JP2015144614A - 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 - Google Patents
二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015144614A JP2015144614A JP2015080051A JP2015080051A JP2015144614A JP 2015144614 A JP2015144614 A JP 2015144614A JP 2015080051 A JP2015080051 A JP 2015080051A JP 2015080051 A JP2015080051 A JP 2015080051A JP 2015144614 A JP2015144614 A JP 2015144614A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fermentation culture
- streptococcus pneumoniae
- molecular weight
- capsular polysaccharide
- polysaccharide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 title claims abstract description 88
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 title claims abstract description 88
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 title claims abstract description 86
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 title claims abstract description 73
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 title claims abstract description 72
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 61
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 4
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 title description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 title description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 100
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 100
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 14
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 9
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 32
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 26
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims description 23
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims description 18
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 6
- 239000002775 capsule Substances 0.000 abstract description 4
- 201000005010 Streptococcus pneumonia Diseases 0.000 abstract 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 66
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 18
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 5
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- -1 19F polysaccharides Chemical class 0.000 description 4
- BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N N-Lauroylsarcosine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)N(C)CC(O)=O BACYUWVYYTXETD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 4
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M lithium;dodecyl sulfate Chemical compound [Li+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 238000011020 pilot scale process Methods 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 1
- KVGOXGQSTGQXDD-UHFFFAOYSA-N 1-decane-sulfonic-acid Chemical group CCCCCCCCCCS(O)(=O)=O KVGOXGQSTGQXDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010035713 Glycodeoxycholic Acid Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- IFQSXNOEEPCSLW-DKWTVANSSA-N L-cysteine hydrochloride Chemical compound Cl.SC[C@H](N)C(O)=O IFQSXNOEEPCSLW-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N bis-tris Chemical compound OCCN(CCO)C(CO)(CO)CO OWMVSZAMULFTJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 229940009025 chenodeoxycholate Drugs 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N chenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-BSWAIDMHSA-N 0.000 description 1
