇｏｎｎｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｎ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ−Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ａｃｃｅｓｓ Ｔｅａｍ（ＬＳ−ＣＡＴ）ｂｅａｍｌｉｎｅｓ ２１ ＩＤ−Ｇにて収集した。
等容積のＭａｔｒｉｇｅｌ １００μＬ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中に２ｘ１０６ ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ−ｓＧｌｕｃ−ＧＦＰ細胞及び／またはｄＣＫｌｏｗ−ｓＧｌｕｃ−ＧＦＰ細胞を移植し、ＲＰＭＩを側腹部に皮下投与して８〜１２週齢雌ＮＳＧマウスにおいてＣＥＭ異種移植片腫瘍を発達させた。ノギス測定（［（長さｘ幅２）／２］）及び出血性Ｇａｕｓｓｉａルシフェラーゼ（ＧＬｕｃ）アッセイにより腫瘍の成長を毎日監視した（Ｔａｎｎｏｕｓ， ２００９）。尾部静脈の切れ目から１０μＬの出血を収集し、２μＬ ５０ｍＭ ＥＤＴＡと混ぜた。１μＬの出血を９９μＬ ＰＢＳと混合し、９６ウエルＯｐｔｉＰｌａｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に移した。２０μＭ セレンテラジン基質１００μＬを混ぜて、プレートルミネッセンスマイクロプレートリーダーＳｐｅｃｔｒａＭａｘ Ｌ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いてルシフェラーゼ活性を測定した。全身腫瘍モデルを、１０６ＣＥＭ ｄＣＫｗｔ−ｓＧｌｕｃ−ＧＦＰまたはｄＣＫｌｏｗ−ｓＧｌｕｃ−ＧＦＰ／１００μＬ ＲＰＭＩの静注投与によって構築した。チミジン（２ｇ／ｋｇ）を生理食塩水中で投与し、及びＤＩ−３９を１．４％ＤＭＳＯと４０％カプチソール（Ｌｉｇａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）との混合物で投与した。
ＣＥＭ異種移植片の腫瘍を採取し、１０％緩衝ホルマリン液中で一晩固定した。次に試料をパラフィンで包埋し、５μｍ切片をスライドガラスに乗せた。製造業者のプロトコール（Ｒｏｃｈｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ）に従って、ＴＵＮＥＬ染色を実施した。その後に染色スライドをＡｐｅｒｉｏ ＳｃａｎＳｃｏｐｅ ＡＴ（Ａｐｅｒｉｏ）でスキャンし、Ｄｅｆｉｎｉｅｎｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｓｔｕｄｉｏ ６４（Ｄｕａｌ）３．５（Ｄｅｆｉｎｉｅｎｓ ＡＧ）を用いて、分析を行った。
ｄＣＫキナーゼ及び取り込みアッセイは、前述のとおり実施した（Ｓｈｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。
すべてのマウスに麻酔をかけて、心穿刺により全血を得た。末梢血の血算として、ＥＤＴＡの入った採血管で試料を採取し、分析のためにＬａｂ Ａｎｉｍａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、ＵＣＬＡ Ｄｉｖｉｓｉｏｎに提出した。
前述のとおり、ＰＥＴ／ＣＴ試験を実施した（Ｒａｄｕ ｅｔ ａｌ．，２００８；Ｓｈｕ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。
マウスを対象にしたＤＩ−３９の薬物動態学的研究は、前述のとおり実施した（Ｍｕｒｐｈｙ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。
他に指示がない限り、すべての統計は、生物学的反復の平均と標準誤差（±ＳＥＭ）として表した。Ｐ値の有意性は、記述したとおり、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）において１つの試料ｔ検定関数を用いて、複数の独立した実験の代表値を示すデータセット内の複数の反復から算出した。
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３．実施例３
哺乳類細胞は、ＤＮＡの複製及び修復のためのデオキシリボヌクレオチド三リン酸の産生及び維持（ｄＮＴＰ）の２つの主要経路であるｄｅ ｎｏｖｏ経路及びヌクレオシドサルベージ経路に依存する。１ｄｅ ｎｏｖｏ経路では、グルコース及びアミノ酸からｄＮＴＰを産生する。ヌクレオシドサルベージ経路は、あらかじめ形成された細胞外環境に存在するデオキシリボヌクレオシドからｄＮＴＰを産生する１。細胞基質デオキシリボヌクレオシドサルベージ経路中の第１の酵素ステップは、デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）及びチミジンキナーゼ１（Ｔｋ）によって触媒される。２ｄＣＫは、デオキシシチジン（ｄＣ）、デオキシグアノシン（ｄＧ）及びデオキシアデノシン（ｄＡ）の５’−リン酸化をｄＣに対して最も高い親和性を示すそれらの一リン酸形態に触媒する３。一リン酸デオキシリボヌクレオチドは、その後、他のキナーゼによってそれらの対応する二リン酸形態及び三リン酸形態にリン酸化される４，５。ｄＣＫ及びＴＫ１は、リンパ前駆細胞及び赤血球前駆細胞中のｄＮＴＰの生合成を調整することによって、造血中において重要な役割を担うことを示した６，７。ヌクレオチド代謝におけるその生理学的役割に加えて、ｄＣＫは、いくつかの臨床上重要な抗ウイルス及び抗癌ヌクレオシド類似体プロドラッグ（例えば、ゲムシタビン、デシタビン、フルダラビン、シタラビン、クロファラビン）をリン酸化し、これらのプロドラッグの活性化には、ｄＣＫによるリン酸化が決定的に必要とされる８。近年、ｄＣＫは、ＤＮＡ損傷への応答において、癌細胞でのＧ２／Ｍチェックポイントの調節に関連づけられた。９造血及び癌中でのｄＣＫの役割が、このキナーゼの小分子阻害物質の発現への関心事となる。こうしたｄＣＫ阻害物質から、悪性疾患及び免疫不全の新規治療薬が提示され得る。知る限りでは、報告されているｄＣＫ阻害物質はほとんどなく１０，１１，１２、１つのみが１３インビボにおいてｄＣＫ活性を阻害することを示した。
ポジトロン放射形断層撮影（ＰＥＴ）は、さまざまな疾患を監視する診断、ステージング、リステージング及び治療法に幅広く使用される非侵襲性インビボイメージング法である１４，１５。放射性トレーサである２−１８Ｆ−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース（１８Ｆ−ＦＤＧ）１６，１７を用いるＰＥＴが、癌の重要な診断及び治療監視ツールとなっているが１８，１９，２０，２１、ＰＥＴの別の用いられ始めている用途は、創薬及び開発におけるその使用に関係する。したがって、創薬／開発工程の初期により迅速にかつさらに効率良く、容易に決定することによって、ＰＥＴは、有望な候補物の発達を加速させ、不全を減少させる２２，２３，２４。例えば、ＰＥＴを使用して、薬力学的（ＰＤ）特性及び／または薬物動態学（ＰＫ）特性を非侵襲性評価することにより、創薬工程においてリード候補物を調節する必要性を示すことができる。ｄＣＫを中心とした創薬及び開発プログラムの特定の文脈において、ＰＥＴは、インビボｄＣＫ活性を評価するために妥当性が検証されたＰＥＴバイオマーカーが使用可能であることを考慮すると、特定の重要な役割を担う。これらのｄＣＫ活性ＰＥＴ ＰＤバイオマーカーとしては、我々のグループが開発したｄＣＫの一連の１８Ｆ−フッ素−アラビノフラノシルシトシン類縁物質が挙げられ、２５これには、１８Ｆ−１−（２’−デオキシ−２’−フルオロアラビノフラノシル）シトシン（１８Ｆ−ＦＡＣ）２６及び１８Ｆ−Ｌ−１−（２’−デオキシ−２’−フルオロアラビノフラノシル）シトシン（１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ）２７が挙げられる。本明細書では、効力のあるｄＣＫ阻害物質の開発について記述し、非侵襲性及び臨床上適用可能なＰＤバイオマーカーとして１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ ＰＥＴを用いて、これらのインビボ有効性を示す。
リード化合物１５ｃの同定。ｄＣＫの新規小分子阻害物質を同定するために、一組の選択された化学ライブラリーの総計ほぼ９０，０００の小分子に対してハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）を実施した。組換え型ヒト酵素を用いてホタルルシフェラーゼ−結合アッセイによりｄＣＫ阻害物質の機能に関してライブラリーのスクリーニングを行った。２８このアッセイでは、ｄＣＫの阻害により、ｄＣＫによるＡＴＰの枯渇を阻止し、その結果、陽性ウエルにおいてより多くの発光シグナルが得られる。スクリーニングにより２つのヒット化合物１及び２が生成され、Ｌ１２１０マウス白血病細胞株（図２６）中でマイクロモル力価を有するトリチウム標識デオキシシチジン（３Ｈ−ｄＣ）の取り込みを阻害する妥当性を検証した。
これらの結果に基づいて、類似の構造的足場を含む５つの市販されている化合物の試験を行い、３Ｈ−ｄＣの取込みの阻害を計測することによって、Ｌ１２１０細胞のＩＣ５０値を求めた（図２６）。化合物６及び化合物７は著しく不活性であったことから、ピリミジン環のビス−アミノ官能基はｄＣＫの阻害に重要であることが示唆される。これらの結果に基づいて、構造活性相関（ＳＡＲ）研究を開始し、リード構造を開発して、強力なインビトロ活性を有する化合物に更に最適化できるようにした。
初めに、ピリミジン及び１，３，５−トリアジンの化合物の２つの主要構造的分類を調べた（表５）。２つの細胞株（Ｌ１２１０マウス白血病細胞及びＣＣＲＦ−ＣＥＭヒト急性Ｔリンパ芽球性白血病細胞）を使用して、ＩＣ５０値を求めた。ほとんどすべての場合において、ピリミジン環を１，３，５−トリアジンモチーフで置換することによりｄＣＫ阻害活性が低下し、その中でも、ほぼ２倍の力価の低下が観察されたものもある。その結果として、ピリミジンモチーフを、進行させる好ましい足場として利用した。ＳＡＲのこの段階では、最終的な１８Ｆ−放射標識目的として、フェニル環におけるフルオロエトキシ側鎖の存在を考慮した。フルオロエトキシ側鎖の位置に対してフェニル環周辺の置換についても調べた。フルオロエトキシ側鎖を化合物８ａのパラ位から化合物９ａのメタ位に移動することによって、阻害活性が約２倍増大した。パラ位のアルコキシ置換基は、アルキル部分よりも良好であることが明白であったが、これは化合物１１ａがメトキシ９ａ類縁体またはエトキシ１０ａ類縁体のいずれよりも大幅に低い活性を有していたためである。１つの炭素によって伸長され、メタ位にフルオロプロポキシ基をもたらした側鎖を含む化合物１２ａでは、阻害活性がわずかに上昇したが、化合物９ａ及び化合物１０ａほどの大幅な上昇ではなかった。オルト位でのフェニル環の置換（例えば、化合物１３ａ及び化合物１４ａにおいて）により、阻害活性が大幅により低くなり、化合物１４ａについては、化合物９ａと比較した場合、約１０倍の力価の低下が観察された。表５の化合物の一般的な合成スキームは、補足情報に示した。
小分子中にフッ素が存在することにより、最終的にｄＣＫ阻害物質の１８Ｆ−アイソトポログの合成が可能になり、フッ素導入により、化合物のほぼすべての物理的特性及びＡＤＭＥ（吸着、分布、代謝及び排泄）特性に影響を及ぼす２９。近年、フッ素が代謝安定性を向上させる能力がますます明らかになっている３０。したがって、一連の化合物が、エトキシ側鎖が連結するというよりも、阻害物質の芳香環に直接付着するフッ素を含んで合成された（化合物１６〜１８、表６）。この一連の各化合物については、３つの誘導体セット（ａ〜ｃ）を合成し、それぞれの場合において、チアゾールの５位の基は、メチル置換基、エチル置換基またはプロピル置換基であった。表５では、化合物１５ａ〜ｃについては、フルオロエトキシ側鎖はフェニル環のメタ位に保持され、メトキシ基は、最初のＳＡＲに起因する好ましい阻害物質によってパラ位であった。
Figure 2016530266
チアゾールの５位に非極性官能基が増えることによって、阻害活性が増大した（表６）。ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞のＩＣ５０値によって、１つの例外を除きＬ１２１０細胞で見られた力価と同じ傾向が示され、セット１６では、メチル置換基、エチル置換基またはプロピル置換基間でほとんど差が認められない。しかし、Ｌ１２１０細胞に対して試験を行ったすべての化合物に関して、対応するメチル誘導体よりも、プロピル置換基によってより良好な阻害活性がもたらされた。Ｌ１２１０細胞で最も良好な例では、化合物１５ｃと化合物１５ａとを比較したとき、活性が１２倍増加した。さらに、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞において、それぞれのメチル誘導体に対するプロピル置換基と比較することによっても、活性における阻害性傾向が次のように増大することがわかった：６倍（１７ｃと１７ａとの比較）または３倍（１８ｃと１８ａとの比較）。チアゾール環の５位の改変による最も強烈な影響は、表１の９ａから表６の１５ｃに示される変化であり、Ｌ１２１０細胞においてプロピル部分の水素の置換により、力価が１８０倍増加した。また、いずれの細胞株においても、フルオロエトキシ側鎖（例えば、化合物シリーズ１６〜１８）を除去することにより、力価の有意な減少となった。本シリーズにおいて最も力価の高い化合物である化合物１５ｃは、フェニル環のメタ位にフルオロエトキシ側鎖を含み、また、チアゾール環の５位にプロピル基を含む。
Figure 2016530266
化合物１５ａ〜ｃは６つのステップで合成した（スキーム４）。市販の３−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾニトリル１９を、塩基として炭酸セシウムを用いて、１−ブロモ−２−フルオロエタン含有ＤＭＦによるアルキル化を介して官能基化し、収率９９％のニトリル２０を得た。塩基性条件下で２０を硫化アンモニウム水溶液に晒して、最良の収率でチオアミド２１を得た３１。還流エタノール中において、３３それぞれエチル３−ブロモ−２−オキソアルカノエート３２によるチオアミド２１の凝結を介して、１５ａ〜ｃのチアゾールコアを形成するための環化が得られた。得られた化合物を水素化ジイソブチルアルミニウムで還元することによって、収率８８〜９９％で、それぞれのアルコール２３ａ〜ｃを得た。アルコール２３ａ〜ｃを、穏やかな条件下で対応する臭化物２４ａ〜ｃに変換した（収率７４〜８０％）３４。最終的に、ブロマイドを４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン３５を用いて求核置換することにより、所望の生成物１５ａ〜ｃ（収率７１〜８７％）を産生した。
