JP2011500939A - ヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーならびに、このポリマーから作られるコンジュゲート - Google Patents

ヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーならびに、このポリマーから作られるコンジュゲート Download PDF

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Abstract

本発明は、コンジュゲートを形成するための生物学的活性剤との反応に適したヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマー試薬であって、１つ以上のポリマー鎖と、１つ以上のポリマー鎖の末端に存在する複数のヒドロキシアパタイト標的化部分と、を含むポリマー試薬を提供するものである。多腕ポリマーについては、１つ以上の分解可能な結合によって、腎クリアランスに適した分子量のポリマーセグメントに分割または分離されていてもよい。本発明のポリマー試薬は、実質的に線状の構造を取り得るが、分岐構造または多腕構造も同様に企図される。本発明は、ポリマーの総数平均分子量が、線状ポリマーで少なくとも約３０，０００Ｄａ、多腕ポリマーで２０，０００Ｄａであるなどの高分子量ポリマーの使用が望ましい用途に適している。各構造は、ｉｎ ｖｉｖｏで分解できる１つ以上の結合を含む。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）に基づいて、２００７年１０月２３日に出願された米国仮特許出願第６０／９８２，０１２号（その開示内容を本明細書に援用する）の優先権の利益を主張するものである。
特に、本発明は、少なくとも１つのヒドロキシアパタイト標的化部分を含む水溶性の非ペプチドポリマーならびに、このポリマーから作られるコンジュゲートに関する。
薬剤の送達には、親水性ポリマーと薬学的に有用な特性を有する分子との共有結合が非常に有用である。このため、コンジュゲートとして臨床試験に導入されるポリマーが増え続けている。その中には、「ＰＥＧ」と略記されるポリエチレングリコールのコンジュゲート［非特許文献１；非特許文献２］、「ＨＥＳ」と略記されるヒドロキシエチルセルロースのコンジュゲート（特許文献１）、ポリ（Ｌ−グルタミン酸）のコンジュゲート［非特許文献３］もある。著しく成功した一例がＰＥＧコンジュゲートであり、そのいくつかは市販の薬剤である（ＣＩＭＺＩＡ（登録商標）、ＮＥＵＬＡＳＴＡ（登録商標）、ＭＡＣＵＧＥＮ（登録商標）、ＳＯＭＡＶＥＲＴ（登録商標）、ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）、ＰＥＧ−ＩＮＴＲＯＮ（登録商標）など）。ＰＥＧは、多くの有益な特性を持つポリマーである。たとえば、ＰＥＧは水に可溶であり、多くの有機溶媒にも可溶であって、無毒かつ非免疫原性で、ＰＥＧを表面に結合させると、生体適合性の保護コーティングが得られる。ＰＥＧの一般的な応用法または使用法としては、（ｉ）たとえば、血漿半減期を延長し、腎臓のクリアランスを低下させるためのタンパク質への共有結合、（ｉｉ）動脈置換、血液接触装置、バイオセンサなどにおける表面への結合、（ｉｉｉ）バイオポリマー合成用の可溶性キャリアとしての使用法、（ｉｖ）ハイドロゲル調製用の試薬としての使用法があげられる。他の一般に用いられる親水性ポリマーにも、同様の特性と潜在的な使用法が主張されている。
上述した用途すべてではないにしても多くの用途では、最初に、ＰＥＧの場合ならヒドロキシル基である親水性ポリマーの活性末端を、タンパク質の表面に見られる官能基などの所望の標的分子または表面内に見られる官能基と容易に反応できる官能基に変換し、親水性ポリマーを活性化する必要がある。タンパク質の場合、典型的な官能基として、リシン、システイン、ヒスチジン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、チロシンの側鎖に関連した官能基ならびに、Ｎ末端のアミノ官能基とＣ末端のカルボン酸官能基があげられる。ポリマー修飾ならびに最終的なコンジュゲーションに利用できる特定の官能基に基づいて適宜変更をほどこせば、他の無毒の生体適合性親水性ポリマーで代替できることもあり、こうしたものが一般に許容される代用品である。
このクラスの代表としてＰＥＧを用いる場合、ほとんどのＰＥＧ活性化反応の開始材料として利用されるＰＥＧは一般に、エンドキャップされたＰＥＧである。エンドキャップされたＰＥＧは、一般にポリマー末端にあるヒドロキシル基のうちの１つ以上が、メトキシ基、エトキシ基またはベンジルオキシ基などの非反応性基に変換されたものである。最も一般的に用いられるのが、ｍＰＥＧと略記されるメトキシＰＥＧである。一般にエンドキャップされたＰＥＧのほうが架橋や凝集に対する抵抗性が高いため、通常はｍＰＥＧなどのエンドキャップされたＰＥＧが好ましい。普通に用いられる２種類のエンドキャップされたＰＥＧアルコールであるｍＰＥＧとモノベンジルＰＥＧ（ｂＰＥＧとしても知られる）の構造を、以下にあげておく。
Figure 2011500939
 式中、ｎは一般に約１０から約２，０００の範囲である。
薬剤送達に用いられるポリマー試薬の１つの具体例において、米国特許第６，４３６，３８６号明細書には、骨部位への治療薬送達用に患者の体内で骨表面を選択的に標的するのに用いることが可能なＰＥＧベースのヒドロキシアパタイト標的化ポリマーが記載されている。このように、ポリマー試薬は、分子の活性な部分を対象となる組織に標的送達するとともに、循環時間を増加させる。
国際公開第２００６／０５０９５９号パンフレット
Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｂｙ ＰＥＧｙｌａｔｅｄ ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．５５：２１７〜２５０ Ｈａｒｒｉｓ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＰＥＧｙｌａｔｉｏｎ ｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ２：２１４〜２２１） Ｌｉ（２００２）Ｐｏｌｙ（Ｌ−ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ）−ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．５４：６９５〜７１３
多くの成功例があるにもかかわらず、活性剤に対するポリマーのコンジュゲーションには、取り組むべき課題があることが多い。たとえば、比較的長いポリ（エチレングリコール）分子を活性剤に結合させると、一般に短めのポリ（エチレングリコール）分子を結合させる場合よりも水溶性が高くなることが知られている。しかしながら、ポリマー部分を持ついくつかのコンジュゲートの欠点の１つに、このようなコンジュゲートがｉｎ ｖｉｖｏで実質的に不活性になりかねないという可能性がある。これらのコンジュゲートは、ポリマー鎖の長さがゆえに実質的に不活性であり、それがゆえに効果的に活性剤全体に「くるまれる」形になり、薬理学的活性に必要なリガンドへの到達を制限すると仮定されている。
その結果、当該技術分野においては、薬剤送達目的で薬剤部分とのコンジュゲーションに適したポリマー試薬、特に、ｉｎ ｖｉｖｏでの循環時間が望ましいが、同時に身体からの適時のクリアランスも呈するコンジュゲートを得るのに必要な分子量を持つポリマー試薬に継続的な需要がある。このようなポリマー試薬によって、ヒドロキシアパタイト表面など身体の特定部位を標的する機能も得られれば、特に有益であろう。本発明は、当該技術分野におけるこうした需要および他の需要に対処するものである。
本発明は、コンジュゲートを形成するための生物学的活性剤との反応に適したヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマー試薬であって、１つ以上のポリマー鎖と、１つ以上のポリマー鎖の末端に存在する複数のヒドロキシアパタイト標的化部分と、を含むポリマー試薬を提供するものである。多腕ポリマーについては、１つ以上の分解可能な結合によって、腎クリアランスに適した分子量のポリマーセグメントに分割または分離されていてもよい。本発明のポリマー試薬は、実質的に線状の構造を取り得るが、分岐構造または多腕構造も同様に企図される。本発明は、ポリマーの総数平均分子量が、線状ポリマーで少なくとも約３０，０００Ｄａ、多腕ポリマーで２０，０００Ｄａであるなどの高分子量ポリマーの使用が望ましい用途に適している。各構造は、ｉｎ ｖｉｖｏで分解できる１つ以上の結合を含む。各ポリマー分子における複数のヒドロキシアパタイト標的化部分によって、ポリマー試薬がヒドロキシアパタイト表面を選択的に標的してこれと結合する機能が強化され、それによって骨部位に送達される生物学的に活性な部分の濃度を高めることが可能である。
一実施形態では、本発明は、以下の構造
Figure 2011500939
 を有するヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーを提供するものであり、
式中、
Ａは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｚ２または−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｚ２であり、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３は各々、同一であっても異なっていてもよく、結合であり、
Ｚ１は各々、同一であっても異なっていてもよく、Ｚ２またはヒドロキシアパタイト標的化部分あるいは、２から約１０のヒドロキシアパタイト標的化部分を含み、任意に少なくとも１つの水溶性非ペプチドポリマーも含む多腕構造であり、ただし、ｂが０である場合、少なくとも１つのＺ１が１本以上のポリマー腕を含む多腕構造を有するという条件で、なおかつ、少なくとも１つのＺ１がヒドロキシアパタイト標的化部分であるという条件であり、
Ｚ２は、スペーサを介してＰＯＬＹ２と結合していてもよい官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
Ｒは、結合に利用できるｐ＋１部位を少なくとも含む分子から誘導されるモノマー性またはオリゴマー性多腕コア分子であり、
ｐは、２〜３２の範囲の整数である。
特定の実施形態では、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、約２２，０００Ｄａ未満、約１５，０００Ｄａ未満、約８，０００Ｄａ未満のうちの１つ以上を満たす数平均分子量を有する。ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２の例示としてのポリマーには、ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）ならびに、これらのコポリマー、ターポリマーまたは混合物がある。ヒドロキシアパタイト標的化部分の例として、テトラサイクリン、カルセイン、ビスホスホネート、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、およびアミノホスホ糖があげられる。
本発明のポリマー試薬の特定の実施形態は、Ｌ１、Ｌ２またはＬ３位の結合などにおける少なくとも１つの加水分解的または酵素的に切断可能な結合を含む。ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２などのポリマー鎖は、結合によって結合された２から約５個の水溶性の非ペプチドポリマーセグメントを含むセグメント化構造を持ち得るものである。たとえば、ＰＯＬＹ１とＰＯＬＹ２のうちの一方または両方が、式−ＰＯＬＹ−Ｌ−ＰＯＬＹ−で表される構造を取ることが可能であって、式中、各ＰＯＬＹは水溶性の非ペプチドポリマーであり、Ｌは、分解可能であってもよい結合である。
末端Ｚ１部分は、以下の構造のうちのいずれかなどの多腕構造を含み得るものである。
Figure 2011500939
 式中、ｍは各々１〜３５０であり、Ｍｅはメチルであり、Ｚは各々、ヒドロキシアパタイト標的化部分である。
コア部分Ｒは、構造Ｒ１（ＯＨ）ｐのポリオールから誘導可能であって、式中、Ｒは、任意に１つ以上のエーテル結合を含む分岐炭化水素であり、ｐは、少なくとも３である。例示としてのポリオールには、グリセロール、ペンタエリスリトール、糖から誘導されるアルコール、これらのオリゴマーまたはポリマーがある。あるいは、Ｒを、ジスルフィド、ペプチド、これらのオリゴマーまたはポリマーならびに、これらの組み合わせから誘導することも可能である。特定の実施形態では、Ｒは、少なくとも１つのリシン残基を含むジペプチドまたはトリペプチドから誘導される。
本発明の例示としてのポリマー試薬は、以下のポリマー構造を含み、
Figure 2011500939
 式中、ｎは１〜３５０である。
別の態様では、本発明は、本発明によるポリマー試薬と生物学的活性剤との反応生成物を含み、以下の構造を有するヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーコンジュゲートを提供するものであり、
Figure 2011500939
 式中、式（Ｉａ）で上述した変数はすべて式（Ｉｂ）にも適用され、さらに、Ｂは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｌ４−Ｄｒｕｇまたは−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｌ４−Ｄｒｕｇであり、Ｄｒｕｇは、生物学的に活性な部分の残基であり、Ｌ４は、Ｚ２と生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、Ｚ３は、Ｌ５−Ｄｒｕｇまたはヒドロキシアパタイト標的化部分であり、式中、Ｌ５は、官能基であるＺ１と、生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、ただし、少なくとも１つのＺ３がヒドロキシアパタイト標的化部分である。
Ｄｒｕｇは、生物学的に活性な部分の残基であり、たとえば、成長因子、抗生物質、化学療法剤または鎮痛剤であり得る。例示としての成長因子には、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、骨形態形成タンパク質、骨形成タンパク質、トランスフォーミング増殖因子、ＬＩＭ無機化タンパク質、類骨誘導因子、アンジオゲニン、エンドセリン；増殖分化因子、ＡＤＭＰ−１、エンドセリン、肝細胞増殖因子およびケラチノサイト増殖因子、ヘパリン結合増殖因子、ヘッジホッグタンパク質、インターロイキン、コロニー刺激因子、上皮増殖因子、インスリン様増殖因子、サイトカイン、オステオポンチン、およびオステオネクチンがある。
多腕構造が最も好ましいが、別の態様では、本発明は、以下の構造すなわち、
Ｚ−（Ｘ１）ａ−Ｌ１−（Ｘ２）ｂ−［ＰＯＬＹ１−（Ｘ３）ｃ−Ｌ２−（Ｘ４）ｄ］ｍ−ＰＯＬＹ２−（Ｘ５）ｅ−Ｙ
を有する、ヘテロ二官能性かつ実質的に線状のヒドロキシアパタイト標的化ポリマーを提供するものであり、
式中、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
Ｌ１は、結合であり、
Ｌ２は各々、カルバメートおよびアミドからなる群から選択される加水分解的または酵素的に切断可能な結合であり、
Ｚは、ヒドロキシアパタイト標的化部分であり、
Ｙは官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
ｍは、１〜１０の範囲の整数である。
ポリマー試薬と、このポリマー試薬から作られるコンジュゲートに加えて、本発明は、このような試薬およびコンジュゲートを生成するための方法ならびに、本発明によるポリマー試薬の生物学的に活性なコンジュゲートを使用する治療方法を含む。
本発明について詳細に説明する前に、本発明は特定のポリマー、合成技術、活性剤などに限定されるものではなく、これらは可変である旨を理解されたい。また、本明細書で使用する専門用語は特定の実施形態を説明するためだけのものであり、限定を意図したものではない旨も理解されたい。
本明細書で使用する場合、単数形「ａ」「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明らかな場合を除いて、複数形の指示対象も含む点に留意すべきである。このため、たとえば、「ポリマー」といえば単数のポリマーはもとより２つ以上の同一または異なるポリマーも含み、「コンジュゲート」といえば、単数のコンジュゲートならびに２つ以上の同一または異なるコンジュゲートも示す。また、「賦形剤」といえば単数の賦形剤はもとより２つ以上の同一または異なる賦形剤も含むなどである。
Ｉ．定義
本発明について説明および権利請求するにあたって、後述する定義に基づいて以下の専門用語を使用する。
「ＰＥＧ」「ポリエチレングリコール」「ポリ（エチレングリコール）」は、本明細書では、あらゆる水溶性ポリ（エチレンオキシド）の意味で用いられる。一般に、本発明で使用するＰＥＧは、「−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」または「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」という２つの構造のうちの１つを含み、ｎは３から３０００であり、末端基とＰＥＧ全体のアーキテクチャは可変である。「ＰＥＧ」は、大部分すなわち５０％を超えて−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−であるサブユニットを含むポリマーを意味する。
広く利用されているＰＥＧの１つに、エンドキャップされたＰＥＧがある。ＰＥＧを「−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」と定義する場合、エンドキャッピング基は通常、一般に１〜２０個の炭素で構成される炭素含有基であり、好ましくはアルキル（メチル、エチルまたはプロピルなど）であるが、その飽和形態および不飽和形態ならびに、アリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロ、上記のいずれかの置換形態も想定されている。ＰＥＧを「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」と定義する場合、エンドキャッピング基は通常、一般に酸素原子と１〜２０個の炭素原子とで構成される炭素含有基であり、酸素原子は当該基に対して共有結合され、ＰＥＧの一末端との共有結合に利用される。この場合、基は一般に、アルコキシ（メトキシ、エトキシまたはベンジルオキシなど）であり、炭素含有基に関しては、飽和されていても不飽和であってもよく、アリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロ、上記のいずれかの置換形態であってもよい。他の（「エンドキャップされていない」）末端は一般に、ヒドロキシル、アミンあるいは、ＰＥＧを「−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−」と定義する場合にさらに化学修飾可能な活性化基である。また、エンドキャッピング基はシランであってもよい。