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- DGABKXLVXPYZII-SIBKNCMHSA-M hyodeoxycholate Chemical compound C([C@H]1[C@@H](O)C2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)CC1 DGABKXLVXPYZII-SIBKNCMHSA-M 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 101150082581 lytA gene Proteins 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000013365 molecular weight analysis method Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 229940124733 pneumococcal vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- WDFRNBJHDMUMBL-OICFXQLMSA-M sodium;(4r)-4-[(3r,5s,7r,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)CC1 WDFRNBJHDMUMBL-OICFXQLMSA-M 0.000 description 1
- ADWNFGORSPBALY-UHFFFAOYSA-M sodium;2-[dodecyl(methyl)amino]acetate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCN(C)CC([O-])=O ADWNFGORSPBALY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- AIDBEARHLBRLMO-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecyl sulfate;2-morpholin-4-ylethanesulfonic acid Chemical compound [Na+].OS(=O)(=O)CCN1CCOCC1.CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O AIDBEARHLBRLMO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000013595 supernatant sample Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- BHTRKEVKTKCXOH-BJLOMENOSA-N taurochenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 BHTRKEVKTKCXOH-BJLOMENOSA-N 0.000 description 1
- AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N taurodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
- A61K39/092—Streptococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L2203/00—Applications
- C08L2203/02—Applications for biomedical use
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
【解決手段】CO2を、糖の繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含有する莢膜多糖血清型を生成する肺炎連鎖球菌細菌細胞の発酵培養物に供給する。糖の繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含有する例示的な肺炎連鎖球菌血清型には、血清型6A、6B、19A、および19Fがある。発酵培養物にCO2を供給するステップには、発酵培養物に重炭酸イオンを加えるステップ、発酵培養物に炭酸イオンを加えるステップ、発酵培養物に重炭酸塩と炭酸イオンの混合物を加えるステップ、及び発酵培養物をCO2で上部に通気するステップが含まれる培養方法。
【選択図】なし
Description
多糖分子量に対する二酸化炭素供給効果
発酵
3LのBraun Biostat B発酵槽(B. Braun Biotech、米国ペンシルベニア州Allentown)で実験室での実験を行った。発酵槽にHYS培地(20g/L HySoy、2.5g/L NaCl、0.5g/L KH2PO4、0.013g/L CaCl2・2H2O、0.15g/L L−システインHCl)1.8Lを充填した。次いで発酵槽を、121℃で60分間加圧滅菌した。冷却した後、各ユニットに50%グルコース+1%硫酸マグネシウム(w/v)(DMS)溶液40または60mL/Lを加えた。必要に応じて、接種の前に重炭酸ナトリウムを加えた。
Shimadzu(米国メリーランド州Columbia)UV−1601(2nm帯域幅)またはSpectronics(米国ニューヨーク州Westbury)Genesys 5分光光度計(5nm帯域幅)を用いて600nmで試料の吸光度を読み取ることによって、発酵ブロスの細胞密度を決定した。ユニットは、試料の要求される希釈度に合うように脱イオン(DI)水で希釈したHYS培地で対照をとった。吸光度の数値を、十分に分光光度計の直線領域の範囲内である0.4未満に維持するために試料を希釈した。
細胞を遠心分離機で分離し、その上清をそのまま、もしくはDI水で3倍希釈することによって、グルコースレベルを決定した。試料をNova Biomedical(米国マサチューセッツ州Waltham)BioProfile 400で分析した。
試料を最終発酵読み取り値で採取し、0.13%(w/v)の濃度まで12%デオキシコール酸ナトリウム(DOC)で処理し、穏やかに撹拌した。それらを5℃で8〜24時間保持し、次いで50%酢酸でpHを5.0に調節して、大部分のDOCおよびタンパク質を沈殿させた。5℃でのさらに12〜24時間の保持間隔の後、試料を遠心分離した(14000rpm、Sorvall(Thermo Fisher Scientific、米国マサチューセッツ州Waltham)SS34ローター、15℃で10分)。上清のpHを6.0に調節した。次いで、上清を0.45μm Pall(米国ニューヨーク州East Hills)HT Tuffryn膜シリンジフィルター(低タンパク質結合)に通してろ過した。ろ過した生成物を、当技術分野でよく知られている標準的な方法を用いて高速サイズ排除クロマトグラフィー(HPLC−SEC)によって分析した(例えば、Aquilar、M.「HPLC of Peptides and Proteins: Methods and Protocols」 Totowa、NJ: Humana Press(2004)を参照のこと)。
タンパク質レベルを、当技術分野でよく知られているドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)法によって分析した(例えば、Walker、J.M.「The Protein Protocols Handbook」 Totowa、NJ: Humana Press(2002)を参照のこと)。上記で調製したろ過した細胞溶解物(上清)を分注して65μL/チューブでマイクロチューブ中に入れた。還元剤(10μLジチオスレイトール(DTT))およびNuPAGE(登録商標)(Invitrogen、米国カリフォルニア州Carlsbad)4倍ドデシル硫酸リチウム(LDS)試料バッファー(25μL)の添加を各試料に行った。試料をボルテックスにかけて10分間加熱してからNuPAGE(登録商標)4〜12%Bis−Tris12ウェルゲルに10μL/レーンを導入した。ゲルをNuPAGE(登録商標)MES−SDSバッファー中150Vで約60分間に限定して泳動し、続いてZoion染色プロトコル(Zoion Biotech、米国マサチューセッツ州Worcester)を用いて染色した。LabWorks(商標)(UVP Inc.)V.3ソフトウェアを備えたUVP Imager(UVP Inc.、米国カリフォルニア州Upland)を用いて試料分析を行って、目的とする特定のタンパク質バンドのおおよその濃度を得た。ウシ血清アルブミン(BSA)フラクションVを使用してタンパク質の標準曲線を作って、試料(溶解した細胞ブロス中)のおおよそのタンパク質値を計算した。
