JP2011517452A

JP2011517452A - 抗増殖性化合物およびその治療的使用

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Publication number: JP2011517452A
Application number: JP2011502271A
Authority: JP
Inventors: パッセイリーニカルロガンバコウルティ、; ローザリンドヘレンガンビー、; アルフォンソツァムボン、; レオナルドスクラポザ、; シアエアンアメド、; プテジェ．ゴエクジアン、; ダヴィドゲイラール、; フロランスポポヴィクス; セドリクシュネイデル、
Original assignee: Univrsite De Geneve; Universite Claude Bernard Lyon 1 UCBL; Universita degli Studi di Milano Bicocca
Current assignee: Univrsite De Geneve; Universite Claude Bernard Lyon 1 UCBL; Universita degli Studi di Milano Bicocca
Priority date: 2008-04-01
Filing date: 2009-03-30
Publication date: 2011-06-09
Anticipated expiration: 2029-03-30
Also published as: JP5524173B2; WO2009121535A3; EP2107054A1; WO2009121535A2; CA2720176A1; US20110112110A1

Abstract

発癌性チロシンキナーゼＡＬＫおよびＢｃｒ−Ａｂｌ変異体Ｔ３１５ＩＢｃｒ−Ａｂｌの阻害剤、同剤を含む医薬組成物、ならびに過剰増殖性疾患の治療のためのそれらの使用。

Description

本発明は、発癌性チロシンキナーゼＡＬＫおよびＢｃｒ−Ａｂｌ変異体Ｔ３１５ＩＢｃｒ−Ａｂｌの阻害剤、同剤を含有する医薬組成物、ならびに癌等の過剰増殖性疾患の治療のため、特に、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）および炎症性筋線維芽細胞腫瘍（ＩＭＴ）等のＡＬＫ融合タンパク質陽性癌と、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）およびＰｈ＋急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）等のＴ３１５ＩＢｃｒ−Ａｂｌ陽性癌との治療のためのそれらの使用を提供する。

癌は、細胞の正常な成長、位置および死亡率を制御する過程の破壊に起因する。この正常な制御機構の喪失は、タンパク質キナーゼの発癌活性化につながる突然変異の獲得により生じる。例えば、染色体再配置ｔ（２ｑ２３，５ｑ３５）によって発生するＡＬＫ中の構造変化は、ＡＬＣＬに関連するＮＰＭ／ＡＬＫ発癌性融合タンパク質を産生する¹(非特許文献１)。それに対し、染色体再配置ｔ（９ｑ３４，２２ｑ１１）によって発生するＡｂｌ中の構造変化は、ＣＭＬおよびＡＬＬに関連するＢｃｒ−Ａｂｌ発癌性融合タンパク質を産生する²（非特許文献２）。Ｂｃｒ−Ａｂｌのキナーゼドメイン内において、突然変異Ｔ３１５Ｉは、分子標的療法に対する腫瘍の抵抗に重要である³。

タンパク質キナーゼは、多くのタンパク質においてアデノシン−５'−三リン酸(ＡＴＰ)から特定のアミノ酸残基へのリン酸の転移を触媒する酵素である。概して、タンパク質のリン酸化は、その機能性を、一部の場合には不活性から活性に、その他の場合には活性から不活性に変化させる。このように、細胞増殖等のシグナル伝達経路のほとんどがリン酸化によって媒介されるため、タンパク質キナーゼは細胞機能の多くの側面の調節に関与する。タンパク質キナーゼの異常活性は、多くの癌および他の疾患に関係するとされている。チロシンのフェノール性ヒドロキシルをリン酸化するチロシンキナーゼは、これらの過程に特に関与する。

大細胞リンパ腫は、すべての非ホジキンリンパ腫の約２５％に相当し、これらの腫瘍の約３分の１は未分化大細胞リンパ腫(ＡＬＣＬ)である。同様に、半数を超えるＡＬＣＬ患者が、ＮＰＭ／ＡＬＫ融合タンパク質の発現につながる染色体転座を有する。構成的に活性なＮＰＭ／ＡＬＫは、形質転換特性および腫瘍形成特性を有する強力な癌遺伝子であることが広範に実証されている⁴。正常なＡＬＫは人体において低レベルで発現するという事実と併せて考えると、リンパ腫細胞内でのＮＰＭ／ＡＬＫおよび他のＡＬＫ融合タンパク質変異株の高レベルの発現ならびにリンパ腫発生におけるそれらの直接的な役割は、ＡＬＫが潜在的に療法の理想的な標的となり得ることを示唆している。

慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)は、Ｐｈ染色体という名称の変性した染色体の存在を特徴とする骨髄増殖性疾患である。８０年代において、この細胞遺伝学的異常と関連する分子の欠損が同定され、Ｐｈ染色体は、チロシンキナーゼ活性を示す発癌性融合タンパク質Ｂｃｒ−Ａｂｌをコードするハイブリッド遺伝子ＢＣＲ−ＡＢＬの形成をもたらすことが立証された。１９８０年代後半、ＣＭＬの発症および進行におけるＢＣＲ−ＡＢＬの役割について蓄積されたデータは、ＢＣＲ−ＡＢＬが分子標的療法アプローチのための最も魅力的な標的であることを示した。そこで、腫瘍性タンパク質のＴＫ活性を阻害しようとする試みが開始され、この過程は最終的にメシル酸イマチニブの発見および開発で終わった。イマチニブは、約８年間(患者５０，０００人)の臨床試験中であり、長期寛解に関して著しい成果を収めている。成功した臨床試験の間、特に急性白血病患者においてイマチニブに対する耐性が現れたが、これは慢性期の患者においても可能性のある問題である。耐性の分子機構は、Ｂｃｒ−Ａｂｌ遺伝子増幅および該遺伝子の触媒キナーゼドメイン内での突然変異において同定された³。ゲートキーパーであるアミノ酸スレオニンのイソロイシン(Ｔ３１５Ｉ)への突然変異は、患者における主要な突然変異として描写されている³。これは、ダサチニブ(Ｄａｓａｔｉｎｉｂ)⁵、ＳＫＩ−６０６⁶およびニロチニブ(Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ)⁷等、耐性の問題を克服することができる新たな化合物を見出すための熱心な研究を促してきた。イマチニブと比較して増大した有効性にもかからわらず、それらのいずれもイマチニブ耐性Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ変異体を効率的に阻害することができない。これらの事実は、Ｂｃｒ−ＡｂｌＴ３１５Ｉ変異体が確かに療法の標的であることを示している。

開示されているＡＬＫおよびＢｃｒ−Ａｂｌ変異体Ｔ３１５Ｉの阻害は、以前に開発されたＥＬＩＳＡベースのインビトロキナーゼアッセイ(ＥＰ１４５４９９２)を使用して実証された。さらに、ＮＰＭ／ＡＬＫ形質転換細胞に対する該化合物の細胞活性は、トリチウム化チミジンベースの細胞増殖阻害アッセイによって実証された。

Ｒａｂｂｉｔｓｓ，Ｔ．Ｈ．ｎａｔｕｒｅ，１９９４，３７２，１４３．Ｂｅｎ−Ｎｅｒｉａｈ，Ｙ．，Ｄａｌｅｙ，Ｇ．Ｑ．，Ｍｅｓ−Ｍａｓｓｏｎ，Ａ．Ｍ．，Ｗｉｔｔｅ，Ｏ．Ｎ．＆Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｄ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９８６，２３３，２１２．

第１の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物：

［式中、Ｑ、Ｔ、Ｗ、Ｋ、Ｊ、Ｙ、Ｘ、Ｚは、Ｃ、Ｎ、Ｓ、Ｏから独立に選択され、但し、該対応する環は（ヘテロ）芳香族であり、
ｎ＝０または１であり、
ｑ＝１または２であり、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＮＨ₂、

から選択され、
Ｒ２は水素またはハロゲンであり、
Ｒ３は、

から選択されるか、
または式（Ｉ）中に存在する部分

は、基

を形成し、式中、Ａは−ＣＨ２−または−ＮＨ−である］
を提供する。

第１の好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉａ）の化合物：

［式中、
Ｒ１は、

から選択され、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｗ、Ｔ、Ｑ、Ｙ、Ｋ、ＪおよびＺは、上記で定義された通りである］
を提供する。

さらに好ましい実施形態において、本発明は、式（ＩＩａ）の化合物：

［式中、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＮＨ₂、

から選択され、
Ｒ２はハロゲンであり、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｋ、Ｊ、Ｚは、上記で定義された通りである］
を提供する。

またさらに好ましい実施形態において、本発明は、式（ＩＩＩａ）の化合物

［式中、Ａは−ＣＨ２−または−ＮＨ−であり、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｘ、Ｚ、ＪおよびＫは、上記で定義された通りである］
を提供する。

本発明の化合物は、遊離塩基または酸付加塩、好ましくは薬学的に許容される酸との塩としての形態であってよい。本発明は、化合物の分離された異性体およびジアステレオマー、またはそれらの混合物（例えばラセミ混合物）も含む。

さらなる態様において、本発明は、治療剤として使用するための、（ａ）〜（ｎ）からなる群から選択される化合物を提供し、各化合物の下には識別子（ＭＤＬ番号）が報告されている。

またさらなる実施形態において、本発明は、化合物（ａ）〜（ｎ）を含む上記した通りの化合物を、生理的に許容される担体および添加剤と併せて含有する医薬組成物を提供する。

組成物は、固体、半固体または液体製剤の形態、好ましくは、液剤、懸濁剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、エアゾール剤または制御送達系の形態であってよい。組成物は、経口、経皮、皮下、静脈内、筋肉内、直腸内および鼻腔内を含む多様な経路によって投与でき、各投薬量が約１〜約１０００ｍｇ、好ましくは１〜５００ｍｇの活性成分を含有する単位剤形で配合されるのが好ましい。医薬組成物の調製のための原理および方法は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ、ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ（ＰＡ）において記載されている。

またさらなる実施形態において、本発明は、腫瘍、特に未分化リンパ腫キナーゼ関連またはＢｃｒ−Ａｂｌ関連腫瘍の治療において使用するための、上記で特定された化合物（ａ）〜（ｎ）を含む、本明細書において提供される通りの化合物または医薬組成物に関する。好ましい実施形態において、本発明による化合物または組成物は、未分化大細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、炎症性筋線維芽細胞腫瘍、慢性骨髄性白血病またはＰｈ＋急性リンパ性白血病の治療において使用される。さらに好ましい実施形態において、化合物または組成物は、イマチニブ(Ｉｍａｔｉｎｉｂ)またはダサチニブまたはニロチニブまたはボスチニブ(Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ)に耐性がある慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)の治療に使用される。

一般的な合成戦略
化合物を、２つの芳香族またはヘテロ芳香族、および２個のヘテロ原子を有する末端５員という一連の３つの不飽和環として設計した。これらの分子は、他の誘導体の合成のコアとなり、５員環上のメタ位における新たな部分の導入は、ＡＬＫ活性部位に対する高親和性を実現するための有望な手法であると考えられている。

共通前駆体から出発して末端基の一団を産生するために、合成アプローチは、非置換５員環のクロスカップリングから開始する。この場合、該５員環のＣ２位は、多環芳香族骨格の構築後に誘導体化を受けるために開いたままである。そのような反応には、概して環の陽子間における異なる酸性度に基づいて多くの例があり、１,３ヘテロ芳香族(heteroarmatic)構造では、Ｃ２位は飛び抜けて酸性が強く、容易にかつ選択的にリチオ化(litiated)され得る。アミノ、アルキルおよびスルファニル部分は、このアプローチを使用してコア構造に結合することができる末端基の例である。

