JP2014062054A

JP2014062054A - よう素−１２３標記チミン類似物［１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのプローブ

Info

Publication number: JP2014062054A
Application number: JP2012206547A
Authority: JP
Inventors: Ho-Lien Huang; 黄鶴聯; Chung-Shan Yu; 兪鐘山; Wuu Jyh Lin; 林武智; Jenn Tzong Chen; 陳振宗; Ching-Shiuann Yang; 楊慶鉉; Wen-Chin Su; 蘇文欽; Chia-Jung Chen; 陳珈融
Original assignee: Institute of Nuclear Energy Research
Current assignee: Institute of Nuclear Energy Research
Priority date: 2012-09-20
Filing date: 2012-09-20
Publication date: 2014-04-10

Abstract

【課題】よう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのプローブを提供する。
【解決手段】一般の商業取引で手に入れられるウリジン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）を原料として、新規のプローブの前駆体を合成して、放射標記を行い、ウリジン上の塩基性基に、［^１２３Ｉ］を標記し、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵが得られ、［^１８Ｆ］−ＦＬＴが、グリコシルに、^１８Ｆを標記することを異なり、新規の腫瘤放射プローブが得られ、その標記方式は、標記前駆体とＮａ［^１２３Ｉ］溶液、酢酸、過酸化水素溶液、コロールホルム及び水酸化ナトリウム溶液を混合した後、１分間から１０分間まで伸びて超音波振動させて、その放射化学純度が、９８％以上になり、放射比活性が、０．１９６ＧＢｑ／ｕｍｏｌｅよりも低くなく、放射産出が、８％から４０％へ上げられ、生物実験に使用可能の程度になる。そのため、ウリジン類似物の放射性標記物をビルドすることにより、有効に、生産コストを低減することができる。
【選択図】図１

Description

本発明は、腫瘤放射プローブに関し、特に、^１８Ｆ−ＦＬＴの類似分子であり、特に、よう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵを利用するものに関する。

新しい遺伝子プローブで遺伝子を観察することに伴って、非侵入型の核医学イメージで、生体内遺伝子治療の効果を観察することができてきた。例えば、^１８Ｆ−ＦＬＴである放射性ヌクレオシドで、腫瘤細胞の存在箇所を確認する方法は、既に、幅広く腫瘤造影の分野に適用される。

上記のような、一般の細胞増殖を検知する造影剤を作製する時、通常は、実験室において、格別の実験道具で、所定の実験手順に従って作製される。しかし、その製造には、コストが高く、純化が簡単ではなく、普及し難くなる。そのため、一般の従来のものは、実用的ではないものである。

本発明者は、上記欠点を解消するため、慎重に研究し、また、学理を活用して、有効に上記欠点を解消でき、設計が合理である本発明を提案する。

本発明の主な目的は、従来の技術にある上記問題点を解消するための^１８Ｆ−ＦＬＴの類似分子を提供し、よう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵを提供する。

本発明の他の目的は、将来に適用される可能性がある^１８Ｆ−ＦＬＴに類似する新型腫瘤放射プローブを提供する。［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの全合成経路を提供する。

本発明は、上記の目的を達成するために、よう素−１２３標記チミン類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのプローブであり、それは、一般の商業取引で、手に入れるウリジン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）を原料として、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの前駆体に合成し、また、よう素−１２３を放射性標記することにより、［^１８Ｆ］−ＦＬＴに類似する新型腫瘤放射プローブが得られ、その放射比活性や産出及び純度は、すべてが、生物実験に適用できる程度になり、ウリジン類似物の放射性標記物をビルドすることにより、有効に、生産コストが低減される。一方、本発明にも、合成されたよう素−１２３標記のＦＬＴ類似物で、体外細胞実験を行い、実験に、ＮＧ４ＴＬ４−ｗｉｌｄｔｙｐｅやＮＧ４ＴＬ４−ＨＳＶｔｋ及びＮＧ４ＴＬ４−ｓｒ３９ｔｋの三種類の細胞が使用され、実験内容では、０．２５や０．５、１．５、３及び５時間等の異なる時点での細胞累積実験が行われる。実験結果によれば、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの場合は、三種類の細胞株において、明白に摂取されていないが、ＮＧ４ＴＬ４−ＨＳＶｔｋ細胞株は、前の時点で、ＦＬＴに類似する性質が示され、それは、両者が、類似するメカニズムにより、細胞に入って、ＨＳＶ−ｔｋによってリン酸化されることを暗示し、ただ、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、ＦＬＴのように、更に、ビスリン酸化されなく、水解されてから細胞から排出される。両者の初期類似と後期相違の結果から、将来において、類似分子を合成に適用することを見出した。

