JP2007525517A

JP2007525517A - ＥＲβリガンドとしてのジベンゾクロメン誘導体およびその使用

Info

Publication number: JP2007525517A
Application number: JP2007500960A
Authority: JP
Inventors: リチャード・イー・ミューショー; リチャード・ジェイムズ・エドソール・ジュニア
Original assignee: Wyeth LLC
Current assignee: Wyeth LLC
Priority date: 2004-02-26
Filing date: 2005-02-24
Publication date: 2007-09-06
Also published as: WO2005082880A1; US20070049605A1; US7157492B2; BRPI0508065A; AU2005217626A1; EP1718630A1; US20050234074A1; CA2556889A1; US7671084B2

Abstract

本発明は、以下の構造式：

［ここに、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７およびＲ^８は、詳細な説明中で定義されるものである］
を有する、式Ｉのエストロゲン受容体モジュレーターを提供する。

Description

発明の詳細な説明

（関連する出願についての相互参照）
本出願は、２００４年２月２６日に出願された米国特許出願番号第60/547,967号の利益を主張する２００５年２月２３日に出願された米国特許出願番号第___________号について優先権を主張し、その両方の開示内容は出典明示によりその全てを本明細書中の一部とされる。

（発明の分野）
本発明は、新規な置換５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン誘導体、エストロゲン様物質としてのその使用、およびその調製方法に関する。

（背景技術）
エストロゲンの哺乳動物の組織における多面的な効果はよく報告されており、現在でも、エストロゲンが多くの臓器系に影響を及ぼすと認められている［MendelsohnおよびKaras, New England Journal of Medicine 340: 1801-1811 (1999)、Eppersonら、Psychosomatic Medicine 61: 676-697 (1999)、Crandall, Journal of Womens Health & Gender Based Medicine 8: 1155-1166 (1999)、MonkおよびBrodaty, Dementia & Geriatric Cognitive Disorders 11: 1-10 (2000)、HurnおよびMacrae, Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism 20: 631-652 (2000)、Calvin, Maturitas 34: 195-210 (2000)、Finkingら、Zeitschrift fur Kardiologie 89: 442-453 (2000)、Brincat, Maturitas 35: 107-117 (2000)、Al-Azzawi, Postgraduate Medical Journal 77: 292-304 (2001)］。エストロゲンは、様々な様式で組織に影響を及ぼす。おそらく、この作用の最もよく特徴付けられた機構は、遺伝子の転写に変更をもたらすエストロゲン受容体との相互作用である。エストロゲン受容体は、リガンド活性型の転写因子であり、核ホルモン受容体のスーパーファミリーに属する。このファミリーの他のメンバーは、プロゲステロン、アンドロゲン、グルココルチコイドおよびミネラルコルチコイド受容体を含む。リガンドと結合すると、これらの受容体は二量体化し、ＤＮＡ上の特異的な配列（応答エレメントとして知られている）と直接結合するか、あるいは別の転写因子（例えば、ＡＰＩ）と相互作用し、次いでそれが特異的なＤＮＡ配列と直接結合することのいずれかにより、遺伝子転写を活性化することができる［MoggsおよびOrphanides, EMBO Reports 2: 775-781 (2001)、Hallら、Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872 (2001)、McDonnell, Principles Of Molecular Regulation. p351-361(2000)］。あるクラスの「共調節（cogulatory）」タンパク質は、リガンドが結合したレセプターと相互作用することもでき、さらにその転写活性を調節することができる[McKennaら、Endocrine Reviews 20: 321-344 (1999)]。エストロゲン受容体は、リガンド依存的および非依存的様式のいずれにおいてもＮＦκＢ調節型の転写を抑制することができる[Quaedackersら、Endocrinology 142: 1156-1166 (2001)、Bhatら、Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology 67: 233-240 (1998)、Pelzerら、Biochemical & Biophysical Research Communications 286: 1153-7 (2001)]。

エストロゲン受容体は、リン酸化によっても活性化され得る。このリン酸化は、成長因子、例えばＥＧＦにより媒介され、リガンド非存在下で遺伝子転写に変化を及ぼす[MoggsおよびOrphanides, EMBO Reports 2: 775-781 (2001)、Hallら、Journal of Biological Chemistry 276: 36869-36872 (2001)]。

エストロゲンが細胞に影響を及ぼし得るほとんど特徴付けられていない手段は、いわゆる膜受容体を介したものである。そのような受容体の存在は論議の的であるが、エストロゲンが細胞からの迅速な非ゲノム性の応答を引き起こし得ることはよく実証されている。これらの効果を導入するのに関与する分子の実体は、完全に単離されていないが、少なくともエストロゲン受容体の核型に環系することを示唆する証拠がある[Levin, Journal of Applied Physiology 91: 1860-1867 (2001)、Levin, Trends in Endocrinology & Metabolism 10: 374-377 (1999)]。

２つのエストロゲン受容体が今までに発見されている。最初のエストロゲン受容体は約１５年前にクローン化され、現在ではＥＲαとして参照される[Greenら、Nature 320: 134-9 (1986)]。２番目のものは比較的最近見出され、ＥＲβと呼ばれる[Kuiperら、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 93: 5925-5930 (1996)]。ＥＲβの初期の研究は種々のリガンドに対するその親和性を決めることに焦点が当てられ、実際に、ＥＲαと幾つかの差異が確かめられた。ＥＲβの組織分布は、げっ歯類においてよくマッピングされており、それはＥＲαとは一致しない。マウスおよびラットの子宮などの組織は、主にＥＲαを発現しているが、マウスおよびラットの肺では主にＥＲβが発現している[Couseら、Endocrinology 138: 4613-4621 (1997)、Kuiperら、Endocrinology 138: 863-870 (1997)]。同じ器官内でさえ、ＥＲαとＥＲβとの分布は区画化され得る。例えば、マウス子宮においては、ＥＲβは顆粒膜細胞で高効率に発現されており、ＥＲαは卵胞膜細胞および間質細胞に限定されている[SarおよびWelsch, Endocrinology 140: 963-971 (1999)、Fitzpatrickら、Endocrinology 140: 2581-2591 (1999)]。しかしながら、その受容体が同時に発現されている例が存在し、ＥＲαとＥＲβがヘテロ二量体を形成し得るというインビトロ実験の証拠が存在する[Cowleyら、Journal of Biological Chemistry 272: 19858-19862 (1997)]。

大部分の潜在的な内在性エストロゲンは、１７β−エストラジオールである。１７β−エストラジオールの活性を模倣するか、もしくは阻害する非常に多くの化合物が記載されている。１７β−エストラジオールと概ね同じ生物学的効果を有する化合物は、「エストロゲン受容体アゴニスト」と呼ばれる。それと組み合わせて与えられた場合に、１７β−エストラジオールの効果を阻害する化合物は、「エストロゲン受容体アンタゴニスト」と称される。実は、エストロゲン受容体アゴニストとエストロゲン受容体アンタゴニスト活性との間には連続性があり、実際に、幾つかの化合物はある種の組織中ではエストロゲン受容体アゴニストとして働くが、その他の組織中ではエストロゲン受容体アンタゴニストとして働く。相反する活性を有するこれらの化合物は、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭＳ）と称され、治療上有用な物質である（例えば、ＥＶＩＳＴＡ）[McDonnell, Journal of the Society for Gynecologic Investigation 7: S10-S15 (2000)、Goldsteinら、Human Reproduction Update 6: 212-224 (2000)]。同一の化合物が細胞特異的な効果を示すことができるその詳細な理由は解明されていないが、受容体の立体構造および／または共調節蛋白質の環境における差異が示唆されている。

エストロゲン受容体は、リガンドと結合する場合に異なる立体構造をとることが長らく知られていた。しかしながら、最近になって、これらの変化の意義およびその巧妙さが明らかにされた。ＥＲαおよびＥＲβの三次元構造が、種々のリガンドとの同時−結晶化により解かれ、エストロゲン受容体アンタゴニストの存在下でヘリックス１２が応答し、受容体−共調節蛋白質の相互作用に必要な蛋白質の配列が立体構造的に隠されることが明白に示された[Pikeら、Embo 18: 4608-4618 (1999)、Shiauら、Cell 95: 927-937 (1998)]。加えて、ファージディスプレイ技術を用いて、異なるリガンドの存在下で、エストロゲン受容体と相互作用するペプチドが同定された[Paigeら、Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 96: 3999-4004 (1999)]。例えば、完全エストロゲン受容体アゴニスト１７β−エストラジオールとジエチルスチルベストロールとで結合されたＥＲαを区別するペプチドが同定された。別のペプチドは、クロミフェンが結合したＥＲαとＥＲβとを区別することが示された。これらのデータは、それぞれのリガンドが異なった生物学的活性を有する、独特でかつ予測できない立体配置の受容体に配置する可能性があることを示している。

上記のように、エストロゲンは多種多様な生物学的過程に影響を及ぼす。加えて、性別の差が持ち出される場合（例えば、疾病頻度、免疫チャレンジに対する応答など）、その説明は、男女間のエストロゲンレベルの差が関与する可能性がある。

（発明の概要）
本発明は、式：

［式中
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシまたはハロゲンから選択され；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、−ＣＨＯ、アリール、フリル、チエニル、ピリミジニルおよびピリジニルであり；
ただし、Ｒ^１〜Ｒ^８の少なくとも１つはＨ以外であることを条件とする；］
の化合物または医薬上許容されるその塩に関する。
他の態様において、本発明は前記化合物の少なくとも１つを含む医薬組成物に関する。
更なる別の態様において、本発明は疾病の処置または予防における前記化合物の使用に関する。

（発明の詳細な記載）
本発明は式Ｉ

［式中
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシまたはハロゲンから選択され；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、−ＣＨＯ、アリール、フリル、チエニル、ピリミジニルおよびピリジニルであり；
ただし、Ｒ^１〜Ｒ^８の少なくとも１つはＨ以外であることを条件とする；］
の化合物を提供する。

いくつかの実施形態において、アリール基は、置換されることあるフェニルまたはナフチルである。他の実施形態において、Ｒ^５、Ｒ^７およびＲ^８はそれぞれ、独立して、水素またはハロゲンであり；Ｒ^４は、水素、１〜６個の炭素原子を有するアルキル、１〜６個の炭素原子を有するアルコキシ、ハロゲン、２〜８個の炭素原子を有するアルケニル、−ＣＮ、フリル、チエニルまたはピリジニルであることが好ましい。さらに別の好ましい実施形態において、Ｒ^５、Ｒ^７およびＲ^８はそれぞれ、独立して、水素またはハロゲンであり；Ｒ^４は、水素、１〜６個の炭素原子を有するアルキル、１〜６個の炭素原子を有するアルコキシ、ハロゲン、２〜７個の炭素原子を有するアルケニル、−ＣＮ、フリル、チエニルおよびピリジニルであり；Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^６はそれぞれ、独立して、水素、ハロゲンまたはヒドロキシルである。さらに別の実施形態において、Ｒ^５、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して、水素またはハロゲンであり；Ｒ^４は、水素、１〜６個の炭素原子を有するアルキル、１〜６個の炭素原子を有するアルコキシ、ハロゲン、２〜７個の炭素原子を有するアルケニル、−ＣＮ、フリル、チエニルおよびピリジニルであり；Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^６は、それぞれ独立して、水素、ハロゲンまたはヒドロキシルであり；Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^６の少なくとも１つがヒドロキシルであることが最も好ましい。

医薬上許容される塩は、本発明の化合物が塩基性部分を含む場合、有機または無機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、マロン酸、マンデル酸、リンゴ酸、フタル酸、塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸および類似する公知の許容される酸から形成され得る。本発明の化合物が酸性部分を含む場合、塩、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウム、リチウムまたはカリウム）、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、各アルキル基にて１〜６個の炭素原子を有するアルキルアンモニウム塩または１〜６個の炭素原子を有するジアルキルアンモニウム塩、および各アルキル基にて１〜６個の炭素原子を有するトリアルキルアンモニウムは、有機および無機塩基から形成されてもよい。

用語「アルキル」は、本明細書中にて用いられる場合、単独で、または他の基、例えばアルコキシ、アリールアルキル、アルコキシカルボニルの一部として用いられるいずれの場合でも、置換されているかまたは置換されていない脂肪族炭化水素鎖を意味し、限定されるものではないが、特に記載しない限り、１〜１２個の炭素原子を含む、好ましくは１〜６個の炭素原子を含む直鎖および分岐鎖である。例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｉ−ブチルおよびｔ−ブチルは、用語「アルキル」に包含される。特に「アルキル」の定義に含まれるものは、置換されることあるこれらの脂肪族炭化水素鎖である。本明細書中の定義にて使用される炭素番号は、炭素骨格および炭素の枝分かれを意味するが、例えばアルコキシ置換基およびその類似物などの置換基の炭素原子は含まれない。

