JP2014209087A - 粒子測定装置 - Google Patents

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Abstract

【課題】血液や尿等の生体試料中の粒子を分析する際に、複数の光源からの散乱光を分けて検出可能な粒子測定装置を提供する。【解決手段】血球分析装置１は、光学検出器Ｄとして、試料を流すためのフローセルＤ１と、所定波長のレーザ光を出射する半導体レーザ１０１と、前記波長とは異なる波長のレーザ光を出射する半導体レーザ１０３と、半導体レーザ１０１、１０３から出射されたレーザ光をフローセルＤ１に照射する光照射光学系Ｄ３と、フローセルＤ１を通過する測定粒子に半導体レーザ１０１からのレーザ光を照射することにより得られる散乱光を受光する受光面２０５ｂと、フローセルＤ１を通過する測定粒子に半導体レーザ１０３からのレーザ光を照射することにより得られる散乱光を受光する受光面２０５ａと、を備える。【選択図】図３

Description

本発明は、血球等の粒子を含む流れに光を照射して、粒子の測定を行う粒子測定装置に関する。
従来、光学式フローサイトメータを用いた粒子測定装置が知られている。この種の粒子測定装置では、血液等の被検粒子を含む試料がフローセルに流され、その流路に光源から出射された光が照射される。そして、受光光学系により、各粒子から発せられる光が検出され、検出された光に基づいて、粒子の分類および計数が行われる。
ここで、特許文献１には、染色された細胞を含む試料に対して波長の異なる複数のレーザ光を照射し、それぞれのレーザ光から励起されて生じた蛍光をそれぞれ取得する粒子測定装置が記載されている。
特開２００７−４６９４７号公報
しかしながら、上記特許文献１の粒子測定装置では、前方散乱光検出装置において青色レーザビームを選択的に透過させるバンドパスフィルタを用いており、また側方散乱光を検出する光電子増倍管ＰＭＴ１に対しても青色側方散乱光だけを透過するバンドパスフィルタＢＰＦ１を用いている。このため、粒子の分析にあたり、散乱光としては青色レーザビームが細胞により散乱して生じる散乱光しか用いていなかった。
よって、本発明は、血液や尿等の生体試料中の粒子を分析する際に、複数の光源からの散乱光を分けて検出可能な粒子測定装置を提供することを目的とする。
本発明の主たる態様は、粒子測定装置に関する。この態様に係る粒子測定装置は、試料を流すためのフローセルと、第１の波長を有する光を出射する第１光源と、前記第１の波長とは異なる第２の波長を有する光を出射する第２光源と、前記第１光源および前記第２光源から出射された光を前記フローセルに照射する照射光学系と、前記フローセルを通過する測定粒子に前記第１光源からの光を照射することにより得られる散乱光を受光する第１受光部と、前記フローセルを通過する測定粒子に前記第２光源からの光を照射することにより得られる散乱光を受光する第２受光部と、を備える。
本態様に係る粒子測定装置によれば、第１の波長の光をフローセルに照射することにより生じる散乱光と、第２の波長の光をフローセルに照射することにより生じる散乱光が、それぞれ、第１受光部と第２受光部により受光される。ここで、各波長の光により生じる散乱光の特性は、粒子の種類毎に異なる。すなわち、同じ大きさの粒子であっても、粒子の種類が異なれば、各波長の光により生じる散乱光の特性が互いに異なる。本態様に係る粒子測定装置によれば、各波長の光により生じる散乱光が対応する受光部により受光されるため、各受光部からの検出信号に、粒子の種類に応じた散乱光の特性が反映される。よって、各受光部からの検出信号に基づいて、試料中の粒子を良好に区分することができる。
本態様に係る粒子測定装置は、前記第１の波長の光を測定粒子に照射することにより生じる散乱光を前記第１受光部へと導き、前記第２の波長の光を測定粒子に照射することにより生じる散乱光を前記第２受光部へと導く受光光学系をさらに備える構成とされ得る。
この場合、前記照射光学系は、前記第１光源から出射された前記第１の波長の光を前記フローセル内の第１照射位置に照射し、前記第２光源から出射された前記第２の波長の光を前記フローセル内の前記第１照射位置とは異なる第２照射位置に照射するよう構成され得る。
ここで、前記第１照射位置と前記第２照射位置は、前記フローセルの試料の流れ方向にずれるよう設定され得る。このように、第１照射位置と第２照射位置が空間的に分離されると、第１の波長の光に基づく散乱光と第２の波長の光に基づく散乱光とを互いに分離させるための構成を、特に受光光学系に設けなくとも、これら２つの散乱光を互いに異なる位置へと導くことが可能となる。よって、各散乱光が導かれる位置に、それぞれ、対応する受光部を配置することにより、各散乱光を受光することができる。
本態様に係る粒子測定装置は、前記第１受光部により受光された散乱光に基づく第１散乱光データおよび前記第２受光部により受光された散乱光に基づく第２散乱光データをそれぞれ取得する解析部をさらに備える構成とされ得る。ここで、上記のように第１照射位置と第２照射位置が空間的に分離される場合、前記解析部は、同一の測定粒子から得られた前記第１散乱光データと前記第２散乱光データとを互いに対応付けて、前記第１散乱光データおよび前記第２散乱光データに基づく解析を実行するよう構成するのが望ましい。上記のように第１照射位置と第２照射位置が空間的に分離される場合、第１の波長の光により生じる散乱光の検出タイミングと、第２の波長の光により生じる散乱光の検出タイミングとの間に、第１照射位置と第２照射位置のずれに伴う時間差が生じる。よって、上記のように、同一の測定粒子から得られた第１散乱光データと第２散乱光データとを互いに対応付けて、第１散乱光データおよび第２散乱光データに基づく解析を実行するよう、解析部を構成すると、粒子の濃度が高く、第１散乱光データと第２散乱光データが混在する場合にも、解析処理を適正に行うことができる。
本態様に係る粒子測定装置において、前記照射光学系は、前記第１光源から出射された前記第１の波長の光と、前記第２光源から出射された前記第２の波長の光を、前記フローセル内の同じ位置に照射するよう構成され得る。この場合、前記受光光学系は、前記第１の波長の光に基づく散乱光の光路と前記第２の波長に基づく散乱光の光路とを互いに分離させる分光部を備えるよう構成され得る。こうすると、第１の波長の光に基づく散乱光と第２の波長の光に基づく散乱光を互いに異なる位置に導くことができる。よって、各散乱光が導かれる位置に、それぞれ、対応する受光部を配置することにより、各散乱光を受光することができる。
本態様に係る粒子測定装置は、前記第１受光部を有する第１の光検出器と、前記第２受光部を有する第２の光検出器をそれぞれ有するよう構成され得る。
本態様に係る粒子測定装置において、前記第１受光部と前記第２受光部は、これら受光部の受光面に平行な方向に互いに隣り合うように配置され得る。
この場合、粒子測定装置は、前記第１受光部と前記第２受光部の両方が配置された一つの光検出器を有する構成とされ得る。こうすると、一つの光検出器により、第１の波長に基づく散乱光と第２の波長に基づく散乱光が受光されるため、光検出部の構成を簡素化することができる。
また、この場合、前記第１受光部と前記第２受光部は、これら受光部の受光面に垂直な方向の位置が互いに同じとなるように配置され得る。こうすると、光検出器上において、第１受光部の受光面と第２受光部の受光面を同一平面に配置できるため、光検出器の構成を簡素にすることができる。
さらに、この場合、前記受光光学系は、前記第１照射位置を通過する測定粒子から生じる散乱光を前記第１受光部に集光し、前記第２照射位置を通過する測定粒子から生じる散乱光を前記第２受光部に集光する色収差補正レンズを含むよう構成され得る。こうすると、第１受光部と第２受光部により、対応する散乱光を適正に受光することができ、光検出器から良好な検出信号を得ることができる。
本態様に係る粒子分析装置は、ヘモグロビンの吸収係数が、前記第１の波長と前記第２の波長で異なるように、構成され得る。こうすると、ヘモグロビンを含む赤血球の散乱光と、ヘモグロビンを含まない他の血球の散乱光とが、互いに異なるものとなるため、赤血球と他の血球とで、信号の状態に差が生じ易くなる。
たとえば、本態様に係る粒子測定装置が血液の分析に用いられる場合、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方は、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長を有する光を照射する半導体レーザ光源とされ得る。酸素化ヘモグロビンの吸収係数は、４００〜４３５ｎｍの辺りがピークとなる。また、一般に、静脈血のヘモグロビン酸化飽和度は、７５％程度と考えられる。よって、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方から出射される光の波長を４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下に設定することで、当該波長の光を赤血球とその他の血球に照射したときにそれぞれ生じる散乱光の差が大きくなり、この差が、当該波長の光を受光する受光部からの検出信号に反映される。よって、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方から出射される光の波長を４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下とすることにより、測定試料中の血球を、赤血球とその他の血球に、より良好に区分することができる。
また、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方は、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長を有する光を照射する半導体レーザ光源とされ得る。酸素化ヘモグロビンの吸収係数は、６１０〜７５０ｎｍの辺りがボトムとなる。よって、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方から出射される光の波長を６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下に設定することで、他方の波長の光を赤血球に照射したときに生じる散乱光と、当該波長の光を赤血球に照射したときとに生じる散乱光の差異が大きくなる。他方、赤血球以外の血球では、ヘモグロビンによる吸収が起こらないため、各波長の光により生じる散乱光の差異は小さい。よって、前記第１光源および前記第２光源の何れか一方から出射される光の波長を６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下とすることにより、赤血球に対する各波長の散乱光の差異が他の血球の場合に比べて大きくなり、結果、赤血球を他の血球から、より良好に区分することができる。
また、本態様に係る粒子測定装置において、前記第１受光部および前記第２受光部は、たとえば、前記第１光源および前記第２の光源からの光の前方散乱光を、それぞれ受光するよう構成され得る。
本態様に係る粒子測定装置は、前記第１光源、前記第２光源および前記照射光学系が取り付けられたベースをさらに備える構成とされ得る。また、前記照射光学系は、前記第１光源から出射される光を透過し、前記第２光源から出射される光を反射するダイクロイックミラーと、前記第１および第２光源から出射され前記ダイクロイックミラーを経由した光を前記フローセルに集光する集光レンズと、を有する。そして、前記第２光源は、回動
可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記第２光源の回動方向と異なる方向に回動可能に前記ベースに取り付けられる。ここで、前記第２光源を前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記フローセルの流路に平行な第１方向および前記流路を横切る第２方向の何れか一方の方向に変位され、前記ダイクロイックミラーを前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記第１および第２方向のうち他方の方向に変位される。
この構成によれば、複数の光源のうち一方の光源とダイクロイックミラーを、それぞれ、独立して回動させることにより、他方の光源の照射位置に対する一方の光源の照射位置を相対的に調整することができる。よって、複数の光源からの光の照射位置の調整作業を簡易なものとすることができる。また、対象となる光源とダイクロイックミラーを、それぞれ、独立して回動させるものであるため、回動機構を簡素にでき、ベースに取り付けられた照射光学系の小型化および簡素化を図ることができる。
この場合、前記第２光源は、前記フローセルの流路に垂直な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記フローセルの流路に平行な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられている。あるいは、前記第２光源は、前記フローセルの流路に平行な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記フローセルの流路に垂直な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられている。
また、前記照射光学系は、前記第２光源と前記ダイクロイックミラーとの間にコリメータレンズを備え、前記第２光源と前記コリメータレンズが共に回動可能に前記ベースに取り付けられているよう構成され得る。
また、前記フローセルの流路に近づく方向および前記流路を横切る方向に変位可能に前記ベースを支持する位置調整機構をさらに備える構成とされ得る。こうすると、第１および第２光源から出射されるレーザ光の焦点位置を調整することができ、さらに、第１光源から出射された光のフローセルに対する照射位置を調整することができる。
また、本態様に係る粒子測定装置において、前記第１光源および前記集光レンズは、前記ベースに固定されているよう構成され得る。
本発明の他の態様に係る粒子測定装置は、試料を流すためのフローセルと、第１の波長を有する光を出射する第１光源と、前記第１の波長とは異なる第２の波長を有する光を出射する第２光源と、前記第１光源および前記第２光源から出射された光を前記フローセルに照射する照射光学系と、前記フローセルを通過する測定粒子に前記第１光源からの光を照射することにより得られる光を受光する第１受光部と、前記フローセルを通過する測定粒子に前記第２光源からの光を照射することにより得られる光を受光する第２受光部と、前記第１光源、前記第２光源および前記照射光学系が取り付けられたベースと、を備える。また、前記照射光学系は、前記第１光源から出射される光を透過し、前記第２光源から出射される光を反射するダイクロイックミラーと、前記第１および第２光源から出射され前記ダイクロイックミラーを経由した光を前記フローセルに集光する集光レンズと、を有する。そして、前記第２光源は、回動可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記第２光源の回動方向と異なる方向に回動可能に前記ベースに取り付けられる。ここで、前記第２光源を前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記フローセルの流路に平行な第１方向および前記流路を横切る第２方向の何れか一方の方向に変位され、前記ダイクロイックミラーを前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記第１および第２方向のうち他方の方向に変位される。
