JP2016067273A - 容器組立体及び容器組立体キット - Google Patents

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Abstract

【課題】長期間保管した場合であっても、一の水系液体層が他の水系液体層の成分で汚染されることを防止する容器組立体の提供。【解決手段】吸着容器100と反応容器400と洗浄容器200と溶出容器300とが接合されて標的核酸を移動するための流路2が形成される容器組立体1。洗浄容器200は、第1〜第3洗浄容器210,220,230を含むことができ、洗浄容器200は、第1〜第3洗浄液12,14,16と第1〜第3洗浄液12,14,16とは混和しない流体である第1〜第4オイル20,22,24,26を封止収納し、第1〜第3洗浄液12,14,16は、標的核酸が吸着した磁気ビーズ30を洗浄する液体であり、溶出容器300は、溶出液32と溶出液32とは混和しない流体26を封止収納し、溶出液32は、磁気ビーズ30から標的核酸を溶出させる液体である容器組立体1。【選択図】図7

Description

本発明は、生体関連物質を移動するための流路を有する容器組立体及び容器組立体を組み立てるための容器組立体キットに関する。
生化学の分野において、PCR(Polymerase Chain Reaction:ポリメラーゼ連鎖反応)の技術が確立されている。最近、PCR法における増幅の精度や検出感度は向上してきており、極微量の検体(DNA等)を増幅し、検出・解析することができるようになってきた。PCRは、増幅の対象とする核酸(標的核酸)及び試薬を含む溶液(反応液)に熱サイクルを施すことで、標的核酸を増幅させる手法である。PCRの熱サイクルとしては、2段階又は3段階の温度で熱サイクルを施す手法が一般的である。
一方、医療の現場におけるインフルエンザ等の感染症の診断は、現状ではイムノクロマト等の簡易検査キットを用いることが主流である。しかし、このような簡易検査では、精度が不十分となる場合があり、より高い検査精度を期待できるPCRを感染症の診断に適用することが望まれている。
近年、PCR法等に用いるデバイスとして、キャピラリー中に、水系液体層と非水溶性のゲル層とを交互に積層し、核酸を付着させた磁性体粒子を通過させることにより、核酸の精製を行うデバイスが提案されている(特許文献1参照)。しかし、このようなデバイスは、長期間保管した場合、水系液体層の成分がゲル層を通じて徐々に拡散し、一の水系液体層が他の水系液体層の成分で汚染される場合がある。
国際公開第2012/086243号
本発明は、長期間保管した場合であっても、一の水系液体層が他の水系液体層の成分で汚染されることを防止する容器組立体を提供することを目的とする。
本発明は前述の課題の少なくとも一部を解決するためになされたものであり、以下の態様又は適用例として実現することができる。
[適用例1]本発明に係る容器組立体は、
洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体であることを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体によれば、洗浄容器と溶出容器とを接合するまで洗浄容器と溶出容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、溶出液が洗浄液によって汚染され
ることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、洗浄容器と溶出容器とを接合した後でも洗浄液及び溶出液は各液と混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、溶出液が洗浄液によって汚染されることを防止できる。
[適用例2]
本発明に係る容器組立体において、
前記洗浄容器は、それぞれが洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する2以上の個別洗浄容器を含み、
前記溶出容器と接合する一の個別洗浄容器に他の個別洗浄容器が接合することができる。
本適用例に係る容器組立体によれば、2以上の個別洗浄容器に収納された洗浄液で2回以上の洗浄を行うことができるため、より効率よく洗浄を行うことができる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、個別洗浄容器同士を接合するまで洗浄液同士が汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、個別洗浄容器同士を接合した後でも洗浄液同士は混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、洗浄液同士が汚染されることを防止できる。
[適用例3]
本発明に係る容器組立体において、
吸着液と該吸着液と混和しない流体を封止収納する吸着容器が前記洗浄容器に接合されて前記流路が形成され、
前記吸着液は、前記物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記吸着容器は、前記洗浄容器の前記溶出容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合されることができる。
本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と洗浄容器とを接合するまで吸着容器が内容物を封止収納しているため、洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と洗浄容器とを接合した後でも吸着液及び洗浄液は各液と混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例4]
本発明に係る容器組立体において、
前記溶出液とは混和しないオイルを封止収納する反応容器が前記溶出容器に接合されて前記流路が形成され、
前記反応容器は、前記溶出容器の前記洗浄容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合されることができる。
本適用例に係る容器組立体によれば、反応容器を溶出容器に接合することで洗浄、溶出及び反応を連続して行うことができる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、反応容器が溶出容器と接合されるまで別体であるので、溶出容器の長さが長くなることを抑えることができる。
[適用例5]
本発明に係る容器組立体において、
前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部が、前記溶出容器における前記流路を形成する部分の一の端部に挿入され、
前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部の外壁の一部が、前記溶出容
器における前記流路を形成する部分の一の端部の内壁の一部と接触して配置することができる。
本適用例に係る容器組立体によれば、洗浄容器における流路を形成する部分の一の端部の外壁が溶出容器における流路を形成する部分の一の端部の内壁に接触する構成とすることで、洗浄容器から溶出容器へ向かう物質結合性固相担体の移動を容易とすることができる。
[適用例6]
本発明に係る容器組立体は、
吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であることを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と洗浄容器とを接合するまで吸着容器と洗浄容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と洗浄容器とを接合した後でも洗浄液及び吸着液は各液と混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例7]
本発明に係る容器組立体は、
吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体であることを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と溶出容器とを接合するまで吸着容器と溶出容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、溶出液が吸着液によって汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、吸着容器と溶出容器とを接合した後でも溶出液及び吸着液は各液と混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、溶出液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例8]
本発明に係る容器組立体は、
第1洗浄液と該第1洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第1洗浄容器と、前記第1洗浄液とは異なる第2洗浄液と該第2洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第2洗浄容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
前記第1洗浄液及び前記第2洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であることを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体によれば、第1洗浄容器と第2洗浄容器とを接合するまで第1洗浄容器と第2洗浄容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、第2洗浄液が第
1洗浄液によって汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体によれば、第1洗浄容器と第2洗浄容器とを接合した後でも第1洗浄液及び第2洗浄液は各液と混和しない流体によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、第2洗浄液が第1洗浄液によって汚染されることを防止できる。
[適用例9]
本発明に係る容器組立体キットは、
洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、
溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、
