JP2008101949A - アミロイドβ結合糖質薄膜、アミロイドβ蛋白質の測定方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】所定の化学式で示されるアミロイドβ結合糖質を基板に結合したアミロイドβ結合糖質薄膜又はアミロイドβ結合糖質修飾基板。これを用いた、インピーダンス測定又は電気化学測定法によるアルツハイマーアミロイドβ蛋白質測定法。
【選択図】図5
Description
民谷ら、J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 11892
本発明によって、アミロイドβと親和性の高い糖鎖と、これを用いたアミロイドβ親和性電極とが提供され、、その糖鎖修飾電極を利用したアミロイドβの検出方法によってアルツハイマー病の信頼性ある早期診断が可能となる。
Triethyleneglycol (関東化学社製品、3.65mL, 27.0mmol)をDMF(関東化学社製品、30mL) に溶かし、NaH (関東化学社製品、140mg, 5.83mmol)を氷冷下で加え、30分放冷したのち、80℃で30分攪拌した。その後、11-Bromo- 1-undecene (和光純薬社製品、1.0mL, 4.6mmol)を加え、24時間攪拌した。さらにNaH (30mg, 1.25mmol)、18-crown-6-ether(東京化成社製品、catalytic amount)を加え、90℃で2日攪拌した。反応の終了後、DMFを減圧蒸留で除き、シリカゲルクロマトグラフィー(溶媒:酢酸エチル、ヘキサン)により精製した。
収量 832mg 収率 64%
1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ5.77 (1H, m, 2-CH), 4.93 (2H, t, J =12, 1-CH2), 3.70-3.54 (2H×6, m, 13-, 14-, 16-, 17-, 19- and 20-CH2), 3.42 (2H, t, J =6, 11-CH2), 2.01 (2H + 1H, q, 3-CH2 and OH), 1.55 (2H, q, 10-CH2), 1.25 (2H×5, s, 4-, 5-, 6-, 7-, 8- and 9-CH2).
2-[2-(10-enyloxy-ethoxy)-ethoxy]-undecanolにチオ酢酸(関東化学社製品、3.5μl、2.5 mmol)とAIBN(和光純薬社製品、54.2mg, 0.166mmol)を入れ、THF2.8μlを加え、窒素雰囲気下、75℃で24時間攪拌した。TLCで反応を確認した後、メタノールを注ぎ、2時間冷却した後、シリカゲルクロマトグラフィー(溶媒: 酢酸エチル、ヘキサン)によって精製した。
収量200mg, 収率67%
1H-NMR(300MHz, CDCl3) δ3.62(2Hx7, t, J=12Hz, CH2), 2.84(2H, t, J=7.2, CH2), 2.30(6H, m, CH3, CH2, and OH), 1.55(2H, m, CH2), 1.25(2Hx5, m, CH2).
ω-(11-{2-[2-(2- hydroxyl ethoxy)-ethoxy]-ethoxy}-undecyl) disulfide (77mg, 1.14mmol, 3eq) をTHF 8mLに溶かし、氷冷下でNaH (10mg, 0.4mmol, 1eq)を加え30分攪拌し、室温でさらに30分攪拌した後、3-bromo-propyne (300μL, 3.99 mmol, 9eq) を加え窒素雰囲気下で攪拌した。6時間後、反応の終了をTLCで確認し、ヘキサンを加え抽出を行った。次にヘキサン層を純水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥を行い、減圧濃縮にかけたものをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。
収量 52mg 収率 61%
N- Acetylglurosamine(東京化成社製品、4.90g, 20.9mmol)に塩化酢酸(東京化成社製品、30ml)を加え、24時間攪拌した、反応液に氷水を加え、反応を停止させ、クロロホルムで抽出し、その後、飽和NaHCO3水で2回、氷水で1回洗浄した。硫酸化マグネシウムで乾燥後、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(溶離液:クロロホルム:メタノール=50:1à
クロロホルムのみ)で精製した。
収量 560mg, 収率6.9 %
1HNMR (CDCl3, 500MHz.):δ 6.19(d, J=4.0, 1H, H-1), 5.76(d, J=8.5, 1H, CONH), 5.32(dd, J=9.10, 1H, H-3), 5.22(m, 1H, H-4), 4.53(ddd, J=3.5, 9.0, 10.5, 1H, H-2), 4.30-4.25(m, 2H, H-5, H-6ProR), 4.16-4.12(m, 1H, H-6proS), 2.05(dd, 12H, Ac). IR(KBr):1747(C=O), 1228(C-O), 601(Cl).