スキーム４。化合物１５a〜ｃの合成ａ
Figure 2016530266
ヒトｄＣＫに結合する化合物のＸ線結晶構造。化合物１５ａのＸ線結晶学試験を開始して、ｄＣＫへの結合に関する情報を得た。この一連の化合物のｄＣＫ−阻害物質相互作用の詳細な分析を実施した。要するに、ｄＣＫ：１５ａ複合体の結晶構造を分解能１．９Åにより解析した（図２７）。１つのモノマー当たり分子量約３０ｋＤａの２つの同一サブユニットの二量体であるヒトｄＣＫは、触媒のためにホスホリル供与体としてＡＴＰまたはＵＴＰのいずれかと結合することができ、また、ｄＣＫは開コンフォメーションまたは閉コンフォメーションをとってもよい３６，３７，３。１５ａとの複合体では、酵素は、開コンフォメーションを取る。二量体酵素の各プロトマーにおける２つの１５ａ分子を観察した（（１５ａ〜Ｉ）及び（１５ａ〜ＩＩ）図２７Ａ）。１５ａがｄＣＫに結合することにより、ヌクレオチド結合が阻止されることはない点に留意されたい（図２７Ａ）。１５ａ−Ｉと１５ａ−ＩＩとを平行配向することにより、各分子のフェニル環とチアゾール環との最適なπ−πスタッキング相互作用が可能になる。
１５ａの２つの分子は活性部位で結合するが、１５ａ−ＩＩよりも１５ａ−Ｉはさらに重要な相互作用と更に短い水素結合距離とを形成することがわかる（図２７Ｂ）。ｄＣＫヌクレオシド結合部位において１５ａ−Ｉのピリミジン部分、及び残基Ｅ５３、Ｑ９７及びＤ１３３との間に存在する広範な水素結合網を図２７Ｂに示す。図２７Ｃは、Ｖ５５、Ｌ８２及びＦ９６を介して、化合物１５ａのメチル基周囲に存在する疎水性ポケットを示す。この図から、ポケットには、より大きい置換基が受容されることがわかり、化合物１５ｂ及び１５ｃに関して得られる力価の増加傾向が説明される。
自由エネルギー摂動（ＦＥＰ）法を用いるＭｏｎｔｅ Ｃａｒｌｏ３８（ＭＣ）法計算モデル法３９，４０を用いて、チアゾールの５位での延長アルキル鎖の阻害効果を更に調べた。ＦＥＰにより、２つの分子の結合エネルギーの差異を計算することができる。タンパク質との複合体［ΔＧタンパク質（Ａ−＞Ｂ）］において及び単一溶液中において［ΔＧ水（Ａ−＞Ｂ）］分子Ａを分子Ｂに摂動することは、完全な熱力学的サイクルの一部である（図３Ａ）。こうしたサイクルにおけるすべての成分の総量はゼロと等しい必要があるので、結合エネルギーの差異は自由エネルギーの差異として計算することができる。
ΔΔG結合 = ΔG結合(B) - ΔG結合(A) = ΔGタンパク質(A → B) - ΔG水(A → B)
ｄＣＫとの各モノマー複合体及び溶液のみにおける構造１５ｂモデル及び構造１５ｃモデル（図２８Ｂ）は、ＭＣを用いて平衡化した。その後、ＦＥＰを用いて、１５ｃの平衡化構造を構造１５ｂ（プロピル鎖をエチルに「収縮させる」）に摂動させて、逆も同様に行った（エチル鎖をプロピルに「成長させる」）。これらの計算は、ＭＣＰＲＯ２．０４１ソフトウェアパッケージを用いて行った。これらの摂動の自由エネルギーの変動を図３Ｃに示す。２つのシミュレーションから得たΔΔＧ結合を加算平均することによって、１５ｂのエチル鎖と比較して１５ｃのプロピル鎖がより好ましい自由結合エネルギー１．２１０ｋｃａｌ／ｍｏｌをもたらすことがわかり、脱溶媒がこの好ましい効果の要因である。アルキル鎖の伸長時の自由エネルギーの変動は、タンパク質との複合体及び水のみの双方において好ましいものではないが（鎖の伸長では正のΔＧであり、鎖の短縮では負のΔＧ）、好ましくないΔＧは、溶媒中においてより大きい。これにより好ましい結合の全ΔΔＧとなることから、プロピル鎖は、タンパク質の内部孔からより上手く水を除去することができ、タンパク質と阻害物質との関連が更に大きくなり得ることが示唆される。
表６の効力傾向及び１５ａのチアゾール環の５位周辺の疎水性ポケットの存在に基づいて、その位置に挿入したプロピル鎖を用いてＳＡＲの更なる化合物を産生し、ｄＣＫ酵素ポケットと阻害物質との間の非極性相互作用を増大させた。分子の溶解性並びに活性部位に存在し得る潜在的水素結合相互作用を向上するために、エトキシ側鎖を末端処理しているフッ素原子をヒドロキシル基またはスルホンアミド基と置換した。さらに、Ｌ１２１０細胞及びＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞の阻害活性から、効力に関して同じ傾向が認められることから、その後に合成されたすべての化合物のＳＡＲは、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞のみで調べた。この結果を表７にまとめる。
Figure 2016530266
化合物２５〜化合物２７は、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞に対して非常に良好な（１〜２ｎＭ）力価を示した（表７）。末端鎖ヒドロキシルをメチルスルホンアミドへ置換することにより、阻害活性が約３倍（化合物２７〜化合物２９と比較して）または５倍（化合物２５〜化合物２８と比較して）低下した。表５の最初のＳＡＲから、パラ位にアルコキシ置換基が存在することにより、阻害活性の低下を招いたことがわかり、このため、パラ位にメトキシ基を再度挿入した。予想どおり、エトキシ側鎖を除去することにより（例えば、化合物３１）、大幅により低い阻害活性を招き、これにより化合物１６〜化合物１８（表６）で観察されたデータがさらに支持された。メタ位のヒドロキシルエトキシ側鎖に加えて、パラ位にメトキシ部分が存在することにより、阻害効力１ｎＭを有する化合物３３が産生された。驚くことに、ピリミジン環からアミノ基のうちの１つを除去することによって、わずかに２．５倍の阻害活性の低下を招いた（化合物３３〜化合物３４と比較して）。最初は、ピリミジン環の双方のアミノ基を除去することによって、完全に阻害活性が消失するが（化合物６及び化合物７、図２６）、アミノ基が１つ存在することによって、好適かつ重要な水素結合相互作用がもたらされ、酵素を阻害し得ることが観察された。１つの炭素によって伸長され、ヒドロキシルプロポキシ基をもたらす側鎖を含む化合物３２も合成した。しかし、この修飾により、ヒドロキシルエトキシ基と比較して、阻害活性のわずかな低下がもたらされた。化合物３３は、細胞培養において強力な化合物であったが、一級ヒドロキシル基が分子内に存在することにより、潜在的酸化またはグルクロン酸抱合の結果としての代謝的不安定性に関する懸念が生じた４２。したがって、化合物３５〜化合物３７を合成して、化合物３３の代謝低下の可能性を低下させた。更なる調査のために表７のこれらの化合物のうち、ＩＣ５０値が化合物１５ａより低く、その構造的特性から最高のインビボ有効性を有することが示唆された８つの化合物を選択した。
細胞をベースとした値が化合物の効力を反映していることを確認するために、定常状態動力学的分析を用いて化合物を選択するＫｉａｐｐ値も求めた。細胞ベースアッセイは、化合物１５ａは化合物１５ｃ（表６）に比べて６〜１２倍効力が低いこと（アッセイで使用される細胞株に依存する）を示した。これに対応して、定常状態データから、化合物１５ａのＫｉａｐｐ値は６倍高い（表８）ことが判明した。同様に、化合物３６及び化合物３７（表７）のＣＥＭ細胞で観察されたナノモルＩＣ５０が低いことは、これらの化合物（表８）のＫｉａｐｐ値から求める定常状態動態において再現された。したがって、我々の細胞ベースのアッセイにより、化合物とｄＣＫとの間の相互作用の強さに関して、比較的正確なデータがもたらされると結論付ける。
Figure 2016530266
新規ＰＥＴ ＰＤアッセイを介したｄＣＫ活性のインビボ阻害の評価。ヌクレオシド類似体ＰＥＴプローブである１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣは、ｄＣＫに対する高親和性基質であり、インビボｄＣＫ酵素活性の非侵襲的推定に使用することができる２７。図４ＡにｄＣＫ特異的方法で、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣが細胞中に累積することによるメカニズムを示す概略図を示す。さまざまな組織中で、１８Ｆ−標識ｄＣＫ基質ＰＥＴトレーサの累積を阻害する時に、これらの有効性に基づいて最も強力なｄＣＫ阻害物質を迅速に同定するために、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ ＰＥＴを使用することができると考えた。インビボＰＥＴ ＰＤアッセイでは、細胞培養３Ｈ−ｄＣ取込みアッセイにおいて１〜１２ｎＭの阻害活性を示すｄＣＫ阻害物質を選択した（表３）。マウスは所与のｄＣＫ阻害物質の腹腔内注射による単回投与（５０ｍｇ／Ｋｇ）により処置した。対照マウスには、ビヒクル（４０％カプチソール／水）を注入した。４時間後、処理されたマウスは、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣが静脈内投与され、プローブ注入の１時間後、ｍＰＥＴ／ＣＴによりマウスを撮影した。ＰＥＴ ＰＤアッセイの読出しは、ｄＣＫ阻害物質対ビヒクル処理マウスにおいて、ｄＣＫ−陽性組織での１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの累積の低下を示した。従来は、ｄＣＫ−依存方法で胸腺、脾臓、骨髄及び肝臓などさまざまな組織に１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣが累積することを示していた２７。膀胱内での蓄積は、非代謝プローブの非酵素的腎クリアランスの結果である。ｄＣＫ依存組織における１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの再現性が最も肝臓と一致するため、２７、さまざまなｄＣＫ阻害物質のインビボ有効性と比較するために、肝臓での１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの保持を定量化することにした。ＰＥＴ ＰＤアッセイの最適条件は、化合物３３を用いて、用量漸増試験及び経時的試験を実施して決定した。
１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ ｍＰＥＴ／ＣＴスキャンの結果を図２９にまとめている。ビヒクルまたは化合物１５ａ、３６または３７のいずれかで処置したマウスを対象に行った１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ肝スキャンの横断ＰＥＴイメージを、図２９Ｂに示す。図２９Ｃは、ｄＣＫ阻害物質を処理されたマウスの肝臓内での１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの取り込みを示す。有効な化合物は、１８Ｆ−標識基質のｄＣＫ−媒介リン酸化の阻害がより大きいことの結果として、ビヒクル処置群と比較して、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの取り込みのより大きい低下を誘導した。ヒビクル対照と比較して、化合物２８、化合物２９、化合物３６及び化合物３７によって１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣシグナルの約３０％の低下が誘導され、他の候補ｄＣＫ阻害物質と比較してこれらの優良なインビボ有効性を示す点に留意する。さらに、化合物３０及び化合物３２は、プローブ取り込みの約２０％の減少を示す。細胞培養アッセイにおいて強力なｄＣＫ阻害物質である化合物３３（表７）は、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ肝臓ＰＥＴアッセイにおいて不十分なインビボ有効性を示し、これはおそらくその不十分なＰＫ特性によると考えられる。仮定したとおり、エトキシ鎖末端でのヒドロキシル基（例えば、化合物３３）の代謝的に安定であるメチルスルホンアミド基（化合物２８、化合物２９及び化合物３７）との置換、またはヒドロキシル基（化合物３６）を阻害することは、インビボ有効性にとって利点であることがわかった。化合物３６及び化合物３７は、すべての有効な化合物において最も低いＩＣ５０値を有し、更なる研究を行うために選択した。
次に、インビボ腫瘍組織においてｄＣＫ活性の阻害時の化合物３６の有効性を求めた。ＣＣＲＦ−ＣＥＭ腫瘍異種移植片担持マウスを、１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ注入前に化合物３６で４時間処置した（図２）。１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣ注入の１時間後、ｍＰＥＴ／ＣＴによりマウスを撮影した。化合物３６で処置したマウスの腫瘍異種移植片における１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの保持は、ビヒクル処置マウスの腫瘍内の１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣの保持と比較して約３０％低下した（図２９Ｄ）。ＰＥＴアッセイを補完するために、標準分析法を用いて化合物３６の薬物動態を求め、近似値を図３０に示す。
化合物３６のＸ線結晶解析研究を開始して、ｄＣＫへの結合に関する情報を得た。ｄＣＫ：３６複合体の結晶構造を分解能１．９４Åで解析した（図３１及び表９）。化合物１５ａ（図２７）のわれわれの観察結果と同様に、化合物３６の場合、酵素も開コンフォメーションを取る。二量体酵素の各プロトマー中の化合物３６の１つの分子を観察した（図３１Ａ）。これは、５位での置換が化合物３６に存在するプロピル基より少ない場合の結合部位ごとに結合される２つの分子の観察結果と反する（図２７）。化合物３６のｄＣＫへの結合は、ヌクレオチド結合を妨げるものではない点に留意されたい（図３１Ａ）。特異的ｄＣＫ：３６相互作用を、図３１Ｂに示す。これには、３６のピリミジン部分とｄＣＫヌクレオシド結合部位の残留物Ｅ５３、Ｑ９７及びＤ１３３との間の広範の水素結合網並びにいくつかの疎水性相互作用が含まれる。