を含み、
前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を脱離させる液体であり、
生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記洗浄容器と前記溶出容器とを接合可能に形成することを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、洗浄容器と溶出容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、洗浄容器と溶出容器とを接合するまで溶出液が洗浄液によって汚染されることを防止できる。
[適用例10]
本発明に係る容器組立体キットにおいて、
前記洗浄容器は、それぞれが洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する2以上の個別洗浄容器を含み、
前記溶出容器と接合する一の個別洗浄容器に他の個別洗浄容器が接合可能に形成されることができる。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、個別洗浄容器同士を接合するまで洗浄液同士が汚染されることを防止できる。また、本適用例に係る容器組立体キットによれば、2以上の個別洗浄容器を有することで使用者の要望に応じて洗浄の精度を調整することができる。
[適用例11]
本発明に係る容器組立体キットにおいて、
吸着液と該吸着液と混和しない流体を封止収納する吸着容器をさらに含み、
前記吸着液は、前記物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記吸着容器は、前記洗浄容器の前記溶出容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合可能に形成されることができる。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、吸着容器が内容物を封止収納しているため、吸着容器と洗浄容器とを接合するまで洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例12]
本発明に係る容器組立体キットにおいて、
前記溶出液とは混和しないオイルを封止収納する反応容器をさらに含み、
前記反応容器は、前記溶出容器の前記洗浄容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合可能に形成されることができる。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、反応容器を溶出容器に接合することで洗浄、溶出及び反応を連続して行うことができる。また、本適用例に係る容器組立体キットに
よれば、反応容器が溶出容器と接合されるまで別体であるので、溶出容器の長さが長くなることを抑えることができる。
[適用例13]
本発明に係る容器組立体キットにおいて、
前記洗浄容器は、前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部に挿入部を有し、
前記溶出容器は、前記溶出容器における前記流路を形成する部分の一の端部に受入部を有し、
前記洗浄容器と前記溶出容器とを接続するときに、前記挿入部の外壁の一部は、前記受入部の内壁の一部と接触するように形成されることができる。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、洗浄容器の挿入部の外壁の一部が溶出容器の受入部の内壁の一部に接触する構成とすることで、組立後における洗浄容器から溶出容器へ向かう物質結合性固相担体の移動を容易とすることができる。
[適用例14]
本発明に係る容器組立体キットは、
吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、
洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、
を含み、
前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記吸着容器と前記洗浄容器とを接合可能に形成することを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、吸着容器と洗浄容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、吸着容器と洗浄容器とを接合するまで洗浄液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例15]
本発明に係る容器組立体キットは、
吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、
溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、
を含み、
前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体であり、
生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記吸着容器と前記溶出容器とを接合可能に形成することを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、吸着容器と溶出容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、吸着容器と溶出容器とを接合するまで溶出液が吸着液によって汚染されることを防止できる。
[適用例16]
本発明に係る容器組立体キットは、
第1洗浄液と該第1洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第1洗浄容器と、
前記第1洗浄液とは異なる第2洗浄液と該第2洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第2洗浄容器と、
を含み、
前記第1洗浄液、及び第2洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記第1洗浄容器と前記第2洗浄容器とを接合可能に形成することを特徴とする。
本適用例に係る容器組立体キットによれば、第1洗浄容器と第2洗浄容器とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、第1洗浄容器と第2洗浄容器とを接合するまで第2洗浄液が第1洗浄液によって汚染されることを防止できる。
実施形態に係る容器組立体1の正面図である。 実施形態に係る容器組立体1の側面図である。 実施形態に係る容器組立体1の平面図である。 実施形態に係る容器組立体1の斜視図である。 実施形態に係る容器組立体1の図3におけるA−A断面図である。 実施形態に係る容器組立体1の図3におけるC−C断面図である。 実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。 実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。 PCR装置50の概略構成図である。 PCR装置50のブロック図である。 第3洗浄容器230の斜視図である。 第3洗浄容器230の縦断面図である。 溶出容器300の縦断面図である。 吸着容器100の縦断面図である。 反応容器400の縦断面図である。
以下に本発明のいくつかの実施形態について説明する。以下に説明する実施形態は、本発明の例を説明するものである。本発明は以下の実施形態になんら限定されるものではなく、本発明の要旨を変更しない範囲において実施される各種の変形形態も含む。なお以下で説明される構成の全てが本発明の必須の構成であるとは限らない。
本実施形態に係る容器組立体は、洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体であることを特徴とする。
また、本実施形態に係る容器組立体キットは、洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、を含み、前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を脱離させる液体であり、生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記洗浄容器と前記溶出容器とを接合可能に形成することを特徴とする。
ここで、生体関連物質としては、生体に関連した物質であって、核酸(DNA、RNA)、ポリペプチド、タンパク質、多糖類などの生体高分子、タンパク質、酵素、ペプチド、ヌクレオチド、アミノ酸、ビタミンなどの生体由来の低分子有機化合物、及び無機化合物などを含む。以下の実施形態では、生体関連物質として核酸を用いて説明する。
また、物質結合性固相担体は、生体関連物質を吸着すなわち可逆的な物理的結合により保持することが可能な物質である。物質結合性固相担体の形状は微粒子であることが好ましいが、これに限らず微細な繊維や網状体であってもよく、特に限定されない。物質結合性固相担体は、生体関連物質を吸着したまま容器組立体内を所望の方向へ移動させるため、磁性を有することが好ましい。以下の実施形態では、物質結合性固相担体として核酸を吸着する磁気ビーズ30(後述の図7、図8を参照)を用いて説明する。
洗浄液12,14,16(後述の図7、図8を参照)は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄するための液体である。したがって、洗浄液によって物質結合性固相担体を洗浄することにより、物質結合性固相担体に吸着された生体関連物質をより安定に吸着させつつ、他の夾雑物等を取り除くことができる。
洗浄液とは混和しない流体は、洗浄容器内で洗浄液と混和しない流体であり、洗浄液と相分離することができる。洗浄液とは混和しない流体は、洗浄液に対して不活性な物質であり、空気などの気体も含む。洗浄液とは混和しない流体は、洗浄液が水系液体である場合には、これと混和しない例えばオイル、オイルゲルなどを用いることができる。オイルゲルは、液体状のオイルをゲル化剤でゲル化したものである。なお、本実施形態において単に「オイル」という場合にはゲル化したものを除く。以下の実施形態では、洗浄液とは混和しない流体としてオイル20,22,24,26(後述の図7、図8を参照)を用いて説明する。
溶出液32(後述の図7、図8を参照)は、物質結合性固相担体から生体関連物質を脱離させて溶出液中に溶出させるものである。溶出液は、例えば、水や緩衝液を用いることができる。