最適な合成経路は、５員の有機金属環と芳香族部分との間の最初のスティルカップリングに基づく。これは、同様に、異なる反応性の２個のハロゲンを有する単一の芳香環または単一のハロゲンを有する２つの芳香環を使用して遂行されている。前者の場合、第２のハロゲンは、鈴木またはスティル手順を適切な有機金属パートナーとともに使用して実施される下記の炭素−炭素カップリング反応において、脱離基として作用する。既に述べた通り、末端基の官能化は合成ラインの終端で行われる。

最初に、末端部分の５員環を合成し、従った文献の方法は、イミダゾールのスタンニル誘導体についてはＣｌｉｆｆおよびＰｙｎｅによって、また有機金属チアゾールについてはＤｏｎｄｏｎｉによって元来開発されたものであった。２つの複素環のＣ４／Ｃ５位における官能化のためのアプローチは全く異なり、イミダゾールについてはメタル化がハロゲン化／還元的脱ハロゲン化ステップ後に金属−ハロゲン交換を介して起こるのに対し、チアゾールはＣ２において直接リチオ化され、塩化トリメチルシリルで保護され、Ｃ５において再度メタル化されることができる。

これらの前駆体が得られたら、Ｃ２におけるカップリングおよび官能化に対するそれらの反応性を試験した。トシルアジドによるチアゾールの官能化は報告されていないが、実行可能であることが証明された。試験反応において、リチオ化後におけるチアゾールへのＴｓＮ₃の標準的な付加(addiction)、それに続くアジドのヒドリド還元によって２−アミノチアゾールが得られ、同様に、チオエーテル基の導入も極めて直接的であった。

次いで、有機複素環をスティルカップリングにおいて使用した。最初に、２−ヨード−５−クロロピリジンの付加体を、次いで、第２のカップリングを受けるのにより適した５−臭素類似体を合成した。収率は、チアゾールについては良好、イミダゾールについては、おそらく反応条件下におけるＭＯＭ保護基の不安定性のために、劣悪であった。

炭素−ハロゲン結合上におけるＰｄの酸化挿入を支持する、より電子不足の位置における好適な脱離基（Ｉ対Ｂｒ）の存在によって予想できるように、この最初のスティル反応の位置選択性は顕著である。いずれの場合も、α−窒素付加体は、ＮＯＥの分析によって示される通り、他のジアステレオ異性体の痕跡なく単離された。

第２の付加は、スズまたはボロン−アリール化合物により、スティルまたは鈴木カップリングを介して遂行することができ、本発明者らは、ボロン酸およびスタンニル化合物のいずれとしても容易に合成できる１，２−ジクロロ−３−メトキシベンゼン誘導体から出発した（Ｐｅｒｅｃら、Ｊ.Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ.、２００１、２１０４〜２１１７）。下記のスティル反応は遅すぎた(３ｄの後は測定可能な生成物形成なし)が、鈴木反応は良好であった。

同じアプローチを用いて、２−ピリジン、３−ピリジンおよび２−ブロモベンゼン基等の末端部分を、スティル手順を用いて有機スズ化合物として（２−および３−ピリジン）、または鈴木手順を用いて有機臭素化合物として（２−ブロモベンゼン、３−ピリジン）カップリングし、導入した。反応条件を評価すると、２つのカップリングを組み合わせて、第１の付加が完了したら反応混合物に第２の有機金属を単純に添加する１ポット２ステップ反応とすることが可能であり、これにより、新たな触媒の使用およびクロマトグラフ分離を省略して、合成ラインを大幅に加速することが可能になる。

末端アミノ部分のアミドへの誘導体化は、試験化合物として５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミンについて研究された。

典型的なカップリング手順は、塩基としてトリエチルアミンを用いる、溶媒混合物（ＴＨＦ／ＤＭＦまたはＤＣＭ／ＤＭＦ）中での塩化アシルのアミンとの反応、ならびに塩基としてジイソプロピルエチルアミンまたはトリエチルアミンを用いる、ＤＣＣ、ＨＴＢＵ、ＤＩＥＡおよびＰｙＢＯＰ等のカップリング剤によって促進される酸との反応であった。これらの方法を使用して、下記の化合物を合成した。

Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセトアミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−７−（ジエチルアミノ）ヘプタンアミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）ニコチンアミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−５−ブロモフラン−２−カルボキサミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロパンアミド
５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フェニル］−フラン−２−カルボン酸［４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−４−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ベンズアミド
Ｎ−（４−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−３,４,５−トリヨードベンズアミド。

既に述べた通り、文献の方法によるスズ置換チアゾールの合成は低収率に悩まされ、これは、主として低温におけるアニオンの難溶解性によるものであった。−７８℃でカルバニオンの完全形成を達成するために、本発明者らは、１０ｍｌのＴＨＦごとに希釈度を１ｍｍｏｌ(８５ｍｇ)に上げなくてはならず、この手順は大規模な調製には適さないため、カルバニオンの形成を遂行するためにＢｕＬｉの付加ごとに温度を上げる、Ｃ−２およびＣ−５カルバニオン上における金属塩化物の逐次付加を用いる１ポット２ステップ手順を選定した。本発明者らの予想では、第１の付加／クエンチシーケンスは最も酸性が強いＣ−２位をＴＭＳ基で保護するはずであり、第２のシーケンスはトリメチルスズ基を穏やかな酸性(mildly acidic)のＣ−５に導入することを目的としていた。Ｃ５−シリルの転位により、Ｃ２−スズ付加体が非常に高い収率で得られた、すなわち、Ｃ５位として挙動したチアゾール環は最も酸性が強いものであった。

そのような挙動の最も直接的な原理は、より強い酸の共役塩基であるカルバニオンの異なる熱力学的安定性を考慮に入れており、Ｃ２アニオンはＣ５アニオンよりも安定であり、塩基を再配列させるには、温度を−２０℃に上げれば十分である。イミダゾールアニオンの４位と２位との間の再平衡が報告されている（Ｇｒｏｚｉａｋ,Ｍ.Ｐ.、Ｗｅｉ,Ｌ.、Ｊ.Ｏｒｇ.Ｃｈｅｍ.、１９９１、４２９６〜４３００）。

発明者らの実験データに基づいて、本発明者らは、この転位のためにスキームで示されている機構を提案する。

このように、反応温度を制御することにより、チアゾール環のＣ５位を直接官能化して、保護／脱保護手順の使用を回避することが可能である。

２−トリメチルスズおよび２−トリメチルシリルチアゾール上での転位はともに有効であり、対応するＣ５化合物が高収率で得られた。

上述したスティル反応において、同じ付加体がさらに精製することなく有効であった。

１．化合物の合成
１）Ｎ，Ｎ’−（５，５’−（１，４−フェニレン）ビス（１Ｈ−イミダゾール−５，２−ジイル））ジアセトアミド（ｒ１１４）

ＤＭＦ(５ｍＬ)中のアセチルグアンニジン(acetylguannidine)(４００ｍｇ、４ｍｍｏｌ)の溶液に、１,１'−(１,４−フェニレン)ビス(２−ブロモエタノン)(３２０ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で９６時間撹拌し、次いで蒸発させ、水に再度溶かし、高真空下で乾燥させて、５０ｍｇ(１５％収率)のＮ,Ｎ'−(５,５'−(１,４−フェニレン)ビス(１Ｈ−イミダゾール−５,２−ジイル））ジアセトアミドを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：１１．７２（ｂｓ１Ｈ）；１１．２８（ｂｓ，１Ｈ）；７．６４（ｓ，４Ｈ）；７．２０（ｓ，２Ｈ）；２．０５（ｓ，６Ｈ）。

２）４，４’−（１，４−フェニレン）ジチアゾール−２−アミン（ｒ２１８の前駆体）

２−ブロモ−１−［４−（２−ブロモ−アセチル）フェニル］エタノン（０．２８ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、熱エタノール（２５ｍＬ）中のチオ尿素（０．１２ｇ、１．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物を７０℃で３時間撹拌した。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（９４：５：１、ＣＨＣｌ₃：ＥｔＯＨ：Ｅｔ₃Ｎ）によって精製して、１９０ｍｇ（７７％）の４，４’−（１，４−フェニレン）ジチアゾール−２−アミンを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：７．８０（ｓ，４Ｈ）、７．１９（ｓ，２Ｈ）、３．５１（ｂｓ，ＮＨ₂）。

３）Ｎ，Ｎ’−（４，４’−（１，４−フェニレン）ビス（チアゾール−４，２−ジイル））ビス（４−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ベンズアミド）（ｒ２１８）

４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−安息香酸（０．３８ｇ、１．６ｍｍｏｌ）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．０ｍｍｏｌ）に溶解した。１０分後、ＨＢＴＵ（０．２６ｇ、０．７ｍｍｏｌ）および４，４’−（１，４−フェニレン）ジチアゾール−２−アミン（０．１９ｇ、０．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌した。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（９４：５：１ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＥｔＯＨ：Ｅｔ₃Ｎ）によって精製して、２００ｍｇ（４０％）のＮ，Ｎ’−（４，４’−１，４−フェニレン）ビス（チアゾール−４，２−ジイル））ビス（４−４（（４−メチルピペラジン−ｌ−イル）メチル）ベンズアミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：８．００（ｄ，４Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、８．０２（ｓ，４Ｈ）、７．７３（ｓ，２Ｈ）、７．４８（ｄ，４Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、３．５９（ｓ，４Ｈ）、２．５０（ｂｓ，１６Ｈ）、２．４５（ｓ，６Ｈ）。

４）１，４−ジ（フラン−３−イル）ベンゼン（ｒ２３６）

パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン(tetrakistryphenilphosphine)（０．２０ｍｍｏｌ、０．２４ｇ）を、ジメトキシエタン／水（１５／５ｍＬ）中の、１，４−ジブロモベンゼン（１．０ｇ、４．４ｍｍｏｌ）、フラン−３−イルボロン酸（０．４０ｇ、３．６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４．２ｇ、１３ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、得られた混合物を脱気し、アルゴン下で１４時間還流させた。

得られた懸濁液を冷却し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（９５：５ヘキサン酢酸エチル）によって精製して、１００ｍｇ（１３％）の１，４−ジ（フラン−３−イル）ベンゼンを白色固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ（ｐｐｍ）：７．７５（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）７．４９（ｍ，６Ｈ）６．７２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）。

５）５−ブロモ−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）メタノン

５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸（２．０ｇ、１０ｍｍｏｌ）を塩化チオニル（１０ｍＬ）に懸濁させた。反応混合物を１００℃に加熱し、２滴のＤＭＦを添加し、得られた溶液を１時間還流させた。冷却後、塩化チオニルを減圧下で除去し、残留物をＥｔ₃Ｎ（３ｍＬ）および無水ＴＨＦ（２５ｍＬ）に再度溶かした。溶液を濾過し、１−メチル−ピペラジン（１．５５ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を７０℃に終夜加熱した。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（９７：２：１ＣＨＣｌ₃：ＥｔＯＨ：Ｅｔ₃Ｎ）によって精製して、２．２０ｇ（８０％）の（５−ブロモ−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）メタノンを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：６．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、６．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、３．８３（ｂｓ，４Ｈ）、２．３６（ｓ，３Ｈ）、１．８０（ｂｓ，４Ｈ）。

６）（５−｛４−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フラン−２−イル］−フェニル｝−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン（ｒ２３７）

パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（４０ｍｇ、３６μｍｏｌ）を、脱気したジオキサン（１５ｍＬ）および飽和炭酸ナトリウム水溶液（８ｍＬ）中の（５−ブロモ−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン（０．４０ｇ、１．４ｍｍｏｌ）および１，４−フェニレンジボロン酸（０．１２ｇ、０．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物をアルゴン雰囲気下で終夜還流させた。溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（８９：１０：１ＣＨＣｌ₃：ＥｔＯＨ：Ｅｔ₃Ｎ）によって精製して、２６０ｍｇ（８０％）の（５−｛４−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フラン−２−イル］フェニル｝−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）メタノンを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：７．７０（ｓ，４Ｈ）、７．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、６．７８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、３．９４（ｂｓ，８Ｈ）、２．４０（ｓ，６Ｈ）、１．８５（ｂｓ，８Ｈ）。

７）５，５’−（１，４−フェニレン）ジフラン−２−カルボン酸（ｒ２３９）

パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（０．１０ｍｍｏｌ、０．３０ｇ）を、ジメトキシエタン／水（１０／５ｍＬ）中の、１，４−フェニレンジボロン酸（０．４０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３．２０ｇ、１０ｍｍｏｌ）および５−ブロモフラン−２−カルボン酸（０．９５ｇ、５ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、得られた混合物を脱気し、アルゴン下で還流させた。２４時間後、溶媒を真空蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（９８：２ＣＨ₂Ｃｌ₂ ＣＨ₃ＯＨ）によって精製して、０．１５ｇ（２０％）の５，５’−（１，４−フェニレン）ジフラン−２−カルボン酸（０．１５ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：７．８５（ｍ，４Ｈ）７．２０（ｍ，２Ｈ）７．１６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）。

８）５−クロロ−２−（１−（メトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、脱気したトルエン（２０ｍｌ）中の１−（メトキシメチル）−４−（トリメチルスタンニル）−１Ｈ−イミダゾール（５５０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）および２−ブロモ−５−クロロピリジン（４００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ(portiowise)添加した。反応混合物を２日間還流させた。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、７０：３０）によって精製して、７０ｍｇ（１５％）の５−クロロ−２−（１−（メトキシメチル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル）ピリジンを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：。

９）５−クロロ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）４（１１０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、脱気したトルエン（１０ｍｌ）中の２−（トリメチルシリル）−５−（トリメチルスタンニル）チアゾール（３２０ｍｇ、１ｍｏｌ）および２−ブロモ−５−クロロピリジン（２００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。反応混合物を１日間還流させた。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ７０：３０％）によって精製した。シリル基の脱保護がクロマトグラフィー中に起こり、１５０ｍｇ（８０％）の５−クロロ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジンを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：８．４８（１Ｈ，ｄ）；８．３２（１Ｈｍｓ）；７．９５（１Ｈ，ｓ）；７．７２（１Ｈ，ｄ）；７．６９（１Ｈ，１Ｈ，ｓ）。

１０）５−ブロモ−２−（チアゾール−２−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（２２０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、脱気したトルエン（２０ｍｌ）中の２−（トリメチルスタンニル）チアゾール（０．５０ｇ、２ｍｍｏｌ）および２−ヨード−５−ブロモピリジン（０．５７ｇ、２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。反応混合物を１４時間還流させた。減圧下での溶媒の蒸発後、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、８０：２０）によって精製して、４００ｍｇ（８３％）の５−ブロモ−２−（チアゾール−２−イル）ピリジンを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：。

１１）５−ブロモ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジン（前駆体ｒ１１３）

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（２２０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、脱気したトルエン（２０ｍｌ）中の２−（トリメチルシリル）−５−（トリメチルスタンニル）チアゾール（６４０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）および２−ヨード−５−ブロモピリジン（０．５７ｇ、２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。反応物を１４時間還流させ、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃でクエンチした。飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液でクエンチ後、混合物をエーテルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、７０：３０）によって精製して、３３０ｍｇ（７０％）の５−ブロモ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：８．８４（１Ｈ，ｓ）；８．５４（１Ｈ，ｄ）；８．３２（１Ｈ，ｓ）；７．７０（１Ｈ，ｄｄ）；７．６３（１Ｈ，ｄ）；。

１２）５−（２−ブロモフェニル）−２−（チアゾール−２−イル）ピリジン（ｒ１１６）

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１０ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、ジオキサン（５ｍｌ）中の２−ブロモフェニルボロン酸（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）および５−ブロモ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジン（１００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。次いで、水（２ｍｌ）中のＫ₂ＣＯ₃（２００ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を１４時間還流させた。飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液でクエンチ後、混合物をエーテルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、３０：７０）によって精製して、６０ｍｇ（５０％）の５−（２−ブロモフェニル）−２−（チアゾール−２−イル）ピリジンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：８．６８（１Ｈ，ｄ）；８．２６（１Ｈ，ｄｄ）；７．９５（１Ｈ，ｄ）；７．８９（１Ｈ，ｄｄ）；７．７２（１Ｈ，ｄｄ）；７．４８（１Ｈ，ｄ）；７．４３（１Ｈ，ｔｄ）；７．３７（１Ｈ，ｄｄ）；７．２９（１Ｈ，ｔｄ）。

１３）２−（６−（チアゾール−５−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン（ｒ１１７）

無水トルエン（５ｍＬ）に溶解した３−（トリメチルスタンニル）ピリジン（０．２４ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、（１０ｍＬ）中の５−（５−ブロモピリジン−２−イル）チアゾール（０．１２ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加し、反応物を１４時間還流撹拌する。次いで、溶媒を真空下で除去し、粗製物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９９：１）によって精製して、０．０６ｇ、０．２４ｍｍｏｌの２−（６−（チアゾール−５−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン（６０％収率）を得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．８８（ｓ，２Ｈ）、８．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ）、８．６８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）、８．４１（ｓ，１Ｈ）、７．９６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．１，Ｊ２＝２．３Ｈｚ）、７．９２（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ１＝１．３，Ｊ２＝７．９Ｈｚ）、７．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８．１，Ｊ２＝４．８Ｈｚ）。

１４）３−（３−クロロ−４−チアゾール−５−イル−フェニル）−ピリジン（ｒ１２０）

シュレンク管内、１５ｍＬのトルエン中の５−（４−ブロモ−２−クロロ−フェニル）−チアゾール（３．４ｇ、１２ｍｍｏｌ）および３−［１,３,２］ジオキサボリナン−２−イル−ピリジン（２．０ｇ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に、水中のＮａ₂ＣＯ₃の飽和溶液５ｍＬを添加した。混合物を脱気し、［Ｐｄ(Ｐ(Ｐｈ₃)₄］（６３０ｍｇ、６０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１１０℃で１２時間撹拌した。次いで、溶媒を蒸発させ(evaporate)、粗製物をＣＨＣｌ₃に再度溶かし、セライト上で濾過し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：１５：８５、ＣＨＣｌ₃／ＡｃＯＥｔ）によって精製して、１．４０ｇ（４２％収率）の３−（３−クロロ−４−チアゾール−５−イル−フェニル）ピリジンを黄色固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：８．９０（ｓ，１Ｈ）、８．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０）、８．６５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．７，２．０Ｈｚ）、８．１６（ｓ，１Ｈ）、７．９０（ｍ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）、７．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．５４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ）、７．４１（ｍ，１Ｈ）。

１５）Ｎ−［５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イル−フェニル）−チアゾール−２−イル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−ベンズアミド（ｒ１２７）

ＤＭＦ（１５ｍＬ）およびＤＩＥＡ（０．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）中の４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）−安息香酸（１２２ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＢＴＵ（２００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）および５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イル−フェニル）−チアゾール−２−イルアミン（１５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で除去し、粗製物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：９９：１、ＣＨＣｌ₃／Ｅｔ₃Ｎ）によって精製した。１７６ｍｇ（７０％収率）のＮ−［５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イル−フェニル）チアゾール−２−イル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）ベンズアミドを得た。

¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：８．８６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４，０．８Ｈｚ）、８．６５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，１．６Ｈｚ）、７．９９（ｍ，２Ｈ）、７．８９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，２．４，１．６Ｈｚ）、７．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）、７．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５６（ｓ，１Ｈ）、７．５３（ｍ，２Ｈ）、７．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ）、７．４１（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，４．９，１．０Ｈｚ）、３．６（ｓ，２Ｈ）、２．５０（ｓ大，４Ｈ）、２．４６（ｓ大，４Ｈ）、２．２８（ｓ，３Ｈ）。

１６）５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸［５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イルフェニル）チアゾール−２−イル］アミド（ｒ１２８）

５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イル−フェニル）−チアゾール−２−イルアミン（１５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＨＴＢＵを、ＤＭＦ（１５ｍＬ）およびＤＩＥＡ（０．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）中の５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し、次いで、溶媒を減圧下で除去し、粗製物をカラムクロマトグラフィー（溶離液：９８：１：１、ＣＨＣｌ₃／ＥｔＯＨ／Ｅｔ₃Ｎ）によって精製して、９８ｍｇ（４０％収率）の５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸［５−（２−クロロ−４−ピリジン−３−イル−フェニル）−チアゾール−２−イル］アミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：９．９０（ｂｓ，１Ｈ）、８．９７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、８．６９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．８，１．７Ｈｚ）、８．１７（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ）、７．９８（ｍ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，２Ｈ）、７．５４（ｍ，１Ｈ）、７．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０，４．８Ｈｚ）、６．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）。

１７）５−ブロモ−Ｎ−（５−（６−（オキサゾール−２−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン−２−イル）フラン−２−カルボキサミド（ｒ２００）

乾燥ＤＣＭ（１０ｍｌ）および新たに蒸留したＥｔ₃Ｎ（０．４ｍｌ）中の５−ブロモフラン−２−カルボニルクロリド（１８．０ｇ、０．９ｍｍｏｌ）の溶液に、５−（６−（オキサゾール−２−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン−２−アミン（０．１５ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を、アルゴン雰囲気下、室温で１時間撹拌し、蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（溶離液：６０：３５：５ＣＨＣｌ３：ＥｔＯＡｃ：Ｅｔ３Ｎ）によって精製した。０．０４ｇ（１７％収率）の５−ブロモ−Ｎ−（５−（６−（オキサゾール−２−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン−２−イル）フラン−２−カルボキサミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）、８．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、８．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）、８．２６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、８．０４（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）、７．３６（ｓ，１Ｈ）、７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、６．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）。

１８）４−（４−ブロモ−３−クロロフェニル）−２−メトキシチアゾール

アルゴン雰囲気下、乾燥メタノール中のナトリウムメトキシドの溶液を０℃に冷却し、乾燥メタノール（５ｍＬ）中の４−（４−ブロモ−３−クロロフェニル）チアゾール（０．２ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を室温に加温し、４時間還流させ、次いで冷却し、水（２０ｍＬ）で希釈し、エーテル（３×２０ｍＬ）で抽出した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、蒸発させて、０．１５ｇ（８４％収率）の４−（４−ブロモ−３−クロロフェニル）−２−メトキシチアゾールを得た。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：７．６２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）、７．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．３４（ｓ，１Ｈ）、７．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、４．１１（ｓ，３Ｈ）。

化合物ｒ２３８、ｒ２３５、ｒ２６２の一般的な手順
ジオキサン：Ｈ２Ｏ５：１中のボロン酸（１当量）の０．１Ｍ溶液に、有機ハロゲン化物（１．２当量）およびＫ２ＣＯ３（５当量）を添加する。溶液を脱気し、［ＰｄＰ(Ｐｈ３)４］（５％ｍｏｌ）を添加し、反応物を加熱還流し、ＴＬＣによってモニターする。完了したら、溶媒を蒸発させ、粗製物をＭｅＯＨまたはクロロホルムに再度溶かし、濾過し、カラムクロマトグラフィーによって精製する。

１９）２−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）フラン

４−ブロモ−２−クロロ−１−ヨードベンゼンのフラン−２−イル−２−ボロン酸との反応によって得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン）による精製後の収率：３０％。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：７．７３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）、７．６０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）、７．５２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．４４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．１４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．５Ｈｚ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）、６．５３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝３．４Ｈｚ）
¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３１００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１４９．３３、１４２．３７、１３３．１５、１３２．０２、１３１．２０、１３０．１４、１２８．８０、１２０．７０、１１１．８５、１１１．３３。

２０）５−（２−クロロ(cloro)−４−(ピリジン(piridin)−３−イル(il))フェニル(fenil)）−２−メトキシチアゾール(metossitiazolo)（ｒ２６２）

４−（４−ブロモ−３−クロロフェニル）−２−メトキシチアゾールのピリジン−３−イルボロン酸との反応によって得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン：酢酸エチル６：４）による精製後の収率：３０％。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．８６（ｓ，１Ｈ）、８．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝４．２Ｈｚ）、７．８９（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｊ＝１．９Ｈｚ）、７．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．５８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．４２（ｍ，２Ｈ）、４．１３（ｓ，３Ｈ）。
¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ３１００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１４０．０８、１３６．５３、１３４．４７、１３４．２６、１３４．１９、１３１．３２（２Ｃ）、１２８．９４、１２５．６１（２Ｃ）、１２３．６４、５８．１７。

２１）３’−クロロ−４’−（フラン−２−イル）ビフェニル(bifenil)−４−カルボン酸(acido carbossilico)（ｒ２３８）

２−（４−ブロモ−２−クロロフェニル）フランの４−ボロノ安息香酸との反応によって得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＣＨＣｌ３：メタノール９５：５）による精製後の収率：３０％。
¹ＨＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．０１（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．９３（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，Ｊ＝５．１Ｈｚ）、７．８７（ｓ，２Ｈ）、７．８５（ｓ，１Ｈ）、７．８１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）、７．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．５Ｈｚ）、６．６８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｊ＝３．３Ｈｚ）。
¹³ＣＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ１００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１４３．６６、１４３．６３、１３０．００、１２９．６５、１２８．８４、１２８．３０、１２８．０２、１２６．７６、１２６．００、１２２．２１、１１１．５３。

２２）５−（３−クロロ−４−（チアゾール(tiazol)−５−イル）フェニル）ピリジン−２−アミン(ammina)（ｒ２３５）

４−（４−ブロモ−３−クロロフェニル）チアゾールの６−アミノピリジン−３−イルボロン酸との反応によって得た。カラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ：メタノール９５：５）による精製後の収率：４２％。
¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ４００ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：８．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．６Ｈｚ）８．３０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．６Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）、８．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．７Ｈｚ）、７．７３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，Ｊ＝８．７Ｈｚ）、７．６４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．８Ｈｚ）、７．５９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．４５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、６．６８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，Ｊ＝８．６Ｈｚ）、５．０４（ｓ，２Ｈ）。

２３）５−（２,３−ジクロロ−４−メトキシフェニル）−２−（２−（メチルチオ）チアゾール−５−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１００ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、ジオキサン（５ｍｌ）中の２，３−ジクロロ−４−メトキシフェニルボロン酸（２２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および５−ブロモ−２−（２−（メチルチオ）チアゾール−５−イル）ピリジン（３５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。次いで、水（１０ｍｌ）中のＫ₂ＣＯ₃（１ｇ、７．２ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を１４時間還流させた。飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液でクエンチ後、混合物をエーテルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ、５０：５０）によって精製して、１１０ｍｇ（３０％）の５−（２，３−ジクロロ−４−メトキシフェニル）−２−（２−（メチルチオ）チアゾール−５−イル）ピリジンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：８．５７（１Ｈ，ｄ）；８．１２（１Ｈ，ｓ）；７．７７（１Ｈ，ｄｄ）；７．６６（１Ｈ，ｄ）；７．２２（１Ｈ，ｄ）；６．９７（１Ｈ，ｄ）；３．９７（３Ｈ，ｓ）；２．７５（３Ｈ，ｓ）。

２４）５−（２，３−ジクロロ−４−メトキシフェニル）−２−（チアゾール−５−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１００ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、ジオキサン（５ｍｌ）中の２，３−ジクロロ−４−メトキシフェニルボロン酸（２２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および５−ブロモ−２−（チアゾール−５−イル）ピリジン（２４０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加した。次いで、水（１０ｍｌ）中のＫ₂ＣＯ₃（１ｇ、７．２ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応物を１４時間還流させた。飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液でクエンチ後、混合物をエーテルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ５０：５０）によって精製して、１４０ｍｇ（３０％）の５−（２，３−ジクロロ−４−メトキシフェニル）−２−（２−（メチルチオ）チアゾール−５−イル）ピリジンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：８．９０（１Ｈ，ｓ）；８．６３（１Ｈ，ｄ）；８．４５（１Ｈ，ｓ）；７．８４（１Ｈｄｄ）；７．７９（１Ｈ，ｄ）；７．２３（１Ｈ，ｄ）；６．９９（１Ｈ，ｄ）；３．９８（３Ｈ，ｓ）。

２５）３−（６−（チアゾール−２−イル）ピリジン−３−イル）ピリジン

Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１００ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥トルエン（２０ｍｌ）中の５−ブロモ−２−（チアゾール−２−イル）ピリジン（４８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に少量ずつ添加し、続いてＥｔＯＨ（５ｍｌ）中のピリジン−３−イル−３−ボロン酸（２８０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、Ｎａ₂ＣＯ₃の２Ｎ水溶液（２．５ｍｌ、５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１２時間還流させた。溶液をエーテルで希釈し、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＡｃＯＥｔ９０：１０）によって精製して、３００ｍｇ（６０％）の３−（６−（チアゾール−２−イル）ピリジン−３−イル）ピリジンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：８．９１（１Ｈ，ｄ）；８．８５（１Ｈ，ｄｄ）；８．６８（１Ｈ，ｄｄ）；８．３０（１Ｈ，ｄ）；８．０１（１Ｈ，ｄｄ）；７．９６（１Ｈ，ｄｄ）；７．９３（１Ｈ，ｄｔ）；７．４９（１Ｈ，ｄ）；７．４５（１Ｈ，ｄ）。

２６）７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸エチル

ジエチルアミン(diethylammine)（０．４３ｍｌ、４．２ｍｍｏｌ）およびヨウ化ナトリウム（０．１４ｇ、０．９ｍｍｏｌ）を、トルエン（２０ｍｌ）中の７−ブロモヘプタン酸エチル（０．５ｇ、２．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応混合物を３６時間還流させ、室温に冷却し、次いで濾過した。有機層を飽和Ｎａ₂ＣＯ₃溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮して、０．３４ｇ（７０％）の７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸エチルを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ₆）、δ（ｐｐｍ）：１．０（６Ｈ，ｔ）、１．２５（３Ｈ，ｔ，）、１．２〜１．３（４Ｈ，ｍ）、１．５〜１．６（２Ｈ，ｍ）、１．６〜１．７（２Ｈ，ｍ）、２．３（２Ｈ，ｔ，）２．４（２Ｈ，ｍ，）、２．５５（４Ｈ，ｑ）、４．１（２Ｈ，）
ＧＣ−ＭＳ：２２９（Ｍ^-・）２１４、２００、１５６。

２７）７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸

ＬｉＯＨの１Ｍ水溶液（４ｍｌ）を、ジオキサン（１５ｍｌ）中の７−ブロモヘプタン酸エチル（０．３５ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１０分間で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、希釈したＨＣｌで中和し、白色固体が沈殿するまで減圧下で濃縮した。次いで、固体をＣＨＣｌ₃／１％ＴＥＡの溶液に懸濁させ、濾過し、有機層を真空濃縮して、０．３ｇ(定量的収率)の７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸を得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ₆）、δ（ｐｐｍ）：０．９（ｔ，３Ｈ，ＣＨ₃アミノ）、１．１９〜１．３８（ｍ，６Ｈ，ＣＨ₂）、１．４５（ｑｕｉ，２Ｈ，ＣＨ₂）、２．１（ｔ，２Ｈ，ＣＨ₂ＣＯＯＨ）、２．３（ｔ，２Ｈ，ＣＨ₂）、２．４（ｑ，４Ｈ；ＣＨ₂アミノ）。

２８）７−（ジエチルアミノ）ヘプタノイルクロリド

塩化オキサリル(oxalil)（０．１３ｍｌ、１．５ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＴＨＦ中の７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸（０．３ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に滴下添加し、次いで２滴のジメチルホルムアミド(dimethylformammide)を添加した。反応混合物を１５分間還流させ、冷却し、真空濃縮し、さらに精製することなく使用した。

２９）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−７−（ジエチルアミノ）ヘプタンアミド（ｒ１０５）

手順１：
ＢＯＰ（１ｍｍｏｌ、０．４４ｇ）およびＤＩＥＡ（３ｍｍｏｌ、０．５ｍｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＣＭ（１０ｍｌ）中の７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸（１ｍｍｏｌ、２００ｍｇ）の撹拌溶液に添加した。３０分後、有機アミンを添加した。反応物を室温でさらに１８時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃ ９７％、ＮＥｔ₃ ２％、ＣＨ₃ＯＨ１％）によって精製して、２２０ｍｇ（５０％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−７−（ジエチルアミノ）ヘプタンアミドを得た。

手順２：
ＤＣＣ（１．５ｍｍｏｌ、０．３ｇ）およびＨＢＴＵ（３ｍｍｏｌ、１．１５ｇ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の７−（ジエチルアミノ）ヘプタン酸（１ｍｍｏｌ、２００ｍｇ）の撹拌溶液に添加した。室温で５分後、乾燥ＤＭＦ（１ｍｌ）中の有機アミン（１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応物を室温で１８時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃ ９７％、ＮＥｔ₃ ２％、ＣＨ₃ＯＨ１％）によって精製して、１４０ｍｇ（３０％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−７−（ジエチルアミノ）ヘプタンアミドを得た。

¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：δ（ｐｐｍ）：１．０３（ｔ，６Ｈ）、１．１５（ｍ，４Ｈ）、１．３６（ｍ，２Ｈ）、１．５８（ｄｑｕ，２Ｈ）、２．２２（ｔ，２Ｈ）、２．３４（ｍ，２Ｈ）、２．５３（ｑ，４Ｈ）、３．９５（ｓ，２Ｈ）、７．１９（ｓ，１Ｈ）、７．３２（ｔ，１Ｈ）、７．３９（ｔ，１Ｈ）、７．５６（ｄ，１Ｈ）、７．８３（ｍ，３Ｈ）、８．０１（ｓ，１Ｈ）。

３０）３−（メトキシカルボニル）プロパン酸

ＢＦ３：Ｅｔ₂Ｏ（０．０１ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、ＭｅＯＨ（１２ｍｌ）中のジヒドロフラン−２，５−ジオン（２ｇ、０．０２ｍｏｌ）の溶液に滴下添加した。室温で５分後、混合物が透明になり、ＮａＨＣＯ₃の飽和溶液を添加し、水層をエーテルで洗浄した。水溶液を、希釈した(diluite)ＨＣｌで酸性化し、エーテルで抽出した。エーテル相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、溶媒を真空除去して、３−（メトキシカルボニル）プロパン酸０．８ｇ（３０％）を白色固体として得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：２．５９〜２．６４（ｍ，４Ｈ）、３．７１（ｓ，３Ｈ）。

３１）３−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イルカルバモイル）プロパノエート

ＢＯＰ（１．０１ｇ、２．３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．２ｍｌ、６．８ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＣＭ（１２ｍＬ）中の３−（メトキシカルボニル）プロパン酸（０．３ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。３０分後、５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（０．６ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１８時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃／ＣＨ₃ＯＨ９９：１）によって精製し、ジエチルエーテル中で結晶化させて、４４０ｍｇの３−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イルカルバモイル）プロパノエート、５０％収率）を黄色固体として得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：２．６０〜２．７７（ｍ，４Ｈ）、３．５９（ｓ，３Ｈ）、３．９６（ｓ，２Ｈ）、７．３０（ｔ，１Ｈ）、７．３７（ｔ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，１Ｈ）、７．６３（ｓ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，１Ｈ）、７．９３（ｓ，２Ｈ）、８．０９（ｓ，１Ｈ）。

３２）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミド（ｒ１０８）

ＬｉＣｌ（０．０２２ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下室温で、２：１ＴＨＦ／ＥｔＯＨ（５ｍＬ）中の３−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イルカルバモイル）プロパノエート（０．１ｇ、２６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。無機塩が完全に溶解した後、ＮａＢＨ₄（０．０２ｇ、０．５２ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。１２時間後、反応混合物を、希釈したＨＣｌでクエンチし、溶媒を圧力下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₃Ｃｌ／ＣＨ₃ＯＨ９５：５）によって精製して、３０ｍｇ（３０％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：１．７３（ｍ，２Ｈ）、２．４８（ｍ，２Ｈ）、３．４１（ｍ，２Ｈ）、３．９６（ｓ，２Ｈ）、７．３０（ｔ，１Ｈ）、７．３７（ｔ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，１Ｈ）、７．６２（ｓ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，１Ｈ）、７．９２（ｓ，２Ｈ）、８．０９（ｓ，１Ｈ）。

３３）Ｎ−［５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）プロピオンアミド

塩化アクリロイル（０．０２６ｍｌ、０．３２ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＣＭ（５ｍｌ）中の５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（４０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびＥｔ₃Ｎ（０．０４６ｍｌ、０．３２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下添加した。２０分後、Ｎ−メチルピペラジン（０．０１３４ｍｌ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で１２時間撹拌し、溶媒を減圧除去し、ＥｔＯＡｃに溶解し、Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空濃縮した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＥｔＯＨ／Ｅｔ₃Ｎ９１：８：１）によって精製して、Ｎ−［５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−３−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）プロピオンアミドを褐色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：８．１０（１Ｈ，ｂｓ）、７．９２（２Ｈ，ｍ）、７．９０（１Ｈ，ｄ）、７．６０（１Ｈ，ｓ）７．４０（２Ｈ，ｍ）３．９（２Ｈ，ｓ）、２．９０（８Ｈ，ｍ）、２．８３（２Ｈ，ｔ）、２．６０（２Ｈ，ＣＨ₂）、２．２０（３Ｈ，ｓ）。

３４）（４−メチル−ピペラジン−１−イル）酢酸エチルエステル

Ｋ₂ＣＯ₃（２．４８ｇ、１８ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルピペラジン（２ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＭＦ（１８ｍｌ）中のブロモエチルエステル（２ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。５０℃で３０分後、混合物をＤＣＭで希釈し、濾過し、有機層を真空蒸留して、（４−メチル−ピペラジン−１−イル）酢酸エチルエステルを褐色油として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：４．１８（２Ｈ，ｑ）、３．２０（２Ｈ，ｓ）、２．６０（８Ｈ，ｍ）、２．２６（３Ｈ，ｓ）、１．２６（３Ｈ，ｔ）。

３５）２−（４−メチルピペラジン−１−イル）酢酸

ＮａＯＨ３Ｎ（４．８ｍＬ、１４，４ｍｍｏｌ）を、ジオキサン／水（６０：４０、２０ｍＬ）中の（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸エチルエステル（２．２６ｇ、１２．１３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。４時間後、反応物を、希釈した(diluited)ＨＣｌでクエンチし、ＤＣＭで希釈し、濾過し、有機層を真空蒸留して、（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸を褐色油として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：４．０（１Ｈ，ｂｓ）、３．０２（２Ｈ，ｓ）、２．５０（８Ｈ，ｍ）、２．１６（３Ｈ，ｓ）。

３６）２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセチルクロリド

塩化オキサリル（０．３ｍｌ、３．４７ｍｍｏｌ）を、１５ｍｌの乾燥ＴＨＦ中の（４−メチル−ピペラジン−１−イル）酢酸（５００ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下添加し、不活性雰囲気下に置いた。２滴のジメチルホルムアミドを添加した。反応混合物を１時間還流させ、溶媒を減圧下で除去して、４４０ｍｇ（８０％）の（４−メチル−ピペラジン−１−イル）アセチルクロリドを黄色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）、δ（ｐｐｍ）：３．２０（２Ｈ，ｓ）、２．７８（８Ｈ，ｍ）、２．６０（３Ｈ，ｓ）。

３７）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセトアミド（ｒ１０６）

ＤＣＣ（０．３１ｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（１．３７ｇ、３ｍｍｏｌ）を、乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の（４−メチル−ピペラジン−１−イル）酢酸（０．１６５ｇ、１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加し、不活性雰囲気下に置き、混合物を室温で５分間撹拌した。乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（０．２６４ｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下添加した。室温で１８時間後、溶媒を減圧下で除去した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃／Ｅｔ₃Ｎ／ＭｅＯＨ９５：４：１）によって精製し、次いでエチルエーテルから結晶化させて、１６０ｍｇ（４０％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセトアミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ₆）、δ（ｐｐｍ）：２．１３（３Ｈ，ｓ）、２．３２（４Ｈ，ｂｓ）、２．５（４Ｈ，ｂｓ）、３．２８（２Ｈ，ｓ）、３．９０（２Ｈ，ｓ）、７．３１（１Ｈ，ｔ）、７．３８（ｔ，１Ｈ）、７．５８（ｄ，１Ｈ）、７．６６（ｓ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，１Ｈ）、７．９２（ｓ，２Ｈ）、８．１（ｓ，１Ｈ）。

３８）５−ブロモフラン−２−カルボニルクロリド

塩化オキサリル（０．２６ｍｌ、２．８６ｍｍｏｌｉ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中の５−ブロモフラン−２−カルボン酸（５００ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下添加した。２滴のジメチルホルムアミドを添加した。反応混合物を１５分間還流させ、溶媒を減圧下で除去して、０．４８ｇ（９０％）の５−ブロモフラン−２−カルボニルクロリドを褐色固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ₆）、δ（ｐｐｍ）：７．２３４（１Ｈ，ｓ）；６．７９５（１Ｈ，ｓ）。

３９）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−５−ブロモフラン−２−カルボキサミド（ｒ８８）

ＤＭＦを、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の５−ブロモフラン−２−カルボン酸クロリド（０．２８０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）および５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（０．３ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、試薬が完全に溶解するまで添加した。次いでＥｔ₃Ｎ（１ｍｌ、５．４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１４時間後、溶媒を減圧下で除去し、残留物をＣＨＣｌ₃で希釈し、ブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＥｔＯＨ／Ｅｔ₃Ｎ９３：６：１）によって精製して、０．１５ｇ（２５％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−５−ブロモフラン−２−カルボキサミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ６）、δ（ｐｐｍ）：３．９８（２Ｈ，ｓ）、６．８７（１Ｈ，ｄ）、７．３１（１Ｈ，ｔ）、７．３８（１Ｈ，ｔ）、７．５８（１Ｈ，ｄ）、７．６４（１Ｈ，ｄ）、７．６９（２Ｈ，ｓ）、７．９１（１Ｈ，ｄ）、７．９２〜７．９９（２Ｈ，ｍ）、８．１４（１Ｈ，ｓ）。

４０）４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）−フェニル−ボロン酸

Ｎ−メチル−ピペラジン（０．２２ｍｌ、１．９８ｍｍｏｌ）およびＰｙＢｒＯＰ（０．９３ｇ、２ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、乾燥ＤＭＦ（７ｍｌ）中の４−カルボキシフェニルボロン酸（０．３３ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．７ｍｌ、４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。室温で１４時間後、溶媒を減圧下で除去し、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＥｔＯＨ／Ｅｔ３Ｎ７５：２０：５）によって精製して、０．１９ｇ（４０％）の４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）−フェニル−ボロン酸を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）、δ（ｐｐｍ）：７．８５（２Ｈ，ｄ）；７．６６（２Ｈ，ｂｄ）。

４１）５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）フェニル］−フラン−２−カルボン酸［５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］アミド（ｒ１０４）

４−（４−メチルピペラジン−１−カルボニル）−フェニル−ボロン酸（０．１７０ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下、ジオキサン（５０ｍＬ）中のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−５−ブロモフラン−２−カルボキサミド（０．３００ｇ、０．６８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。次いで、Ｈ₂Ｏ（１０ｍｌ）中のＫ₂ＣＯ₃（０．３ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を脱気した。触媒量のＰｄ（ＰＰｈ₃）₂（２０ｍｇ）の添加後、反応物を１００℃に２時間加熱し、室温に冷却し、さらに１０時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ／ＥｔＮ₃ ７９：２０：１）によって精製して、５０ｍｇ（１３％）の５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フェニル］−フラン−２−カルボン酸［５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］アミドを得た。

¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯｄ₆）、δ（ｐｐｍ）：２．２０（ｓ，３Ｈ）、２．２６〜２．４５（ｍ，８Ｈ）、３．９９，（ｓ，２Ｈ）、７．２７〜７．３４（ｍ，２Ｈ）、７．３９（ｔ，１Ｈ）、７．５１（ｄ，２Ｈ）、７．６０（ｄ，１Ｈ）、７．６６（ｄ，１Ｈ）、７．７４（ｄ，１Ｈ）、７．８７〜８．０５（ｍ，４Ｈ）、８．１２（ｄ，２Ｈ）、８．１９（ｓ，１Ｈ）。

