JP2008506416A5 - - Google Patents

Claims (66)

1. （ｉ）遺伝子構造物を合胞体細胞に接触する段階と、
   （ｉｉ）前記接触された合胞体細胞におけるリズムが、前記遺伝子構造に接触されていない合胞体細胞におけるものと比較して異なるかどうかを決定し、その結果前記遺伝子構造が前記合胞体細胞のリズムを変えるかどうかを決定する段階と、
   を含む、合胞体細胞のリズムを変える遺伝子構造物の能力を決定する方法。
2. （ａ）前記遺伝子構造物を前記合胞体細胞にｉｎ ｖｉｔｒｏで接触する段階と、
   （ｂ）前記接触された合胞体細胞のリズムを決定する段階と、
   （ｃ）前記遺伝子構造物の接触よりも前の同じ合胞体細胞のリズムで決定されたリズムと比較する段階と、を含み、
   前記合胞体細胞のリズムを変える前記遺伝子構造物の能力は、前記接触された合胞体セルのリズムが、前記遺伝子構造物の接触よりも前の、同じ合胞体細胞のリズムと異なることで示される、請求項１に記載の方法。
3. 前記遺伝子構造物が遺伝子組み換えされた幹細胞である、請求項２に記載の方法。
4. 前記遺伝子組み換えされた幹細胞が遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞である、請求項３に記載の方法。
5. 前記遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞が遺伝子でトランスフェクトされた、請求項４に記載の方法。
6. 前記遺伝子は過分極活性化されたサイクリックヌクレオチドゲーテッド２（ＨＣＮ２）遺伝子である、請求項５に記載の方法。
7. 前記遺伝子構造物は合胞体細胞に結合することができる遺伝子組み換えされた細胞である、請求項２に記載の方法。
8. 前記合胞体細胞が心筋細胞である、請求項２に記載の方法。
9. 前記合胞体細胞が哺乳類の膀胱からとったものである、請求項２に記載の方法。
10. 前記合胞体細胞が哺乳類の肝臓からとったものである、請求項２に記載の方法。
11. 前記合胞体細胞が動脈からとったものである、請求項２に記載の方法。
12. 前記合胞体細胞が細動脈からとったものである、請求項２に記載の方法。
13. 前記合胞体細胞が哺乳類の胃腸管からとった細胞である、請求項２に記載の方法。
14. 前記合胞体細胞が上皮組織から生じる腫瘍からとったものである、請求項２に記載の方法。
15. 前記合胞体細胞が平滑筋組織から生じる腫瘍からとったものである、請求項２に記載の方法。
16. 前記段階（ｂ）が、
    （ｉ）前記遺伝子構造物に接触した前記合胞体細胞に染料を投与する段階と、
    （ｉｉ）前記接触された合胞体細胞のリズムをフォトダイオードで監視する段階と、
    を含む、請求項２に記載の方法。
17. 前記染料はＣａ−認識染料である、請求項１６に記載の方法。
18. 前記Ｃａ−認識染料がｆｌｕｏ−３である、請求項１７に記載の方法。
19. 前記染料が感圧染料である、請求項１６に記載の方法。
20. 前記段階（ｂ）がエッジ検出の使用を含む、請求項２に記載の方法。
21. 前記段階（ｂ）が試験ウェルに埋め込まれた電極の使用を含む、請求項２に記載の方法。
22. 前記電極の使用が、ひとつの１５０×３０μＭの刺激電極およびひとつの直径３０μｍの電極の使用を含む、請求項２１に記載の方法。
23. 前記試験ウェルは内側直径が少なくとも３ｍｍ×３ｍｍである、請求項２２に記載の方法。
24. 前記段階（ｂ）が試験ウェル中のガラスパッチ電極の使用を含む、請求項２に記載の方法。
25. 前記試験ウェルは内側直径が少なくとも３ｍｍ×３ｍｍである、請求項２４に記載の方法。
26. （ｉ）遺伝子構造物を合胞体細胞に接触する段階と、
    （ｉｉ）接触された前記合胞体細胞における収縮性が、前記遺伝子構造物が接触されていない合胞体細胞と異なるかどうか決定し、その結果前記遺伝子構造物が前記合胞体細胞の収縮性を変えるかどうかを決定する段階と、を含む、