溶出液とは混和しない流体は、溶出容器内で溶出液と混和しない流体であり、溶出液と相分離することができる。溶出液とは混和しない流体は、溶出液に対して不活性な物質である。以下の実施形態では、洗浄液とは混和しない流体としてオイル26(後述の図7、図8を参照)を用いて説明する。
1.容器組立体の概要
まず、図1〜図4を用いて、本実施形態に係る容器組立体1の概要について説明する。図1は、実施形態に係る容器組立体1(以下、カートリッジということがある)の正面図である。図2は、実施形態に係る容器組立体1の側面図である。図3は、実施形態に係る容器組立体1の平面図である。図4は、実施形態に係る容器組立体1の斜視図である。なお、図1〜図3における容器組立体1の状態を正立状態として説明する。
容器組立体1は、吸着容器100と、洗浄容器200と、溶出容器300と、反応容器400と、を含む。容器組立体1は、吸着容器100から反応容器400まで連通する図示しない流路を形成する容器である。容器組立体1の流路は、一方の端部はキャップ110によって、他方の端部は底部402によって閉じられている。
容器組立体1は、吸着容器100内で図示しない磁気ビーズに核酸を結合させ、磁気ビーズが洗浄容器200内を移動する間に精製し、溶出容器300内で図示しない溶出液液滴中に核酸を溶出させる前処理と、反応容器400内で核酸を含む溶出液の液滴に対しポリメラーゼ反応の熱サイクル処理と、を行う容器である。
容器組立体1の材質は、特に限定されないが、例えば、ガラス、高分子、金属などとすることができる。容器組立体1の材質にガラスや高分子などの可視光において透明性を有する材質を選択すると、容器組立体1の外部から内部(空洞内)を観察することができる
のでより好ましい。また、容器組立体1の材質に、磁力を透過する物質や非磁性体を選択すると、容器組立体1に図示しない磁気ビーズを通過させる場合などに、容器組立体1の外部から磁力を与えることによってこれを行うことが容易化されるため好ましい。容器組立体1の材質は、例えば、ポリプロピレン樹脂であることができる。
吸着容器100は、内部に図示しない吸着液を収容する円筒状のシリンジ部120と、シリンジ部120の内部に挿入された可動式の押子であるプランジャー部130と、プランジャー部130の一方の端部に固定されるキャップ110と、を有する。吸着容器100は、キャップ110をシリンジ部120に対して移動することでプランジャー部130をシリンジ部120の内面に摺動させ、シリンジ部120内に収容した図示しない吸着液を洗浄容器200へ押し出すことができる。なお、吸着液については、後述する。
洗浄容器200は、第1〜第3洗浄容器210,220,230を接合して組み立てることで得られる。第1〜第3洗浄容器210,220,230は、それぞれ内部に図示しないオイル層で仕切られた1つ以上の洗浄液層を有する。そして、第1〜第3洗浄容器210,220,230を接合することで、洗浄容器200は内部に図示しない複数のオイル層によって区切られた複数の洗浄液層を有する。本実施形態の洗浄容器200では第1〜第3洗浄容器210,220,230からなる3つの洗浄容器を用いた例について説明したが、これに限らず、洗浄液層の数に応じて適宜増減することができる。なお、洗浄液については、後述する。
溶出容器300は、洗浄容器200の第3洗浄容器230に接合され、内部に溶出液をプラグの形状を維持可能に収容する。ここで、「プラグ」とは、流路内において、特定の液体が一区画を占める場合の液体を意味する。より具体的には、特定の液体のプラグは、流路の長手方向において、実質的に当該特定の液体のみが内部を占める柱状のものを指し、液体のプラグによって流路の内部の一定の空間が区画されている状態を示す。ここでの実質的にとの表現は、プラグの周囲、すなわち流路の内壁に少量(例えば薄膜状)の他の物質(液体等)が存在していてもよいことを指す。なお、溶出液については、後述する。
核酸精製デバイス5は、吸着容器100と、洗浄容器200と、溶出容器300と、を含む。
反応容器400は、溶出容器300に接合され、溶出容器300から押し出された液体を受け入れる容器であると共に、熱サイクル処理時に検体を含む溶出液の液滴を収容する容器である。また、反応容器400は、図示しない試薬を収容する。なお、試薬については、後述する。
2.容器組立体の詳細構造
次に、容器組立体1の詳細構造について、図5及び図6を用いて説明する。図5は、実施形態に係る容器組立体1の図3におけるA−A断面図である。図6は、実施形態に係る容器組立体1の図3におけるC−C断面図である。なお、実際には、容器組立体1は、洗浄液などの内容物が充填された状態で組み立てられるものであるが、図5及び図6では容器組立体1の構造を説明するため内容物の記載を省略する。
2−1.吸着容器
吸着容器100は、シリンジ部120の一方の開口端部からプランジャー部130が挿入され、プランジャー部130の開口端部にはキャップ110が挿入されている。キャップ110は、その中央に通気部112を有し、プランジャー部130を操作したときに通気部112によってプランジャー部130の内圧の変化を抑えることができる。
プランジャー部130は、シリンジ部120の内周面を摺動する略円筒状の押子であり、キャップ110が挿入された開口端部と、該開口端部に対向する底部からシリンジ部120の長手方向に延びる棒状部132と、棒状部132の先端の先端部134と、を有する。棒状部132はプランジャー部130の底部の中央から突出しており、棒状部132の周囲には貫通孔が形成されてプランジャー部130内とシリンジ部120内とは連通する。
シリンジ部120は、容器組立体1の流路2の一部を構成し、プランジャー部130を収容する大径部と、該大径部より内径が小さい小径部と、大径部から小径部へ内径を縮径する縮径部と、該小径部の先端に吸着挿入部122と、吸着挿入部122の周囲を覆う円筒状の吸着カバー部126と、を有する。容器組立体1の流路2の一部となる大径部、小径部及び吸着挿入部122は、略円筒状である。
プランジャー部130の先端部134は、作業者への提供時において、シリンジ部120の小径部を封止して大径部及び縮径部と小径部とを仕切り、2つの区画を形成する。
シリンジ部120の吸着挿入部122は、洗浄容器200における第1洗浄容器210の一方の開口端部である第1受入部214内に挿入して嵌合することでシリンジ部120と第1洗浄容器210とを接合する。吸着挿入部122の外周面と第1受入部214の内周面とは密着して内容物である液体が外部へ漏れることを防止する。
2−2.洗浄容器
洗浄容器200は、容器組立体1の流路2の一部を構成し、第1〜第3洗浄容器210,220,230からなる組立体である。第1〜第3洗浄容器210,220,230は、基本的な構造は同じであるので、第1洗浄容器210の構造について説明し、第2、第3洗浄容器220,230についての説明は省略する。
第1洗浄容器210は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、一方の開口端部に形成された第1挿入部212と、他方の開口端部に形成された第1受入部214と、第1挿入部212の周囲を覆う円筒状の第1カバー部216と、を有する。
第1挿入部212の外径は第2受入部224の内径と略同じである。また、第1受入部214の内径は吸着挿入部122の外径と略同じである。
第1洗浄容器210の第1挿入部212を第2洗浄容器220の第2受入部224に挿入して嵌合することで、第1挿入部212の外周が第2受入部224の内周と密着してシールすると共に、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とを接合する。同様にして、第1〜第3洗浄容器210,220,230が連結されて洗浄容器200を形成する。ここで「シールする」とは、少なくとも容器等に収容された液体または気体が外部に漏れないように封ずることであり、外部から内部へ液体または気体が侵入することを封ずることを含んでもよい。
2−3.溶出容器
溶出容器300は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体1の流路2の一部を構成する。溶出容器300は、一方の開口端部に形成された溶出挿入部302と、他方の開口端部に形成された溶出受入部304と、を有する。
溶出受入部304の内径は第3洗浄容器230の第3挿入部232の外径と略同じである。第3挿入部232を溶出受入部304に挿入して嵌合することで、第3挿入部232の外周が溶出受入部304の内周と密着してシールすると共に、第3洗浄容器230と溶
出容器300とを接合する。
2−4.反応容器
反応容器400は、容器組立体1の長手方向に延びる略円筒状であって、容器組立体1の流路2の一部を構成する。反応容器400は、開口端部に形成された反応受入部404と、他方の閉じた端部に形成された底部402と、反応受入部404を覆うリザーバー部406と、を有する。
反応受入部404の内径は、溶出容器300の溶出挿入部302の外径と略同じである。溶出挿入部302を反応受入部404に挿入して嵌合することで、溶出容器300と反応容器400は接合する。
反応受入部404の周囲には所定の空間を有するリザーバー部406が設けられる。リザーバー部406は、プランジャー部130の移動によって反応容器400から溢れ出る液体を受容できる容積を有する。
3.容器組立体の内容物及び容器組立体の操作
次に、容器組立体1の内容物について図7の(a)を用いて説明し、容器組立体1の操作について図7及び図8を用いて説明する。図7は、実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。図8は、実施形態に係る容器組立体1の操作を説明する模式図である。なお、図7及び図8では内容物の状態を説明するため、各容器を流路2で表現し、外形状や接合構造については省略している。
3−1.内容物
図7の(a)は、図1の状態における流路2内の内容物の状態を示す。流路2内の内容物は、キャップ110側から反応容器400へ向かって順に、吸着液10、第1オイル20、第1洗浄液12、第2オイル22、第2洗浄液14、第3オイル24、磁気ビーズ30、第3オイル24、第3洗浄液16、第4オイル26、溶出液32、第4オイル26、試薬34である。
流路2は、容器組立体1の長手方向に直交する面の断面積が大きい部分(流路2の太い部分)と小さい部分(流路2の細い部分)とが交互に配置される。第1〜第4オイル20,22,24,26及び溶出液32は、その各液の一部または全部が流路2の細い部分に収容されている。流路2の細い部分の断面積は、隣接する互いに混和しない液体(流体であってもよい。以下同じ)の界面が流路2の細い部分に配置された場合に、その界面を安定に維持可能な面積を有する。したがって、流路2の細い部分に配置された液体によって、その液体とその液体の上下に配置された他の液体との配置関係を安定に維持することができる。また、流路2の細い部分に配置された液体と流路2の太い部分に配置された他の液体との界面が流路2の太い部分に形成される場合であっても、強い衝撃によってその界面が乱れても、静止した状態に置くことで、界面は所定の位置で安定に形成される。
流路2の細い部分は、吸着挿入部122、第1挿入部212、第2挿入部222、第3挿入部232、溶出挿入部302の内側に形成され、溶出容器300においては溶出挿入部302を超えて上方へ延在する。なお、流路2の細い部分に収容された液体は、容器を組み立てる前であっても安定に維持される。
3−1−1.オイル
第1〜第4オイル20,22,24,26は、いずれもオイルからなり、図7の状態において各オイルの前後の液体の間でプラグとして存在する。第1〜第4オイル20,22,24,26がプラグとして存在するために、各オイルの前後で隣接する液体は、互いに
相分離する液体、すなわち混和しない液体が選択される。また、第1〜第4オイル20,22,24,26を構成するオイルは、互いに異なる種類のオイルであってもよい。これらに用いることができるオイルとしては、例えば、ジメチルシリコーンオイル等のシリコーン系オイル、パラフィン系オイル及びミネラルオイル並びにそれらの混合物から選択される一種を挙げることができる。
3−1−2.吸着液
吸着液10とは、磁気ビーズ30に核酸を吸着させる場となる液体のことを指し、例えば、カオトロピック物質を含む水溶液である。吸着液10としては、例えば、5Mグアニジンチオシアン酸塩、2%Triton X−100、50mM Tris−HCl(pH7.2)を用いることができる。吸着液10はカオトロピック物質を含有すれば特に限定されないが、吸着液10には細胞膜の破壊あるいは細胞中に含まれるタンパク質を変性させる目的で界面活性剤を含有させてもよい。この界面活性剤としては、一般に細胞等からの核酸抽出に使用されるものであれば特に限定されないが、具体的には、Triton−Xなどのトリトン系界面活性剤やTween20などのツイーン系界面活性剤のような非イオン性界面活性剤、N−ウラロイルサルコシンナトリウム(SDS)等の陰イオン性界面活性剤が挙げられるが、特に非イオン性界面活性剤を、0.1〜2%の範囲となるように使用するのが好ましい。さらには、2−メルカプトエタノールあるいはジチオスレイトール等の還元剤を含有させることが好ましい。溶解液は、緩衝液であってもよいが、pH6〜8の中性であることが好ましい。これらのことを考慮し、具体的には、3M〜7Mのグアニジン塩、0%〜5%の非イオン性界面活性剤、0mM〜0.2mMのEDTA、0M〜0.2Mの還元剤等を含有することが好ましい。
ここで、カオトロピック物質とは、水溶液中でカオトロピックイオン(イオン半径の大きな1価の陰イオン)を生じ、疎水性分子の水溶性を増加させる作用を有しており、核酸の固相担体への吸着に寄与するものであれば、特に限定されない。具体的には、グアニジン塩酸塩、ヨウ化ナトリウム、過塩素酸ナトリウム等が挙げられるが、これらのうち、タンパク質変成作用の強いグアニジンチオシアン酸塩またはグアニジン塩酸塩が好ましい。これらのカオトロピック物質の仕様濃度は、各物質によって異なり、例えば、グアニジンチオシアン酸塩を使用する場合には、3M〜5.5Mの範囲で、グアニジン塩酸塩を使用する場合は、5M以上で使用するのが好ましい。
水溶液中にカオトロピック物質が存在することによって、水溶液中の核酸は、水分子に囲まれて存在するよりも、固体に吸着して存在するほうが熱力学的に有利となるため、磁気ビーズ30の表面に吸着することとなる。
3−1−3.洗浄液
第1〜第3洗浄液12,14,16は、核酸の結合した磁気ビーズ30を洗浄するものである。
第1洗浄液12は、第1オイル20及び第2オイル22のいずれとも相分離する液体である。第1洗浄液12は、水または低塩濃度水溶液であることが好ましく、低塩濃度水溶液の場合、緩衝液であることが好ましい。低塩濃度水溶液の塩濃度は、100mM以下が好ましく、50mM以下がより好ましく、10mM以下が最も好ましい。また、第1洗浄液12は、上述したような界面活性剤を含有してもよく、pHは特に限定されない。第1洗浄液12を緩衝液とするための塩は特に限定されないが、トリス、ヘペス、ピペス、リン酸などの塩が好ましい。さらに、第1洗浄液12は、アルコールを核酸の担体への吸着、逆転写反応、PCR反応などを阻害しない量だけ含むことが好ましい。この場合、アルコール濃度は特に限定されない。
なお、第1洗浄液12にカオトロピック物質を含有させてもよい。例えば、第1洗浄液12にグアニジン塩酸塩を含有させると、磁気ビーズ30等に吸着した核酸の吸着を維持または強化しつつ磁気ビーズ30等を洗浄することができる。
第2洗浄液14は、第2オイル22及び第3オイル24のいずれとも相分離する液体である。第2洗浄液14は、基本的に、第1洗浄液12と同じでも異なる組成であってもよいが、カオトロピック物質を事実上含まない溶液であるほうが好ましい。後の溶液に、カオトロピック物質の持ち込みを無くすためである。第2洗浄液14としては、例えば5mMトリス塩酸緩衝液からなってもよい。第2洗浄液14は、上述したように、アルコールを含むことが好ましい。
第3洗浄液16は、第3オイル24及び第4オイル26のいずれとも相分離する液体である。第3洗浄液16は、基本的に、第2洗浄液14と同じでも異なる組成であってもよいが、アルコールを含まない。また、第3洗浄液16は、アルコールを反応容器400に持ち込むことを防止するためにクエン酸を含むことができる。
3−1−4.磁気ビーズ
磁気ビーズ30は、核酸を吸着するビーズであり、容器組立体1の外にある磁石3によって移動させることができるように比較的強い磁性を有することが好ましい。磁気ビーズ30は、例えば、シリカビーズまたはシリカコーティングされたビーズであってもよい。磁気ビーズ30は、好ましくはシリカコーティングされたビーズであってもよい。
3−1−5.溶出液
溶出液32は、第4オイル26と相分離する液体であり、溶出容器300中の流路2内で第4オイル26,26に挟まれたプラグとして存在する。溶出液32は、磁気ビーズ30に吸着した核酸を、磁気ビーズ30から溶出液32中に溶出させる液体である。また、溶出液32は、加熱によって第4オイル26中で液滴となる。溶出液32は、例えば、純水を用いることができる。ここで、「液滴」とは、自由表面で囲まれた液体である。
3−1−6.試薬
試薬34は、反応に必要な成分を含む。試薬34は、反応容器400における反応がPCRである場合には、溶出液の液滴36(図8を参照)の中に溶出させた標的核酸(DNA)を増幅するためDNAポリメラーゼなどの酵素及びプライマー(核酸)と、増幅産物を検出するための蛍光プローブのうち少なくとも一つが含まれていることができ、ここでは、プライマー、酵素及び蛍光プローブの全てが含まれている。試薬34は、第4オイル26とは相溶せず、核酸を含む溶出液32の液滴36に接すると溶けて反応するものであり、反応容器400内の流路2の重力方向における最下部の領域に固体状態で存在する。例えば、試薬34は、凍結乾燥(フリーズドライ)したものを用いることができる。
3−2.容器組立体の操作
容器組立体1の操作の一例として、図7及び図8を用いて説明する。
容器組立体1の操作は、
(A)吸着容器100、洗浄容器200、溶出容器300及び反応容器400を接合して容器組立体1を組み立てる工程と、
(B)吸着液10が収容された吸着容器100に、核酸を含有する検体を導入する工程と、
(C)第2洗浄容器220から吸着容器100へ磁気ビーズ30を移動する工程と、
(D)吸着容器100を揺動して核酸を磁気ビーズ30に吸着させる工程と、
(E)吸着容器100から、第1オイル20、第1洗浄液12、第2オイル22、第2洗
浄液14、第3オイル24、第3洗浄液16及び第4オイル26の順に通過して、溶出容器300へ、核酸が吸着した磁気ビーズ30を移動する工程と、
(F)溶出容器300内で、溶出液32に対して磁気ビーズ30から核酸を溶出させる工程と、
(G)核酸を含む液滴を反応容器400内の試薬34に接触させる工程と、
を含む。
以下、各工程について順番に説明する。
(A)容器組立体1を組み立てる工程
図7の(a)に示すように、組み立てる工程は、吸着容器100から反応容器400までを接合して、吸着容器100から反応容器400まで連続する流路2を形成するように容器組立体1を組み立てる。なお、図7の(a)では、吸着容器100はキャップ110が装着されているが、キャップ110をプランジャー部130に装着するのは(B)工程の後である。
より具体的には、反応容器400の反応受入部404に溶出容器300の溶出挿入部302を挿入し、溶出容器300の溶出受入部304に第3洗浄容器230の第3挿入部232を挿入し、第3洗浄容器230の第3受入部234に第2洗浄容器220の第2挿入部222を挿入し、第2洗浄容器220の第2受入部224に第1洗浄容器210の第1挿入部212を挿入し、第1洗浄容器210の第1受入部214に吸着容器100の吸着挿入部122を挿入する。
(B)検体を導入する工程
導入する工程は、例えば検体が付着した綿棒を、吸着容器100のキャップ110が装着される開口から吸着液10の中に差し入れ、吸着液10にこれを浸漬して行う。より具体的には、吸着容器100のシリンジ部120に挿入された状態のプランジャー部130の一方の端部にある開口から綿棒を差し入れる。次に、綿棒を吸着容器100から取り出し、キャップ110を装着する。これが図7の(a)の状態である。また、検体は、ピペット等によって吸着容器100へ導入してもよい。また、検体がペースト状や固体状であれば、例えば、吸着容器100へ匙やピンセット等によりプランジャー部130の内壁に付着させたり投入したりしてもよい。図7の(a)に示すように、シリンジ部120及びプランジャー部130の中は途中まで吸着液10が充填されているが、キャップ110の装着される開口側には空間が残されている。
検体には標的となる核酸が含まれている。以下、これを単に標的核酸ということがある。標的核酸は、例えば、DNAやRNA(DNA:Deoxyribonucleic Acid、及び/又はRNA:Ribonucleic Asid)である。標的核酸は、検体から抽出され、後述する溶出液32に溶出された後、例えばPCRの鋳型として利用される。検体としては、血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、その他各種の生体試料などが挙げられる。
(C)磁気ビーズを移動する工程
