JP2015520220A - シクロアルキルエーテル化合物およびｂａｃｅ阻害物質としてのその使用 - Google Patents

Abstract

シクロアルキルエーテル化合物、治療上許容されるその塩、それを製造するためのプロセス、ダウン症候群、β−アミロイド血管障害、アルツハイマー病、物忘れ、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病などの疾患に関連する神経変性、または、混合血管および変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症、およびパーキンソン病に関連する認知症を含めた認知症、進行性核上性麻痺、または皮質基底変性症などのＡβ関連の病態を処置するためのこれらの化合物の治療的使用、ならびにこのような化合物を含有する医薬組成物。Ａが−Ｏ−または−ＣＨ２−であり、ｎが０または１である、式（Ｉ）。【化１】

Description

本発明は、シクロアルキルエーテル化合物および治療上許容されるその塩、これらの医薬組成物、これらを作成するためのプロセス、ならびに様々な疾患を処置および／または防止するための医薬としてのこれらの使用に関する。特に、本発明は、β−セクレターゼの阻害物質であり、それゆえアミロイドβ（Ａβ）ペプチドの形成を阻害し、アルツハイマー病、ダウン症候群、およびβ−アミロイド血管障害などのＡβ関連の病態、例えば、それだけには限定されないが、脳アミロイド血管障害、遺伝性脳出血、認知障害に関連する障害、例えば、それだけには限定されないが、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、アルツハイマー病、物忘れ（ｍｅｍｏｒｙ ｌｏｓｓ）、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病などの疾患に関連する神経変性、または混合血管起源および変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症（ｓｅｎｉｌｅ ｄｅｍｅｎｔｉａ）、およびパーキンソン病に関連する認知症を含めた認知症、進行性核上性麻痺、または皮質基底変性症の処置および／または防止に用いられる化合物に関する。

アルツハイマー病（ＡＤ）を鑑別する主な神経病理学的事象は、脳実質および脳血管における４０〜４２残基のアミロイドβ−ペプチド（Ａβ）の沈着である。多くの遺伝的、生化学的、およびｉｎ ｖｉｖｏのデータが、最終的にＡＤをまねく病理学的カスケードにおいて、Ａβに対する中心的な役割を支持している。患者は通常、６０代または７０代で早期症状（通常は物忘れ）を表す。疾患は、認知症の増大およびＡβの沈着の上昇とともに進行する。並行して、過剰リン酸化型の微小管結合タウタンパク質がニューロン内に蓄積し、ニューロンの機能に対して有害作用のある多血症をもたらす。Ａβとタウとの病態間の時間的関係に関して主流となっている作業仮説には、疾患のヒトおよび動物モデルではＡβが沈着した後にタウが凝集すると述べられている。この文脈内では、この病態学的機能を媒介するＡβの正確な分子上の性質が、現在、熱烈に研究にされている問題であることに注目する価値がある。低次元のＡβオリゴマーからＡβ原線維などの超分子アセンブリーの範囲の、毒性種の連続体が存在する可能性が濃厚である。

Ａβペプチドは、ヒト組織において遍在性に発現されるタンパク質である、Ｉ型タンパク質ＡＰＰ（Ａβアミロイド前駆体タンパク質）の不可欠なフラグメントである。可溶性のＡβは血漿および脳脊髄液（ＣＳＦ）の両方において、ならびに培養細胞からの培地において見出すことができることから、ＡＰＰはタンパク質分解を受けなければならない。ＡＤの病態に関連するＡＰＰには、いわゆるα−、β−、およびγ−切断の、主な切断が３つ存在する。α−切断は、ＡＰＰのＡβドメインのほぼ中央で生じ、メタロプロテアーゼＡＤＡＭ１０またはＡＤＡＭ１７（後者はＴＡＣＥとしても知られている）により実行される。β−切断は、ＡβのＮ末端で生じ、膜貫通型アスパルチルプロテアーゼβ部位ＡＰＰ切断酵素１（ＢＡＣＥ１）により産生される。γ−切断は、ＡβのＣ末端を産生し、引き続きペプチドを放出し、γ−セクレターゼと命名されるマルチサブユニットのアスパルチルプロテアーゼによって行われる。ＡＤＡＭ１０／１７切断とその後のγ−セクレターゼ切断により、ヒトにおいてアミロイド沈着を形成することができないＮ末端が切断されたＡβフラグメントである、可溶性ｐ３ペプチドの放出が引き起こされる。このタンパク分解性の経路は、非アミロイド産生性経路と通常呼ばれる。ＢＡＣＥ１およびγ−セクレターゼによる連続的な切断によりインタクトなＡβペプチドが産生され、それゆえこのプロセシングスキームはアミロイド産生性経路と呼ばれている。この知識があれば、Ａβ生成を低下させる２つの可能な手段：非アミロイド産生性プロセシングの刺激、またはアミロイド産生性プロセシングの阻害もしくは変調を想像するのが可能である。本出願は、後者の戦略である、アミロイド産生性プロセシングの阻害または変調に注目するものである。

アミロイド産生性プラークおよび血管のアミロイド血管障害も、トリソミー２１（ダウン症候群）、ダッチ型のアミロイドーシスを有する遺伝性脳出血（Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｗｉｔｈ Ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｕｔｃｈ−ｔｙｐｅ）（ＨＣＨＷＡ−Ｄ）、および他の神経変性障害を有する患者の脳を特徴付けるものである。認知症誘発性障害を含めた他の神経変性障害では、神経原線維変化も生じる（非特許文献１）。β−アミロイド沈着物は、優勢的にＡβペプチドの凝集であり、次にこのＡβペプチドはアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のタンパク質分解の生成物である。より具体的には、Ａβペプチドは、１つまたはそれ以上のγ−セクレターゼによるＣ末端の、およびβ−セクレターゼ酵素（ＢＡＣＥ）によるＮ末端のＡＰＰの切断に起因し、ＢＡＣＥは、β−アミロイド産生性経路の一部としてアスパルチルプロテアーゼすなわちＡｓｐ２またはベータ部位ＡＰＰ切断酵素（ＢＡＣＥ）としても知られている。

ＢＡＣＥ活性は、ＡＰＰからのＡβペプチドの産生に直接相関し（非特許文献２）、試験により、ＢＡＣＥの阻害によりＡβペプチドの生成が阻害されることがますます指摘される（非特許文献３）。ＢＡＣＥは、部分的に活性なプロ酵素として合成され、脳組織において豊富に発現される膜結合性１型タンパク質（ｍｅｍｂｒａｎｅ ｂｏｕｎｄ ｔｙｐｅ １ ｐｒｏｔｅｉｎ）である。これは主なβ−セクレターゼ活性を表すと考えられており、アミロイドβ−ペプチド（Ａβ）の生成における律速段階と考えられている。

したがって、ＢＡＣＥ活性を低減または遮断する薬物は、脳における、またはＡβもしくはそのフラグメントが沈着する他所の、ＡβレベルおよびＡβのフラグメントのレベルを低減しなければならず、ゆえにアミロイドプラークの形成、およびＡβまたはそのフラグメントの沈着を伴うＡＤまたは他の病弊の進行を遅らせなければならない。ＢＡＣＥはしたがって、ダウン症候群、β−アミロイド血管障害などのＡβ関連の病態、例えば、それだけには限定されないが、脳アミロイド血管障害、または遺伝性脳出血、認知障害に関連する障害、例えば、それだけには限定されないが、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、アルツハイマー病、物忘れ、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病などの疾患に関連する神経変性、または混合血管および変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症、およびパーキンソン病に関連する認知症を含めた認知症、進行性核上性麻痺、または皮質基底変性症の処置および／または予防としての薬物を開発するための重要な候補である。

Ｖａｒｇｈｅｓｅ，Ｊ．ら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００３年、４６巻、４６２５〜４６３０頁 Ｓｉｎｈａら、Ｎａｔｕｒｅ、１９９９年、４０２巻、５３７〜５４０頁 Ｒｏｂｅｒｄｓ，Ｓ．Ｌ．ら、Ｈｕｍａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ、２００１年、１０巻、１３１７〜１３２４頁

したがって、本明細書に提供する化合物などの阻害物質によりＢＡＣＥを阻害することにより、Ａβおよびその部分の沈着を阻害することは有用である。

Ａβの沈着を阻害する治療上の可能性は、セクレターゼ酵素を単離および特徴づけし、これらの潜在的な阻害物質を同定するように多くのグループを動機付けているものである。

本発明は、遊離塩基または薬学的に許容されるその塩としての式（Ｉ）による化合物を対象とする：

［式中、
Ａは、−Ｏ−または−ＣＨ_２−であり；
ｎは、０または１であり；
Ｒ^１は、Ｃ_１〜６アルキルまたはＣ_１〜６ハロアルキルであり；
Ｒ^２は、Ｃ_１〜６アルキル、またはＣ_１〜６ハロアルキルであり、前記Ｃ_１〜６アルキル、またはＣ_１〜６ハロアルキルは、Ｃ_３〜６シクロアルキルまたはＣ_３〜６ハロシクロアルキルから独立に選択される１個から３個の基で置換されており；
Ｒ^５およびＲ^６は、独立に、水素、ヘテロシクリル、Ｃ_３〜６シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはＣ_１〜６アルキルであり、前記ヘテロシクリル、Ｃ_３〜６シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、またはＣ_１〜６アルキルは、ハロゲン、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、シアノ、もしくはＯＲ^９から独立に選択される１個もしくは２個の置換基で場合により置換されており；
またはＲ^５およびＲ^６は、これらが結合している炭素と一緒になって３〜１４員シクロアルキルもしくはヘテロシクリル単環式環、もしくは９〜１４員二環式シクロアルキル、もしくはヘテロシクリル環である環Ｂを形成し；環Ｂは、オキソ、ハロゲン、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、シアノ、またはＯＲ^７から独立に選択される１個または２個の置換基により場合により置換されており；
Ｒ^７は、独立に、水素、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、またはＣ_０〜６アルキルＣ_３〜６シクロアルキルであり；
Ｒ^８は、水素、ハロゲン、またはメチルである。

特定の一実施形態において、本発明は、
（１ｒ，４ｒ）−４−メトキシ−５’’−メチル−６’−［（１−メチルシクロプロピル）メトキシ］−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，４ｒ）−６’−［（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，４ｒ）−６’−［（２，２−ジフルオロシクロプロピル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
（１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン、および
（１ｒ，４ｒ）−６’−（２−シクロプロピルエトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン
からなる群から選択される、式Ｉの化合物、または任意の前述の化合物の薬学的な塩を対象とする。

本発明は、本発明による化合物、およびその塩の使用に関する。医薬組成物において用いるための塩は薬学的に許容される塩であるが、他の塩も、本発明による化合物の生成において有用であり得る。

本発明による化合物は、ヒトまたは動物の身体中で分解されて本発明による化合物を生じるプロドラッグの形態において投与することができる。プロドラッグの例には、ｉｎ ｖｉｖｏで加水分解性の、本発明による化合物のエステルが含まれる。カルボキシ基またはヒドロキシ基を含有している、ｉｎ ｖｉｖｏで加水分解性の（または切断性の）本発明による化合物のエステルは、例えば、ヒトまたは動物の身体において加水分解されて親の酸またはアルコールを生成する薬学的に許容されるエステルである。様々な形態のプロドラッグが当技術分野において知られている。

本出願において述べる定義は、本出願を通して用いる用語を明確にしようとするものである。「本明細書」という用語は本出願全体を意味する。

本発明における様々な化合物は、特定の幾何学的形態または立体異性体において存在し得る。本発明は、互変異性体、シス−およびトランス異性体、Ｒ−およびＳ−鏡像体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、これらのラセミ混合物、ならびにこれらの他の混合物を含めたこのような化合物を全て、本発明の範囲内に網羅されるものとして考慮に入れるものである。さらなる不斉炭素原子が、アルキル基などの置換基に存在してもよい。このような異性体、およびこれらの混合物が全て、本発明に含まれるものとされる。本明細書に記載する化合物は不斉中心を有することができる。非対称的に置換されている原子を含有している本発明の化合物は、光学活性型またはラセミ型において単離されてもよい。ラセミ体の分割による、光学活性の出発材料からの合成による、または光学活性試薬を用いた合成によるなど、光学活性型を製造する方法は、当技術分野においてよく知られている。必要に応じて、ラセミ材料の分離は、当技術分野において知られている方法により実現することができる。オレフィンの多くの幾何異性体、Ｃ＝Ｎ二重結合なども、本発明に記載する化合物に存在することができ、このような安定な異性体が全て、本発明に企図される。本発明の化合物のシスおよびトランス幾何異性体を記載し、異性体の混合物として、または分離された異性体型として単離することができる。特定の立体異性体型または異性体型が具体的に指摘されなければ、全てのキラル型の、ジアステレオマー型の、ラセミ型の、および全ての幾何異性体型の構造が意図される。

本明細書で用いられる「薬学的に許容される」は本明細書において用いられて、健全な医学上の判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症なしに、理にかなった損／益比に見合った、ヒトおよび動物の組織と接触させて用いるのに適する、化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。

本明細書で用いられる「薬学的に許容される塩」は、親化合物がその酸または塩基の塩を作成することにより修飾される、開示する化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例には、それだけには限定されないが、アミンなどの塩基性残基の無機または有機酸塩；カルボキシル酸などの酸性残基のアルカリまたは有機塩などが含まれる。薬学的に許容される塩には、形成される親化合物の、例えば、非毒性の無機酸または有機酸からの、非毒性の塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、このような非毒性の塩には、塩酸などの無機酸に由来するものが含まれる。

本発明の薬学的に許容される塩は、塩基性または酸性の部分を含有している親化合物から、従来的な化学方法により合成することができる。一般的に、このような塩は、遊離の酸または塩基の形態のこれらの化合物を、水中もしくは有機溶媒中で、または２つの混合物中で理論量の好適な塩基または酸と反応させることにより調製することができ；一般的に、ジエチルエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が用いられる。

本発明は、本発明の化合物の全ての互変異性型をさらに含む。本明細書で用いられる「互変異性体」は、水素原子の遊走に起因する平衡状態において存在する他の構造異性体を意味する。例えば、得られる化合物がケトンおよび不飽和アルコールの両方の性質を有する、ケト−エノール互変異性。互変異性の他の例には、２Ｈ−イミダゾール−４−アミンおよびその互変異性体、１，２−ジヒドロイミダゾール−５−イミン、ならびに２Ｈ−イミダゾール−４−チオールおよびその互変異性体、１，２−ジヒドロイミダゾール−５−チオンが含まれる。化合物の表記において、本明細書を通して、化合物の可能な互変異性体のうち１つだけが描かれ、または命名されていることが理解される。

