JP6567859B2 - プリオン不活化方法 - Google Patents
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Description
スクレイピープリオン感染マウスの脳組織の10%ホモジネート(以下、「基礎サンプル」という。)をカバーグラスに滴下して乾燥させた後、当該カバーガラスをプロセスチャレンジデバイス(PCD)と呼ばれる実験器具の内部に入れた。この実験器具ごと図1に示した構成の消毒装置の消毒庫1に入れ、消毒庫1の前面扉を閉じて密閉した後に、図2に示した手順に基づき消毒処理を開始した。
実験2では、実験1で用いられたのと同じ方法で作成されたPK(+)サンプルAおよびPK(+)サンプルB(プロティナーゼKが加えられたサンプル群)について、10倍希釈液を作成し、これらについて、さらに10倍希釈して超音波をあて、試験管内で48時間培養する処理(Protein misfolding cyclic amplificationを略して、以下「PMCA処理」という。)を3サイクル実施した。また、PMCA処理の開始前(以下、0サイクルという。)および各サイクル後の希釈液に対し、それぞれウエスタンブロッティングを実施して、プリオンの存在を示すバンドを含む転写結果が得られたか否かを確認した。
この実験3では、16匹のマウスを3つのグループに分け、第1のグループ(4匹)には、基礎サンプルを乾燥させた後に実験1と同じ要領で消毒したものを脳内接種した。一方、第2のグループ(6匹)には、基礎サンプルそのものを消毒せずに脳内接種し、第3のグループ(6匹)には、基礎サンプルを乾燥させたものを消毒せずに脳内接種した。そして、接種後の各個体を、毎日体重を計測しながら生育した。
2 ガス管路
3,4 液管
5 真空ポンプ
6 分解装置
10 気化皿
11 気化装置
21 排気管
22 吸気管
30 ホルムアルデヒド溶液のタンク
40 アンモニア溶液のタンク
81,82,83,84 電磁弁
A 気体導出口
B 気体導入口
C,D 薬液導出口
Claims (3)
- プリオンが付着した消毒対象物を入れた消毒庫にホルムアルデヒド溶液を導入する第1工程と、前記消毒庫の庫内を高真空状態に移行させる第2工程と、高真空状態下で前記ホルムアルデヒド溶液を気化させることによって前記消毒庫の庫内にホルムアルデヒドガスを充満させる第3工程と、前記消毒庫に空気を送り込んで消毒庫の庫内を高真空状態から低真空状態に移行させることにより庫内に充満するホルムアルデヒドガスを流動させる第4工程と、前記低真空状態を所定時間維持する第5工程とを順に実行し、前記第1工程から第5工程までを1サイクルとして、あらかじめ定めた複数サイクルを連続して実行することにより、前記消毒対象物に付着したプリオンを不活化することを特徴とするプリオン不活化方法。
- 請求項1に記載されたプリオン不活化方法であって、前記複数サイクルの第1工程〜第5工程を実行した後に、消毒庫内のホルムアルデヒドガスを分解する第1浄化工程と、前記消毒庫に導入する溶液を中和剤溶液に変更して前記第1工程〜第5工程を少なくとも1サイクル行う中和工程と、前記中和工程により消毒庫内で発生した中和剤ガスを分解する第2浄化工程とを順に実行するプリオン不活化方法。
- 請求項2に記載されたプリオン不活化方法であって、前記複数サイクルの第1工程〜第5工程から前記第2浄化工程までを1サイクルとして、あらかじめ定められた複数サイクルを連続して実行するプリオン不活化方法。
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