JP2009534464A

JP2009534464A - ポリマー系制癌剤

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Publication number: JP2009534464A
Application number: JP2009507625A
Authority: JP
Inventors: ラーズブルース，; イングリッドブルース，
Original assignee: BRUCE MEDICAL AB
Current assignee: BRUCE MEDICAL AB
Priority date: 2006-04-24
Filing date: 2007-04-23
Publication date: 2009-09-24
Also published as: ZA200808329B; EP2012804A4; EP2012804A1; MX2008013576A; RU2432168C2; CN101432005A; WO2007123468A1; BRPI0710564A2; US20090252702A1; RU2008146073A; CN101432005B; AU2007241593B2; CA2648007A1; IL194342A0; AU2007241593A1

Abstract

本発明は特に癌細胞の分裂増殖速度を減らすことにより、癌を治療しそして防止するための両親媒性ブロックコポリマーの使用に関する。望ましいブロックコポリマーは、望ましくは酸化ポリプロピレン鎖である主疎水性鎖が望ましくは酸化ポリエチレン鎖である少なくとも二つの親水性側鎖と結合することからなる。
【選択図】図１１

Description

本発明は一般的に癌の治療に関し、そして特にこのような癌治療におけるポリマー系制癌剤の使用に関する。

（背景）
癌は細胞の制御不可能な分裂で特徴づけられる病気のクラスでありそして侵入を通して隣の組織内への直接増殖、あるいは転移により人体の離れた箇所内への内移植のいずれかにより拡大するこられの細胞の能力である。

今日、癌はヒトの死亡の主たる原因でありそして影響を受ける個人の数は毎年増加している。いろいろな癌治療の方法、例えば、化学療法、内分泌療法、放射線療法そして外科手術がここ１０年ものすごく改善されてきたが、種々な癌の型に対する成果に関しては完全から遠い。さらに、知られている癌治療のいくつかは高い治療費、副作用そして患者の苦痛そして比較的非効率な不利益により台無しになっている。これらの理由のために、広い研究が癌治療の代替法あるいは補助形式を発見するために行われている。

文献［１］は大腸癌および／あるいは直腸癌の治療のための医薬品の調合剤の有効薬剤として非発酵浸透性緩下剤の使用を開示している。このような緩下剤の例はＢＡＳＦ社から入手できるＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）F６８である。これらの化合物は緩下性およびゲル化の性質をもつている。化合物はこれらの物理化学的性質により大腸内に水を惹きつけそして保持し、そして繊維質なしに糞便の排せつを増加することができる。化合物の緩下性、非発酵性、浸透性および水保持性は二つの特別な癌の型の大腸癌そして直腸癌に関して保護効果をもっている。

文献［２］は転移に発展する循環する腫瘍細胞の能力を討論しており、そこではこの能力は内皮に対する固有の物理化学的癒着と微小血栓の形成に基づいている。凝固の過程を妨げる物質が腫瘍の転移の防止のために使用されることが記述されている。提案された物質はヘパリン、ナトリウムワルファリン（抗凝血製剤）およびＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）F６８である。これらの物質は手術の腫瘍処置に次いで転移を防ぐため外科手術と連結して使用される。

（概要）
本発明は従来技術の取り決めのこれらおよび他の欠点を克服する。

癌の治療および予防のために使用できるポリマー系の薬剤を提供することが本発明の全般の目的である。

癌細胞の分裂増殖を減らすポリマー系の薬剤を提供することが本発明の他の目的である。

これらおよび他の目的は付帯する特許請求項で定義される発明により明らかにされる。

手短に言えば、本発明は両親媒性のブロックコポリマーの予期せぬ制癌剤効果を含んでいる。これらのコポリマーは種々の癌の型に対して効果的な化学療法薬剤でありそして癌細胞の分裂増殖速度を減らす効果をもっている。

本発明の両親媒性のブロックコポリマーは少なくとの二つの親水性側鎖に結合する一つの疎水性ポリマー鎖から望ましくはなる。疎水性ポリマー鎖は、少なくとも一つの、望ましくは一つあるいは二つの親水性側鎖に結合する第一端をもち、そして少なくとも一つの、望ましくは一つあるいは二つの親水性側鎖に結合する第二端をもつ主鎖で望ましくはある。

望ましい両親媒性のブロックコポリマーは構造式（Ｉ）をもつものである。

かくして、酸化エチレン側鎖により側面に並ぶ酸化プロピレンの主ポリマー鎖をもつコポリマーが望まれる。付加すると、ｎは望ましくはｐに等しい。このようなコポリマーはＢＡＳＦ社により商品名ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）で利用できる。

本発明の望ましいこのようなＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーは少なくとも４０重量％の平均酸化エチレン含有量で望ましくは８０重量％以下の平均酸化エチレン含有量をもつものである。両親媒性ブロックコポリマーの平均酸化プロピレン含有量は望ましくは少なくても２，０００ｇ／ｍｏｌ、さらに望ましくは、約４，０００±５００ｇ／ｍｏｌのような少なくとも３，０００ｇ／ｍｏｌである。望ましいコポリマーの例は平均分子量１２，６００ｇ／ｍｏｌ、７３．２±１．７％の平均酸化エチレン含有量で５６℃の融点をもつＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７である。

発明者はこれらのコポリマーが細胞の分裂増殖あるいは癌細胞の増殖速度を減らしそして阻害しそして癌細胞のＤＮＡ合成を減らす制癌効果をもつことを驚くべきことに発見した。この驚くべき効果は少なくとも部分的に細胞膜に結合しそして膜上のそれぞれの受容体への異なる成長因子の結合をブロックするコポリマーの効果による。

本発明の薬剤組成は望ましくは本発明の単独の化学療法薬剤として単一の両親媒性ブロックコポリマーあるいは少なくとも二つのコポリマーの混合物からなる。

（図面の簡単な説明）
さらなる目的およびこの利点をともなう本発明は付帯する図と一緒になされる以下の説明を参照してよく理解され、図は以下である：

図１はヒトの乳癌セルラインＭＣＦ−７の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である；

図２はヒトの乳癌セルラインＳＫ−ＢＲ−３の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である；

図３はＦＣＳ刺激ヒト血管平滑筋細胞の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を図示する；

図４は無刺激およびＦＣＳ刺激ドブネズミの大動脈平滑筋細胞の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である。

図５はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７およびＴｒｉｔｏｎＸ−１００の細胞毒性を成立させる細胞の比較を示す図である；

図６はＦＣＳ刺激ヒト血管平滑筋細胞への異なる両親媒性ブロックコポリマーの相対的細胞増殖阻害効果を示す図である；

図７は刺激ドブネズミの大動脈平滑筋細胞へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の増殖速度阻害と平滑筋細胞上の受容体に結合する線維芽細胞増殖因子をブロックするＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果の間の相関性を示す図である。

図８はドブネズミ大動脈平滑筋細胞上の受容体に結合する血小板由来増殖因子をブロックするＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果の図である；

図９はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で治療されあるいはされないでハツカネズミに移殖されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞で中空線維中の細胞密度を示す図である；

図１０はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で治療されあるいはされないでハツカネズミに移殖されたＨ６９癌細胞で中空線維中の細胞密度を示す図である；

図１１は異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である；

図１２Ａから１２Ｏは異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である；そして

図１３Ａから１３ＣはＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ８４、Ｆ１２７あるいはＬ１２１に曝露された異なる癌セルラインの生存指標を示す図である。

（詳細説明）
本発明は癌の治療および特に癌細胞の増殖そして分裂増殖を阻害しそして減らすための両親媒性ブロックコポリマーの使用に一般的に関係している。

本発明の活性のある制癌化合物は疎水性及び親水性モノマーの両親媒性ブロックコポリマーである。それ故、ブロックコポリマーは少なくとも一つの水溶解性（親水性）部分と少なくとも一つの低水溶解性あるいは水不溶解性に等しい（疎水性）部分からなっている。提案する望ましいブロックコポリマーでは、主疎水性鎖は少なくとも二つの親水性側鎖により取り囲まれている。さらに望ましくは、主疎水性鎖は少なくとも一つの、望ましくは一つあるいは二つの親水性側鎖に結合する第一端をもち、そして少なくとも一つの、望ましくは一つあるいは二つの親水性側鎖に結合する第二端をもっている。構造式（II）および（III）はこのような望ましい両親媒性ブロックコポリマーを下に図式的に示している。

