JP2014531966A - 糖リガンドを含む分離材 - Google Patents
糖リガンドを含む分離材 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2014531966A JP2014531966A JP2014524360A JP2014524360A JP2014531966A JP 2014531966 A JP2014531966 A JP 2014531966A JP 2014524360 A JP2014524360 A JP 2014524360A JP 2014524360 A JP2014524360 A JP 2014524360A JP 2014531966 A JP2014531966 A JP 2014531966A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- matrix
- formula
- sugar
- group
- beads
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3268—Macromolecular compounds
- B01J20/3278—Polymers being grafted on the carrier
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
- B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
- B01J20/289—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers bonded via a spacer
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
- B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
- B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
- B01J20/321—Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
- B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
- B01J20/3208—Polymeric carriers, supports or substrates
- B01J20/3212—Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
- B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
- B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
- B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
- B01J20/3251—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising at least two different types of heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulphur
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
- B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
- B01J20/3255—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3268—Macromolecular compounds
- B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
- B01J20/3274—Proteins, nucleic acids, polysaccharides, antibodies or antigens
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3291—Characterised by the shape of the carrier, the coating or the obtained coated product
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
- B01J2220/80—Aspects related to sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
糖−X−R1−(R2−R1)r−(R3−R1)n−Em−F−マトリックス (I)
により表される。
−X−R1−(R2−R1)r−(R3−R1)n−Em−F− (II)
により表される、式(I)の一部を指す。
R3A−R1−(R3−R1)n−E1 (III)
(式中、
R1、R3およびnは先に定義した通りであり、
R3Aは、HOOC−、H2N−、HC≡C−、N3−、NH2−NH−またはOH−を表し、
E1は、−COOH、−CHO、−NH2、−SH、−OH、−N3、−NH−NH2または−C≡CHを表す。)
とをカップリングすることによって調製する。
R3A−R1−E1 (IIIA)
(式中、
R3A、R1およびE1は、先に定義した通りである。)
になる。
F1−マトリックス (IV)
(式中、
F1は、H2N−、N3−、HOOC−、OHC−、NH2−NH−、HC≡C−
またはエポキシを表す。)
と反応させる。
糖−X−R1−(R2−R1)r−Y (V)
(式中、
X、r、R1およびR2は先に定義した通りであり、
Yは、−COOH、−NH2、−C≡CH、−N3、−NH−NH2または−OHを表す。)
と反応させることができる。
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−NH−CO−CH2−(O−C2H4)l−O−CH2−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−CH2−(O−C2H4)l−O−CH2−CONH−、
−X(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−NH−CH2−CH(OH)−、
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−NH−CH2−CH(OH)−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−CH(NH2)−(CH2)2−CO−NH−CH(SH)−CO−NH−CH2−CO−NH−CH2−CH(OH)−、
(式中、
XはO、N、SまたはCH2を表し、
sは、互いに独立して1から10の整数を表し、
lは、1から600の整数を表す。)
を含むリンカーの群から選択されるリンカーを介してマトリックスに連結される。
−O−(CH2)3−NH−CO−(CH2)3−CONH−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
−O−(CH2)3−NH−CO−(CH2)4−CONH−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
−O−(CH2)8−CO−NH−(CH2)2−NH−CO−(CH2)3−CONH−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
−O−(CH2)8−CO−NH−(CH2)2−NH−CO−(CH2)4−CONH−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
−O−(CH2)8−CO−NH−(CH2)2−NH−CO−(CH2)5−NH−CH2−CH(OH)−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
−O−(CH2)3−NH−CO−(CH2)5−NH−CH2−CH(OH)−
によってマトリックスに連結される、式(I)の分離剤を提供する。
エポキシ−官能化マトリックスとグルタル酸との反応および血液型B三糖のカップリング
