JP2011001269A - 紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤 - Google Patents

Abstract

【課題】局所投与可能な紫外線誘発又は一次刺激性皮膚炎予防治療薬を提供する。
【解決手段】チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチドを有効成分とする紫外線誘発又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤。
【選択図】なし

Description

本発明は、紫外線等に起因する皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎を予防又は治療するための外用剤に関する。

紫外線を過剰に照射された皮膚には、あかみ、はれ、ほてり等が生じ、重篤化した場合には全身倦怠感、頭痛、発熱、悪寒、食欲不振、吐き気等の全身症状も生じる。これは日光皮膚炎とも呼ばれ、アレルギー性皮膚炎とは明確に区別されている。
一方、一次刺激性皮膚炎は、アレルギー性皮膚炎とは全く相違し、原因物質の刺激により皮膚の炎症を誘発する疾患であり、アレルギーとは無関係なので誰にでも起こり得るという特徴を有する。症状としてはそう痒を伴う発疹が、原因物質が接触した部分に出現し発赤、浮腫が生じることが多く、重症例では潰瘍を伴うこともある。原因物質としては、油、洗剤、石けんなどの刺激物質、アンモニア（おむつかぶれ）などがある。

紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の治療には、ステロイド外用剤が使用されることが多い。痒みに対しては、抗アレルギー薬や抗ヒスタミン薬が使用されるが、対症療法にすぎない。

一方、チオレドキシンがアレルギー性皮膚炎に有効であることは本発明者らが見出し、先に特許出願した（特許文献１）。しかし、この特許文献１ではチオレドキシントランスジェニックマウスにアレルギー性皮膚炎を生じさせた場合に、その炎症反応が生起しなかったことが示されているにすぎず、実際にチオレドキシンを投与した場合の効果に確認されていない。

特開２００７−２６９６７１号公報

紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の治療に用いられるステロイド薬は、副作用が懸念され、連用はさけるべきである。また、これらの皮膚炎の炎症は紫外線が照射した部分や原因物質が接触した部位に生じる局所的なものであり、安全性や使用性の点から、治療薬は外用剤が望ましい。
従って、本発明の課題は局所投与可能な、紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎予防治療剤を提供することにある。

そこで本発明者は、チオレドキシンに着目して紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎に適用したところ、全く意外にも、チオレドキシンは、局所に外用した場合にこれらの皮膚炎を顕著に抑制することを見出した。さらにチオレドキシンとヒアルロン酸とを併用するとその効果が増強されることも見出した。

すなわち、本発明は、チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチド（ＴＲＸｓ）を有効成分とする紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤を提供するものである。
また、本発明は、チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチド及びヒアルロン酸又はその塩を有効成分とする紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤を提供するものである。

本発明によれば、紫外線誘発皮膚炎及び各種一次刺激性皮膚炎、日光皮膚炎、及び例えば洗剤や油剤に起因するかぶれなどの治療が外用により安全に可能になった。

紫外線照射により増加するサンバーン細胞に対するチオレドキシン塗布の影響を示す図である。 紫外線照射により増加するサンバーン細胞に対するチオレドキシン塗布の影響を示す図である。 クロトンオイル皮膚炎に対するチオレドキシン塗布の効果を示す図である。図中ＣｒＯはクロトンオイルを示す。

本発明の外用剤の有効成分であるチオレドキシン（Ｔｈｉｏｒｅｄｏｘｉｎ；ＴＲＸ）は、その活性部位配列：−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−：の２つのシステイン残基間でのジスルフィド／ジチオール交換反応による酸化還元（レドックス）活性を有する１２ｋＤａの多機能ペプチドである（Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９７；１５：３５１−３５６）。チオレドキシンは、リボヌクレオチドリダクターゼに対する水素イオン供与体、デオキシリボヌクレオチドの合成に重要な酵素として大腸菌から単離されて以来、多くの原核生物、真核生物から単離同定されてきた。
成人Ｔ細胞白血病誘導因子（ＡＤＦ）は、本発明者らがＨＴＬＶ−１に感染したＴリンパ球によって産生されるＩＬ−２受容体誘導因子として最初に同定したもので、ヒトチオレドキシンである。細胞内チオレドキシンはラジカル消去や、ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ−１や、ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ−κＢなどのレドックスに関する転写因子の制御に重要な役割を果たしている（ＲＮＡＳ．１９９７；９４：３６３３−３６３８）。

本明細書において、ヒトチオレドキシン（ｈＴＲＸ）とは、配列番号１に示される１０５個のアミノ酸からなるポリペプチドをいう。
本明細書においては、「ポリペプチド」には、チオレドキシン活性を有するものであれば、オリゴペプチドからタンパク質まで広く含まれる。

本発明のＴＲＸｓはヒトチオレドキシン以外に「チオレドキシンスーパーファミリー」に属するものであればよく、その活性中心に−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−、−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｃｙｓ−、−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｃｙｓ−、−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−を有するポリペプチド類を有するものが例示される。
これらの中でも活性中心に配列−Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓ−を有するチオレドキシン又はチオレドキシン２（ミトコンドリア特異的チオレドキシン）が好ましい。

本発明のチオレドキシン誘導体は配列番号１のヒトチオレドキシンをもとにして公知の遺伝子工学的手法により誘導体を製造することができる。
該誘導体は配列番号１の３２位と３５位以外、好ましくは３２位〜３５位以外のアミノ酸の１又は複数個、好ましくは１又は数個が置換、欠失、付加、挿入され、且つ、一次刺激性皮膚炎抑制活性を有するものである。
尚、配列番号２は、配列番号１の核酸配列を表す。

後記実施例に示すように、チオレドキシンは皮膚への外用によって、優れた紫外線誘発皮膚炎及び一次刺激性皮膚炎の予防治療作用を示す。また、チオレドキシンとヒアルロン酸又はその塩とを組み合わせて皮膚に外用すれば、その紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚予防治療作用はさらに増強される。本発明の適用となる紫外線誘発皮膚炎には日光皮膚炎が挙げられ、一次刺激性皮膚炎には、油剤、洗剤、アンモニア等の刺激物質による皮膚炎が挙げられる。本発明の適用対象は紫外線誘発皮膚炎であるのが特に好ましい。

本発明のチオレドキシンとヒアルロン酸又はその塩を有効成分とする皮膚炎予防治療用外用剤においては、チオレドキシンと、ヒアルロン酸又はその塩とは、同一の製剤中に配合されていてもよいし、別個の製剤中に配合されていてもよい。別個の製剤にそれぞれ含有している場合には、一方を皮膚に適用し、その後他方を適用してもよいし、同時に両方を皮膚に適用してもよい。なお、ヒアルロン酸の塩としてはナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩が好ましい。

本発明の外用剤の形態としては、液剤、乳液、クリーム、軟膏剤、ゲル剤等の形態の他、エアゾール、貼付剤の形態でもよい。これらの形態のうち、液剤、乳液、クリーム、軟膏剤が好ましい。

これらの外用剤を製造するには、前記有効成分に加えて、ワセリン、パラフィン、プラスチベース、植物油、牛脂などの油剤、乳化剤、マクロゴール等の水溶性基剤、ヒドロゲル基剤等を配合することができる。

このうち、チオレドキシンを含有するクリーム製剤又はゲル状製剤とするのが好ましく、特にヒドロゲル基剤中にチオレドキシンを含有させたゲル状製剤がチオレドキシンの経皮吸収性の点で好ましい。ヒドロゲル基剤としては、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、キラト硫酸、キチン、ヒアルロン酸等の天然成分；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の水溶性セルロース誘導体；カルボキシビニルポリマー等のアクリル酸系ポリマー；キサンタンガム、ジェランガム等の天然ガム等が挙げられる。

これらの外用剤中のチオレドキシンの含有量は０．００１〜５０質量％、さらに０．０１〜１０質量％が好ましい。またヒアルロン酸又はその塩の含有量は０．００１〜５０質量％、さらに０．０１〜１０質量％が好ましい。

また本発明の外用剤の投与量はチオレドキシン量として、皮膚５ｃｍ×５ｃｍあたり０．０１〜１００ｍｇ程度が好ましい。また、ヒアルロン酸又はその塩の投与量は、皮膚５ｃｍ×５ｃｍあたり０．０１〜１００ｍｇ程度が好ましい。皮膚への適用は１日あたり１回〜数回とすることができる。

以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により何ら制限されるものではない。

実施例１
アルビノヘアレスマウスの背部にチオレドキシン含有ヒドロゲル（チオレドキシン０．００１ｗ／ｖ％、ヒアルロン酸１ｗ／ｖ％）を塗布（０．５μｇ／ｃｍ²）した。その２時間後にＵＶ−Ｂを７５０Ｊ／ｍ²照射した。ＵＶ−Ｂ照射直後、６時間後及び２４時間後に皮膚を採取し、ヘマトキシリン染色によりサンバーン細胞を染色し、サンバーン細胞の消失を観察した。その結果を図１及び２に示す。図１及び２から明らかなようにプラセボ（ヒドロゲルのみ塗布）群では存在した多くのサンバーン細胞が、チオレドキシン塗布群では消失しており、チオレドキシンの外用により、紫外線照射による炎症が抑制されることが判明した。

実施例２
ウィスター系雄性ラットの耳介に５％クロトン油含有起炎剤（クロトン油：エーテル：ピリジン：水＝１：１４：４：１）を塗布し、一次刺激性皮膚炎を惹起した。
チオレドキシン含有ヒドロゲル（チオレドキシン０．００１ｗ／ｖ％、ヒアルロン酸１ｗ／ｖ％）は、皮膚炎惹起の２時間前に塗布した。炎症惹起６時間後及び２４時間後に耳介の腫脹を測定した。その結果を図３に示すように、チオレドキシン塗布により一次刺激性皮膚炎が抑制されることが判明した。
なお、チオレドキシンを、アセトン：オリーブオイル（４：１）に溶解して塗布した場合の耳介腫脹の抑制効果は、チオレドキシンとヒアルロン酸とを併用した場合に比べて低かった。従って、チオレドキシンとヒアルロン酸との併用による紫外線誘発皮膚炎及び一次刺激性皮膚炎の抑制効果は、顕著であることが判明した。

Claims (3)

1. チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチドを有効成分とする紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤。
2. チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチド及びヒアルロン酸又はその塩を有効成分とする紫外線誘発皮膚炎又は一次刺激性皮膚炎の予防又は治療用外用剤。
3. チオレドキシンスーパーファミリーのポリペプチドが、ヒトチオレドキシンである請求項１又は２記載の予防又は治療用外用剤。