JP2016202477A

JP2016202477A - プリオン不活化方法

Info

Publication number: JP2016202477A
Application number: JP2015086599A
Authority: JP
Inventors: 章一作道; Shoichi Sakumichi; 西山　普賢; Fuken Nishiyama; 普賢西山; 毅鹿島; Takeshi Kajima
Original assignee: MEDIATE KK; University of the Ryukyus NUC
Current assignee: MEDIATE KK; University of the Ryukyus NUC
Priority date: 2015-04-21
Filing date: 2015-04-21
Publication date: 2016-12-08
Anticipated expiration: 2035-04-21
Also published as: JP6567859B2

Abstract

【課題】熱に弱い物体や細い管状の物体が消毒対象となる場合でも、確実にプリオンを不活化できるようにする。
【解決手段】消毒対象物を入れた消毒庫１にホルムアルデヒド溶液を導入した後に、消毒庫１の庫内を高真空状態に移行させ、高真空状態でホルムアルデヒド溶液を気化させることによって消毒庫１の庫内にホルムアルデヒドガスを充満させる。この後、消毒庫１に空気を送り込んで消毒庫１の庫内を高真空状態から低真空状態に移行させ、低真空状態を所定時間維持する。消毒庫１の庫内のホルムアルデヒドガスは、低真空状態への移行のために送り込まれた空気により庫内で活発に流動して、プリオンの不活化効果が促進される。
【選択図】図１

Description

この発明は、物体に付着したプリオンを不活化するための方法に関する。

プリオン病は、プリオン（proteinaceous infectious particles）と呼ばれる蛋白質性の感染因子により引き起こされる致死性の神経変性疾患である。発症のメカニズムはいまだ明らかではないが、正常型プリオン蛋白質（ＰｒＰ^ｃ）から変性した異常型プリオン蛋白質（ＰｒＰ^Ｓｃ）が疾患の主要原因であるという説が有力である。

プリオンは種々の病原体の中でも最も不活化が困難な病原体であり、手術器具や脳内電極などを介した二次感染の事例も報告されていることから、プリオンを確実に不活化することが重要課題となっている。医療用器具に関して厚生労働省が推奨しているのは、３％のドレシル硫酸ナトリウム溶液により１００°Ｃ以上で３分間以上煮沸する方法（ＳＤＳ処理）であり、このＳＤＳ処理を実用化する方法も提案されている（特許文献１を参照。）。

特開２００７−１７５１０７号公報

ＳＤＳ処理は、１００°Ｃ以上の溶液での３分以上の煮沸処理を必要とするため、熱に弱い器具に適用するのは困難である。また煮沸の際には、消毒対象物のすべての面を上記の溶液に接触させる必要があるが、細い管状の器具が消毒対象となる場合には、溶液を管内全体に入り込ませるのが困難で、消毒が不十分になるおそれがある。

この発明は上記の問題に着目し、低い温度で気化させることが可能なホルムアルデヒドと消毒庫内の気圧の大幅な変化との相乗作用によって、熱に弱い物体や細い管状の物体が消毒対象となる場合でも、確実にプリオンを不活化できるようにすることを課題とする。

この発明による不活化方法は、プリオンが付着した消毒対象物を消毒庫に入れた後に、以下の第１〜第５の工程を実行するものである。第１工程では、前記消毒対象物を入れた消毒庫にホルムアルデヒド溶液を導入する。第２工程では、消毒庫の庫内を高真空状態に移行させる。第３工程では、高真空状態下でホルムアルデヒド溶液を気化させることによって前記消毒庫の庫内にホルムアルデヒドガスを充満させる。第４工程では、前記消毒庫に空気を送り込んで消毒庫の庫内を高真空状態から低真空状態に移行させる。第５工程では、前記低真空状態を所定時間維持する。

