JP2016153743A - 容器、液体収納体、カートリッジセット及び液体収納体の製造方法 - Google Patents

Abstract

【課題】容器内に液体を収納する際に気泡の混入を防止することができる容器を提供する。【解決手段】本発明に係る溶出容器３００は、第１開口３１０を封止して液体を収納する容器である。第１開口３１０の周囲に形成された環状の壁面を有する第１環状壁部３１２と、第１環状壁部３１２の内側に形成され、第１開口３１０を封止する第１フィルム３２２を貼り付ける環状の貼付面と、を有する。第１環状壁部３１２は、第１貼付面を超える高さを有する。また、溶出容器３００の他方の第２端部３３４側に環状の壁面を有する第２環状壁部３３２と、第２環状壁部３１２の内側に形成され、第２開口３１０を封止する第２フィルム３２２を貼り付ける環状の第２貼付面３３８と、を有する。第２環状壁部３３２は、第２貼付面３３８を超える高さを有する。【選択図】図１１

Description

本発明は、内部に液体を収納する容器、液体を封止収納した液体収納体、複数の液体収納体を接合できるカートリッジセット及び液体収納体の製造方法に関する。

生化学の分野において、ＰＣＲ（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ：ポリメラーゼ連鎖反応）の技術が確立されている。最近、ＰＣＲ法における増幅の精度や検出感度は向上してきており、極微量の検体（ＤＮＡ等）を増幅し、検出・解析することができるようになってきた。ＰＣＲは、増幅の対象とする核酸（標的核酸）及び試薬を含む溶液（反応液）に熱サイクルを施すことで、標的核酸を増幅させる手法である。ＰＣＲの熱サイクルとしては、２段階又は３段階の温度で熱サイクルを施す手法が一般的である。

一方、医療の現場におけるインフルエンザ等の感染症の診断は、現状ではイムノクロマト等の簡易検査キットを用いることが主流である。しかし、このような簡易検査では、精度が不十分となる場合があり、より高い検査精度を期待できるＰＣＲを感染症の診断に適用することが望まれている。

近年、ＰＣＲ法等に用いるデバイスとして、キャピラリー中に（カートリッジ中に）、水系液体層と非水溶性のゲル層とを交互に積層し、核酸を付着させた磁性体粒子を通過させることにより、核酸の精製を行うデバイスが提案されている（特許文献１参照）。そして、特許文献１には、カートリッジの最下層に核酸増幅反応液が収容され、核酸増幅反応液中で標的核酸の増幅を行うことが記載されている。

国際公開第２０１２／０８６２４３号

しかしながら、上記のようなデバイスは、試料供給部から核酸増幅反応液までが一体の容器で構成されている。このようなデバイスは、例えば長期間保管した場合、洗浄液や溶出液などに含まれる成分がオイルを通じて拡散して汚染が生じ、ＰＣＲが阻害される場合がある。また、デバイス中の液体に外気が入り込んで気泡が形成されると、核酸の精製工程を阻害することがある。

本発明のいくつかの態様に係る目的の１つは、容器内に液体を収納する際に気泡の混入を防止することができる容器を提供することにある。また、本発明のいくつかの態様に係る目的の１つは、気泡の混入を防止して液体を封止収納した液体収納体及びその製造方法を提供することにある。また、本発明のいくつかの態様に係る目的の１つは、複数の液体収納体を接合できるカートリッジセットを提供することにある。

［適用例１］
本発明に係る容器は、
開口を有し、前記開口を封止して液体を封止収納する容器であって、
前記開口の周囲に形成された環状の壁面を有する環状壁部と、
前記環状壁部の内側に形成され、前記開口を封止するフィルムを貼り付ける貼付面と、を有し、
前記環状壁部は、前記貼付面を超える高さを有する。

本適用例に係る容器によれば、液中で貼付面にフィルムを貼りつけることができるため、液体への気泡の混入を防止することができる。

［適用例２］
本発明に係る容器において、
前記貼付面は、前記環状壁部の内側の壁面に形成された環状の段部であってもよい。

本適用例に係る容器によれば、内側の壁面でフィルムを位置決めしながら貼付面に貼り付けることができる。

［適用例３］
本発明に係る容器において、
前記開口、前記環状壁部、前記フィルム、及び前記貼付面は、第１開口、第１環状壁部、第１フィルム、及び第１貼付面であり、
前記第１開口とは異なる第２開口と、
前記第２開口の周囲に形成された環状の壁面を有する第２環状壁部と、
前記第２環状壁部の内側にあって、前記第２開口を封止する第２フィルムを貼り付ける環状の第２貼付面と、
をさらに有し、
前記第２環状壁部は、前記第２貼付面を超える高さを有する。

本適用例に係る容器によれば、２つの開口のいずれにおいても液中で貼付面にフィルムを貼りつけることができるため、液体への気泡の混入を防止することができる。

［適用例４］
本発明に係る容器において、
前記容器は長手方向を有し、
前記第１開口は、前記容器の一の端部に形成され、
前記第２開口は、前記容器の他の端部に形成されてもよい。

本適用例に係る容器によれば、長手方向を有する容器の両端の開口に適用できる。

［適用例５］
本発明に係る液体収納体は、
前記容器の前記貼付面に前記フィルムが貼り付けられ、前記容器の内部に液体を封止収納する。

本適用例に係る液体収納体によれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納することができる。

［適用例６］
本発明に係る液体収納体は、
前記容器の前記第１貼付面に前記第１フィルムが貼り付けられると共に、前記第２貼付面に前記第２フィルムが貼り付けられ、前記第１フィルムと前記第２フィルムとの間で前記容器の内部に液体を封止収納する。

本適用例に係る液体収納体によれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納することができる。

［適用例７］
本発明に係るカートリッジセットは、
前記液体収納体と、前記液体収納体に接合される他の液体収納体と、を含むカートリッジセットであって、
前記液体収納体は、第１流路に前記液体を封止収納すると共に、前記他の液体収納体に挿入される挿入部をさらに有し、
前記挿入部の内側面は、前記第１流路の一部を形成し、
前記挿入部の開口端は、前記貼付面よりも低い位置に形成され、
前記他の液体収納体は、内部に他の液体を収納する第２流路と、一方の端部側に環状の壁面を有する第３環状壁部と、前記第３環状壁部の内側に形成され、第３フィルムが貼り付けられた環状の第３貼付面と、を有し、
前記第３環状壁部は、前記第３貼付面を超える高さを有し、
前記第３貼付面に前記第３フィルムが貼り付けられて前記第２流路内に前記他の液体を封止収納する。

本適用例に係るカートリッジセットによれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納した２つの液体収納体を接合することができる。また、本適用例に係るカートリッジセットによれば、２つの流路を連通して形成される流路に気泡の混入が少ない状態で液体を収納するカートリッジを組み立てることができる。

[適用例８]
本発明に係る液体収納体の製造方法は、前記容器に液体を注入し、前記貼付面を超えるまで液体を充填し、前記フィルムを液中で前記貼付面に貼り付けて液体を封止収納する。

本適用例に係る液体収納体の製造方法によれば、液中でフィルムを貼りつけることによって、封止収納された液体に気泡が入り込むことを防止できる。

実施形態に係る容器組立体１の正面図である。 実施形態に係る容器組立体１の側面図である。 実施形態に係る容器組立体１の平面図である。 実施形態に係る容器組立体１の斜視図である。 実施形態に係る容器組立体１の図３におけるＡ−Ａ断面図である。 実施形態に係る容器組立体１の図３におけるＣ−Ｃ断面図である。 実施形態に係る容器組立体１の操作を説明する模式図である。 実施形態に係る容器組立体１の操作を説明する模式図である。 ＰＣＲ装置５０の概略構成図である。 ＰＣＲ装置５０のブロック図である。 実施形態に係る溶出容器３００の斜視図である。 溶出容器３００の第１端部３１４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。 溶出容器３００の第２端部３３４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。 実施形態に係る反応容器４００の斜視図である。 反応容器４００の第３端部４１４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。 実施形態に係るカートリッジセット５００のＢ−Ｂ断面図である。 核酸増幅反応カートリッジ５０２の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。

