JP2013144697A - 医薬組成物 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】皮膚創傷の部位での、創傷の治癒工程を加速する、皮膚創傷の閉鎖を増加させる、及び炎症を減少させるための組成物に関する。詳細には、δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、並びにCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない薬学的に許容される担体を含む組成物に関する。さらにまたインスリンもしくはインスリンアナログ、並びにCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない薬学的に許容される担体を含む組成物に関する。
【選択図】図1A
Description
本出願は、2007年7月30日に出願された、その全内容が参考として本明細書で援用される「医薬組成物」と題する米国特許仮出願第60/962,706号明細書に対する優先権を主張する。
本発明は、創傷の治癒を加速する、皮膚創傷の閉鎖を増加させる、及び皮膚創傷の部位での炎症を低下させるための組成物に関する。
δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体は水性担体でなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、組成物。そして、好ましくは、前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つであり、前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つであり、前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つであり、組換え発現させられている。また、好ましくは、前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである。好ましくは、前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つであり、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドであり、前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである。さらに、好ましくは、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む。そして、好ましくは、約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含み、さらに好ましくは、0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む。
b)δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を組み合わせる工程、ここで、前記担体が、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない、とを含み、それにより医薬組成物が製造される工程によって製造される、医薬組成物。好ましくは、前記δ−PKC活性化剤、及び前記α−PKC阻害剤が上述の通りである。好ましくは、前記医薬組成物は、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでおらず、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含んでいる前記薬学的に許容される水性担体を含む。
A)塩化カリウム0.2g/L(KCl)
B)リン酸二水素カリウム(無水)0.2g/L(KH2PO4)
C)塩化ナトリウム8.0(g/L)(NaCl)
D)リン酸水素ナトリウム(無水)1.15g/L(Na2HPO4)
本製剤は、カルシウム又はマグネシウムイオンを含んでいてはならない。
A)NPC15437-二塩酸塩水和物(Sigma社)、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物としても公知である。
分子式−C25H50N4O2・2HCl・xH2O
分子量−511.61(無水ベース)
CAS番号−141774-20-1(無水)
MDL番号−MFCD00210207
PubChem Substance ID−24897504
B)CGP41251−[4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン][ミドスタウリン].スタウロスポリン誘導体であるPKC412(CGP41251)は、プロテインキナーゼC(PKC)の従来型アイソフォームのより選択的な阻害剤である。
分子式−O35H30N4O4
分子量−570.65
分子式−C25H23N5O2S・CH4O3S
分子量−553.66
製品番号♯19-163;式は下記に示す:
E)GF-109203X 強力かつ選択的なプロテインキナーゼC阻害剤である、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド
F)ISIS 3521/LY900003 Isis Pharmaceuticals社(カリフォルニア州カールズバッド)から市販で入手できる、以下の配列(配列番号56)を備える、アプリノカルセンとしても公知である20-ヌクレオチド ホスホロチオエート デ−オキシリボ−オリゴヌクレオチド:
5’−GTTCTCGCTGGTGAGTTTCA−3’(配列番号56)
a)塩化カリウム0.2g/L(KCl)
b)リン酸二水素カリウム(無水)0.2g/L(KH2PO4)
c)塩化ナトリウム8.0g/L(NaCl)
d)リン酸水素ナトリウム(無水)1.15g/L(Na2HPO4)
e)ミリストイル化ペプチド(1〜100μM)、例えばMyr*-Phe-Ala-Arg-Lys-Gly-Ala-Leu-Arg-Gln-OH(配列番号1)
f)レギュラーインスリンもしくはその機能的アナログ(治療用量:0.1〜10ユニット/mL)を含んでいる。
上記に列挙した濃度は、組成物中の好ましい最終濃度である。
0.1M NaOHを用いて所与のpHへ調整した、100mLの0.1M KH2PO4;
0.1M HClを用いて所与のpHへ調整した、100mLの0.1Mトリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン;及び
0.1M HClを用いて所与のpHへ調整した、100mLの0.025M Na2B4O710H2O(ホウ砂)。
材料
組織培養培地及び血清は、Biological Industries社(イスラエル国ベイトハーメック)から購入した。増強化学ルミネセンス(ECL)は、BioRad社(イスラエル国)から購入したキットを用いて実施した。抗p−tyrモノクローナル抗体は、Upstate Biotechnology社(米国ニューヨーク州レイクプラシッド)から購入した。PKCアイソフォームに対するポリクローナル及びモノクローナル抗体は、Santa Cruz社(米国カリフォルニア州)及びTransduction Laboratories社(ニューヨーク州レキシントン)から購入した。ホースラディッシュペルオキシダーゼ−抗ウサギ及び抗マウスIgGは、Bio-Rad社(イスラエル国)から入手した。ロイペプチン、アプロチニン、PMSF、DTT、オルトバナジン酸ナトリウム、及びペプスタチンは、Sigma Chemicals社(ミズーリ州セントルイス)から購入した。インスリン(humulinr-組換え型ヒトインスリン)は、Eli Lilly France SA社(フランス国フェーガースハイム)から購入した。IGF1は、Cytolab社(イスラエル国レフォボト)から購入した。ケラチン14抗体は、Babco-Convance社(カリフォルニア州リッチモンド)から購入した。BDGF-BBはR&D systems社(ミネアポリス)から購入し、ミリストイル化PKCα偽基質はCalbiochem社(カリフォルニア州サンディエゴ)から購入した。高速細胞増殖キット(Rapid Cell Proliferation Kit)は、Calbiochem社(カリフォルニア州サンディエゴ)から購入した。
一次ケラチノサイトは、以前に記載されたように新生児皮膚から単離した。ケラチノサイトは、8% キレックス(キレックス-100、BioRad社)処理ウシ胎児血清を含むイーグル最小必須培地(EMEM)中で培養した。増殖性基底細胞表現型を維持するために、最終Ca2+濃度を0.05mMに調整した。実験は、プレーティングの5〜7日後に実施した。
ケラチノサイトを含む培養皿は、Ca2+/Mg2+非含有PBSで洗浄した。細胞は機械的に剥離させ、プロテアーゼ阻害剤及びホスファターゼ阻害剤の混合物(20μg/mLのロイペプチン、10μg/mLのアプロチニン、0.1mM PMSF;1mM DTT;200μM オルトバナジン酸塩;2μg/mLのペプスタチン)を含むRIPA緩衝液(50mMのトリス-HCl(pH7.4);150mM NaCl;1mM EDTA;10mM NaF;1% Triton x 100;0.1% SDS;1% デオキシコール酸ナトリウム)中に溶解させた。この製剤を4℃で20分間にわたり最高速度の微量高速遠心機内で遠心分離にかけた。免疫沈降には上清を使用した。