磁気ビーズ30を移動する工程は、図7の(a)に示すように第2洗浄容器220の第3オイル24,24に挟まれてプラグ状に存在する磁気ビーズ30を、容器外部に配置した磁石3の磁力を印加した状態で、磁石3を吸着容器100へ向かって移動させることによって行う。
この磁気ビーズ30の移動に合わせて、あるいはこれより先にキャップ110及びプランジャー部130をシリンジ部120から抜き出す方向へ移動して、吸着液10内の検体
をプランジャー部130内からシリンジ部120内へ移動させる。このプランジャー部130の移動によって、先端部134によって塞がれていた流路2は吸着液10へ連通する。
磁気ビーズ30は、磁石3の移動に伴って流路2内を上昇し、図7の(b)に示すように、検体のある吸着液10内へ到達する。
(D)核酸を磁気ビーズに吸着させる工程
核酸を吸着させる工程は、吸着容器100を揺動させて行われる。この工程は、吸着容器100の開口がキャップ110によって吸着液10が漏れ出さないように封止されているので、効率的に行うことができる。この工程により、標的核酸は、カオトロピック剤の作用により、磁気ビーズ30の表面に吸着される。この工程では、磁気ビーズ30の表面に標的核酸以外の核酸や蛋白質が吸着してもよい。
吸着容器100を揺動させる方法としては、公知のボルテックスシェイカーなどの装置を用いてもよいし、作業者の手で振り混ぜてもよい。また、磁気ビーズ30の磁性を利用して、外部から磁場を与えながら吸着容器100を揺動してもよい。
(E)核酸が吸着した磁気ビーズを移動する工程
核酸が吸着した磁気ビーズ30を移動する工程は、吸着容器100、洗浄容器200及び溶出容器300の外部から磁石3の磁力を印加しながら移動することによって磁気ビーズ30を吸着液10、第1〜第4オイル20,22,24,26及び第1〜第3洗浄液12,14,16の中を移動させる。
磁石3は、例えば、永久磁石、電磁石等を用いることができる。また、磁石3は、作業者の手で動かして行ってもよいし、機械装置等を利用して行ってもよい。磁気ビーズ30は、磁力によって引き寄せられる性質を有しているため、この性質を利用して、吸着容器100、洗浄容器200、そして溶出容器300へと、磁石3の相対的な配置を変化させて、流路2内を移動させる。磁気ビーズ30が各洗浄液を通過するときの速度は特に限定されないし、同一洗浄液内で流路2の長手方向に沿って往復するようにして移動させてもよい。なお、磁気ビーズ30以外の粒子等をチューブ内で移動させる場合は、例えば、重力や電位差を利用してこれを行うことができる。
(F)核酸を溶出させる工程
核酸を溶出させる工程は、溶出容器300内で、溶出液の液滴36に対して磁気ビーズ30から核酸を溶出させる。図7における溶出液32は、溶出容器300の流路の細い部分にプラグとして存在していたが、上記のように磁気ビーズ30を移動させる間に、反応容器400を加熱することで内容液が膨張し、図8に示すように液滴36として溶出容器300内を上方へ移動している。そして、図8の(a)に示すように、磁気ビーズ30が溶出容器300の溶出液の液滴36に到達すると、溶出液の作用により、磁気ビーズ30に吸着された標的核酸が、溶出液の液滴36内に溶出する。
(G)試薬34に接触させる工程
試薬34に接触させる工程は、核酸を含む液滴36を反応容器400内の最下部にある試薬34に接触させる。具体的には、図8の(b)に示すように、キャップ110を押し、プランジャー部130の先端部134によって第1オイル20を押し下げることで、磁石3の磁力が印加された磁気ビーズ30を所定位置に維持したまま、標的核酸が溶出した溶出液の液滴36が反応容器400へ移動し、反応容器400の最下部にある試薬34に接触する。液滴36が接触した試薬34は溶けて溶出液中の標的核酸と混ざり合い、例えば熱サイクルを用いたPCRを実施することができる。
4.PCR装置
図9及び図10を用いて、容器組立体1を用いて核酸溶出処理及びPCRを行うPCR装置50について説明する。図9は、PCR装置50の概略構成図である。図10は、PCR装置50のブロック図である。
PCR装置50は、回転機構60と、磁石移動機構70と、押圧機構80と、蛍光測定器55と、コントローラー90と、を有する。
4−1.回転機構
回転機構60は、回転用モーター66とヒーター65とを含み、回転用モーター66を駆動することにより容器組立体1及びヒーター65を回転する。回転機構60が容器組立体1及びヒーター65を回転して上下反転させることによって、反応容器400の流路内において標的核酸を含む液滴が移動し、熱サイクル処理が行われる。
ヒーター65は、図示しない複数のヒーターを含み、例えば、溶出用、高温用及び低温用のヒーターを含むことができる。溶出用ヒーターは、容器組立体1のプラグ状の溶出液を加熱し、標的核酸の磁気ビーズからの溶出液への溶出を促進する。高温用ヒーターは、反応容器400の流路の上流側の液体を低温用ヒーターよりも高い温度に加熱する。低温用ヒーターは、反応容器の流路の底部402を加熱する。高温用ヒーターと低温用ヒーターによって、反応容器400の流路内の液体に温度勾配を形成することができる。ヒーター65には、温度制御装置が設けられ、コントローラー90からの指令に従って、容器組立体1内の液体を処理に適した温度に設定できる。
ヒーター65は、反応容器400の底部402の外壁が露出する開口を有する。蛍光測定器55は、その開口から溶出液の液滴の輝度を測定する。
4−2.磁石移動機構
磁石移動機構70は、磁石3を移動させる機構である。磁石移動機構70は、容器組立体1内の磁気ビーズを磁石3に引き寄せるとともに、磁石3を移動させることによって磁気ビーズを容器組立体1内で移動させる。磁石移動機構70は、一対の磁石3と、昇降機構と、揺動機構と、を有する。
揺動機構は、一対の磁石3を図9の左右方向(図9の前後方向であってもよい)に揺動させる機構である。一対の磁石3は、PCR装置50に装着された容器組立体1を左右方向から挟みこむように配置(図7、図8を参照)され、容器組立体1の流路と直交する方向(ここでは図9の左右方向)で磁気ビーズと磁石3との距離を近接させることができる。したがって、一対の磁石3を左右方向に矢印のように揺動させると、その動きに合わせて容器組立体1内の磁気ビーズが左右方向に移動する。昇降機構は、磁石3を上下方向に移動させ、磁石3の移動に合わせて磁気ビーズを図9の上下方向に移動させることができる。
4−3.押圧機構
押圧機構80は、容器組立体1のプランジャー部を押す機構であり、プランジャー部が押圧機構80によって押されることによって、溶出容器300内の液滴が反応容器400内に押し出され、反応容器400内でPCRを実施することができるようになる。
図9では、押圧機構80を正立した容器組立体1の上方に配置して示しているが、押圧機構80がプランジャー部を押す方向は、図9における上下方向ではなく、例えば、上下方向に対して45度傾いていてもよい。このようにすることで、磁石移動機構70と干渉
しない位置に押圧機構80を配置することが容易になる。
4−4.蛍光測定器
蛍光測定器55は、反応容器400の液滴の輝度を測定する測定器である。蛍光測定器55は、反応容器400の底部402に対向する位置に配置される。なお、蛍光測定器55は、マルチプレックスPCRに対応できるように、複数の波長域の輝度検出が可能であると望ましい。
4−5.コントローラー
コントローラー90は、PCR装置50の制御を行う制御部である。コントローラー90は、例えばCPUなどのプロセッサーと、ROMやRAMなどの記憶装置とを有する。記憶装置には各種プログラム及びデータが記憶されている。また、記憶装置は、プログラムを展開する領域を提供する。プロセッサーが記憶装置に記憶されたプログラムを実行することによって、各種の処理が実現される。
例えば、コントローラー90は、回転用モーター66を制御して、容器組立体1を所定の回転位置まで回転させる。回転機構60には図示しない回転位置センサが設けられており、コントローラー90は、回転位置センサの検出結果に応じて回転用モーター66を駆動・停止させる。
また、コントローラー90は、ヒーター65を制御して、ヒーターをオン・オフ制御して発熱させ、容器組立体1内の液体を所定の温度まで加熱する。
また、コントローラー90は、磁石移動機構70を制御して、磁石3を上下方向に移動させ、図示しない位置センサの検出結果に応じて磁石3を図9の左右方向に揺動させる。
また、コントローラー90は、蛍光測定器55を制御して、反応容器400内の液滴の輝度を測定する。この測定結果は、コントローラー90の図示しない記憶装置に保存される。
このPCR装置50に容器組立体1を装着し、上記3−2の(C)〜(G)の工程を実施することができ、さらにPCRを実施することができる。
5.容器組立体キット
本実施形態に係る容器組立体キットについて図11〜図15を用いて説明する。図11は、第3洗浄容器230の斜視図である。図12は、第3洗浄容器230の縦断面図である。図13は、溶出容器300の縦断面図である。図14は、吸着容器100の縦断面図である。図15は、反応容器400の縦断面図である。図11〜図15に示す容器組立体キットは、図1〜図8に示す容器組立体1を組み立てるものであり、容器組立体1の説明と重複する説明は省略する。
容器組立体キットは、図11及び図12に示す第3洗浄容器230と図13に示す溶出容器300とを含む。容器組立体キットは、標的核酸を移動するための流路2を形成するように第3洗浄容器230と溶出容器300とを接合可能に形成することを特徴とする。ここでは、洗浄容器としての最小構成単位である1つの第3洗浄容器230を洗浄容器として説明する。
5−1.洗浄容器
図11及び図12に示すように、洗浄容器である第3洗浄容器230は、洗浄液である第3洗浄液16とこの第3洗浄液16とは混和しない流体である第3オイル24及び第4
オイル26を封止収納する。
第3洗浄容器230は、第3洗浄容器230における流路2を形成する部分の一の端部に第3挿入部232を有し、他の端部に第3受入部234を有する。第3洗浄容器230の内側に形成される流路2は、第3挿入部232から第3受入部234まで貫通する。流路2の外径は、第3受入部234から第3挿入部232へ向かうに従って徐々に小さくなるように構成されている。
第3挿入部232は、略円筒状であって、横断面円形の外壁232aを有する。
第3洗浄容器230は、第3挿入部232の周囲に形成され、かつ、外壁232aの上部から下方に向けて開放する第3カバー部236を有する。
第3カバー部236は、上端が第3挿入部232の外壁232aに接続し、下端が第3挿入部232を超えて延在する。第3カバー部236の内壁236aは、下方に向かって拡径して環状の段部236bを有する。段部236bは、第3挿入部232の下端よりもわずかに下方にあり、その表面にフィルム232cが貼られている。
