JP2010507371A - 病原体を同定するためのアッセイ及び装置 - Google Patents
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Abstract
Description
これらの方法は、通常、タンパク質に対する抗体に基づく診断アッセイ(細菌の成分又は疾患の副産物の何れか)及び細菌の成分をコードする遺伝物質などの核酸に対する診断アッセイに分けることができる。
上記で別段の定義がない限り、本明細書中で使用される全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野の通常の技術者により一般に理解されるものと同じ意味を有する。用語が単数で与えられる場合、発明者らはまた、その用語の複数も意図する。本明細書中で使用される命名法及び下記に記載の手段は、当技術分野において周知であり一般的に使用されるものである。
(a)リボソームを結合させるとができる結合剤を含む支持体を、リボソームを含む試料と接触させること;
(b)試料との接触後に支持体を洗浄すること;
(c)溶液中でmRNAをポリペプチドに翻訳するために、リボソームを結合剤に結合させられるようにするのに適切な条件下で、mRNA及びアミノ酸を含む溶液の存在下で支持体を温置すること;
(d)ポリペプチドの存在を調べること、
を含む方法が提供される。
(a)リボソームを結合させることができる結合剤を使用して支持体上でリボソームを捕捉すること;
(b)mRNA及びアミノ酸を含む溶液とともに捕捉されたリボソームを温置すること;
(c)温置され、捕捉されたリボソームにより産生されるポリペプチドを検出すること、を含む方法が提供される。
アシネトバクター・カルコアセティカス(Acinetobacter calcoaceticus)、A.ヘモリチクス(A.haemolyticus)、エアロモナス・ヒドロフィリア(Aeromonas hydrophilia)、バクテロイド・フラジリス(Bacteroides fragilis)、B.ディスタスノシス(B.distasonis)、バクテロイド(Bacteroides)3452Aホモロジー群、B.ブルガツス(B.vulgatus)、B.オバルス(B.ovalus)、B.テタイオタオミクロン(B.thetaiotaomicron)、B.ユニホルミス(B.uniformis)、B.エガーシイ(B.eggerthii)、B.スプランキニクス(B.splanchnicus)、ブラナメラ・カタラリス(Branhamella catarrhalis)、カンピロバクターフェトゥス(Campylobacterfetus)、C.ジェジュニ(C.jejuni)、C.コリ(C.coli)、シトロバクター・フロインデイ(Citrobacterfreundii)、クロストリジウム・ディフィシル(Clostridium difficile)、C.ジフテリエ(C.diphtheriae)、C.ウルセランス(C.ulcerans)、C.アコレンス(C.accolens)、C.アフェルメンタンス(C.afermentans)、C.アミコラトゥム(C.amycolatum)、C.アルゲントレンス(C.argentorense)、C.アウリス(C.auris)、C.ボビス(C.bovis)、C.コンフスム(C.confusum)、C.コイレア(C.coyleae)、C.ドゥルム(C.durum)、C.ファルセニ(C.falsenii)、C.グルクロノリチクム(C.glucuronolyticum)、C.イミタンス(C.imitans)、C.ジェイケイウム(C.jeikeium)、C.クツシェリ(C.kutscheri)、C.クロッペンステッティイ(C.kroppenstedtii)、C.リポフィルム(C.lipophilum)、C.マクギンレイ(C.macginleyi)、C.マトルコティ(C.matruchoti)、C.ムシファシエンス(C.mucifaciens)、C.ピロスム(C.pilosum)、C.プロピンクーム(C.propinquum)、C.レナーレ(C.renale)、C.リエゲリ(C.riegelii)、C.サンギニス(C.sanguinis)、C.シングラレ(C.singulare)、C.ストリアトゥム(C.striatum)、C.スンズバレンス(C.sundsvallense)、C.トムセニ(C.thomssenii)、C.ウレアリティクム(C.urealyticum)、C.キセロシス(C.xerosis)、エンテロバクター・クロアカエ(Enterobacter cloacae)、E.エアロゲネス(E.aerogenes)、エンテロコッカス・アビウム(Enterococcus avium)、E.カッセリフラブス(E.casseliflavus)、E.セコルム(E.cecorum)、E.ディスパー(E.dispar)、E.ドゥランス(E.durans)、E.フェカリス(E.faecalis)、E.フェシウム(E.faecium)、E.フラベセンス(E.flavescens)、E.ガリナルム(E.gallinarum)、E.ヒラエ(E.hirae)、E.マロドラトゥス(E.malodoratus)、E.マンティ(E.mundtii)、E.シュードアビウム(E.pseudoavium)、E.ラフィノサス(E.raffinosus)、E.ソリタリウス(E.solitarius)、フランシセラ・トゥラレンシス(Francisella tularensis)、ガルドネレラ・バギナリス(Gardnerella vaginalis)、ヘリコバクター・ピロリ(Helicobacter pylori)、キンゲラ・デントリフィカンス(Kingella dentrificans)、K.キンガエ(K.kingae)、K.オラリス(K.oralis)、クレブシエラ・ニューモニア(Klebsiella pneumoniae)、K.オキシトカ(K.oxytoca)、モラクセラ・カタラリス(Moraxella catarrhalis)、M.アトランタエ(M.atlantae)、M.ラクナタ(M.lacunata)、M.ノンリケファシエンス(M.nonliquefaciens)、M.オスロエンシス(M.osloensis)、M.フェニルピルビカ(M.phenylpyruvica)、モルガネラ・モルガニイ(Morganela morganii)、パラクラミジアアミジア・アカントアメーバ(Parachlamydia acanthamoebae)、パスツレラ・ムルトシダ(Pasteurella multocida)、P.ヘモリチカ(P.haemolytica)、プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)、プロテウス・ブルガリス(Proteus vulgaris)、プロビデンシア・アルカリファシエンス(Providencia alcalifaciens)、P.レトゲリ(P.rettgeri)、P.ストゥアルティ(P.stuartii)、セラチア・マルセセンス(Serratia marcescens)、シムカニア・ネゲベンシス(Simkania negevensis)、ストレプトコッカス・ニューモニア(Streptococcus pneumoniae)、S.アガラクチエ(S.agalactiae)、S.ピロゲネス(S.pyrogenes)、トレポネマ・パリドゥム(Treponema pallidum)、ビブリオ・コレラ(Vibrio cholerae)及びV.パラヘモリチクス(V.parahaemolyticus)などの細菌由来のリボソーム。
)、スタフィロコッカス・アーレッタエ(Staphylococcus arlettae)、S.アウレウス(S.aureus)、S.アウリクラリス(S.auricularis)、S.バクテリオファージ(S.bacteriophage)、S.カピチス(S.capitis)、S.カプレ(S.caprae)、S.カルノサス(S.carnosus)、S.カセオリチクス(S.caseolyticus)、S.クロモゲネス(S.chromogenes)、S.コーニイ(S.cohnii)、S.デルフィニ(S.delphini)、S.エピデルミジス(S.epidermidis)、S.エクオルム(S.equorum)、S.フェリス(S.felis)、S.フレウレッティイ(S.fleurettii)、S.ガリナルム(S.gallinarum)、S.ヘモリチクス(S.haemolyticus)、S.ホミニス(S.hominis)、S.ヒクス(S.hyicus)、S.インテルメディウス(S.intermedius)、S.クルーシイ(S.kloosii)、S.レントゥス(S.lentus)、S.ルグドゥネンシス(S.lugdunensis)、S.ルトレ(S.lutrae)、S.ムスカエ(S.muscae)、S.ミュータンス(S.mutans)、S.パスツーリ(S.pasteuri)、S.ファージ(S.phage)、S.ピシフェルメンタンス(S.piscifermentans)、S.プルベレリ(S.pulvereri)、S.サッカロリチクス(S.saccharolyticus)、S.サプロフィチクス(S.saprophyticus)、S.シュレイフェリ(S.schleiferi)、S.スシウリ(S.sciuri)、S.シミュランス(S.simulans)、S.スクシヌス(S.succinus)、S.ビトゥリヌス(S.vitulinus)、S.ワルネリ(S.warneri)、S.キシロサス(S.xylosus)、ウレアプラズマ・ウレアリチクム(Ureaplasma urealyticum)、エルシニア・アルドバーエ(Yersinia aldovae)、Y.ベルコビエリ(Y.bercovieri)、Y.エンテロコリチカ(Y.enterocolitica)、Y.フレデリクセニイ(Y.frederiksenii)、Y.インテルメディア(Y.intermedia)、Y.クリステンセニイ(Y.kristensenii)、Y.モラレティイ(Y.mollaretii)、Y.ペスチス(Y.pestis)、Y.フィロミラジア(Y.philomiragia)、Y.シュードツベルクロシス(Y.pseudotuberculosis)、Y.ローデイ(Y.rohdei)及びY.ルケリ(Y.ruckeri)などの通性細胞内細菌由来のリボソーム。
当業者は、本明細書中に記載の本発明の具体的な実施形態に対する多くの同等物を認めるか、又は通常の実験以外のものを使用せずに確認できよう。本発明の具体的な実施形態を考察してきたが、上記の明細書は例証であり、限定的なものではない。この明細書を検討すれば、本発明の多くの変化が当業者にとって明らかとなろう。本発明の全範囲は、同等物のその完全範囲及び明細書とともに、かかる変化とともに、特許請求の範囲を参照して決定されるものである。かかる同等物は、次の特許請求の範囲により包含されるものとする。
Claims (21)
- (a)リボソームを結合させることができる結合剤を含む支持体を、リボソームを含む試料と接触すること;
(b)試料との接触後に支持体を洗浄すること;
(c)溶液中でmRNAをポリペプチドに翻訳するために、リボソームを結合剤に結合させられるようにするのに適切な条件下で、mRNA及びアミノ酸を含む溶液の存在下で支持体を温置すること;
(d)ポリペプチドの存在を調べること、
を含む方法。 - リボソームが病原体に特異的であり、さらに、ポリペプチドの存在に基づき試料中の病原体の存在を調べることを含む、請求項1に記載の方法。
- 病原体が細菌である、請求項2に記載の方法。
- 結合剤が、リボソームに特異的に結合できる、請求項1に記載の方法。
- リボソームが細菌性リボソームであり、少なくとも1つの細菌からリボソームを放出させることをさらに含む、請求項3に記載の方法。
- 支持体が多孔質材である、請求項1に記載の方法。
- 多孔質材がニトロセルロースである、請求項3に記載の方法。
- 結合剤が抗体である、請求項1に記載の方法。
- 結合剤が、リボソームRNAに結合することができる、請求項1に記載の方法。
- リボソームRNAに結合することができる物質が核酸である、請求項9に記載の方法。
- mRNA及びアミノ酸を含む溶液が基質をさらに含む、請求項1に記載の方法。
- ポリペプチドが酵素である、請求項11に記載の方法。
- ポリペプチドを調べることが、酵素に対する基質との酵素の反応の結果得られる反応産物の存在を調べることを含む、請求項12に記載の方法。
- ポリペプチドを調べることが、反応産物の存在を光学的に検出することを含む、請求項13に記載の方法。
- (a)リボソームに結合することができる結合剤を使用して支持体上でリボソームを捕捉すること;
(b)mRNA及びアミノ酸を含む溶液を用いて捕捉されたリボソームを温置すること;
(c)温置され、捕捉されたリボソームにより産生されるポリペプチドを検出すること、
を含む方法。 - リボソームに結合することができる結合剤を含む支持体を含む、装置。
- 支持体が多孔質材である、請求項16に記載の装置。
- 多孔質材がニトロセルロースである、請求項17に記載の装置。
- 結合剤が抗体である、請求項16に記載の装置。
- 結合剤が、リボソームRNAに結合することができる物質である、請求項16に記載の装置。
- リボソームRNAに結合できる試薬が核酸である、請求項20に記載の装置。
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