発酵試料1〜2リットルを、200rpmで撹拌しながら12%ナトリウムDOCで処理して0.13%(w/v)の濃度にした。試料を5℃または20℃のいずれかで8〜24時間保持した。次いで、50%酢酸で試料のpHを5.0または6.6に調節して、大部分のDOCおよびタンパク質を沈殿させた。5℃での12〜24時間の別の保持間隔の後、試料を遠心分離した(11000rpm、Sorvall(Thermo Fisher Scientific、米国マサチューセッツ州Waltham)SLA−3000ローター、10℃で15分)。次いで、3N NaOHで上清試料のpHを6.0に調節し、0.45μm Millipore(米国マサチューセッツ州Billerica)MP60フィルターを用いてろ過した。次いで、試料を、100K分子量カットオフ(MWCO)ダイアフィルトレーション(5倍濃度、続いてDI水を用いた7.5倍ダイアフィルトレーション)、0.1%HB沈殿、および炭素ろ過で構成される改変精製プロセスにかけた。次いで、精製した物質を多角度光散乱(MALLS)分析にかけた。
これまでの試験に基づいて、塩基滴定液としてNa2CO3からNaOHに切り換えることによって発酵プロセスを最適化した。NaOHの使用により、回収pHを5.0に下げることが可能になり、顕著なタンパク質沈殿が得られた。Na2CO3は、CO2を低pH(<6.6)で放出し、発泡体の形成をもたらす。19A型多糖およびタンパク質レベルに対する塩基滴定液の影響を調べた。3L発酵槽2台を設置し、1台の発酵槽は、塩基供給として20%Na2CO3溶液(w/v)を用いて元のプロセスの対照とした。他の発酵槽は、塩基供給として3N NaOHを使用した。
3Lスケールでの一連の発酵を行って、塩基滴定液、HySoy濃度およびpH保持ステップが血清型19A分子量に影響を及ぼしたかどうかを決定した。改変精製プロセスとその後のMALLSアッセイを用いて分子量決定を行った。結果を表1に示す。血清型6Aでは、塩基滴定液だけを評価した。結果を表2に示す。
第1の試験(実験L29331−122および−139)では、DOC保持ステップ後にpH5.0保持ステップと共に異なるレベルの初期重炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムと炭酸ナトリウムの塩基ブレンドを使用した。初期の重炭酸塩添加は、10〜50mMの範囲であり、塩基滴定液用の3N水酸化ナトリウムに加えた炭酸ナトリウムは、0.2〜1.8Mの範囲であった。1つの実験は、50mM初期重炭酸塩を含有しており、塩基滴定液としてNaOHを使用した。これらの発酵の終わりの炭酸塩レベルは、14〜111mMの範囲であった。血清型19A分子量は、520〜713kDaの範囲であった。実験パラメーターおよび結果を表3に示す。
塩基ブレンドプロセス(0.7M Na2CO3/3N NaOH)と炭酸塩滴定液プロセス(20%Na2CO3溶液、w/v)を比較するために実験を行った。結果(表5)は、炭酸塩滴定液プロセスの分子量が、塩基ブレンドプロセス(561−671kDa)の分子量よりも高く、より安定(778、781kDa)していたことを立証した。多糖収量も、Na2CO3プロセスでより高かった。
種々の塩基滴定液を用いたいくつかの血清型19Aパイロットスケール(100L)実験を行った。完全な精製プロセスとその後のMALLSアッセイを用いて分子量決定を行い、最終精製バッチのものを報告している。結果を表6に示す。
3Lスケールでの一連の発酵を行って、塩基滴定液および大気通気が分子量に影響を及ぼしたかどうかを決定した。改変精製プロセスとその後のMALLSアッセイを用いて分子量決定を行った。結果を表7に示す。
Claims (15)
- 高分子量の単離肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖を含有する溶液を生成するための方法であって、前記多糖が繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含み、a)繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含む莢膜多糖を生成する肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)細菌細胞の発酵培養物を調製するステップと、b)前記発酵培養物にCO2を供給するステップであって、該ステップが発酵培養物の上部にCO2を通気するステップを含むステップと、c)前記発酵培養物中で細菌細胞を溶解するステップと、d)前記発酵培養物から肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖を単離するステップとを含む、方法。
- 前記肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖が血清型19Aである、請求項1に記載の方法。
- 前記肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖が血清型6Aである、請求項1に記載の方法。
- 前記肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖が血清型19Fである、請求項1に記載の方法。
- 前記肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖が血清型6Bである、請求項1に記載の方法。
- 前記発酵培養物にCO2を供給するステップが、発酵培養物に重炭酸イオン(HCO3 −)を加えるステップを含む、請求項1に記載の方法。
- 発酵培養物にHCO3 −を加えるステップが、NaHCO3を加えるステップを含む、請求項6に記載の方法。
- 前記発酵培養物にCO2を供給するステップが、発酵培養物に炭酸イオン(CO3 2−)を加えるステップを含む、請求項1に記載の方法。
- 発酵培養物にCO3 2−を加えるステップが、Na2CO3を加えるステップを含む、請求項8に記載の方法。
- さらに前記発酵培養物のpHが6.0〜6.6である、請求項9に記載の方法。
- 前記発酵培養物にCO2を供給するステップが、NaHCO3の第1の添加およびNa2CO3の第2の添加を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記発酵培養物中で肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)を溶解するステップが、前記発酵培養物にデオキシコール酸ナトリウムを加えるステップを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記単離肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖の分子量が、少なくとも480kDaである、請求項1に記載の方法。
- 高分子量の単離肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖を含有する溶液であって、前記多糖が繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含み、請求項1の方法によって生成される、溶液。
- 高分子量の単離肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖を含有する溶液であって、前記多糖が繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含み、a)繰返し単位の間にホスホジエステル結合を含む莢膜多糖を生成する肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)細菌細胞の発酵培養物を調製するステップと、b)前記発酵培養物にCO2を供給するステップであって、該ステップがNaHCO3の第1の添加およびNa2CO3の第2の添加を含むステップと、c)前記発酵培養物中で細菌細胞を溶解するステップと、d)前記発酵培養物から肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)莢膜多糖を単離するステップとを含む方法によって作成される、溶液。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US13857008P | 2008-12-18 | 2008-12-18 | |