第3受入部234は、略円筒状であって、横断面円形の内壁234aを有する。内壁234aは、上方に向かって拡径して管状の段部234bを有する。段部234bは、第3受入部234の上端付近にあり、その表面にフィルム234cが貼られている。なお、図11においては、フィルム234cが省略されている。
第3洗浄容器230は、その流路2内に、第3受入部234側から第3オイル24、第3洗浄液16、第4オイル26の順に収納された状態で上下の開口をフィルム234c,232cによって封止されている。第3洗浄液16と第3オイル24とは界面16aで混和せず、第3洗浄液16と第4オイル26とは界面16bで混和しない。したがって、第3洗浄容器230内に封止収納された第3オイル24、第3洗浄液16、第4オイル26は、第3洗浄液16をプラグ状に保持する。
5−2.溶出容器
図13に示すように、溶出容器300は、溶出液32と溶出液32とは混和しない流体である第4オイル26,26を封止収納する。
溶出容器300の形状は、基本的に第3洗浄容器230と同じである。
溶出容器300は、溶出容器300における流路2を形成する部分の一の端部に溶出挿入部302を有し、他の端部に溶出受入部304を有する。溶出容器300の内側に形成される流路2は、溶出挿入部302から溶出受入部304まで貫通する。流路2の外径は、溶出受入部304から溶出挿入部302へ向かうに従って徐々に小さくなるように構成されている。
溶出挿入部302は、略円筒状であって、横断面円形の外壁302aを有する。
溶出容器300は、溶出挿入部302の周囲に形成され、かつ、外壁302aの上部から下方に向けて開放する溶出カバー部306を有する。
溶出カバー部306は、上端が溶出挿入部302の外壁302aに接続し、下端が溶出挿入部302を超えて延在する。溶出カバー部306の内壁306aは、下方に向かって拡径して環状の段部306bを有する。段部306bは、溶出挿入部302の下端よりも
わずかに下方にあり、その表面にフィルム302cが貼られている。
溶出受入部304は、略円筒状であって、横断面円形の内壁304aを有する。内壁304aは、上方に向かって拡径して管状の段部304bを有する。段部304bは、溶出受入部304の上端付近にあり、その表面にフィルム304cが貼られている。
溶出容器300は、その流路2内に、溶出受入部304側から第4オイル26、溶出液32、第4オイル26の順に収納された状態で上下の開口をフィルム304c,302cによって封止されている。溶出液32と上側の第4オイル26とは界面32aで混和せず、溶出液32と下側の第4オイル26とは界面32bで混和しない。したがって、溶出容器300内に封止収納された第4オイル26,26及び溶出液32は、溶出液32をプラグ状に保持する。
このような容器組立体キットによれば、第3洗浄容器230と溶出容器300とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、第3洗浄容器230と溶出容器300とを接合するまで溶出液32が第3洗浄液16によって汚染されることを防止できる。
容器組立体キットを組み立てた図1〜図8の容器組立体1は、第3洗浄容器230(又は洗浄容器200)と、溶出容器300と、を含む。第3洗浄容器230と溶出容器300とが接合し、標的核酸を移動するための流路2を形成する。このような容器組立体1によれば、第3洗浄容器230と溶出容器300とを接合するまで第3洗浄容器230と溶出容器300とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、溶出液32が第3洗浄液16によって汚染されることが防止できる。また、このような容器組立体1によれば、第3洗浄容器230と溶出容器300とを接合した後でも第3洗浄液16及び溶出液32は各液と混和しない第4オイル26によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、溶出液32が第3洗浄液16によって汚染されることを防止できる。
5−3.接合構造
第3洗浄容器230における流路2を形成する部分の一の端部の外壁の一部が、溶出容器300における流路2を形成する部分の一の端部の内壁の一部と接触して配置される。より具体的には、第3洗浄容器230の第3挿入部232の外壁232aの一部は、溶出受入部304の内壁304aの一部と接触して配置された状態で第3洗浄容器230と溶出容器300とが接合している。この外壁232aの一部と内壁304aの一部との接触によって、この接合部分において流路2から容器組立体1の外部へ内容物が漏れ出さないようにシールされてもよい。
第3洗浄容器230と溶出容器300との接合は、第3挿入部232及び溶出受入部304がフィルム232c及びフィルム304cを突き破って第3挿入部232を溶出受入部304へ挿入することで行う。したがって、第3挿入部232及び溶出受入部304がフィルム232c及びフィルム304cを突き破って初めて第3洗浄容器230内の流路2と溶出容器300内の流路2とが連通する。
このような容器組立体キットによれば、第3洗浄容器230の第3挿入部232の外壁232aが溶出容器300の溶出受入部304の内壁304aに接触する構成とすることで、組立後における第3洗浄容器230から溶出容器300へ向かう標的核酸の移動を容易とすることができる。2つの容器を接合する場合、各容器の端部の大きさを全く同じにすることは容易ではないため、流路2には段部が生じることになる。特に、標的核酸の移動は微小な磁気ビーズ30によって行わるため、この段部が移動方向で縮径する段部であると磁気ビーズ30の移動を著しく制限することになる。しかし、接合部分を外壁232aが内壁304aに接触する構成としているので、第3洗浄容器230から溶出容器30
0へ向かう方向において縮径する段部はなく、磁気ビーズ30の移動を容易とすることができるのである。
また、外壁232a及び内壁304aは下方へ向かうに従ってわずかに外径が細くなる円錐台形状を含んでもよい。外壁232aと内壁304aとの間の接触により、より確実にシールすることができる。
5−4.個別洗浄容器
図1〜図8に示した実施形態の容器組立体1のように、容器組立体キットにおける洗浄容器200は、それぞれが洗浄液である第1〜第3洗浄液12,14,16とこれら第1〜第3洗浄液12,14,16とは混和しない流体である第1〜第4オイル20,22,24,26を封止収納する2以上の個別洗浄容器である第1〜第3洗浄容器210,220,230を含むことができる。
第1及び第2洗浄容器210,220は、第3洗浄容器230と基本的な構成が同じであるので、重複する説明は省略する。
図5及び図6に示すように、溶出容器300と接合する一の個別洗浄容器である第3洗浄容器230に他の個別洗浄容器である第2洗浄容器220が接合可能に形成されてもよい。さらに、第2洗浄容器220に第1洗浄容器210が接合可能に形成されてもよい。
このようにすることで、容器組立体キットは、個別洗浄容器である第1〜第3洗浄容器210,220,230同士を接合するまで洗浄液同士が汚染されることを防止できる。また、このような容器組立体キットによれば、2以上の個別洗浄容器である第1〜第3洗浄容器210,220,230を有することで使用者の要望に応じて洗浄の精度を調整することができる。
また、容器組立体キットを組み立てた容器組立体1によれば、第1〜第3洗浄容器210,220,230同士を接合した後でも第1〜第3洗浄液12,14,16同士は混和しない流体である第1〜第4オイル20,22,24,26によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、第1〜第3洗浄液12,14,16同士が汚染されることを防止できる。また、このような容器組立体1によれば、第1〜第3洗浄容器210,220,230に収納された第1〜第3洗浄液12,14,16で2回以上の洗浄を行うことができるため、より効率よく洗浄を行うことができる。
5−5.吸着容器
図14に示すように、容器組立体キットは、吸着液10と該吸着液10と混和しない流体である第1オイル20を封止収納する吸着容器100をさらに含むことができる。
吸着容器100は、第3受入部234に接合可能に形成される。ここで第3洗浄容器230は、溶出容器300が接合される一の端部である第3挿入部232と、第3挿入部232とは異なる他の端部である第3受入部234とを有する。図1〜図8の容器組立体1のように、洗浄容器200として3つの個別洗浄容器を用いた場合には、他の端部は第1洗浄容器210の第1受入部214である。
吸着容器100は、シリンジ部120内にプランジャー部130が挿入され、シリンジ部120の上端にあるフランジ部120bの上面にはフィルム120cが貼られている。シリンジ部120は、一の端部に吸着挿入部122を有し、他の端部に外方へ広がる環状のフランジ部120bを有する。吸着挿入部122は、略円筒状であって、横断面円形の外壁122aを有する。
シリンジ部120は、吸着挿入部122の周囲に形成され、かつ、外壁122aの上部から下方に向けて開放する吸着カバー部126を有する。吸着カバー部126は、上端が吸着挿入部122の外壁122aに接続し、下端が吸着挿入部122を超えて延在する。吸着カバー部126の内壁126aは、下方に向かって拡径する環状の段部126bを有する。段部126bは、吸着挿入部122の下端よりもわずかに下方にあり、その表面にフィルム122cが貼られている。
吸着容器100は、その流路2内に、フランジ部120b側から空気11、吸着液10、第1オイル20の順に収納された状態で上下の開口をフィルム120c,122cによって封止されている。吸着液10と第1オイル20とは界面10bで混和せず、しかも流路2は先端部134によって封止されているので吸着液10は移動しない。吸着容器100の静止状態において、吸着液10と空気11とは界面10aで混和しないが、自由界面である。
吸着容器100と第3洗浄容器230との接合は、吸着挿入部122及び第3受入部234がフィルム122c及びフィルム234cを突き破って吸着挿入部122を第3受入部234へ挿入することで行う。したがって、吸着挿入部122及び第3受入部234がフィルム122c及びフィルム234cを突き破って初めて吸着容器100内の流路2と第3洗浄容器230内の流路2とが連通する。
このような容器組立体キットによれば、吸着容器100と第3洗浄容器230とを接合するまで吸着容器100が内容物を封止収納しているため、第3洗浄液16が吸着液10によって汚染されることが防止できる。