以下、本発明の好適な実施形態について、図面を用いて詳細に説明する。なお、以下に説明する実施形態は、特許請求の範囲に記載された本発明の内容を不当に限定するものではない。また、以下で説明される構成の全てが本発明の必須構成要件であるとは限らない。

本実施形態に係る容器は、開口を有し、前記開口を封止して液体を封止収納する容器であって、前記開口の周囲に形成された環状の壁面を有する環状壁部と、前記環状壁部の内側に形成され、前記開口を封止するフィルムを貼り付ける環状の貼付面と、を有し、前記環状壁部は、前記貼付面を超える高さを有することを特徴とする。

本実施形態に係る液体収納体は、前記容器の前記貼付面に前記フィルムが貼り付けられ、前記容器の内部に液体を封止収納することを特徴とする。

本実施形態に係るカートリッジセットは、前記液体収納体と、前記液体収納体に接合される他の液体収納体を、を含むカートリッジセットであって、前記液体収納体は、第１流路に前記液体を封止収納すると共に、前記他の液体収納体に挿入される挿入部をさらに有し、前記挿入部の内側面は、前記第１流路の一部を形成し、前記挿入部の開口端は、前記貼付面よりも低い位置に形成され、前記他の液体収納体は、内部に他の液体を収納する第２流路と、一方の端部側に環状の壁面を有する第３環状壁部と、前記第３環状壁部の内側に形成され、第３フィルムが貼り付けられた環状の第３貼付面と、を有し、前記第３環状壁部は、前記第３貼付面を超える高さを有し、前記第３貼付面に前記第３フィルムが貼り付けられて前記第２流路内に前記他の液体を封止収納することを特徴とする。

本実施形態に係る液体収納体の製造方法は、前記容器に液体を注入し、前記貼付面を超えるまで液体を充填し、前記フィルムを液中で前記貼付面に貼り付けて液体を封止収納することを特徴とする。

本発明に係るカートリッジセットは、核酸増幅反応を行うためのカートリッジを組み立てるためのセットについて説明する。すなわち、本発明に係る核酸増幅反応カートリッジセットを組立てると、核酸増幅反応を行うためのカートリッジを得ることができる。以下では、まず、カートリッジ（容器組立体）について説明し、その後に、容器、液体収納体、液体収納体の製造方法及び核酸増幅反応カートリッジセットについて説明する。

１．容器組立体の概要
まず、図１〜図４を用いて、本実施形態に係る容器組立体１の概要について説明する。図１は、実施形態に係る容器組立体１（以下、カートリッジということがある）の正面図である。図２は、実施形態に係る容器組立体１の側面図である。図３は、実施形態に係る容器組立体１の平面図である。図４は、実施形態に係る容器組立体１の斜視図である。なお、図１〜図３における容器組立体１の状態を正立状態として説明する。

容器組立体１は、吸着容器１００と、洗浄容器２００と、溶出容器３００と、反応容器４００と、を含む。容器組立体１は、吸着容器１００から反応容器４００まで連通する図示しない流路を形成する容器である。容器組立体１の流路は、一方の端部はキャップ１１０によって、他方の端部は底部４０２によって閉じられている。

容器組立体１は、吸着容器１００内で図示しない磁気ビーズに核酸を結合させ、磁気ビーズが洗浄容器２００内を移動する間に精製し、溶出容器３００内で図示しない溶出液液滴中に核酸を溶出させる前処理と、反応容器４００内で核酸を含む溶出液の液滴に対しポリメラーゼ反応の熱サイクル処理と、を行う容器である。

容器組立体１の材質は、特に限定されないが、例えば、ガラス、高分子、金属などとすることができる。容器組立体１の材質にガラスや高分子などの可視光において透明性を有する材質を選択すると、容器組立体１の外部から内部（空洞内）を観察することができるのでより好ましい。また、容器組立体１の材質に、磁力を透過する物質や非磁性体を選択すると、容器組立体１に図示しない磁気ビーズを通過させる場合などに、容器組立体１の外部から磁力を与えることによってこれを行うことが容易化されるため好ましい。容器組立体１の材質は、例えば、ポリプロピレン樹脂であることができる。

吸着容器１００は、内部に図示しない吸着液を収容する円筒状のシリンジ部１２０と、シリンジ部１２０の内部に挿入された可動式の押子であるプランジャー部１３０と、プランジャー部１３０の一方の端部に固定されるキャップ１１０と、を有する。吸着容器１００は、キャップ１１０をシリンジ部１２０に対して移動することでプランジャー部１３０をシリンジ部１２０の内面に摺動させ、シリンジ部１２０内に収容した図示しない吸着液を洗浄容器２００へ押し出すことができる。なお、吸着液については、後述する。

洗浄容器２００は、第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０を接合して組み立てることで得られる。第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０は、それぞれ内部に図示しないオイル層で仕切られた１つ以上の洗浄液層を有する。そして、第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０を接合することで、洗浄容器２００は内部に図示しない複数のオイル層によって区切られた複数の洗浄液層を有する。本実施形態の洗浄容器２００では第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０からなる３つの洗浄容器を用いた例について説明したが、これに限らず、洗浄液層の数に応じて適宜増減することができる。なお、洗浄液については、後述する。

溶出容器３００は、洗浄容器２００の第３洗浄容器２３０に接合され、内部に溶出液をプラグの形状を維持可能に収容する。ここで、「プラグ」とは、流路内において、特定の液体が一区画を占める場合の液体を意味する。より具体的には、特定の液体のプラグは、流路の長手方向において、実質的に当該特定の液体のみが内部を占める柱状のものを指し、液体のプラグによって流路の内部の一定の空間が区画されている状態を示す。ここでの実質的にとの表現は、プラグの周囲、すなわち流路の内壁に少量（例えば薄膜状）の他の物質（液体等）が存在していてもよいことを指す。なお、溶出液については、後述する。

核酸精製デバイス５は、吸着容器１００と、洗浄容器２００と、溶出容器３００と、を含む。

反応容器４００は、溶出容器３００に接合され、溶出容器３００から押し出された液体を受け入れる容器であると共に、熱サイクル処理時に検体を含む溶出液の液滴を収容する容器である。また、反応容器４００は、図示しない試薬を収容する。なお、試薬については、後述する。

２．容器組立体の詳細構造
次に、容器組立体１の詳細構造について、図５及び図６を用いて説明する。図５は、実施形態に係る容器組立体１の図３におけるＡ−Ａ断面図である。図６は、実施形態に係る容器組立体１の図３におけるＣ−Ｃ断面図である。なお、実際には、容器組立体１は、洗浄液などの内容物が充填された状態で組み立てられるものであるが、図５及び図６では容器組立体１の構造を説明するため内容物の記載を省略する。

２−１．吸着容器
吸着容器１００は、シリンジ部１２０の一方の開口端部からプランジャー部１３０が挿入され、プランジャー部１３０の開口端部にはキャップ１１０が挿入されている。キャッ
プ１１０は、その中央に通気部１１２を有し、プランジャー部１３０を操作したときに通気部１１２によってプランジャー部１３０の内圧の変化を抑えることができる。

プランジャー部１３０は、シリンジ部１２０の内周面を摺動する略円筒状の押子であり、キャップ１１０が挿入された開口端部と、該開口端部に対向する底部からシリンジ部１２０の長手方向に延びる棒状部１３２と、棒状部１３２の先端の先端部１３４と、を有する。棒状部１３２はプランジャー部１３０の底部の中央から突出しており、棒状部１３２の周囲には貫通孔が形成されてプランジャー部１３０内とシリンジ部１２０内とは連通する。

シリンジ部１２０は、容器組立体１の流路２の一部を構成し、プランジャー部１３０を収容する大径部と、該大径部より内径が小さい小径部と、大径部から小径部へ内径を縮径する縮径部と、該小径部の先端に吸着挿入部１２２と、吸着挿入部１２２の周囲を覆う円筒状の吸着カバー部１２６と、を有する。容器組立体１の流路２の一部となる大径部、小径部及び吸着挿入部１２２は、略円筒状である。