ここで、Ｘ、Ｘ_１、Ｘ_２およびＺ、Ｚ_１、Ｚ_２はそれぞれの親水性側鎖を表しそしてＹは疎水性主鎖を表す。好ましい実施においては、Ｘ＝Ｚ、そしてＸ_１＝Ｘ_２、Ｚ_１＝Ｚ_２そしてさらに望ましくはＸ_１＝Ｘ_２＝Ｚ_１＝Ｚ_２である。

好ましい実施態様で、本発明の両親媒性ブロックコポリマーは酸化エチレンと酸化プロピレンのブロックコポリマーである。種々の異なるこのようなコポリマーはＢＡＳＦ社からのポリマーＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）およびＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）を含み、現在異なる製造者から利用できる。

手短に言えば、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）は一般構造式（III）をもつ酸化エチレン（ＥＯ）と酸化プロピレン（ＰＯ）のコポリマーである：

望ましい実施態様において、ｎ＝ｐである。

下の表１はＢＡＳＦ社から利用できる種々のＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーでこれは本発明に従って使用される。

技術として知られているように、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）商品名のアルファベット表示は２５℃での商品の物理的な形を示し、ここで“Ｌ”は液体を示し、“Ｐ”はペーストを示しそして“Ｆ”は固体を示す。３００倍した三つの数字の製品名の最初の数字あるいは二つの最初の数字は疎水性主酸化ポリプロピレン鎖のおおよその分子量を示している。最後の数字は、１０倍したとき、ポリマー中のおおよその酸化エチレン含有量（％で）を示している。この酸化エチレン含有量は式（１）から計算できる。

ここで、ｍ、ｎおよびｐは構造式（I）におけると同様に定義される。

もし疎水性すなわち油可溶解性部分（ＰＯ）が過剰に減らされると、すなわち、ｍが小さい整数であると、増殖抑制効果は著しく減る。結論として、本発明のＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーはそれ故、少なくとも約２，０００ｇ／ｍｏｌである疎水性部分をもつ、すなわち、三つの数字の製品名をもつかあるいは製品名の最初の数字が６より大きい表１のこれらのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーである。

付け加えると、大きな親水性含有量をもつＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマー、すなわち、約８０％あるいはそれ以上のおおよその酸化エチレン含有量は試験されたコポリマーの最も小さい効果の制癌効果をもつことがまた示された。これらのコポリマーは表１の製品名の最後の数字に８をもっている。

もしブロックコポリマーの酸化エチレンの含有量が酸化プロピレンの含有量に比べて非常に低いならば、コポリマーは低い水溶解性であるかあるいはそれどころか不溶解性ですらある。このようなブロックコポリマーはそれで非水ベースの溶媒が使用されねばならないため臨床的に有益性は低い。

さらに、構造式（I）のｍ、ｎの両方とpがＬ３１、Ｌ４２、Ｌ４３、Ｌ４４、Ｌ６１そしてＬ６３のように非常に小さいなら、すなわち比較的短い疎水性ブロックコポリマーであれば、ポリマーは癌性および非癌性細胞の両方に毒性となる。結論として、低い医薬剤濃度がこのようなコポリマーに対しては使用されねばならない。

ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーの市販されている望ましい例はＦ１２７、Ｐ８４、Ｐ１０５、Ｐ１２３、Ｆ８７およびＬ１２１そして特にＦ１２７を含んでいる。

実験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーの親水性側鎖の一つを除かれて行われた。この場合には、阻害効果は著しく減るかあるいはひどく失われる。結論として、本発明の望ましい両親媒性コポリマーは疎水性（酸化ポリプロピレン）鎖に結合した少なくとも二つの親水性（酸化ポリエチレン）鎖からなる。

本発明に従って使用される他の関係するコポリマーはＢＡＳＦ社からまた利用できるＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーである。これらのコポリマーは次の構造式（V）によって示される。

下記の表２は利用できるＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーのいくつかの性質を表にしている。

これらのＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーで、ＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）１３０７は本発明に従う市販の望ましい両親媒性コポリマーである。１３０７コポリマーは効果的な制癌効果をもっており、一方、水溶解性でそして非分裂増殖細胞に対して比較的無毒性である。

また他の両親媒性（ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ）（ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ）ブロックコポリマーは本発明に従って使用される。例えば、酸化ポリエチレンのそれぞれの側鎖に結合した主酸化ポリスチレン鎖をもつコポリマーは増殖阻害効果をもっている。かくして、本発明はまた酸化ポリエチレン鎖および多数の酸化ポリエチレン側鎖からなるコポリマー以外に他の両親媒性ブロックコポリマーを包含した。

ＢＡＳＦ社はまたＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）およびＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーに関連する他の関連する両親媒性ブロックコポリマーをもつている。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｒは酸化エチレンおよび酸化プロピレンがＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）に比べて位置を変更されたコポリマーである。言い換えれば、ポリマーは次の一般構造式をもっている：

表３はこのようなコポリマーを表にしている。

同様に、ＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）の酸化エチレンおよび酸化プロピレンが位置を変更したコポリマーはＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｒポリマーで示めされる。表４はＢＡＳＦ社から利用できるこのようなポリマーを表にしている。

コポリマーの分子量がこの文書に記述されるとき、平均の理論的分子量を意味していることは注意されることである。技術に習熟した人によく知られているように、特別のコポリマーの与えられた一群でポリマー分子は全て全く同一のポリマーの長さそして分子量をもっているとは限らない。かくして、与えられた分子量は平均値でありそしてこの平均値の近くに分布している。平均値の近くの分布の同じ議論が、例えば、ポリマーの平均酸化エチレン含有量によって表されるようにコポリマーの親水性に適用する。

本発明のコポリマーは大変低い投与量でさえ体外で癌増殖の効果的な阻害剤である。増殖抑制効果はゆっくり増殖する細胞に比べて急速に増殖する癌においてさらに言明される。付け加えると、少なくとも本発明の両親媒性ブロックコポリマーのいくつかは、もし異なる増殖因子の付加により刺激されないならば、非癌性細胞の機能に影響するいかなる細胞分裂増殖をももたない。

コポリマーは癌セルラインの異なる型の増殖速度を減らしそして正常化するために使用される。さらにコポリマーは高い分裂増殖を正常の増殖速度に下げるように減らし、さらに進行しないと思われる。結論として、非癌性細胞はこれらが既に低い正常増殖速度で分裂増殖しているので影響されない。

癌細胞の増殖速度が一旦減らされると、（ヒトの）患者の免疫システムは癌を除去するために癌細胞をもっと効果的に取扱いできそして除去しようとする。

本発明のコポリマーは突然変異が癌細胞内でおきる速度を防ぐかあるいは少なくとも減らす影響をまたもっている。この発見は突然変異のために、被験者の固有の癌防御機構を避けたりあるいは除去しようとするさらなる傾向がある癌細胞形成の危険性を減らすので特に重要である。

本発明に従って、両親媒性コポリマーは技術において通常の技能として知られる定式化された方法を使用する医薬剤として受け入れられる定式として提供される。これらの定式は標準的なルートで管理される。一般的に、コポリマーは静脈注射、腹腔、皮下、ほほ、直腸、真皮、鼻、経口、気管、気管支、局所的に、医薬剤の許容投薬量の形式で活性成分からなる医薬剤調合の形式で、いずれかの他の特許のルートによりあるいは吸入により投与される。

現在の望ましい投与ルートは静脈内の投与であり、薬剤医療の組成は選択された溶媒の溶液中の本発明の両親媒性コポリマーからなる。

特別な投与の実施において、コポリマーを含む溶液は癌治療を必要としている人に一度あるいは緊急時には望ましくは多数回注射される。例えば、医療用ポンプあるいは他の投与装置から薬剤の連続的あるいは半連続的供給を採用することはまた可能である。また、いわゆるゆっくりの放出による投与は可能でありそして本発明の範囲内である。

他の特別な実施において、腫瘍内のあるいは腫瘍と関連した局所投与は活性な成分の比較的高い局所濃度を認めるために使用される。この局所投与は一つあるいはそれ以上の系統的な投与によって同時に行われる。

通常、調合は望ましくは液体のキャリアーあるいは時には細かく分離された固体キャリアーあるいは両方そしてそれでもし必要であれば製品成型して活性な成分と均一で親密に連携することにより準備される。

