JP2008520660A - 新規抗菌性ペプチド - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、抗菌組成物の製造のためのペプチドの有効性を改善するために、少なくとも1つのアミノ酸残基が置換されている、配列番号1を含むペプチドの使用に関する。当該組成物は、酵母及び寄生虫を含む微生物、例えば細菌、ウイルス、真菌、を駆除するための医薬組成物として使用することができる。
数々の感染症は、哺乳動物、例えばヒト、の免疫系により成功的に対処される。しかしながら、ある例では、局所的又は全身性の急性感染症を引き起こすかもしれない細菌、真菌又はウイルスは、必ずしも除去されない。これは、周産期-、火傷又は集中治療室では、及び免疫システムが損なわれた個体では、重大な関心事である。他の例では、上皮表面での継続的な細菌の存続は、慢性疾患を引き起こすか又は更に悪化させることがある。ヒトでは、これは、慢性皮膚潰瘍、アトピー性皮膚炎及び他の種類の湿疹、座瘡又は泌尿器感染症により例示される。
本発明は、配列番号1を含む新規な改良されたペプチド及びそのアナログであって、当該ペプチドは、配列番号1とは、C1、N2、T5、E6、R8、R9、H11、A12、R13、A14、S15、H16、L17、G18及びA20からなる群より選ばれる少なくとも1つのアミノ酸残基が、微生物と闘うために使用される抗菌組成物の製造のために置換されている点で相違する、前記ペプチドの使用に関する。
定義
本願及び本発明との関連で、以下の定義を適用する。
http://www.mbio.ncsu.edu/BioEdit/bioedit.htmlに見られるアルゴリズムにより、アミノ酸残基の配列をプロットすることによって評価することができる。疎水性残基の配置は、ヘリックス車輪図により見ることができる。二次構造の予測アルゴリズム、例えばGORIV及びAGADIRは、www.expasv.com.に見られる。
抗菌性ペプチド
本発明は、配列番号1を含むペプチド及びそのアナログであって、当該ペプチドは、C1、N2、T5、E6、R8、R9、H11、A12、R13、A14、S15、H16、L17、G18及びA20からなる群より選ばれる少なくとも1つのアミノ酸残基が、微生物の減少又は除去のための抗菌組成物の製造のために置換されている点で配列番号1と相違する、前記ペプチドの使用に関する。置換は、配列番号1のペプチドと比べて、当該ポリペプチドにより活性を付与する。へリックス-コイル転移理論に基づくアルゴリズムを利用することにより、置換に好適なヘリックス性を予測するためのアガディール(AGADIR)が特定された(実施例1を参照)。抗菌力が、膜-模倣環境において固有のヘリックス安定性よりもα-へリックス構造の誘導に関連するようであるので、これらの置換は、微生物と闘う能力の点でポリペプチドの活性を増加させる (Tossi A, Sandri L, Giangaspero A. (2000), 両親媒性の、α-ヘリックス抗菌性ペプチド, Bio-polymers, 55, 4-30)。
可能性のある置換の予測
ヘリックス性を予測するために、ヘリックス-コイル転移理論に基づくアルゴリズム、アガディール(AGADIR)を使用した(Lacroix E, Viguera AR and Serrano L. (1998), ヘリックスの折り畳みの問題を解明すること:部分的なモチーフ、広範囲の静電気学、イオン強度依存、及びNMRパラメータの予測, J Mol Biol, 284, 173-191)。ペプチド配列を、アガディール(AGADIR)サービスへの、EMBL WWWゲートウェイ (http .7/www. embl-heidelberg.de/Services/serrano/agadir/agadir-start.html)に提出することにより計算を行った。
抗菌性ペプチド
ペプチドCNY21; CNYITELRRQHARASHLGLAR、CNY20; CNYITELRRQHARASHLGLA、CNY21R-S; CNYITELSSQHASASHLGLAR、CNY20R-S; CNYITELSSQHASASHLGLA、CNY21H-L: CNYITELRRQLARASLLGLAR、CNY21H-K: CNYITELRRQKARASKLGLAR、CNY21H-P: CNYITELRRQPARASPLGLARをInnovagen AB, Ideon, SE-22370, Lund, Swedenにより合成した。これらのペプチドの純度(>95 %)及び分子量を質量スペクトル分析(MALDI. TOF Voyager)により確認した。
