JP2015049174A - 自動化細胞調製のための遠心分離機装置、遠心分離機チューブ、および方法 - Google Patents

Abstract

【課題】自動化された細胞調製物のための遠心分離機装置、遠心分離機チューブおよび方法。
【解決手段】細胞調製手順の間に自動化された遠心分離機装置をモニターするための自動化方法であって、該方法は：該細胞調製手順の間に状態チェックのセットを実施する工程であって、該状態チェックが該自動化された遠心分離機装置のローターアセンブリに設置可能な複数の遠心分離機チューブに関する工程；該細胞調製手順の間に該自動化された遠心分離機装置におけるインデックス位置を感知モジュールでモニターする工程；該状態チェックのセットにおける個々の状態チェックが、該インデックス位置で位置決め可能な該複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブの状態に基づき満足されているか否かを決定する工程；および該状態チェックのセットにおける少なくとも１つの状態チェックが満足されていない決定に応答して過失状態を示す工程を包含する方法。
【選択図】図５

Description

（技術分野）
本発明は、特に、自動化された、そして半自動化された様式の、電気生理学に関連する測定およびアッセイを実施するために利用される電気生理学およびシステムおよび装置に関する。より詳細には、本発明は、このようなシステムで用いられる細胞の溶液を調製するための装置および方法に関する。

（背景）
細胞および細胞膜の電気的挙動は、基礎研究において、および現代の薬物開発において意味深く重要である。この分野における目的の特定領域は、イオンチャネルおよびトランスポータの研究にある。イオンチャネルは、細胞外環境と細胞の細胞質との間の電気化学的勾配を維持することの原因となる、細胞膜中に見いだされるタンパク質を基礎にした孔である。イオンチャネルは、一旦開くと、イオンが存在する電気化学的勾配の方向に流れる点で、受動的な要素である。

イオンチャネルの研究は、基礎的学究的研究、ならびに生物工学的および薬学的研究を包含する非常に多様で、かつ実を結ぶ領域である。電気生理学は、単離された細胞膜または小胞（ｖｅｓｉｃｌｅ）に対し、ならびに可溶化されたチャネルが製造された膜に再構築されている合成の膜に対して実施される。イオンチャネルの自動化された、高スループットの研究のための器具類が開発されており、そして高スループット電気生理学的測定システムと称され得る。

自動化された高スループット測定システムは、比較的迅速で、かつ効率的な様式で電気生理学的アッセイを実施するために採用され得るが、このようなシステムは、これらアッセイで用いられる細胞および細胞の溶液を自動的に調製するために装備されてはいない。従って、電気生理学的アッセイで用いられる細胞および細胞の溶液を自動的に調製するためのシステムおよび方法に対する必要性が存在している。

本発明は、例えば、以下を提供する。
（項目１）
細胞調製手順の間に自動化された遠心分離機装置（３００）をモニターするための自動化方法であって、該方法は：
該細胞調製手順の間に状態チェックのセットを実施する工程であって、該状態チェックが該自動化された遠心分離機装置のローターアセンブリ（３０４）に設置可能な複数の遠心分離機チューブ（３１０）に関する工程；
該細胞調製手順の間に該自動化された遠心分離機装置におけるインデックス位置（３３６）を感知モジュール（３０４）でモニターする工程；
該状態チェックのセットにおける個々の状態チェックが、該インデックス位置（３３６）で位置決め可能な該複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）の状態に基づき満足されているか否かを決定する工程；および
該状態チェックのセットにおける少なくとも１つの状態チェックが満足されていない決定に応答して過失状態を示す工程、を包含する、方法。
（項目２）
上記状態チェックが、以下：
遠心分離機（３１０）チューブが、細胞懸濁物が上記ローターアセンブリのチューブ位置に分与される前に該ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれの遠心分離機チューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されたか否かを自動的に決定する遠心分離機チューブ存在チェック；
上記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞懸濁物中の細胞をペレット化する前に所定量の細胞懸濁物を含むか否かを自動的に決定する充填レベルチェック；および
該複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離チューブ（３１０）が、細胞ペレット化の後に実質的に垂直な配向に戻ったか否かを自動的に決定する垂直への戻りチェック、の少なくとも１つを含む、上記項目に記載の方法。
（項目３）
上記遠心分離機チューブ存在チェックが：
上記ローターアセンブリ（３０４）の個々のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）をインデックス位置（３３６）まで回転する工程であって、該インデックス位置に回転されたチューブ位置が、インデックスチューブ位置である工程；
感知モジュール（３２４）を用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、該レーザビームが、遠心分離機チューブ（３１０）が該インデックスチューブ位置に設置されているときに反射され、そして該レーザビームが、遠心分離機チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていないときに反射されない工程；
該レーザビームが反射されるとき、遠心分離機チューブ（３１０）がインデックスチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていることと決定する工程；
該レーザビームが反射されないとき、遠心分離機チューブ（３１０）がインデックスチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていないことと決定する工程；および
遠心分離機チューブが該ローターアセンブリ（３０４）の少なくとも１つのチューブ位置に設置されていないことの決定に応答して該遠心分離機チューブ存在チェックが満足されていないことと決定する工程、を含む上記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目４）
さらに：遠心分離機チューブ（３１０）が上記ローターアセンブリ（３０４）の少なくとも１つのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていない決定に応答してバランスチェックを実施する工程；
上記自動化された遠心分離機装置（３００）のバランスがとれているという決定に応答して、上記遠心分離機存在チェックが満足されていることを決定する工程；および
該自動化された遠心分離機装置のバランスがとれていないという決定に応答して、上記遠心分離機が満足されていないことを決定する工程、を含む、上記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
上記充填レベルチェックが：
上記遠心分離機装置（３００）の上記ローターアセンブリ（３０４）を比較的低速度で回転する工程であって、第１のレベルまで充填され、そして上記ローターアセンブリに設置された上記遠心分離機チューブ（３１０）が垂直配向に対して角度をなす配向に旋回され、そして該第１のレベルより少ない第２のレベルまで充填され、そして該ローターアセンブリに設置された遠心分離機チューブが該角度をなす配向に旋回しない工程；
感知モジュール（３２４）を用いて上記インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、該第１のレベルまで充填された遠心分離機チューブが、該第１のレベルまで充填された遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射せず、そして該２のレベルまで充填された遠心分離機チューブが、該２のレベルまで充填された遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射する工程；
遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行する間に該レーザビームを反射しないとき、該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが第１のレベルまで充填されていることを決定する工程；
遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行する間に該レーザビームを反射するとき、該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが第２のレベルまで充填されていることを決定する工程；および
該遠心分離機チューブの少なくとも１つが該第２のレベルまで充填されている決定に応答して、該充填レベルチェックが満足されていないことを決定する工程、を含む、上記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
上記垂直への戻りチェックが；
上記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された上記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）を上記インデックス位置まで回転する工程；
感知モジュール（３２４）を用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、垂直に配向された遠心分離機チューブが、該インデックス位置に位置決めされるとき該レーザビームを反射し、そして非垂直に配向された遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされるとき該レーザビームを反射しない工程；
該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが、該遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされる間に該レーザビームが反射されるときに、垂直に配向された遠心分離機チューブであると決定する工程；
該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが、該遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされる間に該レーザビームが反射されないときに、非垂直に配向された遠心分離機チューブであると決定する工程；および
該遠心分離機チューブの１つが非垂直に配向された遠心分離機チューブであるとの決定に応答して、垂直位置への戻りチェックが満足されていないと決定する工程を含む、上記項目のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
細胞調製手順を実施するための自動化された遠心分離機装置（３００）であって、以下：
複数のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された複数の遠心分離機チューブ（３１０）を支持するように構成されたローターアセンブリ（３０４）であって、該複数のチューブ位置がインデックス位置（３３６）まで回転可能である、ローターアセンブリ；
状態チェックの間に該インデックス位置（３３６）をモニターするように構成された感知モジュール（３２４）であって、該状態チェックが、該複数の遠心分離機チューブ（３１０）に関する、感知モジュール；を備え、
ここで、該感知モジュール（３２４）によって発生される論理信号が、該状態チェックが満足されているか否かを自動的に決定するために用いられる、自動化された遠心分離機装置。
（項目８）上記ローターアセンブリ（３０４）が：
上記複数のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）を画定するローター（３０８）；
それぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）で該ローター（３０８）にそれぞれ取り付けられた複数のカラー（３１６）であって、該カラーは該ローターに対して旋回可能であり、そしてそれぞれの遠心分離機チューブ（３１０）を受容かつ支持するように構成された複数のカラー；および
それぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）で該ローター（３０８）上に位置決めされる複数の旋回制限器（６０４）であって、該旋回制限器は、該カラー（３１６）を該ローターアセンブリ（３０４）の回転の間に所定の旋回角度に制限する、旋回制限器を含む上記項目に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目９）
上記旋回制限器（６０４）の各々が、上記カラー（３１６）を上記所定の旋回角度に制限する一対の機械的停止部材（６１０）を含み、そして
該一対の機械的停止部材における各々の機械的停止部材が、該カラーが該ローターアセンブリ（３０４）の回転の間に旋回するとき、該カラー（３１６）の下表面と係合する面取り部を含み、該カラーの該所定の旋回角度を超える動きが制限され、ここで、特に、該所定の角度が約３２゜と約４０゜との間である、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１０）
上記感知モジュール（３２４）が、以下：
遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞懸濁物が上記ローターアセンブリのチューブ位置で分与される前に上記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれの遠心分離機チューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されたか否かを自動的に決定する遠心分離機チューブ存在チェック；
上記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、該細胞懸濁物中の細胞をペレット化する前に、所定量の細胞懸濁物を含むか否かを自動的に決定する充填レベルチェック；および
上記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞ペレット化の後に実質的に垂直配向に戻ったか否かを自動的に決定する垂直への戻りチェックの少なくとも１つを含むことにより、上記状態チェックをモニターするように構成されている、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１１）
上記感知モジュール（３２４）が、上部センサ（３２６）および下部センサ（３２８）を含み；該上部センサ（３２６）が遠心分離機装置チューブ存在チェックを実施するように構成され；そして
該下部センサ（３２８）が充填レベルチェックおよび垂直への戻りチェックを実施するように構成されている、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１２）
上記自動化された遠心分離機装置（３００）が：
上記ローターアセンブリ（３０４）の個々のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）を上記インデックス位置（３３６）まで回転させること；
上記感知モジュールを用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向けることであって、上記遠心分離機装置チューブ（３１０）が上記インデックスチューブ位置に設置されるとき該レーザビームが反射され、そして該遠心分離機装置チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていないとき該レーザビームが反射されないこと；
該レーザビームが反射されるとき該感知モジュール（３２４）を用いて論理信号を発生することであって、該論理信号が、該遠心分離機チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていることを示すこととを行うように構成されている、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１３）
さらに：比較的遅い速度で上記ローターアセンブリ（３０４）を回転するように構成された回転アクチュエータ（３４０）を備え、該ローターアセンブリに設置された適切に充填された遠心分離機チューブ（３１０）が垂直配向に対して角度をなす配向に旋回し、そして該ローターアセンブリに設置された不適切に充填された遠心分離機チューブが該角度をなす配向に旋回せず、そしてここで：
該感知モジュール（３２４）が上記インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向けるように構成され、適切に充填された遠心分離機装置チューブが、該適切に充填された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射せず、そして不適切に充填された遠心分離機装置チューブが、該不適切に充填された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射し；そして
該感知モジュール（３２４）が、該レーザビーム（３３２、３３４）が反射されるとき、論理信号を発生するように構成され、該論理信号が、上記複数の遠心分離機チューブの遠心分離機チューブの少なくとも１つが不適切に充填された遠心分離機チューブであることを示す、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１４）
さらに：上記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された上記複数の遠心分離機装置チューブのそれぞれの遠心分離機装置チューブ（３１０）を上記インデックス位置（３３６）まで回転するように構成された回転アクチュエータ（３４０）を備え、
上記感知モジュール（３２４）が、該インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向けるように構成され、垂直に配向された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置に位置決めされとき該レーザビームを反射し、そして非垂直に配向された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置に位置決めされとき該レーザビームを反射せず；そして
該感知モジュール（３２４）が、該レーザビーム（３３２、３３４）が反射されるとき論理信号を発生するように構成され、該論理信号が、該複数の遠心分離機装置チューブの遠心分離機装置チューブ（３１０）の少なくとも１つが非垂直配向の遠心分離機チューブであることを示す、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置。
（項目１５）
細胞調製手順の間に自動化された遠心分離機装置（３００）における使用のため、特に、上記項目のいずれか一項に記載の自動化された遠心分離機装置における使用、または上記項目のいずれか一項に記載の方法における使用のための遠心分離機チューブ（３１０、７００）であって：
円筒形の上部分（７０４）；
該円筒形の上部分に隣接する円錐形の下部分（７０６）；および
該円錐形の下部分（７０６）に形成された内部ポケット（７０２）を備え、ここで、該内部ポケットが細胞ペレット化の間に細胞を収集し、該細胞が、ピペッターが上記遠心分離機チューブ中に挿入されるとき該ピペッターから離れて位置決めされる、遠心分離機チューブ。

（摘要）
細胞調製手順を実施するための自動化遠心分離機装置（３００）が提供される。ローターアセンブリ（３０４）が遠心分離機チューブ（３１０）を支持し、これらチューブは、それぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置可能である。これらチューブ位置は、インデックス位置（３３６）まで回転可能である。感知モジュール（３２４）が、遠心分離機チューブ（３１０）に関する状態チェックのセットの間にインデックス位置をモニターする。感知モジュール（３２４）によって生成される論理信号が、状態チェックが満足されているか否かを自動的に決定するために用いられる。

（要約）
本発明は、請求項１、７および１５にそれぞれ規定される。詳細な実施形態は、従属請求項に配置される。

細胞調製手順の間の自動化された遠心分離機装置をモニターするための自動化された方法が提供される。状態チェックのセットが細胞調製手順の間に行われる。この状態チェックは、装置のローターアセンブリに設置された遠心分離機チューブに関連する。感知モジュールが、細胞調製手順の間の装置のインデックス位置をモニターする。次いで、それぞれの状態チェックが、インデックス位置に位置決め可能である遠心分離機チューブの状態を基に満足されるか否かが決定される。少なくとも１つの状態チェックが満足されていない決定に応答して、過失状態が示される。

実施形態では（例えば、請求項３および４を参照のこと。）、本発明の方法は、以下の工程を含むバランスチェックを提供する：自動化遠心分離機装置のローターアセンブリにゼロ、１つ、２つまたは３つの遠心分離機チューブが設置されているか否かを自動的に決定する工程；それぞれの遠心分離機チューブが設置されているローターアセンブリのチューブ位置を自動的に識別する工程；２つの遠心分離機チューブがローターアセンブリでまったく反対のチューブ位置に設置されている決定に応答して、自動化遠心分離機装置がバランスされていることを自動的に決定する工程；２つの遠心分離機チューブがローターアセンブリで隣接するチューブ位置に設置されている決定に応答して自動化遠心分離機装置のバランスがとれていないことを自動的に決定する工程；およびゼロ、１つ、または３つの遠心分離機チューブがローターアセンブリに設置されている決定に応答して自動化遠心分離機装置のバランスがとれていないことを自動的に決定する工程。

上記バランスチェックのさらなる、または代替の実施形態によれば、このバランスチェックは以下の工程を提供する：上記ローターアセンブリの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、またはより多くのチューブ位置に遠心分離機チューブを手動により、または自動的に配置する工程；ローターアセンブリ内の利用可能なチューブ位置のどれが、チューブの不存在／存在が好ましくは感知モジュールによって決定されるインデックス位置に上記ローターアセンブリの利用可能な位置の各１つを好ましは割り当てることによって、その位置に配置された遠心分離機チューブによって実際に占領されているのかを決定する工程；および実際に検出されたチューブが上記ローターアセンブリの回転軸の周りに対称形態で位置決めされている場合に上記遠心分離機装置のバラスンがとれていると決定する工程。詳細には、または代替的に、上記チューブは、実際に位置決めされたチューブの質量の中心が、回転軸と一致または本質的に一致するように上記軸の周りに配置される。

細胞調製手順を行うための自動化された遠心分離機装置がまた、提供される。ローターアセンブリが、それぞれのチューブ位置で設置可能である遠心分離機チューブを支持する。チューブ位置は、インデックス位置に指し示され得る。感知モジュールが、遠心分離機チューブに関する状態チェックのセットの間にインデックス位置をモニターする。この感知モジュールによって発生された論理シグナルが、状態チェックが満足されるか否かを自動的に決定するために用いられる。

自動化遠心分離機装置の実施形態によれば、複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブは、以下：円筒形の上部分；上記円筒形の上部分に隣接し、そして上部テーパー状領域、このテーパー状領域の下に位置する垂直遷移領域、およびこの垂直遷移領域の位置に位置する下部テーパー状領域を含む円錐形の下部分；およびこの円錐形の下部分に形成され、そして上記垂直遷移領域と下部テーパー状領域とによって画定される内部ポケットを含み、ここで、この内部ポケットは、細胞ペレット化の間に細胞を収集し、細胞は、ピペッターが上記遠心分離機チューブ中に挿入されるとき、ピペッターから離れて位置決めされる。さらなる実施形態では、自動化遠心分離機装置または上記の方法で用いられる少なくとも１つ、またはすべての遠心分離機チューブは、以下または詳細な説明で提示されるように設計される。

細胞調製手順の間に自動化遠心分離機装置での使用のための遠心分離機チューブがさらに提供される。この遠心分離機チューブは、円筒形の上部分、この円筒形の上部分に隣接する円錐形の下部分、およびこの円錐形の下部分に形成される内部ポケットを含む。この内部ポケットは、ピペッターが遠心分離機チューブ中に挿入されるとき、細胞がピペッターから離れて位置決めされるように、細胞ペレット化の間に細胞を集める。

請求項に記載の遠心分離機チューブによれば：円錐形の下部分は、上部テーパー状領域、この上部テーパー状領域の下に位置する垂直遷移領域、およびこの垂直遷移領域の下に位置する下部テーパー状領域；この垂直遷移領域および下部テーパー状領域によって画定される内部ポケットを備え、上記テーパー遠状領域における上記遠心分離機チューブの内径は、上記垂直遷移領域に向かってテーパー状であり；そして上記内径は、上記下部テーパー状領域において、上記垂直遷移領域から下方にテーパー状となっている。

上記遠心分離機チューブの代替またはさらなる実施形態では：上記遠心分離機チューブ壁は、円筒形の上部分および円錐形の下部分を画定し；この遠心分離機チューブ壁は、上記円錐形の下部分の上部テーパー状領域で第１の厚みを、そして上記円錐形の下部分の下部テーパー状領域で第２の厚みを有し；そして、この第２の厚みは第１の厚みより薄い。

以下の詳細な説明においては、本発明の方法、装置および／またはチューブの特徴が記載され、これらの特徴は、それぞれ、または本発明または添付の請求項に記載の上記の要約された要旨の局面と任意の組み合わせで組み合わされ得る。

本発明は、添付の図面を参照することにより、より良好に理解され得る。図面中の構成要素は必ずしもスケール通りではなく、それに代わって、本発明の原理を示す際に強調がなされている。図面において、同様の参照番号は、異なる図の全体で対応する部品を指定している。
図１は、自動化高スループット電気生理学的測定システムの実施の一例の平面図である。 図２は、自動化高スループット電気生理学的測定システムのロボットピペッターヘッドの実施の一例の側面図である。 図３は、自動化高スループット電気生理学的測定システムのプレナム上に支持されたパッチプレートの例示の実施の側断面図である。 図４は、調製手順の例示の方法ステップのフローチャーである。 図５は、自動化遠心分離機装置の実施の一例の上からの斜視図である。 図６は、図５の自動化遠心分離機装置の側面図である。 図７は、チューブ状態チェック手順を含む細胞調製手順の例示の方法ステップのフローチャーである。 図８は、チューブ存在チェック手順の例示の方法ステップのフローチャーである。 図９Ａは、チューブ存在チェック手順の間の自動化遠心分離機装置の実施の一例の平面図である。図９Ｂは、図９Ａの自動化遠心分離機装置の側面図である。 図１０は、チューブバランスチェック手順の例示の方法ステップのフローチャートである。 図１１は、チューブ充填レベルチェック手順の例示の方法ステップのフローチャートである。 図１２Ａは、チューブ充填レベルチェック手順の間の自動化遠心分離機装置の実施の一例の平面図である。図１２Ｂは、図１２Ａの自動化遠心分離機装置の側面図である。 図１３は、垂直へのチューブ戻りチェック手順の間の例示の方法ステップのフローチャートである。 図１４Ａは、垂直へのチューブ戻りチェック手順の間の自動化遠心分離機装置の実施の一例の平面図である。図１４Ｂは、図１４Ａの自動化遠心分離機装置の側面図である。 図１５Ａは、ローターアセンブリの実施の一例の上からの斜視図である。図１５Ｂは、図１５Ａのローターアセンブリの別の上からの斜視図である。 図１６は、ポケットのある遠心分離機チューブの実施の一例の前部の断面図である。 図１７は、図１６の遠心分離機チューブの一部分の拡大した前部の断面図である。 図１８は、ポケットのある遠心分離機チューブの実施の一例のポケットの上からの斜視断面図である。

（詳細な説明）
自動化高スループット電気生理学的測定システムにおける使用のための細胞および細胞の溶液の自動化された調製のための装置、デバイス、および方法が提供される。自動化遠心分離機装置は、自動化細胞調製手順の間に細胞濃縮物を調製する。この自動化遠心分離機装置は、自動化高スループット電気生理学的測定システムの構成要素であり得、それによって、このシステムによって実行されるアッセイのための細胞濃縮物の自動化されたデッキ上（on-deck）の調製を可能にする。

この自動化された遠心分離機装置は、細胞濃縮物の調製に用いられる遠心分離機チューブに関する状態チェックを実行するために利用される感知モジュールを含み得る。この感知モジュールは、チューブの存在または不在、チューブの充填状態、およびチューブの相対的な垂直配向を自動的に決定するために細胞調製手順の間に利用され得る。

ポケットのある遠心分離機チューブが、媒体がチューブから吸引され、そしてチューブ中に分配されるとき、細胞を損傷すること、または細胞を分解することを最小にするために、細胞調製手順の間に利用され得る。この自動化遠心分離機装置はまた、システムのプロセスデッキにおける装置の設置面積（ｆｏｏｔｐｒｉｎｔ）を最小にするために、細胞調製プロセスの間のチューブの旋回角度を束縛し得る。この自動化遠心分離機装置に関するこれら局面およびその他の局面は、以下にさらに詳細に論議される。

図１を参照して、自動化高スループット電気生理学的測定システム１００の実施の一例が平面図で示される。この例におけるシステム１００は、複数サンプル（例えば、サンプルの二次元グリッドまたはアレイ）に対する同時測定を行うように構成されている。この高スループット電気生理学的測定システムは、測定プラットホーム１０２を含み得、これはまたプロセスデッキ１０２とも称される。このプロセスデッキ１０２は、システム１００の種々の構成要素を支持し得、そしてこの測定システム１００のいくつか、またはすべての構成要素の所望の空間的配列を支持または維持するためにほぼ平面状の表面を備え得る。

このシステムは、アッセイの間にシステム１００の操作を制御する制御モジュール１０４を含み得る。この制御モジュール１０４は、例えば、外部マイクロコンピュータ、ディスプレイデバイス、およびソフトウェアユーザインターフェースを含み得る。この制御モジュール１０４はまた、運動制御、流体工学的制御、および電気的データ記録を含むシステム１００のリアルタイムの機能的局面を制御するために、外部マイクロコンピュータにインターフェースされるマイクロコントローラを含み得る。

このシステム１００はまた、システム１００の構成要素を制御し、電気生理学的測定を実施し、そしてパッチクランプアッセイの間に獲得されたデータをデジタル化するパッチエンジンを含み得る。この例では、パッチエンジンは、プレナム１０６、電極プレート１０８、およびデータ獲得エンジンを含む。これらの構成要素は、以下でさらに詳細に論議される。

このシステム１００は、種々の機能を実行するために構成された複数のステーションまたはモジュールを含み得る。例示される例では、このシステム１００は、７つのステーション：チップラックステーション１１０；外部緩衝ステーション１１２；第１の化合物ステーション１１４；分析ステーション１１６；洗浄ステーション１１８；第２の化合物ステーション１２０；および細胞ステーション１２２を含む。このシステム１００が、まさに上記した機能とは異なる機能を提供するステーションを含む、より多く、またはより少ないステーションを含み得ることが理解される。

この例では、これらステーションの各々は、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロタイタープレート（Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を受容するような形状である。換言すれば、この例では、これらのステーションは、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロプレートフットプリントを有するとして記載され得る。アッセイのステップは、プロセスデッキ１０２で行われ、そしてロボットピペッターヘッドが、流体を、外部緩衝ステーション１１２、細胞ステーション１２２、ならびに化合物ステーション１１４および１２０から、分析ステーション１１６にある測定基板に送達する。このロボットヘッドは、図２を参照して以下にさらに論議される。

測定基板はパッチプレートと称され得、そしてその周りに、対応するサンプル（例えば、細胞または細胞膜）が分析のために位置決め、またはシールされる複数の穴または孔を含み得る。この例においては、パッチプレートは、ＳＢＳ−標準３８４ウェルマイクロプレートである。従って、この例におけるパッチプレートは、細胞、外部緩衝液、および生物学的スクリーニング化合物を保持するための３８４のそれぞれのウェルを含む。この例においては、パッチプレートの３８４のウェルは、１６の列（Ａ−Ｐで識別される）および２４の縦列（１−２４）のグリッドで配列され得る。このパッチプレートのウェルは、下部表面を通って形成された１つ以上の孔を含み得る。各孔は、例えば、約２マイクロメートル（μｍ）の直径を有し得る。ウェルあたり１つの孔を有するパッチプレートは、単一穴プレートと称され得る。ウェルあたり複数の孔（例えば、６４孔のアレイ）を有するパッチプレートは、集団パッチクランプ（ＰＰＣ）プレートと称され得る。このパッチプレートは、アッセイの間に分析ステーションに、および分析ステーションから移動され得る。このパッチプレートは、図３を参照して以下にさらに詳細に論議される。

チップラックステーション１１０は、ピペッターチップが予備装填され得るトレイを保持する。ロボットピペッターヘッドは、チップラックステーション１１０の方に向けられてより低くなり、アッセイの開始時にピペッターチップを装填する。このピペッターチップは、アッセイのために指示された特定方法に依存して、外部緩衝溶液、化合物、および細胞を、所定のアッセイの間に適切な回数で吸引および分与するために利用され得る。

外部緩衝ステーション１１２はまた、入力ステーションとも称され得、そして外部緩衝溶液を保持する外部緩衝ボートを含み得る。いくつかの例の実施では、蠕動ポンプおよび減圧支援廃棄ボトルが選択的に採用されて外部緩衝ステーション１１２を自動的に充填かつ排液する。この外部緩衝ボートは、アッセイの開始前に外部緩衝溶液で充填され得る。この外部緩衝溶液は、細胞外溶液を模倣する塩または塩の混合物（例えば、低濃度のカリウムを含む溶液）を含む生理学的塩溶液であり得る。ロボットピペッターヘッドは、外部緩衝ステーション１１２から外部緩衝溶液を吸引し、この外部緩衝溶液を分析ステーション１１６に輸送し、そしてこの緩衝溶液をパッチプレートのウェル中に分与し得る。

第１および第２の化合物ステーション１１４および１２０はまた、入力ステーションとも称され、そして、アッセイの間に利用され得る生物学的スクリーニング化合物またはその他のタイプの試薬を保持する。ＳＢＳ−標準３８４ウェル化合物プレート（例えば、ハマイクロプレート）は、生物学的スクリーニング化合物を保持し得、そして上記第１または第２の化合物ステーション１１４または１２０にある設置面積内にある。ロボットピペッターヘッドは、同様に、化合物ステーション１１４または１２０から化合物を吸引し、化合物を分析ステーション１１６に輸送し、そして化合物をパッチプレートのウェル中に分与し得る。

分析ステーション１１６は、パッチエンジンのプレナム１０６を含み、そしてアッセイの間パッチプレートを支持する。プレナム１０６はリザーバ１２６を含み、そして内部緩衝溶液が、アッセイの間に下からこのプレナムリザーバ１２６中に、かつそれからポンプ輸送され得る。内部緩衝溶液は、生存細胞の内部細胞質を模倣する塩または塩の混合物を含む塩溶液（例えば、高濃度のカリウムを含む溶液）であり得る。パッチプレートはプレナム１０６上に静止し、そしてプレナム１０６の周を取り囲むｏ−リング１２８は、パッチプレートとプレナムリザーバ１２６との間に気密シールを作製する。小さな負（差動的）の圧力が導入され、これは、ウェル中にある細胞（または細胞膜）をウェルの底にある孔に向かって引く。この差動的な圧力は、それ故、当業者に認識されるように、細胞（または細胞膜）とウェルの底との間に高い抵抗の電気的シールを形成する。

電極プレート１０８は、電子工学的ヘッドとも称され、そしてパッチプレートにおいて細胞サンプルに対する電気生理学的測定を実施するために用いられる。電気生理学的測定は、パッチプレートのウェル中の孔を横切る電気的回路を形成することにより実施され得る。電気的回路は、パッチプレートの膜の対向する側に電極を位置決めすることにより形成され得る。例えば、感知電極が膜の上の位置決めされ得、そして接地電極が膜の下に位置決めされ得る。従って、この例では、プレナム１０６は、プレナムリザーバ１２６の頂部に位置決めされる４つの接地電極１３０を含み得、そして、この例では、電極プレート１０８は、パッチプレートおよびプレナムの頂部に適合するフレーム中に収容される感知電極１３２のアレイを含み得る。電極プレート１０８は、図２および図３を参照して以下にさらに詳細に論議される。

電極プレート１０８の感知電極１３２の配列は、パッチプレートのウェルの配列に対応し得、各感知電極１３２は、パッチプレートのそれぞれのウェルで電気生理学的測定を実施し得る。従って、この例では、電極プレート１０８は、３８４の感知電極１３２のアレイを含み得る。各感知電極１３２は、１つの電子チャネルに対応する。従って、この例では、３８４の感知電極１３２は、３８４の電子チャネルに対応する。

電極１３２は、例えば、銀または銀で被覆されたピン（例えば、Ａｇ／ＡｇＣｌ）であり得る。回路を完成するために、適切な電解質（例えば、塩）溶液がパッチプレートのウェルおよびプレナムリザーバ１２６に添加され得る。例えば、外部緩衝溶液および内部緩衝溶液は、感知電極１３２および接地電極１３０が電気的活性をモニターすることを可能にするために塩素イオンを含み得る。

電極プレート１０８は、アッセイの間にプレナム１０６にクランプされ得、感知電極１３２がパッチプレートのそれぞれのウェル中に受容される。電極プレート１０８は、その上部表面を通って形成された孔を含み得、ピペッターチップへのアクセスを提供する。このようにして、電極プレート１０８は、パッチプレートウェルへの化合物の添加を可能にし、その一方、同時にウェル中のイオン電流を測定する。図３を参照して以下にさらに詳細に論議されるように、感知電極１３２および接地電極１３０は測定電子部品に連結されてもよく、電気生理学的測定に関連するデータを得る。

洗浄ステーション１１８は種々の構成要素を受容し得、アッセイの後で、これら構成要素をきれいにする。この例では、洗浄ステーション１１８は、洗浄手順のために、ピペッターチップおよび電極プレートの電極ピンを収容するリザーバを含む。従って、この例では、洗浄ステーション１１８は、ピペッターチップおよび電極ピンの寸法に一致する入力ポートのマニホールドを含み得る。流体取扱いシステム（図示はされていない）は、洗浄ステーション１１８を通って洗浄溶液をポンプ輸送し得、この洗浄溶液は、プロセスデッキ１０２の下の箱入り大型ガラス瓶（ｃａｒｂｏｙ）（図示はされていない）中に注がれる。洗浄ステーション１１８はまた、使用されていないとき、電極プレートのための静止位置として供され得る。ロボットピペッターヘッドは、洗浄ステーション１１８で電極プレート１０８をピックアップし得、そしてアッセイの間に電極プレート１０８を分析ステーション１１６に輸送し得る。ロボットピペッターヘッドは、次いで、電極プレート１０８を、アッセイの終わりで洗浄ステーション１１８にあるその静止位置に戻し得る。

細胞ステーション１２２はまた、入力ステーションとも称され得、そしてアッセイで用いられる細胞（またはその他の生物学的サンプル）を保持する細胞ボートを含む。細胞は、細胞ボートに存在しながら、外部緩衝溶液中に分散され得る。ロボットピペッターヘッドは、同様に、細胞ステーション１２２から細胞を吸引し、細胞を分析ステーション１１６に輸送し、そしてパッチプレートのウェル中に細胞を分与し得る。

図２を参照して、高スループット電気生理学的測定システム１００のためのロボットピペッターヘッド１５０の実施の例が側面図で示される。このロボットピペッターヘッド１５０はまた、流体工学的ヘッドまたは複数チャネル分与ヘッドとも称され得る。このロボットピペッターヘッド１５０は、流体、細胞溶液、および化合物をパッチプレートのウェル中に添加し、除去し、置換し、または移すために用いられ得る。この例では、ロボットピペッターヘッド１５０は、流体を、細胞ステーション１２２、外部緩衝ステーション１１２、および化合物ステーション１１４および１２０から、分析ステーション１１６に輸送するために利用されるピペッターチップを保持し得る。ピペッターチップは、アッセイプロトコルに従って、流体を正確な量で吸引または分与する。

ロボットピペッターヘッド１５０は、ロボットピペッターヘッド１５０をプロセスデッキのステーション間で移動するための三次元の機械的構台（ｇａｎｔｒｙ）システム１５２に連結され得る。制御モジュール１０４は、この機械的構台システム１５２と通信し得、アッセイの間、ロボットピペッターヘッド１５０の移動を制御する。

アッセイの開始のときに、ロボットピペッターヘッド１５０は、チップラックステーション１１０に移動し得、そしてピペッターチップを装填する。ロボットピペッターヘッド１５０はまた、電極プレート１０８のための輸送機構としても供される。従って、ロボットピペッターヘッド１５０は、例えば、電極プレート１０８を保持する電極プレート輸送クリップ１５４を含み得る。このロボットピペッターヘッド１５０は、電極プレート１０８を洗浄ステーション１１８にあるその静止位置から装填し得、そしてそれを分析ステーション１１６に輸送し、そこで、それは、アッセイの間にプレナム１０６にクランプする。アッセイの終わりに、ロボットピペッターヘッド１５０は、分析ステーション１１６から電極プレート１０８を装填し得、そしてそれを洗浄ステーション１１８に輸送して戻す。

ここで、図３を参照して、高スループット電気生理学的測定システム１００のプレナム１０６によって支持されるパッチプレート１６０の例示の実行が示される。このパッチプレート１６０は、上記で論議されたように、複数のウェル１６２（例えば、３８４個のウェル）を含み得る。パッチプレート１６０の２つのウェル１６２が、図３に例示の目的で示される。各ウェル１６２は、ウェル壁１６４によって区画され、そしてパッチプレート１６０の底１６６によって境される。さらに、図３の例示のパッチプレート１６０中のウェル１６２は、各々がパッチプレート１６０の底１６６を通って形成された孔１６８を含む。それぞれのウェル１６２中の細胞１７０は、上記で論議されたように、差動的圧力によりパッチプレート１６０の底１６６にシールされ得る。

パッチプレート１６０のウェル１６２は外部緩衝溶液１７２で充填され得、そしてパッチプレート１６０の下に位置するプレナム１０６のプレナムリザーバ１２６は、内部緩衝溶液１７４で充填され得る。感知電極１３２は、パッチプレート１６０のそれぞれのウェル１６２中に位置決めされ得、当業者によって認識されるように、細胞１７０のイオンチャネル１７６の活性のような、アッセイの間にウェル１６２中で起こる電気的活性を測定する。プレナム１０６の接地電極１３０は、パッチプレート１６０のそれぞれの孔１３８を横切る電気的回路を完成する。

電極プレート１０８の感知電極１３２および接地電極１３０は、例えば、プログラム可能な電圧供給源（図示はされていない）、増幅器１８２およびアナログ−デジタルコンバータ（ＡＤＣ）１８４のような、測定電子機器１８０を経由して、データ獲得エンジン１７８と通信し得る。図３に示される例で見られるように、感知電極１３２および接地電極１３０は、増幅器１８２と信号通信しており、増幅器はＡＤＣ１８４と信号通信しており、ＡＤＣは次にデータ獲得エンジン１７８と信号通信している。増幅器１８２は、感知電極１３２上で測定された電流を、アナログ電圧信号に変換する、高ゲイン、低ノイズのトランス−インピーダンス増幅器であり得る。ＡＤＣ１８４は、増幅器１８２からのこのアナログ電圧信号をデジタル電圧測定値に変換し得る。データ獲得エンジン１７８は、それ故、コンピュータメモリ中に、感知電極チャネルのためのこのデジタル電圧測定値を記録し得る。

図４を参照して、細胞調製手順の例示のステップのフローチャート２００が示される。自動化高スループット電気生理学的測定システムによって実行されるアッセイにおける使用のための細胞を調製するために、オペレータは、遠心分離機チューブ、細胞収集チューブ、緩衝チューブ、および開始混合物を細胞取扱いユニットに設置することにより細胞取扱いユニットをセットアップし得る。開始混合物は、例えば、媒体（例えば、血清、緩衝溶液、抗生物質など）中に懸濁された細胞を含む細胞懸濁物であり得る。オペレータは、細胞取扱いユニットの細胞小屋（ｃａｂａｎａ）中に比較的低密度の細胞供給物を装填し得る。

この細胞取扱いユニットは、細胞ピペッター（図１７）を含み得る。この細胞ピペッターは、プロセスデッキの上で、かつ細胞ステーション近傍に位置決めされ得るロボットピペッティングユニットである。細胞ピペッターは、アッセイの間の使用のために細胞ステーションの細胞ボートに最終の混合物を送達する。この最後の混合物は、例えば、最後の細胞懸濁物であり得る。

一旦、遠心分離機チューブが設置されると、細胞ピペッターは、細胞小屋からチューブに比較的低密度の細胞供給物を添加する（ステップ２０４）。細胞取扱いユニットは、次いで、細胞をペレット化する（ステップ２０６）。細胞ペレット化の後、細胞ピペッターは、チューブから上清液（例えば、媒体、細胞残渣など）を除去し、そしてチューブに緩衝溶液を添加する（ステップ２１０）。細胞取扱いユニットは、次いで、チューブの内容物を混合し、緩衝溶液中にペレット化細胞を再懸濁する。すなわち、ペレット化細胞を砕き（ステップ２１２）、比較的高密度の細胞の溶液を得る。細胞取扱いユニットは、ペレット化細胞を緩衝溶液中に再懸濁するために複数の混合サイクルを実施し得る。従って、さらなるり混合サイクルが実施されるべき場合、細胞取扱いユニットは、ステップ２１２を繰り替えし得、チューブの内容物をさらに混合する。

さらに、細胞取扱いユニットは、複数のチューブにおいて細胞懸濁物を調製し得る。従って、さらなるチューブがチューブ内容物の再懸濁のために残っている場合（ステップ２１６）、そのときは、この細胞取扱いユニットは次のチューブに指標付け得（ステップ２１８）、そして次のチューブから上清液を除去し、緩衝溶液を添加し、そして緩衝溶液中にペレット化細胞を再懸濁するためにステップ２０８−２１４を繰り返す。

チューブ内容物の再懸濁のためのチューブがもはや残っていない場合（ステップ２１６）、そのときは、細胞ピペッターはチューブから比較的高密度の細胞溶液を吸引し得（ステップ２２０）、そして細胞溶液を細胞収集チューブ中に分与する（ステップ２２４）。さらなるチューブが吸引のために残っている場合（ステップ２２４）、そのときは、細胞取扱いユニットは、次のチューブに指標を付けし得（ステップ２２６）、そしてステップ２２０−２２４を繰り返し、比較的高密度の細胞溶液をチューブから細胞収集チューブに移す。

吸引されるべきチューブがもはや残らない場合（ステップ２２４）、そのときは、細胞取扱いユニットは、細胞収集チューブの内容物を、プロセスデッキにある細胞ステーションの細胞ボート中に分与し得る（ステップ２２８）。一旦、細胞取扱いユニットが、細胞収集チューブの内容物を細胞ボート中に分与すると、細胞取扱いユニットは、緩衝溶液でチューブを繰り返しすすぐことにより遠心分離チューブをきれいにし得る（ステップ２３０）。緩衝溶液でチューブをすすぐために、細胞取扱いユニットは、チューブに緩衝溶液を注ぎ得、そしてチューブから緩衝溶液を吸引する。細胞取扱いユニットは、吸引された緩衝溶液を、すすぎサイクル間に廃棄液（ｓｐｉｔ）溜め（ｓｉｎｋ）中に分与し得る。細胞取扱いユニットはまた、緩衝溶液で細胞収集チューブを繰り返しすすぐことによって同様の様式で細胞収集チューブをきれいにする（ステップ２３２）。遠心分離機チューブのように、細胞取扱いユニットは、繰り返し、細胞収集チューブに緩衝溶液を注ぎ、細胞収集チューブから緩衝溶液を吸引し、そして吸引された緩衝溶液を液溜め中に分与する。

このようにして、細胞取扱いユニットは、自動化高スループット電気生理学的測定システムによって実施されるべき複数アッセイのための細胞を調製し得る。（ステップ２３４）のための細胞を調製するためのさらなるアッセイが残っている場合、そのときは、細胞取扱いユニットは、さらなるアッセイのための細胞を調製するために、ステップ２０４−２３２を繰り返し得る。

上記で述べたように、この細胞調製手順は自動化され得る。しかし、自動化細胞調製手順は、細胞取扱いユニットが適正にセットアップされていない場合には失敗し得る。失われた、または誤整列された遠心分離機チューブ、バランスのとれていない遠心分離機、または不十分な量の細胞懸濁物は、細胞調製手順またはアッセイの成功した終了を危うくし得る。

自動化遠心分離機装置は、細胞調製手順の間に一連のチューブ状態チェックを実行することによってこれらのリスクを緩和する。図５を参照して、自動化遠心分離機装置３００の実施の例が、上からの斜視図で示される。この自動化遠心分離機装置３００は、取り付けフレーム、例えば、自動化高スループット測定システム（図１中の１００）のプロセスデッキ（図１中の１０２）上に取り付けられ得る。この例では、自動化遠心分離機装置３００は、スピンドル３０６頂部に取り付けられるローターアセンブリ３０４を含む。この例では、ローターアセンブリ３０４は、遠心分離機チューブ３１０を支持するローター３０８を含み、チューブ３１０は、ローターアセンブリ３０４が中央軸のまわりでスピンするとき、ローターアセンブリ３０４に対して外向きに旋回し得る。スピンハウジング３１２は、取り付けフレーム３０２に取り付けられ、そしてローターアセンブリ３０４および遠心分離機チューブ３１０を取り囲み、それによって、スピン領域３１４を画定し得る。この例では、スピンハウジング３１２は、遠心分離機チューブ３１０およびローターアセンブリ３０４を取り囲む垂直の円筒壁である。この例におけるスピンハウジング３１２はまた、過剰に充填された遠心分離機チューブ３１０からの任意の溢れ物またはスプレーを含むための、はね返し保護として機能し得る。

この例では、ローターアセンブリ３０４のローター３０８は、ローター３０８の周辺の周りの４つのそれぞれのチューブ位置で４つの遠心分離機チューブ３１０を支持する。この例では、各チューブ位置において、カラー窪み（図１５Ａ）が、遠心分離機チューブ３１０を保持するカラー３１６を受容するために、ローター３０８中に形成される。一対の旋回ピン３１８が、ローター３０８のそれぞれのカラー窪み中にカラー３１６の各々をそれぞれ固定する。この例では、カラー３１６は環状のリングであり、これを通って遠心分離機チューブ３１０が挿入され得る。従って、このカラー窪みは、カラー３１６を受容するための形状である。この例では、カラー窪みは、カラー３１６の環状形状を受容するための半球形形状を有する。

遠心分離機チューブ３１０の頂部を取り囲むリム３２０は、カラー３１６の上部表面上に静止し得る。このようにして、カラー３１６は、遠心分離機チューブ３１０をローター３０８に固定する。この例では、ローターアセンブリ３０４が４つの遠心分離機チューブ３１０を支持するとき、図５に例として示されるローターアセンブリ３０４は、従って、一対の旋回ピン３１８を経由して窪み中にそれぞれ支持されている４つのカラー３１６のそれぞれの受容のための４つのカラー窪みを含み、それ故、旋回ピンは、合計して８つの旋回ピンである。ローター３０８が４つより多いか、または少ない遠心分離機チューブ３１０を支持するように構成され得ることが理解される。

さらに、遠心分離機チューブ３１０は、ローターアセンブリ３０４が中央軸の周りで回転されるとき、カラー３１６と組み合わされて旋回ピン３１８の周りで旋回し得る。ローター３０８のカラー窪みは、カラー３１６とチューブ３１０とがカラー窪み中で旋回することを許容するようなサイズである。自動化遠心分離機装置３００は、ローターアセンブリ３０４を比較的速い速度で回転することにより、遠心分離機チューブ３１０に含まれる細胞をペレット化し得る。遠心分離力は、チューブ３１０の下端部３２２をローターアセンブリ３０４から遠ざかる外方に引く。遠心分離力はまた、チューブ３１０内の細胞をチューブ３１０の下端部３２２に向かって引き、そこで、それらは、ペレットと称され得る細胞の塊に一緒に集まり得る。

自動化遠心分離機装置３００はまた、細胞調製手順の間にローターアセンブリ３０４中に支持されたチューブ３１０の状態をモニターするセンサモジュール３２４を含む。この例におけるセンサモジュールは、２つのセンサ３２６および３２８を含む。図５に見られるように、センサモジュール３２４は、上部センサ３２６および上部センサ３２６の直接下に位置される下部センサ３２８を含み得る。これらセンサ３２６および３２８は、例えば、光学的センサであり得、そしてスピンハウジング３１２内の遠心分離機チューブ３１０の状態をモニターするように構成されている。光学的センサ３２６および３２８は、取り付けフレーム３０２または取り付けフレーム３０２に取り付けられている垂直取り付け壁３３０に取り付けられ得る。図５に例として示されるように、上部光学的センサ３２６は垂直取り付け壁３３０に取り付けられ、そして下部光学的センサ３２８は取り付けフレーム３０２に取り付けられる。

この例では、各光学的センサ３２６および３２８は、それぞれのレーザビーム３３２および３３４をスピン領域３１４に向け、遠心分離機チューブ３１０の状態をモニターする。従って、この例では、取り付け壁３３０およびスピンハウジング３１２は、センサ３２６および３２８からのレーザビーム３３２および３３４がスピン領域３１４に入ることを許容するために透明である。回転アクチュエータ（図６）は、回転アセンブリ３０４を回転し得、ローター３０８上のチューブ位置（図９Ａ）を、スピン領域３１４内のインデックス位置３３６まで回転させる。インデックス位置３３６（即ち、インデックス位置３３６に位置決めされる）まで回転されたローター３０８のチューブ位置は、チューブインデックス位置と称される。遠心分離機チューブ３１０がチューブインデックス位置に設置されるとき、すなわち、遠心分離機チューブ３１０がインデックス位置３３６に位置されるとき、この遠心分離機チューブ３１０は、同様に、チューブインデックス位置にある遠心分離機チューブと称され得る。遠心分離機チューブ３１０は、各レーザビーム３３２および３３４の経路中に位置されるインデックス位置まで回転され得る。種々のチューブ状態のための測定値は、それ故、このインデックス位置３３６でとられ得る。

図５に見られるように、この例では、上部光学的センサ３２６は、下部光学的センサ３２８の直接上に位置決めされる。従って、この上部光学的センサ３２６は、上部レーザビーム３３２を、インデックス位置３３６に位置する遠心分離機チューブ３１０の上端部３３８に向かって方向付け得、そして下部光学的センサ３２８は、下部レーザビーム３３４を、インデックス位置３３６に位置するチューブ３１０の下端部３２２に向かって方向づけ得る。

これら光学的センサ３２６および３２８は、例えば、インデックス位置３３６でそれぞれのレーザビーム３３２および３３４を検出し、そして受容される任意の反射をモニターすることにより、インデックス位置３３６におけるチューブ３３６におけるチューブ３１０を検出する反射レーザセンサであり得る。この例では、レーザビーム３３２および３３４は、６６０ナノメートル（ｎｍ）あたりの波長を有し得る。レーザビーム３３２および３３４が、それぞれの反射を受容した場合、そのときは、光学的センサ３２６および３２８は、チューブ３１０がインデックス位置３３６で検出されたことを示す信号を発生し得る。反射レーザセンサ３２６および３２８は、レーザ光供給源（例えば、レーザダイオード）をそれぞれ含み得、それぞれのレーザビーム３３２および３３４を発生し、そしてそれぞれの画像センサ（例えば、ＣＭＯＳ画像センサ）は任意の反射を受容する。センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８は、インデックス位置３３６から離れた作動距離（すなわち、作業距離）に位置決めされ得る。作動距離は３５ｍｍ〜１００ｍｍであり得、そしていくつかの実施においては、５５ｍｍほどであり得る。作動距離は、光学的センサ３２６および３２８に対向して位置されるスピンハウジング３１２の一部が、スピンハウジング３１２から離れるレーザビーム３３２および３３４の反射が、光学的センサ３２６および３２８に戻り、そしてこれらを誘発することを防ぐように、光学的センサ３２６および３２８の作動距離を超えて位置決めされる。自動化遠心分離機装置３００のローターアセンブリ３０４中の遠心分離機チューブ３１０の状態をモニターするために適切な光学的センサ３２６および３２８は、日本国、大阪にあるＫｅｙｅｎｃｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから、例えば、パーツ番号ＬＲ−ＺＢ１００Ｎとして入手可能であり得る。ここで図６を参照して、図５の自動化遠心分離機装置３００の例示の実施が、側面図で示される。図６に見られるように、ローターアセンブリ３０４は、取り付けフレーム３０２を通る開口部３４２を経由して回転アクチュエータ３４０に連結されている。アクチュエータハウジング３４４は、回転アクチュエータ３４０を取り付けフレーム３０２に取り付け得る。回転アクチュエータ３４０は、上記で論議されたように、ローターアセンブリ３０４の中央軸の周りの回転を駆動するためのモータ３４６を含み得る。適切な回転アクチュエータ３４０は、Ｆａｌｌ ＲｉｖｅｒのＭａｘｏｎ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ｍｏｔｏｒｓ，Ｉｎｃ．から、パーツ番号３１２３３６として入手可能である。

回転アクチュエータ３４０は、回転アクチュエータ３４０のモータ３４６を制御する制御モジュール１０４に連結され得る。このようにして、制御モジュール１０４は、遠心分離機チューブ３１０の回転速度を制御し得る。センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８がまた、制御モジュール１０４に連結され得る。従って、光学的センサ３２６および３２８は、チューブ状態チェックの間に制御モジュール１０４にデジタル論理信号を通信し得る。さらに以下で論議されるように、制御モジュール１０４は、センサモジュール３２４からの信号の受信に応答して種々のアクションを実施し得る。この例における制御モジュール１０４は、図１を参照して上記で論議された制御モジュール１０４であり得る。

ここで図７を参照して、チューブ状態チェック手順を含む細胞調製方法のための例示の-方法ステップのフローチャート４００が示される。このチューブ状態チェックは、遠心分離機チューブが、細胞調製プロセスのために存在し、充填され、そして自由にスイングしていることを確実にする。この例では、自動化遠心分離機装置の感知モジュールが、チューブ状態チェックが満たされているか否かを決定するために、自動化遠心分離機装置中の遠心分離機チューブの位置をモニターする。

オペレータは、自動化遠心分離機装置をセットアップし、そして図４を参照して上記で論議されたように、細胞調製手順（ステップ４０２）を開始し得る。一旦、細胞調製手順が開始されると、自動化遠心分離機装置は状態チェック手順（ステップ４０４）を開始し得る。この例では、自動化遠心分離機装置は、最初に、ローターアセンブリのローター上の各チューブ位置にチューブが設置されているか否かを決定するためにチューブ存在チェック（ステップ４０６）を実施する。このチューブ存在チェックは、ローターにおける空きのチューブ位置に細胞溶液を送達することに対して保護する。

チューブ存在チェックに続き、この例における自動化遠心分離機装置は、遠心分離機バランスチェックを実施する（ステップ４０８）。遠心分離機チューブがローターアセンブリからなくなっている場合（例えば、ゼロ、１つ、または３つのチューブがローターアセンブリのローター中に取り付けられている場合）、遠心分離機は、ローターアセンブリおよびチューブが回転されるときアンバランスになり得る。以下でさらに論議されるように、ローターアセンブリは、２つのみの遠心分離機チューブを含み得るが、これらチューブは、バランスのとれた遠心分離を達成するために、ローターアセンブリのローター中に互いに対向して（すなわち、互いに対して１８０度）位置決めされるべきである。この遠心分離機バランスチェックは、バランスのとれた遠心分離を確実にするために、ローターアセンブリのローターが２つの遠心分離機チューブのみを含む場合、この２つの遠心分離機チューブが全く反対のチューブ位置に位置決めされているかことを確実にする。２つの遠心分離機チューブが、隣接するチューブ位置でローターアセンブリに設置されている場合、自動化遠心分離機装置は、この例ではバランスがとれていないと考えられる。バランスのとれた遠心分離を維持することは、遠心分離機の寿命を有利に改善し得る。

バランスチェックの後、この例では、自動化遠心分離機装置は、遠心分離機チューブを充填し得（ステップ４１０）、そして、これらチューブが十分な量の細胞の溶液を含むか否かを決定するために比較的低速度でこれらチューブを回転することにより、充填レベルチェック（ステップ４１２）を実施する。この充填レベルチェックは、適切な量の細胞溶液が処理され、その結果、不十分な細胞溶液を有することにより、そして細胞数が少なすぎるためにアッセイが防げられることがないことを確実にする。

充填レベルチェックの後、この例では、自動化遠心分離機装置は、上記で論議されたように比較的高速度でチューブを回転することにより細胞をペレット化する（ステップ４１４）。比較的高速度で遠心分離機チューブを回転することは、遠心分離機チューブを、回転の間にローターアセンブリから離して旋回させる。回転の間に、チューブは旋回ピンの周りで旋回し、垂直配向から、ローターアセンブリに対して角度をなす配向に移動する。用語「垂直配向」はまた、垂直に近い（または実質的に垂直）ことをいうことが理解される。遠心分離機チューブの回転が遅くなり停止するにつれて、チューブがローターアセンブリに向かって旋回して戻り、垂直配向に戻る。細胞ピペッター（図１７）が遠心分離機チューブから上清液を吸引するために、これらチューブは、細胞ピペッターを受容するために垂直位置に配向されるべきである。

いくつかの状況では、遠心分離機チューブは、細胞ペレット化の後に、角度をなす配向のままであり得る。換言すれば、遠心分離機チューブは、細胞ペレット化の後に、垂直または垂直に近い配向に戻らないかも知れず、そして細胞ピペッターを受容するためには適正に配向されていないかも知れない。従って、この例では、自動化遠心分離機装置は、細胞ペレット化の後、各チューブが垂直または垂直に近い位置に戻ったか否かを決定するために垂直チェック（ステップ４１６）への戻りを実施する。

垂直に戻らない遠心分離機チューブは、ローターアセンブリを、特に、カラーおよびチューブのピボットピンを掃除する必要性を示し得る。さらに、垂直に戻らない遠心分離機はまた、チューブが、細胞ペレット化の間に、角度をなす配向に向かって旋回することに代わって、細胞の乏しいペレット化を生じ得る、垂直配向のままであるリスクにあることを示し得る。

自動化遠心分離機装置が、遠心分離機チューブの各々が首尾良く垂直配向に戻ったことを決定する場合、これらチューブは、上清液を吸引するために（ステップ４１８）細胞ピペッターを信頼性よく受容し得る。一旦、上清液がチューブから吸引されると、緩衝液がチューブに添加され得（ステップ４２０）、そしてペレット化された細胞は、緩衝液に再懸濁され得る（ステップ４２２）。一旦、細胞が緩衝液中に再懸濁されると、細胞の溶液がチューブから吸引され得る（ステップ４２４）。

ここで図８を参照して、チューブ存在チェック手順の例示の方法ステップのフローチャート４５０が示される。このチューブ存在チェックは、細胞取扱いユニットがローターアセンブリのチューブ位置に細胞の溶液を分与する前に、オペレータが自動化遠心分離機装置のローターアセンブリに遠心分離機チューブを設置したか否かを決定する。このチューブ存在チェックは、チューブ存在チェックの間に自動化遠心分離機装置３００の操作を示す図９Ａおよび９Ｂをさらに参照して論議される。チューブ存在チェック（ステップ４５２）の開始の後、自動化遠心分離機装置３００は、第１のチューブ３５０をインデックス位置３３６まで回転する（ステップ４５４）。上記のように、インデックス位置３３６まで回転された遠心分離機チューブは、チューブインデックス位置にある遠心分離機チューブと称され得る。自動化遠心分離機装置３００は、回転アクチュエータ（図６中の３４０）を起動することによりチューブ３１０および３５０を回転することができ、そして回転アクチュエータ３４０のモータ（図６中の３４６）がローターアセンブリ３０４のローター３０８を回転し、図９Ａおよび９Ｂに例示によって示されるように、インデックス位置３３６に第１のチューブ３５０を置く。

この例では、ローターアセンブリ３０４のローター３０８は、上記のように４つのチューブ位置を含む。図９Ａ中の自動化遠心分離機装置３００の平面図に見られるように、この例では、ローター３０８の４つのチューブ位置は、ローター３０８の４つの辺にそれぞれ位置するとして記載され得る。この例では、ローター３０８のチューブ位置は、チューブ位置Ｐ_１、チューブ位置Ｐ_２、チューブ位置Ｐ_３、およびチューブ位置Ｐ_４として識別される。図９Ａに例によって示されるように、チューブ位置Ｐ_１は、現在のインデックス位置のチューブ位置であり、そしてチューブ位置Ｐ_１に位置する遠心分離機チューブ３５０は、現在インデックス位置にある遠心分離機チューブである。

第１のチューブ３５０がインデックス位置３３６にあって、センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８の１つ（例えば、上部光学的センサ３２６）が、インデックス位置３３６にレーザビーム３３２を向ける（ステップ４５６）。この例では、センサモジュール３２４の上部光学的センサ３２６が、チューブ存在チェックの間に用いられる。従って、上部光学的センサ３２６は、インデックス位置３３６にレーザビーム３３２を方向付け、遠心分離機チューブがインデックス位置に存在するか否かを決定し得る。遠心分離機チューブがインデックス位置３３６に存在する場合、光学的センサ３２６および３２８の１つ（この例では上部光学的センサ３２６）は、測定フィードバックを得ることができる（ステップ４５８）。図９Ａおよび９Ｂに見られるように、インデックス位置にあるチューブ３５０は、インデックス位置Ｐ_１に存在する。上記のように、光学的センサ３２６および３２８は反射レーザセンサであり得、そして図９Ａおよび９Ｂに見られるように、インデックス位置３３６に位置する割り当てられた遠心分離機チューブ３５０は、上部光学的センサ３２６からのレーザビーム３３２の経路に位置される。この例では、遠心分離機チューブ３５０はインデックス位置にあるチューブ位置Ｐ_１に存在するので、インデックス位置３３６に向けられたレーザビーム３３２は、チューブ３５０から反射して上部光学的センサ３２６に戻る。

２つのセンサ３２６および３２８を有するセンサモジュール３２４が、図９Ａおよび９Ｂに例示によって示されてはいるが、チューブ存在チェックを実施するために１つのセンサを有するセンサモジュールが選択的に採用され得ることが理解される。現在の例では、センサモジュール３２４の上部光学的センサ３２６を採用して、レーザビーム３３２をインデックス位置３３６に向け、上部光学的センサ３２６からのレーザビーム３３２が、インデックス位置にある遠心分離機チューブ３５０の上端部３３８近傍のチューブ３５０の最も広い部分に突き当たる。このようにして、センサモジュール３２４の上部センサ３２６は、このインデックス位置にある遠心分離機チューブ３５０が、上部光学的センサ３２６からのレーザビームがインデックス位置にある遠心分離機チューブ３５０に中央線からわずかに離れて突き当たる垂直配向からわずかにオフセットしているときでさえ、インデックス位置にあるチューブ位置（この例ではＰ_１）でインデックス位置にある遠心分離機チューブ３５０の存在を検出し得る。上記のように、しかしながら、１つの光学的センサを有するセンサモジュール３２４が選択的に採用されてチューブ存在チェックを実施し得、そこでは、この光学的センサは、より広い上端部３３８よりはむしろ、インデックス位置にある遠心分離機チューブ３５０の下端部３３２の近傍にレーザビームを向ける。

遠心分離機チューブが、インデックス位置のチューブ位置、図９Ａ中のＰ_１に存在しない場合（ステップ４６０）、光学的センサ３２６は、チューブがインデックス位置にあるチューブ位置、図９Ａ中のＰ_１に存在しないことの表示に対応する論理信号を発生し、そしてこの論理信号を制御モジュール（図６中の１０４）に伝達する（ステップ４６２）。チューブがインデックス位置であるチューブ位置、図９Ａ中のＰ_１にないことの信号の受信に応答して、制御モジュール１０４は、チューブがインデックス位置であるチューブ位置、図９Ａ中のＰ_１にないことを示す不在チューブフラグをローターアセンブリ３０４のローターに対してセットし得る（ステップ４６４）。上記のように、ローターアセンブリ３０４は、バランスのとれた遠心分離機装置３００を確実にするために、チューブがローター３０８の対向する側に互いに対向して位置決めされている場合に、２つのみの遠心分離機チューブ３１０を含み得る。従って、制御モジュール１０４は、制御モジュール１０４が、ローター３０８が互いに対向して位置決めされる２つのチューブ３１０を含むか否かを決定するまで過失状態を指摘するために待ち得る。

この例では、さらなるチューブ位置、Ｐ_２−Ｐ_４が、チェックされるべきままである場合（ステップ４６６）、自動化遠心分離機装置３００は、次のチューブ位置、例えば、チューブ位置Ｐ_２をインデックス位置３３６まで回転し得る（ステップ４６８）、自動化遠心分離機装置３００は、次いで、チューブが、次のチューブ位置、例えば、チューブ位置Ｐ_２に存在するか否かを決定するために、ステップ４５６−４６０を繰り返し得る。

チェックするためのさらなるチューブ位置がない場合（ステップ４６６）、制御モジュール１０４は、１つ以上の不在チューブフラグがセットされているか否かを決定し得る（ステップ４７０）。不在チューブフラグがセットされていない場合は、光学的センサ３２６が、これ例では、チューブ位置Ｐ_１−Ｐ_４の各々でチューブ３１０および３５０を検出したことになる。従って、制御モジュール１０４は、ローターアセンブリ３０４が適切に装填されたことを決定し得、そしてチューブ充填チェックが開始され得る（ステップ４７２）。

不在チューブフラグがセットされいする場合、これは、ローターアセンブリ３０４が適正に装填されなかったことを示し得る。この例では、ローターアセンブリ３０４は、適正に装填されておらず、ローターアセンブリ３０４は４つより少ないチューブ３１０を含み得る。この例では、ローターアセンブリ３０４はまた、適正に装填されておらず、ローターアセンブリ３０４は互いに対向して位置決めされていない２つのチューブ３１０を含み得る。ローターアセンブリ３０４がバランスされているか否かを決定するために、ローターアセンブリ３０４は、遠心分離機装置３００がバランスされているか否かを決定するためのバランスチェックを実施し得る（ステップ４７４）。

遠心分離機装置３００のバランスがとれていない場合（ステップ４７６）、制御モジュール１０４は、ローターアセンブリ３０４が適正に装填されていなかったことを決定し、そして過失状態を示す（ステップ４７８）。制御モジュール１０４は、図１を参照した上記で述べたディスプレイデバイス上にエラーメッセージを表示することにより、オペレータに過失状態を示し得る。エラーメッセージの受容に応答して、オペレータは、ローターアセンブリ３０４をチェックし、そして、この例では、遠心分離機チューブがない任意のチューブ位置Ｐ_１−Ｐ_４にそれぞれの遠心分離機チューブ３１０を設置し得る。次いで、オペレータは、チューブ存在チェックを再び開始し得る。

遠心分離機装置３００のバランスがとれている場合（ステップ４７６）、すなわち、制御モジュール１０４が、ローターアセンブリ３０４が互いに対向して位置決めされた２つのチューブ３１０を含むことを決定する場合、制御モジュール１０４は、ローターアセンブリ３０４が適正に装填されたことを決定し得、そしてチューブ充填レベルチェックが開始され得る（ステップ４７２）。

図１０を参照して、チューブバランスチェック手順のための例示の方法ステップのフローチャート５００が示される。このチューブバランスチェックは、バランスのとれた構成でローターアセンブリ３０４中にオペレータが遠心分離機チューブ３１０を設置したか否かを決定する。図８を参照して上記で述べたように、制御モジュール（図６中１０４）は、不在チューブフラグがセットされているとき、チューブバランスチェック（ステップ５０２）を開始し得る。不在チューブフラグがセットされている場合、少なくとも１つのチューブ３１０が、ローターアセンブリ３０４にない。換言すれば、ローターアセンブリ３０４は、不在チューブフラグがセットされているとき、３つまたはより少ないチューブ３１０を含む。ローターアセンブリ３０４が２つのチューブ３１０を含む場合であっても、遠心分離機装置３００は、それにもかかわらず、チューブ３１０が互いに対向して位置決めされている場合バランスがとれている。

従って、２つのチューブ３１０が存在する場合（ステップ５０４）、制御モジュール１０４は、チューブ３１０が互いに対向して位置決めされているか否かを決定する（ステップ５０６）。チューブ３１０が互いに対向して位置決めされている場合、制御モジュール１０４は、遠心分離機装置３００はバランスがとれていることを決定し得る（ステップ５０８）。その結果、この例では、制御モジュール１０４は、ローターアセンブリ３０４のローター３０８が互いに対向して位置決めされる２つのチューブ３１０を含み、過失状態を示さなくてもよい。図９Ａを戻って参照し、制御モジュール１０４（図６中の１０４）は：ａ）ローター３０８がチューブ位置Ｐ_１およびＰ_３に２つのチューブ３１０を含む；またはｂ）ローター３０８がチューブ位置Ｐ_２およびＰ_４に２つのチューブ３１０を含むとき、バラスンがとれていることを決定する。制御モジュール１０４は、ローター３０８が２つのチューブ３１０を：ａ）チューブ位置Ｐ_１およびチューブ位置Ｐ_２；チューブ位置Ｐ_２およびチューブ位置Ｐ_３；ｃ）チューブ位置Ｐ_３およびチューブ位置Ｐ_４；またはｄ）チューブ位置Ｐ_４およびチューブ位置Ｐ_１に含むとき、遠心分離機装置３００はバランスがとれていないことを決定する。

不在チューブフラグがセットされており、そして２つのチューブ３１０が存在しない場合（ステップ５０４）、ローターアセンブリ３０４には、１つのチューブ３１０、３つのチューブ、または４つのチューブがなく、そして制御モジュール１０４は、遠心分離機装置３００がバランスがとれていないことを決定し得る（ステップ５１０）。上記で説明したように、遠心分離機装置３００のバランスがとれていない場合、制御モジュール１０４は、過失状態を示すためにエラーメッセージを表示し得る。

遠心分離機チューブ３１０が存在し、かつ遠心分離機装置３００のバランスがとれているとき、細胞ピペッター（図１７）は、チューブ３１０中の細胞の溶液を分与し得る。自動化遠心分離機装置３００は、充填レベルチェックを実施し遠心分離機チューブ３１０が十分な量の細胞の溶液を含むことを確実にし得る。流体充填レベルチェックはまた、一致しないで充填された遠心分離機チューブ３１０によって引き起こされる非バランスに対して保護するためのバランスチェックとして供され得る。図１１を参照して、充填レベルチェック手順の例示の方法ステップのフローチャート５２０が示される。この充填レベルチェックは、遠心分離機チューブが、細胞ペレット化が実施される前に細胞懸濁物の十分な量を含むか否かを決定する。この充填レベルチェック手順は、この充填レベルチェックの間に自動化遠心分離機装置３００の操作を例示する図１２Ａおよび図１２Ｂをさらに参照して論議される。

細胞ピペッタ（図１７）がチューブ３５１および３５２中に細胞の溶液を分与した後、自動化遠心分離機装置３００は、充填レベルチェックを開始し得る（ステップ５２２）。自動化遠心分離機装置３００は、比較的低速度（ステップ５２４）、すなわち、細胞をペレット化するために用いられるであろうより遅い速度で遠心分離機チューブ３５１および３５２を回転し得る。比較的低速度は、例えば、１分間あたりほぼ３０−５０回転であり得る。

ローターアセンブリ３０４が比較的低速度で回転するとき、遠心分離機チューブ３５２は、遠心分離力がチューブ３５２の下端部３２２を垂直配向に対して角度をなす配向に外方に引くので、ローターアセンブリ３０４に対して角度をなす配向に旋回し得る。比較的遅い速度のスピンの間のチューブ３５２の角度のある配向は、低速度の「フライアウト（ｆｌｙｏｕｔ）」位置３５４と称され得る。この低速度フライアウト位置３５４は、例えば、垂直配向に対して約１０゜であり得る。遠心分離機チューブ３５２は、チューブ３５２が十分な量の細胞溶液を含む場合にこの低速度フライアウト位置３５４に旋回する。遠心分離機チューブ、例えば、遠心分離機チューブ３５１が十分な量の細胞溶液を含まない、すなわち、十分な量より少ない細胞溶液を含む場合、チューブ３５１は、図１２Ａおよび図１２Ｂに見られるように、垂直位置にのこる。換言すれば、遠心分離機チューブ３５１および３５２の充填レベルは、遠心分離機チューブ３５１および３５２が、低速度スピンの間にフライアウト位置３５４に旋回するか否かを決定し得る。遠心分離機チューブ、例えば、遠心分離機チューブ３５２が十分な量の細胞溶液を含む場合、遠心分離機チューブ３５２は、低速度スピンの間にフライアウト位置３５４まで外方に旋回する。遠心分離機チューブ、例えば遠心分離機チューブ３５１が十分な量より少ない細胞溶液を含むように充填される（またはまったく充填されない）場合、遠心分離機チューブ３５１は、低速度スピンの間にフライアウト位置３５４まで外方に旋回できない。比較的低速度のスピンの間に低速度フライアウト位置３５４まで旋回する遠心分離機チューブ３５２を生じる細胞溶液の十分な量は、例えば、約４．５ミリリットル（ｍｌ）であり得る。しかし、細胞溶液の代替の容量が細胞溶液の十分な量であると選択的に考えられ得ることが理解される。さらに、低速度フライアウト位置３５４は、垂直配向に対する代替の角度に選択的に対応し得る。比較的より多い容量の細胞溶液が細胞溶液の十分量であると考えられる場合、低速度フライアウト位置３５４は、垂直配向に対して比較的より大きい角度に対応し得；そして比較的より少ない量の細胞溶液が十分な量の細胞溶液であると考えられる場合、低速度フライアウト位置３５４は、垂直配向に対して比較的より小さな角度に対応し得る。さらに、センサモジュール３２４は、低速度スピンの間にこれらの代替の角度に旋回しない遠心分離機チューブ３５１を検出するために、インデックス位置３３６に対して側方に調節され得る。

図１２Ａおよび図１２Ｂに例として示されるように、遠心分離機チューブ３５２の３つがフライアウト位置３５４に配向され、その一方、１つの遠心分離機チューブ３５１が垂直配向にのこっている。この例では、チューブ位置Ｐ_１、Ｐ_２、およびＰ_４にある遠心分離機チューブ３５２がフライアウト位置３５４に配向され、そしてチューブ位置Ｐ_３にある遠心分離機チューブ３５１が垂直配向にのこっている。センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８の１つが、充填レベルチェックを実施するために用いられる。この例では、センサモジュール３２４の下部光学的センサ３２８が、充填レベルチェックを実施するために用いられる。センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８の１つ（例えば、下部光学的センサ３２８）が、自動化遠心分離機装置３００のインデックス位置３３６に向かってレーザビーム３３４を方向付ける。チューブ３５１および３５２が比較的低速度スピンの間に回転するとき、下部光学的センサ３２８は、遠心分離機チューブ３５１および３５２がインデックス位置３３６を通って進行するとき、測定フィードバックを得る（ステップ５２８）。

図１２Ａおよび図１２Ｂに示されるように、フライアウト位置３５４にある遠心分離機チューブ３５２は、チューブ３５２がインデックス位置３３６を通って進行するとき、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４の経路を横切らない。換言すれば、そして図１２Ｂに例として示されるように、フライアウト位置３５４にあるチューブ３５２の角度をなす配向は、チューブ３５２がインデックス位置３３６を通過するとき、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４を逃させる。結果として、チューブ３５２は、レーザビーム３３４を、下部光学的センサ３２８に戻るように反射せず、すなわち、チューブ３５２は、チューブ３５２がフライアウト位置３５４にあるとき、下部光学的センサ３２８を誘発しない。

垂直配向にある遠心分離機チューブ３５１は、しかしながら、図１２Ｂに見られるように、チューブ３５１がインデックス位置３３６を通過するとき、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４の経路を横切る。換言すれば、垂直配向にあるチューブ３５１は、チューブ３５１がインデックス位置３３６を通過するとき、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４を逃さない。結果として、チューブ３５１は、チューブ３５１がインデックス位置３３６を通過するとき、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４を下部光学的センサ３２８に反射して戻し、それによって、下部光学的センサ３２８を誘発する。

下部光学的センサ３２８がチューブ、例えば、遠心分離機チューブ３５１を検出する場合（ステップ５３０）、下部光学的センサ３２８は、チューブ３５１がインデックス位置３３６で検出されたことの表示に対応する論理信号を発生し得、そして論理信号を制御モジュール（図６中の１０４）に伝達する。この制御モジュール１０４は、それ故、チューブ、例えば、遠心分離機チューブ３５１の１つが細胞溶液で適正に充填されていないことを決定し得（ステップ５３４）、そして過失状態を示す（ステップ５３６）。制御モジュール１０４は、この過失状態を、オペレータに図１を参照して上記で述べたディスプレイデバイス上にエラーメッセージを表示することにより示し得る。このエラーメッセージの受容に応答して、オペレータは、ローターアセンブリ３０４上の遠心分離機チューブ３５１および３５２をチェックし得、そして十分な量の細胞溶液を有さない任意のチューブ、この例では、遠心分離機チューブ３５１を充填する。次いで、オペレータは、チューブ状態チェックを再び開始し得る。

光学的センサ３２８が、比較的遅い速度のスピンの間にインデックス位置３３６でチューブを検出しない場合（ステップ５３０）、制御モジュール１０４は、各遠心分離機チューブ、例えば、図１２Ａおよび図１２Ｂ中の遠心分離機チューブ３５２が、十分な量の細胞溶液を含むことを決定し得（ステップ５３８）、そして細胞ペレット化手順が開始され得る（ステップ５４０）。細胞ペレット化の間に、ローターアセンブリ３０４、および遠心分離機チューブ３５１および３５２は比較的高速度で回転され得る。細胞ペレット化速度は、例えば、約５００ｒｐｍ〜約２，０００ｒｐｍの範囲であり得、そして通常の細胞ペレット化速度は、例えば、ほぼ１，６２０ｒｐｍであり得る。

細胞ペレット化の後、自動化遠心分離機装置３００は、垂直チェックへの戻りを実施し、遠心分離機チューブ３５２の各々がフライアウト位置３５４から垂直配向に戻ったことを確実にする。図１３を参照して、垂直への戻りチェック手順のための例示の方法ステップのフローチャート５５０が示される。垂直チェックへの戻りは、遠心分離機チューブが細胞ペレット化の後に実質的に垂直配向に戻ったか否かを決定する。垂直への戻りチェック手順は、垂直チェックへの戻りの間に、自動化遠心分離機装置３００の操作を示す図１４Ａおよび図１４Ｂをさらに参照して論議される。

細胞ペレット化の後、自動化遠心分離機装置３００は、垂直への戻りチェックを開始し得る（ステップ５５２）。自動化遠心分離機装置３００は、ローターアセンブリ３０４のローター３０８にある第１のチューブ位置、例えば、チューブ位置Ｐ_１をインデックス位置３３６に割り当てる（ステップ５５４）。センサモジュール３２４の光学的センサ３２６および３２８の１つ（例えば、下部光学的センサ３２８）は、インデックス位置３３６にレーザビーム３３４を方向付け（ステップ５５６）、イッデックス位置であるチューブ位置にある遠心分離機チューブが、実質的に垂直配向に戻った否かを決定する。この例では、チューブ位置Ｐ_１に存在する遠心分離機チューブ３６１が、インデックス位置にある遠心分離機チューブである。遠心分離機チューブがインデックス位置３３６に存在する場合、光学的センサ３２８は、レーザビーム３３４が光学的センサ３２８に向かって反射されて戻るとき、測定フィードバックを得る（ステップ５５８）。充填レベルチェックと同様に、この例では、自動化遠心分離機装置３００は、下部光学的センサ３２８を用いて垂直への戻りチェックを実施する。

