JP2009221154A - インタ−ロイキン−６産生抑制剤 - Google Patents

Abstract

【課題】紫外線暴露により誘発される炎症を予防乃至は改善する好適な皮膚外用剤の提供。
【解決手段】下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体（好ましくはピロロキノリンキノン）及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、IＬ−６産生抑制剤。前記ＩＬ−６産生抑制剤は、紫外線暴露により誘発される炎症の予防乃至は改善に使用する。

（１）
【選択図】図１

Description

本発明は、インタ−ロイキン−６（以下、本明細書中では「ＩＬ−６」と略す場合がある）産生抑制剤及びこれを含有する皮膚外用剤に関し、詳しくは、ピロロキノリンキノン誘導体及びそれらの薬理学的に許容される塩からなるＩＬ−６産生抑制剤、及び、これらを含有する、紫外線暴露により誘発される炎症を抑制するのに好適な皮膚外用剤に関する。

身体全体を覆っている皮膚は、紫外線照射、化学物質の暴露、温度や湿度の変化、やほこりなどの外部刺激により、様々なダメ−ジを受けている。特に、紫外線照射は、日焼けに加え、しわ・しみ・たるみ等の皮膚老化を早めたりするほか、過度に紫外線を暴露した場合には、やけどや火ぶくれを伴う炎症、さらには皮膚ガンを引き起こす原因となる。

従来の化粧料、医薬品、食品等には、紫外線照射による炎症を予防・改善することを目的とし、ジブチルヒドロキシトルエン（BHT）、ジブチルヒドロキシアニソ−ル（BHA）等の合成抗酸化剤、または、α−トコフェロ−ル、アスコルビン酸等の天然物由来の抗酸化剤等の様々な抗酸化剤が用いられてきたが、皮膚炎症の予防・改善に対する効果は十分とは言えなかった。一般的に、抗酸化剤は安定性面に課題を有することが多い。また、化学的に合成された上記抗酸化剤は、抗酸化剤そのものに加え、分解物の安全性に関しても懸念が残る。このため、高い安定性と安全性を確保しながら、紫外線照射により誘発される炎症に対して顕著な抑制効果を示す物質の提供が切望されている。この様な望ましい特性を併せ持つ化合物は、安定な化学構造を有し、抗酸化作用以外の作用機序または抗酸化作用を含む複数の作用機序により抗炎症作用を発現する化合物を見出すことにより達成される。

ＩＬ−６は、幾つかの腫瘍細胞株の他、B細胞、T細胞、単球、並びに線維芽細胞等の多様な細胞により産生されるサイトカインであり、正常な免疫応答や生体防御において中心的な役割を果たしている（例えば、非特許文献１、非特許文献２、非特許文献３を参照）。ＩＬ−６の産生亢進又は低下、更には、ＩＬ−６に対する反応性の異常は、ヒト炎症、自己免疫、および腫瘍性疾患等の病態形成・悪化に関する関連性が示唆されており（例えば、非特許文献４、非特許文献５を参照）、ＩＬ−６生物活性を調節する薬剤の創出により、前記疾患群に対する有効な治療薬開発が期待されている。特に、抗炎症薬については、様々なステロイド系または非ステロイド系抗炎症薬が開発されているが、必ずしも満足のいく治療効果が得られていない。特に、著効を示すステロイド系抗炎症薬は、長期に渡る投与により望ましくない副作用（例えば皮膚の劣化、副腎皮質の抑制等）を示すことも報告されている。しかしながら、本発明のＩＬ−６産生抑制物質は、ステロイド系抗炎症薬との作用機序の違いにより、このような副作用を示さないことが期待される。特に、IＬ−６は、紫外線などの照射後、この刺激を受けて炎症因子が放出され、炎症が著しいものになる、所謂、フレ−ムアップに関与し、ひいては、紫外線障害から癌が誘導される過程にも関与していることが知られており（例えば、非特許文献６を参照）、紫外線の影響を早期に抑制する技術開発が望まれていた。

さらに、ピロロキノリンキノン誘導体、特にピロロキノリンキノン（PQQ）は、メタノ−ル資化性菌の代謝産物より単離同定された物質であり、真核生物のカビ、酵母、さらには、哺乳動物にも存在することが確認されている。その生物活性としては、細胞の増殖促進作用（例えば、特許文献１を参照）、抗白内障作用（例えば、特許文献２を参照）、肝臓疾患予防治療作用（例えば、特許文献３を参照）、創傷治癒作用（例えば、特許文献４を参照）、抗アレルギ−作用（例えば、特許文献５を参照）、逆転写酵素阻害作用（例えば、特許文献６を参照）及びグリオキサラ−ゼI阻害作用−制癌作用（例えば、特許文献７を参照）、メラニン産生抑制作用（例えば、特許文献８を参照）、抗酸化作用（例えば、非特許文献７を参照）、神経細胞再生作用（例えば、特許文献９を参照）、あざなどの治療作用（例えば、特許文献１０を参照）等の様々な作用が明らかとなっている。

しかしながら、上記ピロロキノリンキノン誘導体及び／又はその薬理学的に許容される塩がＩＬ−６産生抑制作用を有することは知られておらず、これを皮膚外用剤に含有させて炎症抑制効果を持たせるという報告も未だなされていない。

Teranishi, T., T. Hirano, N. Arima, and K. Onoue., J. Immunol. 128:1903-1908, 198． Hirano, T., T. Teranishi, and K. Onoue., J. Immunol. 132:229-234, 1984． Hirano, T., T. Teranishi, Bi-Hu Lin, and K. Onoue., J. Immunol. 133:798-802, 1984． 一色弘、 松田正、アレルギ−の臨床9巻、 11号、 Ｐ819-822 （1989）． 一色弘、 松田正、アレルギ−の臨床9巻、 13号、 Ｐ965-967 （1989）． Fischer SM., J Environ, Pathol Toxicol Oncol. 21(2):183-91, 2002． Rong, Tao, Joel S. Karliner, Ursula Simonis, Jie Zheng, Jianqing Zhang, Norman Honbo, Conard C. Alano, Biochem. Biophys. Res. Commun. 363, 257-262（2007）． 特開昭６１−５８５８４号公報． 特開昭６３−４１４２１号公報． 特開昭６３−１９２７１７号公報． 特開昭６３−１５２３０９号公報． 特開昭６３−１７４９３号公報． 特開昭６３−１５６７２４号公報． 特開昭６３−２１５６２８号公報． 特開平８−２０５１２号公報 特開２００７−２３０９１２号公報 特開２００４−５１６２７号公報

本発明の目的は、紫外線暴露により誘発される炎症を予防乃至は改善することにある。具体的には、皮膚が紫外線を照射された直後に投与され、その後に起こるフレ−ムアップを抑制し、紫外線の影響が強度の炎症にならないように予防し、紫外線の影響を改善する抗炎症剤を提供することにある。

この様な実情に鑑みて、本発明者等は、紫外線暴露により誘発される炎症を予防乃至は改善するべく、ＩＬ−６産生抑制作用を有する化合物探索に鋭意努力を重ねた結果、顕著なＩＬ−６産生抑制作用を有するピロロキノリンキノン誘導体を見出し、発明を完成させるに至った。
すなわち、本発明によれば、以下に示す一般式（１）出表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容できる塩を有効成分とする、ＩＬ−６産生抑制剤によって前記課題を解決できる。即ち、本発明は以下に示すとおりである。
＜１＞ 下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、インタ−ロイキン−６産生抑制剤。

（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長のアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基又はフェニル基、水素原子を表す。］

＜２＞前記一般式（１）で表される化合物は、ピロロキノリンキノンであることを特徴とする、＜１＞に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤。

ピロロキノリンキノン（化合物２）

＜３＞紫外線に暴露されることにより生じるべき、炎症を抑制することを目的として使用することを特徴とする、＜１＞又は＜２＞の何れか一項に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤。

＜４＞皮膚外用剤全量に対して、＜１＞〜＜３＞の何れか一項に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤を０．０００１質量％〜１０％質量％含有することを特徴とする、＜３＞に記載の皮膚外用剤。

＜５＞紫外線に暴露されることにより生じるべき、炎症の抑制を目的とすることを特徴とする、＜３＞又は＜４＞に記載の皮膚外用剤。

＜６＞化粧料又は医薬部外であることを特徴とする、＜３＞〜＜５＞の何れか一項に記載の抗炎症剤。

本発明によれば、紫外線暴露による誘発される炎症を予防乃至は改善する手段を提供することができる。

本発明のＩＬ−６産生抑制剤は、前記一般式（１）に表される化合物及び／又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とすることを特徴とする。一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長の、より具体的には炭素数１〜４の直鎖、分岐乃至は環状構造を有することにあるアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基、具体例を挙げれば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、シクロプロピルメチル基等、１環乃至は２環が独立に結合した乃至は縮合した方芳香族基、具体例を挙げれば、フェニル基、ビフェニル基、ナフチル基等、又は水素原子が好ましく、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３が共に水素原子であるピロロキノリンキノンが特に好適に例示できる。

一般式（１）で表される化合物のうち、好ましいものを具体的に例示すれば、ピロロキノリンキノン（化合物２）が好適に例示できる。一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体はそのままで本発明のインタ−ロイキン−６（ＩＬ−６）産生抑制剤としても利用することができるが、アルカリ金属を用いて使用することも可能である。たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属、トリエチルアミン塩、ピペリジン塩等の有機アミン塩が好ましく例示できる。

一般式（１）で表される化合物は、メタノ−ル資化性菌を培養して精製し得ることも出来るし、特許文献８（特開平８−２０５１２号公報）に記載の方法で合成し得ることも出来る。又、ピロロキノリンキノンに付いては、同仁化学株式会社より市販されているものも存し、この様な市販品を購入し利用することも出来る。斯くして得られた一般式（１）で表される化合物及び／又は生理的に許容されるそれらの塩は、紫外線暴露により生体内において誘発されるＩＬ−６産生異常による炎症を予防乃至は改善する作用を有する。即ち、皮膚に紫外線の照射が起こった後に、直ちに経皮的に投与することで、著しい紅斑反応などの強い炎症が生じるのを抑制することができる。この様な作用を得るためには、前記一般式（１）に表される化合物及び／又はその薬理学的に許容な塩を成人１人１日あたり、IＬ−６産生抑制剤を０．０００１質量％〜１０％質量％、より好ましくは、０．００１質量％〜１％質量％、更に好ましくは０．０１質量％〜０．１質量％含有する皮膚外用剤を、適量、一回乃至は数回に分けて、経口的に投与することが好ましい。勿論、経口的に０．１ｍｇ〜１０ｍｇ投与しても同様に抗炎症効果は得られるが、代謝による効率低下が存する場合があるので、患部乃至はその付近に局所的（経皮的）に投与することが好ましい。

本発明の皮膚外用剤においては、前記ＩＬ−６産生抑制剤意以外に通常の皮膚外用剤で使用される任意の成分を含有することが出来る。この様な任意の成分としては、例えば、マカデミアナッツ油、アボガド油、トウモロコシ油、オリ−ブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワ−油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、スクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；セチルアルコ−ル、ステアリルアルコ−ル、イソステアリルアルコ−ル、ベヘニルアルコ−ル、オクチルドデカノ−ル、ミリスチルアルコ−ル、セトステアリルアルコ−ル等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコ−ル、ジカプリン酸ネオペンチルグリコ−ル、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロ−ルプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロ−ルプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット等の合成エステル油類；ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ジフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノ−ルアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエ−ト、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレ−ト等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレ−ト等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコ−ルモノオレ−ト、ＰＯＥジステアレ−ト等）、ＰＯＥアルキルエ−テル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエ−テル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエ−テル類（ＰＯＥノニルフェニルエ−テル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエ−テル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；ポリエチレングリコ−ル、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリト−ル、ソルビト−ル、キシリト−ル、マルチト−ル、プロピレングリコ−ル、ジプロピレングリコ−ル、ジグリセリン、イソプレングリコ−ル、１，２−ペンタンジオ−ル、２，４−ヘキサンジオ−ル、１，２−ヘキサンジオ−ル、１，２−オクタンジオ−ル等の多価アルコ−ル類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、；表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパ−ル剤類；レ−キ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマ−等の有機粉体類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤、；桂皮酸系紫外線吸収剤、；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾ−ル、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノ−ル等の低級アルコ−ル類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ6塩酸塩、ビタミンＢ6トリパルミテ−ト、ビタミンＢ6ジオクタノエ−ト、ビタミンＢ2又はその誘導体、ビタミンＢ12、ビタミンＢ15又はその誘導体等のビタミンＢ類；α−トコフェロ−ル、β−トコフェロ−ル、γ−トコフェロ−ル、ビタミンＥアセテ−ト等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ピロロキノリンキノン等のビタミン類等；フェノキシエタノ−ル等の抗菌剤などが好ましく例示できる。

これらの必須成分、任意成分を常法に従って処理し、ロ−ション、乳液、エッセンス、クリ−ム、パック化粧料、洗浄料などに加工することにより、本発明の皮膚外用剤は製造できる。本発明の皮膚外用剤としては、皮膚に外用で適用されるものであれば特段の限定はなく応用でき、例えば、医薬部外品を含む化粧料、皮膚外用医薬、皮膚外用雑貨等が好ましく例示できる。本発明の皮膚外用剤は、その必須成分であるＩＬ−６産生抑制剤の特性を生かし、紅斑誘導照射量以上の紫外線が照射された皮膚に、照射後直ちに投与する形態で使用されることが特に好ましい。この様な使用形態により、紫外線の肌への悪影響を大きく抑制することが出来る。

以下に、本発明について、実施例を挙げて更に詳細に説明を加えるが、本発明がかかる実施例にのみ、限定されないことは言うまでもない。

＜本発明のＩＬ−６産生抑制剤である、ピロロキノリンキノン＞
本発明におけるＩＬ−６産生抑制作用を評価するために用いたピロロキノリンキノン（化合物２）は、同仁化学株式会社より購入し、使用した。

＜本発明の紫外線誘発によるＩＬ−６産生抑制作用＞
試験には、ヒト由来正常ケラチノサイト培養細胞を使用した。ケラチノサイト基本培地（Humedia-KG2、クラボウ）を用いて１．０×１０４細胞を２４ウェルプレートに播種し、３７℃、二酸化炭素５％中にて培養した。増殖因子を含まないケラチノサイト用培地（Humedia-KB2、クラボウ）に、ピロロキノリンキノン（化合物２、同仁化学株式会社）を添加したもの、対照群としてDMSO(シグマアルドリッチジャパン)を添加したものを調製し、培養した細胞をPBS（和光純薬工業）にて洗浄後、それぞれの培地にて１６時間培養した。培養後の細胞について、PBSにて洗浄後、紫外線ランプを用いて５０mJ/cm2となるように紫外線を照射した。照射後の細胞をピロロキノリンキノン（化合物２）またはDMSOを含むHumedia-KG2培地（クラボウ）にて４時間培養した培養上清を試料とし、ヒトIL-6 Biotrak Easy ELISA キット（GEヘルスケア）を用いて測定した。
図にはDMSO添加のときの測定値に対する比で、ピロロキノリンキノン(化合物２)のIＬ−６産生抑制の効果を示した。

この様に評価された、本発明のＩＬ−６産生抑制剤のＩＬ−６産生抑制作用を後記の図１に示す。この図より、本発明のＩＬ−６産生抑制剤は優れたＩＬ−６産生抑制作用を有することがわかる。

前記実施例２の皮膚外用剤と、実施例２の皮膚外用剤のピロロキノリンキノンを水に置換した比較例１、通常の抗炎症剤であるグリチルリチンジカリウムに置換した比較例２について、紫外線の炎症有機に対する抑制効果を調べた。即ち、上腕内側部に２ｃｍＸ２ｃｍの部位を５つ設け、１部位は無処置コントロ−ルとし、１部位は照射コントロ−ルとし、残る３部位はサンプル投与部位とした。予め求めておいたＭＥＤ（最小紅斑量）の３倍の紫外線を無処置コントロ−ル部位以外の部位に照射し、サンプル投与部位にはそれぞれサンプルを３０μＬ、照射コントロ−ル部位には水を３０μＬ投与し、投与後２４時間にドレ−ズの基準で皮膚反応を判定した。即ち、スコア０：無反応、スコア０．５：擬陽性反応、スコア１：明瞭な紅斑を伴う反応、スコア２：浮腫を伴う反応の基準である。結果を以下に示す。

本発明は化粧料などの皮膚外用剤に応用できる。

本発明のＩＬ−６産生抑制剤のＩＬ−６産生抑制作用を示す図である。

Claims (6)

1. 下記一般式（１）で表されるピロロキノリンキノン誘導体及び／又はそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする、インタ−ロイキン−６産生抑制剤。
   

   

   （１）
   ［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立して、短鎖長のアルキル基、アルケニル基、アラルキル基、アラアリ−ル基又はフェニル基、水素原子を表す。］
2. 前記一般式（１）で表される化合物は、ピロロキノリンキノンであることを特徴とする、請求項１に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤。
   

   

   ピロロキノリンキノン（化合物２）
3. 紫外線に暴露されることにより生じるべき、炎症を抑制することを目的として使用することを特徴とする、請求項１又は２の何れか一項に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤。
4. 皮膚外用剤全量に対して、請求項１〜３の何れか一項に記載のインタ−ロイキン−６産生抑制剤を０．０００１質量％〜１０％質量％含有することを特徴とする、請求項３に記載の皮膚外用剤。
5. 紫外線に暴露されることにより生じるべき、炎症の抑制を目的とすることを特徴とする、請求項３又は４に記載の皮膚外用剤。
6. 化粧料又は医薬部外であることを特徴とする、請求項３〜５の何れか一項に記載の抗炎症剤。

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