インビボ対象阻害物質を示す強力な小分子ヒトｄＣＫ阻害物質を同定することが報告されている。阻害活性の最適化は、アルキル鎖をチアゾール環の５位から延長することによって行った。インビボ有効性は、フェニル環のメタ位に存在するエトキシ側鎖を操作することによって向上させた。ＰＥＴを強力なツールとして、標的阻害の非侵襲的測定に使用し、その結果として、標的阻害の消失（おそらく、インビボでの基質の代謝による）の測定として使用することを提示している。ＰＥＴの主要な臨床応用は、主に中枢神経系（ＣＮＳ）及び腫瘍学をベースとした診断／治療のためのものであるが、ＰＥＴは、薬物開発においてますます重要な役割を担い、体内分布、吸収、標的親和性、血漿結合、代謝及び投与の評価などを含むこうした分子イメージングプラットの主要課題を解決する能力が付与される４３。本明細書では、ＰＥＴ ＰＤバイオマーカーとして放射性トレーサ１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣを使用して、候補ｄＣＫ阻害物質のインビボ有効性を比較し、最初に細胞培養アッセイにおいて力価によって同定し、特徴付けた。さらに、ＰＥＴを使用して、最も有望な化合物３６のうちの１つによって、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ異種移植片マウスモデルのインビボ標的阻害の推定値が提示された。正常組織に対して最小の毒性を有するＣＣＲＦ−ＣＥＭ腫瘍に対する有意の薬理学的応答を誘発する別の有望な化合物３７の能力は、我々のグループによって評価され、別の刊行物に記述されている。今後の研究において、最良のｄＣＫ阻害物質のＰＫ及び溶解性を改善する更なる最適化に取り組む。加えて、最も有望なｄＣＫ阻害物質２９のうちの１つの芳香環にフッ素が存在することにより、１８Ｆ放射標識を受け入れることができる。１８Ｆ放射性同位体を含む小分子ｄＣＫ阻害物質を合成することにより、ＰＥＴイメージングにより生体の体内全体にわたって非侵襲的に検出し、定量化することができる治療用候補化合物の陽電子放出核種を産生することができる。この作業は、更なる伝達の主体となり得る。
Figure 2016530266
ハイスループットスクリーニング。濃度１μＭの組換え型ヒトｄＣＫを１０μＭ 薬剤、１０μＭ ｄＣ及び０．５μＭ ＡＴＰを入れた５０ ｍＭ Ｔｒｉｓ （ｐＨ７．６）、５ｍＭ ＭｇＣｌ２，２ｍＭ ＤＴＴとともにインキュベートした。反応物は、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加える前に３７℃で４時間インキュベートした。要約すると、４０μＬ ｄＣＫ酵素を濃度１２．５μｇ／ｍｌで、ｍｕｌｔｉｄｒｏｐ ３８（Ｔｈｅｒｍｏ， Ｔｕｒｋｕ， Ｆｉｎｎｌａｎｄ）を用いて、３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ， Ｂａｈｌｉｎｇｅｎ， Ｇｅｒｍａｎｙ）に入れ、化合物は、５００ｎＬ ｃｕｓｔｏｍ ｐｉｎ ｔｏｏｌ（Ｖ＆Ｐ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を備えたＢｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｂｉｏｍｅｋ ＦＸ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ， Ｂｒｅａ，ＣＡ）を用いて添加した。薬剤に代わって、カラム１、２、２３及び２４にはＤＭＳＯのみを入れた。加えて、カラム２３及びカラム２４には、これらのカラムを追加の対照として使用するためいずれのｄＣＫも入れなかった（以下を参照されたい）。３７℃で３０分インキュベートした後、体積１０μＬでｍｕｌｔｉｄｒｏｐを用いてカラム１〜２２にｄＣ及びＡＴＰをそれぞれ最終濃度１０μＭ及び０．５μＭとなるまで添加した。カラム２３及びカラム２４に関して、以下の対照を用いた。次の追加の対照を含む２．５μＭ ＡＴＰ溶液１０μｌをそれぞれ添加した：ウェルＡ−Ｄ２３：１μＭ ｄＣＴＰ、ウェルＥ−Ｈ２３：１０μＭ ｄＣＴＰ、ウェルＩ−Ｌ２３：１０μＭ Ｌ−ＦＡＣ、ウェルＦ−Ｐ２３：１０μＭ ＦＡＣ、ウェルＡ−Ｄ２４：０．５μＭ ＡＴＰ標準液、ウェルＥ−Ｈ２４：ウェルＩ−Ｌ２４ １μＭ ＤＣＫのみに対して０．１μＭ ＡＴＰ標準液、及びウエルＦ−Ｐ２４ １０μＭ ＵＴＰ。これらの対照を各プレートに入れて、装置の誤動作を除外した。この後、３７℃で４時間インキュベートし、更に２５μＬ Ｃｅｌｌ ｔｉｔｅｒ ｇｌｏ ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ， Ｆｉｔｃｈｂｕｒｇ， ＷＩ）をｍｕｌｔｉｄｒｏｐで滴下し、その後、 Ａｃｑｕｅｓｔ ｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒ （Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ， Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）で読み取った。使用したライブラリーは、化合物製造者Ａｓｉｎｅｘ （Ｗｉｎｓｔｏｎ−Ｓａｌｅｍ， ＮＣ）及びＥｎａｍｉｎｅ （Ｍｏｎｍｏｕｔｈ Ｊｃｔ．，ＮＪ）から入手した特注の化合物セットであった。これらのセットは、リピンスキーのルールオブファイブを用いて、ドラッグライクに対して大規模に選択された化合物及び特注のクラスター化アルゴリズムを用いた回転可能な結合及び最大の多様性から構成された。
化学。基本手順。別途注記のない限り、市販の無水溶媒を用いて、窒素雰囲気下においてオーブン乾燥ガラス器中で反応させた。抽出及びクロマトグラフィーに使用される溶媒は、無水物ではなかった。水和物を動的真空下にて、１１０℃で２０時間乾燥させて、４，６−ジアミノ−２−メルカプト−ピリミジンを得た。市販の業者より入手した他の試薬はすべて試薬等級であり、指定がない限り、更なる精製を行わずに使用した。反応物及びクロマトグラフィー分画は、Ｍｅｒｃｋ ｐｒｅｃｏａｔｅｄ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０Ｆ２５４ガラスプレート（２５０μｍ）を用いて、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により解析した。紫外線、バニリン染色、過マンガン酸塩染色またはｐ−アニスアルデヒド染色により可視化を行った。フラッシュカラムクロマトグラフィーはＥ．Ｍｅｒｃｋ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０（２３０〜４００メッシュ）により、圧縮空気を用いて行った。ＡＲＸ５００（５００ＭＨｚ）スペクトロメータまたはＡｖａｎｃｅ５００（５００ＭＨｚ）スペクトロメータにより１Ｈ及び１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを記録した。化学シフトは、１０００万分率（ｐｐｍ、δ）にて報告し、対照として残留溶媒ピークを用いる。別の記述がなければ、溶媒及び標準品としてＤＭＳＯ−ｄ６（１Ｈ：δ２．５０ｐｐｍ；１３Ｃ：δ３９．５ｐｐｍ）を使用した。結合定数Ｊはヘルツ（Ｈｚ）にて報告し、共鳴パターンは次のような表記法で報告される：ｂｒ（ブロード）、ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）及びｍ（多重線）。ＭａｓｓＬｙｎｘ ４．１ソフトウェアにより制御した飛行時間計器（Ｗａｔｅｒｓ ＬＣＴ Ｐｒｅｍｉｅｒ ＸＥ）により、エレクトロスプレー質量分析データを収集した。試料は、メタノールに溶解し、直接ループ注入（Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ）でマルチモードイオン化源に融合させた。全最終化合物の純度は、９５％超であるようにした。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｒｅｖｅｒｓｅ−ｐｈａｓｅ Ｌｕｎａ ｃｏｌｕｍｎ（５μｍ、４．６ｘ２５０ｍｍ）ｉｎｌｉｎｅ Ｋｎａｕｅｒ ＵＶ（２５４ｎｍ）検出器を備えたＫｎａｕｅｒ Ｓｍａｒｔｌｉｎｅ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍで分析用ＨＰＬＣを実施した。気相：Ａ：０．１％ ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＭｅＣＮ。補足情報に記述された各化合物の溶離液勾配を明記する。ＧｉｎａＳｔａｒ（ｒａｙｔｅｓｔ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．； Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ， ＮＣ， ＵＳＡ）ＡＤ変換器及びＧｉｎａＳｔａｒソフトウェア（ｒａｙｔｅｓｔ ＵＳＡ， Ｉｎｃ．）を用いて、すべてのクロマトグラムを採取した。
化合物１５ａ〜１５ｃの基本合成手順。３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシベンゾニトリル（２０）。Ｃｓ２ＣＯ３（１０．５ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）及び１−ブロモ−２−フルオロエタン（５．１ｇ、４０．２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）中の３−ヒドロキシ−４メトキシベンゾニトリル１９（３．０ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）溶液に添加した。この混合物を１８時間、５０℃で攪拌した。濃縮して残留溶媒を除去した後、得られた残留物をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水で３回洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧濃縮し、淡黄色固体として粗生物２０（３．９１ｇ、２０．０３ｍｍｏｌ、９９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．２８ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９０ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８３ ‐ ４．８１ （ｍ， １Ｈ）， ４．７３ ‐ ４．７１ （ｍ， １Ｈ）， ４．２８ ‐ ４．２６ （ｍ， １Ｈ）， ４．２３ ‐ ４．２１ （ｍ， １Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：１５３．６， １４８．１， １２７．３， １１９．１， １１６．５， １１１．９， １０３．８， ８２．３ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １７０．５ Ｈｚ）， ６８．７ （ｄ， ＪＣＦ ＝ ２０．３ Ｈｚ）， ５６．１。
３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシベンゾチオアミド（２１）。硫化アンモニウム溶液（Ｈ２Ｏ中２０重量％、１３．５２ｍＬ、３９．６ｍｍｏｌ）を／ピリジン（４１ｍＬ）／トリエチルアミン（３ｍＬ）中の２０（３．８６ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）の混合物に添加した。この混合物を１８時間、６０℃で攪拌した。反応混合物を冷却し、減圧濃縮し、残留溶媒を除去した。得られた残留物をブラインで洗浄し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧濃縮し、黄色−オレンジ固形物として２１（４．５ｇ、１９．８ｍｍｏｌ、定量化）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ：８．８１ （ｂｒｓ， １Ｈ）， ８．７４ （ｂｒｓ， １Ｈ）， ７．７３ （ｓ， １Ｈ）， ７．７２ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．００ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７９ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４８．０， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３２ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２９．５， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ：２００．４， １５２．９， １４７．２， １３１．８， １２１．５， １１３．６， １１０．８， ８２．７ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６７．３ Ｈｚ）， ６８．５ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １９．６ Ｈｚ）， ５５．４。
エチル２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−カルボキシレート（２２ａ）。エタノール（３２ｍＬ）中のチオアミド２１（１．５０ｇ、６．５ｍｍｏｌ）とエチル３−ブロモ−２−オキソブタノエート（２．７２ｇ、１３．０ｍｍｏｌ）との混合物を還流下で２．５時間攪拌した。得られた混合物を冷却し、減圧濃縮し、残留溶媒を除去した。粗残渣をシリカゲル（１０：３ ヘキサン：酢酸エチル）フラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製し、薄い茶色の固体として所望のチアゾール中間体２２ａ（１．４５ｇ、４．３ｍｍｏｌ、６５％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ （ｐｐｍ）：７．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３７ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４８．０， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３１ ‐ ４．２２ （ｍ， ２Ｈ）， ４．２８ （ｑ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８１ （ｓ， ３Ｈ）， ２．６７ （ｓ， ３Ｈ）， １．２８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１６２．９， １６２．１， １５１．４， １４８．２， １４３．９， １４１．９， １２５．５， １２０．５， １１２．６， １１０．８， ８３．１ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６５．９ Ｈｚ）， ６８．３ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １９．０ Ｈｚ）， ６０．８， ５６．０， １４．５， １３．３。