上記の方法によれば、高真空状態になった消毒庫の庫内でホルムアルデヒドガスを発生させた後に、庫内に空気を送り込んで庫内を高真空状態から低真空状態に移行させたとき、この送り込まれた空気により、庫内に充満するホルムアルデヒドガスが活発に流動し、庫内の隅々にまで行き渡る。また、細い管状の対象物を消毒する場合でも、その管の内部にくまなくホルムアルデヒドガスを入り込ませることが可能である。

上記方法の好ましい一実施態様では、前記第１工程から第５工程までを１サイクルとして、あらかじめ定めた複数サイクルを連続して実行する。このように複数サイクルの不活化処理を行うことによって、プリオンを完全に不活化することができる。

より好ましい実施態様では、複数サイクルの第１工程〜第５工程を実行した後に、消毒庫内のホルムアルデヒドガスを分解する第１浄化工程と、浄化後の前記消毒庫に導入する溶液を中和剤溶液に変更して前記第１工程〜第５工程を少なくとも１サイクル行う中和工程と、前記中和工程により消毒庫内で発生した中和剤ガスを分解する第２浄化工程とを実行する。このようにすれば、ホルムアルデヒドガスを無害化してから消毒庫を開けることができる。

さらに好ましい実施態様では、前記複数サイクルの第１工程〜第５工程から前記第２浄化工程までを１サイクルとして、あらかじめ定められた複数サイクルを連続して実行する。このようにすれば、プリオンを完全に不活化することができるとともに、ホルムアルデヒドを無害化してから消毒庫を開けることができる。

この発明によれば、高真空状態の消毒庫の庫内でホルムアルデヒドガスを充満させた後に、庫内に空気を送り込んで庫内を高真空状態から低真空状態に移行させることにより、ホルムアルデヒドガスを庫内で活発に流動させることができるので、細い管状の物体が消毒対象となる場合でも、その管の内部にくまなくホルムアルデヒドガスが入り込み、消毒対象物をまんべんなく消毒することができる。また、沸点が低いホルムアルデヒドを使用するので、消毒庫の庫内を高温にする必要がなく、熱に弱い物体でも、支障なく消毒することができる。

この発明によるプリオン不活化方法に用いられる消毒装置の概略構成を示す説明図である。上記の消毒装置で実行される処理の手順を示すフローチャートである。プリオンの不活化を検証する実験１の結果を示す図である。プリオンの不活化を検証する実験２の結果を示す図である。プリオンの不活化を検証する実験２の結果を示す図である。

図１は、この発明によるプリオン不活化方法に用いられる消毒装置の構成例を示すものである。この実施例の消毒装置は、前面に密封可能な扉（図示せず。）が設けられた消毒庫１を有し、適所に気体導出口（図１では点Ａにより示す。）、気体導入口（図１では点Ｂにより示す。）、一対の溶液導入口（図１では点Ｃ，Ｄで示す。）が設けられている。消毒庫１の内部には、２個の気化皿１０を備える気化装置１１や庫内の気圧と温度を計測するための圧力センサ１２や温度センサ１３などが設けられている。

消毒庫１の各薬液導入口Ｃ，Ｄには、それぞれ薬液導入用の液管３，４を挿通させている。各液管３，４は、電磁弁３１，４１やポンプ３２，４２を介して溶液タンク３０，４０に連結されている。薬液導入口Ｃに対応する溶液タンク３０にはホルムアルデヒド溶液が充填され、薬液導入口Ｄに対応する溶液タンク４０には中和剤となるアンモニア溶液が充填されている。

消毒庫１の気体導出口Ａと気体導入口Ｂとの間にはガス管路２が接続され、その管路途中には、気体導出口Ａから気体導入口Ｂに向けて、真空ポンプ５，分解装置６，冷却装置７が順に設けられている。ガス管路２の冷却装置７と気体導入口Ｂとの間には、排気管２１と吸気管２２とを連通させている。ガス管路２の両端部には電磁弁８１，８２が、排気管２１と吸気管２２には電磁弁８３，８４が、それぞれ設けられている。

