JP2014021016A - 試料中の標的物質を検出又は定量する方法及びキット - Google Patents
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Abstract
【解決手段】試料中の標的物質を検出する方法であって、試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する判定工程と、を含み、第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。
【選択図】図1
Description
量子ドットは数十nm以下の半導体結晶であり、励起光を照射すると蛍光を発する。本発明の検出方法及び定量方法は、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接すると、量子ドットの蛍光強度が増強するという現象を利用するものである。
本実施形態に係る試料中の標的物質を検出する方法は、試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する判定工程とを含む。
本実施形態の方法では、標的物質として、抗原−抗体、レクチン−糖、レセプター−リガンド、アプタマー−アプタマーの標的物質、核酸−核酸等の、互いに特異的に結合する物質の組の一方を用い、他方をプローブとして用いることができる。より具体的には、タンパク質、ペプチド、DNA、RNA、化学物質、ホルモン、ウイルス、糖等を標的物質又はプローブに用いることができる。
金属ナノ粒子としては、ナノオーダーの粒径を有する金、銀等のプラズモン現象を有する金属の粒子が挙げられる。なかでも、量子ドットの蛍光を増強させる効果が大きいことから金であることが好ましい。プラズモン現象とは、金属中の自由電子が集団的に振動して擬似的な粒子として振る舞う現象を意味する。
金平糖状金属ナノ粒子とは、表面に金平糖状の凹凸を有する金属ナノ粒子であり、urchin−like金属ナノ粒子ともいう。表面に凹凸を有するか否かは、例えば、透過型電子顕微鏡(TEM)で観察することにより確認することができる。通常の金属ナノ粒子(表面が滑らかな金属ナノ粒子)がほぼ球状であるのに対し、金平糖状金属ナノ粒子は、金平糖のような形状である。金平糖状金属ナノ粒子は、例えば、10mLの10mM HEPES緩衝液(pH7.4)に250μlの20mM塩化金酸溶液を添加した後、溶液の色が黄色から濁った青に変わるまで室温で30分間静置することにより調製することができる。
量子ドットとは、直径が2〜10nm程度の量子井戸構造を有するナノ結晶である。量子ドットには、コア構造のみのものと、コア/シェル構造のものが知られている。前者の例としては、CdS、CdSe、CdTe、CdSeTe等のCd系量子ドット;PbS、PbSe等のPb系量子ドット;ZnSe、ZnTe等のZn系量子ドット等が知られている。後者の例としてはCdSe/ZnS、CdSe/CdS/ZnS、CdSe/ZnSe/ZnS、GaAs/AlGaAs等の量子ドットが知られている。本実施形態においては、これらのいずれの量子ドットも使用することができる。
金属ナノ粒子及び量子ドットへのプローブの固定方法は特に限定されないが、例えば、金属ナノ粒子又は量子ドットの表面にアミノ基、カルボキシル基、チオール基等の官能基を導入し、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(EDC)、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、スクシンイミジル−4−(N−マレイミドメチル)シクロヘキサン−1−カルボキシレート(SMCC)等の化学架橋剤を用いてプローブを固定することができる。金属ナノ粒子又は量子ドットの表面に官能基を導入する方法としては、例えば、金属ナノ粒子又は量子ドットを、8−メルカプトオクタン酸等の両親媒性のチオール化合物と反応させる方法等が挙げられる。
インキュベーション工程では、試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションする。この工程により、試料中に標的物質が存在する場合には、標的物質、第1のプローブ及び第2のプローブが結合し、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接する。金属ナノ粒子及び量子ドットの量は適宜設定すればよい。インキュベーション温度は、標的物質やプローブに応じて適宜選択できる。インキュベーション時間は、標的物質、第1のプローブ及び第2のプローブの結合が平衡に達するのに要する時間に設定すればよく、例えば1時間である。
蛍光測定工程では、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する。測定には、分光蛍光光度計等の一般的な蛍光測定機器を用いることができる。より具体的には、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照に対して、量子ドットの励起光を照射し、発生する蛍光強度を測定すればよい。
判定工程では、蛍光測定工程において測定された蛍光強度に基づいて、試料中に標的物質が存在したか否かを判定する。具体的には、試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する。また、上記したように、量子ドットとして可視光領域の蛍光を発するものを使用した場合には、蛍光測定機器を使わなくても肉眼で観察することにより、蛍光を検出することも可能である。そして、肉眼で蛍光強度の増強に基づいて、標的物質の存在又は不存在を判定することができる。
試料中の標的物質を定量する方法は、基本的には試料中の標的物質を検出する方法と同様であり、試料と共に既知濃度の標的物質を含む複数の標準試料を用いる点が異なる。具体的には、試料及び既知濃度の標的物質を含む複数の標準試料のそれぞれに第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加して、上記と同様のインキュベーション工程及び蛍光測定工程を行う。続いて、次に説明する定量工程を行う。
定量工程では、試料中の量子ドットの蛍光強度を、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度と比較することにより、試料中の標的物質の存在量を求める。例えば、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度をもとに検量線を作成し、試料中の量子ドットの蛍光強度をこの検量線に当てはめることにより、試料中の標的物質の濃度を求めることができる。
一実施形態において、試料中の標的物質の検出又は定量用キットは、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを含む。これらの第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットは、溶液の状態で供給されてもよいし、乾燥状態で供給され、使用時にバッファーに溶解又は懸濁させるものであってもよい。これらの金属ナノ粒子及び量子ドットを用いて、上記のインキュベーション工程、蛍光検出工程、判定工程又は定量工程を実施することにより、試料中の標的物質を検出又は定量することができる。
表面が滑らかな金粒子の溶液(金コロイド溶液)100mLを作製した。まず、使用する全ての器具を王水(塩酸と硝酸を容量比3:1で混合した液体)で洗浄し、エタノール及び超純水(比抵抗値18.2MΩ・cm)ですすいだ。次に、次のA液及びB液の2種類の溶液を準備した。
A液:1%塩化金酸1mLと純水79mLの混合溶液
B液:1%クエン酸4mL、1%タンニン酸0.025mL及び純水の混合溶液(合計20mL)
続いて、A液及びB液をそれぞれ約60℃に加熱し、A液を攪拌しながら、A液にB液を素早く加えた。混合した溶液の色が赤くなった後、約5〜10分間沸騰させることにより、金コロイドを作製した。なお、上記の方法において、B液のタンニン酸の容量を変化させることにより、金粒子の粒径を調整することができる。例えば、3.5〜14nmの粒径の金粒子を調製することができる。
使用する全ての器具を王水(塩酸と硝酸を容量比3:1で混合した液体)で洗浄し、エタノール及び超純水(比抵抗値18.2MΩ・cm)ですすいだ。100mM HEPES溶液を超純水で調製し、1M NaOHでpHを7.4(25℃)に調整した。続いて、100mM HEPES溶液1mLと超純水9mLを混合し、これに20mM HAuCl4溶液250μLを添加した。室温で30分以内に溶液の色が淡黄色からピンク色に変化し、最終的には不透明な青色になり、金平糖状金ナノ粒子を得た。
チオール系化合物を保護剤としてCdTe量子ドットを調製した。具体的には、0.985g(2.35mmol)のCd(ClO4)2・6H2Oを125mLの水に溶解し、5.7mmolのチオグリコール酸を撹拌しながら添加した。続いて、1M NaOHを滴下することによりpHを11.4〜11.6に調整した。この溶液を三つ口フラスコに入れ、窒素バブリングを30分間行うことにより脱気した。続いて、溶液を撹拌しながら、ゆっくりとした窒素ガスの流れと共に、H2Teガスを溶液中に20分間通した。H2Teガスは、窒素雰囲気下で、0.2g(0.46mmol)のAl2Te3の塊と、0.5M H2SO4 15〜20mLとを反応させることにより調製した。凝縮装置を連結し、反応混合物を100℃、大気下(open−air condition)で20分間還流することにより、CdTe前駆体が生成し、CdTeナノ結晶に変換された。
金ナノ粒子を、まず、8−メルカプトオクタン酸で修飾した。1.0mLの8−メルカプトオクタン酸を9.0mLの金平糖状金ナノ粒子と混合し、終濃度0.5mMに調整した。室温で一晩、穏やかに振とうしながらインキュベートすることにより、金ナノ粒子の表面に8−メルカプトオクタン酸の単膜層(Self−Assembled Monolayer、SAM)を形成した。続いて、溶液を4000rpm、15分、4℃遠心し、上清を捨て、リン酸緩衝液(PBS、0.01M、pH7.4)でペレットをすすいだ。この洗浄操作を3回以上繰り返して結合しなかった8−メルカプトオクタン酸を除去し、8−メルカプトオクタン酸で修飾した金ナノ粒子を5mLの水に懸濁した。続いて、400μLの0.1M 1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(EDC)を添加し、10分間インキュベートした後に、100μLの0.1M N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)を添加した。続いて、抗ウシIgGヤギ抗体を終濃度10μg/mLとなるように添加した。この混合溶液を、穏やかに振とうしながら室温で8時間インキュベートし、上記と同様の遠心/すすぎ工程を3回以上繰り返して、結合しなかった抗ウシIgGヤギ抗体を除去した。最終的なペレットを5.0mLのリン酸緩衝液に懸濁し、使用するまで4℃で保存した。この方法は、表面が滑らかな金ナノ粒子及び金平糖状金ナノ粒子のいずれにも使用できる。
予め8−メルカプトオクタン酸で修飾した量子ドットを、エタノールで2回洗浄した。続いて、ネオスポラタンパク質である、NcSAG1又はNcSRS2を、上記の金ナノ粒子へのプローブの結合と同様の方法によって、量子ドットに結合した。プローブを結合した量子ドットは、1.0mLのリン酸緩衝液で懸濁し、使用するまで4℃で保存した。
(プローブを固定した量子ドットにおける蛍光波長及び蛍光強度の変化の検討)
プローブを固定していない量子ドット、ネオスポラタンパク質であるNcSAG1を固定した量子ドット、及びネオスポラタンパク質であるNcSRS2を固定した量子ドットの蛍光スペクトルを測定した。蛍光スペクトルの測定には、分光蛍光光度計(蛍光マイクロプレートリーダー)インフィニットM200 NanoQuant(商品名、TECAN社製)を用いた。
(表面の滑らかな金ナノ粒子と量子ドットを用いた牛ネオスポラ症の感染の検出)
量子ドットに抗ウシIgGヤギ抗体を固定した。また、表面の滑らかな金ナノ粒子に組換え体ネオスポラタンパク質NcSAG1を固定した。これらの量子ドット及び金ナノ粒子の混合溶液に、牛ネオスポラ症に感染したウシの血清(陽性血清)と健常な牛の血清(陰性血清)をそれぞれ添加し、1時間インキュベートした後に蛍光強度を測定した。結果を図4に示す。陽性血清を添加した場合の蛍光強度と陰性血清を添加した場合の蛍光強度との間に有意な差が認められ、この方法により牛ネオスポラ症の感染を検出できることが示された。陽性血清を添加した場合の蛍光強度は、陰性血清を添加した場合の蛍光強度と比較して9%増強した。
(金平糖状金ナノ粒子と量子ドットを用いた牛ネオスポラ症の感染の検出)
量子ドットに組換え体ネオスポラタンパク質NcSAG1を固定した。また、金平糖状金ナノ粒子に抗ウシIgGヤギ抗体を固定した。これらの量子ドット及び金ナノ粒子の混合溶液に、リン酸緩衝液、牛ネオスポラ症に感染したウシの血清(陽性血清)と健常な牛の血清(陰性血清)をそれぞれ添加し、1時間インキュベートした後に蛍光強度を測定した。結果を図5に示す。陽性血清を添加した場合の蛍光強度と陰性血清を添加した場合の蛍光強度との間に有意な差が認められ、この方法により牛ネオスポラ症の感染を検出できることが示された。陽性血清を添加した場合の蛍光強度は、陰性血清を添加した場合の蛍光強度と比較して18%増加した。実施例1と実施例2では、量子ドット及び金ナノ粒子に固定したプローブがそれぞれ逆になっているが、いずれの場合においても牛ネオスポラ症の感染を検出できることが示された。また、金平糖状金ナノ粒子を用いることにより、表面の滑らかな金ナノ粒子を用いた場合よりも蛍光強度の増強が強いことが示された。
(金平糖状金ナノ粒子と量子ドットを用いた牛ネオスポラ症の感染の検出)
実施例2と異なるプローブを用いた検討を行った。量子ドットに組換え体ネオスポラタンパク質NcSRS2を固定した。また、金平糖状金ナノ粒子に抗ウシIgGヤギ抗体を固定した。これらの量子ドット及び金ナノ粒子の混合溶液に、リン酸緩衝液、牛ネオスポラ症に感染したウシの血清(陽性血清)と健常な牛の血清(陰性血清)をそれぞれ添加し、1時間インキュベートした後に蛍光強度を測定した。結果を図6に示す。陽性血清を添加した場合の蛍光強度と陰性血清を添加した場合の蛍光強度との間に有意な差が認められ、この方法により牛ネオスポラ症の感染を検出できることが示された。陽性血清を添加した場合の蛍光強度は、陰性血清を添加した場合の蛍光強度と比較して48%増加した。
(インフルエンザタンパクの検出)
量子ドットに抗インフルエンザH1N1ヘマグルチニン(HA)抗体(ポリクローナル抗体)を固定した。また、金ナノ粒子に抗インフルエンザH1N1 HA抗体(ポリクローナル抗体)を固定した。96ウェルプレートに、これらの量子ドット及び金ナノ粒子の混合溶液を分注し、組換え体インフルエンザH1N1 HAタンパク質を、終濃度が1000ng/mL、100ng/mL、10ng/mL、1ng/mL、100pg/mL、10pg/mL及び1pg/mLとなるようにそれぞれ添加し、30分間インキュベートした後に蛍光強度を測定した。結果を図7に示す。組換え体インフルエンザH1N1 HAタンパク質の濃度に応じた蛍光強度の増強(蛍光強度の増加)が得られた。この結果は、上記の方法により標的物質を定量できることを示す。
Claims (11)
- 試料中の標的物質を検出する方法であって、
試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、
インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する判定工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。 - 試料中の標的物質を定量する方法であって、
試料及び既知濃度の標的物質を含む複数の標準試料のそれぞれに、第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを添加してインキュベーションするインキュベーション工程と、
インキュベーション工程後の試料及び複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度を、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度と比較して、試料中の標的物質を定量する定量工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。 - 金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項1又は2に記載の方法。
- 金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 試料中の標的物質の検出又は定量用キットであって、
第1のプローブを固定化した金属ナノ粒子及び第2のプローブを固定化した量子ドットを含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが標的物質と結合することにより、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接し、それにより量子ドットの蛍光強度が増強する、キット。 - 金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項7に記載のキット。