以下、図面を参照しながら、本発明の特徴や技術内容について、詳しく説明するが、それらの図面等は、参考や説明のためであり、本発明は、それによって制限されることが無い。

本発明のよう素−１２３標記チミン類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの合成反応概念図。本発明に係る［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのＨＰＬＣクロマトグラフィの紫外領域信号概念図。本発明の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ細胞吸收実験結果概念図。

図１と図２は、それぞれ、本発明に係るよう素−１２３標記チミン類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの合成反応概念図と、本発明に係る［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのＨＰＬＣのクロマトグラフィの紫外領域信号概念図である。図のように、本発明に係るよう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのプローブは、一般の商業取引で、手に入れられるウリジン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）を、原料とし、新型プローブの前駆体と放射標記を合成することにより、［^１８Ｆ］−ＦＬＴに類似する新型腫瘤放射プローブが得られる。上記［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの構造は、

である。

本発明によれば、まず、一般の有機な実験室において、複数の手順で、合成を行って、前駆体が予めに、作製され、その後、台湾核能研究所によって提供されたソースで、放射標記や純化作業を行う。用意したら、有機合成経路は、市販のウリジン１から始め、まず、炭酸ジフェニル（ＤｉｐｈｅｎｙｌＣａｒｂｏｎａｔｅ）で、１４０°Ｃの条件下、２,２´−ｃｙｃｌｏｕｒｉｄｉｎｅ２が形成され、その後、希トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を利用して開ループし、生成物３が得られ、また、露出した水酸基用無水酢酸（Ａｃ_２Ｏ）を保護して、生成物４が得られる。そして、塩基性基の５端によう素が結合されて生成物５が得られ、その後、すず化して生成物６が得られ、最後に、保護を除去して、放射標記前駆体７が得られる。その後、台湾核能研究所によって提供される放射性よう化ナトリウム（Ｎａ［^１２３Ｉ］）を利用して、酸化条件で、放射性よう素原子を標記すると、放射性生成物８が完成される。生成物８は、１８Ｆ−ＦＬＴに類似する新規の分子である。

より良い実施例によれば、図１のように、よう素−１２３標記ＦＬＴ類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの合成方法は、次のようであり、
［実施例一］前置作業
１Ｈ−ＮＭＲと１３Ｃ−ＮＭＲ核磁気共鳴スペクトルは、５００ＭＨｚを使用し、質量スペクトルは、エレクトロスプレイイオン化を採用する。薄層液相円柱クロマトグラフィーは、ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０Ｆ２５４ｐｒｅｃｏａｔｅｄｐｌａｔｅｓを使用し、２５４ナノメータ（ｎｍ）波長であるＵＶ光を照射して検知する。快速の円柱クロマトグラフィーは、填材が、ｓｉｌｉｃａｇｅｌ６０（２３０〜４００篩目）であるものを使用する。反応用溶媒は、ともに、予めに、一般のデカンテーション方法で処理した後、使用する。

［実施例二］２,２´−ｃｙｃｌｏｕｒｉｄｉｎｅ２の合成
５００ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）のウリジン１、５７０ｍｇ（２．６５ｍｍｏｌと１．３グラム当量（ｅｑ））の炭酸ジフェニル及び１０ｍｇ（０．１２ｍｍｏｌ、０．０５９ｅｑ）の炭酸水素ナトリウムを、１ｍＬのジメチルホルムアミドに溶けて、１４０°Ｃまで加熱する。出発物質が、完全に消耗された後、溶液を、室温まで、下げて、白い沈殿が発生すると、白い沈殿を、冷たい蟻酸で、清浄して減圧し、余計な溶液を除去した後、白い粉末生成物（２,２´−ｃｙｃｌｏｕｒｉｄｉｎｅ）２を収集すると、その重量と産出が、それぞれ、３７０ｍｇと８０％である。

