JP2013511992A5

JP2013511992A5 -

Info

Publication number: JP2013511992A5
Application number: JP2012541219A
Authority: JP
Filing date: 2010-11-29
Publication date: 2014-01-23

Description

本明細書において開示する対象は、粒子または細胞の混合集団から生物学的細胞、細胞小器官および他の粒子を分離および操作するのに用いることが可能である。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
（先行技術文献）
（特許文献）
国際公開第２００９−１３１６４５号米国特許出願公開第２００７−００７２２９０号明細書米国特許出願公開第２００７−０１７２９０３号明細書米国特許第６，００８，０４０号明細書（非特許文献）ＷＥＧＮＥＲＣＣ．ｅｔａｌ．ＨｕｍａｎｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ１９ＶＰ２ｅｍｐｔｙｃａｐｓｉｄｓｂｉｎｄｔｏｈｕｍａｎｖｉｌｌｏｕｓｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｃｅｌｌｓｉｎｖｉｔｒｏｖｉａｔｈｅｇｌｏｂｏｓｉｄｅｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．２００４，Ｖｏｌ．１２，Ｎｏ．２，ｐｐ．６９−７８．

Claims

母体血液サンプルからの胎児様細胞を分離する方法であって、
本体、カバーおよび分離エレメントを有する装置の注入口領域に前記サンプルを導入する工程であって、
前記本体およびカバーは前記分離エレメントを含む間隙を定義するものであり、当該間隙は注入口領域および排出口領域を有するものであり、
前記分離エレメントは第一の段と第二の段とを有し、前記注入口領域および排出口領域を流動的につなぐ段階状の通路を定義するものであり、
前記段階状の通路は、前記第一の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第一の通路を含み、且つさらに、前記第二の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第二の通路を含むものであり、
前記第一の通路は狭径を有し、且つ前記第二の通路と前記注入口領域とを流動的につなぐものであり、
前記第二の通路は前記第一の通路の狭径よりも狭い狭径を有し、当該第二の通路の狭径は８〜１５マイクロメートルの範囲である、前記導入する工程と、
前記注入口領域から前記排出口領域に向かう方向において、前記段階状の通路における流体の流れを誘導する工程であって、これにより母体血液細胞が前記第一および第二の通路を通過して、前記排出口領域に移動し、且つ胎児様細胞は前記第二の通路に入ることができないものである、前記誘導する工程と
を有するものである、方法。
請求項１記載の方法において、この方法は、さらに、
前記装置から前記胎児様細胞を回収する工程を有するものである、方法。
請求項２記載の方法において、前記胎児様細胞は、前記排出口領域から前記注入口領域への方向の前記段階状の通路において流体の流れを誘導することにより集められ、これにより前記胎児様細胞が前記注入口領域に入ることが可能である、方法。
請求項１記載の方法において、この方法は、さらに、
前記第一の通路の範囲内で溶解産物を産生させるため前記胎児様細胞を溶解する工程と、前記溶解産物を含む前記流体を収集する工程とを有するものである、方法。
請求項１記載の方法において、前記段階状の通路の中を流れる流体の前期第一および第二の通路において実質的に直線流速を等しくするために、当該第一および第二の通路の幾何学的寸法は選択されるものである、方法。
粒子を分離する装置であって、本体、カバーおよび分離エレメントを有し、
前記本体およびカバーは前記分離エレメントを含む間隙を定義するものであり、当該間隙は注入口領域および排出口領域を有するものであり、
前記分離エレメントは第一の段と第二の段とを有し、前記注入口領域および排出口領域を流動的につなぐ段階状の通路を定義するものであり、
前記段階状の通路は、前記第一の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第一の通路を含み、且つさらに、前記第二の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第二の通路を含むものであり、
前記第一の通路は狭径を有し、且つ前記第二の通路と前記注入口領域とを流動的につなぐものであり、
前記第二の通路は前記第一の通路の狭径よりも狭い狭径を有し、
これにより、前記注入口領域から前記排出口領域に移動する粒子は、それらが前記第一の通路および前記第二の通路のいずれかまたは両方を通過することができないことにより、分離され得るものである、装置。
請求項６記載の装置において、前記注入口領域から前記排出口領域に移動する流体における粒子が、それらが前記第一の通路を通過すること及び前記第二の通路を通過できないことにより分離され得るようにするため、前記第一および第二の通路の前記狭径は選択されるものである、装置。
請求項６記載の装置において、前記分離エレメントは、前記注入口領域から前記排出口領域への方向において、前記段階状の通路において連続的に狭くなる通路の境界となる少なくとも３つの段を定義するものである、装置。
請求項６記載の装置において、前記第一の通路は、前記本体および前記カバーの１つの平面と実質的に平行である前記分離エレメントの平面により境界されるものである、装置。
請求項９記載の装置において、前記平面の幅は、バルク流体の流れに対して垂直な方向において、前記第一の通路の前記狭径の少なくとも１０００倍である、装置。
粒子を分離する方法であって、
本体、カバー、および分離エレメントを有する装置の注入口領域において、流体に懸濁された粒子を導入する工程であって、
前記本体およびカバーは前記分離エレメントを含む間隙を定義するものであり、当該間隙は注入口領域および排出口領域を有するものであり、
前記分離エレメントは第一の段と第二の段とを有し、前記注入口領域および排出口領域を流動的につなぐ段階状の通路を定義するものであり、
前記段階状の通路は、前記第一の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第一の通路を含み、且つさらに、前記第二の段と前記本体およびカバーの少なくとも１つとにより境界される第二の通路を含むものであり、
前記第一の通路は狭径を有し、且つ前記第二の通路と前記注入口領域とを流動的につなぐものであり、
前記第二の通路は前記第一の通路の狭径よりも狭い狭径を有するものである、前記導入する工程と、
前記排出口領域において粒子を集める工程であって、これにより前記排出口領域における粒子が、前記第二の通路に入ることができない他の粒子から分離されるものである、前記集める工程と
を有するものである、方法。
請求項１１記載の方法において、前記粒子が前記注入口領域に導入された後、当該注入口領域から前記排出口領域への方向において、流体の流れは前記段階状の通路に誘導されるものである、方法。
請求項１２記載の方法において、流体の流れは、前記注入口領域および前記排出口領域の少なくとも１つと流体連結するポンプで誘導されるものである、方法。
請求項１３記載の方法において、前記ポンプによって誘導される流体の流れの容積流量は、前記ポンプが作動している間、前記注入口と排出口領域との間の圧力低下を実質的に一定に維持するために、制御されるものである、方法。
請求項１１記載の方法において、前記粒子は細胞である、方法。
請求項１５記載の方法において、前記細胞が浮遊する前記流体は血液である、方法。
請求項１６記載の方法において、前記装置に前記細胞を導入する８時間前以内に、前記血液は対象から得られるものである、方法。
請求項１６記載の方法において、前記流体は、動脈血、および毛細管より上流の動脈血由来の流体から成る群から選択されるものである、方法。
請求項１８記載の方法において、前記流体は、総肝動脈、肺分泌物、および気管支洗浄液から採血される血液から成る群から選択されるものである、方法。
請求項１記載の方法において、前記装置は、さらに、前記間隙と流体連結する障壁を有するものであり、前記障壁は、前記胎児様細胞が前記サンプル中の他の細胞とは異なる相互作用をする材料を有するものである、方法。
請求項１記載の方法において、この方法は、さらに、
前記サンプルの他の細胞から前記胎児様細胞を分離した後、当該胎児様細胞の増殖を支えるのに十分である条件下において、前記装置を維持する工程を有するものである、方法。