溶解液は、300μgの細胞溶解液を25μLのプロテインA/Gセファロース(Santa Cruz社、米国カリフォルニア州)と混合することによって予備浄化し、この懸濁液を4℃で30分間にわたり持続的に回転させた。製剤は次に4℃で10分間にわたり最高速度で遠心分離し、30μLのA/Gセファロースを個々の抗原に対して特異的なポリクローナル又はモノクローナル抗体と共に上清へ加えた(希釈率、1:100)。サンプルは4℃で一晩回転させた。懸濁液を次に4℃で10分間にわたり最高速度で遠心分離させ、ペレットはRIPA緩衝液で洗浄した。この懸濁液を再び15,000×g(4℃で10分間)遠心し、TBST中で4回洗浄した。サンプル緩衝液(0.5M トリス-HCl(pH6.8)、10% SDS;10%グリセロール;4% 2−β−メルカプトエタノール;0.05% ブロモフェノールブルー)を加え、サンプルを5分間にわたり沸騰させ、次にSDS−PAGEにかけた。
組み換えアデノウイルスベクターは、Saito他著、54 J. Virol. 711(1985)によって以前に記載されたように構築した。
培養培地を吸引し、ケラチノサイト培養物は、例えばPKCαなどの特異的PKCアイソフォームをコードするPKC組換えアデノウイルスで1時間にわたり感染させた。次に培養をMEMで2回洗浄し、再補給した。感染10時間後の細胞を24時間にわたり無血清の低Ca2+含有MEMへ移した。
特異的PKC活性は、適切な処理後にケラチノサイト培養から新しく調製した免疫沈降物中で決定した。これらの溶解液はNaFを含まないRIPA緩衝液中で調製した。活性は、SignaTECTプロテインキナーゼCアッセイシステム(Promega社、米国ウィスコンシン州マディソン)を製造業者の取扱説明書にしたがって使用して測定した。PKCα偽基質をこれらの試験における基質として使用した。
細胞増殖は、6ウエルプレート内での[3H ]チミジン取込みによって測定した。細胞には1時間にわたり[3H]チミジン(3μCi/mL)をパルスした。インキュベーション後、細胞はPBSで5回洗浄し、各ウエルには1時間にわたり5% TCAを加えた。この溶液を除去し、細胞を1M NaOH中に溶解させた。細胞内に取り込まれた標識化チミジンをTRI-CARB(商標)液体シンチレーションカウンタの3Hウィンドウ内で計数した。
精製及び標準化されたPKCアイソザイムは、Dr. P. Blumberg(NCI(米国立癌研究所)、NIH(米国立衛生研究所))及びDr. Marcello G. Kazanietz(ペンシルバニア大学医学部)のご厚意により提供された。一次ケラチノサイトは500μLの1% Triton Lysis Buffer(1% Triton-X 100、10μg/mLのアプロチニン及びロイペプチン、2μg/mLのペプスタチン、1mM PMSF、1mM EDTA、200μM Na2VO4、10mM NaF 、1×PBS中)中で収集した。溶解液を4℃で30分間にわたりインキュベートし、4℃で30分間にわたり16,000×gでスピンさせた。上清を新しい試験管へトランスファーした。細胞溶解液の免疫沈降は、5μg/サンプルの抗−α6/GoH3(PharMingen社)及び30μL/サンプルのProtein A/G Plus Agaroseスラリー(Santa Cruz社)と共に4℃で一晩実施した。ビーズをRIPA緩衝液で1回、50mM トリス/HCl(pH7.5)で2回洗浄した。35μLの反応緩衝液(1mM CaCl2、20mM MgCl2、50mM トリス-HCl(pH7.5))を各アッセイに加えた。各アッセイに、DMSOもしくは10mM TPAのいずれかを含む5.5μL/アッセイのリン脂質小胞(vesicle)の懸濁液をスラリーへ、標準化された量の特異的PKCアイソザイムと共に加えた。この反応は10μL/アッセイの125mM ATP(1.25μCi/アッセイ[γ-32P]ATP、Amersham社)を加えることによって開始させ、30℃で10分間持続させた。次にビーズをRIPA緩衝液で2回洗浄した。30μL/サンプルのタンパク質ローディング色素(3×Laemmli、5% SDS)を加え、サンプルを水浴中で5分間にわたり沸騰させた。タンパク質は8.5%ゲルでのSDS−PAGEによって分離し、Protran膜(Schleicher & Schuell社)上に移し、オートラジオグラフィーによって視認した。ヒストンのリン酸化及びPKC基質ペプチドのリン酸化は、PKC活性のためのコントロールとして使用した。
全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。
ウエスタンブロッティングなどのその他の技術は、例えばSambrook et al.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual(3d ed. 2001)に記載されたような当該技術分野において周知の標準プロトコールを用いて実施した。
下記の実験は、様々な製剤で調製されたインスリン(10-6M;0.1ユニット/mL)及びPKCα阻害剤(Myr−偽基質PKCαペプチド(1μM))を利用してin vitroでの創傷治癒の有効性を決定するために実施した。
下記の実験は、様々な製剤中で調製されたインスリン+PKCα阻害剤によって媒介される創傷閉鎖をさらに評価するために実施した。
下記の実験は、偽基質PKCαペプチド(PKCα阻害剤)の抗炎症作用を評価するために実施した。
下記の実験は、本医薬組成物が肉芽組織(granular tissue)形成に及ぼす作用を評価するために実施した。
下記の実験は、偽基質PKCαペプチドがPKCα活性を阻害する能力に製剤の含量が影響を及ぼすかどうかを決定するために実施した。
様々な製剤でのインスリンにより媒介されるin vitro創傷閉鎖及び細胞増殖を評価するためにまた別の実験を実施した。
培地B中でのケラチノサイトのプレインキュベーションがin vitroでの細胞増殖にインスリン及びインスリン+PKCα阻害剤が及ぼす作用に与える影響を評価した。成体マウス(7〜10カ月齢から2年齢)の尾由来の5日齢のコンフルエントなケラチノサイトの培養をin vitroで増殖させた。MEM (培地A)中での5日後、増殖培地を培地B(上記)と交換した。培地交換と平行して、又はその24時間後、細胞はインスリン又はインスリン+PKCα阻害剤で処置した。細胞の増殖率は、市販で入手できるRapid Cell Proliferation Kit(製品番号QIA127;Calbiochem社)を用いて測定した。この実験は6回ずつ実施した。結果は、未処置細胞(コントロール)の百分率として表示した。図7から明らかなように、24時間にわたる培地B中での細胞のプレインキュベーションは、細胞増殖にインスリン及びインスリン+PKCα阻害剤が及ぼす作用を増強する。
慢性足部潰瘍を有するヒト患者を製剤A(図8の下方パネルに示した結果)又は、製剤C(図8Aの上方パネルに示した結果)を適用したインスリン+PKCα阻害剤の局所的適用によって12週間にわたり毎日処置した。製剤Aで適用されたインスリン+PKCα阻害剤は12週までに完全閉塞を示したが、製剤Cでインスリン+PKCα阻害剤で処置された患者の潰瘍においては有意な治癒は所見されなかった。患者の創傷を週に1回追跡し、VISITRAK(登録商標)(Smith & Nephew社)を利用して測定した。創傷の幅及び創傷の長さのフォローアップグラフは両方の患者についての12週間の測定を示した(下方パネル)。
糖尿病性創傷に罹患しているヒト患者を製剤A(図8Bの左側パネルに示した結果)又は製剤C(図8Bの右側パネルに示した結果)で適用したインスリン+PKCα阻害剤の局所的適用によって60日間にわたり毎日処置した。製剤Aで適用されたインスリン+PKCα阻害剤は60日までに完全創傷閉鎖及び治癒を示したが、製剤C中のインスリン+PKCα阻害剤で処置された患者の創傷においては有意な治癒は所見されなかった。図8Bは、第0日及び第60日の創傷のフォローアップ資料を示している。
1年齢の雌性クォーターウマは、過増殖した肉芽の過増殖組織(肉芽proud flesh)創傷に罹患しており、1ヶ月間にわたり治癒が得られていなかった。この創傷を3カ月間にわたり製剤Aでのインスリン+PKCα阻害剤により毎日処置した。この期間後、創傷は完全に閉鎖されて治癒した。6カ月後のフォローアップは、完全な組織再生を示した。これらの結果は、図9に示した。
2年齢のウマは、骨髄炎を伴う慢性日光膿瘍と診断されたひづめ創傷を有していた。この創傷の治癒は、数カ月間にわたって発生しなかった。製剤Aでのインスリン+PKCα阻害剤による毎日の処置は、30分間にわたる創傷への本組成物の直接適用によって実施した。図10に示したように、処置の1カ月間以内に、創傷サイズは有意に減少し、2カ月間以内に創傷は完全に閉鎖されて治癒した。
常性に舐めること(すなわち、肢端舐め(acral lick))に起因する足の創傷に罹患しているイヌを数カ月間にわたり従来型治療法を用いて処置したが、治癒は得られなかった。製剤Aでのインスリン+PKCα阻害剤による毎日の処置を実施すると、創傷は完全に閉鎖され、2カ月以内に治癒した。処置の3.5カ月後、完全な毛皮の再生が観察された。これらの結果は、図11に示した。