Ｍｐ：２５０〜２５３°Ｃ．［ｌｉｔ．３０，２４４〜２４６°Ｃ，ｌｉｔ．３１，２３８〜２４４°Ｃ；ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌａｕｔｈｅｎｔｉｃｓａｍｐｌｅ：２４８〜２５１°Ｃ］．ａｎａｌ．Ｃ_９Ｈ_１０Ｎ_２Ｏ_５，ｃａｌｃｄ：Ｃ４７．７９，Ｈ４．４６，Ｎ１２．３９；ｆｏｕｎｄ：Ｃ４７．４１，Ｈ４．４４，Ｎ１２．４１；ＭＷ：２２６．２，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦＭＳ，Ｍ＝２２６．１（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２２７．１，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝２４９．０，［２Ｍ＋Ｈ］^＋＝４５３．２，［２Ｍ＋Ｎａ］^＋＝４７５．２；１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）： δ ３．４５（ｄｄ，Ｊ_{５’ａ，４’} ＝４．０，Ｊ_{５’ａ，５’ｂ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ａ），３．４９（ｄｄ，Ｊ_{５’ｂ，４’} ＝４．０，Ｊ_{５’ｂ，５’ａ}＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ｂ），４．２３（ｄｄ，Ｊ_{４’，５’ａ} ＝４．０，Ｊ_{４’，５’ｂ} ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_４’），４．５４（ｓ，１Ｈ，Ｈ_３’），５．２８（ｄ，Ｊ_{２’，１’}＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_２’），６．０５（ｄ，Ｊ_５，６＝７．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５），６．３７（ｄ，Ｊ_{１’，２’} ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_１’），７．８２（ｄ，Ｊ_６，５＝７．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_６）。

［実施例三］１−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ３の合成
また、上記５００ｍｇ（２．２３ｍｍｏｌ）の生成物２を、出発物質として、５ｍＬのジメチルホルムアミドに浸入し、７０ｍＬのトリフルオロ酢酸（０．０５Ｎ）を添加しながら、８０°Ｃで、絶えずに、攪拌する。反応完成した後、減圧して濃縮させて、余計な溶液を除去し、更に、快速的に円柱クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ_３＝１：３）で純化させ、白色の粉末生成物（１−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）３が得られ、その重量と産出は、それぞれ、５１０ｍｇと９５％である。

Ｍｐ：２０９〜２１６°Ｃ［ｌｉｔ．３２，２０９〜２１１°Ｃ，ｌｉｔ．３３，２１０〜２１５°Ｃ］．ａｎａｌ．Ｃ_９Ｈ_１２Ｎ_２Ｏ_６，ｃａｌｃｄ：Ｃ４４．２７，Ｈ４．９５，Ｎ１１．４７；ｆｏｕｎｄ：Ｃ４３．１３，Ｈ５．０１，Ｎ１１．０８．ａｎａｌ．Ｃ_９Ｈ_１２Ｎ_２Ｏ_６ＭＷ：２４４．２，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦＭＳ，Ｍ＝２４４．１（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２４５．０，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝２６７．１，［２Ｍ＋Ｈ］^＋＝４８９．２，［２Ｍ＋Ｎａ］^＋＝５１１．２，［３Ｍ＋Ｎａ］^＋＝７５５．２；１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ３．７７（ｄｄ，Ｊ_{５’ａ，４’} ＝４．５，Ｊ_{５’ａ，５’ｂ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ａ），３．８１（ｄｄ，Ｊ_{５’ｂ，４’} ＝４．０，Ｊ_{５’ｂ，５’ａ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ｂ），３．９１（ｄｄｄ，Ｊ_{４’，３’} ＝３．５，Ｊ_{４’，５’ｂ} ＝４．０，Ｊ_{４’，５’ａ} ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_４’），４．０６（ｄｄ，Ｊ_{３’，２’} ＝３．０，Ｊ_{３’，４’} ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_３’），４．１４（ｄｄ，Ｊ_{２’，３’} ＝３．０，Ｊ_{２’，１’} ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_２’），５．６４（ｄ，Ｊ_５，６＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５），６．１２（ｄ，Ｊ_{１’，２’} ＝４．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_１’），７．８４（ｄ，Ｊ_５，６＝８．１Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_６）。

［実施例四］合成１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４−（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ４
上記５００ｍｇ（２．０５ｍｍｏｌ）の生成物３を出発物質として、３５ｍＬのピリジンに溶け、１１ｍＬの無水酢酸を添加して、持続的に攪拌する。反応完成後、減圧濃縮して全部を掬い上げ、快速的に、円柱クロマトグラフィー（Ａｃｅｔｏｎｅ／ｎ−ｈｅｘａｎｅ＝４：５）を純化させ白色の生成物（１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−ｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４−（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）４を得る。その重量と産出は、それぞれ、６７５ｍｇと８９％である。

