JP2012034577A5 - - Google Patents

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  1. 細胞に照明光を照射して集光位置を深さ方向に変化させつつ深さ方向に交差する方向に走査させ、前記細胞からの戻り光を撮影して3次元画像を取得する画像取得工程と、
    該画像取得工程により取得された前記3次元画像上で、複数の前記細胞により形成されるコロニーに含まれる個々の前記細胞の特徴量を抽出する特徴量抽出工程と、
    前記3次元画像内の細胞数に対する前記特徴量抽出工程により抽出された前記特徴量が所定の閾値を超える細胞数の割合もしくは所定の閾値を下回る細胞数の割合に基づいて前記コロニーの特性を評価する評価工程とを含むコロニーの特性評価方法。
  2. 前記評価工程において、前記コロニーの特性として、コロニーの増殖または分化の程度を評価する請求項1に記載のコロニーの特性評価方法。
  3. 前記評価工程において、前記コロニーの特性として、コロニーに未分化細胞が多く含まれるかどうかを評価する請求項2に記載のコロニーの特性評価方法。
  4. 前記評価工程において、前記細胞数の割合として、G1期の細胞数の割合に基づいてコロニーに未分化細胞が多く含まれるかどうかを評価する請求項3に記載のコロニーの特性評価方法。
  5. 前記特徴量抽出工程において、特徴量として、DNA量および密度を抽出し、
    前記評価工程において、前記DNA量および密度によってG1期の細胞数の割合を特定し、G1期の細胞数の割合に基づいてコロニーに未分化細胞が多く含まれるかどうかを評価する請求項4に記載のコロニーの特性評価方法。
  6. 前記評価工程において、複数のコロニーの前記G1期の細胞数の割合を比較することにより、コロニーに未分化細胞が多く含まれるかどうかを評価する請求項4または5に記載のコロニーの特性評価方法。
  7. 前記評価工程において、前記コロニーの特性として、コロニーが将来どのような器官になる可能性が高いかを評価する請求項2に記載のコロニーの特性評価方法。
  8. 前記特徴量抽出工程において、特徴量として、ニューロン特異的なマーカーが発する蛍光量を抽出し、
    前記評価工程において、前記蛍光量が所定の閾値を超える細胞数の割合に基づいて前記コロニーが将来ニューロンになる可能性が高いと評価する請求項7に記載のコロニーの特性評価方法。
  9. 前記特徴量が、蛍光強度、蛍光波長、前記細胞の大きさ、形状、密度、または、これらの変化量のうち少なくとも1つを含む請求項1から8のいずれかに記載のコロニーの特性評価方法。

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