４２）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）ニコチンアミド（ｒ８６）

Ｅｔ₃Ｎ（２ｍｌ、１５ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１５ｍｌ）中のニコチン酸クロリド塩酸塩（０．２７０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）および５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（０．２７０ｇ、１ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に添加した。室温で２日後、溶媒を減圧下で除去し、ＤＣＭで希釈し、ブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空濃縮した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ／ＥｔＮ₃、９７：２：１）によって精製して、３６ｍｇ（１０％）のＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）ニコチンアミドを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）、δ（ｐｐｍ）：８．９１（１Ｈ，ｄ）；８．６９（１Ｈ，ｓ）；８．６２（１Ｈ，ｂｓ）；８．００（１Ｈ，ｂｓ）；７．８９〜７．８３（３Ｈ，ｍ）；７．６０（２Ｈ，ｍ）；７．４２（２Ｈ，ｍ）；７．２４（１Ｈ，ｓ）４．０１（２Ｈ，ｓ）。

４３）Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−ヨードベンズアミド（ｒ８７）

試薬が完全に溶解するまで、ＤＭＦを、不活性雰囲気下、乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の２−ヨードベンゾイルクロリド（０．３９０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）および５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−アミン（０．３ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に添加した。次いでＥｔ₃Ｎ（１．８ｍｌ、１２ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１４時間後、溶媒を減圧下で除去し、残留物をトリクロロメタンで希釈し、ブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗製物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ／Ｅｔ₃Ｎ、９７：２：１）によって精製して、１１０ｍｇのＮ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−ヨードベンズアミドを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：８．３０（１Ｈ，ｓ）、８．１０（１Ｈ，ｓ）、８．００〜７．９０（２Ｈ，ｍ）、７．８２〜７．７７（２Ｈ，ｍ）、７．４２０〜７．２９（３Ｈ，ｍ）、７．２４（１Ｈ，ｓ）、７．１７（１Ｈ，ｍ）、７．０２５（１Ｈ，ｓ）；３．９３（２Ｈ，ｓ）。

４４）２−（メチルチオ）チアゾール
ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍ、２．１ｍｌ、５．２ｍｍｏｌ）の溶液を、不活性雰囲気下、−７８℃で、乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のチアゾール（０．３６ｍｌ、５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下添加した。１時間後、１，２−ジメチルジスルファン（５．２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物をさらに２時間撹拌し、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃でクエンチし、エーテルで抽出し、有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥させた。粗製物を減圧下での蒸留によって精製して、０．５２ｇ（８０％）の２−（メチルチオ）チアゾールを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：７．６５（１Ｈ，ｄ）；７．２０（１Ｈ，ｄ）；２．７０（３Ｈ，ｓ）；。

４５）５−（トリメチルスタンニル）−２−（メチルチオ）チアゾール
ヘキサン中のｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍ、２．１ｍｌ、５．２ｍｍｏｌ）の溶液を、不活性雰囲気下、−７８℃で、乾燥ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の２−（メチルチオ）チアゾール（０．５２ｇ、４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下添加した。１時間後、Ｍｅ₃ＳｎＣｌ（５ｍｍｏｌ、１ｇ）を少量ずつ添加した。１４時間後、反応物を飽和Ｎａ２ＣＯ３でクエンチし、エーテルで抽出し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させた。粗製物を減圧下での蒸留によって精製して、０．９０ｇ（７０％）の５−（トリメチルスタンニル）−２−（メチルチオ）チアゾールを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）、δ（ｐｐｍ）：７．５７（１Ｈ，ｓ）；２．６９（３Ｈ，ｓ）；０．３８（３Ｈ，ｓ）。

４６）１−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）エタノン１：

パラフィン中６０％のＮａＨ（２１．２ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）を、０℃で、無水ＴＨＦ３．５ｍＬ中の２−アセチルカルバゾール（１００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。０℃で２０分間撹拌後、塩化ベンゼンスルホニル（７４μＬ、０．５７ｍｍｏｌ）を滴下添加した。反応混合物を１２時間撹拌し、次いで５％ＮａＨＣＯ₃水溶液を注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をＥｔＯＡｃからの再結晶によって精製して、所望の化合物を８０％（１３４ｍｇ、０．３８３ｍｍｏｌ）で白色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３５０［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ８．９３（ｓ，１Ｈ）、８．３６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、８．０２〜７．９５（ｍ，３Ｈ）、７．８３（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．９Ｈｚ）、７．５７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、７．４８〜７．３２（ｍ，４Ｈ）、２．７５（ｓ，３Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ１９７．５（Ｃ）、１３９．５（Ｃ）、１３８．０（Ｃ）、１３７．６（Ｃ）、１３６．０（Ｃ）、１３４．０（ＣＨ）、１３０．１（Ｃ）、１２９．１（２ＣＨ）、１２８．８（ＣＨ）、１２６．４（２ＣＨ）、１２５．３（ＣＨ）、１２４．３（ＣＨ）、１２４．０（ＣＨ）、１２０．８（ＣＨ）、１１９．９（ＣＨ）、１１５．３（ＣＨ）、１１５．１（Ｃ）、２６．９（ＣＨ₃）。

４７）４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イルアミン３：

ＥｔＯＡｃ（１３ｍＬ）中のＣｕＢｒ₂（１．２８ｇ、５．７２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、アルゴン下室温で、ＥｔＯＡｃ（１３ｍＬ）中の２−アセチル−１−フェニルスルホニル−１Ｈ−カルバゾール（１）（１ｇ、２．８６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を９０分間還流撹拌した。６４５ｍｇのＣｕＢｒ₂（２．８８ｍｍｏｌ）を混合物に添加して、モノ臭素化誘導体に完全変換させた。冷却後、沈殿物を濾過によって除去し、酢酸エチルで洗浄した。合わせた濾液を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液およびブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、真空で蒸発乾固した。生成物２をさらに精製することなく直ちに使用した。

ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中の２（１．１０ｇ、２．５７ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に、チオ尿素（１９５ｍｇ、７６．１２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で２時間加熱した。室温に冷却後、溶媒を蒸発乾固した。得られた固体をＥｔＯＡｃ／飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（２／１）の混合物中で溶解するまで撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）によって精製して、３を６９％収率（８０１ｍｇ、１．９６８ｍｍｏｌ）で黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４０８［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（（ＣＤ₃）₂ＣＯ；３００ＭＨｚ）δ８．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、８．３３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）、８．０３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．９４〜７．８９（ｍ，３Ｈ）、７．６２〜７．３８（ｍ，５Ｈ）、７．１３（ｓ，１Ｈ）、６．６０（ｂｓ，２Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１６８．４（Ｃ）、１４９．６（Ｃ）、１３８．２（Ｃ）、１３７．８（Ｃ）、１３６．６（Ｃ）、１３４．８（Ｃ）、１３４．７（ＣＨ）、１２９．８（２×ＣＨ）、１２７．６（ＣＨ）、１２６．０（２×ＣＨ）、１２５．８（Ｃ）、１２４．７（Ｃ）、１２４．５（ＣＨ）、１２２．１（ＣＨ）、１２０．７（ＣＨ）、１２０．６（ＣＨ）、１１４．６（ＣＨ）、１１１．８（ＣＨ）、１０２．７（ＣＨ）。

中間体（２）は、白色固体として単離された。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｚ４２７、４２９［Ｍ+・；⁷⁹Ｂｒ，⁸¹Ｂｒ］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ８．９６（ｓ，１Ｈ）、８．３８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）、８．０２〜７．９５（ｍ，３Ｈ）、７．８６（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．４Ｈｚ）、７．５７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、７．４８〜７．３２（ｍ，４Ｈ）、４．５９（ｓ，２Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１９１．１（Ｃ）、１３８．．７（Ｃ）、１３７．２（Ｃ）、１３６．２（Ｃ）、１３５．０（ＣＨ）、１３３．０（Ｃ）、１３０．１（Ｃ）、１２９．８（２×ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２６．３（２×ＣＨ）、１２５．０（ＣＨ）、１２４．８（ＣＨ）、１２４．７（Ｃ）、１２１．９（ＣＨ）、１２１．０（ＣＨ）、１１４．８（ＣＨ）、１１４．７（ＣＨ）、３４．５（ＣＨ₂）。

４８）Ｎ−アシル置換チアゾールの調製のための一般的な手順
無水ＣＨ₂Ｃｌ₂中の（４−アミノチアゾール−２−イル）−１−フェニルスルホニル−１Ｈ−カルバゾール３の０．１５Ｍ撹拌懸濁液に、不活性雰囲気下室温で、無水ピリジン（２当量）および塩化アシル（１．５当量）を添加した。混合物を反応が完了するまで室温で撹拌した（続いてＴ．Ｌ．Ｃ．を行った）。得られた混合物をＨ₂Ｏでクエンチし、ＣＨ₂Ｃｌ₂で３回抽出した。得られた有機層をＮＨ₄Ｃｌ飽和水溶液およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。

４９）Ｎ−［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］アセトアミド４

所望の化合物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂）によって、６４％収率（１００ｍｇの３から７０ｍｇ、０．１５６ｍｍｏｌ）で黄色固体として得られる。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４４８［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ９．５７（ｂｓ，１Ｈ）、８．８３（ｓ，１Ｈ）、８．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．９３〜７．８８（ｍ，３Ｈ）、７．８１（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．９Ｈｚ）、７．５０（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、７．４４〜７．３９（ｍ，２Ｈ）、７．３１〜７．２７（ｍ，３Ｈ）、２．０２（ｓ，３Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１６８．８（Ｃ）；１５８．８（Ｃ）、１４８．４（Ｃ）、１３８．２（Ｃ）、１３７．８（Ｃ）、１３６．５（Ｃ）、１３４．８（ＣＨ）、１３４．１（Ｃ）、１２９．８（２×ＣＨ）、１２７．８（ＣＨ）、１２６．０（２×ＣＨ）、１２５．６（Ｃ）、１２５．２（Ｃ）、１２４．５（ＣＨ）、１２２．３（ＣＨ）、１２１．０（ＣＨ）、１２０．７（ＣＨ）、１１４．６（ＣＨ）、１１１．７（ＣＨ）、１０８．９（ＣＨ）、２２．５（ＣＨ₃）。

５０）Ｎ−［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］ベンズアミド５

所望の化合物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃／石油エーテル１／１）によって、６１％収率（１００ｍｇの３から７６ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ）で黄色固体として得られる。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ５１０［Ｍ＋Ｈ⁺］、１０１８［２Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ９．９６（ｂｓ，１Ｈ）、８．９１（ｓ，１Ｈ）、８．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、８．０３（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．７Ｈｚ）、７．９１〜７．８４（ｍ，５Ｈ）、７．６３〜７．２９（ｍ，９Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ１６４．９（Ｃ）、１５８．８（Ｃ）、１５０．０（Ｃ）、１３９．０（Ｃ）、１３８．９（Ｃ）、１３７．９（Ｃ）、１３３．０（ＣＨ）、１３３．８（Ｃ）、１３３．０（ＣＨ）、１３１．９（Ｃ）、１２９．２（２×ＣＨ）、１２９．０（２×ＣＨ）、１２７．２（３×ＣＨ）、１２６．６（２×ＣＨ）、１２６．３（ＣＨ）、１２６．２（Ｃ）、１２４．２（ＣＨ）、１２２．３（ＣＨ）、１２０．３（ＣＨ）、１２０．２（ＣＨ）、１１５．２（ＣＨ）、１１２．９（ＣＨ）、１０８．８（Ｃ）。

５１）ビフェニル−４−カルボン酸［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］アミド６

所望の化合物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃／トルエン１／１）によって、６０％収率（２００ｍｇの３から１７４ｍｇ、０．２９７ｍｍｏｌ）で黄色固体として得られる。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ５８６［Ｍ＋Ｈ⁺］、１１７０［２Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ９．８９（ｂｓ，１Ｈ）、８．９２（ｓ，１Ｈ）、８．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、８．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）、７．９３〜７．８４（ｍ，５Ｈ）、７．７５（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒８．３Ｈｚ）、７．６４（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．０Ｈｚ）、７．５２〜７．２９（ｍ，９Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ１６４．８（Ｃ）、１５９．０（Ｃ）、１５０．０（Ｃ）、１５４．４（Ｃ）、１３９．５（Ｃ）、１３８．８（Ｃ）、１３８．７（Ｃ）、１３７．９（Ｃ）、１３３．９（ＣＨ）、１３３．８（Ｃ）、１３０．４（Ｃ）、１２９．２（２×ＣＨ）、１２９．０（２×ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．０（２×ＣＨ）、１２７．５（ＣＨ）、１２７．３（２×ＣＨ）、１２７．２（２×ＣＨ）、１２６．５（２×ＣＨ）、１２６．１（Ｃ）、１２６．０（Ｃ）、１２４．１（ＣＨ）、１２２．２（ＣＨ）、１２０．２（ＣＨ）、１２０．１（ＣＨ）、１１５．１（ＣＨ）、１１２．８（ＣＨ）、１０８．８（ＣＨ）。

５２）カップリングペプチドの一般的な手順
無水ＤＭＦ中のカルボン酸の２Ｍ撹拌混合物に、不活性雰囲気下室温で、無水ＤＭＦ中の（４−アミノチアゾール−２−イル）−１−フェニルスルホニル−１Ｈ−カルバゾール３の０．５Ｍ溶液、乾燥ＤＭＦ中のＥＤＣＩの２Ｍ溶液および０．４当量のＤＭＡＰを添加した。反応混合物を室温で１２時間撹拌し、ＤＭＦを真空蒸発させた。

５３）Ｎ−［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）ベンズアミド７

所望の化合物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ９５／５）によって、２４％収率（１５０ｍｇの３から５６ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）で白色固体として得られる。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ６２２［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）９．８６（ｂｓ，１Ｈ）８．９１（ｓ，１Ｈ）、８．３２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．９６〜７．８２（ｍ，７Ｈ）、７．５１〜７．３１（ｍ，８Ｈ）、３．５８（ｓ，２Ｈ）、２．５１（ｂｒ．ｍ，８Ｈ）、２．３２（ｓ，３Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１６４．９（Ｃ）、１５８．５（Ｃ）、１４８．７（Ｃ）、１４２．８（Ｃ）、１３８．１（Ｃ）、１３７．８（Ｃ）、１３６．６（Ｃ）、１３４．３（ＣＨ）、１３３．９（Ｃ）、１３０．６（Ｃ）、１２９．４（２×ＣＨ）、１２８．４（２×ＣＨ）、１２７．９（２×ＣＨ）、１２７．４（ＣＨ）、１２５．７（２×ＣＨ）、１２５．４（Ｃ）、１２５．０（Ｃ）、１２４．２（ＣＨ）、１２２．２（ＣＨ）、１２０．５（ＣＨ）、１２０．３（ＣＨ）、１１４．３（ＣＨ）、１１１．６（ＣＨ）、１０９．２（ＣＨ）、６０．８（ＣＨ₂）、５３．７（２×ＣＨ₂）、５１．２（２×ＣＨ₂）、４４．３（ＣＨ₃）。

５４）５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］アミド８

所望の化合物は、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂）によって、２０％収率（６５３ｍｇの３から１８９ｍｇ、０．３２８ｍｍｏｌ）で黄色固体として得られる。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ５７７、５７９［Ｍ＋Ｈ⁺；⁷⁹Ｂｒ，⁸¹Ｂｒ］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ１０．１３（ｂｓ，１Ｈ）、８．８９（ｓ，１Ｈ）８．３１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．９０〜７．８０（ｍ，５Ｈ）、７．４８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）、７．４４（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、７．４１〜７．２４（ｍ，５Ｈ）、６．４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）；¹³ＣＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１５８．１（Ｃ）、１５５．０（Ｃ）、１４９．０（Ｃ）、１４７．５（Ｃ）、１３８．３（Ｃ）、１３７．９（Ｃ）、１３６．５（Ｃ）、１３４．８（ＣＨ）、１３４．０（Ｃ）、１２９．８（２×ＣＨ）、１２７．９（ＣＨ）、１２７．５（Ｃ）、１２６．１（２×ＣＨ）、１２５．７（Ｃ）、１２５．４（Ｃ）、１２４．６（ＣＨ）、１２２．５（ＣＨ）、１２１．０（ＣＨ）、１２０．８（ＣＨ）、１１８．９（ＣＨ）、１１４．７（ＣＨ）、１１４．５（ＣＨ）、１１１．８（ＣＨ）、１０９．８（ＣＨ）。

５５）５−［４−（ピペラジン−１−カルボニル）フェニル］−フラン−２−カルボン酸［４−（９−ベンゼンスルホニル−９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］アミド９

１，４ジオキサン（８ｍＬ）およびＨ₂Ｏ（２ｍＬ）中の、化合物（８）（１１３ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）、［１−（４−メチル）−ピペラジニルカルボニル］ボロン酸（５６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（３４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）およびＫ₂ＣＯ₃（７９ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を、アルゴンで脱気し（degased）、次いで、１００℃で１５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ９５／５）によって精製して、３を６４％収率（９０ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）で緑色泡状物として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ７０２［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃；３００ＭＨｚ）δ１０．３６（ｂｓ，１Ｈ）、８．８４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．８Ｈｚ）、８．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．８６（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．９Ｈｚ）、７．８２〜７．７８（ｍ，４Ｈ）、７．７６（ｓ，１Ｈ）、７．５２〜７．２７（ｍ，９Ｈ）、６．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．８Ｈｚ）、３．８２（ｂｒ．ｍ，２Ｈ）、３．４９（ｂｒ．ｍ，２Ｈ）、２．５０（ｂｒ．ｍ，２Ｈ）、２．３９（ｂｒ．ｍ，２Ｈ）、２．３３（ｓ，３Ｈ）；¹³ＣＮＭＲ（（ＣＤ₃）₂ＣＯ；３００ＭＨｚ）δ１６９．６（Ｃ）、１５８．７（Ｃ）、１５７．０（Ｃ）、１５６．５（Ｃ）、１５０．５（Ｃ）、１４６．６（Ｃ）、１３９．７（Ｃ）、１３９．４（Ｃ）、１３８．２（Ｃ）、１３７．５（Ｃ）、１３５．２（ＣＨ）、１３２．８（ＣＨ）、１３２．７（ＣＨ）、１３２．７（ＣＨ）、１３２．５（ＣＨ）、１３１．１（Ｃ）、１３０．３（２×ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２９．３（ＣＨ）、１２８．７（２×ＣＨ）、１２８．４（ＣＨ）、１２７．２（２×ＣＨ）、１２７．１（Ｃ）、１２６．７（Ｃ）、１２５．５（２×ＣＨ）、１２５．３（ＣＨ）、１２３．２（ＣＨ）、１２１．３（ＣＨ）、１２１．２（ＣＨ）、１１９．８（ＣＨ）、１１５．８（ＣＨ）、１１３．３（ＣＨ）、１０９．８（ＣＨ）、１０９．７（ＣＨ）、４６．１（ＣＨ₃）。

５６）テトラブチルアンモニウムフルオリドによるＮ−スルホニルの脱保護のための一般的な手順
無水ＴＨＦ中の化合物（３〜９）の１Ｍ混合物に、不活性雰囲気下、４当量のＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ溶液）を添加した。混合物を反応が完了するまで還流させた（続いてＴ．Ｌ．Ｃを２〜３時間行った）。溶媒を除去し、残留物をＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解した。有機層を、水、ブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。

５７）４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イルアミン１０（ｒ１５６）

残留物をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ₃／ＭｅＯＨ９５／５）によって精製し、ＥｔＯＨから再結晶させて、所望の化合物を白色固体として２９％収率（８．４ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ２６６［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（（ＣＤ₃）₂ＣＯ；３００ＭＨｚ）δ１１．１１（ｂｓ，１Ｈ）、８．８４（ｍ，３Ｈ）、８．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｊ＝１．７Ｈｚ）、８．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、８．１２（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，Ｊ＝０．６Ｈｚ）、７．９５（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８ＨｚＪ＝７．１Ｈｚ，Ｊ＝０．６Ｈｚ）、７．７３（ｓ，１Ｈ）、７．１８（ｂｓ，２Ｈ）。

５８）Ｎ−［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］アセトアミド１１

残留物をＥｔＯＨから再結晶させて、所望の化合物を白色固体として３３％収率（１５ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３０８［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（（ＣＤ₃）₂ＣＯ）；３００ＭＨｚ）δ１１．０４（ｂｓ，１Ｈ）、１０．３７（ｂｓ，１Ｈ）、８．１５〜８．１０（ｍ，３Ｈ）、７．７６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，Ｊ＝８．３Ｈｚ）、７．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．４９（ｓ，１Ｈ）、７．３７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｊ＝０．９Ｈｚ）、７．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，Ｊ＝０．９Ｈｚ）、２．２９（ｓ３Ｈ）；ＨＲＭＳＣ₁₇Ｈ₁₃Ｎ₃ＯＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値３０８．０８５８実測値３０８．０８５７。

５９）Ｎ−［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］ベンズアミド１２（ｒ１５８）

残留物をＥｔＯＨから再結晶させて、所望の化合物を白色固体として４２％収率（１７ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ３７０［Ｍ＋Ｈ+・］；¹ＨＮＭＲ（（ＣＤ₃）₂ＣＯ）；３００ＭＨｚ）δ１１．４８（ｂｓ，１Ｈ）、１０．４４（ｂｓ，１Ｈ）、８．２３（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒７．０Ｈｚ）、８．１６〜８．１１（ｍ，３Ｈ）、７．８１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）、７．６２（ｍ，４Ｈ）、７．５１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．２Ｈｚ）、７．３９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｊ＝１．０Ｈｚ）、７．１８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，Ｊ＝１．０Ｈｚ）；ＨＲＭＳＣ₂₂Ｈ₁₅Ｎ₃ＯＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値３７０．１０１４実測値３７０．１０１３。

６０）ビフェニル−４−カルボン酸４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］アミド１３（ｒ１６９）

ＣＨＣｌ₃から熱濾過によって残留物を得て、所望の化合物を白色固体として１０％収率（１４ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４４６［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１２．８７（ｂｓ，１Ｈ）、１１．３７（ｂｓ，１Ｈ）、８．２６（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒８．４Ｈｚ）、８．１７〜８．０９（ｍ，３Ｈ）、７．８８（ｄ，２Ｈ，Ｊ≒８．４Ｈｚ）、７．８１〜７．７５（ｍ，４Ｈ）、７．５５〜７．３６（ｍ，５Ｈ）、７．１７（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）；ＨＲＭＳＣ₂₈Ｈ₁₉Ｎ₃ＯＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値４４６．１３２７実測値４４６．１３２６。

６１）Ｎ−［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イルメチル）ベンズアミド１４

残留物をＥｔＯＨから再結晶させて、所望の化合物を白色固体として５０％収率（２０ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４８２［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１２．７３（ｂｓ，１Ｈ）、１１．３５（ｂｓ，１Ｈ）、８．１６〜８．０８（ｍ，５Ｈ）、７．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）、７．７１（ｓ，１Ｈ）、７．５１〜７．４６（ｍ，３Ｈ）、７．３８（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、７．１６（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝０．９Ｈｚ，Ｊ＝７．３Ｈｚ）、３．５５（ｓ，２Ｈ）、２．３９（ｂｒ．ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｂｒ．ｍ，４Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳＣ₂₈Ｈ₂₇Ｎ₅ＯＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値４８２．２０１５実測値４８２．２０１５。

６２）５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］アミド１５（ｒ１７０）

残留物をＥｔＯＨから再結晶させて、所望の化合物を黄色固体として６６％収率（２５ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ４３８、４４０［Ｍ＋Ｈ⁺；⁷⁹Ｂｒ，⁸¹Ｂｒ］；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆；３００ＭＨｚ）δ１２．８３（ｂｓ，１Ｈ）、１１．３４（ｂｓ，１Ｈ）、８．１６〜８．１０（ｍ，２Ｈ）、８．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０Ｈｚ）、７．７７〜７．７３（ｍ，３Ｈ）、７．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．３８（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｊ＝１．０Ｈｚ）、７．１６（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，Ｊ＝１．０Ｈｚ）、６．９１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）。

６３）５−［４−（ピペラジン−１−カルボニル）フェニル］フラン−２−カルボン酸［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）チアゾール−２−イル］アミド１６

ＭｅＯＨ中での粉砕後に残留物を濾過して、所望の化合物を白色固体として３９％収率（２２ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）で得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ５６２［Ｍ＋Ｈ⁺］；¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆で７０℃；３００ＭＨｚ）δ１３．０６，（ｂｓ，１Ｈ）、１１．１４（ｂｓ，１Ｈ）、８．１５〜８．０８（ｍ，５Ｈ）、７．７７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，Ｊ＝１．５Ｈｚ）、７．６５〜７．６３（ｍ，２Ｈ）、７．５４〜７．４９（ｍ，３Ｈ）、７．３９（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、７．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）、７．１７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５４Ｈｚ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，Ｊ＝１．１Ｈｚ）、３．５１（ｂｒ．ｍ，４Ｈ）、２．３６（ｂｒ．ｍ，４Ｈ）、２．２３（ｓ，３Ｈ）；ＨＲＭＳＣ₃₂Ｈ₂₇Ｎ₅Ｏ₃Ｓ［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値５６２．１９１３実測値５６２．１９１１。

２．Ａｌｋキナーゼ阻害活性
方法：ＥＬＩＳＡベースのインビトロキナーゼアッセイ
ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓ２Ｃバキュロウイルスベクター系を使用して組換えＡＬＫキナーゼをＳｆ９昆虫細胞中に発現させ、アニオン交換ＦａｓｔＦｌｏｗＱ−ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラム(Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ)、続いてＨｉＴｒａｐ(商標)ニッケル親和性カラム(Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ)を使用して精製した。ＥＬＩＳＡベースのキナーゼアッセイにおいては、阻害剤をスクリーニングするために、精製したＡＬＫタンパク質を使用した。ＮｕｎｃＩｍｍｕｎｏ９６ウェルプレートを、ＰＢＳ中種々の濃度のＡＬＫペプチド基質（ＡＲＤＩＹＲＡＳＦＦＲＫＧＧＣＡＭＬＰＶＫ）を含有するコーティング溶液（１２５μｌ／ウェル）とともに、３７℃で終夜インキュベートした。次いで、ウェルを２００μｌの洗浄緩衝液（ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ０．０５％）で洗浄し、３７℃で少なくとも２時間乾燥させた。キナーゼ反応は、全体積１００μ／ウェルで、５０ｍＭのＴｒｉｓｐＨ７．５、５ｍＭのＭｎＣｌ₂、５ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．３ｍＭのＡＴＰおよび精製したｒＡＬＫの存在下、３０℃で１５分間実施した。阻害剤試験のために、反応混合物を阻害剤または溶媒対照とともに室温で１０分間プレインキュベートした後、ＥＬＩＳＡプレートに移した。反応後、ウェルを２００μｌの洗浄緩衝液で５回洗浄した。ＰＢＳ＋４％ＢＳＡ中で１：２０００に希釈した１００μｌ／ウェルのマウスモノクローナル抗ホスホチロシン抗体（クローン４Ｇ１０、ＵｐｓｔａｔｅＢｉｏｔｅｃｈＬｔｄ）を使用し、リン酸化ペプチドを検出した。室温で３０分間インキュベーション後、抗体を除去し、ウェルを上述した通りに洗浄した。ＰＢＳ＋４％ＢＳＡ中で１：１０００に希釈した１００μｌの二次抗体（抗マウスＩｇＧ、西洋ワサビペルオキシダーゼを全抗体に結合したもの、ＡｍｅｒｓｈａｍＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ）を各ウェルに添加し、プレートを室温で３０分間再度インキュベートした後、上記の通り洗浄した。１００μｌ／ウェルのＴＭＢ基質溶液（Ｅｎｄｏｇｅｎ）を使用してプレートを展開し、等体積のＨ₂ＳＯ₄ ０．３６Ｍを添加することによって反応を停止させた。最後に、Ｕｌｔｒｏｓｐｅｃ（登録商標）３００分光光度計（Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ）を使用して、吸光度を４５０ｎｍで読み取った。対照と比較して５０％の阻害を示す試験液の濃度を、ＩＣ₅₀と表現した。

ＥＬＩＳＡキナーゼアッセイの結果

３．ＮＰＭ／ＡＬＫ形質転換細胞の増殖の阻害
方法：トリチウム化チミジン取り込み細胞増殖アッセイ
発癌性融合タンパク質ＮＰＭ／ＡＬＫで形質転換したＢａＦ３細胞を、添加培地中体積１００μＬに１００００細胞／ウェルでＵ底９６ウェルプレートに播種した。阻害剤の連続希釈液を適当なウェルに添加し、体積を２００μＬに調整した。対照を、等体積のビヒクル、ＤＭＳＯ単独で処理した。プレートを３７℃で７２時間インキュベートした。インキュベーションの最後の１６時間は、³[Ｈ]−チミジン（１μＣｉ／ウェル）を添加した。細胞をガラスフィルター上に収穫し、βシンチレーションカウンター（１４３０ＭｉｃｒｏＢｅｔａ、Ｗａｌｌａｃ、Ｔｕｒｋｕ、Ｆｉｎｌａｎｄ）を使用して³[Ｈ]−チミジン組み込みを計測した。５０％の阻害濃度（ＩＣ₅₀）は、対照と比較して³[Ｈ]−チミジン取り込みを５０％減少させる阻害剤の濃度として定義した。

増殖アッセイの結果

４．ＡｂｌＴ３１５Ｉ変異体キナーゼ阻害活性
方法：ＥＬＩＳＡベースのインビトロキナーゼアッセイ
ｐＢｌｕｅＢａｃＨｉｓ２Ｃバキュロウイルス発現ベクターを使用して、組換えＡｂｌＴ３１５Ｉタンパク質をＳｆ９細胞中に発現させた。アニオン交換ＦａｓｔＦｌｏｗＱ−ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラム(Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ)、続いてＨｉＴｒａｐ(商標)ニッケル親和性カラム(Ａｍｅｒｓｈａｍ−ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ)を使用して、ＡｂｌＴ３１５Ｉを精製した。ＥＬＩＳＡベースのキナーゼアッセイにおいては、上述した通り、阻害剤をスクリーニングするために、精製したＡｂｌＴ３１５Ｉを使用した。キナーゼ反応は、５０ｍＭのＴｒｉｓｐＨ７．５、１ｍＭのＭｎＣｌ₂、５ｍＭのＭｇＣｌ₂、０．３ｍＭのＡＴＰ、ペプチド基質(ＡＲＤＩＹＲＡＳＦＦＲＫＧＧＣＡＭＬＰＶＫ)および精製したＡｂｌＴ３１５Ｉの存在下で実施した。対照と比較して５０％の阻害を示す試験液の濃度を、ＩＣ₅₀と表現した。

参考文献

Claims

式（Ｉ）の化合物：

［式中、Ｑ、Ｔ、Ｗ、Ｋ、Ｊ、Ｙ、Ｘ、Ｚは、Ｃ、Ｎ、Ｓ、Ｏから独立に選択され、但し、前記対応する環は（ヘテロ）芳香族であり、
ｎ＝０または１であり、
ｑ＝１または２であり、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＮＨ２、

から選択され、
Ｒ２は、水素またはハロゲンであり、
Ｒ３は、

から選択されるか、
または式（Ｉ）中の部分

は、基

を形成し、式中、Ａは−ＣＨ２−または−ＮＨ−である］。
式（Ｉａ）：

の、請求項１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、

から選択され、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｗ、Ｔ、Ｑ、Ｙ、Ｋ、ＪおよびＺは、上記で定義された通りである］。
式（ＩＩａ）

の、請求項１に記載の化合物
［式中、
Ｒ１は、ハロゲン、−ＮＨ₂、

から選択され、
Ｒ２は、ハロゲンであり、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｔ、Ｗ、Ｙ、Ｋ、Ｊ、Ｚは、上記で定義された通りである］。
式（ＩＩＩａ）

の、請求項１に記載の化合物
［式中、Ａは−ＣＨ２−または−ＮＨ−であり、
Ｒ３は、

から選択され、
Ｘ、Ｚ、ＪおよびＫは、上記で定義された通りである］。
− Ｎ，Ｎ’−（４，４’−（１，４−フェニレン）ビス（チアゾール−４，２−ジイル））ビス（４−（（４−メチルピペラジン−１−イル）メチル）ベンズアミド）
− １，４−ジ（フラン−３−イル）ベンゼン（ｒ２３６）
− （５−｛４−［５−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フラン−２−イル］−フェニル｝−フラン−２−イル）−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−メタノン
− ５，５’−（１，４−フェニレン）ジフラン−２−カルボン酸
− ５−（２−ブロモフェニル）−２−（チアゾール−２−イル）ピリジン
− Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）ニコチンアミド
− Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−ヨードベンズアミド
− Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）チアゾール−２−イル）−５−ブロモフラン−２−カルボキサミド
− ５−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−カルボニル）−フェニル］−フラン−２−カルボン酸［５−（９Ｈ−フルオレン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アミド
− Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセトアミド
− Ｎ−（５−（９Ｈ−フルオレン−７−イル）チアゾール−２−イル）−４−ヒドロキシブタンアミド
− ４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イルアミン
− Ｎ−［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］−ベンズアミド
− ビフェニル−４−カルボン酸４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アミド
− ５−ブロモ−フラン−２−カルボン酸［４−（９Ｈ−カルバゾール−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アミド
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
治療剤として使用するための、

からなる群から選択される化合物。
前記請求項のいずれかに記載の化合物を、生理的に許容されるビヒクルまたは添加剤と併せて含有する医薬組成物。
腫瘍の治療において使用するための、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物または請求項７に記載の組成物。
未分化リンパ腫キナーゼ関連またはＢｃｒ−Ａｂｌ関連腫瘍の治療において使用するための、請求項８に記載の化合物または組成物。
未分化大細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、炎症性筋線維芽細胞腫瘍、慢性骨髄性白血病またはＰｈ＋急性リンパ性白血病の治療において使用するための、請求項８に記載の化合物または組成物。