プランジャー部１３０の先端部１３４は、作業者への提供時において、シリンジ部１２０の小径部を封止して大径部及び縮径部と小径部とを仕切り、２つの区画を形成する。

シリンジ部１２０の吸着挿入部１２２は、洗浄容器２００における第１洗浄容器２１０の一方の開口端部である第１受入部２１４内に挿入して嵌合することでシリンジ部１２０と第１洗浄容器２１０とを接合する。吸着挿入部１２２の外周面と第１受入部２１４の内周面とは密着して内容物である液体が外部へ漏れることを防止する。

２−２．洗浄容器
洗浄容器２００は、容器組立体１の流路２の一部を構成し、第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０からなる組立体である。第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０は、基本的な構造は同じであるので、第１洗浄容器２１０の構造について説明し、第２、第３洗浄容器２２０，２３０についての説明は省略する。

第１洗浄容器２１０は、容器組立体１の長手方向に延びる略円筒状であって、一方の開口端部に形成された第１挿入部２１２と、他方の開口端部に形成された第１受入部２１４と、第１挿入部２１２の周囲を覆う円筒状の第１カバー部２１６と、を有する。

第１挿入部２１２の外径は第２受入部２２４の内径と略同じである。また、第１受入部２１４の内径は吸着挿入部１２２の外径と略同じである。

第１洗浄容器２１０の第１挿入部２１２を第２洗浄容器２２０の第２受入部２２４に挿入して嵌合することで、第１挿入部２１２の外周が第２受入部２２４の内周と密着してシールすると共に、第１洗浄容器２１０と第２洗浄容器２２０とを接合する。同様にして、第１〜第３洗浄容器２１０，２２０，２３０が連結されて洗浄容器２００を形成する。ここで「シールする」とは、少なくとも容器等に収容された液体または気体が外部に漏れないように封ずることであり、外部から内部へ液体または気体が侵入することを封ずることを含んでもよい。

２−３．溶出容器
溶出容器３００は、容器組立体１の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体１の流路２の一部を構成する。溶出容器３００は、一方の開口端部に形成された溶出挿入部３０２と、他方の開口端部に形成された溶出受入部３０４と、を有する。

溶出受入部３０４の内径は第３洗浄容器２３０の第３挿入部２３２の外径と略同じである。第３挿入部２３２を溶出受入部３０４に挿入して嵌合することで、第３挿入部２３２の外周が溶出受入部３０４の内周と密着してシールすると共に、第３洗浄容器２３０と溶出容器３００とを接合する。

２−４．反応容器
反応容器４００は、容器組立体１の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体１の流路２の一部を構成する。反応容器４００は、開口端部に形成された反応受入部４０４と、他方の閉じた端部に形成された底部４０２と、反応受入部４０４を覆うリザーバー部４０６と、を有する。

反応受入部４０４の内径は、溶出容器３００の溶出挿入部３０２の外径と略同じである。溶出挿入部３０２を反応受入部４０４に挿入して嵌合することで、溶出容器３００と反応容器４００は接合する。

反応受入部４０４の周囲には所定の空間を有するリザーバー部４０６が設けられる。リザーバー部４０６は、プランジャー部１３０の移動によって反応容器４００から溢れ出る液体を受容できる容積を有する。

３．容器組立体の内容物及び容器組立体の操作
次に、容器組立体１の内容物について図７の（ａ）を用いて説明し、容器組立体１の操作について図７及び図８を用いて説明する。図７は、実施形態に係る容器組立体１の操作を説明する模式図である。図８は、実施形態に係る容器組立体１の操作を説明する模式図である。なお、図７及び図８では内容物の状態を説明するため、各容器を流路２で表現し、外形状や接合構造については省略している。

３−１．内容物
図７の（ａ）は、図１の状態における流路２内の内容物の状態を示す。流路２内の内容物は、キャップ１１０側から反応容器４００へ向かって順に、吸着液１０、第１オイル２０、第１洗浄液１２、第２オイル２２、第２洗浄液１４、第３オイル２４、磁気ビーズ３０、第３オイル２４、第３洗浄液１６、第４オイル２６、溶出液３２、第４オイル２６、試薬３４である。

流路２は、容器組立体１の長手方向に直交する面の断面積が大きい部分（流路２の太い部分）と小さい部分（流路２の細い部分）とが交互に配置される。第１〜第４オイル２０，２２，２４，２６及び溶出液３２は、その各液の一部または全部が流路２の細い部分に収容されている。流路２の細い部分の断面積は、隣接する互いに混和しない液体（流体であってもよい。以下同じ）の界面が流路２の細い部分に配置された場合に、その界面を安定に維持可能な面積を有する。したがって、流路２の細い部分に配置された液体によって、その液体とその液体の上下に配置された他の液体との配置関係を安定に維持することができる。また、流路２の細い部分に配置された液体と流路２の太い部分に配置された他の液体との界面が流路２の太い部分に形成される場合であっても、強い衝撃によってその界面が乱れても、静止した状態に置くことで、界面は所定の位置で安定に形成される。

流路２の細い部分は、吸着挿入部１２２、第１挿入部２１２、第２挿入部２２２、第３挿入部２３２、溶出挿入部３０２の内側に形成され、溶出容器３００においては溶出挿入部３０２を超えて上方へ延在する。なお、流路２の細い部分に収容された液体は、容器を組み立てる前であっても安定に維持される。

３−１−１．オイル
第１〜第４オイル２０，２２，２４，２６は、いずれもオイルからなり、図７の状態において各オイルの前後の液体の間でプラグとして存在する。第１〜第４オイル２０，２２，２４，２６がプラグとして存在するために、各オイルの前後で隣接する液体は、互いに相分離する液体、すなわち混和しない液体が選択される。また、第１〜第４オイル２０，２２，２４，２６を構成するオイルは、互いに異なる種類のオイルであってもよい。これらに用いることができるオイルとしては、例えば、ジメチルシリコーンオイル等のシリコーン系オイル、パラフィン系オイル及びミネラルオイル並びにそれらの混合物から選択される一種を挙げることができる。

３−１−２．吸着液
吸着液１０とは、磁気ビーズ３０に核酸を吸着させる場となる液体のことを指し、例えば、カオトロピック物質を含む水溶液である。吸着液１０としては、例えば、５Ｍグアニジンチオシアン酸塩、２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．２）を用いることができる。吸着液１０はカオトロピック物質を含有すれば特に限定されないが、吸着液１０には細胞膜の破壊あるいは細胞中に含まれるタンパク質を変性させる目的で界面活性剤を含有させてもよい。この界面活性剤としては、一般に細胞等からの核酸抽出に使用されるものであれば特に限定されないが、具体的には、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘなどのトリトン系界面活性剤やＴｗｅｅｎ２０などのツイーン系界面活性剤のような非イオン性界面活性剤、Ｎ−ウラロイルサルコシンナトリウム（ＳＤＳ）等の陰イオン性界面活性剤が挙げられるが、特に非イオン性界面活性剤を、０．１〜２％の範囲となるように使用するのが好ましい。さらには、２−メルカプトエタノールあるいはジチオスレイトール等の還元剤を含有させることが好ましい。溶解液は、緩衝液であってもよいが、ｐＨ６〜８の中性であることが好ましい。これらのことを考慮し、具体的には、３Ｍ〜７Ｍのグアニジン塩、０％〜５％の非イオン性界面活性剤、０ｍＭ〜０．２ｍＭのＥＤＴＡ、０Ｍ〜０．２Ｍの還元剤等を含有することが好ましい。

ここで、カオトロピック物質とは、水溶液中でカオトロピックイオン（イオン半径の大きな１価の陰イオン）を生じ、疎水性分子の水溶性を増加させる作用を有しており、核酸の固相担体への吸着に寄与するものであれば、特に限定されない。具体的には、グアニジン塩酸塩、ヨウ化ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられるが、これらのうち、タンパク質変成作用の強いグアニジンチオシアン酸塩またはグアニジン塩酸塩が好ましい。これらのカオトロピック物質の仕様濃度は、各物質によって異なり、例えば、グアニジンチオシアン酸塩を使用する場合には、３Ｍ〜５．５Ｍの範囲で、グアニジン塩酸塩を使用する場合は、５Ｍ以上で使用するのが好ましい。

水溶液中にカオトロピック物質が存在することによって、水溶液中の核酸は、水子に囲まれて存在するよりも、固体に吸着して存在するほうが熱力学的に有利となるため、磁気ビーズ３０の表面に吸着することとなる。

３−１−３．洗浄液
第１〜第３洗浄液１２，１４，１６は、核酸の結合した磁気ビーズ３０を洗浄するものである。

第１洗浄液１２は、第１オイル２０及び第２オイル２２のいずれとも相分離する液体である。第１洗浄液１２は、水または低塩濃度水溶液であることが好ましく、低塩濃度水溶液の場合、緩衝液であることが好ましい。低塩濃度水溶液の塩濃度は、１００ｍＭ以下が好ましく、５０ｍＭ以下がより好ましく、１０ｍＭ以下が最も好ましい。また、第１洗浄液１２は、上述したような界面活性剤を含有してもよく、ｐＨは特に限定されない。第１洗浄液１２を緩衝液とするための塩は特に限定されないが、トリス、ヘペス、ピペス、リン酸などの塩が好ましい。さらに、第１洗浄液１２は、アルコールを核酸の担体への吸着
、逆転写反応、ＰＣＲ反応などを阻害しない量だけ含むことが好ましい。この場合、アルコール濃度は特に限定されない。

なお、第１洗浄液１２にカオトロピック物質を含有させてもよい。例えば、第１洗浄液１２にグアニジン塩酸塩を含有させると、磁気ビーズ３０等に吸着した核酸の吸着を維持または強化しつつ磁気ビーズ３０等を洗浄することができる。

第２洗浄液１４は、第２オイル２２及び第３オイル２４のいずれとも相分離する液体である。第２洗浄液１４は、基本的に、第１洗浄液１２と同じでも異なる組成であってもよいが、カオトロピック物質を事実上含まない溶液であるほうが好ましい。後の溶液に、カオトロピック物質の持ち込みを無くすためである。第２洗浄液１４としては、例えば５ｍＭトリス塩酸緩衝液からなってもよい。第２洗浄液１４は、上述したように、アルコールを含むことが好ましい。

第３洗浄液１６は、第３オイル２４及び第４オイル２６のいずれとも相分離する液体である。第３洗浄液１６は、基本的に、第２洗浄液１４と同じでも異なる組成であってもよいが、アルコールを含まない。また、第３洗浄液１６は、アルコールを反応容器４００に持ち込むことを防止するためにクエン酸を含むことができる。

３−１−４．磁気ビーズ
磁気ビーズ３０は、核酸を吸着するビーズであり、容器組立体１の外にある磁石３によって移動させることができるように比較的強い磁性を有することが好ましい。磁気ビーズ３０は、例えば、シリカビーズまたはシリカコーティングされたビーズであってもよい。磁気ビーズ３０は、好ましくはシリカコーティングされたビーズであってもよい。

３−１−５．溶出液
溶出液３２は、第４オイル２６と相分離する液体であり、溶出容器３００中の流路２内で第４オイル２６，２６に挟まれたプラグとして存在する。溶出液３２は、磁気ビーズ３０に吸着した核酸を、磁気ビーズ３０から溶出液３２中に溶出させる液体である。また、溶出液３２は、加熱によって第４オイル２６中で液滴となる。溶出液３２は、例えば、純水を用いることができる。ここで、「液滴」とは、自由表面で囲まれた液体である。

３−１−６．試薬
試薬３４は、反応に必要な成分を含む。試薬３４は、反応容器４００における反応がＰＣＲである場合には、溶出液の液滴３６（図８を参照）の中に溶出させた標的核酸（ＤＮＡ）を増幅するためＤＮＡポリメラーゼなどの酵素及びプライマー（核酸）と、増幅産物を検出するための蛍光プローブのうち少なくとも一つが含まれていることができ、ここでは、プライマー、酵素及び蛍光プローブの全てが含まれている。試薬３４は、第４オイル２６とは相溶せず、核酸を含む溶出液３２の液滴３６に接すると溶けて反応するものであり、反応容器４００内の流路２の重力方向における最下部の領域に固体状態で存在する。例えば、試薬３４は、凍結乾燥（フリーズドライ）したものを用いることができる。

３−２．容器組立体の操作
容器組立体１の操作の一例として、図７及び図８を用いて説明する。

容器組立体１の操作は、
（Ａ）吸着容器１００、洗浄容器２００、溶出容器３００及び反応容器４００を接合して容器組立体１を組み立てる工程と、
（Ｂ）吸着液１０が収容された吸着容器１００に、核酸を含有する検体を導入する工程と、
（Ｃ）第２洗浄容器２２０から吸着容器１００へ磁気ビーズ３０を移動する工程と、
（Ｄ）吸着容器１００を揺動して核酸を磁気ビーズ３０に吸着させる工程と、
（Ｅ）吸着容器１００から、第１オイル２０、第１洗浄液１２、第２オイル２２、第２洗浄液１４、第３オイル２４、第３洗浄液１６及び第４オイル２６の順に通過して、溶出容器３００へ、核酸が吸着した磁気ビーズ３０を移動する工程と、
（Ｆ）溶出容器３００内で、溶出液３２に対して磁気ビーズ３０から核酸を溶出させる工程と、
（Ｇ）核酸を含む液滴を反応容器４００内の試薬３４に接触させる工程と、
を含む。

以下、各工程について順番に説明する。

（Ａ）容器組立体１を組み立てる工程
図７の（ａ）に示すように、組み立てる工程は、吸着容器１００から反応容器４００までを接合して、吸着容器１００から反応容器４００まで連続する流路２を形成するように容器組立体１を組み立てる。なお、図７の（ａ）では、吸着容器１００はキャップ１１０が装着されているが、キャップ１１０をプランジャー部１３０に装着するのは（Ｂ）工程の後である。

より具体的には、反応容器４００の反応受入部４０４に溶出容器３００の溶出挿入部３０２を挿入し、溶出容器３００の溶出受入部３０４に第３洗浄容器２３０の第３挿入部２３２を挿入し、第３洗浄容器２３０の第３受入部２３４に第２洗浄容器２２０の第２挿入部２２２を挿入し、第２洗浄容器２２０の第２受入部２２４に第１洗浄容器２１０の第１挿入部２１２を挿入し、第１洗浄容器２１０の第１受入部２１４に吸着容器１００の吸着挿入部１２２を挿入する。

（Ｂ）検体を導入する工程
導入する工程は、例えば検体が付着した綿棒を、吸着容器１００のキャップ１１０が装着される開口から吸着液１０の中に差し入れ、吸着液１０にこれを浸漬して行う。より具体的には、吸着容器１００のシリンジ部１２０に挿入された状態のプランジャー部１３０の一方の端部にある開口から綿棒を差し入れる。次に、綿棒を吸着容器１００から取り出し、キャップ１１０を装着する。これが図７の（ａ）の状態である。また、検体は、ピペット等によって吸着容器１００へ導入してもよい。また、検体がペースト状や固体状であれば、例えば、吸着容器１００へ匙やピンセット等によりプランジャー部１３０の内壁に付着させたり投入したりしてもよい。図７の（ａ）に示すように、シリンジ部１２０及びプランジャー部１３０の中は途中まで吸着液１０が充填されているが、キャップ１１０の装着される開口側には空間が残されている。

検体には標的となる核酸が含まれている。以下、これを単に標的核酸ということがある。標的核酸は、例えば、ＤＮＡやＲＮＡ（ＤＮＡ：Ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ、及び／又はＲＮＡ：Ｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃ Ａｓｉｄ）である。標的核酸は、検体から抽出され、後述する溶出液３２に溶出された後、例えばＰＣＲの鋳型として利用される。検体としては、血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、その他各種の生体試料などが挙げられる。

（Ｃ）磁気ビーズを移動する工程
磁気ビーズ３０を移動する工程は、図７の（ａ）に示すように第２洗浄容器２２０の第３オイル２４，２４に挟まれてプラグ状に存在する磁気ビーズ３０を、容器外部に配置した磁石３の磁力を印加した状態で、磁石３を吸着容器１００へ向かって移動させることによって行う。

この磁気ビーズ３０の移動に合わせて、あるいはこれより先にキャップ１１０及びプランジャー部１３０をシリンジ部１２０から抜き出す方向へ移動して、吸着液１０内の検体をプランジャー部１３０内からシリンジ部１２０内へ移動させる。このプランジャー部１３０の移動によって、先端部１３４によって塞がれていた流路２は吸着液１０へ連通する。

磁気ビーズ３０は、磁石３の移動に伴って流路２内を上昇し、図７の（ｂ）に示すように、検体のある吸着液１０内へ到達する。

（Ｄ）核酸を磁気ビーズに吸着させる工程
核酸を吸着させる工程は、吸着容器１００を揺動させて行われる。この工程は、吸着容器１００の開口がキャップ１１０によって吸着液１０が漏れ出さないように封止されているので、効率的に行うことができる。この工程により、標的核酸は、カオトロピック剤の作用により、磁気ビーズ３０の表面に吸着される。この工程では、磁気ビーズ３０の表面に標的核酸以外の核酸や蛋白質が吸着してもよい。

吸着容器１００を揺動させる方法としては、公知のボルテックスシェイカーなどの装置を用いてもよいし、作業者の手で振り混ぜてもよい。また、磁気ビーズ３０の磁性を利用して、外部から磁場を与えながら吸着容器１００を揺動してもよい。

（Ｅ）核酸が吸着した磁気ビーズを移動する工程
核酸が吸着した磁気ビーズ３０を移動する工程は、吸着容器１００、洗浄容器２００及び溶出容器３００の外部から磁石３の磁力を印加しながら移動することによって磁気ビーズ３０を吸着液１０、第１〜第４オイル２０，２２，２４，２６及び第１〜第３洗浄液１２，１４，１６の中を移動させる。

磁石３は、例えば、永久磁石、電磁石等を用いることができる。また、磁石３は、作業者の手で動かして行ってもよいし、機械装置等を利用して行ってもよい。磁気ビーズ３０は、磁力によって引き寄せられる性質を有しているため、この性質を利用して、吸着容器１００、洗浄容器２００、そして溶出容器３００へと、磁石３の相対的な配置を変化させて、流路２内を移動させる。磁気ビーズ３０が各洗浄液を通過するときの速度は特に限定されないし、同一洗浄液内で流路２の長手方向に沿って往復するようにして移動させてもよい。なお、磁気ビーズ３０以外の粒子等をチューブ内で移動させる場合は、例えば、重力や電位差を利用してこれを行うことができる。

（Ｆ）核酸を溶出させる工程
核酸を溶出させる工程は、溶出容器３００内で、溶出液の液滴３６に対して磁気ビーズ３０から核酸を溶出させる。図７における溶出液３２は、溶出容器３００の流路の細い部分にプラグとして存在していたが、上記のように磁気ビーズ３０を移動させる間に、反応容器４００を加熱することで内容液が膨張し、図８に示すように液滴３６として溶出容器３００内を上方へ移動している。そして、図８の（ａ）に示すように、磁気ビーズ３０が溶出容器３００の溶出液の液滴３６に到達すると、溶出液の作用により、磁気ビーズ３０に吸着された標的核酸が、溶出液の液滴３６内に溶出する。

（Ｇ）試薬３４に接触させる工程
試薬３４に接触させる工程は、核酸を含む液滴３６を反応容器４００内の最下部にある試薬３４に接触させる。具体的には、図８の（ｂ）に示すように、キャップ１１０を押し、プランジャー部１３０の先端部１３４によって第１オイル２０を押し下げることで、磁石３の磁力が印加された磁気ビーズ３０を所定位置に維持したまま、標的核酸が溶出した
溶出液の液滴３６が反応容器４００へ移動し、反応容器４００の最下部にある試薬３４に接触する。液滴３６が接触した試薬３４は溶けて溶出液中の標的核酸と混ざり合い、例えば熱サイクルを用いたＰＣＲを実施することができる。

４．ＰＣＲ装置
図９及び図１０を用いて、容器組立体１を用いて核酸溶出処理及びＰＣＲを行うＰＣＲ装置５０について説明する。図９は、ＰＣＲ装置５０の概略構成図である。図１０は、ＰＣＲ装置５０のブロック図である。

ＰＣＲ装置５０は、回転機構６０と、磁石移動機構７０と、押圧機構８０と、蛍光測定器５５と、コントローラー９０と、を有する。

４−１．回転機構
回転機構６０は、回転用モーター６６とヒーター６５とを含み、回転用モーター６６を駆動することにより容器組立体１及びヒーター６５を回転する。回転機構６０が容器組立体１及びヒーター６５を回転して上下反転させることによって、反応容器４００の流路内において標的核酸を含む液滴が移動し、熱サイクル処理が行われる。

ヒーター６５は、図示しない複数のヒーターを含み、例えば、溶出用、高温用及び低温用のヒーターを含むことができる。溶出用ヒーターは、容器組立体１のプラグ状の溶出液を加熱し、標的核酸の磁気ビーズから溶出液への溶出を促進する。高温用ヒーターは、反応容器４００の流路の上流側の液体を低温用ヒーターよりも高い温度に加熱する。低温用ヒーターは、反応容器の流路の底部４０２を加熱する。高温用ヒーターと低温用ヒーターによって、反応容器４００の流路内の液体に温度勾配を形成することができる。ヒーター６５には、温度制御装置が設けられ、コントローラー９０からの指令に従って、容器組立体１内の液体を処理に適した温度に設定できる。

ヒーター６５は、反応容器４００の底部４０２の外壁が露出する開口を有する。蛍光測定器５５は、その開口から溶出液の液滴の輝度を測定する。

４−２．磁石移動機構
磁石移動機構７０は、磁石３を移動させる機構である。磁石移動機構７０は、容器組立体１内の磁気ビーズを磁石３に引き寄せるとともに、磁石３を移動させることによって磁気ビーズを容器組立体１内で移動させる。磁石移動機構７０は、一対の磁石３と、昇降機構と、揺動機構と、を有する。

揺動機構は、一対の磁石３を図９の左右方向（図９の前後方向であってもよい）に揺動させる機構である。一対の磁石３は、ＰＣＲ装置５０に装着された容器組立体１を左右方向から挟みこむように配置（図７、図８を参照）され、容器組立体１の流路と直交する方向（ここでは図９の左右方向）で磁気ビーズと磁石３との距離を近接させることができる。したがって、一対の磁石３を左右方向に矢印のように揺動させると、その動きに合わせて容器組立体１内の磁気ビーズが左右方向に移動する。昇降機構は、磁石３を上下方向に移動させ、磁石３の移動に合わせて磁気ビーズを図９の上下方向に移動させることができる。

４−３．押圧機構
押圧機構８０は、容器組立体１のプランジャー部を押す機構であり、プランジャー部が押圧機構８０によって押されることによって、溶出容器３００内の液滴が反応容器４００内に押し出され、反応容器４００内でＰＣＲを実施することができるようになる。

図９では、押圧機構８０を正立した容器組立体１の上方に配置して示しているが、押圧機構８０がプランジャー部を押す方向は、図９における上下方向ではなく、例えば、上下方向に対して４５度傾いていてもよい。このようにすることで、磁石移動機構７０と干渉しない位置に押圧機構８０を配置することが容易になる。

４−４．蛍光測定器
蛍光測定器５５は、反応容器４００の液滴の輝度を測定する測定器である。蛍光測定器５５は、反応容器４００の底部４０２に対向する位置に配置される。なお、蛍光測定器５５は、マルチプレックスＰＣＲに対応できるように、複数の波長域の輝度検出が可能であると望ましい。

４−５．コントローラー
コントローラー９０は、ＰＣＲ装置５０の制御を行う制御部である。コントローラー９０は、例えばＣＰＵなどのプロセッサーと、ＲＯＭやＲＡＭなどの記憶装置とを有する。記憶装置には各種プログラム及びデータが記憶されている。また、記憶装置は、プログラムを展開する領域を提供する。プロセッサーが記憶装置に記憶されたプログラムを実行することによって、各種の処理が実現される。

