JPWO2015122391A1 - 量子ドット蛍光増強免疫測定法 - Google Patents
量子ドット蛍光増強免疫測定法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2015122391A1 JPWO2015122391A1 JP2015562818A JP2015562818A JPWO2015122391A1 JP WO2015122391 A1 JPWO2015122391 A1 JP WO2015122391A1 JP 2015562818 A JP2015562818 A JP 2015562818A JP 2015562818 A JP2015562818 A JP 2015562818A JP WO2015122391 A1 JPWO2015122391 A1 JP WO2015122391A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- probe
- target substance
- sample
- quantum dots
- fluorescence intensity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
- G01N33/585—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with a particulate label, e.g. coloured latex
- G01N33/587—Nanoparticles
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
- G01N21/648—Specially adapted constructive features of fluorimeters using evanescent coupling or surface plasmon coupling for the excitation of fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6489—Photoluminescence of semiconductors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
- G01N33/542—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with steric inhibition or signal modification, e.g. fluorescent quenching
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Description
量子ドットは数十nm以下の半導体結晶であり、励起光を照射すると蛍光を発する。本発明の検出方法及び定量方法は、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接すると、量子ドットの蛍光強度が増強するという現象を利用するものである。
図1は、カーボンナノチューブに金属ナノ粒子を固定化させ、さらに該金属ナノ粒子に第1のプローブを固定化させる方法の一実施形態を示す模式図である。試料中の標的物質を検出する方法の一実施形態を説明する模式図である。本実施形態では、カーボンナノチューブ10を金属イオン20で処理して、金属イオン処理カーボンナノチューブ100を得た後に、還元剤による処理を行うことで、カーボンナノチューブ10の表面に金属ナノ粒子30を形成し、金属ナノ粒子30を固定化したカーボンナノチューブ200を得る。さらに、金属ナノ粒子30の表面に第1のプローブ40を固定化し、第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300を得る。また、同様の操作によって、量子ドット60の表面に第2のプローブ61を固定化する。
図2は、試料中の標的物質を検出する方法の一実施形態を説明する模式図である。上記方法によって得られた第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300及び第2のプローブ61を固定化した量子ドット60を、標的物質50を含む試料に添加することにより、第1のプローブ40、標的物質50及び第2のプローブ61の順に結合した複合体400を形成させる。上記複合体400を形成させることにより、第1のプローブ40に結合した金属ナノ粒子30と、第2のプローブ61に結合した量子ドット60が互いに近接し、量子ドット60の蛍光強度が増強される。一方、試料に代えて、標的物質50を含まない陰性対照を用いた場合の量子ドット60の蛍光強度と比較することにより、試料中の標的物質50の存在をより簡便に検出することができる。
本実施形態の方法では、標的物質として、抗原−抗体、レクチン−糖、レセプター−リガンド、アプタマー−アプタマーの標的物質、核酸−核酸等の、互いに特異的に結合する物質の組の一方を用い、他方をプローブとして用いることができる。より具体的には、タンパク質、ペプチド、DNA、RNA、化学物質、ホルモン、ウイルス、糖等を標的物質又はプローブに用いることができる。
本発明の第1のプローブは、カーボンナノチューブに固定化された金属ナノ粒子の表面に固定化される。本発明に用いるカーボンナノチューブには、単層カーボンナノチューブ、二層カーボンナノチューブ、多層(Multi−walled)カーボンナノチューブ等を用いることができる。カーボンナノチューブに金属ナノ粒子を固定化することにより、カーボンナノチューブを構成するベンゼン環に存在するπ電子の効果により、蛍光がより増強される。
金属ナノ粒子としては、ナノオーダーの粒径を有する金、銀等のプラズモン現象を有する金属の粒子が挙げられる。なかでも、量子ドットの蛍光を増強させる効果が大きいことから、金属ナノ粒子は、金の粒子であることが好ましい。プラズモン現象とは、金属中の自由電子が集団的に振動して擬似的な粒子として振る舞う現象を意味する。
金平糖状金属ナノ粒子とは、表面に金平糖状の凹凸を有する金属ナノ粒子であり、海胆状(urchin−like)金属ナノ粒子ともいう。表面に凹凸を有するか否かは、例えば、透過型電子顕微鏡(TEM)で観察することにより確認することができる。通常の金属ナノ粒子(表面が滑らかな金属ナノ粒子)がほぼ球状であるのに対し、金平糖状金属ナノ粒子は、金平糖又は海胆のような形状である。金平糖状金属ナノ粒子は、例えば、10mLの10mM HEPES緩衝液(pH7.4)に250μLの20mM塩化金酸溶液を添加した後、溶液の色が黄色から濁った青に変わるまで室温で30分間静置することにより調製することができる。
