JP2009530598A - 化学的検知装置 - Google Patents
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Abstract
本発明は、化学的検知法、特に全血試料中の被分析物を検出する方法に関する。この方法は、要約すれば、該試料を、テザー試薬を有する変換器に露出する工程、標識を付けた試薬を導入する工程、該試料を一連の600nm以上の波長における電磁放射線パルスで照射する工程、および電気的信号を変換し、各パルス間の時間遅延を検出する工程を含んでなる。標識を付けた試薬上の標識が、使用する電磁放射線の波長における全血試料の吸収と少なくとも等しいレベルで電磁放射線を吸収する。
Description
該試料を、パイロ電気的またはピエゾ電気的素子および電極を有し、エネルギーの変化を電気的信号に変換できる変換器に露出する工程と、
ここで該変換器は、少なくとも一種のテザー(tethered)試薬を該変換器の上または近くに有し、該少なくとも一種のテザー試薬は、該被分析物を結合できる結合箇所を有し;
標識を付けた試薬を試料中に導入する工程と、
ここで該標識を付けた試薬は、該被分析物または該テザー試薬のための結合箇所、および放射線源により発生した電磁放射線を吸収し、無放射減衰によりエネルギーを発生することができる標識を含み;
該試料を一連の600nm以上の波長における電磁放射線パルスに照射し、発生したエネルギーを電気的信号に変換する工程と;
該電気的信号および該放射線源から来る各電磁放射線パルスと該電気的信号の発生との間の時間遅延を検出する工程
を含んでなる方法であり、
ここで、各電磁放射線パルスと該電気的信号の発生との間の時間遅延が、該変換器の表面からの異なった距離における一つ以上の位置のいずれかにおける該標識を付けた試薬の位置に対応し、該標識を付けた試薬上の該標識が、該標識が該電磁放射線を、使用する該電磁放射線の該波長における該全血試料の吸収に少なくとも等しいレベルで吸収するように選択される、方法を提供する。
(i) 分散した粒子を含む液体試料中の被分析物を検出するための装置であって、600nm以上の波長で一連の電磁放射線パルスを発生するように設計された放射線源と、パイロ電気的またはピエゾ電気的素子および電極を有し、エネルギーの変化を電気的信号に変換できる変換器と、該変換器の上または近くにある少なくとも一種のテザー試薬であって、該被分析物を結合できる結合箇所を有するテザー試薬と、該試料を変換器と流体接触しながら保持するための閉じ込め構造と、該変換器により発生した該電気的信号を検出することができ、該放射線源から来る各電磁放射線パルスと該電気的信号の発生との間の時間遅延を決定するように設計された検出器とを含んでなる、装置、並びに、
(ii) 該被分析物または該テザー試薬に結合する結合箇所、および放射線源により発生した電磁放射線を吸収し、無放射減衰によりエネルギーを発生することができる標識を有する標識を付けた試薬であって、該標識を付けた試薬上の該標識が、該標識が該電磁放射線を、使用する該電磁放射線の該波長における該全血試料の吸収に少なくとも等しいレベルで吸収するように選択される、標識を付けた試薬。
ニトロセルロース被覆したピエゾ電気的被膜の表面上で実験を行い、被膜に隣接する溶液中における、抗体で標識を付けた粒子の存在を検出する。実験中、液体はニトロセルロース表面上に拘束する。被膜を重合させたストレプトアビジンの、PBS(ホスフェート緩衝食塩水)pH7.2中、濃度20μg/mlの溶液中に一晩浸漬する。PBS/Tween 0.05%によるすすぎ/洗浄工程の後、ビオチニル化したマウスの抗体を加え、1時間培養する。過剰のマウス抗体をすすいで除去した後、専用の(proprietary)安定剤を使用して表面を安定化させる。
ニトロセルロース被覆したPVDF被膜の表面を例1と同じ様式で被覆する。
例3は、全血の存在下で例2を繰り返し、同様の信号が発生する。
Claims (29)
- 全血試料中の被分析物を検出する方法であって、
前記試料を、パイロ電気的またはピエゾ電気的素子および電極を有し、エネルギーの変化を電気的信号に変換できる変換器に露出する工程と、
ここで前記変換器は、少なくとも一種のテザー試薬を前記変換器の上または近くに有し、前記少なくとも一種のテザー試薬は、前記被分析物を結合できる結合箇所を有し;
標識を付けた試薬を前記試料中に導入する工程と、
ここで前記標識を付けた試薬は、前記被分析物または前記テザー試薬のための結合箇所、および放射線源により発生した電磁放射線を吸収し、無放射減衰によりエネルギーを発生することができる標識を含み;
前記試料を一連の600nm以上の波長における電磁放射線パルスに照射し、発生した前記エネルギーを電気的信号に変換する工程と;
前記電気的信号および前記放射線源から来る各電磁放射線パルスと前記電気的信号の発生との間の時間遅延を検出する工程
とを含んでなり、
各電磁放射線パルスと前記電気的信号の発生との間の時間遅延が、前記変換器の表面からの異なった距離における一つ以上の位置のいずれかにおける前記標識を付けた試薬の位置に対応し、
前記標識を付けた試薬上の前記標識が、前記標識が前記電磁放射線を、使用する前記電磁放射線の前記波長における前記全血試料の吸収に少なくとも等しいレベルで吸収するように選択される、方法。 - 前記少なくとも一種のテザー試薬が抗体であり、前記被分析物が抗原である、請求項1に記載の方法。