本態様に係る粒子測定装置によれば、複数の光源のうち一方の光源とダイクロイックミラーを、それぞれ、独立して回動させることにより、他方の光源の照射位置に対する一方の光源の照射位置を相対的に調整することができる。よって、複数の光源からの光の照射位置の調整作業を簡易なものとすることができる。また、対象となる光源とダイクロイックミラーを、それぞれ、独立して回動させるものであるため、回動機構を簡素にでき、ベースに取り付けられた照射光学系の小型化および簡素化を図ることができる。
以上のとおり、本発明によれば、血液や尿等の生体試料中の粒子を分析する際に、複数の光源からの散乱光を分けて検出可能な粒子測定装置を提供することができる。
本発明の効果ないし意義は、以下に示す実施の形態の説明により更に明らかとなろう。ただし、以下に示す実施の形態は、あくまでも、本発明を実施化する際の一つの例示であって、本発明は、以下の実施の形態により何ら制限されるものではない。
実施の形態に係る血球分析装置の外観を示す斜視図である。 実施の形態に係る測定ユニットの構成を模式的に示す図である。 図３（ａ）は、実施の形態に係る光学検出器の光学系構成を模式的に示す図、図３（ｂ）は、当該光検出器の光学系をＸ軸正方向に見た図である。 図４（ａ）〜（ｄ）は、それぞれ、実施の形態に係るフローセル、ビームストッパ、ピンホールおよびフォトダイオードの構成を示す図である。 実施の形態に係る測定ユニットの構成を示す図である。 実施の形態に係る情報処理ユニットの構成を示す図である。 図７（ａ）、（ｂ）は、解析例１に係る同一血球から取得された各波長のデータを対応付ける方法を説明する図である。図７（ａ）は、粒子濃度が低い場合に赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳが検出されるタイミングを示すタイミングチャート、図７（ｂ）は、粒子濃度が高い場合（通常濃度の血液試料を用いた場合）に赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳが検出されるタイミングを示すタイミングチャートである。 図８（ａ）は、解析例１に係る赤血球に含まれるヘモグロビンの吸収特性を示す図、図８（ｂ）、（ｃ）は、それぞれ、解析例１と比較例における粒子分析のシミュレーション結果を示す図、図８（ｄ）は、解析例１に係る前方散乱光に基づくスキャッタグラムを示す図である。 解析例１に係る血球分析装置による解析処理を示すフローチャートである。 図１０（ａ）〜（ｃ）は、それぞれ、解析例２に係る異なる被検者から採取された血液検体に基づいて作成されたスキャッタグラムを示す図、図１０（ｄ）〜（ｆ）は、解析例２に係る異なる被検者から採取された血液検体に基づいて行われた白血球の分類結果を示す図である。 解析例２に係る血球分析装置による解析処理を示すフローチャートである。 解析例３に係る血球分析装置による解析処理を示すフローチャートである。 本実施の形態に係る光照射ユニットの構成例を示す分解斜視図である。 図１４（ａ）は、本実施の形態に係る組立後の光照射ユニットを示す斜視図、図１４（ｂ）は、本実施の形態に係る組立後の光照射ユニットの主たる構成を模式的に示す図である。 図１５（ａ）は、本実施の形態に係る光照射ユニットを位置調整機構に設置する前の状態を示す斜視図、図１５（ａ）は、本実施の形態に係る光照射ユニットを位置調整機構に設置した状態を示す斜視図である。 図１６（ａ）は、本実施の形態に係る光照射ユニットを位置調整機構に設置した状態を示す斜視図、図１６（ｂ）は、図１６（ａ）の状態から青光源ユニットを取り外した状態を示す斜視図、図１６（ｃ）は、ベースの凹部付近を示す斜視図である。 図１７（ａ）、（ｂ）は、本実施の形態に係る光照射ユニットにおける青レーザ光のＹ軸方向の位置調整方法を示す図、図１７（ｃ）、（ｄ）は、本実施の形態に係る光照射ユニットにおける青レーザ光のＸ軸方向の位置調整方法を示す図である。 図１８（ａ）は、変更例に係る組立後の光照射ユニットの主たる構成を模式的に示す図、図１８（ｂ）、（ｃ）は、それぞれ、本変更例に係る光照射ユニットにおける青レーザ光のＹ軸方向およびＸ軸方向の位置調整方法を示す図である。 変更例に係る光学検出器の構成を模式的に示す図である。
本実施の形態は、血液に関する検査および分析を行うための血球分析装置とその光照射光学系に本発明を適用したものである。以下、本実施の形態に係る血球分析装置について、図面を参照して説明する。
図１は、本実施の形態に係る血球分析装置１の外観を示す斜視図である。
血球分析装置１は、血液検体に含まれる白血球、赤血球、血小板等を検出し、各血球を計数する多項目血球分析装置である。血球分析装置１は、測定ユニット２と、測定ユニット２の前面側に配置された搬送ユニット３と、情報処理ユニット４とを備えている。患者から採取された末梢血である血液検体は、検体容器（採血管）Ｔに収容される。複数の検体容器ＴがサンプルラックＬに支持され、このサンプルラックＬが搬送ユニット３により搬送されて、血液検体が測定ユニット２へ供給される。
情報処理ユニット４は、表示部４１と入力部４２を備えており、測定ユニット２と、搬送ユニット３と、ホストコンピュータ５（図２参照）に対して、通信可能に接続されている。情報処理ユニット４は、測定ユニット２と搬送ユニット３の動作を制御し、測定ユニット２で行われた測定結果に基づいて解析を行い、解析結果をホストコンピュータ５（図２参照）に送信する。情報処理ユニット４は、パーソナルコンピュータからなっている。
図２は、測定ユニット２の構成を模式的に示す図である。
測定ユニット２は、ハンド部２１と、検体容器セット部２２と、バーコードユニット２３と、検体吸引部２４と、試料調製部２５と、検出部２６とを備えている。検体吸引部２４は、ピアサ２４ａを備えており、検体容器Ｔから検体を吸引する。試料調製部２５は、混合チャンバＭＣとヒータＨを備えており、検体に試薬または希釈液を混和することにより測定に用いられる測定試料を調製する。検出部２６は、光学検出器Ｄを備えており、測定試料から血球を検出する。測定ユニット２の各部は、情報処理ユニット４からの指示に基づいて制御される。
搬送ユニット３により位置Ｐ１に位置付けられた検体容器Ｔは、ハンド部２１により把持され、サンプルラックＬから上方向に抜き出される。そして、ハンド部２１が揺動されることにより、検体容器Ｔ内の検体が撹拌される。攪拌が終了した検体容器Ｔは、ハンド部２１により、位置Ｐ１に位置付けられた検体容器セット部２２にセットされる。しかる後、この検体容器Ｔは、検体容器セット部２２により位置Ｐ２まで搬送される。
検体容器Ｔが位置Ｐ２に位置付けられると、位置Ｐ２の近傍に設置されたバーコードユニット２３により、検体容器Ｔに貼付されたバーコードラベルから検体番号が読み取られる。しかる後、この検体容器Ｔは、検体容器セット部２２により位置Ｐ３まで搬送される
。検体容器Ｔが位置Ｐ３に位置付けられると、検体吸引部２４によりピアサ２４ａを介して検体容器Ｔから所定量の検体が吸引される。検体の吸引が終了すると、この検体容器Ｔは、検体容器セット部２２により前方に搬送され、ハンド部２１により元のサンプルラックＬの支持位置に戻される。ピアサ２４ａを介して吸引された検体は、ピアサ２４ａが混合チャンバＭＣの位置へ移送された後、検体吸引部２４により混合チャンバＭＣに所定量だけ吐出される。
試料調製部２５は、第１試薬を収容する容器２５１と、第２試薬を収容する容器２５２と、希釈液を収容する容器２５３に、チューブを介して接続されている。また、試料調製部２５はコンプレッサ（図示せず）に接続されており、このコンプレッサにより発生される圧力により容器２５１〜２５３から、それぞれ、第１試薬と、第２試薬と、希釈液を分取することが可能となっている。第１試薬と第２試薬を用いる場合、試料調製部２５は、混合チャンバＭＣ内で、血液検体と試薬とを混合し、この混合液を所定時間だけヒータＨにより加温して、測定試料を調製する。第１試薬と第２試薬を用いない場合、試料調製部２５は、混合チャンバＭＣ内で、血液検体と希釈液とを混合して、測定試料を調製する。なお、第１試薬と第２試薬を用いない場合でも、適宜、混合液を加温しても良い。試料調製部２５で調製された測定試料は、検出部２６の光学検出器Ｄに供給される。
なお、第１試薬は、核酸を染色可能な蛍光色素を含有し、第２試薬で処理された血液試料中の有核細胞の核酸を蛍光染色するための試薬である。第２試薬は、赤血球を溶血させ、白血球の細胞膜に上記の蛍光色素が透過できる程度の損傷を与えるための試薬である。
検出部２６は、シース液を収容する容器２６１に、チューブを介して接続されている。また、検出部２６はコンプレッサ（図示せず）に接続されており、このコンプレッサにより発生される圧力により容器２６１からシース液を分取することが可能となっている。
図３（ａ）、（ｂ）は、光学検出器Ｄの光学系の構成を模式的に示す図である。便宜上、図３（ａ）には、互いに直交するＸＹＺ座標軸が示されている。Ｘ軸方向は、紙面上下方向、Ｚ軸方向は紙面左右方向である。図３（ａ）は、光学検出器Ｄの光学系をＹ軸負方向に見た図、図３（ｂ）は、光学検出器Ｄの光学系をＸ軸正方向に見た図である。
また、図４（ａ）は、フローセルＤ１の構成を模式的に示す図、図４（ｂ）は、ビームストッパ２０３の構成を模式的に示す図、図４（ｃ）は、ピンホール２０４の構成を模式的に示す図、図４（ｄ）は、フォトダイオード２０５の構成を模式的に示す図である。
図３（ａ）を参照して、光学検出器Ｄは、フローセルＤ１と、シースフロー系Ｄ２と、光照射光学系Ｄ３と、前方散乱光受光光学系Ｄ４と、側方散乱光受光光学系Ｄ５と、蛍光受光光学系Ｄ６を有している。
シースフロー系Ｄ２は、フローセルＤ１内に測定試料をシース液に包まれた状態で送り込み、フローセルＤ１中に液流を発生させるように構成されている。図３（ｂ）に示すように、フローセルＤ１は、測定試料を細孔部Ｄ１３に向かって上方へ噴射する試料ノズルＤ１１と、シース液供給口Ｄ１２と、廃液口Ｄ１４を備える。細孔部Ｄ１３内に、測定試料が流れる流路Ｄ１５が形成される。
光照射光学系Ｄ３は、半導体レーザ１０１、１０３と、コリメータレンズ１０２、１０４と、ダイクロイックミラー１０５と、シリンドリカルレンズ１０６と、コンデンサレンズ１０７を備えている。
半導体レーザ１０１は、発光部（図示せず）の半導体層の積層方向がＸ軸方向に一致す
るよう配置される。したがって、半導体レーザ１０１から出射されるレーザ光の広がり角は、Ｘ軸方向において最大となり、Ｙ軸方向において最小となる。半導体レーザ１０１は、所定波長のレーザ光（以下、「赤レーザ光ＲＬ」という）をＺ軸正方向に出射する。半導体レーザ１０１の出射波長は、６１０〜７５０ｎｍの範囲に含まれるよう設定される。半導体レーザ１０１の出射光軸は、光照射光学系Ｄ３の光軸Ｏに一致している。
コリメータレンズ１０２は、半導体レーザ１０１から出射された赤レーザ光ＲＬを平行光に変換する。
半導体レーザ１０３は、発光部（図示せず）の半導体層の積層方向がＺ軸方向に一致するよう配置される。したがって、半導体レーザ１０３から出射されるレーザ光の広がり角は、Ｚ軸方向において最大となり、Ｙ軸方向において最小となる。半導体レーザ１０３は、所定波長のレーザ光（以下、「青レーザ光ＢＬ」という）をＸ軸負方向に出射する。半導体レーザ１０３の出射波長は、４００〜４３５ｎｍの範囲に含まれるよう設定される。半導体レーザ１０３の出射光軸は、光照射光学系Ｄ３の光軸Ｏに交差する。
コリメータレンズ１０４は、半導体レーザ１０３から出射された青レーザ光ＢＬを平行光に変換する。
ダイクロイックミラー１０５は、コリメータレンズ１０２を透過した赤レーザ光ＲＬを透過し、コリメータレンズ１０４を透過した青レーザ光ＢＬを反射する。ダイクロイックミラー１０５は、ダイクロイックミラー１０５によって反射された青レーザ光ＢＬの進行方向が、図３（ｂ）に示すように、Ｚ軸方向からややＹ軸方向に傾くように、配置されている。
シリンドリカルレンズ１０６は、ダイクロイックミラー１０５を経由した赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬをＸ軸方向にのみ収束させる。コンデンサレンズ１０７は、シリンドリカルレンズ１０６を透過した赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬを集光する。コンデンサレンズ１０７は、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬをＹ軸方向に収束させてフローセルＤ１の流路Ｄ１５（図４（ａ）参照）の位置に合焦させ、また、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬをＸ軸方向に収束させて流路Ｄ１５の手前（Ｚ軸負側）の位置に合焦させる。したがって、コンデンサレンズ１０７によってＸ軸方向に収束された光は、合焦位置から流路Ｄ１５の位置に達するまでに、やや広がる。よって、流路Ｄ１５には、図４（ａ）に示すように、Ｘ軸方向に細長いビーム形状で、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬが照射される。
図３（ｂ）に示すように、ダイクロイックミラー１０５によって反射された青レーザ光ＢＬは、Ｚ軸方向からＹ方向にやや傾いた方向に進むため、流路Ｄ１５に対する青レーザ光ＢＬの照射位置ＥＰ１は、赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ２よりもＹ軸正方向にずれている。赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ２は、光軸Ｏ上にある。
前方散乱光受光光学系Ｄ４は、前方集光レンズ２０１と、絞り２０２と、ビームストッパ２０３と、ピンホール２０４と、フォトダイオード２０５を備える。フローセルＤ１から前方（Ｚ軸正方向）へと向かう赤レーザ光ＲＬおよび青レーザ光ＢＬの散乱光（前方散乱光）は、それぞれ、前方集光レンズ２０１によってピンホール２０４の位置に集光され、その後、ピンホール２０４を通って、フォトダイオード２０５により受光される。フォトダイオード２０５は、受光した前方散乱光のピーク値に基づいて前方散乱光信号を出力する。
前方集光レンズ２０１は、その光軸が、光照射光学系Ｄ３の光軸ＯからＹ軸正方向にず
れるように配置されている。したがって、赤レーザ光ＲＬの前方散乱光（以下、「赤散乱光ＲＳ」という）の中心を通る光線は、前方集光レンズ２０１を透過した後、Ｚ軸正方向からややＹ軸負方向に傾く方向に進む。また、青レーザ光ＢＬの前方散乱光（以下、「青散乱光ＢＳ」という）の中心を通る光線は、前方集光レンズ２０１を透過した後、Ｚ軸正方向からややＹ軸正方向に傾く方向に進む。
図４（ｃ）に示すように、ピンホール２０４には、Ｙ軸方向に並ぶ２つの孔２０４ａ、２０４ｂが形成されている。孔２０４ａ、２０４ｂの径Ｗ２は、それぞれ、青散乱光ＢＳ、赤散乱光ＲＳの収束スポットの径よりもやや大きく設定されている。赤散乱光ＲＳは、Ｙ軸正側の孔２０４ｂの位置に集光され、孔２０４ｂを通り抜ける。また、青散乱光ＢＳは、Ｙ軸負側の孔２０４ａの位置に集光され、孔２０４ｂを通り抜ける。
図４（ｄ）に示すように、フォトダイオード２０５には、Ｙ軸方向に並ぶ２つの受光面２０５ａ、２０５ｂが配置されている。受光面２０５ａ、２０５ｂは、Ｚ軸方向において同じ位置にあり、それぞれ、Ｘ−Ｙ平面に平行である。フォトダイオード２０５上において、受光面２０５ａ、２０５ｂは、同一平面上に配置されている。ピンホール２０４の孔２０４ａを通り抜けた青散乱光ＢＳは、受光面２０５ａに照射され、孔２０４ｂを通り抜けた赤散乱光ＲＳは、受光面２０５ｂに照射される。