用語「アルケニル」は、本明細書中にて用いられる場合、単独で、または他の基の一部として用いられるいずれの場合でも、置換されているかまたは置換されていない脂肪族炭化水素鎖を意味し、限定されるものではないが、２〜８個の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖を含み、少なくとも１つの二重結合を含む。好ましくは、アルケニル部分は、１つまたは２つの二重結合を有する。このようなアルケニル部分は、Ｅ体またはＺ体にて存在していてもよく、本発明の化合物はいずれの配座も包含する。特に「アルケニル」の定義に含まれるものは、置換されることあるこれらの脂肪族炭化水素鎖である。アルケニルに結合しているヘテロ原子、例えばＯ、ＳまたはＮ−Ｒ_１は、二重結合に結合している炭素原子に結合されるべきではない。

１つの基または基の一部として本明細書中にて用いられる「アリール」は、置換されることある芳香族性の５−〜１３−員のモノ−またはバイ−炭素環式環、例えばフェニルまたはナフチルを意味する。好ましくは、アリール部分を含む基は、その環中に５〜７個の炭素原子有する単環式である。フェニルは、好ましいアリールの１つである。いくつかの実施形態において、フェニル部分は、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_７アルケニル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、−ＮＯ_２、アミノ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルアミノ、アルキル基あたり１〜６個の炭素原子を有するジアルキルアミノ、チオ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルチオ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルスルフィニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルスルホニル、２〜７個の炭素原子を有するＣ_２−Ｃ_７アルコキシカルボニル、２〜７個の炭素原子を有するアルキルカルボニル、トリフルオロアルコキシ（alkxoy）、ベンジルニトリルまたはベンゾイルで置換されていてもよい。

１つの基または基の一部としてのヘテロアリールは、独立して窒素、酸素または硫黄であってよい１〜５個のヘテロ原子を有するモノ−またはバイ−環式環を含む芳香族性の５−〜１３−員炭素を意味する。好ましくは、ヘテロアリール部分を含む基は、環中に５〜７員を有し、その環員の１〜２個が独立して窒素、酸素または硫黄から選択される単環式を意味する。アリールまたはヘテロアリール部分を含む基は、以下に定義するように置換されていることがあってもよく、または置換されていなくてもよい。ヘテロアリールの例として、限定されるものではないが、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾチエニル、イソベンゾチエニル、キノリル、イソキノリル、キノキサリニルまたはキナゾリニルが挙げられる。

用語「ハロゲン」は、臭素、塩素、フッ素およびヨウ素を含む。

本明細書中にて記載される置換されることある置換基、例えばアルキル、アルケニル、アリールまたはヘテロアリールは、１つまたはそれ以上の置換基、例えば１〜５個または１〜３個で置換されていてもよい。適当な任意の置換基は、独立して、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）、ハロ、ヒドロキシ、カルボキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル（例えば、２〜７個の炭素原子を有する）、シクロアルキル（例えば、５〜８個の炭素原子を有する）、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、アルキルアルコキシ、アルコキシカルボニル、アルコキシアルコキシ、ペルフルオロアルキル、ペルフルオロアルコキシ、アリールアルキル、アルキルアリール、ヒドロキシアルキル、アルコキシアルキル、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、−Ｓ（Ｏ）_２−Ｎ（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）、（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）Ｎ−アルキル、（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）Ｎ−アルコキシアルキル、（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）Ｎ−アルキルアリールオキシアルキル、−Ｓ（Ｏ）ｓ−アリール（ここで、ｓ＝０〜２）、または−Ｓ（Ｏ）_ｓ−ヘテロアリール（ここで、ｓ＝０〜２）；ここで、Ｒ_１１およびＲ_１２は、それぞれ独立して、水素、置換されていない（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル、置換されていない（Ｃ_３−Ｃ_７）シクロアルキル、アリール、アリール−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル、アリールオキシ−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル、アリールチオ−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル、ヘテロアリールオキシ−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキルまたはヘテロアリールチオ−（Ｃ_１−Ｃ_３）アルキル基から選択されてもよく；または一緒になる場合、アルキレン−基として結合して、例えば３〜８環員の環を形成し得る。本発明の特定の実施形態において、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびシクロアルキルの好ましい置換基には、ニトロ、シアノ、−Ｎ（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）、ハロ、ヒドロキシル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシ、アルコキシアルキルおよびアルコキシカルボニルが含まれる。本発明の特定の実施形態において、アリールおよびヘテロアリールの好ましい置換基には、−Ｎ（Ｒ_１１）（Ｒ_１２）、アルキル、ハロ、ペルフルオロアルキル、ペルフルオロアルコキシ、アリールアルキルおよびアルキルアリールが含まれる。置換されているアルキルおよびアルケニル部分の例として、１−ブロモビニル、１−フルオロビニル、１，２−ジフルオロ２，２−ジフルオロビニル、１，２，２−トリフルオロビニル、１，２−ジブロモエタン、１，２ジフルオロエタン、１−フルオロ−２−ブロモエタン、ＣＦ_２ＣＦ_３、ＣＦ_２ＣＦ_２ＣＦ_３およびその類似物が含まれる。

用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味し、いくつかの実施形態において、１〜３個の炭素原子が好ましい。

本明細書中にて用いられる「アルコキシ」は、Ｒが以上で定義されるようなアルキル基であるＲ−Ｏ−基を意味する。本明細書中にて用いられる「低級アルコキシ」は、Ｒが１〜６個の炭素原子を有するアルキル基であるＲ−Ｏ−基を意味する。いくつかの実施形態において、１〜３個の炭素原子を有するＲが好ましい。

本発明に関して用いられるように、本発明の対象となる化合物または基質を提供することに関し、用語「提供する」は、そのような化合物または基質を直接投与すること、もしくは体内で有効量の該化合物または基質を形成するプロドラッグ、誘導体または類似体を投与することのいずれかを意味する。

本発明の化合物は、少なくとも部分的にエストロゲン欠損もしくは過剰により媒介されるか、またはエストロゲン様物質の使用を通じて処置もしくは抑制される症状、障害または疾病状態の処置あるいは抑制に有用なエストロゲン受容体モジュレーターとして使用することができる。本発明の化合物は、産生される内因性のエストロゲンレベルが大きく減少する閉経期の、更年期の、または閉経後の患者を処置するのに部分的に有用である。更年期障害は、最後の自然な月経期として一般的に定義され、血流中の循環エストロゲンの相当程度の低下を引き起こす、卵巣機能の停止により特徴付けられる。本明細書中にて用いられるように、更年期障害は、外科的、化学的又は卵巣機能の早期の減退もしくは停止を引き起こす病状により生じ得る、減少されたエストロゲン産生の状態も含む。

従って、本発明の化合物は、個人の新たな骨組織形成と古い組織の再吸収との不均衡から生じ、正味の骨量の減少を引き起こす骨粗鬆症を処置もしくは抑制するのに、および骨の無機質脱落を抑制するのに用いることができる。このような骨の激減は、個人の範囲、特に閉経後の女性、両側卵巣摘出手術を受けたことのある女性、受けている女性、拡大されたコルチコステロイド治療を受けている女性、生殖器発育不全を経験している女性、およびクッシング症候群に罹患している女性に生じる。骨折、問題のある骨格を有する個人、および骨に関連する手術および／または人工装具の移植を受けている個人における、歯および口腔の骨、代替物を含む骨に対する特殊な必要性もまた、これらの化合物を用いて処理され得る。これら上記の問題に加えて、これらの化合物は、変形性関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、パジェット病、骨軟化症、骨石灰脱失症、多発性骨髄腫および骨組織に有害な影響を及ぼす他の形態の癌を処置または抑制するのに用いることができる。

本発明の化合物はまた、前立腺肥大症、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性の乳房疾患、腺筋症、卵巣癌、黒色腫、疲れによる癌（prostrate cancer）、大腸の癌、例えば神経膠腫もしくは血管芽腫（astioblastomia）などのＣＮＳ癌を含む、良性もしくは悪性の異常組織増殖を処置または抑制するのにも有用である。

本発明の化合物は心臓保護的であり、そしてそれらはコレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）、およびＬＤＬレベルを低下させるのに；高コレステロール血症；高脂血症；心血管疾患；アテローム性動脈硬化症；抹消血管疾患；再狭窄および血管痙攣を抑制または処置するのに；並びに免疫介在性の血管損傷に向かう細胞事象からの血管壁損傷を抑制するのに有用である。これらの心血管保護の性質は、骨粗鬆症を抑制するために、閉経後の患者をエストロゲンを用いて処置する場合に、およびエストロゲン治療が指示された男性の場合に、非常に重要である。

本発明の化合物は抗酸化物質でもあるため、遊離基誘導型の病状を処置または抑制するのに有用である。正常化するために、抗酸化治療が指示される特定の状態は、癌、中枢神経系障害、アルツハイマー病、骨疾患、老化、炎症性障害、抹消血管疾患、リウマチ性関節炎、自己免疫疾患、呼吸窮迫症、気腫、再潅流傷害の阻止、ウイルス性肝炎、慢性活動性肝炎、結核、乾癬、全身性エリテマトーデス、成人呼吸窮迫症候群、中枢神経系外傷および卒中である。

本発明の化合物はまた、認知増強（認知増強）を与えるのに、および老人性痴呆、アルツハイマー病、認識衰退、神経変性障害を処置または抑制するのに、神経防護作用または認知増強を与えるのに有用である。

本発明の化合物はまた、炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、および大腸炎；更年期に関連する状態、例えば、顔面潮紅を含む血管運動症状、膣もしくは陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、そう痒症、性交疼痛症、排尿障害、頻尿、尿失禁、尿路感染症、顔面潮紅を含む血管運動症状、筋肉痛、関節痛、不眠症、被刺激性、および類似の症状；男性型禿頭症；皮膚萎縮；座瘡；II型糖尿病；不正子宮出血；および不妊症を処置または抑制するのに有用である。

本発明の化合物は、無月経が好都合である病状、例えば、白血病、子宮内膜切除、慢性腎疾患もしくは慢性肝疾患または凝固疾患もしくは障害において有用である。

本発明の化合物は、特にプロゲスチンと組み合わせた場合、避妊剤として用いることができる。

特定の病状もしくは障害の処置または抑制のために投与される場合、有効な用量は、利用される特定の化合物、投与方法、状態、およびその処置される状態の重篤度、並びに処置される個人に関連する種々の物理条件に応じて変更し得ることは理解される。本発明の化合物の有効な投与は、約０．１ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日の経口投与量で与えることができる。好ましくは、投与は、単一投与または２回もしくはそれ以上の分割投与にて、約１０ｍｇ／日〜約６００ｍｇ／日、より好ましくは約５０ｍｇ／日〜約６００ｍｇ／日であろう。計画された１日投与量は、投与経路により変更するものと期待される。

このような用量は、本明細書中の活性化合物を、経口で、移植片を介して、非経口で（静脈内、腹腔内および皮下注射を含む）、直腸で、鼻腔内で、膣内で、および経皮的を含み、患者の血流に導くのに有効な任意の様式で投与することができる。

本発明の活性化合物を含む経口製剤は、錠剤、カプセル剤、口内剤型、トローチ剤、ロゼンジおよび経口液体、懸濁液または溶液を含む、任意の慣用される経口剤型を含み得る。カプセル剤は、活性化合物（群）と、不活性な充填剤および／または医薬的に許容される澱粉（例えば、コーン、ポテトもしくはタピオカ澱粉）などの希釈剤、砂糖、人工甘味料、粉末セルロース、例えば、結晶セルロースおよび微結晶性セルロース、穀粉、ゼラチン、ガムとの混合物を含み得る。有用な錠剤製剤は、慣用の圧縮法、湿潤造粒法または乾式造粒法により作製することができ、限定されるものではないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アカシアガム、キサンチンガム、クエン酸ナトリウム、ケイ酸複合体、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、乾燥澱粉および粉糖を含む、医薬上許容される希釈剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、表面修飾剤（界面活性剤を含む）、懸濁化剤または分解防止剤を利用することができる。好ましい表面修飾剤は、非イオン性およびアニオン性の表面修飾剤を含む。表面修飾剤の代表例は、限定されるものではないが、ポロキサマー（poloxamer）１８８、塩化ベンズアルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアル（cetostearl）アルコール、セトマクゴール（cetomacrogol）乳化ワックス、ソルビトールエステル、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、ケイ酸マグネシウム・アルミニウム、トリエタノールアミンを含む。本明細書中の経口製剤は、活性化合物（群）の吸収を改変するために標準的な遅延または徐放製剤を利用することができる。経口製剤もまた、必要に応じて適当な溶解補助剤または乳化剤を含む、水中もしくは果汁中の活性物質を投与することから構成され得る。