US61/138,570 | 2008-12-18 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011542424A Division JP5789514B2 (ja) | 2008-12-18 | 2009-12-17 | 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015144614A true JP2015144614A (ja) | 2015-08-13 |
JP6095715B2 JP6095715B2 (ja) | 2017-03-15 |
Family
ID=41666441
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011542424A Active JP5789514B2 (ja) | 2008-12-18 | 2009-12-17 | 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 |
JP2015080051A Active JP6095715B2 (ja) | 2008-12-18 | 2015-04-09 | 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011542424A Active JP5789514B2 (ja) | 2008-12-18 | 2009-12-17 | 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US20100160622A1 (ja) |
EP (1) | EP2385981B1 (ja) |
JP (2) | JP5789514B2 (ja) |
KR (1) | KR101307703B1 (ja) |
CN (1) | CN102257127B (ja) |
AU (1) | AU2009335824B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0923165A8 (ja) |
CA (1) | CA2743708C (ja) |
DK (1) | DK2385981T3 (ja) |
ES (1) | ES2749952T3 (ja) |
HK (1) | HK1163737A1 (ja) |
HU (1) | HUE046859T2 (ja) |
IL (1) | IL213215A (ja) |
MX (1) | MX346071B (ja) |
PL (1) | PL2385981T3 (ja) |
PT (1) | PT2385981T (ja) |
RU (1) | RU2524436C2 (ja) |
SI (1) | SI2385981T1 (ja) |
WO (1) | WO2010080484A1 (ja) |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3020411A1 (en) | 2005-12-22 | 2016-05-18 | GlaxoSmithKline Biologicals s.a. | Vaccine |
MX2011006432A (es) * | 2008-12-18 | 2011-09-29 | Wyeth Llc | Metodo para controlar el peso molecular del polisacarido streptococcus pneumoniae serotipo 19a. |
WO2010125480A1 (en) | 2009-04-30 | 2010-11-04 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | Pneumococcal vaccine and uses thereof |
WO2011151841A1 (en) * | 2010-05-31 | 2011-12-08 | Panacea Biotec Limited | Fermentation process for streptococcus pneumoniae |
KR20190103256A (ko) | 2016-12-30 | 2019-09-04 | 수트로박스, 인코포레이티드 | 비자연 아미노산을 갖는 폴리펩타이드-항원 접합체 |
US11951165B2 (en) | 2016-12-30 | 2024-04-09 | Vaxcyte, Inc. | Conjugated vaccine carrier proteins |
US11197921B2 (en) | 2017-01-31 | 2021-12-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Methods for making polysaccharide-protein conjugates |
EP3589314A4 (en) | 2017-02-24 | 2021-04-21 | Merck Sharp & Dohme Corp. | INCREASED IMMUNOGENICITY OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE POLYSACCHARIDE PROTEIN CONJUGATES |
WO2019050816A1 (en) | 2017-09-07 | 2019-03-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | ANTI-PNEUMOCOCCAL POLYSACCHARIDES AND THEIR USE IN IMMUNOGENIC CONJUGATES POLYSACCHARIDE-PROTEIN CARRIER |
CA3074703A1 (en) | 2017-09-07 | 2019-03-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Pneumococcal polysaccharides and their use in immunogenic polysaccharide-carrier protein conjugates |
CN107746825A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-03-02 | 成都欧林生物科技股份有限公司 | 利于肺炎链球菌快速增殖的培养基 |
CN108004160A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-05-08 | 成都欧林生物科技股份有限公司 | 含有中药材的菌种培养基的制备方法 |
CN117982633A (zh) | 2017-12-06 | 2024-05-07 | 默沙东有限责任公司 | 包含肺炎链球菌多糖蛋白缀合物的组合物及其使用方法 |
WO2019212844A1 (en) | 2018-04-30 | 2019-11-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Methods for providing a homogenous solution of lyophilized mutant diptheria toxin in dimethylsulfoxide |
EP3787673A4 (en) | 2018-04-30 | 2022-04-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | METHODS FOR PRODUCING CAPSULAR CARRIER PROTEIN-POLYSACCHARIDE CONJUGATES OF STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE |
CN113423815A (zh) * | 2018-12-06 | 2021-09-21 | 创赏有限公司 | 非动物来源培养基上的细菌生长 |