- 金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項7又は8に記載のキット。
- 量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項7〜9のいずれか一項に記載のキット。
- 第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項7〜10のいずれか一項に記載のキット。
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015122391A1 (ja) * | 2014-02-13 | 2015-08-20 | 国立大学法人静岡大学 | 量子ドット蛍光増強免疫測定法 |
WO2016208466A1 (ja) * | 2015-06-22 | 2016-12-29 | ウシオ電機株式会社 | 検出対象物質の検出方法 |
JP2017037295A (ja) * | 2015-08-07 | 2017-02-16 | ゼロックス コーポレイションXerox Corporation | 比色検知用途のためのスルホン化ポリエステル−金属ナノ粒子コンポジットトナー |
CN111239387A (zh) * | 2020-01-18 | 2020-06-05 | 天津科技大学 | 一种同时检测酪胺和组胺的荧光免疫方法 |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20180063593A (ko) * | 2016-12-02 | 2018-06-12 | (주)플렉센스 | 표면적이 향상된 검지 구조체를 이용한 면역분석방법 |
CN109187450B (zh) * | 2018-08-01 | 2020-10-27 | 傅英 | 一种基于量子点的生物分子浓度检测方法 |
US11585010B2 (en) | 2019-06-28 | 2023-02-21 | Globalwafers Co., Ltd. | Methods for producing a single crystal silicon ingot using boric acid as a dopant and ingot puller apparatus that use a solid-phase dopant |
CN113376130B (zh) * | 2021-05-14 | 2024-06-14 | 南京师范大学 | 用于检测氨苄青霉素残留的荧光开启式探针及其制备方法和应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010538298A (ja) * | 2007-09-07 | 2010-12-09 | ケアストリーム ヘルス インク | ナノ粒子を用いた蛍光共鳴エネルギ移動検出 |
JP2013057630A (ja) * | 2011-09-09 | 2013-03-28 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 増強微粒子含有半導体ナノ粒子集積体 |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005071401A2 (en) * | 2004-01-15 | 2005-08-04 | Chiron Corporation | Homogeneous multiplex assay for nucleic acid targets |
-
2012
- 2012-07-20 JP JP2012161928A patent/JP6083849B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-07-19 WO PCT/KR2013/006484 patent/WO2014014309A1/ko active Application Filing
- 2013-07-19 KR KR1020157006525A patent/KR20150064026A/ko not_active Application Discontinuation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010538298A (ja) * | 2007-09-07 | 2010-12-09 | ケアストリーム ヘルス インク | ナノ粒子を用いた蛍光共鳴エネルギ移動検出 |
JP2013057630A (ja) * | 2011-09-09 | 2013-03-28 | Konica Minolta Medical & Graphic Inc | 増強微粒子含有半導体ナノ粒子集積体 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6016020671; VK.KOMARALA、外5名: 'Enhanced Forster resonance energy transfer between the CdTe quantum dots in proximity to gold nanopa' Proc SPIE Vol.6641, 2007, Page.66410Y.1-66410Y.8 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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