Chloro 2-acetamide-3,4,6-tri-O-acetyl-deoxy-α-D-glucopyranoside(560mg, 1.53mmol)をメチレンクロライド5mlに溶解させ、1N NaOH 5ml、Bu4NBr(東京化成社製、490mg, 1.5mmol)とp-nitorophenol(東京化成社製、430mg, 3.1mmol)を加え、12時間攪拌した。その後、酢酸エチルで抽出し、1N NaOH、飽和食塩水、水で洗浄した。その後、シリカゲルクロマトグラフィー(溶離液:クロロホルム:メタノール=100:1)で精製した。
収量290mg, 収率40%
1HNMR (CDCl3, 500MHz):δ 8.20(dt, 2H, Ph), 7.07(dt, 2H, Ph), 5.60(1H, NHCO), 5.47(d, 1H, H-1), 5.46(t, J=10.5Hz, 1H, H-3), 5.15(t, J=9.5Hz, 1H, H-4), 4.29(dd, J=5.5, 12.0Hz, 1H, H-6proR), 4.20(dd, J=2.0, 5.5, 9.5 Hz, 1H, H-5), 4.10(ddd, J=8.5, 8.5, 10.5 Hz, 1H, H-2), 3.94(ddd, J=2.0, 5.5, 9.5 Hz, 1H, H-5), 2.08, 2.067(sxs, s, 3H, OAc), 1.97(s, 3H, NHAc).
IR(KBr): 1745(C=O), 1523(NO2), 1344(NO2), 1228(C-O).
p-nitrophenyl 2-acetamide-3,4,6-triO-acetyl-2-deoxy-b-D-glucopyranoside(130mg, 0.29mmol)をメタノール10mlに溶解させ、ナトリウムメトキシド(東京化成社製、10mg, 0.19 mmol)を加え、室温で2時間攪拌した。陽イオン交換樹脂(アンバーリスト、オルガノ社製)で中和し、ろ過した。ろ液を濃縮し、再結晶により目的化合物を得た。
収量 100 mg, 収率100%
1H NMR (D2O, 500MHz):δ 8.26(dt, 2H, Ph), 7.20(dt, 2H, Ph), 5.32(d, J=8.5Hz, 1H, H-1), 4.03(dd, J=8.5, 10.5 Hz, H1, H-2), 3.96(dd, J=2.5, 12.5 Hz, H-1, H-6proS), 3.80(dd, J=5.5, 12.5 Hz, 1H, H-6proR), 3.69(m, 2H, H-3, H-5), 3.38(dd, J=9.0, 10.0 Hz, 1H, H-4), 2.01(s, 3H, Ac).
IR(KBr):3307(OH), 1521(NO2), 1346(NO2), 1250(C-O).
30mlナスフラスコにp-nitrophenyl 2-acetamide-2-deoxy-β-D-glucopyranoside 200 mgを入れてDMF8 mlに溶かした。ソニケーターでよく溶解させた後、40℃のオイルバス中でDMF6 mlに溶かしたMe3N・SO3 3e.q.(シグマアルドリッチ社製、240.5 mg)を一滴ずつ加えて3時間攪拌した。その間TLCで反応を追跡していった(展開溶媒 クロロホルム:メタノール=2:1)。反応終了後、メタノールを14 ml加えて室温で3時間攪拌し、エバポレーターで濃縮して逆相カラムで分離精製を行った。その後、得られた化合物を陽イオン交換樹脂を2 ml加えて3日間攪拌した。その後陽イオン交換樹脂をガラスフィルターでろ過して、液体を濃縮し凍結乾燥させた。
収量 123.1 mg 収率 47.2 %
1H NMR (500 MHz, D2O, 30 ℃)δ 8.02 (m, 2H, Hmetha of phenyl group), 7.00 (m, 2H, Hortho of phenyl group), 5.16 (d, 1H, J=8.5 Hz, H-1β), 4.27 (dd, 1H, J=2.0, 11.5 Hz, H-6pros), 4.11 (dd, 1H, J=5.5, 11.5 Hz, H-6proR), 3.92 (dd, 1H, J=8.5, 10.5 Hz, H-2), 3.80 (m, 1H, H-5), 3.58 (dd, 1H, J=10.5, 9.0 Hz, H-3), 3.48 (dd, 1H, J=9.0, 10.0 Hz, H-4), 2.74 (s, 9H, 3×Me), 1.89 (s, 3H, Ac)
[2-(2-Chloroethoxy)ethoxy]ethanol (2.20g, 13.0 mmol) をアセトン(30ml)に溶解させ、15% NaHCO3水溶液40 mlを加え、0°Cで攪拌した。KBr (0.312g, 2.60mmol)とTEMPO 0.040g(0.40mmol)を加えた後、Trichloroisocyanuric acid (6.10g, 26.2 mmol)を20分かけてゆっくり滴下した。室温に戻し、8時間攪拌した後、反応の終了をTLCによって確認した。2-Propanol 10mlを加えて、反応を停止させ、反応混合物をセライトでろ過した後、飽和Na2CO3水溶液で中和した。1H HCl水溶液で酸性にした後、CHCl3で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した後、吸引ろ過によって硫酸マグネシウムを除去し、ろ液を減圧濃縮し、無色油状の化合物を得た。
収量 1.94g 収率 88.6%
1H-NMR (300MHz, r.t. CDCl3):δ3.58-3.60(m, 2H, CH2) 3.64-3.68(m, 2H, CH2), 3.69-3.70(m, 2H, CH2), 3.71-3.76(m,2H, CH2), 4.18(s, 2H, CH2).
[2-(2-Chloroethoxy)ethoxy]acetic acid (0.312g, 1.78mmol)をDMF2mlに溶解させ、0°CでNaH(0.530g, 2.22mmol)を加え、30分攪拌した。MeI(0.649g, 3.33mmol)を加えて、室温で22.5時間攪拌した。反応の終了をTLCにて確認した。DMFを減圧留去し、CHCl3に溶解した後、1H HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液、飽和食塩水で2回ずつ有機層を除去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(溶媒:酢酸エチル、ヘキサン)で精製し、無色油状の化合物を得た。
収量 0.242g, 収率74.4%
1H-NMR(300MHz, r.t, CDCl3):δ 3.62(t, 2H, J=6Hz, CH2), 3.71-3.72(m, 2H, CH2), 3.72-3.74(m, 2H, CH2), 3.73(s. 3H, CH3), 3.74-3.76(m, 2H, CH2), 4.16(s, 2H, CH2).
Methyl 2-[2-(2-Chloroethoxy)ethoxy]acetate (0.22g, 1.15mmol)を1N NaOH水溶液15mlに溶解させて室温で16時間攪拌した。反応の終了をTLCによって確認した。1N HCl 水溶液で中和の後、酸性条件下でCHCl3で抽出した。有機層を硫酸マグネシウムによって乾燥した後、吸引ろ過によって硫酸マグネシウムを除去した。ろ液を減圧濃縮して、無色油状の化合物を得た。
収量0.172g, 収率84.4%
1H-NMR (300MHz, CDCl3): d3.41(t, 2H, J=4.8Hz, J=5.1Hz, CH2), 3.67-3.69(m, 2H, CH2), 3.70-3.71(m, 2H, CH2), 3.75-3.78(m, 2H, CH2), 4.16(2, 2H, CH2).
p-nitropheny 2-acetoamido-2-deoxy-6-sulfate b-D-glucopyranoside(0.10g, 0.29mmol)をMeOHに溶解し、Pd/Cを0.010g加え、水素雰囲気下11時間攪拌した。次いで、Pd/Cをガラス繊維ろ紙にてろ過し、ろ液を減圧濃縮した(p-aminophenyl 2-acetoamido-2-deoxy-6-sulfate β-D-glucopyranoside)。減圧濃縮したろ液に、DMF3mlを加え、0℃で攪拌しながら、HATU(ペプチド研究所社製品、0.103g, 0.44mmol)、N,N-diisopropylethylamine (東京化成社製品、0.74μl, 0.44mmol)の順で加えた。室温に戻し、4時間攪拌した。反応の終了をTLCによって確認した。DMFを減圧留去し、逆相シリカゲルクロマトグラフィー(溶媒、水、メタノール)によって精製した。
収量0.134g, 収率96.0%
1H-NMR (500MHz, CD3OD):d1.93(s, 3H, OCOCH3), 3.10-3.34(m, 2H, CH2), 3.12-3.14(m, 1H, 5H),3.10-3.34(m, 1H, H4), 3.67-3.69(m,2H, CH2),3.46(dd, 1H, J=9.0Hz, 8.5Hz H3), 3.59-3.63(m, 2H, CH2), 3.64-3.66(m, 2H, CH2), 3.79-3.83(m, 1H, H2), 4.90(d, 1H, J=8.5Hz H1), 3.67-3.69(m, 2H, H6), 6.95(d, 2H, J=8.7Hz, PhH), 7.43(d, 2H, J=9.0Hz, PhH).
