JP2015525349A5 - - Google Patents
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Claims (12)
- a.免疫細胞によって発現される抗原(マーカー)に特異的に結合する抗体を使用することによる自動スライド染色システムによって得られる組織切片の1つ以上の免疫染色された薄片を準備する工程、
b.高解像度のスキャンを読み取ることによって工程a.のスライドのデジタル化を進め、これにより、分析しようとするスライドの高精細度(4.6μm/ピクセル又はそれより良好)のデジタル写真を得る工程、
c.デジタル写真上の組織切片の前記薄片を検出する工程、
d.(i)腫瘍(CT)及び(ii)腫瘍の浸潤周辺部分(IM)を規定するために、組織切片の前記薄片を分析する工程、
e.同じ表面積を有する均一に分布した単位を有する参照サイズ格子を準備する工程であって、前記格子は、分析しようとする腫瘍のサイズに適合している、工程、
e1.免疫染色の品質を確認する工程、
f.各単位の染色細胞を検出及び定量し、これにより、各単位の染色された免疫細胞の数又は密度を評価する工程
を含む、腫瘍組織における免疫細胞の数又は密度の評価のための方法。 - 各単位の染色細胞の検出及び定量が、腫瘍(CT)及び腫瘍の浸潤周辺部分(IM)で別々に実施される、請求項1記載の方法。
- 参照サイズ格子が全く準備されない、請求項1記載の方法。
- 前記抗体が、CD3、CD4、CD8、CD20、CD45RO又はGZMBマーカーに特異的な抗体からなる群より選択される、請求項1ないし3のいずれか一項記載の方法。
- 以下の組合せ:CD3+CD8、CD3+CD45RO、CD3+CD20、CD3+GZMB、CD8+CD20、CD8+GZMB、CD8+CD45RO、CD20+GZMB、CD20+CD45RO、GZMB+CD45RO、CD4+CD8、CD4+CD45RO、CD4+GZMB、CD4+CD20と、CD3、CD8、CD20、CD45RO、CD4及びGZMBマーカーの中の3つのマーカーの全ての組合せとからなる群より選択される2つ又は3つの抗体が使用される、請求項1ないし4のいずれか一項記載の方法。
- 自動免疫染色装置が工程a)の実施に使用される、請求項1ないし5のいずれか一項記載の方法。
- (i)腫瘍(CT)と(ii)腫瘍の浸潤周辺部分(IM)の境界を規定するための組織切片の前記薄片の分析が、適切なソフトウェアによって実施される、請求項1ないし6のいずれか一項記載の方法。
- 10×10−9m2ないし1000×10−9m2の表面積を有する六角形、正方形又は長方形の単位が使用される、請求項1、2及び4ないし7のいずれか一項記載の方法。
- 各単位の染色された免疫細胞の評価された数又は密度が、
− 染色細胞の最大数、
− 染色細胞の最大密度、
− 染色細胞の数の合計、
− 染色細胞の表面積の合計、
− 染色細胞の密度の合計、
− 染色細胞の平均数、
− 染色細胞の平均密度、
− 染色細胞の最大数、及び
− 染色細胞の数の中央値
からなるA群の数値から選択される、請求項1ないし8のいずれか一項記載の方法。 - − 単個染色細胞、
− 少なくとも3個の染色細胞を含むクラスター中の染色細胞、
− 単個染色細胞又は少なくとも3個の染色細胞を含むクラスター、
− 全ての染色細胞、
− 最も染色された単位、及び
− 無作為な単位
からなるB群から選択される基準に従って、細胞又は単位を検出することをさらに含む、請求項1、2及び4ないし9のいずれか一項記載の方法。 - 患者を、その予想される生存率又は癌処置に対するその応答に従って群に分離する工程をさらに含む、請求項1ないし10のいずれか一項記載の方法。
- 所与のマーカーについての免疫細胞の数又は密度の数値を、当該マーカーについての予め決定された参照値と比較する、請求項11記載の方法であって、当該予め決定された参照値は、前記癌の進行の特定の予後及び/又は患者の生存率及び/又は癌処置に対する応答に相関する、方法。
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