量子ドットとは、直径が2〜10nm程度の量子井戸構造を有するナノ結晶である。量子ドットには、コア構造のみのものと、コア/シェル構造のものが知られている。前者の例としては、CdS、CdSe、CdTe、CdSeTe等のCd系量子ドット;PbS、PbSe等のPb系量子ドット;ZnSe、ZnTe等のZn系量子ドット等が知られている。後者の例としてはCdSe/ZnS、CdSe/CdS/ZnS、CdSe/ZnSe/ZnS、GaAs/AlGaAs等の量子ドットが知られている。本実施形態においては、これらのいずれの量子ドットも使用することができる。
金属ナノ粒子及び量子ドットへのプローブの固定方法は特に限定されないが、例えば、金属ナノ粒子又は量子ドットの表面にアミノ基、カルボキシ基、チオール基等の官能基を導入し、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(EDC)、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)、スクシンイミジル−4−(N−マレイミドメチル)シクロヘキサン−1−カルボキシレート(SMCC)等の化学架橋剤を用いてプローブを固定することができる。金属ナノ粒子又は量子ドットの表面に官能基を導入する方法としては、例えば、金属ナノ粒子又は量子ドットを、8−メルカプトオクタン酸、システアミン等の両親媒性のチオール化合物と反応させる方法等が挙げられる。金属ナノ粒子又は量子ドットの表面に官能基を導入する際、8−メルカプトオクタン酸を用いるとカルボキシ基を導入することができ、システアミンを用いるとアミノ基を導入することができる。本発明に使用するプローブの種類に基づいて、カルボキシ基、アミノ基、チオール基等の官能基を適宜選択することができる。
インキュベーション工程では、試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300及び第2のプローブ61を固定化した量子ドット60を添加してインキュベーションする。この工程により、試料中に標的物質が存在する場合には、標的物質、第1のプローブ及び第2のプローブが結合し、金属ナノ粒子及び量子ドットが近接する。金属ナノ粒子及び量子ドットの量は適宜設定すればよい。インキュベーション温度は、標的物質やプローブに応じて適宜選択できる。インキュベーション時間は、標的物質、第1のプローブ及び第2のプローブの結合が平衡に達するのに要する時間に設定すればよく、例えば1時間である。
蛍光測定工程では、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する。測定には、分光蛍光光度計等の一般的な蛍光測定機器を用いることができる。より具体的には、インキュベーション工程後の試料及び陰性対照に対して、量子ドットの励起光を照射し、発生する蛍光強度を測定すればよい。
判定工程では、蛍光測定工程において測定された蛍光強度に基づいて、試料中に標的物質が存在するか否かを判定する。具体的には、試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する。また、上記したように、量子ドットとして可視光領域の蛍光を発するものを使用した場合には、蛍光測定機器を使わなくても肉眼で観察することにより、蛍光を検出することも可能である。そして、肉眼で蛍光強度の増強に基づいて、標的物質の存在又は不存在を判定することができる。
試料中の標的物質を定量する方法は、基本的には試料中の標的物質50を検出する方法と同様であり、試料と共に既知濃度の標的物質50を含む複数の標準試料を用いる点が異なる。具体的には、試料及び既知濃度の標的物質50を含む複数の標準試料のそれぞれに第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300及び第2のプローブ61を固定化した量子ドット60を添加して、上記と同様のインキュベーション工程及び蛍光測定工程を行う。続いて、次に説明する定量工程を行う。
定量工程では、試料中の量子ドットの蛍光強度を、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度と比較することにより、試料中の標的物質の存在量を求める。例えば、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度をもとに検量線を作成し、試料中の量子ドットの蛍光強度をこの検量線に当てはめることにより、試料中の標的物質の濃度を求めることができる。
一実施形態において、試料中の標的物質の検出又は定量用キットは、第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300、及び、第2のプローブ61を固定化した量子ドット60を含む。上記第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300、及び、上記第2のプローブ61を固定化した量子ドット60は、溶液又は懸濁液の状態で供給されてもよいし、乾燥状態で供給され、使用時にバッファーに溶解又は懸濁させるものであってもよい。上記第1のプローブ固定化カーボンナノチューブ300及び上記第2のプローブ61を固定化した量子ドット60を用いて、上記のインキュベーション工程、蛍光検出工程、判定工程及び定量工程を実施することにより、試料中の標的物質を検出又は定量することができる。
HAuCl4・3H2O(0.01mmol、Sigma−Aldrich社製)と酸処理した多層カーボンナノチューブ(2mg、Sigma−Aldrich社製)を蒸留水(30mL)に入れ、30分間超音波処理によって分散し、CNT溶液を得た。得られたCNT溶液(600μL)を、没食子酸(0.01M、Sigma−Aldrich社製)とイソフラボン(10mg、韓国産豆から直接抽出したもの)の混合液(10mL)に入れて1時間激しく撹拌した。撹拌後、13,000rpmで10分間遠心分離を行い、上澄みを除去し、粉末状態のAuCNTを得た。
1.抗HA抗体固定化AuCNTの作製