なお、前方散乱光受光光学系Ｄ４の倍率は、受光面２０５ａ、２０５ｂに照射される際の青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳの間隔が、受光面２０５ａの中心と受光面２０５ｂの中心との間隔に一致するように設定される。これにより、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳは、図４（ｄ）に示すように、それぞれ、受光面２０５ａ、２０５ｂの中央に照射される。
図３（ａ）、（ｂ）に戻り、フローセルＤ１に照射された赤レーザ光ＲＬ、青レーザ光ＢＬのうち、粒子（血球、等）に照射されずにフローセルＤ１を透過したレーザ光（以下、「直接光」という）は、前方集光レンズ２０１によってビームストッパ２０３上に集光される。ビームストッパ２０３は、光を透過しない薄板状の部材によって構成されている。図４（ｂ）に示すように、ビームストッパ２０３は、半円状の開口２０３ａ、２０３ｂと、これら開口２０３ａ、２０３ｂ間に形成された遮光部２０３ｃとを備える。遮光部２０３ｃのＸ軸方向の幅Ｗ１は一定である。この遮光部２０３ｃ上に、直接光が集光される。上記のように、コンデンサレンズ１０７は、Ｘ軸方向におけるレーザ光の焦点位置がＹ軸方向におけるレーザ光の焦点位置よりも手前（Ｚ軸負側）となるようにレーザ光を収束させる。このため、直接光は、Ｘ軸方向の焦点位置がＹ軸方向の焦点位置よりも手前（Ｚ軸負側）となるように、前方集光レンズ２０１によって集光される。ビームストッパ２０３は、入射面が、直接光のＸ軸方向の焦点位置に位置付けられるように配置される。したがって、直接光は、図４（ｂ）に示すように、Ｙ軸方向に長いビーム形状で、遮光部２０３ｃ上に照射される。
フローセルＤ１からの赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳは、大部分が、ビームストッパ２０３の開口２０３ａ、２０３ｂを通過し、一部が、遮光部２０３ｃによって遮光される。遮光部２０３ｃによる前方散乱光の遮光量は、遮光部２０３ｃの幅Ｗ１によって決まる。このため、遮光部２０３ｃの幅Ｗ１は、なるべく小さいことが望ましい。しかしながら、遮光部２０３ｃの幅Ｗ１は、直接光を確実に遮光できるよう、直接光のＸ軸方向の幅の１０倍程度に設定される。
側方散乱光受光光学系Ｄ５は、コリメータレンズＤ５１と、ダイクロイックミラーＤ５２と、側方集光レンズＤ５３と、フォトダイオードＤ５４を備える。フローセルＤ１から側方（Ｘ軸正方向）へと向かう散乱光（側方散乱光）は、コリメータレンズＤ５１にて平行光に変換される。上記のように、フローセルＤ１には、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光Ｂ
Ｌが照射されるため、各レーザ光に基づく２つの側方散乱光が生じる。コリメータレンズＤ５１は、これら２つの側方散乱光をそれぞれ平行光に変換する。平行光に変換された２つの側方散乱光は、ダイクロイックミラーＤ５２で反射され、さらに、側方集光レンズＤ５３により集光されて、フォトダイオードＤ５４により受光される。
フォトダイオードＤ５４は、フォトダイオード２０５と同様、各波長の側方散乱光をそれぞれ受光する２つの受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂを有する。受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂはＹ軸方向に並び、Ｚ軸方向において同じ位置にある。フォトダイオードＤ５４上において、受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂは、同一平面上に配置されている。フォトダイオードＤ５４は、受光した各波長の側方散乱光のピーク値に基づいて側方散乱光信号を出力する。
なお、側方散乱光受光光学系Ｄ５の倍率は、受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂに照射される際の青レーザ光ＢＬの散乱光と赤レーザ光ＲＬの散乱光との間隔が、受光面Ｄ５４ａの中心と受光面Ｄ５４ｂの中心との間隔に一致するように設定される。これにより、これら散乱光は、それぞれ、受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂの中央に照射される。
蛍光受光光学系Ｄ６は、分光フィルタＤ６１と、蛍光集光レンズＤ６２と、アバランシェフォトダイオードＤ６３と、コリメータレンズＤ６４と、ミラーＤ６５を備える。フローセルＤ１からＸ軸正方向へと向かう蛍光は、コリメータレンズＤ５１にて平行光に変換され、ダイクロイックミラーＤ５２を透過し、さらに分光フィルタＤ６１に通されて、蛍光集光レンズＤ６２により集光される。また、フローセルＤ１からＸ軸負方向へと向かう蛍光は、コリメータレンズＤ６４にて平行光に変換され、ミラーＤ６５によって反射される。ミラーＤ６５によって反射された蛍光は、再び、コリメータレンズＤ６４とフローセルＤ１を通ってコリメータレンズＤ５１に入射する。その後、この蛍光は、ダイクロイックミラーＤ５２を透過し、さらに分光フィルタＤ６１に通されて、蛍光集光レンズＤ６２により集光される。こうして、蛍光集光レンズＤ６２により集光された蛍光は、アバランシェフォトダイオードＤ６３に受光される。アバランシェフォトダイオードＤ６３は、受光した蛍光のピーク値に基づいて蛍光信号（ＳＦＬ）を出力する。蛍光信号の取得の際には、通常、半導体レーザ１０１、１０３の何れか一方が駆動される。
なお、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学系において、前方集光レンズ２０１は、アクロマティックレンズからなっており、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの２つの波長に対して色収差を補正する機能を備えている。このため、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳは、同一平面上に配置された受光面２０５ａ、２０５ｂ上に適正に照射される。同様に、側方集光レンズＤ５３も、アクロマティックレンズからなっており、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬに基づく２つの側方散乱光の波長に対して色収差を補正する機能を備えている。このため、これら２つの側方散乱光は、同一平面上に配置された受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂ上に適正に照射される。
図２に戻り、光学検出器Ｄにより取得された前方散乱光信号と、側方散乱光信号と、蛍光信号は、情報処理ユニット４に送信される。情報処理ユニット４は、受信したこれら信号に基づいて解析を実行する。
図５は、測定ユニット２の構成を示す図である。
測定ユニット２は、図２に示す検体吸引部２４、試料調製部２５および検出部２６の他、センサ部２７と、駆動部２８と、制御部２９を備える。センサ部２７は、検体容器ＴおよびサンプルラックＬの位置を検出するためのセンサ等を含み、駆動部２８は、検体の測定を行うための機構を含む。図２に示すバーコードユニット２３は、センサ部２７に含まれる。
制御部２９は、ＣＰＵ２９１と、メモリ２９２と、通信インターフェース２９３と、Ｉ／Ｏインターフェース２９４を含んでいる。
ＣＰＵ２９１は、メモリ２９２に記憶されているコンピュータプログラムを実行する。メモリ２９２は、ＲＯＭ、ＲＡＭ、ハードディスク等からなる。また、ＣＰＵ２９１は、通信インターフェース２９３を介して、情報処理ユニット４との間でデータの送受信を行う。また、ＣＰＵ２９１は、Ｉ／Ｏインターフェース２９４を介して、測定ユニット２内の各部を制御すると共に、各部から出力された信号を受信して処理する。検出部２６により得られた血液検体の測定データは、ＣＰＵ２９１により処理され、メモリ２９２に格納される。血液検体に対する測定が終了すると、メモリ２９２に格納された測定データが、通信インターフェース２９３を介して、情報処理ユニット４に送信され、情報処理ユニット４において解析処理が行われる。
図６は、情報処理ユニット４の構成を示す図である。
情報処理ユニット４は、パーソナルコンピュータからなり、本体４０と、表示部４１と、入力部４２から構成されている。本体４０は、ＣＰＵ４０１と、ＲＯＭ４０２と、ＲＡＭ４０３と、ハードディスク４０４と、読出装置４０５と、画像出力インターフェース４０６と、入出力インターフェース４０７と、通信インターフェース４０８を有する。
ＣＰＵ４０１は、ＲＯＭ４０２に記憶されているコンピュータプログラムおよびＲＡＭ４０３にロードされたコンピュータプログラムを実行する。ＲＡＭ４０３は、ＲＯＭ４０２およびハードディスク４０４に記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、ＲＡＭ４０３は、これらのコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ４０１の作業領域としても利用される。
ハードディスク４０４には、オペレーティングシステム、ＣＰＵ４０１に実行させるためのコンピュータプログラム、およびコンピュータプログラムの実行に用いるデータが記憶されている。また、ハードディスク４０４には、後述の解析処理を実行させるためのプログラム４０４ａが記憶されている。読出装置４０５は、ＣＤドライブまたはＤＶＤドライブ等によって構成されており、記録媒体４０５ａに記録されたコンピュータプログラムおよびデータを読み出すことができる。なお、上記プログラム４０４ａが記録媒体４０５ａに記録されている場合には、読出装置４０５により記録媒体４０５ａから読み出されたプログラム４０４ａが、ハードディスク４０４に記憶される。
画像出力インターフェース４０６は、画像データに応じた映像信号を表示部４１に出力し、表示部４１は、画像出力インターフェース４０６から出力された映像信号に基づいて画像を表示する。ユーザは入力部４２を介して指示を入力し、入出力インターフェース４０７は、入力部４２を介して入力された信号を受け付ける。通信インターフェース４０８は、測定ユニット２と、搬送ユニット３と、ホストコンピュータ５に接続されており、ＣＰＵ４０１は、通信インターフェース４０８を介して、これら装置との間で指示信号およびデータの送受信を行う。
ところで、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学検出器Ｄは、血液検体に試薬が混和された測定試料がフローセルＤ１に流される場合の他、試薬が混和されない測定試料がフローセルＤ１に流される場合にも、血球分析のための信号を取得するために用いられる。試薬が混和されない測定試料がフローセルＤ１に流される場合、半導体レーザ１０１、１０３が駆動され、青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬが、それぞれ、照射位置ＥＰ１、ＥＰ２に照射される。そして、照射位置ＥＰ１、ＥＰ２から生じた青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳが、そ
れぞれ、フォトダイオード２０５の受光面２０５ａ、２０５ｂにより受光され、フォトダイオード２０５から、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳに基づく前方散乱光信号が出力される。こうして取得された２種類の前方散乱光信号に基づいて、血球の分類と計数が行われる。
以下、これら２種類の前方散乱光信号に基づく血球の分類および計数の処理について説明する。なお、以下の解析処理では、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳに基づく前方散乱光信号が用いられているが、青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬからそれぞれ生じる２種類の側方散乱光に基づく側方散乱光信号を、同様の解析に用いることも可能である。
＜解析例１＞
本解析例は、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを用いて、赤血球と他の血球とを分類する処理に関するものである。なお、本解析例では、測定試料の調製において、検体容器Ｔから吸引された検体には希釈液のみが混和され、染色剤や溶血剤等の試薬は混和されない。
図３（ｂ）に示すように、青レーザ光ＢＬの照射位置ＥＰ１と赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ２は、互いに、Ｙ軸方向にずれている。また、測定試料は、流路Ｄ１５をＹ軸正方向に流れる。したがって、流路Ｄ１５を流れる血球に赤レーザ光ＲＬが照射されてから、この血球に青レーザ光ＢＬが照射されるまでには、所定のタイムラグがある。このため、青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬからそれぞれ生じる２種類の前方散乱光に基づく前方散乱光信号を解析に用いる場合には、同一の血球から生じた２種類の前方散乱光信号から取得された２種類のデータ（以下、「前方散乱光データ」という）を互いに対応付ける必要がある。
図７（ａ）、（ｂ）は、２種類の前方散乱光データを対応付ける方法を説明する図である。図７（ａ）は、粒子濃度が低い場合に赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳが検出されるタイミングを示すタイミングチャート、図７（ｂ）は、粒子濃度が高い場合（通常濃度の血液試料を用いた場合）に赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳが検出されるタイミングを示すタイミングチャートである。
図７（ａ）を参照して、測定試料の濃度が低い場合、赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングは離散的になる。この場合、通常、一つの血球に対する赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングとの間の期間に、次の血球に対する赤散乱光ＲＳの検出タイミングが入ることはない。したがって、赤散乱光ＲＳの検出タイミングの次に到来する青散乱光ＢＳの検出タイミングが、同一血球に対する検出タイミングとして対応づけられる。図７（ａ）の例では、検出タイミングＴ２１〜Ｔ２５が、それぞれ、検出タイミングＴ１１〜Ｔ１５に対応づけられる。同一血球に対する検出タイミングの時間差は、何れの血球の場合も略同じである。したがって、たとえば、互いに対応付けられた２つの検出タイミングの時間差の平均値Δｔを、各血球に対する赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの検出タイミングの時間差として用いることができる。
図７（ｂ）を参照して、粒子濃度が高い場合（通常濃度の血液試料を用いる場合）には、赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングが混在し合うことになる。この場合、同一の血球に対する赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングとを対応付けることが難しい。しかしながら、フローセルＤ１を流れる測定試料の速度は、粒子濃度が高い場合と粒子濃度が低い場合とで殆ど変わらない。よって、粒子濃度が低い場合に取得された時間差Δｔを、粒子濃度が高い場合の同一血球に対する赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングの時間差として用いることができる。図７（ｂ）の例では、時間差Δｔを用いることにより、検出タイミングＴ２ｎ、Ｔ２ｍが、それぞれ、検出タイミングＴ１ｎ、Ｔ１ｍに対応づけられる。
