JP2014527832A - 生体組織の保存方法 - Google Patents
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Abstract
Description
血小板血漿(アフェレーシス療法を経た献血から得られた)は、バクスター社製のプラスチック袋(Baxter's plastic bags PL 1813/1)に入れられた。
貯蔵のために、血小板血漿を含む袋がその中に置かれた密閉チャンバーが、実験において使用された。このチャンバーは、少なくとも5barの内圧に耐えられるように設計され、加圧下でキセノンと酸素を供給するための導管および前記チャンバー内に供給されるガスの量と割合およびチャンバー内のガス圧をコントロールするための流量計と圧力計を備えるように、特別に製造された。キセノンと酸素は、個別の高圧ボトルから供給された。
プリセット温度4℃の医療用冷蔵庫が、前記冷却チャンバーとして使用された。
細胞の数−貯蔵後のポピュレーション保存の程度を示すパラメーター。このパラメーターは、実験開始時−血小板血漿保存開始前の細胞の数からパーセンテージとして計算される。
PH値−血小板(pH理想値は7.4)の生存能と機能性を決定するパラメーターの一つ。6.2より低いあるいは7.8より高いpH値を有する場合、血小板(患者に輸血される)は、人体から有害物質を取り除く浄化システムによって血流から速やかに除去されるであろう。6.2〜7.8の範囲内のpH値は、保存の良好な結果であると考えられる。pH値に関する最も良い結果は、7.4に等しいpHである。
乳酸塩濃度−酸素欠乏コンディション下での貯蔵の間の細胞の生存能を示すパラメーター。乳酸塩濃度は、代謝プロセスのため、貯蔵の間増加する。高い濃度の乳酸塩は、血小板に対し毒性となる。さらに、乳酸塩濃度が20mM/lより高い場合、血漿pHの値は、6.2以下に下がる可能性がある。血小板の生存能および機能性は、このpH低下の結果として、低下する。貯蔵された血小板血漿中の乳酸塩の許容濃度は、最大5日までの期間室温で貯蔵された血小板血漿の乳酸塩濃度の値を超えるべきではない。
グルコース濃度−代謝にも関連し、且つ「細胞のための食糧予備」を反映するパラメーター。もし、血小板血漿中のグルコース濃度が、貯蔵後に大きく減少すれば、一定の割合の血小板は、生存できないかもしれず、且つ輸血後、そのような血小板は、その機能を実行することができず、血液から排除されるであろう。
サンプル1(フレッシュ)−アフェレーシスによって得られた60msの新鮮なヒト血小板血漿の濃縮物
サンプル2(コントロールRT)−室温で5日間貯蔵後の血小板血漿(標準的な貯蔵方法)
サンプル3(コントロール+4)−温度4℃の冷蔵庫中で、大気圧下、14日間貯蔵した後の血小板血漿
実験結果は、以下のことを示す;
1)血小板細胞の数に関して、最も良い結果は、酸素濃度約13%(サンプル6)で得られた。
2)pH値に関して、最も良い結果は、酸素濃度13%および21%(サンプル6および7)で得られた。
3)乳酸塩濃度に関して、最も良い結果は、酸素濃度21%(サンプル7)で得られた。しかしながら、酸素濃度13%で得られた結果は、わずかに異なるだけであり、他のサンプルの結果は、最も良い結果(サンプル7)と比べて25〜50%異なった。
4)グルコース濃度に関して、許容できる結果は、酸素がガス混合物の組成中に存在する全てのサンプルで得られた。最も良い結果は、酸素濃度13%(サンプル6)で得られた。
Claims (20)
- 血小板保存のための方法であって、
a)血小板を含む組成物を、キセノンと酸素を含むガス混合物中に置く工程
b)前記血小板を含む組成物を、前記ガス混合物の存在下で、第一期間の間、第一温度にて、前記ガス混合物中のキセノンが、前記血小板を含む組成物を少なくとも部分的に飽和するまで維持する工程
c)キセノンで少なくとも部分的に飽和された前記血小板を含む組成物を、前記第一温度より低い第二温度まで冷却する工程、および
d)前記血小板を含む組成物を前記第二温度で、第二期間の間維持する工程
を含む方法。 - 前記ガス混合物が、50%より多くのキセノンと約21%以下の酸素を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記ガス混合物が、79%〜95%のキセノンと5%〜21%の酸素を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記ガス混合物が、79%〜95%のキセノンと5%〜21%の酸素を含む、請求項2に記載の方法。
- 前記第一温度が18℃〜37℃である、請求項1に記載の方法。
- 前記第一温度が18℃〜37℃である、請求項2〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 第一期間の間、第一温度で、前記血小板を含む組成物を、前記ガス混合物の存在下で維持する工程が、前記血小板を含む組成物を少なくとも1barの圧力にかけることを含む、請求項1に記載の方法。
- 第一期間の間、第一温度で、前記血小板を含む組成物を、前記ガス混合物の存在下で維持する工程が、前記血小板を含む組成物を少なくとも1barの圧力にかけることを含む、請求項2〜6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第二温度が約0.1℃〜6℃である、請求項1に記載の方法。
- 前記第二温度が約0.1℃〜6℃である、請求項2〜8のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第二期間が5日より長い、請求項1に記載の方法。
- 前記第二期間が5日より長い、請求項2〜10のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第一期間が前記第二期間より短い、請求項1に記載の方法。
- 前記第一期間が前記第二期間より短い、請求項2〜12のいずれか1項に記載の方法。
- 前記第一期間が10時間以下である、請求項1に記載の方法。
- 前記第一期間が10時間以下である、請求項2〜14のいずれか1項に記載の方法。
- 前記血小板を含む組成物が、前記第一期間の間、前記第一温度にて、キセノンガスによる完全飽和の少なくとも80%になる、請求項1に記載の方法。
- 前記血小板を含む組成物が、前記第一期間の間、前記第一温度にて、キセノンガスによる完全飽和の少なくとも80%になる、請求項2〜16のいずれか1項に記載の方法。
- 前記組成物が、前記ガス混合物に透過性の袋あるいは容器内に置かれ、前記組成物が、密閉チャンバーの中で、前記ガス混合物と接触させられる、請求項1に記載の方法。
- 前記組成物が、前記ガス混合物に透過性の袋あるいは容器内に置かれ、前記組成物が、密閉チャンバーの中で、前記ガス混合物と接触させられる、請求項2〜18のいずれか1項に記載の方法。
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