幾つかの場合で、エアロゾルの剤型で本化合物を直接気管に投与することが望ましい場合があり得る。

本発明の化合物もまた、非経口または腹膜内投与することができる。遊離塩または医薬的に許容される塩としてのこれらの活性化合物の溶液または懸濁液は、適切には、界面活性剤、例えばヒドロキシ−プロピルセルロースと混合して、水中で調製することができる。分散剤もまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、および油中のその混合物にて調製されることができる。保存および使用の一般的な条件下で、これらの調合薬は、微生物の増殖を防ぐために防腐剤を含む。

注射の使用に適切な医薬剤型は、滅菌注射溶液または懸濁液の即時調製ための、滅菌水溶液または懸濁液および滅菌粉剤を含む。全ての場合において、剤型は、滅菌でなければならず、また容易に注射針を通過する程度に流体でなければならない。製品の状態および保存下で安定でなければならず、微生物、例えば細菌および菌類の汚染行為から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコール）、適切なそれらの混合物、および植物油を含む、溶媒または分散媒であってよい。

この開示の目的のために、経皮投与は、体の表面並びに上皮および粘膜組織を含む身体通路（bodily passages）の内層を横切る全ての投与を含むことは理解される。そのような投与は、水薬、クリーム剤、発泡剤、パッチ、懸濁剤、溶剤および坐剤（直腸および膣）中の、本化合物または医薬的に許容されるその塩を用いて実施することができる。

経皮投与は、活性化合物、および活性化合物に対して不活性であり、皮膚に対して毒性がなく、そして全身吸収のために皮膚を介して血流中に薬剤を輸送できる担体を含有する経皮パッチの使用を通じて実施することができる。担体は、多くの形態、例えば、クリームおよび軟膏、ペースト、ゲル、および閉塞装置（occlusive device）であって良い。クリームおよび軟膏は、粘稠液または水中油もしくは油中水型のいずれかの半固体乳濁液であってよい。有効成分を含む鉱油まはた親水性の鉱油中に分散された吸収性の粉末から成るペーストもまた適切であろう。種々の閉塞装置は、血流中に有効成分を放出するために、例えば、担体含有もしくは不含の有効成分を含む貯蔵部または有効成分を含むマトリクスを覆う半透膜を用いることができる。その他の閉塞装置は、文献にて既知である。

坐薬製剤は、カカオ脂、坐薬の融点を改変するための付加的なワックスを含む若しくは含まない、およびグリセリンを含む慣用の物質から調製することができる。水溶性坐薬の基材、例えば種々の分子量を有するポリエチレングリコールもまた用いることができる。

本発明の化合物の調製に用いられる試薬は、商業的に入手するか、または文献中に記載の標準的手順により調製することができる。

本発明の幾つかの代表例としての調製法を以下のスキーム１〜６に記載する。

本発明は、以下の特定の、非制限的な実施例に言及して例示する。

実施例１
２−ブロモ−５−メトキシベンジルアルコール
３−メトキシベンジルアルコール（１３．８２ｇ、０．１ｍｏｌ）とＮＢＳ（１９．５８ｇ、０．１１ｍｏｌ）をアセトニトリル（２５０ｍＬ）中にて室温で３時間反応させて標記化合物を調製した。溶媒を除去し、得られた塊をジクロロメタン（２５０ｍＬ）中にスラリーし、濾過して不溶性スクシンイミド副産物を除去した。粗物質をクロマトグラフィー（２０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）により精製して白色固体（１７．６９ｇ、８１％）、融点５７−５８℃を得た。

実施例２
２−［（２−ブロモ−５−メトキシベンジル）オキシ］−７−メトキシナフタレン

無水ＴＨＦ（５００ｍｌ）中の７−メトキシ−２−ナフトール（２６．９２ｇ、０．１５mol）、２−ブロモ−５−メトキシベンジルアルコール（３３．５８ｇ、０．１５mol）およびトリフェニルホスフィン（３９．３ｇ、０．１５mol）溶液に、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のＤＥＡＤ（２６．１０ｇ、０．１５mol）溶液を０．５時間かけて滴加した。溶液を室温で一晩攪拌し、体積の半分を蒸発させて、生成物を高純度で沈殿させた。その固体を濾過し、ＴＨＦですすぎ、ついで乾燥させて３２．９６ｇ（５９％）の白色固体を得た：融点１５６−１５７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.77 (3H, s), 3.86 (3H, s), 5.18 (2H, s), 6.92 (1H, dd, J=3.2 Hz, J=8.7 Hz), 7.00 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.7 Hz), 7.09 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.9 Hz), 7.22 (1H, d, J=3.2 Hz), 7.25 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.35 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.59 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.74 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.76(1H, d, J=8.7 Hz);MS m/z 373/375 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₉H₁₇BrO₃として
計算値（％）: C: 61.14; H: 4.59
測定値（％）: C: 61.29; H: 4.21

実施例３
３，９−ジメトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン

無水ジメチルアセトアミド（５００ｍＬ）中の２−［（２−ブロモ−５−メトキシベンジル）オキシ］−７−メトキシナフタレン（９．３５ｇ、２５ｍｍｏｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．７５ｇ、２．５ｍｍｏｌ）および酢酸ナトリウム（６．１５ｇ、７５ｍｍｏｌ）の混合物を１３０℃で窒素存在下にて２日間攪拌した。冷却後、その触媒を濾過して除去し、ジメチルアセトアミドを減圧下にて除去した。残渣をメタノール（２００ｍＬ）中にスラリーし、所望の生成物を濾過により単離して２．９ｇ（４０％）の黄褐色固体として得た：融点１９０−１９１℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.81 (3H, s), 3.85 (3H, s), 5.14 (2H, s), 6.92 (1H, d, J=2.6 Hz), 7.00-7.03 (2 H, m), 7.18 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.29 (1H, s), 7.79 (1H, d, J=9.0 Hz), 7.92 (1H, d, J=8.7 Hz), 8.26 (1H, s);MS m/z 293 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₉H₁₆O₃として
計算値（％）: C: 78.06;H: 5.52
測定値（％）: C: 77.95;H: 5.34

前記の環化により、メタノール濾過水から生成する望ましくない位置異性体も提供される。この望ましくない位置異性体は純粋なものとして得られず、実施例４のために下記にて説明するように脱メチル化される。

実施例４
５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

１９０℃の塩酸ピリジニウム（３０ｇ、０．２６ｍｏｌ）に３，９−ジメトキシ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン（７．０ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）を加えた。その溶液を１９０℃で３．５時間攪拌し、混合物を室温近くまで冷却した。混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ、攪拌して固体として沈殿させた。この固体を濾過し、水で十分に洗浄して乾燥させた。クロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して５．０ｇ（７９％）の白色固体を得た：融点２３１−２３３℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.05 (2H, s), 6.68 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.83 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.4 Hz), 6.90 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.7 Hz), 6.93 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.96 (1H, d, J=2.1Hz), 7.13 (1H, s), 7.71 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.5 Hz), 9.70 (2H, s);MS m/z 265 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₇H₁₂O₃として
計算値（％）: C: 77.26;H: 4.58
測定値（％）: C: 77.00;H: 4.31

実施例５
５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｆ］クロメン−３，１１−ジオール４

他の位置異性体およびデスブロモ連結生成物の混合物を実施例２に従って同様の脱メチル条件にかけた。粗生成物をクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄褐色固体０．４５ｇ（１％）を得た：融点１９９−２０１℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.93 (2H, s), 6.83 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.89 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.4 Hz), 6.95-6.99 (2H, m), 7.63 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.73-7.81(3H, m), 9.75 (2H, s);MS m/z 265 ([M+H]+)。分析HPLCは、254nmで純度98.9%を示した。
元素分析：C₁₇H₁₂O₃・0.2H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.22;H: 4.67
測定値（％）: C: 76.43;H: 4.49

実施例６
８−クロロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＨ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（０．２０ｇ、０．７６mmol）およびＮ−クロロスクシンイミド（succimide）（０．１２ｇ、０．９１mmol）の溶液を室温で４８時間攪拌した。得られた溶液をフロリジル（Florosil）上に濃縮し、シリカクロマトグラフィー（３０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、０．１４ｇ（６２％）の黄褐色固体を得た。この物質を逆相分取ＨＰＬＣによりさらに精製して標記化合物をオフホワイト固体として得た：融点２１２−２１４℃; ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.12 (2H, s), 6.70 (1H, d, J = 2.37 Hz), 6.85 (1H, dd, J = 2.43 Hz, J = 8.46 Hz), 7.13 (1H, d, J = 9.06 Hz), 7.39 (1H, s), 7.73 (1H, d, J = 8.91 Hz), 7.82 (1H, d, J = 8.53 Hz), 8.24 (1H, s), 9.81 (1H, s), 10.39 (1H, s); MS (ESI) m/z 297/299 ([M-H]-)。
元素分析：C₁₇H₁₁ClO₃として
計算値（％）: C: 68.35;H: 3.71
測定値（％）: C: 68.17;H: 3.65

実施例７
３−（アセチルオキシ）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート

ピリジン（３５ｍＬ）と無水酢酸（３５ｍＬ）の混合物に（Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール）（５．０ｇ、１８．９ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で攪拌した。約１時間後沈殿物が形成され、さらに５時間攪拌を続けた。この混合物を濾過し、生成物を酢酸エチルで洗浄した。粗生成物をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、白色固体（５．０ｇ、７６％）として得た：融点１９４−１９５℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.31 (3H, s), 2.33 (3H, s), 5.20 (2H, s), 7.16 (1H, d, J=1.9 Hz), 7.19 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.25 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.3 Hz), 7.44 (1H, s), 7.54 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.95 (1H, d, J=9.3 Hz), 8.09 (1H, d, J=8.3 Hz), 8.50 (1H, s);MS m/z 349 ([M+H]+)。
元素分析：C₂₁H₁₆O₅として
計算値（％）: C: 72.41;H: 4.63
測定値（％）: C: 72.06;H: 4.48

実施例８
３−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート

無水アセトニトリル（４００ｍＬ）中のＮ−ブロモスクシンイミド（３．１ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）の混合物に３−（アセチルオキシ）−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（５．０ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で一晩攪拌した。固体を濾過し、アセトニトリルで洗浄し、乾燥させて５．９ｇ（９６％）の淡褐色固体を得た。この固体試料をクロマトグラフィー（塩化メチレン）により精製して白色固体として得た：融点２２４−２２６℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.32 (3H, s), 2.35 (3H, s), 5.35 (2H, s), 7.19 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.28 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.3 Hz), 7.31 (1H, dd, J=2.0 Hz, J=8.8 Hz), 7.75 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.05 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.12 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.59 (1H, s); MS m/z 427/429 ([M+H]+)。
元素分析：C₂₁H₁₅BrO₅として
計算値（％）: C: 59.04;H: 3.54
測定値（％）: C: 58.87;H: 3.34

実施例９
１−クロロ−７−メトキシ−２−ナフトール

氷浴温度のアセトニトリル（１００ｍＬ）中の７−メトキシ−２−ナフトール溶液にＮ−クロロスクシンイミド（１．６１ｇ、１２．０７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間氷浴温度で攪拌し、さらに０．１当量のＮ−クロロスクシンイミドを加えた。反応物を１時間かけて室温まで温め、水（１８０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒減圧下にて除去した。エーテルを加え、不溶性不純物を濾過した。母液を濃縮し、クロマトグラフィー（１：４、酢酸エチル−ヘキサン）に付して淡黄色固体を得た：融点７６−７８℃。ＨＰＬＣは、生成物の純度が９８．０％（２３０ｎｍ）と示した。
元素分析：C₁₁H₉ClO₂として
計算値（％）: C, 63.32 H, 4.35
測定値（％）: C, 63.12 H, 4.25

実施例１０
２−［（２−ブロモ−５−メトキシ−ベンジル）オキシ］−１−クロロ−７−メトキシナフタレン

室温の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の実施例７（３．０５ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）、２−ブロモ−５−メトキシベンジルアルコール（３．４９ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４．２２ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ）の溶液にＤＥＡＤ（２．８ｇ、１６．０８ｍｍｏｌ）を１５分かけてゆっくりと加えた。４０分攪拌後、ＴＨＦを蒸発させ、粗生成物をメタノールで粉砕して５．３１ｇの白色固体生成物（８９％）を得た：融点１２６−１２７℃。
元素分析：C₁₉H₁₆BrClO₃として
計算値（％）: C, 55.98; H, 3.96
測定値（％）: C, 55.86; H, 4.01