細胞ペレット化の後に、実質的に垂直配向に戻らず、それに代わって、フライアウト位置３５４にのこる遠心分離機チューブ、例えば、図１４Ａおよび図１４Ｂ中の遠心分離機チューブ３５１は、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４の経路を横切らない。図１４Ａおよび図１４Ｂに例として示されるように、遠心分離機チューブ３６２の３つが、細胞ペレット化の後に垂直配向に戻り、そして１つの遠心分離機チューブ３６１がフライアウト位置３５４にのこる。図１４Ｂに見られるように、フライアウト位置３５４にある遠心分離機チューブ３６１は、チューブ３６１の角度をなす配向に起因してインデックス位置３３６で下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４を逃す。いくつかの例示の実施では、例えば、約１０゜垂直軸から離れて配向されている遠心分離機チューブは、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４を逃し、それ故、チューブが実質的に垂直配向に戻らなかったことを示す。

垂直配向に戻った遠心分離機チューブ、例えば遠心分離機チューブ３６２は、図１４Ｂに見られるように、下部光学的センサ３２８からのレーザビーム３３４の経路を横切る。結果として、レーザビーム３３４はインデックス位置３３６で垂直に配向されたチューブ３６２から反射し、それによって、光学的センサ３２８を誘発する。

チューブ３６２がインデックス位置３３６で検出される場合（ステップ５６０）、すなわち、インデックス位置３３６でチューブ３６２が光学的センサ３２８を誘発する場合、光学的センサ３２８はチューブ３６２が検出されたことを示す論理信号を生じ、そしてこの論理信号を制御モジュール（図６中の１０４）に伝達し得る（ステップ５６２）。この光学的センサ３２８からの論理信号の受信に応答して、制御モジュール１０４は、インデックス位置３３６にあるチューブ３６２が垂直配向に戻ったことを決定し得る（ステップ５６４）。ローター３０８がチェックするためのさらなるチューブ位置、例えば、チューブ位置Ｐ_２−Ｐ_４を含む場合（ステップ５６６）、自動化遠心分離機装置３００は、ローター３０８の次のチューブ位置、例えば、チューブ位置Ｐ_２にまで回転することができ（ステップ５６８）、そして次のチューブ位置にある遠心分離機チューブが垂直配向に戻ったか否かを決定するためにステップ５５６−５６０を繰り返す。

チューブ、例えば、遠心分離機チューブ３６１がインデックス位置３３６で検出されない場合（ステップ５６０）、すなわち、インデックス位置３３６にあるチューブ３６１が光学的センサ３２８を誘発しない場合、制御モジュール１０４は、光学的センサ３２８から論理信号を受けない。制御モジュール１０４が光学的センサ３２８から論理信号を受けない場合、制御モジュール１０４は、インデックス位置３３６にあるチューブ３６１が垂直配向に戻らなかったことを決定し得（ステップ５７０）、そして過失状態を示す（ステップ５７２）。上記で論議したように、制御モジュール１０４は、図１を参照して上記で述べたディスプレイデバイス上にエラーメッセージを表示することにより、オペレータに過失状態を示し得る。エラーメッセージの受容に応答して、オペレータは、ローターアセンブリ３０４をチェックし得、そして垂直位置に戻らなかった任意の遠心分離機チューブ、例えば、遠心分離機チューブ３５１を調節する。

チェックするためのローター３０８のさらなるチューブ位置がない場合（ステップ５６６）、自動化遠心分離機装置３００は、チューブから上清液の吸引を開始し得る（ステップ５７４）。一旦、上清液がチューブ３６１および３６２から除去されると、自動化遠心分離機装置３００は、これらチューブからペレット化された細胞の吸引を開始し得る（ステップ５７６）。この自動化遠心分離機装置３００は、各チューブ３６１および３６２が垂直配向に戻ったことをチェックしたので、細胞ピペッター（図１７）がチューブ３６１および３６２中に受容される可能性が有利なことに改善される。

ここで図１５Ａおよび１５Ｂを参照して、ローターアセンブリ６００の実施の例が示される。ローターアセンブリ６００のローター６０２は、ローターアセンブリ６００の回転の間に、遠心分離機チューブ３１０の外方への旋回角度を制限するための旋回制限器６０４を含む。従って、この旋回制限器６０４は、細胞をペレット化するための比較的高速度スピンの間に遠心分離機チューブ３１０が水平位置にフライアウトすることを防ぐ。各カラー窪み６０６は旋回制限器６０４をそれぞれ含み得、カラー窪み６０６中に位置するカラー６０８、およびカラー６０８中に支持されるそれぞれの遠心分離機チューブ３１０の旋回角度を制限する。カラー６０８および対応する遠心分離機チューブ３１０の旋回角度を制限することにより、自動化遠心分離機装置（図５中の３００）のスピンエンベロープ（すなわち、専有面積）は、有利なことに最小になる。

図１５Ａに例によって示されるように、ローター６０２の各チューブ位置（この例ではＰ_１−Ｐ_４）は、それぞれの旋回制限器６０４を含む。カラー窪み６０６に存在するカラー６０８は、ローターアセンブリ６００の回転の間に旋回制限器６０４を係合し、そしてこの旋回制限器６０４は、カラー６０８およびこのからー６０８に固定された遠心分離機チューブ３１０の旋回角度を制限する。この例では、旋回制限器６０４は、半球形のカラー窪み６０６に位置する一対の機械的停止部材６１０を含む。この例におれるこれら停止部材６１０は、ローター６０２の外側エッジ、すなわち、カラー窪みの前部に位置決めされる。この例では、旋回制限器の停止部材６１０は、図１５Ａに例によって示されるように、カラー窪み６０６の壁６１２から離れ、このカラー窪み６０６のそれぞれの端部で互いに向かい、かつ互いに平行であるように突き出す。その他の実施では、各カラー窪み６０６に１つの停止部材が含まれ得る。

この例では、旋回制限器６０４の停止部材６１０は、各々が、カラー６０８の軸が垂直配向にあるとき、すなわち、ローターアセンブリ６００が回転していないとき、その上にカラー６０８の下部表面６１６が位置決めされる上部踊り場（ｌａｎｄｉｎｇ）を含む。旋回制限器６０４の停止部材６１０は、この例では、図１５Ａに例によって示されるように、カラー窪み６０６中に下向きに、そしカラー窪み６０６の後部に向かって傾斜する面取り部６１８をまた含む。カラー６０８が旋回ピン６２０の周りを旋回するとき、カラー６０８の下部表面６１６は、面取り部６１８に向かって旋回する。

図１５Ｂは、遠心分離機チューブ３１０のセットと作動する図１５Ａのローターアセンブリ６００の例示の実施を示す。図１５Ｂに見られるように、カラー６０８は、回転の間に旋回ピン６２０の周りを旋回する、カラー窪み６０６中にそれぞれ固定される。カラーの下部表面６１６は、旋回制限器６０４の停止部材６１０のそれぞれの面取り部６１８と係合する。面取り部６１８と接触することにより、カラー６０８とチューブ３１０とはさらにもはや旋回できない。このようにして、旋回制限器６０４は、カラー６０８およびカラー６０８にそれぞれ固定されたチューブ３１０の旋回角度を制限する。旋回制限器６０４の停止部材６１０の面取り部６１８は、カラー６０８の旋回角度を、例えば、約３２度〜約４０度に制限し得る。いくつかの実施では、旋回制限器６０４は、カラー６０８の旋回角度を約３８度に制限し得、それによって直径１１１ｍｍの最大スピンエンベロープを生じる。この比較的小さいスピンエンベロープは、有利なことに、自動化遠心分離機装置（図５中の３００）が、自動化された細胞懸濁物のデッキ上調製のための自動化された高スループット電気生理学的測定システム（図１中の１００）のプロセスデッキ（図１中の１０２）に設置され得ることを可能にする。

ここで図１６を参照して、自動化遠心分離機装置（図５中の３００）と組み合わせて用いられ得る遠心分離機チューブ７００の実施の例が、前部の断面図で示される。この遠心分離機チューブ７００は、内部ポケット７０２を含み、ここにペレット化された細胞を、細胞ペレット化手順の間に収集し得る。このポケットを有する遠心分離機チューブ７００は、有利なことに、ペレット化された細胞が、細胞ピペッターがチューブ７００中に受容され上清液を吸引するとき、細胞ピペッター（図１７）によって損傷されるか、または破壊されることから保護する。ペレット化された細胞が遠心分離機チューブ７００のポケット７０２中に収集され、そしてそれ故、細胞ピペッターから離れて位置決めされるので、細胞ピペッターがペレット化された細胞と接触するようになる可能性が、特に、遠心分離機チューブ７００が、垂直配向に正確に配向されていない場合に低減される。

図１６中のポケットを有する遠心分離機チューブ７００の前部断面図に見られるように、遠心分離機チューブ７００は、円筒形の上部分７０４、円錐形の下部分７０６、および通常、半球形の底部分７０８を含む。ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内壁表面７１０は、内径ｄを規定する。ポケットを有する遠心分離機チューブ７００はまた、円筒形の上部分７０４の頂部を囲む環状リム７１２を含む。ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の円錐形の下部分７０６は、図１６に見られるように、円筒形の上部分７０４と半球形の底部分７０８との間でテーパー状である。遠心分離機チューブ７００の下部分７０６は、ペレット化された細胞を収集する内部ポケット７０２を含む。この遠心分離機チューブ７００の下部分７０６は、選択的に代替の形状を示し得る。

チューブ７００の円筒形の上部分７０４において、内壁表面７１０の輪郭は、この内壁表面７１０が実質的に垂直である上部垂直領域７１４を画定する。従って、上部垂直領域７１４における、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内径ｄは実質的に均一である。このチューブ７００の円錐形の下部分７０６において、ポケット７０２は、この例では、垂直遷移領域７１６、下部テーパー状領域７１８、および垂直遷移領域７１６と上部テーパー状領域７２０との間のインターフェースによって画定される。図１６に見られるように、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の垂直遷移領域７１６は、この例では、チューブ７００の円錐形の下部分７０６を分割し、上部テーパー状領域７２０および下部テーパー状領域７１８を形成する。従って、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内壁表面７１０の輪郭は、上部垂直領域７１４と垂直遷移領域７１６との間でテーパー状である。結果として、上部テーパー状領域７２０にあるポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内径ｄはまた、上部垂直領域７１４から垂直遷移領域７１６に向かってテーパー状である。同様に、下部テーパー状領域７１８にあるポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内壁表面７１０の輪郭、および下部テーパー状領域７１８にあるチューブ７００の内径は、垂直遷移領域７１６からチューブ７００の半球形の底部分７０８に向かって下方にテーパー状である。

上部垂直領域７１４と同様に、垂直遷移領域７１６における内壁表面の輪郭は、垂直または実質的に垂直であり得る。例えば、垂直遷移領域７１６における内壁表面７１０の輪郭は、上部テーパー状領域７２０および下部テーパー状領域７１８のそれぞれの角度とは異なっている（垂直軸に対して）小さな角度でわずかにテーパー状であり得る。図示される例では、垂直遷移領域７１６におけるポケットを有する遠心分離機チューブ７００の内径ｄは、通常、その上の任意の内径ｄより大きくはなく、そしてその下の任意の内径ｄよりは小さくない。換言すれば、垂直遷移領域７１６の内径ｄは、図１６に例によって示されるように、上部テーパー状領域７２０の最も小さい内径ｄに一致し得、そして下部テーパー状領域７１８の最も大きい直径ｄに一致し得る。いくつかの例示の実施においては、垂直遷移領域７１６は、チューブ７００の内部の空洞７２２を形成する鋳型ツールの除去を可能にするために、約１゜の小さな抜き勾配（ｄｒａｆｔ）を有し得る。

図１６にまた見られるように、遠心分離機チューブ７００の壁７２４の厚みは、この例では、チューブ７００の下部分７０６でテーパー状であり、そしてそれ故、チューブ７００の上部分７０４に対してチューブの下部分７０６で比較的より薄い。図１６に例によって示されるように、遠心分離機チューブ壁７２４の厚みは、遠心分離機チューブ７００の下部分７０６の垂直遷移領域７１６でテーパーになり始める。従って、上部垂直領域７１４および上部テーパー状領域７２０における遠心分離機チューブ壁７２４の厚みｔ_１は、この例では、チューブ７００の下部分７０６の下部テーパー状領域７１８中の遠心分離機チューブ壁７２４の厚みｔ_２より相対的により大きい。結果として、下部テーパー状領域７１８は、下部分７０６で遠心分離機チューブ７００の内部を囲むポケット７０２を画定する。例えば、上部垂直領域７１４および上部テーパー状領域７２０における遠心分離機チューブ壁７２４の厚みｔ_１は、約１．０ｍｍであり得、そして下部テーパー状領域７１８における遠心分離機チューブ壁７２４の厚みｔ_２は、約０．７ｍｍであり得る。

その他の実施では、ポケット７０２は、遠心分離機チューブ壁７２４の厚みを変化することを必要としない様式で、または遠心分離機チューブ壁７２４の厚みとは独立である様式で画定され得る。例えば、遠心分離機チューブ７００は、上記に記載され、そして図１６に示されるように、ポケット７０２を画定する内部輪郭を得るように、しかし、壁厚みを変えることなく、チューブ壁７２４を形成する様式で製作され得る。

図１７を参照して、図１６のポケットを有する遠心分離機チューブ７００の拡大した断面図が示される。図１７に見られるように、細胞ペレット化の後に、細胞ピペッター７２６がポケットを有する遠心分離機チューブ７００中に挿入されている。このポケットを有する遠心分離機チューブ７００は、細胞ピペッター７２６を、チューブ７００の実質的に中央近傍のピペッター受容領域７２８中に受容し、細胞ピペッター７２６は、チューブ７００から上清液を吸引し得る。ペレット化された細胞７３０は、図１７に見られるように遠心分離機チューブ７００のポケット７０２中に収集され、それ故、ペレット化された細胞７３０をピペッター受容領域７２８から離して位置決めする。このようにして、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００は、有利なことに、細胞ピペッター７２６がチューブ７００中に挿入されるとき、細胞ピペッター７２６が、ペレット化された細胞７３０と接触するようになる機会を最小にする。

図１８に、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の実施の例のポケット７０２の上からの斜視断面図が示される。ポケット７０２の断面７３２は、この例では、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の円錐形下部分７０６中のポケット７０２の位置および構成を示すために強調されている。ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の壁７２４の内部の周りの強調された断面７３２の３６０゜の掃引は、それ故、ポケットを有する遠心分離機チューブ７００の円錐形の下部分７０６の内部を囲むポケット７０２を形成する。

上記実施形態の説明は、図示および説明の目的で提示された。上記説明は、排他的なものではなく、そして本願発明を開示される正確な形態に限定するものではない。改変および変更が、上記説明を考慮して可能であるか、または本発明の実施から獲得され得る。特許請求の範囲およびその均等物が、本発明の範囲を規定する。

Claims (15)

1. 細胞調製手順の間に自動化された遠心分離機装置（３００）をモニターするための自動化方法であって、該方法は：
   該細胞調製手順の間に状態チェックのセットを実施する工程であって、該状態チェックが該自動化された遠心分離機装置のローターアセンブリ（３０４）に設置可能な複数の遠心分離機チューブ（３１０）に関する工程；
   該細胞調製手順の間に該自動化された遠心分離機装置におけるインデックス位置（３３６）を感知モジュール（３０４）でモニターする工程；
   該状態チェックのセットにおける個々の状態チェックが、該インデックス位置（３３６）で位置決め可能な該複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）の状態に基づき満足されているか否かを決定する工程；および
   該状態チェックのセットにおける少なくとも１つの状態チェックが満足されていない決定に応答して過失状態を示す工程、を包含する、方法。
2. 前記状態チェックが、以下：
   遠心分離機（３１０）チューブが、細胞懸濁物が前記ローターアセンブリのチューブ位置に分与される前に該ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれの遠心分離機チューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されたか否かを自動的に決定する遠心分離機チューブ存在チェック；
   前記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞懸濁物中の細胞をペレット化する前に所定量の細胞懸濁物を含むか否かを自動的に決定する充填レベルチェック；および
   該複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離チューブ（３１０）が、細胞ペレット化の後に実質的に垂直な配向に戻ったか否かを自動的に決定する垂直への戻りチェック、の少なくとも１つを含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記遠心分離機チューブ存在チェックが：
   前記ローターアセンブリ（３０４）の個々のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）をインデックス位置（３３６）まで回転する工程であって、該インデックス位置に回転されたチューブ位置が、インデックスチューブ位置である工程；
   感知モジュール（３２４）を用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、該レーザビームが、遠心分離機チューブ（３１０）が該インデックスチューブ位置に設置されているときに反射され、そして該レーザビームが、遠心分離機チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていないときに反射されない工程；
   該レーザビームが反射されるとき、遠心分離機チューブ（３１０）がインデックスチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていることと決定する工程；
   該レーザビームが反射されないとき、遠心分離機チューブ（３１０）がインデックスチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていないことと決定する工程；および
   遠心分離機チューブが該ローターアセンブリ（３０４）の少なくとも１つのチューブ位置に設置されていないことの決定に応答して該遠心分離機チューブ存在チェックが満足されていないことと決定する工程、を含む請求項２に記載の方法。
4. さらに：遠心分離機チューブ（３１０）が前記ローターアセンブリ（３０４）の少なくとも１つのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されていない決定に応答してバランスチェックを実施する工程；
   前記自動化された遠心分離機装置（３００）のバランスがとれているという決定に応答して、前記遠心分離機存在チェックが満足されていることを決定する工程；および
   該自動化された遠心分離機装置のバランスがとれていないという決定に応答して、前記遠心分離機が満足されていないことを決定する工程、を含む、請求項３に記載の方法。
5. 前記充填レベルチェックが：
   前記遠心分離機装置（３００）の前記ローターアセンブリ（３０４）を比較的低速度で回転する工程であって、第１のレベルまで充填され、そして前記ローターアセンブリに設置された前記遠心分離機チューブ（３１０）が垂直配向に対して角度をなす配向に旋回され、そして該第１のレベルより少ない第２のレベルまで充填され、そして該ローターアセンブリに設置された遠心分離機チューブが該角度をなす配向に旋回しない工程；
   感知モジュール（３２４）を用いて前記インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、該第１のレベルまで充填された遠心分離機チューブが、該第１のレベルまで充填された遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射せず、そして該２のレベルまで充填された遠心分離機チューブが、該２のレベルまで充填された遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射する工程；
   遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行する間に該レーザビームを反射しないとき、該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが第１のレベルまで充填されていることを決定する工程；
   遠心分離機チューブが該インデックス位置を通って進行する間に該レーザビームを反射するとき、該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが第２のレベルまで充填されていることを決定する工程；および
   該遠心分離機チューブの少なくとも１つが該第２のレベルまで充填されている決定に応答して、該充填レベルチェックが満足されていないことを決定する工程、を含む、請求項２〜４のいずれか１項に記載の方法。
6. 前記垂直への戻りチェックが；
   前記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された前記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）を前記インデックス位置まで回転する工程；
   感知モジュール（３２４）を用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向ける工程であって、垂直に配向された遠心分離機チューブが、該インデックス位置に位置決めされるとき該レーザビームを反射し、そして非垂直に配向された遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされるとき該レーザビームを反射しない工程；
   該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが、該遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされる間に該レーザビームが反射されるときに、垂直に配向された遠心分離機チューブであると決定する工程；
   該遠心分離機チューブ（３１０）の１つが、該遠心分離機チューブが該インデックス位置に位置決めされる間に該レーザビームが反射されないときに、非垂直に配向された遠心分離機チューブであると決定する工程；および
   該遠心分離機チューブの１つが非垂直に配向された遠心分離機チューブであるとの決定に応答して、垂直位置への戻りチェックが満足されていないと決定する工程を含む、請求項２〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. 細胞調製手順を実施するための自動化された遠心分離機装置（３００）であって、以下：
   複数のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された複数の遠心分離機チューブ（３１０）を支持するように構成されたローターアセンブリ（３０４）であって、該複数のチューブ位置がインデックス位置（３３６）まで回転可能である、ローターアセンブリ；
   状態チェックの間に該インデックス位置（３３６）をモニターするように構成された感知モジュール（３２４）であって、該状態チェックが、該複数の遠心分離機チューブ（３１０）に関する、感知モジュール；を備え、
   ここで、該感知モジュール（３２４）によって発生される論理信号が、該状態チェックが満足されているか否かを自動的に決定するために用いられる、自動化された遠心分離機装置。
8. 前記ローターアセンブリ（３０４）が：
   前記複数のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）を画定するローター（３０８）；
   それぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）で該ローター（３０８）にそれぞれ取り付けられた複数のカラー（３１６）であって、該カラーは該ローターに対して旋回可能であり、そしてそれぞれの遠心分離機チューブ（３１０）を受容かつ支持するように構成された複数のカラー；および
   それぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）で該ローター（３０８）上に位置決めされる複数の旋回制限器（６０４）であって、該旋回制限器は、該カラー（３１６）を該ローターアセンブリ（３０４）の回転の間に所定の旋回角度に制限する、旋回制限器を含む請求項７に記載の自動化された遠心分離機装置。
9. 前記旋回制限器（６０４）の各々が、前記カラー（３１６）を前記所定の旋回角度に制限する一対の機械的停止部材（６１０）を含み、そして
   該一対の機械的停止部材における各々の機械的停止部材が、該カラーが該ローターアセンブリ（３０４）の回転の間に旋回するとき、該カラー（３１６）の下表面と係合する面取り部を含み、該カラーの該所定の旋回角度を超える動きが制限され、ここで、特に、該所定の角度が約３２゜と約４０゜との間である、請求項８に記載の自動化された遠心分離機装置。
10. 前記感知モジュール（３２４）が、以下：
    遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞懸濁物が前記ローターアセンブリのチューブ位置で分与される前に前記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれの遠心分離機チューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置されたか否かを自動的に決定する遠心分離機チューブ存在チェック；
    前記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、該細胞懸濁物中の細胞をペレット化する前に、所定量の細胞懸濁物を含むか否かを自動的に決定する充填レベルチェック；および
    前記複数の遠心分離機チューブの個々の遠心分離機チューブ（３１０）が、細胞ペレット化の後に実質的に垂直配向に戻ったか否かを自動的に決定する垂直への戻りチェックの少なくとも１つを含むことにより、前記状態チェックをモニターするように構成されている、請求項７〜９のいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置。
11. 前記感知モジュール（３２４）が、上部センサ（３２６）および下部センサ（３２８）を含み；該上部センサ（３２６）が遠心分離機装置チューブ存在チェックを実施するように構成され；そして
    該下部センサ（３２８）が充填レベルチェックおよび垂直への戻りチェックを実施するように構成されている、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置。
12. 前記自動化された遠心分離機装置（３００）が：
    前記ローターアセンブリ（３０４）の個々のチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）を前記インデックス位置（３３６）まで回転させること；
    前記感知モジュールを用いて該インデックス位置にレーザビーム（３３２、３３４）を向けることであって、前記遠心分離機装置チューブ（３１０）が前記インデックスチューブ位置に設置されるとき該レーザビームが反射され、そして該遠心分離機装置チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていないとき該レーザビームが反射されないこと；
    該レーザビームが反射されるとき該感知モジュール（３２４）を用いて論理信号を発生することであって、該論理信号が、該遠心分離機チューブが該インデックスチューブ位置に設置されていることを示すこととを行うように構成されている、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置。
13. さらに：比較的遅い速度で前記ローターアセンブリ（３０４）を回転するように構成された回転アクチュエータ（３４０）を備え、該ローターアセンブリに設置された適切に充填された遠心分離機チューブ（３１０）が垂直配向に対して角度をなす配向に旋回し、そして該ローターアセンブリに設置された不適切に充填された遠心分離機チューブが該角度をなす配向に旋回せず、そしてここで：
    該感知モジュール（３２４）が前記インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向けるように構成され、適切に充填された遠心分離機装置チューブが、該適切に充填された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射せず、そして不適切に充填された遠心分離機装置チューブが、該不適切に充填された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置を通って進行するとき該レーザビームを反射し；そして
    該感知モジュール（３２４）が、該レーザビーム（３３２、３３４）が反射されるとき、論理信号を発生するように構成され、該論理信号が、前記複数の遠心分離機チューブの遠心分離機チューブの少なくとも１つが不適切に充填された遠心分離機チューブであることを示す、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置。
14. さらに：前記ローターアセンブリ（３０４）のそれぞれのチューブ位置（Ｐ_１−Ｐ_４）に設置された前記複数の遠心分離機装置チューブのそれぞれの遠心分離機装置チューブ（３１０）を前記インデックス位置（３３６）まで回転するように構成された回転アクチュエータ（３４０）を備え、
    前記感知モジュール（３２４）が、該インデックス位置（３３６）にレーザビーム（３３２、３３４）を向けるように構成され、垂直に配向された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置に位置決めされとき該レーザビームを反射し、そして非垂直に配向された遠心分離機装置チューブが該インデックス位置に位置決めされとき該レーザビームを反射せず；そして
    該感知モジュール（３２４）が、該レーザビーム（３３２、３３４）が反射されるとき論理信号を発生するように構成され、該論理信号が、該複数の遠心分離機装置チューブの遠心分離機装置チューブ（３１０）の少なくとも１つが非垂直配向の遠心分離機チューブであることを示す、請求項７〜１３のいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置。
15. 細胞調製手順の間に自動化された遠心分離機装置（３００）における使用のため、特に、請求項７〜１４にいずれか１項に記載の自動化された遠心分離機装置における使用、または請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法における使用のための遠心分離機チューブ（３１０、７００）であって：
    円筒形の上部分（７０４）；
    該円筒形の上部分に隣接する円錐形の下部分（７０６）；および
    該円錐形の下部分（７０６）に形成された内部ポケット（７０２）を備え、ここで、該内部ポケットが細胞ペレット化の間に細胞を収集し、該細胞が、ピペッターが前記遠心分離機チューブ中に挿入されるとき該ピペッターから離れて位置決めされる、遠心分離機チューブ。