また、このような容器組立体キットを組み立てた図1〜図8の容器組立体1によれば、吸着容器100と洗浄容器200とを接合した後でも吸着液10及び第1〜第3洗浄液12,14,16は各液と混和しない流体である第1〜第4オイル20,22,24,26によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、第1〜第3洗浄液12,14,16が吸着液10によって汚染されることを防止できる。
5−6.反応容器
図15に示すように容器組立体キットは、溶出液32とは混和しない第4オイル26を封止収納する反応容器400をさらに含むことができる。
反応容器400は、溶出容器300の第3洗浄容器230が接合される一の端部である溶出受入部304とは異なる他の端部である溶出挿入部302に接合可能に形成される。
反応容器400は、一の端部に底部402を有し、他の端部に反応受入部404を有する。反応受入部404は、略円筒状であって、横断面円形の内壁404aを有する。反応容器400は、反応受入部404の周囲に形成され、かつ、反応受入部404の下部から上方に向けて開放する反応カバー部405を有する。反応カバー部405は、下端が反応受入部404の外壁に接続し、上端が反応受入部404を超えて延在する。反応受入部404の上面にフィルム404cが貼られている。
反応容器400は、その流路2内に、反応受入部404側に第4オイル26、底部402側に試薬34が収納された状態で開口をフィルム404cによって封止されている。
反応容器400と溶出容器300との接合は、溶出挿入部302及び反応受入部404がフィルム302c及びフィルム404cを突き破って溶出挿入部302を反応受入部4
04へ挿入することで行う。したがって、溶出挿入部302及び反応受入部404がフィルム302c及びフィルム404cを突き破って初めて溶出容器300内の流路2と反応容器400内の流路2とが連通する。
このような容器組立体キットによれば、反応容器400を溶出容器300に接合することで洗浄、溶出及び反応(例えば核酸増幅反応)を連続して行うことができる。また、このような容器組立体キットによれば、反応容器400が溶出容器300と接合されるまで別体であるので、溶出容器300が反応容器の機能を兼ねる場合に比べて溶出容器300の長さが長くなることを抑えることができる。
また、このような容器組立体キットを組み立てることで図1〜図8の容器組立体1を得ることができる。
5−7.固定構造
各容器同士の接合構造は、上記の通り、各容器の挿入部を隣接する容器の受入部に挿入することで挿入部と受入部とが接触してシールするものである。そして、接合後もこのような接合構造をより確実に維持するために、各容器の接合構造にさらに固定構造を有することができる。このような固定構造としては、スナップフィットを採用することができる。
スナップフィットは、材料の弾性を利用して機械的に接合するものであり、各容器は容器の外面から突出する係合突起と、係合突起を受け入れる係合孔と、を有する。例えば、図11においては、第3洗浄容器230は係合突起230aと係合孔230bとを有し、係合突起230aは隣接する第2洗浄容器220に設けられた図示しない係合孔に嵌まり込んで容器同士を固定し、係合孔230bは隣接する溶出容器300の係合用フランジ300c(図13を参照)に設けられた図示しない係合突起に嵌まり込んで容器同士を固定する。図13においては溶出挿入部302側に係合突起300aが図示され、図15においては係合突起300aと係合する係合孔400bが図示されている。
本発明は、上述した実施形態に限定されるものではなく、さらに種々の変形が可能である。例えば、本発明は、実施形態で説明した構成と実質的に同一の構成(例えば、機能、方法、及び結果が同一の構成、あるいは目的及び効果が同一の構成)を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成の本質的でない部分を置き換えた構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成と同一の作用効果を奏する構成又は同一の目的を達成することができる構成を含む。また、本発明は、実施形態で説明した構成に公知技術を付加した構成を含む。
6.変形例
上記5で説明した容器組立体キットは、第3洗浄容器230と溶出容器300とを最小構成単位として説明したが、本発明はこれに限定されるものでは無い。そこで、上記実施形態の変形例について以下に説明する。なお、以下の変形例は、上記1〜上記4で説明した容器組立体1及び上記5で説明した容器組立体キットにおける容器の組み合わせを変更するものであるため、図1〜図15を用いて説明し、重複する部分の説明は省略する。
6−1.第1変形例
第1変形例に係る容器組立体キットは、吸着液10と該吸着液10とは混和しない流体である第1オイル20を封止収納する吸着容器100と、洗浄液である第1洗浄液12と該第1洗浄液12とは混和しない流体である第2オイル22を封止収納する洗浄容器である第1洗浄容器210と、を含み、生体関連物質を移動するための流路2を形成するように吸着容器100と第1洗浄容器210とを接合可能に形成する。第1洗浄容器210の
詳細については、図11及び図12の第3洗浄容器230と基本的構成が同様であるので説明を省略する。このような容器組立体キットによれば、吸着容器100と第1洗浄容器210とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、吸着容器100と第1洗浄容器210とを接合するまで洗浄液12が吸着液10によって汚染されることを防止できる。
第1変形例に係る容器組立体キットを組み立てた容器組立体1は、図1〜図8を用いて上述した通りであり、最小構成単位である吸着容器100と第1洗浄容器210とを組み立てた場合には、第1洗浄容器210の第1挿入部212側に図12に示した第3洗浄容器230と同様にフィルムが貼られ、第2洗浄容器220以下の容器を接合しない。このような容器組立体1によれば、上述した容器組立体キットによる効果に加えて、吸着容器100と第1洗浄容器210とを接合した後でも第1洗浄液12及び吸着液10は各液と混和しない流体(第1オイル20、第2オイル20)によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、第1洗浄液12が吸着液10によって汚染されることを防止できる。
第1変形例に係る容器組立体キット及び容器組立体1は、上記5−4で説明したように複数の個別洗浄容器を含むことができ、また、上記5−2の溶出容器300や上記5−6の反応容器400をさらに含むことができる。
6−2.第2変形例
第2変形例に係る容器組立体キットは、吸着液10と該吸着液10とは混和しない流体である第1オイル20を封止収納する吸着容器100と、溶出液32と該溶出液32とは混和しない流体である第4オイル26を封止収納する溶出容器300と、を含み、生体関連物質を移動するための流路2を形成するように吸着容器100と溶出容器300とを接合可能に形成する。このような容器組立体キットによれば、吸着容器100と溶出容器300とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、吸着容器100と溶出容器300とを接合するまで溶出液32が吸着液10によって汚染されることを防止できる。
第2変形例に係る容器組立体キットを組み立てた容器組立体は、図1〜図8の容器組立体1から洗浄容器200及び反応容器400を取り除いて吸着容器100と溶出容器300とを直接接合すればよいので、図示は省略する。より具体的には、吸着容器100の吸着挿入部122を溶出容器300の溶出受入部304に挿入すればよい。こうして組み立てられた容器組立体は、吸着液10中で、または吸着液10に導入する前に、標的核酸から夾雑物を所定レベルまで除去できれば、洗浄工程を経なくても、標的核酸を磁気ビーズ30に吸着させ、磁気ビーズ30を溶出容器300に移動させ、磁気ビーズ30から溶出液32に標的核酸を溶出させることができる。そして、このような容器組立体によれば、上述した容器組立体キットによる効果に加えて、吸着容器100と溶出容器300とを接合した後でも溶出液32及び吸着液10は各液と混和しない流体(第1オイル20、第4オイル26)によって混和することが防止されるため、組立後速やかに使用することにより、溶出液32が吸着液10によって汚染されることを防止できる。
第2変形例に係る容器組立体キット及び容器組立体は、上記5−6の反応容器400をさらに含むことができる。
6−3.第3変形例
第3変形例に係る容器組立体キットは、第1洗浄液12と該第1洗浄液12とは混和しない流体である第1オイル20及び/又は第2オイル22を封止収納する第1洗浄容器210と、第1洗浄液12とは異なる第2洗浄液14と該第2洗浄液14とは混和しない流体である第2オイル22及び/又は第3オイル24を封止収納する第2洗浄容器220と、を含み、生体関連物質を移動するための流路2を形成するように第1洗浄容器210と
第2洗浄容器220とを接合可能に形成する。第1洗浄容器210及び第2洗浄容器220の詳細については、図11及び図12の第3洗浄容器230と基本的構成が同様であるので説明を省略する。このような容器組立体キットによれば、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とを接合するまで第2洗浄液14が第1洗浄液12によって汚染されることを防止できる。
第3変形例に係る容器組立体キットを組み立てた容器組立体1は、図1〜図8を用いて上述した通りであり、最小構成単位である第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とを組み立てた場合には、第1洗浄容器210の第1受入部214側と、第2洗浄容器220の第2挿入部222側に図12に示した第3洗浄容器230と同様にフィルムが貼られ、吸着容器100及び第3洗浄容器230以下の容器を接合しない。このような容器組立体1によれば、上述した容器組立体キットによる効果に加えて、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とがそれぞれ内容物を封止収納しているため、第1洗浄容器210と第2洗浄容器220とを接合するまで第2洗浄液14が第1洗浄液12によって汚染されることを防止できる。
第3変形例に係る容器組立体キット及び容器組立体は、上記5−1で説明した第3洗浄容器230を第2挿入部222にさらに接合してもよく、また、上記5−2の溶出容器300、上記5−5の吸着容器100、及び上記5−6の反応容器400の少なくともいずれか1つをさらに含むことができる。