実施例１１
７−クロロ−３，９−ジメトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン

ジメチルアセトアミド（dimethyacetamide）（２２０ｍＬ）中の実施例８（３．１２ｇ、７．６６ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（１．８８ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）およびジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．６１ｇ、２．３ｍｍｏｌ）の混合物を１３０℃で３時間加熱した。溶媒を高真空下にて除去し、触媒を二塩化メチレンを用いたフロリジルに通じて濾過した。固体を二塩化メチレン−メタノール（１：２）で洗浄して２．５９ｇの生成物を得た。母液を濃縮し、クロマトグラフィー（１０％酢酸エチル−ヘキサン）に付し、メタノールで洗浄してさらに１６０ｍｇの生成物を白色固体として得た。総収量２．７５ｇ（７４．５％）：融点１６６−１６８℃。
元素分析：C₁₉H₁₅ClO₃として
計算値（％）: C, 69.84;H, 4.63
測定値（％）: C, 69.59;H, 4.32

実施例１２
７−クロロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

実施例９（２．２５ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）および塩酸ピリジウミウム（（２１．９ｇ、１６２ｍｍｏｌ）の混合物を２時間１８４℃まで加熱した。反応混合物を放冷し、水（３００ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出し、塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、生成物をクロマトグラフィー（４０％酢酸エチル−ヘキサン）に付して白色固体を得て、それを塩化メチレン（２５ｍＬ）で粉砕して１．２ｇ（５８％）を得た；融点２３０−２３１℃。
元素分析：C₁₆H₁₁ClO₃として:
計算値（％）: C, 68.35;H, 3.71
測定値（％）: C, 68.02;H, 3.57

実施例１３
７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

メタノール（２５ｍＬ）中の７−ブロモ−３−（アセチルオキシ）−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（４２７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の混合物にメタノール（６ｍＬ）中の２５％ナトリウムメトキシドを加えた。反応物を室温で０．５時間攪拌し、次いで酢酸エチル（３００ｍＬ）および１ＮＨＣｌ（１５０ｍＬ）で希釈した。酢酸エチル部分を水（２×１００ｍＬ）および塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過した。溶媒を減圧下で除去し、得られた固体をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄色固体（２８６ｍｇ、８３％）を得た：融点（分解）260℃以上;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.19 (2H, s), 6.70 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.86 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.99 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.31 (1H, d, J=2.3 Hz), 7.79 (1H, d, J=6.3 Hz), 7.81 (1H, d, J=6.0 Hz), 8.22 (1H, s), 9.97 (2H, br s);MS m/z 343/345 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₇H₁₁BrO₃として
計算値（％）: C: 59.50;H: 3.23
測定値（％）: C: 59.22;H: 3.29

実施例１４
３，９−ジヒドロキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−７−カルボニトリル

３−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（８５５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）および無水ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）の混合物にシアン化銅（１．０ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１５０℃に加熱し、一晩維持した。混合物を冷却し、酢酸エチルおよび水間で懸濁した。その層を分離し、酢酸エチル部分を水（３×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチルを無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去し、得られた固体をメタノール（１０ｍＬ）に溶かし、２５％ナトリウムメトキシドを加えた（３ｍＬ）。０．５時間の攪拌後に、酢酸エチル（５０ｍｌ）および１ＮＨＣｌ（２０ｍＬ）を加え、その層を分離し、有機部分を水（３×３０ｍＬ）および塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させた後、溶媒を除去し、薄黒い黄色固体を得て、それをクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して淡黄色固体（２０８ｍｇ、３６％）を得た：融点＞２８０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.32 (2H, s), 6.71 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.87 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.3 Hz), 7.06 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.9 Hz), 7.18 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.84 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.87 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.50 (1H, s), 9.90 (1H, br s), 10.32 (1H, br s);MS m/z 288 ([M-H]-)。分析HPLCは254nmで純度98.5%を示した。
元素分析：C₁₈H₁₁NO₃ ・0.5H₂Oとして
計算値（％）: C: 72.48;H: 4.05;N: 4.70
測定値（％）: C: 72.31;H: 3.96; N: 4.55

実施例１５
７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

３−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（４２７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ＣｕＢｒ（１４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）および無水ＤＭＦ（６ｍＬ）の混合物に２５％ＮａＯＭｅ／メタノール（３ｍＬ）を加えた。混合物を１時間１２０℃に加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（１００ｍＬ）および１ＮＨＣｌ（５０ｍＬ）を加えた。その層を懸濁し、有機部分を水（３×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させ、粗生成物をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄色固体（２６０ｍｇ、８８％）を得た：融点（分解）２４０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.88 (3H, s), 5.09 (2H, s), 6.70 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.83 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.3 Hz), 6.93 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.19 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.72 (1H, d, J=8.5 Hz), 7.77 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.92 (1H, s), 9.75 (2H, s);MS m/z 295 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₈H₁₄O₄として
計算値（％）: C: 73.46 H: 4.79
測定値（％）: C: 73.19 H: 4.62

実施例１６
７−ビニル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

３−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（３００ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、無水トルエン（２ｍＬ）およびトリブチルビニルチン（２５４ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の混合物にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１６０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流温度まで加熱し、４．５時間維持した。反応混合物を冷却し、水および酢酸エチルで希釈し、有機部分を水および塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去した後、粗物質をメタノール（１０ｍＬ）および２５％ナトリウムメトキシド（２ｍＬ）で処理した。混合物を０．５時間攪拌し、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）および１ＮＨＣｌ（２０ｍＬ）を加えた。有機部分を分離し、水（２×２０ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去して、固体を得て、それをクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄褐色固体（４５ｍｇ、１５％）を得た：融点（分解）１９５−１９７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.07 (2H, s), 5.66-5.76 (2H, m), 6.69 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.4 Hz), 6.91-7.04 (2H, m), 7.34 (1H, d, J= 2.4 Hz), 7.74 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.10 (1H, s), 9.72 (2H, s); MS m/z 291 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₉H₁₄O₃ ・0.2 H₂0として
計算値（％）: C: 77.64;H: 4.94
測定値（％）: C: 77.63;H: 4.81

実施例１７
３−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート

ピリジン（８ｍＬ）および無水酢酸（８ｍＬ）の混合物に７−メトキシ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（１．３７ｇ、４．７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で２時間攪拌した。その不溶性の固体を濾過し、１０％酢酸エチル−ヘキサンですすいで黄褐色固体（１．６ｇ、９０％）を得た。この固体部分をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−塩化メチレン）により精製して白色固体を得た：融点１６５−１６７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.31 (3H, s), 2.33 (3H, s), 3.95 (3H, s), 5.24 (2H, s), 7.18 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.22 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.25 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.67 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.96 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.08 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.28 (1H, s); MS m/z 379 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.8%を示した。
元素分析：C₂₂H₁₈O₆・0.3 H₂0として
計算値（％）: C: 68.85;H: 4.88
測定値（％）: C: 68.93;H: 4.72。

実施例１８
３−（アセチルオキシ）−１２−ブロモ−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート

無水アセトニトリル（１００ｍＬ）中の３−（アセチルオキシ）−１２−ブロモ−７−メトキシ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（５７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物にＮ−ブロモスクシンイミド（３５０ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を除去し、粗残渣をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、黄白色固体（５００ｍｇ、７３％）を得た：融点１７６−１７７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.33 (3H, s), 2.35 (3H, s), 3.96 (3H, s), 5.12 (2H, s), 7.30 (1H, d, J=2.9 Hz), 7.31 (1H, s), 7.42 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=9.3 Hz), 7.80 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.35 (1H, d, J=9.3 Hz), 8.54 (1H, dd, J=2.0 Hz, J=7.6 Hz)。
元素分析：C₂₂H₁₇BrO₆として
計算値（％）: C: 57.79;H: 3.75
測定値（％）: C: 57.54;H: 3.63

実施例１９
１２−ブロモ−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

メタノール（２５ｍＬ）中の３−（アセチルオキシ）−１２−ブロモ−７−メトキシ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（２６０ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の混合物にメタノール（３ｍＬ）中の２５％ナトリウムメトキシドを加え、混合物を０．５時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ）と１ＮＨＣｌ（２０ｍＬ）の間に懸濁し、有機部分を水（３×５０ｍＬ）に次いで塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。酢酸エチルを無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去して黄褐色固体を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー（５０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して９５ｍｇ（４５％）の黄褐色固体を得た：融点（分解）２５０℃以上;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.89 (3H, s), 4.97 (2H, s), 6.82 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.88 (1H, dd, J=2.7 Hz, J=8.5 Hz), 7.12 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=9.3 Hz), 7.29 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.12 (1H, d, J=9.3 Hz), 8.29 (1H, d, J=8.3 Hz), 9.93 (1H, s), 10.06 (1H, s);MS m/z 373/375 ([M+H]+)。
元素分析：C₁₈H₁₃BrO₄として
計算値（％）: C: 57.93;H:3.51
測定値（％）: C: 57.64 ;H:3.34

実施例２０
１２−クロロ−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の３−（アセチルオキシ）−７−メトキシ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（２９０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）の混合物にＮ−クロロスクシンイミド（１３３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌した。溶媒を除去し、メタノール（１０ｍＬ）および２５％ナトリウムメトキシド−メタノール（３ｍＬ）を加えた。室温で０．５時間攪拌した後、酢酸エチル（２５ｍＬ）および１ＮＨＣｌ（１０ｍＬ）を加え、混合物を振盪し、その層を分離し、酢酸エチルを水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄した。混合物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を除去し、粗黄褐色固体をシリカゲルクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して１６６ｍｇ（６６％）の白色固体を得た：融点（分解）２４０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.89 (3H, s), 4.99 (2H, s), 6.82 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.88 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.12 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.29 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.11 (1H, d, J=9.3 Hz), 8.27 (1H, d, J=8.3 Hz), 10.00 (2H, br s);MS m/z 329/331 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.6%を示した。
元素分析：C₁₈H₁₃ClO₄・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 65.05;H: 4.06
測定値（％）: C: 65.21;H: 4.12

実施例２１
７−メチル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、無水ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）およびジクロロビス（トリ−ｏ−トリルホスフィン）パラジウム（７９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物にテトラメチルスズ（２６８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃に加熱し、３時間維持した。ＴＬＣおよびＭＳ分析は、出発物質と生成物の１：１混合物と示した。混合物を室温まで冷却し、さらなるテトラメチルスズ（２６８ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）および触媒（７９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を一晩８０℃で加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）および水（２５ｍＬ）を加えた。その層を分離した後、有機部分を水（３×２０ｍＬ）次いで塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、粗生成物をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、黄白色固体（１１７ｍｇ、４２％）を得た：融点２２４−２２６℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.38 (3H, s), 5.06 (2H, s), 6.69 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.83 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.4 Hz), 6.93 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.7 Hz), 7.08 (1H, d, J=2.3 Hz), 7.71 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.77 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.01 (1H, s), 9.67 (2H, s);MS m/z 279 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.5%を示した。
元素分析：C₁₈H₁₄O₃ (0.2 H₂O)として
計算値（％）: C: 76.69;H: 5.15
測定値（％）: C: 76.61;H: 4.99

実施例２２
７−［２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

３−（アセチルオキシ）−７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−９−イルアセテート（２．０３ｇ、４．８ｍｍｏｌ）、（２−ヒドロキシメチルフェニル）ボロン酸二水和物（１．５４ｇ、１３．３ｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．０７ｇ、１５ｍｍｏｌ）、ジメトキシエタン（１００ｍＬ）および水（１０ｍＬ）の混合物にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流温度に１時間加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）と水（７５ｍＬ）の間に懸濁した。酢酸エチルを水（２×７５ｍＬ）に続いて塩水（７５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた黄色液体をメタノール（１００ｍＬ）に溶かし、２５％ナトリウムメトキシド（１０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ）および１ＮＨＣｌ（７５ｍＬ）で希釈した。酢酸エチルを水（３×７５ｍＬ）に次いで塩水（７５ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去して黄褐色固体を得て、それをクロマトグラフィー（３５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して白色固体（５００ｍｇ、１５％）を得た:融点171-173℃; ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.08 (1H, dd, J=3.7 Hz, J=14.3 Hz), 4.26 (1H, dd, J=3.6 Hz, J=14.3 Hz), 4.92 (2H, s), 4.94-4.99(1H, m), 6.36 (1H, d, J=2.0 Hz), 6.63 (1H, d, J=2.1 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.5 Hz), 6.89 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.7 Hz), 7.11 (1H, d, J=7.4 Hz), 7.36-7.39 (1H, m), 7.45-7.49 (1H, m), 7.67 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.6 Hz),8.20 (1H, s), 9.53 (1 H, br s), 9.70 (1H, br s);MS m/z 369 ([M-H]-).分析HPLCは280nmで純度94.9%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₄・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.71;H: 4.99
測定値（％）: C: 76.56;H: 4.95