例えば、コントローラー９０は、回転用モーター６６を制御して、容器組立体１を所定の回転位置まで回転させる。回転機構６０には図示しない回転位置センサが設けられており、コントローラー９０は、回転位置センサの検出結果に応じて回転用モーター６６を駆動・停止させる。

また、コントローラー９０は、ヒーター６５を制御して、ヒーターをオン・オフ制御して発熱させ、容器組立体１内の液体を所定の温度まで加熱する。

また、コントローラー９０は、磁石移動機構７０を制御して、磁石３を上下方向に移動させ、図示しない位置センサの検出結果に応じて磁石３を図９の左右方向に揺動させる。

また、コントローラー９０は、蛍光測定器５５を制御して、反応容器４００内の液滴の輝度を測定する。この測定結果は、コントローラー９０の図示しない記憶装置に保存される。

このＰＣＲ装置５０に容器組立体１を装着し、上記３−２の（Ｃ）〜（Ｇ）の工程を実施することができ、さらにＰＣＲを実施することができる。

５．容器及び液体収納体
図１１〜図１６を用いて容器及び液体収納体について説明する。容器としては、液体を封止収納する容器であれば各種容器に適用することができるが、ここでは、上述した容器組立体１の一部を構成する容器を用いて説明する。また、液体収納体は、容器に液体を封止収納したものである。

５−１．溶出容器
図１１〜図１３及び図１６に示す容器は、第１流路２ａに液体である溶出液３２を収納する溶出容器３００であり、上記「２−３．溶出容器」で説明した容器である。溶出容器３００は、内部に第１流路２ａの一部を形成し第１流路２ａの軸方向に延びる略筒状の胴部３０８と、第１流路２ａの両端の２つの開口３１０，３３０と、を有する。

図１１は実施形態に係る溶出容器３００の斜視図であり、図１２は溶出容器３００の第１端部３１４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図であり、図１３は溶出容器３００の第２端部３
３４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図であり、図１６は実施形態に係るカートリッジセット５００（溶出容器３００と反応容器４００）のＢ−Ｂ断面図である。なお、以下の説明において、容器と液体収納体とを特に区別せずに説明するが、容器は液体を収納していない状態であり、液体収納体は容器が液体を内部に封止収納したものである。

図１１〜図１３に示すように、溶出容器３００は、２つの開口３１０，３３０を有する。まず、図１２を用いて、溶出容器３００の一方の端部（図１１における下方にある第１端部３１４）側の第１開口３１０について説明する。

図１２に示すように、溶出容器３００は、第１開口３１０を有し、第１開口３１０を封止して液体である第４オイル２６及び溶出液３２（図１６）を封止収納する容器である。なお、溶出液３２は「３−１−５．溶出液」で説明し、第４オイル２６については「３−１−１．オイル」で説明しているので、重複する説明は省略する。

溶出容器３００は、長手方向を有し、第１開口３１０は、溶出容器３００の一の端部（第１端部３１４）に形成され、第２開口３３０は、溶出容器３００の他の端部（第２端部３３４）に形成される。溶出容器３００は、第１開口３１０の周囲に形成された環状の壁面を有する環状壁部である第１環状壁部３１２と、第１環状壁部３１２の内側に形成され、第１開口３１０を封止するフィルムである第１フィルム３２２を貼り付ける環状の貼付面である第１貼付面３１８と、を有する。

第１開口３１０は、内側の筒と外側の筒からなる２重筒構造になっており、内側の筒が溶出挿入部３０２であり、外側の筒が第１環状壁部３１２である。溶出挿入部３０２及び第１環状壁部３１２は、いずれも略円筒状であるが、筒状であれば他の形態であってもよい。

溶出挿入部３０２の内側面は第１流路２ａの一部を形成し、溶出挿入部３０２の開口端３０３は第１貼付面３１８よりも低い位置に形成される。ここで、「高い」または「低い」は、本明細書で特に断らない限り、開口を上に液体を収容する部分を下にして、フィルムを貼り付ける前の容器に液体を充填したと仮定した場合における容器の各部分の上方への高さの高低である。開口端３０３が第１貼付面３１８より低い位置にあるので、図１２に示すように、第１貼付面３１８の上方まで第４オイル２６を充填すると、開口端３０３は液中に没する。したがって、溶出挿入部３０２の開口端３０３が第１フィルム３２２を貼りつける際に邪魔にならない。また、溶出挿入部３０２は、胴部３０８と同じ太さの外径を有する。溶出挿入部３０２の下方には、胴部３０８から外方へ突出する環状のフランジ部３２０が形成されている。

第１環状壁部３１２は、フランジ部３２０の上面から上方に向かって延びる。ここで、「上」「下」は、本明細書で特に断らない限り、各図における上下方向である。

第１環状壁部３１２は、第１貼付面３１８を超える高さを有する。ここで、「高さ」は、本明細書で特に断らない限り、フィルムを貼り付ける前の容器に液体を充填したと仮定した場合における容器の各部分の上方への高さである。したがって、第１開口３１０を鉛直上方へ向けた状態で、第１貼付面３１８と第１環状壁部３１２とを比較したとき、第１環状壁部３１２の上端縁（第１端部３１４）が第１貼付面３１８よりも高い位置にある。第１環状壁部３１２が第１貼付面３１８よりも高い位置にあることで、第４オイル２６を第１貼付面３１８よりも高い位置まで充填することができる。この状態で第１貼付面３１８に第１フィルム３２２を貼り付ける作業を行えば、液中で第１貼付面３１８に第１フィルム３２２を貼りつけることができるため、液体（第４オイル２６及び溶出液３２）への気泡の混入を防止することができる。

第１フィルム３２２は、溶出容器３００内に液体を封止収納することができる密封性を有するものである。また、第１フィルム３２２は、他の容器（反応容器４００）と接合するときに、容易に破れる程度の強度を有するものである。

第１フィルム３２２の外形は、後述する第１内側面３１６よりわずかに小さい相似形（本実施形態では円形）である。第１内側面３１６によって第１フィルム３２２を貼りつけ位置に位置決めしやすいからである。

第１フィルム３２２としては、公知の合成樹脂製のフィルムを採用することができ、第１貼付面３１８への熱溶着性を考慮すると、表面にポリエチレン層を有するフィルムが好ましく、例えば、ポリエステルフィルムの表面にポリエチレン層が積層された多層構造のフィルムが好ましい。

第１貼付面３１８は、環状であって、第１フィルム３２２が貼り付けられる面である。第１貼付面３１８は、第１環状壁部３１２の内側の壁面である第１内側面３１６に形成された内側に突出する環状の段部である。第１貼付面３１８は、円環状の平坦面であり、第１端部３１４より低い位置にある。このように第１貼付面３１８が第１内側面３１６に形成された段部であることで、第１フィルム３２２を貼りつける際に、第１内側面３１６で第１フィルム３２２を位置決めしながら第１貼付面３１８に貼り付けることができる。すなわち、水平方向（図１２における左右・前後方向への第１フィルム３２２の移動が第１内側面３１６によって制限されるため、所定貼りつけ位置である第１貼付面３１８に確実に配置することができる。

次に、図１３を用いて、溶出容器３００の他方の端部（図１１における上方にある第２端部３３４）側の第２開口３３０について説明する。

図１３に示すように、溶出容器３００は、第１開口３１０とは異なる第２開口３３０と、第２開口３３０の周囲に形成された環状の壁面を有する第２環状壁部３３２と、第２環状壁部３３２の内側にあって、第２開口３３０を封止する第２フィルム３４０を貼り付ける環状の第２貼付面３３８と、を有する。

第２環状壁部３３２は、第２貼付面３３８を超える高さを有する。このように第２端部３３４側にも第２環状壁部３３２及び第２貼付面３３８を設けることで、いずれの開口３１０，３３０においても液中で貼付面にフィルムを貼りつけることができるため、液体への気泡の混入を防止することができる。第２環状壁部３３２は、溶出受入部３０４の上端の一部である。