（２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）メタノール（２３ａ）。水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍ ＴＨＦ １０ｍｍｏｌ、１０ｍＬ）を０℃に冷却したＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中の攪拌中間体２２ａ（８６０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）溶液にゆっくり加えた。反応物は２３℃まで加温して１時間攪拌した。混合物を０℃まで冷却して、ロッシェル塩飽和水溶液でゆっくりクエンチした。混濁液を１時間２３℃で溶液が再び透明になるまで攪拌した。得られた溶液を酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧濃縮し、淡黄色固体として所望のアルコール２３ａ（６５４ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ、８８％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：７．３９ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．０４ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．７３ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４８．０， ３．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４６ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．２５ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３０．０， ３．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４１ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１６２．７， １５３．２， １５０．８， １４８．２， １２９．５， １２６．５， １１９．８， １１２．５， １１０．４， ８３．１ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６５．９ Ｈｚ）， ６８．４ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １８．５ Ｈｚ）， ５７．３， ５５．９， １１．２。
４−（ブロモメチル）−２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール（２４ａ）。２３℃でＰＰｈ３（２．５ｇ、９．６ｍｍｏｌ）、その後、ヘキサブロモアセトン（１．７０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３０ｍＬ）中の２３ａ（１．９０ｇ、６．４ｍｍｏｌ）溶液に加えた。この混合物を１時間、４０℃で攪拌し、その時点で、ＴＬＣ分析によると、すべての出発材料が消費されていた。溶媒を減圧下で除去し、粗残渣をシリカゲル（１０：３ ヘキサン：酢酸エチル）フラッシュカラムクロマトグラフィーで精製し、薄い茶色の固体として所望の臭化物２４ａ（１．８４ｇ、５．１ｍｍｏｌ、８０％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：７．５０ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４０ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．８１ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４７．０， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．５９ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３６ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２７．５， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９０ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４６ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ：１６４．１， １５１．２， １４８．１， １４８．０， １３１．７， １２６．４， １２０．４， １１１．６， １１１．５， ８２．４ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６９．９ Ｈｚ）， ６８．４ （ｄ， ＪＣＦ ＝ ２０．５ Ｈｚ）， ５５．９， ２５．８， １１．４。
２−（（（２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）−５−メチルチアゾール−４−イル）メチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（１５ａ）。４，６−ジアミノ−２−メルカプトピリミジン（３３６ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）及びＮａＯＨ（９４ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）をエタノール（２０ｍＬ）中で１０分間２３℃で攪拌した。温熱エタノール（１６ｍＬ）中の臭化物２４ａ（７１０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）溶液を反応混合物に添加し、得られた混合物を３時間７０℃で攪拌した。その溶液を冷却し、減圧濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーでシリカゲル（１００：５ ジクロロメタン：メタノール）を用いて、淡黄色固体として所望の生成物１５ａ（５９０ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ、７１％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：７．３６ （ｓ， １Ｈ）， ７．３４ （ｄ， Ｊ ＝ ８．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．０９ （ｂｒｓ， ４Ｈ）， ５．１２ （ｓ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４８．０， ３．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２５ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３０．５， ３．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．４３ （ｓ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１６８．３， １６３．９ （２）， １６３．３， １５０．９， １４９．５， １４８．３， １２９．１， １２６．４， １１９．９， １１２．７， １１０．５， ８３．２ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６５．９ Ｈｚ）， ７９．５， ６８．５ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １８．７ Ｈｚ）， ５６．１， ２７．９， １１．７； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ１８Ｈ２０ＦＮ５Ｏ２Ｓ２ Ｈに対する計算値：４２２．１１２１、実測値：４２２．１１３６。
２−（（（５−エチル−２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニル）チアゾール−４−イル）メチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（１５ｂ）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：７．３７ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．０， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３６ （ｓ， １Ｈ）， ７．０２ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１３ （ｂｒｓ， ４Ｈ）， ５．１３ （ｓ， １Ｈ）， ４．７２ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４７．５， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．３４ （ｓ， １Ｈ）， ４．２５ （ｄｔ， Ｊ ＝ ３０．５， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ３Ｈ）， ２．８７ （ｑ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．１７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：１６８．２， １６３．８ （２）， １６３．５， １５１．０， １４８．４， １４８．３， １３６．９， １２６．５， １１９．９， １１２．７， １１０．５， ８３．３ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６５．９ Ｈｚ）， ７９．５， ６８．５ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １８．８ Ｈｚ）， ５６．１， ２８．０， １９．９， １７．１； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ１９Ｈ２２ＦＮ５Ｏ２Ｓ２ Ｈに対する計算値：４３６．１２７７、実測値：４３６．１２６３。
２−（（（２−（３−（２−フルオロエトキシ）−４−メトキシフェニルメトキシフェニル）−５−プロピルチアゾール−４−イル）メチル）チオ）ピリミジン−４，６−ジアミン（１５ｃ）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ：７．５３ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４６ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０３ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．６３ （ｂｒｓ， ４Ｈ）， ５．３８ （ｓ， １Ｈ）， ４．８０ （ｄｔ， Ｊ ＝ ４８．０， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．４５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．３４ （ｄｔ， Ｊ ＝ ２９．５， ４．０ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８７ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， １Ｈ）， １．６６ （ｑｔ， Ｊ ＝ ７．５， ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．９７ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， アセトン−ｄ６） δ：１６９．２， １６４．０ （２）， １６３．９， １６３．６， １５１．４， １４９．０， １４８．５， １３４．６， １２６．９， １１９．８， １１２．１， １１１．１， ８２．８ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １６７．５ Ｈｚ）， ７９．５， ６８．６ （ｄ， ＪＣＦ ＝ １９．５ Ｈｚ）， ５５．３， ２８．１， ２５．２， １３．０； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２０Ｈ２４ＦＮ５Ｏ２Ｓ２ Ｈに対する計算値：４５０．１４３４、実測値４５０．１４３２。
１−（５−（４−（（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）メチル）−５−プロピルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）−２−メチルプロパン−２−オール（３６）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ：７．５１ （ｄ， Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．００ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ５．４８ （ｓ， １Ｈ）， ５．３２ （ｓ， １Ｈ）， ４．４８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．８９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．８６ （ｓ， ２Ｈ）， ２．８８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６７ （ｑｔ， Ｊ ＝ ７．５， ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．３３ （ｓ， ６Ｈ）， ０．９８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＭｅＯＤ） δ：１６８．８， １６５．２， １６３．８ （２）， １５１．２， １４８．９， １４８．０， １３５．４， １２６．４， １１９．７， １１１．８， １１０．７， ７９．２， ７７．０， ６９．６， ５５．２， ４８．４， ２７．９， ２７．８， ２５．０， ２４．９， １２．６； ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２２Ｈ２９Ｎ５Ｏ３Ｓ２ Ｈに対する計算値：４７６．１７９０、実測値４７６．１７７２。