実施例２３
７−フェニル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルアセトアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物にフェニルボロン酸（３６６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３時間１２０℃に加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄褐色固体（１７０ｍｇ、５０％）を得た：融点２２５−２２７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.95 (2H, s), 6.63 (2H, s), 6.85 (1H, dd, J=2.2 Hz, J=8.4 Hz), 6.92(1H, dd, J=2.2 Hz, J=8.7 Hz), 7.33 (2H, d, J= 7.0 Hz), 7.40-7.43 (1H, m), 7.49-7.53 (2H, m), 7.77 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.19 (1H, s), 9.61 (1H, br s）, 9.69 (1H, br s);MS m/z 341 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.2%示した。
元素分析：C₂₃H₁₆O₃・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 79.07;H: 4.90
測定値（％）: C: 78.68;H: 4.64

実施例２４
７−（２−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に２−トリルボロン酸（４００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２．５時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い固体をクロマトグラフィー（５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄色固体（１５０ｍｇ、４２％）を得た：融点１９３−１９６℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1.97 (3H, s), 4.92 (2H, s), 6.36 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.62 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.83-6.92 (2H, m), 7.09-7.13 (1H, m), 7.27-7.39 (3H, m), 7.78 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.84 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.20 (1H, s), 9.52 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 355 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.8%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₃・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 79.32;H: 5.27
測定値（％）: C: 79.04;H: 5.15

実施例２５
７−（３−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−トリルボロン酸（４００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い油状物をクロマトグラフィー（５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２６４ｍｇ、７５％）を得た：融点２１９−２２２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.39 (3H, s), 4.94 (2H, s), 6.61-6.64 (2H, m), 6.84 (1H, dd, J =2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.90 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.09-7.12 (2H, m), 7.22 (1H, d, J=9.1 Hz), 7.39-7.43 (1H, m), 7.77 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.18 (1H, s), 9.54 (1H, br s), 9.72 (1H, s);MS m/z 355 ([M+H]+)。分析HPLCは254nmで純度99.3%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₃・0.1 H₂Oとして
計算値（％）: C: 80.93;H: 5.15
測定値（％）: C: 80.81;H: 5.08

実施例２６
７−（４−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に４−トリルボロン酸（４００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い油状物をクロマトグラフィー（５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２６５ｍｇ、７５％）を得た：融点２３８−２４０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.40 (3H, s), 4.93 (2H, s), 6.64 (2H, dd, J=2.3 Hz, J=7.0Hz), 6.84 (1H, dd, J =2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.90 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.20 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.31 (2H, d, J=8.0 Hz), 7.76 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.17 (1H, s), 9.54 (1H, br s), 9.71 (1H, br s);MS m/z 355 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.9%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 80.16;H: 5.21
測定値（％）: C: 79.99;H: 5.12

実施例２７
７−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に４−メトキシフェニルボロン酸（５００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた褐色固体をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して白色固体（２１５ｍｇ、５８％）を得た：融点２００−２０３℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.85 (3H, s), 4.95 (2H, s), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.68 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.6 Hz, J=8.4 Hz), 6.91 (1H, dd, J=2.2 Hz, J=8.8 Hz), 7.08 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.25 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.77 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.17 (1H, s), 9.50 (1H, s), 9.69 (1H, s);MS m/z 371 ([M+H]+)。分析HPLCは254nmで純度98.3%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₄・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 77.07;H: 4.96
測定値（％）: C: 76.81;H: 5.00

実施例２８
７−（４−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に４−クロロフェニルボロン酸（４６８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１．５時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い油状物をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して白色固体（２１５ｍｇ、５８％）を得た：融点２３９−２４２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.96 (2H, s), 6.60 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 6.92 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 7.36 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.58 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.21 (1H, s), 9.56 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 375/377 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.6%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅ClO₃・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 73.00;H: 4.10
測定値（％）: C: 72.89;H: 4.01

実施例２９
７−（４−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム(１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に４−フルオロフェニルボロン酸（４２０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた黄褐色固体をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して白色固体（２１５ｍｇ、６２％）を得た：融点２２９−２３２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.96 (2H, s), 6.62 (2H, dd, J=2.4 Hz, J=9.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.92 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.33-7.43 (4H, m), 7.78 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.5 Hz), 8.20 (1H, s), 9.56 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 359 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.1%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅FO₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 75.94;H: 4.32
測定値（％）: C: 76.02;H: 4.29

実施例３０
７−チエン−２−イル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（５ｍＬ）、水（１ｍＬ）、２Ｎ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニル−ホスフィン）−パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に２−チオフェンボロン酸（２６０ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１２０℃に加熱し、一晩維持した。混合物を冷却し、酢酸エチル（５０ｍＬ）および５％塩化アンモニウム（２５ｍＬ）を加えた。酢酸エチルを水（２×２０ｍＬ）および塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去した後、粗固体をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄白色固体（８４ｍｇ、２４％）を得た：融点２３３−２３６℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.01 (2H, s), 6.65 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.83-6.88 (2H, m), 6.93 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.09 (1H, dd, J=1.0 Hz, J=3.4 Hz), 7.24 (1H, dd, J=3.5 Hz, J=5.1 Hz), 7.70 (1H, dd, J=1.0 Hz, J=5.1 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.7 Hz), 8.24 (1H, s), 9.67 (1H s), 9.75 (1H, s);MS m/z 347 ([M+H]+)。分析HPLCは300nMで純度96.8%を示した。
元素分析：C₂₁H₁₄O₃S・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 72.06;H: 4.15
測定値（％）: C: 71.82;H: 4.0.1

実施例３１
７−チエン−３−イル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−チオフェンボロン酸（３００ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱した。反応混合物を冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄色固体（１８８ｍｇ、５４％）を得た：融点１５９−１６１℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.65 (1H, d, J=2.5Hz), 6.83-6.86 (2H, m), 6.92(1H, dd, J =2.4 Hz, J=8.7 Hz), 7.18 (1H, dd, J=1.2 Hz, J=4.9 Hz), 7.50 (1H, dd, J=1.2 Hz, J=4.9 Hz), 7.68 (1H, dd, J=2.9 Hz, J=4.9 Hz), 7.76 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.17 (1H, s), 9.57 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 345 ([M-H]-). 分析HPLCは280nmで純度99.8%を示した。
元素分析：C₂₁H₁₄O₃S・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 70.97;H: 4.25
測定値（％）: C: 71.06;H: 3.98

実施例３２
７−（３−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−フルオロフェニルボロン酸（４２０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して白色固体（１９６ｍｇ、５５％）を得た：融点２２５−２２７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.62-6.64 (2H, m), 6.84 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.92 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.16-7.29 (3H, m), 7.52-7.59 (1H, m), 7.77-7.85 (2H, m), 8.22 (1H, s), 9.59 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 359 ([M+H]+)。分析HPLCは210nmで純度99.2%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅FO₃・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.32;H: 4.29
測定値（％）: C: 76.21;H: 4.22

実施例３３
７−（３−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−クロロフェニルボロン酸（４６８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（１３８．６ｍｇ、３７％）を得た：融点２４３−２４６℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.59 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.4 Hz), 6.93 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.29-7.32 (1H, m), 7.38-7.41 (1H, m), 7.45-7.58 (2H, m), 7.77-7.85(2H, m), 8.22 (1H, s), 9.61 (1H, s), 9.73 (1H,s);MS m/z 375/377, 1 Cl, ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.5%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅ClO₃として
計算値（％）: C: 73.70;H: 4.03
測定値（％）: C: 73.84;H: 4.15

実施例３４
７−（３−メトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−メトキシフェニルボロン酸（４５６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い固体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２４８．３ｍｇ、６７％）を得た：融点２２０−２２３℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.79 (3H, s), 4.96 (2H, s), 6.64 (2H, dd, J=2.3 Hz, J=7.0 Hz), 6.82-6.92 (4H, m), 6.98 (1H, dd, J=1.5 Hz, J=6.7 Hz), 7.40-7.45 (1H, m), 7.75-7.84 (2H, m), 8.19 (1H, s), 9.54 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 371 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.5%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈O₄・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.71;H: 4.99
測定値（％）: C: 76.88;H: 4.80

実施例３５
７−（２−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に２−クロロフェニルボロン酸（４６８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（８５．１ｍｇ、２２％）を得た：融点２２０−２２２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.37 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.63 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.92 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.33-7.38 (1H, m), 7.43-7.53 (2H, m), 7.61-7.67 (1H, m), 7.78-7.85 (2H, m), 8.24 (1H, s), 9.58 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 375/377, 1 Cl, ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.6%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅ClO₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 72.65;H: 4.14
測定値（％）: C: 72.63;H: 3.83

実施例３６
７−（３，４−ジフルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３，４−ジフルオロフェニルボロン酸（４７４ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた黄褐色固体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（１６２．１ｍｇ、４３％）を得た：融点２３５−２３７℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.99 (2H, s), 6.63 (2H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.4 Hz), 6.93 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.16-7.21 (1H, m), 7.42-7.49 (1H, m), 7.53-7.62 (1H, m), 7.77-7.84 (2H, m), 8.23 (1H, s), 9.60 (1H, s), 9.73 (1H, s);MS m/z 377 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.6%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₄F₂O₃・0.1 H₂Oとして
計算値（％）: C: 73.05;H: 3.78
測定値（％）: C: 72.98;H: 3.63

実施例３７
７−（４−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に４−ピリジルボロン酸（３７０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。その不溶性の黄褐色固体を濾過し、乾燥させ、次いでジクロロメタン：メタノール中に溶かし、濾過助剤に通じて濾過して触媒を除去した。溶媒を除去して黄褐色固体（６０ｍｇ、１８％）を得た：融点＞２５０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.99 (2H, s), 6.60 (1H, d, J=2.2 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.40 (2H, dd, J=1.5 Hz, J=4.4 Hz), 7.79-7.85 (2H, m), 8.26 (1H, s), 8.71 (2H, dd, J=1.5 Hz, J=4.4 Hz), 9.65 (1H, s), 9.76 (1H.s);MS m/z 342 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.7%を示した。
元素分析：C₂₂H₁₅NO₃・HClとして
計算値（％）: C: 69.94;H: 4.27;N: 3.71
測定値（％）: C: 70.27;H: 4.08;N: 3.58

実施例３８
７−（２−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に２−フルオロフェニルボロン酸（４２０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を２時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（１２０ｍｇ、３０％）を得た：融点２４０−２４２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.97 (2H, d, J=2.7 Hz), 6.55 (1H, s), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.93 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.33-7.43 (3H, m), 7.45-7.54 (1H, m), 7.78-7.85 (2H, m), 8.25 (1H, s), 9.62 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 359 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.2%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₅FO₃・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 75.20;H: 4.39
測定値（％）: C: 75.09;H: 4.22

実施例３９
７−（３，４−ジメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３，４−ジメチルフェニルボロン酸（４５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた黄褐色固体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（９５ｍｇ、２６％）を得た：融点２１８−２２１℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.29 (3H, s), 2.31 (3H, s) 4.92 (2H, s),6.62-6.65 (2H, m), 6.82-6.91 (2H, m), 7.01-7.05 (1H, m), 7.08 (1H, s), 7.25 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.77-7.83 (2H, m), 8.16 (1H, s), 9.48 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 369 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.3%を示した。
元素分析：C₂₅H₂₀O₃・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 80.71;H: 5.53
測定値（％）: C: 80.61;H: 5.43

実施例４０
７−（４−シアノフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（４００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１４０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の混合物に４−シアノフェニルボロン酸（５１４ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２８２．３ｍｇ、６６％）を得た：融点＞２５０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.55 (1H, d, J=2.2 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.57 (2H, d, J=8.3 Hz), 7.79-7.85 (2H, m), 7.98 (1H, d, J=7.8 Hz), 8.25 (1H, s), 9.62 (1H, s), 9.74 (1H, s);MS m/z 364 ([M-H]-). 分析HPLCは280nmで純度96.5%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₅NO₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 77.74;H: 4.24;N: 3.78
測定値（％）: C: 77.91;H: 4.07;N: 3.53

実施例４１
７−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−フルオロ−４−メチルフェニルボロン酸（４６２ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い固体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２２６ｍｇ、６１％）を得た：融点２３８−２４０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.97 (2H, s), 6.63-6.65 (2H, m), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.91 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.8 Hz), 7.04-7.13 (2H, m), 7.38-7.43 (1H, m), 7.76-7.84 (2H, m), 8.20 (1H, s), 9.55 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 373 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.2%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₇O₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.30;H: 4.70
測定値（％）: C: 76.04;H: 4.60

