JP2013512259A

JP2013512259A - ２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ３

Info

Publication number: JP2013512259A
Application number: JP2012541222A
Authority: JP
Inventors: ヘクターエフ．デルカ; パウエルグジィヴァチュ; ローリエイ．プラム; マーガレットクラーゲット−デイム
Original assignee: ウイスコンシンアラムニリサーチファンデーション
Priority date: 2009-11-30
Filing date: 2010-11-29
Publication date: 2013-04-11
Also published as: CA2781889A1; EP2509943A1; MX2012005936A; EP2509943A4; US20110294764A1; WO2011066506A1; AU2010324596A1

Abstract

本発明は、式Ｉの化合物を提供し、式中、Ｘ^１およびＸ^２は独立してＨまたはヒドロキシ保護基から選択される。当該化合物は薬学的組成物の調製に使用され得、また様々な生物学的状態の治療に有用である。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２００９年１１月３０日に出願された米国仮出願第６１／２６４，９９０号の優先権を主張し、その開示全体が引用により本明細書に組み込まれる。

分野
本技術は、ビタミンＤ化合物、および、より具体的には２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３およびその誘導体、ならびに本化合物を含有する薬学的製剤に関する。本技術はまた、様々な疾患の治療における２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３の使用、および様々な疾患の治療に使用するための医用薬剤の調製に関する。

背景
天然のホルモン、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（１α，２５−ジヒドロキシコレカルシフェロールおよびカルシトリオールとも称する）およびそのエルゴステロール系の類似体、すなわち１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_２は、動物およびヒトにおいてカルシウム恒常性に関して高い効力をもつレギュレーターであることが知られており、それらの細胞分化活性もまた、実証されている(Ostrem et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2610 (1987)（非特許文献１）)。これらの代謝産物の多くの化学構造類似体が調製および試験されてきたが、その例として１α−ヒドロキシビタミンＤ_３、１α−ヒドロキシビタミンＤ_２、様々な側鎖同族化(homologated)ビタミン類、およびフッ素化類似体が挙げられる。これらの化合物の一部は、細胞分化活性およびカルシウム調節活性において、興味深い分離を示す。この活性の差異は、腎性骨ジストロフィー、ビタミンＤ−抵抗性くる病、骨粗しょう症、乾癬、およびある種の悪性腫瘍などの様々な疾患の治療に有用であり得る。１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３の化学構造、およびこの化合物での炭素原子を示すために使用される番号付けシステムを以下に示す。

Ostrem et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2610 (1987)

概要
本技術は、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３および関連する化合物、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３を含む薬学的製剤、本化合物を使用して様々な病状を治療する方法、ならびに様々な病状を治療するための医用薬剤の調製における本化合物の使用を提供する。

したがって１つの態様では、本技術は、以下に示す式Ｉ：

で表される化合物を提供し、式中Ｘ^１およびＸ^２は同一または異なってもよく、独立してＨまたはヒドロキシ保護基から選択される。いくつかの実施形態では、Ｘ^１およびＸ^２が共にシリル基などのヒドロキシ保護基である。当該実施形態では、Ｘ^１およびＸ^２は共にｔ−ブチルジメチルシリル基である。他の実施形態では、前記化合物が以下に示す式ＩＡ：

で表される２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３であるように、Ｘ^１およびＸ^２は共にＨである。

当該実施形態では、式ＩＡの化合物は式ＩＢの化合物であり、以下に示す化学構造：

で表される。

本技術の化合物は、ビタミンＤ受容体との強い結合性、強力な細胞分化活性、さらには低い〜非常に低いカルシウム血症活性を含む、高度に有利な生物活性パターンを示す。したがって本化合物は、ある生物学的状態を患う対象の治療方法において、および当該生物学的状態を治療する医用薬剤の調製方法において使用され得る。本方法は、本技術の有効量の化合物を対象に投与することを含む。生物学的状態は乾癬；白血病；大腸癌；乳癌；前立腺癌；多発性硬化症；狼瘡；糖尿病；宿主対移植片反応；臓器移植拒否反応；関節リウマチ、ぜんそく、もしくは炎症性腸疾患から選択される炎症性疾患；しわ、十分な皮膚のハリ不足、十分な皮膚水分の不足、もしくは不十分な皮脂分泌から選択される皮膚状態；腎性骨ジストロフィー；または骨粗しょう症から選択される。

本技術の化合物は、有効量で上記疾患および障害を治療するための、また場合により薬学的に許容可能な担体を含む組成物で存在してもよい。いくつかの実施形態では、化合物の含有量は、組成物１グラム当たり約０．０１μｇ〜約１ｍｇ、好ましくは組成物１グラム当たり約０．１μｇ〜約５００μｇであり、また約０．０１μｇ／日〜約１ｍｇ／日、好ましくは約０．１μｇ／日〜約５００μｇ／日の用量で、局所、経皮、経口、または非経口投与されてもよい。

本技術のさらなる特徴と有効性は、以下の詳細な説明と図面から明らかであろう。

図１から図５は、天然ホルモン１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３（図では「１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３」と称す）と比較した様々な２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３（図では「２６Ｎ」と称す）の生物活性を例示する。