分解装置６は、酸化分解用の触媒や触媒を活性化させるための予熱器を備え、ガス管路２を通過するホルムアルデヒドガスやアンモニアガスに触媒を作用させて酸化反応を促す。この分解装置６を通過したホルムアルデヒドガスは水蒸気と炭酸ガスとに分解され、分解装置６を通過したアンモニアガスは水蒸気と窒素ガスとに分解される。冷却装置７は、分解処理後のガスを冷却する。

図１には示していないが、この実施例の消毒装置は、上記した構成のほかに、設定や始動指示などの操作を受け付ける操作部、実行中の工程の確認画面を表示する表示部、消毒庫１の庫内を温めるためのヒーター、装置内の各部の動作を制御する制御装置などを備えている。

制御装置は、真空ポンプ５の動作や電磁弁８１〜８４の開閉動作を制御することにより、消毒庫１の庫内を低真空状態と高真空状態とに切り換える。具体的には、ガス管路２の気体導出口Ａの側の電磁弁８１と排気管２１の電磁弁８３とを開放して真空ポンプ５を作動させ、消毒庫１内の空気を排気管２１より外部に排出することにより、庫内が大気圧状態から約−１０ｋＰａの低真空状態に移行し、さらに低真空状態下で排気を行うことにより、庫内が約−８０ｋＰａの高真空状態に移行する。その後、真空ポンプ５を停止させて、ガス管路２の気体導出口Ａの側の電磁弁８１と排気管２１の電磁弁８３とを閉じると共に、気体導入口Ｂの側の電磁弁８２と吸気管２２の電磁弁８４とを開き、吸気管２２より消毒庫１に外気を取り込むことにより、庫内が高真空状態から低真空状態に戻る。

上記構成の消毒装置は、消毒庫１の庫内を低真空状態と高真空状態とに切り換えながら、庫内で殺菌機能を有するホルムアルデヒドガスを発生させて充満させることによって、消毒対象物に付着しているプリオンを不活化するものである。

図２は、プリオンが付着している物体（手術用具など）を対象に、上記構成の消毒装置を用いた消毒処理を行う場合の処理手順を示すもので、装置の立ち上げ直後の暖機運転（ステップＳ１）、ホルムアルデヒドガスによる不活化処理（ステップＳ２）、ホルムアルデヒドガスの浄化処理（ステップＳ３）、アンモニアガスを用いた中和処理（ステップＳ４）、アンモニアガスの浄化処理（ステップＳ５）を順に実行するものである。図２では、特に重要な不活化処理のステップＳ２と中和処理のステップＳ４とについて、詳細な手順を表している。以下、図２に示す流れに沿って、消毒処理の手順を詳細に説明する。

まず、作業者は、消毒庫１の扉を開けて消毒対象物を消毒庫１内に入れ、扉を閉じて消毒庫１を密封状態にし、始動操作を行う。この始動操作によりステップＳ１の暖機運転が開始される。暖機運転では、低真空状態と高真空状態とが短い時間間隔で交互に切り替えられ、この処理が所定回数繰り返される。この間に図示しない加温用のヒーターによって、消毒庫１の庫内の温度が５０°Ｃに設定される。

暖機運転は低真空状態で終了し、ガス管路２、排気管２１、および吸気管２２の電磁弁８１〜８４が閉じられ、真空ポンプ５も停止した状態で、つぎの不活化処理（ステップＳ２）に進む。

この実施例の不活化処理は、５段階の工程（ステップＳ２_Ａ，Ｓ２_Ｂ，Ｓ２_Ｃ，Ｓ２_Ｄ，Ｓ２_Ｅとする。）を含む処理サイクルを、あらかじめ定められた回数（Ｎ回とする。）繰り返すものである。この処理サイクルの最初のステップＳ２_Ａでは、暖機運転または前回のサイクルから引き継がれた低真空状態下において、液管３の電磁弁３１を開き、溶液タンク３０内のホルムアルデヒド溶液をポンプ３２により吸い上げて、消毒庫１に導入する。導入されたホルムアルデヒド溶液は２個の気化皿１０のうちの第１の気化皿１０に注がれる。