1…容器組立体、2…流路、3…磁石、5…核酸精製デバイス、10…吸着液、11…空気、12…第1洗浄液、14…第2洗浄液、16…第3洗浄液、20…第1オイル、22…第2オイル、24…第3オイル、26…第4オイル、30…磁気ビーズ、32…溶出液、34…試薬、36…液滴、50…PCR装置、55…蛍光測定器、60…回転機構、65…ヒーター、66…回転用モーター、70…磁石移動機構、80…押圧機構、90…コントローラー、100…吸着容器、110…キャップ、112…通気部、120…シリンジ部、120b…フランジ部、120c…フィルム、122…吸着挿入部、122a…外壁、122c…フィルム、126…吸着カバー部、126a…内壁、126b…段部、130…プランジャー部、132…棒状部、134…先端部、200…洗浄容器、210…第1洗浄容器、212…第1挿入部、214…第1受入部、216…第1カバー部、220…第2洗浄容器、222…第2挿入部、224…第2受入部、226…第2カバー部、230…第3洗浄容器、230a…係合突起、230b…係合孔、232…第3挿入部、232a…外壁、232c…フィルム、234…第3受入部、234a…内壁、234b…段部、234c…フィルム、236…第3カバー部、236a…内壁、236b…段部、300…溶出容器、300a…係合突起、300c…係合用フランジ、302…溶出挿入部、302a…外壁、302c…フィルム、304…溶出受入部、304a…内壁、304b…段部、304c…フィルム、306…溶出カバー部、306a…内壁、306b…段部、400…反応容器、400b・・・係止孔、402…底部、404…反応受入部、404a…内壁、404c…フィルム、405…反応カバー部、406…リザーバー部

Claims (16)

  1. 洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
    前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
    前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体である、容器組立体。
  2. 請求項1において、
    前記洗浄容器は、それぞれが洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する2以上の個別洗浄容器を含み、
    前記溶出容器と接合する一の個別洗浄容器に他の個別洗浄容器が接合する、容器組立体。
  3. 請求項1または2において、
    吸着液と該吸着液と混和しない流体を封止収納する吸着容器が前記洗浄容器に接合されて前記流路が形成され、
    前記吸着液は、前記物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記吸着容器は、前記洗浄容器の前記溶出容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合される、容器組立体。
  4. 請求項1〜3のいずれか1項において、
    前記溶出液とは混和しないオイルを封止収納する反応容器が前記溶出容器に接合されて前記流路が形成され、
    前記反応容器は、前記溶出容器の前記洗浄容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合される、容器組立体。
  5. 請求項1〜4のいずれか1項において、
    前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部が、前記溶出容器における前記流路を形成する部分の一の端部に挿入され、
    前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部の外壁の一部が、前記溶出容器における前記流路を形成する部分の一の端部の内壁の一部と接触して配置される、容器組立体。
  6. 吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
    前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体である、容器組立体。
  7. 吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
    前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体である、容器組立体。
  8. 第1洗浄液と該第1洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第1洗浄容器と、前記第
    1洗浄液とは異なる第2洗浄液と該第2洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第2洗浄容器と、が接合されて生体関連物質を移動するための流路が形成され、
    前記第1洗浄液及び前記第2洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体である、容器組立体。
  9. 洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、
    溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、
    を含み、
    前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
    前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を脱離させる液体であり、
    生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記洗浄容器と前記溶出容器とを接合可能に形成する、容器組立体キット。
  10. 請求項9において、
    前記洗浄容器は、それぞれが洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する2以上の個別洗浄容器を含み、
    前記溶出容器と接合する一の個別洗浄容器に他の個別洗浄容器が接合可能に形成される、容器組立体キット。
  11. 請求項9または10において、
    吸着液と該吸着液と混和しない流体を封止収納する吸着容器をさらに含み、
    前記吸着液は、前記物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記吸着容器は、前記洗浄容器の前記溶出容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合可能に形成される、容器組立体キット。
  12. 請求項9〜11のいずれか1項において、
    前記溶出液とは混和しないオイルを封止収納する反応容器をさらに含み、
    前記反応容器は、前記溶出容器の前記洗浄容器が接合される一の端部とは異なる他の端部に接合可能に形成される、容器組立体キット。
  13. 請求項9〜12のいずれか1項において、
    前記洗浄容器は、前記洗浄容器における前記流路を形成する部分の一の端部に挿入部を有し、
    前記溶出容器は、前記溶出容器における前記流路を形成する部分の一の端部に受入部を有し、
    前記洗浄容器と前記溶出容器とを接続するときに、前記挿入部の外壁の一部は、前記受入部の内壁の一部と接触すうように形成される、容器組立体キット。
  14. 吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、
    洗浄液と該洗浄液とは混和しない流体を封止収納する洗浄容器と、
    を含み、
    前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
    生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記吸着容器と前記洗浄容器とを接合可能に形成する、容器組立体キット。
  15. 吸着液と該吸着液とは混和しない流体を封止収納する吸着容器と、
    溶出液と該溶出液とは混和しない流体を封止収納する溶出容器と、
    を含み、
    前記吸着液は、物質結合性固相担体に核酸を吸着させる液体であり、
    前記溶出液は、物質結合性固相担体から生体関連物質を溶出させる液体であり、
    生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記吸着容器と前記溶出容器とを接合可能に形成する、容器組立体キット。
  16. 第1洗浄液と該第1洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第1洗浄容器と、
    前記第1洗浄液とは異なる第2洗浄液と該第2洗浄液とは混和しない流体を封止収納する第2洗浄容器と、
    を含み、
    前記第1洗浄液、及び第2洗浄液は、生体関連物質が吸着した物質結合性固相担体を洗浄する液体であり、
    生体関連物質を移動するための流路を形成するように前記第1洗浄容器と前記第2洗浄容器とを接合可能に形成する、容器組立体キット。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20200121681A (ko) * 2019-04-16 2020-10-26 (주)얼라인드제네틱스 애널라이트 수집 장치, 이를 이용한 애널라이트 수집 방법 및 애널라이트 검사 시스템
WO2021086442A1 (en) * 2019-10-29 2021-05-06 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Vertically layered fluid columns

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8664377B2 (en) * 2009-09-30 2014-03-04 Samsung Electronics Co., Ltd. Method and apparatus for isolating nucleic acids
CN103269787B9 (zh) * 2010-12-21 2016-07-20 株式会社岛津制作所 用于在管内操作对象成分的器件和方法
JP6011036B2 (ja) * 2012-06-06 2016-10-19 セイコーエプソン株式会社 デバイス
JP2014176302A (ja) * 2013-03-13 2014-09-25 Seiko Epson Corp 核酸増幅反応装置及び核酸増幅方法

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