溶出受入部３０４は、上記「２−３．溶出容器」で説明したように第３洗浄容器２３０の第３挿入部２３２を受け入れる部分である。

第２貼付面３３８は、溶出受入部３０４の環状の内側面である第２内側面３３６に形成された内側に突出する環状の段部である。第２貼付面３３８は、環状であって、第２フィルム３４０が貼り付けられる面である。第２貼付面３３８は、円環状の平坦面であり、第２端部３３４より低い位置にある。このように第２貼付面３３８が第２内側面３３６に形成された段部であることで、第２フィルム３４０を貼りつける際に、第２内側面３３６で第２フィルム３４０を位置決めしながら第２貼付面３３８に貼り付けることができる。

第２フィルム３４０は、第１フィルム３２２と同様の機能を有するものを採用することができる。

５−２．液体収納体
図１６の左側に示すように、液体（第４オイル２６及び溶出液３２）を内部に封止収納した溶出容器３００が液体収納体である。

液体収納体は、溶出容器３００の第１貼付面３１８に第１フィルム３２２が貼り付けられ、第２貼付面３３８に第２フィルム３４０が貼り付けられ、第１フィルム３２２と第２フィルム３４０との間で溶出容器３００の内部に液体（第４オイル２６及び溶出液３２）を封止収納する。上記「５−１．溶出容器」で説明したように、液体収納体によれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納することができる。なお、溶出容器３００の場合には、２つの開口を有するので上記のような構成となっているが、後述する反応容器４００や吸着容器１００では他の容器と接合する側の１つの開口にのみフィルムを貼りつける構造を有すればよい。

液体収納体において、溶出挿入部３０２及びその開口端３０３は第４オイル２６の液中にある。

５−３．液体収納体の製造方法
図１１〜図１３を用いて、液体収納体の製造方法について説明する。

まず、図１１に示すような２つの開口３１０，３３０を封止していない溶出容器３００を用意する。

次に、図１３に示すように、第２開口３３０を鉛直上方へ向けて、第２貼付面３３８に第２フィルム３４０を載せる。第２フィルム３４０は、第２内側面３３６によって水平方向（図の左右・前後方向）への移動が制限されるので、所定位置に容易に配置することができる。なお、この時点では第１開口３１０が封止されていないので、図１３のような第４オイル２６はない。図１３のように第４オイル２６が充填されるのは、最初に第１開口３１０を封止した場合である。さらに、第２フィルム３４０の外縁付近を第２貼付面３３８上に押しつけながら加熱することで、第２フィルム３４０を第２貼付面３３８に貼り付ける。

次に、図１２に示すように、第１開口３１０を鉛直方向へ向けて、溶出容器３００に液体（第４オイル２６、溶出液３２、そして第４オイル２６の順に入れる）を注入し、第１貼付面３１８を超えるまで液体（第４オイル２６）を充填する。この時点で、第１貼付面３１８は、第４オイル２６の表面よりも低い位置にあり、液中にある。

この状態で、第１フィルム３２２を液中にある第１貼付面３１８に載せる（図の破線の位置）。第１フィルム３２２は、第１内側面３１６によって水平方向（図の左右・前後方向）への移動が制限されるので、所定位置に容易に配置することができる。そして、第１フィルム３２２の外縁付近を第１貼付面３１８上に押しつけながら加熱して溶着することで、第１フィルム３２２を液中で第１貼付面３１８に貼り付けて液体（第４オイル２６及び溶出液３２）を封止収納する。このように、液中で第１フィルム３２２を貼りつけることによって、充填された液体に気泡が入り込むことを防止できる。第１フィルム３２２の貼付方法は、溶着が好ましいが、これに限られるものではなく、他の公知の接着方法を採用することができる。

このようにして、第４オイル２６及び溶出液３２が第１流路２ａに封止収納された溶出容器３００は、図１６の左側に示すような状態の液体収納体となる。なお、ここでは第２開口３３０側を先に封止した例について説明したが、第１開口３１０側を先に封止しても
よい。その場合には、ここで説明した第１開口３１０と同様に、第２貼付面３３８より上まで液体を注入してから第２フィルム３４０を貼り付ける。

５−４．反応容器
図１４〜図１６に示す他の容器は、第３開口４１０を封止して液体である第４オイル２６が封止収納された反応容器４００であり、上記「２−４．反応容器」で説明した容器である。図１４は実施形態に係る反応容器４００の斜視図であり、図１５は反応容器４００の第３端部４１４側の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。

反応容器４００は、内部に第２流路２ｂを形成する筒状の胴部４０３と、一方の端部に形成された第３開口４１０と、他方の端部に形成された第２流路２ｂを閉塞する底部４０２と、第３開口４１０側にあって胴部４０３の周囲に形成される筒状のリザーバー部４０６と、溶出挿入部３０２を第２流路２ｂに受け入れる反応受入部４０４と、を有する。第２流路２ｂは、第４オイル２６と、溶出液３２に溶出した核酸と反応する試薬３４と、を含む。

反応容器４００は、一方の端部である第３端部４１４側に環状の壁面を有する第３環状壁部４１２と、第３環状壁部４１２の内側に形成され、第３開口４１０を封止する第３フィルム４２２を貼り付ける環状の第３貼付面４１８と、を有する。

第３開口４１０は、第１開口３１０と同様に、２重筒構造になっており、内側の筒が反応受入部４０４であり、外側の筒が第３環状壁部４１２である。溶出容器３００が反応容器４００に接合した際に、第３環状壁部４１２と反応受入部４０４の外側面との間の空間は、第１フィルム３２２及び第３フィルム４２２が破れて流路２ａ，２ｂから漏れ出した液体が外部に漏れないように受け入れることができる。

反応受入部４０４の内面は第２流路２ｂの一部を形成し、胴部４０３とほぼ同じ太さの外径を有する。反応受入部４０４の下方には、胴部３０８から外方へ突出する環状の接続部４２０が形成されている。第３環状壁部４１２は、接続部４２０の外周縁から上方に向かって延びる。反応受入部４０４及び第３環状壁部４１２は、いずれも略円筒状であるが、筒状であれば他の形態であってもよい。

第３貼付面４１８は、環状であって、第３フィルム４２２が貼り付けられる面である。第３貼付面４１８は、反応受入部４０４の上端面である。第３貼付面４１８は、環状の平坦面である。

第３環状壁部４１２は、第３貼付面４１８を超える高さを有する。したがって、第３開口４１０を鉛直上方へ向けて、第３貼付面４１８と第３環状壁部４１２とを比較したとき、第３環状壁部４１２の上端縁（第３端部４１４）が第３貼付面４１８よりも高い位置にある。第３環状壁部４１２が第３貼付面４１８よりも高い位置にあることで、第４オイル２６を第３貼付面４１８よりも高い位置まで充填することができる。この状態で第３貼付面４１８に第３フィルム４２２を貼り付ける作業を行えば、液中で第３貼付面４１８に第３フィルム４２２を貼りつけることができるため、第４オイル２６への気泡の混入を防止することができる。

第３フィルム４２２は、第１フィルム３２２と同様の機能を有するものを採用することができる。第３フィルム４２２の外形は、第３貼付面４１８の外径より大きく、円形である。第３フィルム４２２が第３貼付面４１８に貼り付けられた状態で、第３フィルム４２２の外周縁は第３内側面４１６との間に間隔を有する。

５−５．他の液体収納体
図１６の右側に示すように、他の液体（第４オイル２６）を内部に封止収納した反応容器４００が他の液体収納体である。他の液体収納体は、反応容器４００の第３貼付面４１８に第３フィルム４２２が貼り付けられ、第３貼付面４１８に第３フィルム４２２が貼り付けられ、反応容器４００の内部に液体（第４オイル２６）を封止収納する。上記「５−４．反応容器」で説明したように、他の液体収納体によれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納することができる。

５−６．他の液体収納体の製造方法
図１４及び図１５を用いて、他の液体収納体の製造方法について説明する。

まず、図１４に示すような第３開口４１０を封止していない反応容器４００を用意する。

次に、図１５に示すように、第３開口４１０を鉛直上方へ向けて、反応容器４００に液体（試薬３４及び第４オイル２６）を注入し、第３貼付面４１８を超えるまで液体（第４オイル２６）を充填する。この時点で、第３貼付面４１８は、第４オイル２６の表面よりも低い位置にあり、液中にある。