Ｍｐ：１２８〜１３０°Ｃ［ｌｉｔ．１０３２，１２８〜１３０°Ｃ，ｌｉｔ．３４，１２９〜１３０°Ｃ］．ａｎａｌ．Ｃ_１５Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_９，ｃａｌｃｄ：Ｃ４８．６５，Ｈ４．９０，Ｎ７．５６；ｆｏｕｎｄ：Ｃ４８．４１，Ｈ５．０１，Ｎ７．５４；ＭＷ：３７０．３，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦＭＳ，Ｍ＝３７０（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３７１．１，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝３９３．０，［２Ｍ＋Ｈ］^＋＝７４１．１，［２Ｍ＋Ｎａ］^＋＝７６３．１。

［実施例五］１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｉｏｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ５の合成
上記４５４ｍｇ（１．２３ｍｍｏｌ）の生成物４を、出発物質として、４２０ｍｇ（１．６６ｍｍｏｌ、１．３ｅｑ）のよう素と７００ｍｇ（１．２７ｍｍｏｌ、１ｅｑ）の硝酸セリウムアンモンとをともに、１５ｍＬの無水アセトニトリルに溶けて８０°Ｃまで加熱する。出発物質が消えた後、１００ｍＬの酢酸エチルを添加し、また、順に、３０ｍＬ（５％）の重亜硫酸ナトリウムと３０ｍＬの飽和食塩水を添加して清浄する。有機相を合わせて収集して減圧濃縮してから、快速的に、円柱クロマトグラフィーで純化（Ａｃｅｔｏｎｅ／ｎ−ｈｅｘａｎｅ＝２：３）させ、白い粉末である生成物（１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｉｏｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）５を得る。その重量と産出は、それぞれ、４２５ｍｇと７０％である。

Ｍｐ：１８４〜１８６°Ｃ［ｌｉｔ．３５，１８５〜１８７°Ｃ，ｌｉｔ．３６，１８４〜１８６°Ｃ］．ａｎａｌ．Ｃ_１５Ｈ_１７ＩＮ_２Ｏ_９，ｃａｌｃｄ：Ｃ３６．３１，Ｈ３．４５，Ｎ５．６５；ｆｏｕｎｄ：Ｃ３６．０９，Ｈ３．５２，Ｎ５．８５．ａｎａｌ．Ｃ_１５Ｈ_１７ＩＮ_２Ｏ_９，ＭＷ：４９６．２，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦ，Ｍ＝４９６．０（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４９７．０，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝５１９．０，［２Ｍ＋Ｈ］^＋＝９９３．０；１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）： δ２．０４（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），２．１３（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），２．１７（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），４．１９（ｄｄｄ，Ｊ_{４’，３’} ＝３．５，Ｊ_{４’，５’ａ} ＝４．５，Ｊ_{４’，５’ｂ} ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_４’），４．３８（ｄｄ，Ｊ_{５’ａ，４’} ＝４．５，Ｊ_{５’ａ，５’ｂ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ａ），４．４４（ｄｄ，Ｊ_{５’ｂ，４’} ＝５．５，Ｊ_{５’ｂ，５’ａ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ｂ），５．１０（ｄｄ，Ｊ_{３’，２’} ＝１．５，Ｊ_{３’，４’} ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_３’），５．３８（ｄｄ，Ｊ_{２’，３’} ＝１．５，Ｊ_{２’，１’} ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_２’），６．２７（ｄ，Ｊ_{１’，２’} ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_１’），７．８９（ｓ，１Ｈ，Ｈ_６），８．８７（ｓ，１Ｈ，ＨＮＨ）。

［実施例六］１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｔａｎｎｙｌｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ６の合成
上記６００ｍｇ（１．２１ｍｍｏｌ）の生成物５を、出発物質として、１．４２ｇ（４．３２ｍｍｏｌ、３．６ｅｑ）のヘキサメチルジすず（Ｓｎ_２Ｍｅ_６）と。２２ｍｇ（０．０３ｅｑ）のビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(ＩＩ)ジクロリドとを、ともに、３６ｍＬのジオキサンに溶けて、１００°Ｃで、攪拌し続ける。出発物質が消えてから、減圧濃縮させて元の溶媒を析出し、快速的に、円柱クロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ｎ−ｈｅｘａｎｅ＝１：１）で純化させ、生成物の白い固体生成物である（１−（２’，３’，５’−Ｔｒｉ−Ｏ−ａｃｅｔｙｌ−β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｔａｎｎｙｌｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）６を得る。その重量と産出は、それぞれ、５００ｍｇと７５％である。

Ｍｐ：６３〜７３°Ｃ．ａｎａｌ．Ｃ_１８Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_９Ｓｎ，ｃａｌｃｄ：Ｃ４０．５５，Ｈ４．９２，Ｎ５．２５；ｆｏｕｎｄ：Ｃ４２．３６，Ｈ５．７９，Ｎ５．０１．ＭＷ：５３３．１，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦＭＳ，Ｍ＝５３２．１（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３３．１，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝５５５．１．ＣｌｕｓｔｅｒｉｎｇｏｆｔｈｅｐｅａｋｓｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｔｏｉｓｏｔｏｐｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＳｎｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ；１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，Ｃ_６Ｄ_６）： δ０．２２−０．３５（ｍ，９Ｈ，ＳｎＭｅ_３），１．４７（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），１．４８（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），１．６９（ｓ，３Ｈ，ＨＡｃ），３．８１（ｄｄｄ，Ｊ_{４’，３’} ＝３．５，Ｊ_{４’，５’ａ}＝４．０，Ｊ_{４’，５’ｂ} ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_４’），４．２４（ｄｄ，Ｊ_{５’ａ，４’} ＝４．０，Ｊ_{５’ａ，５’ｂ} ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ａ），４．３２（ｄｄ，Ｊ_{５’ｂ，４’} ＝６．５，Ｊ_{５’ｂ，５’ａ}＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_５’ｂ），５．０６（ｄｄ，Ｊ_{３’，２’} ＝１．０，Ｊ_{３’，４’} ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_３’），５．４８（ｄｄ，Ｊ_{２’，３’} ＝１．０，Ｊ_{２’，１’} ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_２’），６．３５（ｄ，Ｊ_{１’，２’} ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ_１’），７．２８〜７．３８（ｍ，１Ｈ，Ｈ_６），９．７６（ｓ，１Ｈ，ＨＮＨ）。

［実施例七］１−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｔａｎｎｙｌｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ７の合成
上記２５０ｍｇ（０．４５ｍｍｏｌ）の生成物６を、出発物質として、１５ｍＬのＭｅＯＨに溶けて０°Ｃまで、温度を下げ、その後、０．０１Ｎ濃度の５ｍＬのＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨを添加して、攪拌し続ける。出発物質が完全に消えてから、アンバーライト-IRC（Ｄｏｗｅｘ５００ＷＸ８−４００，Ｈ＋ｆｏｒｍ）で中和してろ過し、最後に、３０°Ｃの温度で、減圧濃縮させ、溶液を乾燥して、生成物である（１−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｔａｎｎｙｌｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ）７が得られ、その重量と産出は、それぞれ、１４０ｍｇと８０％である。

Ｃ_１２Ｈ_２０Ｎ_２Ｏ_６Ｓｎｃａｌｃｄｍａｓｓ：４０６．０ａｍｕ，ＥＳＩ＋Ｑ−ＴＯＦＭＳ，Ｍ＝４０６．０（ｍ／ｚ），［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４０７．１，［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２４５．１，［Ｍ＋Ｎａ］^＋＝２６７．１，［２Ｍ＋Ｈ］^＋＝４８９．２；ＣｌｕｓｔｅｒｉｎｇｏｆｔｈｅｐｅａｋｓｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｔｏｉｓｏｔｏｐｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆＳｎｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ．１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）： δ ０．２４（ｔ，ＳｎＭｅ_３），３．７４〜３．８４（ｍ，Ｈ_５’），３．８８〜３．９３（ｍ，Ｈ_４’），４．１０（ｔ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，Ｈ_３’），４．１４〜４．１７（ｍ，Ｈ_３’），６．１７（ｄ，Ｊ_{１’，２’} ＝４．５Ｈｚ，Ｈ_１’），７．６４（ｓ，Ｈ_６）。