本解析例では、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳを用いた血球分析が行われる前に、粒子濃度の低い試料がフローセルＤ１に流され、時間差Δｔが取得される。そして、こうして取得された時間差Δｔが、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳを用いた血球分析が行われる場合に用いられ、青散乱光ＢＳに基づいて取得された前方散乱光データと赤散乱光ＲＳに基づいて取得された前方散乱光データが互いに対応づけられる。この対応付けは、図５に示す測定ユニット２の制御部２９において行われる。制御部２９のＣＰＵ２９１は、検出部２６（光学検出器Ｄ）から受信した赤散乱光ＲＳおよび青散乱光ＢＳに基づく２種類の前方散乱光データを、順次、時間差Δｔを用いて対応づけて、メモリ２９２に格納する。
なお、時間差Δｔの取得方法は、上述の方法に限られるものではない。たとえば、フローセルＤ１を流れる測定試料の速度は、測定試料の温度によって変化する。したがって、フローセルＤ１を流れる測定試料の温度を測るための検出器をフローセルＤ１中に配置しておき、検出された温度に基づいて時間差Δｔのデフォルト値を調整して、時間差Δｔを取得するようにしても良い。
次に、赤血球により生じる前方散乱光と、赤血球以外の血球（血小板や白血球）により生じる前方散乱光との違いについて説明する。
光が照射されることにより粒子から生じる散乱光は、その粒子の粒径と屈折率とにより定まる（Ｍｉｅ散乱理論）。ここで、屈折率は、実数部と虚数部とからなる複素数により表すことができる。すなわち、複素屈折率をｍ、屈折率をｎｒ、吸収をｎｉとすると、複素屈折率ｍは、以下の式により算出することができる。
ｍ＝ｎｒ＋ｉｎｉ
上記式によれば、複素屈折率ｍは吸収ｎｉに応じて変化するため、光に対する粒子の吸収度合いが異なれば、屈折率も異なることになる。よって、異なる種類の粒子が互いに異なる吸収度合いを有する場合、これら粒子に対して光を照射すると、生じる散乱光も互いに異なったものとなる。
図８（ａ）は、赤血球に含まれるヘモグロビンの吸収特性を示す図である。横軸は、ヘモグロビンに照射される光の波長を示し、縦軸は、吸収係数（任意単位）を示している。
図８（ａ）には、酸素化ヘモグロビン（ＨｂＯ２）と脱酸素化ヘモグロビン（Ｈｂ）の吸収係数がそれぞれ示されている。赤血球中のヘモグロビンは、酸素化ヘモグロビンと、脱酸素化ヘモグロビンとが混在した状態にあり、一般的には、静脈血のヘモグロビン酸素飽和度は約７５％、すなわち、酸素化ヘモグロビンと脱酸素化ヘモグロビンの存在比率が３対１となっている。このため、血液検体に含まれる赤血球では、酸素化ヘモグロビンの性質が支配的となる。
図８（ａ）に示すように、波長が４００〜４３５ｎｍの範囲では、酸素化ヘモグロビン（ＨｂＯ２）の吸収係数は、他の波長帯に比べて数段大きくなっている。一方、波長が６１０〜７５０ｎｍの範囲では、酸素化ヘモグロビン（ＨｂＯ２）の吸収係数は、他の波長帯に比べて数段小さくなっている。すなわち、青レーザ光ＢＬに対する赤血球の吸収度合いと、赤レーザ光ＲＬに対する赤血球の吸収度合いとの差は、大きいものとなる。他方、赤血球以外の血球（血小板や白血球）はヘモグロビンを含んでいないため、青レーザ光ＢＬに対する赤血球以外の血球の吸収度合いと、赤レーザ光ＲＬに対する赤血球以外の血球の吸収度合いとの差は、小さいものとなる。
以上のことから、赤血球と、赤血球以外の血球（血小板や白血球）とでは、青レーザ光ＢＬに対する吸収度合いと、赤レーザ光ＲＬに対する吸収度合いとの差が顕著に異なるため、青レーザ光ＢＬが照射される場合に生じる青散乱光ＢＳの強度と、赤レーザ光ＲＬが照射される場合に生じる赤散乱光ＲＳの強度との差も異なるものとなる。具体的には、赤血球では、青散乱光ＢＳの強度は、赤散乱光ＲＳの強度よりも小さくなり易く、赤血球以外の他の血球では、青散乱光ＢＳの強度と赤散乱光ＲＳの強度は、同程度になり易い。
図８（ｂ）、（ｃ）は、それぞれ、本解析例と比較例における粒子分析のシミュレーション結果を示す図である。
本シミュレーションは、上記光学検出器Ｄにおいて、前方散乱光受光光学系Ｄ４のＮＡを０．２２に、ビームストッパ２０３の遮光部２０３ｃの幅Ｗ１を０．３ｍｍに、フローセルＤ１とビームストッパ２０３との間を６ｍｍに、フローセルＤ１に照射されるビームのＹ軸方向の幅を１０μｍとして行われた。また、本シミュレーションでは、赤血球と同様の性質を有する粒子と、血小板と同様の性質を有する粒子とが設定され、これら粒子に対して所定波長のレーザ光を照射することにより生じる前方散乱光の強度がシミュレーションにより算出された。
本解析例のシミュレーションでは、赤血球と血小板に相当する粒子に、波長６４０ｎｍの赤レーザ光ＲＬと波長４０５ｎｍの青レーザ光ＢＬを照射し、各粒子により生じる６４０ｎｍと４０５ｎｍの前方散乱光信号が、図８（ｂ）に示すようにスキャッタグラム上にプロットされている。比較例のシミュレーションでは、赤血球と血小板に相当する粒子に、約６３２ｎｍの波長のレーザ光を照射し、各粒子により生じる低角（２〜３度）と高角（８〜２０度）の前方散乱光信号が、図８（ｃ）に示すようにスキャッタグラム上にプロットされている。
図８（ｂ）、（ｃ）に示すスキャッタグラムには、それぞれ、赤血球に相当する粒子が分布するマップＭ１、Ｍ２が示されている。マップＭ１、Ｍ２は、体積の値がＶ３０〜Ｖ１５０であり、ヘモグロビン濃度の値がＨＣ２２〜ＨＣ４６である８１個の粒子に基づいて作成されており、各粒子は、マップＭ１、Ｍ２の格子の交点にプロットされている。なお、健常者の赤血球では、概ね、体積がＶ６０〜Ｖ１２０であり、ヘモグロビン濃度がＨＣ３１〜ＨＣ３７である。また、図８（ｂ）、（ｃ）に示すスキャッタグラムには、それぞれ、血小板に相当する粒子が分布する分布線Ｃ１１、Ｃ１２が示されている。分布線Ｃ１１、Ｃ１２は、体積の値がＶ０．５〜Ｖ３３である４つの粒子に基づいて作成されている。
図８（ｂ）、（ｃ）に示すように、赤血球と血小板に相当する粒子に対して行ったシミュレーション結果から、被検者から採取される赤血球も、マップＭ１、Ｍ２内に分布すると考えられ、被検者から採取される血小板も、分布線Ｃ１１、Ｃ１２上に分布すると考えられる。
本解析例において、赤血球の分布を示すマップＭ１は、血小板の分布を示す分布線Ｃ１１よりも、左上に位置しており、マップＭ１と分布線Ｃ１１とが重なり合わない。これは、図８（ａ）を参照して説明したように、赤血球に含まれるヘモグロビンにより青レーザ光ＢＬが吸収され、青散乱光ＢＳの強度が赤散乱光ＲＳに比べて小さくなっているためと考えられる。一方、比較例において、赤血球の分布を示すマップＭ２は、血小板の分布を示す分布線Ｃ１２と、左右方向において同様の位置にあり、マップＭ２に分布線Ｃ１２が重なっている。
本解析例の場合、被検者から採取される血小板の体積が大きいと、この血小板は、分布
線Ｃ１１の延長線Ｃ１１ａに位置付けられることになる。しかしながら、延長線Ｃ１１ａはマップＭ１と交わらないため、この血小板はマップＭ１と重なることはない。このため、本解析例では、血小板の体積が大きい場合でも、赤血球と血小板を弁別する精度が高められる。一方、比較例の場合、被検者から採取される血小板の体積が大きいと、この血小板は、分布線Ｃ１２の延長線Ｃ１２ａに位置付けられることになる。この場合、延長線Ｃ１２ａはマップＭ２と交わるため、この血小板はマップＭ２と重なる惧れがある。このため、比較例では、血小板の体積が大きい場合、赤血球と血小板を弁別する精度が悪くなる惧れがある。
なお、血小板と白血球は、概ね同様の屈折率を有していると考えられ、ヘモグロビンを有しないという点でも同様の性質を有している。このため、白血球から生じる前方散乱光信号も、概ね分布線Ｃ１１、Ｃ１２上に位置すると考えられる。なお、白血球は血小板に比べて大きいため、白血球は血小板よりも、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの値が大きい領域に位置付けられる。本解析例では、白血球がマップＭ１と重なりにくいため、赤血球と白血球を弁別する精度が高められる。一方、比較例では、白血球がマップＭ２と重なりやすいため、赤血球と白血球を弁別する精度が悪くなる惧れがある。
よって、本解析例のように青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬを用いると、図８（ｂ）に示すように、赤血球と、赤血球以外の血球（血小板や白血球）とを精度良く弁別することが可能になる。
図８（ｄ）は、本解析例において、実際の測定試料から得られる赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳに基づくスキャッタグラムを示す図である。縦軸と横軸は、それぞれ、フォトダイオード２０５から出力される赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの信号を示しており、各血球から得られた赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの信号をパラメータとして、各血球がスキャッタグラム上にプロットされている。
この場合、赤血球を示す点は領域Ａ１近傍に分布しており、血小板を示す点は、領域Ａ２近傍に分布しており、白血球を示す点は領域Ａ３近傍に分布している。また、赤血球が分布する領域Ａ１は、分布曲線Ｃ１上に位置しており、血小板が分布する領域Ａ２と白血球が分布する領域Ａ３は、分布曲線Ｃ２上に位置している。また、分布曲線Ｃ２は、図８（ｂ）に示す分布線Ｃ１１と延長線Ｃ１１ａに対応するものであり、分布曲線Ｃ１と分布曲線Ｃ２とは、互いに異なる角度で伸びているため、交わることがない。図８（ｄ）のように分布曲線Ｃ１と分布曲線Ｃ２とが互いに離れるのは、上記のように、赤血球がヘモグロビンを有しており、ヘモグロビンの吸収係数が波長によって大きく変わるためであると考えられる。
このように、実測値において、分布曲線Ｃ１上に位置する赤血球が分布する領域Ａ１と、分布曲線Ｃ２上に位置する赤血球以外の血球が分布する領域Ａ２、Ａ３が重なりにくいことが分かる。なお、赤散乱光ＲＳの信号を示す閾値Ｖ１は、後述するようにノイズを含む信号を除くために用いられる。
図９は、本解析例の血球分析装置１による解析処理を示すフローチャートである。
血球分析装置１が起動されると、まず、図７（ａ）、（ｂ）を参照して説明したように、赤散乱光ＲＳの検出タイミングと青散乱光ＢＳの検出タイミングの時間差に基づいて、時間差Δｔが取得される（Ｓ１１）。そして、取得された時間差Δｔは、測定ユニット２のメモリ２９２に記憶される。なお、時間差Δｔは、たとえば、フローセルＤ１に粒子濃度が低い精度管理用試料を流すことにより取得されても良く、あるいは、フローセルＤ１中に配置された温度を測るための検出器が検出する温度に基づいてデフォルト値を修正す
ることにより取得されても良い。
解析処理が開始されると、上述したように検体容器Ｔが測定ユニット２に取り込まれ、位置Ｐ３に位置付けられる。そして、測定ユニット２のＣＰＵ２９１は、ピアサ２４ａにより検体容器Ｔから検体を吸引し、試料調製部２５により吸引した検体から測定試料を調製する（Ｓ１２）。この場合の測定試料の調製は、赤血球を溶血する試薬や、白血球を染色する試薬等が混和されることなく行われる。
次に、ＣＰＵ２９１は、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬをフローセルＤ１に照射し、測定試料をフローセルＤ１に流す（Ｓ１３）。これにより、同一の血球から生じた２種類の前方散乱光（赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳ）が生じ、これら前方散乱光がフォトダイオード２０５により受光される。ＣＰＵ２９１は、フォトダイオード２０５から出力される２種類の前方散乱光信号に基づく前方散乱光データを取得する。そして、ＣＰＵ２９１は、経過時間のカウントを開始する（Ｓ１４）。
続いて、ＣＰＵ２９１は、赤散乱光ＲＳの信号が図８（ｄ）に示す閾値Ｖ１以下であるかを判定する（Ｓ１５）。なお、閾値Ｖ１は微小な値に設定されており、ノイズを含む信号を除くために用いられる。赤散乱光ＲＳの信号が閾値Ｖ１より大きいと（Ｓ１５：ＮＯ）、ＣＰＵ２９１は、上記時間差Δｔに基づいて、同一の血球から生じた２種類の前方散乱光データを互いに対応付けて、メモリ２９２に記憶する（Ｓ１６）。他方、赤散乱光ＲＳの信号が閾値Ｖ１以下であると（Ｓ１５：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、この場合の血球についての２種類の前方散乱光データを記憶せず、処理をＳ１７に進める。
こうして、所定時間が経過するまで、血球ごとにＳ１５、Ｓ１６の処理が繰り返し行われる（Ｓ１７）。所定時間が経過することにより測定が終了すると（Ｓ１７：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、メモリ２９２に記憶した前方散乱光データを、情報処理ユニット４に送信する（Ｓ１８）。
一方、情報処理ユニット４のＣＰＵ４０１は、測定ユニット２から前方散乱光データを受信すると（Ｓ２１：ＹＥＳ）、図８（ｄ）に示すようなスキャッタグラムを作成し、表示部４１に表示する（Ｓ２２）。続いて、ＣＰＵ４０１は、作成したスキャッタグラム上に領域Ａ１を設定する（Ｓ２３）。こうして、ＣＰＵ４０１は、スキャッタグラム上の領域Ａ１に含まれる点を測定試料に含まれる赤血球として区分し、領域Ａ１に含まれる点に基づいて赤血球の解析処理を行い（Ｓ２４）、解析結果を表示部４１に表示する（Ｓ２５）。
なお、Ｓ２３で設定される領域Ａ１は、あらかじめ決められた固定領域であっても良く、固定領域に基づいて微調整された領域であっても良い。ここで、領域Ａ１の境界は、たとえば、直線や曲線の数式により定義される。
また、ここでは、説明の便宜上、作成したスキャッタグラム上に領域Ａ１が設定され、このスキャッタグラム上の領域Ａ１に含まれる点が赤血球に対応する点として区分されたが、スキャッタグラムは、必ずしも図形またはグラフとして作成される必要はなく、領域Ａ１の設定と領域Ａ１に含まれる点の区分は、データ処理によって行われるようにしても良い。
以上、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、血球を、赤血球とその他の血球に良好に分類することができる。上記のように、赤血球は、波長により吸収係数が大きく変化するヘモグロビンを含むため、赤血球と他の血球では、赤散乱光ＲＳの強度と青散乱光ＢＳの強度が、大きく異なる。このため、図８（ｄ）のスキャッタグラ
ムに示すように、赤血球が分布する領域Ａ１と、血小板および白血球が分布する領域Ａ２、Ａ３とが大きく離れるようになる。赤血球は、図８（ｄ）のスキャッタグラム上に模式的に示した分布曲線Ｃ１に沿うように分布し、血小板と白血球は、分布曲線Ｃ２に沿うように分布する。上記のように、分布曲線Ｃ１と分布曲線Ｃ２との間には、大きな開きが生じ、且つ、分布曲線Ｃ１と分布曲線Ｃ２とが交差することもない。よって、横軸を青散乱光ＢＳの強度とし、縦軸を赤散乱光ＲＳの強度とするスキャッタグラムでは、図８（ｄ）に示すように、赤血球が分布する領域Ａ１と、血小板および白血球が分布する領域Ａ２、Ａ３とが大きく離れるようになる。したがって、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、血球を、赤血球とその他の血球に、良好に分類することができる。