Ｎ−（２−（５−（４−（（（４，６−ジアミノピリミジン−２−イル）チオ）メチル）−５−プロピルチアゾール−２−イル）−２−メトキシフェノキシ）エチル）メタンスルホンアミド（３７）。１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ：７．４１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ７．５， ２．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．３９ （ｓ， １Ｈ）， ７．２５ （ｔ， Ｊ ＝ ６．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０５ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．１３ （ｂｒｓ， ４Ｈ）， ５．１５ （ｓ， １Ｈ）， ４．３９ （ｓ， ２Ｈ）， ４．０７ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．８０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３６ （ｄｔ， Ｊ ＝ ５．５， ５．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．１５ （ｄ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ２．９８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．８４ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．５８ （ｑｔ， Ｊ ＝ ７．５， ７．５ Ｈｚ， ２Ｈ）， ０．９１ （ｔ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ３Ｈ）； １３Ｃ ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） ＮＭＲ （１２５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１６８．３， １６３．９（２），１６３．７，１５１．１，１４９．１，１４８．３，１３５．０，１２６．５，１１９．９，１１２．７，１１０．６，７９．５，６８．３，６０．２，４２．４，３１．２，２８．２，２８．０，２５．４，１３．９；ＨＲＭＳ−ＥＳＩ （ｍ／ｚ） ［Ｍ ＋ Ｈ］＋ Ｃ２１Ｈ２８Ｎ６Ｏ４Ｓ３ Ｈに対する計算値：５２５．１４１２、実測値：５２５．１４０４。
細胞培養にて実施したｄＣＫ取り込みアッセイ。すべてのＬ１２１０及びＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞株をすべて５％ ＦＣＳ／５％ ＣＯ２を追加したＲＰＭＩ培地１６４０で、３７℃にてインキュベータで培養した。取込みアッセイでは、細胞をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ＭｕｌｔｉＳｃｒｅｅｎ ＧＶ９６ウェルプレートに密度５０，０００細胞／ウエルで播種した。０．２５ μＣｉ ３Ｈ−ｄＣ（Ｍｏｒａｖｅｋ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を最終体積１００μＬ／ウエルにて同時にｄＣＫ阻害物質の濃度を有する細胞に添加した。３７℃で１時間経過後、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｖａｃｕｕｍ Ｍａｎｉｆｏｌｄを用いて、細胞を氷冷リン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で４回洗浄した。導入するプローブの量をＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａを用いて、シンチレーション計数によって測定した。
タンパク質の発現及び精製。Ｃ４Ｓ Ｓ７４Ｅ ｄＣＫバリアント発現及び精製に関する詳細は、Ｎｏｍｍｅ ｅｔ ａｌが記述している。
結晶化、Ｘ線データ収集、精密化。Ｎｏｍｍｅ ｅｔ ａｌ．が詳細に記述したとおり、次の基準手順で化合物１５ａ及び化合物３６を有する複合体中のｄＣＫの結晶化、データ収集及び構造の決定を実施した。具体的には、懸滴蒸気拡散方法を用いて、１２℃で化合物３６、ＵＤＰ、ＭｇＣｌ２及び２．５倍を超える３６の阻害物質を有する複合体のｄＣＫの結晶を成長させた。リザーバ溶液は０．９〜１．５ Ｍクエン酸三ナトリウム水和物及び２５ ｍＭ ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）を含有した。回折データは、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｐｈｏｔｏｎ Ｓｏｕｒｃｅ，Ａｒｇｏｎｎｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｎ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ−Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｖｅ Ａｃｃｅｓｓ Ｔｅａｍ（ＬＳ−ＣＡＴ）ｂｅａｍｌｉｎｅｓ ２１ ＩＤ−Ｇにて収集した。
動力学的アッセイ。Ｎｏｍｍｅ ｅｔ ａｌが記述しているとおり、定常状態動力学的アッセイ及びデータフィッティングを行った。
計算モデル。ＭＣＰＲＯ ２．０パッケージを用いてすべてのシミュレーションを行った４１。初期座標は、ｄＣＫの化合物１５ｃとの複合体のＸ線構造から得た。このタンパク質を従来の水モデルＴＩＰ４Ｐ４４によって示される３０Å 水栓で溶媒和した。溶質原子は、ＯＰＬＳ−ＡＡ力場によって示され４５使用された。Ｍｅｔｒｏｐｏｌｉｓ Ｍｏｎｔｅ Ｃａｒｌｏ（ＭＣ）を用いて、ＮＰＴアンサンブルにて２５℃、１気圧で、平衡化を行った。タンパク質の骨格及びタンパク質内のすべての結合長さを固定し、結合分子の中心から１１Å以内の角度及びねじれの試料を取った。平衡シミュレーション中、阻害化合物のすべての自由度の試料を取った。平衡は、溶媒のみが移動する５ｘ１０６のサンプリング設定の、その後のタンパク質−阻害物質複合体及び溶液中の孤立阻害因子の１０ｘ１０６設定からなった。次に平衡化された系に対して、自由エネルギー摂動（ＦＥＰ）／ＭＣシミュレーションを行った。これらのシミュレーションは、２倍の試料の１４の摂動ステップから構成される。ＦＥＰ中、その系は、溶媒平衡化の５ｘ１０６のコンフィギュレーション、次いで、全平衡の１０ｘ１０６の設定、データ収集の２５ｘ１０６の設定を受けた。摂動を受けた結合を除き、阻害物質の全自由度をサンプリングした。摂動した結合長さは、最初の長さから最終長さまで系統的に変化した。
インビボＭｉｃｒｏＰＥＴ／ＣＴ画像化試験。動物試験は、ＵＣＬＡ動物実験委員会によって認可され、ＵＣＬＡのＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅのガイドラインに従って実施した。ＰＥＴ肝アッセイでは、Ｃ５７ＢＬ／６Ｃ５７Ｂｌ／６マウスを対象に、７０μＣｉ １８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣを静注する４時間前に指示量のｄＣＫ阻害物質（４０％カプチソールに再懸濁されている）を腹腔内（ｉ．ｐ．）投与した。腫瘍異種移植片アッセイでは、皮下ＣＣＲＦ−ＣＥＭ腫瘍異種移植片を担持しているＮＯＤ ｓｃｉｄ ＩＬ−２受容体γ鎖ノックアウト（ＮＳＧ）に５０ｍｇ／ｋｇ 化合物３６またはビヒクルを注入した。処置４時間後、マウスに７０μＣｉ１８Ｆ−Ｌ−ＦＡＣを静脈内投与した。全てのＰＥＴ／ＣＴ試験について、プローブ投与と、ｍＰＥＴ／ＣＴスキャン（Ｉｎｖｅｏｎ，Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ＵＳＡ Ｉｎｃ．； ｍｉｃｒｏＣＡＴ， Ｉｍｔｅｋ Ｉｎｃ．）の間に１時間の間隔を許容した。６００秒間、静的ｍＰＥＴイメージを撮影した。画像は、ＯｓｉｒｉＸ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ３．８を用いて解析した。
薬物動態学的研究。８週齢のＣ５７Ｂｌ／６雌マウスに、指示した化合物を単回投与した（５０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）。５分、１５分、３０分、３５分、４０分、４５分、１時間、２時間、４時間及び６時間の時点で、ヘパリン管で眼窩出血の血液試料（約７０μＬ）を採取した。血液試料を、２０，０００ｘｇで５分間遠心分離にかけて、血漿を単離した。１ｍＬのアセトニトリルを３０μＬ血漿に添加した。上清を新しい採血管に入れ、ＳｐｅｅｄＶａｃを用いて蒸発させた。次いで、試料を５０μＬ未希釈ＤＭＳＯで再懸濁し、上清をＬＣ／ＭＳ試料バイアルに入れた。次に試料をＡｇｉｌｅｎｔ ６４６０ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄ ＬＣ／ＭＳにかけた。
統計分析。すべての統計は、標準誤差（±ＳＥＭ）、標準偏差（±ＳＤ）または最大ひげ及び最小ひげによる箱型図とともに生物学的反復の平均として示す。Ｐ値の有意性は、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）における１標本スチューデントｔ検定により算出した。
ＰＤＢ ＩＤコード：図２７及び図２８：ｄＣＫ＋１５ａ＋ＵＤＰコード：４ＪＬＫ。図３１：ｄＣＫ＋３６＋ＵＤＰコード：４Ｌ５Ｂ
実施例３の参考文献：
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８． Ｖａｎ Ｒｏｍｐａｙ，Ａ．Ｒ．；Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ，Ｍ．；Ｋａｒｌｓｓｏｎ，Ａ．，Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ａｎｄ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ Ａｎａｌｏｇｓ ｂｙ Ｈｕｍａｎ Ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ Ｋｉｎａｓｅｓ ａｎｄ Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ Ｋｉｎａｓｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２００３；ｐｐ１１９〜１３９。
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１０． Ｔａｒｖｅｒ，Ｊ．Ｅ．；Ｊｅｓｓｏｐ，Ｔ．Ｃ．；Ｃａｒｌｓｅｎ，Ｍ．；Ａｕｇｅｒｉ，Ｄ．Ｊ．；Ｆｕ，Ｑ．；Ｈｅａｌｙ，Ｊ．Ｐ．；Ｈｅｉｍ−Ｒｉｅｔｈｅｒ，Ａ．；Ｘｕ，Ａ．；Ｔａｙｌｏｒ，Ｊ．Ａ．；Ｓｈｅｎ，Ｍ．；Ｋｅｙｅｓ，Ｐ．Ｅ．；Ｋｉｍｂａｌｌ，Ｓ．Ｄ．；Ｙｕ，Ｘ．−Ｃ．；Ｍｉｒａｎｄａ，Ｍ．；Ｌｉｕ，Ｑ．；Ｓｗａｆｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ｃ．；Ｎｏｕｒａｌｄｅｅｎ，Ａ．；Ｗｉｌｓｏｎ，Ａ．Ｇ．Ｅ．；Ｒｉｎｃｈ，Ｒ．；Ｊｈａｖｅｒ，Ｋ．；Ｆｏｕｓｈｅｅ，Ａ．Ｍ．Ｄ．；Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｓ．；Ｏｒａｖｅｃｚ，Ｔ．；Ｃａｒｓｏｎ，Ｋ．Ｇ．，５−Ｆｌｕｏｒｏｃｙｔｏｓｉｎｅ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００９；ｐｐ６７８０〜６７８３。
１１． Ｙｕ，Ｘ．−Ｃ．；Ｍｉｒａｎｄａ，Ｍ．；Ｌｉｕ，Ｚ．；Ｐａｔｅｌ，Ｓ．；Ｎｇｕｙｅｎ，Ｎ．；Ｃａｒｓｏｎ，Ｋ．；Ｌｉｕ，Ｑ．；Ｓｗａｆｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ｃ．，Ｎｏｖｅｌ Ｐｏｔｅｎｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ Ｄｅｏｘｙｃｙｔｉｄｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｂｙ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ａｓｓａｙｓ．Ｊ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ２０１０，１５，７２〜７９。
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実施例４
Figure 2016530266
Figure 2016530266
Figure 2016530266
５.実施例５:
Figure 2016530266
Figure 2016530266
ＶＩＩ．実施形態
実施形態Ｐ１式（ｐＩ）の化合物：
Figure 2016530266
 またはその塩であって、Ｙ及びＺは、それぞれ独立してＣＲ８またはＮであって、Ｒ８はＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、ＣＦ３、１８ＦまたはＯＲ９であって、Ｒ９は独立して、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、ＣＤ３、ＣＤ２ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、
Figure 2016530266
 （ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２ＧまたはＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２Ｌであって、ｎは２〜２０であって、ＧはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、１８Ｆ、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｏ）、
Figure 2016530266
 であり、ＬはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 であって、Ｒ１及びＲ４は、独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＦ３、１８ＦまたはＯＲ１０であって、Ｒ１０は独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、ＣＤ３、ＣＤ２ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ（１８Ｆ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（１８Ｆ）ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）ＳＯ２ＣＨ３、