得られたAuCNT(1mg)を蒸留水(10mL)に入れ、5分間超音波処理によって分散し、AuCNT溶液を得た。金ナノ粒子の表面にアミノ基を導入するため、システアミン(0.01M、1mL)をAuCNT溶液に添加し、30分間撹拌してから13,000rpmで10分間遠心分離を行い、上澄みを除去し、アミン処理したAuCNTを得た。一方、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC;100μL、10mM、Sigma−Aldrich社製)とN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS;100μL、10mM、Sigma−Aldrich社製)に、抗ヘマグルチニン(HA)抗体(1μL、Ab66189、Abcam社製)を入れ、30分間反応し、抗体溶液を得た。得られた抗体溶液にアミン処理したAuCNT(1mg/mL、30μL)を混合し、3時間反応を行った。
抗HA抗体固定化AuCNTの作製と同様の操作によって、CdTeの表面に抗HA抗体(Ab66189、Abcam社製)を固定化させた。
抗HA抗体固定化AuCNT及び抗HA抗体固定化CdTeを混合した後、96ウエルプレートに加え、インフルエンザウイルス(A/Beijing/262/95、H1N1型、Sino Biological Inc社製)を添加後、1時間反応を行った。励起波長380nm、発光波長518nmで蛍光強度を測定した。
1.抗NA抗体固定化AuCNTの作製
得られたAuCNT(1mg)を蒸留水(10mL)に入れ、5分間超音波処理によって分散し、AuCNT溶液を得た。金ナノ粒子の表面にアミノ基を導入するため、システアミン(0.01M、1mL)をAuCNT溶液に添加し、30分間撹拌してから13,000rpmで10分間遠心分離を行い、上澄みを除去し、アミン処理したAuCNTを得た。一方、1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDC;100μL、10mM、Sigma−Aldrich社製)とN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS;100μL、10mM、Sigma−Aldrich社製)に、抗ノイラミニダーゼ(NA)抗体(1μL、A/New Caledonia/20/1999、H1N1型、Cosmo bio社製)を入れ、30分間反応し、抗体溶液を得た。得られた抗体溶液にアミン処理したAuCNT(1mg/mL、30μL)を混合し、3時間反応を行った。
抗NA抗体固定化AuCNTの作製と同様の操作によって、CdTeの表面に抗HA抗体(Ab66189、Abcam社製)を固定化させた。
抗NA抗体固定化AuCNT及び抗HA抗体固定化CdTeを混合した後、96ウエルプレートに加え、インフルエンザウイルス(A/New Caledonia/20/99IvR116、H1N1型、Sino Biological Inc社製)を添加後、1時間反応を行った。励起波長380nm、発光波長518nmで蛍光強度を測定した。
紫外可視光分光光度計(infinite F500、TECAN社製)を用いて、AuCNTの吸光度を測定した結果を図3に示す。なお、図3において、横軸は波長(nm)を示し、縦軸は吸光度を示す。図3に示すように、実施例1で得られたAuCNTは、約550nmの波長において金ナノ粒子表面プラズモン共鳴による吸光ピークが観測された。また、カーボンナノチューブ(CNT)を用いて同様に吸光度を測定すると、約550nmの波長における吸光ピークは観測されなかった。
粉末X線回折装置(RINT ULTIMA、Rigaku社製)を用いて、AuCNTのX線回折パターンを測定した結果を図4に示す。なお、図4において、横軸は2θを示し、縦軸は強度を示す。図4に示すように、カーボンナノチューブ(CNT)では、(002)面のみのパターンが観測されたが、実施例1で得られたAuCNTでは、金ナノ粒子による多様な回折パターンが観測された。特に、炭素は金に比べて結晶性が低いので、回折パターンの強度が弱いことが確認できた。
透過型電子顕微鏡(JEM−2100F、JEOL社製)を用いて、カーボンナノチューブ(CNT)及びAuCNTを観察した結果を図5A、図5B及び図5Cに示す。カーボンナノチューブの場合は、図5Aに示すように、直径180〜200nm、長さ数マイクロメートルの透明なチューブ構造を示す像が得られた。一方、AuCNTの場合は、図5B及び図5Cに示すように、透明なチューブに直径10〜100nmの黒色の粒子が固定されている像が得られた。さらに高い拡大倍率の像によれば、図5Bに示された黒色の粒子は、複数の金ナノ粒子の凝集体であり、個々の金ナノ粒子の粒子径は10〜20nmであった。図5Cに示すAuCNTでは、図5Bに示すAuCNTと比較して、より小さな金ナノ粒子がカーボンナノチューブに数多く固定化されていた。
実施例1で得られたアミン処理したAuCNTについて、赤外吸収スペクトルを測定した結果を図6に示す。なお、図6において、横軸は吸収率(%)を示し、縦軸は波数(cm−1)を示す。図6に示すように、波数1450〜1580cm−1付近において、カーボンナノチューブを構成するベンゼン環(C6H6)の炭素−炭素二重結合の伸縮振動エネルギーを示す赤外吸収ピークが観測された。また、波数3400〜3500cm−1付近において、NH振動エネルギーを示す赤外吸収ピークが観測された。なお、実施例1では、金ナノ粒子を固定化したカーボンナノチューブとシステアミンとの反応により、システアミンのチオール基が金ナノ粒子表面に結合し、カーボンナノチューブに金ナノ粒子を介してアミノ基が導入される。
実施例1で得られた抗HA抗体固定化AuCNTと抗HA抗体を固定化していないAuCNTとを用いて、それぞれELISA解析を行った。結果を図7Aに示す。抗HA抗体固定化AuCNT(HA Ab/AuCNT)の吸光度は、抗HA抗体を固定化していないAuCNTの吸光度と比較して約4倍であり、抗HA抗体の抗原特異性が確認できた。また、抗原を添加しない場合、吸光度は検出できなかった。また、実施例2で得られた抗NA抗体固定化AuCNTを用いて、同様にELISA解析を行った。結果を図7Bに示す。抗NA抗体固定化AuCNTの場合(NA Ab/AuCNT)も、抗NA抗体の抗原特異性が確認できた。
Claims (11)
- 試料中の標的物質を検出する方法であって、
試料及び標的物質を含まない陰性対照のそれぞれに、第1のプローブ及び第2のプローブを添加してインキュベーションするインキュベーション工程であって、第1のプローブは、カーボンナノチューブに固定された金属ナノ粒子に結合され、第2のプローブは、量子ドットに結合されている、工程と、
インキュベーション工程後の試料及び陰性対照中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度が、陰性対照中の量子ドットの蛍光強度と比較して強い場合に、試料中に標的物質が存在すると判定する判定工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、前記標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが前記標的物質と結合することにより、前記金属ナノ粒子及び前記量子ドットが近接し、それにより前記量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。 - 試料中の標的物質を定量する方法であって、
試料及び既知濃度の標的物質を含む複数の標準試料のそれぞれに、第1のプローブ及び第2のプローブを添加してインキュベーションするインキュベーション工程であって、第1のプローブは、カーボンナノチューブに固定された金属ナノ粒子に結合され、第2のプローブは、量子ドットに結合されている、工程と、
インキュベーション工程後の試料及び複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度を測定する蛍光測定工程と、
試料中の量子ドットの蛍光強度を、複数の標準試料中の量子ドットの蛍光強度と比較して、試料中の標的物質を定量する定量工程と、
を含み、
第1のプローブ及び第2のプローブは、前記標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが前記標的物質と結合することにより、前記金属ナノ粒子及び前記量子ドットが近接し、それにより前記量子ドットの蛍光強度が増強する、方法。 - 前記金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 試料中の標的物質の検出又は定量用キットであって、
第1のプローブ及び第2のプローブとを含み、
第1のプローブは、カーボンナノチューブに固定された金属ナノ粒子に結合され、
第2のプローブは、量子ドットに結合され、
第1のプローブ及び第2のプローブは、前記標的物質と結合するが互いに結合せず、第1のプローブ及び第2のプローブが前記標的物質と結合することにより、前記金属ナノ粒子及び前記量子ドットが近接し、それにより前記量子ドットの蛍光強度が増強する、キット。 - 前記金属ナノ粒子は、金平糖状金属ナノ粒子である、請求項7に記載のキット。
- 前記金属ナノ粒子は、金ナノ粒子である、請求項7又は8に記載のキット。
- 前記量子ドットは、可視光領域の蛍光を発するものである、請求項7〜9のいずれか一項に記載のキット。
- 第1のプローブ及び第2のプローブは、抗原、抗体、レクチン、糖、レセプター、リガンド、アプタマー又は核酸である、請求項7〜10のいずれか一項に記載のキット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2014025431 | 2014-02-13 | ||
JP2014025431 | 2014-02-13 | ||
PCT/JP2015/053572 WO2015122391A1 (ja) | 2014-02-13 | 2015-02-10 | 量子ドット蛍光増強免疫測定法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2015122391A1 true JPWO2015122391A1 (ja) | 2017-03-30 |
JP6593840B2 JP6593840B2 (ja) | 2019-10-23 |
Family
ID=53800134
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015562818A Expired - Fee Related JP6593840B2 (ja) | 2014-02-13 | 2015-02-10 | 量子ドット蛍光増強免疫測定法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP6593840B2 (ja) |
WO (1) | WO2015122391A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106950206B (zh) * | 2017-03-01 | 2020-03-31 | 南京医科大学 | 一种基于核酸适配体的荧光传感器检测腺苷的方法 |
KR102098030B1 (ko) * | 2017-12-11 | 2020-04-07 | 주식회사 딕스젠 | 결핵진단용 조성물 및 광학적 특성 변화에 기반한 결핵 진단방법 |
WO2019117585A2 (ko) * | 2017-12-11 | 2019-06-20 | 주식회사 딕스젠 | 결핵진단용 조성물 및 광학적 특성 변화에 기반한 결핵 진단방법 |
CN113376130B (zh) * | 2021-05-14 | 2024-06-14 | 南京师范大学 | 用于检测氨苄青霉素残留的荧光开启式探针及其制备方法和应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003322653A (ja) * | 2002-05-07 | 2003-11-14 | Toshiba Corp | プローブ固定支持体及びプローブ固定担体 |
JP2007234962A (ja) * | 2006-03-02 | 2007-09-13 | Fujitsu Ltd | 量子ドットデバイスの製造方法及びその方法で作製したデバイスからなる集積回路 |
US20090004117A1 (en) * | 2006-01-04 | 2009-01-01 | Jianghong Rao | Self-Illiminating Dot Systems and Methods of Use Thereof |
US20120178640A1 (en) * | 2010-08-31 | 2012-07-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Nanotube Array for Optical Detection of Protein-Protein Interactions |
JP2014021016A (ja) * | 2012-07-20 | 2014-02-03 | National Univ Corp Shizuoka Univ | 試料中の標的物質を検出又は定量する方法及びキット |
-
2015
- 2015-02-10 JP JP2015562818A patent/JP6593840B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2015-02-10 WO PCT/JP2015/053572 patent/WO2015122391A1/ja active Application Filing
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2003322653A (ja) * | 2002-05-07 | 2003-11-14 | Toshiba Corp | プローブ固定支持体及びプローブ固定担体 |
US20090004117A1 (en) * | 2006-01-04 | 2009-01-01 | Jianghong Rao | Self-Illiminating Dot Systems and Methods of Use Thereof |
JP2007234962A (ja) * | 2006-03-02 | 2007-09-13 | Fujitsu Ltd | 量子ドットデバイスの製造方法及びその方法で作製したデバイスからなる集積回路 |
US20120178640A1 (en) * | 2010-08-31 | 2012-07-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Nanotube Array for Optical Detection of Protein-Protein Interactions |
JP2014021016A (ja) * | 2012-07-20 | 2014-02-03 | National Univ Corp Shizuoka Univ | 試料中の標的物質を検出又は定量する方法及びキット |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
DU,D.: "Covalent coupling of organophosphorus hydrolase loaded quantum dots to carbon nanotube/Au nanocompos", BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS, vol. 25, JPN6015016977, 2010, pages 1370-1375 * |
GUIFEN JIE: "Electrochemiluminescence immunosensor based on nanocomposite film of CdS quantum dots-carbon nanotub", ELECTROCHEMISTRY COMMUNICATIONS, vol. 12, JPN6015016978, 2010, pages 22-26 * |
LEE,J.: "A plasmon-assisted fluoro-immunoassay using gold nanoparticle-decorated carbon nanotubes for monitor", BIOSENSORS ANDBIOELECTRONICS, vol. 64, JPN6015016979, 16 September 2014 (2014-09-16), pages 311-317 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6593840B2 (ja) | 2019-10-23 |
WO2015122391A1 (ja) | 2015-08-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Chen et al. | SERS-based lateral flow immunoassay for sensitive and simultaneous detection of anti-SARS-CoV-2 IgM and IgG antibodies by using gap-enhanced Raman nanotags | |
Xu et al. | Ultrasensitive detection of severe fever with thrombocytopenia syndrome virus based on immunofluorescent carbon dots/SiO2 nanosphere-based lateral flow assay | |
Wang et al. | Surface-enhanced electrochemiluminescence of Ru@ SiO2 for ultrasensitive detection of carcinoembryonic antigen | |
Hassanpour et al. | Recent trends in rapid detection of influenza infections by bio and nanobiosensor | |
Wang et al. | Application of Au based nanomaterials in analytical science | |
Achadu et al. | Molybdenum trioxide nanocubes aligned on a graphene oxide substrate for the detection of norovirus by surface-enhanced Raman scattering | |
Ko et al. | SERS-based immunoassay of tumor marker VEGF using DNA aptamers and silica-encapsulated hollow gold nanospheres | |
Kim et al. | Applications, techniques, and microfluidic interfacing for nanoscale biosensing | |
Ahmed et al. | Optoelectronic fowl adenovirus detection based on local electric field enhancement on graphene quantum dots and gold nanobundle hybrid | |