２６Ｎおよび天然ホルモン１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３間の、核ホルモン受容体との拮抗的結合性のグラフを示す。２６Ｎは核ビタミンＤ受容体に、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と同じ親和性で結合する。２６Ｎと１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の濃度の関数としてＨＬ−６０細胞分化パーセントを比較したグラフである。２６Ｎは、ＨＬ−６０細胞の単球への分化を引き起こすことに関して、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３と同じ効力をもつ。２６Ｎと１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３のインビボ転写活性を比較したグラフである。２６Ｎは、２４−ヒドロキシラーゼ遺伝子の転写を増加させることに関して、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の約１対数分、効力が弱い。図４Ａおよび４Ｂは、ラットにおいて、２６Ｎと１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の骨カルシウム動員活性を比較した棒グラフである。２６Ｎは、骨カルシウムの貯蔵を放出することに関して、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の効力のおよそ３０分の１である。図５Ａおよび５Ｂは、２６Ｎと１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の腸カルシウム輸送活性を比較した棒グラフである。２６Ｎは、ラット消化管での活性なカルシウム輸送を促進することに関して、１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３の効力の少なくとも１０分の１である。

詳細な説明
２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３を合成し、試験し、そして本明細書に記載の様々な生物学的状態を治療するのに有効であることを見いだした。化学構造的に、本化合物は以下に示す式ＩＡ：

で表される。

２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３の調製は、適した二環式のＷｉｎｄａｕｓ−Ｇｒｕｎｄｍａｎｎ型ケトン（ＩＩ）をアリルホスフィンオキシドＩＩＩと縮合し、次いで脱保護すること（Ｙ_１およびＹ_２基の除去）により成し遂げられ得る。

ホスフィンオキシドＩＩＩでは、Ｙ_１およびＹ_２はシリル保護基などのヒドロキシ−保護基である。ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）基は特に有用なヒドロキシ−保護基の一例である。上記過程は、多くのビタミンＤ化合物の調製に効果的に適用される収束的合成コンセプトの適用を表す(すべてが引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのようにあらゆる目的で本明細書に組み入れられる、Lythgoe et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 590 (1978); Lythgoe, Chem. Soc. Rev. 9, 449 (1983); Toh et al., J. Org. Chem. 48, 1414 (1983); Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986); Sardina et al., J. Org. Chem. 51, 1264 (1986); J. Org. Chem. 51, 1269 (1986); DeLuca et al., 米国特許第５，０８６，１９１号; DeLuca et al., 米国特許第５，５３６，７１３号;および DeLuca et al., 米国特許第５，８４３，９２８号を参照のこと）。

ホスフィンオキシドＩＩＩは、Sicinski et al., J. Med. Chem., 41, 4662 (1998), DeLuca et al., 米国特許第５，８４３，９２８号; Perlman et al., Tetrahedron Lett. 32, 7663 (1991);および DeLuca et al., 米国特許第５，０８６，１９１号に記載された手順により調製され得る便利な試薬である。スキーム１は、引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのように本明細書に組み入れられる米国特許第５，８４３，９２８号で概説されたホスフィンオキシドＩＩＩを合成する基本手順を示す。

化学構造ＩＩのヒドラインダノン（Hydraindanones）は既知の方法のわずかな変更により調製され得、これらの方法は当業者に容易に理解され、本明細書に記載される。ビタミンＤ類似体のための二環式のケトンを合成するため使用される方法の特定の例が、Mincione et al., Synth. Commun 19, 723, (1989); and Peterson et al., J. Org. Chem. 51, 1948, (1986)に記載される。２−アルキリデン−１９−ノル−ビタミンＤ化合物を合成するための全過程が、引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのようにあらゆる目的で本明細書に組み入れられる米国特許第５，８４３，９２８号に例示および記載される。ヒドリナノンＩＩ(hydrinanoneII)の調製の詳細はスキーム２および本明細書の実施例に見られる。

本明細書に使用される場合、「ヒドロキシ−保護基」という用語は、ヒドロキシ（−ＯＨ）官能基の一時的な保護に通常使用されるあらゆる基、例えばこれに限定されないがアルコキシカルボニル、アシル、アルキルシリルまたはアルキルアリールシリル基（以降、単に「シリル」基と称する）、およびアルコキシアルキル基など、を意味する。「アルキル」という用語は、炭素数１〜６の直鎖状または分岐状飽和炭化水素基を表し、また環式を含む。アルコキシカルボニル保護基は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、またはアリルオキシカルボニルなどのアルキル−Ｏ−ＣＯ−基である。「アシル」という用語は、炭素数１〜６のアルカノイル基、その異性体のすべてについて、あるいは炭素数１〜６のカルボキシアルカノイル基、例えばオキサリル基、マロニル基、スクシニル基、グルタリル基、あるいは芳香族アシル基、例えばベンゾイル、またはハロ、ニトロ、もしくはアルキル置換ベンゾイル基を示す。アルコキシアルキル保護基は、メトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエトキシメチル、またはテトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルなどの基である。シリル−保護基は、好ましくはトリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ジブチルメチルシリル、ジフェニルメチルシリル、フェニルジメチルシリル、ジフェニル−ｔ−ブチルシリル、および類似するアルキル化シリル基である。「アリール」という用語は、フェニル−、アルキル−、ニトロ−、またはハロ−置換フェニル基を意味する。ヒドロキシ官能性に関する保護基の広範なリストが、これに明記された手順を用いて付加または除去してもよく、かつ引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのようにあらゆる目的で本明細書に組み入れられるProtective Groups in Organic Synthesis, Greene, T.W.; Wuts, P. G. M., John Wiley & Sons, New York, NY, (3rd Edition, 1999)に見出され得る。