このように、本解析例によれば、実施の形態に記載の血球分析装置１を用いることにより、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、簡易な工程により、良好に、測定試料に含まれる血球から、赤血球を弁別し計数することができる。また、測定試料に含まれる血球から、赤血球と血小板を分類することができる。さらに、測定試料に含まれる血球から、血小板を弁別し計数することもできる。
なお、本解析例によれば、図８（ｄ）に示すように、赤血球の他、血小板と白血球を弁別することが可能である。しかしながら、白血球の血球数は、赤血球と血小板の血球数に比べてかなり少ないため、本解析例により白血球を弁別して精度の高い解析結果を得ようとする場合には、測定時間を長くして、測定結果に含まれる白血球の数を高める必要がある。しかし、測定時間を長くすると、赤血球と血小板の血球数が多くなり過ぎ、赤血球と血小板の弁別が非効率となる。よって、本解析例は、測定時間を制限しながら、赤血球と血小板を効率的に弁別・分類する際に用いて好適なものである。白血球については、追って示す解析例２を用いることにより、効率的に、弁別・分類することが可能である。
また、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いる必要がないため、血液検体に試薬を混和する工程を省略することができる。よって、簡易な工程で良好に、血球を区分することができる。
また、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いる必要がないため、コストの削減を図ることができる。さらに、試薬の消費を削減でき、且つ、試薬を含む測定試料が廃棄されることを抑制できるため、環境に配慮した分析手法を実現することができる。
また、本解析例によれば、図７（ａ）、（ｂ）を参照して説明したように、同一血球から取得された赤散乱光ＲＳおよび青散乱光ＢＳに基づくデータが互いに対応づけられるため、血球の濃度が高く、各散乱光に基づくデータが混在する場合にも、解析処理を適正に行うことができる。
また、本実施の形態に係る光学検出器Ｄでは、図３（ｂ）に示すように、青レーザ光ＢＬの照射位置ＥＰ１と赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ２が流路Ｄ１５に平行な方向にずれているため、別途、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳとを分離する素子を配さなくとも、前方散乱光受光光学系Ｄ４の倍率を調整することにより、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳを、それぞれ、フォトダイオード２０５の受光面２０５ａ、２０５ｂに集光させることができる。同様に、側方散乱光受光光学系Ｄ５の倍率を調整することにより、青レーザ光ＢＬに基づく散乱光と赤レーザ光ＲＬに基づく散乱光を、それぞれ、フォトダイオードＤ５４の受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂに集光させることができる。
また、本実施の形態に係る光学検出器Ｄによれば、一つのフォトダイオード２０５に受光面２０５ａ、２０５ｂが配置されているため、光学検出器Ｄの構成を簡素にすることが
できる。同様に、一つのフォトダイオードＤ５４に受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂが配置されているため、光学検出器Ｄの構成を簡素にすることができる。
また、本実施の形態に係る光学検出器Ｄによれば、受光面２０５ａ、２０５ｂが同一平面上に配置されるため、フォトダイオード２０５の構成を簡素にすることができる。同様に、受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂが同一平面上に配置されるため、フォトダイオードＤ５４の構成を簡素にすることができる。
また、本実施の形態に係る光学検出器Ｄによれば、前方集光レンズ２０１が、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの２つの波長に対して色収差を補正する機能を備えているため、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを、受光面２０５ａ、２０５ｂ上に適正に照射することができる。同様に、側方集光レンズＤ５３も、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬに基づく２つの側方散乱光の波長に対して色収差を補正する機能を備えているため、これら２つの側方散乱光を、受光面Ｄ５４ａ、Ｄ５４ｂ上に適正に照射することができる。
＜解析例２＞
上記解析例１では、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを用いて、測定試料に含まれる血球から赤血球を弁別する処理について説明した。本解析例では、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを用いて、測定試料に含まれる血球から白血球を弁別し、白血球を３つの分類に区分する処理について説明する。なお、本解析例でも、上記解析例１と同様、測定試料の調製において、検体容器Ｔから吸引された検体には希釈液のみが混和され、染色剤や溶血剤等の試薬は混和されない。
上記のように、白血球はヘモグロビンを持たないため、白血球に対する赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの強度変化に寄与するパラメータは、粒径が支配的となる。すなわち、粒径が異なれば、図８（ｄ）のスキャッタグラムに模式的に示された分布曲線Ｃ２上における血球の分布位置が異なることとなる。本解析例では、かかる分布位置の差異に基づいて、白血球が、リンパ球、単球および顆粒球（好中球、好酸球、好塩基球）に区分される。
また、上記解析例１において説明したとおり、赤血球が分布する領域Ａ１（分布曲線Ｃ１）は、白血球を含む他の血球が分布する領域Ａ２、Ａ３（分布曲線Ｃ２）から大きく離れている。このため、白血球を分類および計数する際に、赤血球が分布する領域Ａ１に含まれるデータを処理対象から除外することが可能である。本解析例では、フォトダイオード２０５から出力される前方散乱光信号のうち、赤血球が分布する領域Ａ１に対応する前方散乱光信号については、前方散乱光データの取得が禁止され、これにより、処理負荷の軽減が図られる。
図１０（ａ）〜（ｃ）は、本解析例において、異なる被検者から採取された３つの血液検体に基づいて作成されたスキャッタグラムを示す図である。縦軸と横軸は、それぞれ、フォトダイオード２０５から出力される赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの信号を示している。なお、この場合の測定試料の調製では、赤血球の解析と同様の希釈液による希釈が行われ、この場合の測定試料の測定では、赤血球の解析を行う場合と同様の測定時間で測定が行われている。
本解析例では、青散乱光ＢＳの信号が所定の閾値Ｖ２以下である血球は、解析処理に用いられない。具体的には、フォトダイオード２０５から出力される青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下であると、この血球から取得された２種類の前方散乱光信号はメモリ２９２には記憶されない。これにより、図１０（ａ）〜（ｃ）に示すように、各検体に基づいて作成されるスキャッタグラムには、青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下である領域Ａ１０に、血球がプロットされなくなる。なお、閾値Ｖ２は、領域Ａ１０に、大部分の赤血球が
含まれる値に設定される。これにより、領域Ａ１０以外の領域に、大部分の白血球が含まれることになる。こうして、図１０（ａ）〜（ｃ）に示すように、領域Ａ１０に含まれる血球が除かれることにより、赤血球が分布する領域Ａ１も大きく除かれることになる。
図１０（ｄ）〜（ｆ）は、異なる被検者から採取された８つの血液検体に基づいて行われた白血球の分類結果を示す図である。図１０（ｄ）〜（ｆ）の縦軸と横軸は、ぞれぞれ、本解析例に基づく処理によって得られた結果と、染色剤や溶血剤等の試薬を用いて測定試料を調製する解析手法（比較手法）によって得られた結果を示している。
本解析例では、図１０（ａ）〜（ｃ）と同様に、閾値Ｖ２以下の血球が解析の対象から除外される。そして、領域Ａ３１〜Ａ３３内の血球数を、それぞれ、３つの分類（リンパ球、単球および顆粒球）の血球数として取得し、全体の血球数に占める各分類の血球数の比率を求める。図１０（ｄ）〜（ｆ）の縦軸には、それぞれ、本解析例におけるリンパ球と、単球と、顆粒球とが全体の血球数に占める比率（％）が示されている。一方、比較手法においても、この手法に従って白血球を３つの種類に分類し、全体の血球数に占める各分類の血球数の比率を求める。図１０（ｄ）〜（ｆ）の横軸には、それぞれ、この装置におけるリンパ球と、単球と、顆粒球とが全体の血球数に占める比率（％）が示されている。こうして、図１０（ｄ）〜（ｆ）には、本解析例による比率と比較手法による比率とをパラメータとして、それぞれ、８つの検体に対応する比率を示す点がプロットされる。
また、図１０（ｄ）〜（ｆ）には、それぞれ、８つの検体の比率を示す点の近似直線Ｌ１〜Ｌ３と、ｘ（横軸の値）とｙ（縦軸の値）からなる近似直線Ｌ１〜Ｌ３の式が示されている。また、図１０（ｄ）〜（ｆ）には、本解析例による結果と、比較手法による結果との相関係数Ｒ２の値が示されている。近似直線の傾きと相関係数の値は、何れも１に近づくほど、本解析例による結果と比較手法による結果との相関性が高くなる。
図１０（ｄ）〜（ｆ）に示すように、近似直線Ｌ１〜Ｌ３の傾きは、それぞれ、１．１７３５、０．９４３６、１．１８３であり、相関係数Ｒ２の値は、それぞれ、０．９３９７、０．４９４８、０．９１４９であるため、リンパ球と顆粒球では、本解析例の結果と比較手法の結果との相関性は、比較的高いことが分かる。このことから、本解析例によれば、リンパ球と顆粒球の結果は、染色剤や溶血剤等の試薬を用いて測定試料を調製する比較手法と、同程度の精度を有することが分かる。
なお、単球では、近似直線Ｌ２に対する各点の収束度合いがやや低いため、本解析例の結果と比較手法の結果との相関性は、やや低いことが分かる。しかしながら、本解析例の解析処理は、赤血球の解析手法（赤血球用の希釈と測定時間）に基づいて行われているため、本解析例の解析処理が、白血球の解析手法（白血球用の希釈と測定時間）に基づいて行われれば、本解析例と比較手法との相関性は高められる可能性がある。
図１１は、本解析例の血球分析装置１による解析処理を示すフローチャートである。図１１に示すフローチャートは、図９に示す上記解析例１のフローチャートにおいて、Ｓ１５の替わりにＳ１０１が追加され、Ｓ２３の替わりにＳ２０１が追加されている。
測定ユニット２のＣＰＵ２９１は、上記解析例１と同様にして、Ｓ１１〜Ｓ１４の処理を行う。続いて、ＣＰＵ２９１は、青散乱光ＢＳの信号が図１０（ａ）〜（ｃ）に示す閾値Ｖ２以下であるかを判定する（Ｓ１０１）。青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２より大きいと（Ｓ１０１：ＮＯ）、ＣＰＵ２９１は、上記時間差Δｔに基づいて、同一の血球から生じた２種類の前方散乱光データを互いに対応付けて、メモリ２９２に記憶する（Ｓ１６）。他方、青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下であると（Ｓ１０１：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、この血球についての２種類の前方散乱光データを記憶せず、処理をＳ１０２に進め
る。
こうして、所定時間が経過するまで、血球ごとにＳ２０１、Ｓ１６の処理が繰り返し行われる（Ｓ１７）。なお、この場合の所定時間は、赤血球よりも数段個数の少ない白血球をより多く検出するために、上記解析例１のＳ１７（図９参照）で設定される所定時間よりも長く設定される。所定時間が経過することにより測定が終了すると（Ｓ１７：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、メモリ２９２に記憶した前方散乱光データを、情報処理ユニット４に送信する（Ｓ１８）。
一方、情報処理ユニット４のＣＰＵ４０１は、測定ユニット２から前方散乱光データを受信すると（Ｓ２１：ＹＥＳ）、図１０（ａ）〜（ｃ）に示すようなスキャッタグラムを作成し、表示部４１に表示する（Ｓ２２）。続いて、ＣＰＵ４０１は、作成したスキャッタグラム上に領域Ａ３１〜Ａ３３（領域Ａ３）を設定する（Ｓ２０１）。こうして、ＣＰＵ４０１は、領域Ａ３１〜Ａ３３に含まれる点を測定試料に含まれるリンパ球、単球および顆粒球（好中球、好酸球、好塩基球）として区分し、領域Ａ３１〜Ａ３３に含まれる点に基づいて白血球の解析処理を行い（Ｓ２４）、解析結果を表示部４１に表示する（Ｓ２５）。
なお、Ｓ２０１で設定される領域Ａ３１〜Ａ３３は、あらかじめ決められた固定領域であっても良く、固定領域に基づいて微調整された領域であっても良い。ここで、領域Ａ３１〜Ａ３３の境界は、たとえば、直線や曲線の数式により定義される。
また、ここでは、説明の便宜上、作成したスキャッタグラム上に領域Ａ３１〜Ａ３３が設定され、このスキャッタグラム上の領域Ａ３１〜Ａ３３に含まれる点が、それぞれ、リンパ球、単球および顆粒球に対応する点として区分されたが、スキャッタグラムは、必ずしも図形またはグラフとして作成される必要はなく、領域Ａ３１〜Ａ３３の設定と領域Ａ３１〜Ａ３３に含まれる点の区分は、データ処理によって行われるようにしても良い。
以上、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、白血球を、リンパ球、単球および顆粒球（好中球、好酸球、好塩基球）に区分し計数することができる。また、図３（ａ）、（ｂ）に示す構成の光学検出器Ｄを用いることにより、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、簡易な工程により、良好に、測定試料に含まれる血球から、白血球を弁別し、白血球を３つの分類に区分し計数することができる。
また、本解析例によれば、青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下であると、この血球の前方散乱光データはメモリ２９２に記憶されない。これにより、白血球の解析処理に不要な前方散乱光データが記憶されないため、解析処理の負荷軽減を図りながら、効率的に、測定試料に含まれる血球から、白血球を弁別し計数することができる。
＜解析例３＞
上記解析例２では、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを用いて、測定試料に含まれる血球から白血球を弁別し、白血球を３つの分類に区分する処理について説明した。本解析例では、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳを用いて測定試料に含まれる血球から、赤血球を弁別する処理と、白血球を弁別し、白血球を３つの分類に区分する処理を、一つの測定試料を用いて同時に行う処理について説明する。なお、本解析例でも、上記解析例１、２と同様、測定試料の調製において、検体容器Ｔから吸引された検体には希釈液のみが混和され、染色剤や溶血剤等の試薬は混和されない。