本発明の分離材を、式(IV)に従ったエポキシ樹脂と式(III)に従ったグルタル酸および式(V)に従った血液型B三糖誘導体(「TsB_AP」)との反応により作製する。エポキシ官能基を担持するさまざまな市販のビーズ、特にTosoh Toyopearls(登録商標)AF−Epoxy650−M、ChiralVision Immobead(商標)350またはMitsubishi ReliZyme(商標)EXE135が、分離材の調製方法に使用可能である。
アミノ官能化マトリックスとアジピン酸との反応および血液型B三糖のカップリング
本発明の分離材を、遊離第1級アミノ官能基を有するマトリックスを使用することによって作製する。従って、アミノ官能基を、ジカルボン酸、例えばアジピン酸に、前処理なしに直接結合可能である。第1級アミノ官能基担持マトリックスとして、市販のビーズTosoh Toyopearls(登録商標)AF−Amino650−Mを使用する。または、中空繊維膜は、アンモニアプラズマ処理によってアミノ官能基により官能化することができる。
エポキシ官能化マトリックスとアミノヘキサン酸との反応および血液型B三糖のカップリング
本発明の分離材を、エポキシ官能基を有するビーズ(Tosoh Toyopearls AF−Epoxy650−M、ChiralVision IB−350またはMitsubishi ReliZyme(商標)EXE135)を使用することによって作製する。従って、アミノ官能基を有する式(III)の化合物を、マトリックスのエポキシ官能基と直接反応させることができる。ここで、式(III)の化合物はアミノヘキサン酸である。アミノ官能基は、エポキシの開環をもたらし、一方同時に、炭素−窒素結合が形成される。第2ステップにおいて、アミノヘキサン酸の残りの遊離カルボキシ官能基を、遊離アミノ官能基を有する式(V)の糖(「TsB_ANA」、実施例2を参照されたい。)に結合させることができる。
アミノ官能化マトリックスと血液型B三糖との反応
本発明の分離材を、アミノ官能基を有するビーズ(例えば、Tosoh Toyopearls(登録商標)AF−Amino650−M)を使用して作製する。ここで、式(V)の糖のカルボキシ官能基を、マトリックス(IV)のアミノ官能基に直接結合させる。
レソルシノール試験
マトリックスに結合された糖、例えば実施例1から4の三糖の量の定量分析を、Monsignyらによるレソルシノール試験(Analytical Biochemistry 175,1988,525−530)によって実施する。3mgの乾燥TsB−ビーズを、200μLの蒸留水、200μLのレソルシノール水溶液(10mLの水中60mgのレソルシノール)および1mLの硫酸75%と一緒にガラス管に入れる。この混合物を撹拌し、90℃に30分間加熱し、その後ウォーターバス中で30分間、光の不在下で冷却し、その後遠心分離機にかける。糖含有量を、溶液の吸光度を503nmでUV/VIS分光計において測定し、ブランクを差し引き、あらかじめ作成した較正曲線に対して結果を評価することにより計算する。
高分子電解質滴定
式(III)の化合物と式(IV)のマトリックスとの間のカップリング反応の分析を、式(III)の化合物のカップリングにより存在する電荷を定量化することによって実施する。使用する高分子電解質は、陽イオン性ポリジアリルジメチル塩化アンモニウム(ポリ−DADMAC)および陰イオン性ナトリウムポリエチレンスルホネートである。高分子電解質滴定を、BTG Mutek PCD−03 Particle Charge Detectorを用いて実施する。
エポキシビーズにおけるエポキシ官能基のβ−アミノアルコールへの変換
エポキシビーズ(それぞれ、Toyopearl AF Epoxy650M、Chiralvision Immobeads T2−150およびReliZyme(商標)EXE135)を、エポキシ官能基をβ−アミノアルコールに変換するために、一晩室温において、32.0wt−%のアンモニア溶液と共にインキュベートした。ビーズ1グラム当たり、8mLのアンモニア溶液を適用した。次のステップにおいて、該ビーズをガラスフィルタ上で逆浸透水を用いて中性pHまですすいだ。
アミノ官能化ビーズとジカルボン酸のカップリング手順
式(III)のジカルボキシル化合物とアミノ官能化ビーズとのカップリングのために、ビーズの初期官能化に関して3倍過剰のジカルボン酸、例えば、グルタル酸、アジピン酸またはグルタチオンを、0.5Mリン酸緩衝液、pH5.4に溶解し、その後、6倍過剰のカップリング試薬、例えばEDCまたはDICをNHSと組み合わせて加えた。該ビーズを、一晩室温において、このカップリング溶液と共にインキュベートし、最終的に、逆浸透水を用いてガラスフィルタ上ですすいた。ビーズ上のカルボン酸基の濃度を、高分子電解質滴定によって決定した。実施例8および9の結果を下記の表IIIに要約する。
グルタル酸とアミノ化ReliZyme(商標)EXE135とのカップリング
実施例7の1gのビーズ(ReliZym(商標)EXE135、1当量、166μmol/g)を、5mLの0.1M MESバッファー、pH5.4中の66.2mgのグルタル酸(3当量)および192mgのEDC(6当量)の溶液に加えた。このビーズを回転台の上で24時間室温において撹拌し、その後、逆浸透水でビーズをすすいだ。カルボキシ官能基によるビーズの官能化を、高分子電解質滴定で決定し、119μmol/gビーズであった。
6−アミノへキサン酸とReliZyme(商標)EXE135とのカップリング
5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液(pH13)中の、エポキシ官能基を担持する1gのビーズReliZyme(商標)EXE135(1当量、166μmol/g)を、65.7mgの6−アミノへキサン酸(3当量)と、24時間、40℃において反応させ、その後、すすぎステップを実施した。カルボキシ官能基によるビーズの官能化を、高分子電解質滴定で決定し、154μmol/gビーズであった。
血液型決定因子B三糖類と、マトリックス(IV)および式(III)の化合物のカップリング生成物とのカップリング
ビーズの初期官能化に対して等モル量の血液型決定因子B三糖を、0.1MのMES−緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液に、2当量のカップリング剤EDCを加え、その後、実施例8のビーズを加え、室温において一晩インキュベートし、逆浸透水で最終すすぎステップを実施し、血液型B三糖類で官能化されたビーズ(TsB−ビーズ)を得た。ビーズのg当たりの三糖のμmolの単位の、TsBによるビーズの官能化を、レソルシノール試験により分析した(表IV)。
TsB_ANAとグルタル酸官能化ReliZyme(商標)EXE135ビーズのカップリング
6.1μmolのTsB_ANAを、0.5mLの0.1M MES緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液に、96mgのEDC(ビーズの初期官能化に対して3当量)を加え、その後、40mgの実施例9の官能化ReliZyme(商標)EXE135ビーズを加え、回転台の上で24時間室温において撹拌し、逆浸透水で最終すすぎステップを実施し、TsB−官能化ビーズを得た。糖によるビーズの官能化を、レソルシノール試験により決定し、8.5μmol TsB_ANA/gビーズであった。
TsB_ANAと、ReliZyme(商標)EXE135ビーズに結合した6−アミノへキサン酸とのカップリング
6.1μmolのTsB_ANAを、0.5mLの0.1M MES緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液に、96mgのEDC(ビーズの出発官能化に対して3当量)を加え、その後、40mgの実施例10の官能化ReliZyme(商標)EXE135ビーズを加え、回転台の上で24時間室温において撹拌し、逆浸透水で最終すすぎステップを実施し、TsB−官能化ビーズを得た。糖によるビーズの官能化を、レソルシノール試験により決定し、25.9μmol TsB_ANA/gビーズであった。
TsB APと、Toyopearl AF Epoxy650Mビーズに結合したグルタル酸とのカップリング
131.3mgのTsB_AP(1当量)を、7mLのリン酸緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液に、70.4mgのDIC(3当量)を加え、その後、161.7mgの実施例8の官能化Toyopearl(登録商標)AF Epoxy650Mビーズを加え、回転台の上で24時間室温において撹拌し、逆浸透水で最終すすぎステップを実施し、TsB−ビーズを得た。