    合胞体細胞の収縮性を変えるための遺伝子構造物の能力を決定する方法。
27. （ａ）前記遺伝子構造物を前記合胞体細胞に、ｉｎ ｖｉｔｒｏで接触する段階と、
    （ｂ）前記接触された合胞体細胞の収縮性を決定する段階と、
    （ｃ）前記遺伝子構造物と接触するよりも前に同じ合胞体細胞の収縮性で決定された収縮性と比較する段階と、を含み、
    前記遺伝子構造物の前記合胞体細胞の収縮性を変える能力が、前記接触された合胞体細胞の収縮性が前記遺伝子構造物と接触するよりも前の同じ合胞体細胞の収縮性と異なることで示される、請求項２５に記載の方法。
28. 前記遺伝子構造物が遺伝子組み換えされた幹細胞である、請求項２７に記載の方法。
29. 前記遺伝子組み換えされた幹細胞が遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞である、請求項２８に記載の方法。
30. 前記遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞が遺伝子でトランスフェクトされた、請求項２９に記載の方法。
31. 前記遺伝子は過分極活性化されたサイクリックヌクレオチドゲーテッド２（ＨＣＮ２）遺伝子である、請求項３０に記載の方法。
32. 前記遺伝子構造物は合胞体細胞に結合することができる遺伝子組み換えされた細胞である、請求項２７に記載の方法。
33. 前記合胞体細胞が心筋細胞である、請求項２７に記載の方法。
34. 前記合胞体細胞が哺乳類の膀胱からとったものである、請求項２７に記載の方法。
35. 前記合胞体細胞が哺乳類の肝臓からとったものである、請求項２７に記載の方法。
36. 前記合胞体細胞が動脈からとったものである、請求項２７に記載の方法。
37. 前記合胞体細胞が細動脈からとったものである、請求項２７に記載の方法。
38. 前記合胞体細胞が哺乳類の胃腸管からとった細胞である、請求項２７に記載の方法。
39. 前記合胞体細胞が上皮組織から生じる腫瘍からとったものである、請求項２７に記載の方法。
40. 前記合胞体細胞が平滑筋組織から生じる腫瘍からとったものである、請求項２７に記載の方法。
41. （ａ）遺伝子構造物を合胞体細胞にｉｎ ｖｉｔｒｏで接触する段階と、
    （ｂ）前記接触された合胞体細胞のリズムを決定する段階と、
    （ｃ）前記遺伝子構造物と接触するよりも前に同じ合胞体細胞のリズムで決定されたリズムと比較する段階と、を含み
    前記合胞体細胞への前記遺伝子構造物の結合は、前記接触された合胞体細胞のリズムが、前記遺伝子構造物と接触するよりも前の同じ合胞体細胞のリズムと異なることで示される、合胞体細胞への遺伝子構造物の結合を決定する方法。
42. 前記遺伝子構造物が遺伝子組み換えされた幹細胞である、請求項４１に記載の方法。
43. 前記遺伝子組み換えされた幹細胞は遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞である、請求項４２に記載の方法。
44. 前記遺伝子組み換えされた間葉性幹細胞が遺伝子でトランスフェクトされた、請求項４３に記載の方法。
45. 前記遺伝子は過分極活性化されたサイクリックヌクレオチドゲーテッド２（ＨＣＮ２）遺伝子である、請求項４４に記載の方法。
46. 前記遺伝子構造物は合胞体細胞に結合することができる遺伝子組み換えされた細胞である、請求項４１に記載の方法。
47. 前記合胞体細胞が心筋細胞である、請求項４１に記載の方法。
48. 前記合胞体細胞が哺乳類の肝臓からとったものである、請求項４１に記載の方法。
49. 前記合胞体細胞が動脈からとったものである、請求項４１に記載の方法。
50. 前記合胞体細胞が細動脈からとったものである、請求項４１に記載の方法。
51. 前記合胞体細胞が哺乳類の胃腸管からの細胞である、請求項４１に記載の方法。
52. 前記合胞体細胞が上皮組織から生じる腫瘍からのものである、請求項４１に記載の方法。
53. 前記合胞体細胞が平滑筋組織から生じる腫瘍からのものである、請求項４１に記載の方法。
54. 前記段階（ｂ）が、
    （ｉ）前記遺伝子構造物に接触した前記合胞体細胞に染料を投与する段階と、
    （ｉｉ）前記接触された合胞体細胞のリズムをフォトダイオードで監視する段階と、
    を含む、請求項４１に記載の方法。
55. 前記染料はＣａ−認識染料である、請求項５４に記載の方法。
56. 前記Ｃａ−認識染料がｆｌｕｏ−３である、請求項５５に記載の方法。
57. 前記染料が感圧染料である、請求項５４に記載の方法。
58. 前記段階（ｂ）がエッジ検出の使用を含む、請求項４１に記載の方法。
59. 前記段階（ｂ）が試験ウェルに埋め込まれた電極の使用を含む、請求項４１に記載の方法。
60. 前記電極の使用が、ひとつの１５０×３０μＭの刺激電極およびひとつの直径３０μｍの電極の使用を含む、請求項５９に記載の方法。
61. 前記試験ウェルは内側直径が少なくとも３ｍｍ×３ｍｍである、請求項６０に記載の方法。
62. 前記段階（ｂ）が試験ウェル中のガラスパッチ電極の使用を含む、請求項４１に記載の方法。
63. 前記試験ウェルは内側直径が少なくとも３ｍｍ×３ｍｍである、請求項６２に記載の方法。
64. （ａ）合胞体細胞と結合する性能を有する細胞を、遺伝子構造物を形成するための遺伝子と接触する段階と、
    （ｂ）ｉｎ ｖｉｔｒｏで、段階（ａ）の遺伝子構造物を合胞体細胞に接触する段階と、
    （ｃ）前記接触された合胞体細胞のリズムを決定する段階と、
    （ｄ）前記遺伝子構造物と接触させるよりも前に同じ合胞体細胞のリズムで決定されたリズムと比較し、前記遺伝子構造物が前記合胞体細胞のリズムを変える能力は、前記接触された合胞体細胞のリズムが前記遺伝子構造物に接触するよりも前の同じ合胞体細胞のリズムと異なることで示される段階と、
    （ｅ）前記合胞体細胞のリズムを変える能力を持つと決定された段階（ｄ）の遺伝子構造物を選択する段階と、
    を含む、合胞体細胞のリズムを変えることができる遺伝子構造物を製造する方法。
65. （ａ）合胞体細胞と結合する性能を有する細胞を、遺伝子構造物を形成するための遺伝子と接触する段階と、
    （ｂ）ｉｎ ｖｉｔｒｏで、段階（ａ）の遺伝子構造物を合胞体細胞に接触する段階と、
    （ｃ）前記接触された合胞体細胞の収縮性を決定する段階と、
    （ｄ）前記遺伝子構造物と接触させるよりも前に同じ合胞体細胞の収縮性で決定された収縮性と比較し、前記遺伝子構造物が前記合胞体細胞の収縮性を変える能力は、前記接触された合胞体細胞の収縮性が前記遺伝子構造物に接触するよりも前の同じ合胞体細胞の収縮性と異なることで示される段階と、
    （ｅ）前記合胞体細胞の収縮性を変える能力を持つと決定された段階（ｄ）の遺伝子構造物を選択する段階、とを含む、
    合胞体細胞の収縮性を変える能力を有する遺伝子構造物を製造する方法。
66. （ａ）合胞体細胞と結合する性能を有する細胞を、遺伝子構造物を形成するための遺伝子と接触する段階と、
    （ｂ）ｉｎ ｖｉｔｒｏで、段階（ａ）の遺伝子構造物を前記合胞体細胞に接触する段階と、
    （ｃ）前記接触された合胞体細胞のリズムを決定する段階と、
    （ｄ）前記遺伝子構造物と接触させるよりも前に同じ合胞体細胞のリズムで決定されたリズムと比較し、前記遺伝子構造物の前記合胞体細胞への結合が、前記接触された合胞体細胞のリズムが前記遺伝子構造物に接触するよりも前の同じ合胞体細胞のリズムと異なることで示される段階と、
    （ｅ）前記合胞体細胞と結合されたと決定された段階（ｄ）の遺伝子構造物を選択する段階とを含む、
    合胞体細胞と結合する能力を有する遺伝子構造物を製造する方法。