実施例４２
７−（３，４−ジメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−フルオロ−４−メチルフェニルボロン酸（５４６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２６１．１ｍｇ、６５％）を得た：融点２４５−２４８℃; ¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.75 (3H, s), 3,84 (3H, s), 4.96 (2H, s), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.75 (1H, dd, J=2.3 Hz), 6.83-6.92 (4H, m), 7.09 (1H, d, J=8.2 Hz),
7.74-7.83 (2H, m), 8.17 (1H, s), 9.51 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 401 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.4%を示した。
元素分析：C₂₅H₂₀O₅・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 73.34;H: 5.17
測定値（％）: C: 73.24;H: 4.95

実施例４３
７−（３−トリフルオロメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−フルオロ−４−メチルフェニルボロン酸（５７０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた黄褐色固体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して白色固体（２１４ｍｇ、５２％）を得た：融点２２８−２３１℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.99 (2H, d, J=2.7 Hz), 6.55 (1H, d, J=2.2 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.66-7.86 (6 H, m), 8.25 (1H, s), 9.62 (1H, s), 9.73 (1H, s);MS m/z 409 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度100%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₅FO₃として
計算値（％）: C: 70.59;H: 3.70
測定値（％）: C: 70.23;H: 3.79

実施例４４
７−（３，５−ジフルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３，５−ジフルオロ−フェニルボロン酸（４７５ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１．５時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄褐色固体（２１７．４ｍｇ、５８％）を得た：融点２３８−２４０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.01 (2H, s), 6.63 (2H, dd, J=2.3 Hz, J=6.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.08-7.14 (2H, m), 7.27-7.35 (1H, m), 7.78-7.84 (2 H, m), 8.24 (1H, s), 9.65 (1H, s), 9.75 (1H, s);MS m/z 375 ([M-H]-). 分析HPLCは280nm純度97.5%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₄F₂O₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 72.36;H: 3.85
測定値（％）: C: 72.31;H: 3.64

実施例４５
７−（３，５−ジクロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、ｌｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３，５−ジフルオロ−フェニルボロン酸（５７３ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄褐色固体（１７８．９ｍｇ、４４％）を得た：融点２５２−２５５℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.01 (2H, s), 6.57 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.5 Hz, J=8.5 Hz), 6.94 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.42 (2H, d, J=1.9 Hz), 7.66-7.70 (1 H, m), 7.79-7.85 (2H, m), 8.25 (1H, s), 9.68 (1H, s), 9.76 (1H, s);MS m/z 409/411/413, 2 Cl ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.6%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₄Cl₂O₃として
計算値（％）: C: 67.50;H: 3.45
測定値（％）: C: 67.13;H: 3.63

実施例４６
７−（３−メチル−４−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、２Ｍ炭酸ナトリウム（１ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物に３−メチル−４−フルオロ−フェニルボロン酸（４８６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１時間１２０℃に加熱し、次いで冷却し、酢酸エチル（２５ｍＬ）および５％塩化アンモニウムで希釈した。有機層を水（３×１０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、得られた薄黒い液体をクロマトグラフィー（２．５％アセトニトリル−ジクロロメタン）により精製して黄褐色固体（２２３ｍｇ、６０％）を得た：融点１８５−１８８℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.31 (3H, d, J=1.2 Hz), 4.95 (2H, s), 6.62 (2H, dd, J=2.3 Hz, J=10.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=2.4 Hz, J=8.5 Hz), 6.91 (1H, dd, J=2.3 Hz, J=8.8 Hz), 7.13-7.30 (3H, m), 7.76-7.84 (2H, m), 8.19 (1H, s), 9.55 (1H, s), 9.73 (1H, s);MS m/z 371 ([M-H]-). 分析HPLCは280nmで純度99.5%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₇FO₃として
計算値（％）: C: 77.41;H: 4.60
測定値（％）: C: 77.17;H: 4.54

実施例４７
７−（３−フリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、フラン−３−ボロン酸（２２４ｍｇ、２ｍｍｏｌｓ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の混合物を１２０℃にて４時間攪拌しながら加熱した。混合物をセライトに通じて濾過し、酢酸エチル（×３）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を分離し、シリカカラムクロマトグラフィー（１８％−２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して２００ｍｇ（６１％）の標記化合物を黄色がかった固体を得た：融点２１６−２１８℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.00 (2H, s), 6.66 (2H, m), 6.84 (1H, dd, J = 8.45 Hz, J = 2.35 Hz), 6.93 (1H, dd, J = 8.77 Hz, J = 2.35 Hz), 7.04 (1H, d, J = 2.17 Hz), 7.76 (1H, d, J = 8.83 Hz), 7.80-7.85 (3H, m), 8.16 (1H, s), 9.61 (1H, s), 9.71 (1H, s);MS (ESI) m/z 329 (M-H)^-, 331(M+H)⁺。
元素分析：C₂₁H₁₄O₄として
計算値（％）: C:76.36 H:4.27
測定値（％）: C:75.81 H:4.32

実施例４８
７−（２−フリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

トルエン（２６ｍＬ）中の７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（４５０ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、２−（トリブチルスタンニル）フラン（０．６２２ｍＬ、１．９７ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１５３ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）の混合物を１１０℃にて２３時間攪拌しながら加熱した。混合物をセライトに通じて濾過し、濃縮し、逆相分取ＨＰＬＣにより精製して２８０ｍｇ（６４％）の標記化合物を淡褐色固体として得た。それをさらにＣＨ_２Ｃｌ_２で粉砕して精製し、灰色固体を得た：融点１５８−１６３℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.04 (2H, s), 6.61 (1H, d, J = 3.11 Hz), 6.67-6.69 (2H, m), 6.85 (1H, dd, J = 8.47 Hz, J = 2.33 Hz), 6.95 (1H, dd, J = 8.72 Hz, J = 2.27 Hz), 6.99 (1H, d, J = 1.98 Hz), 7.77 (1H, d, J = 8.77 Hz), 7.82 (1H, d, J = 8.53 Hz), 7.85 (1H, d, J = 1.32 Hz), 8.24 (1H, s), 9.70 (1H, s), 9.75 (1H, s);MS (ESI) m/z 329 (M-H)^-, 331(M+H)⁺。
元素分析：C₂₁H₁₄O₄・0.2CH₂Cl₂として
計算値（％）: C: 72.62 H: 4.06
測定値（％）: C: 72.67 H: 4.03。

実施例４９
７−ブチル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

ＤＭＦ（１２ｍＬ）中の７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（４２０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、２−トリブチルスタンニルチアゾール（０．９５ｍＬ、１．１５ｇ、３．０７ｍｍｏｌｓ）およびジクロロビス（トリ−Ｏ−トイルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（９７ｍｇ、０．１２３mmol）の混合物を１１０℃にて１８時間攪拌しながら加熱した。混合物をセライトに通じて濾過し、酢酸エチル（×３）で抽出し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を分離して、シリカカラムクロマトグラフィー（２５％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して２００ｍｇ（５１％）の標記化合物を黄色固体として得た。その分析試料をさらに別のシリカカラムクロマトグラフィー（１０％−２０％酢酸エチル−ヘキサン）により精製して黄色がかった固体として得た：融点１８７−１８９℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 0.94 (3H, t, J = 7.17 Hz), 1.37-1.44 (2H, m), 1.47-1.58 (2H, m), 2.92 (2H, t, J = 7.00 Hz), 5.04 (2H, s), 6.73 (1H, d, J = 2.36 Hz), 6.82 (1H, dd, J = 8.44 Hz, J = 2.48 Hz), 6.92 (1H, dd, J = 8.76 Hz, J = 2.18 Hz), 7.12 (1H, d, J = 2.05 Hz), 7.71 (1H, d, J = 8.88 Hz), 7.76 (1H, d, J = 8.53 Hz), 8.00 (1H, s), 9.63 (1H, s), 9.67 (1H, s);MS (ESI) m/z 319 (M-H)^-, 321 (M+H)⁺。
元素分析：C₂₁H₂₀O₃として
計算値（％）: C: 78.73 H: 6.29
測定値（％）: C: 78.42 H: 6.27

実施例５０
７−（３−ピリジニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（６８６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）と３−ピリジニルボロン酸（７３７ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄色固体（２０１ｍｇ、３０％）を得た：融点＞２５０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.99 (2H, s), 6.60 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.65 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.86 (2H, dd, J=8.5 Hz, J=2.6 Hz), 7.54-7.58 (1H, m), 7.78-7.85 (3H, m), 8.25 (1H, s), 8.55 (1H, d, J=1.4 Hz), 8.63 (1H, dd, J=4.8 Hz, J=1.6 Hz), 9.62 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 342 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.6%を示した。
元素分析：C₂₂H₁₅NO₃・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 76.60;N: 4.50: H: 4.06
測定値（％）: C: 76.46;N: 4.53: H: 3.80

実施例５１
７−（４−メトキシ−３−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と４−メトキシ−３−ピリジニルボロン酸（１６８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄色固体（６２．３ｍｇ、１７％）を得た：融点＞２２０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.94 (3H, s) 4.98 (2H, s), 6.64-6.67 (2H, m), 6.83 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.4 Hz), 6.93 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.3 Hz), 6.98 (1H, d, J=8.5 Hz), 7.69 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.4 Hz), 7.78-7.85 (2H, m), 8.13 (1H, d, J=2.2 Hz), 8.22 (1H, s), 9.60 (1H, s), 9.73 (1H, s);MS m/z 372 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.9%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₇NO₄・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 73.67;N: 4.68;H: 3.74
測定値（％）: C: 73.71;N: 4.40;H: 3.34

実施例５２
７−（ピリミジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）とピリミジルボロン酸（３７０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄褐色固体（８４．８ｍｇ、２５％）を得た：融点＞２５０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 5.04 (2H, s), 6.62 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.65 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.6 Hz), 6.97 (1H, dd, J=11.8 Hz, J=5.4 Hz), 7.82-7.86 (2H, m), 8.31 (1H, s), 8.87 (2H, s), 9.26 (1H, s), 9.73 (2H, br s);MS m/z 343 ([M+H]+)。分析HPLCは300nmで純度96.8%を示した。
元素分析：C₂₁H₁₄N₂O₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 72.53;N: 4.23;H: 8.06
測定値（％）: C: 72.48;N: 4.17;H: 7.68

実施例５３
７−（５−メトキシ−３−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（５１５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）と５−メトキシ−３−ピリジニルボロン酸（３０６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄褐色固体（１６０．４ｍｇ、２９％）を得た：融点＞２５０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 3.88 (3H, s), 5.00 (2H, s), 6.64 (2H, dd, J=6.2 Hz, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.6 Hz), 6.94 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.3 Hz), 7.38 (1H, dd, J=2.9 Hz, J=1.7 Hz), 7.81-7.85 (2H, m), 8.14 (1H, s), 8.25 (1H, s), 8.36 (1H, s), 9.61 (1H, br s), 9.72 (1H, br s);MS m/z 372 ([M+H]+)。分析HPLCは300nmで純度99.0%を示した。
元素分析：C₂₃H₁₇NO₄として
計算値（％）: C: 74.38;N: 4.61;H: 3.77
測定値（％）: C: 74.27;N: 4.49;H: 3.31

実施例５４
７−（２−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（６８６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）と２−ピリジニルトリブチルスズ（３０６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄褐色固体（４６．９ｍｇ、７％）を得た：融点＞２２０℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.96 (2H, s), 6.57 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.4 Hz), 6.92 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.4 Hz), 7.40-7.46 (1H, m), 7.47 (1H, dd, J=6.9 Hz, J=1.0 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.84 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.90-7.94 (1H, m), 8.23 (1H, s), 8.75 (1H, d, J=2.4 Hz), 9.52 (1H, br s), 9.71 (1H, br s);MS m/z 342 ([M+H]+)。分析HPLCは210nmで純度99.0%を示した。
元素分析：C₂₂H₁₅NO₃ ・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 75.42;N: 4.60;H: 4.00
測定値（％）: C: 75.08;N: 4.20;H: 3.80

実施例５５
７−（３，４−ジクロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と３，４−ジクロロフェニルボロン酸（５７２ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（２２０ｍｇ、５４％）を得た：融点１４３−１４５℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.99 (2H, s), 6.57 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.65 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.84 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.6 Hz), 6.93 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.4 Hz), 7.35 (1H, dd, J=8.2 Hz, J=2.1 Hz), 7.62 (1H, d, J=1.9 Hz), 7.77-7.84 (3H, m), 8.24 (1H, s), 9.59 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 407/409 ([M-H]-).分析HPLCは280nmで純度97.7%を示した。
元素分析：C₂₂H₁₅NO₃ ・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 66.62;H: 3.55
測定値（％）: C: 66.40;H: 3.39

実施例５６
７−（４−メチルチオフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と４−メチルチオフェニルボロン酸（５０４ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して黄褐色固体（２５０ｍｇ、６５％）を得た：融点１９５−１９８℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.56 (3H, s), 4.95 (2H, s), 6.65 (2H, dd, J=10.6, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=8.5, Hz J=2.6 Hz), 6.91 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.4 Hz), 7.28 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.39 (2H, d, J=8.5 Hz), 7.77 (1H, d, J=8.7 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.18 (1H, s), 9.52 (1H, s), 9.69 (1H, s);MS m/z 387 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.4%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₈SO₃・0.3 H₂Oとして
計算値（％）: C: 73.56;H: 4.78
測定値（％）: C: 73.66;H: 4.43

実施例５７
７−（４−シアノメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と４−シアノメチルフェニルボロン酸（４８３ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（２１０ｍｇ、５５％）を得た：融点２４０−２４２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.14 (2H, s), 4.95 (2H, s), 6.63 (2H, d, J=2.3 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5, Hz J=2.4 Hz), 6.92 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.4 Hz), 7.36 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.49 (2H, d, J=8.3 Hz), 7.78 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.83 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.20 (1H, s), 9.55 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 380 ([M+H]+)。分析HPLCは280nm純度を98.6%示した。
元素分析：C₂₅H₁₇NO₃・0.2 H₂Oとして
計算値（％）: C: 78.40;N: 4.58;H: 3.66
測定値（％）: C: 78.45;N: 4.30;H: 3.56

実施例５８
７−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と３−トリフルオロメトキシフェニルボロン酸（６１８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（１４０ｍｇ、３３％）を得た：融点１１０−１１２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.98 (2H, s), 6.61 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=1.9 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5, Hz J=2.4 Hz), 6.93 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.3 Hz), 7.32 (1H, s), 7.38-7.44 (2H, m,), 7.64-7.68 (1H, m), 7.80 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.83 (1H,d, J=8.6 Hz), 8.23 (1H, s), 9.61 (1H, s), 9.72 (1H, s);MS m/z 425 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度98.7%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₅F₃O₄・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 66.51;H: 3.72
測定値（％）: C: 66.57;H: 3.39

実施例５９
７−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）および４−トリフルオロメトキシフェニルボロン酸（６１８ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（２１９ｍｇ、５２％）を得た：融点２４５−２４８℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.97 (2H, s), 6.60 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.64 (1H, d, J=2.5 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5, Hz J=2.5 Hz), 6.93 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.3 Hz), 7.32 (1H, s), 7.38-7.44 (2H, m,), 7.64-7.68 (1H, m), 7.80 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.83 (1H,d, J=8.6 Hz), 8.22 (1H, s), 9.60 (1H, s), 9.71 (1H, s);MS m/z 425 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.9%を示した。
元素分析：C₂₄H₁₅F₃O₄として
計算値（％）: C: 67.93;H: 3.56
測定値（％）: C: 67.76;H: 3.50

実施例６０
７−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニルボロン酸（５３４ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（１４４ｍｇ、３６％）を得た：融点１６２−１６５℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1.38 (9H, s), 4.94 (2H, s), 6.63 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.68 (1H, d, J=2.2 Hz), 6.84 (1H, dd, J=8.5, Hz J=2.4 Hz), 6.90 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.3 Hz), 7.27 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.53 (2H, d, J=8.3 Hz）, 7.79 (1H, d, J=7.6 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.18 (1H, s), 9.54 (1H, s), 9.69 (1H, s);MS m/z 397
([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.2%を示した。
元素分析：C₂₇H₂₄O₃ ・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 79.98;H: 6.21
測定値（％）: C: 79.24;H: 6.29

実施例６１
７−（ナフチル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と１−ナフチルボロン酸（５１６ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（１１０ｍｇ、２８％）を得た：融点１６０−１６２℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 4.85 (2H, s), 6.24 (1H, d, J=2.4 Hz), 6.57 (1H, d, J=2.3 Hz), 6.84-6.92 (3H, m), 7.26-7.51 (4H, m), 7.63-7.68 (1H, m), 7.83 (1H, d, J=8.1 Hz), 7.88 (1H, d, J=8.5 Hz), 8.02 (1H, d, J=8.2 Hz), 8.30 (1H, s), 9.39 (1H, s), 9.70 (1H, s);MS m/z 389 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度95.4%を示した。
元素分析：C₂₇H₁₈O₃ ・0.4 H₂Oとして
計算値（％）: C: 81.55;H: 4.76
測定値（％）: C: 81.39;H: 4.87

実施例６２
７−（４−エチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）および４−エチルフェニルボロン酸（４５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（２９２ｍｇ、７９％）を得た：融点２０３−２０５℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 1.29 (3H, t, J=7.6 Hz), 2.71 (2H, q, J=2.2 Hz), 4.94 (2H, s), 6.65 (2H, dd, J=13.7 Hz, J=2.4 Hz), 6.85 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.6 Hz), 6.90 (1H, dd, J=8.8 Hz, J=2.4 Hz), 7.25 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.34 (2H, d, J=8.2 Hz), 7.76 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.17 (1H, s), 9.51 (1H, s), 9.69 (1H, s);MS m/z 369 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度99.8%を示した。
元素分析：C₂₅H₂₀O₃ ・0.5 H₂Oとして
計算値（％）: C: 79.56;H: 5.61
測定値（％）: C: 79.86;H: 5.37

実施例６３
７−（３，５−ジメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール

７−ブロモ−Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール（３４３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と３，５−ジメチルフェニルボロン酸（４５０ｍｇ、３ｍｍｏｌ）を反応させて、前記実施例２３に記載のように標記化合物を調製して白色固体（２７０ｍｇ、７３％）を得た：融点２２０−２２３℃;¹H NMR (DMSO-d₆): δ 2.34 (6H, s), 4.93 (2H,), 6.62 (2H, dd, J=9.7 Hz, J=2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J=8.5 Hz, J=2.4 Hz), 6.88-6.91 (3H, m), 7.04 (1H, s), 7.76 (1H, d, J=8.9 Hz), 7.82 (1H, d, J=8.6 Hz), 8.16 (1H, s), 9.49 (1H, s), 9.69 (1H, s);MS m/z 369 ([M+H]+)。分析HPLCは280nmで純度97.2%を示した。
元素分析：C₂₅H₂₀O₃ ・0.25 H₂Oとして
計算値（％）: C: 80.52;H: 5.54
測定値（％）: C: 80.64;H: 5.32

実施例６４
ＥＲαおよびＥＲβの両方に対する１７β−エストラジオールの競合力
本発明の代表例は、ＥＲαおよびＥＲβの両方に対する１７β−エストラジオールの競合力について評価された。この試験手順は、特定の化合物がエストロゲン受容体に結合するかどうか（従って、「エストロゲン様」であるかどうか）、さらにＥＲαまたはＥＲβに対して選択的かどうかを決定する一例としての方法論を提供する。その値は、後掲の表で示され、ＩＣ_５０として報告される。１７β−エストラジオールは、比較の標準的な基準として含まれる。用いられる手順を以下に簡潔に記載する。ヒトＥＲαまたはＥＲβのエストロゲン受容体リガンド結合ドメイン（Ｄ、ＥおよびＦ）を発現する大腸菌の粗溶菌液を調製した。受容体と化合物の両方を１ｍＭのＥＤＴＡを含む１×ダルベッコＰＶＳ（ＤＰＢＳ）にて希釈した。高結合性のマスクされたマイクロタイタープレートを用いて、１００μＬの受容体（１ｕＧ／ウェル）を、２ｎＭの［^３Ｈ］−１７β−エストラジオールおよび種々の濃度の化合物と組み合わせた。室温で５〜１５時間経過した後、プレートをＤＰＢＳ／１ｍＭＥＤＴＡで洗浄し、結合された放射能を液体シンチレーション計数により決定した。ＩＣ_５０は、結合する総１７β−エストラジオールを５０％にまで減少させる化合物の濃度として定義される。得られた結果を以下の表に記載する。

標準の薬理学試験手順において得られる結果は、本発明の化合物がエストロゲン様化合物であり、幾つかはＥＲβ受容体に対して強く選択的な親和性を有していることを実証している。本発明の化合物は、ＥＲα以上にＥＲβに対して強く選択的な親和性を有するものから、両方の受容体に対してほぼ等しい親和性を有するものにまで及ぶ。従って、本発明の化合物は、少なくとも部分的に、これらの受容体親和性、選択性の側面に基づく活性の範囲に及ぶものである。加えて、それぞれの新規な受容体リガンド複合体は独特であり、従って種々の共調節（coregulatory）蛋白質との相互作用が独特であるため、本発明の化合物は、それらが存在する細胞環境に応じて異なる修飾作用を示すであろう。例えば、幾つかの細胞型において、ある化合物はエストロゲンアゴニストとして振る舞い、一方で他の組織では、アンタゴニストとして振る舞うことが可能である。そのような活性を有する化合物は、時々、ＳＥＲＭ（選択的エストロゲン受容体モジュレーター）として参照される。しかしながら、多くのエストロゲンと異なり、ＳＥＲＭの多くは子宮の湿重量に増加をもたらさない。これらの化合物は、子宮における抗エストロゲンであり、そして子宮組織においてエストロゲンアゴニストの作用効果を完全に打ち消すことができる。しかしながら、これらの化合物は、骨、心血管および中枢神経系においてエストロゲンアゴニストとして作用する。これらの化合物のこの組織選択的性質のため、エストロゲン欠損（特定の組織、例えば、骨もしくは心血管において）、または過剰量のエストロゲン（子宮もしくは乳腺において）により生じる若しくは関連する哺乳動物の病状または症候群を処置または予防するのに有用である。

このような細胞特異的修飾さえも越えて、本発明の化合物はまた、ある受容体型でアゴニストとして振る舞うが、他の受容体ではアンタゴニストとして作用する可能性を有する。例えば、化合物がＥＲβにおいてはアンタゴニストであるが、ＥＲαにおいてはアゴニストであり得ることが実証されている(Meyers, Marvin J.；Sun, Jun；Carlson, Kathryn E.；Katzenellenbogen, Benita S.；Katzenellenbogen, John A.. J. Med. Chem. (1999), 42(13), 2456-2468)。そのようなＥＲＳＡＡ（エストロゲン受容体選択的アゴニスト・アンタゴニスト）活性は、この一連の化合物内で医薬的に明確なエストロゲン様活性を提供する。

標準的な薬理学試験手順は、所定の被験化合物の活性プロフィールを決定するために容易に利用できる。以下の実施例は、幾つかの代表的な試験手順を簡単に概説したものである。ＳＥＲＭについての標準的な薬理学試験手順もまた、米国特許第4,418,068号および第5,998,402号において提供される。

実施例６５
ラット子宮効果性（uterotrophic）／抗子宮効果性試験手順
化合物のエストロゲン様および抗エストロゲン様特性は、L.J.BlackおよびR.L.Goode, Life Sciences, 26, 1453 (1980)により以前に記載されたように、未成熟のラット子宮効果性アッセイ（４日）において決定することができる。未成熟なスプラグ−ダウレイ（Sprague-Dawley）ラット（メス、１８日齢）を６つのグループにおいて試験した。動物を、１日あたり、１０ｕＧ化合物、１００ｕＧ化合物、抗エストロゲン性を確認するための（１００ｕＧ化合物＋１ｕＧ１７β−エストラジオール）、および１ｕＧ１７β−エストラジオールを、注射媒体として５０％ＤＭＳＯ／５０％塩水と共に腹腔内投与することにより処理する。４日目に、動物はＣＯ_２窒息により犠牲にされ、それらの子宮を取り出し、余分な脂肪を剥がし、全ての体液を取り除き、そして湿重量を決定した。１つのホーンの小切片を、組織学のために提供し、補体成分３遺伝子発現を評価するために、残りの部分を用いて全ＲＮＡを単離した。

実施例６６
６週齢の卵巣除去ラット試験手順−骨および心臓保護
メスのスプラグ−ダウレイＣＤラット、ｏｖｘまたは偽ｏｖｘは、手術後１日にタコニック・ファーム（Taconic Farm）から入手した（体重の範囲２４０〜２７５ｇ）。１２時間／１２時間（明／暗）日程の室内にてラット３匹または４匹／ケージで、飼料（ピューリナ（Purina）５Ｋ９６Ｃラット食物）と水を自由に与えられて飼育された。全ての研究の処理は、動物の到着後１日で開始し、示すように６週間、１週間に７日投与した。処理を全く受けていない週齢一致の偽手術ラットの群は、全ての研究についての無傷な、エストロゲン供給十分な対象群として提供される。