5-Acetamide-3,5-dideoxy-D-glycero-D-galacto-2-nonulosonic acid (東京化成社製品、3.00g, 9.70mmol)にMeOH(50ml)、Amberlist 50(H+)(ダウケミカル社製品、2.00g)を加えて静かに磁気攪拌した。反応の進行をTLCで追跡した。9.5 時間後、反応を止めて、Amberlist (H+)をろ過して濃縮した。これをMeOHに溶解させ、ジエチルエーテルで再結晶させることで、白色粉状の化合物を得た。
収量 2.96g, 収率94%
1HNMR (500MHz, CD3OD) d 4.02(m, 1H, H-4), 3.98(dd, 1H, J=1.5, 11.0Hz, H-6), 3.75-3.81(m, 2H, H-5 and H-9), 3.76(s, 3H, Ch3), 3.69(m, 1H, H-8), 3.60(dd, 1H, J=5.5, 11.0Hz, H-9), 3.45(dd, 1H, J=1.5, 9.0Hz, H-7), 2.20(dd, 1H, J=5.0, 12.5Hz, H-3), 2.00(s,3H, Ac), 1.88(dd, 1H, J=11.5, 13.5Hz, H-3).
5-Acetamide-3,5-dideoxy-D-glycero-D-galacto-2-nonulosonic acid methyl etser (961mg, 2.97mmol)にAc2O(5.0ml)、pyridine (7.0ml)を加えて、氷浴中で塩化カルシウム管をつけて磁気攪拌した。反応の進行をTLCによって追跡した。23時間後、反応を止めて酢酸エチルで抽出(1N HCl x 2, NaHCO3aq x 2, H2O x 2)した。硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶媒:トルエン、酢酸エチル=1/3)で精製、濃縮して、無色透明の油状化合物47%を得た。
1HNMR(500MHz, CDCl3):δ 5.37(dd, 1H, J=1.5, 5.5Hz, H-7), 5.23-5.28(m, 2H, NH and H-4), 5.08(ddd, 1H, J=2.5, 5.5, 7.0Hz, H-8), 4.49(dd, 1H, J=3.0, 12.5Hz, H-9), 4.10-4.14(m, 3H, H-5, H-6, and H-9), 3.80(s, 3H, CH3), 2.55(dd, 1H, J=5.0, 13.0, H-3), 2.15(s, 3H, Ac), 2.10(dd, 1H, H-3), 2.07(s, 3H, Ac), 2.04(s, 3H, Ac), 2.04(s, 3H, Ac), 1.90(s, 3H, Ac).
5-Acetamide-2,4,7,8,9-penta-O-acetyl-3,5-dideoxy-D-glycero-D-galacto-2-nonulosonic acid methyl ester(504.7mg, 0.946 mmol)をメチレンクロライド(9.5 ml)に溶解させ、ベンゼンチオール(108.7μl, 1.04mmol)、(C2H5)2O BF3(632.0μl, 2.34mmol)を加えて室温で磁気攪拌した。クロロホルムで抽出した後、NaHCO3水溶液、水で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液を濾過、濃縮して、シリカゲルクロマトグラフィー(溶媒、トルエン、酢酸エチル)で精製、能職して、白色固体状の化合物を得た。
収量 413mg, 収率75%
1HNMR (500MHz, CDCl3) δ7.27-7.46(m, 5H, Ph), 5.57(d, 1H, H-7), 5.39(ddd, 1H, H-8), 4.95(m, 1H, H-4), 4.63(dd, 1H, H-6), 4.99(dd, 1H, H-9), 4.14(m, 2H, H-5 and NH), 4.01(dd, 1H, H-9), 3.61(s, 3H, CH3), 2.62(dd, 1H, H-3), 2.11(s, 3H, Ac), 2.08(s, 3H, Ac), 2.06(m,1H, H-3), 2.05(s, 3H, Ac), 1.97(s, 3H, Ac), 1.91(s, 3H, Ac).
二口ナスフラスコにスターラーチップとモレキュラーシーブス3Aをいれ、3方コック、セプタムで栓をして脱水した後、窒素置換した。アセトニトリル(10ml)にPhenyl 5-acetamide-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-2-thio-b-D-glycero-D-galacto-2-nonuloxonic acid methyl ester (500mg, 0.857mmol), NIS(386mg, 1.71mmol)を溶解させて、シリンジで加え、2-2-2-Chloroethoxyethoxyethanol (872μl, 6.00mmol)を加えた後、1時間磁気攪拌した。-35℃においてシリンジでTfOH(30μl)を加えて反応を開始させ、8時間攪拌した。トリエチルアミン数滴を加えて反応を停止し、セライトで濾過をしてクロロホルムで抽出し、(NaHCO3+Na2SO3 溶液、食塩水、水)で洗浄、硫酸マグネシウムで乾燥した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(溶媒、トルエン、酢酸エチル)で精製、能職して、白色固体状の化合物を得た。
収量 362mg、収率362.4mg
1HNMR (500MHz, CDCl3) δ5.39(m, 1H, H-4), 5.32(dd, 1H, H-7), 5.25(m, 1H, NH), 4.89(ddd, 1H, H-8), 4.30(dd, 1H, H-9), 4.10(m, 3H, H-5, H-6 and H-9), 3.89-3.97(m, 2H,CH2), 3.80(s,3H, CH3), 3.63-3.69(m, 10H, CH2x5), 2.15(s, 3H, Ac), 2.06(m, 1H, H-3), 2.03(s, 3H, Ac), 1.88(s, 3H, Ac)
Methyl(5-acetamido-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-2-(2-(2-(2-chloroethoxy)ethoxy)ethoxy)ethoxy)-β-D-glycero-D-galacto-2-nonulopuranosid)onate (362.4mg, 0.564mmol)をDMF(10ml)に溶解させ、アジ化ナトリウム(183.5mg, 2.82mmol)を加えて、70度で磁気攪拌させた。その後、反応混合物を濾過、濃縮し、残渣を酢酸エチルで抽出し、食塩水、水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。
1HNMR (500MHz, CDCl3) δ5.39(m, 1H, H-4), 5.32(dd, 1H, H-7), 5.23(m, 1H, NH), 4.89(ddd, 1H, H-8), 4.30(dd, 1H, H-9), 4.06(m, 3H, H-5, H-6 and H-9), 3.80(s, 3H, CH3), 3.63(m, 10H, CH2x5), 2.62(dd, 1H, H-3), 2.15(s, 3H, Ac), 2.14(s, 3H, Ac), 2.06(m, 1H, H-3), 2.04(2, 3H, Ac), 2.03(s, 3H, Ac), 1.88(s, 3H, Ac).
Methyl(5-acetamido-4,7,8,9-tetra-O-acetyl-3,5-dideoxy-2-(2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)ethoxy)-β-D-glycero-D-galacto-2-nonulopuranosid)onate (209.6mg, 0.323mmol) をメタノール(7.0ml)に溶解させ、NaOMe(2.9mg, 0.323 mmol)を加えて磁気攪拌した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。
収量 94.4mg, 収率 61%
1HNMR (500MHz, CDCl3) δ3.92(m, 1H, H-4), 3.50-3.81(m, 4H, H-6, H-5 and CH2), 3.78(dd, 1H, H-9), 3.74(m, 1H, H-8), 3.56(m, 9H, H-9, CH2), 3.64(s, 3H, CH3), 3.31(m, 2H, Ch2), 2.70(dd, 1H, H-3), 2.00(s, 3H, Ac), 1.75(dd, 1H, H-3)
Methyl(5-acetamido-3,5-dideoxy-2-(2-(2-(2-azidoethoxy)ethoxy)ethoxy)ethoxy)-β-D-glycero-D-galacto-2-nonulopuranosid)onate (94.4mg, 0.196 mmol)に0.2M NaHCO3を加えて60度で磁気攪拌した。反応終了後、アンバーリストで中和して混合物をろ過し、濃縮、凍結乾燥した。
収量140mg
1HNMR (500MHz, CDCl3) δ3.42-3.85(m, 5H, H-4, H-5, H-6 and CH2), 3.50-3.66(m, 11H, H-8, H-9, H-9 and CH2), 3.43-3.45(m, 3H, H-7 and Ch2), 2.67(dd, 1H, H-3), 1.96(s, 3H, Ac), 1.61(dd, 1H, H-3).
1-{2-[2-(2-Prop-2-ynyloxy-ethoxy)-ethoxy]-ethoxy}-11-(11-{2-[2-(2-prop-2-ynyloxy-ethoxy)-ethoxy]-ethoxy}-undecyldisulfanyl)-undecane disulfide (6.41mg)にエタノール1mLを入れ、0.01mmol/Lの溶液を作った。その溶液を、洗浄した金基板上に表面を覆うように数滴滴下し、12時間室温で放置した。12時間後、金基板をエタノールに数回浸して洗浄した。
純水(333μL)とエタノール(167μL)に、 p-nitorophenyl [2-(2-azidoethoxy)ethoxy]amidophenyl 2-acetoamido-2-deoxy-6-sulfate β-D-glucopyranoside(44.5mg, 0.6mmol)、アスコルビン酸 (0.99mg, 5mol%)とCuSO4(0.16,mg 1mol%)を加え、0.2 M溶液を作成した。その溶液を、薄膜形成した金基板上に数滴滴下し、基板上で反応させ、結合させた。薄膜の形成は反射赤外スペクトルおよび、X線分光解析によって確認した。
電気化学測定はビーエイエス社製品 ALS600、電極は北斗産業のプリント微小電極を使用した。アミロイドβは20μMに調整し、37℃で加温した。所定時間放置後、アミロイドβ溶液5μlを電極にアプライし、1分間吸着させた。その後、純水(MilliQ水)10mlにて電極表面を洗浄した。洗浄後、窒素ガスで表面を乾かし、電気メディエーターとして0.1Mol-K4[Fe3(CN)6]/K3[Fe4(CN)6] (in 1mol-KCl)を30μl滴下し、表面を覆い、インピーダンス測定を行った。その結果を図5に示す。
Claims (16)
- アミロイドβ蛋白と特異的に結合する反応性物質が膜又は基板に固定された構造部分を備えることを特徴とするアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記反応性物質が糖構造体又はその誘導体であることを特徴とする請求項1に記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記反応性物質が自己組織化膜を形成して固定されていることを特徴とする請求項1〜請求項5のいずれかに記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記反応性物質が、その一部に備えた結合性官能基を介して、前記膜又は基板に設けた導電性材料に結合・固定されていることを特徴とする請求項1〜請求項6のいずれかに記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記反応性物質が、その一部に備えた結合性官能基を介して前記膜又は基板に固定されていることを特徴とする請求項1〜請求項7のいずれかに記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記膜又は基板が導電性材料からなり、又は電気絶縁性の基板材料上に導電性材料を配設した構造を持ち、これらの導電性材料に対して前記反応性物質が固定されていることを特徴とする請求項1〜請求項8のいずれかに記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記膜又は基板が電気絶縁性の基板材料上に導電性材料を配設した構造を持つ場合において、この導電性材料が、任意の方法により形成された特定のパターンを持つ電極を構成していることを特徴とする請求項9に記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記特定のパターンを持つ電極が電極印刷法により形成された印刷電極であることを特徴とする請求項10に記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記印刷電極の構成材料の主体が金ペースト、カーボンペースト又は銀ペーストをであることを特徴とする請求項11に記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 前記特定のパターンを持つ電極が金属蒸着された金属によって構成されていることを特徴とする請求項10に記載のアミロイドβ結合用ベース体。
- 請求項1〜請求項13のいずれかに記載のアミロイドβ結合用ベース体を用いて、被検試料中のアミロイドβ蛋白の検出又は定量を行うことを特徴とするアミロイドβ蛋白の測定方法。
- 前記アミロイドβ蛋白の検出又は定量を行う手段が電気化学的測定方法であることを特徴とする請求項14に記載のアミロイドβ蛋白の測定方法。
- 前記電気化学的測定方法がインピーダンス法であることを特徴とする請求項15に記載のアミロイドβ蛋白の測定方法。
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