TsB_ANAと、Toyopearl AF Epoxy650Mビーズに結合したグルタル酸とのカップリング
725mgのNHS、0.981mLのDICおよび0.893mLのジイソプロピルエチルアミンを、25mLの1,4−ジオキサンに溶解した。0.5gの実施例8の官能化Toyopearl(登録商標)AF Epoxy650Mビーズを、2.5mLの活性化溶液に加え、回転台の上で3時間室温において撹拌した。このビーズを、次いで5mLの1,4−ジオキサンおよび15mLのDMSOで洗浄した。2mLのDMSO中14.4mgのTsB_ANAをビーズに加え、その後、この懸濁液を回転台の上で3時間室温において撹拌し、ビーズを逆浸透水ですすいだ。糖によるビーズの官能化を、レソルシノール試験により決定し、43.4μmol TsB_ANA/gビーズであった。
TsB_ANAと、グルタル酸官能化Chiralvision Immobead(商標)T2−150ビーズとのカップリング
4.3mgのTsB_ANA(0.1当量)を、2mLのリン酸緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液に、18.9mgのDIC(3当量)を加え、その後、0.5gmgの実施例8の官能化Immobead(商標)T2−150ビーズ(1等量)を加え、回転台の上で24時間室温において撹拌し、逆浸透水で最終すすぎステップを実施し、TsB−ビーズを得た。糖によるビーズの官能化を、レソルシノール試験により決定し、7.1μmol TsB_ANA/gビーズであった。
TsB−ビーズによる抗体価の低下
0.5mLの血液型A血漿を、20mgの、実施例11−15の湿潤TsB−ビーズ(およそ5mgの乾燥ビーズに相当する。)に加え、37℃において120分、回転台の上でインキュベートした。プローブ(probe)をその後遠心分離(10分、1000g)処理し、上清を、ゲル試験アッセイを用いたIgM抗体価の決定に使用した。ゲル試験アッセイは、Bio−Rad Laboratoriesから市販されている(NaCl, Enzyme Test and Cold Agglutinins(「NaCl カード」);Coombs Anti−IgG(「Coombsカード」))。従って、プローブの段階希釈液を調製した。50μLの血漿または血漿希釈液それぞれを、NaClカード中50μLの赤血球Bと混合し、15分間室温においてインキュベートした。次のステップにおいて、このプローブを、ID−遠心分離機(DiaMed AG)において遠心分離処理し、ゲルカードを凝集に関して評価した。
TsB_ANAの段階希釈液を用いた抗体価低下試験
65.7mgの6−アミノへキサン酸(3当量)を、5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液、pH10中の1g(0.167mmol、1当量)のエポキシドビーズ(ReliZyme(商標)EXE135)の懸濁液に加えた。pHを13に調整後、混合液を、40℃において24時間撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。ビーズ上のカルボン酸官能基の濃度を、高分子電解質滴定により決定し、0.167mmol/gであり、これは、エポキシ官能基の完全変換に相当する。
中空繊維膜のプラズマ官能化
外殻径320μmおよび壁厚50μmを有する1000mの多孔質ポリアリールエーテルスルホン(polyaryethersulfone)−ポリビニルピロリドン中空繊維膜を、真空密閉プラズマ点火チャンバーに、速度5−20m/分で送り込んだ。前記点火チャンバーに、アンモニアからなる圧力0.25mbarの前駆体ガスを、アミン含有炭水化物薄膜が膜の多孔質表面に被覆されるように導入した。プラズマを、13.56MHzのパルスRFパワー、100Wを用いて励起した。このプラズマ処理後、アミノ基の密度を高分子電解質滴定により測定し、20μmol/gの値を得た。
ミニモジュールの調製
紡糸工程後の膜束の調製は、実験に適切な方法で繊維束を調製するために必要である。第1の工程ステップは、150の繊維をこの末端近くで単繊維により固定することである。該繊維束を、ハウジング内に移す。その後、繊維束を規定の長さの20cmに切断する。次の工程ステップは、繊維束をポッティングキャップ(potting cap)に移すことからなる。ポッティングキャップを機械的に固定し、ポッティングチューブ(potting tube)を、ポッティングキャップに乗せる。その後、繊維の末端を閉じる。光学制御により、すべての繊維を確実に充分閉止する。その後、ミニモジュールを真空乾燥オーブンに一晩入れる。その後、ポッティングをポリウレタンを用いて実施する。ポッティング後、ポリウレタンが少なくとも1日の間硬化可能であることが確実でなければならない。次の工程ステップにおいて、ポッティングされた膜束を、規定の長さに切断する。最終工程ステップは、繊維束の光学制御からなる。この工程ステップの間、切断の質(切断が平滑であるか、またはナイフによるいずれかの損傷があるか)およびポッティングの質(紡糸工程の開口繊維の数がポッティングされた繊維で減少したか、またはポリウレタンが存在しないなんらかの目視可能な空隙があるか)を制御する。光学制御後、膜束を乾燥して保存し、その後膜束をさまざまな実験に使用する。
フィルタの調製
フィルタ(=透析装置)は、有効表面積1.4m2を有する約8,000から10,000の繊維を含む。フィルタは、流体を透析するための2つのコネクタと、それぞれが1つの中央血液コネクタを有する、両端に適用されるキャップとを備えた、円筒形ハウジングを特徴とする。製造工程(巻き付け後)は、下記の主なステップに分けることができる:
(A)切断束(長さ約30cm)を、特殊な束鉤爪(bundle claw)を有するハウジングに移す;
(B)束の両端を、閉鎖工程により閉鎖する;
(C)繊維を、ポリウレタン(PUR)を用いてハウジング内においてポッティングする;
(D)繊維を開口するために末端を切断する;
(E)キャップを血液コネクタに、超音波溶接を使用して溶接する;
(F)最終処理は、すすぎ、完全性試験、最終乾燥を含む;
(G)フィルタを、滅菌バッグに梱包し、蒸気滅菌する。
グルタル酸とアミノ官能化中空繊維膜とのカップリング
実施例19の中空繊維と式(III)の化合物とのカップリングのために、30gのグルタル酸および30gのEDCを、1500mLの0.25Mリン酸緩衝液、pH5.4に溶解した。この溶液を使用して、それぞれ150繊維を有する4つのミニモジュールを官能化した。カップリングを、該溶液を4つのミニモジュールの中を流速85mL/分で室温において16時間循環させることによって実施した。その後、該モジュールを、40Lの逆浸透水ですすぎ、最終的に乾燥させた。官能化を、高分子電解質滴定により測定し、9.4μmol/gであった。
TsBと、中空繊維膜に結合したグルタル酸とのカップリング
血液型B三糖(TsB)と実施例22の中空繊維(200mg)とのカップリングのために、10μmol(2.5当量)のTsB_APおよびTsB_ANAそれぞれと、25μmolのカップリング剤EDCとを、17mLの0.1M MES緩衝液、pH5.4に、各ミニモジュール用に溶解した。カップリングを、連続流条件で、流速6mL/分で室温において24時間実施した。その後、該モジュールを、1.5Lの逆浸透水ですすぎ、最終的に乾燥させた。
TsB−中空繊維を用いた抗体価低下試験
実施例23の150の中空繊維を含むミニモジュールを、10mLの血液型Aのヒト血漿および10mLのNaCl溶液の混合物で、調節されたフード(tempered hood)において37℃で2時間、流速2.5mL/時および40%のろ過で潅流させた。プローブを、得られたプールから採取し、これを用いて、IgM抗体価の決定をBio−Rad Laboratories製のゲル試験アッセイ(上を参照されたい。)により実施した。従って、プローブの段階希釈液を調製した。50μLの血漿または血漿希釈液それぞれを、NaClカード中50μLの赤血球Bと混合し、15分間室温においてインキュベートした。次のステップにおいて、このプローブを、ID−遠心分離機(DiaMed AG)において遠心分離処理し、ゲルカードを凝集に関して評価した。
異なるマトリックス、リンカー濃度および反応条件に基づく、TsBを含む分離材を用いた抗体価低下の比較
実施例25A:可変量の糖を有するReliZyme(商標)EXE135
(A)リンカーのカップリング
65.7mgの6−アミノへキサン酸(3当量)を、5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液、pH10中の1g(0.167mmol、1当量)のエポキシドビーズ(ReliZyme(商標)EXE135)の懸濁液に加えた。0.1M NaOHを用いてpHを13に調整後、混合物を、40℃において24時間撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。ビーズ上のカルボン酸官能基の濃度を、高分子電解質滴定により決定し、165μmol/gビーズであった。
14.4mgのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)および24.0mgの1−エチル−3−(3’−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド*HCl(EDC、3当量)を、1mLのポリエチレングリコール200(PEG−200)に、0.25gのステップ(A)のビーズ(0.167mmol、1当量)と一緒に溶解した。混合物を、回転台の上で3時間室温において撹拌し、その後ろ過し、20mlのPEG−200ですすいだ。
ステップ(B)の活性化ビーズと三糖とのカップリングのために、さまざまな量(3.3mg、2.3mg、1.7mg、1.4mg)のTsB_ANAを、下記の表XIXに示すように調製し、0.5mlのPEG−200に溶解した。4種の異なる量のTsB_ANAを用いた4種の異なるカップリング反応を実施した。混合物を、それぞれ回転台の上で24時間室温において撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。変換の程度、即ち糖のカップリング率を含めて、他の反応条件をXIXに要約する。20mgの湿潤TsB−ビーズ(5mgの乾燥材料に相当する。)および1.5mLのヒト血漿を用いて、上記のように力価低下を実施した。
(A)リンカーのカップリング
65.7mgの6−アミノへキサン酸(3当量)を、5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液、pH10中の1g(0.167mmol、1当量)のエポキシドビーズ(ReliZyme(商標)EXE135)の懸濁液に加えた。0.1M NaOHを用いてpHを10または13に調整後、混合物を、40℃または55℃において6時間または24時間、それぞれ撹拌し、その後ろ過し、蒸留水でpHが中性になるまですすいだ。ビーズ上のカルボン酸官能基の濃度を、高分子電解質滴定により決定した。結果を表XXに示す。
14.4mgのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)および24.0mgの1−エチル−3−(3’−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド*HCl(EDC、3当量)を、1mLのポリエチレングリコール200(PEG−200)に、0.25gのステップ(A)のビーズ(0.167mmol、1当量)と一緒に溶解した。混合物を、回転台の上で3時間室温において撹拌し、その後ろ過し、20mlのPEG−200ですすいだ。
ステップ(B)の活性化ビーズと三糖とのカップリングのために、3mg(±0.1)のTsB_ANAを調製し、0.5mlのPEG−200にそれぞれ溶解した。基本的に同じ量のTsB_ANAを用いた6種の異なるカップリング反応を、表XXに示すように実施した。混合物を、それぞれ回転台の上で24時間室温において撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。変換の程度、即ち糖のカップリング率を含めて、他の反応条件を表XIXに要約する。20mgの湿潤TsB−ビーズ(5mgの乾燥材料に相当する。)および1.5mLのヒト血漿を用いて、上記のように力価低下を実施した。
(A)リンカーのカップリング
85.8mgの6−アミノへキサン酸(3当量)を、5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液、pH10中の1g(0.218mmol、1当量)のエポキシドビーズ(ReliZyme(商標)EXE148)の懸濁液に加えた。4mLの0.1M NaOHを用いてpHを13に調整後、混合物を、40℃において24時間撹拌し、その後ろ過し、蒸留水でpHが中性値に達するまですすいだ。ビーズ上のカルボン酸官能基の濃度を、高分子電解質滴定により決定し、285μmol/gビーズであった。
14.4mgのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)および24.0mgの1−エチル−3−(3’−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド*HCl(EDC、3当量)を、1mLのポリエチレングリコール200(PEG−200)に、0.25gのステップ(A)のビーズ(0.285mmol、1当量)と一緒に溶解した。混合物を、回転台の上で3時間室温において撹拌し、その後ろ過し、20mlのPEG−200ですすいだ。
ステップ(B)の活性化ビーズと三糖とのカップリングのために、さまざまな量(3.0mg、2.2mg、1.9mg、1.6mg)のTsB_ANAを、下記の表XIXに示すように調製し、0.5mlのPEG−200に溶解した。4種の異なる量のTsB_ANAを用いた4種の異なるカップリング反応を実施した。混合物を、それぞれ回転台の上で24時間室温において撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。変換の程度、即ち糖のカップリング率を含めて、他の反応条件を表XXIに要約する。20mgの湿潤TsB−ビーズ(5mgの乾燥材料に相当する。)および1.5mLのヒト血漿を用いて、上記のように力価低下を実施した。
(A)リンカーのカップリング
85.8mgの6−アミノへキサン酸(3当量)を、5mLの0.1M ホウ酸−KCl緩衝液、pH10中の1g(0.167mmol、1当量)のエポキシドビーズ(ReliZyme(商標)EXE148)の懸濁液に加えた。4mLのNaOHを用いてpHを10または13に調整後、混合物を、40℃または55℃において6時間または24時間、それぞれ撹拌し、その後ろ過し、蒸留水でpHが中性になるまですすいだ。ビーズ上のカルボン酸官能基の濃度を、高分子電解質滴定により決定した。結果を表XXIIに示す。
14.4mgのN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)および24.0mgの1−エチル−3−(3’−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド*HCl(EDC、3当量)を、1mLのポリエチレングリコール200(PEG−200)に、0.25gのステップ(A)のビーズ(0.285mmol、1当量)と一緒に溶解した。混合物を、回転台の上で3時間室温において撹拌し、その後ろ過し、20mlのPEG−200ですすいだ。
ステップ(B)の活性化ビーズと三糖とのカップリングのために、3mg(±0.1)のTsB_ANAを調製し、0.5mlのPEG−200にそれぞれ溶解した。基本的に同じ量のTsB_ANAを用いた6種の異なるカップリング反応を、表XXに示すように実施した。混合物を、それぞれ回転台の上で24時間室温において撹拌し、その後ろ過し、蒸留水ですすいだ。変換の程度、即ち糖のカップリング率を含めて、他反応条件を表XIXに要約する。20mgの湿潤TsB−ビーズ(5mgの乾燥材料に相当する。)および1.5mLのヒト血漿を用いて、上記のように力価低下を実施した。
Claims (16)
- 一般式(I)
糖−X−R1−(R2−R1)r−(R3−R1)n−En−F−マトリックス (I)
により表される糖−リンカー−マトリックスを含む分離材であって、
式中、
Xが、O、S、CH2またはNR’を表し、ここで、R’が、H、メチルまたは、アセチル(Ac)、トリフルオロアセチル(TFA)、トリクロロアセチル、ベンゾイル(Bz)、ベンジル(Bn)、tert−ブチルオキシカルボニル(BOC)、カルボベンジルオキシ(Cbz)、p−メトキシベンジルカルボニル(Moz)、9−フルオレニルメチルオキシカルボニル(FMOC)、ビニルオキシカルボニル(Voc)、アリルオキシカルボニル(Alloc)、p−メトキシベンジル(PMB)、3、4−ジメトキシベンジル(DMB)、p−メトキシフェニル(PMP)、トリフェニルメチル(Tr)、トシル(Ts)およびノシル(Ns)を含む群から選択される保護基を表し、
R1が、互いに独立して、直鎖もしくは分岐鎖のC1−C10のアルキルを表し、ここで、該アルキル基は、非置換であっても、またはハロゲン、アルキル、アルコキシ、ハロアルキル、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、チオール、アシルアミノ、アルコキシカルボニルアミノ、ハロアルコキシカルボニルアミノもしくはアルキルスルホニルアミノを含む置換基の群から選択される、少なくとも1つの適切な置換基で置換されていてもよく、
R2が、互いに独立して、−CO−NH−、−NH−CO−、−CO−NH−NH−、−NH−NH−CO−、−N=CH−、−CH=N−、−NH−N=CH−、−CH=N−NH−、またはトリアゾリルを表し、
R3が、互いに独立して、−O−、−CO−NH−、−NH−CO−、−N=CH−または−CH=N−を表し、
rが、0または1から10の整数を表し、
nが0または1から600の整数を表し、
Eが、−NH−、−CO−、−O−、−S−、−N=、−CH=、−NH−NH−、−NH−N=またはトリアゾリルを表し、
Fが−NH−、=N−、=CH−、−CO−、−CH2−CH(OH)−、−NH−CH2−CH(OH)−、−NH−NH−、=N−NH−、−CO−NH−、−NH−CO−またはトリアゾリルを表し、および
mが0または1を表す、
分離材。 - Xが、O、SまたはNR’を表し、ここで、R’が水素、メチルまたは適切な保護基を表し、
R1が、互いに独立して、非置換または置換されたメチル、エチル、n−もしくはイソ−プロピル、n−、イソ、−、sec−もしくはtert−ブチル、n−ペンチル、n−ヘキシル、n−へプチル、n−オクチル、n−ノニルまたはn−デシルを表し、ここで、置換基がハロゲン、アルキル、アミノ、ヒドロキシまたはチオールを含む置換基の群から選択され、
R2が、互いに独立して、−CO−NH−、−NH−CO−、−CO−NH−NH−、−NH−NH−CO−、−N=CH−または−CH=N−を表し、
R3が、互いに独立して、−O−、−CO−NH−、−NH−CO−、−N=CH−または−CH=N−を表し、
rが1を表し、
Eが、−NH−、−CO−、−O−または−S−を表し、
Fが−NH−、=N−、−CO−、−CH2−CH(OH)−、−NH−CH2−CH(OH)−または−CO−NH−NH−を表し、および
mが1を表す、
請求項1に記載の分離材。 - リンカーが、
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−NH−CO−CH2−(O−C2H4)l−O−CH2−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−CH2−(O−C2H4)l−O−CH2−CONH−、
−X(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−CONH−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−NH−CH2−CH(OH)−、
−X(CH2)s−NH−CO−(CH2)s−NH−CH2−CH(OH)−、
−X(CH2)s−CO−NH−(CH2)s−NH−CO−CH(NH2)−(CH2)2−CO−NH−CH(SH)−CO−NH−CH2−CO−NH−CH2−CH(OH)−、
を含むリンカーの群から選択される、請求項1または2に記載の分離材であって、
ここで、
XがO、N、SまたはCH2を表し、ならびに
sが、互いに独立して1から10の整数を表し、ならびに
lが、1から600の整数を表す、
分離材。 - マトリックスが、合成ポリマー、ペプチドまたは多糖である、請求項1から3のいずれかに記載の分離材。
- マトリックスが、ポリチレン(PE)、ポリオキシメチレン(POM)、ポリプロピレン(PP)、ポリ塩化ビニル(PVC)、ポリ酢酸ビニル(PVA)、ポリ塩化ビニリデン(PVDC)、ポリスチレン(PS)、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、ポリアクリレート、ポリ(メチルメタクリレート)(PMMA)、ポリアクリルアミド、ポリグリシジルメタクリレート(PGMA)、アクリロニトリルブタジエンスチレン(ABS)、ポリアクリロニトリル(PAN)、ポリエステル、ポリカーボネート、ポリエチレンテレフタレート(PET)、ポリアミド、ポリアラミド、ポリエチレングリコール(PEG)、ポリビニルピロリドン(PVP)、ポリスルホン(PS)、ポリエーテルスルホン(PES)、ポリアリールエーテルスルホン(PEAS)、エチレンビニルアセテート(EVA)、エチレンビニルアルコール(EVOH)、ポリアミド−イミド、ポリアリールエーテルケトン(PAEK)、ポリブタジエン(PBD)、ポリブチレン(PB)、ポリブチレンテレフタレート(PBT)、ポリカプロラクトン(PCL)、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリエーテルエーテルケトン(PEEK)、ポリエーテルケトンケトン(PEKK)、ポリエーテルイミド(PEI)、ポリイミド、ポリ乳酸(PLA)、ポリメチルペンテン(PMP)、ポリ(p−フェニレンエーテル)(PPE)、ポリウレタン(PU)、スチレンアクリロニトリル(SAN)、ポリブテン酸、ポリ(4−アリル−安息香酸)、ポリ(グリシジルアクリレート)、ポリグリシジルメタクリレート(PGMA)、ポリ(アリルグリシジルエーテル)、ポリ(ビニルグリシジルエーテル)、ポリ(ビニルグリシジルウレタン)、ポリアリルアミン、ポリビニルアミンおよびこれらのコポリマーを含む群から選択される、親水性および/または疎水性の合成ポリマーから調製される、請求項5に記載の分離材。
- マトリックスが、ポリアクリレート(PA)、ポリ(メチルメタクリレート)(PMMA)またはポリグリシジルメタクリレート(PGMA)、ポリビニルピロリドン(PVP)、ポリスルホン(PS)、ポリエーテルスルホン(PES)、ポリアリールエーテルスルホン(PAES)およびこれらの組み合わせを含む群から選択される、親水性および/または疎水性の合成ポリマーから調製される、請求項4または5に記載の分離材。
- マトリックスが、ビーズ、フラットシート膜または中空繊維膜の形態を有する、請求項4または5に記載の分離材。
- フラットシートまたは中空繊維膜が、リンカーおよび糖とカップリングされる前にガスプラズマにより処理される、請求項7に記載の分離材。
- 糖が、別の分子、タンパク質または細胞と結合可能な単糖、二糖、三糖またはオリゴ糖である、請求項1から8のいずれかに記載の分離材。
- 糖が血液型A決定因子および/または血液型B決定因子である、請求項10に記載の分離材。
- 液体から、糖類に結合する能力を有する物質を選択的に分離する方法であって、請求項1から10のいずれかに記載の分離材を使用する、方法。
- 液体が全血または血液製剤である、請求項11に記載の方法。
- 請求項1から12のいずれかに記載の分離材を含む、液体から、前記分離材の糖に対する親和性を有する物質を分離するための、装置。
- 請求項1から10のいずれかに記載の分離材を調製する方法であって、
(a)式(IV)
F1−マトリックス (IV)
のマトリックス[式中、
F1が、H2N−、N3−、HOOC−、OHC−、NH2−NH−、C≡C−
またはエポキシを表す]を提供するステップ;
(b)一般式(V)
糖−X−R1−(R2−R1)r−Y (V)
の糖[式中、
X、r、R1およびR2は、請求項1または2に定義した通りであり、
Yが、−COOH、−NH2、−C≡C、−N3、−NH−NH2または−OHを表す]を提供するステップ;ならびに
(c)前記糖と前記マトリックスとをカップリングするステップ、
を含む、方法。 - (b2)式(III)
R3A−R1−(R3−R1)n−E1 (III)
の化合物[式中、
R1、R3およびnは請求項1または2に定義した通りであり、
R3Aが、HOOC−、H2N−、C≡C−、N3−、NH2−NH−またはOH−を表し、ならびに
E1が、−COOH、−CHO、−NH2、−SH、−OH、−N3、−NH−NH2または−C≡Cを表す]を提供する、
追加のステップを有し、ステップ(c)において式(III)の化合物を、まず式(IV)のマトリックスと結合させ、その後、得られた生成物を式(V)の糖とカップリングする、請求項14に記載の方法。 - ステップ(c)における糖とマトリックスとのカップリングを、溶媒としてメタノールまたはPEG−200の存在下で実施する、請求項15に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP11176769.5 | 2011-08-08 | ||
EP20110176769 EP2556848A1 (en) | 2011-08-08 | 2011-08-08 | Separation material comprising saccharide ligands |
PCT/EP2012/065388 WO2013020964A1 (en) | 2011-08-08 | 2012-08-07 | Separation material comprising saccharide ligands |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014531966A true JP2014531966A (ja) | 2014-12-04 |
JP6182532B2 JP6182532B2 (ja) | 2017-08-16 |
Family
ID=46604352
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014524360A Active JP6182532B2 (ja) | 2011-08-08 | 2012-08-07 | 糖リガンドを含む分離材 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9259710B2 (ja) |
EP (2) | EP2556848A1 (ja) |
JP (1) | JP6182532B2 (ja) |
CN (1) | CN104053462B (ja) |
AU (2) | AU2012293700B2 (ja) |
CA (1) | CA2842710C (ja) |
WO (1) | WO2013020964A1 (ja) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017053846A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体および/または抗b抗体を除去するための新規なアフィニティークロマトグラフィー媒体 |
JP2017053848A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体または抗b抗体の除去に適した媒体の品質を評価する方法 |
JP2017053847A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体または抗b抗体に結合するクロマトグラフィー媒体の品質を評価する方法 |
CN107709547A (zh) * | 2015-05-28 | 2018-02-16 | 伊穆特丽克斯治疗股份有限公司 | 通用血液制品及其制备和使用方法 |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2556849A1 (en) * | 2011-08-08 | 2013-02-13 | Gambro Lundia AB | Separation material |
AU2014285971A1 (en) * | 2013-07-05 | 2016-02-04 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Affinity chromatography matrix |
FR3008098B1 (fr) * | 2013-07-05 | 2016-09-16 | Lab Francais Du Fractionnement | Matrice de chromatographie d'affinite a densite de ligands reduite |
FR3008097B1 (fr) * | 2013-07-05 | 2016-11-04 | Lab Francais Du Fractionnement | Matrice de chromatographie d'affinite |
US11305236B2 (en) * | 2014-06-13 | 2022-04-19 | Gattaco Inc. | Surface tension driven filtration |
FR3026950A1 (fr) * | 2014-10-09 | 2016-04-15 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de preparation de plasma universel |
FR3035799B1 (fr) | 2015-05-06 | 2017-05-05 | Elicityl | Support pour la purification de liquides biologiques |
FR3035794B1 (fr) | 2015-05-06 | 2017-05-05 | Elicityl | Procede pour la purification du sang total ou d'un produit issu du sang |
CN106861661B (zh) * | 2015-12-14 | 2019-06-25 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 单糖聚合物富集材料及其制备和在糖肽富集中的应用 |
CN107175129B (zh) * | 2017-06-01 | 2020-06-09 | 江苏大学 | 一种无机生物复合纳米催化剂Au@Aβ2535的制备方法 |
GB201717555D0 (en) | 2017-10-25 | 2017-12-06 | Nonwovens Innovation & Res Institute Ltd | Blood filter |
CN108610494B (zh) * | 2018-03-20 | 2020-11-06 | 南京理工大学 | 聚醚砜/功能性含糖聚合物杂化膜的制备方法 |
CN108607529B (zh) * | 2018-05-08 | 2021-02-09 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一种有机-无机复合污染水的净化滤料及其制备方法和应用 |
FR3083121B1 (fr) * | 2018-06-27 | 2021-10-22 | Maco Pharma Sa | Procede de greffage d un element fibreux pour l elimination d anticorps du sang ou d un composant sanguin |
EP3669888A1 (en) | 2018-12-20 | 2020-06-24 | Gambro Lundia AB | Extracorporeal devices for methods for treating diseases associated with anti-neutrophil cytoplasmic antibodies |
US20220143320A1 (en) | 2019-03-06 | 2022-05-12 | Gambro Lundia Ab | Device and method for the delivery of a thrombin activated fibrin sealant |
EP3934712A1 (en) | 2019-03-06 | 2022-01-12 | Gambro Lundia AB | Blood treatment device comprising alkaline phosphatase |
US11786842B2 (en) | 2019-05-30 | 2023-10-17 | Restek Corporation | Hybrid ligand and liquid chromatography stationary phase including hybrid ligand |
CN115850540B (zh) * | 2022-12-13 | 2023-11-03 | 苏州博进生物技术有限公司 | 一种层析活化偶联介质及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5777960A (en) * | 1980-10-31 | 1982-05-15 | Mitsubishi Chem Ind Ltd | Affinitive adsorbent for affnity chromatography |
US20100152425A1 (en) * | 2007-05-04 | 2010-06-17 | Nilsson Kurt G I | Material for Separation of a Biomolecule |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3947352A (en) | 1974-05-31 | 1976-03-30 | Pedro Cuatrecasas | Polysaccharide matrices for use as adsorbents in affinity chromatography techniques |
GB1544908A (en) * | 1975-07-08 | 1979-04-25 | Chembiomed Ltd | Artificial oligosaccharide antigenic determinants |
US4411832A (en) | 1979-11-26 | 1983-10-25 | Pedro Cuatrecasas | Polysaccharide matrices comprising macromolecular spacer arms for use as adsorbents in affinity chromatography techniques |
SE454847B (sv) | 1987-08-31 | 1988-06-06 | Gambro Dialysatoren | Anordning for diffusion och/eller filtrering samt forfarande for tillverkning av denna anordning |
US5240601A (en) * | 1988-11-09 | 1993-08-31 | Chembiomed, Ltd. | Affinity supports for hemoperfusion |
US5955343A (en) | 1992-12-28 | 1999-09-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Stable macroscopic membranes formed by self-assembly of amphiphilic peptides and uses therefor |
US5670483A (en) | 1992-12-28 | 1997-09-23 | Massachusetts Insititute Of Technology | Stable macroscopic membranes formed by self-assembly of amphiphilic peptides and uses therefor |
US6074559A (en) | 1996-11-21 | 2000-06-13 | Fresenius Medical Care Deutschland Gmbh | Filter device having a hollow fiber bundle and associated sealing devices |
US6686457B1 (en) * | 1996-12-23 | 2004-02-03 | Kurt Nilsson | Material |
US20040022784A1 (en) | 2000-02-08 | 2004-02-05 | Kurt Nilsson | Oligosaccharide supports for e.g. removal of antibodies from blood |
DE10007327A1 (de) | 2000-02-17 | 2001-08-30 | Fresenius Medical Care De Gmbh | Filtervorrichtung, vorzugsweise Hohlfaserdialysator mit gelockten Hohlfasern |
SE0203855L (sv) | 2002-12-20 | 2004-06-21 | Gambro Lundia Ab | Permselektivt membran |
US7713923B2 (en) | 2003-06-25 | 2010-05-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Self-assembling peptides incorporating modifications and methods of use thereof |
EP2261271B1 (en) | 2003-09-17 | 2014-04-30 | Gambro Lundia AB | Separation material |
SE0401834D0 (sv) | 2004-07-09 | 2004-07-09 | Gambro Lundia Ab | A continuous method for production of a regioselective porous hollow fibre membrane |
ES2342097T3 (es) | 2006-07-07 | 2010-07-01 | Gambro Lundia Ab | Membrana de separacion de plasma. |
ATE460974T1 (de) | 2006-07-07 | 2010-04-15 | Gambro Lundia Ab | Plasmatrennmembran |
WO2008008709A2 (en) * | 2006-07-11 | 2008-01-17 | Leap Bioscience Corporation | Method of selective protein enrichment and associated applications |
EP2083939B1 (en) | 2006-10-18 | 2010-11-10 | Gambro Lundia AB | Hollow fiber membrane and method for manufacturing thereof |
PL2113298T3 (pl) | 2008-04-30 | 2013-11-29 | Gambro Lundia Ab | Membrana kapilarna do hemodializy o poprawionej przepuszczalności i selektywności |
-
2011
- 2011-08-08 EP EP20110176769 patent/EP2556848A1/en not_active Withdrawn
-
2012
- 2012-08-07 WO PCT/EP2012/065388 patent/WO2013020964A1/en active Application Filing
- 2012-08-07 EP EP12743184.9A patent/EP2741795A1/en not_active Ceased
- 2012-08-07 CN CN201280044201.0A patent/CN104053462B/zh active Active
- 2012-08-07 AU AU2012293700A patent/AU2012293700B2/en active Active
- 2012-08-07 US US14/237,182 patent/US9259710B2/en active Active
- 2012-08-07 JP JP2014524360A patent/JP6182532B2/ja active Active
- 2012-08-07 CA CA2842710A patent/CA2842710C/en active Active
-
2016
- 2016-10-26 AU AU2016250389A patent/AU2016250389B2/en not_active Ceased
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5777960A (en) * | 1980-10-31 | 1982-05-15 | Mitsubishi Chem Ind Ltd | Affinitive adsorbent for affnity chromatography |
US20100152425A1 (en) * | 2007-05-04 | 2010-06-17 | Nilsson Kurt G I | Material for Separation of a Biomolecule |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107709547A (zh) * | 2015-05-28 | 2018-02-16 | 伊穆特丽克斯治疗股份有限公司 | 通用血液制品及其制备和使用方法 |
JP2018518531A (ja) * | 2015-05-28 | 2018-07-12 | イムトリクス セラピューティクス、インコーポレイテッド | ユニバーサル血液製剤並びにそれを調製及び使用する方法 |
JP7002445B2 (ja) | 2015-05-28 | 2022-01-20 | イムトリクス セラピューティクス、インコーポレイテッド | ユニバーサル血液製剤並びにそれを調製及び使用する方法 |
JP2017053846A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体および/または抗b抗体を除去するための新規なアフィニティークロマトグラフィー媒体 |
JP2017053848A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体または抗b抗体の除去に適した媒体の品質を評価する方法 |
JP2017053847A (ja) * | 2015-09-08 | 2017-03-16 | メルク パテント ゲーエムベーハー | 抗a抗体または抗b抗体に結合するクロマトグラフィー媒体の品質を評価する方法 |
KR101918545B1 (ko) * | 2015-09-08 | 2018-11-14 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 항-a 또는 항-b 항체를 제거하기에 적합한 매질의 품질 평가 방법 |
KR101921907B1 (ko) * | 2015-09-08 | 2018-11-26 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 항-a 또는 항-b 항체에 결합하는 크로마토그래피 매질의 품질 평가 방법 |
US10697982B2 (en) | 2015-09-08 | 2020-06-30 | Merck Patent Gmbh | Methods of evaluating quality of a chromatography media which binds anti-A or anti-B antibodies |
US10697983B2 (en) | 2015-09-08 | 2020-06-30 | Merck Patent Gmbh | Methods of evaluating quality of media suitable for removing anti-A or anti-B antibodies |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2012293700A1 (en) | 2014-02-13 |
US20150111194A1 (en) | 2015-04-23 |
EP2556848A1 (en) | 2013-02-13 |
US9259710B2 (en) | 2016-02-16 |
JP6182532B2 (ja) | 2017-08-16 |
WO2013020964A1 (en) | 2013-02-14 |
EP2741795A1 (en) | 2014-06-18 |
CA2842710C (en) | 2020-08-04 |
CA2842710A1 (en) | 2013-02-14 |
AU2016250389B2 (en) | 2018-03-15 |
CN104053462A (zh) | 2014-09-17 |
AU2016250389A1 (en) | 2016-11-17 |
AU2012293700B2 (en) | 2016-10-20 |
CN104053462B (zh) | 2017-04-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6182532B2 (ja) | 糖リガンドを含む分離材 | |
US9844621B2 (en) | Separation material | |
EP1924345B1 (en) | Process for cross-linking cellulose ester membranes | |
US9522365B2 (en) | Cross-linked cellulose membranes | |
US7700746B2 (en) | Filtration material | |
JP4709452B2 (ja) | エンドトキシンの体外除去方法 | |
US5136032A (en) | Method for separating phosphopolyol compounds using a separating agent | |
JP2013500797A (ja) | 体液から生物学的に有害な物質を除去するための装置及び方法 | |
JPH119688A (ja) | タンパク質を含有する溶液を浄化する装置、その装置のための支持材料を生産する方法及びその装置の使用方法 | |
WO2019081688A1 (en) | POROUS FIBROUS SEPARATION MATERIAL | |
EP1165159B1 (en) | Oligosaccharide supports for e.g. removal of antibodies from blood | |
EP1507563B1 (en) | Endotoxin-binding ligands and their use | |
EP2144681A1 (en) | Material for separation of a biomolecule | |
US20150190563A1 (en) | Hydrophilic resin compound having sugar chain affixed thereto, polymer substrate for virus-removal, and biocompatible material | |
WO2007100294A1 (en) | Material system for blood products | |
WO2000041718A1 (en) | Method and apparatus for selectively removing xenoreactive antibodies from blood, serum or plasma |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20150311 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20160225 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20160301 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160526 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160831 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20170110 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170509 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20170510 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20170627 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170718 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170724 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6182532 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |