JP2016136890A - 乳酸菌のインターロイキン10産生誘導能の増強方法 - Google Patents
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Abstract
Description
従って、本発明の課題は、乳酸菌のIL−10産生誘導能の増強方法を提供することにある。
〔2〕前記乳酸菌が、ラクトバチルス・プランタラム YIT 0132(FERM BP−11349)またはラクトバチルス・プランタラム YIT 0148(FERM BP−11350)である〔1〕記載の増強方法。
〔3〕培養開始から少なくとも定常状態到達時点まで、培地のpHを2.0〜5.7に調整する〔1〕又は〔2〕記載の増強方法。
〔4〕培地のpHを3.4〜5.2に調整する〔1〕〜〔3〕のいずれかに記載の増強方法。
〔5〕〔1〕〜〔4〕のいずれかに記載の増強方法により得られた乳酸菌及び/又はその処理物を有効成分とするインターロイキン10産生誘導剤。
ここで「100%果汁」、「到達生菌数」は、特許文献2記載の定義に従う。
(a)Lactobacilli MRS Broth培地で定常状態になるまで37℃で16時間培養した菌液を、グレープおよびオレンジの100%果汁に対してそれぞれ0.4%容量接種したものを37℃で48時間培養した時の到達生菌数が、共に108CFU/mL以上である。
(b)Lactobacilli MRS Broth培地で定常状態になるまで37℃で16時間培養した菌液を、グレープ、グレープフルーツ、オレンジ、パインおよびアップルの100%果汁に対してそれぞれ0.4%容量接種したものを37℃で48時間培養した時のそれぞれの到達生菌数(CFU/mL)を108で除して加えた増殖スコア値が25以上である。
培養開始時の好ましい培地のpHはIL−10産生誘導能増強効果の点から、2.0〜5.7が好ましく、3.4〜5.7がより好ましく、さらに好ましくは3.4〜5.2である。
培養方法は、好気条件または嫌気条件のいずれでもよく、液体静置培養等であってもよい。
さらに、本発明のIL−10産生誘導剤は炎症性サイトカインであるIL−12の産生誘導を増強する作用がほとんどみられないことから、上記各種疾患の治療や改善、或いはその予防がさらに容易になることが期待される。
A.材料と方法
(1)使用菌株
Lactobacillus plantarum YIT 0132
Lactobacillus plantarum YIT 0102(基準株)
ここで、YIT 0102(基準株)は、Lactobacilli MRS Broth培地で定常状態になるまで37℃で16時間培養した菌液を、グレープおよびオレンジの100%果汁に対してそれぞれ0.4%容量接種したものを37℃で48時間培養した時の到達生菌数が、108CFU/mL未満である。
(2)MRS液体培地の調製
RO水にLactobacilli MRS Broth(Difco)を55g/L溶解後、クエン酸一水和物(試薬特級、SIGMA−ALDRICH)を用いてpH3.4、pH3.8、pH4.5、pH5.2、pH5.8、pH6.4に調整後、121℃、15分間滅菌した。
(3)pH制御培養
pH3.4、pH3.8、pH4.5、pH5.2、pH5.8、pH6.4に調整したMRS液体培地およびpH未調整(市販粉末溶解時のpH6.4)のMRS液体培地3Lをオートクレーブ滅菌後、3L容のミニジャーファーメンター(マルビシバイオエンジ製、以下ミニジャーと略)に仕込み、各菌株の前培養液をそれぞれ0.4%接種した。各pHに維持されるよう5N NaOHで制御しつつ、37℃で攪拌培養した(pH3.4、pH3.8での培養は、増殖過程中のpHの大幅な低下がないことを確認したため、pH制御は行わなかった)。培養中は2時間毎にサンプリングして660nmの吸光度(OD660)をモニターし、定常状態到達時点(OD660の増加が止まった時点)で培養を停止した。
各菌株の培養液を滅菌水にて洗浄して、100℃、30分間の加熱死菌化後に凍結乾燥した。メスのBALB/cマウス(日本SLC)より調製した脾臓細胞(5×105cells/well/200μL)を96ウエル培養プレートに播き込み、10%FCSを含むRPMI1640培地で加熱死菌体を100μg/mLとなるよう添加して、72時間培養した。上清中のIL−10濃度をELISAで測定した。
(1)pH制御培養菌体の調製
ミニジャーでの培養中のpHは、初発pH±0.2の範囲内に制御されていた。YIT 0132の培養中のOD660を2時間毎にモニターしたところ、pH3.4は培養30時間後(OD660 6.99)、pH3.8は培養30時間後(OD660 5.76)、pH4.5は培養28時間後(OD660 6.22)、pH5.2は培養14時間後(OD660 9.08)、pH5.8は培養13時間後(OD660 9.52)、pH6.4は培養7時間後(OD660 5.6)にそれぞれ増加が止まったため、培養を停止した。
同様に、YIT 0102(基準株)の培養中のOD660を2時間毎にモニターしたところ、pH3.8は培養28時間後(OD660 7.17)、pH6.4は培養7時間後(OD660 6.7)にそれぞれ増加が止まったため、培養を停止した。
(i)IL−10産生誘導能
YIT 0132(菌体100μg/mL添加)では、低pHで培養した菌体を添加したものほどIL−10産生量が高くなる傾向がみられた(図1)。72時間培養後のYIT 0132によるIL−10産生量は、通常培養の場合に比べて、pH5.8で1.00倍、pH5.2で1.04倍、pH4.5で1.11倍、pH3.8で1.51倍、pH3.4で1.94倍であった。