つぎのステップＳ２_Ｂでは、ガス管路２の気体導出口Ａの側の電磁弁８１および排気管２１の電磁弁８３を開放して真空ポンプ５を動かすことにより、消毒庫１の庫内が低真空状態から高真空状態に移行する。圧力センサ１２により庫内の気圧が−８０ｋＰａに達したことが検出されると、開放されていた電磁弁８１，８３が閉じられ、真空ポンプ５の動作を停止させる。

ステップＳ２_Ｃでは、高真空状態の庫内で気化装置１１の内蔵ヒーターにより気化皿１０を暖め、気化皿１０のホルムアルデヒドを気化させる。ガス管路２、排気管２１、および吸気管２２の電磁弁８１〜８４は全て閉じられており、気化により生じたホルムアルデヒドガスは高真空状態の庫内に充満した状態となる。

高真空状態を所定時間継続させた後は、ステップＳ２_Ｄへ進み、ガス管路２の気体導入口Ｂの側の電磁弁８２および吸気管２２の電磁弁８４を開放することによって、消毒庫１に外部から空気を取り込み、消毒庫１の庫内を高真空状態から低真空状態に移行させる。庫内が低真空状態に戻ると、ステップＳ２_Ｅへ進み、開放されていた電磁弁８２，８４を閉じて低真空状態を所定時間維持する。このときには気体導出口Ａの側の電磁弁８１や排気管２１の電磁弁８３も閉じており、真空ポンプ５は動作を停止しているので、ホルムアルデヒドガスは消毒庫１の庫内に閉じ込められ、気体導入口Ｂから庫内に入った空気と混ぜ合わせられる。

この実施例では、上記ステップＳ２_ＡからステップＳ２_Ｅまでの１サイクルを、約１５分かけて実施するようにしている。Ｎ回目のサイクルの処理が終了すると、ステップＳ２_Ｆが「ＹＥＳ」となり、不活化処理を終了する。

なお、ステップＳ２_Ａの低真空状態下でホルムアルデヒド溶液の導入を行っているのは、高圧環境下でホルムアルデヒド溶液を消毒庫１に導入するのが困難なためであるが、その結果、つぎのステップＳ２_Ｂで低真空状態から高真空状態に移行させる間に、気化皿１０内のホルムアルデヒド溶液の一部が気化してガス管路２に流出する可能性がある。しかし、ガス管路２に入ったホルムアルデヒドガスは、分解装置６により無害化されて外気に排出されるので、周囲の環境に影響が及ぶおそれはない。

つぎのステップＳ３のホルムアルデヒドガスの浄化処理では、ガス管路２の両端部の電磁弁８１，８２を開放する一方で、排気管２１および吸気管２２の各電磁弁８３，８４を閉じ、真空ポンプ５を動かすことによって、消毒庫１とガス管路２との間で気体を循環させる。気体中に含まれるホルムアルデヒドガスは分解装置６を通過する間に水蒸気と炭酸ガスとに分解されて無害化される。

ステップＳ３の詳細な手順は示していないが、浄化処理が開始されてからしばらくの間は、不活化処理の終了時の低真空状態が維持され、その後、高真空状態と低真空状態とが複数回切り替えられる。なお、浄化処理では真空ポンプ５が常時動いているので、低真空状態下の気圧は−１０ｋＰａよりやや低くなる。