本発明で使用される特定のＰＥＧ形態は、以下において詳細に説明する、多岐にわたる分子量、構造または幾何学的形状（分岐、線状、多腕など）のＰＥＧを含む。
エンドキャッピング基に、検出可能なラベルを都合よく含ませることも可能である。ポリマーが検出可能なラベルを含むエンドキャッピング基を有する場合、ポリマーおよび／またはポリマーをカップリングさせる該当部分（活性剤など）の量または位置については、好適な検出器を用いて判断することが可能である。このようなラベルは、限定することなく、蛍光体、化学発光体、酵素標識や比色分析に用いられる部分（染料など）、金属イオン、放射性部分などを含む。
本明細書に記載の方法で使用するポリマーは一般に、多分散系である（すなわち、ポリマーの数平均分子量と重量平均分子量が等しくない）。しかしながら、本明細書に記載の方法に基づいて調製されるポリマーは、重量平均分子量（Ｍｗ）と数平均分子量（Ｍｎ）との比（Ｍｗ／Ｍｎ）で表される多分散性値が小さく、通常は約１．３未満、好ましくは約１．２未満、一層好ましくは約１．１５未満、なお一層好ましくは約１．０５未満、さらに最も好ましくは約１．０４未満、最も好ましくは約１．０３未満である。多腕ＰＥＧの多分散性は、多腕ＰＥＧの生成に用いられるポリマー腕の多分散性よりもかなり高くなり得る点に注意されたい。
本明細書で使用する場合、「イオン化可能な官能基」という用語ならびに、その類語は、水性媒質または他の極性媒質中で、官能基の別のイオン化可能な種との相互作用によってプロトンを獲得または失うことのある官能基である。イオン化可能な官能基としては、アミン、カルボン酸、アルデヒド水和物、ケトン水和物、アミド、ヒドラジン、チオール、フェノール、オキシム、ジチオピリジン、ビニルピリジンがあげられるが、これに限定されるものではない。
本明細書で使用する場合、「カルボン酸」という用語は、
Figure 2011500939
 官能基［「−ＣＯＯＨ」または−Ｃ（Ｏ）ＯＨとも表される］を有する部分ならびに、カルボン酸の誘導体である部分であり、このような誘導体は、たとえば、保護されたカルボン酸を含む。このため、文脈からそうでないことが明らかな場合を除いて、カルボン酸という用語は、酸形態のみならず、対応するエステルおよび保護形態も含む。Ｇｒｅｅｎｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９を参照のこと。
「活性化カルボン酸」は、特に求核アシル置換に関して、親カルボン酸よりも反応性が高いカルボン酸の機能的誘導体を意味する。活性化カルボン酸としては、酸ハライド（酸クロリドなど）、無水物、アミド、エステルがあげられるが、これに限定されるものではない。
「反応性の」または「活性化された」という表現は、特定の官能基について使用する場合、別の分子の求電子剤または求核剤と容易に反応する反応性官能基を示す。これは、反応に強い触媒または極めて非実用的な反応条件を必要とする基（すなわち、「非反応性」または「不活性」基）とは対照的である。
「保護された」または「保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）」または「保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｇｒｏｕｐ）」とは、特定の反応条件下で分子における特定の化学的反応性官能基の反応を防ぐまたは遮断する部分（すなわち、保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ））が存在することを示す。保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）は、保護対象となる化学的反応性基のタイプならびに、利用する反応条件、分子に別の反応性基または保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）がある場合はその存在によって変化することになる。当該技術分野において周知の保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）は、上掲のＧｒｅｅｎｅらに記載されている。
本明細書で使用する場合、「官能基」またはその類義語は、その保護された形態を包含することを意図したものである。
「スペーサ」または「スペーサ部分」という用語は、本明細書では、水溶性ポリマーの末端や官能基などの相互接続部分を連結するのに任意に用いられる原子または原子の集合体を示すものとして用いられる。本発明のスペーサ部分は、加水分解的に安定であってもよいし、生理学的に加水分解可能または酵素的に分解可能な結合を含むものであってもよい。
「アルキル」は、一般に約１から２０原子長の炭化水素鎖を示す。このような炭化水素鎖は、飽和炭化水素鎖であると好ましいが必ずしもそうでなくてもよく、分岐鎖であっても直鎖であってもよいが、一般に直鎖が好ましい。例示としてのアルキル基には、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、２−メチルブチル、２−エチルプロピルなどがある。本明細書で使用する場合、アルキルが３個以上の炭素原子を含み得る場合、「アルキル」はシクロアルキルを含む。
「低級アルキル」は、１から６個の炭素原子を含むアルキル基を示し、直鎖であっても分岐鎖であってもよく、一例として、メチル、エチル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルがあげられる。
「シクロアルキル」は、好ましくは３から約１２個、一層好ましくは３から約８個の炭素原子で構成される、架橋化合物、縮合化合物またはスピロ環化合物を含む、飽和または不飽和環状炭化水素鎖を示す。
「非干渉置換基」は、分子に存在する場合に、一般にその分子内に含まれる他の官能基に対して非反応性の基である。
たとえば「置換アルキル」における「置換」という表現は、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、たとえば、シクロプロピル、シクロブチルなど；ハロ、たとえば、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード；シアノ；アルコキシ、低級フェニル（０〜２置換フェニルなど）；置換フェニル；などであるがこれに限定されるものではない、１つ以上の非干渉置換基で置換された部分（アルキル基など）を示す。
「置換アリール」は、１つ以上の非干渉基を置換基として有するアリールである。フェニル環での置換の場合、置換基はどのような配向性（すなわち、オルト、メタまたはパラ）であってもよい。
「アルコキシ」は−Ｏ−Ｒ基を示し、式中、Ｒはアルキルまたは置換アルキル、好ましくはＣ１〜Ｃ２０アルキル（メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ベンジルオキシなど）であり、一層好ましくはＣ１〜Ｃ８アルキルである。
「アリール」は、各々５または６個のコア炭素原子からなる１つ以上の芳香環を意味する。アリールは、ナフチルでの場合のように縮合されていてもよいし、ビフェニルでの場合のように未縮合であってもよい、複数のアリール環を含む。アリール環についても、１つ以上の環状炭化水素、ヘテロアリールまたは複素環と縮合されていてもよいし、未縮合であってもよい。本明細書で使用する場合、「アリール」はヘテロアリールを含む。
「ヘテロアリール」は、１から４個のヘテロ原子、好ましくはＮ、ＯまたはＳあるいはこれらの組み合わせを含むアリール基である。ヘテロアリール環は、１つ以上の環状炭化水素、複素環、アリールまたはヘテロアリール環と縮合されていてもよい。
「求電子剤」は、イオンまたは原子または原子の集合体を示し、求電子中心すなわち求核剤を求めているか求核剤と反応できる電子である中心を有するイオン性のものであってもよい。
「求核剤」は、イオンまたは原子または原子の集合体を示し、求核中心すなわち求電子中心を求めているか求電子剤と反応できる中心を有するイオン性のものであってもよい。
「ｉｎ ｖｉｖｏで切断可能な」結合は、ｉｎ ｖｉｖｏでの循環時に、加水分解プロセス、酵素的なプロセス、化学的なプロセスまたはこれらのプロセスの組み合わせによって切断できる結合を示す。言い換えると、ｉｎ ｖｉｖｏで切断可能な結合は、生理学的条件下（すなわち、血清または他の体液の存在下にてｐＨ約７から７．５、温度約３７℃）で別々に分離可能な結合である。結合の分解半減期は可変であるが、一般に生理的条件下で約０．１から約１０日間の範囲である。
「加水分解的に切断可能な」または「加水分解可能な」または「加水分解的に分解可能な」結合は、生理学的条件下で水と反応する（すなわち加水分解される）比較的弱い結合である。水中における結合の加水分解しやすさは、２つの中心原子をつなぐ結合の一般的なタイプのみならず、これらの中心原子と結合した置換基によっても左右される。加水分解的に不安定または弱い適切な結合としては、カルボン酸エステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、オリゴヌクレオチドがあげられるが、これに限定されるものではない。
「酵素的に分解可能な結合」は、生理学的条件下で１種類以上の酵素による分解対象となる結合を意味する。また、酵素分解プロセスは、加水分解反応も含む。酵素的に分解可能な結合は、特に分解を活性化できるか酵素を引きつけるのに必要な別の部位を提供できる他の原子群と近接した配置にあるときに、特定のアミド（−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）およびウレタン（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）結合を含み得る。たとえば、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨＹ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｙ’（式中、Ｙは、Ｈ、アルキル、置換アルキル（アリールアルキル、ヒドロキシルアルキル、チオアルキルなど）またはアリールであり、Ｙ’はアルキルまたは置換アルキルである）などの特定のアミドと近接した位置にあるウレタンは、酵素的に分解可能である。本明細書で定義する場合、「ウレタン」結合は、上記の構造を有する結合も含む。
「化学的に分解可能な」結合とは、本明細書で使用する場合、ｉｎ ｖｉｖｏでの生理的条件下で化学反応によって分解される結合である。たとえば、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）結合は、ｉｎ ｖｉｖｏにてグルタチオンとの化学反応によって分解可能なものである。
「加水分解的に安定な」または「非分解性」結合または結合は、水中で実質的に安定している（生理学的条件下で長時間にわたって適当な程度まで加水分解切断または酵素切断されないことを意味する）化学結合、一般には共有結合を示す。加水分解的に安定な結合の例として、炭素−炭素結合（脂肪族鎖におけるものなど）、エーテルなどがあげられるが、これに限定されるものではない。通常、加水分解的に安定な結合は、生理学的条件下での加水分解率が１日あたり約１〜２％未満のものである。代表的な化学結合の加水分解率については、標準的な化学教科書のほとんどに見いだすことが可能である。
ポリマーまたはポリオールに関する文脈での「多官能性」または「多置換」とは、２つ以上の官能基が含まれるポリマーまたはポリオールを意味し、これらの官能基は同一であっても異なっていてもよい。本発明の多官能性ポリマーまたはポリオールは一般に、約２〜１００官能基、２〜５０官能基、２〜２５官能基、２〜１５官能基、２から１０官能基という範囲のうちの１つ以上を満たす多数の官能基を含有する。このため、ポリマー骨格またはポリオールにおける官能基の数は、２、３、４、５、６、７、８、９または１０官能基のうちのいずれであってもよい。
「二官能性」または「二置換」ポリマーまたはポリオールとは、同一（すなわちホモ二官能性）または異なる（すなわちヘテロ二官能性）２つの官能基が含まれるポリマーまたはポリオールを意味する。
「単官能性」または「一置換」ポリマーとは、単一の官能基が含まれるポリマーを意味する（ｍＰＥＧベースのポリマーなど）。
本明細書に記載の塩基性または酸性反応物は、中性のもの、荷電されたものならびに、その対応する塩形態を含む。
「患者」という表現は、コンジュゲートを投与することで予防または治療可能な症状に羅患しているか、こうした症状にかかりやすい生体を示し、ヒトと動物の両方を含む。
「任意の」または「任意に」とは、それに続いて説明される状況が起こるかもしれないし、起こらないかもしれないことを意味するため、説明には、その状況が起こる場合と起こらない場合が含まれる。
特に明記しないかぎり、本明細書での分子量は、
Figure 2011500939
 で定義される数平均分子量（Ｍｎ）で表記され、式中、Ｎｉは、分子量Ｍｉのポリマー分子数（またはこれらの分子のモル数）である。
「薬剤」「生物学的に活性な分子」「生物学的に活性な部分」「活性剤」「生物学的活性剤」という用語は各々、本明細書で使用する場合、ウイルス、細菌、真菌、植物、動物、ヒトなどであるが、これに限定されるものではない、生物有機体の物性または生化学的特性に影響し得る物質を意味する。特に、本明細書で使用する場合、生物学的に活性な分子は、ヒトまたは他の動物における疾患の診断、治癒、軽減、治療または予防向きの物質か、そうでなければヒトまたは動物の物理的または心理的な平穏さを高めるための物質を含む。生物学的に活性な分子の例として、ペプチド、タンパク質、酵素、小分子薬剤、染料、脂質、ヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、核酸、細胞、ウイルス、リポソーム、微小粒子およびミセルがあげられるが、これに限定されるものではない。本発明と併用するのに適した生物学的活性剤のクラスとしては、抗生物質、殺真菌薬、抗ウイルス薬、抗炎症薬、抗腫瘍薬、心血管治療薬、抗不安薬、ホルモン、成長因子、ステロイド剤などがあげられるが、これに限定されるものではない。
本明細書で使用する場合、「非ペプチド」は、実質的にペプチド結合を持たないポリマー骨格を示す。しかしながら、ポリマー骨格に、たとえば約５０モノマー単位あたり約１ペプチド以下の結合など、骨格の長さ方向に間隔をあけて少数のペプチド結合が含まれていてもよい。
「コンジュゲート」は、反応性のポリマー分子、好ましくは１つ以上の反応性基を有するポリ（エチレングリコール）に対する生物学的に活性な分子などの分子の共有結合の結果として形成される実体を示すことを意図したものである。
ＩＩ．ヒドロキシアパタイト標的化ポリマーと、このポリマーから作られるコンジュゲート
一態様では、本発明は、複数のヒドロキシアパタイト標的化部分が存在することを特徴とする、ポリマー試薬、当該ポリマー試薬を用いて作られる生物学的活性剤を含むコンジュゲートを提供するものである。単一のポリマー構造に複数のヒドロキシアパタイト標的化部分を用いることで、骨表面に対するポリマーの結合を強めることができ、これによって骨部位でポリマー構造に結合した薬剤分子の滞留時間を潜在的に長くできよう。
本発明の多腕ポリマーを一般化した構造を以下に示すが、この構造には、治療薬をコンジュゲートするのに使用可能な反応性ハンドルと骨標的化部分とを含む。骨標的化部分（ＢＴＭ）の数は、特定のＢＴＭの結合効率に応じて２つから２０を超える数まで大幅に変わることがある。必要に応じてポリマー分子量を調節し、循環時間、溶解性、薬剤の保護、ＢＴＭのキャリアなどのポリマーが果たすさまざまな役割において効率を最大にすることが可能である。
Figure 2011500939
 式中、各ＰＯＬＹおよび任意のＰＯＬＹ２は、水溶性の非ペプチドポリマーであり、ＢＴＭは骨標的化部分（本明細書ではヒドロキシアパタイト標的化部分と同義に用いられる）であり、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３は結合である。「反応性ハンドル」と、骨癌細胞を標的できる薬剤などの治療薬とのコンジュゲーションによって、ポリマー固定化薬剤が骨細胞の標的化薬剤になる。適用する際には、薬剤を骨の癌性部分に直接注射して作用させることができよう。
反応性ハンドルは、好ましくは、分子の操作および精製に利用できるイオン化可能な官能基である。例示としてのイオン化可能な官能基には、炭素長（カルボニル炭素を含む）が炭素原子数１から約２５のアルカン酸などのアミンおよびカルボン酸基がある（たとえば、カルボキシメチル、プロパン酸、ブタン酸）。他の好適な官能基の例として、アルデヒド水和物、ケトン水和物、アミド、ヒドラジン、ヒドラジド、チオール、スルホン酸、アミド化物、ヒドロキシルアミン、フェノール、オキシム、ジチオピリジン、ビニルピリジン、２−置換−１，３−オキサゾリン、２−置換１，３−（４Ｈ）−ジヒドロオキサジン、２−置換−１，３−チアゾリン、２−置換１，３−（４Ｈ）−ジヒドロチアジンがあげられる。
本発明の多腕ポリマーの別の一般構造を以下に示すが、これは単一の骨標的化部分と、治療薬を含有する複数の部位とを含む。繰り返すが、数ＢＴＭは、特定ＢＴＭの結合効率に応じて１から数個まで大きく変わり得るものであるが、好ましいＢＴＭ単位数は小さい。必要に応じてポリマー分子量を調節し、循環時間、溶解性、ＢＴＭのキャリアなどのポリマーが果たすさまざまな役割において効率を最大にすることが可能である。この用途での薬剤部分は、標的部位で薬剤の送達を可能にする分解可能な結合によってポリマーと結合したものであってもよい低分子量単位である。
Figure 2011500939
 また、ポリマー試薬は、ｉｎ ｖｉｖｏで分解する１つ以上の切断可能な結合または分解可能な結合であってもよい。１つ以上の分解可能な結合は、ポリマー鎖に沿ってまたは中心コア分子内で、結合のｉｎ ｖｉｖｏでの分解時に放出されるポリマー試薬の各セグメントが、セグメントの腎クリアランスを妨害しない分子量になるように間隔があいている。本発明のポリマー試薬は、身体からポリマーを実質的に完全に除去するとともに比較的高ポリマー分子量が望ましい両方の場合のコンジュゲートの調製に使用できるという点で、特に好都合である。たとえば、ポリマー試薬（およびそれから調製されるコンジュゲート）のポリマーの総数平均分子量は一般に、分子量約３０，０００から約１５０，０００Ｄａ（総分子量約３０，０００Ｄａ、３５，０００Ｄａ、４０，０００Ｄａ、４５，０００Ｄａ、５０，０００Ｄａ、５５，０００Ｄａ、６０，０００Ｄａ、６５，０００Ｄａ、７０，０００Ｄａなど）など、少なくとも約３０，０００Ｄａである。分解可能な結合の分解時に放出される各ポリマーセグメントの数平均分子量は、好ましくは約２２，０００Ｄａ以下、一層好ましくは約２０，０００Ｄａ以下、なお一層好ましくは約１５，０００Ｄａ以下、最も好ましくは約８，０００Ｄａ以下である。いくつかの実施形態では、ポリマーセグメントの分子量が約５，０００Ｄａ以下または約２，５００Ｄａ以下である。分解可能な結合の切断に起因するポリマーセグメントの数は、２から約４０まで可変であるが、通常は２から約１０の範囲（２、３、４、５、６、７、８、９または１０ポリマーセグメントなど）である。
本発明のポリマー試薬（およびそれから調製されるコンジュゲート）の構造的な構成は可変である。それほど好ましくはないが、ポリマー試薬は実質的に線状の形態を取ることも可能である。ポリマー試薬の好ましい実施形態は、ポリオールまたはペプチドなどの共通の多官能性コア分子から延在する２つ以上（好ましくは３つ以上）のポリマー腕を含む「多腕」構成である。本発明のポリマーの好ましい実施形態はハイドロゲルの形ではない、つまりポリマー試薬（およびそれから調製されるコンジュゲート）が水で膨潤可能なマトリクスの他のポリマーと一定以上の度合いで架橋されていない。
ポリマー試薬（およびそれから調製されるコンジュゲート）内の分解可能な結合は可変である。ｉｎ ｖｉｖｏで切断可能であって、生理学的条件（すなわち、ｐＨ７〜７．５、温度約３７℃）下での半減期が約０．１から約１０日の間である分解可能な結合を用いると好ましい。結合の分解速度については、ゲル浸透クロマトグラフィ（「ＧＰＣ」）を用いる遊離ポリマーセグメントの分析的判断によって測定可能である。本発明のポリマー試薬は、１つ以上のカーボネート基を分解可能な結合として含み得るものであるが、ポリマー試薬が、カーボネート基を含まない少なくとも１つの分解可能な結合を含むと好ましく、カーボネート基を含まないポリマー試薬も企図される。
例示としての分解可能な結合としては、エステル結合；カーボネート結合；カルバメート；イミド；ジスルフィド；ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチド；たとえばアミンとアルデヒドとの反応によって生じるイミン結合（本明細書に援用するＯｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ ３８（１）：５８２〜３などを参照のこと）；たとえばアルコールをホスフェート基と反応させて形成されるホスフェートエステル結合；一般にヒドラジドとアルデヒドとの反応によって形成されるヒドラゾン結合；一般にアルデヒドとアルコールとの反応によって形成されるアセタール結合；たとえばギ酸塩とアルコールとの反応によって形成されるオルトエステル結合；たとえばポリマー末端などのホスホラミダイト基とオリゴヌクレオチドの５’ヒドロキシル基との反応によって形成されるオリゴヌクレオチド結合があげられるが、これに限定されるものではない。
Ｋ．Ｒ．Ｒｅｄｄｙ，Ｍ．Ｗ．Ｍｏｄｉ ａｎｄ Ｓ．Ｐｅｄｄｅｒ（２００２）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．５４：５７１〜５８６など、アミドおよびウレタン結合は通常インターフェロンなどのタンパク質に対する結合ＰＥＧ用の安定した基であるとみなされる。しかしながら、これらの安定した基の切断によっては、ｉｎ ｖｉｖｏで起こる場合もある。たとえば、ＰＥＧインターフェロン（「ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標）」のブランドで市販）では、コンジュゲートと関連したＰＥＧの最大３０％がウレタン結合の切断によって排出される（Ｍ．Ｗ．Ｍｏｄｉ，Ｊ．Ｓ．Ｆｕｌｔｏｎ，Ｄ．Ｋ．Ｂｕｃｋｍａｎｎ，Ｔ．Ｌ．Ｗｒｉｇｈｔ，Ｄ．Ｊ．Ｍｏｏｒｅ（２０００）“Ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ Ｐｅｇｙｌａｔｅｄ（４０ｋＤａ）ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｐｈａ−２ａ（ＰＥＧＡＳＹＳ（登録商標））ｉｓ Ｐｒｉｍａｒｉｌｙ Ｈｅｐａｔｉｃ，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ３２：３７１Ａを参照のこと）。コンジュゲートの全体としてのクリアランスの機序はかなりゆっくりで、数日を要する。
アミド結合に関しては、ペプチド結合に見られるものなどのアミド結合が酵素切断の影響を受けやすい特別な場合がある。Ｓｕｚａｗａ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．８（８）：２１７５〜８４）は、ポリ（エチレングリコール）結合Ｌ−アラニン−バリンジペプチド結合がモデル酵素サーモリシンの存在下で切断されることを見いだした。本発明における用途のあり得るペプチド結合の別の例（ジペプチドまたはトリペプチド結合など）を、米国特許第５，２８６，６３７号明細書および同第６，１０３，２３６号明細書、Ｇｏｆｆ ａｎｄ Ｃａｒｒｏｌｌ（１９９０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．１：３８１〜３８６）、Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．９：６１２〜６１７）に見いだすことができる。このため、特定の実施形態では、ポリマー試薬（およびそれから形成されるコンジュゲート）に含有される１つ以上の分解可能な結合は、アミドまたはウレタン結合を含み得る。
エステルは、アミドおよびウレタンよりも加水分解的な切断の影響を受けやすいが、酵素によるプロセスで容易に切断されるため、エステルを特にｉｎ ｖｉｖｏで結合しやすくする。エステルは、酵素の接近を立体的に遮断する基が官能基の側にあれば、酵素切断に対する耐性が高い。よって、このタイプの立体的に障害されるエステル機能を含めると、ポリマーを数時間から数日で加水分解的にまたは酵素的に分解するのが望ましい場合に、エステル基が魅力的なリンカーになることがある。
立体障害によって安定性を最も容易にする基は、以下の２つのエステル含有ポリマー（式中、「ＰＯＬＹ」は水溶性の非ペプチドポリマーである）の場合のように、エステルのカルボニル炭素に対してα位に存在する基（アルキル基など）である。酵素切断に立体障害を提示する構造を選択するにあたり、カルボニル基に対する電子求引作用のある基を含まないことが好ましい。理論に拘泥されるものではないが、このような電子求引基は、酸触媒加水分解または塩基触媒加水分解を加速する傾向にある。
Figure 2011500939
 エステルのアルキル部（酸素原子に近い部または原子などであり、カルボニル炭素に結合される）での立体障害も、エステルの酵素切断を減速させることがある。よって、酵素切断の速度に影響をおよぼすのに立体障害が望ましい場合、カルボニル炭素および／または酸素原子に対してαおよび／またはβ位に立体障害を加えることが企図され、これがエステル基のカルボニル炭素に結合される。しかしながら、ＳＮ１経路によるエステルの求電子切断を容易にするために、立体的なこみあいと電子供与との組み合わせを加えることも重要である。さらに、アルキル部を、電子求引基の置換によって、塩基触媒による加水分解が望ましいような良好な脱離基にしないことも重要である。以下の構造に示すように、酸素原子のαおよびβ位におだやかな立体妨害を導入し、これがエステル基のカルボニル炭素と結合するようにすれば、バランスを保つことができる。
Figure 2011500939
 式中、Ｌは、ＰＯＬＹとエステル含有部分との反応によって生じるスペーサ部分または結合であり、ＰＯＬＹは水溶性の非ペプチドポリマーである。
このため、好ましい立体障害基としては、カルボニル炭素に隣接および／またはエステルのカルボニル基と結合された酸素原子に隣接（すなわちαまたはβ位）し、最も好ましくはカルボニル炭素と隣接するアルキル基（Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基など）またはアリール基（Ｃ６〜Ｃ１０アリール基など）があげられる。
ポリマー試薬を提示の基で調製すれば、提示の特定の基が所望の立体障害を得るのに適しているか否かを判断することが可能である。提示のポリマー試薬からのコンジュゲートの形成後、続いてこのコンジュゲートを患者に投与するか、好適なモデルに加える。患者への投与（または好適なモデルへの添加）後、たとえば血液試料（または好適なモデルからの液体のアリコート）を採取して、クロマトグラフィ技術によってコンジュゲートの分解成分を同定することで、コンジュゲート内の各分解可能な結合の分解速度を求めることが可能である。提示の基は、全体としての分解率が所望の範囲内におさまるおよび／または同じ条件下で試験するポリマー試薬の対照よりも改善される場合に、所望の立体障害を提供するのに適している。
本発明のポリマー試薬の一部をなす水溶性の非ペプチドポリマー（ＰＯＬＹ１、ＰＯＬＹ２など）は、無毒かつ生体適合性である、すなわちポリマーが害を引き起こすことなく生体組織または生物体と共存できるものでなければならない。ポリマーは、多数ある水溶性の非ペプチドポリマーのうちのいずれであってもよい旨は理解されたい。好ましくは、ポリ（エチレングリコール）（すなわちＰＥＧ）が、本明細書に記載のポリマー試薬の形成に用いられるポリマーである。他の好適なポリマーの例として、他のポリ（アルキレングリコール）、エチレングリコールおよびプロピレングリコールのコポリマー、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）（全体を本明細書に援用する米国特許第５，６２９，３８４号明細書に記載されているものなど）ならびにこれらのコポリマー、ターポリマー、混合物があげられるが、これに限定されるものではない。異なるポリマーを同じポリマー骨格に取り入れることも可能である。水溶性の非ペプチドポリマーの組み合わせも、本発明に包含される。ポリマーセグメント（ＰＯＬＹ１またはＰＯＬＹ２各々など）は、切断可能なまたは安定した結合で接続された２つ以上のポリマーセグメントも含み得る。
ポリマーは、実質的に線状の形態であってもよいし、多腕または分岐形態（本明細書に援用する米国特許第５，９３２，４６２号明細書に記載の分岐ＰＥＧ分子など）であってもよい。一般的に言えば、多腕または分岐ポリマーは、中央の分岐点から延在する２つ以上のポリマー「腕」を持つ。たとえば、例示としての分岐ＰＥＧポリマーは、以下の構造を有する。
Figure 2011500939
 式中、ＰＥＧ１およびＰＥＧ２は、本明細書に記載のどのような形態または幾何学的形状であってもよいＰＥＧポリマーであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｌ’は加水分解的に安定な結合である。式Ｉの例示としての分岐ＰＥＧは、以下の構造を有する。
Figure 2011500939
 式中、ｐｏｌｙａおよびｐｏｌｙｂは、ヒドロキシポリ（エチレングリコール）などのＰＥＧ骨格であり、Ｒ”は、Ｈ、メチルまたはＰＥＧ骨格などの非反応性部分であり、ＰおよびＱは非反応性の結合である。好ましい実施形態では、分岐ＰＥＧポリマーがヒドロキシポリ（エチレングリコール）二置換リシンである。
式ＩＶの分岐ＰＥＧ構造は、以下に示す第３のオリゴマーまたはポリマー鎖に結合可能である。
Figure 2011500939
 式中、ＰＥＧ３は第３のＰＥＧオリゴマーまたはポリマー鎖であり、ＰＥＧ１およびＰＥＧ２と同一であっても異なっていてもよい。
別の実施形態では、本発明で使用する分岐ＰＥＧは以下の構造を有する。
Figure 2011500939
 式中、各ＰＯＬＹは、水溶性の非ペプチドポリマーまたはオリゴマーセグメント（ＰＥＧセグメントなど）であり、各Ｚは、キャッピング基、官能基または骨標的化基である。
以下の例示としてのポリマー構造から明らかなように、本発明のポリマー試薬は一般に、ポリマー試薬と活性剤との間に共有結合（任意にｉｎ ｖｉｖｏにて切断可能）を形成するために生物学的活性剤での相補官能基との反応に適した１つ以上の官能基を含むことになる。好適な官能基の例として、ヒドロキシル、活性エステル（Ｎ−ヒドロキシサクシニミジルエステルおよび１−ベンゾトリアゾリルエステルなど）、活性カーボネート（Ｎ−ヒドロキシサクシニミジルカーボネート、１−ベンゾトリアゾリルカーボネート、ｐ−ニトロフェニルカーボネートなど）、アセタール、炭素長が１から２５炭素のアルデヒド（アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド、ブチルアルデヒドなど）、アルデヒド水和物、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、活性スルホン、アミン、ヒドラジド、チオール、炭素長（カルボニル炭素を含む）１から約２５炭素原子のアルカン酸（カルボン酸、カルボキシメチル、プロパン酸、ブタン酸など）、酸ハライド、イソシアネート、イソチオシアネート、マレイミド、ビニルスルホン、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、トレシレートがあげられる。例示としての官能基は、以下の参考文献に記載されている。Ｎ−サクシニミジルカーボネート（米国特許第５，２８１，６９８号明細書、同第５，４６８，４７８号明細書などを参照のこと）、アミン（Ｂｕｃｋｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８２：１３７９（１９８１）、Ｚａｌｉｐｓｋｙ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｐｏｌｙｍ．Ｊ．１９：１１７７（１９８３）などを参照のこと）、ヒドラジド（Ａｎｄｒｅｓｚ ｅｔ ａｌ．Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１７９：３０１（１９７８）などを参照のこと）、プロピオン酸サクシニミジルおよびブタン酸サクシニミジル（Ｏｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ １７０〜１８１，Ｈａｒｒｉｓ ＆ Ｚａｌｉｐｓｋｙ Ｅｄｓ．，ＡＣＳ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ，１９９７などを参照のこと。また、米国特許第５，６７２，６６２号明細書も参照のこと）、コハク酸サクシニミジル（Ａｂｕｃｈｏｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．７：１７５（１９８４）およびＪｏｐｐｉｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１８０：１３８１（１９７９）などを参照のこと、サクシニミジルエステル（米国特許第４，６７０，４１７号明細書などを参照のこと）、炭酸ベンゾトリアゾール（米国特許第５，６５０，２３４号明細書などを参照のこと）、グリシジルエーテル（Ｐｉｔｈａ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．９４：１１（１９７９）、Ｅｌｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３：３５４（１９９１）などを参照のこと、オキシカルボニルイミダゾール（Ｂｅａｕｃｈａｍｐ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３１：２５（１９８３）、Ｔｏｎｄｅｌｌｉ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １：２５１（１９８５）などを参照のこと）、炭酸ｐ−ニトロフェニル（Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，ｅｔ ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１１：１４１（１９８５）およびＳａｒｔｏｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．，２７：４５（１９９１）などを参照のこと）、アルデヒド（Ｈａｒｒｉｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ｃｈｅｍ．Ｅｄ．２２：３４１（１９８４）、米国特許第５，８２４，７８４号明細書、同第５，２５２，７１４号明細書などを参照のこと）、マレイミド（Ｇｏｏｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ８：３４３（１９９０）、Ｒｏｍａｎｉ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ２：２９（１９８４））、Ｋｏｇａｎ，Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｃｏｍｍ．２２：２４１７（１９９２）などを参照のこと）、オルトピリジルジスルフィド（Ｗｏｇｈｉｒｅｎ，ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．４：３１４（１９９３）などを参照のこと）、アクリロイル（Ｓａｗｈｎｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２６：５８１（１９９３）などを参照のこと）、ビニルスルホン（米国特許第５，９００，４６１号明細書などを参照のこと）。上記の参考文献をすべて本明細書に援用する。
特定の実施形態では、ポリマー試薬（およびそれから形成されるコンジュゲート）のキャッピング基、官能基またはヒドロキシアパタイト標的化基（Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３などの「Ｚ」部分）は多腕構造となる。たとえば、「Ｚ」部分は、２から約１０の官能基（２、３、４、５、６、７、８、９または１０の官能基など）を含む多腕の反応性構造を取り得る。例示としての多腕基として、以下の構造を有するものがあげられる。
Figure 2011500939
 式中、Ｚは各々、同一であっても異なっていてもよく、官能基、キャッピング基またはヒドロキシアパタイト標的化基であり、任意にスペーサ部分を含み、ｍは１から約３５０、好ましくは１から約１０、一層好ましくは１から約４の範囲の整数である。
ポリマー試薬（およびそれから形成されるコンジュゲート）は、２つのポリマー種またはポリマーと生物学的活性剤との反応によって生じる特に分解可能な結合または安定した結合のいずれかの側にある１つ以上のスペーサ部分（Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７、Ｘ８、Ｘ９などの「Ｘ」部分）を含むものであってもよい。例示としてのスペーサ部分として、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価シクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、アミノ酸、ジペプチドまたはトリペプチド、−Ｎ（Ｒ６）−、上記の２つ以上の組み合わせがあげられ、式中、Ｒ６は、Ｈであるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、および置換アリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である。他の具体的なスペーサ部分は、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１〜６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−という構造を有し、式中、各メチレンに続く下付きの値は、その構造に含まれるメチレン数を示す。たとえば、（ＣＨ２）１〜６は、その構造が、１、２、３、４、５または６つのメチレンを含み得ることを示す。また、スペーサ部分は、上述したスペーサ部分に加えて、あるいはこれに代えて、１から２５個のエチレンオキシドモノマー単位［すなわち−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１〜２５］を含むエチレンオキシドオリゴマー／ポリマー鎖を含むものであってもよい。別のスペーサ部分に加えて使用する場合、エチレンオキシドオリゴマー鎖はスペーサ部分の前であっても後ろであってもよく、任意に、２つ以上の原子で構成されるスペーサ部分の２つの原子の間であってもよい。
本発明のコンジュゲートに用いられる好ましい生物学的活性剤としては、特定のタンパク質、ペプチド、小分子薬剤などの比較的低水溶解性の活性剤があげられる。特に好ましい生物学的活性剤としては、成長因子、抗生物質、化学療法剤または鎮痛剤など、患者の体内で骨組織に対する生物学的効果を持つことを想定したものがあげられる。例示としての成長因子には、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、骨形態形成タンパク質、骨形成タンパク質、トランスフォーミング増殖因子、ＬＩＭ無機化タンパク質、類骨誘導因子、アンジオゲニン、エンドセリン；増殖分化因子、ＡＤＭＰ−１、エンドセリン、肝細胞増殖因子およびケラチノサイト増殖因子、ヘパリン結合増殖因子、ヘッジホッグタンパク質、インターロイキン、コロニー刺激因子、上皮増殖因子、インスリン様増殖因子、サイトカイン、オステオポンチン、およびオステオネクチンがある。
本発明のポリマー試薬に対して共有結合可能な比較的疎水性である活性剤の他の例として、アビエチン酸、アセグラトン、アセナフテン、アセノクマロール、アセトヘキサミド、アセトメロクトール、アセトキソロン、アセチルジギトキシン、アセチレンジブロミド、アセチレンジクロリド、アセチルサリチル酸、アラントラクトン、アルドリン、アレキシトールナトリウム、アレスリン、アリルエストレノール、アリルスルフィド、アルプラゾラム、アルミニウムビス（アセチルサリチル酸塩）、アンブセタミド、アミノクロテンオキサジン、アミノグルテチミド、アミルクロリド、アンドロステンジオール、アネトールトリチオン、アニラジン、アントラリン、アンチマイシンＡ、アプラスモマイシン、アルセノ酢酸、アジアチコシド、アスターニゾール（ａｓｔｅｒｎｉｚｏｌｅ）、オーロドクス、金チオグリカニド、８−アザグアニン、アゾベンゼン、バイカレイン、バルサムペルー、バルサムトルー、バーバン、バクストロビン、ベンダザック、ベンダゾール、ベンドロフルメチアジド、ベノミル、ベンザチン、ベンゼステロール、ベンゾデパ、ベンゾキシキノン、ベンズフェタミン、ベンズチアジド、安息香酸ベンジル、ケイ皮酸ベンジル、ビブロカトール、ビフェノックス、ビナパクリル、ビオレスメトリン、ビサボロール、ビサコジル、ビス（クロロフェノキシ）メタン、ヨード次没食子酸（ｉｏｄｏｓｕｂｇａｌｌａｔｅ）ビスマス、次没食子酸ビスマス、タンニン酸ビスマス、ビスフェノールＡ、ビチオノール、ボルニル、ブロモイソ吉草酸塩、塩化ボルニル、イソ吉草酸ボルニル、サリチル酸ボルニル、ボロジファクム、ブロメタリン、ブロキシキノリン、ブフェキサマク、ブタミラート、ブテタール、ブチオベート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ヨードステアリン酸カルシウム、糖酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、カポベン酸、キャプタン、カルバマゼピン、カルボクロラール、カルボフェノチン、カルボコン、カロテン、カルバクロール、セファエリン、セファリン、カウルムーグル酸、ケノジオール、キチン、クロルダン、クロルフェナック、クロルフェネトール、クロロタロニル、クロロトリアニセン、クロルプロチキセン、クロルキナルドール、クロモナール、シロスタゾール、シンコニジン、シトラール、クリノフィブラート、クロファジミン、クロフィブラート、クロフルカルバン、クロニトラート、クロピドール、クロリンジオン、クロキサゾラム、コロクソン、コルチコステロン、クルナクロル、クマホス、クミトエートクレシル酢酸、クリミジン、クルホマート、クプロバム、シアメマジン、シクランデレート、シクラルバマートシマリン、シクロスポリンＡ、シペルメトリル、ダプソン、デホスファミド、デルタメトリン、酢酸デオキシコルチココステロン、デスオキシメタゾン、デキストロモラミド、ジアセタゾト、ジアリホール、ジアチモスルホン、デカプトン、ジクロフルアニ、ジクロロフェン、ジクロフェナミド、ジコホル、ジクリル、ジクマロール、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ジフェナミゾール、酢酸ジヒドロコデイノンエノール、ジヒドロエルゴタミン、ジヒドロモルヒネ、ジヒドロタキステロール、ジメステロール、ジメチステロン、ジオキサチオン、ジフェナン、Ｎ−（１，２−ジフェニルエチル）ニコチンアミド、３，４−ジ−［１−メチル６−ニトロ−３−インドリル］−１Ｈ−ピロール−２，５−ジオン（ＭＮＩＰＤ）、ジピロセチル、ジスルファミド、ジチアノン、ドキセニトイン、ドラゾキソロン、デュラバタイト、エジフェンホス、エモジン、エンフェナム酸、エルボン、エルゴコルニニン、四硝酸エリスリチル、ステアリン酸エリスロマイシン、エストリオール、エタベリン、エチステロン、ビスクルンアセト酸（ｂｉｓｃｏｕｒｎａｃｅｔａｔｅ）エチル、エチルヒドロクプレイン、エチルメタンカルボキサミド、オイゲノール、ユープロシン、エキサラミド、フェバルバマート、フェナラミド、フェンベンダゾール、フェニペントール、フェニトロチオン、フェノフィブラート、フェンキゾン、フェンチオン、フェプラゾン、フリルピン、フィリキシン酸、フロクタフェニン、フルアニソン、フルメキン、フルオコルチンブチル、フルオキシメステロン、フルロチル、フルタゾラム、フマギリン、５−フルフチリル−５−イソプロピルバルビツール酸、フサフムジン；グラフェニン、グルカゴン、グルテチミド、グリブチアゾール、グリセオフルビン、グアイアコール炭酸塩、グアイアコールリン酸塩；ハルシノニド、ヘマトポルフィリン、ヘキサクロロフェン、ヘキセストロール、ヘキセチジン、ヘキソバルビタール、ヒドロクロロチアジド、ヒドロコドン、イブプロキサム、イデベノン、インドメタシン、ナイアシン酸イノシトール、イオベンザム酸、イオセタム酸、イオジパミド、イオメグラム酸、イポダート、イソメテプテン、イソノキシン、２−イソバレリルインダン−１，３−ジオン、ジョサマイシン、１１−ケトプロゲステロン、ラウロカプラム、３−Ｏ−ラウロイルピリドキソール二酢酸塩、リドカイン、リンダン、リノレン酸、リオチロニン、ルセンソマイシン、マンコゼム、マンデル酸、イソアミルエステル、マジンドール、メベンダゾール、メブヒドロリン、メビキン、メラルソプロール、メルファラン、メナジオン、吉草酸メンチル、メフェノキサロン、メフェンテルミン、メフェニトイン、メプリルカイン、メスタノロン、メストラノール、メスルフェン、メテルゴリン、メタラタル、メタンドリオール、メタカロン、メチルコラントレン、メチルフェニデート、１７−メチルテストステロン、メチプラノロール、ミナプリン、ミオラル、ナフタロホス、ナフトピジル、ナフタレン、２−ナフチル乳酸塩、２−（２−ナフチルオキシ）エタノール、サリチル酸ナフチル、ナプロキセン、ネアルバルビタール、ネマデクチン、ニクロサミド、ニコクロナート、ニコモルフィン、ニフロキン、ニフロキサジド、ニトラクリン、ニトロメルソール、ノガラマイシン、ノルダゼパム、ノルエタンドロロン、ノルゲストリエノン、オクタベリン、オレアンドリン、オレイン酸、オキサゼパム、オキサゾラム、オキセラジン、オキセサゼイン、オキシコドン、オキシメステロン、酢酸オキシフェニサチン、パクリタキセル、パラヘルクアミド、パラチオン、ペモリン、四硝酸ペンタエリスリトール、ペンチルフェノール、ペルフェナジン、フェンカルバミド、フェニラミン、２−フェニル−６−クロロフェノール、フェントンエチルバルビツール酸（ｐｈｅｎｔｈｎｅｔｈｙｌｂａｒｂｉｔｕｒｉｃ ａｃｉｄ）、フェニトイン、ホサロン、Ｏ−フタリルスルファチアゾール、フィロキノン、ピカデックス、ピファルニン、ピケトフェン、ピプロゾリン、ピロザジル、ピバロイルオキシメチルブチレート、プラフィブリド、プラウノトール、ポラプレジンク、ポリチアジド、プロベネシド、プロゲステロン、プロメゲストン、プロパニジド、プロパルギット、プロファム、プロカゾン、プロチオナミド、ピリメタミン、ピリミタート、パモ酸ピルビニウム、ケルセチン、キンボロン、キザロホップエチル、ラフォキサニド、レシナミン、ロシベリン、ロンネル、サレン、スカーレットレッド、シッカニン、シマジン、シメトリド、シンバスタチン、ソブゾキサン、ソラン、スピロノラクトン、スクアレン、スタノロン、スクラルファート、スルファベンズ、スルファグアノール、スルファサラジン、スルホキシド、スルピリド、スキシブゾン、タルブタール、ターガイド（ｔｅｒｇｕｉｄｅ）、テストステロン、テトラブロモクレゾール、テトランドリン、チアセタゾン、チオコルヒチン、チオクト酸、チオキノックス、チオリダジン、チラム、チミルＮ−イソアミルカルバメート、チオキシダゾール、チオキソロン、トコフェロール、トルシクラート、トルナフテート、トリクロサン、トリフルサール、トリパラノール、ウルソール酸、バリノマイシン、ベラパミル、ビンブラスチン、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、キセンブシン、キシラジン、ザルトプロフェン、およびゼアラレノンがあげられるが、これに限定されるものではない。
一実施形態では、本発明は、以下の構造を有するヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーを提供するものであり、
Figure 2011500939
 式中、
Ａは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｚ２または−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｚ２であり、
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３は各々、同一であっても異なっていてもよく、結合であり、
Ｚ１は各々、同一であっても異なっていてもよく、Ｚ２またはヒドロキシアパタイト標的化部分あるいは、２から約１０のヒドロキシアパタイト標的化部分を含み、任意に少なくとも１つの水溶性非ペプチドポリマーも含む多腕構造であり、ただし、ｂが０である場合、少なくとも１つのＺ１が１本以上のポリマー腕を含む多腕構造を有するという条件で、なおかつ少なくとも１つのＺ１がヒドロキシアパタイト標的化部分であるという条件であり、
Ｚ２は、スペーサを介してＰＯＬＹ２に結合していてもよい官能基（イオン化可能な官能基など）であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
Ｒは、結合に利用できるｐ＋１部位を少なくとも含む分子から誘導されるモノマー性またはオリゴマー性多腕コア分子であり、
ｐは、２〜３２の範囲の整数である。
特定の実施形態では、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、約２２，０００Ｄａ未満、約１５，０００Ｄａ未満または約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する。ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２の例示としてのポリマーには、ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）ならびに、これらのコポリマー、ターポリマーまたは混合物がある。ヒドロキシアパタイト標的化部分の例として、テトラサイクリン、カルセイン、ビスホスホネート、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、アミノホスホ糖があげられる。
本発明のポリマー試薬の特定の実施形態は、Ｌ１、Ｌ２またはＬ３位に上述したような少なくとも１つの加水分解的または酵素的に切断可能な結合を含む。ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２などのポリマー鎖は、結合によって結合された２から約５個の水溶性の非ペプチドポリマーセグメントを含むセグメント化構造を持ち得るものである。たとえば、ＰＯＬＹ１とＰＯＬＹ２のうち一方または両方が、式−ＰＯＬＹ−Ｌ−ＰＯＬＹ−で表される構造を取ることが可能であって、式中、各ＰＯＬＹは水溶性の非ペプチドポリマーであり、Ｌは、酵素的にまたは加水分解的に切断可能な結合である。
別の態様では、本発明は、本発明のポリマー試薬と生物学的活性剤との反応生成物を含み、以下の構造を有するヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーコンジュゲートを提供するものであり、
Figure 2011500939
 式中、Ｂは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｌ４−Ｄｒｕｇまたは−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｌ４−Ｄｒｕｇであり、Ｄｒｕｇは、生物学的に活性な部分の残基であり、Ｌ４は、Ｚ２と生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、Ｚ３は、Ｌ５−Ｄｒｕｇまたはヒドロキシアパタイト標的化部分であり、式中、Ｌ５は、官能基であるＺ１と、生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、ただし、少なくとも１つのＺ３がヒドロキシアパタイト標的化部分である。
コア分子Ｒは、ポリマーセグメントの結合用に３つ以上の反応部位が得られるどのようなモノマー分子またはオリゴマー分子であってもよく、一般に３から約３２の反応部位を有し、一層好ましくは３から約２５の反応部位、最も好ましくは３から約１０の反応部位を有することになる（３、４、５、６、７、８、９または１０の反応部位など）。コア分子における反応部位の数は、ポリマーセグメントに対する結合に実際に使用する部位の数より多くてもよい（すなわち、反応部位の数がｐより大きくてもよい）点に注意されたい。反応部位は、官能化ポリマーセグメントとの反応に利用できる末端官能基を含み、２タイプ以上の官能基を含み得る。たとえば、特定のジペプチドまたはトリペプチドコア分子が、１つ以上のカルボン酸基と１つ以上のアミン基の両方を含むことになる。上述したように、Ｒコア分子は、ポリオールのヒドロキシル基の部位および／またはポリペプチドまたはジスルフィド上の遊離反応性基の部位にポリマー腕を結合できる多腕コア分子を形成するためのポリペプチド（ジペプチドまたはトリペプチドなど）またはジスルフィドとポリオールとの組み合わせであってもよい。ポリマー腕の結合前に、必ずしも事前にＲコア分子を形成しておかなくてもよい点に注意されたい。代わりに、ポリマー腕を最終的なコア分子となる成分のうちの１つと結合させた後でコア分子を作製することが可能である。たとえば、ポリマー腕をポリオール分子と結合させた上で、２つのポリマー修飾ポリオール分子をジスルフィドまたはジペプチドリンカーで一緒に結合することが可能である。
コア分子として用いるポリオールは、複数の利用可能なヒドロキシル基を含む。ポリマー腕の所望の数に応じて、ポリオールは一般に、３から約２５のヒドロキシル基を含み、好ましくは約３から約２２のヒドロキシル基、最も好ましくは約５から約１２のヒドロキシル基を含む。ヒドロキシル基間の間隔はポリオールごとに異なるが、一般に各ヒドロキシル基間には１から約２０個の原子（炭素原子など）があり、好ましくは１から約５個の原子がある。どのポリオールを選択するかは、ポリマー腕の結合部位として必要なヒドロキシル基の所望の数に応じて変わる。ポリオール開始材料の数平均分子量は一般に、約１００から約２，０００Ｄａである。ポリオールは一般に分岐構造を持ち、ポリオールの炭化水素コア構造の１つ以上の炭素原子が、炭素原子およびエーテル連結酸素原子（すなわち、２つの炭素原子と結合した酸素原子）から選択される３つまたは４つの原子と共有結合されている。
コア分子として用いるのに好ましいポリオールとしては、ヘキサグリセロールなどのグリセロールオリゴマーまたはポリマー、ペンタエリスリトールならびにこれらのオリゴマーまたはポリマー（ジペンタエリスリトール、トリペンタエリスリトール、テトラペンタエリスリトールなど）、ソルビトール、アラビニトール、マンニトールなどの糖から誘導されるアルコールがあげられる。また、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール（ＴＲＩＳ）、２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝酢酸（トリシン）、２−［（３−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝プロピル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール、２−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝エタンスルホン酸（ＴＥＳ）、４−｛［２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル］アミノ｝−１−ブタンスルホン酸、および２−［ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ］−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール塩酸塩などのイオン化可能な基を含む多くの市販のポリオールも適切な開始材料である。一般に、本発明で用いるポリマーポリオールは、約２５以下のモノマー単位を含む。ジペンタエリスリトールおよびトリペンタエリスリトールの構造を、ヘキサグリセロールに考えられる構造のうちの１つと一緒に以下にあげておく。
Figure 2011500939
 利用可能なヒドロキシル基が２１あるヒドロキシプロピル−β−サイクロデキストリンが、別の例示としてのポリオールである。さらに別の例示としてのポリオールは、ドイツのＦｒｅｉｂｕｒｇにあるＨｙｐｅｒｐｏｌｙｍｅｒｓ ＧｍｂＨから入手可能な高分岐ポリグリセロールであり、これについては以下に示しておく。
Figure 2011500939
 ポリオールは、ポリオールコアと結合したＰＥＧオリゴマーまたはポリマーセグメントを含むものであってもよい。ポリオール開始材料は一般に、分子量の異なるポリオールオリゴマーまたはポリマーの混合物あるいは、分子量の異なるエトキシル化ポリオール構造の混合物など、生成物の混合物の形であって、おそらくはさらに、グリセロールなどの残留量の元のポリオールモノマー単位を含む。しかしながら、開始混合物中の少なくとも１つのポリオールは一般に、少なくとも３つの利用可能なヒドロキシル基を有する式Ｒ（ＯＨ）ｐの分岐ポリオールであり、式中、Ｒは、任意に１つ以上のエーテル結合を含む分岐炭化水素であり、ｐは少なくとも３、一般に３から約２５、好ましくは３から約１０である。
本発明の特定の実施形態では、環状アセタールまたはケタール基をヒドロキシル保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）として使用しやすくする、ヒドロキシル基間の間隔が詰まったポリオールが特に好ましい。ポリオール構造内のヒドロキシル基間に炭素原子２個または３個分の間隔があると、特定の好ましい複素環保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）を形成できる。たとえば、ペンタエリスリトールオリゴマーまたはポリマーのヒドロキシル基での間隔が近いと、当該技術分野において周知の技術で環状アセタールまたはケタール基を形成できる。環状アセタールまたはケタール基は、ケトン試薬（シクロヘキサノンなど）または式Ｒ’−ＣＨＯの試薬などのアルデヒド試薬とポリオールとを反応させることで形成可能であり、式中、Ｒ’は、アルキル、置換アルキル、アリールまたは置換アリールである。例示としてのアルデヒド試薬にベンズアルデヒドがある。
ポリオールの大部分のヒドロキシル基を保護された形とし、イオン化可能な官能基を含む試薬とポリオールコアとを反応させ、構成要素としてのイオン化可能な官能基の数で区別される複数の生成物を生成することが可能である。一般に、この反応では、単官能化生成物、二官能化生成物、残りの未反応ポリオールが生成される。イオン交換クロマトグラフィ系を用いて、電荷の差を利用して各生成物画分を分離し、所望の単官能性生成物を精製することが可能である。電荷の差を利用してＰＥＧポリマー種を精製するためのプロセスは、全体を本明細書に援用する米国特許出願公開第２００５／００５４８１６号明細書に記載されている。
精製プロセスで用いる１つ以上のイオン交換カラムは、電荷によって混合物を分離するのに従来から用いられているどのようなイオン交換カラムであってもよい（Ｉｏｎ Ｅｘｃｈａｎｇｅ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄ．Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ １９９４；“Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．”Ｈｅｆｔｍａｎ，Ｅ（Ｅｄ．），Ｖａｎ Ｎｏｓｔｒａｎｄ Ｒｈｅｉｎｈｏｌｄ Ｃｏ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９７５）。それぞれのカラムは、イオン交換媒質と、イオン交換媒質を流れる移動相または溶離液を含む。本発明で使用するのに適したイオン交換カラムには、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ製のＰＯＲＯＳ（登録商標）イオン交換媒質やＰｈａｒｍａｃｉａ製のＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）イオン交換媒質がある。
特定の実施形態では、ＰＯＬＹ１が各々ポリ（エチレングリコール）ポリマーであり、Ｒが、ジスルフィドリンカー、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドであるが、これはＲ部分が少なくとも１つのジスルフィド結合（ジスルフィドリンカーから）またはアミド結合（ペプチド残基間の結合など）を含むことになることを意味する。好ましいＲ基としては、少なくとも１つのリシン残基を含むものがあげられる。好適なジスルフィドリンカーとしては、−Ｓ−Ｓ−結合を含み、鎖長が全体で４〜２５原子からなるさまざまなリンカーがあげられ、好ましいジスルフィド分子はポリマーセグメントの結合に４〜８個の官能基を利用できる。特定の実施形態では、ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、分岐ポリ（エチレングリコール）ポリマーである。
ポリマー試薬は、以下の構造を有するジスルフィド分子由来のＲ部分を含むものであってもよい。
Figure 2011500939
 さらに他の実施形態では、ＰＯＬＹ１が各々、ポリ（エチレングリコール）ポリマーを含み、Ｒが少なくとも１つのペプチド残基である。Ｒ部分はさらに、ジスルフィド結合を含むものであってもよい。特定の実施形態では、Ｒが、脂肪族炭素鎖、ジスルフィド結合を含む脂肪族炭素鎖、ポリ（エチレングリコール）オリゴマー（１〜２５のモノマー単位を有するオリゴマーなど）からなる群から選択されるリンカーとアミド結合によって連結された少なくとも２つのリシン残基を含む。
さらに別の実施形態では、ＰＯＬＹ１が各々、ポリ（エチレングリコール）ポリマーを含み、Ｒが、少なくとも１つのジスルフィド結合と少なくとも２つのアミド結合とを有する非ペプチド部分を含む。「非ペプチド」とは、Ｒ分子がペプチド残基を含まない（すなわち、アミドおよびジスルフィド結合がペプチド分子の一部ではない）ことを意味する。このように、アミド結合が含まれるという点で構造がペプチド分子に似ているが、技術的には性質がペプチドではないＲコア分子を使用することが可能である。
多腕構造が最も好ましいのであるが、別の態様では、本発明は、以下の構造すなわち
Ｚ−（Ｘ１）ａ−Ｌ１−（Ｘ２）ｂ−［ＰＯＬＹ１−（Ｘ３）ｃ−Ｌ２−（Ｘ４）ｄ］ｍ−ＰＯＬＹ２−（Ｘ５）ｅ−Ｙ
を有する、ヘテロ二官能性で実質的に線状のヒドロキシアパタイト標的化ポリマーを提供するものであり、
式中：
ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
Ｌ１は、結合であり、
Ｌ２は各々、カルバメートおよびアミドからなる群から選択される加水分解的または酵素的に切断可能な結合であり、
Ｚは、ヒドロキシアパタイト標的化部分であり、
Ｙは官能基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
ｍは、１〜１０の範囲の整数である。
本発明の例示としてのポリマー試薬は、以下のポリマー構造を含む。
Figure 2011500939
Figure 2011500939
 実施例１は、上述した第１の構造についての例示としての合成経路を提供するものである。上記の第２の構造は、グリセロールコアと、ＰＥＧ鎖末端の２つの遠隔ビスホスホネート基と、ブタン酸官能基による薬剤結合用の部位とを有する「ＰＥＧ２」分子をベースにしたものである。この分子を構成するにあたって、一般的なメトキシキャップＰＥＧ（ｍ−ＰＥＧ）ではなくベンジルキャップＰＥＧ（ｂ−ＰＥＧ）を使用することが可能である。続いて、適当な処理ステップで、ベンジル基を水素化分解して除去し、一連のステップで、ビスホスホネート官能基を加えることが可能である。実施例２に、このタイプの分子で考えられる合成経路を示す。実施例３には、上述したトリリシンベースのポリマー試薬の場合の例示としての合成をあげておく。
本発明のヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーを形成する方法は、変更可能なものである。以下の反応スキーム１は、ペンタエリスリトールベースで、エステルをイオン化可能な反応性の腕（保護されたカルボン酸）として有する６本腕のポリオールを構成する１つの方法を示すものである。この例では、リンカーＬ３がリシンなどの多官能性リンカーである。
Figure 2011500939
 以下の反応スキーム２は、上記の反応スキーム１で一般化した構造を（ベンジルエステルの水素化分解によって）どのように脱保護し、以後のアミン末端治療薬との反応用に活性化させるのかについて示すものである。
Figure 2011500939
 以下の反応スキーム３は、リシンコアとイオン化可能な反応性の腕としてのカルボン酸基を有するポリマーの末端に骨標的化部分を結合させる方法を示すものである。図示のように、トリチル基を水素化分解した後、酸基をエステル化して保護された酸を形成し、続いて末端と本例ではＡＨＰＤＰ（３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸の誘導体）である骨標的化剤とを反応させる。以下の反応スキーム３で得られるポリマー種を水素化分解して、ベンジルエステル基を除去することも可能である。続いて、本明細書に援用する米国特許第６，４３６，３８６ Ｂ１号明細書で用いているものと同様の方法でＤＣＣ／ＮＨＳと反応させることで、この骨標的化ポリマーを、Ｎ末端リシンなどの治療薬上の利用可能なアミン基を介して治療薬をコンジュゲートするのに使用可能な活性エステル試薬（ＮＨＳエステル）に変換できる。
Figure 2011500939
 上述したように、ポリアスパラギン酸またはポリグルタミン酸などの遊離カルボキシル基を有するアミノ酸の特定のホモオリゴマーは、ヒドロキシアパタイトに対する結合能が良好である。したがって、このタイプのポリペプチド基を側基として用いて、骨標的化ポリマーの別の構造を調製可能である。以下のスキーム（反応スキーム４）に示すのは、市販のヘテロ二官能性ＰＥＧ誘導体を、当該技術分野において周知のポリアスパラギン酸と反応させることが可能な方法である。アミンと末端カルボン酸がブロックされたままの生成物をさらに操作して、アミン基を脱ブロックすることが可能である。この中間体を、多腕試薬の形成に直接使用（反応スキーム５などを参照）してもよいし、さらに操作して活性エステルを形成し、それを図示しない、異なる多腕試薬に変換することも可能である。
Figure 2011500939
 以下の反応スキーム５は、ポリペプチド含有骨標的化多腕ポリマー試薬の調製に用いられるアミン保護中間体および酸保護中間体の形成を示すものである。
Figure 2011500939
 以下の反応スキーム６では、反応スキーム５のメチルエステル中間体を塩基加水分解で脱保護するが、これはｔ−ブチルエステルには影響しない。次に、得られるカルボン酸をジシクロヘキシルカルボジイミドおよびＮ−ヒドロキシスクシンイミドでエステル化して、活性エステルを得る。マレイミドを形成するためのアミン含有試薬との反応では、ポリペプチド部分にカルボン酸エステルを残したままマレイミド基を有するポリマー試薬が得られる。おだやかな酸加水分解によって保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）を除去し、チオール含有治療薬に対して反応性の試薬を生成する。
Figure 2011500939
 以下の反応スキーム７では、上記の試薬とのコンジュゲーションを治療薬とともに示すが、これはたまたまチオール基を有するポリペプチドになるものである。
Figure 2011500939
 本発明は、ポリマー試薬と、プロドラッグとして作用して骨部位で生物学的に活性な部分を放出するよう設計された、上記のポリマー試薬から作られるコンジュゲートとを含む。この場合、薬剤とのコンジュゲーションが起こる部位に分解可能な官能基を加える。フェノラートまたはＦＭＯＣタイプの分解可能な官能基は、このタイプの分子に容易に取り込み可能であり、よって、本明細書ではこのクラスの試薬の特徴として含めてある。
以下の反応スキーム８では、ｉｎ ｖｉｖｏにて酵素的に切断してポリマーをさらに小さな断片としてクリアすることが可能なトリペプチド結合を含有するポリマー試薬の例を示す。市販のトリリシンをコアトリペプチドとして使用して、遊離アミン基をベンジル保護活性カーボネートＰＥＧ（ｂ−ＰＥＧ−ＢＴＣ）と反応させる。これによって、４本腕のポリマーが、除去可能なベンジル基で末端保護された状態で形成される。このポリマーは、ポリマーの精製ならびに薬剤分子への接続用の活性化に使用可能なカルボン酸基を有する点に注意されたい。
Figure 2011500939
 反応スキーム８の生成物に対する一連の処理ステップが終了すると、以下に示す４本腕のビスホスホネートにつながる骨標的化官能性と薬剤が付加される。
Figure 2011500939
 別のプロセスでは、モノブロック化（エステル）ジスルフィド結合ジペプチドＬｙｓ−Ｃｙｓすなわち、以下に示すものを利用して、４本腕の構造を誘導することが可能である。
Figure 2011500939
 この小分子を以下に示す４本腕のビスホスホネートポリマー薬剤送達コンジュゲートに変化させることが可能である。セグメント化ポリマー種を用いることの利点は、これらのポリマーが、酵素または細胞内化学作用によって、特定のポリオールをベースにしたものなどの安定した多腕分子よりも短時間で体外に排出されるさらに小さな線状断片に分解される機能にある。
Figure 2011500939
 当該技術分野において周知の経路で、上記の分子を点線で示した結合部位で切断できた。一重点線は酵素または細胞内化学切断が起こりやすい部位であり、二重点線は、隣接するアミド基が関与する化学プロセスによって脱ＰＥＧ化が起こる場合がある部位を表す（Ｇｕｉｏｔｔｏ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４，１２，５０３１〜５０３７）。水溶性ポリマー固定化薬剤分子のジスルフィド結合は、血清または細胞においてグルタチオンなどの作用剤で切断されることが周知である（Ｚａｌｉｐｓｋｙ ｅｔ ａｌ Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１９９９，１０，７０３〜７０７；米国特許第６，３４２，２４４Ｂ１号明細書；米国特許出願公開第２００５／０１７０５０８Ａ１号明細書；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｃｏｎｊ Ｃｈｅｍ．１９９８，９，６１２〜６１７）。ペプチド結合の酵素切断も水溶性ポリマーで報告されている（Ｕｌｂｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ Ｍａｋｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８６，１８７，１１３１〜１１４４；Ｓｕｚａｗａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌ．２０００，６９，２７〜４１；Ｓｕｚａｗａら、米国特許第６，１０３，２３６号明細書）。
送達を促進し、骨に標的されるまでコンジュゲートを保持する上で高分子量のポリマーが望ましい場合、ビスホスホネート骨標的化基を有するセグメント化ポリマーを用いることが重要なこともある。その後、リンカーでのセグメント切断によって、ポリマー断片がすべて低分子量で一般に線状のポリマーになるため、ポリマー断片のクリアランスが可能になる。
ポリマー試薬、このポリマー試薬から作られるコンジュゲートならびに、上述の合成方法に加えて、本発明はさらに、ポリマーコンジュゲートを治療的に用いて、骨の表面への生物学的活性剤の標的化送達が役立つであろうさまざまな症状および疾患状態を治療する方法も含む。治療対象となる例示としての症状には、骨癌、骨組織の感染、年齢による骨組織の分解、外傷によって生じる骨欠損などがある。投与経路、生物学的に活性な部分、薬用量の範囲の選択内容は、医師が容易に判断可能なものであり、治療対象となる症状、患者の状態、傷害または疾患の重篤度などを含む多数の要因に応じて変化する。
本明細書に引用した論文、書籍、特許、特許公開、他の刊行物はいずれも、その内容全体を本明細書に援用するものである。
実験
以上、具体的な特定の好ましい実施形態をあげて本発明について説明してきたが、上記の説明ならびに以下の実施例は、例示を意図したものであり、本発明の範囲を限定されるものではない旨は理解できよう。本発明の範囲に包含される他の態様、利点および修正は、本発明の属する分野の当業者であれば自明であろう。たとえば、特定の用途において、すべての結合が分解可能ではなく安定した上記の式のいずれかのポリマー試薬を用いると望ましい場合もある。
特に明記しないかぎり、添付の実施例で取り上げるＰＥＧ試薬はいずれも、たとえばＮｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ，ＡＬから入手したものなどの市販品である。１ＨＮＭＲデータはいずれも、Ｂｒｕｋｅｒ製の３００または４００ＭＨｚのＮＭＲ分光計で生成した。高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）については、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣ系（Ａｇｉｌｅｎｔ）、ゲル浸透カラムまたはイオン交換カラム、移動相としてのリン酸緩衝水溶液、屈折率（ＲＩ）検出器を用いて実施した。
実施例１
Ｉ．ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−ヒドロキシ−ω−ブタン酸、メチルエステル
ＰＥＧ（５，０００）−α−ヒドロキシ−ω−ブタン酸（７０ｇ、０．０１４０モル）（Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）を無水メタノール（４００ｍｌ）に入れた溶液に、濃硫酸（８．０ｍｌ）を加えた後、混合物を室温で３時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３（８％水溶液）を加えて混合物のｐＨを７．０に調整した。メタノールを減圧下で留去し、ＣＨ２Ｃｌ２（２×３５０ｍｌ）で生成物を抽出した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去した。収量６０ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．３４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．５７ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，１Ｈ），３．５８ ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ３Ｏ−，３Ｈ）。
ＩＩ．ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−サクシニミジルカーボネート−ω−ブタン酸、メチルエステル
ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−ヒドロキシ−ω−ブタン酸、メチルエステル（６０ｇ、０．０１２０モル）をアセトニトリル（３００ｍｌ）に入れた溶液に、ピリジン（１．６０ｍｌ）とジサクシニミジルカーボネート（３．９２ｇ）を加え、反応混合物をアルゴン雰囲気下で室温にて一晩攪拌した。次に、混合物を濾過し、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。湿生成物を減圧下で乾燥させた。収量５７ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．３４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−（スクシンイミド），４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．５８ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ３Ｏ−，３Ｈ），４．４５ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ）。
ＩＩＩ．ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブタン酸
ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−サクシニミジルカーボネート−ω−ブタン酸、メチルエステル（４０ｇ、０．００８０モル）をアセトニトリル（４００ｍｌ）に入れた溶液に、３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸、ジテトラブチルアンモニウム塩（ＡＨＰＤＰ−２Ｂｕ４Ｎ）（６．２ｇ）とトリエチルアミン（２．４ｍｌ）を加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物をＤＩ水（４００ｍｌ）に溶解し、１Ｍの水酸化ナトリウムを用いて溶液のｐＨを１２．０に調整した。１Ｍの水酸化ナトリウムを定期的に加えてｐＨを１２に維持したまま、この溶液を２時間攪拌した後、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ １２０（プラス）カラム（２００ｍｌ）で濾過した。濾液から、減圧下で水を留去した。湿生成物を塩化メチレン（６００ｍｌ）に溶解した後、溶媒を留去した。最後に、生成物を減圧下で乾燥させた。収量３５ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（ＡＨＰＤＰ），２Ｈ），２．３４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），７．１１ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，１Ｈ）。
ＩＶ．ＰＥＧ（５，０００）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル
ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブタン酸（３０ｇ、０．００６０当量）を無水塩化メチレン（３００ｍｌ）に入れた溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．８３ｇ、０．００７２モル）を加えた後、１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．０Ｍ塩化メチレン溶液、７．２ｍｌ、０．００７２モル）を加えた。反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、混合物を濾過し、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。最後に、生成物を減圧下で乾燥させた。収量２７ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．８４ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ −（ＡＨＰＤＰ），２Ｈ），２．７１ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−（スクシンイミド），４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），７．１１ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，１Ｈ）。
Ｖ．ＰＥＧ（５，０００）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブチルアルデヒドジエチルアセタール
ＰＥＧ（５，０００Ｄａ）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（２５ｇ、０．００５０当量）を無水塩化メチレン（２５０ｍｌ）に入れた溶液に、テトラ（エチレングリコール）−α−アミノ−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ；２．０ｇ、０．００５９モル）を加えた後、トリエチルアミン（１．７０ｍｌ）を加えた。反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、混合物を濾過し、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。最後に、生成物を減圧下で乾燥させた。収量２２ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−Ｃ，６Ｈ），１．５１ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２ −，ブチルアルデヒド， ４Ｈ），１．７２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ −（ＡＨＰＤＰ），２Ｈ），２．１０ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ−，アセタール，１Ｈ），７．１１ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，１Ｈ）。
ＶＩ．ＰＥＧ（５，０００）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブチルアルデヒド
ＰＥＧ（５，０００）−α−ＡＨＰＤＰ−ω−ブチルアルデヒドジエチルアセタール（２０ｇ）を水３００ｍｌに溶解し、希リン酸を用いて溶液のｐＨを２．５に調整した。この溶液を室温にて３時間攪拌した。次に、０．５Ｍの水酸化ナトリウムを用いて溶液のｐＨを７に調整した。生成物を塩化メチレンで抽出し、ジエチルエーテルで沈殿させた。最後に、生成物を減圧下で乾燥させた。収量１７．５ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７５ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨＯ，２Ｈおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ −（ＡＨＰＤＰ），２Ｈ），２．１０ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．４４ ｐｐｍ（ｄｔ，−ＣＨ２ＣＨＯ，２Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，２Ｈ），７．１１ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，１Ｈ），９．６６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨＯ，１Ｈ）。
実施例２
Ｉ．グリセロールベースの前駆体分子の調製
Figure 2011500939
 ｃｉｓ−１，３−Ｏ−ベンジリデングリセロール（７．２ｇ、０．０４０モル）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）をトルエン（１００ｍｌ）に入れた溶液を、トルエンを蒸留することで共沸乾燥させた。乾燥後の化合物を無水トルエン（１００ｍｌ）に溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをｔｅｒｔ−ブタノール（６０ｍｌ、０．０６０モル）に入れた１．０Ｍ溶液と１−（３−ブロモプロピル）−４−メチル−２，６，７−トリオキサビシクロ［２，２，２］オクタン（１４．０ｇ、０．０５５８モル）とを加え、混合物をアルゴン雰囲気下で１００℃にて一晩攪拌した。この混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去して１５．７ｇの固体生成物（化合物２）を得た。ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．７４ ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ），１．６１ ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ），１．８８ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），３．４４ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．８１ ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ），４．０５ ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ），５．５５ ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ），７．３７ ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 化合物２の加水分解
化合物２（１５．０ｇ）をアセトニトリル（１５０ｍｌ）と蒸留水（３５ｍｌ）との混合物に溶解した。次に、Ｈ３ＰＯ４の１０％溶液を加えて、ｐＨを４．５に調整した。この混合物をｐＨ＝４．５で１時間攪拌した。ＮａＣｌ（２ｇ）を加え、ｐＨを７．５に調整した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２（６００および１５０ｍｌ）で抽出した。
抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去して固体生成物（化合物３）を得た。収量を求めたところ、１４．２ｇであった。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：０．７８ ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ），１．７９ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），２．４１ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．２５ ｐｐｍ（ｍ，６Ｈ），３．４９ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），４．０５ ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ），４．４８ ｐｐｍ（ｔ，３Ｈ），５．５６ ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ），７．３７ ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 化合物３（１４．２ｇ）をアセトニトリル（８０ｍｌ）と蒸留水（８０ｍｌ）の混合物に溶解した。次に、ＮａＯＨの６％溶液を加えてｐＨを１２．５に調整した。この溶液を、ＮａＯＨの６％溶液を定期的に加えてｐＨの範囲を１２．３〜１２．８に維持したまま５．５時間攪拌した。ＮａＣｌ（５ｇ）を加え、５％Ｈ３ＰＯ４でｐＨを７．５に調整した。非酸性不純物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出（２回処理し、１回目は３００ｍｌ使用し、２回目は２００ｍｌ使用）した。Ｈ３ＰＯ４で溶液のｐＨを３．０に調整し、生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出（２回処理し、１回目は２００ｍｌ使用し、２回目は１００ｍｌ使用）した。
抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去した。得られる生成物（化合物４）の収量は８．７ｇであった。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７６ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），２．３１ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．４６ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），４．０５ ｐｐｍ（ｍ，４Ｈ），５．５６ ｐｐｍ（ｓ，１Ｈ），７．３７ ｐｐｍ（ｍ，５Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 化合物４（８．０ｇ）を無水メタノール（１２０ｍｌ）に溶解し、溶解時に濃Ｈ２ＳＯ４（１．６ｍｌ）を加えた。この溶液を室温にて４時間攪拌した。ＮａＨＣＯ３（８％溶液）を加え、混合物のｐＨを７．５に調整した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出（２回処理し、１００ｍｌずつ使用）した。
抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、揮発性化合物を６０℃にて減圧下（０．０５ｍｍＨｇ）で留去した。得られる生成物（化合物１）の収量は４．８ｇであった。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），２．３７ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．２０ ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），３．４２ ｐｐｍ（ｂｍ，４Ｈ），３．４９ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．５９ ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 ＩＩ．「ＨＯ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル」の調製
Figure 2011500939
 （式中、ＨＯ−ＰＥＧ１０Ｋは分子量１０，０００ダルトンのＰＥＧを示す）
「ＨＯ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル」
前駆体分子でのヒドロキシル基の活性化
化合物１（２．０ｇ、０．０２０８当量）を無水アセトニトリル（５０ｍｌ）に溶解し、無水ピリジン（２．２ｍｌ、０．２７２モル）とＮ，Ｎ−ジサクシニミジルカーボネート（５．８６ｇ、０．０２２９モル、ＤＳＣ）とを加えた。この溶液をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、混合物を濾過し、溶媒を留去した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍｌ）に溶解し、５％Ｈ３ＰＯ４溶液で洗浄した。次に、この溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を留去した。得られる生成物（化合物５）の収量は２．８ｇであった。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７６ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），２．３５ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），２．８２ ｐｐｍ（ｓ，８Ｈ），３．５６ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），３．５８ ｐｐｍ（ｓ，３Ｈ），３．９６ ｐｐｍ（ｍ，１Ｈ），４．３７ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ），４．５２ ｐｐｍ（ｍ，２Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 活性化前駆体とアミン含有水溶性ポリマーとのカップリング
ベンジルオキシ−ＰＥＧ（５Ｋ）−アミン（ＢｚＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）−アミン）（２０ｇ、０．００４０モル）（Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ、ＡＬ）と、塩化メチレン（２００ｍｌ）と、トリエチルアミン（１．４ｍｌ）との混合物に、化合物５（０．９０１ｇ、０．００３８当量）を加えた。この混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒を減圧下で留去した。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 脱保護ステップとＢｚＯ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブタン酸のクロマトグラフィ精製
得られた化合物６（本明細書ではＢｚＯ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブタン酸、メチルエステルと呼ぶ）を蒸留水４００ｍｌに溶解し、０．５ＭのＮａＯＨ溶液で溶液のｐＨを１２．２に調整した。この溶液をｐＨ範囲１２．０〜１２．２で３時間攪拌した。次に、ＮａＣｌ（２０ｇ）を加え、５％Ｈ３ＰＯ４溶液でｐＨを３．０に調整した。生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出（１５０ｍｌ×２）した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去して固体生成物１９ｇを得た。この生成物を、米国特許第５，９３２，４６２号明細書に記載されているようにしてイオン交換クロマトグラフィで精製し、１００％純粋な生成物１４．５ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ）２．２４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．４９ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−（ベンジル），４Ｈ），７．１９ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），７．３３ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ６Ｈ５−，１０Ｈ）。
概略的に、この反応は以下のように表される。
Figure 2011500939
 ＢｚＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの調製
Figure 2011500939
 ＢｚＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸（１４．５ｇ、０．００１４５モル）（上述したようにして調製）を無水ジクロロメタン（１５０ｍｌ）に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．１７９ｇ、０．００１５６モル）と１，３−ジシクロカルボジイミド（０．３３６ｇ、０．００１６３モル）とを加えた。この混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒の一部を減圧下で留去し、生成物を室温にてイソプロピルアルコールで沈殿させ、真空下で乾燥させて白色粉末１４．０ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．８１ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７０ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−（スクシンイミド），４Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，４Ｈ），４．４９ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２−（ベンジル），４Ｈ），７．２２ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），７．３３ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ６Ｈ５−，１０Ｈ）。
ＨＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの調製
Figure 2011500939
 ＢｚＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１２．３ｇ、０．００１２３モル）（上述したようにして調製）を無水エチルアルコール（２４０ｍｌ）に溶解し、水酸化パラジウム／活性炭（Ｐｄが２０重量％、水分含有量５０％；０．７ｇ）を加えて、反応混合物を４０ｐｓｉの水素下で一晩水素化した。次に、混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。生成物を室温にてイソプロピルアルコールで沈殿させ、真空下で乾燥させて白色粉末１１．５ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．８１ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．７０ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．８１ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２ＣＨ２−，スクシンイミド，４Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＯＮＨ（Ｃ＝Ｏ），４Ｈ），４．５７ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，２Ｈ），７．２２ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，２Ｈ）。
ＨＯ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタールの調製
ＨＯ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）４ＣＨ２（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＯＣＨ２ＣＨ２）２
テトラ（エチレングリコール）（９７．１ｇ、０．５００モル）とトルエン（２００ｍｌ）との混合物を、減圧下にてトルエンを留去（ロータリーエバポレータ）して共沸乾燥させた。乾燥後のテトラ（エチレングリコール）を無水トルエン（１８０ｍｌ）に溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをｔｅｒｔ−ブタノール（１２０．０ｍｌ、０．１２０モル）に入れた１．０Ｍ溶液と４−クロロブチルアルデヒドジエチルアセタール（１８．１ｇ、０．１００モル）（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ、Ｗａｒｄ Ｈｉｌｌ、ＭＡ）とを加えた。この混合物をアルゴン雰囲気にて９５〜１００℃で一晩攪拌した。室温まで冷ました後、混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。粗生成物を１０００ｍｌの脱イオン水に溶解し、得られる溶液を活性炭で濾過した。塩化ナトリウム（１００ｇ）を加え、生成物をジクロロメタンで抽出（２５０、２００、１５０ｍｌ）した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４上）、溶媒を減圧下で留去した（回転蒸発）。
粗生成物を３００ｍｌの１０％リン酸緩衝液（ｐＨ＝７．５）に溶解し、不純物を酢酸エチルで抽出（２×５０ｍｌ）した。得られる生成物をジクロロメタンで抽出（２００、１５０、１００ｍｌ）した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４上）、溶媒を減圧下で留去した（回転蒸発）。収量：２０．３ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−Ｃ−）１．５１ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−），３．４９ ｐｐｍ（ｂｍ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ，アセタール），４．５８ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ）。純度：約１００％（未反応の開始材料の徴候なし）。
テトラ（エチレングリコール）−α−メシレート−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタールの調製
ＣＨ３−Ｓ（Ｏ）２−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）４ＣＨ２（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＯＣＨ２ＣＨ２）２
テトラ（エチレングリコール）モノブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１２．５ｇ、０．０３７モル）とトルエン（１２０ｍｌ）との混合物を、減圧下にてトルエンを留去（ロータリーエバポレータ）して共沸乾燥させた。乾燥後のテトラ（エチレングリコール）モノブチルアルデヒド、ジエチルアセタールを無水トルエン（１００ｍｌ）に溶解した。この溶液に、２０ｍｌの無水ジクロロメタンと５．７ｍｌのトリエチルアミン（０．０４１モル）とを加えた。続いて４．５ｇのメタンスルホニルクロリド（０．０３９モル）を滴下して加えた。この溶液を窒素雰囲気にて室温で一晩攪拌した。次に、炭酸ナトリウム（５ｇ）を加え、混合物を１時間攪拌した。続いて溶液を濾過し、溶媒を減圧下で留去した（ロータリーエバポレータ）。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−Ｃ−）１．５１ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−），３．１７ ｐｐｍ（ｓ，ＣＨ３−メタンスルホネート），３．４９ ｐｐｍ（ｂｍ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−），４．３０ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−メタンスルホネート），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ，アセタール）。純度：約１００％。
テトラ（エチレングリコール）−α−アミノ−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール
Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）４ＣＨ２（ＣＨ２）２−ＣＨ（ＯＣＨ２ＣＨ２）２
テトラ（エチレングリコール）−α−メシレート−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１４．０ｇ）と、濃水酸化アンモニウム（６５０ｍｌ）と、エチルアルコール（６０ｍｌ）との混合物を、室温にて４２時間攪拌した。次に、揮発性物質をすべて減圧下で留去した。粗生成物を１５０ｍｌの脱イオン水に溶解し、溶液のｐＨを１．０ＭのＮａＯＨで１２に調整した。生成物をジクロロメタンで抽出（３×１００ｍｌ）した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去した（ロータリーエバポレータ）。収量１０．６ｇ。
ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１．０９ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３−Ｃ−）１．５６ ｐｐｍ（ｍ，Ｃ−ＣＨ２−ＣＨ２−），２．６９ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ２−Ｎ），３．５６ ｐｐｍ（ｂｍ，−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−），４．５６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ，アセタール）。純度：約１００％。
ＨＯ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール
Figure 2011500939
 ＨＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブタン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（１０．６ｇ、０．００１０６モル）を塩化メチレン（１００ｍｌ）に入れた溶液に、テトラ（エチレングリコール）−α−アミノ−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（０．４０ｇ、０．００１１８モル）とトリエチルアミン（０．０３７ｍｌ）とを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。ロータリーエバポレータを用いて溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。湿生成物を減圧下で乾燥させた。収量１０．５ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３ＣＨ２−，６Ｈ），１．５１ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２−（ブチルアルデヒド），４Ｈ），１．６７ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．１２ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，アセタール）。４．５７ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，２Ｈ），７．２２ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），７．８２ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，１Ｈ）。換算：約１００％。
ＢＴＣ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール
Figure 2011500939
 ＨＯ−ＰＥＧ２（１０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１０．５ｇ、０．００１０５モル）を無水アセトニトリル（１４０ｍｌ）に入れた溶液に、ピリジン（０．６８ｍｌ）とジベンゾトリアゾリルカーボネート（７０％混合物を０．８９ｇ、０．００２１０モル）とを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。ロータリーエバポレータを用いて溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。湿生成物を減圧下で乾燥させた。収量１０．０ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３ＣＨ２−，６Ｈ），１．５１ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２−（ブチルアルデヒド），４Ｈ），１．６７ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．１２ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９９ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，アセタール），４．６２ ｐｐｍ（ｍ，ＰＥＧ−Ｏ−ＣＨ２ −Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−，４Ｈ），７．１９ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，２Ｈ），７．４１−８．２１ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ．，ベンゾトリアゾールプロトン，４Ｈ），７．８０ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，１Ｈ）。換算：約１００％。
ＡＨＰＤＰ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブチルアルデヒド
Figure 2011500939
 ＢＴＣ−ＰＥＧ２（１０ＫＤａ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１０ｇ、０．００１０モル）を無水塩化メチレン（１００ｍｌ）に入れた溶液に、３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸、ジテトラブチルアンモニウム塩（ＡＨＰＤＰ−２Ｂｕ４Ｎ）（１．７ｇ）とトリエチルアミン（３．０ｍｌ）とを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物をＤＩ水（２００ｍｌ）に溶解させ、溶液をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ １２０（プラス）カラム（１００ｍｌ）で濾過した。次に、溶液のｐＨを５％Ｈ３ＰＯ４で２．５に調整した。この溶液を３時間攪拌した後、１Ｍの水酸化ナトリウムでｐＨを６．６に再調整した。低分子量の化合物を限外濾過によって溶液から除去した。次に、水を減圧下で留去し、白色の固体生成物６．２ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．７５ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨＯ，２Ｈおよび−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２ −（ＡＨＰＤＰ），４Ｈ），２．１０ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＣＯＯ−，２Ｈ），２．４４ ｐｐｍ（ｄｔ，−ＣＨ２ −ＣＨＯ，２Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），７．１９ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，２Ｈ），７．８０ ｐｐｍ（ｔ，−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−，１Ｈ），９．６６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨＯ，１Ｈ）。
実施例３
１．トリリシンベースのＢｚＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−酸の調製
Figure 2011500939
 トリリシン（１．０ｇ、０．００６６６当量）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を０．１Ｍのホウ酸溶液（２００ｍｌ）に溶解し、溶液のｐＨを０．１ＭのＮａＯＨで８．５に調整した。次に、ベンジルオキシ−ＰＥＧ（５Ｋ）−ベンゾトリアゾリルカーボネート（ＢｚＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）ＢＴＣ）（４０．０ｇ、０．００８００モル）（Ｎｅｋｔａｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｈｕｎｔｓｖｉｌｌｅ、ＡＬ）を４５分間かけて攪拌しながら加えた。ＢｚＯ−ＰＥＧ（５Ｋ）ＢＴＣ添加時、０．１ＭのＮａＯＨを定期的に加えてｐＨを８．５〜９．０に維持した。続いて、反応混合物を室温にて一晩攪拌した。塩化ナトリウムを加え（１０ｇ）、混合物のｐＨをＨ３ＰＯ４の１０％溶液で２．０に調整した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去した。
粗生成物を米国特許第５，９３２，４６２号明細書に記載されているようにしてイオン交換クロマトグラフィで精製し、１００％純粋な生成物２２．８ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０−１７５ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ．，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−（リシン），１８Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，６Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，１Ｈ），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．４９ ｐｐｍ（ｓ，−ＣＨ２−（ベンジル），８Ｈ），７．１４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，３Ｈ），７．３２ ｐｐｍ（ｍ，−Ｃ６Ｈ５，２０Ｈ ａｎｄ −ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，１Ｈ）。
２．トリリシンベースのＨＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−酸
Figure 2011500939
 トリリシンベースのＢｚＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）酸（２２．０ｇ、０．００１１０モル）（上述したようにして調製）をエチルアルコール（９６％、２００ｍｌ）に溶解し、水酸化パラジウム／活性炭（Ｐｄを２０重量％、水分含有量５０％；１．５ｇ）を加えて、反応混合物を４０ｐｓｉの水素下で一晩水素化した。次に、混合物を濾過し、溶媒を減圧下で留去した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍｌ）に溶解した。この溶液を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を減圧下で留去した。湿生成物を真空下で乾燥させて白色の固体１９．５ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０−１７５ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ．，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−（リシン），１８Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，６Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯＨ，１Ｈ），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．５６ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ），７．１４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，３Ｈ），７．３１ ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，１Ｈ）。
３．トリリシンベースのＨＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール
Figure 2011500939
 トリリシンベースのＨＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−酸（２０．０ｇ、０．００１００モル）（上述したようにして調製）を無水ジクロロメタン（２００ｍｌ）およびテトラ（エチレングリコール）−α−アミノ−ω−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（３．７０ｇ、０．００１１０モル）に溶解し、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．１４０ｇ、０．００１０５モル）およびＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．３０ｇ、０．００１１１モル）を加えた。混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒の一部を減圧下で留去し、生成物を室温にてイソプロピルアルコールで沈殿させ、真空下で乾燥させて白色粉末１９．５ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３ＣＨ２−，６Ｈ），１．１０−１７５ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ．，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−（リシン），１８Ｈおよび−ＣＨ２ＣＨ２−（ブチルアルデヒド），４Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，６Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，１Ｈ），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２Ｏ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ−，８Ｈ），４．４６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ （アセタール），１Ｈ），４．５６ ｐｐｍ（ｔ，−ＯＨ，４Ｈ），７．１４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，３Ｈ），７．３１ ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，１Ｈ）。換算：約１００％。
４．トリリシンベースのＢＴＣ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタールの調製
Figure 2011500939
 トリリシンベースのＨＯ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１９．５ｇ、０．００３９０−ＯＨ当量）を無水アセトニトリル（２００ｍｌ）に入れた溶液に、ピリジン（１．２５ｍｌ）とジベンゾトリアゾリルカーボネート（７０％混合物を３．３０ｇ、０．００７８００モル）とを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。混合物を濾過し、ロータリーエバポレータを用いて溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物を塩化メチレンに溶解し、イソプロピルアルコールで沈殿させた。湿生成物を減圧下で乾燥させた。収量１９．０ｇ。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０ ｐｐｍ（ｔ，ＣＨ３ＣＨ２−，６Ｈ），１．１０−１．７５ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−（リシン），１８Ｈおよび−ＣＨ２ＣＨ２−（ブチルアルデヒド），４Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，６Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，１Ｈ），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，８Ｈ），４．４５ ｐｐｍ（ｔ，１Ｈ，アセタール），４．６２ ｐｐｍ（ｍ，ｍＰＥＧ−Ｏ−ＣＨ２ −Ｏ（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−，８Ｈ），７．１４ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，３Ｈ），７．３１ ｐｐｍ（ｄ，−ＣＨＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，１Ｈ），７．４１−８．２１ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ，ベンゾトリアゾールプロトン，１６Ｈ）。換算：約１００％。
５．トリリシンベースのＡＨＰＤＰ−ＰＥＧ２（２０Ｋ）−ブチルアルデヒドの調製
Figure 2011500939
 トリリシンベースのＢＴＣ−ＰＥＧ４（２０Ｋ）−ブチルアルデヒド、ジエチルアセタール（１９ｇ、０．０３８０−ＢＴＣ当量）を無水塩化メチレン（３００ｍｌ）に入れた溶液に、３−アミノ−１−ヒドロキシプロパン−１，１−ジホスホン酸、ジテトラブチルアンモニウム塩（ＡＨＰＤＰ−２Ｂｕ４Ｎ）（６．４ｇ）とトリエチルアミン（５．８ｍｌ）とを加え、反応混合物をアルゴン雰囲気で室温にて一晩攪拌した。次に、溶媒を完全に蒸発させた。粗生成物をＤＩ水（４００ｍｌ）に溶解させ、溶液をＡｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ １２０（プラス）カラム（１００ｍｌ）で濾過した。次に、溶液のｐＨを５％Ｈ３ＰＯ４で２．５に調整した。この溶液を３時間攪拌した後、１Ｍの水酸化ナトリウムでｐＨを６．６に再調整した。低分子量の化合物を限外濾過によって溶液から除去した。次に、水を減圧下で留去し、白色の固体生成物１７．４ｇを得た。
ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）：１．１０−１．７５ ｐｐｍ（ｃｏｍｐｌｅｘ ｍｕｌｔ．，−ＣＨ−（ＣＨ２）３−（リシン），１８Ｈ），２．０２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−（ＡＨＰＤＰ），８Ｈ），２．４４ ｐｐｍ（ｄｔ，−ＣＨ２ＣＨＯ，２Ｈ），３．１２ ｐｐｍ（ｑ，−ＣＨ２ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）−，４Ｈ），３．５１ ｐｐｍ（ｓ，ＰＥＧ骨格），３．９２ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ−ＣＯＯ−，１Ｈ），４．０３ ｐｐｍ（ｍ，−ＣＨ２−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−，８Ｈ），７．１４ ｐｐｍ（ｔ，２Ｈ），７．３１ ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ），９．６６ ｐｐｍ（ｔ，−ＣＨＯ，１Ｈ）。

Claims (28)

  1. 以下の構造を有するポリマーであって、
    Figure 2011500939
     式中、
    Ａは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｚ２または−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｚ２であり、
    ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
    Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
    Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３は各々、同一であっても異なっていてもよく、結合であり、
    Ｚ１は各々、同一であっても異なっていてもよく、Ｚ２と、ヒドロキシアパタイト標的化部分と、２から約１０のヒドロキシアパタイト標的化部分を含み、任意に少なくとも１つの水溶性非ペプチドポリマーも含む多腕構造と、からなる群から選択され、ただし、ｂが０である場合、少なくとも１つのＺ１が１本以上のポリマー腕を含む多腕構造を有するという条件で、なおかつ少なくとも１つのＺ１がヒドロキシアパタイト標的化部分であるという条件であり、
    Ｚ２は、スペーサ部分を介してＰＯＬＹ２と結合していてもよい官能基であり、
    ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
    Ｒは、結合に利用できるｐ＋１部位を少なくとも含む分子から誘導されるモノマー性またはオリゴマー性多腕コア分子であり、
    ｐは、２〜３２の範囲の整数である、ポリマー。
  2. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約２２，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項１に記載のポリマー。
  3. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約１５，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項２に記載のポリマー。
  4. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項３に記載のポリマー。
  5. Ｚ１が各々、テトラサイクリン、カルセイン、ビスホスホネート、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、およびアミノホスホ糖からなる群から独立して選択される、請求項１に記載のポリマー。
  6. Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３のうちの少なくとも１つが、加水分解的に切断可能または酵素的に切断可能である、請求項１に記載のポリマー。
  7. ＰＯＬＹ１とＰＯＬＹ２のうちの一方または両方が、存在する場合、結合によって結合された２から約５個の水溶性の非ペプチドポリマーセグメントを含むセグメント化構造を有する、請求項１に記載のポリマー。
  8. ＰＯＬＹ１とＰＯＬＹ２のうちの一方または両方が、存在する場合、式−ＰＯＬＹ−Ｌ−ＰＯＬＹ−で表される構造を有し、式中、各ＰＯＬＹは水溶性の非ペプチドポリマーであり、Ｌは結合である、請求項７に記載のポリマー。
  9. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、ポリ（アルキレングリコール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリレート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（アクリル酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）ならびに、これらのコポリマー、ターポリマーまたは混合物からなる群から独立して選択されるポリマーである、請求項１に記載のポリマー。
  10. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、ポリ（エチレングリコール）である、請求項１に記載のポリマー。
  11. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、構造−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＣＨ２ＣＨ２−を有し、ｎは１〜３５０である、請求項１に記載のポリマー。
  12. Ｚ１が各々、
    Figure 2011500939
     からなる群から選択される多腕構造を有し、
    式中、ｍは各々１〜３５０であり、Ｍｅはメチルであり、Ｚは各々、ヒドロキシアパタイト標的化部分である、請求項１に記載のポリマー。
  13. ｐが３から約１０である、請求項１に記載のポリマー。
  14. Ｒが構造Ｒ１（ＯＨ）ｐのポリオールから誘導され、式中、Ｒは、任意に１つ以上のエーテル結合を含む分岐炭化水素であり、ｐは、少なくとも３である、請求項１に記載のポリマー。
  15. ポリオールが、グリセロール、ペンタエリスリトール、および糖から誘導されるアルコールならびに、これらの各々のオリゴマーまたはポリマーからなる群から選択される、請求項１４に記載のポリマー。
  16. ｐが２から約１０であり、Ｒが、ポリオール、ジスルフィド、ペプチドならびに、これらの各々のオリゴマーまたはポリマー、さらにはこれらの組み合わせからなる群から選択される分子から誘導される、請求項１に記載のポリマー。
  17. Ｒが、少なくとも１つのリシン残基を含むジペプチドまたはトリペプチドから誘導される、請求項１に記載のポリマー。
  18. ポリマーが、以下の構造
    Figure 2011500939
     を有し、式中、ｎは１〜３５０である、請求項１に記載のポリマー。
  19. ポリマーが、以下の構造
    Figure 2011500939
     を有し、式中、ｎは１〜３５０である、請求項１に記載のポリマー。
  20. 請求項１に記載のポリマーと生物学的活性剤との反応生成物を含み、以下の構造
    Figure 2011500939
     を有するポリマーコンジュゲートであって、
    式中、
    Ｂは、−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−ＰＯＬＹ２−Ｌ４−Ｄｒｕｇまたは−（Ｘ３）ｄ−（Ｌ３）ｅ−（Ｘ４）ｆ−Ｌ４−Ｄｒｕｇであり、
    Ｄｒｕｇは、生物学的に活性な部分の残基であり、
    Ｌ４は、Ｚ２と生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、
    Ｚ３は、Ｌ５−Ｄｒｕｇまたはヒドロキシアパタイト標的化部分であり、式中、Ｌ５は、官能基であるＺ１と、生物学的に活性な部分の官能基との反応によって得られる結合であり、ただし、少なくとも１つのＺ３がヒドロキシアパタイト標的化部分であり、
    他の変数はいずれも請求項１に記載したように定義される、ポリマーコンジュゲート。
  21. Ｄｒｕｇが、成長因子、抗生物質、化学療法剤、および鎮痛剤からなる群から選択される、請求項２０に記載のポリマーコンジュゲート。
  22. Ｄｒｕｇが、線維芽細胞成長因子、血小板由来成長因子、骨形態形成タンパク質、骨形成タンパク質、トランスフォーミング増殖因子、ＬＩＭ無機化タンパク質、類骨誘導因子、アンジオゲニン、エンドセリン；増殖分化因子、ＡＤＭＰ−１、エンドセリン、肝細胞増殖因子およびケラチノサイト増殖因子、ヘパリン結合増殖因子、ヘッジホッグタンパク質、インターロイキン、コロニー刺激因子、上皮増殖因子、インスリン様増殖因子、サイトカイン、オステオポンチン、およびオステオネクチンからなる群から選択される成長因子である、請求項２１に記載のポリマーコンジュゲート。
  23. 構造
    Ｚ−（Ｘ１）ａ−Ｌ１−（Ｘ２）ｂ−［ＰＯＬＹ１−（Ｘ３）ｃ−Ｌ２−（Ｘ４）ｄ］ｍ−ＰＯＬＹ２−（Ｘ５）ｅ−Ｙ
    を有するヘテロ二官能性かつ実質的に線状のヒドロキシアパタイト標的化ポリマーであって、
    式中、
    ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２は各々、同一であっても異なっていてもよく、水溶性の非ペプチドポリマーであり、
    Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５は各々、同一であっても異なっていてもよく、スペーサ部分であり、
    Ｌ１は、結合であり、
    Ｌ２は各々、カルバメートおよびアミドからなる群から選択される加水分解的または酵素的に切断可能な結合であり、
    Ｚは、ヒドロキシアパタイト標的化部分であり、
    Ｙは官能基であり、
    ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅは各々、同一であっても異なっていてもよく、０または１のいずれかであり、
    ｍは、１〜１０の範囲の整数である、ヒドロキシアパタイト標的化ポリマー。
  24. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約２２，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項２３に記載のポリマー。
  25. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約１５，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項２４に記載のポリマー。
  26. ＰＯＬＹ１およびＰＯＬＹ２が各々、存在する場合、約８，０００Ｄａ未満の数平均分子量を有する、請求項２５に記載のポリマー。
  27. Ｚが、テトラサイクリン、カルセイン、ビスホスホネート、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、およびアミノホスホ糖からなる群から選択される、請求項２３に記載のポリマー。
  28. Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５が各々、存在する場合、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）１−６−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−［ＣＨ２］ｈ−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｊ−、二価シクロアルキル基、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ６）−、これらの組み合わせからなる群から選択され、式中、Ｒ６は、Ｈであるか、またはアルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、および置換アリールからなる群から選択される有機ラジカルであり、（ｈ）は０から６であり、（ｊ）は０から２０である、請求項１または２３に記載のポリマー。
JP2010531043A 2007-10-23 2008-10-23 ヒドロキシアパタイト標的化多腕ポリマーならびに、このポリマーから作られるコンジュゲート Active JP5823125B2 (ja)

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