インスリンアナログ単独が創傷治癒を促進できるかどうかを決定するために、製剤Aで調製された4つのインスリンアナログを試験した。全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷を、創傷上に直接配置される製剤A(上記)での0.1ユニット/mLの様々なインスリンアナログで毎日処置した。試験したインスリンアナログは、インスリンリスプロ(HumL)、インスリンアスパルト(Novo)、インスリングラルジン(LANTUS(登録商標))、及びHUMULIN(登録商標)R(HumR)であった。7日後、創傷を切除し、固定し、H&E染色後に組織学的に評価した。
相乗作用を識別するために、図17に示したように、組換え型ヒトレギュラーインスリン及びUSPインスリン、PKCα偽基質阻害性ペプチドを用いた処置後の肉芽組織形成を評価することによって創傷治癒を測定した。
インスリンアナログ、組換え型ヒトインスリン及びPKCα偽基質阻害性ペプチドを用いた治療が炎症に及ぼす作用を決定するために、これらの処置後の炎症を測定した。
(1)膿瘍形成
(2)過剰な白血球増加症(固定視野(×200)内で>100cell)
(3)20%を超える血管内のWBC含量が固定視野(×200)内で示される血管内での高WBC/RBC比。
培地A及び培地B中でのケラチノサイトのインキュベーションならびにマウスビスファチン及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩(L−α)(Calbiochem社、製品番号524615)がケラチン1の発現に及ぼす影響
図1.様々な製剤で調製されたインスリン+PKCα阻害剤を利用したin vitroでの創傷治癒の有効性。
5日齢の培養、コンフルエントなケラチノサイトin vitroスクラッチアッセイにかけ、創傷治癒を試験した。
創傷形成後、インスリン及びPKCα阻害剤(インスリン10-6M;0.1ユニット/mL)、Myr−偽基質PKCαペプチド(1μM)を上述した様々な製剤(製剤A〜C)中での細胞培養に加え、創傷閉鎖を追跡した。処置24時間後、未処置コントロールに比較して、製剤Aで提供されたインスリン+PKCα阻害剤で処置された細胞のみが、創傷の閉鎖を示した。この実験は3回ずつ実施した。図1Aは、代表的な細胞培養プレートの写真を示している。図1Bは、処置24時間後の創傷閉鎖率を示している(p<0.05)。
全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷は上述したように様々な製剤(製剤A〜C)において創傷上へ直接適用するインスリン(10-6M;0.1ユニット/mL)、PKCα阻害剤(1μMの偽基質PKCαペプチド)、又はインスリン+PKCα阻害剤(1μMの偽基質PKCαペプチド及び0.1ユニットのインスリン)を用いて毎日処置した。7日後、創傷を切除し、創傷の形態及び組織学を検査することによって治癒創傷の百分率を評価した。図2Aでは、結果は、1群当たり全創傷当たりの治癒創傷の百分率として表示した。創傷の完全な治癒及び閉鎖は、製剤Aで適用されたインスリン+PKCα阻害剤の処置によって誘導された。これとは対照的に、製剤B及び製剤Cを用いた場合は、創傷の辺縁閉鎖しか観察されなかった。全製剤条件について、インスリン又は偽基質ペプチド単独を用いた処置は、様々な製剤だけで処置されたコントロール群に比較して、創傷治癒有効性を促進しなかった。図2Bは、代表的な創傷生検からの写真を示している。
全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷は、上述した様々な製剤(製剤A〜C)で創傷上に直接適用されたPKCα阻害剤(偽基質PKCαペプチド(1μM))を用いて毎日処置した。7日後、創傷を切除し、組織学検査及び免疫組織化学検査にかけた。炎症負荷は、創傷間隙に以下のパラメータ3つのうちの少なくとも2つが存在する場合には重度と見なした:(1)創傷領域での膿瘍形成、(2)過剰な白血球増加症(固定視野(×200)内で>100cell)、(3)20%を超える血管内のWBC含量が固定視野(×200)内で示される血管内での高WBC/RBC比。結果を要約し、群内の全創傷数当たりの重症炎症を備える創傷の百分率として表示した。棒グラフから明らかなように、PKCα阻害剤が製剤Aで適用された場合にのみ重症炎症の有意な減少が観察された。処置が製剤B又は製剤Cで適用された場合には、炎症負荷の減少は見られなかった。
全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷は、上述した様々な製剤(製剤A〜C)で創傷上に直接適用されたインスリン及びPKCα阻害剤(偽基質PKCαペプチド、1μM及びインスリン(0.1ユニット/mL))を用いて毎日処置した。7日後、創傷を切除し、固定し、H&E染色後に組織学的に評価した。肉芽組織形成は、H&E染色法を利用して評価し、創床での全創傷領域に比較して形成された肉芽組織の百分率にしたがってスコア付けした。製剤A中のインスリン+PKCα阻害剤で毎日処置した創傷だけが、コントロール、製剤B及び製剤C処置群に比較して肉芽組織形成の有意な増加を示した。
5日齢の培養、コンフルエントなケラチノサイトを、PKCαをコードする組換えアデノウイルスで感染させた。感染の24時間後、細胞は図5に示したように製剤(製剤A及びB)で15分間にわたりPKCα阻害剤(Myr−偽基質PKCαペプチド、1μM)により処置した。処置後、細胞を溶解させ、上述したようにPKCα活性アッセイにかけた。コントロールに比較して、製剤Aで提供されたPKCα阻害剤だけが過剰発現細胞におけるPKCα活性を有意に阻害することができた。実験は2回ずつ実施した。結果は、PKCαを過剰発現するコントロール細胞に比較してPKCα活性の減少率として表示した。
5日齢の培養、コンフルエントなケラチノサイトをin vitroスクラッチアッセイにかけ、創傷治癒を試験した。創傷形成後、インスリン(10-6M;0.1ユニット/mL)を上述した様々な製剤(製剤C及びD)で細胞培養物へ加えた。創傷閉鎖を48時間にわたり追跡した。実験は3回ずつ実施した。(A)代表的な細胞培養皿の写真を示した。(B)創傷閉鎖は、処置48時間後の閉鎖率として表示した。(C)増殖アッセイは、上述したチミジン取込み増殖アッセイを用いて創傷内の培養細胞上で実施した。インスリンは、KClを含む製剤Dで提供された場合は、それ自体が部分的創傷閉鎖及び細胞増殖を誘導した。製剤Cは、図6A〜6Cから明らかなように、インスリン誘導性創傷閉鎖及び細胞増殖を阻害した。
成体マウス(7〜10カ月齢から2年齢)の尾から調製した5日齢のコンフルエントなケラチノサイトの培養を、市販で入手できるRapid Cell Proliferation Kit(製品番号QIA127;Calbiochem社)を利用した増殖アッセイにかけた。MEM 中で5日後、増殖培地は上記の培地Bと交換した。
培地交換に平行して、又はその24時間後、細胞をインスリン又はインスリン+PKCα阻害剤で処置した。実験は、6回ずつ実施した。結果は、未処置細胞(コントロール)の百分率として表示した。24時間にわたる培地B中での細胞のプレインキュベーションは、図7に示したようにインスリン及びインスリン+PKCα阻害剤が細胞増殖に及ぼす作用を増強する。
例えば糖尿病随伴性足部及び手部潰瘍などの慢性糖尿病随伴性潰瘍を有する患者を、12週間にわたり製剤A(図A、下方パネル)又は製剤C(図8A、上方パネル)で適用したインスリン+PKCα阻害剤の局所適用によって毎日処置した。製剤Aで適用したインスリン+PKCα阻害剤は12週間後までに完全閉鎖を示したが、製剤C中のインスリン+PKCα阻害剤で処置された患者の潰瘍では有意な治癒は所見されなかった。患者の創傷は、VISITRAK(登録商標)(Smith & Nephew社)を利用して週1回追跡し、測定した。創傷幅及び創傷長のフォローアップグラフは、両方の患者の12週間にわたる測定値について表示した(図8の右側パネル)。
糖尿病性創傷に罹患している患者を、60日間にわたり製剤A(図8B、右側パネル)又は製剤C(図8B、左側パネル)で適用したインスリン+PKCα阻害剤の局所適用によって毎日処置した。製剤Aで適用されたインスリン+PKCα阻害剤は、60日後までに完全治癒及び創傷閉鎖を生じさせた。製剤C中のインスリン+PKCα阻害剤で処置された創傷では、有意な治癒は見られなかった。第0日及び第60日での創傷のフォローアップ写真は、図8Bに示した。
1年齢の雌クォーターウマは、過増殖した肉芽組織(肉芽)創傷に罹患しており、1カ月間にわたり治癒が得られていなかった。創傷は、3カ月間にわたり製剤A中のインスリン+PKCα阻害剤により毎日処置した。この期間後、創傷は完全に閉鎖して治癒した。6カ月後のフォローアップ検査では、完全な組織再生が観察された。
2年齢のウマは、骨髄炎を伴う慢性日光膿瘍であると診断されたひづめ創傷を有しており、1カ月間にわたり治癒が得られていなかった。製剤A中のインスリン+PKCα阻害剤による毎日の処置は、30分間にわたる創傷への本組成物の直接適用によって実施した。図10に示したように、創傷サイズは処置1カ月間以内に有意に減少し、創傷は2カ月間以内に完全に閉鎖して治癒した。
常に自分で舐め続けていることに起因する足の慢性肢端舐性創傷に罹患しているイヌは、従来方法を用いて治療されたが、数カ月間にわたって治癒が得られていなかった。この創傷を、局所適用される製剤A中のインスリン+PKCα阻害剤により毎日処置した。2カ月間以内に、創傷は完全に閉鎖して治癒した。3.5カ月間以内に、完全な毛皮の再生が観察された。
商標名HUMALOG(登録商標)によって公知であるインスリンリスプロ(rDNA起源)の略図表示である。インスリンリスプロのα鎖(配列番号57)及びβ鎖(配列番号58)のアミノ酸配列を各々示した。
商標NOVOLOG(登録商標)によって公知であるヒトインスリンアナログであるインスリンアスパルト(rDNA起源)の一次構造の略図表示である。インスリンアスパルトのα鎖(配列番号57)及びβ鎖(配列番号59)のアミノ酸配列を各々示した。
商標LANTUS(登録商標)によって公知であるヒトインスリンアナログであるインスリングラルジン(rDNA起源)の一次構造の略図表示である。LANTUS(登録商標)のα鎖(配列番号60)及びβ鎖(配列番号61)のアミノ酸配列を各々示した。
商標HUMULIN(登録商標)R及びNOVOLIN(登録商標)Rによって公知である組換え型ヒトレギュラーインスリンの一次構造の略図表示である。HUMULIN(登録商標)Rのα鎖(配列番号57)及びβ鎖(配列番号62)のアミノ酸配列を各々示した。
全層(長さ20mm)の皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷は、創傷上に直接配置された製剤A(上記)で図6に示した0.1ユニット/mLのインスリンアナログを用いて毎日処置した。試験したインスリンアナログは、インスリンリスプロ(「HumL」)、インスリンアスパルト(「Novo」)、インスリングラルジン(「LANTUS(登録商標)」)、及び組換え型ヒトインスリン(「HumR」)であった。7日後、創傷を切除し、固定し、H&E染色後に組織学的に評価した。
創傷治癒率は、表皮基底層形成及び肉芽組織形成を測定することによって評価した。表皮閉鎖は、表皮基底層形成を検出するためにケラチン14染色法を利用することによって評価した。完全な表皮再構築を示した創傷を治癒したと見なした。肉芽組織形成は、H&E染色法を利用して評価し、創床での全創傷領域に比較して形成された肉芽組織の百分率にしたがってスコア付けした。70%を超える肉芽組織形成を示した創傷を治癒したと見なした。
インスリンアナログは、商標名の略称によって識別した:インスリンリスプロは「HumL」、インスリンアスパルトは「Novo」、インスリングラルジンは「LANTUS(登録商標)」、及びHUMULIN(登録商標)Rは「HumR」。
全層(長さ20mm)皮膚切開は、麻酔をかけたC57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)の上背部上で実施した。切開後、創傷は、製剤A(上記)中のPKCα偽基質阻害性ペプチド(1μg/mL)又は0.1ユニット/mLのHUMULIN(登録商標)RもしくはUSPインスリンを用いて毎日処置し、そして、これらは創傷上に直接配置された。7日後、創傷を切除し、固定し、H&E染色後に組織学的に評価した。
肉芽組織形成は、H&E染色法を利用して評価し、創床での全創傷領域に比較して形成された肉芽組織の百分率にしたがってスコア付けした。70%を超える肉芽組織形成を示した創傷を治癒したと見なした。
レギュラー組換え型ヒトインスリン及びUSPインスリンは、各々略称「HumR」及び「Ins USP」と識別した。PKCα偽基質阻害性ペプチドは、「pep」と識別した。
重症炎症のレベルは、C57BL/6Jマウス(1群当たりマウス6匹)上の皮膚創傷部位で測定した。創傷は、上述したように切開によって調製した。毎日の処置は、図19に示したように製剤A(上記)中のPKCα偽基質阻害性ペプチド(1μg/mL)又は0.1ユニット/mLのHUMULIN(登録商標)Rもしくはインスリンリスプロを用いて実施した。エマルジョンを調製し、薬物溶出スカフォールドとして機能するガーゼ包帯からの送達によって皮膚上に配置した。7日後、皮膚組織を切除し、固定し、H&E染色後に組織学的に評価した。
重度の炎症は、下記のパラメータを利用して評価した。
(1)膿瘍形成
(2)過剰な白血球増加症(固定視野(×200)内で>100cells)
(3)20%を超える血管内のWBC含量が固定視野(×200)内で示される血管内での高WBC/RBC比。
炎症負荷は、創傷間隙に上記のパラメータ3つのうちの少なくとも2つが存在する場合には重度と見なした。
重症炎症の総百分率は、各検体について観察された上記のパラメータ各々によって記録したデータを統合することによって決定した。
HUMULIN(登録商標)R及びインスリンリスプロは、各々、略称「HumR」及び「HumL」として識別した。PKCα偽基質阻害性ペプチドは、「pep」と識別した。
図19.培地A及び培地B中で、ビスファチン及びL−αを用いて処置された経時ケラチノサイトでのケラチン1の発現。
成体マウス(7〜10カ月齢から2年齢)の尾から調製した一次皮膚ケラチノサイトを培地A(MEM )中で維持した。培地A中で5日後、培養皿の半分の増殖培地を培地B(上記)と交換した。ビスファチン又はL−αを次に培地A及び培地B中で培養した細胞へ提供した。
次に0.05mM〜0.12mMの培養培地中のカルシウムレベルを上昇させることによって細胞分化を誘導した。分化の24時間後、誘導した細胞を収集し、ウエスタンブロット分析を実施した。次に市販で入手できるケラチン1特異的抗体を使用して細胞溶解液中でのケラチン1の発現を評価した。発現は、標準ウエスタンブロッティング及び濃度計法を用いて評価した。
Adams JC and Watt FM (1990) Changes in keratinocyte adhesion during terminal differentiation: reduction in fibronectin binding precedes alpha 5 beta 1 integrin loss from the cell surface. Cell 63: 425-435.
Alt A, Gartsbein M, Ohba M, Kuroki T, and Tennenbaum T (2004) Differential regulation of alpha6beta4 integrin by PKC isoforms in murine skin keratinocytes. Biochem Biophys Res Commun 314: 17-23.
Alt A, Ohba M, Li L, Gartsbein M, Belanger A, Denning MF, Kuroki T, Yuspa SH, and Tennenbaum T (2001) Protein kinase Cdelta-mediated phosphorylation of alpha6beta4 is associated with reduced integrin localization to the hemidesmosome and decreased keratinocyte attachment. Cancer Res 61: 4591-4598.
Ausubel FM, et al. (1989) Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Interscience.
Azzi A, Boscoboinik D, and Hensey C (1992) The protein kinase C family. Eur J Biochem 208: 547-557.
Bell E, Sher S, Hull B, Merrill C, Rosen S, Chamson A, Asselineau D, Dubertret L, Coulomb B, Lapiere C, Nusgens B, and Neveux Y (1983) The reconstitution of living skin. J Invest Dermatol 81: 2s-10s.
Blumberg PM (1991) Complexities of the protein kinase C pathway. MoI Carcinog 4: 339-344.
Boyce ST and Ham RG (1983) Calcium-regulated differentiation of normal human epidermal keratinocytes in chemically defined clonal culture and serum-free serial culture. J Invest Dermatol 81: 33s-40s.
Bradshaw D, Hill CH, Nixon JS, and Wilkinson SE (1993) Therapeutic potential of PKC inhibitors. Agents Actions 38: 135-147.
Breitkreutz D, Bohnert A, Herzmann E, Bowden PE, Boukamp P, and Fusenig NE (1984) Differentiation specific functions in cultured and transplanted mouse keratinocytes: environmental influences on ultrastructure and keratin expression. Differentiation 26: 154-169.
Breitkreutz D, Stark HJ, Plein P, Baur M, and Fusenig NE (1993) Differential modulation of epidermal keratinization in immortalized (HaCaT) and tumorigenic human skin keratinocytes (HaCaT-ras) by retinoic acid and extracellular Ca2+. Differentiation 54: 201-217.
Cadena, Gill (1993) Protein Expression and Purification 4:177.
Castagna M, Takai Y, Kabuchi K, Kikkawa U, and Nishizuka Y (1982) Direct activation of calcium-activated phospholipid dependent protein kinase by tumor-promoting phorbol esters. J Biol Chem 257: 7847-7851.
Chakravarthy BR, Isaacs RJ, Morley P, Durkin JP, and Whitfield JF (1995) Stimulation of protein kinase C during Ca2+induced keratinocyte differentiation. Selective blockade of MARCKS phosphorylation by calmodulin. J Biol Chem 270: 1362-1368.
Chauhan VPS, Chauha A, Deshmukh DS, and Brockerhoff H (1990) Lipid activators of protein kinase C. Life Sci 47: 981-986.
Coligan et al, Current Protocols in Immunology, Wiley Interscience, 1991, Unit 9.
De M, I and Theoret CL (2004) Spatial and temporal expression of types I and II receptors for transforming growth factor beta in normal equine skin and dermal wounds. Vet Surg 33: 70-76.
Denning MF, Dlugosz AA, Cheng C, Dempsey PJ, Coffey RJJ, Threadgill DW, Magnuson T, and Yuspa SH (2000) Cross-talk between epidermal growth factor receptor and protein kinase C during calcium-induced differentiation of keratinocytes. Exp Dermatol 9: 192-199.
Denning MF, Dlugosz AA, Williams EK, Szallasi Z, Blumberg PM, and Yuspa SH (1995) Specific protein kinase C isozymes mediate the induction of keratinocyte differentiation markers by calcium. Cell Growth Differ 6: 149-157.
Deucher A, Efimova T, and Eckert RL (2002) Calcium-dependent involucrin expression is inversely regulated by protein kinase C (PKC)alpha and PKCdelta. J Biol Chem 277: 17032-17040.
Diegelmann RF and Evans MC (2004) Wound healing: an overview of acute, fibrotic and delayed healing. Front Biosci 9:283-9.: 283-289.
Eckert RL (1989) Structure, function, and differentiation of the keratinocyte. Physiol Rev 69: 1316-1346.
Eichholtz T, de Bont DB, de WJ, Liskamp RM, and Ploegh HL (1993) A myristoylated pseudosubstrate peptide, a novel protein kinase C inhibitor. J Biol Chem 268: 1982-1986.
Erangionic, Neel (1993) Analytical Biochemistry, 210:179.
Freeman (1969) San Francisco, pp. 27-62.
Fuchs E and Byrne C (1994) The epidermis: rising to the surface. Curr Opin Genet Dev 4: 725-736.
Gartsbein M, Alt A, Hashimoto K, Nakajima K, Kuroki T, and Tennenbaum T (2006) The role of protein kinase C delta activation and STAT3 Ser727 phosphorylation in insulin-induced keratinocyte proliferation. J Cell Sci 119: 470-481.
Goldsmith, L. A.
Goodson WH and Hunt TK (1979) Wound healing and the diabetic patient. Surg Gynecol Obstet 149: 600-608.
Green H (1977) Terminal differentiation of cultured human epidermal cells. Cell 11: 405-416.
Grunfeld C (1992) Diabetic foot ulcers: etiology, treatment, and prevention. Adv Intern Med 37:103-32: 103-132.
Hennings H, Michael D, Cheng C, Steinert P, Holbrook K, and Yuspa SH (1980) Calcium regulation of growth and differentiation of mouse epidermal cells in culture. Cell 19: 245-254.
Hofmann J (1997) The potential for isoenzyme-selective modulation of protein kinase C. FASEB J 11: 649-669.
Houghten (1985) Proc. Natl. Acad. Sci., USA 82:5131.
House C and Kemp BE (1987) Protein kinase C contains a pseudosubstrate prototope in its regulatory domain. Science 238: 1726-1728.
Jones KT and Sharpe GR (1994) Staurosporine, a non-specific PKC inhibitor, induces keratinocyte differentiation and raises intracellular calcium, but Ro31-8220, a specific inhibitor, does not. J Cell Physiol 159: 324-330.
Kazanietz MG, Areces LB, Bahador A, Mischak H, Goodnight J, Mushinski JF, and Blumberg PM (1993) Characterization of ligand and substrate specificity for the calcium-dependent and calcium-independent PKC isozymes. MoI Pharmacol 44: 298-307.
Keast DH and Orsted H (1998) The basic principles of wound care. Ostomy Wound Manage 44: 24-1.
Kikkawa U, Kishimoto A, and Nishizuka Y (1989) The protein kinase C family: heterogeneity and its implications. Annu Rev Biochem 58: 31-44.
Kirsner RS and Eaglstein WH (1993) The wound healing process. Dermatol Clin 11: 629-640.
Knol BW and Wisselink MA (1996) Lick granuloma in dogs; an obsession for dogs, owners and veterinarians. Tijdschr Diergeneeskd 121: 21-23.
Li L, Tennenbaum T, and Yuspa SH (1996) Suspension-induced murine keratinocyte differentiation is mediated by calcium. J Invest Dermatol 106: 254-260.
Li W, Nadelman C, Gratch NS, Chen M, Kasahara N, and Woodley DT (2002) An important role for protein kinase C-delta in human keratinocyte migration on dermal collagen. Exp Cell Res 273: 219-228.
Merrifield (1962) 85 J. Am. Chem. Soc. 2149.
Mousley M (2003) Diabetes and its effect on wound healing and patient care. Nurs Times 99: 70, 73-70, 74.
Nash LG, Phillips MN, Nicholson H, Barnett R, and Zhang M (2004) Skin ligaments: regional distribution and variation in morphology. Clin Anat 17: 287-293.
Nishizuka Y (1988) The molecular heterogeneity of PKC and its implications for cellular regulation. Nature 334: 661-665.
Nishizuka Y (1995) Protein kinase C and lipid signaling for sustained cellular responses. FASEB J 9; 484-496.
Ohba M, Ishino K, Kashiwagi M, Kawabe S, Chida K, Huh NH, and Kuroki T (1998) Induction of differentiation in normal human keratinocytes by adenovirus-mediated introduction of the eta and delta isoforms of protein kinase C. MoI Cell Biol 18: 5199-5207.
Querleux B, Cornillon C, Jolivet O, and Bittoun J (2002) Anatomy and physiology of subcutaneous adipose tissue by in vivo magnetic resonance imaging and spectroscopy: relationships with sex and presence of cellulite. Skin Res Technol 8: 118-124.
Saito I, Oya Y, Yamamoto K, Yuasa T, Shimojo H. (1985) Construction of nondefective adenovirus type 5 bearing a 2.8-kilobase hepatitis B virus DNA near the right end of its genome. J Virol. Jun;54(3):711-719.
Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (3d ed.).
Seo HR, Kwan YW, Cho CK, Bae S, Lee SJ, Soh JW, Chung HY, and Lee YS (2004) PKCalpha induces differentiation through ERK1/2 phosphorylation in mouse keratinocytes. Exp MoI Med 36: 292-299.
Shaw JE and Boulton AJ (1997) The pathogenesis of diabetic foot problems: an overview. Diabetes 46 Suppl 2:S58-61: S58-S61.
Shen S, Alt A, Wertheimer E, Gartsbein M, Kuroki T, Ohba M, Braiman L, Sampson SR, and Tennenbaum T (2001) PKCdelta activation: a divergence point in the signaling of insulin and IGF-1-induced proliferation of skin keratinocytes. Diabetes 50: 255-264.
Silhi N (1998) Diabetes and wound healing. J Wound Care 7: 47-51.
Stone OJ (1986) Hyperinflammatory proliferative (blastomycosis-like) pyodermas: review, mechanisms, and therapy. J Dermatol Surg Oncol 12: 271-273.
Svetek J, Schara M, Pecar S, Hergenhahn M, and Hecker E (1995) Spectroscopic characterization of specific phorbol ester binding to PKC-receptor sites in membranes in situ. Carcinogenesis 16: 2589-2592.
Tennenbaum T, Yuspa SH, Knox B, Sobel ME, Castronovo V, Yamada Y, and De Luca LM (1991) Alterations in attachment to laminin and localization of laminin binding proteins during differentiation of primary mouse keratinocytes in vitro (abstract). J Invest Dermatol 96: Abstract 566.
White SD (1990) Naltrexone for treatment of acral lick dermatitis in dogs. J Am Vet Med Assoc 196: 1073-1076.
Williams RL and Armstrong DG (1998) Wound healing. New modalities for a new millennium. Clin Podiatr Med Surg 15: 117-128.
Wysocki AB (1999) Skin anatomy, physiology, and pathophysiology. Nurs Clin North Am 34: 777-97, v.
Yeruham I, Gur Y, and Harmelin A (1992) Acral lick dermatitis in a dairy cow. Vet Rec 130: 479-480.
Yim VW, Yeung JH, Mak PS, Graham CA, Lai PB, and Rainer TH (2007) Five year analysis of Jockey Club horse-related injuries presenting to a trauma centre in Hong Kong. Injury 38: 98- 103.
Yuspa SH, Hawley-Nelson P, Stanley JR, and Hennings H (1980) Epidermal cell culture. Transplant Proc 12: 114-122.
Claims (111)
- δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体は水性担体でなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項1に記載の組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項2に記載の組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項2に記載の組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項4に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項2に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項2に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項2に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項2に記載の組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む、請求項1〜9のいずれか一項に記載の組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項9に記載の組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項11に記載の組成物。
- δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、薬学的に許容される担体、及び、薬物溶出スカフォールドを含み、前記担体は水性担体ではなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、組成物。
- 前記薬物溶出スカフォールドが、多孔性固体を含む、請求項13に記載の組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項14に記載の組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項15に記載の組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項15に記載の組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項17に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項15に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項15に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項15に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項15に記載の組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項22に記載の組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項22に記載の組成物。
- 前記薬物溶出スカフォールドが、スポンジである、請求項13〜24のいずれか一項に記載の組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでおらず、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含んでいる前記薬学的に許容される担体を含む、請求項25に記載の組成物。
- a)δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を提供する工程、ここで、前記担体が水性担体ではなく、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない、
b)δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を組み合わせる工程、ここで、前記担体が水性担体ではなく、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない、とを含み、それにより医薬組成物が製造される工程によって製造される、医薬組成物。 - 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項27に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項30に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項28に記載の医薬組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項35に記載の医薬組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項35に記載の医薬組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む請求項27〜37のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 動物の皮膚創傷の閉鎖を増加させるための医薬組成物であって、δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、ここで、前記担体が水性担体ではなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、医薬組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項39に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項42に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項40に記載の医薬組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項47に記載の医薬組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項47に記載の医薬組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む請求項39〜49のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 動物の皮膚創傷の部位での炎症を減少させるための医薬組成物であって、δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体が水性担体ではなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、医薬組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項51に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項52に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項52に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項54に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項52に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項52に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項51に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項51に記載の医薬組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項59に記載の医薬組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項59に記載の医薬組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む請求項51〜61のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- 動物上の創傷の閉鎖を増加させるための医薬組成物であって、δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体が水性担体ではなく、かつCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、そして、前記創傷が、糖尿病性潰瘍創傷、肢端舐性創傷、肉芽創傷、外科創傷、慢性日光膿瘍創傷、及び骨髄炎創傷からなる群から選択される少なくとも1つである、医薬組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項63に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項66に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項64に記載の医薬組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン及び約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項71に記載の医薬組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン及び1μMのペプチドを含む、請求項71に記載の医薬組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む請求項63〜73のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体が水性担体ではなく、かつK+カチオンを含んでいてCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項75に記載の組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項76に記載の組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項76に記載の組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項78に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項76に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項76に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項76に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項76に記載の組成物。
- δ−PKC活性化剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体がCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、そして、有効成分としてα−PKC阻害剤を含まない、組成物。
- 前記担体がK+カチオンを含んでいてCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、請求項84に記載の組成物。
- 前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項84又は85に記載の組成物。
- 前記インスリンアナログが、インスリンリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングラルジン、ビスファチン、及びL−α−ホスファチジルイノシトール−3,4,5−トリホスフェート,ジパルミトイル−,ヘプタアンモニウム塩からなる群から選択される少なくとも1つである、請求項86に記載の組成物。
- 前記インスリンが、ヒトインスリン、ウシインスリン、及びブタインスリンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項86に記載の組成物。
- 前記インスリンが、組換え発現させられている、請求項88に記載の組成物。
- 約0.0001ユニット/L〜約0.1ユニット/Lのインスリン又はインスリンアナログを含む、請求項86に記載の組成物。
- 0.0001ユニット/Lのインスリン又はインスリンアナログを含む、請求項86に記載の組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む水性担体である、請求項84〜91のいずれか一項に記載の組成物。
- α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体がCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、そして、有効成分としてδ−PKC活性化剤を含まない、組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項93に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項93に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項93に記載の組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項93に記載の組成物。
- 約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項97に記載の組成物。
- 1μMのペプチドを含む、請求項98に記載の組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体が、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む水性担体である、請求項93〜99のいずれか一項に記載の組成物。
- 動物上の皮膚創傷の部位での炎症を減少させるための医薬組成物であって、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体がCa2+及びMg2+カチオンを含んでいない、そして、有効成分としてδ−PKC活性化剤を含まない、医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項101に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55に示したアミノ酸配列を有するペプチドからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項101に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項101に記載の医薬組成物。
- 前記α−PKC阻害剤が、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する配列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドである、請求項101に記載の医薬組成物。
- 約1μM〜約100μMのペプチドを含む、請求項101に記載の医薬組成物。
- 1μMのペプチドを含む、請求項106に記載の医薬組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない前記薬学的に許容される担体は、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含む水性担体である、請求項101〜107のいずれか一項に記載の医薬組成物。
- δ−PKC活性化剤、α−PKC阻害剤、及び薬学的に許容される担体を含み、前記担体は、Ca2+及びMg2+カチオンを含んでいない、ここで、
前記δ−PKC活性化剤が、インスリン及びインスリンアナログではなく、
前記α−PKC阻害剤が、配列番号2、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、配列番号10、配列番号11、配列番号12、配列番号13、配列番号14、配列番号15、配列番号16、配列番号17、配列番号18、配列番号19、配列番号20、配列番号21、配列番号22、配列番号23、配列番号24、配列番号26、配列番号27、配列番号28、配列番号29、配列番号30、配列番号31、配列番号32、配列番号33、配列番号34、配列番号35、配列番号36、配列番号37、配列番号38、配列番号39、配列番号40、配列番号41、配列番号42、配列番号43、配列番号44、配列番号45、配列番号46、配列番号47、配列番号48、配列番号49、配列番号50、配列番号51、配列番号52、配列番号53、配列番号54、及び配列番号55のアミノ酸配列、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有し、そのカルボキシ末端でアミド化されている配列番号25に示したアミノ酸配列、及び、そのアミノ末端でミリストイル化アミノ酸残基を有する・BR>Z列番号1に示したアミノ酸配列からなるペプチドではない、組成物。 - 前記α−PKC阻害剤が、(S)−2,6−ジアミノ−N−[(1−(1−オキソトリデシル)−2−ピペリジニル)メチル]ヘキサンアミド二塩酸塩水和物、4’−N−ベンゾイルスタウロスポリン、ビスインドリルマレイミドIX、メタンスルホン酸塩、12−(2−シアノエチル)−6,7,12,13−テトラハイドロ−13−メチル−5−オキソ−5H−インドロ[2,3−a]ピロロ[3,4−c]カルバゾール、2−[1−(3−ジメチルアミノプロピル)−1H−インドール−3−イル]−3−(1H−インドール−3−イル)マレイミド、及びアプリノカルセンからなる群から選択される少なくとも1つである、請求項109に記載の組成物。
- Ca2+及びMg2+カチオンを含んでおらず、0.2g/LのKCl、0.2g/Lの無水KH2PO4、8g/LのNaCl、及び1.15g/Lの無水Na2HPO4を含んでいる前記薬学的に許容される水性担体を含む、請求項109又は110に記載の組成物。
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CA2625674C (en) * | 2005-08-29 | 2015-04-14 | Healor Ltd. | Methods and compositions for prevention and treatment of diabetic and aged skin |
WO2011011808A1 (en) * | 2009-07-30 | 2011-02-03 | Roman Buga | A cosmetic composition comprising sodium chloride in combination with one or more of protein, collagen, gelatin or amino acid |
WO2011082231A1 (en) * | 2009-12-31 | 2011-07-07 | New York University | Compositions and methods for promoting epithelialization and wound closure |
CN102724994A (zh) * | 2010-01-11 | 2012-10-10 | 希尔洛有限公司 | 用于治疗炎性疾病和病症的方法 |
EP2944319A1 (en) * | 2010-11-08 | 2015-11-18 | Arava Bio-Tech Ltd. | Buffered ophthalmic compositions and use thereof |
US10342891B2 (en) * | 2013-09-19 | 2019-07-09 | Medline Industries, Inc. | Wound dressing containing saccharide and collagen |
WO2015114062A1 (en) | 2014-01-29 | 2015-08-06 | Universite De Strasbourg | New target for diabetes treatment and prevention |
EP3421485A1 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-02 | Université de Strasbourg | Peptides for treatment and prevention of hyperglycaemia |
RU2766292C1 (ru) * | 2021-08-05 | 2022-03-14 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России) | Состав вакцины против covid-19 |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06316530A (ja) * | 1992-03-17 | 1994-11-15 | Pharmed Dr Liedtke Gmbh | 局所用インスリン含有製剤 |
JP2003528926A (ja) * | 2000-03-24 | 2003-09-30 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 新血管形成の改善された処置 |
JP2004536018A (ja) * | 2000-07-31 | 2004-12-02 | バル・イラン・ユニバーシティ | 創傷治療のための方法および薬学的組成物 |
WO2005000640A2 (en) * | 2003-06-27 | 2005-01-06 | Valeo Electrical Systems, Inc | Fluid heater with low porosity thermal mass |
JP2006518375A (ja) * | 2003-01-29 | 2006-08-10 | リポペプチド・アクチエボラーグ | 創傷治癒のための、カテリシジンll−37、および、それらの誘導体の使用 |
US20060258562A1 (en) * | 2000-07-31 | 2006-11-16 | Healor Ltd. | Methods and pharmaceutical compositions for healing wounds |
WO2007026356A2 (en) * | 2005-08-29 | 2007-03-08 | Healor Ltd. | Methods and compositions for prevention and treatment of diabetic and aged skin |
Family Cites Families (80)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3549747A (en) * | 1968-02-20 | 1970-12-22 | Flow Pharma Inc | Contact lens wetting solution and method of using same |
US3856919A (en) * | 1970-06-08 | 1974-12-24 | Burton Parsons Chemicals Inc | Ophthalmic solution |
US3947573A (en) * | 1969-12-01 | 1976-03-30 | Burton, Parsons And Company, Inc. | Opthalmic solution |
US3767788A (en) * | 1970-06-08 | 1973-10-23 | Burton Parsons Chemicals Inc | Ophthalmic solution |
US3767789A (en) * | 1971-06-21 | 1973-10-23 | Burton Parsons & Co Inc | Method of providing a synthetic mucus in vivo |
US3987163A (en) * | 1973-07-27 | 1976-10-19 | Burton, Parsons And Company, Inc. | Polystyrene sulfonate containing opthalmic solutions |
US3907985A (en) * | 1973-07-27 | 1975-09-23 | Burton Parsons And Company Inc | Polystyrene sulfonate containing opthalmic solutions |
US4029817A (en) * | 1973-09-24 | 1977-06-14 | Allergan Pharmaceuticals | Soft contact lens preserving solutions |
US3920810A (en) * | 1974-04-23 | 1975-11-18 | Burton Parsons And Company Inc | Polyacrylamide containing ophthalmic solutions |
US4120949A (en) * | 1977-10-05 | 1978-10-17 | Cooper Laboratories, Inc. | Ophthalmic solution |
US4131651A (en) * | 1977-10-25 | 1978-12-26 | Barnes-Hind Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of dry eye |
US4409205A (en) * | 1979-03-05 | 1983-10-11 | Cooper Laboratories, Inc. | Ophthalmic solution |
US4558033A (en) * | 1983-06-06 | 1985-12-10 | Amgen | Potentiation of the effects of insulin by peptides |
US4673649A (en) * | 1983-07-15 | 1987-06-16 | University Patents, Inc. | Process and defined medium for growth of human epidermal keratinocyte cells |
DE3674883D1 (de) * | 1985-11-25 | 1990-11-15 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Farbentwicklungsmethode in klinischen untersuchungen. |
US4801612A (en) * | 1986-07-03 | 1989-01-31 | Regents Of The University Of California | Method of inhibiting inflammatory response |
US4833257A (en) * | 1986-07-28 | 1989-05-23 | Arizona Board Of Regents | Compositions of matter and methods of using same |
IL80298A (en) * | 1986-10-14 | 1993-01-31 | Res & Dev Co Ltd | Eye drops |
JPH0739508B2 (ja) * | 1986-11-11 | 1995-05-01 | 株式会社林原生物化学研究所 | プルラン・ポリエチレングリコ−ル会合物とその製造方法並びに用途 |
US4808402A (en) * | 1987-05-29 | 1989-02-28 | Northwestern University | Method and compositions for modulating neovascularization |
US5137734A (en) * | 1989-03-22 | 1992-08-11 | Dana Farber Cancer Institute | Angiogenic monoglycerides |
US5019400A (en) * | 1989-05-01 | 1991-05-28 | Enzytech, Inc. | Very low temperature casting of controlled release microspheres |
US5158935A (en) * | 1989-05-12 | 1992-10-27 | Chiron Corporation | Human epidermal growth factor having substitution at position 11 |
US5723119A (en) * | 1989-07-28 | 1998-03-03 | Schering Corporation | Method for enhancing wound healing/repair with IL-4 |
US5145679A (en) * | 1989-10-05 | 1992-09-08 | Hinson Joan B | Topical emollient for prevention and treatment of circulatory induced lesions |
US5981606A (en) * | 1991-03-01 | 1999-11-09 | Warner-Lambert Company | Therapeutic TGF-beta-wound healing compositions and methods for preparing and using same |
EP0580778B1 (en) * | 1991-04-19 | 1999-08-11 | LDS Technologies, Inc. | Convertible microemulsion formulations |
US5591709A (en) * | 1991-08-30 | 1997-01-07 | Life Medical Sciences, Inc. | Compositions and methods for treating wounds |