つぎのステップＳ４のアンモニアガスによる中和処理は低真空状態下で開始される。最初のステップＳ４_Ａでは、全ての電磁弁８１〜８４を閉じ、真空ポンプ５の動作も停止させる一方で、液管４の電磁弁４１を開放し、溶液タンク４０内のアンモニア溶液をポンプ４２により吸い上げて、消毒庫１に導入する。導入されたアンモニア溶液は２個の気化皿１０のうちの第２の気化皿１０に注がれる。つぎのステップＳ４_Ｂでは、庫内の低真空状態を所定時間維持し、気化装置１１の内蔵ヒーターにより気化皿１０を温めることによりアンモニア溶液を気化させる。

この後、再びアンモニア溶液を導入し（ステップＳ４_Ｃ）、以下、不活化処理のステップＳ２_Ａ〜Ｓ２_Ｅと同様の手順の処理を進行させる。すなわち、消毒庫１の庫内を低真空状態から高真空状態に移行させ（ステップＳ４_Ｄ）、その高真空状態を所定時間維持してアンモニア溶液を気化し（ステップＳ４_Ｅ）、その後に庫内を高真空状態から低真空状態に戻し（ステップＳ４_Ｆ）、低真空状態を所定時間維持する（ステップＳ４_Ｇ）。ステップＳ４_ＣからＳ４_Ｇまでの処理も、１サイクルを約１５分として、あらかじめ定められた回数（Ｍ回とする。）繰り返される。

つぎのステップＳ５のアンモニアガスの浄化処理では、ガス管路２の両端部の電磁弁８１，８２を開放する一方で、排気管２１および吸気管２２の電磁弁８３，８４を閉じ、真空ポンプ５を動かすことによって、消毒庫１とガス管路２との間で気体を循環させる。気体中に含まれるアンモニアガスは分解装置６を通過する間に水蒸気と窒素ガスとに分解され、無害化される。

上記のとおり、この実施例の不活化処理では、消毒庫１にホルムアルデヒド溶液を導入した後に、消毒庫１の庫内を高真空状態にすることにより庫内にホルムアルデヒドガスを充満させ、その後に消毒庫１に外部から消毒庫１に空気を送り込んで庫内を高真空状態から低真空状態に移行させる。高真空状態下で気化したホルムアルデヒドガスは、低真空状態への移行の間に送り込まれる空気と混合しながら庫内で活発に流動するので、ホルムアルデヒドガスを庫内の隅々にまで行き渡らせることができる。また、細い管状の物体が消毒対象となる場合でも、管の内部にくまなくホルムアルデヒドガスを入り込ませることが可能である。

なお、不活化処理における処理サイクルの回数Ｎおよび中和処理における処理サイクルの回数Ｍは、消毒対象物の種類や消毒庫の庫内の体積などに応じて、適宜、変更する。また、１サイクルの実行時間を上記実施例より長くし、各処理サイクルの回数Ｍ，Ｎを「１」に設定してもよい。

さらに、望ましい実施態様においては、不活化処理のステップＳ２からアンモニアの浄化処理のステップＳ５を１サイクルとし、これを複数サイクル連続して実行するものである。

つぎに、上記図２に示した手順に沿った消毒処理によってプリオンが不活化されることを確認した検証実験について、説明する。

＜実験１＞
スクレイピープリオン感染マウスの脳組織の１０％ホモジネート（以下、「基礎サンプル」という。）をカバーグラスに滴下して乾燥させた後、当該カバーガラスをプロセスチャレンジデバイス（ＰＣＤ）と呼ばれる実験器具の内部に入れた。この実験器具ごと図１に示した構成の消毒装置の消毒庫１に入れ、消毒庫１の前面扉を閉じて密閉した後に、図２に示した手順に基づき消毒処理を開始した。