非経口的な投与に適した調合は、予定する受容者の血液と等調の調合となる抗オキシダント、緩衝剤、静菌剤および溶質を含む水溶液および非水溶液の殺菌した注射溶液、そして懸濁した薬剤および濃縮した薬剤を含む水溶液および非水溶液の殺菌した懸濁液を含む。調合は単一投与量あるいは複数投与量の容器、例えば、封をしたアンプルおよび水薬びんで供給され、そして殺菌した液体のキャリアー、例えば、使用の直ぐ前に注射用水の追加のみを要求される冷凍乾燥（凍結乾燥）状態で貯蔵される。

特に本発明の水不溶解性コポリマーに対して、水媒体以外の媒体は薬剤を注射するときに使用される。このような媒体の例はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。他の例は水中の油あるいは油中の水の乳濁液を含んでいる。鉱物あるいはＤｒａｋｅｏｌ６ＶＲあるいはＤｒａｋｅｏｌ５（Ｐｅｎｒｅｃｏ、Ｂｕｔｌｅｒ、ＰＡ）のような他の油状物質が懸濁液の油相として使用される。水相は生理機能のあるリン酸塩緩衝生理食塩水あるいは生理機能のある塩溶液である。水に対する油の比は望ましくは約８０：２０と１：１００の間である。

経口投与に適した調合は粉末あるいは微粒として活性成分のあらかじめ決められた量をそれぞれに含むカプセル、オブラートあるいは錠剤として；水溶液体あるいは非水溶液体の溶液、懸濁液、乳濁液として提供される。皮膚への典型的な投与に適した調合は薬剤の受容できるキャリアー内に投与されるための成分を含む軟膏、クリーム、ゲルおよびペーストとして提供される。直腸投与のための調合は、例えば、ココア、バターあるいはサルチル酸塩からなる適当なベースをもつ座薬として提供される。膣投与のための調合は、活性成分に適当である技術として知られたキャリアーを添加して含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡あるいは噴霧調合として提供される。

単位投与量の調合の例は、ここに上記で列挙したように、一日の供与量あるいは単位、一日の半供与量、あるいは投与成分のこれらの適当な分轄を含む調合である。

本発明に従って使用される最大許容投与量は、数あるなかで、特殊な両親媒性ブロックコポリマーの毒性、その制癌効果、すなわち増殖速度の阻害効果、および投与ルートに依存する。両親媒性コポリマーの最大許容濃度は本提供文献の実施例箇所に記載された毒性研究に従って推算される。ハツカネズミあるいはいくつかの他の動物の毒性研究からの結果は技術としてよく知られた技法を使用して、ヒトを含む他の動物の最大許容濃度を推算するためにそれから補正される。例えば、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈ等の投与量換算係数表［１７］が使用される。この換算係数表に従って、約１／１２のハツカネズミからヒトへの換算係数が提案され、もしＸ％の最大ポリマー濃度がハツカネズミに許容されるなら、ヒトにおける相応する推算最大濃度は約Ｘ／１２％であることを意味している。

例えば、ハツカネズミの毒性研究は約３０重量％の最大ポリマー濃度がどのような副作用もなしにハツカネズミに安全に注射できるかを示している。それでこれはヒト投与に対して約２．５重量％に濃度制限に相応する。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）を含む本発明の上記リストの両親媒性コポリマーのいくつかは臨床段階の研究および広範囲の毒性調査を受けている。

ポリマーの投与に使用される濃度は上記の手法に基づき技術に習熟した人により干渉なく決定される。２５、２０、１５あるいは１０重量％以上、あるいは７．５重量％以上のような３０重量％以上、少なくとも０．１重量％のような望ましくは０．００１から５重量％、さらに望ましくは少なくとも０．０１重量％のポリマー濃度が適当な濃度であることが期待される。

適当な濃度は５重量％以下、多分２．５重量％以下そして特に１重量％以下の平均血液濃度を与える濃度である。望ましい濃度範囲は０．０１重量％以上あるいは０．１重量％以上のような０．０００１重量％と１重量％ポリマーの間である。

本発明は動物被検者、望ましくは哺乳類被検者およびさらに望ましくはヒト被検者について使用される。

本発明の活性コポリマーは異なる癌のラインおよび型の腫瘍の増殖速度を減らすために役立つ。本発明は、制限されないで、ヒトの肉腫および癌腫を含むいくつかの異なる型の癌に適用でき、例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、背索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原生癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮癌、胎児性癌、ウイルムス腫瘍、子宮癌、睾丸腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状膠細胞癌、髄芽細胞癌、頭蓋咽頭腫、上皮細胞腫、血管芽細胞腫、乏突起神経膠腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、および急性骨髄性白血病（骨髄芽球性、前骨髄性、骨髄単球性、単球性および赤白血病）、慢性白血病（慢性骨髄性白血病、慢性顆粒性白血病およびリンパ球性白血病）、真性多血症、リンパ腫（ホジキン病および非ホジキン病）、多発性骨髄腫、ワルデンシュトレ−ム型マクログロブリン血症およびＨ鎖病である。

本発明の医薬剤組成は本発明の両親媒性ブロックコポリマーの一つを含む。他の実施態様では、組成は少なくとも本発明の二つの両親媒性ブロックコポリマーを含む。

さらに本発明は伝統的な癌治療技術、例えば、照射、化学療法、ホルモン治療等、患者の癌に打ち勝つために補体として使用される。

本発明のポリマーは他の化学療法薬剤と一緒に優位に使用される。この場合に、少なくとも一つのこのような化学療法薬剤は本発明の少なくとも一つの両親媒性コポリマーの比較投与を同時にあるいは引き続いて投与される。

本発明のコポリマーと一緒に使用される適当な化学療法薬剤の例は次を含む：
・シスプラチン、カルボプラチン、オキサプラチン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシルのようなアルキル化薬剤；
・メトトレキサート、アザチオプリン、メルカプトプリン、チオグアニン、フルダラビン、ペントスタチン、クラドリビン、５−フルオロウラシル、フロクスウラジン、シトシンアラビノシドのような代謝拮抗薬剤；
・ダウノルビシン、ドキソルビシン、エビルビシン、イダルビシン、ミトキサントロンのようなアンスラサイクリン系薬剤；
・ビンクラスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシンのような植物アルカロイド系薬剤；
・エトポシド、テニポシドのようなポドフィロトキシン系薬剤；
・パラシリタキセル、ドセタキセルのようなタキサン系薬剤；そして
・イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド、エトポシドリン酸塩、テニポシドのようなトポイソメラーゼ阻害薬剤

本発明のコポリマーの増殖阻害効果に対する可能な理論はこの中に続く。しかしながら、本発明はこの理論に全ては拘束されない。投与あるいは体外においてコポリマーは癌細胞に到達しそして反応する好ましくは水溶解性である。コポリマーの疎水性部分は細胞膜に浸透しそしてそこに結合する。親水性部分はコポリマーを膜の内に侵入することを防ぐ。これはコポリマーが細胞表面に典型的に固定されることを意味している。膜に固定されると、コポリマーは異なる方法でコポリマーの細胞増殖阻害作用を働かせる。

両親媒性コポリマーは増殖因子に結合しそしてそれによってこれらを不活性にするかあるいは少なくとも癌細胞膜の増殖受容体と結合しそして受容体を活性化することを防ぐ。これは細胞膜上のそれぞれの受容体への線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２、また塩基性ＦＧＦと表示される）および血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）の結合をブロックすることができる本発明の両親媒性ブロックコポリマーの一つの実験において見られる。

付加すると、両親媒性コポリマーは膜内の増殖受容体をブロックしそして細胞内に信号を送るためにしばしば必要であるこれらの受容体が一緒に対になることを防止できた。

付加すると、あるいは代替として、両親媒性コポリマーは増殖受容体と結合しそしてそれによりそれらを不活性化しあるいは少なくともそれらをブロックしそしてそれにより増殖因子を受容体に結合しそして受容体を活性化することを防止する。

本発明の両親媒性ブロックコポリマーのいくつかは以前に制腫瘍剤として使用されてきた。例えば、選択されたＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーおよび酸化ポリエチレンの組み合わせは抗腫瘍剤の毒性を減らしそしてi）血流内の薬剤の安定性を増加し、ii）薬剤をさらに溶解性とし、あるいはiii）細胞膜を横断する薬剤の輸送を改善することにより制癌活性を増加するため使用されていることが知られている［１８］。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ブロックポリマーは薬剤流出輸送体の増殖を含む種々の明らかな薬剤耐性に影響し、酸性小嚢における薬剤隔離を駄目にし、そしてグルチオン／グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ解毒システムを阻害することが知られている。全てのこれらの薬剤耐性の機構はエネルギー依存性でありそしてそれ故多重薬剤耐性癌細胞内でＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ブロックコポリマーにより引き起こされるＡＴＰ（アデノシン三リン酸）の消耗がアントラサイクリン抗生物質およびＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーの一緒にした投与により経験される温熱化学増感に対する理由として考えられる。

しかしながら、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーのような両親媒性ブロックコポリマーが分裂増殖を阻害する形式および癌細胞の増殖速度においてそれ自体で制癌効果をもつことは今までは実現していなかった。このように効果的な制癌薬剤がどのような先行技術の化学療法薬剤なしにそして癌を防ぎそして治療するにことにさらに効果的である本発明の両親媒性ブロックコポリマーからなることは実現されていなかった。

本発明の第一の観点は抗細胞分裂増殖あるいは抗細胞増殖速度薬剤として本発明の両親媒性ブロックコポリマーからなる薬学的組成物に関する。この観点はまた抗細胞分裂増殖あるいは抗細胞増殖薬剤の製造における本発明の両親媒性ブロックコポリマーの使用に関する。本発明は生体外で調整する方法、すなわち、細胞の、望ましくは癌細胞の分裂増殖速度あるいは増殖速度を減らしあるいは阻害すらすることをまたもたらした。この方法は細胞、望ましくは癌細胞と両親媒性ブロックコポリマーと接触することを含んでいる。両親媒性ブロックコポリマーは望ましくは細胞に対して使用される培養保存液に添加される。さらなる実施態様は生体内で調整する方法、すなわち、細胞の、望ましくは癌細胞の分裂増殖速度あるいは増殖速度を減らしあるいは阻害すらすることに関する。方法は本発明の第一の観点に従って被験者に薬学的組成物を投与することを含み、ここではこの被験者は動物被験者、望ましくは哺乳類被験者、そしてさらに望ましくはヒト被験者である。

本発明の第二の観点は、両親媒性ブロックコポリマーがＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８（平均分子量８，４００ｇ／ｍｏｌ、平均酸化エチレン含有量８１．８±１．９％、融点５２℃そして平均Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度１０００ｃｐｓ（７７℃）、そして平均化学構造式ＨＯ−(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)₈₀−(ＣＨ(ＣＨ₃)ＣＨ₂Ｏ)₂₇−(ＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ)₈₀−Ｈ）でない但し書きで癌を治療しそして防止するための化学療法剤として本発明の両親媒性ブロックコポリマーからなる薬学的組成物に関する。他の実施態様はブロックコポリマーがＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８でない但し書きで癌を治療しそして防止するための薬剤の製造に化学療法薬剤（活性制癌剤）として両親媒性ブロックコポリマーの使用に関する。この観点はまた被験者、望ましくは哺乳類被験者、そしてさらに望ましくはヒト被験者の癌を治療しそして防止する方法に関する。方法は被験者に対する第二の観点に従って薬学的組成物を投与することを含む。

本発明の第三の観点は癌にかかった被験者、望ましくは哺乳類被験者そしてさらに望ましくはヒト被験者の癌細胞の増殖速度を減らしあるいは阻害するための本発明の両親媒性ブロックコポリマーからなる薬学的組成物に関する。この観点の実施態様は癌にかかった被験者の癌細胞の増殖速度を阻害しあるいは減らすための薬剤の製造における本発明の両親媒性ブロックコポリマーの使用に関する。この観点はまた癌にかかった被験者の癌細胞の増殖速度を減らす方法に関し、ここで方法は被験者に対する第三の観点の薬学的組成物を投与することを含む。

本発明の第四の観点は。構造式（IV）により表される両親媒性ブロックコポリマーからなる薬学的組成物に関する：

ここでｍ、ｎ及びｐはそれぞれ整数であり、癌が結腸癌あるいは直腸癌でない但し書きで被験者、望ましくは哺乳類被験者そしてさらに望ましくはヒト被験者の癌を治療しそして防止するための望ましくは多様な整数である。実施態様は前記癌が結腸癌あるいは直腸癌でない但し書きで被験者の癌を治療しそして防止するための薬剤の製造における化学療法薬剤として構造式（IV）によって表される両親媒性ブロックコポリマーの使用を教える。この観点はまた被験者に対する第四の観点の薬学的組成物を投与することにより被験者の結腸癌あるいは直腸癌と異なる癌を治療しそして防止する方法に関する。

本発明の第五の観点は生体外の方法を含み、細胞の細胞膜上の増殖因子受容体への増殖因子の結合をブロックする方法に関する。方法は細胞を本発明に従う両親媒性ブロックコポリマーと接触させることからなる。

（実施例）
実験で異なる両親媒性ブロックコポリマーが使用される。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）およびＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーはＢＡＳＦ社から取得された。ＤＯＲＶＡＬ１と表記された両親媒性ブロックコポリマーはＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）の変形であるがしかし主酸化ポリプロピレン鎖を相応するポリスチレン鎖と置換したものである。このブロックコポリマーはＰｏｌｙｍｅｒＳｏｕｒｃｅＩｎｃ．、カナダから注文された。コポリマーは次の図式構造をもつ：(ＥＯ)_ｘ−(Ｓｔ)_ｙ−(ＥＯ)_ｘ、ここでｘ≒７０そしてｙ≒２７、Ｍｎ：ＰＥＯ(３１００)−ＰＳｔ(２８００)−ＰＥＯ(３１００)そしてＭ_ｗ／Ｍ_ｎ＝１．１１。

（乳癌細胞の成長速度阻害）
ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果は生体外で培養したヒト乳癌セルラインの細胞増殖について試験された。増殖速度は^３Ｈ−チミジンの結合で測定された。活動的に増殖する乳癌セルライン、ＭＣＦ−７およびもっと遅く増殖する乳癌セルライン、ＳＫ−ＢＫ−３が試験された。

手短に言えば、約３×１０^４細胞は１０％ＦＣＳ（子ウシ胎児血清）、インシュリン（１ｍｇ／１００ｍＬ）そして１％抗生物質で補足された１．０ｍＬＲＰＭＩ（ＲｏｓｗｅｌｌＰａｒｋＭｅｍｏｒｉａｌ研究所）培養媒地中に２４−ウエルマイクロタイタープレートに内で播種され、夜間中培養された（湿った空気、５％二酸化炭素、３７℃）。一晩培養ののち、媒地は消毒されたＰａｓｔｅｕｒピペットを使用する真空吸引により除去されそしてウエル当り０．１％ＦＣＳで１．０ｍＬＲＰＭＩにより交換された。一晩の培養に続いて、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７および／あるいは１０％ＦＣＳを調整する増殖速度の異なる濃度（０．０１、０．１、０、３、１および２重量％）で補足されたＲＰＭＩが細胞（ｎ＝３）に添加された。制御ウエルおよび１％Ｆ１２７をともなうウエルを除く全てのウエルで、ＦＣＳがまたウエルに添加された。ウエルは約１５時間培養された。

１μＣｉ／ｍＬ^３Ｈ−チミジン（Ａｍｅｒｉｃａｎ−ＰｈａｍａｃｉａＢｉｏｔｅｃｈ）がウエル当り添加されそして４時間培養された。標識化期間の終わりに、培地は除去されそして細胞はＰＢＳ中で２回ゆすがれそして冷却された（４℃）１０％ＴＣＡ（３塩素化酢酸）で１０分間固定された。ＴＣＡはそれから除去されそして単層は９５％エタノールで洗浄されそして室温で２０分間空気乾燥された。

その後、１．０ｍＬ０．２ＭＮａＯＨがウエル当り添加されそして細胞を溶解するため室温で少なくとも１時間培養された。各ウエルの内容物１．０ｍＬは５ｍＬシンチレーション管に４ｍＬＨｉｇｈｓａｆｅ II シンチレーション溶液に希釈された。放射線量がベータ線計測器で測定された。

図１および２に見られるように、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７は両方の乳癌セルラインの増殖を著しく減らした。急速に増殖する癌（ＭＣＦ−７）に最も現れた効果はおおよそ８０％細胞分裂増殖を減らした１％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７であった。ＳＫ−ＢＲ−３にまた現れた効果は増殖がおおよそ６０％減らされたことであった。

増殖刺激ＦＣＳの添加はＳＫ−ＢＲ−３において分裂増殖を増加したがしかしＭＣＦ−７では多分最大速度でＭＣＦ−７それ自身の分裂増殖により増加しない。ＳＫ−ＢＲ−３ではＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果は無刺激細胞に比べてＦＣＳ刺激の細胞では増加した。

ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７は試験した最も低い濃度（０．０１重量％）でさえ分裂増殖の阻害に効果的であつた。

（刺激平滑筋細胞へのＤＮＡ合成阻害）
上記の増殖速度実験はまた男性、ドブネズミおよび兔からの血管平滑筋で体外で行った。実験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７がＤＮＡ合成を阻害したことを男性、ドブネズミおよび兔からの増殖刺激（１０％ＦＣＳの存在）血管平滑筋細胞でチミジンと合体により測定される投薬量依存法で確認した。しかしながら、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７無刺激筋肉細胞の増殖速度に影響しなかった。

短く言えば、大きな血管に対しては、解剖される血管は切り開かれそして内皮はメスでこすり取られた。血管は裏返しさらに外膜がこすり取られた。小さい血管に対しては、内皮は０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で１０秒間血管腔を洗浄することにより除去され、洗浄に続いてＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅｓ’ｓＭｅｄｉｕｍ）培養媒地で洗浄された。

血管は小さい片、約１×１ｍｍにぶった切られた。血管片は１０％ＦＣＳと１％抗生物質で補足されたＤＭＥＭをともなう細胞培養容器に１０日間培養するために移された。ヒト細胞では、ＤＭＥＭ媒地はまた１０％ヒト血清（ＮＨＳ）で補足された。

細胞の通過で、使用済み培養媒地はピペットで取り出され廃棄された。細胞はフラスコにＰＢＳ（１０ｍＬ／７５ｃｍ^２フラスコ）の添加により、細胞単層を混乱させないように注意して、２回洗浄された。単層はフラスコを前後に緩やかに揺り動かすことにより洗浄された。ＰＢＳは除去されそして廃棄された。トリプシン（３．５ｍＬ／７５ｃｍ^２フラスコ）がフラスコに添加されそしてフラスコは全ての単層がトリプシン溶液で覆われることを確実にするよう緩やかに揺り動かされた。

フラスコは細胞が離れ始めるまで３から５分間培養された。３．５ｍＬ１０％ＦＣＳがトリプシンを‘中性化する’ためフラスコ当りに添加されそして溶液は、細胞が単一細胞懸濁液内に分散されるまで、ピペットで取り出しそして入れたりされた。

溶液は３００ｇで５分間遠心分離されそして上澄み液は除去されそして廃棄された。細胞ペレットはＤＭＥＭに溶解されそして２つの新しい培養フラスコに移された。

細胞増殖速度（ＤＮＡ合成）実験は上記の２つの乳癌セルラインに対すると同様な方法でそれから行われた。

図３はヒト血管平滑筋細胞へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の増殖速度調整の結果を図示する。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７はＦＣＳ刺激筋細胞への投薬量依存分裂増殖速度阻害をもつものとみられる。比較した結果はドブネズミおよび兔の血管平滑筋細胞からまた得られた。

比較研究で、Ｆ１２７および他のＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーのＦＣＳ刺激（１０％）平滑筋細胞へのＤＮＡ合成阻害効果が研究された。結果は１０％ＦＣＳで補足された媒地に増殖する制御細胞のＤＮＡ合成（上記のチミジンを基本とする方法を使用して決定される）に標準化された下記表５に示される。試験細胞は１０％ＦＣＳそして１０、１あるいは０．１ｍｇ／ｍＬの濃度のコポリマーで補足された媒地で増殖された。これらの試験で制御細胞のＤＮＡ合成は１００％に設定されそして試験物質は制御細胞のＤＮＡ合成のパーセントとして表現される。

これらの実験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーはＤＮＡ合成を阻害するために使用されることを確認する。実験はまたＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８はこのようなどんな阻害効果ももつようには思えない。最も高い試験濃度（１０ｍｇ／ｍＬ）でＬ３１は細胞を殺す傾向がある。

（刺激平滑筋細胞への細胞増殖阻害）
ＤＮＡ合成の阻害が細胞数、すなわち分裂増殖速度阻害を減らすことによることを確認するために、比色法がＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７治療に続いて細胞数を測定するために使用された。

ドブネズミの大動脈からの血管平滑筋細胞は上記の手順を使用して得られた。１０％ＦＣＳにより補足された２００μＬのＤＭＥＭ中の５，０００のドブネズミの大動脈細胞がＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｏｕｓプレート（Ｐｒｏｍｅｇａ社）中にウエル当り播種された。細胞は約１日間培養された。媒地はピペットで取り出されそして廃棄されそしてウエル当り０．１％ＦＣＳをともなう２００μＬＤＭＥＭにより置換された。

２日後、細胞ＤＭＥＭ媒地（マイナス制御）、１０％ＦＣＳをともなうＤＭＥＭ媒地（プラス制御）、１あるいは５％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７をともなうＤＭＥＭ媒地、あるいは１０％ＦＣＳと１あるいは５％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７をともなうＤＭＥＭ媒地が異なるウエル（ｎ＝３）に添加されＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）非放射性細胞分裂増殖／細胞毒性評価製造社の臨床試験計画表に従って培養された。

ウエルは製造社の臨床試験計画表に従ってＰＢＳで３回洗浄されそして２０μＬのＭＴＳ溶液がそれからウエル当り添加された。プレートは１から４時間培養されそして吸光度が４９０ｎｍで測定された。

結果は図４に図示される。比色法は上述のＤＮＡ合成法を使用して観察されたＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の細胞分裂増殖速度阻害を確認することが図で分かる。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７がＦＣＳの増殖刺激効果を阻害したがしかし無刺激細胞ではどのような効果もなかった。

（細胞仲介細胞毒性）
ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の細胞分裂増殖阻害効果が細胞へのコポリマーのどのような毒性効果によるかどうか決定するために、細胞仲介細胞毒性試験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の細胞毒性試験がＴｒｉｔｏｎＸ−１００、ＰＥＧ１００００および他のＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーＰ１２３に対して比較された場所で実施された。

Ｐｒｏｍｅｇａ社からのＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）非放射性細胞分裂増殖／細胞毒性評価を使用した上述の手順はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７、１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００、１％ＰＥＧ１００００および１％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２３の異なる濃度で使用して実施された。図５はＴｒｉｔｏｎＸ−１００、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の細胞毒性のパーセントで発現した異なるＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７濃度の細胞毒性効果が５％の最も高い試験濃度でさえ細胞毒性を示さないことを図示している。しかしながら、他の試験したＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）ポリマーは比較的顕著な高い細胞毒性を示した。

（両親媒性ブロックコポリマーの比較研究）
ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７以外のＢＡＳＦ会社からのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ３８、Ｆ６８、Ｆ８７、Ｆ９８、Ｐ１０５、Ｆ１０８そしてＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｔ９０８、Ｔ１３０７およびＰｏｌｙｍｅｒＳｏｕｒｃｅＩｎｃ．からのＤＯＲＶＡＬ１を含む他の両親媒性ブロックコポリマーの増殖速度阻害効果が刺激（１０％ＦＣＳ）ヒト血管平滑筋細胞で試験された。

実験は上述で図３に図示されたチミジンベースのＤＮＡ合成実験と同様な方法で、三つの濃度１、０．１、０．０１重量％がブロックコポリマー当り試験された差異で実施された。

増殖速度阻害の結果は図６に示され、そこでは増殖速度は最も高く測定された増殖速度（Ｔ９０８および００１重量％）と比較して標準化された。

最も高い親水性含有量（約９０％）、これはＦ３８、Ｆ６８、Ｆ１０８そしてＴ９０８、をもつコポリマーがＦＣＳ刺激平滑筋細胞に最も低い細胞増殖阻害効果を示したことが図から分かる。コポリマーＦ８７はＦ１２７と同様の効果をもつが、一方、Ｐ１０５は示された実験の設定では最も高い阻害効果を達成した。

（結合実験）
試験実験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の増殖速度阻害効果がドブネズミの大動脈平滑筋細胞のそれぞれの受容体に異なる成長因子の結合のブロックによって仲介されるかどうか決定するために行われた。

前述のように提供されたドブネズミ大動脈細胞はウエル当り約５０００細胞濃度で２４ウエルマイクロタイタープレートのウエルに培養媒地（１０％ＦＣｓ）中に添加された。プレートは一晩培養され細胞はウエル底の層を形成した。培養媒地はそれから０．１％ＦＣＳで補足された培養媒地で置換されそして２日間培養された。

培養媒地はそれから除去されそしてウエルはＰＢＳで２回洗浄された。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の異なる濃度（２、１、０．１、０．０１、０．００１および０．０００１重量％）の１５０μＬのＮａＣｌ溶液が、緩衝溶液（０．２３７モルＮａＣｌ、０．００５４モルＫＣｌ、０．０００４４モルＫＨ_２ＰＯ_４、０．００１２６モルＣａＣｌ_２、０．０００１８モルＭｇＳＯ_４、０．０２０モルＨＥＨＥＳおよび０．３％ＢＳＡ）に希釈された１μＬ^１２５Ｉ−ＦＧＦ２（放射性標識線維芽細胞増殖因子２）あるいは１μＬ^１２５Ｉ−ＰＤＧＦ（血小板由来増殖因子）と一緒に添加されそして３０分間、３７℃で培養された。ウエルはそれからＰＢＳ（リン酸塩緩衝生理食塩水；１０００ｍＬ蒸留水当り０．２ｇＫＣｌ、０．２ｇＫＨ_２ＰＯ_４、１．３５ｇＮａ_２ＨＰＯ_４および８．０ｇＮａＣｌ）で５回洗浄され、それから１ｍＬ０．２モルＮａＣｌがウエル当りに添加されそしてプレートは一晩冷蔵庫に置かれた。放射性標識増殖因子の結合量はそれから従来のガンマ線測定で決定された。

ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）は投薬量依存手法で細胞のこれらのそれぞれの受容体に二つの増殖因子の結合をブロックすることが結論づけられた。追加して図７に図示されるように、そこでは増殖阻害効果とＦＧＦ２結合の阻害に対して要求されるＦ１２７の間に非常に高い相関性がある。図８は放射性標識ＰＤＧＦへのＦ１２７ポリマーの相応する結合ブロック効果を図示する。結論として、細胞膜内の受容体へのこの増殖因子結合のブロッキングは本発明の両親媒性ブロックコポリマーの増殖速度阻害の機構の少なくとも一つである。

（ハツカネズミにおける毒性研究）
実験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５がハツカネズミに静脈投与の後、毒性反応を生じるかどうか試験するために行われた。

１０匹のＮＭＲＩ白色種のハツカネズミ、到着時重量約２５ｇが実験に使用された。動物はＳｃａｎｂｕｒＢＫから取得されそして研究の開始前１週間条件を整えられた。動物は即興的に食物および水を提供された。

活性な物質ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５は、それぞれ１０％溶液に対してＮａＣｌ（９ｍｇ／Ｌ）中にそして５０％溶液に対してＮａＣｌ（９ｍｇ／Ｌ）とＰＥＧ中にコポリマーの重量で１０および５０％の二つの大容積の溶液中に準備された。

動物は五つのグループに分離されそして尾静脈に静脈内投与で５日間１日１回処置された。全てのグループの注射容量は１５０μＬであった。注射は１０秒間実施された。
・グループ１：５０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５（ｎ＝２）
・グループ２：４０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５（ｎ＝２）
・グループ３：３０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５（ｎ＝２）
・グループ４：２０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５（ｎ＝２）
・グループ５：１０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５（ｎ＝２）

体重は最初の投与前そして６日目に記録された。動物は毒性の臨床的兆候（柔毛の質、唾液分泌過多、落涙、下痢、呼吸作用、運動障害、意欲低下、振顫、痙攣および昏睡）を０から３０分間および試験物質の投与後１、２、３，４、８，２４、４８および７２時間目で観察された。

予備的な研究は１０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で処置された２匹のハツカネズミおよび５０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で処置された２匹のハツカネズミで実施された。最も低いＰ１０５で処置された動物はよく繰り返し処置を許容したがしかし５０％Ｐ１０５で処置された動物は第２の注射で既に浮腫および溶血性尾を示した。付加すると、これらの２匹の動物は減少した運動行動を示しそしてその後処置開始後３日で安楽死された。この時点で、４０％、３０％および２０％に生理食塩水で希釈された５０％調合で６匹のハツカネズミを処置することが決定された。

４０％Ｐ１０５で処置された動物は処置期間持続した２日目に尾の僅かの溶血性退色を示した。いくらかの浮腫が注目された。これらの動物はまた減少した重量取得を示した。表６参照。

２０％および３０％希釈で注射された動物は処置をよく耐えることが見いだされた。

（中空ファイバー移殖試験）
試験はＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５がハツカネズミに中空ファイバーモデルで腫瘍細胞増殖を阻害するかどうか調査するため行われた。

１８のＮＭＲＩ白色種の雄ハツカネズミ、到着時重量約２５ｇが実験に使用された。動物はＳｃａｎｂｕｒＢＫから取得されそして研究の開始前１週間条件を整えられた。動物は即興的に食物および水を提供された。

ファイバーの充填はＵｐｐｓａｒａ大学病院、臨床薬学部で実施された。ファイバーは次の腫瘍細胞で負荷された：Ｕ９３６／ｇｔｂをもつ黄色のファイバーおよびＨ６９をもつ青色ファイバー。

毛を剃りそして消毒した後、小さい皮膚の切開が、イソフルラン麻酔のもと、動物の背中になされた。三つのファイバー、二つの黄色と一つの青色が行き当たりばったりの方式で皮下に埋め込まれそして皮膚の切開はとじ金を使用して閉じられた。

動物は三つのグループに分離されそして埋め込み後に直ちに開始し５日間毎日１回尾静脈に静脈注射に従うよう処置された：
・グループ１：１０％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５ＮａＣｌに希釈（ｎ＝６）
・グループ２：２５％ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５ＰＥＧおよびＮａＣｌに希釈（ｎ＝６）
・グループ３：賦形剤（ｎ＝６）

体重は第一の投与前そして安楽死の前に記録された。動物は、例えば、通常の健康状態の変化の兆候のような食物の摂取、活動の変化等の兆候を毎日点検された。ファイバー埋め込み後６日の後、動物はイソフルランで麻酔されそして大凡２５０μＬの血液が血液学のため眼窩叢から取得された。その後、動物は頸椎脱臼により安楽死されそしてファイバーは抜き出されそして細胞密度および生存性を評価する前に細胞培養媒地（３７℃）中に置かれた。

統計的評価がＷｉｎｄｏｗｓ(登録商標)ＸＰでＨＰＣｏｍｐａｃｄｘ２０００計算機を使いＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ改訂４（ＧｒａｐｈＰａｄＳｏｆｔｗａｒｅＩｎｃ．、ＳａｎＤｉｅｇｏ、Ｕ．Ｓ．）を使用して実施された。Ｔｕｋｅｙ多重比較検定の一元配置分散分析が処置グループ間の血液学変数における統計的差異を検定するために使用された。対応のあるｔ検定が処置前後の体重の差異を統計的に検定するために使用された。

どの動物にも健康状況に変化の明白な兆候はなかった。処置前後の体重に関してグループ間に統計的に顕著な差異はなかった。

グループ間の統計的に顕著な差異は血液学パラメーターＲＢｓ（ｐ＝０．０１２７、グループ１対グループ３およびグループ２対グループ３）、ＨＧＢ（ｐ＝０．０２１、グループ１対グループ３およびグループ２対グループ３）そしてＰＬＴ（ｐ＝０．０００６、グループ１対グループ３およびグループ２対グループ３）で発見された。表７参照。

ファイバーの細胞密度は制御されたものと比較してＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５の高い投薬量で処置されたファイバーを含むＵ９３７／ｇｔｂ中で顕著に減少した（ｐ<０．０５）。図９参照。同様の傾向はＰ１０５の低い投薬量で処置された動物の細胞埋め込みに対してもまた観察された。平均細胞密度を低くする傾向はコポリマーで処置された動物のＨ６９セルラインに対して観察された。図１０参照。

（コポリマーの細胞毒性活性の体外評価）
現在の研究は異なるＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）およびＴＥＴＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーの細胞毒性活性を調査することを目的としている。モデルシステムとして、１０の選択されたヒト腫瘍セルラインおよび一つの追加された前立腺癌セルラインのパネルを定義するウエルが使用された。敏感なリンパセルラインＵ９３７／ｇｔｂで選定したのち選択された三つの化合物が全てのセルラインにおいて調査されている。

この研究に使用したモデルシステムはヒト腫瘍セルラインのセルラインパネルである［３］。この概念はアメリカ合衆国の国立癌研究所（ＮＣＩ）から始まり、ここでは大凡６０の異なるセルライン（ヒト癌の形式を最も示している）が新しい化合物の活性の輪郭を定義するために通常使用される［４］。セルラインパネルは相関分析の使用により特別の機構グループ（例えば、代謝拮抗剤、アルキレーター、トポイソメラーゼII阻害剤）に関連づけられるため薬剤を上手く分類できる。細胞毒性薬剤耐性の定義された種類を示すヒト腫瘍セルラインのさらに制約された数（１０）が最初の評価および制癌剤の予備的機構分類のために上手く利用される［６］。

腫瘍細胞は細胞毒性薬剤に耐性を得ることができ、そして知られている耐性機構の例は、細胞の解毒システムの活性を増加し、チューブリンの結合／機能と薬剤の細胞内再配置を変更すると同様にトポイソメラーゼII（トポII）のような核指標酵素の機能を変更するＰ糖蛋白質（Ｐｇｐ）および多剤耐性関連蛋白質（ＭＲＰ）である。使用されるセルラインパネルはこれらの表現型のいくつかを発現するセルラインを含んでいる［３］。

薬剤の排出ポンプ、例えば、ＰｇｐおよびＭＲＰは基質に対して低い特異性を示しそしてかくして種々の分類の薬剤、例えば、ツルニチソウアルカロイド、アンスラサイクリン、タキサン、エピポドフィロトキシンそして他の薬剤に対して感度を減少するように寄与する［７］。

ヒト腫瘍細胞の最初の培養は新しい薬剤を選定しそして開発の状況に比較的に注目を受けていない代わりのモデルシステムである。しかしながら、異なる腫瘍から最初の培養を実施される体外評価は臨床腫瘍型の特別な活性に良く相関することが証明されている［８］。

異なる細胞毒性薬剤を組み合わせそして薬剤の理解をあるいは薬剤の効果を増加する化合物を含む薬剤調合の創造は癌化学療法において進展している分野である。薬剤の相互作用に関する前臨床研究を実施しそして説明する数多くの方法が提案されてきている。単一の薬剤およびこれらの組み合わせが固定濃度で利用されるとき、“多重増殖概念”（追加的モデル）が一般的に使用される。ここで、追加的相互反応は単一の薬剤の生存断片の生成物に等しい生存断片となり、薬剤の独立した反応を示す二つの薬剤の組み合わせと定義される。［９］。もし組み合わせの効果が添加効果に打ち勝つならば、相互反応は相互作用である。

薬剤の活性パターンを評価するために、異なる耐性の機構を示す四つの感度のある親のセルライン、五つの薬剤耐性サブラインのヒトセルラインパネルおよび初期耐性をもつ一つのセルラインが使用された。含まれたセルラインは、骨髄種セルラインＰＲＭＩ８２２６／Ｓおよびそのサブライン８２２６／Ｄｏｘ４０および８２２６／ＬＲ−５（Ｗ．Ｓ．Ｄａｌｔｏｎ、アリゾナ大学アリゾナ癌センター薬学部、Ｔｕｃｓｏｎ、ＡＺの好意の寄贈品）、白血病セルラインＵ−９３７／ｇｔｂおよびＵ−９３７−Ｖｃｒ（Ｋ．Ｎｉｌｓｓｏｎ、スエーデン、ウプサラ大学、病理学部の好意の寄贈品、）、ＳＣＬＣセルラインＮＣＩ−Ｈ６９およびそのサブラインＨ６９ＡＲ（アメリカ型培養収集（ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）；ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ）、腎臓の腺癌セルラインＡＣＨＮ（ＡＴＣＣ）および白血病細胞ラインＣＣＲＦ−ＣＥＭそしてそのサブラインＣＥＭ／ＶＭ−１（Ｗ．Ｔ．Ｂｅｃｋ、テネシー大学、医学単科大学、薬学部の好意の寄贈品）であった。

８２２６／Ｄｏｘ４０はドキソルビシン耐性に対して選択されそしてＰ糖蛋白質（Ｐｇｐ）の過剰出現をともなう古典的ＭＤＲ表現型を示す［１０］。８２２６／ＬＲ−５はメルファラン耐性に対して選択されそしてＧＳＨの増加した水準と関連されると提案された。Ｕ−９３７−Ｖｃｒはビンクリスチン耐性に対して選択されそしてチューブリンに関連されると提案された［１２］。ドキソルビシン耐性に対して選択されたＨ６９ＡＲはＭＲＰにより調整されると提案されたＭＤＲを発現する［１３］。テニポシド耐性に対して選択されたＣＥＭ／ＶＭ−１はトポイソメラーゼII（トポII）に関連されるよう提案される単型ＭＤＲを発現する。初期耐性のＡＣＨＮセルラインに対する耐性の正確な機構は知られておらずそして多重競合である。

セルラインは以下に記述するように３７℃、５％二酸化炭素を含む加湿大気中で完全な培養媒地中で増殖された。８２２６／Ｄｏｘ４０は０２４μｇ／ｍＬのドキソルビシンで月に一度処置されそして８２２６／ＬＲ−５は１．５３μｇ／ｍＬメルファランで媒地の変更毎に処置された。Ｕ−９３７−Ｖｃｒはビンクリスチンの１０ｎｇ／ｍＬの存在のもとで連続的に培養されそしてＨ６９ＡＲは薬剤の含まない媒地およびドキソルビシンの０．４６μｇ／ｍＬを含む媒地で交互に供給された。ＣＥＭ／ＶＭ−１セルラインは６から８月間耐性のどのような損失もなしに薬剤を含まない媒地中で培養された。セルラインの耐性パターンは制御実験において定期的に確認された。

ヒト前立腺癌ＰＣ−３細胞はアメリカ型培養収集（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ）から取得された。これらは１０％胎児のウシ亜科の血清、ペニシリンＧおよびストレプトマイシンで補足したＤｕｌｂｅｃｃｏの調整Ｅａｇｌｅ媒地中で増殖された。

１０％非活性化されたＦＣＳで補足された炭酸塩緩衝培養媒地ＲＰＭＩ−１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅ、Ｃｒａｍｌｉｎｇｔｏｎ、ＵＫ）、２ミリモルグルタミン、、ストレプトマイシンの５０μｇ／ｍＬ、そしてペニシリンの６０μｇ／ｍＬを含む完全な媒地がセルラインに対して終始使用された。ＦＤＡ（Ｓｉｇｍａ、ＳｔＬｏｕｉｓ、ＭＯ）がＤＭＳＯに溶解されそして光から防御された貯蔵溶液として冷凍保存（−２０℃）された。

試験化合物は次の表９に従って溶解された。

初期の選定の主な部分は塩化ナトリウムとエタノールのみに溶解された物質（Ｆ１２７およびＦ６８）の最初の一群でのみで作られた。いくつかの実験で、活性は塩化ナトリウムとエタノールに溶解されたコポリマーそしてＰＥＧとエタノールに溶解されたコポリマーの間で比較され、そしてそこには顕著な効能の差異はなかった。簡単にするため全ての受領した水薬びん中の試験物質濃度は５０重量％と仮定される。これらからの希釈は溶液を清浄にするためリン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳ：ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ）でなされた。

腫瘍細胞は約２０，０００細胞／ウエルの細胞密度で９６−ウエルプレートを準備された薬剤中で播種された。

ＦＤＡの加水分解から完全な血漿膜をもつ細胞により蛍光を発生する蛍光を測定することに基づく蛍光測定微小培養細胞毒評価（ＦＭＣＡ）および詳細に以前に記述されたように［１６］使用された。プレートは３７℃、二酸化炭素５％を含む湿度大気で、７２時間培養された。培養期間の終わりにプレートは遠心分離され（１０００ｒｐｍ、５分間）そして媒地は吸引で除去された。ＰＢＳで一度洗浄されたのち、生理学緩衝液（１０μｇ／ｍＬ）に溶解されたＦＤＡの１００μＬ／ウエルが添加された。プレートは４５分間培養されそしてそれぞれのウエルから発生した蛍光が９６−ウエル走査蛍光分析計で測定された（Ｆｌｕｏｒｏｓｃａｎ II、ＬａｂｓｙｓｔｅｍｓＯｙ、Ｈｅｌｓｉｎｋｉ、Ｆｉｎｌａｎｄ）。蛍光度はウエル中の正常細胞の数に比例している。

成功した分析の品質標準は、５回平均ブランク値よりも大きい制御ウエルの蛍光度信号、培養に先立ち細胞準備において３０％より少なくそして７０％腫瘍細胞よりも大きい制御ウエルの平均変動係数（ＣＶ）を含んだ。実験は２回実施せれ、平均値は一貫して使用される。

細胞の生存は制御ウエルの蛍光度のパーセントで実験ウエルの蛍光度として引き算されたブランクウエルの値で、定義された生存指標（ＳＩ）として表される。全てのセルライン実験は少なくとも２回実施され、そして全てのデータは分析に含まれた。

セルラインパネル実験からのデータは最も一般的に使用される細胞毒性薬剤を含む１５０以上の異なるデータベースと比較された。この目的のため、ＩＣ５０は全ての薬剤およびセルラインに対して計算され、単純対数−直線回帰を使用する５０％生存指標を導く薬剤濃度として定義された。各薬剤に対する１０のＩＣ５０値のセットがデータベースの全ての他の薬剤から相応するデータのセットとピアソン相関係数を用いて相関された。これらのＩＣ５０から活性パターンはＤｅｌｔａを使用してまた表示され、セルラインパネルの平均ｌｏｇＩＣ５０から一つのセルラインのｌｏｇＩＣ５０の偏差として定義された。これらの計算は国立癌研究所（ｗｗｗ．ｄｔｐ．ｎｃｉ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）で使用される手順から修正されたＤｈａｒ等に従って実施された。

両方のセルラインパネルから濃度−効果データがＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウエア（ＧｒａｐｈＰａｄＳｏｆｔｗａｒｅ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）の非線型回帰を使用して変動勾配でＳ状結腸投与量応答式に適合された。０および１００細胞生存は、それぞれ、最大効果とベースラインとしてセットされそしてＥＣ５０（５０％効果を与える濃度）は曲線の適合によって示された。耐性因子はセルライン対における耐性および親のセルラインにおけるＥＣ５０間の比として計算された。

化合物は−７０℃で４週間貯蔵後これらの細胞毒性活性を保持した。濃度−効果曲線は４週間保存されたプレートを使用するときそして新しく準備したプレート（図示されない）を使用するとき同様であった。

Ｕ９３７ｇｔｂの全ての試験された化合物に対する濃度−効果曲線は図１１に示される。比較試験コポリマーは図１２Ａから１２Ｏに独立して描かれる。ＩＣ５０値は下の表１０に示される。ＮａＣｌ／ＥｔＯＨおよびＰＥＧ／ＮａＣｌ／ＥｔＯＨに溶解された試料が比較されたとき、同様な結果が得られた（示されない）。

もう一度、結果は平均約８０％の親水性含有量のＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）コポリマーははるかに最も低い制癌効果をもつことを確認した。全てのセルラインに対するＥＣ５０は表１１から選ばれた三つの最も高い効果のあるコポリマーに対して表１１に表示される。図１３Ａから１３Ｃは結果のグラフ表示である。

物質は０．００１６重量％の最低濃度に低くして試験された。これ以下のＥＣ５０値は曲線の外挿をした直線回帰解析からの評価である。曲線の適用が不適当でそして最低濃度で細胞の大多数が死んだとき、ＥＣ＜＜０．００１６が使用された。

種々の修正および変更が付属する特許請求項により定義される範囲から逸脱しないで本発明がなされることは技術を習得した人によって理解される。

（参考文献）
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ヒトの乳癌セルラインＭＣＦ−７の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である。ヒトの乳癌セルラインＳＫ−ＢＲ−３の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である。ＦＣＳ刺激ヒト血管平滑筋細胞の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を図示する。無刺激でそしてＦＣＳ刺激ドブネズミの大動脈平滑筋細胞の増殖速度へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果を示す図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７およびＴｒｉｔｏｎＸ−１００の細胞毒性を成立させる細胞の比較を示す図である。ＦＣＳ刺激ヒト血管平滑筋細胞への異なる両親媒性ブロックコポリマーの相対的細胞増殖阻害効果を示す図である。刺激ドブネズミの大動脈平滑筋細胞へのＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の増殖速度阻害と平滑筋細胞上の受容体に結合する線維芽細胞増殖因子をブロックするＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果の間の相関性を示す図である。ドブネズミ大動脈平滑筋細胞上の受容体に結合する血小板由来増殖因子をブロックするＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ１２７の効果の図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で治療されあるいはされないでハツカネズミに移殖されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞で中空線維中の細胞密度を示す図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ１０５で治療されあるいはされないでハツカネズミに移殖されたＨ６９癌細胞で中空線維中の細胞密度を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。異なる両親媒性ブロックコポリマーに曝露されたＵ９３７／ｇｔｂ癌細胞の生存指標を示す図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ８４、Ｆ１２７あるいはＬ１２１に曝露された異なる癌セルラインの生存指標を示す図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ８４、Ｆ１２７あるいはＬ１２１に曝露された異なる癌セルラインの生存指標を示す図である。ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｐ８４、Ｆ１２７あるいはＬ１２１に曝露された異なる癌セルラインの生存指標を示す図である。

Claims

両親媒性ブロックコポリマーが構造式（V）によって表されるコポリマーでないという条件で癌を治療しあるいは防止するための薬剤の製品において化学療法薬剤として前記両親媒性ブロックコポリマーの使用：

ここで、ａおよびｂはコポリマーが８，４００ｇ／ｍｏｌの平均分子量、８１．８±１．９％の平均酸化エチレン含有量、５２℃の融点および７７℃で１，０００ｃｐｓの平均Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度をもつように定義される。
構造式（V）によって表される前記コポリマーがＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｆ６８である請求項１に従う使用。
癌を被った被験者における癌細胞の増殖速度を減らすための薬剤の製品に両親媒性ブロックコポリマーの使用：
制細胞分裂増殖薬剤の製品に両親媒性ブロックコポリマーの使用：
前記両親媒性ブロックコポリマーが、少なくとも一つの親水性ポリマー側鎖に結合する第１端および少なくとも一つの親水性ポリマー側鎖に結合する第２端をもつ主疎水性ポリマー鎖をもつ請求項１から４のいずれかに従う使用：
前記両親媒性ブロックコポリマーが構造式（I）によって表される請求項５に従う使用：

ここで、ｍ、ｎおよびｐはそれぞれ整数である。
構造式（I）によって表される両親媒性ブロックコポリマーの使用：

ここで、ｍ、ｎおよびｐは前記癌が結腸癌あるいは直腸癌でないという条件で被験者における癌を治療しあるいは防止するための薬剤の製品において化学療法薬剤としてそれぞれ整数である。
ｎがｐに等しい請求項６あるいは７に従う使用。
前記両親媒性ブロックコポリマーの平均酸化エチレン含有量が少なくとも４０重量％である請求項６から８のいずれかに従う使用。
前記両親媒性ブロックコポリマーの平均酸化エチレン含有量が８０重量％以下である請求項６から９のいずれかに従う使用。
前記両親媒性ブロックコポリマーの平均酸化プロピレン含有量が少なくとも２，０００ｇ／ｍｏｌである請求項６から１０のいずれかに従う使用。
前記平均酸化ポリプロピレン含有量が少なくとも３，０００ｇ／ｍｏｌである請求項１１に従う使用。
前記平均酸化ポリプロピレン含有量が３，５００から４，５００ｇ／ｍｏｌの範囲にあり、望ましくは約４，０００ｇ／ｍｏｌである請求項１２に従う使用。
前記両親媒性ブロックコポリマーが１２，６００ｇ／ｍｏｌの平均分子量、７３．２±１．７％の平均酸化エチレン含有量および５６℃の融点をもつ請求項６から１３のいずれかに従う使用。
前記癌が腎臓癌、肺癌、骨髄腫、リンパ腫および前立腺癌からなるグループから選ばれる請求項１４に従う使用。
前記薬剤が単独の化学療法薬剤として前記両親媒性ブロックコポリマーあるいは少なくとも二つの両親媒性ブロックコポリマーの混合物を含む請求項１から１５のいずれかに従う利用。
細胞の分裂増殖速度を調整する体外の方法であって、前記方法は前記細胞を両親媒性ブロックコポリマーと接触することを含む。
前記細胞が癌細胞である請求項１７に従う方法。
細胞の細胞膜上の増殖因子受容体に増殖因子の結合をブロックする方法であって、前記方法は前記細胞を両親媒性ブロックコポリマーと接触することを含む。
前記増殖因子が線維芽細胞増殖因子あるいは血小板由来増殖因子である請求項１９に従う方法。