［実施例八］１−（β−Ｄ−ａｒａｂｉｎｏｆｕｒａｎｏｓｙｌ）−５−［^１２３Ｉ］ｉｏｄｏｐｙｒｉｍｉｄｉｎ−２，４（３Ｈ）−ｄｉｏｎｅ（［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ）８の合成
上記１ｍｇの生成物７を、前駆体として、２００μＬのコロールホルム（ＣＨＣｌ_３）に溶けてから、順に、５０μＬの酢酸と過酸化水素混合液（酢酸／過酸化水素＝３：１）と０．１ｍｌ（０．２Ｎ）の水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）及び１０ｍＣｉのＮａ［^１２３Ｉ］溶液を添加する。上記混合液は、１０分間、超音波振動してから、１ｍＬの水を希釋し、更に、３０秒間、超音波振動させる。そのまま置いて、分層しれから、０．５ｍＬの水相を取り出して、Ｃ１８とＡｌ_２Ｏ_３のカートリッジ（Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ）セットでろ過し、更に、カルビノールで、生成物である（［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ）８を洗浄する。収集液を、１ｍＬ毎に一管として、三管目と四管目の収集液を混合した後、高速液体クロマトグラフィー（Ｈｉｇｈ−ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬＣ）で、更に、純化させる。ＨＰＬＣで純化させるには、円柱と勾配溶離の設定が、下記表１の通りであり、生成物と標準品の出現時間は、帯域が２５４ｎｍに設定されたＵＶ検知器と半導体放射検知器で、確認した（図２のように）出現時間と一致し、ＨＰＬＣによって分離された後の目標生成物（［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ）８は、モノピーク出現時点が、１３．７分である。

上記生成物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ８の全合成実験において、コストを顧慮したため、出発物質を、市販のウリジンを利用し、２’端のヒドロキシル基が上へ向かわせるため、本発明において、まず、ウリジンを、２,２’−ｃｙｃｌｏｕｒｉｄｉｎｅ２に作製させる。一般の開ループ反応は、アルカリ条件下で、行うが、本発明においては、希酸条件下で、その手順を行う。また、すず化反応時の副反応が、複雑しすぎることを防止するため、グリコシル上のヒドロキシル基を、ともに、無水酢酸で保護する。しかしながら、保護が除去される時、一部が水解されるため、水解の割合を低減するために、反応の温度が、０°Ｃまで下げなければならなく、それでも、所定の割合に、水解されて、最後に、ＮＭＲスペクトルに、存在しないはずの信号が存在する。最後の放射標記反応は、酸化条件下で行われ、その効率が高くて、緩和である。この実験により、作製された［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、放射化学純度が９８％以上（図２のように）で、放射比活性が、０．１９６ＧＢｑ／ｕｍｏｌｅよりも低くなく、放射産出が、約４０％である。

図３は、本発明に係る［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの細胞吸收実験結果概念図である。図のように、本発明も、上記合成したよう素−１２３標記のＦＬＴ類似物を利用して、体外細胞実験を行い、実験に、ＮＧ４ＴＬ４−ｗｉｌｄｔｙｐｅやＮＧ４ＴＬ４−ＨＳＶｔｋ及びＮＧ４ＴＬ４−ｓｒ３９ｔｋの三種類の細胞が使用され、１０％の胎盤牛血清を含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ´ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅ´ｓＭｅｄｉｕｍ）培養液において、３７°Ｃ、５％二酸化炭素の雰囲気で培養し、その後、１×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの割合で、９６穴盤に移転し、１２時間後、生物実験を行う。

細胞摂取実験開始前、上記約１ｍＣｉの［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ８や［^１８Ｆ］−ＦＬＴ（台湾核能研究所によって提供される）と、５０ｍｌの血清なしのＤＭＥＭ培養液と、十分に混合させる。その後、９６穴盤にある本来の培養液を掬い上げて、直ちに、前記の放射性物質が混合された培養液に添加し、その割合が２００ μｌ／ｗｅｌｌである。培養液が添加された細胞を、３７°Ｃと５％の二酸化炭素の培養器に戻して培養させ、そして、０．２５と０．５、１．５、３及び５時間等の異なる時点で、それぞれ、上清液を収集して、その後、加入５０ｕｌのトリプシン−ＥＤＴＡ（Ｔｒｙｐｓｉｎ−ＥＤＴＡ）を添加して、５分間、置いて、最後に、離断細胞の溶液を取り出して、されぞれ、収集する。最後に、γ計数器
（Ｇａｍｍａ−Ｃｏｕｎｔｅｒ）で、それぞれ、上清液と細胞質の放射活性を測定する。その中、解析の式は、
（細胞質の放射活性／全部活性）×100％である。

細胞摂取実験は、図において、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵが、ＮＧ４ＴＬ４−ｗｉｌｄｔｙｐｅとＮＧ４ＴＬ４−ＨＳＶｔｋ及びＮＧ４ＴＬ４−ｓｒ３９ｔｋの三種類の細胞の摂取比較曲線１１と１２及び１３のように表現され、結果によれば、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、三種類の細胞において、ともに、明らかに、累積されていなく、５時間経過しても、最大の摂取量が、全体の１０％を超えない。しかしながら、ＮＧ４ＴＬ４−ＨＳＶｔｋの細胞の前面時点では、ＦＬＴに類似する性質が示され、それは、両者が、類似したメカニズムにより、細胞に入って、ＨＳＶ−ｔｋによってリン酸化されるが、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、ＦＬＴのように、更に、ビスリン酸化されずに、水解されて、細胞から排出されることが、暗示される。両者は、初期において、類似するが、後期において、異なる結果を見出し、未来において、類似分子を合成する応用に有利である。

本発明は、ウリジンを原料とし、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの前駆体が合成され、また、緩和の条件下で、その塩基性基に、放射性よう素−１２３が標記されて、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵが得られ、それは、［^１８Ｆ］−ＦＬＴが、グリコシル上に^１８Ｆが標記されることと異なり、新規の腫瘤放射プローブが得られる。その標記方式は、標記前駆体とＮａ［^１２３Ｉ］溶液、酢酸、過酸化水素溶液、コロールホルム及び水酸化ナトリウム溶液を混合した後、１分間から１０分間まで延びて超音波振動させて、その産出が、８％から４０％へ上がる。その放射比活性や産出及び純度は、ともに、生物実験に使用可能な程度になる。［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵと［^１８Ｆ］−ＦＡＵは、構造上、十分に類似するが、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、細胞の摂取実験において、明らかではなく、類似する構造分子の代謝メカニズムと［^１８Ｆ］−ＦＬＴの累積実験で比較すると、５番位置のよう素によって、チミジル酸合成酵素（ＴｈｙｍｉｄｙｌａｔｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＴＳ）のメチル化過程が支障され、その後の酵素が、識別されことができないため、二番目と三番目のリン酸化反応が行わないと、推定する。しかし、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの細胞実験結果が、よくないが、そのウリジン類似物の放射性標記方法が、すでにビルドされたため、それを開発して利用すれば、その生産コストが、更に、低減され、また、最適な生成物品質が得られる。

以上のように、本発明に係るよう素−１２３標記チミン類似物［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵのプローブは、有効に、従来の諸欠点を解消でき、ウリジンを原料として、［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの前駆体が合成され、また、緩和の条件下で、上放射性よう素−１２３を標記し、その放射比活性と産出及び純度は、ともに、生物実験に適用できる程度になり、ウリジン類似物の放射性標記物をビルドすることにより、有効に、生産コストが低減されて、そのため、本発明は、より進歩的かつより実用的で、法に従って発明請求を出願する。

以上は、ただ、本発明のより良い実施例であり、本発明は、それによって制限されることが無く、本発明に係わる特許請求の範囲や明細書の内容に基づいて行った等価の変更や修正は、全てが、本発明の特許請求の範囲内に含まれる。

１ウリジン
２生成物
３生成物
４生成物
５生成物
６生成物
７放射標記前駆体
８放射性生成物
１１、１２、１３摂取比較曲線

Claims

腫瘤放射プローブで、ウリジン（Ｕｒｉｄｉｎｅ）を原料として合成された［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵの前駆体で、よう素−１２３で放射性標記を行う、

ことを特徴とするよう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ構造。
上記［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵは、放射性よう化ナトリウム（Ｎａ［^１２３Ｉ］）で標記することを特徴とする請求項１に記載のよう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ構造。
上記［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ放射化学純度が、９８％以上であることを特徴とする請求項１に記載のよう素−１２３標記チミン（ＦＬＴ）類似物の［^１２３Ｉ］−ＩａｒａＵ構造