Figure 2016530266
 （ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２ＧまたはＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２Ｌであって、ｎは２〜２０であって、ＧはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、１８Ｆ、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４１８Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｏ）、
Figure 2016530266
 ＬはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ
Figure 2016530266
 であって、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＲ１１であって、Ｒ１１は独立してＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、ＣＤ３、ＣＤ２ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、またはＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３であって、Ｒ５は独立してＨ、Ｃ１〜Ｃ６ｎ−アルキル鎖、Ｃ１〜Ｃ６分岐アルキル鎖、ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＯＨ、（ＣＨ２）ｍＯＣＨ３、（ＣＨ２）ｍＦ、（ＣＨ２）ｍ１８Ｆ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２Ｃ６Ｈ４１８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ６Ｈ５、Ｃ６Ｈ４Ｆ、Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ、Ｃ６Ｈ４ＯＣＨ３、Ｃ６Ｈ４ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、Ｃ６Ｈ４ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、２−、３−または４−ピリジル、３−フルオロ−４−ピリジル、３−［１８Ｆ］フルオロ−４−ピリジルまたはＣＨ２ＣＨ２−２−、３−または４−ピリジルであって、ｍは、１〜６であって、ＸはＣＨ２、Ｏ、ＮＲ１２、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ２であって、Ｒ１２はＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であって、Ｒ６及びＲ７は独立してＨ、Ｄ、Ｆ、ＣＨ３またはＲ及びＳ ＣＨ３立体異性体であって、並びにＲ６及びＲ７は共にＣ３〜Ｃ６シクロアルキル基である。
実施形態Ｐ２。式（ｐＩＩ）の化合物
Figure 2016530266
 またはその塩であって、Ｙ及びＺはそれぞれ独立してＣＲ６またはＮであって、Ｒ６は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、ＣＦ３、１８ＦまたはＯＲ７であって、Ｒ７は独立してＣＨ３、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ １８ＦまたはＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、
Figure 2016530266
 であって、Ｒ１及びＲ４は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、１８ＦまたはＯＲ８であって、Ｒ８は独立してＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）ＳＯ２ＣＨ３、
Figure 2016530266
 （ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２ＧまたはＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２Ｋであって、ｎは、２〜２０であって、ＧはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、１８Ｆ、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｏ）、
Figure 2016530266
 であり、ＫはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 （ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２ＧまたはＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２Ｋであって、ｎは、２〜２０であって、ＧはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、１８Ｆ、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｐ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ（ｏ）、ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ（ｏ）、
Figure 2016530266
 であって、ＫはＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 であって、Ｒ２及びＲ３は、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＲ９であって、Ｒ９は独立してＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３またはＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３であって、Ｒ５は独立してＨ、Ｃ１〜Ｃ６ｎ−アルキル鎖、Ｃ１〜Ｃ６分岐アルキル鎖、ＣＨ２−Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＯＨ、（ＣＨ２）ｍＯＣＨ３、（ＣＨ２）ｍＦ、（ＣＨ２）ｍ １８Ｆ、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ６Ｈ５、Ｃ６Ｈ５、Ｃ６Ｈ４Ｆ、Ｃ６Ｈ４ １８Ｆ、Ｃ６Ｈ４ＯＣＨ３、Ｃ６Ｈ４ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、Ｃ６Ｈ４ＣＨ２ＣＨ２ １８Ｆ、２−、３−または４−ピリジル、３−フルオロ−４−ピリジル、３−［１８Ｆ］フルオロ−４−ピリジルまたはＣＨ２ＣＨ２−２−、３−または４−ピリジルであって、ｍは、１〜６であって、ＸはＯ、ＮＲ１０、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ２であって、Ｒ１０はＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７、ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であって、ＬはＣＨ２、Ｏ、ＮＲ１０、Ｓ、ＳＯまたはＳＯ２である。
実施形態Ｐ３。付属資料Ａ、付属資料Ｂまたは付属資料Ｃ（実施例１〜５）に示す式を有する化合物。
実施形態Ｐ４。実施形態Ｐ１〜Ｐ３のいずれか１つの化合物であって、該化合物がデオキシシチジンキナーゼポリペプチドと結合する。
実施形態Ｐ５。Ｐ１〜Ｐ４のいずれか１つの実施形態の化合物またはそれらの塩及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。
実施形態Ｐ６。実施形態Ｐ１〜Ｐ５のいずれか１つの化合物をデオキシシチジンキナーゼと接触させることを含む、デオキシシチジンキナーゼ（ｄＣＫ）活性を阻害する方法。
実施形態Ｐ７。有効量の実施形態Ｐ１からＰ５のいずれか１つの実施形態の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩及びチミジンを個体に投与することを含む個体における癌の治療方法であって、該化合物はチミジンと共に投与される。
実施形態Ｐ８。実施形態Ｐ７の方法であって、該癌は、白血病、リンパ腫、乳癌、卵巣癌、肺癌、膵癌、肝細胞癌、黒色腫、肉腫、頭頸部癌、グリオーム、グリア芽細胞腫または及びゲノムの不安定性及び／またはＤＮＡ損傷応答の活性化を特徴とする器官の組織に依存しない癌である。
実施形態Ｐ９。有効量の実施形態Ｐ１からＰ５のいずれか１つの実施形態の化合物、またはそれらの薬学的に許容可能な塩を個体に投与することを含む、その必要のある個体における免疫不全の治療方法。
実施形態Ｐ１０。Ｐ１〜Ｐ５のいずれか１つの実施形態の化合物を含むＰＥＴプローブ。
実施形態Ｐ１１。実施形態Ｐ１０の化合物を生体物質に接触させることと、ＰＥＴ画像化を用いて、生体物質中の化合物の局所濃度を決定することと、化合物の局所濃度を局所免疫反応または新生物組織の存在とを相関させることとを含む画像化方法。
実施形態Ｐ１２。実施形態Ｐ１１の方法であって、化合物を生体物質と接触させることは、任意の量の該化合物を動物またはヒトに投与することと、動物またはヒト中の化合物の局所濃度を動物またはヒトにおける局所免疫反応または新生物組織と相関させることとを含む。
実施形態Ｐ１３。実施形態Ｐ１２の方法であって、本方法は、化合物の局所濃度を使用して癌を診断することかつ／または癌治療を監視すること更に含む。
実施形態Ｐ１４。実施形態Ｐ１１の方法であって、動物またはヒトは、癌、自己免疫疾患、発育障害、ウイルス感染、細菌感染、寄生虫感染、感染、代謝性疾患及び炎症からなる群から選択される状態を有する。
実施形態Ｐ１５。実施形態Ｐ１１の方法であって、動物またはヒトは、リンパ節症、黒色腫、白血病及びグリオームからなる群から選択される状態を有する。
実施形態Ｐ１６。実施形態Ｐ１１の方法であって、動物またはヒトは、関節リウマチ、炎症性腸疾患、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病及びアテローム性動脈硬化症からなる群から選択される状態を有する。
実施形態Ｐ１７。実施形態Ｐ１７の方法であって、動物またはヒトは、癌免疫療法、免疫療法、インターフェロン療法、ワクチン接種、放射線治療、化学療法及び抗生物質療法からなる群から選択される療法を受けている。
実施形態Ｐ１８。腫瘍崩壊剤に対する耐性の予測方法であって、本方法は、Ｐ１〜Ｐ５実施形態のいずれか１つの化合物を新生物と接触させることと、ＰＥＴ撮像を用いて、新生物中の化合物の局所濃度を測定することと、化合物の局所濃度とベースライン値とを比較することと、ベースライン値よりも大幅に低い局所濃度と新生物の低ｄＣＫの発現とを相関させることと、新生物の低ｄＣＫ発現と腫瘍崩壊性ヌクレオシド類似体抵抗性とを相関させることとを含み、ベースライン値は、ｄＣＫを発現させる代表的新生細胞中の化合物の測定濃度、ｄＣＫが発現していない代表的新生細胞中の化合物の濃度かまたは重み付き平均に対応している。
実施形態Ｐ１９。実施形態Ｐ１８の方法であって、新生物はＴリンパ球系列のものである。
実施形態Ｐ２０。ＰＥＴ工程において化合物の使用を検査する方法であって、本方法は、（ａ）規定された位置の「コールド」フッ素１９原子を実施形態１〜５のいずれか１つの化合物に取り込むステップと、（ｂ）「コールド」フッ素１９原子を「ホット」フッ素１８原子に置き換えるステップと、（ｃ）ステップ（ｂ）の化合物を哺乳類へ投与するステップと、（ｄ）ＰＥＴイメージングにより、哺乳類の体内全体のステップ（ｂ）の化合物を検出するかつ／または定量化するステップとを含む。
実施形態Ｐ２１。Ｐ１〜Ｐ４のいずれか１つの実施形態の化合物であって、Ｒ６はメチルである。
実施形態Ｐ２２。Ｐ１〜Ｐ４及びＰ２１のいずれか１つの実施形態の化合物であって、Ｒ６は（Ｒ）立体化学体を有する炭素に結合している。
実施形態Ｐ２３。Ｐ１〜Ｐ４及びＰ２１〜Ｐ２２のいずれか１つの化合物であって、Ｒ５は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルである。
実施形態Ｐ２４。Ｐ１〜Ｐ４及びＰ２１〜Ｐ２３のいずれか１つの実施形態の化合物であって、Ｒ７は水素であり、（Ｒ）立体化学体を有する炭素に結合している。
実施形態Ｐ２５。Ｐ１〜Ｐ４及びＰ２１〜Ｐ２４のいずれか１つの実施形態の化合物であって、Ｒ９は−Ｏ（ＣＨ２）２ＮＨＳ（Ｏ）２ＣＨ３である。
実施形態１。次式を有する化合物であって、
Figure 2016530266
 式中、ＹはＣ（Ｒ８）またはＮであり、ＺはＣ（Ｒ９）またはＮであり、ＸはＣＨ２、Ｏ、Ｎ（Ｒ１０）、Ｓ、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり、Ｒ１は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１Ｒ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ２は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ３は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ４Ａ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ５は、独立して水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換のシクロアルキル基を形成し、Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であって；Ｒ７はＨ、Ｄ、Ｆまたは−ＣＨ３であり、Ｒ８は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ８Ａ、−ＯＲ８Ａ、−ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８Ｒ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＯＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ９は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ９Ａ、−ＯＲ９Ａ、−ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９Ｒ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＯＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＮＲ９ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ９ＡＲ９Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ１０はＨ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ８Ａ、Ｒ８Ｂ、Ｒ９Ａ及びＲ９Ｂは独立して水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；及びｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ８及びｎ９は独立して１、２、または３である。