一方、ラクトバチルス・プランタラムYIT 0102(基準株)においては、72時間培養後のYIT 0132によるIL−10産生量は、pH6.4で培養した場合に比べて、pH3.8では0.70倍であり、低pHで培養した菌体を添加すると、IL−10産生量が低くなることが明らかになった。
すなわち、本発明の培養条件(pH3.4〜5.7)で培養した場合に、pH依存的に(低pHで培養したときほど)IL−10産生誘導能が増強される作用は、種々のラクトバチルス・プランタラム菌株の中でも、本発明の乳酸菌(YIT 0132等)において特異的に認められる作用であることが確認された。
Claims (5)
- Lactobacilli MRS Broth培地で定常状態になるまで37℃で16時間培養した菌液を、グレープおよびオレンジの100%果汁に対してそれぞれ0.4%容量接種したものを37℃で48時間培養した時の到達生菌数が、共に108CFU/mL以上であるラクトバチルス・プランタラムに属する乳酸菌を、pH2.0〜5.7に調整した培地で培養する工程を含む、当該乳酸菌のインターロイキン10産生誘導能の増強方法。
- 前記乳酸菌が、ラクトバチルス・プランタラム YIT 0132(FERM BP−11349)またはラクトバチルス・プランタラム YIT 0148(FERM BP−11350)である請求項1記載の増強方法。
- 培養開始から少なくとも定常状態到達時点まで、培地のpHを2.0〜5.7に調整する請求項1又は2記載の増強方法。
- 培地のpHを3.4〜5.2に調整する請求項1〜3のいずれか1項に記載の増強方法。
- 請求項1〜4のいずれか1項に記載の増強方法により得られた乳酸菌及び/又はその処理物を有効成分とするインターロイキン10産生誘導剤。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2790442C2 (ru) * | 2017-01-31 | 2023-02-21 | Юниверсити-Индастри Кооперейшн Груп Оф Кюн Хее Юниверсити | Новый штамм lactobacillus plantarum, композиции, содержащие его, и связанный с ним способ и его применение |
US11660321B2 (en) | 2017-01-31 | 2023-05-30 | University-Industry Cooperation Group Of Kyung Hee University | Method of treatment with lactic acid bacteria |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007138993A1 (ja) * | 2006-05-31 | 2007-12-06 | Meiji Dairies Corporation | 免疫調節活性の高い乳酸菌の培養法 |
JP2014131504A (ja) * | 2012-12-07 | 2014-07-17 | Bio Ken:Kk | Il−12産生誘導能を有する乳酸菌及びその製造方法 |
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Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2007138993A1 (ja) * | 2006-05-31 | 2007-12-06 | Meiji Dairies Corporation | 免疫調節活性の高い乳酸菌の培養法 |
JP2014131504A (ja) * | 2012-12-07 | 2014-07-17 | Bio Ken:Kk | Il−12産生誘導能を有する乳酸菌及びその製造方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
BIOSCIENCE OF MICROBIOTA, FOOD AND HEALTH, vol. 33, no. 4, JPN6017031961, 2014, pages 147 - 155, ISSN: 0003800614 * |
JOURNAL OF BIOSCIENCE AND BIOENGINEERING, vol. 114, no. 1, JPN6017031963, 2012, pages 9 - 16, ISSN: 0003800615 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2790442C2 (ru) * | 2017-01-31 | 2023-02-21 | Юниверсити-Индастри Кооперейшн Груп Оф Кюн Хее Юниверсити | Новый штамм lactobacillus plantarum, композиции, содержащие его, и связанный с ним способ и его применение |
US11660321B2 (en) | 2017-01-31 | 2023-05-30 | University-Industry Cooperation Group Of Kyung Hee University | Method of treatment with lactic acid bacteria |
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