第３フィルム４２２を液中にある第３貼付面４１８に載せる（図の破線の位置）。そして、第３フィルム４２２の外縁付近を第３貼付面４１８上に押しつけながら加熱することで、第３フィルム４２２を液中で第３貼付面４１８に貼り付けて液体（第４オイル２６及び試薬３４）を封止収納する。このように、液中で第３フィルム４２２を貼りつけることによって、封止収納された液体に気泡が入り込むことを防止できる。

このようにして、第４オイル２６及び試薬３４が第２流路２ｂに封止収納された反応容器４００は、図１６の右側に示すような状態の他の液体収納体となる。

６．カートリッジセット
図１６を用いて、カートリッジセット５００について説明する。図１６は、実施形態に係るカートリッジセット５００のＢ−Ｂ断面図である。

図１６に示すように、カートリッジセット５００は、上記「５−２．液体収納体」で説明した溶出容器３００からなる液体収納体と、液体収納体に接合される上記「５−５．他の液体収納体」で説明した反応容器４００からなる他の液体収納体と、を含む。

溶出容器３００からなる液体収納体は、反応容器４００からなる他の液体収納体に対して、挿入方向Ｓで溶出挿入部３０２が反応受入部４０４に挿入されるように接合することができる。そして、その接合操作の際に、第１フィルム３２２及び第３フィルム４２２は、溶出挿入部３０２の開口端３０３及び反応受入部４０４の第３貼付面４１８によって破られる。溶出挿入部３０２の開口端３０３は液中にある状態のまま第４オイル２６に満たされた反応受入部４０４内に挿入されるので、接合操作においても第１流路２ａ及び第２流路２ｂの中（２つの流路を連通して形成される流路）には気泡が混入しにくい。その接合状態は図１７に示す。図１７は、核酸増幅反応カートリッジ５０２の一部を示すＢ−Ｂ断面図である。なお、図１７にフィルムは示していない。

また、上述したように、カートリッジセット５００によれば、気泡の混入が少ない状態で液体を封止収納した２つの液体収納体を接合して、核酸増幅反応カートリッジ５０２を組み立てることができる。

ここで説明したカートリッジセット５００（図１６）は、溶出容器３００と反応容器４００とのセットであるが、上述した他の容器（１００，２００，３００，４００）を適宜組み合わせて組立てることができる。溶出容器３００の両開口における封止構造は、第１洗浄容器２１０、第２洗浄容器２２０及び第３洗浄容器２３０においても同様に採用することができる。第１、第２洗浄容器２１０，２２０の場合には、第１、第２挿入部２１２，２２２から板状体が突出している（図６）が、その板状体も同様に液中になるようにフィルムを貼り付ける。また、吸着容器１００には第１洗浄容器２１０に接合する端部側を溶出容器３００の第１開口３１０における封止構造を採用し、他の開口にフィルムを貼りつけたプランジャー部１３０を挿入することで封止することができる。そして、これらの容器（１００，２００，３００，４００）を接合することで、上述した容器組立体１を得ることができる。なお、各容器の接合工程順は適宜変更することができ、容器同士の組み合わせも適宜変更することができる。

本発明は、上述した実施形態に限定されるものではなく、さらに種々の変形が可能である。例えば、本発明は、実施形態で説明した構成と実質的に同一の構成（例えば、機能、方法、及び結果が同一の構成、あるいは目的及び効果が同一の構成）を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成又は同一の目的を達成することができる構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成に公知技術を付加した構成を含む。

１…容器組立体、２…流路、２ａ…第１流路、２ｂ…第２流路、３…磁石、５…核酸精製デバイス、１０…吸着液、１２…第１洗浄液、１４…第２洗浄液、１６…第３洗浄液、２０…第１オイル、２２…第２オイル、２４…第３オイル、２６…第４オイル、３０…磁気ビーズ、３２…溶出液、３４…試薬、３６…液滴、５０…ＰＣＲ装置、５５…蛍光測定器、６０…回転機構、６５…ヒーター、６６…回転用モーター、７０…磁石移動機構、８０…押圧機構、９０…コントローラー、１００…吸着容器、１１０…キャップ、１１２…通気部、１２０…シリンジ部、１２２…吸着挿入部、１２６…吸着カバー部、１３０…プランジャー部、１３２…棒状部、１３４…先端部、２００…洗浄容器、２１０…第１洗浄容器、２１２…第１挿入部、２１４…第１受入部、２１６…第１カバー部、２２０…第２洗浄容器、２２２…第２挿入部、２２４…第２受入部、２２６…第２カバー部、２３０…第３洗浄容器、２３２…第３挿入部、２３４…第３受入部、２３６…第３カバー部、３００…溶出容器、３０２…溶出挿入部、３０３…開口端、３０４…溶出受入部、３０８…胴部、３１０…第１開口、３１２…第１環状壁部、３１４…第１端部、３１６…第１内側面、３１８…第１貼付面、３２０…フランジ部、３２２…第１フィルム、３３０…第２開口、３３２…第２環状壁部、３３４…第２端部、３３６…第２内側面、３３８…第２貼付面、３４０…第２フィルム、４００…反応容器、４０２…底部、４０３…胴部、４０４…反応受入部、４０６…リザーバー部、４１０…第３開口、４１２…第３環状壁部、４１４…第３端部、４１６…第３内側面、４１８…第３貼付面、４２０…接続部、４２２…第３フィルム、５００…カートリッジセット、５０２…核酸増幅反応カートリッジ、Ｓ…挿入方向

Claims (8)

1. 開口を有し、前記開口を封止して液体を封止収納する容器であって、
   前記開口の周囲に形成された環状の壁面を有する環状壁部と、
   前記環状壁部の内側に形成され、前記開口を封止するフィルムを貼り付ける貼付面と、を有し、
   前記環状壁部は、前記貼付面を超える高さを有する、容器。
2. 請求項１において、
   前記貼付面は、前記環状壁部の内側の壁面に形成された環状の段部である、容器。
3. 請求項１または２において、
   前記開口、前記環状壁部、前記フィルム、及び前記貼付面は、第１開口、第１環状壁部、第１フィルム、及び第１貼付面であり、
   前記第１開口とは異なる第２開口と、
   前記第２開口の周囲に形成された環状の壁面を有する第２環状壁部と、
   前記第２環状壁部の内側にあって、前記第２開口を封止する第２フィルムを貼り付ける環状の第２貼付面と、
   をさらに有し、
   前記第２環状壁部は、前記第２貼付面を超える高さを有する、容器。
4. 請求項３に記載の容器において、
   前記容器は長手方向を有し、
   前記第１開口は、前記容器の一の端部に形成され、
   前記第２開口は、前記容器の他の端部に形成されている、容器。
5. 請求項１または２の前記容器の前記貼付面に前記フィルムが貼り付けられ、前記容器の内部に液体を封止収納する、液体収納体。
6. 請求項３または４の前記容器の前記第１貼付面に前記第１フィルムが貼り付けられると共に、前記第２貼付面に前記第２フィルムが貼り付けられ、前記第１フィルムと前記第２フィルムとの間で前記容器の内部に液体を封止収納する、液体収納体。
7. 請求項５または６の前記液体収納体と、前記液体収納体に接合される他の液体収納体と、を含むカートリッジセットであって、
   前記液体収納体は、第１流路に前記液体を封止収納すると共に、前記他の液体収納体に挿入される挿入部をさらに有し、
   前記挿入部の内側面は、前記第１流路の一部を形成し、
   前記挿入部の開口端は、前記貼付面よりも低い位置に形成され、
   前記他の液体収納体は、内部に他の液体を収納する第２流路と、一方の端部側に環状の壁面を有する第３環状壁部と、前記第３環状壁部の内側に形成され、第３フィルムが貼り付けられた環状の第３貼付面と、を有し、
   前記第３環状壁部は、前記第３貼付面を超える高さを有し、
   前記第３貼付面に前記第３フィルムが貼り付けられて前記第２流路内に前記他の液体を封止収納する、カートリッジセット。
8. 請求項１または２の前記容器に液体を注入し、前記貼付面を超えるまで液体を充填し、前記フィルムを液中で前記貼付面に貼り付けて液体を封止収納する、液体収納体の製造方法。