JP6196159B2 (ja) | 金属錯体量子結晶及びそれを用いる生化学物質の表面増強ラマン散乱(sers)分析法 | |
JP6083849B2 (ja) | 試料中の標的物質を検出又は定量する方法及びキット | |
JP6593840B2 (ja) | 量子ドット蛍光増強免疫測定法 | |
Zhao et al. | Highly sensitive microfluidic detection of carcinoembryonic antigen via a synergetic fluorescence enhancement strategy based on the micro/nanostructure optimization of ZnO nanorod arrays and in situ ZIF-8 coating | |
Feng et al. | A magnetic SERS immunosensor for highly sensitive and selective detection of human carboxylesterase 1 in human serum samples | |
Tessaro et al. | A systematic review on gold nanoparticles based-optical biosensors for Influenza virus detection | |
Ahmed et al. | Amplified visual immunosensor integrated with nanozyme for ultrasensitive detection of avian influenza virus | |
Xiao et al. | Single functional magnetic-bead as universal biosensing platform for trace analyte detection using SERS-nanobioprobe | |
Zhao et al. | Chiroplasmonic assemblies of gold nanoparticles as a novel method for sensitive detection of alpha-fetoprotein | |
Wu et al. | AIEgens barcodes combined with AIEgens nanobeads for high-sensitivity multiplexed detection | |
Xiang et al. | Rapid self-assembly of Au nanoparticles on rigid mesoporous yeast-based microspheres for sensitive immunoassay | |
Pengcheng et al. | Recent advances of lateral flow immunoassay for bacterial detection: Capture-antibody-independent strategies and high-sensitivity detection technologies | |
Dai et al. | Label-free fluorescence quantitative detection platform on plasmonic silica photonic crystal microsphere array | |
Li et al. | Detection of pathogen based on the catalytic growth of gold nanocrystals | |
Zheng et al. | Dual-color MoS2@ QD nanosheets mediated dual-mode lateral flow immunoassay for flexible and ultrasensitive detection of multiple drug residues | |
He et al. | Smartphone conducted DNA portable quantitative detection platform based on photonic crystals chip and magnetic nanoparticles |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20160729 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180209 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181030 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20181030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181030 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20181030 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20180209 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20190226 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20190522 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190523 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20190522 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190903 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190918 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6593840 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |