JP2011062080A - シロアリの卵認識フェロモンの構成成分としてβ−グルコシダーゼを用いた擬似卵およびそれを用いたシロアリ駆除 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】害虫、特にシロアリの卵を模した基材に卵認識フェロモンの構成成分としてβ−グルコシダーゼ、その塩、その生物学的フラグメントまたはβ−グルコシダーゼ関連ペプチドを含有せしめた擬似卵、それを用いる害虫の駆除・防除方法および生物学研究ツール等。
【選択図】なし
Description
(1)シロアリの卵を模した基材に卵認識フェロモンの構成成分としてβ−グルコシダーゼ、その塩、その生物学的フラグメントまたはβ−グルコシダーゼ関連ペプチドを含有せしめた擬似卵;
(2)(1)記載の擬似卵にリゾチーム、その塩、その生物学的フラグメントまたはリゾチーム関連ペプチドを基材に含有せしめた擬似卵;
(3)(1)または(2)記載の擬似卵に害虫の卵から抽出した成分を基材に含有せしめた擬似卵;
(4)(1)〜(3)のいずれかに記載の擬似卵にセルラーゼ、その塩、その生物学的フラグメントまたはセルラーゼ関連ペプチドを基材に含有せしめた擬似卵;
(5)(1)〜(4)のいずれかに記載の擬似卵にグリセロールを基材に含有せしめた擬似卵;
(6)(1)ないし(5)のいずれかに記載の擬似卵に殺虫活性成分、孵化阻害物質、生殖阻害物質、発育阻害活性成分、または昆虫病原菌からなる群より選択される1またはそれ以上の成分を含有せしめた擬似卵;
(7)(6)記載の擬似卵をシロアリに与え、卵運搬行動を利用して巣内に運搬させることを特長とする、シロアリの駆除方法;
(8)(1)ないし(6)のいずれかに記載の擬似卵を必須として含む生物学研究ツール
等を提供するものである。
シロアリ卵抽出物、β−グルコシダーゼ、卵白リゾチーム、セルラーゼ、卵白リゾチームとセルラーゼの混合物、卵白リゾチームとβ−グルコシダーゼの混合物、卵白リゾチームとβ−グルコシダーゼおよびセルラーゼの混合物、および対照として50%グリセリン水溶液の卵認識活性を、ヤマトシロアリワーカー(職蟻)を用いて調べた。
各試験標品を以下のようにして調製した。
エッペンドルフチューブ中のヤマトシロアリの卵400mgに800μLの超純水を添加し、ホモジナイズし、5分間超音波処理し、15000rpmで30分の遠心分離を行った。上清を凍結乾燥し、凍結乾燥粉末5.0mgを100μLの30%グリセリン水溶液に溶解させた(シロアリ卵抽出物)。アーモンド由来のβ−グルコシダーゼ(Product#:G0395−5KU,Lot#:047K4037,SIGMA−ALDRICH)1.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(β−グルコシダーゼ)。ニワトリ卵白リゾチーム(Product#:L7651−10G,Lot#:056K16901,SIGMA−ALDRICH)を透析膜SnakeSkin(7000MWCO,Product#:68700,PIERCE)を用いて脱塩し、脱塩したニワトリ卵白リゾチーム2.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(卵白リゾチーム)。Trichoderma viridae由来のセルラーゼ(Product#:C1794−5KU,Lot#:074K1304,SIGMA−ALDRICH)1.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(セルラーゼ)。卵白リゾチーム2.0mgおよびセルラーゼ1.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(卵白リゾチームとセルラーゼの混合溶液)。卵白リゾチーム2.0mgおよびβ−グルコシダーゼ1.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(卵白リゾチームとβ−グルコシダーゼの混合物)。卵白リゾチーム2.0mg、β−グルコシダーゼ1.0mg、およびセルラーゼ1.0mgを10μLの50%グリセリン水溶液に溶解させた(卵白リゾチームとβ−グルコシダーゼおよびセルラーゼの混合物)
直径0.5mmのガラスビーズ100個等量に上記の各試験標品2.0μLを加えてよく混和し、ガラスビーズ表面に試験標品をコートした。50%グリセリン水溶液のみでコートしたガラスビーズを対照区とした。
直径30mmのシャーレ上にシロアリの卵10個と上記手順によって得た擬似卵20個をランダムに置き、これにヤマトシロアリの職蟻(ワーカー)10個体を入れて25℃の恒温室内で静置し、実験開始から24時間後および48時間後に、卵塊中への擬似卵の運搬率を調べた(各試験標品につき同じ手順で実験を行った)。各処理区について8回の繰り返しを行った。運搬率をアークサインルート変換し、両側T検定により対照区との統計比較を行った。職蟻はシャーレ上に散在した卵を集めて卵塊を形成し、保護行動を示した。各試験標品をコートした擬似卵の24時間後の、卵塊への運搬率を図1に示す。48時間後の運搬率を図2に示す。
β−グルコシダーゼを添加することによる卵認識活性の増加は顕著であり、24時間後、48時間後のいずれの観察時にも、β−グルコシダーゼを加えないリゾチームとセルラーゼのみの処理区よりも、β−グルコシダーゼ加えた処理区の方が、有意に卵認識活性が高かった(P<0.001、両側T検定)。なかでも、β−グルコシダーゼ、リゾチームおよびセルラーゼを含む擬似卵の運搬活性が高かった。
Claims (4)
- シロアリの卵を模した基材に卵認識フェロモンの構成成分としてβ−グルコシダーゼ、その塩、その生物学的フラグメントまたはβ−グルコシダーゼ関連ペプチドを含有せしめた擬似卵。
- 請求項1記載の擬似卵に殺虫活性成分、孵化阻害物質、生殖阻害物質、発育阻害活性成分、または昆虫病原菌からなる群より選択される1またはそれ以上の成分を含有せしめた擬似卵。
- 請求項2記載の擬似卵をシロアリに与え、卵運搬行動を利用して巣内に運搬させることを特長とする、シロアリの駆除方法。
- 請求項1または2記載の擬似卵を必須として含む生物学研究ツール。
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