JP2016512045A5 - - Google Patents

Claims (11)

1. 核酸の増幅方法であって、
   （ｉ）標的核酸を含有する細胞試料と接触させた含浸化学物質を含む固体支持体を反応容器に移す工程と、
   （ｉｉ）固体支持体上の核酸を、試料から核酸を溶出させるのに十分な高ｐＨ溶液とインキュベートする工程と、
   （ｉｉｉ）核酸を増幅して、増幅核酸を生じさせる工程と、
   （ｉｖ）増幅核酸を定量する工程と
   を含む方法。
2. 溶出した核酸が最小限の体積で含まれており、溶出した化学物質その他の細胞成分によって後段の分析手順が阻害されない、請求項１記載の方法。
3. 溶出方法が、増幅工程の前に、中和溶液を添加することをさらに含む、請求項１又は請求項２記載の方法。
4. 増幅方法が、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応、等温増幅又は定量的ポリメラーゼ連鎖反応を含む、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
5. 溶出した核酸がＤＮＡ種又はＲＮＡ種を含む、請求項３記載の方法。
6. 核酸が、ＲＮａｓｅ阻害剤及びα−シクロデキストリン存在下で増幅され、増幅が損失又は阻害を伴わずに効率的に起こる、請求項５記載の方法。
7. 核酸増幅試薬溶液は、ポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸（ｄＮＴＰ）、反応緩衝液及び１種以上のプライマーを含み、プライマーが、場合により色素で標識されている、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
8. 固体支持体の組成物は、チオシアン酸グアニジン、塩化グアニジン、塩酸グアニジン、ドデシル硫酸ナトリウム、尿酸、ＥＤＴＡ又はＴｒｉｓ緩衝液を含む、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
9. 工程（ｉ）の前に固体支持体が水溶液で洗浄される、請求項１乃至請求項８のいずれか１項記載の方法。
10. 核酸がＤＮＡであって、当該方法が、さらに、
    （ｖ）ショートタンデムリピート（ＳＴＲ）プロファイリングを用いてＳＴＲプロファイルを作成することを含む、請求項１乃至請求項９のいずれか１項記載の方法。
11. 核酸が、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｐｉＲＮＡ又はｓｉＲＮＡであり、当該方法が、さらに、遺伝子発現分析を含む、請求項１乃至請求項１０のいずれか１項記載の方法。