「保護ヒドロキシ」基は、ヒドロキシ官能基、例えば上記定義したシリル、アルコキシアルキル、アシル、またはアルコキシカルボニル基の、一時的または永久的な保護のために通常使用される上記基のいずれかにより誘導または保護されるヒドロキシ基である。

上記化合物は、所望の、高度に有利な生物活性パターンを示す。本化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較して、ビタミンＤ受容体と比較的強く結合するがごく低い腸カルシウム輸送活性をもつという特徴を有し、また１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３と比較して、骨からカルシウムを動員する能力が低い。それゆえ本化合物は、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ_３が顕著なカルシウム血症活性を示す用量で、たとえあったとしてもほんの少しのカルシウム血症活性を有することを特徴とする。したがって、腎性骨ジストロフィーの二次性副甲状腺機能亢進症を抑制する治療に有効であり得る。

本技術の化合物はまた、特に免疫系の平衡失調、例えば多発性硬化症、狼瘡、糖尿病、宿主対移植片反応、および臓器移植拒否反応を含む自己免疫疾患によって特徴付けられる障害の治療および予防に、および、さらには関節リウマチ、ぜんそく、ならびに炎症性腸疾患などの炎症性疾患、例えばセリアック病、潰瘍性大腸炎、およびクローン病の治療に好都合である。座瘡、脱毛症、および高血圧症は、本技術の化合物で治療し得る他の病状である。

上記化合物はまた、細胞分化活性が比較的高い特徴を持つ。したがって、本化合物はまた、乾癬治療のための、または特に白血病、大腸癌、乳癌、および前立腺癌に対する抗癌剤としての治療剤を提供する。さらに、その比較的高い細胞分化活性から、本化合物は、しわ、十分な皮膚水分の不足すなわちドライスキン、十分な皮膚のハリ不足すなわち皮膚弛緩、および不十分な皮脂分泌を含む様々な皮膚状態の治療のための治療剤を提供する。本化合物の使用はしたがって、皮膚に保湿をもたらすだけでなく、皮膚のバリア機能もまた改善する。

本技術の化合物は、薬学的に許容可能な担体と組み合わせて本技術の化合物を含む薬学的製剤または医用薬剤を調製するために使用されてもよい。当該薬学的製剤および医用薬剤は、本明細書に記載したような様々な生物学的障害を治療するために使用されてもよい。そのような障害を治療する方法は、典型的には生物学的障害を患う対象に有効量の化合物または該化合物を含有する適当量の薬学的製剤もしくは医用薬剤を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象は哺乳類である。当該実施形態では、哺乳類は、げっ歯類、霊長類、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、クマ、ブタ、ウサギ、またはモルモットから選択される。当該実施形態では、哺乳類はラットまたはマウスである。いくつかの実施形態では、対象は霊長類、例えばいくつかの実施形態ではヒトである。

治療を目的として、式Ｉ、式ＩＡ、および式ＩＢに定義される化合物は、当業者に公知の従来法にしたがって、無害の溶媒中に溶液として、または好適な溶媒もしくは担体中にエマルジョン、懸濁液、もしくは分散液として、または固形担体と共に丸剤、錠剤、もしくはカプセルとして、薬学的用途のために製剤されてもよい。当該あらゆる製剤はまた、安定剤、抗酸化剤、結合剤、着色剤、または乳化剤もしくは味覚修飾剤などの、他の薬学的に許容可能で無毒性の添加剤を含有してもよい。薬学的に許容可能な添加剤および担体は一般に当業者に公知であり、したがって本技術に含まれる。当該添加剤および担体は、例えば引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのようにあらゆる目的で本明細書に組み入れられる"Remingtons Pharmaceutical Sciences" Mack Pub. Co., New Jersey (1991)に記載される。

化合物は、経口、局所、非経口、または経皮的に投与され得る。化合物は、注入によりまたは静脈内注射もしくは好適な滅菌溶液により、または消化管を介して液体もしくは固体投与の形態で、または経皮用途に好適なクリーム、軟膏、パッチ、もしくは同様の媒体の形態で、好都合に投与される。いくつかの実施形態では、化合物０．００１μｇ〜約１ｍｇ／日の投与量が、治療目的としては適切である。当該実施形態では、適切で有効な投与量は、化合物０．０１μｇ〜１ｍｇ／日であってもよい。当該他の実施形態では、適切で有効な投与量は、化合物０．１μｇ〜５００μｇ／日であってもよい。当該投与量は、治療すべき疾患または症状の種類、疾患及び症状の重症度、および当業者によってよく理解されるような対象の反応にしたがって調整される。化合物は単独で、または別の活性ビタミンＤ化合物と共に好適に投与されてもよい。

本技術で使用する組成物は、活性成分としての有効量の２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３および好適な担体を含む。本技術のいくつかの実施形態による使用のための化合物の有効量は、一般に本明細書に記載のような投与量であり、局所、経皮、経口、経鼻、直腸内、または非経口的に投与されてもよい。

式ＩＡおよび式ＩＢの化合物は、前骨髄球の、正常マクロファージへの分化をもたらすのに十分な量で、好都合に投与され得る。上記記載の用量が好適であり、所定の量を、疾患の重症度、および当業者がよく理解するような対象の症状および反応に対応して調整されるべきであることが理解される。

化合物は、クリーム、ローション、軟膏、エアロゾル、座薬、局所パッチ、丸剤、カプセル、もしくは錠剤として、または薬学的に無害で許容可能な溶媒もしくはオイル中の、溶液、エマルジョン、分散液、もしくは懸濁液の形態で製剤されてもよく、また当該調製物はさらに安定剤、酸化防止剤、乳化剤、着色剤、結合剤、または味覚修飾剤などの他の薬学的に無害または有益な構成成分を含有してもよい。

