JP2013502569A5

JP2013502569A5 -

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Publication number: JP2013502569A5
Application number: JP2012525213A
Authority: JP
Filing date: 2010-08-19
Publication date: 2014-06-19

Description

好ましくは、用いられるアッセイは比ろう法（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）又は比濁法（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）である。λＦＬＣ又はκＦＬＣを検出するための比ろう（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）及び比濁（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）アッセイは当該技術分野で一般的に公知であるが、トータルＦＬＣのアッセイは公知ではない。これらはアッセイの感度が最高レベルである。λＦＬＣ及びκＦＬＣの濃度は別々に決定してもよく、トータルＦＬＣ用の単一のアッセイで決定してもよい。そのようなアッセイは、典型的には５０：５０の比率で抗κＦＬＣ抗体及び抗λＦＬＣ抗体を含む。

更に、例えば本発明の方法で用いるための、トータルＦＬＣ用のアッセイキットが提供される。キットはサンプル中のトータルＦＬＣ量を検出し得る。そのようなアッセイキットは、２５ｍｇ／Ｌ未満、最も好ましくは、サンプル中の約２０ｍｇ／Ｌ未満、１０ｍｇ／Ｌ、５ｍｇ／Ｌ未満、又は４ｍｇ／Ｌ未満のトータル遊離軽鎖（ＦＬＣ）の量を検出するように適合されていてよい。アッセイキットは、例えば比ろう（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）アッセイキットであり得る。好ましくは、キットは、ＦＬＣに対する１又は複数の抗体を含むイムノアッセイキットである。典型的には、キットは、抗κＦＬＣ抗体及び抗λＦＬＣ抗体の混合物を含む。典型的には、抗遊離κ抗体及び抗遊離λ抗体の５０：５０混合物が使用される。キットは、サンプル中の１〜１００ｍｇ／Ｌ又は好ましくは１〜８０ｍｇ／Ｌのトータル遊離軽鎖を検出するように適合されていてよい。

アッセイキットは、比ろう法（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）又は比濁法（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）キットであり得る。これは、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、蛍光、化学発光、ビーズタイプのアッセイ、又はディップスティックであり得る。そのようなアッセイは当該技術分野で一般的に公知である。

米国のメイヨークリニックは、ミネソタ州オルムステッド郡で、５０歳以上（１９９５年１月１日時点）の２０，０００名を超える居住者をモニタリングした。英国バーミンガムのザ・バインディング・サイト・グループ・リミテッド社製の遊離κ軽鎖及び遊離λ軽鎖用「Ｆｒｅｅｌｉｔｅ（商標）アッセイを用いて、保存された凍結血清中のＦＬＣ濃度
を遡及的に測定した。Ｆｒｅｅｌｉｔｅアッセイは、多発性骨髄腫、ＡＬアミロイドーシス等の形質細胞疾患（ｐｌａｓｍａｃｅｌｌｄｉｓｏｒｄｅｒ）の診断及びモニタリングの補助としてＦＤＡに承認されている市販の比ろう（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）及び比濁（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）アッセイである。これらの疾患では通常、λ又はκＦＬＣのいずれかの濃度の上昇及び異常なＦＬＣ比が生じる。

患者及び方法
患者は全員、種々の理由により（集中治療室内で）検査及び治療介入を受けていた。患者が治療室内にいる時間中、連続血液サンプルを採取し、ＣＲＰ及びＦＬＣの濃度を免疫比ろう法（ｉｍｍｕｎｏｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃａｌｌｙ）により測定した。ＦＬＣは前述した通りに測定した。ＣＲＰはロシュ社（Ｒｏｃｈｅ）から市販されているキット（ＣＲＰＬ３Ｔｉｍａ−ｑｕａｎｔＣ−ＲｅａｃｔｉｖｅＰｒｏｔｅｉｎ）を用いて測定した。