HUT67319A (en) * | 1991-08-30 | 1995-03-28 | Life Medical Sciences Inc | Compositions for treating wounds |
WO1993008825A1 (en) * | 1991-11-04 | 1993-05-13 | Zymogenetics, Inc. | Pdgf gel formulation |
US6537973B1 (en) * | 1992-03-16 | 2003-03-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide inhibition of protein kinase C |
US5922686A (en) * | 1992-03-16 | 1999-07-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide modulation of protein kinase C |
GB9210574D0 (en) * | 1992-05-18 | 1992-07-01 | Ca Nat Research Council | Biotherapeutic cell-coated microspheres for wound/burn and prothesis implant applications |
CA2125060C (en) * | 1993-07-02 | 1999-03-30 | Henry P. Dabrowski | Ophthalmic solution for artificial tears |
US6028118A (en) * | 1996-08-08 | 2000-02-22 | Les Laboratoires Aeterna Inc. | Methods of using extracts of shark cartilage |
JP3414539B2 (ja) * | 1994-05-11 | 2003-06-09 | 有限会社ドット | 経鼻吸収用組成物 |
US5631245A (en) * | 1995-06-06 | 1997-05-20 | Biodynamics Pharmaceuticals, Inc. | Method for medicating the inflammatory controlling system and adverse inflammatory reactions and for making compounds for treating the pathology of adverse inflammatory reactions |
GB2304047A (en) * | 1995-08-09 | 1997-03-12 | Univ Manchester | Pharmaceutical compositions containing cytokines |
EP0877752B1 (en) * | 1996-01-23 | 2003-05-21 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Methods for screening for transdominant effector peptides and rna molecules |
US5869037A (en) * | 1996-06-26 | 1999-02-09 | Cornell Research Foundation, Inc. | Adenoviral-mediated gene transfer to adipocytes |
JPH10158188A (ja) * | 1996-11-29 | 1998-06-16 | Senju Pharmaceut Co Ltd | 角膜治療用組成物 |
GB9702943D0 (en) * | 1997-02-13 | 1997-04-02 | Univ Manchester | Wound healing |
US6274712B1 (en) * | 1997-12-23 | 2001-08-14 | 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. | Analogs of human basic fibroblast growth factor mutated at one or more of the positions glutamute 89, aspartate 101 or leucine 137 |
FR2773075B1 (fr) * | 1997-12-31 | 2000-05-05 | Cird Galderma | Utilisation d'activateurs de ppar-gamma en dermatologie |
DE69924232D1 (de) * | 1998-01-09 | 2005-04-21 | Novo Nordisk As | Stabilisierte insulin-zubereitungen |
US6790207B2 (en) * | 1998-06-04 | 2004-09-14 | Curon Medical, Inc. | Systems and methods for applying a selected treatment agent into contact with tissue to treat disorders of the gastrointestinal tract |
US6489306B2 (en) * | 1998-02-23 | 2002-12-03 | University Of South Florida | Method of intranasal gene transfer for protection against respiratory infection |
DE19826628C1 (de) * | 1998-06-17 | 2000-07-20 | Werner Kern | Intranasale Verwendung von Insulin bei Hirnleistungsstörungen |
US6376467B1 (en) * | 1998-10-09 | 2002-04-23 | The Regents Of The University Of California | Use of inhibitors of protein kinase C epsilon to treat pain |
IL141021A0 (en) * | 1998-07-23 | 2002-02-10 | Yeda Res & Dev | Treatment of autoimmune conditions with copolymer 1 and related copolymers |
US6096288A (en) * | 1998-10-12 | 2000-08-01 | Mobil Oil Corporation | Synthesis of the cubic mesoporous molecular sieve MCM-48 |
CA2350599A1 (en) * | 1998-11-20 | 2000-06-02 | Genentech, Inc. | Method of inhibiting angiogenesis |
US7261881B1 (en) * | 1999-05-20 | 2007-08-28 | Yale University | Modulation of angiogenesis and wound healing |
US6541447B1 (en) * | 1999-09-01 | 2003-04-01 | B & M Healthcare Technologies, Inc. | Wound healing composition and method for use thereof |
AU4721901A (en) * | 2000-02-25 | 2001-09-03 | Immunex Corp | Integrin antagonists |
US6582713B2 (en) * | 2000-04-06 | 2003-06-24 | Univ. Of Colorado - Colorado Springs | Compositions and methods for promoting wound healing |
US20040037828A1 (en) * | 2002-07-09 | 2004-02-26 | Bar-Ilan University | Methods and pharmaceutical compositions for healing wounds |
US20100129332A1 (en) * | 2000-07-31 | 2010-05-27 | Tamar Tennenbaum | Methods and pharmaceutical compositions for healing wounds |
GB2369572A (en) * | 2000-11-29 | 2002-06-05 | Raft Trustees Ltd | Wound treatment composition comprising insulin |
US20020119914A1 (en) * | 2000-12-26 | 2002-08-29 | Deguang Zhu | New uses of insulin and pancreatin |
JP2002198443A (ja) * | 2000-12-26 | 2002-07-12 | Nec Corp | 半導体装置及びその製造方法 |
GB0103877D0 (en) * | 2001-02-16 | 2001-04-04 | King S College London | Novel Drug Delivery system |
DE10109280A1 (de) * | 2001-02-26 | 2002-09-05 | Peter Mayser | Indolderivate mit inhibitorischer Wirkung auf Proteinkinasen |
KR100404072B1 (ko) * | 2001-03-12 | 2003-11-03 | 주식회사 두산 | 광범위 피부질환 치료용 조성물 |
US20030091601A1 (en) * | 2001-11-13 | 2003-05-15 | Abat Inc. | Use of topical arginine to enhance wound healing |
US20030124503A1 (en) * | 2001-12-28 | 2003-07-03 | Olivencia-Yurvati Albert H. | Pyruvate cardioplegia solutions for administration to the heart during cardiopulmonary surgery and methods of use thereof |
AU2003209226A1 (en) * | 2002-01-11 | 2003-07-30 | Michael Tennant | Adiponectin gene therapy |
RU2249467C2 (ru) * | 2002-11-25 | 2005-04-10 | ООО Научно-производственное предприятие "ЭРЛОН", Лтд. | Медицинский материал и изделия на его основе |
US20040175384A1 (en) * | 2003-12-12 | 2004-09-09 | Mohapatra Shyam S. | Protein kinase C as a target for the treatment of respiratory syncytial virus |
CN101850108A (zh) * | 2003-07-15 | 2010-10-06 | 巴尔-伊兰大学 | 用于愈合创伤的方法和药物组合物 |
NZ545086A (en) * | 2003-08-07 | 2011-06-30 | Healor Ltd | Pharmaceutical compositions and methods for accelerating wound healing |
KR20060127415A (ko) * | 2003-12-24 | 2006-12-12 | 와이어쓰 | 천식의 치료방법 |
WO2005079300A2 (en) * | 2004-02-13 | 2005-09-01 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | Protein kinase inhibitors and methods for identifying same |
WO2006108270A1 (en) * | 2005-04-11 | 2006-10-19 | Pharmagap Inc. | Inhibitors of protein kinases and uses thereof |
CA2659961A1 (en) * | 2005-08-05 | 2007-02-15 | Pharmagap Inc. | Targeted protein kinase c inhibitors and uses thereof |
MX2008002272A (es) * | 2005-08-19 | 2008-04-16 | Emisphere Tech Inc | Compuestos de ciclopropilo y composiciones para suministrar agentes activos. |
US20090306045A1 (en) * | 2005-12-22 | 2009-12-10 | Ira Mellman | Inhibition of Glycogen Synthase Kinase and Methods of Treating Autoimmune or Immune Inflammatory Disease |
US20080292726A1 (en) * | 2007-01-23 | 2008-11-27 | Bernstein Lawrence R | Ophthalmic gallium compositions and methods of their use |
WO2010029350A1 (en) * | 2008-09-09 | 2010-03-18 | University Of East Anglia | Treatment of fibrotic eye disorders |
EP2400980B1 (en) * | 2009-02-24 | 2016-08-31 | Arava Bio-Tech Ltd. | Visfatin antagonists agents for the treatment of acne and other conditions |
-
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06316530A (ja) * | 1992-03-17 | 1994-11-15 | Pharmed Dr Liedtke Gmbh | 局所用インスリン含有製剤 |
JP2003528926A (ja) * | 2000-03-24 | 2003-09-30 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | 新血管形成の改善された処置 |
JP2004536018A (ja) * | 2000-07-31 | 2004-12-02 | バル・イラン・ユニバーシティ | 創傷治療のための方法および薬学的組成物 |
US20060258562A1 (en) * | 2000-07-31 | 2006-11-16 | Healor Ltd. | Methods and pharmaceutical compositions for healing wounds |
JP2006518375A (ja) * | 2003-01-29 | 2006-08-10 | リポペプチド・アクチエボラーグ | 創傷治癒のための、カテリシジンll−37、および、それらの誘導体の使用 |
WO2005000640A2 (en) * | 2003-06-27 | 2005-01-06 | Valeo Electrical Systems, Inc | Fluid heater with low porosity thermal mass |
WO2007026356A2 (en) * | 2005-08-29 | 2007-03-08 | Healor Ltd. | Methods and compositions for prevention and treatment of diabetic and aged skin |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
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