本技術の製剤は、薬学的に許容可能な担体と共に活性成分を有し、したがって任意で他の治療成分を有する。担体は、製剤の他の成分と適合し、製剤の服用者に有害でないという意味で「許容可能」でなければならない。

経口投与に好適な本技術の製剤は、それぞれが所定量の活性成分を含有する、カプセル、小袋、錠剤、またはトローチ剤のような個別単位の形態；粉末もしくは顆粒の形態；水性液体もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液の形態；または水中油エマルジョンもしくは油中水エマルジョンの形態であってよい。

直腸内投与用の製剤は、活性成分とココアバターなどの担体を組み入れた座薬の形態、または浣腸の形態であってよい。

非経口投与用の製剤は、都合よく、好ましくは服用者の血液と等張である活性成分の滅菌油性調製物または滅菌水性調製物を含む。

局所投与に好適な製剤は、塗抹剤、ローション、塗布剤、水中油または油中水エマルジョン例えばクリーム、軟膏、もしくはペースト、などの液体調製物または半液体調製物；または液滴もしくは噴霧用などの溶液もしくは懸濁液を含む。

経鼻投与に関しては、スプレー缶、ネブライザー、またはアトマイザーを用いて投薬される、粉末剤、自己噴霧剤、またはスプレー剤の吸入が用いられ得る。製剤は、投薬する場合、１０〜１００ミクロンの粒径である。

製剤は、用量単位形態で存在し得、また薬学分野でよく知られるあらゆる方法により調整され得る。「用量単位」という用語は、患者に、活性成分それ自体、または固体もしくは液体の薬学的希釈剤または担体と活性成分との混合物のいずれかを含む物理的または化学的に好適な単位投与量として投与することができる、一元的、すなわち単一の投与量を意味する。

本明細書に引用される全ての参考文献は、引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのようにあらゆる目的で本明細書に明確に組み入れられる。

２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ _３の合成
式Ｉ、式ＩＡ、および式ＩＢの化合物を、スキーム１〜３に示す方法を用いて調製した。スキーム２に示すように、化合物１を、Grywacz et al. (Arch. Biochem. Biophys. 460, 274-284, 2007)に記載の、ビタミンＤ_２のオゾン分解、その後ホウ化水素による還元により得る。ジアルコール１を、ピリジン中で塩化ベンゾイルおよびＤＭＡＰにより処理し、次いでエタノール中でＫＯＨにより処理してベンゾイル化合物２を得た。化合物２を、ジクロロメタンおよびＤＭＳＯ中のＴＥＡ存在下で、三酸化硫黄ピリジン錯体により酸化し、化合物３を得た。化合物３を２０位で水酸化テトラブチルアンモニウムにより処理してエピマー化し、次いで水素化ホウ素ナトリウムで還元して化合物４を得た。後者の化合物を、ジクロロメタン中で塩化トシル、ＴＥＡ、およびＤＭＡＰで処理してトシレートに転化し化合物５を得た。１Ｍ硫酸で後処理した後、トシレート５をＬｉ_２ＣｕＣｌ_４存在下で塩化ブチルマグネシウムと反応させて遊離アルコール７を得た。化合物７を、４−メチルモルホリンオキシドの存在下で、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムを用いて酸化させて化合物８にした。

環−Ａホスフィンオキシド化合物９をスキーム１に示すようにおよび前述のように合成した。スキーム３に示すように、上記特許文献に明記されたフェニルリチウムを用いて化合物８をＡ−環ホスホニウム塩と結合させて化合物１０、ｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）保護ビタミン誘導体を生成した。アセトニトリル（ＭｅＣＮ）中で、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中で、フッ化水素酸（ＨＦ）を用いて化合物１０から保護基を除去し、所望の生成物、化合物１１（式ＩＡの化合物）を得、これを５０％酢酸エチルのヘキサンを用いてＴＬＣにより検出した。この生成物を以下に記載のように完全に特性を決定した。

ａ）１．Ｏ_３、ピリジン、ＭｅＯＨ；２．ＮａＢＨ_４（１、７５％）
ｂ）１．ＢｚＣｌ、ＤＭＡＰ、ピリジン；２．ＫＯＨ、ＥｔＯＨ（２、９３％）
ｃ）ＳＯ_３−ピリジン、ＴＥＡ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＤＭＳＯ（３、８３％）
ｄ）１．ｎ−Ｂｕ_４ＮＯＨ、ＣＨ_２Ｃｌ_２；２．ＮａＢＨ_４、ＥｔＯＨ、ＴＨＦ（４、８０％）
ｅ）ＴｓＣｌ、ＴＥＡ、ＤＭＡＰ、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５、９１％）
ｆ）ｎ−ＢｕＭｇＣｌ、Ｌｉ_２ＣｕＣｌ_４、ＴＨＦ−７８℃（７、６７％）
ｇ）ＮＭＯ、Ｐｒ_４ＮＲｕＯ_４、４オングストロームのシーブ、ＣＨ_２Ｃｌ_２（８、９２％）