本明細書で用いられる「安定な化合物」および「安定な構造」は、反応混合物から有用な純度への単離、および効果的な治療剤への調合を残存するほど十分に頑強である化合物を指摘することを意味する。

本発明の化合物は、水和物および溶媒和物をさらに含む。

本発明は、同位体標識した本発明の化合物をさらに含む。「同位体的に」または「放射標識した」化合物は、１つまたはそれ以上の原子が、典型的に天然に見出される（すなわち、天然に存在する）原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子によって置き換えられ、または置換されている、本発明の化合物である。本発明の化合物に組み入れることができる適切な同位体には、それだけには限定されないが、^２Ｈ（重水素に対してＤとも書かれる）、^３Ｈ（トリチウムに対してＴとも書かれる）、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１３Ｎ、^１５Ｎ、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^１８Ｆ、^３５Ｓ、^３６Ｃｌ、^８２Ｂｒ、^７５Ｂｒ、^７６Ｂｒ、^７７Ｂｒ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１２５Ｉ、および^１３１Ｉが含まれる。本発明の放射標識した化合物に組み入れられる放射性核種は、放射標識した化合物の特定の適用に依存する。例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏの受容体標識化および競合アッセイに対して、^３Ｈ、^１４Ｃ、^８２Ｂｒ、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、または^３５Ｓを組み入れる化合物が一般的に最も有用である。放射性イメージングの適用には、^１１Ｃ、^１８Ｆ、^１２５Ｉ、^１２３Ｉ、^１２４Ｉ、^１３１Ｉ、^７５Ｂｒ、^７６Ｂｒ、または^７７Ｂｒが一般的に最も有用である。

「放射標識した化合物」は、少なくとも１つの放射性核種を組み入れている化合物であることが理解される。いくつかの実施形態において、放射性核種は、^３Ｈ、^１４Ｃ、^１２５Ｉ、^３５Ｓ、および^８２Ｂｒからなる群から選択される。

本発明の化合物は、経口的に、非経口的に、頬側に、膣内に、直腸内に、吸入、ガス注入、舌下に、筋肉内に、皮下に、局所に、鼻腔内に、腹腔内に、胸郭内に、静脈内に、硬膜外に、くも膜下腔内に、脳室内に、および関節中への注射により投与することができる。

投与量は、特定の患者に最も好適であるとして個々のレジメンおよび投与量レベルを決定する場合、投与経路、疾患の重症度、患者の年齢および体重、ならびに担当医により通常考慮される他の因子に依存する。

投与しようとする化合物の量は、処置される患者に対して変化し、１日あたり約１００ｎｇ／ｋｇ体重から１００ｍｇ／ｋｇ体重まで変化する。例えば、投与量は、本開示および当技術分野における知識から、当業者により容易に増大することができる。したがって、当業者は、組成物中の、および本発明の方法において投与しようとする、化合物、ならびに任意選択の添加剤、ビヒクル、および／または担体の量を容易に決定することができる。

別の一態様において、本発明は、医薬として使用するための、例えば、Ａβ関連の病態を処置または防止するための、本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩に関する。

別の一態様において、本発明は、Ａβ関連の病態を処置または防止するための医薬の製造における、本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩の使用に関する。

別の一態様において、本発明は、ヒトなどの哺乳動物におけるＡβ関連の病態を処置または防止する方法であって、それを必要とする哺乳動物に治療有効量の本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む方法に関する。

本発明の化合物、およびその薬学的に許容される塩は、それにより、それだけには限定されないが、アルツハイマー病、ダウン症候群、β−アミロイド血管障害、脳アミロイド血管障害、遺伝性脳出血、認知障害に関連する障害、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、物忘れ、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺、外傷性脳損傷、または皮質基底変性症などのＡβ関連の病態の処置の方法を提供するものである。

別の一態様において、本発明は、有効成分として治療有効量の本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩を、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤と共に含む医薬組成物に関する。

別の一態様において、本発明は、ＢＡＣＥの活性を本発明による化合物で阻害する方法に関する。

別の一態様において、本発明は、ヒトなどの哺乳動物におけるＡβ関連の病態を処置または防止する方法であって、治療有効量の、本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩、および認知増強剤、記憶増強剤、またはコリンエステラーゼ阻害剤の少なくとも１つを前記患者に投与することを含み、前記Ａβ関連の病態はアルツハイマー病である、方法に関する。

別の一態様において、本発明は、（ｉ）本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩、（ｉｉ）さらなる治療剤、または薬学的に許容されるその塩、および（ｉｉｉ）薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む医薬組成物に関する。

別の一態様において、本発明は、（ｉ）本発明による化合物、または薬学的に許容されるその塩、（ｉｉ）認知増強剤、記憶増強剤、およびコリンエステラーゼ阻害剤からなる群から選択される少なくとも１つの薬剤、および（ｉｉｉ）薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤を含む医薬組成物に関する。

本明細書に規定するＡβ関連の病態の処置は、単独療法として適用してもよく、または、本発明の化合物に加えて、本明細書に言及する１つまたはそれ以上の疾患状態を処置するのに価値ある従来の治療法との共同処置（ｃｏｎｊｏｉｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）を伴ってもよい。このような従来の治療法は、１つまたはそれ以上の以下の範疇の薬剤：アセチルコリンエステラーゼ阻害剤、抗炎症剤、認知および／もしくは記憶増強剤、または非定型抗精神病剤を含むことができる。認知増強剤、記憶増強剤、およびアセチルコリンエステラーゼ阻害剤には、それだけには限定されないが、ドネペジル（ＡＲＩＣＥＰＴ）、ガランタミン（ＲＥＭＩＮＹＬまたはＲＡＺＡＤＹＮＥ）、リバスチグミン（ＥＸＥＬＯＮ）、タクリン（ＣＯＧＮＥＸ）、およびメマンチン（ＮＡＭＥＮＤＡ、ＡＸＵＲＡ、またはＥＢＩＸＡ）が含まれる。非定型抗精神病剤には、それだけには限定されないが、オランザピン（販売名ＺＹＰＲＥＸＡ）、アリピプラゾール（販売名ＡＢＩＬＩＦＹ）、リスペリドン（販売名ＲＩＳＰＥＲＤＡＬ）、クエチアピン（販売名ＳＥＲＯＱＵＥＬ）、クロザピン（販売名ＣＬＯＺＡＲＩＬ）、ジプラシドン（販売名ＧＥＯＤＯＮ）、およびオランザピン／フルオキセチン（販売名ＳＹＭＢＹＡＸ）が含まれる。

このような共同処置は、処置の個々の構成成分を同時に、逐次に、または別々に投与することにより実現され得る。このような組合せ生成物は本発明の化合物を使用する。

さらなる従来の化学療法は、１つまたはそれ以上の以下の範疇の薬剤：（ｉ）抗うつ薬、（ｉｉ）非定型抗精神病薬、（ｉｉｉ）向精神病薬、（ｉｖ）抗不安薬、（ｖ）抗痙攣薬、（ｖｉ）現在用いられているアルツハイマーの治療法、（ｖｉｉ）パーキンソンの治療法、（ｖｉｉｉ）偏頭痛治療法、（ｉｘ）脳卒中治療法、（ｘ）尿失禁治療法、（ｘｉ）神経因性疼痛治療法、（ｘｉｉ）侵害受容性疼痛治療法、（ｘｉｉｉ）不眠症治療法、および（ｘｉｖ）気分安定剤を含むことができる。前述の治療法に対して知られている処置を、本明細書に記載する本発明と組み合わせて用いてもよい。

このような組合せ生成物は、本明細書に記載する投与量範囲内の本発明の化合物、ならびに認可されている投与量範囲および／または出版されている参考文献に記載されている投与量の範囲内の他の薬学上の有効化合物または（複数の）化合物を使用する。

化合物の製造
本発明の化合物は、本明細書に記載するプロセスによって、遊離塩基または薬学的に許容されるその塩として製造することができる。このようなプロセスの以下の記載を通して、適宜、適切な保護基が加えられ、引き続き、有機合成の技術分野の技術者により容易に理解されるやり方で、様々な反応物および中間体から除去されることが理解される。このような保護基を用いるための従来の手順、および適切な保護基の例は、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ、Ｐ．Ｇ．Ｍ Ｗｕｔｚ著、第３版、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９９９年に記載されている。マイクロ波（ＭＷ）を、反応混合物を加熱するのに代替的に用いることができることが理解される。本発明の別の一態様は、式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容されるその塩を製造するためのプロセスを提供し、別段の特定がなければ、Ｒ^１〜Ｒ^８、ｎ、およびＡは、上記の式（Ｉ）に対して規定した通りであり、または後続の変換においてＲ^１〜Ｒ^８、またはＡに変換することができる基である。Ｒ^９は、ＯＲ^２、または後続の変換においてＯＲ^２基に変換することができる、ハロゲンなどの脱離基などの基と規定する。式（Ｘ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物に等価であってもよい。ＬＧは、ハロゲン（例えば、塩素、臭素、もしくはヨウ素）、またはアルキル−、アリール−、もしくはハロアルキル−スルホネート（例えば、トリフレート）などの脱離基を表し、ＰＧは保護基を表す。前記プロセスは以下からなる：

方法（ｉ）：式（ＩＩＩａ）に相当する化合物の形成：

式（ＩＩ）のケトンを、メチルアクリレート、（二置換されている）ハロゲン化アルキル、トリフレート、またはメシレートなどの適切な求電子試薬の存在下で、水素化ナトリウム、ＫＯｔＢｕ、またはＬＤＡなどの適切な塩基で処理して、式（ＩＩＩａ）の化合物を得る（スキーム１）。反応は、テトラヒドロフラン、２−Ｍｅ ＴＨＦ、またはジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中、０℃から＋９０℃の間の温度範囲で行ってもよい。アルキル化を、単離および精製された中間体と逐次的な方法において、またはワンポットの段階的な様式で、行ってもよい。反応により、エステル、オレフィン、シアノ、スルホン、スルホニウムドナーなどで置換されている生成物が得られる場合、これを場合により、ディークマン環化（Ｄｉｅｃｋｍａｎ ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ）、ＲＣＭ、求核置換、または環状付加によりさらに反応させてもよい。得られたスピロ環状環は１つまたはそれ以上の置換基を場合により含有することができ、この置換基を、脱炭酸反応、ケトンのアルコールへの還元、および前記アルコールのエーテルへの変換などの知られている官能基の変換により、さらに変換してもよい。

方法（ｉｉ）：式（ＩＩＩａ）に相当する化合物の形成：

式（ＩＩ）のケトンを、室温から＋１００℃の間の温度範囲で、ＴＨＦ、ベンゼン、またはトルエンなどの適切な溶媒中のＮ−メチルアニリニウムトリフルオロアセテートの存在下で、ホルムアルデヒドなどのアルデヒドまたはケトンと反応させる（スキーム２）。中間体（ＩＶ）（ＺおよびＹは、水素またはアルキルなどと規定される）を、場合により密封した試験管中、０℃から＋９０℃の間の温度範囲におけるＤｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ反応を利用して、（ブタ−１，３−ジエン−２−イルオキシ）トリメチルシランなどの様々なジエンと反応させてもよい。反応は、ニートで、またはジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、ＴＨＦ、もしくは２−Ｍｅ ＴＨＦなどの適切な溶媒中で行ってもよい。ルイス酸、または反応を助け得る任意の他の薬剤を加えて、濃縮された鏡像体またはジアステレオマーを得ることができる。得られたスピロ環状環は、場合により１つまたはそれ以上の置換基を含有し得、この置換基を、脱炭酸反応、ケトンのアルコールへの還元、および前記アルコールのエーテルへの変換など、知られている官能基の変換によりさらに変換してもよい。

方法（ｉｉｉ）：式（ＶＩＩ）に相当する化合物の形成：

式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物を式（Ｖ）の化合物と反応させることにより得てもよく（スキーム３）、式中、Ｒ^１１はアルキル（例えば、ｔｅｒｔ−ブチルなど）である。反応は、式（ＶＩ）の化合物などの適切なルイス酸の存在下で行われ、Ｒ^１２はアルキル（例えば、エチルまたはイソプロピル）である。反応は、室温から還流温度の間の温度で、適切な溶媒（例えば、ジクロロメタン、２−メチル−テトラヒドロフラン、またはテトラヒドロフラン）中で、場合により反応中に形成したアルコールを除去するための共沸蒸留とともに行われる。

方法（ｉｖ） 式（Ｘ）に相当する化合物の形成：

式（ＶＩＩＩ）の化合物は、化合物（ＶＩＩ）（式中、Ｒ^１１はアルキル（例えば、ｔｅｒｔ−ブチルなど）（方法（ｉｉｉ）、式ＶＩＩ）である）を、スルホンアミド保護基を除去してイミン（ＶＩＩＩ）を形成する適切な方法を用いて、反応させることにより得てもよい（スキーム４）。適切な方法は、それだけには限定されないが、前記化合物ＶＩＩを塩酸などの酸で、適切な溶媒（例えば、ジオキサンまたはテトラヒドロフラン）中無水（ｄｒｙ）条件下で処理することであってもよく、化合物（ＶＩＩＩ）を、単離してもよく、または単離せずにさらに反応させてもよい。式（ＶＩＩＩ）の化合物を、場合によりトリエチルオルトホルメートの存在下、メタノールなどの溶媒中、室温から還流温度の間の温度で、場合によりＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ条件下、２−オキソプロパンチオアミド（Ａｓｉｎｇｅｒら、Ｊｕｓｔｕｓ Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａｎｎａｌｅｎ ｄｅｒ Ｃｈｅｍｉｅ、１９７１年、７４４巻、５１〜６４頁に記載されている）とさらに反応させて、式（ＩＸ）の化合物を得る。式（Ｘ）の化合物への変換は、式（ＩＸ）の中間体をアンモニアと反応させることにより行ってもよい。スキーム４によって記載するプロセスにおいて、２−オキソプロパンチオアミドを２−オキソブタンチオアミドに交換すると、式（ＩＸｂ）および（Ｘｂ）の化合物が、（ＩＸ）および（Ｘ）の代わりに得られる。

方法（ｖ） 式（Ｉ）に相当する化合物の形成：

式（ＸＶＩ）の化合物は、式（ＸＩＶ）の化合物（式中、ＬＧは、ハロゲン（例えば、ヨウ化物または臭化物）などの脱離基を表し、Ｐｇ^１およびＰｇ^２は水素および／または適切な保護基、例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを表す）を、式（ＸＶ）のアルコールと、酢酸パラジウム（ＩＩ）などの適切なパラジウム触媒の存在下、場合によりジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−３−メトキシ−６−メチルビフェニル−２−イル）ホスフィンまたは２−（ジ−ｔ−ブチルホスフィノ）−１，１−ビナフチルなどの適切なリガンドの存在下で反応させることにより製造してもよい（スキーム５）。反応は、ＴＨＦ、２−メチル−テトラヒドロフラン、またはトルエンなどの適切な溶媒中の炭酸セシウムなどの適切な塩基の存在下、２０℃から１６０℃の間の温度で行われる。式（Ｉ）の化合物は、Ｐｇ^１および／またはＰｇ^２はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである式（ＸＶＩ）の化合物から、メタノール溶液などのＮＨ_３の溶液と、水の存在下、６０℃から１００℃の間の温度で反応させることにより得てもよい。

式（ＩＩ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＸＩＩＩ）、および（ＸＶ）の化合物は市販されている化合物であり、または文献において知られており、または当技術分野において知られている標準的なプロセスにより製造される。

一般的方法
用いた溶媒は全て分析用のグレードのものであり、市販の無水溶媒を反応にルーチン的に用いた。用いた出発材料は市販されていたものであり、または文献の手順にしたがって製造した。室温は２０〜２５℃を指す。溶媒混合物の組成を、体積パーセント値または体積比として示す。

ＭＷ加熱は、２４５０ＭＨｚの持続的照射を生成するＢｉｏｔａｇｅ Ｃｒｅａｔｏｒ、ＩｎｉｔｉａｔｏｒまたはＳｍｉｔｈ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ Ｓｉｎｇｌｅ−ｍｏｄｅ ＭＷ ｃａｖｉｔｙにおいて行った。反応混合物を加熱するのにマイクロ波を用いることができることが理解される。

薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）はＭｅｒｃｋ ＴＬＣ−プレート（シリカゲル６０ Ｆ_２５４）上で行い、スポットをＵＶ可視化した。ストレート相（Ｓｔｒａｉｇｈｔ ｐｈａｓｅ）フラッシュカラムクロマトグラフィー（「フラッシュクロマトグラフィー」）は、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０（０．０４０〜０．０６３ｍｍ）上、手操作で行い、または指摘する溶媒系を用いたＲｅｄｉＳｅｐ（商標）順相フラッシュカラムを用いてＩＳＣＯ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ（商標）システムを用いて自動的に行った。相分離は、場合によりＩｓｏｌｕｔｅ（登録商標）相分離器上で行った。

ＮＭＲスペクトルを、適切な配置のプローブに適合させた４００〜６００ＭＨｚのＮＭＲ分析計上で記録した。別段の記載がなければ、スペクトルは周囲温度で記録した。化学シフトはＴＭＳ（０．００ｐｐｍ）からの低磁場および高磁場のｐｐｍで示す。以下の基準シグナルを^１Ｈ−ＮＭＲ：ＴＭＳ δ０．００において用い、または残留溶媒のシグナルＤＭＳＯ−ｄ_６ δ２．４９、ＣＤ_３ＯＤ δ３．３０、アセトン−ｄ_６ ２．０４、もしくはＣＤＣｌ_３ δ７．２５（別段の指摘がなければ）を用いた。共鳴の多重度を、一重線、二重線、三重線、四重線、多重線、ブロード（ｂｒｏａｄ）、および見かけ（ａｐｐａｒｅｎｔ）に対してそれぞれｓ、ｄ、ｔ、ｑ、ｍ、ｂｒ、およびａｐｐと示す。場合により、診断シグナルだけを報告する。

ＨＰＬＣ、ＨＰＬＣＭＳ、およびＬＣＭＳ分析：高速液体クロマトグラフィー（Ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）（ＨＰＬＣ）を、逆相（ＲＰ）カラム上で行った。移動相Ａ（５％ＣＨ_３ＯＨもしくは５％ＣＨ_３ＣＮ（ａｑ．）中１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ、または０．１％ＮＨ_３（ａｑ．）または０．１％ギ酸（ａｑ．））およびＢ（ＣＨ_３ＯＨまたはＣＨ_３ＣＮ）などを用いて、直線勾配を適用した。エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ＋／−）および／または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ＋／−）を用いてポジティブおよび／またはネガティブイオンモードにおいて、質量分析法（ＭＳ）分析を行った。

ＧＣＦＩＤおよびＧＣＭＳ分析：ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）を、質量分析計（ＭＳ）または炎イオン化検出器（ＦＩＤ）を装着したＧＣ上で行った。ＭＳイオン源は、電子衝撃（ＥＩ）または化学イオン化（ＣＩ、反応ガス メタン）のいずれかであった。分離には、ＤＢ−５ＭＳ、（Ｊ＆Ｗ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）などのキャピラリーカラムを用いた。直線温度勾配を適用した。

分取クロマトグラフィーを、オートサンプラー一体型自動フラクションコレクター（Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ ｃｏｍｂｉｎｅｄ Ａｕｔｏｍａｔｅｄ Ｆｒａｃｔｉｏｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｏｒ）（Ｗａｔｅｒｓ２７６７）、勾配ポンプ（Ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｐｕｍｐ）（Ｗａｔｅｒｓ ２５２５）、カラムスイッチ（Ｃｏｌｕｍｎ Ｓｗｉｔｃｈ）（Ｗａｔｅｒｓ ＣＦＯ）、およびＰＤＡ（Ｗａｔｅｒｓ ２９９６）を有するＷａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステム上で行った。カラム；ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）Ｐｒｅｐ Ｃ８ １０μｍ ＯＢＤ（商標）１９×３００ｍｍ、およびガードカラム；ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＰｒｅｐＭＳ Ｃ８ １０μｍ １９×１０ｍｍカートリッジ（Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ）。Ｂ（１００％ＭｅＣＮ）中Ａ（ＭｉｌｌｉＱ水および５％ＭｅＣＮ中９５％０．１Ｍ ＮＨ_４ＯＡｃ）の勾配、またはＢ（１００％ＭｅＯＨ）中Ａ（ＭｉｌｌｉＱ水および５％ＭｅＯＨ中９５％０．１Ｍ ＮＨ_４ＯＡｃ）、Ａ（ＭｉｌｌｉＱ水中０．２％ＮＨ_３）、またはＡ（ＭｉｌｌｉＱ水中０．２％ギ酸）の勾配を、流速２０ｍｌ／分のＬＣ−分離に適用した。異性体を分離するための分取キラルクロマトグラフィーを、特定されたカラムおよび移動相系を用いて、ＬａＰｒｅｐ（登録商標）システムなどの上を流した。

ＳＦＣ分析：超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）を、ストレート相カラム上で行った。移動相Ａ（ＣＯ_２）、および移動相Ｂ（ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、またはＩＰＡ）などを用いて、イソクラティック流（ｉｓｏｃｒａｔｉｃ ｆｌｏｗ）を適用した。

ストレート相ＨＰＬＣ分析：高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）をストレート相カラム上で行った。移動相Ａ（ヘプタン）およびＢ（ＥｔＯＨまたはＩＰＡ）などを用いて、直線勾配またはイソクラティック流を適用した。

高分解能質量分析法（ＨＲＭＳ）は、正確に質量を測定するために、ＬｏｃｋＳｐｒａｙ源を装着し、ＰＤＡ検出器およびＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８カラムを有するＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣシステムに接続したＷａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ−Ｇ２質量分析計上で行った。測定質量により、元素組成が３ｐｐｍ以内であったことが確証された。

略語
ＡＣＮ アセトニトリル
ａｑ 水性の
Ａｔｍ 大気圧
Ｂｏｃ ｔ−ブトキシカルボニル
Ｂｏｒａｘ 四ホウ酸二ナトリウム、またはホウ酸ナトリウム、または四ホウ酸ナトリウム
Ｃｂｚ ベンジルオキシカルボニル
ＣＤＩ １，１’−カルボニルジイミダゾール
ｄｂａ ジベンジリデンアセトン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＥＡ ジエチルアミン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ 水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥ １，２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ｄｐｐｆ １，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
Ｅｔ_２Ｏ ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
ｅｑ．またはｅｑｕｉｖ． 当量
ｈ 時間（複数可）
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー（ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）
ＩＰＡ イソプロパノール
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー質量分析計
ＬｉＨＭＤＳ リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＭｅＯＨ メタノール
ｍｉｎ 分
ＭＳ 質量分析法
ＭＷ マイクロ波（複数可）
ＮＨ_４ＯＡｃ 酢酸アンモニウム
ＮＭＲ 核磁気共鳴分析法
ｏｘ 酸化
Ｐｓｉ ポンド毎平方インチ
ｑｕａｎｔ． 定量的
ＲＣＭ 閉環メタセシス
ｒ．ｔ． 室温
ｓａｔ． 飽和
ＳＦＣ 超臨界流体クロマトグラフィー
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＬＣ 薄層クロマトグラフィー
ＴＭＥＤＡ テトラメチルエチレンジアミン
ＵＰＬＣ 超高性能液体クロマトグラフィー（ｕｌｔｒａ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）
２−Ｍｅ ＴＨＦ ２−メチルテトラヒドロフラン

化合物は、ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔＭｅｄＣｈｅｍ ＥＬＮ ｖ２．２、またはＡｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｉｎｃ．（ＡＣＤ／Ｌａｂｓ）、トロント オンタリオ州、カナダ、ｗｗｗ．ａｃｄｌａｂｓ．ｃｏｍからのＡＣＤ／Ｎａｍｅ、バージョン１０．０、もしくは１０．０６、もしくはバージョン１２．０１ソフトウエア、またはＯｐｅｎＥｙｅからのＬｅｘｉｃｈｅｍ、バージョン１．９ソフトウエアを用いて命名した。

中間体
中間体１
２−オキソプロパンチオアミド

ＴＨＦ（１７００ｍＬ）およびシアン化アセチル（２５０ｍＬ、３．１５ｍｏｌ）の−１０℃の溶液に、Ｈ_２Ｓをおよそ４５分間泡立たせた。泡立ちを止め、温度が−１０℃になるまで溶液を撹拌した。−１０℃で温度が安定するまで、さらなるＨ_２Ｓを泡立てた。ＴＨＦ（２０ｍＬ）中トリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を、温度が０℃から−３℃の間で維持される速度で、滴下添加した（非常に発熱性の反応）。添加が完了したら、温度を＋４℃に設定し、混合物を終夜撹拌した。窒素を３０分間、反応を通して流し、混合物を濃縮して表題生成物（３１９ｇ、収率９８％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） ｐｐｍ ２．６７（ｓ，３Ｈ）、７．３０〜７．８１（ｍ，１Ｈ）、７．９７〜８．５２（ｍ，１Ｈ）；^１３Ｃ ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） ｐｐｍ ２５．１、１９０．８、１９２．５；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ １０４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体２
６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン

方法Ａ
氷浴中で冷却しながら、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（７．５０ｇ、６６．８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５５ｍＬ）中の６−ブロモ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン（１１．８ｇ、５５．７ｍｍｏｌ）およびメチルアクリレート（１１．１ｍＬ、１２３ｍｍｏｌ）に部分ごとに加えた。混合物をｒ．ｔ．で１．５時間撹拌した。水（８０ｍＬ）およびＫＯＨ（３．１２ｇ、５５．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を７５℃に加熱し、次いで終夜、６０℃にした。混合物を０℃に冷却し、形成した沈殿物をろ去し、真空中で乾燥させて表題化合物（１１．６９ｇ、収率７２％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．８３〜１．９２（ｍ，２Ｈ）、２．１５〜２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．４０〜２．５０（ｍ，２Ｈ）、２．７１（ｄｔ，２Ｈ）、３．１７（ｓ，２Ｈ）、７．３９（ｄ，１Ｈ）、７．７５（ｄｄ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

方法Ｂ
２−Ｍｅ ＴＨＦ（４Ｌ）中の６−ブロモ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン（８００ｇ、３．７９ｍｏｌ）およびメチルアクリレート（７８７ｍＬ、８．７２ｍｏｌ）を２８℃で撹拌した。カリウムｔｅｒｔ−ペントキシドのトルエン（１．７Ｍ、２．６８Ｌ、４．５５ｍｏｌ）溶液を、温度を３０℃から４３℃の間に維持しつつ、滴下添加した。混合物を２５℃で０．５時間撹拌した。水（４Ｌ）を加え、１０分後にＫＯＨ（３８３ｇ、６．８２ｍｏｌ）を加えた。混合物を加熱還流し、有機溶媒を４時間の間に留去した。混合物を１０℃に冷却し、形成した沈殿物をろ去し、真空中で乾燥させて表題化合物（８３７ｇ、収率７５％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １．７４〜１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．９４（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｍ，２Ｈ）、２．５２〜２．６０（ｍ，２Ｈ）、３．２７（ｓ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，１Ｈ）、７．７９〜７．８３（ｍ，１Ｈ）、７．８９（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

方法Ｃ
約２０〜３０℃で、６−ブロモ−１−インダノン（８．００ｋｇ、３７．９ｍｏｌ）、ＴＨＦ（１６Ｌ）、およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２１０ｇ、１．８７ｍｏｌ）の混合物に、メチルアクリレート（６．６Ｌ、７３ｍｏｌ）を等量ずつ３回に分けて（各２．２Ｌ、２４．６ｍｏｌ）徐々に投入した。メチルアクリレートの１回目の投入後に、ＴＨＦ（０．３９Ｌ）に溶解したさらなるカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８６ｇ、０．７７ｍｏｌ）を投入した。メチルアクリレートの２回目の投入後に、ＴＨＦ（０．３９Ｌ）に溶解したさらなるカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（８６ｇ、０．７７ｍｏｌ）を投入した。次いで、さらなるカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４．６４ｋｇ、４１．３ｍｏｌ）のＴＨＦ（２１Ｌ）溶液を約２０〜３０℃で徐々に投入した。溶媒（２１．５Ｌ）を約６５℃で留去し、次いで、水（４９Ｌ）および５０％ＫＯＨ水溶液（２．３Ｌ、３０ｍｏｌ）の混合物を、６０℃未満で約１０分かけて加えた。反応を約６時間、６０℃に保持し、次いで１時間かけて２０℃に冷却し、次いで約１２時間２０℃に保持した後、ろ過した。固体を、水（８Ｌ）およびＴＨＦ（４Ｌ）の混合物で洗浄し、次いで乾燥させて表題化合物（７．４７ｋｇ、ＮＭＲアッセイ９２％ｗ／ｗ、２３．４ｍｏｌ、収率６２％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．７８〜１．８４（ｍ，２Ｈ）、１．９５（ｔｄ，２Ｈ）、２．３２〜２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．５１〜２．５９（ｍ，２Ｈ）、３．２７（ｓ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，１Ｈ）、７．８１（ｍ，１Ｈ）、７．８９（ｍ，１Ｈ）。

中間体３
６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

方法Ａ
６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体２、６．１ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２２０ｍＬ）に溶解し、−６５℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（０．３５４ｇ、９．３６ｍｍｏｌ）を加え、冷却浴を除去した。混合物を放置して０℃に到達させた（およそ３０分）。水（１０ｍＬ）を加え、有機溶媒のほとんどを蒸発により除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）とＮａＣｌの水溶液（５０ｍＬ）との間で分配した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、蒸発させて生成物を得、この生成物を、６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン１４．６ｇから出発して同様の方法で得た付加的な生成物と合わせた。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ１２０ｇ、勾配溶出：ＣＨ_２Ｃｌ_２からＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ（９０：１０））により精製し、表題化合物１３．６ｇ（収率６６％）を得た。得られた材料は、異性体１と異性体２の８０：２０混合物からなっていた。異性体の分析用試料を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ勾配）により単離して以下を得た：

異性体１：（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン：

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．２０〜１．４３（ｍ，４Ｈ）、１．４９〜１．６２（ｍ，２Ｈ）、１．７９〜１．８９（ｍ，２Ｈ）、２．９９（ｓ，２Ｈ）、３．３９〜３．５０（ｍ，１Ｈ）、４．６８（ｄ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，１Ｈ）、７．８５（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３１７［Ｍ＋Ｎａ］^＋および

異性体２：（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン：

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．０７〜１．２０（ｍ，２Ｈ）、１．５１〜１．６３（ｍ，２Ｈ）、１．６５〜１．７６（ｍ，２Ｈ）、１．９３（ｔｄ，２Ｈ）、２．９８（ｓ，２Ｈ）、３．８３（ｄ，１Ｈ）、４．４５（ｄ，１Ｈ）、７．５１〜７．５５（ｍ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，１Ｈ）、７．８４（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３１７［Ｍ＋Ｎａ］^＋。

中間体３、異性体１
方法Ｂ
ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体２、５０．５ｇ、１７２ｍｍｏｌ）に、ＤＣＭ（５０ｍＬ）中ボランｔｅｒｔ−ブチルアミン錯体（５．７０ｇ、６５．５ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくりと投入した。４０分後、濃ＨＣｌ（２０ｍＬ）、引き続き２０％ＮａＣｌ（７０ｍＬ）を投入した。混合物を放置してｒ．ｔ．に到達させ、３０分間撹拌した。相を分離し、水相にＤＣＭ（４０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）を投入した。有機相を合わせ、濃縮し、真空下で終夜乾燥させて、表題生成物（５２．４ｇ、１００％収率）を、表題生成物（収率８３％）および他のジアステレオマーである（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（１７％）の混合物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，両方の異性体のシグナル） ｐｐｍ ^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．３９〜１．５０（ｍ，３Ｈ）、１．６７〜１．８５（ｍ，３Ｈ）２．０５〜２．１２（ｍ，２Ｈ）２．９６（ｓ，０．３４Ｈ）、２．９８（ｓ，１．６８Ｈ）、３．７６（ｍ，０．８３Ｈ）、４．０４（ｍ，０．１７Ｈ）、７．３４（ｍ，１Ｈ）７．７０（ｍ，１Ｈ）７．８８（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２９５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体３、異性体１
方法Ｃ
６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体２、７５０ｇ、２．５６ｍｏｌ）およびプロパン−２−オール（９．８５５Ｌ）を加熱還流し、粉砕したＮａＯＨ（１００ｇ、２．５０ｍｏｌ）を２つの部分にして混合物に加えた。混合物を２時間、加熱還流した。溶媒５Ｌを減圧蒸留により除去した。トルエン（２Ｌ）を加え、溶媒２Ｌを減圧蒸留により除去した。トルエン（３Ｌ）、引き続き２Ｍ ＨＣｌ（１．２７８Ｌ、２．５６ｍｏｌ）を、撹拌している混合物に加えた。相を分離し、有機相を水（２．０Ｌ）で洗浄した。有機相を濃縮し、トルエン（２Ｌ）を加え、次いで、混合物を濃縮した。２−Ｍｅ ＴＨＦ（１Ｌ）を加え、次いで溶媒０．５Ｌを減圧蒸留により除去し、得られた混合物を次の工程で用いた。表題化合物は、ジアステレオマー（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オンとの７：３比の混合物であった（ＨＰＬＣおよびＮＭＲ分析により確立した）：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，両方の異性体のシグナル） ｐｐｍ １．４０〜１．５２（ｍ，３Ｈ）、１．７０〜１．８４（ｍ，３Ｈ）、２．０４〜２．１１（ｍ，２Ｈ）、２．９７（ｓ，０．６２Ｈ）、３．００（ｓ，１．３８Ｈ）、３．７３〜３．８１（ｍ，０．７Ｈ）、４．０４（ｍ，０．３Ｈ）、７．３１〜７．３８（ｍ，１Ｈ）、７．６７〜７．７３（ｍ，１Ｈ）、７．８９（ｍ，１Ｈ）。

中間体４
６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

方法Ａ
６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体３、１２．７ｇ、４３．０ｍｍｏｌ）の異性体の混合物を、Ｎ_２下でＴＨＦ（２１０ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５．７９ｇ、５１．６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、混合物を０℃で２５分間撹拌した。ヨウ化メチル（４．３０ｍＬ、６８．８ｍｍｏｌ）を加えた。冷却浴を除去し、混合物をｒ．ｔ．で撹拌した。さらなるカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．４８３ｇ、４．３０ｍｍｏｌ）を２回、それぞれ２時間後および３時間後に加え、次いで、混合物を２時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を加え、得られた溶液をＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）との間で分配した。水相をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）の別の一部分で抽出した。有機相を合わせ、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、蒸発させて：
異性体１：（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン：

および、異性体２：（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン：

の混合物（およそ８０：２０）１２．５ｇ（収率９４％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，異性体１のシグナル）δ ｐｐｍ １．２０〜１．３２（ｍ，２Ｈ）、１．４０〜１．４８（ｍ，２Ｈ）、１．５１〜１．６２（ｍ，２Ｈ）、１．９７〜２．０７（ｍ，２Ｈ）、３．００（ｓ，２Ｈ）、３．１５〜３．２３（ｍ，１Ｈ）、３．２６（ｓ，３Ｈ）、７．５６（ｄ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，１Ｈ）、７．８６（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３０９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体４、異性体１
方法Ｂ
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体３、異性体１、５０．９ｇ、１７２ｍｍｏｌ）（（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン１７％を含有する）、ヨウ化メチル（１８．３ｍＬ、２９３ｍｍｏｌ）、および２−Ｍｅ ＴＨＦ（３６０ｍＬ）を、Ｎ_２下で３０℃に加熱した。カリウムｔｅｒｔ−ペントキシドのトルエン溶液（トルエン中１．７Ｍ、２０３ｍＬ、３４４ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下添加した。混合物を放置してｒ．ｔ．に到達させ、１時間撹拌した。水（２５０ｍＬ）を加え、撹拌１０分後、相を分離した。有機相を水（１４０ｍＬ）で洗浄し、濃縮し、真空中で乾燥させて固体を得た。ＭｅＯＨ３００ｍＬを固体に加え、混合物を加熱還流した。水を加え（３０ｍＬ）、引き続き５分間還流した。混合物をゆっくりと放置してｒ．ｔ．に到達させた。混合物をｒ．ｔ．で終夜撹拌した。固体をろ去して、表題化合物を、単一の異性体（３１ｇ、収率５８％）として得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） ｐｐｍ １．３８（ｍ，２Ｈ）１．５２（ｍ，２Ｈ）１．７７（ｔｄ，２Ｈ）２．１６（ｍ，２Ｈ）２．９８（ｓ，２Ｈ）３．２８（ｍ，１Ｈ）３．４０（ｓ，３Ｈ）７．３５（ｄ，１Ｈ）７．７０（ｄｄ，１Ｈ）７．８８（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３０９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体４、異性体１
方法Ｃ
ＤＣＭ（３．６Ｌ）に溶解したボランｔｅｒｔ−ブチルアミン錯体（８２０ｇ、９．４ｍｏｌ）を、約０〜５℃で約４０分かけて、ＤＣＭ（４１Ｌ）中６’−ブロモスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体２、７．４６ｋｇ、ＮＭＲアッセイ９２％ｗ／ｗ、２３．４ｍｏｌ）のスラリーに投入した。約１時間後、ＮａＣｌ（２．６８ｋｇ）、水（１２．９Ｌ）、および３７％塩酸（２．５Ｌ、３１ｍｏｌ）の溶液を投入した。混合物を約１５℃に温め、層に定着した後、相を分離した。（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体３、異性体１）を含有しているＤＣＭ相を、メチルメタンスルホネート（２．５９Ｌ、３０．５ｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムクロリド（１３０ｇ、０．４７ｍｏｌ）と一緒に、反応器に戻した。次いで、約２０℃で、５０％ＮａＯＨ水溶液（１３Ｌ、２２９ｍｏｌ）を、激しく振盪している反応混合物に約１時間かけて投入した。約１６時間保持した後、水（１９Ｌ）を加え、分離後に水相を廃棄した。溶媒（３４Ｌ）を大気圧で留去し、次いでさらなる溶媒（２０Ｌ）を、ＥｔＯＨ（２０Ｌ）を等しい５つの部分にして加える間に留去した。ＥｔＯＨ（１４Ｌ）を加え、溶液を２５℃に冷却した。試料（０．３Ｌ）を、冷却する間に４０℃で取り出した。試料を自発的に結晶化させ、２５℃の反応器に再投入した。約４０℃に再加熱後、水（１４Ｌ）を、約２０分かけて投入した。スラリーを約２０℃に冷却し、１６時間保持した後、ろ過した。固体を、水（４．８Ｌ）およびＥｔＯＨ（６．４Ｌ）の混合物で洗浄し、次いで乾燥させて表題化合物（ＨＰＬＣ−分析により異性体２：（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン４．６％を含有する）（５．５７ｋｇ、ＮＭＲアッセイ９１％、１６．４ｍｏｌ、収率７０％）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １．２２〜１．３２（ｍ，２Ｈ）、１．４１〜１．４８（ｍ，２Ｈ）、１．５６（ｔｄ，２Ｈ）、１．９９〜２．０７（ｍ，２Ｈ）、３．０１（ｓ，２Ｈ）、３．１６〜３．２３（ｍ，１Ｈ）、３．２７（ｓ，３Ｈ）、７．５６（ｄ，１Ｈ）、７．７７（ｄ，１Ｈ）、７．８６（ｄｄ，１Ｈ）。

中間体５
（Ｎ−（５’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド）

方法Ａ
６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体４、異性体の混合物、１．１４ｇ、３．６９ｍｍｏｌ）、２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（０．６７０ｇ、５．５３ｍｍｏｌ）およびチタンエトキシド（１．５１９ｍＬ、７．３７ｍｍｏｌ）を２−Ｍｅ ＴＨＦ（８ｍＬ）に溶解し、２６時間加熱還流した。反応をｒ．ｔ．に放冷した。ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３（飽和、１５ｍＬ）を、撹拌しながら加えた。次いで、混合物を、１５分間、撹拌せずに静置した。有機相をろ過により回収し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。ｎ−ヘプタン中０〜２０％ＥｔＯＡｃの勾配でのフラッシュクロマトグラフィーにより、表題化合物（１．００ｇ、収率６６％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＣＮ，主異性体のシグナル）δ ｐｐｍ ０．８５〜０．９１（ｍ，１Ｈ）、１．２７（ｓ，９Ｈ）、１．２５〜１．８６（多重線，５Ｈ）、２．０１〜２．１０（ｍ，２Ｈ）、３．０２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）、３．１８〜３．２６（ｍ，１Ｈ）、３．３１（ｓ，３Ｈ）、７．３７（ｄ，１Ｈ）、７．６７（ｄｄ，１Ｈ）、８．５９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４１３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体５、異性体１
Ｎ−（（１ｒ，４ｒ）−５’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド方法Ｂ

（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体４、異性体１、方法Ｂ、３１ｇ、１００ｍｍｏｌ）、２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（１５．８ｇ、１３０ｍｍｏｌ）、２−Ｍｅ ＴＨＦ（２００ｍＬ）、およびチタンエトキシド（４１．３ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）を１００℃に加熱して、７４℃の共沸混合物を得た。共沸混合物の蒸留を８時間継続し、次いで混合物を終夜還流した。共沸混合物の蒸留をさらなる８時間継続し、次いで、混合物を終夜還流した。混合物をｒ．ｔ．に冷却した。さらなる２−Ｍｅ ＴＨＦを加えて、元の濃度の混合物を得た。硫酸（１１．１４ｍＬ、２００．５ｍｍｏｌ）およびＮａ_２ＳＯ_４（３５．６ｇ、２５０ｍｍｏｌ）の水溶液（１５０ｍＬ）を製造した。次いで、反応混合物を２０分かけて、体積の４／５の酸性溶液に加えた。相を分離し、有機相を残りの酸性溶液で、引き続き水（７５ｍＬ）中の酢酸アンモニウム（１５．４６ｇ、２００．５ｍｍｏｌ）、および水（７５ｍＬ）で洗浄した。有機相を濃縮し、終夜真空中で乾燥させて表題化合物（４０．８ｇ、収率９９％）を得た：ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４１２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体６
６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン

方法Ａ
Ｎ−（５’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（中間体５、異性体の混合物、２ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）溶液に、１，４−ジオキサン（１２．１２ｍＬ、４８．５０ｍｍｏｌ）中の４Ｍ ＨＣｌを加えた。白色沈殿物が直ちに形成し、得られた混濁した混合物をｒ．ｔ．の窒素雰囲気下で９０分間撹拌した。Ｅｔ_２Ｏ（３０ｍＬ）を加え、固体をろ去し、Ｅｔ_２Ｏで洗浄した。固体をＤＣＭ（４０ｍＬ）とＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（４０ｍＬ）との間で分配した。相を分離し、有機層を濃縮した。表題化合物（１．４１ｇ）を次の工程で直接用いた。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３０７Ｍ^＋．。

方法Ｂ
中間体６、異性体１
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン塩酸塩

ＨＣｌ（Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ、９９ｍＬ、１９７ｍｍｏｌ）を、Ｅｔ_２Ｏ（３０ｍＬ）およびＤＣＭ（３０ｍＬ）に溶解したＮ−（（１ｒ，４ｒ）−５’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（中間体５、異性体１、４０．８ｇ、９８．９ｍｍｏｌ）に５分かけて滴下添加した。混合物を６０分間撹拌した後、これをろ過した。ろ過ケークをＥｔ_２Ｏで洗浄し、真空中で乾燥させて表題化合物（３１．３ｇ、収率９２％）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １．２８（ｍ，２Ｈ）１．７０（ｄ，２Ｈ）２．０４（ｍ，４Ｈ）３．１７（ｓ，２Ｈ）３．２３（ｍ，１Ｈ）３．２８（ｓ，３Ｈ）７．６１（ｄ，１Ｈ）８．０４（ｄｄ，１Ｈ）８．８１（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ ３０７ Ｍ^＋．。

方法Ｃ
中間体６、異性体１
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体５、異性体１、１９．２０ｇ、ＮＭＲアッセイ９１％、５６．５ｍｍｏｌ）を、チタン（ＩＶ）エトキシド（２４ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ）および２−Ｍｅ ＴＨＦ（４４ｍＬ）と８２℃で加熱することにより、２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（８．９０ｇ、７３．５ｍｍｏｌ）と反応させた。３つの部分の溶媒（１部分あたり約２６ｍＬ）を、それぞれ０．５時間、７．５時間、および８時間の期間加熱した後、留去し、各蒸留が完了した後、さらなる２−Ｍｅ ＴＨＦ（３部分、１部分あたり２６ｍＬ）を加えた。１７．５時間後、さらなる１部分の溶媒（約２６ｍＬ）を留去した。反応混合物をｒ．ｔ．に冷却し、ＤＣＭ（５２．５ｍＬ）で希釈し、次いで、約４分かけて、Ｎａ_２ＳＯ_４（１７．９％ｗ／ｗ）、水（７２．２％ｗ／ｗ）、および硫酸（９．９％ｗ／ｗ）から製造した溶液（９２ｍＬ、１１３ｇ）に徐々に加えた。ＤＣＭ（５２．５ｍＬ）を用いて反応フラスコおよび付加漏斗を洗浄し、次いで後処理用のフラスコに加えた。層を分離した後、有機相を水（１７．５ｍＬ）と、Ｎａ_２ＳＯ_４（１７．９％ｗ／ｗ）、水（７２．２％ｗ／ｗ）、および硫酸（９．９％ｗ／ｗ）から製造した溶液（１８．５ｍＬ、２３ｇ）との混合物で洗浄した。混合物を、Ｎａ_２ＳＯ_４（８．７５ｇ）と、約６時間撹拌した。スラリーをろ過し、ろ過ケークをＤＣＭ（１７．５ｍＬ）で洗浄した。合わせたろ液を、溶媒（約１０８ｍＬ）を留去することにより濃縮した。さらなるＤＣＭ（５２．５ｍＬ）を加え、同体積の溶媒（５２．５ｍＬ）を留去した。無水（ｄｒｙ）溶液を約２０℃に冷却し、ＤＣＭ（１７．５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（８．７ｍＬ）で希釈した。次いで、ＨＣｌ（Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ）（３４ｍＬ、６８ｍｍｏｌ）を、約２０分かけて徐々に加えた。得られたスラリーを約４５分間、約２０℃に保持した後、ろ過した。ろ過ケークを、等体積のＤＣＭおよびＥｔ_２Ｏから製造した溶液（３部分、１部分あたり１７．５ｍＬ）で洗浄し、次いで真空中で乾燥させて、別の異性体（１７．４１ｇ、ＮＭＲアッセイ８８％ｗ／ｗ、４４．４ｍｍｏｌ、収率７９％）約４％を含有する表題化合物を得た（ＮＭＲアッセイにおいて、残留のＤＣＭ６．８％ｗ／ｗおよび塩化アンモニウム２．９％ｗ／ｗが検出された）：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １．３０（ｍ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，２Ｈ）、１．９８（ｍ，２Ｈ）、２．１０（ｍ，２Ｈ）、３．１７（ｓ，２Ｈ）、３．２３（ｍ，１Ｈ）、３．２９（ｓ，３Ｈ）、７．６１（ｄ，１Ｈ）、８．０４（ｄｄ，１Ｈ）、８．７５（ｄ，１Ｈ）、１２．９０（ｂｒ ｓ，２Ｈ）。

中間体７
６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン

方法Ａ
６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン（中間体６、１．４１ｇ、４．５７ｍｍｏｌ）および２−オキソプロパンチオアミド（中間体２、１．４２ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に溶解し、得られた溶液を窒素雰囲気下、６０℃で加熱した。１５時間後、反応をｒ．ｔ．に放冷した。沈殿物が形成し、これをろ去し、真空中で乾燥させ、表題化合物（１．１６ｇ、収率６４％）を異性体の混合物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．１８（ｍ，４Ｈ）、１．４７（ｍ，２Ｈ）、１．８７（ｍ，２Ｈ）、２．２７（ｍ，３Ｈ）、３．０３（ｍ，３Ｈ）、３．２０（ｓ，３Ｈ）、６．９８（ｄ，１Ｈ）、７．３４（ｄ，１Ｈ）、７．５１（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ ３９４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

方法Ｂ
中間体７、異性体１
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン

（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン塩酸塩（中間体６、異性体１、９５ｇ、２００ｍｍｏｌ）（（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン塩酸塩３０％を含有する）を、ＤＣＭ（６００ｍＬ）と２ＭＮａＯＨ水溶液（４００ｍＬ）との間で分配した。有機相を濃縮し、２−プロパノール（２００ｍＬ）を加え、混合物を濃縮した。得られた（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン、トリメチルオルトホルメート（６６ｍＬ、６０２ｍｍｏｌ）、および２−プロパノール（３００ｍＬ）を８０℃に加熱した。２−プロパノール（２５０ｍＬ）中２−オキソプロパンチオアミド（５１．５ｇ、５００ｍｍｏｌ）を、６５℃を超える温度を維持しながら、４０分の間に加えた。反応を２時間、７５℃で撹拌した。混合物を体積約１／２に濃縮し、終夜０℃で放置した。形成された固体をろ去し、４０℃の真空キャビネット中で３時間乾燥させて表題化合物を得た（６１．２４ｇ、収率７８％、（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン１４％を含有する）：ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ３９２Ｍ^＋．。

中間体８
６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

方法Ａ
６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン（中間体７、０．９３６ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）をアンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１０ｍＬ、７０．００ｍｍｏｌ）中に吸収させ、得られた混合物をアルゴンと泡立て、次いで１２０℃のＭＷ反応器中で１時間加熱した。溶媒を蒸発させた。アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、６ｍＬ、４２ｍｍｏｌ）を加え、反応をアルゴンと泡立て、ＭＷを用いて６０分間、１２０℃で再び加熱した。溶媒を蒸発させ、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１０ｍＬ、７０ｍｍｏｌ）を加えた。反応をアルゴンと泡立て、次いでＭＷを用いて２時間、１２０℃で加熱した。溶媒を蒸発させ、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１５ｍＬ、１０５ｍｍｏｌ）を加え、反応を再び１２０℃で２時間加熱した。溶媒を蒸発させ、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１５ｍＬ、１０５ｍｍｏｌ）を加え、反応を再び１２０℃で２時間加熱した。溶媒を蒸発させ、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、２０ｍＬ、１４０ｍｍｏｌ）を加えた。反応を再び、ＭＷを用いて１時間、１２０℃で加熱した。溶媒を蒸発させ、得られた残留物をＤＣＭ（６０ｍＬ）およびブライン（×２）に吸収させ、相分離器中に注いだ。有機相をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、表題化合物（０．７３６ｇ、収率８２％）を異性体の混合物として得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） ｐｐｍ １．０９（ｔｄ，１Ｈ）、１．２７〜１．４９（ｍ，３Ｈ）、１．６２〜１．７４（ｍ，２Ｈ）、１．９３〜２．０１（ｍ，２Ｈ）、２．３７（ｓ，３Ｈ）、３．０４〜３．１８（ｍ，３Ｈ）、３．３４（ｓ，３Ｈ）、６．９０（ｄ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，１Ｈ）、７．３８（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＭＭ−ＥＳ＋ＡＰＣＩ）＋ ｍ／ｚ ３７６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンの異性体の分離
６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（中間体８、８０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、分取クロマトグラフィー（ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）ＰｒｅｐＣ８ １０μｍ ＯＢＤ（商標）１９×２５０ｍｍカラムおよびガードカラム；ＸＴｅｒｒａ（登録商標）ＰｒｅｐＭＳ Ｃ８ １０μｍ １９×１０ｍｍカートリッジを装着したＷａｔｅｒｓ ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘシステム。ＭｉｌｌｉＱ水中０．２％ＮＨ_３中３５〜７０％ＭｅＯＨの直線勾配を流速２０ｍＬ／分で適用した）を用いて精製して以下を得た：

異性体混合物１：（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（第１に溶出される、副異性体、２．０ｍｇ、２．５％収率）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＣＮ）δ ｐｐｍ １．１５〜１．２５（ｍ，２Ｈ）、１．３６（ｔｄ，１Ｈ）、１．４５〜１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．６３〜１．７４（ｍ，３Ｈ）、２．１９（ｓ，３Ｈ）、２．９８〜３．０６（ｄｄ，２Ｈ）、３．２０（ｓ，３Ｈ）、３．３２（ｔ，１Ｈ）、５．１９〜５．３９（ｍ，２Ｈ）、６．７５（ｄ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，１Ｈ）、７．３４（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３７８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

および、異性体混合物２：（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（第２に溶出される、主異性体、収率は未決定）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．０９（ｔｄ，３．４７Ｈｚ，１Ｈ）、１．２７〜１．４９（ｍ，３Ｈ）、１．６２〜１．７４（ｍ，２Ｈ）、１．９３〜２．０１（ｍ，２Ｈ）、２．３７（ｓ，３Ｈ）、３．０４〜３．１８（ｍ，３Ｈ）、３．３４（ｓ，３Ｈ）、６．９０（ｄ，１Ｈ）、７．２０（ｄ１Ｈ）、７．３８（ｄｄ，１．７３Ｈｚ，１Ｈ）、ＭＳ（ＭＭ−ＥＳ＋ＡＰＣＩ）＋ ｍ／ｚ ３７８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ−［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンの異性体の分離
中間体８の異性体混合物２の異性体をＬｕｘＣ４；４．６^＊２５０ｍｍ；５μｍカラムを有し、移動相が１５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡを含有する）、および流速５０ｍＬ／分の８５％ＣＯ_２からなる、ＳＦＣ ＢｅｒｇｅｒＭｕｌｔｉｇｒａｍ ＩＩを用いて分離して、以下を得た：

保持時間６．１分の異性体１：（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（９ｍｇ、収率１１％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＣＮ）δ ｐｐｍ １．０５（ｄｄ，１Ｈ）、１．２３（ｄｔ，２Ｈ）、１．３９（ｄ，１Ｈ）、１．４９（ｄｄｄ，２Ｈ）、１．８１〜１．８９（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｓ，３Ｈ）、２．９４〜３．１０（ｍ，３Ｈ）、３．２３（ｓ，３Ｈ）、５．３２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．７５（ｄ，１Ｈ）、７．１９（ｄ，１Ｈ）、７．３３（ｄｄ，１Ｈ）、ＭＳ（ＭＭ−ＥＳ＋ＡＰＣＩ）＋ ｍ／ｚ ３７８［Ｍ＋Ｈ］^＋；

および、保持時間９．５分の異性体２：（１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（１５ｍｇ、収率１９％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＣＮ）δ ｐｐｍ １．００〜１．０９（ｍ，１Ｈ）、１．１７〜１．３１（ｍ，２Ｈ）、１．３９（ｔｄ，１Ｈ）、１．５０（ｄｄｄ，２Ｈ）、１．８６（ｄｔ，２Ｈ）、２．１８（ｓ，３Ｈ）、２．９４〜３．１０（ｍ，３Ｈ）、３．２４（ｓ，３Ｈ）、５．３２（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．７６（ｄ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，１Ｈ）、７．３４（ｄｄ，１Ｈ）、ＭＳ（ＭＭ−ＥＳ＋ＡＰＣＩ）＋ ｍ／ｚ ３７８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンの異性体の分離
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（中間体８、異性体混合物２、主）および（１ｓ，４ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（中間体８、異性体混合物１、副）を含有する混合物１．７ｇを、以下の条件を用いて分取クロマトグラフィーにより精製した：カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８；５０^＊３００ｍｍ；１０μｍ、移動相：２０分かけて、０．１％ＮＨ_３水溶液中２０〜６０％ＭｅＣＮ、流速：１２０ｍＬ／分。得られた、保持時間１５分の副異性体（上記の異性体混合物１に等しい）を、次いで、以下のシステムを用いた分取ＳＦＣにより、その異性体に分離した：ＢｅｒｇｅｒＭｕｌｔｉｇｒａｍ ＩＩ ＳＦＣシステム、カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈ；２０^＊２５０ｍｍ；５μｍ、移動相：１０％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡを含有する）／９０％ＣＯ_２，流速：５０ｍＬ／分により以下が得られる：
保持時間６．５分の、絶対配置が未決定の異性体３（７７ｍｇ、収率５％）：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．０５〜１．１７（ｍ，２Ｈ）、１．２４（ｔｄ，１Ｈ）、１．３６〜１．５４（ｍ，２Ｈ）、１．５７〜１．７４（ｍ，３Ｈ）、２．１６（ｓ，３Ｈ）、２．８５〜３．０７（ｍ，２Ｈ）、３．１２（ｓ，３Ｈ）、３．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、６．５８（ｓ，２Ｈ）、６．６３（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，１Ｈ）、７．３３（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＣＩ^＋）ｍ／ｚ ３７６［Ｍ＋Ｈ］^＋、
および、保持時間１２分の、絶対配置が未決定の異性体４（６４ｍｇ、収率４％）：^１Ｈ
ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．０５〜１．１７（ｍ，２Ｈ）、１．２４（ｔｄ，１Ｈ）、１．３６〜１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．５７〜１．７４（ｍ，３Ｈ）、２．１６（ｓ，３Ｈ）、２．８５〜３．０６（ｍ，２Ｈ）、３．１２（ｓ，３Ｈ）、３．２９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、６．５８（ｓ，２Ｈ）、６．６３（ｄ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，１Ｈ）、７．３３（ｄｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＣＩ^＋）ｍ／ｚ ３７６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

方法Ｂ
中間体８、異性体混合物２
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン（中間体７、異性体１、２２．７ｇ、５７．７ｍｍｏｌ）およびアンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１８０ｍＬ、１．２６ｍｏｌ）を圧力反応器に入れ、終夜７４℃に加熱した。残留物を放置してｒ．ｔ．に到達させ、混合物を濃縮した。残留物を２Ｍクエン酸（４００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）との間で分配した。不溶性の材料をろ去し、未反応の出発材料であることが決定された。有機相（ｏｒｇ１）を真空中で濃縮して、さらなる未反応の出発材料を得た。水相にＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）を加え、次いで、ｐＨが約１２になるまで５０％ＮａＯＨを加え、混合物を１０分間撹拌した。得られた有機相（ｏｒｇ２）を保存した。ｏｒｇ１からの残留物、およびろ去した固体を合わせ、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、１８０ｍＬ、１．２６ｍｍｏｌ）に懸濁し、圧力反応器に入れ、終夜１００℃で加熱した。得られた溶液を真空中で濃縮した。残留物を２Ｍクエン酸（３００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）との間で分配した。水相にＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）を加え、次いで、ｐＨが約１２になるまで５０％ＮａＯＨを加え、混合物を１０分間撹拌した。有機相を上記からのｏｒｇ２と合わせた。活性炭を有機相に加え、混合物を３０分間撹拌した後、これを珪藻土を通してろ過した。有機相を濃縮し、真空中で終夜乾燥させて固体を得た。固体にジイソプロピルエーテル（１２５ｍＬ）を加え、混合物を終夜還流した。混合物を放置してｒ．ｔ．に到達させ、固体をろ去して表題化合物（上記中間体８、異性体混合物２に等しい）（１５ｇ、収率６９％）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ ０．９３（ｍ，１Ｈ）１．１〜１．２５（ｍ，２Ｈ）１．３５〜１．４５（ｍ，３Ｈ）１．８１（ｂｒ．ｄ，２Ｈ）２．１６（ｓ，３Ｈ）２．８７〜３．０３（ｍ，３Ｈ）３．１８（ｓ，３Ｈ）６．５９（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．６４（ｄ，１Ｈ）、７．２５（ｄ，１Ｈ）、７．３４（ｄｄ，１Ｈ）；ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３７６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体８、異性体１
（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１’，２’’−インデン−１’，２’’イミダゾール］−４’’−アミン

１Ｌ丸底フラスコに、（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（中間体８、異性体混合物２、方法Ｂ、６１ｇ、１６２ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（９９．５％、６００ｍＬ）、および水（６０ｍＬ）を加えて均一な混合物を得、これを７０℃に加熱した。混合物を高温で３０分間撹拌し、引き続きＤ（＋）−１０−カンファースルホン酸（１８．８ｇ、８１．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３時間、７０℃で撹拌し、次いで、放置して２時間かけて２０℃に到達させ、引き続き２０℃で１２時間撹拌した。混合物をろ過して固体を得、これを冷ＥｔＯＨで洗浄し、次いで、５０℃の真空乾燥機で１０時間乾燥させて、Ｄ（＋）−１０−カンファースルホン酸塩（３７ｇ；収率３７％）として表題化合物を得た。鏡像体比を、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム（４．６^＊２５０ｍｍ；５μｍ）を装着し、移動相が１０％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡを含有する）および流速３ｍＬ／分の９０％ＣＯ_２からなる、ＳＦＣ Ｂｅｒｇｅｒ Ａｎａｌｙｔｉｘシステム上の分析により決定した。保持時間３．６８分の第１のピーク（面積２．５％）は、異性体２に等しい、（１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンに相当した。保持時間４．５８分の第２のピーク（面積９７．５％）は、異性体１に等しく、表題化合物である（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１’，２’’−インデン−１’，２’’イミダゾール］−４’’−アミンに相当した。

塩からの表題化合物の遊離を、ジクロロメタン（４ｍＬ）中に懸濁したカンファースルホン酸塩（０．３２ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、ＫＯＨ（０．３２ｇ、５．７ｍｍｏｌ）の水溶液（４ｍＬ）とともに３０分間、室温で撹拌することにより行った。有機相を分離し、真空中で濃縮して、定量的に鏡像体余剰９５％の表題化合物を得た（上記の通り決定した）。

方法Ｃ
中間体８、異性体１（＋）−カンファースルホニレート（ｃａｍｐｈｏｒ ｓｕｌｆｏｎｙｌａｔｅ）
（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１’，２’’−インデン−１’，２’’イミダゾール］−４’’−アミン（＋）−カンファースルホニレート
（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン（中間体７、異性体１、１２．８ｇ、３２．６ｍｍｏｌ）、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ、９３．３ｍＬ、６５３ｍｍｏｌ）、および酢酸亜鉛二水和物（８．６０ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）を圧力反応器に投入し、２４時間、８０℃に加熱した。反応混合物を冷却し、溶媒を最終体積１３０ｍＬの１−ブタノールに変更した（１−ＢｕＯＨ（１３０ｍＬ）を加え、次いで、混合物を蒸留して１３０ｍＬに減らし、この段階でさらなる１−ＢｕＯＨ（６５ｍＬ）を加えて体積を維持しながら蒸留を継続した）。有機溶液を、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（８５ｍＬ）および水（５１ｍＬ）で洗浄した。得られた溶液を７０℃に加熱し、Ｄ（＋）−１０−カンファースルホン酸（６．８２ｇ、２９．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を冷却し、得られた固体をろ過により回収し、エタノール（５１ｍＬ）で洗浄し、４０℃の真空乾燥機で乾燥させて、鏡像体純度９９％の白色固体として表題化合物（７．０９ｇ、収率４１％）を得た（カラム温度２０℃、移動相が流速０．９ｍＬ／分の９５：５イソヘキサン：エタノール（０．１％ｖ／ｖトリエチルアミン）からなる、クロマトグラフィー：ＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＡ−３ ０．４６ｃｍ×５ｃｍ、中間体８、異性体１：保持時間２．６６分、中間体８、異性体２ 保持時間２．３９分）。

中間体９
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドジカーボネート

ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（８．５３ｇ、３９．１ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（５．４４ｍＬ、３９．１ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（０．２２７ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を、（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（中間体８、異性体混合物２、７．００ｇ、１８．６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液に加えた。得られた混合物をｒ．ｔ．で２０時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、２Ｍ ＨＣｌ水溶液、水、ＮａＨＣＯ_３飽和水溶液、およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。ＤＣＭ中０〜５％メタノールの勾配溶出を用いたシリカゲル上のクロマトグラフィーによる精製により、表題化合物（４．４１ｇ、収率４１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １．１〜１．３（ｍ，４Ｈ）、１．４（ｓ，１８Ｈ）、１．５〜１．６（ｍ，２Ｈ）、１．８〜１．９（ｍ，２Ｈ）、２．２（ｓ，３Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，１Ｈ）、３．１（ｓ，２Ｈ）、３．２（ｓ，３Ｈ）、６．７（ｄ，１Ｈ）、７．４（ｄ，１Ｈ）、７．５（ｄｄ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ５７６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１０
ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］カルバメート

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドジカーボネートおよびｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドカーボネート（中間体９、クロマトグラフィーにかけない混合物として使用、４．０９ｇ、７．７８ｍｍｏｌ）の混合物を、４０℃で８時間、２Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３（７．１ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）水溶液で処理した。メタノールのほとんどを減圧して蒸発させ、残留物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた抽出物を、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。ＤＣＭおよびヘプタン（１５：８５）の混合物中０〜１０％ＭｅＯＨの勾配溶出を用いたシリカゲル上のクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物（２．９０ｇ、収率８６％）の２つの異性体の１：１混合物に一致する^１Ｈ ＮＭＲを示す生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．４４（ｓが多重線と一部重複，９Ｈ）、１．４７（ｓが多重線と一部重複，９Ｈ）、２．１８（ｓ，３Ｈ）、２．２８（ｓ，３Ｈ）、３．１８（ｓが多重線と一部重複，４Ｈ）、３．２０（ｓが多重線と一部重複，３Ｈ）、６．６６（ｄ，１Ｈ）、７．０３（ｍ，１Ｈ）、７．３１（ｍ，２Ｈ）、７．４１（ｄｄ，１Ｈ）、７．４８（ｄｄ，１Ｈ）、９．８５（ｓ，１Ｈ）、１０．５２（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４７６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１１
６−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン

６−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン（３．６ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液に、（３，３−ジフルオロシクロブチル）メタノール（２．９７ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（９．５６ｇ、３６．４５ｍｍｏｌ）を加えた。ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（７．１８ｍＬ、３６．５ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物をｒ．ｔ．で終夜撹拌した。材料を、ヘプタン中０〜１００％ＥｔＯＡｃの勾配を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物３．６７ｇ（収率６０％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．３０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）２．４２〜２．５２（ｍ，６Ｈ）２．５４〜２．６２（ｍ，１Ｈ）２．６３〜２．６６（ｍ，２Ｈ）２．６７〜２．７６（ｍ，２Ｈ）２．９８〜３．０４（ｍ，２Ｈ）４．０８（ｄ，２Ｈ）７．１０（ｄ，１Ｈ）７．２６（ｄｄ，１Ｈ）７．４８（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２５３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１２
６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）スピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン

６−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン（中間体１１、７．０ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）およびメチルアクリレート（５．５１ｍＬ、６１．１ｍｍｏｌ）の２−Ｍｅ ＴＨＦ（６ｍＬ）中混合物を０℃に冷却し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３．７４ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）を部分ごとに加えた。ｒ．ｔ．で２時間撹拌した後、水（９ｍＬ）および水酸化カリウム（１．５６ｇ、２７．８ｍｍｏｌ）を加え、混合物を終夜、加熱還流した。混合物をｒ．ｔ．に冷却し、水およびブラインを加えた。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮し、３．５１ｇ、収率３７％の表題化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．８０〜１．９１（ｍ，２Ｈ）２．１７〜２．２６（ｍ，２Ｈ）２．３９〜２．５７（ｍ，４Ｈ）２．５８〜２．８２（ｍ，５Ｈ）３．１６（ｓ，２Ｈ）４．０５（ｄ，２Ｈ）７．２０（ｄ，１Ｈ）７．２５（ｄｄ，１Ｈ）７．４０（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３３５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１３
６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）スピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体１２、３．５１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）およびメタノール（４．２５ｍＬ、１０５ｍｍｏｌ）の混合物に溶解した。ボラン−トリメチルアミン錯体（１．６９ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を終夜撹拌した。クエン酸一水和物（３０．９ｇ、１４７ｍｍｏｌ）を一度に加え、引き続き水（３．７８ｍＬ、２１０ｍｍｏｌ）を滴下添加した。混合物を３時間撹拌し、その後水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した（×２）。合わせた有機相を、乾燥させ、濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜１０％ＭｅＯＨ）を用いて精製し、表題化合物２．９８ｇ（定量的収率）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３３７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１４
６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体１３、２．９８ｇ、８．８５ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、ＴＨＦ（３５ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（２．９８ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、混合物を０℃で１５分間撹拌した。ヨウ化メチル（１．１１ｍＬ、１７．７ｍｍｏｌ）を加えた。冷却浴を除去し、混合物をｒ．ｔ．で終夜撹拌した。水（２００ｍＬ）を加え、得られた溶液をさらなる水（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ）との間で分配した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮し、生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘプタン中０〜５０％ＥｔＯＡｃ）を用いて単離し、表題化合物１．８５ｇ（収率５９％）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３５１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１５
６’−（シクロブチルメトキシ）スピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン

６−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−オン（３．０ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）およびシクロブチルメタノール（２．１０ｍＬ、２２．３ｍｍｏｌ）から出発し、中間体１１に対して記載した手順を用いて、表題化合物（２．５６ｇ、収率５８％）を製造した。混合物を４５℃に加熱し、週末にわたって撹拌したままにした。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．８１〜２．０３（ｍ，４Ｈ）、２．１１〜２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．６９〜２．７４（ｍ，２Ｈ）、２．７８（ｄｔ，１Ｈ）、３．０４〜３．１２（ｍ，２Ｈ）、３．９６（ｄ，２Ｈ）、７．１７〜７．２２（ｍ，２Ｈ）、７．３６（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ２１７［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１６
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

６’−（シクロブチルメトキシ）スピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’，４（３’Ｈ）−ジオン（中間体１５、２．３５ｇ、７．８８ｍｍｏｌ）から出発し、中間体１３に対して記載した手順を用いて、表題化合物を製造した。生成物を、シリカゲルカラム（ｎ−ヘプタン中０〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配溶出）上で精製して、表題化合物（１．８４ｇ、収率７８％、（１ｓ，４ｓ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン２９％を含有する）を得た。この化合物を次の工程において用いた：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．１０（ｍ，副異性体）、１．２〜１．４（ｍ，４Ｈ）、１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．７１（ｍ，副異性体）、１．７５〜１．９５（ｍ，６Ｈ）、２．０７（ｍ，２Ｈ）、２．７１（ｍ，１Ｈ）、２．９２（ｍ，２Ｈ）、３．４４（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｍ，副異性体）、３．９８（ｄ，２Ｈ）、４．４２（ｄ，副異性体）、４．６６（ｄ，１Ｈ）、７．０７（ｄ，１Ｈ）、７．２６（ｍ，１Ｈ）、７．４４（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３０１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１７
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン

（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体１６、別の異性体２９％を含有する、１．８４ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）を、不活性な雰囲気下で２−Ｍｅ ＴＨＦ（１７ｍＬ）に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ヨウ化メチル（０．４９８ｍＬ、７．９６ｍｍｏｌ）を加え、引き続きカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．９６２ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた。得られた混合物を３５℃で１時間撹拌した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．９６２ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を継続した。さらに３０分後、新たな一部分のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（０．１０３ｇ、０．９２ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を継続した。合計４時間後、完全な変換が得られた。水（６ｍＬ）およびブライン（３ｍＬ）を加えた。相を分離し、有機層を乾燥させ、濃縮した。生成物をシリカゲルカラム上（ｎ−ヘプタン中０〜５０％ＥｔＯＡｃの勾配溶出）で精製して、表題化合物（１．４８ｇ、収率７７％）を得た。生成物は、（１ｓ，４ｓ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オンを２９％含有しており、これを次の工程において用いた：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．１１（ｍ，副異性体）、１．２６（ｍ，２Ｈ）、１．４０（ｄ，１Ｈ）、１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．７５〜１．９５（ｍ，５Ｈ）、２．０〜２．１（ｍ，３Ｈ）、２．７１（ｍ，１Ｈ）、２．９５（ｓ，３Ｈ）、２．９５（ｓ，副異性体）、３．１９（ｍ，１Ｈ）、３．２４（ｓ，副異性体）、３．２６（ｓ，３Ｈ）、３．４５（ｍ，副異性体）、３．９９（ｄ，２Ｈ）、７．０７（ｄ，１Ｈ）、７．２６（ｍ，１Ｈ）、７．４５（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３１５．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１８
Ｎ−（５’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド

６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体１４、１．８５ｇ、５．２８ｍｍｏｌ）および２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（１．１５ｇ、９．５０ｍｍｏｌ）を２−Ｍｅ ＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解した。テトラエトキシチタン（２．２１ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を、週末にわたって８０℃に加熱した。反応混合物をｒ．ｔ．に冷却し、酢酸エチル（８５ｍＬ）で希釈した。激しく撹拌しながら水（３ｍＬ）を加え、次いで、混合物を１時間静置した。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させ、残留物を、ヘプタン中０〜７０％酢酸エチルの勾配を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物をＥｔＯＨから２回再結晶化して、表題化合物０．７５０ｇ（収率３１％）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４５４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体１９
６’−［（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン

ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中４Ｍ、４．１３ｍＬ、１６．５ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（５’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（中間体１８、７５０ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）溶液に加えた。白色沈殿物が直ちに形成し、得られた混濁した混合物を窒素雰囲気下で終夜撹拌した。混合物をＮａＨＣＯ_３（水溶液）で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機相を乾燥させ、濃縮して、６’−（（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン（６７２ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）を得た。イミン、トリメチルオルトホルメート（０．５５７ｍＬ、５．０８ｍｍｏｌ）、および２−プロパノール（５ｍＬ）をＭＷ管中に配置し、混合物を油浴中６０℃で加熱した。ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中２−オキソプロパンチオアミド（中間体１、３９７ｍｇ、３．８５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を終夜撹拌した。混合物を真空中で濃縮した。生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘプタン中０〜５０％ＥｔＯＡｃ）を用いて単離して、表題化合物１０６ｍｇ（収率１２％）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ４３５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体２０
Ｎ−（（１ｒ，４ｒ）−５’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド

（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−オン（中間体１７、１．４８ｇ、４．７１ｍｍｏｌ）および２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（１．０２７ｇ、８．４７ｍｍｏｌ）を２−Ｍｅ ＴＨＦ（１７ｍＬ）に溶解した。チタン（ＩＶ）エトキシド（１．９７ｍＬ、９．４１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を終夜、加熱還流した。２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（０．５６０ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）を加え、反応を６時間還流した。さらなる２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（０．５６０ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）およびチタン（ＩＶ）エトキシド（１ｍＬ、４．７９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を終夜、還流した。さらなる２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（０．５６０ｇ、４．６２ｍｍｏｌ）およびチタン（ＩＶ）エトキシド（１ｍＬ、４．７９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を終夜還流した（８０％変換）。撹拌しながら、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（２ｍＬ）を加えた。混合物を１時間静置した。珪藻土を通したろ過により有機相を回収し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濃縮した。生成物を、シリカゲルカラム上で精製して（ｎ−ヘプタン中０〜１００％ＥｔＯＡｃの勾配溶出）、（１ｓ，４ｓ）−異性体３０％を含有する表題化合物（１．１２ｇ、収率５７％）を得た。これを次の工程において用いた：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．２６（ｍ，１１Ｈ）、１．５０（ｍ，３Ｈ）、１．８７（ｍ，５Ｈ）、２．０６（ｍ，４Ｈ）、２．７３（ｍ，１Ｈ）、２．９６（ｍ，２Ｈ）、３．１７（ｍ，１Ｈ）、３．２６（ｓ，３Ｈ）、３．９５（ｄ，２Ｈ）、７．２２（ｍ，１Ｈ）、７．４０（ｍ，１Ｈ）、７．８３（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４１８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体２１
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン

ＨＣｌ（１，４−ジオキサン中４Ｍ）（６．７０ｍＬ、２６．８ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（（１ｒ，４ｒ）−５’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−３’（１’Ｈ）−イリデン）−２−メチルプロパン−２−スルフィナミド（中間体２０、１．１２ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）の無水１，４−ジオキサン（８ｍＬ）溶液に加えた。反応混合物を窒素雰囲気下、ｒ．ｔ．で９０分間撹拌した。ＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（１５ｍＬ）を反応混合物に加えた。相を分離し、有機層を濃縮して表題化合物（０．８４０ｇ、定量的収率）を得、これを次の工程において直接用いた：ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ３１４．１５［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体２２
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン

（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン］−１’（３’Ｈ）−イミン（中間体２１、０．８４ｇ、２．６８ｍｍｏｌ）および２−オキソプロパンチオアミド（中間体１、０．８２９ｇ、８．０４ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）に溶解し、得られた橙色溶液を終夜、Ｎ_２（ｇ）下６０℃で加熱した。さらなる２−オキソプロパンチオアミド（０．８２９ｇ、８．０４ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、これを６時間、６０℃に加熱した。反応混合物を濃縮し、溶媒を２−プロパノール（１２ｍＬ）に交換した。トリメチルオルトホルメート（０．８８０ｍＬ、８．０４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を約２日間、８０℃に加熱した（２０％変換）。混合物を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、次いで水で洗浄した。有機相を濃縮し、残留物をシリカゲルカラム上で精製して（ｎ−ヘプタン中０〜１００％ＥｔＯＡｃ）表題化合物（０．１４０ｇ、収率１３％）を得た。生成物は（１ｓ，４ｓ）−異性体１５％を含有しており、これを次の工程において用いた：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．０９（ｍ，１Ｈ）１．２４（ｍ，３Ｈ）１．４９（ｍ，２Ｈ）１．８５（ｍ，６Ｈ）２．０３（ｍ，２Ｈ）２．２６（ｓ，３Ｈ）２．６４（ｄｔ，１Ｈ）２．９７（ｍ，３Ｈ）３．２０（ｓ，３Ｈ）３．８５（ｍ，２Ｈ）６．３０（ｄ，１Ｈ）６．８７（ｄｄ，１Ｈ）７．２３（ｄ，１Ｈ）１２．２９（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３９９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例１）
（１ｒ，４ｒ）−４−メトキシ−５’’−メチル−６’−［（１−メチルシクロプロピル）メトキシ］−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］カルバメート（中間体１０、３１５ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、アリルパラジウム（ＩＩ）クロリド（５ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−３−メトキシ−６−メチルビフェニル−２−イル）ホスフィン（１９ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、およびＣｓ_２ＣＯ_３（３２３ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を試験管中に秤量した。試験管にキャップをした。トルエン（５ｍＬ）を加え、ヘッドスペースを排除し、アルゴンで再充填した。（１−メチルシクロプロピル）メタノール（１１４ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１６時間、９０℃に加熱した。冷却した反応混合物をろ過した。７Ｍメタノール性アンモニア（３ｍＬ、２１ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を６５時間、８０℃に加熱した。反応混合物を濃縮し、残留物をｐｒｅｐＨＰＬＣにより精製して表題生成物９３ｍｇを得た（収率３７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．３０〜０．３５（ｍ，２Ｈ）、０．４４〜０．４９（ｍ，２Ｈ）、０．９０（ｍ，１Ｈ）、１．０８〜１．２６（ｍ，５Ｈ）、１．３３〜１．４８（ｍ，３Ｈ）、１．８０（ｍ，２Ｈ）、２．１４（ｓ，３Ｈ）、２．８１〜２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．８８〜２．９８（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．５４〜３．６３（ｍ，２Ｈ）、６．０４（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｓ，２Ｈ）、６．６９（ｄｄ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３８２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例２）
（１ｒ，４ｒ）−６’−［（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

６’−［（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン（中間体１９、１０６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、マイクロ波バイアル中に配置した。アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ）（２ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加え、混合物を、ＭＷ反応器中９０℃で３０分間加熱した。反応混合物を濃縮し、アンモニア（ＭｅＯＨ中７Ｍ）（２ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をＭＷにより、３０分間１２０℃で加熱した。このサイクルを５回繰り返した。得られた混合物を濃縮し、逆相分取クロマトグラフィーにより、表題化合物（７ｍｇ、収率７％）を単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ｐｐｍ １．０７〜１．１７（ｍ，１Ｈ）１．２７〜１．４４（ｍ，３Ｈ）１．６３〜１．７６（ｍ，２Ｈ）１．９５〜２．０８（ｍ，２Ｈ）２．４３〜２．４６（ｍ，３Ｈ）２．４６〜２．５０（ｍ，１Ｈ）２．５３〜２．６１（ｍ，１Ｈ）２．６５（ｓ，２Ｈ）２．６７〜２．７３（ｍ，２Ｈ）３．０４〜３．１２（ｍ，２Ｈ）３．１３〜３．２０（ｍ，１Ｈ）３．３４（ｓ，３Ｈ）３．９２（ｔ，２Ｈ）６．３７（ｄ，１Ｈ）６．８６（ｄｄ，１Ｈ）７．２５（ｄ，１Ｈ）８．３３（ｓ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４１８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例３）
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドジカーボネート（中間体９、５２２ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−３−メトキシ−６−メチルビフェニル−２−イル）ホスフィン（２６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、アリルパラジウムクロリド二量体（７ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、およびＣｓ_２ＣＯ_３（４４３ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）を試験管中に秤量した。ヘッドスペースを排除し、アルゴンで再充填した。トルエン（３ｍＬ）およびシクロプロピルメタノール（０．１４３ｍＬ、１．８１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を２時間４０分、９０℃に加熱した。反応混合物をろ過し、７Ｍメタノール性アンモニア（３．９ｍＬ、２７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を１５時間、８５℃に加熱した。混合物を濃縮し、ＤＣＭ中０．２Ｍメタノール性アンモニア０〜５％の勾配溶出を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィー、引き続き分取クロマトグラフィーにより精製して表題生成物（２０２ｍｇ、収率６１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．２〜０．３（ｍ，２Ｈ）、０．５〜０．５（ｍ，２Ｈ）、０．９（ｔｄ，１Ｈ）、１．１〜１．３（ｍ，３Ｈ）、１．３〜１．５（ｍ，３Ｈ）、１．７〜１．９（ｍ，２Ｈ）、２．１（ｓ，３Ｈ）、２．８〜２．９（ｍ，１Ｈ）、２．９〜３．０（ｍ，２Ｈ）、３．２（ｓ，３Ｈ）、３．６（ｄ，２Ｈ）、６．０（ｄ，１Ｈ）、６．５（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．７（ｄｄ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３６８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例４）
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンの異性体の分離
３つの部分に分割した、（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（実施例３、１４７ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈ；２０^＊２５０ｍｍ；５μｍカラムを有し、移動相が２５％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡを含有する）および流速５０ｍＬ／分の７５％ＣＯ_２からなるＳＦＣ ＢｅｒｇｅｒＭｕｌｔｉｇｒａｍ ＩＩシステムを用いて精製して以下を得た：

保持時間１．５８分の異性体１ （１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（６６ｍｇ、収率４５％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．２３〜０．２９（ｍ，２Ｈ）、０．４７〜０．５４（ｍ，２Ｈ）、０．９０（ｔｄ，１Ｈ）、１．０７〜１．２６（ｍ，３Ｈ）、１．３４〜１．４７（ｍ，３Ｈ）、１．８０（ｄ，２Ｈ）、２．１４（ｓ，３Ｈ）、２．８１〜２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．８９〜２．９８（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．６４（ｄ，２Ｈ）、６．０３（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｓ，２Ｈ）、６．７０（ｄｄ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３６８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

および保持時間２．２４分の異性体２ （１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（６５ｍｇ、収率４４％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．２６（ｍ，２Ｈ）、０．５１（ｍ，２Ｈ）、０．９０（ｔｄ，１Ｈ）、１．０７〜１．２６（ｍ，３Ｈ）、１．３４〜１．４８（ｍ，３Ｈ）、１．８０（ｍ，２Ｈ）、２．１４（ｓ，３Ｈ）、２．８０〜２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．８８〜２．９８（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．６４（ｄ，２Ｈ）、６．０４（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｓ，２Ｈ）、６．７０（ｄｄ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３６８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例５）
（１ｒ，４ｒ）−６’−［（２，２−ジフルオロシクロプロピル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドジカーボネート（中間体９、２００ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、および（２，２−ジフルオロシクロプロピル）メタノール（７５ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）から出発して、実施例３に対して記載した手順を用いて、表題化合物を製造した。生成物を、シリカカラム上のクロマトグラフィー（溶離液 ０〜１００％ＤＣＭ中（ＭｅＯＨ中７ＭＮＨ_３）／ＤＣＭ１：９）、引き続き分取ＨＰＬＣにより精製して表題化合物（２９ｍｇ、収率２１％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９０（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、１．１８（ｍ，２Ｈ）、１．４２（ｍ，４Ｈ）、１．６６（ｍ，１Ｈ）、１．８０（ｄ，２Ｈ）、１．８０（ｍ，０Ｈ）、２．１１（ｍ，１Ｈ）、２．１３（ｓ，３Ｈ）、２．８５（ｄ，１Ｈ）、２．９３（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．７９（ｄ，１Ｈ）、４．００（ｍ，１Ｈ）、６．０７（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．７４（ｄｄ，１Ｈ）、７．１６（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ４０４．０９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例６）
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’（３’’Ｈ）−チオン（中間体２２、１４０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）から出発して、実施例２に記載した手順を用いて、表題化合物を製造した。生成物をシリカゲルカラム上で（０〜１００％ＤＣＭ中（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ１：９中７ＭＮＨ_３）の勾配溶出）、引き続き分取クロマトグラフィーにより精製して表題化合物（４４ｍｇ、収率２８％）を得た：^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９０（ｔ，１Ｈ）１．１７（ｍ，２Ｈ）１．４１（ｍ，３Ｈ）１．８２（ｍ，９Ｈ）２．０１（ｍ，２Ｈ）２．１４（ｓ，３Ｈ）２．６２（ｍ，１Ｈ）２．９０（ｍ，３Ｈ）３．１８（ｓ，３Ｈ）３．７８（ｍ，２Ｈ）６．０５（ｓ，１Ｈ）６．４６（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）６．７０（ｄ，１Ｈ）７．１４（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ ３８２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例７）
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミンの異性体の分離
（１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（実施例６、３５ｍｇ）の異性体を、ＯＤ−Ｈ；２０^＊２５０ｍｍ；５μｍカラムを有し、移動相が３０％ＭｅＯＨ（０．１％ＤＥＡを含有する）および流速５０ｍＬ／分の７０％ＣＯ_２からなるＳＦＣ ＢｅｒｇｅｒＭｕｌｔｉｇｒａｍ ＩＩシステムを用いて分離して以下を得た：

保持時間２．１分の異性体１：（１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（１２ｍｇ、収率３４％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９０（ｄ，１Ｈ）、１．１４（ｄ，２Ｈ）、１．４１（ｍ，３Ｈ）、１．８２（ｍ，６Ｈ）、２．０１（ｍ，２Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．９０（ｍ，３Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｄｄ，２Ｈ）、６．０５（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、６．７０（ｄｄ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ
３８２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

および、保持時間５．０分の異性体２：（１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン（１２ｍｇ、収率３４％）：

^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９０（ｍ，１Ｈ）、１．１８（ｍ，２Ｈ）、１．４３（ｍ，３Ｈ）、１．８２（ｍ，６Ｈ）、２．０１（ｍ，２Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．８９（ｍ，３Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．７８（ｄｄ，２Ｈ）、６．０５（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｓ，２Ｈ）、６．７０（ｄｄ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，１Ｈ）、ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ ３８２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

（実施例８）
（１ｒ，４ｒ）−６’−（２−シクロプロピルエトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン

ジ−ｔｅｒｔ−ブチル［（１ｒ，４ｒ）−６’−ブロモ−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−イル］イミドジカーボネート（中間体９、２１０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２’，４’，６’−トリイソプロピル−３−メトキシ−６−メチルビフェニル−２−イル）ホスフィン（１０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）、アリルパラジウムクロリド二量体（２．７ｍｇ、７．３μｍｏｌ）、炭酸セシウム（１７８ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、および２−シクロプロピルエタノール（６３ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の混合物上のヘッドスペースを排除し、アルゴンで再充填した。トルエン（１．３ｍＬ）を加え、混合物を３日間、９０℃で加熱した。ｒ．ｔ．でさらに２日後、反応混合物を、シリンジフィルタを通してろ過した。フィルタをメタノール中７Ｍアンモニア（１．５６ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）で洗浄した。さらなるメタノール中７Ｍアンモニア（１．５６ｍＬ、１０．９ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を２４時間、８５℃で加熱した。ｒ．ｔ．に冷却した後、混合物を濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃと２Ｍクエン酸水溶液との間で分配した。相を分離し、有機層を２Ｍクエン酸水溶液で２回抽出した。有機層を廃棄した。クエン酸水溶液相をＮａＯＨ（５０％水溶液）で塩基性化し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機相を活性炭で処理し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、珪藻土を通してろ過し、濃縮した。ＣＨＣｌ_３／ＭｅＯＨ（２０：１〜１５：１〜１０：１）の勾配を用いたフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（５６ｍｇ、収率４０％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．０２〜０．１２（ｍ，２Ｈ）、０．３４〜０．４５（ｍ，２Ｈ）、０．７２〜０．８４（ｍ，１Ｈ）、０．９０（ｔｄ，１Ｈ）、１．０７〜１．２７（ｍ，２Ｈ）、１．３５〜１．４８（ｍ，３Ｈ）、１．５３（ｑ，２Ｈ）、１．８０（ｄ，２Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、２．８１〜２．８８（ｍ，１Ｈ）、２．８８〜２．９８（ｍ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）、３．８０〜３．９１（ｍ，２Ｈ）、６．０６（ｄ，１Ｈ）、６．５０（ｓ，２Ｈ）、６．７１（ｄｄ，１Ｈ）、７．１５（ｄ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｚ ３８２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

生物学的アッセイ
化合物の活性のレベルを、以下の方法を用いて試験した：

ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイ
ＴＲ−ＦＲＥＴにおいて用いるβ−セクレターゼ酵素を、以下の通りに製造した：
ヒトβ−セクレターゼの可溶性部分（アミノ酸１〜アミノ酸４６０）に対するｃＤＮＡを、哺乳動物発現ベクターＡＳＰ２−Ｆｃ１０−１−ＩＲＥＳ−ＧＦＰ−ｎｅｏＫを用いてクローニングした。遺伝子をＩｇＧ１（アフィニティタグ）のＦｃドメインに融合させ、ＨＥＫ２９３細胞中に安定にクローニングした。精製したｓＢＡＣＥ−Ｆｃを、５０ｍＭグリシンｐＨ２．５中、−８０℃で貯蔵し、１Ｍ ＴｒｉｓでｐＨ７．４に調整し、純度は４０％であった。

酵素（切断型）を６μｇ／ｍＬ（保存液１．３ｍｇ／ｍＬ）に希釈し、ＴｒｕＰｏｉｎｔ ＢＡＣＥ１基質を反応バッファー（酢酸ナトリウム、ｃｈａｐｓ、トリトンｘ−１００、ＥＤＴＡ ｐＨ４．５）中２００ｎＭ（保存液１２０μＭ）に希釈した。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ最終濃度５％）中の酵素および化合物を混合し、ＲＴで１０分間プレインキュベートした。次いで、基質を加え、反応をＲＴで１５分間インキュベートした。０．３５倍容の停止溶液（酢酸ナトリウム、ｐＨ９）を加えて反応を停止させた。生成物の蛍光を、励起波長３４０〜４８５ｎｍおよび発光波長５９０〜６１５ｎｍのＶｉｃｔｏｒ ＩＩプレートリーダー上で測定した。酵素の最終濃度は２．７μｇ／ｍｌであり；基質の最終濃度は１００ｎＭであった（Ｋｍはおよそ２５０ｎＭ）。ジメチルスルホキシド対照は、試験化合物の代わりに、１００％の活性レベルを規定し、０％の活性は酵素を欠くウエルにより（反応バッファーで置き換えたもの）、または飽和投与量の既知の阻害物質である、２−アミノ−６−［３−（３−メトキシフェニル）フェニル］−３，６−ジメチル−５Ｈ−ピリミジン−４−オンにより規定された。対照の阻害物質をやはり投与量反応アッセイにおいて用い、ＩＣ５０はおよそ１５０ｎＭであった。

希釈ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイ
高親和性を有する化合物を、希釈ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイにおいてさらに試験し、条件は上記ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイに対して記載した通りであったが、酵素は５０倍少なく、ｒ．ｔ．で暗所の、６．５時間の長い反応時間であった。

ｓＡＰＰβ放出アッセイ
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を、Ｇｌｕｔａｍａｘ、１０％ＦＣＳ、および１％非必須アミノ酸を含む、ＤＭＥＭ／Ｆ−１２中で培養し、冷凍保存し、１バイアルあたり７．５〜９．５×１０^６細胞の濃度で、−１４０℃で貯蔵した。細胞を解凍し、３８４ウエルの組織培養物処理したプレートに、Ｇｌｕｔａｍａｘ、１０％ＦＣＳ、および１％非必須アミノ酸を含むＤＭＥＭ／Ｆ−１２中１００００細胞／ウエル付近の濃度で、細胞懸濁液１００μＬ／ウエルを播種した。次いで、細胞プレートを３７℃、５％ＣＯ_２で７〜２４時間インキュベートした。細胞培地を除去し、引き続き、Ｇｌｕｔａｍａｘ、１０％ＦＣＳ、１％非必須アミノ酸、および１％ＰｅＳｔを含むＤＭＥＭ／Ｆ−１２中で希釈した化合物３０μＬを、ＤＭＳＯの最終濃度が１％になるまで加えた。化合物を細胞と一緒に１７時間（終夜）、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。メソスケールディスカバリー（Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）（ＭＳＤ）プレートを、ｓＡＰＰβ放出の検出に用いた。ＭＳＤ ｓＡＰＰβプレートを、Ｔｒｉｓ洗浄バッファー（４０μＬ／ウエル）中１％ＢＳＡ中で、ｒ．ｔ．の振盪機上１時間、ブロックし、Ｔｒｉｓ洗浄バッファー（４０μＬ／ウエル）中で１回洗浄した。予めブロックし、洗浄したＭＳＤ ｓＡＰＰβマイクロプレートに培地２０μＬを移し、細胞プレートをＡＴＰアッセイにおいてさらに用いて、細胞毒性を測定した。ＭＳＤプレートを、ｒ．ｔ．で２時間振盪しながらインキュベートし、培地を廃棄した。検出抗体１０μＬを１ウエルあたり（１ｎＭ）加え、引き続きｒ．ｔ．で２時間、振盪しながらインキュベートし、次いで廃棄した。１ウエルあたり４０μＬのリードバッファー（Ｒｅａｄ Ｂｕｆｆｅｒ）を加え、プレートをＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒにおいて読み取った。

ＡＴＰアッセイ
ｓＡＰＰβ放出アッセイにおいて指摘した通り、培地２０μＬをｓＡＰＰβ検出用細胞プレートから移した後、プレートを用いて、全細胞のＡＴＰを測定するＣａｍｂｒｅｘ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅからのＶｉａＬｉｇｈｔＴＭ Ｐｌｕｓ細胞増殖／細胞毒性キットを用いて、細胞毒性を分析した。アッセイを、製造元のプロトコールにしたがって行った。簡潔に述べると、１ウエルあたり細胞溶解試薬１０μＬを加えた。プレートをｒ．ｔ．で１０分間インキュベートした。再構成したＶｉａＬｉｇｈｔＴＭ ＰｌｕｓＡＴＰ試薬２５μＬを加えた２分後に発光を測定した。毒性閾値（Ｔｏｘ ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ）は、対照の７５％未満のシグナルである。

結果
本発明の化合物に対する典型的なＩＣ_５０値は、約０．１ｎＭから約１００，０００ｎＭの範囲にある。特定の例の化合物に対する生物学的データを、以下の表１に示す。

Claims (11)

1. 遊離塩基または薬学的に許容されるその塩としての式（Ｉ）の化合物
   

   

   ［式中、
   Ａは、−Ｏ−または−ＣＨ_２−であり；
   ｎは、０または１であり；
   Ｒ^１は、Ｃ_１〜６アルキルまたはＣ_１〜６ハロアルキルであり；
   Ｒ^２は、Ｃ_１〜６アルキル、またはＣ_１〜６ハロアルキルであり、前記Ｃ_１〜６アルキルまたはＣ_１〜６ハロアルキルは、Ｃ_３〜６シクロアルキルまたはＣ_３〜６ハロシクロアルキルから独立に選択される１個から３個の基で置換されており；
   Ｒ^５およびＲ^６は、独立に、水素、ヘテロシクリル、Ｃ_３〜６シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、もしくはＣ_１〜６アルキルであり、前記ヘテロシクリル、Ｃ_３〜６シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、もしくはＣ_１〜６アルキルは、ハロゲン、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、シアノ、もしくはＯＲ^９から独立に選択される１個もしくは２個の置換基で場合により置換されており；
   またはＲ^５およびＲ^６は、これらが結合している炭素と一緒になって３〜１４員シクロアルキルもしくはヘテロシクリル単環式環、もしくは９〜１４員二環式シクロアルキルもしくはヘテロシクリル環である環Ｂを形成し；環Ｂは、オキソ、ハロゲン、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、シアノ、またはＯＲ^７から独立に選択される１個または２個の置換基により場合により置換されており；
   Ｒ^７は、独立に、水素、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６ハロアルキル、またはＣ_０〜６アルキルＣ_３〜６シクロアルキルであり；
   Ｒ^８は、水素、ハロゲン、またはメチルである］。
2. （１ｒ，４ｒ）−４−メトキシ−５’’−メチル−６’−［（１−メチルシクロプロピル）メトキシ］−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，４ｒ）−６’−［（３，３−ジフルオロシクロブチル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロプロピルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，４ｒ）−６’−［（２，２−ジフルオロシクロプロピル）メトキシ］−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，４ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，１’Ｒ，４Ｒ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン；
   （１ｒ，１’Ｓ，４Ｓ）−６’−（シクロブチルメトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン、および
   （１ｒ，４ｒ）−６’−（２−シクロプロピルエトキシ）−４−メトキシ−５’’−メチル−３’Ｈ−ジスピロ［シクロヘキサン−１，２’−インデン−１’，２’’−イミダゾール］−４’’−アミン
   からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物、または任意の前述の化合物の薬学的に許容される塩。
3. 有効成分として治療有効量の請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、担体、または希釈剤と共に含む医薬組成物。
4. 医薬として用いるための、請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
5. Ａβ関連の病態を処置または防止するための、請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
6. 前記Ａβ関連の病態は、ダウン症候群、β−アミロイド血管障害、脳アミロイド血管障害、遺伝性脳出血、認知障害に関連する障害、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、アルツハイマー病、物忘れ、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺、または皮質基底変性症である、Ａβ関連の病態を処置または防止するための、請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
7. アルツハイマー病を処置または防止するための、請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩。
8. それを必要とする患者においてＡβ関連の病態を処置または防止する方法であって、前記患者に治療有効量の請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む前記方法。
9. 前記Ａβ関連の病態は、ダウン症候群、β−アミロイド血管障害、脳アミロイド血管障害、遺伝性脳出血、認知障害に関連する障害、ＭＣＩ（「軽度認知障害」）、アルツハイマー病、物忘れ、アルツハイマー病に関連する注意欠陥症状、アルツハイマー病に関連する神経変性、混合血管起源の認知症、変性起源の認知症、初老期認知症、老年認知症、パーキンソン病に関連する認知症、進行性核上性麻痺、または皮質基底変性症である、請求項７に記載の方法。
10. それを必要とする患者においてアルツハイマー病を処置または防止する方法であって、前記患者に治療有効量の請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与することを含む前記方法。
11. それを必要とする患者においてＡβ関連の病態を処置または防止する方法であって、前記患者に治療有効量の請求項１または２に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩、および認知増強剤、記憶増強剤、またはコリンエステラーゼ阻害剤の少なくとも１つを投与することを含む前記方法。