SG11202106541WA (en) | 2018-12-19 | 2021-07-29 | Merck Sharp & Dohme | Compositions comprising streptococcus pneumoniae polysaccharide-protein conjugates and methods of use thereof |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05148157A (ja) * | 1991-01-28 | 1993-06-15 | Merck & Co Inc | 肺炎連鎖球菌からの多糖抗原 |
JP2003531584A (ja) * | 2000-03-16 | 2003-10-28 | ザ・チルドレンズ・ホスピタル・オブ・フィラデルフィア | ニューモコッカス莢膜多糖類の調整的製造 |
JP2008535838A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-09-04 | ワイス | 多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物 |
JP2008535490A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-09-04 | ワイス | pH操作によるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖からの混入物の分離 |
WO2008118752A2 (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-02 | Wyeth | Shortened purification process for the production of capsular streptococcus pneumoniae polysaccharides |
JP2009527222A (ja) * | 2005-12-28 | 2009-07-30 | ザ ユーエイビー リサーチ ファウンデイション | 肺炎球菌血清型 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4115058A (en) * | 1977-10-03 | 1978-09-19 | Fmc Corporation | Aromatic sulfonic anhydrides as peroxygen activators |
CA1115210A (en) | 1977-11-28 | 1981-12-29 | Dennis J. Carlo | Pneumococcal vaccine |
US4221906A (en) * | 1979-03-19 | 1980-09-09 | American Cyanamid Company | Stabilization of pneumococcal polysaccharides |
US4242501A (en) | 1979-08-08 | 1980-12-30 | American Cyanamid Company | Purification of pneumococcal capsular polysaccharides |
FR2495939B1 (fr) | 1980-12-11 | 1985-10-11 | Merieux Inst | Procede de purification de polyosides de streptococcus pneumoniae et vaccin a base de polyosides ainsi purifies |
BE889979A (fr) | 1981-08-14 | 1982-02-15 | Smith Kline Rit | Procede de preparation de polysaccharides bacteriens capsulaires antigeniques purifies, produits obtenus et leur utilisation |
US4686102A (en) * | 1984-04-12 | 1987-08-11 | American Cyanamid Company | Multivalent pneumococcal vaccine and preparation thereof |
CA2059692C (en) * | 1991-01-28 | 2004-11-16 | Peter J. Kniskern | Pneumoccoccal polysaccharide conjugate vaccine |
US5714354A (en) * | 1995-06-06 | 1998-02-03 | American Home Products Corporation | Alcohol-free pneumococcal polysaccharide purification process |
US5656206A (en) * | 1995-06-14 | 1997-08-12 | Transitions Optical, Inc. | Substituted naphthopyrans |
US6146902A (en) | 1998-12-29 | 2000-11-14 | Aventis Pasteur, Inc. | Purification of polysaccharide-protein conjugate vaccines by ultrafiltration with ammonium sulfate solutions |
US6743610B2 (en) * | 2001-03-30 | 2004-06-01 | The University Of Chicago | Method to produce succinic acid from raw hydrolysates |
US7741092B2 (en) * | 2002-10-31 | 2010-06-22 | Verenium Corporation | Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them |
US7320874B2 (en) * | 2003-07-08 | 2008-01-22 | Aventis Pasteur Sa | Assaying the teichoic acids of gram+ bacteria |
SI1664319T1 (sl) * | 2003-09-11 | 2010-06-30 | An Vws De Staat Der Nederlande | Postopek za pripravo kapsularnega polisaharida zauporabo v konjugatnih vakcinah |
US7955605B2 (en) * | 2005-04-08 | 2011-06-07 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
US7709001B2 (en) * | 2005-04-08 | 2010-05-04 | Wyeth Llc | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
US20070184072A1 (en) | 2005-04-08 | 2007-08-09 | Wyeth | Multivalent pneumococcal polysaccharide-protein conjugate composition |
GB0522303D0 (en) | 2005-11-01 | 2005-12-07 | Chiron Srl | Culture method |
JP5260531B2 (ja) * | 2006-10-10 | 2013-08-14 | ワイス・エルエルシー | 肺炎連鎖球菌3型多糖体の精製 |
WO2009000825A2 (en) * | 2007-06-26 | 2008-12-31 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Vaccine comprising streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide conjugates |
MX2011006432A (es) * | 2008-12-18 | 2011-09-29 | Wyeth Llc | Metodo para controlar el peso molecular del polisacarido streptococcus pneumoniae serotipo 19a. |
-
2009
- 2009-12-17 EP EP09804098.3A patent/EP2385981B1/en active Active
- 2009-12-17 DK DK09804098.3T patent/DK2385981T3/da active
- 2009-12-17 AU AU2009335824A patent/AU2009335824B2/en active Active
- 2009-12-17 ES ES09804098T patent/ES2749952T3/es active Active
- 2009-12-17 WO PCT/US2009/068424 patent/WO2010080484A1/en active Application Filing
- 2009-12-17 CA CA2743708A patent/CA2743708C/en active Active
- 2009-12-17 US US12/640,666 patent/US20100160622A1/en not_active Abandoned
- 2009-12-17 MX MX2011006431A patent/MX346071B/es active IP Right Grant
- 2009-12-17 PT PT98040983T patent/PT2385981T/pt unknown
- 2009-12-17 PL PL09804098T patent/PL2385981T3/pl unknown
- 2009-12-17 KR KR1020117013852A patent/KR101307703B1/ko active IP Right Grant
- 2009-12-17 JP JP2011542424A patent/JP5789514B2/ja active Active
- 2009-12-17 CN CN200980150897.3A patent/CN102257127B/zh active Active
- 2009-12-17 BR BRPI0923165A patent/BRPI0923165A8/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-12-17 RU RU2011124143/10A patent/RU2524436C2/ru active
- 2009-12-17 SI SI200932002T patent/SI2385981T1/sl unknown
- 2009-12-17 HU HUE09804098A patent/HUE046859T2/hu unknown
-
2011
- 2011-05-30 IL IL213215A patent/IL213215A/en active IP Right Grant
-
2012
- 2012-04-24 HK HK12104020.2A patent/HK1163737A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2015
- 2015-04-09 JP JP2015080051A patent/JP6095715B2/ja active Active
- 2015-09-03 US US14/845,065 patent/US20150376667A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-04-21 US US15/493,806 patent/US20170224802A1/en not_active Abandoned
-
2020
- 2020-06-25 US US16/912,032 patent/US11376315B2/en active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05148157A (ja) * | 1991-01-28 | 1993-06-15 | Merck & Co Inc | 肺炎連鎖球菌からの多糖抗原 |
JP2003531584A (ja) * | 2000-03-16 | 2003-10-28 | ザ・チルドレンズ・ホスピタル・オブ・フィラデルフィア | ニューモコッカス莢膜多糖類の調整的製造 |
JP2008535838A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-09-04 | ワイス | 多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物 |
JP2008535490A (ja) * | 2005-04-08 | 2008-09-04 | ワイス | pH操作によるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖からの混入物の分離 |
JP2009527222A (ja) * | 2005-12-28 | 2009-07-30 | ザ ユーエイビー リサーチ ファウンデイション | 肺炎球菌血清型 |
WO2008118752A2 (en) * | 2007-03-23 | 2008-10-02 | Wyeth | Shortened purification process for the production of capsular streptococcus pneumoniae polysaccharides |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NARAHARI S.PUJAR: "Base Hydrolysis of Phosphodiester Bonds in Pneumococcal Polysaccarides", BIOPOLYMERS, vol. 75, JPN6017002624, 2004, pages 71 - 84, XP071032472, ISSN: 0003488614, DOI: 10.1002/bip.20087 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6095715B2 (ja) | 二酸化炭素を用いて肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)多糖の分子量を制御するための方法 | |
JP5843612B2 (ja) | 肺炎連鎖球菌(Streptococcuspneumoniae)血清型19A多糖の分子量を制御するための方法 | |
JP6872649B2 (ja) | 莢膜Streptococcus pneumoniae多糖の生産のための短縮された精製プロセス | |
DK1866342T3 (en) | SEPARATION OF POLLUTANTS CONTAMINATING FROM STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE POLYSACCHARID BY PH-MANIPULATION |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160307 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160523 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160906 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170206 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170214 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6095715 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |