JP2014506230A - トリプタミン誘導体、その製造方法および胃疾患についての使用 - Google Patents

Abstract

本発明は様々なトリプタミン誘導体の合成法及び胃保護効果の評価に関する。当該誘導体は、公知抗酸化分子のアミド又はエステルとして合成され、良好な抗酸化性を示す。セロトニンと没食子酸から生成されるＳＥＧＡ（３ａ）は、他の合成化合物よりも抗酸化性が強い。当該誘導体は、ＮＳＡＩＤｓが誘発した胃疾患に対し胃保護能力を示し、治癒を加速させ、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリア酸化ストレスを防ぐ。当該誘導体は、カスパーゼ９及びカスパーゼ３の活性化を防ぎ、ＮＳＡＩＤが誘発したミトコンドリア酸化ストレスを介したアポトーシスを妨げ、ＮＳＡＩＤｓが媒介したミトコンドリア膜電位や脱水素酵素活性の衰弱を回復させる。当該誘導体は、ミトコンドリア内ＲＯＳ補足剤や鉄キレート剤として重要であり、従って、有力な抗酸化抗アポトーシス分子であり、ＮＳＡＩＤｓが誘発した胃疾患及びストレスやアルコールが媒介した胃損傷を効果的に防ぐ。

Description

本発明は一般式（１）で表される化合物に関する。

式中、Ｒ₁は−ＯＨ、または−Ｈ、または−ＯＭｅ、または以下の式である。

Ｒ₂はＨ、−ＣＯＭｅ、または以下の式である。

本発明はさらに、数種類の公知抗酸化分子を用いたアミドまたはエステルを形成することにより合成された、一般式（１）で表されるトリプタミン誘導体に関する。当該抗酸化剤としては、たとえば、没食子酸（ガリック酸）、クマル酸（４−ヒドロキシシンナミック酸）、およびインドール−３−酢酸がある。

本発明はさらに、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、ストレスまたはエタノールにより誘発される胃疾患／胃粘膜損傷を防ぐ、抗酸化効果および抗アポトーシス効果が有用である一般式（１）で表されるトリプタミン誘導体に関する。

非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）は、痛み、リュウマチ性疾患、炎症および変形性関節症の治療に、世界中で最も有用な薬である（Ｈａｒｔｈ Ｍ、ｅｔ ａｌ．、“Ｂｒ Ｍｅｄ Ｊ”、１９６６、１、５４７９、８０−８３）。

ＮＳＡＩＤｓは解熱効果を有しており、熱の治療に用いられている（Ｋｏｅｂｅｒｌｅ Ａ、ｅｔ ａｌ.、“Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ”、２００９、１６、３２、４２７４−９６）。よって、ＮＳＡＩＤｓを用いた治療を避けることはできないが、ＮＳＡＩＤｓ治療に伴う主な限界は、大量出血や消化不良を伴う深刻な胃疾患や胃粘膜損傷が発生することである。ＮＳＡＩＤに関する上部消化管の副作用により、アメリカにおいて年１０３０００件の入院および１６５００件の死亡が生じていると推定される（Ｇｒｅｅｎ Ｇ．Ａ．、“Ｃｌｉｎ Ｃｏｒｎｅｒｓｔｏｎｅ”、２００１、３、５、５０−６０）。ＮＳＡＩＤｓは吐き気／嘔吐、下痢の原因でもある（Ｓｉｍｏｎｅ Ｒｏｓｓｉ、ｅｄ．、“Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ ｍｅｄｈｉｃｉｎｅｓ ｈａｎｄｂｏｏｋ ２００６”、Ａｄｅｌａｉｄｅ、Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ｈａｎｄｂｏｏｋ Ｐｔｙ Ｌｔｄ、２００６）。

雑誌「Ｍａｉｔｙ Ｐ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ”、２００８、２８３、２１、１４３９１−１４４０１」を参照すると、当該雑誌において、ＮＳＡＩＤが誘発する胃疾患の主な原因は、活性酸素種（ＲＯＳ）の過剰生成の結果、胃粘膜に酸化ストレスが発生することであるとわかっている。

ＲＯＳは、ミトコンドリアおよびデスレセプターの両方の誘導を経緯し、胃粘膜細胞のアポトーシス経路を介する、胃疾患を誘発すると記載されている（Ｍａｉｔｙ Ｐ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ Ｐｉｎｅａｌ Ｒｅｓ”、２００９、４６、３、３１４−３２３）。事実、ＮＳＡＩＤｓはミトコンドリア症状（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ）を引き起こす。当該症状は、ミトコンドリア内のＲＯＳ、例えば酸化ストレスを引き起こすＯ₂ ^・-、Ｈ₂Ｏ₂および^・ＯＨ、の発生が増加することに関連する。Ｏ₂ ^・-は、ミトコンドリアアコニターゼに最も効果的に損傷を与え、鉄−硫黄クラスターから鉄を遊離する原因となる。遊離された鉄は、ミトコンドリア内のＨ₂Ｏ₂と作用し、^・ＯＨを形成する。興味深いことに、ミトコンドリア内で^・ＯＨが発生することは、インドメタシンが原因の、ミトコンドリア症状の発生およびミトコンドリア死経路の活性化に対し、重要である（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００９、２８４、３０５８−３０６８）。

デスフェリオキサミンを用いた遊離鉄のキレート化、あるいは胃粘膜の酸化ストレスの妨害、により、胃粘膜損傷を防ぐことができる（Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｙ ｅｔ ａｌ．、“Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．”、２００２ Ｎｏｖ １、７１、２４、２８４５−６５）。ＮＳＡＩＤにより誘発される胃粘膜損傷において、胃粘膜中のセロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）が遊離し関与していることも（Ｏｇｉｈａｒａ Ｙ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊｐｎ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ”、１９９３、６１、２、１２３−１３１）、明白である。セロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン）は生体アミンであり神経伝達物質として知られている（Ｋｕｓｈｎｉｒ ＩＨ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｉｚｉｏｌ Ｚｈ”、２００９、５５、３、１２５−１２７）。

セロトニンは血管収縮により胃粘膜血流（ＧＭＢＦ）を減少させ、その結果、局所貧血が促進されることによってＲＯＳが発生し、急性胃損傷が引き起こされることは述べておくべきことである（Ｗｏｎｇ Ｓ．Ｈ、ｅｔ ａｌ．、“Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ”、１９９０、４５、１、５２−６０、 Ｙｏｎｅｄａ Ｍ、ｅｔ ａｌ．、“Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ”、１９９５、２６９、１ Ｐｔ ２、Ｒ１−６、Ｋｈａｎ Ｍ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｅｘｐ Ｔｈｅｒ”、２００７、３２３、３、８１３−８２１）。セロトニンは、粘膜細胞の分泌機能を減少させて胃粘膜の防衛機能に不利に作用し、上皮および血管の保全性を弱める。好中球が活性化することは、ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）活性の上昇を経緯し、５−ＨＴの有害な効果の原因の一部であると思われる（Ｋｏ Ｊ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、１９９８、２４、６、１００７−１０１４）。

インドメタシン、［非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）］、エタノール（Ｗｏｎｇ Ｓ．Ｈ、ｅｔ ａｌ．、“Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ”、１９９０、４５、１、５２−６０）、ストレスにより誘発される胃潰瘍（Ｄｅｂｎａｔｈ Ｓ、ｅｔ ａｌ．、“Ｉｎｄｉａｎ Ｊ Ｅｘｐ Ｂｉｏｌ”、２００７、４５、８、７２６−７３１）において、セロトニンが重大な役割を果たすことは、述べる価値がある。セロトニンは、ＲＯＳ発生を経て酸化ストレスを引き起こすことができる（Ｂｉａｎｃｈｉ Ｐ、ｅｔ ａｌ．、“ＦＡＳＥＢ Ｊ”、２００５、１９、６、６４１−６４３）。セロトニンは炎症に反応して遊離され（Ｙｏｎｅｄａ Ｍ、ｅｔ ａｌ．、“Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ”、１９９５、２６９、１ Ｐｔ ２、Ｒ１−６）、セロトニンにより誘発される粘膜中のＸＯ活性種が増加することにより、フリーラジカル生成物が誘発され、潰瘍発生過程を調整出来る可能性がある（Ｋｏ Ｊ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、１９９８、２４、６、１００７−１０１４）。セロトニンは、受容体非依存性および受容体依存性メカニズムによって、ＲＯＳを発生させる（Ｂｉａｎｃｈｉ Ｐ、ｅｔ ａｌ．、“ＦＡＳＥＢ Ｊ”、２００５、１９、６、６４１−６４３）。胃潰瘍あるいは胃疾患は、胃粘膜の炎症疾患の一種である（Ｍｉｅｒｚｗａ Ｇ、ｅｔ ａｌ．、“Ｍｅｄ Ｗｉｅｋｕ Ｒｏｚｗｏｊ”、２００５、９、４、６４７−６５４）。

よって、ＲＯＳやキレート化合物から遊離された鉄を除去でき、同時にＮＳＡＩＤが誘発した胃疾患や関連障害と戦うためにセロトニンと対応受容体の相互作用を防ぐことができる、分子を合成することには大きな利点がある。

鉄キレート剤である没食子酸（ＧＡ）は、胃を保護する化合物であり、ＮＳＡＩＤが誘発した胃粘膜損傷を効率的に防ぐ（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７）。機構研究によって、ＧＡは、ＮＳＡＩＤにより誘発されたミトコンドリア酸化ストレスおよび胃粘膜細胞アポトーシスを防ぐことにより胃の保護効果を提供し、さらにＮＳＡＩＤにより誘発されたミトコンドリア機能不全を防ぐことが、明らかになった（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７）。

本発明は、ＧＡと結合しアミドまたはエステルを形成する様々なトリプタミン（セロトニンに似た分子）誘導体、およびＧＡを他の公知抗酸化剤、例えばクマル酸、３−インドール酢酸、に置き換えた他の構造のトリプタミン誘導体を提供する。セロトニンの主な欠点は毒性である。他方、ＧＡの限界は生物学的利用能（ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ）が低いことである（Ｓｈａｈｒｚａｄ Ｓ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ Ｎｕｔｒ”、２００１、１３１、４、１２０７−１２１０）。薬物動態学および生物学的利用能の研究により、ＧＡは４−Ｏ−メチル没食子酸に非常に早く代謝され、血漿中の生物学的利用能が低いことが示されている。ＧＡ摂取量の３８％が尿に排泄された（Ｓｈａｈｒｚａｄ Ｓ、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ Ｎｕｔｒ”、２００１、１３１、４、１２０７−１２１０、 Ｍａｎａｃｈ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ａｍ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ”、２００５、８１、１ Ｓｕｐｐｌ、２３０Ｓ−２４２Ｓ）。インドール−３−酢酸およびクマル酸は、フリーラジカルを除去することにより重要な抗酸化剤活性を示す（Ｃａｎｏ Ａ、ｅｔ ａｌ、“Ａｎａｌ Ｂｉｏａｎａｌ Ｃｈｅｍ”、２００３、３７６、３３−３７、 Ｋｙｌｌｉ Ｐ、“Ａｎａｌ Ｂｉｏａｎａｌ Ｃｈｅｍ”、２００３、３７６、３３−３７）。セロトニン誘導体（本研究の化合物２ｂ）は、セロトニンＮ−ヒドロキシシンナモイル転移酵素（ＳＨＴ）により、セロトニンとクマル酸の結合によって生合成されることが報告されている（Ｋｉｙｏｏｎ Ｋａｎｇ ｅｔ ａｌ、“Ａｐｐｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ”、２００９、８３、２７−３４）。当該化合物はセントーレアモンタナ（Ｃｅｎｔａｕｒｅａ ｍｏｎｔａｎａ、キク科）の種から単離されたものであり、試験管内でＣａＣｏ２大腸癌細胞に対して細胞障害活性を示す（Ｍｏｈａｍｍａｄ Ｓｈｏｅｂ ｅｔ ａｌ、“Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ”、２００６、６２、１１１７２−１１１７７）。

現存する胃保護化合物、例えばプロトンポンプインヒビター（オメプラゾール、ランソプラゾールなど）、Ｈ₂受容体遮断薬（ラニチジン、シメチジンなど）、には限界がある。当該現存化合物は、ＮＳＡＩＤにより生じた胃疾患に対し、非常に少量の投与量で効果を有するが、下痢（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ Ｓ．、“Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ”、２００３、１８、５、６０２−６０３）、線形粘膜欠陥、粘膜の脆弱化といった副作用を有する。当該症状は、コラーゲン形成大腸炎、ライジッヒ細胞腫、亜急性皮膚エリテマトーデス、多発筋炎を含む筋障害、急性腎炎およびアナフィラキシー反応に関連する（Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ Ｓ．、“Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ”、２００３、１８、５、６０２−６０３、Ｃｌａｒｋ Ｄ．Ｗ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｕｎｄａｍ Ａｐｐｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ”、１９９５、２６、２、１９１−２０２）。プロトンポンプインヒビターは、細菌感染症および関連障害の増加リスクと関連することが報告されている（Ｄｉａｌ Ｓ、ｅｔ ａｌ．、“ＪＡＭＡ”、２００４、２９２、１６、１９５５−１９６０）。

本発明により合成された誘導体はいくつか利点を有する。当該誘導体は、試験管内で、遊離鉄をキレート化し、ＲＯＳを除去することにより酸化ストレスを防ぎ、同時に抗アポトーシス効果を提供できる。当該誘導体は、生体内でＲＯＳの除去をするだけでなく、鉄が媒介するＯＨの形成を妨げる能力も有する。当該誘導体は、ＮＳＡＩＤｓにより誘発される、ＲＯＳが媒介した胃粘膜細胞アポトーシスの活性化を妨げることによって、胃粘膜酸化ストレスおよび胃疾患を防ぐことができる。

本発明の主な目的は、一般式（１）で表される化合物を提供することにある。本発明の他の目的は、ストレスはもちろん、ＮＳＡＩＤｓ、エタノールにより誘発された胃疾患治療のための新しいスキャフォールドを提供することにある。

本発明の別の目的は、セニトロン分子のアミノ基を保護することによって、セロトニンの毒性を減らすことにある。

本発明のさらに別の目的は、セニトロン受容体アンタゴニストを形成することによって、セニトロンが誘発した疾患の治療用分子を提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、抗酸化剤分子を、生体内はもちろん、試験管内でも提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、抗アポトーシス分子を、生体内はもちろん、試験管内でも提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、ＮＳＡＩＤｓにより誘発された、ミトコンドリア機能障害はもちろん、ミトコンドリア酸化ストレスも防ぐ分子を提供することにある。

本発明のさらに別の目的は、ミトコンドリア内ＲＯＳ（活性酸素種）の捕捉はもちろん、ミトコンドリア鉄キレート化を、促進させることにある。

従って、本発明は一般式（１）の化合物を提供する。

式中、Ｒ₁はＯＨ、Ｈ、ＯＭｅ、または以下の式であり、

Ｒ₂はＨ、−ＣＯＭｅ、

または

である。

本発明の一実施態様では、前記化合物は：
３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド；ＳＥＧＡ（３ａ）；
Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３，４，５−トリヒドロキシベンズアミド ＴＲＧＡ（３ｂ）；
３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド ＭＥＧＡ（３ｃ）；
（Ｅ）−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド ２ｂ；
（Ｅ）−Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド ２ｅ；
（Ｅ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アクリルアミド ２ｈ；
Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）アセトアミド ２ｃ；
Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）アセトアミド ２ｆ；
２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アセトアミド；２ｉ；
３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ３，４，５−トリヒドロキシベンゾエート ＧＡＳＡ（４ｄ）；
３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ５−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミノ）−５−オキソペンタノエート ６ｃ；または
Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アセトアミド ５ａである。

本発明の別の実施態様は、前記化合物の構造式は以下の式で表される化合物である：

本発明のさらに別の実施態様は、前記化合物は胃疾患の治療に有用である。

本発明のさらに別の実施態様は、前記化合物は試験管内で抗酸化性を示す。

本発明のさらに別の実施態様は、６分、６５分における鉄還元抗酸化力（ＦＲＡＰ）値、および２、２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）アッセイにおける吸光度変化値は、それぞれ１．６５±０．０６〜３９．５１±２．７、１．８３±０．２９〜６０．６１±７．３および０．１０７±０．０２〜０．４４９±０．０８の範囲にある。

本発明のさらに別の実施態様は、構造式ＳＥＧＡ、ＧＡＳＡ、ＴＲＧＡおよびＭＥＧＡの化合物が示す潰瘍指数（ｕｌｃｅｒ ｉｎｄｅｘ）が、３０±３〜６１±３の範囲の値にある。

本発明のさらに別の実施態様は、医薬組成物は、薬学的に許容可能なキャリアとともに一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物を含有する。

本発明のさらに別の実施態様は、動物の胃疾患の治療方法において、一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物が有効量投与されることを含む。

本発明のさらに別の実施態様は、前記胃疾患は非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、エタノールおよび寒冷拘束ストレス（ｃｏｌｄ‐ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ ｓｔｒｅｓｓ）が原因であり、ミトコンドリア酸化ストレスの発生およびその後の胃粘膜細胞アポトーシス誘導を経緯している。

本発明のさらに別の実施態様は、一般式（１）の化合物の有効量は１ｍｇｋｇ^-1〜５０ｍｇｋｇ^-1の範囲にある。

本発明のさらに別の実施態様は、一般式（１）の化合物が腹腔内に投与される。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）のＥＤ₅₀値は６〜８ｍｇｋｇ^-1である。

本発明のさらに別の実施態様は、構造式ＳＥＧＡ（３ａ）の化合物は、３［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）還元アッセイを用いて確立される、非毒性分子である。

本発明のさらに別の実施態様は、一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物を有効量投与することにより、培養された胃粘膜細胞の試験管内における損傷を防ぐ方法である。

本発明のさらに別の実施態様は、請求項２に記載の構造式ＳＥＧＡ（３ａ）、２ｂ、２ｃ、ＴＲＧＡ（３ｂ）、２ｅ、２ｆ、ＭＥＧＡ（３ｃ）、２ｈ、２ｉ、４ｄの化合物の製造方法であり、次の工程を含む：
i． トリプタミン誘導体および置換された酸を１：１．２〜１：２の比の範囲で１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カーボジイミドヒドロクロライド（ＥＤＣヒドロクロライド）を用いて縮合し、次いで構造式２ａ−Ｉ、４ｂ、６ｂの化合物を得るために２〜３％メタノール含有クロロホルムへ溶出させて分離する工程、
ii． 構造式３ａ、３ｂ、３ｃ、４ｃの化合物を得るために、構造式２ａ、２ｄ、２ｄの化合物を水素添加する工程、
iii． 工程（i）で得た６ｂまたは工程（ii）で得た４ｃを、１０〜２０％ＣＨ₂Ｃｌ₂およびギ酸に、０〜１℃の温度範囲で混合し、次いで２５〜２７℃の温度範囲で５０〜８０分間撹拌し、６ｃ、４ｄをそれぞれ得る工程。

本発明のさらに別の実施態様は、トリプタミン誘導体は、セロトニンハイドロクロライド（５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド）、トリプタミンハイドロクロライド、５−メトキシトリプタミン、ｔｅｒｔブチル２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルカルバメートからなる群から選択される。

本発明のさらに別の実施態様は、置換された酸は、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸、クマル酸、インドール−３−酢酸、セロトニンハイドロクロライド（５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド）からなる群から選択される。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、生体内でＮＳＡＩＤが誘発したカスパーゼ−３活性を妨害するだけでなく、ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）アッセイを行うことによって、ＮＳＡＩＤが誘発した胃粘膜アポトーシスを減少させる。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）はミトコンドリアのアポトーシス経路を、ＮＳＡＩＤが誘発したカスパーゼ−９活性を妨害することによって保護する。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）はＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリアのタンパク質のカルボニル形成を妨げる。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）はＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリアの脂質過酸化反応を保護する。

本発明のさらに別の実施態様は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）はＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリアの全チオールの枯渇を妨げる。

本発明のさらに別の実施態様は、前記化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、細胞内活性酸素種（ＲＯＳ）の発生を防ぐために、培養された細胞内の遊離鉄を除去する。

本発明のさらに別の実施態様は、前記化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリアの脱水酵素活性抑制を妨げる。

ＳＥＧＡ（３ａ）、２ｂ、２ｃの合成スキームを表す。当該スキームにおいて、試薬および条件は、（i）ベンジルクロライド、Ｋ₂ＣＯ₃、Ｂｕ₄Ｎ⁺Ｉ^-、アセトン４時間還流、８０％；（ii）２０％ＫＯＨ、エタノール、３時間還流、８４％；（iii）セロトニンハイドロクロライド、ＲＣＯＯＨ、ＥＤＣ−ＨＣｌ、Ｅｔ₃Ｎ、ＤＭＦ、室温一晩；（iv）１０％Ｐｄ−Ｃ、メタノール ｒｔ（室温、２７℃）、２ｈ、である。 ＴＲＧＡ（３ｂ）、ＭＥＧＡ（３ｃ）、２ｅ、２ｆ、２ｈ、および２ｉの合成スキームを表す。当該スキームにおいて、試薬および条件は、（i）Ｒ₁ＮＨ₂、Ｒ₂ＣＯＯＨ、ＥＤＣ−ＨＣｌ、Ｅｔ₃Ｎ、ＤＭＦ、１２時間、ｒｔ（室温、２７℃）、（iv）１０％Ｐｄ−Ｃ、メタノール ｒｔ（室温、２７℃）、３０分、である。 ＧＡＳＡ（４ｄ）の合成スキームを表す。当該スキームにおいて、試薬および条件は、（i）ＮａＨＣＯ₃、ＮａＣｌ、Ｈ₂Ｏ、（ＢＯＣ）₂Ｏ、ＣＨＣｌ₃、３時間還流、９５％；（ii）１ｂ、ＥＤＣ−ＨＣｌ、ＤＭＡＰ、ＤＭＦ、ｒｔ（室温、２７℃）、１２時間、（iii）１０％Ｐｄ−Ｃ、メタノール ｒｔ、２ｈ、（iv）ＣＨ₂Ｃｌ₂、９６％ＨＣＯＯＨ、３０％ＮＨ₃水溶液、ｒｔ（室温、２７℃）、３ｈ、８１％である。 ５ｃの合成スキームを表す。当該スキームにおいて、試薬および条件は、（i）ＢＢｒ₃、ＤＣＭ、−７８℃、ｒｔ（室温、２７℃）一晩、４５％である。 ６ｃの合成スキームを表す。当該スキームにおいて、試薬および条件は、（i）グルタル酸無水物、ＤＭＡＰ、Ｅｔ₃Ｎ、ＴＨＦ、還流４時間、７４％；（ii）セロトニンハイドロクロライド、ＥＤＣ−ＨＣｌ、Ｅｔ₃Ｎ、ＤＭＦ、（室温、２７℃）、１２時間、５６％；（iii）ＣＨ₂Ｃｌ₂、９６％ＨＣＯＯＨ、３０％ＮＨ₃水溶液、ｒｔ ３ｈ、８１％である。 試験管内で抗酸化性を示したトリプタミン誘導体を表す。（Ａ）様々な時間間隔で、様々な構造のトリプタミン誘導体の存在下、鉄還元抗酸化力（ＦＲＡＰ）アッセイにより、５９５ｎｍにおける吸光度変化を測定した。当該値は３セットの平均±標準誤差（ＳＥＭ）である。（Ｂ）様々な時間間隔で、トリプタミン誘導体と数種類の公知抗酸化剤との、抗酸化活性の比較分析である。当該値は３セットの平均±標準誤差（ＳＥＭ）である。 ＦＲＡＰアッセイを用い、様々な濃度において、ＳＥＧＡ（３ａ）と数種類の公知抗酸化剤との、抗酸化活性の比較分析を表す。 様々な濃度における、様々なトリプタミン誘導体の、２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）フリーラジカルの除去活性を表す。 （Ａ）潰瘍指数の測定により、様々な投与量でＳＥＧＡ（３ａ）が、インドメタシンが誘発した胃粘膜損傷を保護することを表す。（Ｂ）「物質と方法」に記載の通り潰瘍指数を測定し、ＳＥＧＡ（３ａ）が、ジクロフェナクが誘発した胃疾患を防ぐ。データは平均±標準誤差（ＳＥＭ）を表す。（^###はインドメタシンまたはジクロフェナクに対しｐ＜０．００１、ｎ＝６）。 動物（ラット）モデルを用い、エタノール、ストレスが誘発した胃粘膜損傷におけるＳＥＧＡ（３ａ）の効果を示す。（^***はコントロールに対しｐ＜０．００１、^###はエタノールまたはストレスに対しｐ＜０．００１、ｎ＝５）。 コントロール、インドメタシン処理、およびＳＥＧＡ（３ａ）前処理後インドメタシン処理、のラットから得た、胃粘膜切片のヘマトキシリン−エオシン染色を表す。 潰瘍指数により測定されているように、インドメタシンが誘発した胃粘膜損傷の治癒を、ＳＥＧＡ（３ａ）が加速していることを表す。データは平均値±標準誤差（ＳＥＭ）を表した（^###はインドメタシンに対しｐ＜０．００１、ｎ＝４）。 ＳＥＧＡ（３ａ）が、生体内で非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）が誘発したミトコンドリア酸化ストレスを防ぐことを表す。ＳＥＧＡ（３ａ）はインドメタシン、ジクロフェナクが誘発したミトコンドリア内タンパク質のカルボニル形成やミトコンドリアの脂質の過酸化を防ぎ、インドメタシン、ジクロフェナクが誘発したミトコンドリア内チオール濃度の減少を防ぐ。データは平均値±標準誤差（ＳＥＭ）を表した（^***はコントロールに対しｐ＜０．００１、^###はインドメタシンに対しｐ＜０．００１、ｎ＝５）。 ＳＥＧＡ（３ａ）が、インドメタシンが誘発したアポトーシスを生体内で防ぐことを表す。（Ａ）ＳＥＧＡは、投与量に依存して、インドメタシンが誘発したカスパーゼ−３活性を防ぐ。データは平均値±標準誤差（ＳＥＭ）を表した（^***はコントロールに対しｐ＜０．００１、^###はインドメタシンに対しｐ＜０．００１、ｎ＝６）。（Ｂ）ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼｄＵＴＰニック末端標識（ＴＵＮＥＬ）アッセイ（矢印で示される、濃茶染色部はアポトーシス性ＤＮＡフラグメンテーションを示唆する）により、インドメタシンは胃粘膜細胞アポトーシスを引き起こし、ＳＥＧＡ（３ａ）はインドメタシンが誘発した胃粘膜アポトーシスをブロックすることが示される。 ＳＥＧＡ（３ａ）が、生体内において、インドメタシンが誘発したミトコンドリアのアポトーシス経路を防ぐことを表す。ＳＥＧＡはインドメタシンが誘発したカスパーゼ−９活性を防ぐ。データは平均値±標準誤差（ＳＥＭ）を表した（^***はコントロールに対しｐ＜０．００１、^###はインドメタシンに対しｐ＜０．００１、ｎ＝６）。 ＳＥＧＡ（３ａ）が、試験管内で、インドメタシンが誘発した胃粘膜細胞アポトーシスを防ぐことを表す。ＴＵＮＥＬアッセイは、ＧＡが一次培養胃上皮細胞のアポトーシスを妨げることを示す。第１列はヨウ化プロピジウム（ＰＩ）によって染色された核を示し、第２列はアレキサフルオール（Ａｌｅｘａ Ｆｌｏｕｒ）４８８により染色されたアポトーシス性ＤＮＡフラグメンテーションを示し、第３列は第１（ＰＩ）および第２（アレキサフルオール４８８）列の写真を合成したものを示す。 ＳＥＧＡ（３ａ）が、ＮＳＩＡＤｓが誘発したミトコンドリア機能障害を防ぐことを表す。（Ａ）下記「物質と方法」の記載通り、ＭＴＴアッセイにより測定されるように、ＳＥＧＡは、ミトコンドリア機能障害を回復させる。（Ｂ）ＳＥＧＡは、インドメタシン、ジクロフェナクが誘発した膜電位（ΔΨ_m）の減少を防ぐ。当該電位はＪＣ−１吸収に示される。 試験管内で、ＳＥＧＡ（３ａ）が、ＮＳＡＩＤによって発生されたミトコンドリア内過酸化物（Ｏ₂ ^・-）を除去することを表す。ミトソックスレッド（ＭｉｔｏＳＯＸ Ｒｅｄ）により検出されるミトコンドリア内のＯ₂ ^・-の発生により、細胞が染色される。当該細胞は、コントロール、インドメタシン処理およびＳＥＧＡ前処理した、胃粘膜培養細胞である。 試験管内で、ＳＥＧＡ（３ａ）の遊離鉄キレート特性を表す。遊離鉄の発生は、フェングリーンＳＫ（Ｐｈｅｎ Ｇｒｅｅｎ ＳＫ）によって検出され、細胞が染色される。当該細胞は、コントロール、インドメタシン処理およびＳＥＧＡ前処理した胃粘膜培養細胞である。

本発明において、トリプタミン誘導体ＳＥＧＡ（３ａ）、ＴＲＧＡ（３ｂ）、ＭＥＧＡ（３ｃ）、ＧＡＳＡ（４ｄ）、２ｂ、２ｃ、２ｅ、２ｆ、２ｈ、２ｉ、５ｃおよび６ｃを、セロトニン、トリプタミン、５−メトキシトリプタミンと、数種類の公知抗酸化剤、例えば没食子酸（ガリック酸）、クマル酸（４−ヒドロキシシンナミック酸）、インドール−３−酢酸など、を縮合することにより合成した。全ての当該誘導体の中で、セロトニンと没食子酸の結合により生成された化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、試験管内で、他の誘導体と比べて特に抗酸化性を示す。

セロトニンの一級アミノ基は、例えばＮ−ガリル（ＳＥＧＡ）３ａ、Ｎ−シンナミル２ｂおよびＮ―インドールアセチル２ｃのような、種々のアミド誘導体にそれぞれ誘導体化される。当該誘導体は、図１に概要を示すように、セロトニンとベンジル化された没食子酸、クマル酸、インドール−３−酢酸をそれぞれ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ．ＨＣｌ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下、それぞれ縮合し、次いで１０％Ｐｄ−Ｃ／Ｈ₂存在下で水素化分解する（３ａを得るために）ことにより合成された。様々な構造のアミンを用いた没食子酸誘導体合成のため、炭酸カリウムおよび触媒テトラｎ−ブチルヨウ化アンモニウムの存在下、没食子酸を塩化ベンジルとともに処理し、ベンジル３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾエイト（１ａ）を得た。その後、２０％ＫＯＨエタノール溶液中還流して加水分解し、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）を得た（図１）。インドール環５位に存在するセロトニンのフリーのヒドロキシル基の重要性を評価するため、さらに５−デオキシ誘導体ＴＲＧＡ（３ｂ）や５−メトキシ誘導体３ｃを、トリプタミンハイドロクロライドおよび５−メトキシトリプタミンをそれぞれ用いて合成した。前記と同様の手法を用いて、クマル酸、インドール−３−酢酸、４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）とアミンを縮合、最終的なアミン誘導体（図２）２ｅ、２ｆ、２ｈ、２ｉ、３ｂおよび３ｃをそれぞれ高収率で得た。セロトニン−没食子酸結合体（没食子酸がセロトニンの一級アミノ基を攻撃しＮ−ガリアミドとなるか、または、没食子酸がセロトニンのフリーのヒドロキシル基を攻撃しｏ−ガリエステルとなるか）の置換基としての没食子酸の効果を理解するために、加えてセロトニン−没食子酸結合体中のフリーアミノ基の効果を確認するために、さらにｏ−ガリエステルＧＡＳＡ（４ｄ）（図３）を合成した。ｏ−ガリエステル（４ｄ）合成に備えて、一級アミノ基をジ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル無水物を用いＢｏｃにより保護し、ｔｅｒｔ−ブチル２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルカルバメート（４ａ）を得た（Ｂｒｅｉｔｉｎｇｅｒ Ｈ．Ｇ、ｅｔ ａｌ．、“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”、２０００、３９、１８、５５００−５５０８）。Ｂｏｃによって保護されたセロトニン４ａを、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）とともに縮合し、エステル４ｂを得た。その後、１０％Ｐｄ−Ｃ／Ｈ₂を用いて水素化分解し、次いで９６％ギ酸の存在下Ｂｏｃ基の脱保護をして、必要な化合物ＧＡＳＡ（４ｄ）を得た（図３）。インドール環５位に存在するメラトニンのフリーメトキシ基の重要性をみるために、図３に示すようにメラトニンをＢＢｒ₃とともに−７８℃で取り扱い、収率４５％で５−ヒドロキシ誘導体５ｃを同様に合成した（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ Ｖ、ｅｔ ａｌ．、“Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ”、２００７、１５、１、５１８−５２５）。最後に、構造活性相関研究（ＳＡＲ）のために、図４に示すように、セロトニンから二量化セロトニン誘導体６ｃを合成した。あくまでも、Ｂｏｃにより保護されたセロトニン４ａを、カルボン酸誘導体６ａに転換したものであり、トリメチルアミンおよびＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下、グルタル酸無水物とともに扱った（Ｓｈｉ Ｗ、ｅｔ ａｌ．、“Ｏｒｇ Ｌｅｔｔ”、２００７、９、２６、５４６１−５４６４）。ＥＤＣの存在下、６ａを他のセロトニン分子と縮合し６ｂが得られ、その後当該化合物を９６％ギ酸を用いて処理し、必要なセロトニン二量体６ｃが得られた（図４）。

全ての当該誘導体は、試験管内で鉄還元抗酸化力アッセイ（ＦＲＡＰアッセイ）においてＦｅ（III）をＦｅ（II）へ還元し、さらにＤＰＰＨアッセイにおいてＤＰＰＨフリーラジカルを除去し、重要な抗酸化性を示す。当該試験は、市販の公知抗酸化剤の存在下、行った。ＳＥＧＡ（３ａ）は、公知抗酸化剤よりも大きな抗酸化力を示す。

当該誘導体は、ＮＳＡＩＤｓ（インドメタシン、ジクロフェナク）が誘発した胃粘膜損傷から、投与量に依存して、胃粘膜を保護する。当該誘導体は、ストレスやエタノールが誘発した損傷からも胃粘膜を保護する。

ＳＥＧＡ（３ａ）はＮＳＡＩＤｓ（インドメタシン、ジクロフェナク）が誘発した胃疾患において、投与量に依存して胃保護効果を示し、当該誘導体はエタノール、ストレスが誘発した胃疾患も妨げる。

ＳＥＧＡ（３ａ）は、ＮＳＡＩＤｓが媒介したミトコンドリアのタンパク質のカルボニル形成、ミトコンドリアのタンパク質の過酸化、およびミトコンドリア内全チオールの枯渇を妨げることによって、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリアの酸化ストレスを防ぐ。

ＳＥＧＡ（３ａ）は、生体内で、ＴＵＮＥＬアッセイにより明らかであるように、インドメタシンが誘発したカスパーゼ−３活性を妨げることにより、インドメタシンが誘発した胃粘膜のアポトーシスを保護する。当該化合物は、ＴＵＮＥＬアッセイにより明らかであるように、試験管内で、培養胃粘膜のアポトーシスも保護する。ＳＥＧＡ（３ａ）は、インドメタシンが誘発したカスパーゼ−９活性を妨げることによって、ミトコンドリアのアポトーシス経路を保護する。

ＳＥＧＡ（３ａ）は、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリア機能障害を妨げ、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリア膜電位低下を回復させ、インドメタシンが誘発したミトコンドリアの脱水素酵素活性低下をチェックし、かつミトコンドリア内の過酸化物を除去する。当該化合物は、ミトコンドリア内のＲＯＳ、すなわち過酸化物、の除去剤としてだけでなく、ミトコンドリア内の鉄キレート剤として重要な役割を果たす。

値は、少なくとも３検体の平均値±標準誤差（ＳＥＭ）である。

値は、少なくとも６検体の平均値±標準誤差（ＳＥＭ）である。

（生物学的効果）
様々な構造を有するトリプタミン誘導体の抗酸化性を評価し、公知抗酸化剤の効力と比較した。種々の異なる合成化合物、ならびに公知の抗酸化剤、ケルセチン、アスコルビン酸および没食子酸について、ＦＲＡＰアッセイによって分析した。ＦＲＡＰアッセイは当該物質のＦｅ³⁺をＦｅ²⁺に還元する能力の測定に基づいており、還元力が大きい程抗酸化性が大きくなる。抗酸化剤はＦｅ³⁺−ＴＰＩＺを青色のＦｅ²⁺−ＴＰＩＺ錯体に還元し、その結果、ＦＲＡＰ値を与える５９５ｎｍの吸光度が増加する。高いＦＲＡＰ値ほど、化合物がより還元能力（すなわち、抗酸化性）を有していることを示す。５９５ｎｍの様々な化合物の存在下、６分における様々な濃度の吸光度変化（図７）だけでなく様々な時間間隔における吸光度変化（図６）も測定した。６分および６５分におけるＦＲＡＰ値は、異なるトリプタミン誘導体および公知の抗酸化剤から計算した（表１）。セロトニン−没食子酸結合体ＳＥＧＡ（３ａ）は、公知の抗酸化剤（没食子酸、ケルセチン、およびアスコルビン酸）だけでなく他のトリプタミン誘導体と比較しても、（Ｆｅ³⁺をＦｅ²⁺への）大きな還元能力を有することが、当該結果より明らかである。セロトニンは抗酸化性を殆ど有さず、二量化後もセロトニン固有の抗酸化性をごく僅かに示すだけで、抗酸化性は増加しない。当該合成誘導体の抗酸化性を、ＤＰＰＨアッセイを用いてさらに測定した。ＤＰＰＨアッセイはＤＰＰＨフリーラジカルの抗酸化分子の除去力に基づいている。除去力が高いほど抗酸化性が高くなる。当該結果は、全誘導体中ＳＥＧＡ（３ａ）が高い除去力を有することを示す（図８）（表２および表３）。当該アッセイを数種類の公知抗酸化剤、例えば、アスコルビン酸、ケルセチンおよび没食子酸の存在下でも、行った。当該測定結果より、ＳＥＧＡ（３ａ）は当該公知酸化剤と同程度の抗酸化力を示すことが分かる（データは示していない）。

ＳＥＧＡ（３ａ）（０．０５Ｎ水酸化ナトリウムに溶解）は、投与量に依存し（ＥＤ₅₀ ６．９ｍｇｋｇ^-1）インドメタシンが誘発した胃粘膜損傷を妨げる。５０、２０、１０、５、３および１ｍｇｋｇ^-1それぞれの投与量において、ＳＥＧＡ（３ａ）は、インドメタシンが誘発した胃粘膜損傷の場合９４％、８２％、６２％、４５％、２８％および１７％、ジクロフェナクが誘発した潰瘍の場合８２％、７２％、５７％、４２％、２５％および２２％保護している（図９）。ＳＥＧＡ（３ａ）はＮＳＡＩＤｓが誘発した胃疾患について胃保護効果を示すだけでなく、エタノール、ストレスが誘発した胃疾患についても胃粘膜を保護する（図１０）。コントロール、インドメタシン処理およびＳＥＧＡ（３ａ）を用いて前処理したインドメタシン処理サンプルについて、胃粘膜細胞を顕微鏡で観察して組織の変化を観察するために、組織学的な研究を行った（図１１）。ＳＥＧＡ（３ａ）が、インドメタシンが誘発した胃粘膜細胞損傷の増加や表面粘膜中の損傷悪化を引き起こす細胞の剥がれから、胃粘膜を保護できることが、当該研究によりさらに示された。インドメタシンが誘発した胃疾患に対する、他のトリプタミン誘導体の効果を見るために、全てのトリプタミン誘導体ＴＲＧＡ（３ｂ）、ＭＥＧＡ（３ｃ）、ＧＡＳＡ（４ｄ）（０．０５Ｎ水酸化ナトリウム溶液に溶解）を、ＳＥＧＡ（３ａ）のＥＤ₅₀量、すなわち６．９ｍｇｋｇ^-1、腹腔内に投与した。当該結果は、当該誘導体は、ＳＥＧＡ（３ａ）よりも胃保護効果が低いことを示す（表４）。セロトニンのみの胃疾患への効果を知るためにセロトニン二量体（６ｃ）を合成した。当該化合物を注射したラットは全て２０分以内に死亡した。当該実験より、セロトニンは毒性を有する分子であることが明らかである。当該結果をクロスチェックするために、５０ｍｇｋｇ^-1および２５ｍｇｋｇ^-1のセロトニンを投与したところ、再度全ラットの死亡が確認された。よって、セロトニンは毒性を有する化合物であるが、それに対し、セロトニン誘導体ＳＥＧＡ（３ａ）は非毒性である、と結論づけることが出来る。当該実験より、セロトニンのアミノ基を没食子酸でブロックすることにより、セロトニン分子を解毒すると結論付けることが出来る。当該化合物はＮＳＡＩＤｓが誘発した既に損傷を受けた胃粘膜を治癒することも可能であり、すなわち当該化合物は治癒過程を加速している（図１２）。

化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、特にＮＳＡＩＤｓ（インドメタシン、ジクロフェナク）が誘発したミトコンドリアの酸化ストレスを防いだ。当該化合物は、ミトコンドリアのタンパク質の酸化（タンパク質のカルボニル化）、ミトコンドリアのチオールの枯渇、およびミトコンドリアの脂質の過酸化を防ぐ。当該結果は、胃粘膜上、タンパク質のカルボニル化、ミトコンドリア脂質の過酸化およびミトコンドリアのチオールの枯渇が増加した場合でも、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）を用いて前処理すると、ＮＳＡＩＤｓ（インドメタシン、ジクロフェナク）が誘発したミトコンドリア酸化ストレスを防いだことを示す（図１３）。よって、当該研究から、化合物ＳＥＧＡは生体内で重要な抗酸化役割を果たすと言える。

ＳＥＧＡ（３ａ）は、潰瘍形成過程において、酸化ストレスにより生じた胃粘膜アポトーシスを妨げる。インドメタシンは、ＲＯＳの発生やその後の酸化ストレス誘発を経緯して、胃粘膜アポトーシスを誘発する。従って、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）の胃保護効果を有する抗酸化剤をさらに調べると、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）の存在または不存在にかかわらず、インドメタシンによるカスパーゼ活性化（アポトーシス指標）が観測された。当該結果は、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、投与量に依存して、インドメタシンが誘発したカスパーゼ−３の活性化を妨げることを示す（図１４Ａ）。

興味深いことに、化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は、インドメタシン処理の間のカスパーゼ−９の活性化も妨げる（図１５）。カスパーゼ−９の活性化は、ミトコンドリアのアポトーシス経路の稼働を示し、当該経路においてはミトコンドリア酸化ストレスの発生が重要な役割を果たす。化合物ＳＥＧＡ（３ａ）は生体内で本質的に抗酸化剤であり、カスパーゼ−９の活性化を妨げることより、当該化合物は、抗アポトーシス効果を提供するミトコンドリアの酸化ストレスを、妨げることを示す。ＴＵＮＥＬアッセイを行うことにより、ＳＥＧＡ（３ａ）は、試験管内で培養された胃粘膜（図１６）だけでなく、生体内でも（図１４Ｂ）インドメタシンが誘発したアポトーシスを妨げると結論づけることが出来る。

ＳＥＧＡ（３ａ）は、ミトコンドリア膜電位や脱水素酵素活性を測定することにより確認される、インドメタシンが誘発したミトコンドリア機能障害を回復させ、ミトコンドリア中の過酸化物を減少させる。ＮＳＡＩＤｓ（インドメタシン、ジクロフェナク）は、５９０ｎｍ（ＪＣ−１集合体）および５３０ｎｍ（ＪＣ−１単体）の蛍光値比率によって測定されるミトコンドリア膜電位（図１７）、ＭＴＴ還元アッセイにより測定されるミトコンドリア脱水素酵素活性（図１７）を増加させる。また、ＮＳＡＩＤｓは、ミトソックス（ｍｉｔｏＳＯＸ）により測定される過酸化物も増加させる（図１８）が、ＳＥＧＡ（３ａ）前処理を行うことにより、ＮＳＡＩＤｓが誘発したミトコンドリア機能障害が全て回復する。ＳＥＧＡ（３ａ）は、また、試験管内において培養された細胞のミトコンドリア中の鉄をキレート化し、当該キレートはフェングリーンＳＫ（Ｐｈｅｎ Ｇｒｅｅｎ ＳＫ）により測定される（図１９）。

以下の実施例は本発明において例示した方法により得られるが、これらは本発明を限定解釈するものではない。

（実施例１：エステルやアミド形状を形成する一般的なＥＤＣカップリング方法）
３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸／クマル酸／インドール−３−酢酸（１当量、１２ｍｍｏｌ）、アミン類（ハイドロクロライド）／アルコール（１．２当量、１４．４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（１当量、１２ｍｍｏｌ、アミンの場合）、Ｅｔ₃Ｎ（６当量、７２ｍｍｏｌ、アミンの場合）／ＤＭＡＰ（１当量、１２ｍｍｏｌ、アルコールの場合）のＤＭＦ溶液に、ＥＤＣハイドロクロライド（１．２当量、１４．４ｍｍｏｌ）を０℃において加えた。その後、反応物の混合体を室温下、ＴＬＣでモニターして、反応終了まで一晩攪拌した。その後、混合物に氷冷Ｈ₂Ｏを加えて反応を停止し、エチルアセテートにより抽出した。合わせた有機相を塩水で洗浄し、Ｎ₂ＳＯ₄を用いて乾燥した。

その後、当該有機相を真空下で濃縮した。濃縮したエチルアセテート抽出物は、シリカゲルカラムを通してクロマトグラフィーによって分離した。

（実施例２：脱ベンジル化反応（水素化分解）の一般的方法）
メタノール−クロロホルム混合溶媒（５：１）（１０ｍＬ）中、化合物と１０％Ｐｄ／Ｃ（触媒）の混合物を、４０ｐｓｉで２ｈ水素化分解し、溶液をシーライトを通して濾過し、触媒を除去した後、濾過液を真空下蒸発乾固させ、生成物を得た。

（実施例３：ＳＥＧＡ（３ａ）の生成プロセス）
ベンジル３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾネート（１ａ）
アセトン（５０ｍｌ）溶媒中、没食子酸（４ｇ、２１．２７ｍｍｏｌ）、ベンジルクロライド（１９．５ｍｌ、０．１７０ｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルヨウ化アンモニウム（触媒）およびＫ₂ＣＯ₃（１４．６７ｇ、１０６ｍｍｏｌ）混合物を６時間還流した。当該混合物を濾過し、濾過ケーキをアセトンでよく洗浄した。濾過液と洗浄液を合わせ、真空下蒸発乾固させた。乾燥後の残留物をエチルアセテート（５０ｍＬ）に溶解させ、Ｈ₂Ｏ（２０×２ｍＬ）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄下蒸発乾固させた。粗残留物を、溶離液として５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製、白色固体の高純度１ａ（９．０１ｇ、８０％）を得た。
Ｒ_f０．５１２（１５％エチルアセテート含有ヘキサン）；ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ２９６３．９８、１７０７．１７、１５９５．７０；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ５．１２（ｓ、６Ｈ）、５．３２（ｓ、２Ｈ）、７．２５−７．４２（ｍ、２２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₃₅Ｈ₃₀Ｏ₅の計算値：５３０．２０；測定値：５５３．０１［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３,４,５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）
１ａ（４ｇｍ、７．５４ｍｍｏｌ）のエタノール溶液（４０ｍＬ）に、２０％ＫＯＨ溶液（１０ｍＬ）を添加した。反応物の混合体を２ｈ還流した。エタノールを真空下蒸発させ、６Ｎ ＨＣｌで中和させた。当該混合物をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）で抽出し、塩溶液で洗浄した（２０ｍＬ）。当該有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、蒸発乾固した。祖残留物を、溶離液として３０％エチルアセテート含有ヘキサンを用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色固体の高純度３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）（２．７８ｇ、８４％）を得た。Ｒ_f＝０．５１５（５０％エチルアセテート含有ヘキサン）。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ２９５８．０５、１６８６．６６、１５９６．４７；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ５．１５（ｓ、６Ｈ）、７．２５−７．４４（ｍ、１７Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₈Ｈ₂₄Ｏ₅の計算値：４４０．１６；測定値：４６３．２３［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド（２ａ）
２ａは、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（８６０ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）および５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド（４９６ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。当該化合物は、２％メタノール含有クロロホルムを用いて溶出され、白色固体（８７４ｍｇ、７５％）として分離された。Ｒ_f：０．４７０（５％メタノール含有クロロホルム）。
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ３．０１（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、５．０３（ｓ、２Ｈ）、５．０７（ｓ、２Ｈ）、６．６７（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、７．０５（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｓ、２Ｈ）、７．１９−７．４６（ｍ、１６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ２４．６６、４０．６１、７１．７６（２Ｃ）、７４．７９、１０２．５９、１０６．１４（２Ｃ）、１１１.７８、１２３．０２、１２６．９５、１２７．２６（６Ｃ）、１２７．５７、１２７．８３、１２８．０８、１２８．１８、１２８．１８（６Ｃ）、１２９．５８、１３１．０６、１３６．３５、１３７．１２、１３７．８３、１４０．２５、１４０．８４、１４９．９９、１５２．２５（２Ｃ）、１６７．３１； ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚＣ₃₈Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₅の計算値：５９８．２４；測定値：６２１．０２［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド（３ａ）
３ａは、２ａに水素添加することにより形成され、少し赤味を帯びた固体として分離された（８３％）。Ｒ_f：０．５１２（エチルアセテート）；ｍｐ：２２５−２２８℃。
ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max３４０９．９１、３３６５．５５、３１９７．７６、１５７７．６６、１５２７．５２、１４４４．５８；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２．９７（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、６．６８（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８５（ｓ、２Ｈ）、７．０１（ｓ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．４２、４１．７８、１０３．６０、１０７．７５（２Ｃ）、１１２．３８、１１２．６２、１１２．６６、１２４．２６、１２６．３３、１２９．４２、１３３.１０、１３８．０７、１４６．６５（２Ｃ）、１５１．０８、１７０．４９；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｎａ）⁺ Ｃ₁₇Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₅Ｎａの計算値３５１．０９５７；測定値：３５１．０９４８。

（実施例４：２ｂの生成プロセス）
（Ｅ）−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド（２ｂ）は、標準的なＥＤＣ合成法を用いて、クマル酸（１５０ｍｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）および５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド（２３２ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。２ｂは５５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出し、赤味かかった半固体として分離された（１８２ｍｇ、６２％）。Ｒ_f：０．５８（エチルアセテート）；
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２．９３（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、６．４１（ｄ、Ｊ＝１５．９Ｈｚ、１Ｈ）、６．６８（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２．２４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、６．８３（ｄ、Ｊ＝２．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．４１、４１．６５、１０１.１５、１１２．５２、１１２．６９、１１３．１２、１１６．２６（２Ｃ）、１１８．５２、１２４．４８、１２７.５２、１２９．１５、１３０．４２（２Ｃ）、１３３．５７、１４１．６２、１５４．５４、１６０．１６、１６９.６０；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₁₉Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₃の計算値：３２２．１３；測定値３４５．０７［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

（実施例５：２ｃの生成プロセス）
３−（（２−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチルアミノ）エチル）−１Ｈ−インドール−５−オル（２ｃ）は、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド（５０、０．２３５ｍｍｏｌ）およびインドール−３−酢酸（２９３ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成され、６０％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出し、黄味を帯びた半固体として分離された（３０１ｍｇ、６２％）。
Ｒ_f：０.５１２（エチルアセテート）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２．８０（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６４（ｓ、２Ｈ）、６．６６（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、Ｊ＝２．１、１Ｈ）、６．７０（ｓ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、７．００（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、１Ｈ）、７．０９−７．１６（ｍ、３Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．０７、３４．１２、４１．２６、１０１．２２、１０９．３３、１１２．３７、１１２．５５、１１２．６７、１１２．８９、１１９．３５、１２０．１３、１２２．６２、１２４．２４、１２５．０３、１２８．４５、１２８．９１、１３３．２６、１３８．０４、１５４．８５、１７４．７５；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂の計算値：３３３．１４；測定値３５６．１９［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

（実施例６：ＴＲＧＡ（３ｂ）の合成方法）
１． 化合物Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンズアミド（２ｄ）
２ｄは、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（４８０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）およびトリプタミンハイドロクロライド（２５６ｍｇ、１．３０８ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。２ｄは、０．５％メタノール含有クロロホルムを用いて溶出され、白色固体として分離された（４８２ｍｇ、７６％）。Ｒ_f：０．５３８（１．５％メタノール含有クロロホルム）；ｍｐ：１０５−１０７℃；ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ３４１３．７７、１６３７．４５、１５７９．５９、１４９６．６６；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ２．９６（ｔ、Ｊ＝６．１４Ｈｚ、２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）、４．８９（ｓ、４Ｈ）、４．９６（ｓ、２Ｈ）、６．０８（ｂｓ、１Ｈ）、６．８５（ｓ、３Ｈ）、６．８７−７．２５（ｍ、１８Ｈ）、７．５４（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）、８．２１（ｂｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ２４．９０、４０．６５、７１．０１（２Ｃ）、７５．０５、１０６．４４（２Ｃ）、１１１．３９、１１８．４８、１１９．３６、１２１．９８、１２２．３０、１２６．８６、１２７．４４（６Ｃ）、１２７．８８、１２８．０９、１２８．４０（６Ｃ）、１２８．４８、１２９．９７、１３６．３３、１３６．５６（２Ｃ）、１３７．３１、１４０．６９、１４０．９２、１５２．５４（２Ｃ）、１６７．１２；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₃₈Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₄の計算値：５８２．２５；測定値：６０５．０７［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

２． Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３，４，５−トリヒドロキシベンズアミド（３ｂ）
Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３，４，５−トリヒドロキシベンズアミド、ＴＲＧＡ（３ｂ）は、２ｄを水素添加することにより生成され、赤味を帯びた半固体として分離された（８１％）。
Ｒｆ：０．４８９（エチルアセテート）；ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ３４４３．０５、３３２３．４６、３２３０．８７、１６４９．１９、１５５６．６１；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ３．０４（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、６．８５（ｓ、２Ｈ）、６．９８−７．１２（ｍ、３Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．６２（ｄ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．２９、４１．９０、１０７．７８（２Ｃ）、１１０．３２、１１２．１８、１１９．３４、１１９．５８、１２２．２８、１２３．３８、１２６．３６、１２８．１９、１３７．９０、１３８．０２、１４６．５７（２Ｃ）、１７０．３４； ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｎａ）⁺ Ｃ₁₇Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₄Ｎａの計算値：３３５．１００８、測定値：３３５．１００３。

（実施例７：２ｅの合成プロセス）
（Ｅ）−Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド（２ｅ）は、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、クマル酸（１５０ｍｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）およびトリプタミンハイドロクロライド（２１５ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。２ｅは、４５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出し、黄味を帯びた固体として分離された（１７８ｍｇ、６４％）。Ｒ_f：０．５９３（８０％エチルアセテート含有ヘキサン）；ｍｐ：１３５−１３８℃；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ３４０７．９８、３３６７．４８、３０８３．９６、１６５０．９５、１６０２．７４、１４４２．６６；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ３．０２（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６０（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、６．４１（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、７．０９（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、２Ｈ）、７．３４（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、２Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５９（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．３７、４１．５９、１１２．２１、１１３．２６、１１６．６８（２Ｃ）、１１８．５２、１１９．３０、１１９．６０、１２２．３１、１２３．４０、１２７．７０、１２８．７４、１３０．５４（２Ｃ）、１３８．１２、１４１．７０、１６０．４３、１６９．２５；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₁₉Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₂の計算値：３０６．１３；測定値：３２９．１２［Ｍ＋Ｎａ］⁺ 。

（実施例８：２ｆの合成プロセス）
Ｎ−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エタンアミン（２ｆ）は標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、トリプタミンハイドロクロライド（３００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）およびインドール−３−酢酸（２９３ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。２ｆは、５０％エチレン含有ヘキサンを用いて溶出され、黄味を帯びた半固体として分離された（３０１ｍｇ、６２％）。
Ｒ_f：０．４８４（９０％エチルアセテート含有ヘキサン）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２．８６（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２（ｓ、２Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、６．９４−７．１５（ｍ、５Ｈ）、７．３１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４７−７．５０（ｍ、２Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．０１、３４．０２、４１．３１、１０６．２０、１１２．２１、１１２．４０、１１２．８７、１１９．２２、１１９．３５、１１９．６１、１２０．０８、１２２．２９、１２２．６６、１２３．４５、１２５．０７、１２８．２２、１２８．４３、１２８．６０、１３８．０８、１７４．８０；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏの計算値：３１７．１５；測定値：３４０．２４［Ｍ＋Ｎａ］⁺ 。

（実施例９：ＭＥＧＡ（３ｃ）の合成プロセス）
化合物３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド（２ｇ）
２ｇは、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、１ｂ（４８０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）および５−メトキシトリプタミン（２４８ｍｇ、１．３０８ｍｍｏｌ）を縮合して合成され、０．５％メタノール含有クロロホルムを用いて溶出され、白色固体として分離された（５６５ｍｇ、８４％）。Ｒ_f：０．５１７（１．６％メタノール含有クロロホルム）；ｍｐ：１２５−１２８℃；
ＩＲ（ｎｅａｔ）ν_max ３３５７．８４、１６３７．４５、１５８７．３１、１５５２．５９、１４４８．４４；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ３．０３（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．７４（ｓ、３Ｈ）、５００（ｓ、４Ｈ）、５．０５（ｓ、２Ｈ）、６．０９（ｂｓ、１Ｈ）、６．８５（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．９３（ｓ、２Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、７．０５（ｓ、１Ｈ）、７．２５−７．３６（ｍ、１６Ｈ）、８．０５（ｂｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ２４．９１、４０．７４、５５．５８、７０．９５（２Ｃ）、７５．０３、１００．１２、１０６．３７（２Ｃ）、１１２．１３、１１２．２３、１２２．９８、１３７．４４、１２７．４４（６Ｃ）、１２７．７０、１２７．８７、１２８．０８、１２８．３８（６Ｃ）、１２８．４６、１２９．９３、１３１．４０、１３６．５２（２Ｃ）、１３７．２７、１４０．６８、１５２．５６（２Ｃ）、１５３．８８、１６６．９７；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₃₉Ｈ₃₆Ｎ₂Ｏ₅の計算値：６１２．２６；測定値：６３５．１０［Ｍ＋Ｎａ］⁺ 。

３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド、ＭＥＧＡ（３ｃ）
３ｃは、２ｇに水素添加することにより合成された（８３％）。
Ｒ_f：０．４８１（９０％エチルアセテート含有ヘキサン）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ３．００（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６１（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．７６（ｓ、３Ｈ）、６．７５（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．８６（ｓ、２Ｈ）、７．０７（ｓ、１Ｈ）、７．０９（ｓ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．２６、４２．００、５６．１６、１０１．２４、１０７．７７（２Ｃ）、１１２．５７、１１２．８７、１１３．２４、１２４．１９、１２６．２８、１２９．０２、１３３．１３、１３７．８６、１４６．５５（２Ｃ）、１５４．７７、１７０．１８。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｎａ）⁺ Ｃ₁₈Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₅Ｎａの計算値：３６５．１１１３、測定値：３６５．１１１０。

（実施例１０：２ｈの合成プロセス）
（Ｅ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アクリルアミド（２ｈ）は、標準的なＥＤＣカップリング法を用い、クマル酸（１５０ｍｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）および５−メトキシトリプタミン（２０７ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を縮合することにより、合成された。２ｈは、２５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出され、黄味を帯びた固体として分離された（１８１ｍｇ、５９％）。
Ｒ_f：０．４２４（８０％エチルアセテート含有ヘキサン）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２．９７（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．５８（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．７８（ｓ、３Ｈ）、６．３８（ｄ、Ｊ＝１５．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．７４−６．８１（ｍ、３Ｈ）、７．０６（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）、７．４７（ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ，１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ）δ２６．３４、４１．６６、５６．２５、１０１．２５、１１２．６２、１１２．８９、１１３．１５、１１６．６６（２Ｃ）、１１８．５２、１２４．１８、１２７．６２、１２９．０５、１３０．５２（２Ｃ）、１３３．２７、１４１．６８、１５４．８４、１６０．３６、１６９．２０；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₀Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃の計算値：３３６．１４；測定値：３５９．０７［Ｍ＋Ｎａ］⁺ 。

（実施例１１：２ｉの合成プロセス）
Ｎ−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エタンアミン（２ｉ）は、標準的なＥＤＣカップリング法を用いて、５−メトキシトリプタミン（４８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびインドール−３−酢酸（５０ｍｇ、０，２８ｍｍｏｌ）を縮合することにより合成された。２ｃは、５０％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出し、黄味を帯びた固体として分離された（５２ｍｇ、６１％）。Ｒ_f：０．４４１（９０％エチルアセテート含有ヘキサン）。
¹Ｈ ＮＭＲ （３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ） δ２．８３（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、３．６２（ｓ、２Ｈ）、３．７７（ｓ、３Ｈ）、６．７３−６．７６（ｍ、２Ｈ）、６．９７−７．０２（ｍ、２Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、７．１１（ｔ、Ｊ＝７．４６Ｈｚ、１Ｈ）、７．２０（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．４６（ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ （７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ） δ２６．０６、３４．０２、４１．１６、５６．２６、１０１．２２、１０９．２３、１１２．３６、１１２．５３、１１２．６６、１１２．８８、１１９．３３、１２０．０３、１２２．６１、１２４．２３、１２５．０３、１２８．４３、１２８．９０、１３３．２７、１３８．０５、１５４．８６、１７４．７５；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₁Ｈ₂₁Ｎ₃Ｏ₂の計算値：３４７．１６；測定値：３７０．２８ ［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

（実施例１２：４ｄの合成プロセス）
ｔｅｒｔ−ブチル−２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルカルバメート（４ａ）
５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド（５００ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に、炭酸水素ナトリウム（１９７ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）水溶液（６ｍＬ）、塩化ナトリウム（５００ｍｇ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル無水物（５１２ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）の３ｍＬクロロホルム溶液を、続けて加えた。当該混合物を、よく撹拌しながら３ｈ還流した。当該水相をクロロホルムで１回洗浄し、合わせた有機相を水（２０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。有機層は減圧下除去された。粗残留物はシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精留され、４ａが得られた。４ａは、２０％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出され、固体（６２１ｍｇ、９５％）として分離された。
Ｒ_f：０．５３８（５０％エチルアセテート含有ヘキサン）；ｍｐ：５５−５７℃；¹Ｈ ＮＭＲ （３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．３７（ｓ、９Ｈ）、２．７９（ｂｓ、２Ｈ）、 ３．３４、（ｂｓ、２Ｈ）、４．６１（ｂｓ、１Ｈ）、５．５６（ｂｓ、１Ｈ）、６．７２（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１．８ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９０（ｓ、１Ｈ）、６．９４（ｓ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、８．１６（ｂｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣ１₃） δ２５．６７、２８．３７（３Ｃ）、４０．５９、７９．４７、１０３．１４、１１１．８４（２Ｃ）、１１１．９８、１２３．１１、１２７．８５、１３１．４１、１４９．６９、１５６．３３；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₁₅Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃の計算値：２７６．１４；測定値：２９９．１４［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチル）−１Ｈ−インドール−５−イル３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）ベンゾエート（４ｂ）
４ｂは、３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸（１ｂ）（３４０ｍｇ、０．７７３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル−２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルカルバメート（４ａ）（２５６ｍｇ、０．９２７ｍｍｏｌ）を縮合することにより合成された。４ｂは２５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出され、白色固体として分離された（２５０ｍｇ、５６％）。
Ｒ_f：０．４２８（４５％エチルアセテート含有ヘキサン）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ１．４３（ｓ、９Ｈ）、２．８６（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｂｓ、２Ｈ）、４．６３（ｂｓ、１Ｈ）、４．６３（ｂｓ、１Ｈ）、５．１８（ｓ、６Ｈ）、６．７７（ｄ、Ｊ＝７．５ Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９−７．０３（ｍ、２Ｈ）、７．２７（ｓ、 ２Ｈ）、７．３４−７．４７（ｍ、１６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣ１₃） δ ２５．６０、２８．３４（３Ｃ）、４０．５８、７１．１６（２Ｃ）、７５．１２、７９．２１、１０３．０４、１０９．４４（２Ｃ）、１１０．７６、１１１．７５、１１１．８９、 １１２．９１、１２３．６６、１２７．５２（６Ｃ）、１２７．９７、１２８．１３、１２８．４６、１２８．５０（６Ｃ）、１３１．３６、１３４．２６、１３６．４４、１３７．２２、１４２．５８、１４４．０７、１４９．７６、１５２．５５（２Ｃ）、１５６．０７、１６５．８５；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₄₃Ｈ₄₂Ｎ₂０₇の計算値：６９８．２９；測定値：７２１．１８［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチル）−１Ｈ−インドール−５−イル３，４，５−トリヒドロキシベンゾエート（４ｃ）
４ｃは、４ｂの水素添加により合成され、無色半固体として分離された（７９％）。Ｒ_f：０．４１１（５％メタノール含有クロロホルム）；
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ） δ１．４１（ｓ、９Ｈ）、２．８９（ｔ、Ｊ ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．３（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、６．８９（ｄｄ、Ｊ＝１０．２Ｈｚ、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．１３５（ｓ、２Ｈ）、７．２６（ｓ、２Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝１０．２Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ） δ２６．７１、２８．７３（３Ｃ）、４２．５６、７９．９５、１１０．２９、１１０．５３（２Ｃ）、１１１．６７、１１２．５７、１２５．０６、１２１．１５、１２９．１２、１３５．８８、１４０．２５、１４５．３３、１４６．３、１４６．６０（２Ｃ）、１５８．４７、１６８．２３１；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₂₂Ｈ₂₄Ｎ₂０₇の計算値：４２８．１８；測定値４５１．０６［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル３，４，５−トリヒドロキシベンゾエート（４ｄ）
０℃の、４ｃ（５０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂（１００μＬ）溶液に、９６％ギ酸（２００μＬ）を滴下した。３０分後、冷却槽を除去し、さらに１時間室温で撹拌し続けた。ギ酸を真空下除去し、残留物はメタノール（１ｍＬ）に溶解された。３０％ＮＨ₃水溶液を用いて、当該溶液のｐＨを８に調整した。アルコール部を減圧下取り除き、４ｄを得た。生成物は、半固体として分離された（３１ｍｇ、８２％）。
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ₂Ｏ） δ２．７７（ｔ、Ｊ＝６．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．０１（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．７３（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｓ、 ２Ｈ）、７．０８（ｂｓ、２Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣ１₃） δ２１．９３、３８．９６、１０８．７０、１０９．３９、１０９．６６（２Ｃ）、１１１．８９、１１５．２８、１１９．１３、１２４．９６、１２６．１０、１３３．８２、１３８．０１、１４３．０７、１４３．８５（２Ｃ）、１６９．９４； ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₁₇Ｈ₁₆Ｎ₂０₅の計算値：３２８．１０；測定値：３２９．０５［Ｍ＋Ｈ］⁺。

（実施例１３：５ａの合成プロセス）
丸底フラスコ内で、メラトニン（４８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を脱水ＣＨ₂Ｃｌ₂（３ｍｌ）に溶かした。当該反応混合物を、液体窒素を用いたアセトン槽によって−７８℃に冷却した。当該冷却反応物に、三臭化ホウ素（０．１２ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）を滴下し、さらに１時間当該温度において撹拌し続けた。その後、反応混合物を室温において一晩撹拌した。反応の終了はＴＬＣでモニターした。反応混合物を、水および１０％ＨＣｌを添加して反応を停止し、エチルアセテートを用いて抽出した。合わせた有機相を水（２０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）により洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて乾燥した。当該有機層を減圧下除去した。粗残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アセトアミド（５ａ）を得た。６％メタノール含有クロロホルムを用いて溶出され、赤味を帯びた半固体（２０ｍｇ、４５％）として分離された。
Ｒ_f：０．４５１（１０％メタノール含有クロロホルム）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ１．９２（ｓ、３Ｈ）、２．８６（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４４（ｔ、 Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、６．６７（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、２．２２Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｄ、Ｊ＝２．１８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０１（ｓ、１Ｈ）、７．１６（ｄ、Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ） δ２１．６４、２５．２５、４０．４５、１０２．５４、１１１．３９、１１１．５４、１１１．７０、１２３．２３、１２８．４８、１３２．１１、１５０．１２、１７２．３２；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₁₂Ｈ₁₄Ｎ₂Ｏ₂の計算値：２１８．１０；測定値：２４１．１１［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

（実施例１４：６ｃの合成プロセス）
５−（３−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチル）−１Ｈ−インドール−５−イルオキシ）−５−オキソペンタノイックアシッド（６ａ）
４ａ（２３５ｍｇ、０．８５１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１７．５ｍｇ、０．１４３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（５ｍＬ）に、Ｅｔ₃Ｎ（１７９μＬ、１．２７６ｍｍｏｌ）を加えた。グルタル酸無水物（１２６ｍｇ、１．１０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液３ｍＬを当該溶液にゆっくりと滴下した。当該混合物をアルゴン下４時間撹拌し還流した。ＴＨＦを真空状態で除去し、ＥｔＯＡｃ５ｍＬを加え、次いでＨ₂Ｏを１０ｍＬ添加し、混合物を１０分撹拌した。有機相を分離し、エチルアセテート（５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄を用いて乾燥した。有機層を減圧下除去した。粗残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、６ａが得られた。シリカゲルに４５％エチルアセテート含有ヘキサンを用いて溶出され、やや赤味を帯びた半固体（２４５ｍｇ、７４％）が分離された。
Ｒ_f：０．５１１（８０％エチルアセテート含有ヘキサン）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、 ＣＤＣ１₃） δ１．４２（ｓ、９Ｈ）、２．０９−２．１４（ｍ、２Ｈ）、２．５４（ｔ、 Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、２．６８（ｔ、Ｊ＝７．０５Ｈｚ、２Ｈ）、２．８８（ｂｓ、 ２Ｈ）、３．３９（ｂｓ、２Ｈ）、４．６７（ｂｓ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝ ８．４ Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｂｓ、２Ｈ）、７．２９（ｂｓ、１Ｈ）、８．２４（ｂｓ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃） δ１９．９１、２５．７３、２８．３１（３Ｃ）、３２．８３、３３．３６、４０．７２、７９．２６、１１０．８２、１１１．４８（２Ｃ）、１１６．０３、１２３．３８、１２７．６７、１３４．１５、１４３．９５、１５６．００、１７２．３８、１７７．３０； ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｎａ］⁺ Ｃ₂₀Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₆Ｎａの計算値：４１３．１６８９；測定値４１３．１８００。

３−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）エチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ５−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミノ）−５−オキソペンタノエート（６ｂ）
１ｂ（１８７ｍｇ、０．４８１ｍｍｏｌ）、５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド（１１２ｍｇ、０．５２８ｍｍｏｌ）およびＥｔ₃Ｎ（３３７μＬ、２．４０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（３ｍＬ）に、ＥＤＣハイドロクロライド（１１０ｍｇ、０．５２８ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。当該反応混合物を室温で一晩撹拌し、当該反応混合物を氷冷Ｈ₂Ｏ（５ｍＬ）の添加により停止、エチルアセテート（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。有機層は減圧下除去した。粗残留物はシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製され、６ｂを得た。５５％エチルアセテート含有ヘキサンをシリカゲルに用いて溶出され、やや赤味を帯びた半固体が得られた（９７ｍｇ、３６％）。
Ｒ_f：０．５２５（エチルアセテート）；¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ１．４３（ｓ、９Ｈ）、１．９７−２．０７（ｍ、２Ｈ）、２．３３（ｔ、Ｊ＝７．３５Ｈｚ、 ２Ｈ）、２．５９（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．９９（ｂｓ、４Ｈ）、３．３２（ｂｓ、 ２Ｈ）、３．４９（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、６．６８（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．８３（ｄｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１．８Ｈｚ、１Ｈ）、６．９６（ｄ、 Ｊ＝１．８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、７．２１−７．１８（ｍ、２Ｈ）、７．２７−７．３４（ｍ、２Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ２０．９０、２４．９６、２５．３６、２７．４３（３Ｃ），３２．９４、３４．７１、３９．８７、４１．０４、７８．５７、１０２．２０、１１０．１５、１１１．０５、１１１．１９、１１１．３７、１１２．４６、１１５．１０、１２２．９４、１２３．１０、１２３．７０、１２７．６５、１２８．６５、１２８．１０、１３１．７０、１３４．５２、１４３．７０、１５７．０９、１７３．１４、１７３．７８；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ Ｃ₃₀Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₆の計算値：５４８．２６；測定値：５７１．２５［Ｍ＋Ｎａ］⁺。

３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ５−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミノ）−５−オキソペンタノエート（６Ｃ）
０℃の６ｂ（９０ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）ＣＨ₂Ｃｌ₂溶液（２００μＬ）に９６％ギ酸（４００μＬ）を滴下した。３０分後、冷却槽を除去し、室温においてさらに１時間撹拌し続けた。ギ酸を真空下除去した。残留物をメタノール（１ｍＬ）に溶解した。３０％ＮＨ₃水溶液を用いて、溶液のｐＨを８に調整した。アルコール部を減圧化で除去した。６ｃは半固体として分離された（６０ｍｇ、８１．６６％）。
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤ₃ＯＤ）δ１．９５−２．０２（ｍ、２Ｈ）、２．３２（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、２．５９（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、２．８９（ｔ、Ｊ＝６．９Ｈｚ、２Ｈ）、３．０８（ｂｓ、２Ｈ）、３．２０（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．４９（ｔ、Ｊ＝６．６Ｈｚ、２Ｈ）、６．６７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、６．８７（ｄ、Ｊ＝８．７Ｈｚ、１Ｈ）、６．９６（ｓ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、７．１７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４７（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｓ、１Ｈ）、７．３８（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、１Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ） δ２２．３０、２４．４３、２６．３５、３４．３４、３６．０９、４１．１１、４１．３１、１０３．５５、１１０．６８、１１１．１９、１１２．３８、１１２．５０、１１２．６９、１１２．９８、１１６．９８、１２４．２７、１２５．９７、１２８．３５、１２９．４９、１３３．１２、１３６．１７、１４５．３９、１５１．１２、１７４．５２、１７５．１９； ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）⁺ Ｃ₂₅Ｈ₂₈Ｎ₄Ｏ₄の計算値：４４９．２１８８、測定値：４４９．２１８２。

（実施例１５：試験管内での鉄還元抗酸化力（ＦＲＡＰ）アッセイを用いた抗酸化性の決定）
当該測定を９６穴マイクロプレートで行った。ＦＲＡＰ試薬を、１０ｍｌアセテートバッファー（２００ｍＭ、ｐＨ３−６）、１ｍｌの２，４，６−トリス（２−ピリジル）−ｓ−トリアジン（ＴＰＴＺ）溶液（４０ｍＭのＨＣｌ中１０ｍＭ）、および１ｍｌの塩化鉄溶液（２０ｍＭ）を蒸留水中で混合することによって調整した。１時間、当該混合物を３７℃のウォーターバス中で保温した。９６穴マイクロプレートに、１−２５μＭの範囲の様々な濃度に溶解された（メタノール中、化合物によっては水に溶解）検討中の化合物を２５μＬ、３組設置し、直近に調整されたＦＲＡＰ溶液（１７５μＬ）を当該サンプルに添加した。マイクロプレートリーダーによって、様々な経過時間で１５０分まで、５９５ｎｍの吸光度をモニターした。１７５μＬのＦＲＡＰ溶液および２５μＬメタノールまたは水の混合物の吸光度を各経過時間で測定し、吸光度変化（ΔＡ）を計算するために、各経過時間におけるサンプルの吸光度から減じた。経過時間ｔにおけるＦＲＡＰ値（ＦＲＡＰ ｖａｌｕｅ_t）は次の計算式によって計算される。

Δａ_tＦ１は、経過時間ｔ（６分および６５分）の、濃度１０μＭにおける検査対象のフラボノイドに関連した吸光度変化であり、Δａ_tＦｅ²⁺は同一経過時間同一濃度における硫酸鉄に関連した吸光度変化である。（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７、Ｆｉｒｕｚｉ Ｏ、ｅｔ ａｌ．、“Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ”、２００５、１７２１、１７４−１８４）。

（実施例１６：試験管内でのフリーラジカルの除去活性（ＤＰＰＨアッセイ））
２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）は安定なフリーラジカルであり、水素ラジカルまたは電子を受容でき、安定した反磁性分子となる。抗酸化剤は、水素を付加することによってＤＰＰＨを除去でき、当該結果はＤＰＰＨラジカルの紫色から黄色への変色によって視覚化される（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７、Ｂｅｎ Ｆａｒｈａｔ、Ｍ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．”、２００９、５７、１０３４９−１０３５６、Ｈａｎ Ｊ、ｅｔ ａｌ．、“Ｗｅｉ Ｓｈｅｎｇ Ｙａｎ Ｊｉｕ”、２００９、３８、５９６−５９８）。当該アッセイシステムは、１０〜１００μＭの範囲の様々な濃度に溶解（メタノール中、化合物によっては水に溶解）された検討化合物１ｍＬ、およびメタノール（水に８０％ ｖ／ｖ）中ＤＰＰＨ（０．１５ｍＭ）４ｍｌを含み、よく混合させた。当該混合物を、遮光して２７℃で３０分静置した。同濃度のアスコルビン酸を陽性コントロールとした。当該溶液の吸光度は５１７ｎｍにおける分光測定で測定され、吸光度の減少から様々なトリプタミン誘導体の抗酸化性を定量した。

（実施例１７：動物、およびインドメタシンおよびジクロフェナクにより誘発された胃損傷）
スプラギュ−ダウレイ（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄｗａｌｅｙ）ラット（１８０−２２０ｇｍ）を本研究において用いた。動物の各群（コントロールまたは実験用）を、２４±２℃において、１２時間の明暗サイクルで保持した。当該動物を、実験開始前２４時間絶食させた。食物により生じる胃酸分泌の増加、およびそれにより胃損傷に影響を及ぼすことを避けるために、当該動物には水を自由に供給した。胃粘膜潰瘍は、記載の通り、インドメタシンを用いて生じさせた（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７， Ｂｉｓｗａｓ Ｋ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００３、２７８、１０９９３−１１００１，Ｂａｎｄｙｏｐａｄｈｙａｙ Ｕ．、ｅｔ ａｌ．、 “Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．”、２００２、７１、２８４５−２８６５）。概要を記載すると、全動物を、コントロール、インドメタシンおよびテスト化合物の群に、分けた。体重１ｋｇあたり４８ｍｇのインドメタシンを絶食した動物に経口投与し、胃潰瘍を生じさせた。薬を用いて前処理する群には、インドメタシンを用いた潰瘍誘発３０分前に、動物に腹腔内に薬を与えた（体重１ｋｇあたり５０、２０、１０、５、３、１ｍｇ）。コントロール群には、インドメタシンを含有しない溶媒のみ与えた。インドメタシン処理の４時間後、動物を安楽死させ、胃を回収した。粘膜損傷を潰瘍指数として数え、症状なし＝０、ピンヘッド潰瘍１つ＝１、と数えた。全数の合計を、潰瘍指数を示した動物の数で割った。すべての生体実験は動物倫理委員会のガイドラインに従って行われた。ジクロフェナクが誘発した胃粘膜損傷に対するＳＥＧＡの効果を見るために、胃粘膜損傷をジクロフェナクの経口投与（７５ｍｇｋｇ^-1）により発生させ、実験の残りをインドメタシンの場合に述べたのと同様の方法で行った。ジクロフェナクはインドメタシンと同様にピンヘッド潰瘍を発生させ、粘膜損傷を潰瘍指数として上述したように数えた。エタノールが誘発した胃粘膜損傷を、１ｍｌの５０％エタノールの経口投与によって発生させ（Ｂａｎｅｒｊｅｅ Ｒ．Ｋ．、 “Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ”、２００２、７１、２８４５−２８６５）、４時間後当該動物を犠死させた。また寒冷抑制ストレスが誘発した胃粘膜損傷は、動物を４℃において３．５時間固定することによって発生させた（Ｂａｎｅｒｊｅｅ Ｒ．Ｋ．、“Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ”、２００２、７１、２８４５−２８６５， “Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ”、２００３、２７８、１０９９３−１１００１）。

（実施例１８：組織学的検査）
異なる群の動物の胃組織をまずＰＢＳ（ｐＨ７．４）で数回洗浄し、その後１０％バッファーホルマリンに１２時間２５℃で固定した。ホルマリン固定した組織をその後乾燥させ、半薄切片を用意するためにパラフィン中に包埋した（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００８、２８３、１４３９１−１４４０１）。半薄切片はミクロトーンを用いて作成され、ヘマトキシリン−エンジン染色法を行うために、ポリ−Ｌ−リジンコートされたガラス面に貼付けられた。染色部分をマイクロスコープ（Ｌｅｉｃａ ＤＭ−２５００、ドイツ製）を用いて観測し、高解像度デジタルカメラを用いて記録した。

（実施例１９：インドメタシンが誘発した胃損傷に対する、ＳＥＧＡの治療効果）
胃粘膜損傷をまず投与量４８ｍｇｋｇ^-1のインドメタシン処理を行うことにより誘発させた。粘膜損傷を誘発した後４時間経過後に、動物の一部分を２つの異なった群、すなわち自然治癒およびＳＥＧＡが誘導する治癒、へ分けた（ｎ＝６）。当該時点を、治癒の０時間とした。当該時点において、ＳＥＧＡが誘導する治癒群には、ＳＥＧＡを５０ｍｇｋｇ^-1投与（腹腔内投与）した（当該投与量は用量−反応曲線から定めた）。ＳＥＧＡを用いずにインドメタシンのみ与えた動物を、自然治癒群とした。０時間から始め、全群の胃を、上述の潰瘍指数の測定（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００８、２８３、１４３９１−１４４０１）および組織学的検査のために、それぞれ経過時間２時間、４時間、８時間において解剖した。

（実施例２０：ミトコンドリアの分離）
商業上入手可能なキット（Ｂｉｏｃｈａｉｎ）を、胃粘膜細胞からのミトコンドリア分離のために用いた。概要を述べると、胃粘膜の小片を、氷冷しながらペトリ皿上で、ミトコンドリア抽出バッファーを含有した状態で十分に細かく切り刻んだ。Ｕｌｔｒａ−Ｔｕｒｒａｘ Ｔ−２５ホモジナイザーをセルの均質化に用いた。核や破壊されていない細胞を取り除くために、均質化された物質をまず１０分間８００×ｇ遠心分離し、次いで、最終的にミトコンドリアの断片を得るために１５分間１２０００×ｇ遠心分離した。

（実施例２１：ミトコンドリア酸化ストレスの測定）
ミトコンドリア酸化ストレスは、以前より、タンパク質のカルボニル化、脂質の過酸化の測定、全チオール含有率、を測定することにより行われていた。（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、 ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”２００９、２８４、３０５８−３０６８， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００８、２８３、１４３９１−１４４０１， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｐｉｎｅａｌ Ｒｅｓ．”２００９、４６、３１４−３２３）。

ミトコンドリア酸化ストレスは、以前より、ミトコンドリアの全チオール枯渇、脂質過酸化、タンパク質のカルボニル化の測定、により研究されてきた。概要を述べると、チオールの含有量は５，５’−ジチオニトロ安息香酸（ＤＴＮＢ）との反応により測定され、当該反応により、４１２ｎｍに測定されるＴＮＢ（チオニトロ安息香酸）の黄色の発色団が得られる。ミトコンドリアの脂質過酸化は、１ｍｌのミトコンドリアフラクションの０．９％通常生理食塩溶液を、２ｍｌのＴＢＡ−ＴＣＡ混合物（それぞれ０．３７５％ ｗ／ｖ、１５％ ｗ／ｖ）の０．２５Ｎ ＨＣｌ溶液に加えることにより分析され、１５分間の混合および煮沸後、冷却され、遠心分離後、上澄み部の５３５ｎｍの吸光度が測定された。テトラエトキシプロパンを標準とした。タンパク質カルボニルは、ジニトロフェニルヒドラジン（ＤＮＰ）とカルボニル基の結合を測定する、標準的な発色定量法により測定され、３６２ｎｍの吸光度が定量された。

（実施例２２：カスパーゼ−９およびカスパーゼ−３活性アッセイ）
胃粘膜組織の細胞質基質フラクションから、カスパーゼ−９およびカスパーゼ−３活性は、商業上入手可能なキットを用いて測定された（Ｂｉｏｖｉｓｉｏｎ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、ＣＡ、ＵＳＡ、Ｓｉｇｍａの各社）。概要を述べると、胃粘膜はカスパーゼ分解バッファー（それぞれのキットによって提供される）により均質化された。均質物を１６０００×ｇで１５分間遠心分離した。上澄液を回収し、２種類のリアクションバッファー５０μｌ（それぞれのキットによって提供される）と混合した。さらに、カスパーゼ−３に対してはＡｃ−ＤＥＤＶ−ｐＮａ（最終濃度２００μＭ）、カスパーゼ−９に対してはＬＥＨＤ−ｐＮＡ（最終濃度２００μＭ）、の基質を加えた。混合物を３７℃で１時間保温し、４０５ｎｍの吸光度を測定した（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００９、２８４、３０５８−３０６８， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００８、２８３、１４３９１−１４４０１， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｐｉｎｅａｌ Ｒｅｓ．”、２００９、４６、３１４−３２３）。

（実施例２３：セルの培養）
胃粘膜細胞を分離し、以前の記載（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７）から少し修正して培養した。ラットの胃粘膜を、１００Ｕ／ｍｌペニシリンと１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含んだＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）の中に、切り抜いて入れた。粘膜を、その後細かく切り刻み、０．０５％ヒアルロニダーゼおよび０．１％コラゲナーゼタイプＩを含んだＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）中に、吊るした。懸濁液を、３７℃３０分、５％ＣＯ₂雰囲気下で振とうさせながら保温し、その後ステリルナイロンメッシュを通して濾過した。濾過水を６００×ｇ５分間遠心分離した。細胞のペレットをＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）で洗浄し、さらに遠心分離した。当該ペレットを、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンおよびゲンタマイシンを追加し、Ｔ２５フラスコ内で、５ｍｌのＨａｎｓ Ｆ−１２メディア中、保温した。細胞を５％ＣＯ₂下３７℃にて培養させ、治療前と９０％一致するように成長させた。当該手順に従って得られた細胞の９０％は、上皮特性を有していた。

（実施例２４：ミトコンドリア膜電位（ΔΨ_m）の測定）
ミトコンドリア膜電位（ΔΨ_m）を記載の通り測定した（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、 “Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００９、２８４、３０５８−３０６８， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、 ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００８、２８３、１４３９１−１４４０１， Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｐｉｎｅａｌ Ｒｅｓ．”、２００９、４６、３１４−３２３）。ミトコンドリアは、前述の通り胃粘膜の断片から、ミトアイソレーション（Ｍｉｔｏｉｓｏｌａｔｉｏｎ）キット（Ｂｉｏｃｈａｉｎ）を用いて分離された。各群（コントロール、インドメタシン、ジクロフェナク、およびＳＥＧＡ前処理を行ったインドメタシンやジクロフェナク処理）から等量のミトコンドリア（２５μｇ）を１００μｌのＪＣ−１アッセイバッファー（５５０ｍＭのＫＣｌ、５０ｍＭのＡＴＰ、５０ｍＭのＭｇＣｌ₂、５０ｍＭの亜硫酸ナトリウム、５ｍＭのＥＧＴＡを含む、１００ｍＭのＭＯＰＳ、ｐＨ７．５）中に取り、ＪＣ１（３００ｎＭ）中２５℃で１５分間暗所にて保温した。各サンプルの蛍光（４９０ｎｍの励起、ＪＣ−１単体の５３０ｎｍの発光、ＪＣ−１総量の５９０ｎｍの発光）をＨｉｔａｃｈｉ Ｆ−７０００蛍光分光計を用いて測定した。ΔΨｍは５９０ｎｍ／５３０ｎｍの蛍光比を表す。

（実施例２５：ミトコンドリアの脱水素酵素活性アッセイ）
ミトコンドリア膜電位は、ＭＴＴ（［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド］）をホルマザン色素に還元する、ミトコンドリア脱水素酵素能を測定することによって検討されてきた（Ｐａｌ Ｃ、ｅｔ ａｌ．、“Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃ Ｂｉｏｌ Ｍｅｄ”、２０１０、４９、２、２５８−２６７）。同数の胃粘膜の初代培養細胞を、１２穴プレートの各ウェルに取り（１０⁶）、コントロール、インドメタシン処理（５ｍＭ）、ＳＥＧＡ（５０μＭ）に加えてインドメタシン（５ｍＭ）の処理、の３群に分けた。１６時間保温後、細胞を分離し、５００×ｇ５分間遠心分離し、上澄液を廃棄した。セルペレットを新しい細胞培地に再構成した。各群から最終体積１００μｌの細胞培地中の同数の細胞（１０⁵細胞）を、９６穴プレートに３組採取した。ＭＴＴ（最終濃度０．１％）溶液を、コントロールおよび実験群の両方の各ウェルに加え、よく撹拌し、３７℃で３時間、ＣＯ₂恒温器で保温した。保温後、培地を慎重に吸引し、穴底部の不溶性ホルマザン結晶を、無水イソプロパノール中１０％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００に加えて０．１Ｎ ＨＣｌを含む、１００μｌ ＭＴＴ溶解溶液に溶解させた。ＭＴＴ還元を５７０ｎｍ（ホルマザン色素の吸光度）において測定した。

（実施例２６：ミトコンドリア内の過酸化物の測定）
コントロールおよびインドメタシン処理の両方の培養胃粘膜から得た、分離された粘膜細胞を、ミトソックスを用いたミトコンドリア内過酸化物の検出に用いた。当該方法は、過酸化物に反応する蛍光プローブであり、製品カタログ記載のプロトコルに従って行われた（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、 ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００９、２８４、３０５８−３０６８）。細胞はそれぞれＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）を用いた蛍光プローブによって染色され、製品プロトコル記載の通り３７℃１５分間暗所で保温された。保温後、細胞を、ＨＢＳＳを用いて３回洗浄し、蛍光顕微鏡を用いて検査した（Ｌｅｉｃａ， ＤＭ−２５００， Ｌｅｉｃａ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ）。ミトソックスによる染色は赤色フィルターを用いて視覚化された。

（実施例２７：遊離鉄の測定）
コントロールおよびインドメタシン処理の両方の培養胃粘膜から得た、分離された粘膜細胞を、フェングリーンＳＫ（Ｐｈｅｎ Ｇｒｅｅｎ ＳＫ）を用いた遊離鉄の局在化に用いた。当該方法は、鉄に反応する蛍光プローブであり、製品カタログ記載のプロトコルに従って行われた（Ｍａｉｔｙ Ｐ．、ｅｔ ａｌ．、“Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．”、２００９、２８４、３０５８−３０６８）。細胞を、まずフェングリーンＳＫ（２０μｍ）を用いて、１５分３７℃暗所で保温した。保温後、当該細胞を、ＨＢＳＳを用いて洗浄、続けて蛍光顕微鏡を用いて検査した（Ｌｅｉｃａ，ＤＭ−２５００，Ｌｅｉｃａ Ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍｓ）。フェングリーンＳＫによる染色は、緑色フィルターを用いて視覚化された。

（本発明の利点）
本発明において合成した誘導体は、いくつかの利点を有している。
１． 当該誘導体は、遊離鉄をキレート化でき、ＲＯＳを除去することによって酸化ストレスを妨げ、同時に試験管内で抗アポトーシス効果を提供することができる。
２． 当該誘導体は、生体内でＲＯＳを除去するだけでなく、鉄が媒介したＯＨの形成を妨げる能力を有する。当該誘導体は、ＮＳＡＩＤｓが誘発した胃粘膜細胞におけるＲＯＳ媒介アポトーシス活性化を妨げることによって、胃粘膜の酸化ストレスや胃疾患を予防することができる。
３． 本発明は、胃保護効果を有する新規小分子や、胃疾患に対する新薬発見のための新規方法を提供する。

Claims (28)

1. 一般式（１）で表され、
   

   

   式中、Ｒ₁はＯＨ、Ｈ、ＯＭｅ、または以下の式であり、
   

   

   Ｒ₂はＨ、−ＣＯＭｅ、または以下の式である化合物。
   

   

   

   

   もしくは
   

   
2. ３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド；ＳＥＧＡ（３ａ）；
   Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３，４，５−トリヒドロキシベンズアミド ＴＲＧＡ（３ｂ）；
   ３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）ベンズアミド ＭＥＧＡ（３ｃ）；
   （Ｅ）−Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド ２ｂ；
   （Ｅ）−Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アクリルアミド ２ｅ；
   （Ｅ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アクリルアミド ２ｈ；
   Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）アセトアミド ２ｃ；
   Ｎ−（２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）−２−（１Ｈ−インドール−３−イル）アセトアミド ２ｆ；
   ２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−Ｎ−（２−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アセトアミド；２ｉ；
   ３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ３，４，５−トリヒドロキシベンゾエート ＧＡＳＡ（４ｄ）；
   ３−（２−アミノエチル）−１Ｈ−インドール−５−イル ５−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルアミノ）−５−オキソペンタノエート ６ｃ；または
   Ｎ−（２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチル）アセトアミド ５ａ
   である、請求項１に記載の一般式（１）で表される化合物。
3. 化合物の構造式が以下の式で表される、請求項１に記載の一般式（１）で表される化合物。
   

   
4. 前記化合物が胃疾患の治療に有用である、請求項１に記載の化合物。
5. 前記化合物が試験管内で抗酸化性を示す、請求項１に記載の化合物。
6. ６分、６５分における鉄還元抗酸化力（ＦＲＡＰ）値および２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）アッセイにおける吸光度変化が、それぞれ１．６５±０．０６〜３９．５１±２．７、１．８３±０．２９〜６０．６１±７．３および０．１０７±０．０２〜０．４４９±０．０８の範囲にある、請求項１に記載の化合物。
7. 構造式ＳＥＧＡ、ＧＡＳＡ、ＴＲＧＡおよびＭＥＧＡの化合物であり、潰瘍指数が３０±３〜６１±３の範囲にある、請求項２に記載の化合物。
8. 薬学的に許容可能なキャリアとともに、一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物を含む、胃疾患の治療に用いられる医薬品組成物。
9. 一般式（１）の化合物の有効量が１ｍｇｋｇ^-1〜５０ｍｇｋｇ^-1の範囲にある、請求項８に記載の胃疾患の治療に用いられる医薬品組成物。
10. 一般式（１）の化合物が腹腔内投与される、請求項８に記載の胃疾患の治療に用いられる医薬品組成物。
11. 動物の胃疾患治療用の薬を調製するための、一般式（１）の化合物の使用。
12. 前記胃疾患が、ミトコンドリア酸化ストレスの発生、次いで胃粘膜細胞アポトーシス誘導を経過して、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、エタノール、寒冷拘束ストレスによって誘発されたものである、請求項９に記載の使用。
13. 一般式（１）の化合物の有効量が、１ｍｇｋｇ^-1〜５０ｍｇｋｇ^-1の範囲にある、請求項９に記載の使用。
14. 一般式（１）の化合物が腹腔内投与される、請求項９に記載の使用。
15. 化合物ＳＥＧＡ（３ａ）のＥＤ₅₀値が６〜８ｍｇｋｇ^-1の範囲にある、請求項９に記載の使用。
16. 構造式ＳＥＧＡ（３ａ）の化合物が、３［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）還元アッセイにより構成される、非毒性分子である、請求項９に記載の使用。
17. 試験管内で培養胃粘膜細胞の損傷を防ぐ薬を調整する、一般式（１）の化合物の使用。
18. ｉ． トリプタミン誘導体および置換された酸を１：１．２〜１：２の比の範囲で１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カーボジイミドヒドロクロライド（ＥＤＣヒドロクロライド）を用いて縮合し、次いで構造式２ａ−Ｉ、４ｂ、６ｂの化合物を得るために２〜３％メタノール含有クロロホルムへ溶出させて分離する工程、
    ii． 構造式３ａ、３ｂ、３ｃ、４ｃの化合物を得るために、構造式２ａ、２ｄ、２ｄの化合物を水素添加する工程、
    iii． 工程（i）で得た６ｂまたは工程（ii）で得た４ｃを、１０〜２０％ＣＨ₂Ｃｌ₂およびギ酸に、０〜１℃の温度範囲で混合し、次いで２５〜２７℃の温度範囲で５０〜８０分間撹拌し、６ｃ、４ｄをそれぞれ得る工程、
    を含む、請求項２に記載の構造式ＳＥＧＡ（３ａ）、２ｂ、２ｃ、ＴＲＧＡ（３ｂ）、２ｅ、２ｆ、ＭＥＧＡ（３ｃ）、２ｈ、２ｉ、４ｄの化合物の製造方法。
19. トリプタミン誘導体がセロトニンハイドロクロライド（５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド）、トリプタミンハイドロクロライド、５−メトキシトリプタミン、ｔｅｒｔブチル２−（５−ヒドロキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）エチルカルバメートからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
20. 置換された酸が３，４，５−トリス（ベンジルオキシ）安息香酸、クマル酸、インドール−３−酢酸、セロトニンハイドロクロライド（５−ヒドロキシトリプタミンハイドロクロライド）からなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
21. 前記化合物が三臭化ホウ素（ＢＢｒ₃）を用いメラトニンの脱メチル反応によって製造される、請求項２に記載の構造式５ａの化合物の製造方法。
22. 一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物が有効量投与されることを含む、動物の胃疾患の治療方法。
23. 前記胃疾患がミトコンドリアの酸化ストレスの発生、次いで胃粘膜細胞アポトーシス誘導を経過して、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、エタノール、寒冷拘束ストレスによって誘発されたものである、請求項２２に記載の方法。
24. 一般式（１）の化合物の有効量が１ｍｇｋｇ^-1〜５０ｍｇｋｇ^-1の範囲にある、請求項２２に記載の方法。
25. 一般式（１）の化合物が腹腔内投与される、請求項２２に記載の方法。
26. 化合物ＳＥＧＡ（３ａ）のＥＤ₅₀値が６〜８ｍｇｋｇ^-1の範囲にある、請求項２２に記載の方法。
27. 構造式ＳＥＧＡ（３ａ）の化合物が、３［４，５−ジメチルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（ＭＴＴ）還元アッセイにより構成される非毒性分子である、請求項２２に記載の方法。
28. 一般式（１）で表される少なくとも１種の化合物が有効量投与されることを含む、培養された胃粘膜細胞の試験管内における損傷を妨げる方法。

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