Claims

サンプル中の遊離軽鎖（ＦＬＣ）の総量を検出するための１又は複数の検出剤を含む、血清、全血又は血漿サンプル中のＦＬＣの総量を決定するためのアッセイキットであって、前記１又は複数の検出剤は、ポリクローナル抗遊離λ抗体又はその断片、及び、ポリクローナル抗遊離κ抗体又はその断片を含み、それら抗体又はその断片は一緒に混合されている、アッセイキット。
前記抗体又はその断片が、ラテックス粒子等の粒子に結合している、請求項１に記載のアッセイキット。
対象由来サンプル中のトータルＦＬＣを検出する全体的健康のスクリーニング方法において使用するための、請求項１又は２に記載のアッセイキット。
サンプル中の２５ｍｇ／Ｌ未満のトータル遊離軽鎖（ＦＬＣ）の量を検出できる、請求項１〜３のいずれか一項に記載のアッセイキット。
約１ｍｇ／ＬのトータルＦＬＣの量を検出できる、請求項４に記載のアッセイキット。
１〜８０ｍｇ／ＬのトータルＦＬＣの量を検出できる、請求項１−５のいずれか一項に記載のアッセイキット。
比ろう法（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）又は比濁法（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）キットである、請求項１−６のいずれか一項に記載のアッセイキット。
サンプル中のコレステロール、クレアチニン、シスタチンＣ、及びＣＲＰの１又は複数の濃度を測定するための１又は複数の構成要素を更に含む、請求項１−７のいずれか一項に記載のアッセイキット。
前記ＦＬＣ又は前記構成要素の濃度の標準曲線の作成を可能にする前記ＦＬＣ又は前記構成要素用の複数の標準を含む、請求項１−８のいずれか一項に記載のアッセイキット。
前記標準が、２５ｍｇ／Ｌ未満のＦＬＣ濃度を決定するための１又は複数の標準を含む、請求項９に記載のアッセイキット。
対象に由来するサンプル中の遊離軽鎖（ＦＬＣ）の量を決定することを含み、ＦＬＣの量が少ないことが前記対象の生存率の上昇及び／又はより良い全体的健康に関連し、より高レベルのＦＬＣが未検出の医学的問題が存在する可能性を示す、全体的健康のスクリーニング方法であって、前記対象は、見かけ上健康であり、生命に関わる疾患又はＢ細胞関連疾患の明らかな症状を有さない、全体的健康のスクリーニング方法。
前記対象が、Ｂ細胞関連の疾患又は障害等の生命に関わる疾患の明らかな症状を有さない、請求項１１に記載の方法。
前記遊離軽鎖の量が、前記サンプル中のトータル遊離軽鎖の量である、請求項１１又は１２に記載の方法。
前記ＦＬＣが、前記対象由来の血清サンプル中で決定される、請求項１１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
前記トータルＦＬＣが、抗遊離軽鎖抗体を用いたイムノアッセイにより決定される、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
前記抗体が、抗遊離κ軽鎖抗体及び抗遊離λ軽鎖抗体の混合物である、請求項１５に記載の方法。
比ろう法（ｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｉｃ）又は比濁法（ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ）により前記ＦＬＣの量を検出することを含む、請求項１１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
前記アッセイが、約１〜８０ｍｇ／ＬのＦＬＣを検出できる、請求項１７に記載の方法。
前記サンプルが血清サンプルであり、トータルＦＬＣの量が２５ｍｇ／Ｌ未満であることが対象の全生存率の上昇の可能性を示す、請求項１１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
前記対象由来のサンプル中のコレステロール、クレアチニン、シスタチンＣ、又はＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）の量を決定するステップを更に含む、請求項１１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
請求項１１〜２０のいずれか一項に記載の方法において使用するための説明書を更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のアッセイキット。
前記アッセイキットを用いて得られたＦＬＣ濃度を比較して対象の生存率上昇を示すための正常値を更に含む、請求項２１に記載のアッセイキット。
サンプル中の遊離軽鎖（ＦＬＣ）の総量を検出するための１又は複数の検出剤を含む、血清、全血又は血漿サンプル中のＦＬＣの総量を決定するためのアッセイキットの使用であって、当該使用は、サンプル中のＦＬＣの総量を検出するために、血清、全血又は血漿サンプルを１又は複数の検出剤と接触させる工程を含み、また、前記１又は複数の検出剤は、抗遊離λ抗体又はその断片、及び、抗遊離κ抗体又はその断片を含む、アッセイキッ
トの使用。