エンテロコッカス・フェカリス(Enterococcus faecalis)2374、エシェリシア・コリ(Escherichia coli)37.4、シュードモナス・エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)21 Aを当初は慢性静脈潰瘍から得、真菌カンジタ・アルビカンス(Candida albicans)BM 4435をアトピー性皮膚炎の患者から得、実験に使用した。
C3a-由来CNY21ペプチドの抗菌効果
図1Aは、E.フェカリス(E. faecalis)2374(−黒丸−)及びP.エルギノーサ(P. aeruginosa)27.1(−白四角−)に対するCNY21の殺菌効果を記載する。細菌は、トッド・ヒューイット(TH)培地中で対数期の中頃まで培養した。5 mMグルコースを含む10 mM トリス、pH 7.4で細菌を洗浄し、希釈し、細菌(50 μl; 2 x 106 cfu/ml)を37℃で2時間、0.03〜60 μMの範囲の濃度の合成ペプチドと共にインキュベートした。殺菌活性を定量するために、インキュベーション混合物の段階的希釈をTHアガーに播き、37℃で終夜インキュベートし、コロニー形成単位数を測定した。
CNY変異体のラジカル拡散アッセイ分析
本質的には先に記載のとおりにして、ラジカル拡散アッセイ(RDA)を行った(Andersson他, Eur J Biochem, 2004, 271: 1219-1226)。すなわち、細菌(P. aeruginosa 27.1)を、10 mlの完全強度(3 % w/v)トリプチカーゼ大豆ブロス(TSB)(Becton-Dickinson, Cockeysville, MD) 中で、対数期の中頃まで培養した。当該微生物を、10 mM トリス、pH 7.4、4 x 106 細菌cfu又は1 x 105 真菌cfuで、一回洗浄し、0.03 %(w/v)TSB、1 %(w/v)低-電気エンドスモシス型(electroendosmosistype)(Low-EEO)アガロース(Sigma, St Louise MO) 及び最終濃度0.02 %(v/v)のTween 20 (Sigma)からなる、5 mlの下に敷いたアガロースゲルに加えた。下敷きをΦ85 mmペトリ皿に注いだ。アガロースを固化させた後、4 mm径のウェルをあけ、6 μlの試験試料を各ウェルに加えた。プレートを37℃で3時間インキュベートし、ペプチドを拡散させた。次いで、下敷きゲルを5 mlのモルトン・オーバーレイ(6 % TSB及び1 % Low-EEOアガロースのdH2O液)で覆った。37℃で18〜24時間インキュベーションした後、ペプチドの抗菌活性は、各ウェルの周囲の透明ゾーンとして見えた。抗菌効果を決定するために100 μMの濃度で、合成ペプチドを試験した(図8)。CNY21; CNYITELRRQHARASHLGLAR、CNY20; CNYITELRRQHARASHLGLA、CNY21R-S; CNYITELSSQHASASHLGLAR、CNY20R-S; CNYITELSSQHASASHLGLA、CNY21H-L: CNYITELRRQLARASLLGLAR、CNY21H-K: CNYITELRRQKARASKLGLAR、CNY21H-P: CNYITELRRQPARASPLGLAR。CNY21H-P変異体 (ここでは非表示) は、抗菌効果を示さなかった。
CNY-変異体の抗真菌効果
真菌 (C. アルビカンス)を、10 mlの完全強度(3 % w/v)トリプチカーゼ大豆ブロス(Becton-Dickinson, Cockeysville, MD)中で、対数期の中頃まで培養した。当該微生物を、10 mM トリス、pH 7.4、1 x 105 真菌cfuで、一回洗浄し、0.03 %(w/v)TSB、1 %(w/v)低-電気エンドスモシス型 (Low-EEO)アガロース(Sigma, St Louise MO) 及び最終濃度0.02 %(v/v)のTween 20 (Sigma)からなる、5 mlの下に敷いたアガロースゲルに加えた。下敷きをΦ85 mmペトリ皿に注いだ。アガロースを固化させた後、4 mm径のウェルをあけ、6 μlの試験試料を各ウェルに加えた。プレートを37℃で3時間インキュベートし、ペプチドを拡散させた。次いで、下敷きゲルを5 mlのモルトン・オーバーレイ(6 % TSB及び1 % Low-EEOアガロースのdH2O液)で覆った。28℃で18〜24時間インキュベーションした後、カンジタ・アルビカンス(Candida albicans)のペプチドの抗菌活性は、各ウェルの周囲の透明ゾーンとして見えた(図9)。結果は、3点試料の平均を示す。CNY21; CNYITELRRQHARASHLGLAR、CNY21H-K: CNYITELRRQKARASKLGLAR、CNY21H-L: CNYITELRRQLARASLLGLAR、CNY20R-S; CNYITELSSQHASASHLGLA、CNY21R-S; CNYITELSSQHASASHLGLAR、CNY21H-P: CNYITELRRQPARASPLGLAR。
抗菌性ペプチドの溶血効果
溶血活性は、540 nmでのヘモグロビンの放出をモニターすることにより決定した。すなわち、赤血球(PBS中に10 %)の懸濁液を同量のペプチド(PBS中)でインキュベートした。混合物を37℃で1時間インキュベートし、遠心した。上清の吸光度を測定した。100パーセント溶血生は、同体積の2 % Triton X100を赤血球懸濁液に添加することにより達成した。試験したCNY変異体は、ほとんど又は全く溶血効果を示さなかった(図10)。これに対して、抗菌性ペプチドLL-37は、60 μMで約6 %の溶血生を示した。
真核細胞膜に対するCNY-変異体の効果
ヒトHaCaTケラチン生成細胞株に対する膜透過性効果を試験した。96-ウェルプレート中で培養したコンフルエント細胞培養物を、6時間、ペプチドと共にインキュベートし、ラクトースデヒドロゲナーゼの放出を測定した。試験したCNY変異体は、抗菌性ペプチドLL-37と比べて、LDHを放出しなかった(図11)。
CNY21のヘパリン結合
ペプチドのヘパリン結合活性を試験した。ペプチドをニトロセルロース膜に適用した(Hybond, Amersham Biosciences)。膜を1時間、ブロックし(PBS, pH 7.4, 0.25 % Tween 20, 3 % ウシ胎児血清)、同一の緩衝剤中で1時間、放射性同位体標識したヘパリンでインキュベートした。非標識多糖(ヘパリン,2 mg/ml)を結合の競争のために加えた。膜を洗浄し(3 x 10分、PBS, pH 7.4, 0.25 % Tween 20)。非標識ヘパリン(6 mg/ml)の放射活性を視覚化するために、Bas 2000放射性画像化装置(Fuji)を用いた。非標識ヘパリン(6 mg/ml)は、125I-ヘパリンCNY21の結合を阻害した。
脂質二重層へのCNY21変異体の結合
ペプチドを、脂質膜中に孔形成及びペプチドの二次構造を生じる脂質二重層への結合について試験した。試験した脂質膜は、(ホスファチジルコリンを含む)両性イオン性膜及びアニオン性膜(ホスファチジルコリン及びホスファチジン酸の混合物を含む)を含む。脂質膜をシリカ上に置き、10 mM トリス、pH 7.4由来のペプチドの結合を、偏光解析法により直接モニターした。脂質膜は、また、同一の脂質由来のリポゾームの形態で、そして押出し及び冷凍-twawingの反復により同一の緩衝剤中で調製し、150 nm径の単層リポゾームを生じた。これらのリポゾーム中での孔形成は、リポゾーム内にカルボキシフルオレセインを含ませ、次いでリポゾームへのペプチドの添加における蛍光強度の増加により、測定した。更に、リポゾーム脂質膜中のペプチドの二次構造は、円形2色法により探知した。この結果は、CNY21が両性イオン性及びアニオン性脂質膜に結合し、そしてCNY21がCNY21 R-Sよりも高い結合傾向を示す、ことを示した。更に、CNY21変異体は、孔形成及びリポゾームの漏出をもたらし、CNY21 H-L≒ CNY21 H-K > CNY21 > CNY21 H-P ≧ CNY21 R-Sのオーダーの効率を示した。また、CDは、同一のオーダーで減少する程度に、リポゾーム脂質膜におけるペプチドのヘリックス構造の存在を指摘した。
ペプチド
ペプチドは、Sigma-Genosys製であり、ペプチド合成プラットフォームによりつくられる(PEPscreen(登録商標),Custom Peptide Libraries, SigmaGenosys)。収率は、約1〜6 mgであり、ペプチド長は20アミノ酸であった。MALDI-ToF質量スペクトル分析は、これらのペプチドについて行った。20マーの平均粗純度は、約61 %であった。ペプチドは、凍結乾燥状態でそして96-ウェルチューブラックで市販されている。生物試験の前に、PEPscreenペプチドをdH20 (5 mMストック)で希釈し、-20℃で保存した。このストック溶液を次の実験に使用した。
エシェリシア・コリ(Escherichia coli)37.4単離物は、もともと、慢性静脈潰瘍を有する患者から得たが、スタフィロコッカス・アーレウス(Staphylococcus aureus)単離物BD14312は、アトピー性皮膚炎の患者から得た。スタフィロコッカス・アーレウス(Staphylococcus aureus)ATCC29213及びカンジタ・アルビカンス(Candida albicans)ATCC90028は、いずれも、ランド大学病院の臨床微生物科から得た。
本質的に先に記載 (Lehrer他, J Immunol Methods 137, 167-173, 1991, Andersson他, Eur J Biochem 271, 1219-1226, 2004) の細菌は、10 mlの完全強度(3 % w/v)トリプチカーゼ大豆ブロス(TBS)(Becton-Dickinson, Cockeysville, MD) 中で対数期の中頃まで培養した。次いで、当該微生物を、10 mM トリス、pH 7.4、4 x 105 細菌コロニー形成単位で、一回洗浄し、0.03 %(w/v)TSB、1 %(w/v)低-電気エンドスモシス型(Low-EEO)アガロース(Sigma, St Louise MO) 及び0.02 %(v/v)のTween 20 (Sigma)からなる、15 mlの下に敷いたアガロースゲルに加えた。下敷きをΦ144 mmペトリ皿に注いだ。アガロースを固化させた後、4 mm径のウェルをあけ、6 μlの試験試料を各ウェルに加えた。プレートを37℃で3時間インキュベートし、ペプチドを拡散させた。次いで、下敷きゲルを15 mlのモルトン・オーバーレイ(6 % TSB及び1 % Low-EEOアガロースのdH2O液)で覆った。37℃で18〜24時間インキュベーションした後、ペプチドの抗菌活性は、各ウェルの周囲の透明ゾーンとして見えた。
溶血アッセイ
EDTA-血液を10分間、800 gで遠心し、その後、血漿及び軟膜を除いた。赤血球を3回洗浄し、5 % PBS、pH 7.4に再懸濁した。次いで、ペプチド(60 μM)の存在下、37℃で1時間、細胞を旋回しながらインキュベートした。2 % Triton X-100 (Sigma- Aldrich) は、陽性対照として使用した。次いで、試料を800 gで10分間、遠心した。ヘモグロビン放出の吸光度をλ540 nmで測定し、プロットでは、TritonX-100誘導溶血の %として表した。
へリックス形成の予測
ヘリックス性を予測するために、ヘリックス-コイル転移理論に基づくアルゴリズムである、アガディール(AGADIR)を用いた(Lacroix他, J MoI Biol 284, 173-191, 1998)。ペプチド配列を、アガディール(AGADIR)サービスへの、EMBL WWWゲートウェイ (http .7/www. embl-heidelberg.de/Services/serrano/agadir/agadir-start.html)に提出することにより計算を行った。インプットパラメータは以下のとおりである: C末端遊離、N末端遊離、pH 7.4、温度 278 K及びイオン強度 0.15 M。
実施例1で特定された基準に基づいて、増加した正の正味電荷、高いヘリシティ及び増加した両親媒性を有する数個の新規な変異体を設計し、及び合成した。合理的に試験するために、上記のように、PEPscreenライブラリーと同じくらいの多くの異なった変異体を利用した。PEPscreenライブラリーのみが20-マーペプチドに適合するので、CNY21のC-末端アルギン残基は除いた。CNY20変異体である、「CNYITELRRQHARASHLGLA」を、2つの単離物、シュードモナス・エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)15159及びエシェリシア・コリ(Eschericia coli)37.4を用いるRDAアッセイにおいて、CNY21と比較した。以下のデータは、100 μMのペプチド(n=9)を用いて、P. aeruginosaについて得られた;平均値;CNY21: 5,00、SD; 0,81、SEM 0,27、CNY20: 平均値; 6,02、SD; 0,59、SEM; 0,20。E.コリ(E. coli); CNY21 : 平均値;6,02、SD;0,93、SEM; 0,31、CNY20: 平均値; 8,03、SD; 1,22、SEM, 0,41。ここで、CNY21と比べたときに、CNY20については活性の減少が認められなかった。ペプチド番号2〜17は、N-キャップ、N-キャップ+3及びN-キャップ+4の位置を変化させることにより、ヘリシティを増やすように設計した(表1、実施例1)。ペプチド番号18〜20は、C-キャップ-4及びC-キャップ-2の位置を変化させることにより、ヘリシティを安定化させるように設計した(表1、実施例1)。21〜30の範囲のペプチドに関しては、リシン間の間隔は、ヘリシティを増やすために変化させた(表1、実施例1)。両親媒性構造は、ペプチド31〜43における位置8、11、15、16及び17でのアミノ酸を置換することにより、更に最適化した(表1、実施例1)。ペプチド44〜56については、最適の両親媒性及び増加したヘリシティは、先に記載の置換を組み合わせることにより得られた。最後に、ペプチド57〜74は、安定したヘリシティ及び最適な両親媒性と組み合わせて正味の正の電荷を増やすように設計した。
低溶血活性とペアを組むRDAにおけるE. coliに対する高い抗菌活性を示す最初のPEPscreenにおける変異体の内の4つは、不完全な両親媒性へリックスを含んだ。そのため、両親媒性ペプチドの構造的構成にブレイク(break)を与える、アミノ酸置換を有する別の変異体を設計した。正味電荷を約+2〜+3に維持し、ペプチドを比較的高い(しかし、高すぎない)へリックス含量(20-60 %)を有するように設計した。
Claims (26)
- 配列番号1を含むペプチド又はそのアナログの使用であって、当該ペプチドは、C1、N2、T5、E6、R8、R9、H11、A12、R13、A14、S15、H16、L17、G18及びA20からなる群から選ばれる少なくとも1つのアミノ酸残基が、微生物の減少及び/又は除去、又は微生物感染症の予防的処置のための抗菌組成物の製造のために置換されている点で、配列番号1で示されるアミノ酸配列と異なる、前記使用。
- 前記置換(複数)が、C1G、N2S、N2T、N2K、T5E、T5D、T5N、E6A、E6V、E6L、E6I、E6M、E6F、E6Y、E6W、R8A、R8V、R8L、R8I、R8M、R8W、R8K、R9K、H11A、H11V、H11L、H11I、H11M、H11K、H11R、H11W、A12L、R13K、A14V、A14L、A14I、A14M、S15A、S15V、S15L、S15I、S15M、S15T、S15N、S15Q、S15K、S15R、S15W、H16K、H16R、H16A、H16V、H16L、H16I、H16M、L17K、L17R、L17A、L17V、L17I、L17M、G18W及びA20Rからなる群より選ばれる、請求項1記載の使用。
- 前記置換(複数)が、例えば、N2S、N2K、T5E、T5D、T5N、E6A、E6V、E6L、E6I、E6M、E6F、E6Y、E6W、R8A、R8V、R8L、R8I、R8M、R8K、R8W、H11A、H11V、H11L、H11I、H11M、H11K、H11R、H11W、A12L、A14L、S15A、S15V、S15L、S15I、S15M、S15T、S15N、S15Q、S15K、S15R、S15W、H16K、H16R、H16A、H16V、H16L、H16I、H16M、L17K、L17R、L17A、L17V、L17I、L17M、G18W及びA20Rからなる群より選ばれる、請求項2記載の使用。
- 前記ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号1で示されるアミノ酸配列と、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12個のアミノ酸残基において相違する、請求項1〜4のいずれか1項記載の使用。
- C1、N2、T5、E6、R8、R9、H11、A12、R13、A14、S15、H16、L17、G18及びA20からなる群より選ばれる少なくとも1つのアミノ酸残基が、配列番号1で示されるアミノ酸配列から除かれている、請求項1〜5のいずれか1項記載の使用。
- 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10又は11個のアミノ酸残基が除かれている、請求項5記載の使用。
- 前記ペプチドが、1以上のアミノ酸残基、他のペプチド(複数)又は他の物質に結合される、請求項1〜6のいずれか1項記載の使用。
- 前記ペプチドが、約1〜約100個の追加のアミノ酸残基、例えば約5〜約50個のアミノ酸残基に結合される、請求項1〜7のいずれか1項記載の使用。
- 前記ペプチドが、アミド化、エステル化、アシル化、アセチル化、PEG化又はアルキル化により修飾される、請求項1〜8のいずれか1項記載の使用。
- 前記抗菌組成物が、薬学的に許容される緩衝剤、希釈剤、担体、アジュバント又は賦形剤を含む医薬組成物である、請求項1〜9のいずれか1項記載の使用。
- 前記組成物が、塩を含む、請求項10記載の使用。
- 前記塩が、一価のナトリウム、カリウム、又は二価の亜鉛、マグネシウム、銅又はカルシウムからなる群より選ばれる、請求項11記載の使用。
- 前記塩が二価の亜鉛である、請求項12記載の使用。
- 前記医薬組成物が約4.5〜約7.0のpHを有する、請求項10〜13のいずれか1項記載の使用。
- 前記抗菌組成物又は医薬組成物が、請求項1〜9で定義される1、2、3又は4個の異なったポリペプチドの混合物を含む、請求項1〜14のいずれか1項記載の使用。
- 前記抗菌組成物又は医薬組成物が、1以上の抗生物質及び/又は防腐剤(複数)を含む、請求項1〜15のいずれか1項記載の使用。
- 前記薬剤が、ペニシリン、セファロスポリン、カルバセフェム、セファマイシン、カルバペネム、モノバクタム、アミノグリコシド、グリコペプチド、キノロン、テトラサイクリン、マクロライド、フルオロキノロン、ヨウ素、銀、銅、クロルヘキシジン、ポリヘキサニド、ビグアニド、キトサン、酢酸及び過酸化水素からなる群より選ばれる、請求項17記載の使用。
- 前記抗菌組成物又は医薬組成物が、顆粒、粉末、錠剤、被覆錠剤、カプセル剤、座剤、シロップ剤、注射用形態、エマルション、ゲル、軟膏、懸濁液、クリーム、アエロゾル、液滴の形態にある、請求項1〜17のいずか1項記載の使用。
- 微生物の減少及び/又は除去のための抗菌組成物の製造のための、配列番号2と少なくとも70 %のホモロジーを示すポリペプチドの使用。
- 前記ポリペプチドが、微生物の減少及び/又は除去のための抗菌組成物の製造のための、配列番号2と80 %、90 %又は95 %のホモロジーを示す、請求項19記載のポリペプチドの使用。
- 前記微生物が、細菌、ウイルス、寄生虫、真菌及び酵母からな群より選ばれる、請求項1〜20のいずれか1項記載の使用。
- 前記微生物が、グラム陽性及びグラム陰性菌、例えばエンテロコッカス・フェカリス(Enterococcus faecalis)、エシェリシア・コリ(Eschericia coli)、シュードモナス・エルギノーサ(Pseudomonas aeruginosa)、プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)、ストレプトコッカス・ニューモニアエ(Streptococcus pneumoniae、ストレプトコッカス・ピオゲネス(Streptococcus pyogenes)、ストレプトコッカス・アーレウス(Staphylococcus aureus)、ウイルス、寄生虫、真菌及び酵母、例えばカンジタ・アルビカンス(Candida albicans)及びカンジタ・パラプシロシス(Candida parapsilosis)からなる群より選ばれる、請求項21記載の使用。
- 前記抗菌組成物又は医薬組成物が、包帯、絆創膏、縫合糸、石鹸、止血栓、おむつ、シャンプー、練り歯磨き、抗座瘡化合物、サンクリーム、織物、接着剤に含まれ、創傷包帯、洗浄液又はインプラントに組み込まれる、請求項1〜22のいずれか1項記載の使用。
- 前記抗菌組成物が、術後及び皮膚損傷後の熱傷創の予防的処置、アトピー性皮膚炎、膿痂疹、慢性皮膚潰瘍、感染性急性損傷及び熱傷創、潰瘍、外耳炎、真菌性髄膜炎、肺炎、脂漏性皮膚炎、間擦疹型皮膚カンジダ症、カンジタ膣炎、経口咽頭カンジタ症、眼科感染症及び鼻腔内感染症からなる群より選ばれる疾患の処置のために使用される、請求項1〜23のいずれか1項記載の使用。
- 請求項10〜22のいずれか1項記載の医薬組成物の治療上有効量を患者に投与することを含む、微生物感染症を有する哺乳動物の治療方法。
- 前記哺乳動物が、ヒト、ウマ、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ及びラクダからなる群より選ばれる、請求項25記載の哺乳動物の治療方法。
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