JP2008134210A - ストレス測定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 本発明に係るストレス測定方法は、生体の唾液を採取して唾液サンプルとする唾液採取工程(S101)と、唾液サンプルに還元剤を加える還元剤付加工程(S102)と、唾液サンプルに酸化剤を加える酸化剤付加工程(S103)と、還元剤付加工程において還元剤が加えられ、酸化剤付加工程において酸化剤が加えられた唾液サンプルの化学発光をチオシアン酸イオンの濃度の指標として測定する発光測定工程(S104)と、チオシアン酸イオンの濃度から、所定の基準に基づいて生体のストレスを評価するストレス評価工程(S105)と、を含む。
【選択図】 図3
Description
図1は、第1実施形態に係るストレス測定方法に用いられるストレス測定システム10の機能構成図である。ストレス測定システム10は、被験者(生体)から採取された唾液に含まれるチオシアン酸イオンの発光現象を利用して被験者のストレスを測定(判定)するものである。具体的には、本システム10は、唾液サンプル設置部11と、還元剤付加部12と、酸化剤付加部13と、発光測定部14と、ストレス評価部15とを含んで構成されている。
Spx
H2O2 + SCN− → OSCN− + H2O + UCL↑
上記の化学式で、Spxは、唾液中に含まれるペルオキシターゼを示したものであり、触媒の役割を果たしている。また、UCL↑は、微弱化学発光(ultra-weakchemiluminescence)であり、化学反応により化学発光が生じることを示している。また、OSCN−は、化学反応により生じる酸化生成物(抗微生物活性保有物質)を示している。なお、還元剤として用いる没食子酸は、上記の化学式には示されていないが、化学発光の発光量を底上げする役割を果たしていると考えられる。
図4に示すフローチャートを参照して、第2実施形態に係るストレス測定方法を説明する。本実施形態に係るストレス測定方法は、被験者(生体)から採取された唾液に含まれるチオシアン酸イオンに基づく吸光度を評価することによって、被験者のストレスを測定するものである。
上述した第1及び第2実施形態で説明した方法以外でも、生体の唾液に含まれるチオシアン酸イオンの濃度を評価することができる。当該評価されたチオシアン酸イオンの濃度から、所定の基準に基づいて生体のストレスを評価することができる。以下に、第1及び第2実施形態の方法以外で、生体の唾液に含まれるチオシアン酸イオンの濃度を評価する方法を説明する。
硫酸アンモニウムとエタノールによる抽出において、Cu(II)がアスコルビン酸によってCu(I)に還元される。この還元Cu(I)とチオシアン酸イオン(SCN−)を反応させると、CuSCNとなり沈殿が生成される。この沈殿生成物は、エタノール層と水層との境界で安定する。反応しなかったCu(I)から、反応したCu(I)=SCN−濃度を測定する。なお、この方法は、Indirectdetermination of thiocyanate with ammonium sulfate and ethanol byextraction-flotation of copper.Analyst. 2000 Oct;125(10):1885-8.に、より詳細に記載されている。
例えば、0.1Mベータアラニン塩酸(pH3.5)をバックとした間接的紫外部吸収測定法によりシリカキャピラリー(64.5cm×75μm)を用いる。検出限界は200nMである。唾液は、例えば20倍精製水により希釈調製してから測定を行う。なお、この方法は、Analysis of thiocyanate in biological fluids by capillary zoneelectrophoresis. JChromatogr A. 2001May 4;916(1-2):273-7. に、より詳細に記載されている。
例えば、1mMクエン酸溶液を移動層としてセチルメチルアミンでコートされたODSカラムを用いる。チオシアン酸イオンは、他の有機、無機イオンと明確に分離される。なお、この方法は、Determination of thiocyanate in human saliva and urine by ionchromatographyAnalyst. 1992Dec;117(12):1855-8.により詳細に記載されている。
実施例1は、上述した第1実施形態のストレス測定方法の実施例である。本実施例においては、男性23人(平均年齢21.6±標準偏差1.3)、女性23人(平均年齢21.9±標準偏差2.3)の学生をストレスの測定対象の被験者とした。これらの被験者に対して、図5に示すような実験を行った。まず、これらの被験者を、5分間、座った状態(座位:sittingposition)にさせる。その後、30分間クレペリン検査を行わせる。その後、また、30分間、座位をとらせる。
実施例2は、上述した第2実施形態のストレス測定方法の実施例である。この方法では、チオシアン酸イオンの基準の吸光度を測定して検量線を作成して、測定した唾液サンプルの吸光度を作成した検量線と比較することにより、ストレスを評価する。
y(吸光度)=0.1813x(チオシアン酸ナトリウム)+0.0188
となる。
被験者Aのチオシアン酸イオン濃度(nm)=
(0.154−0.0188)/0.1813=0.746(mM)
被験者Bのチオシアン酸イオン濃度(nm)=
(0.220−0.0188)/0.1813=1.110(mM)
と求められた。このように求められたチオシアン酸イオン濃度から、被験者のストレスを評価することができる。
Claims (5)
- 生体の唾液を採取して唾液サンプルとする唾液採取工程と、
前記唾液サンプルに含まれるチオシアン酸イオンの濃度を評価する指標物質評価工程と、
前記指標物質評価工程により評価されたチオシアン酸イオンの濃度から、所定の基準に基づいて前記生体のストレスを評価するストレス評価工程と、
を含むストレス測定方法。 - 前記指標物質評価工程は、
前記唾液サンプルに還元剤を加える還元剤付加工程と、
前記唾液サンプルに酸化剤を加える酸化剤付加工程と、
前記還元剤付加工程において還元剤が加えられ、前記酸化剤付加工程において酸化剤が加えられた前記唾液サンプルの化学発光を前記チオシアン酸イオンの濃度の指標として測定する発光測定工程と、
を含むことを特徴とする請求項1に記載のストレス測定方法。 - 前記還元剤付加工程において付加する還元剤は、没食子酸を含むことを特徴とする請求項2に記載のストレス測定方法。
- 前記酸化剤付加工程において付加する酸化剤は、過酸化水素を含むことを特徴とする請求項2又は3に記載のストレス測定方法。
- 前記指標物質評価工程は、
前記唾液サンプルに、当該唾液サンプルに含まれるチオシアン酸イオンと反応して発色する試薬を加える試薬付加工程と、
前記発色剤付加工程において試薬が加えられた前記唾液サンプルの吸光度を前記チオシアン酸イオンの濃度の指標として測定する吸光度測定工程と、
を含むことを特徴とする請求項1に記載のストレス測定方法。
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