JP2011521247A5 - - Google Patents

Claims (14)

1. 一次元および二次元ゲル電気泳動の画像収集の方法であって、
   タンパク質に結合された蛍光色素をパルスレーザスキャナで励起して、たんぱく質の検出および定量化のための蛍光寿命画像化測定値を画素毎のレベルで与え、蛍光減衰曲線の多次指数関数的当てはめを用いて、蛍光色素標識化タンパク質種から生じる蛍光と、ゲルマトリクス自身、ゲル内に存在する溶液または粒子、または散乱効果を含むグループから選択された他の源から生じる蛍光とを分離することを特徴とする、前記画像収集の方法。
2. 前記タンパク質の検出および定量化は、ブロットした後に蛍光を定量化することを含む、請求項１記載の画像収集の方法。
3. 前記パルスレーザスキャナは密閉したスキャナ容器内に納めたダイオードレーザである、請求項１記載の画像収集の方法。
4. 前記パルスレーザスキャナは光ファイバケーブル・コンセントにより外部に取り付けて、用いる励起波長に最適の柔軟性を与える、請求項１記載の画像収集の方法。
5. 前記方法はグレードアップした現在の計装で行う、請求項１記載の画像収集の方法。
6. 前記方法は完全に閉じたスキャナシステムで行う、請求項１記載の画像収集の方法。
7. 蛍光減衰曲線の多次指数関数的当てはめを用いて、後でバックグラウンド除去を行うために、蛍光色素標識化タンパク質種から生じる蛍光と、ブロットした膜を含む他の源から生じる蛍光とを分離することを更に含む、請求項１または２記載の画像収集の方法。
8. 励起のために多数のレーザ波長を連続的に用いて、時間分解蛍光と蛍光色素のスペクトル分離との組合せを容易にし、スペクトル分離による多重化を用いて寿命減衰スペクトルの複雑さを減らすことを更に含む、請求項１記載の画像収集の方法。
9. 二重蛍光寿命画像化測定がある、請求項８記載の画像収集の方法。
10. 前記蛍光色素に特有の強度蛍光減衰曲線を積分して曲線の下の面積を計算することを更に含む、請求項１記載の画像収集の方法。
11. 自動化およびユーザが使いやすい機能を組み込むことを更に含む、請求項１記載の画像収集の方法。
12. 前記自動化およびユーザが使いやすい機能は、得られる一次元または二次元のゲル電気泳動の図形的および定量的計算、蛍光寿命画像化解析のための自動化プロトコル、前記バックグラウンド成分の除去、および二次元のゲル電気泳動に用いられる標準蛍光色素のための蛍光色素成分の強度画像のエクスポートの少なくとも１つを含む、請求項１１記載の画像収集の方法。
13. 自動化を最大にし、多重化に用いる多数の蛍光色素の連続スキャニングを含むユーザが定義する多数の異なるプロトコルの連続スキャニングのプログラミングを容易にすることを更に含む、請求項１記載の画像収集の方法。
14. ゲルベースのプロテオミクスに用いる蛍光プローブと、スキャン時間の最適化のための可変周波数パルスレーザダイオードとを用いることを更に含む、請求項１記載の画像収集の方法。