図１２は、本解析例の血球分析装置１による解析処理を示すフローチャートである。図１２に示すフローチャートは、図１１に示す上記解析例２のフローチャートにおいて、Ｓ
１４、Ｓ１０１の間にＳ１１１〜Ｓ１１３が追加され、Ｓ２２、Ｓ２０１の替わりにＳ２１１〜Ｓ２１４が追加されている。
測定ユニット２のＣＰＵ２９１は、上記解析例１、２と同様にして、Ｓ１１〜Ｓ１４の処理を行う。続いて、ＣＰＵ２９１は、図９のＳ１５と同様、赤散乱光ＲＳの信号が図８（ｄ）に示す閾値Ｖ１以下であるかを判定する（Ｓ１１１）。赤散乱光ＲＳの信号が閾値Ｖ１より大きいと（Ｓ１１１：ＮＯ）、ＣＰＵ２９１は、図９のＳ１６と同様、上記時間差Δｔに基づいて、同一の血球から生じた２種類の前方散乱光データを互いに対応付けて、メモリ２９２に記憶する（Ｓ１１２）。他方、赤散乱光ＲＳの信号が閾値Ｖ１以下であると（Ｓ１１１：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、この場合の血球についての２種類の前方散乱光データを記憶せず、処理をＳ１０４に進める。
こうして、所定時間が経過するまで、血球ごとにＳ１１１、Ｓ１１２の処理が繰り返し行われる（Ｓ１１３）。所定の時間が経過すると（Ｓ１１３：ＹＥＳ）、処理がＳ１０１へ進められる。なお、フローセルＤ１への測定試料の供給は継続される。
次に、ＣＰＵ２９１は、上記解析例２と同様、青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下であるかを判定する（Ｓ１０１）。青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２より大きいと（Ｓ１０１：ＮＯ）、前方散乱光データをメモリ２９２に記憶し（Ｓ１６）、青散乱光ＢＳの信号が閾値Ｖ２以下であると（Ｓ１０１：ＹＥＳ）、この血球についての２種類の前方散乱光データを記憶しない。所定時間が経過することにより測定が終了すると（Ｓ１７：ＹＥＳ）、ＣＰＵ２９１は、Ｓ１１２においてメモリ２９２に記憶した前方散乱光データと、Ｓ１６においてメモリ２９２に記憶した前方散乱光データとを、情報処理ユニット４に送信する（Ｓ１８）。
一方、情報処理ユニット４のＣＰＵ４０１は、測定ユニット２から前方散乱光データを受信すると（Ｓ２１：ＹＥＳ）、Ｓ１１２で取得された前方散乱光データに基づいて、図８（ｄ）に示すようなスキャッタグラムを作成し、表示部４１に表示する（Ｓ２１１）。そして、ＣＰＵ４０１は、Ｓ２１１で作成したスキャッタグラム上に領域Ａ１を設定する（Ｓ２１２）。続いて、ＣＰＵ４０１は、Ｓ１６で取得された前方散乱光データに基づいて、図１０（ａ）〜（ｃ）に示すようなスキャッタグラムを作成し、表示部４１に表示する（Ｓ２１３）。そして、ＣＰＵ４０１は、Ｓ２１３で作成したスキャッタグラム上に領域Ａ３１〜Ａ３３（領域Ａ３）を設定する（Ｓ２１４）。
次に、ＣＰＵ４０１は、Ｓ２１１で作成したスキャッタグラムとＳ２１２で設定した領域Ａ１に基づいて、上記解析例１と同様にして、赤血球の解析処理を行い、Ｓ２１３で作成したスキャッタグラムとＳ２１４で設定した領域Ａ３１〜Ａ３３に基づいて、上記解析例２と同様にして、白血球の解析処理を行う（Ｓ２４）。そして、ＣＰＵ４０１は、解析結果を表示部４１に表示する（Ｓ２５）。
以上、本解析例によれば、染色剤や溶血剤等の試薬を用いることなく、測定試料に含まれる血球から、赤血球を弁別することができ、且つ、白血球を弁別し、白血球を、リンパ球、単球および顆粒球（好中球、好酸球、好塩基球）に区分し計数することができる。
また、本解析例によれば、１回の測定工程において、白血球の弁別に必要な前方散乱光データと、赤血球の弁別に必要な前方散乱光データの両方を取得することができる。これにより、同一の測定試料を用いて、白血球の弁別と、白血球以外の他の血球（赤血球）の弁別とを行うことができるため、白血球の弁別と、白血球以外の他の血球の弁別とを行うために、個別に測定試料の調製を行う必要がなくなる。
＜光照射ユニット＞
上記実施の形態では、図４（ａ）に示すように、流路Ｄ１５における照射位置がＹ軸方向にずれるように、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬがフローセルＤ１に照射される。この場合、赤レーザ光ＲＬの光軸を基準として、青レーザ光ＢＬの照射位置が調整される。すなわち、赤レーザ光ＲＬの強度ピーク位置を流路Ｄ１５の中央に位置付けた後、青レーザ光ＢＬの強度ピーク位置が流路Ｄ１５の中央となるように、青レーザ光ＢＬの照射位置が調整される。したがって、青レーザ光の照射位置は、Ｙ軸方向のみならず、Ｘ軸方向にも調整される必要がある。
以下、このように青レーザ光の照射位置をＸ軸方向とＹ軸方向に調整可能な光照射ユニットＵＤの構成について説明する。
図１３は、光照射ユニットＵＤの構成例を示す分解斜視図である。光照射ユニットＵＤは、図３（ａ）に示す光照射光学系Ｄ３をユニット化したものである。
図１３に示すように、光照射ユニットＵＤは、ベース１１と、赤光源ユニット１２と、青光源ユニット１３と、ダイクロイックミラーユニット１４と、集光レンズユニット１５を備えている。
ベース１１は、略立法体形状の中空の部材からなっている、ベース１１の上面には一段低い段部１１１が形成され、さらに、この段部１１１に２つのネジ孔１１１ａ、１１１ｂと、内部に連通する開口１１１ｃが形成されている。段部１１１の底面は、Ｘ−Ｚ平面に並行となっている。また、ベース１１のＸ軸正側の側面には、Ｘ軸負方向に凹んだ凹部１１２が形成されている。凹部１１２のＸ軸負側の面（底面）は、Ｙ−Ｚ平面に平行となっており、凹部１１２のＸ軸正負側の各面（壁面）は、それぞれ、Ｘ−Ｙ平面に平行となっている。凹部１１２の底面には、円形の開口１１２ａが形成されている。また、凹部１１２のＺ軸負側の壁面には、ベース１１のＺ軸負側の側面へと貫通するネジ孔１１２ｂが設けられている。さらに、凹部１１２のＺ軸正側の壁面には、ベース１１のＺ軸正側の側面へと貫通する円形の孔１１２ｃ、１１２ｄ（図１３には図示せず、図１６（ｃ）参照）が設けられている。さらに、ベース１１のＺ軸負側の側面には、内部に連通する円形の開口１１３が形成されている。また、ベース１１のＺ軸正側の側面にも、内部に連通する円形の開口１１４（図１３には図示せず、図１４（ｂ）参照）が形成されている。
赤光源ユニット１２は、図３に示す半導体レーザ１０１およびコリメータレンズ１０２と、これらを収容するカバー１２１を備えている。
青光源ユニット１３は、図３に示す半導体レーザ１０３およびコリメータレンズ１０４と、これらを支持する板状の支持体１３１と、半導体レーザ１０３およびコリメータレンズ１０４を収容するカバー１３２を備えている。半導体レーザ１０３とコリメータレンズ１０４は、ホルダー１３３に保持され、このホルダー１３３が支持体１３１に装着される。支持体１３１には、略中央位置に開口１３１ａが設けられ、Ｚ軸負側の側面に円形の孔１３１ｂが形成されている。また、支持体１３１のＺ軸正側の側面には、２つのネジ孔１３１ｃ、１３１ｄ（図１３には図示せず、図１６（ｂ）参照）が形成されている。
ダイクロイックミラーユニット１４は、ダイクロイックミラー１０５と、ダイクロイックミラー１０５を支持する支持体１４１とを備えている。ダイクロイックミラー１０５は、キュービック形状を有しており、内部に、赤レーザ光ＲＬを透過し青レーザ光ＢＬを反射するミラー面が設けられている。支持体１４１は、板状の部材の下面に直方体形状の台座１４１ａが一体形成された構成となっている。この台座１４１ａにキュービック形状のダイクロイックミラー１０５が装着される。また、支持体１４１には、ベース１１上面に
設けられた２つのネジ孔１１１ａ、１１１ｂにそれぞれ対応する位置に、孔１４１ｂ、１４１ｃが設けられている。
集光レンズユニット１５は、図３に示すシリンドリカルレンズ１０６およびコンデンサレンズ１０７と、これらを保持するホルダー１５１を備えている。
光照射ユニットＵＤは、赤光源ユニット１２と、青光源ユニット１３と、ダイクロイックミラーユニット１４と、集光レンズユニット１５が、それぞれ、ベース１１の対応する側面に装着されることにより、組み立てられる。
図１４（ａ）は、組立後の光照射ユニットＵＤを示す斜視図、図１４（ｂ）は、組立後の光照射ユニットＵＤの主たる構成を模式的に示す断面図である。図１４（ｂ）には、Ｘ−Ｚ平面に平行な平面によって光照射ユニットＵＤの中央付近を切断したときの断面が模式的に示されており、便宜上、ダイクロイックミラーユニット１４の支持体１４１とダイクロイックミラー１０５が併せて示されている。
図１４（ｂ）を参照して、半導体レーザ１０１とコリメータレンズ１０２は、ホルダー１２２に保持され、このホルダー１２２がベース１１に装着されることにより、ベース１１に支持される。ホルダー１２２は、円筒部分と、この円筒部分よりも径が大きい鍔部分を有しており、円筒部分がベース１１の開口１１３に嵌め込まれた状態で、鍔部分がベース１１にネジ留めされる。これにより、ベース１１にホルダー１２２が装着される。こうしてベース１１にホルダー１２２が装着された後、カバー１２１（図１４（ａ）参照）がホルダー１２２に装着される。
シリンドリカルレンズ１０６とコンデンサレンズ１０７は、ホルダー１５１に保持され、このホルダー１５１がベース１１に装着されることにより、ベース１１に支持される。ホルダー１５１は、円筒部分と、この円筒部分よりも幅が広い鍔部分を有しており、円筒部分がベース１１の開口１１４に嵌め込まれた状態で、鍔部分がベース１１にネジ留めされる。こうして、ベース１１にホルダー１５１が装着される。
半導体レーザ１０３とコリメータレンズ１０４は、ホルダー１３３に保持され、このホルダー１３３が支持体１３１に装着される。さらに、支持体１３１にカバー１３２（図１４（ａ）参照）が装着される。そして、支持体１３１が、ベース１１の凹部１１２に挿入され、ベース１１に組み付けられる。ここで、支持体１３１は、回転軸ＲＡ１の回りに回動可能にベース１１に組み付けられる。支持体１３１の組み付け方法については、追って、図１６（ａ）〜（ｃ）を参照して説明する。
図１４（ａ）を参照して、ダイクロイックミラーユニット１４は、スプリングワッシャー１４２と留めネジ１４３によってベース１１上面の段部１１１に装着される。より詳細には、図１３に示す台座１４１ａとダイクロイックミラー１０５がベース１１上面の開口１１１ｃに挿入され、支持体１４１が段部１１１の上面に載置される。そして、支持体１４１の孔１４１ｂ、１４１ｃが、それぞれ、ベース１１側のネジ孔１１１ａ、１１１ｂに合わされる。この状態で、スプリングワッシャー１４２を介して留めネジ１４３が一方のネジ孔１１１ａにネジ留めされ、さらに、スプリングワッシャー１４２を介して留めネジ１４３が他方のネジ孔１１１ａにネジ留めされる。こうして、ダイクロイックミラーユニット１４がベース１１に組み付けられる。なお、２つのスプリングワッシャー１４２と支持体１４１上面との間には、さらに、ワッシャー（図示せず）が挿入されている。
ダイクロイックミラーユニット１４をベース１１に組み付ける際、２つの留めネジ１４３は緩くネジ留めされる。図１３に示すように、支持体１４１に設けられた２つの孔１４
１ｂ、１４１ｃのうち、孔１４１ｃは、孔１４１ｂに比べて径が大きくなっている。一方、図１４（ａ）に示す２つの留めネジ１４３のネジ部分の径は、図１３に示す孔１４１ｂの径と略同じである。このため、２つの留めネジ１４３が緩くネジ留めされると、支持体１４１は、孔１４１ｂの中心を通る回転軸ＲＡ１の周りに、所定の角度範囲だけ回動可能となる。
図１５（ａ）は、光照射ユニットＵＤを位置調整機構ＰＡに設置する前の状態を示す斜視図、図１５（ｂ）は、光照射ユニットＵＤを位置調整機構ＰＡに設置した状態を示す斜視図である。
図１５（ａ）を参照して、位置調整機構ＰＡは、第１調整板１６１と、２つの板バネ１６２と、第２調整板１７１と、２つの板バネ１７２とを備えている。
第１調整板１６１は、薄板状の部材からなっており、平面視において、正方形の一部が切欠かれた輪郭を有している。第１調整板１６１には、Ｘ軸方向に延びる長孔１６１ａと、同じくＸ軸方向に延びる切欠き１６１ｂが形成され、さらに、Ｘ軸負側の端部に、Ｙ軸正方向に突出しＺ軸方向に延びる２つの壁部１６１ｃ、１６１ｄが形成されている。さらに、第１調整板１６１には、２つのネジ孔１６１ｅ、１６１ｆが形成されている。第２調整板１７１は、薄板状の部材からなっており、平面視において、長方形の一部が切欠かれた輪郭を有している。第２調整板１７１には、長孔１６１ａに対応する位置に開口１７１ａが設けられ、さらに、ネジ孔１６１ｅ、１６１ｆに対応する位置に、それぞれ、Ｚ軸方向に延びる長孔１７１ｂと、同じくＺ軸方向に延びる切欠き１７１ｃが形成されている。
第１調整板１６１は、血球分析装置１内に配された支持基板（図示せず）に装着される。より詳細には、当該支持基板に設けられＸ軸方向に延びる壁面（図示せず）に、第１調整板１６１のＺ軸正側の端部が押し当てられる。この状態で、図１５（ｂ）に示すように、スプリングワッシャー１６３を介して留めネジ１６４が長孔１６１ａに挿入され、さらに、スプリングワッシャー１６３を介して留めネジ１６４が切欠き１６１ｂに挿入される。このとき、スプリングワッシャー１６３と第１調整板１６１上面との間にワッシャー（図示せず）が挿入される。２つの留めネジ１６４は、それぞれ、支持基板に設けられたネジ孔（図示せず）に嵌められ、このネジ孔に留めネジ１６４を留めることにより、第１調整板１６１が支持基板に組み付けられる。さらに、第１調整板１６１のＺ軸負側の端部を押さえるように２つの板バネ１６２が支持基板に取り付けられる。これら板バネ１６２により、第１調整板１６１は、Ｙ軸負方向に押さえられ、さらにＺ軸正方向にも押さえられる。
こうして第１調整板１６１が支持基板に取り付けられた後、第２調整板１７１が第１調整板１６１の上面に装着される。すなわち、第１調整板１６１の壁部１６１ｃ、１６１ｄの内壁面に、第２調整板１７１のＸ軸負側の端部が押し当てられる。この状態で、図１５（ｂ）に示すように、スプリングワッシャー１７３を介して留めネジ１７４が長孔１７１ｃに挿入され、さらに、スプリングワッシャー１７３を介して留めネジ１７４が切欠き１７１ｂに挿入される。このとき、スプリングワッシャー１７３と第２調整板１７１上面との間にワッシャー（図示せず）が挿入される。２つの留めネジ１７４は、それぞれ、第１調整板１６１に設けられたネジ孔１６１ｅ、１６１ｆに嵌められ、これらネジ孔１６１ｅ、１６１ｆに留めネジ１７４を留めることにより、第２調整板１７１が第１調整板１６１に組み付けられる。さらに、第２調整板１７１のＸ軸正側の端部を押さえるように２つの板バネ１７２が第１調整板１６１に取り付けられる。これら板バネ１７２により、第２調整板１７１は、Ｙ軸負方向に押さえられ、さらにＸ軸負方向にも押さえられる。
こうして第２調整板１７１が第１調整板１６１上面に取り付けられた後、光照射ユニッ
トＵＤが第２調整板１７１上面に装着される。これにより、図１５（ｂ）に示す状態となる。
なお、図１５（ｂ）の状態では、留めネジ１６４が緩くネジ留めされている。このため、第１調整板１６１は、Ｚ軸正側の端部が支持基板の壁面（図示せず）に摺接しながら、Ｘ軸方向に移動可能となっている。同様に、留めネジ１７４が緩くネジ留めされ、これにより、第２調整板１７１は、Ｘ軸負側の端部が第１調整板１６１の壁部１６１ｃ、１６１ｄの内壁面に摺接しながら、Ｚ軸方向に移動可能となっている。