実施形態２。Ｒ２及びＲ３は水素である、実施形態１に記載の化合物。
実施形態３。実施形態１〜２のいずれか１つの化合物であって、Ｒ７は水素である。
実施形態４。次式を有する、実施形態３に記載の化合物：
Figure 2016530266
実施形態５。実施形態１〜４のいずれか１つの化合物であって、Ｒ５は置換または非置換アルキル基である。
実施形態６。実施形態１〜４のいずれか１つの化合物であって、Ｒ５は非置換アルキル基である。
実施形態７。実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物であって、Ｒ５は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基である。
実施形態８。実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物であって、Ｒ５はメチル基である。
実施形態９。実施形態１〜８のいずれか１つに記載の化合物であって、Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基である。
実施形態１０。実施形態１〜８のいずれか一つに記載の化合物であって、Ｒ６は、メチル基、エチル基またはプロピル基である。
実施形態１１。実施形態１〜２０のいずれかに１つに記載の化合物であって、Ｒ６はメチル基である。
実施形態１２。実施形態１〜１１のいずれか一つに記載の化合物であって、Ｒ６は（Ｒ）絶対立体化学配置を有する炭素に結合している。
実施形態１３。実施形態１〜１１のいずれか一つに記載の化合物であって、Ｒ６は（Ｓ）絶対立体化学配置を有する炭素に結合している。
実施形態１４。実施形態１〜１３のいずれか一つに記載の化合物であって、Ｒ４は水素またはハロゲンである。
実施形態１５。実施形態１〜１４のいずれか１つの化合物であって、Ｒ１は水素、ハロゲン、−ＯＲ１Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
実施形態１６。実施形態１〜１５のいずれか１つの化合物であって、Ｒ１は−ＯＲ１Ａ（Ｒ１Ａは水素、置換若しくは非置換アルキル基、または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）である。
実施形態１７。実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物であって、Ｒ１Ａは置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である。
実施形態１８。実施形態１〜１７のいずれか１つの化合物であって、Ｒ１Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）３Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）ＳＯ２ＣＨ３、
Figure 2016530266
 −（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ａまたは−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ｂ、（式中ｎは、２〜２０）であって；
Ｇ１ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、−Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、
Figure 2016530266
 であり；Ｇ１ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 である。
実施形態１９。実施形態１〜１７のいずれか１つの化合物であって、Ｒ１Ａは−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５である）である。
実施形態２０。実施形態１〜１９のいずれか１つの化合物であって、ＹはＣ（Ｒ８）である。
実施形態２１。実施形態１〜１９のいずれか１つの化合物であって、ＹはＮである。
実施形態２２。実施形態１から２１のいずれか１つの化合物であって、Ｒ８は水素、ハロゲン、−ＯＲ８Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である。
実施形態２３。実施形態１〜２２のいずれか１つの化合物であって、Ｒ８は−ＯＲ８Ａ（Ｒ１Ａは水素、置換または非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である）である。
実施形態２４。実施形態１〜２３のいずれか１つの化合物であって、Ｒ８Ａは置換または非置換アルキル基または置換または非置換ヘテロアルキル基である。
実施形態２５。実施形態１〜２４のいずれか１つの化合物であって、Ｒ８Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、
Figure 2016530266
 −（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ａまたは−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ｂ（式中ｎは、２〜２０）であって；Ｇ８ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ，ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ
Figure 2016530266
 であり；Ｇ８ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
Figure 2016530266
 である。
実施形態２６。実施形態１〜２４のいずれか１つに記載の化合物であって、Ｒ８Ａは（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５）である。
実施形態２７。実施形態１〜２６のいずれか１つの化合物であって、ＺはＣ（Ｒ９）である。
実施形態２８。実施形態１〜２７のいずれか１つの化合物であって、Ｒ９は独立して水素である。
実施形態２９。実施形態１〜２７のいずれか１つの化合物であって、ＺはＮである。
実施形態３０。実施形態１〜２９のいずれか１つの化合物であって、ＸはＳである。
実施形態３１。次式を有する実施形態１〜３０のいずれか１つの化合物：
Figure 2016530266
実施形態３２。実施形態３１の化合物であって、Ｒ１はＯＲ１Ａであって、Ｒ１Ａは−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３であって、ｎは２〜５であって、Ｒ４は水素またはハロゲンであり；Ｒ５はメチルまたはプロピルであり；Ｒ６はメチルであり；Ｒ８は−ＯＲ８Ａであって、Ｒ８Ａは−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ，または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５）である。
実施形態３３。実施形態１〜３２のいずれか一つの化合物及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬配合物。
実施形態３４。癌の治療方法を、それを必要とする対象において行う方法であって、本方法は、治療有効量の実施形態１〜３２のいずれか一つの化合物を対象に投与することを含む。
実施形態３５。実施形態３４に記載の方法であって、癌は、白血病、リンパ腫、卵巣癌、膵癌、肺癌、グリア芽細胞腫、肝細胞癌、トリプルネガティブ乳癌、前立腺癌または頭頸部癌である。
実施形態３６。実施形態３４の方法であって、癌は白血病またはリンパ腫である。
実施形態３７。実施形態３４の方法であって、癌は、卵巣癌、膵癌、肺癌、グリア芽細胞腫、肝細胞癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、前立腺癌または頭頸部癌である。
実施形態３８。デオキシシチジンキナーゼの阻害方法であって、デオキシシチジンキナーゼと治療有効量の実施形態１〜３４のいずれか一つの化合物とを接触させることを含む方法であって、これによって、デオキシシチジンキナーゼを阻害させる方法。
実施形態３９接触させることは、インビトロで実施する、実施形態３８の方法。

Claims (39)

  1. 次式を有する化合物であって：
    Figure 2016530266
     式中、
    ＹはＣ（Ｒ８）またはＮであって；
    ＺはＣ（Ｒ９）またはＮであって；
    ＸはＣＨ２、Ｏ、Ｎ（Ｒ１０）、Ｓ、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であって；
    Ｒ１は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ１Ａ、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１Ｒ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＯＲ１Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ１ＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＯＮＲ１ＡＲ１Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ１ＡＲ１Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ２は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ２Ａ、−ＯＲ２Ａ、−ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２Ｒ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＯＲ２Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ２ＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＯＮＲ２ＡＲ２Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ２ＡＲ２Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ３は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ３Ａ、−ＯＲ３Ａ、−ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３Ｒ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＯＲ３Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ３ＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＯＮＲ３ＡＲ３Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ３ＡＲ３Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ４は、水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ４Ａ、−ＯＲ４Ａ、−ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４Ｒ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＯＲ４Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ４ＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＯＮＲ４ＡＲ４Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ４ＡＲ４Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ５は、独立して水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ５Ａ、−ＯＲ５Ａ、−ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５Ｒ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＯＲ５Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ５ＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＯＮＲ５ＡＲ５Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ５ＡＲ５Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；Ｒ５及びＲ６は、任意により組み合わせて、置換若しくは非置換のシクロアルキル基を形成し、
    Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基であって；
    Ｒ７はＨ、Ｄ、Ｆまたは−ＣＨ３であり、