この消毒処理では、図２に示した不活化処理のステップＳ２_Ａ〜Ｓ２_Ｅの実行回数Ｎを１２回、中和処理のステップＳ４_Ｃ〜Ｓ４_Ｇの実行回数Ｍを２回とした。また、ステップＳ２_Ａ〜Ｓ２_Ｅの１サイクルの時間を１８０分、不活化後の浄化処理（ステップＳ３）の時間を３５分、中和処理（ステップＳ４）の時間を５０分、中和後の浄化処理（ステップＳ５）の時間を４５分として、図２に示した手順全体（ステップＳ１〜Ｓ５）を４サイクル連続して実行した。

上記の消毒処理の完了後、消毒装置の消毒庫１から実験器具を取り出して、カバーガラスの基礎サンプルを水で回収し、その一部に正常型プリオン蛋白質を分解する機能を持つプロティナーゼＫを添加した。以下、消毒後にプロティナーゼＫを加えた基礎サンプルをＰＫ（＋）サンプルＡと呼び、消毒したがプロティナーゼＫを加えていない基礎サンプルをＰＫ（−）サンプルＡと呼ぶ。

上記の各サンプルと比較するために、消毒処理を施していない基礎サンプルについても、プロティナーゼＫを加えたサンプル（以下、ＰＫ（＋）サンプルＢという。）と、プロティナーゼＫを加えないサンプル（以下、ＰＫ（−）サンプルＢという。）とを準備した。ＰＫ（＋）サンプルＢは異常型プリオン蛋白質のみを含むサンプルであり、ＰＫ（−）サンプルＢは正常型プリオン蛋白質および異常型プリオン蛋白質の双方を含むサンプルである。

上記４種類のサンプルについて、それぞれ個別にウエスタンブロッティングを実施し、生きたプリオンの存在を示すバンドを含む転写結果が得られたか否かを確認した。なお、ＰＫ（＋）サンプルＡ，ＰＫ（−）サンプルＡについては、ホルムアルデヒドによりプリオンが固定されて泳動が抑制される可能性を考慮し、ホルムアルデヒド架橋を外す還元剤を投与した後にウエスタンブロッティングを実施した。

図３（１）は、ＰＫ（＋）サンプルＡの転写結果の写真とＰＫ（＋）サンプルＢの転写結果の写真とを、比較できるように左右に並べたものである。図３（２）は、ＰＫ（−）サンプルＡの転写結果の写真とＰＫ（−）サンプルＢの転写結果の写真とを、比較できるように左右に並べたものである。

プロティナーゼＫが加えられたサンプル群については、図３（１）に示すように、消毒されていないＰＫ（＋）サンプルＢではプリオンの存在を示すバンドが検出されたが、消毒されたＰＫ（＋）サンプルＡでは、バンドは検出されなかった。プロティナーゼＫが加えられなかったサンプル群についても同様に、消毒されていないＰＫ（−）サンプルＢではバンドが検出されたが、消毒されたＰＫ（−）サンプルＡでは、バンドは検出されなかった。

＜実験２＞
実験２では、実験１で用いられたのと同じ方法で作成されたＰＫ（＋）サンプルＡおよびＰＫ（＋）サンプルＢ（プロティナーゼＫが加えられたサンプル群）について、１０倍希釈液を作成し、これらについて、さらに１０倍希釈して超音波をあて、試験管内で４８時間培養する処理（Protein misfolding cyclic amplificationを略して、以下「ＰＭＣＡ処理」という。）を３サイクル実施した。また、ＰＭＣＡ処理の開始前（以下、０サイクルという。）および各サイクル後の希釈液に対し、それぞれウエスタンブロッティングを実施して、プリオンの存在を示すバンドを含む転写結果が得られたか否かを確認した。

図４は、ＰＫ（＋）サンプルＡ，Ｂについての０サイクルおよび１サイクルの転写結果の写真を、サイクル毎に左右に並べたものである。図５は、ＰＫ（＋）サンプルＡ，Ｂについての２サイクルおよび３サイクルの転写結果の写真を、サイクル毎に左右に並べたものである。なお、図４では、０サイクルについてのみ、該当するサンプルの写真を２組ずつ提示している。