（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン−８−オール（１）の調製
オゾンをビタミンＤ_２（３ｇ、７．６ｍｍｏｌ）のメタノール（２５０ｍＬ）およびピリジン（２．４４ｇ、２．５ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）の溶液に５０分間、−７８℃で通過させた。次いで反応混合物を酸素を用いて１５分間フラッシュして残存オゾンを除去し、溶液をＮａＢＨ_４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）で処理した。２０分後、ＮａＢＨ_４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏ１）の第二の部分を添加して、その混合物を室温まで加熱した。次いで、ＮａＢＨ_４（０．７５ｇ、２０ｍｍｏｌ）の第三の部分を添加し、反応混合物を１８時間撹拌した。反応を水（４０ｍＬ）で冷却停止し、溶液を減圧下で濃縮した。残渣から酢酸エチルで抽出して、複合有機相を１Ｍ塩酸水溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（７５：２５）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、ジオール１（１．２１ｇ、７５％収率）を白色結晶として得た：

。

（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（２）の調製
塩化ベンゾイル（２．４ｇ、２ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）をジオール１（１．２ｇ、５．７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の無水ピリジン溶液（２０ｍＬ）に０℃で添加した。反応混合物を４℃で２４時間撹拌し、塩化メチレン（１００ｍＬ）で希釈し、５％塩酸水溶液、水、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣（３．３９ｇ）をＫＯＨ（１ｇ、１５．５ｍｍｏｌ）の無水エタノール溶液（３０ｍＬ）で室温にて処理した。反応混合物を３時間撹拌後、氷と５％塩酸水溶液をｐＨ＝６になるまで添加した。溶液から酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、複合した有機相を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（７５：２５）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、アルコール２（１．６７ｇ、９３％収率）を無色油として得た：

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（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−ホルミルプレグナン（３）の調製
三酸化硫黄ピリジン錯体（１．９４ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）をアルコール２（６４０ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．４１ｍＬ、１．０２ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン（１０ｍＬ）、および無水ＤＭＳＯ（２ｍＬ）の溶液に０℃にて添加した。反応混合物をアルゴン中で０℃、１時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（９５：５）によるシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィによって精製し、アルデヒド３（５２９ｍｇ、８３％収率）を油として得た：

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（８Ｓ，２０Ｒ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−（ヒドロキシメチル）プレグナン（４）の調製
アルデヒド３（３６４ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（１５ｍＬ）中に溶解し、これに４０％ｎ−Ｂｕ_４ＮＯＨ水溶液（１．４７ｍＬ、１．４５ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物をアルゴン中で室温にて１６時間撹拌し、塩化メチレン（２０ｍＬ）で希釈し、水で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣でヘキサン／酢酸エチル（９５：５）によりシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、約１：２の割合のアルデヒド３、およびその２０−エピマー混合物（２９２ｍｇ、８０％収率）を得た（^１ＨＮＭＲによる）。

このアルデヒド混合物（２９２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、これにＮａＢＨ_４（６４ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）を添加し、次いでエタノール（５ｍＬ）を滴加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌し、その後飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液で冷却停止した。混合物からエーテル（３×２０ｍＬ）で抽出し、複合有機相を水で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（９６：４→８０：２０）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、所望の、純（２０Ｒ）−アルコール４（１６０ｍｇ、５５％収率）を油として、また約１：３の割合の４とその２０−エピマー２（１２６ｍｇ、４３％収率）の混合物を得た（^１ＨＮＭＲによる）：

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（２０Ｒ）−デス−Ａ，Ｂ−８−ベンゾイルオキシ−２０−［（ｐ−トルエンスルホニル）−オキシメチル］プレグナン（５）の調製
撹拌したアルコール４（３９３ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、およびＥｔ_３Ｎ（０．７ｍＬ、０．５１ｇ、５．０４ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン溶液（１０ｍＬ）に、塩化ｐ−トルエンスルホニル（３２０ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を０℃にて添加した。反応混合物を室温まで加熱し（４時間）、さらに２２時間撹拌を継続した。塩化メチレン（６０ｍＬ）を添加してその混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（９５：５）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、トシレート５（５３３ｍｇ、９１％収率）を無色油として得た：

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（８Ｓ，２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−ペンチル−プレグナン−８−オール（７）の調製
マグネシウム削り屑（６２５ｍｇ、２６ｍｍｏｌ）、１−クロロ−ブタン（１．５ｍＬ、１．３ｇ、１４ｍｍｏｌ）、およびヨウ素（２結晶）を無水ＴＨＦ（１３ｍＬ）中で４時間還流した。形成したグリニャール試薬６溶液を−７８℃まで冷却し、これをカニューレを通してトシレート５（１７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（５ｍＬ）に−７８℃にて滴下した。その後、５ｍＬのＬｉ_２ＣｕＣｌ_４溶液［ＬｉＣｌ（乾燥）（１１６ｍｇ、２．７３ｍｍｏｌ）およびＣｕＣｌ_２（乾燥）（１８４ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１３ｍＬ）中への溶解により調製］をカニューレを通して反応混合物に−７８℃にて滴下した。冷却槽から外し、混合物を室温にて２０時間撹拌し、次いで氷（約５０ｇ）を含む１ＭＨ_２ＳＯ_４溶液（１２ｍＬ）に注いだ。混合物から塩化メチレン（３×５０ｍＬ）で抽出し、複合有機層を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣をヘキサン／酢酸エチル（９６：４）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフィを行い、アルコール７（６１ｍｇ、６７％収率）を無色油として得た：）：

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（２０Ｓ）−デス−Ａ，Ｂ−２０−ペンチル−プレグナン−８−オン（８）の調製
４オングストロームのモレキュラーシーブ（１５０ｍｇ）を４−メチルモルホリンオキシド（２０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（０．７ｍＬ）に添加した。混合物を室温にて１５分間撹拌し、過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウム（３ｍｇ、９μｍｏｌ）を添加し、次いで、アルコール７（２１ｍｇ、８３μｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（４００＋４００μＬ）を添加した。得られた懸濁液を室温にて１時間撹拌した。反応混合物をＷａｔｅｒｓ製Ｓｅｐ−Ｐａｋシリカカートリッジ（２ｇ）にて濾過し、さらにジクロロメタンで洗浄した、溶媒を除去後、ケトン８（１９ｍｇ、９２％収率）を無色油として得た：

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（２０Ｓ）−２−メチレン−１９，２６−ジノル−１α−ヒドロキシビタミンＤ _３（１１）の調製
−２０℃で、ホスフィンオキシド9（７３ｍｇ、１２５μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５００μＬ）溶液に、アルゴン中、ＰｈＬｉ（ジ−ｎ−ブチルエテル中１．６Ｍ，１００μＬ，１６０μｍｏｌ）を撹拌しながらゆっくり添加した。溶液が深いオレンジ色に変化した。３０分後、混合物を−７８℃まで冷却し、これに前冷却した（−７８℃）ケトン８（１８ｍｇ、７２μｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（２００＋１００μＬ）をゆっくり添加した。混合物をアルゴン下で−７８℃で４時間および０℃で１８時間撹拌した。酢酸エチルを添加して、有機相をブラインで洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、蒸発させた。残渣をヘキサンに溶解し、Ｗａｔｅｒｓ製Ｓｅｐ−Ｐａｋシリカカートリッジ（２ｇ）に塗布した。カートリッジをヘキサンおよびヘキサン／酢酸エチル（９９．５：０．５）で洗浄し、１９−ノルビタミン誘導体１０（３１．６ｍｇ、７１％収率）を得た。その後Ｓｅｐ−Ｐａｋを酢酸エチルで洗浄し、ジフェニルホスフィンオキシド９（３３ｍｇ）を回収した。

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保護ビタミン１０（３１．５ｍｇ、５１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）およびアセトニトリル（２ｍＬ）に溶解した。４８％ＨＦ水溶液のアセトニトリル溶液（割合１：９、２ｍＬ）を０℃にて添加後、得られた混合物を室温にて６時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を添加後、反応混合物から酢酸エチルで抽出した。複合した有機相をブラインで洗浄し、乾燥させて（Ｎａ_２ＳＯ_４）、減圧下で濃縮した。残渣を２ｍＬのヘキサン／酢酸エチル（９５：５）で希釈し、Ｗａｔｅｒｓ製のＳｅｐ−Ｐａｋシリカカートリッジ（２ｇ）に塗布した。ヘキサン／酢酸エチル（９：１）による溶出、その後の酢酸エチルによる溶出で、粗生成物１１（１７ｍｇ）を得た。ビタミン１１をさらに、順相ＨＰＬＣ［９．４×２５０ｍｍＺｏｒｂａｘＳｉｌカラム、５ｍＬ／分、ヘキサン／２−プロパノール（９：１）溶媒系、Ｒ_ｔ＝６．１３分間］、その後の逆相ＨＰＬＣ［９．４×２５０ｍｍＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ−Ｃ１８カラム、３ｍＬ／分、メタノール／水（９５：５）溶媒系、Ｒ_ｔ＝１４．６９分］により精製し、無色油（１４．２ｍｇ、７２％収率）を得た：

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生物活性
ビタミンＤ受容体結合性
試験材料
タンパク質源
完全長の組換えラット受容体を大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＢＬ２１（ＤＥ３）ＣｏｄｏｎＰｌｕｓＲＩＬ細胞にて発現させ、２つの異なるカラムクロマトグラフィシステムを用いて均一になるまで精製した。第一のシステムは、このタンパク質のＣ末端ヒスチジンタグを利用するニッケルアフィニティレジンであった。このレジンから溶出されたタンパク質をさらにイオン交換クロマトグラフィ（Ｓ−ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ）を用いて精製した。精製タンパク質のアリコートを、液体窒素で急速冷凍し、使用するまで−８０℃で保管した。結合アッセイでの使用のために、タンパク質を、０．１％Ｃｈａｐｓ洗浄剤を含有するＴＥＤＫ_５０（５０ｍＭトリス、１．５ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ７．４、５ｍＭＤＴＴ、１５０ｍＭＫＣｌ）にて希釈した。添加した放射標識リガンドの２０％未満が受容体と結合するように、受容体タンパク質−リガンド濃度を最適化した。

研究用薬物
非標識リガンドをエタノール中に溶解し、その濃度をＵＶ分光光度法（１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３：モル吸光係数＝１８，２００およびλ_ｍａｘ＝２６５ｎｍ；類似体：モル吸光係数＝４２，０００およびλ_ｍａｘ＝２５２ｎｍ）を用いて測定した。放射標識リガンド（^３Ｈ−１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３、約１５９Ｃｉ／ｍｍｏｌｅ）をエタノール中に添加して最終濃度１ｎＭにした。

アッセイ条件
放射標識および非標識リガンドを１００ｍｃｌの希釈タンパク質に≦１０％の最終エタノール濃度で添加して混合し、氷上で一晩インキュベートして、結合平衡に達した。翌日、１００ｍｃｌのヒドロキシルアパタイトスラリー（５０％）を各チューブに添加して１０分間隔で３０分間混合した。ヒドロキシルアパタイトを遠心分離により回収し、次いで、トリス−ＥＤＴＡ緩衝液（５０ｍＭトリス、１．５ｍＭＥＤＴＡ、ｐＨ７．４）含有０．５％ＴｉｔｒｏｎＸ−１００で３回洗浄した。最終洗浄後、ペレットを４ｍｌのＢｉｏｓａｆｅＩＩシンチレーションカクテルを含むシンチレーションバイアルに移し、混合し、シンチレーションカウンタに入れた。総結合性を、放射標識リガンドのみを含むチューブから測定した。

ＨＬ−６０分化
試験材料
研究用薬物
研究用薬物をエタノール中に溶解し、ＵＶ分光光度法を用いてその濃度を測定した。薬物濃度の範囲を、細胞培養物に存在するエタノールの最終濃度（≦０．２％）を変えることなく試験し得るように、連続希釈物を調製した。

細胞
ヒト前骨髄球性白血病（ＨＬ６０）細胞を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地中で増殖させた。細胞を、５％ＣＯ_２の存在下で、３７℃でインキュベートした。

アッセイ条件
ＨＬ６０細胞を、１．２×１０^５細胞／ｍｌで塗抹した。塗抹後１８時間で、増殖中の細胞を薬物で処理した。４日後、細胞を採取し、ニトロブルーテトラゾリウム還元アッセイを実施した(Collins et al., 1979; J. Exp. Med. 149:969-974)。分化細胞の割合は、計２００細胞を計数して細胞内の黒青色のホルマザン沈着物を含む細胞の数を記録することにより決定した。単球細胞への分化の検証を、食作用活性を測定することにより決定した（データは示さず）。

インビトロ転写アッセイ
転写活性は、ルシフェラーゼ受容体遺伝子（Arbour et al., 1998)の上流に２４−ヒドロキシラーゼ（２４ＯＨアーゼ）遺伝子プロモーターを安定的にトランスフェクトしたＲＯＳ１７／２．８（骨）細胞で測定した。細胞にある範囲の投与量を供給した。投与の１６時間後、細胞を採取し、ルシフェラーゼ活性をルミノメーターを用いて測定した。ＲＬＵ＝相対ルシフェラーゼ単位。

腸カルシウム輸送および骨カルシウム動員
離乳雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｄｉｅｔ１１（０．４７％Ｃａ）餌＋ＡＥＫ油で１週間、その後Ｄｉｅｔ１１（０．０２％Ｃａ）＋ＡＥＫ油で３週間飼育した。次いで、ラットを０．４７％Ｃａ含有餌での１週間、その後０．０２％Ｃａ含有餌での２週間の飼育に切り替えた。０．０２％カルシウム含有餌での最後の１週間中に投与を開始した。４回連続の腹腔内投与をおよそ２４時間おきに行った。最後の投与後２４時間で、切断した首から血液を回収し、骨カルシウム動員の１つの指標として血清カルシウム濃度を測定した。腸の初めの１０ｃｍもまた、反転腸嚢法を用いた腸カルシウム輸送分析のために回収した。

生物学的アッセイ結果
２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３の生物活性を上記方法を用いてアッセイを行った。アッセイ結果を図１〜５に示す。図１に示すように、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は、組換えビタミンＤ受容体との結合性において、１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３とほぼ同等の効果である。また２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は、培養物中のＨＬ−６０細胞の分化を、１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３と同じ効力で誘導する（図２）。しかしながら、骨細胞で２４−ＯＨアーゼ遺伝子発現を刺激する効力は、１，２５−（ＯＨ）_２Ｄの約１０分の１である（図３）。図４Ａ、４Ｂ、５Ａ、および５Ｂに示すように、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３のカルシウム血症活性もまた、極めて低い。

骨カルシウム動員活性のインビボ予備試験により、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は本質的に２６０ｐｍｏｌ投与量ではカルシウム血症活性を示さないことが実証された（図４Ａ）。さらにインビボ試験により、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は、７０２０ｐｍｏｌの投与量で示すように、骨カルシウム動員が１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３のほぼ３０分の１の活性であること（図４Ｂ）、および，腸カルシウム輸送を生じる活性は１，２５−（ＯＨ）_２Ｄ_３より著しく少ないこと（図５Ａおよび５Ｂ）が実証された。

２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３の測定された低カルシウム血症活性は、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３により生成されるカルシウム血症活性を考慮しても、予期せぬことである。表１は、引用することにより全体が本明細書に完全に明記されるかのように本明細書に組み入れられるGrzywacz et al., Arch. of Biochem. Biophys., 460, 274 (2007)により報告された２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３（「２６Ｎ」と称する）のカルシウム血症活性と、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３（「２６Ｍｅ」と称する）のカルシウム血症活性を列挙している。比較目的で、ビヒクル単独で見られる対応する活性を減じた後、最終的な骨カルシウム動員活性および腸カルシウム輸送活性を提示する。

化学構造的に、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３と２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３とは、前者が２６−メチル基を有する点で異なる。この小さな化学構造の違いにもかかわらず、２つの化合物はカルシウム血症活性に関する極めて異なる生物学的性質を示す。表１に示すように、２−メチレン−１９，２６−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は、２６０ｐｍｏｌ投与量での骨カルシウム動員または腸カルシウム輸送のいずれに関しても、本質的にカルシウム血症活性を示さない。７０２０ｐｍｏｌ投与量でさえ、２６Ｎは骨カルシウム動員活性をほとんど示さない。それに対して、２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３は、同じ２６０ｐｍｏｌ投与量で骨カルシウム動員と腸カルシウム輸送の両方に著しい活性を示し２３４０ｐｍｏｌ投与量では、２６Ｎの７０２０ｐｍｏｌより高い投与量での骨カルシウム血症活性の、約１０倍を示す。

２−メチレン−１９−ノル−（２０Ｓ）−１α−ヒドロキシビタミンＤ_３により示された生物学的性質は、本化合物が、血清カルシウムの上昇が望ましくない疾患の治療に極めて有効であることを例示する。したがって本化合物は、慢性腎不全を患う患者の二次性副甲状腺機能亢進症の治療への実用性が見いだされるに違いない。なぜなら、慢性腎不全を患う患者では、心臓、大動脈、および他の重要な臓器へのカルシウム沈着を恐れて、平均以上の血清カルシウムの上昇が望ましくない一方で、本化合物は副甲状腺増殖およびプレプロ副甲状腺遺伝子の転写を抑制するからである。同様に本化合物は、乳癌、結腸直腸癌、および前立腺癌などの悪性腫瘍の治療、または多発性硬化症、狼瘡、関節リウマチ、１型糖尿病、および炎症性腸疾患などの自己免疫疾患の治療に有効であり得る。また本化合物は、移植拒絶反応の予防に有効であり得る。

本技術は本明細書に例示のために明記された実施形態に限定されないが、下記の特許請求の範囲内となるように、その当該形態の全てを包含することが理解されるべきである。

Claims

式Ｉ：

で表される化合物であって、式中、Ｘ^１およびＸ^２が、独立してＨおよびヒドロキシ保護基から選択される、化合物。
Ｘ^１およびＸ^２が共にヒドロキシ保護基である、請求項１記載の化合物。
Ｘ^１およびＸ^２が共にｔ−ブチルジメチルシリル基である、請求項２記載の化合物。
Ｘ^１およびＸ^２が共にＨであり、かつ前記化合物が式ＩＡ：

で表される、請求項１記載の化合物。
Ｘ^１およびＸ^２が共にＨであり、前記化合物が式ＩＢ：

で表される、請求項１記載の化合物。
請求項４または請求項５記載の化合物の有効量および薬学的に許容可能な担体を含む薬学的組成物。
前記有効量が前記組成物１グラム当たり約０．０１μｇ〜約１ｍｇの化合物を含む、請求項６記載の薬学的組成物。
前記有効量が前記組成物１グラム当たり約０．１μｇ〜約５００μｇの化合物を含む、請求項６記載の薬学的組成物。
ある生物学的状態を患う対象を治療する方法であって、
前記方法が、請求項４または請求項５の化合物の有効量を該対象に投与する工程を含み、
前記生物学的状態が、乾癬；白血病；大腸癌；乳癌；前立腺癌；多発性硬化症；狼瘡；糖尿病；宿主対移植片反応；臓器移植拒否反応；関節リウマチ、ぜんそく、もしくは炎症性腸疾患から選択される炎症性疾患；しわ、十分な皮膚のハリ不足、十分な皮膚水分の不足、もしくは不十分な皮脂分泌から選択される皮膚状態；腎性骨ジストロフィー；または骨粗しょう症から選択される、方法。
前記生物学的状態が乾癬である、請求項９記載の方法。
前記生物学的状態が、白血病、大腸癌、乳癌、または前立腺癌から選択される、請求項９記載の方法。
前記生物学的状態が多発性硬化症、狼瘡、糖尿病、宿主対移植片反応、または臓器移植拒否反応から選択される、請求項９記載の方法。
前記生物学的状態が関節リウマチ、ぜんそく、または、セリアック病、潰瘍性大腸炎、およびクローン病より選択される炎症性腸疾患から選択される、請求項９記載の方法。
前記生物学的状態がしわ、十分な皮膚のハリ不足、十分な皮膚水分の不足、または不十分な皮脂分泌から選択される、請求項９記載の方法。
前記化合物が対象に経口投与される、請求項９記載の方法。
前記化合物が対象に非経口投与される、請求項９記載の方法。
前記化合物が対象に経皮的に投与される、請求項９記載の方法。
前記化合物が対象に局所的に投与される、請求項９記載の方法。
前記化合物が約０．０１μｇ／日〜約１ｍｇ／日の用量で投与される、請求項９記載の方法。
乾癬；白血病；大腸癌；乳癌；前立腺癌；多発性硬化症；狼瘡；糖尿病；宿主対移植片反応；臓器移植拒否反応；関節リウマチ、ぜんそく、もしくは炎症性腸疾患から選択される炎症性疾患；しわ、十分な皮膚のハリ不足、十分な皮膚水分の不足、もしくは不十分な皮脂分泌から選択される皮膚状態；腎性骨ジストロフィー；または骨粗しょう症を治療するための、請求項４または請求項５記載の化合物。
乾癬；白血病；大腸癌；乳癌；前立腺癌；多発性硬化症；狼瘡；糖尿病；宿主対移植片反応；臓器移植拒否反応；関節リウマチ、ぜんそく、または炎症性腸疾患から選択される炎症性疾患；しわ、十分な皮膚のハリ不足、十分な皮膚水分の不足、もしくは不十分な皮脂分泌から選択される皮膚状態；腎性骨ジストロフィー；または骨粗しょう症を治療する医用薬剤を調製するための、請求項４または請求項５記載の化合物の使用。