こうして、光照射ユニットＵＤが第２調整板１７１に取り付けられた後、フローセルＤ１の流路Ｄ１５に対する赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬの位置調整が行われる。ここでは、まず、半導体レーザ１０１を点灯させて、赤レーザ光ＲＬの位置調整が行われる。具体的には、赤レーザ光ＲＬがフローセルＤ１の流路Ｄ１５に合焦するように、第１調整板１６１のＺ軸方向の位置を調整する。そして、赤レーザ光ＲＬの強度ピーク位置が流路Ｄ１５の中央に位置付けられるように、第２調整板１７１のＸ軸方向の位置を調整する。こうして、第１調整板１６１と第２調整板１７１の位置調整が完了した後、留めネジ１６４を締め付けて第１調整板１６１を支持基板に固定し、さらに、留めネジ１７４を締め付けて第２調整板１７１を第１調整板１６１に固定する。これにより、赤レーザ光ＲＬの位置調整が完了する。その後、半導体レーザ１０３を点灯させて、青レーザ光ＢＬの位置調整が行われる。
図１６（ａ）は、光照射ユニットＵＤを位置調整機構ＰＡに設置した状態を青光源ユニット１３側から見た斜視図、図１６（ｂ）は、図１６（ａ）の状態から青光源ユニット１３を取り外した状態を示す斜視図、図１６（ｃ）は、ベース１１の凹部１１２付近を示す斜視図である。
図１６（ｂ）を参照して、青光源ユニット１３は、支持体１３１が凹部１１２に挿入された後、留めネジ１３５、１３６によってベース１１に装着される。このとき、支持体１３１のＺ軸正側の面に設けられた２つのネジ孔１３１ｃ、１３１ｄが、それぞれ、ベース１１側の孔１１２ｃ、１１２ｄ（図１６（ｃ）参照）に合わされ、また、支持体１３１のＺ軸負側の面に設けられた孔１３１ｂ（図１３参照）が、ベース１１側のネジ孔１１２ｂ（図１６（ｃ）参照）に合わされる。そして、２つの留めネジ１３５が、それぞれ、孔１１２ｃ、１１２ｄに通されて、支持体１３１側のネジ孔１３１ｃ、１３１ｄに留められ、さらに、留めネジ１３６が、ネジ孔１１２ｂに通されて、支持体１３１側の孔１３１ｂに挿入される。
留めネジ１３５とベース１１のＺ軸正側の側面との間には、Ｚ軸負側から順に、スプリングワッシャー１３４、ワッシャー（図示せず）が介在している。また、Ｙ軸負側の留めネジ１３５と留めネジ１３６は、Ｚ軸方向に直線状に並ぶように配置される。支持体１３１側の孔１３１ｂの径は、留めネジ１３６のネジ部分の径と略同じである。また、図１６（ｃ）に示すように、ベース１１の上側の孔１１２ｃの径は、下側の孔１１２ｄの径よりも大きい。ここで、下側の孔１１２ｄの径は留めネジ１３５のネジ部分の径と略同じである。したがって、２つの留めネジ１３５を緩く締めると、青光源ユニット１３は、図１６（ｃ）の回転軸ＲＡ１の周りに所定の角度範囲だけ回動可能となる。
フローセルＤ１の流路Ｄ１５に対する青レーザ光ＢＬの位置調整は、このように２つの留めネジ１３５が緩く留められた状態で行われる。なお、この場合、上記のように、ダイクロイックミラーユニット１４の留めネジ１４３も緩く留められており、支持体１４１とダイクロイックミラー１０５（図１３参照）が、回転軸ＲＡ２の周りに回動可能となっている。
図１７（ａ）、（ｂ）は、光照射ユニットＵＤにおける青レーザ光ＢＬのＹ軸方向の位置調整方法を示す図、図１７（ｃ）、（ｄ）は、光照射ユニットＵＤにおける青レーザ光ＢＬのＸ軸方向の位置調整方法を示す図である。
図１７（ａ）を参照して、青光源ユニット１３を回転軸ＲＡ１の周りに回転させると、ダイクロイックミラーユニット１４のダイクロイックミラー１０５に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｘ−Ｙ平面に平行な方向に回動する。これにより、集光レンズユニット１５のコンデンサレンズ１０７に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｙ−Ｚ平面に平行な方向に回動し、図１７（ｂ）に示すように、フローセルＤ１に対する青レーザ光ＢＬの照射位置が流路Ｄ１５に平行な方向（Ｙ軸方向）に変位する。
図１７（ｃ）を参照して、ダイクロイックミラーユニット１４を回転軸ＲＡ２の周りに回転させると、ダイクロイックミラー１０５により反射される青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｘ−Ｚ平面に平行な方向に回動する。これにより、集光レンズユニット１５のコンデンサレンズ１０７に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｘ−Ｚ平面に平行な方向に回動し、図１７（ｄ）に示すように、フローセルＤ１に対する青レーザ光ＢＬの照射位置が流路Ｄ１５に垂直な方向（Ｘ軸方向）に変位する。
青レーザ光ＢＬの位置調整時には、青レーザ光ＢＬの照射位置が赤レーザ光ＲＬの照射位置から所定距離だけＹ軸方向に離れるように、青光源ユニット１３の回転位置を調整し、さらに、青レーザ光ＢＬの強度ピーク位置が流路Ｄ１５の中央に位置付けられるように、ダイクロイックミラーユニット１４の回転位置を調整する。こうして、青光源ユニット１３とダイクロイックミラーユニット１４の位置調整が完了した後、２つの留めネジ１３５を締め付けて青光源ユニット１３をベース１１に固定し、さらに、２つの留めネジ１４３を締め付けてダイクロイックミラーユニット１４をベース１１に固定する。これにより、青レーザ光ＢＬの位置調整が完了する。
本構成例によれば、青光源ユニット１３とダイクロイックミラーユニット１４を、それぞれ、独立して回動させることにより、青レーザ光ＢＬの照射位置の調整を行うことができる。よって、青レーザ光ＢＬの照射位置の調整作業を簡易なものとすることができる。また、青光源ユニット１３とダイクロイックミラーユニット１４を、それぞれ、独立して回動させるものであるため、各ユニットに対する回動機構を簡素にでき、光照射ユニットＵＤの小型化および簡素化を図ることができる。さらに、立方体形状のベース１１の各側面に、赤光源ユニット１２、青光源ユニット１３、ダイクロイックミラーユニット１４および集光レンズユニット１５を装着するものであるため、光照射ユニットＵＤのコンパクト化を図ることができる。
なお、上記構成例では、青光源ユニット１３がＺ軸に平行な回転軸（流路Ｄ１５に垂直な回転軸）ＲＡ１の周りに回動され、ダイクロイックミラーユニット１４がＹ軸方向に平行な回転軸（流路Ｄ１５に平行な回転軸）ＲＡ２の周りに回動されたが、光照射ユニットＵＤの構成は、これに限定されるものではない。たとえば、青光源ユニット１３をＹ軸方向に平行な回転軸（流路Ｄ１５に平行な回転軸）の周りに回動させ、ダイクロイックミラーユニット１４をＺ軸に平行な回転軸（流路Ｄ１５に垂直な回転軸）の周りに回動させても良い。
図１８（ａ）は、変更例に係る組立後の光照射ユニットＵＤの主たる構成を模式的に示す図である。
本変更例では、ベース１１のＸ軸負側の面に段部１１１が形成され、この段部１１１に
、支持体１４１が載置される。ベース１１に対する支持体１４１の取り付け方法は、上記構成例と同様である。これにより、ダイクロイックミラーユニット１４は、Ｘ軸に平行な回転軸ＲＡ２の周りを所定の角度範囲だけ回動可能となる。また、青光源ユニット１３は、回転軸ＲＡ１がＹ軸に平行となるように、ベース１１に取り付けられる。この場合、凹部１１２はＸ軸正負の方向に内壁面が生じるように形成され、支持体１３１はＹ軸方向にネジ留めされる。
この変更例では、青光源ユニット１３を回転軸ＲＡ１の周りに回動させると、ダイクロイックミラー１０５に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｘ−Ｚ平面に平行な方向に回動する。これにより、集光レンズユニット１５のコンデンサレンズ１０７に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｘ−Ｚ平面に平行な方向に回動し、図１８（ｃ）に示すように、フローセルＤ１に対する青レーザ光ＢＬの照射位置が流路Ｄ１５に垂直な方向（Ｘ軸方向）に変位する。
また、ダイクロイックミラーユニット１４を回転軸ＲＡ２の周りに回転させると、ダイクロイックミラー１０５により反射される青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｙ−Ｚ平面に平行な方向に回動する。これにより、集光レンズユニット１５のコンデンサレンズ１０７に入射する青レーザ光ＢＬの光軸が、Ｙ−Ｚ平面に平行な方向に回動し、図１８（ｂ）に示すように、フローセルＤ１に対する青レーザ光ＢＬの照射位置が流路Ｄ１５に平行な方向（Ｙ軸方向）に変位する。
この変更例においても、青光源ユニット１３とダイクロイックミラーユニット１４を、それぞれ、独立して回動させることにより、青レーザ光ＢＬの照射位置の調整を行うことができる。よって、上記構成例と同様の効果が奏され得る。なお、この変更例においても、青光源ユニット１３およびダイクロイックミラーユニット１４の位置調整が完了した後、対応する留めネジが締め付けられ、青光源ユニット１３およびダイクロイックミラーユニット１４がベース１１に固定される。
なお、上記構成例および本変更例では、赤レーザ光ＲＬがダイクロイックミラー１０５を透過し、青レーザ光ＢＬがダイクロイックミラー１０５により反射されるように光照射光学系Ｄ３が構成されたが、青レーザ光ＢＬがダイクロイックミラー１０５を透過し、赤レーザ光ＲＬがダイクロイックミラー１０５により反射されるように光照射光学系Ｄ３が構成されても良い。この場合、青レーザ光ＢＬの位置調整は、図１５（ａ）、（ｂ）に示す位置調整機構ＰＡによって行われ、赤レーザ光ＲＬの位置調整が、赤光源ユニット１２の回動とダイクロイックミラーユニット１４の回動によって行われる。
＜変更例＞
以上、本発明の実施の形態および解析例について説明したが、本発明の実施形態はこれらに限定されるものではない。
たとえば、上記実施の形態では、血液が測定対象とされたが、尿が測定対象であっても良い。すなわち、本発明は、血液や尿等の生体試料中の粒子を測定する装置に適用可能である。
また、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学系では、前方集光レンズ２０１が、アクロマティックレンズとされ、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの２つの波長に対して色収差が補正された。しかしながら、前方集光レンズ２０１が、色収差補正機能を有さない通常の集光レンズからなっていても良い。また、アクロマティックレンズに替えて回折レンズを用いてもよい。
この場合、図１９（ａ）に模式的に示すように、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの収束位置がＺ軸方向にずれる。このため、図１９（ａ）の構成では、青散乱光ＢＳ用のピンホール２０６と赤散乱光ＲＳ用のピンホール２０７が、それぞれ、青散乱光ＢＳの収束位置と赤散乱光ＲＳの収束位置に配置され、さらに、青散乱光ＢＳ用のフォトダイオード２０８と、赤散乱光ＲＳ用のフォトダイオード２０９が、それぞれ、ピンホール２０６、２０７のＺ軸正側に配置されている。青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳは、それぞれ、受光面２０８ａ、２０９ａへと導かれる。
なお、赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの収束位置のずれが小さい場合には、径が互いに異なる２つの孔が形成された一つのピンホールを用いても良い。この場合、各孔の径は、ピンホールの配置位置における赤散乱光ＲＳおよび青散乱光ＢＳのビーム径に応じて設定される。赤散乱光ＲＳと青散乱光ＢＳの収束位置のずれが小さい場合は、広さが互いに異なる２つの受光面を有する一つのフォトダイオードを用いても良い。この場合、各受光面の広さは、各受光面の配置位置における赤散乱光ＲＳおよび青散乱光ＢＳのビームサイズに応じて設定される。この場合、２つの受光面は、必ずしも同一平面上に無くても良く、Ｚ軸方向にずれていても良い。また、２つの受光面がＺ軸方向に互いにずれている場合、これら受光面の広さは必ずしも相違していなくとも良く、同じ広さであっても良い。
また、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学系では、ダイクロイックミラー１０５を傾けることにより、青レーザ光ＢＬの照射位置ＥＰ１と赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ２が流路Ｄ１５に平行な方向（Ｙ軸方向）にずらされた。しかしながら、ダイクロイックミラー１０５を経由した後の青レーザ光ＢＬの中心軸（光軸）と赤レーザ光ＲＬの中心軸（光軸）とが互いに一致するようダイクロイックミラー１０５を配置し、青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬを、流路Ｄ１５上の同じ照射位置ＥＰ０に照射しても良い。
この場合、たとえば、図１９（ｂ）に模式的に示すように、青散乱光ＢＳの光路と赤散乱光ＲＳの光路を分離するための分光素子２１０が、前方散乱光受光光学系Ｄ４に配置される。分光素子２１０は、入射面と出射面が互いに平行な透明部材であり、ガラス等の材料からなっている。図１９（ｂ）に示すように分光素子２１０をＹ−Ｚ平面に平行な方向に傾けることにより、青散乱光ＢＳの光路を、赤散乱光ＲＳの光路に対してＹ軸負側にずらすことができる。これにより、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳを、それぞれ、受光面２０５ａ、２０５ｂへと導くことができる。なお、分光素子２１０に代えて、波長選択性の回折格子を用いることにより、青散乱光ＢＳの光路と赤散乱光ＲＳの光路を分離しても良い。
また、青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬが流路Ｄ１５上の同じ照射位置ＥＰ０に照射される場合、図１９（ｂ）に示す分光素子２１０に代えて、図１９（ｃ）に示すダイクロイックミラー２１１が、前方散乱光受光光学系Ｄ４に配置されても良い。ダイクロイックミラー２１１は、青散乱光ＢＳを反射し、赤散乱光ＲＳを透過する。この構成では、青散乱光ＢＳ用のピンホール２１２が青散乱光ＢＳの収束位置に配置され、さらに、その後段に、青散乱光ＢＳ用のフォトダイオード２１３が配置される。また、赤散乱光ＲＳ用のピンホール２１４が赤散乱光ＲＳの収束位置に配置され、さらに、その後段に、赤散乱光ＲＳ用のフォトダイオード２１５が配置される。これにより、青散乱光ＢＳと赤散乱光ＲＳを、それぞれ、受光面２１３ａ、２１５ａへと導くことができる。
なお、図１９（ａ）〜（ｃ）の構成例においても、図１３〜図１８に示す光照射ユニットＵＤを用いることができる。
また、本発明の実施の形態では、図１３〜図１８に示す光照射ユニットＵＤを用いて複数の光源の照射位置をずらすよう調整し、それぞれの光源により生じる前方散乱光を取得
したが、これに限定されるものではない。たとえば、異なる複数の光源により蛍光信号を取得する場合であっても、複数の光源の照射位置をずらす必要があれば、光照射ユニットＵＤを用いることで簡易に照射位置を調整することが可能となる。
また、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学系では、赤レーザ光ＲＬを出射する半導体レーザ１０１と青レーザ光ＢＬを出射する半導体レーザ１０３が個別に配置されたが、たとえば、半導体レーザ１０１が、２つの発光部（光源）を備え、各発光部から、それぞれ、Ｚ軸方向に、赤レーザ光ＲＬと青レーザ光ＢＬを出射する構成であっても良い。この場合、図３（ａ）、（ｂ）に示す光学系から、半導体レーザ１０３と、コリメータレンズ１０４と、ダイクロイックミラー１０５が省略される。また、コリメータレンズ１０２は、赤レーザ光ＲＬの波長と青レーザ光ＢＬの波長に対して、色収差補正機能を有する。さらに、２つの発光部は、Ｙ軸方向にずれるように、半導体レーザ１０１に配置される。