図４および図５に示すように、プロティナーゼＫが加えられたサンプル群のうち消毒されたＰＫ（＋）サンプルＡでは、０サイクルを含むいずれのサイクルでもバンドは認められなかった。これに対し、消毒されなかったＰＫ（＋）サンプルＢでは、０サイクルのときからバンドが認められ、ＰＭＣＡ処理を行ってもバンドが維持された。

図４および図５に示した実験結果に図３に示した実験１の結果を合わせて勘案すると、ＰＫ（＋）サンプルＡには正常型プリオン蛋白質も異常型プリオン蛋白質も含まれていないと思われる。

＜実験３＞
この実験３では、１６匹のマウスを３つのグループに分け、第１のグループ（４匹）には、基礎サンプルを乾燥させた後に実験１と同じ要領で消毒したものを脳内接種した。一方、第２のグループ（６匹）には、基礎サンプルそのものを消毒せずに脳内接種し、第３のグループ（６匹）には、基礎サンプルを乾燥させたものを消毒せずに脳内接種した。そして、接種後の各個体を、毎日体重を計測しながら生育した。

第２および第３のグループの１２匹は、接種後、１７０日を経過したあたりから徐々に体重が低下し、２３５日目になるまでに全頭死亡した。一方、第１グループの４匹は体重が安定し、接種から３４０日目を超えても、なお生存した。

上記実験３の結果によれば、第１グループのマウスに接種されたサンプルは、消毒処理によりプリオンが不活化されていた可能性が高いと思われる。

上記のとおり、実験１〜３の結果は、いずれも、図２のステップＳ２_Ａ〜Ｓ２_Ｅによる不活化処理がプリオンの不活化に有効であることを裏付けるものとなった。この不活化処理は、手術用具などの医療器具のほか、手術衣、シーツ、ベッドマットなど、プリオンにより汚染されている可能性がある種々の物品の消毒処理に適用することが可能である。

１消毒庫
２ガス管路
３，４液管
５真空ポンプ
６分解装置
１０気化皿
１１気化装置
２１排気管
２２吸気管
３０ホルムアルデヒド溶液のタンク
４０アンモニア溶液のタンク
８１，８２，８３，８４電磁弁
Ａ気体導出口
Ｂ気体導入口
Ｃ，Ｄ薬液導出口

Claims

プリオンが付着した消毒対象物を入れた消毒庫にホルムアルデヒド溶液を導入する第１工程と、前記消毒庫の庫内を高真空状態に移行させる第２工程と、高真空状態下で前記ホルムアルデヒド溶液を気化させることによって前記消毒庫の庫内にホルムアルデヒドガスを充満させる第３工程と、前記消毒庫に空気を送り込んで消毒庫の庫内を高真空状態から低真空状態に移行させる第４工程と、前記低真空状態を所定時間維持する第５工程とを順に実行することにより、前記消毒対象物に付着したプリオンを不活化することを特徴とするプリオン不活化方法。
請求項１に記載されたプリオン不活化方法であって、
前記第１工程から第５工程までを１サイクルとして、あらかじめ定めた複数サイクルを連続して実行するプリオン不活化方法。
請求項２に記載されたプリオン不活化方法であって、
前記複数サイクルの第１工程〜第５工程を実行した後に、消毒庫内のホルムアルデヒドガスを分解する第１浄化工程と、前記消毒庫に導入する溶液を中和剤溶液に変更して前記第１工程〜第５工程を少なくとも１サイクル行う中和工程と、前記中和工程により消毒庫内で発生した中和剤ガスを分解する第２浄化工程とを順に実行するプリオン不活化方法。
請求項３に記載されたプリオン不活化方法であって、
前記複数サイクルの第１工程〜第５工程から前記第２浄化工程までを１サイクルとして、あらかじめ定められた複数サイクルを連続して実行するプリオン不活化方法。