- 前記標識を付けた試薬が標識を付けた抗体である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が抗体であり、前記被分析物が抗原であり、前記標識を付けた試薬が、前記少なくとも一種のテザー試薬に結合することもできる、標識を付けた抗原であり、かつ、前記検出器により検出される前記電気的信号が、前記試料中にある前記被分析物の存在に逆比例する、請求項1または2に記載の方法。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が第一の核酸であり、前記被分析物が第二の核酸であり、かつ、前記第一および第二核酸が相補的である、請求項1に記載の方法。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬がアビジンまたはその誘導体を含み、前記被分析物がビオチンまたはその誘導体を含むか、もしくはその逆である、請求項1に記載の方法。
- 前記標識を付けた試薬上の前記標識が、染料分子、金粒子、着色重合体粒子、蛍光分子、酵素、磁性粒子、炭素粒子および非伝導性コア材料および少なくとも一つの金属シェル層を含んでなるナノ粒子から選択される、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記時間遅延が少なくとも1ミリ秒間である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- 前記時間遅延が500ミリ秒間以下である、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記電磁放射線が、光、好ましくは可視光である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が、前記変換器の上に吸着されている、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記標識が、粒子径50〜250nmを有する金粒子である、請求項12に記載の方法。
- 前記電磁放射線の波長が610nm以上である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
- 前記電磁放射線の波長が654nmである、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
- 下記(i)および(ii)を含んでなる、キット:
(i) 分散した粒子を含む液体試料中の被分析物を検出するための装置であって、
600nm以上の波長で一連の電磁放射線パルスを発生するように設計された放射線源と、
パイロ電気的またはピエゾ電気的素子および電極を有し、エネルギーの変化を電気的信号に変換できる変換器と、
前記変換器の上または近くにある、少なくとも一種のテザー試薬であって、前記被分析物を結合できる結合箇所を有する、テザー試薬と、
前記試料を前記変換器と流体接触しながら保持するための閉じ込め構造と、
前記変換器により発生した前記電気的信号を検出することができ、前記放射線源から来る各電磁放射線パルスと前記電気的信号の発生との間の時間遅延を決定するように設計された検出器
とを含んでなる、装置、並びに
(ii) 前記被分析物または前記テザー試薬に結合する結合箇所、および放射線源により発生した電磁放射線を吸収し、無放射減衰によりエネルギーを発生することができる標識を有する、標識を付けた試薬であって、
前記標識を付けた試薬上の前記標識が、前記標識が前記電磁放射線を、使用する前記電磁放射線の前記波長における前記全血試料の吸収に少なくとも等しいレベルで吸収するように選択される、標識を付けた試薬。 - 前記少なくとも一種のテザー試薬が抗体であり、前記被分析物が抗原である、請求項15に記載のキット。
- 前記標識を付けた試薬が標識を付けた抗体である、請求項15または16に記載のキット。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が抗体であり、前記被分析物が抗原であり、前記標識を付けた試薬が、前記少なくとも一種のテザー試薬に結合することもできる、標識を付けた抗原であり、前記検出器により検出される前記電気的信号が、前記試料中にある前記被分析物の存在に逆比例する、請求項15または16に記載のキット。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が第一の核酸であり、前記被分析物が第二の核酸であり、前記第一および第二核酸が相補的である、請求項15に記載のキット。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬がアビジン、ストレプトアビジン、またはその誘導体を含み、前記被分析物がビオチンまたはその誘導体を含むか、もしくはその逆である、請求項15に記載のキット。
- 前記標識を付けた試薬上の前記標識が、染料分子、金粒子、着色重合体粒子、蛍光分子、酵素、磁性粒子、炭素粒子および非伝導性コア材料および少なくとも一つの金属シェル層を含んでなるナノ粒子から選択される、請求項15〜20のいずれか一項に記載のキット。
- 前記時間遅延が少なくとも20ミリ秒間である、請求項15〜21のいずれか一項に記載のキット。
- 前記時間遅延が500ミリ秒間以下である、請求項15〜22のいずれか一項に記載のキット。
- 前記電磁放射線が光、好ましくは可視光である、請求項15〜23のいずれか一項に記載のキット。
- 前記少なくとも一種のテザー試薬が、前記変換器の上に吸着されている、請求項15〜24のいずれか一項に記載のキット。
- 前記閉じ込め構造がウェルである、請求項15〜25のいずれか一項に記載のキット。
- 前記装置が横方向フロー装置であり、前記閉じ込め構造が多孔質材料である、請求項15〜25のいずれか一項に記載のキット。
- 前記電磁放射線の波長が610nm以上である、請求項15〜227のいずれか一項に記載のキット。
- 前記電磁放射線の波長が654nmである、請求項15〜28のいずれか一項に記載の方法。
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