この場合、流路Ｄ１５上における青レーザ光ＢＬと赤レーザ光ＲＬの照射位置ＥＰ１、ＥＰ２の間隔は、２つの発光部の間隔と、光照射光学系Ｄ３の倍率によって決まる。したがって、半導体レーザ１０３に装備される２つの発光部の間隔は、照射位置ＥＰ１、ＥＰ２の間隔が所望の値となるように設定される。
また、上記実施の形態に係る光学検出器Ｄでは、フローセルＤ１から前方（Ｚ軸正方向）に出射された各波長の光の前方散乱光（赤散乱光ＲＳ、青散乱光ＢＳ）を用いて、血球の分類が行われた。しかしながら、これに限らず、フローセルＤ１から側方（Ｘ軸正方向）に出射された各波長の光の側方散乱光を用いて、血球の分類が行われても良い。
また、フローセルＤ１に照射される２つの光の波長も上記に記載された波長に限られず、ヘモグロビンの吸収係数がそれぞれ異なるように波長を適宜選択してもよい。たとえば、青レーザ光ＢＬと同様に赤血球の吸収度合いの高い黄レーザ光（出射波長５５０〜６００ｎｍ）を青レーザ光ＢＬに替えて用いてもよい。さらに、散乱光の特性が血球毎に異なるのであれば、他の波長が用いられても良い。ただし、青レーザ光ＢＬの波長を上記実施の形態に示された波長に設定することにより、上記のように、各血球の分布をより明確に区分し、各血球を計数することができる。
また、解析例１では、赤散乱光ＲＳの強度に対してのみ閾値Ｖ１が設定され、前方散乱光データの取得が制限されたが、さらに青散乱光ＢＳの強度に対しても閾値を設定して前方散乱光データの取得が制限されても良い。また、解析例２では、青散乱光ＢＳの強度に対してのみ閾値Ｖ２が設定され、前方散乱光データの取得が制限されたが、さらに赤散乱光ＲＳの強度に対しても閾値を設定して前方散乱光データの取得が制限されても良い。
また、上記解析例１〜３では、表示部４１にスキャッタグラムが表示されたが、スキャッタグラムは必ずしも表示されなくても良い。ただし、スキャッタグラムが表示された方が、各血球の分離具合を視覚により確認できるため、解析結果の評価を円滑に行うことができる。
また、上記実施の形態では、第１試薬と第２試薬が混和されない測定試料だけでなく、これら試薬が混和された測定試料に対しても測定可能なように、血球分析装置１が構成された。しかしながら、血球分析装置１は、必ずしも、第１試薬と第２試薬が混和された測定試料を処理するための構成を備えずとも良く、たとえば、上記解析例１〜３に従って、第１試薬と第２試薬が混和されない測定試料のみを測定可能なように、血球分析装置１が構成されても良い。この場合、図２に示す測定ユニット２から、第１試薬を収容する容器２５１と、第２試薬を収容する容器２５２が省略される。また、図３（ａ）に示す光学検出器Ｄから、蛍光受光光学系Ｄ６が省略され、ダイクロイックミラーＤ５２が全反射ミラ
ーに変更される。こうすると、血球分析装置１の構成を簡素にすることができる。また、容器２５１、２５２が省略されるため、試料調製部２５に容器２５１、２５２を接続する手間が省略されると共に、コストの削減を図ることができる。
この他、本発明の実施の形態は、特許請求の範囲に示された技術的思想の範囲内において、適宜、種々の変更が可能である。
１ … 血球分析装置
２ … 測定ユニット
２６ … 検出部
Ｄ … 光学検出器
Ｄ１ … フローセル
Ｄ１５ … 流路
Ｄ３ … 光照射光学系
Ｄ４ … 前方散乱光受光光学系
ＵＤ … 光照射ユニット
１１ … ベース
１２ … 赤光源ユニット
１３ … 青光源ユニット
１４ … ダイクロイックミラーユニット
１５ … 集光レンズユニット
ＰＡ … 位置調整機構
ＲＡ１、ＲＡ２ … 回転軸
１０１、１０３ … 半導体レーザ
１０２、１０４ … コリメータレンズ
１０５ … ダイクロイックミラー
１０７ … 集光レンズ
２０１ … 前方集光レンズ
２０５、２０８、２０９、２１３、２１５ … フォトダイオード
２０５ａ、２０５ｂ、２０８ａ、２０９ａ、２１３ａ、２１５ａ … 受光面
２１０ … 分光素子
２１１ … ダイクロイックミラー

Claims (22)

  1. 試料を流すためのフローセルと、
    第１の波長を有する光を出射する第１光源と、
    前記第１の波長とは異なる第２の波長を有する光を出射する第２光源と、
    前記第１光源および前記第２光源から出射された光を前記フローセルに照射する照射光学系と、
    前記フローセルを通過する測定粒子に前記第１光源からの光を照射することにより得られる散乱光を受光する第１受光部と、
    前記フローセルを通過する測定粒子に前記第２光源からの光を照射することにより得られる散乱光を受光する第２受光部と、を備える、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  2. 請求項１に記載の粒子測定装置において、
    前記第１の波長の光を測定粒子に照射することにより生じる散乱光を前記第１受光部へと導き、前記第２の波長の光を測定粒子に照射することにより生じる散乱光を前記第２受光部へと導く受光光学系をさらに備える、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  3. 請求項１または２に記載の粒子測定装置において、
    前記照射光学系は、前記第１光源から出射された前記第１の波長の光を前記フローセル内の第１照射位置に照射し、前記第２光源から出射された前記第２の波長の光を前記フローセル内の前記第１照射位置とは異なる第２照射位置に照射する、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  4. 請求項３に記載の粒子測定装置において、
    前記第１照射位置と前記第２照射位置は、前記フローセルの試料の流れ方向にずれている、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  5. 請求項４に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部により受光された散乱光に基づく第１散乱光データおよび前記第２受光部により受光された散乱光に基づく第２散乱光データをそれぞれ取得する解析部をさらに備え、
    前記解析部は、同一の測定粒子から得られた前記第１散乱光データと前記第２散乱光データとを互いに対応付けて、前記第１散乱光データおよび前記第２散乱光データに基づく解析を実行する、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  6. 請求項２に記載の粒子測定装置において、
    前記照射光学系は、前記第１光源から出射された前記第１の波長の光と、前記第２光源から出射された前記第２の波長の光を、前記フローセル内の同じ位置に照射し、
    前記受光光学系は、前記第１の波長の光に基づく散乱光の光路と前記第２の波長の光に基づく散乱光の光路とを互いに分離させる分光部を備える、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  7. 請求項１ないし６の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部を有する第１の光検出器と、前記第２受光部を有する第２の光検出器をそれぞれ有する、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  8. 請求項１ないし６の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部と前記第２受光部は、これら受光部の受光面に平行な方向に互いに隣り合うように配置される、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  9. 請求項８に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部と前記第２受光部の両方が配置された一つの光検出器を有する、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  10. 請求項９に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部と前記第２受光部は、これら受光部の受光面に垂直な方向の位置が互いに同じとなるように配置される、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  11. 請求項１０に記載の粒子測定装置において、
    前記受光光学系は、前記第１照射位置を通過する測定粒子から生じる散乱光を前記第１受光部に集光し、前記第２照射位置を通過する測定粒子から生じる散乱光を前記第２受光部に集光する色収差補正レンズを含む、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  12. 請求項１ないし１１の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    ヘモグロビンの吸収係数が、前記第１の波長と前記第２の波長で異なる、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  13. 請求項１ないし１２の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１光源および前記第２光源の何れか一方は、４００ｎｍ以上４３５ｎｍ以下の波長を有する光を照射する半導体レーザ光源である、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  14. 請求項１ないし１３の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１光源および前記第２光源の何れか一方は、６１０ｎｍ以上７５０ｎｍ以下の波長を有する光を照射する半導体レーザ光源である、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  15. 請求項１ないし１４の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１受光部および前記第２受光部は、前記第１光源および前記第２の光源からの光の前方散乱光を、それぞれ受光する、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  16. 請求項１ないし１５の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１光源、前記第２光源および前記照射光学系が取り付けられたベースをさらに備え、
    前記照射光学系は、
    前記第１光源から出射される光を透過し、前記第２光源から出射される光を反射するダイクロイックミラーと、
    前記第１および第２光源から出射され前記ダイクロイックミラーを経由した光を前記フローセルに集光する集光レンズと、を有し、
    前記第２光源は、回動可能に前記ベースに取り付けられ、
    前記ダイクロイックミラーは、前記第２光源の回動方向と異なる方向に回動可能に前記
    ベースに取り付けられ、
    前記第２光源を前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記フローセルの流路に平行な第１方向および前記流路を横切る第２方向の何れか一方の方向に変位され、前記ダイクロイックミラーを前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記第１および第２方向のうち他方の方向に変位される、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  17. 請求項１６に記載の粒子測定装置において、
    前記第２光源は、前記フローセルの流路に垂直な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記フローセルの流路に平行な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられている、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  18. 請求項１６に記載の粒子測定装置において、
    前記第２光源は、前記フローセルの流路に平行な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられ、前記ダイクロイックミラーは、前記フローセルの流路に垂直な軸の周りに回動可能に前記ベースに取り付けられている、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  19. 請求項１６ないし１８の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記照射光学系は、前記第２光源と前記ダイクロイックミラーとの間にコリメータレンズが配置され、前記第２光源と前記コリメータレンズが共に回動可能に前記ベースに取り付けられている、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  20. 請求項１６ないし１９の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記フローセルの流路に近づく方向および前記流路を横切る方向に変位可能に前記ベースを支持する位置調整機構をさらに備える、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  21. 請求項１６ないし２０の何れか一項に記載の粒子測定装置において、
    前記第１光源および前記集光レンズは、前記ベースに固定されている、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
  22. 試料を流すためのフローセルと、
    第１の波長を有する光を出射する第１光源と、
    前記第１の波長とは異なる第２の波長を有する光を出射する第２光源と、
    前記第１光源および前記第２光源から出射された光を前記フローセルに照射する照射光学系と、
    前記フローセルを通過する測定粒子に前記第１光源からの光を照射することにより得られる光を受光する第１受光部と、
    前記フローセルを通過する測定粒子に前記第２光源からの光を照射することにより得られる光を受光する第２受光部と、
    前記第１光源、前記第２光源および前記照射光学系が取り付けられたベースと、を備え、
    前記照射光学系は、
    前記第１光源から出射される光を透過し、前記第２光源から出射される光を反射するダイクロイックミラーと、
    前記第１および第２光源から出射され前記ダイクロイックミラーを経由した光を前記フ
    ローセルに集光する集光レンズと、を有し、
    前記第２光源は、回動可能に前記ベースに取り付けられ、
    前記ダイクロイックミラーは、前記第２光源の回動方向と異なる方向に回動可能に前記ベースに取り付けられ、
    前記第２光源を前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記フローセルの流路に平行な第１方向および前記流路を横切る第２方向の何れか一方の方向に変位され、前記ダイクロイックミラーを前記ベースに対して回動させると、前記第２光源から出射された光の集光位置が、前記第１および第２方向のうち他方の方向に変位される、
    ことを特徴とする粒子測定装置。
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