    Ｒ８は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ８Ａ、−ＯＲ８Ａ、−ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ８Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８Ｒ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＯＲ８Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ８ＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ８ＡＲ８Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ８ＡＲ８Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ９は水素、ハロゲン、−Ｎ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ３、−ＣＢｒ３、−ＣＩ３、−ＣＮ、−ＣＯＲ９Ａ、−ＯＲ９Ａ、−ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＯ２、−ＳＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９Ｒ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＯＲ９Ａ、−Ｓ（Ｏ）ｎ９ＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＮＲ９ＡＲ８Ｂ、−ＯＮＲ９ＡＲ９Ｂ、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＲ９ＡＲ９Ｂ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり；
    Ｒ１０はＨ、−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＨ２Ｃ６Ｈ５であり；
    Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂ、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ３Ａ、Ｒ３Ｂ、Ｒ４Ａ、Ｒ４Ｂ、Ｒ５Ａ、Ｒ５Ｂ、Ｒ８Ａ、Ｒ８Ｂ、Ｒ９Ａ、及びＲ９Ｂは、独立して水素、オキソ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ２、−ＮＯ２、−ＳＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｃｌ、−Ｓ（Ｏ）３Ｈ、−Ｓ（Ｏ）４Ｈ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ２、−ＮＨＮＨ２、−ＯＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨＮＨ２、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ２、−ＮＨＳ（Ｏ）２Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｈ、−ＮＨＣ（Ｏ）−ＯＨ、−ＮＨＯＨ、−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基であり、
    ｎ１、ｎ２、ｎ３、ｎ４、ｎ５、ｎ８及びｎ９は独立して１，２，または３である、
    前記化合物。
  2. Ｒ２及びＲ３は水素である、請求項１に記載の化合物。
  3. Ｒ７は水素である、請求項１〜２のいずれか一項に記載の化合物。
  4. 次式を有する、請求項３に記載の化合物：
    Figure 2016530266
  5. Ｒ５は置換または非置換アルキル基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
  6. Ｒ５は非置換アルキル基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
  7. Ｒ５は非置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
  8. Ｒ５はメチル基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
  9. Ｒ６は非置換Ｃ１〜Ｃ４アルキル基である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
  10. Ｒ６は、メチル基、エチル基またはプロピル基である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
  11. Ｒ６はメチル基である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
  12. Ｒ６は（Ｒ）絶対立体化学配置を有する炭素に結合している、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
  13. Ｒ６は（Ｓ）絶対立体化学配置を有する炭素に結合している、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
  14. Ｒ４は水素またはハロゲンである、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
  15. Ｒ１は水素、ハロゲン、−ＯＲ１Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは、非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
  16. Ｒ１は−ＯＲ１Ａであって、Ｒ１Ａは、水素、置換若しくは非置換アルキル基または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。
  17. Ｒ１Ａは、置換または非置換アルキル基または置換または非置換ヘテロアルキル基である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
  18. 請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物であって、Ｒ１Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ３Ｈ７、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｆ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）３Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−（ＣＨ２）２ＣＨ（Ｃｌ）ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｃｌ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）３Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）ＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ）ＳＯ２ＣＨ３、
    Figure 2016530266
     、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ａまたは−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ１Ｂ、
    式中、
    ｎは、２〜２０であって、
    Ｇ１ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、−Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、
    Figure 2016530266
     であり；
    Ｇ１ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
    Figure 2016530266
     である、前記化合物。
  19. Ｒ１ＡはＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３であって、式中、ｎは２〜５である、
    請求項１〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
  20. ＹはＣ（Ｒ８）である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
  21. ＹはＮである、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
  22. Ｒ８は水素、ハロゲン、−ＯＲ８Ａ、置換若しくは非置換アルキル基、置換若しくは非置換ヘテロアルキル基、置換若しくは非置換シクロアルキル基、置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル基、置換若しくは非置換アリール基、または置換若しくは非置換ヘテロアリール基である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物。
  23. Ｒ８は−ＯＲ８Ａであって、Ｒ１Ａは、水素、置換若しくは非置換アルキル基、または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
  24. Ｒ８Ａは、置換若しくは非置換アルキル基、または置換若しくは非置換ヘテロアルキル基である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
  25. 請求項１〜２４のいずれか一項に記載の化合物であって、
    Ｒ８Ａは−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−ＣＤ３、−ＣＤ２ＣＤ３、−（ＣＨ２）２ＯＨ、−（ＣＨ２ＣＨ２）３ＯＨ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２ＯＨ、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、−（ＣＨ２）２Ｃ（ＣＨ３）２Ｆ、
    Figure 2016530266
     、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ａまたは−ＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ２ＣＨ２−Ｇ８Ｂ（式中ｎは、２〜２０）であって；
    Ｇ８ＡはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、Ｆ、Ｃｌ、Ｎ３、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ，ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４ＮＯ２、−ＮＨＣＨ２Ｃ６Ｈ４Ｆ、
    Figure 2016530266
     であって；
    Ｇ８ＢはＨ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＯＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、
    Figure 2016530266
     である、前記化合物。
  26. Ｒ８Ａは（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５）である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の化合物。
  27. ＺはＣ（Ｒ９）である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の化合物。
  28. Ｒ９は独立して水素である、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
  29. ＺはＮである、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
  30. ＸはＳである、１〜２９のいずれか一項に記載の化合物。
  31. 次式を有する１〜３０のいずれか一項に記載の化合物：
    Figure 2016530266
  32. 請求項１〜３１に記載の化合物であって、
    Ｒ１はＯＲ１Ａであって、Ｒ１Ａは−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２Ｆ、−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３であって、ｎは２〜５であって、
    Ｒ４は水素またはハロゲンであり、
    Ｒ５はメチルまたはプロピルであり、
    Ｒ６はメチルであり、
    Ｒ８は−ＯＲ８Ａであって、Ｒ８Ａは−（ＣＨ２）２ＮＨＳＯ２ＣＨ３、−（ＣＨ２）２Ｆ、（ＣＨ２）３Ｆ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＦ，または−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣＨ３（式中、ｎは２〜５である）である、前記化合物。
  33. 請求項１〜３４のいずれか一項に記載の化合物及び薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬配合物。
  34. 癌の治療を、それを必要とする対象において行う方法であって、治療有効量の請求項１〜３２のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与することを含む、前記方法。
  35. 前記癌は、白血病、リンパ腫、卵巣癌、膵癌、肺癌、グリア芽細胞腫、肝細胞癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、前立腺癌または頭頸部癌である、請求項３４に記載の方法。
  36. 前記癌は、白血病またはリンパ腫である、請求項３４に記載の方法。
  37. 前記癌は、卵巣癌、膵癌、肺癌、グリア芽細胞腫、肝細胞癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌、前立腺癌または頭頸部癌である、請求項３４に記載の方法。
  38. デオキシシチジンキナーゼの阻害方法であって、デオキシシチジンキナーゼを治療有効量の請求項１〜３４のいずれか一項に記載の化合物と接触させることを含み、これによって、前記デオキシシチジンキナーゼを阻害させる、前記方法。
  39. 前記接触はインビトロで行われる、請求項３８に記載の方法。
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