全ての処置は、処置容量が０．１ｍＬ／１００ｇ体重となるよう所定濃度で、通常の塩水中の１％ツイーン（tween）８０にて調製される。１７β−エストラジオールは、コーン油中に溶解され（２０μｇ／ｍＬ）、０．１ｍＬ／ラットは皮下にて運搬される。全ての投薬は、群の平均体重測定に応じて３週間隔で調整される。

処置開始後５週目および研究の処置開始前１週目に、それぞれのラットは、骨ミネラル濃度（ＢＭＤ）について評価される。脛骨近位端の総密度および小柱密度は、麻酔したラットにおいて、ＸＣＴ−９６０Ｍ（ｐＱＣＴ；Stratec Medizintechnik、ドイツ、プフォルツハイム）を用いて評価される。測定は、以下のように行った：走査の１５分前に、それぞれのラットを、４５ｍｇ／ｋｇのケタミン、８．５ｍｇ／ｋｇのキシラジン、および１．５ｍｇ／ｋｇのアセプロマジンを腹腔内注射により麻酔にかけた。

右後ろ肢を、直径２５ｍｍのポリカーボネートチューブに通し、９０°の角度で足関節を、そして１８０°で膝間接をアクリル製の枠にテープで貼り付けた。そのポリカーボネートチューブを、ｐＱＣＴの開口部に対して垂直に維持する可動式の台に固定した。そのプラットフォームは、大腿骨遠位端および脛骨近位端が捜査範囲内に入るように調整される。２次元スカウト像は、１０ｍｍの長さで、０．２ｍｍの線解像度で行われる。スカウト像をモニター上に表示した後に、脛骨近位端の位置を確認した。ｐＱＣＴ走査は、この点から３．４ｍｍ遠位で始められる。ｐＱＣＴ走査は、１ｍｍの厚さで、０．１４０ｍｍのボクセル（３次元ピクセル）サイズを有し、スライスを通じて１４５の投影像から成る。

ｐＱＣＴ走査が完了した後に、映像をモニター上に表示する。脛骨を含むが、腓骨を除外した興味範囲を大まかに示す。反復アルゴリズムを用いて、軟組織を自動で取り除く。残りの骨の密度（総密度）をｍｇ／ｃｍ^３にて記録する。骨の外側５５％を同心性螺旋状に剥がす。残りの骨の密度（小柱密度）をｍｇ／ｃｍ^３にて記録する。ＢＭＤ評価の後１週目に、ラットを二酸化炭素窒息により安楽死させ、コレステロール決定のために血液を採取する。子宮を取り出し、その重量を量った。総コレステロールは、コレステロール／ＨＰキットを用いたベーリンガー−マンハイム・日立９１１クリニカルアナライザーを用いて決定される。統計（Statitstics）は、ダネット検定（Dunnet’s test）を用いて一元配置分散分析法を用いて比較した。

実施例６７
ＭＣＦ−７／ＥＲＥ抗細胞増殖作用試験手順
被験化合物の保存溶液（通常、０．１Ｍ）をＤＭＳＯ中に調製し、次いで、１ｍＭまたは１０ｍＭの使用液を作製するためにＤＭＳＯを用いて１０倍〜１００倍希釈する。ＤＭＳＯ保存は４℃（０．１Ｍ）または−２０℃（＜０．１Ｍ）で保存する。ＭＣＦ−７細胞は、増殖培地［１０％（ｖ／ｖ）加熱不活化ウシ胎児血清、１％（ｖ／ｖ）ペニシリン−ストレプトマイシン、および２ｍＭｇｌｕｔａＭａｘ−１を含むＤ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］を用いて、１週間で２回継代される。細胞は、５％ＣＯ_２／９５％加湿エアーインキュベーター内で３７℃の通気孔付きフラスコ中で維持される。処置の前日に、細胞を９６ウェルプレート中に培養基を用いて２５，０００／ウェルで撒き、３７℃で一晩インキュベートした。

細胞を、実験用培地［１０％（ｖ／ｖ）加熱不活化チャコール処理（charcoal-stripped）ウシ胎児血清、１％（ｖ／ｖ）ペニシリン−ストレプトマイシン、２ｍＭｇｌｕｔａＭａｘ−１、１ｍＭピルビン酸ナトリウムを含む、フェノールレッド−不含Ｄ−ＭＥＭ／Ｆ−１２培地］中のアデノウイルス５−ＥＲＥ−ｔｋ−ルシフェラーゼの１：１０希釈液を１ウェルあたり５０μｌ用いて、３７℃で２時間感染させた。次いで、ウェルを実験用培地１５０μｌで一回洗浄した。最後に、細胞を、８ウェル／処置の重複測定で、１５０μｌ／ウェルの媒体（≦０．１％Ｖ／ＶＤＭＳＯ）または実験用培地中に≧１０００倍希釈された化合物と一緒に３７℃で２４時間処置される。

被験化合物の最初のスクリーニングは、単独で試験される（アゴニスト形式）１μＭの一回投与か、または０．１ｎＭの１７β−エストラジオールとの組み合わせ（ＥＣ_８０；アンタゴニスト形式）で行われる。それぞれの９６ウェルプレートはまた、媒体対照群（０．１％ｖ／ｖＤＭＳＯ）およびアゴニスト対照群（０．１または１ｎＭのいずれかの１７β−エストラジオール）を含む。用量−応答実験は、１０^−１４〜１０^−５Ｍの指数関数増加の活性化合物において、アゴニスト形式および／またはアンタゴニスト形式のいずれかで行われる。これらの用量−応答曲線から、ＥＣ_５０およびＩＣ_５０値がそれぞれ算出される。最後のウェルはそれぞれ、ＥＲアンタゴニスト対照として５μｌの３×１０^−５ＭＩＣＩ−１８２，７８０（１０^−６Ｍ終濃度）を含む。

処置後に、細胞を、２５μｌ／ウェルの１×細胞培養溶菌試薬（プロメガ・コーポレーション）を用いて１５分間震盪器上で溶菌させる。その細胞溶菌液（２０μｌ）を９６ウェル・照度計プレートに移し、そしてルシフェラーゼ活性を、１００μｌ／ウェルのルシフェラーゼ基質（プロメガ・コーポレーション）を用いたＭｉｃｒｏＬｕｍａｔＬＢ９６Ｐルミノメーター（EG & G Berthold）で測定する。基質注入前に、１秒のバックグラウンド測定がそれぞれのウェルについて行われる。基質注入の後、ルシフェラーゼ活性は、１秒置いた後に１０秒間測定される。データは、ルミノメーターからマッキントッシュ・パーソナルコンピューターに移され、ＪＭＰソフトウェアー(SAS Institute)を用いて分析される；このプログラムは、それぞれのウェルのルシフェラーゼ測定値（％）からバックグラウンド測定値（％）を引き、次いでそれぞれの処置の平均値と標準偏差を決定する。

ルシフェラーゼデータは対数に変換され、ヒューバーＭ−推定量（Huber M-estimator）を、非本質的な形質転換された観察であるダウン−ウェイト（down-weight）に用いる。ＪＭＰソフトウェアーを用いて、一元ＡＮＯＶＡ（ダネット検定）について形質転換および加重データが分析される。化合物処置は、アゴニスト形式における媒体対照の結果、またはアンタゴニスト形式における陽性アゴニスト対照（０．１ｎＭ１７β−エストラジオール）の結果と比較される。最初の単一用量実験については、化合物処置の結果が、適当な対照と有意に（ｐ＜０．０５）異なっている場合は、次に、その結果を１７β−エストラジオール対照と比較したパーセントとして［すなわち、（（化合物−媒体対照）／（１７β−エストラジオール対照−媒体対照））×１００］記録される。ＪＭＰソフトウェアーもまた、非線形用量−応答曲線からＥＣ_５０および／またはＩＣ_５０値を決定するために用いられる。

実施例６８
ＬＤＬ酸化の阻害−抗酸化活性
ブタの大動脈を屠殺場から入手し、洗浄して、冷却ＰＢＳ中に移し、そして大動脈内皮細胞を回収した。細胞を回収するために、大動脈の肋間脈菅を結紮し、大動脈の一端を留め具で固定した。新鮮な、滅菌ろ過した、０．２％コラゲネース（シグマＩ型）を大動脈中に配置し、次いでもう一端を閉鎖系を形成するために留め具で固定した。その大動脈を３７℃で１５〜２０分間インキュベートし、その後、コラゲネース溶液を集め、２０００×ｇで５分間遠心分離した。それぞれのペレットを、チャコール処理したＦＢＳ（５％）、ニューセリウム（NuSerum）（５％）、Ｌ−グルタミン（４ｍＭ）、ペニシリン−ストレプトマイシン（１０００Ｕ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ）およびゲンタマイシン（７５μｇ／ｍｌ）が補充されたフェノールレッド不含ＤＭＥＭ／ハンスＦ１２培地から成る７ｍＬの内皮細胞培養基中に懸濁し、１００ｍｍペトリ皿中に撒き、そして５％ＣＯ_２中３７℃でインキュベートした。２０分後、その細胞をＰＢＳですすぎ、新鮮な培地を加えることを、２４時間何度も繰り返した。細胞はおよそ１週間でコンフルエントになる。内皮細胞は慣用的に１週間に２回栄養が与えられ、そしてコンフルエントになった場合に、トリプシン処理し、１：７の割合で撒く。評価されるべき化合物（５μＭ）の存在下で、１２．５μｇ／ｍＬのＬＤＬの細胞媒介性酸化により４時間３７℃で生存可能となる。結果は、アルデヒド不含分析についてのＴＶＡＲＳ（チオバルビツール酸反応基質）方法（Yagi K., Biochem Med 15:212-216 (1976)）により測定されるように、酸化過程の阻害パーセントとして表される。

実施例６９
Ｄ１２視床下部（Hypothalmic）細胞試験手順
Ｄ１２ラットの視床下部細胞を、ＲＣＦ１７親細胞系からサブクローン化し、凍結保存する。それらを、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を加えたＤＭＥＭ：Ｆ１２（１：１）、ｇｌｕｔａＭＡＸ−１（２ｍＭ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍｌ）−ストレプトマイシン（１００ｍｇ／ｍｌ）にて慣用的に生育させる。細胞は、２〜１０％チャコール処理ＦＢＳを含むフェノールレッド不含培地（ＤＭＥＭ：Ｆ１２、ｇｌｕｔａＭＡＸ、ペニシリン−ストレプトマイシン）中にサブコンフルエント密度（１〜４×１０＜６＞細胞／１５０ｍｍ皿）で撒く。細胞を２４時間後に、２％除去した血清を含む培地で栄養を与える。アゴニスト活性を試験するために、細胞を１０ｎＭの１７β−エストラジオールまたは種々の用量の被験化合物（１ｍＭまたは１ｐＭ〜１ｍＭの範囲）で処理した。アンタゴニスト活性を試験するために、細胞を、種々の用量の被験化合物（１００ｐＭ〜１ｍＭ）の非存在下もしくは存在下の０．１ｎＭの１７β−エストラジオールで処理する。対照皿もまた、陰性対照としてＤＭＳＯで処理する。ホルモン添加後５８時間に、細胞を溶菌させ、結合試験手順を行う。

それぞれの結合試験手順について、１００−１５０ｍｇの蛋白質を、１５０ｍｌ容量中の１０ｎＭの^３Ｈ−Ｒ５０２０＋１００倍過剰量のＲ５０２０と共にインキュベートする。３重反応（Ｒ５０２０を用いた３回、Ｒ５０２０を用いない３回）を９６ウェルプレート中に調製する。蛋白質抽出物を最初に加え、続いて、^３Ｈ-Ｒ５０２０または^３Ｈ-Ｒ５０２０＋１００×非標識Ｒ５０２０を加える。この反応は、室温で１〜２時間行う。この反応は、ＴＥｐＨ７．４中の１００ｍｌの冷却５％チャコール（ＮｏｒｉｔＳＸ-４）、０．５％デキストラン６９Ｋ（ファルマシア）の添加により停止させる。室温で５時間後に、結合および非結合リガンドを遠心分離（５分、１０００ＲＣＦ、４℃）により分離する。上清溶液（〜１５０ｍｌ）を取り出し、シンチレーション・バイアルに移す。続いて、シンチレーション流動体（ベックマン・レディー・プロテイン＋（Beckman Ready Protein+）を加え、試料をシンチレーション計数器中で１分間計数する。

実施例７０
ＣＮＳ視索前野におけるプロゲステロン受容体
６０日齢の老齢のメスのスプラグ−ダウレイラットを卵巣切除する。その動物を、１２時間明所、１２時間暗所の光周期の、水とげっ歯類の食物を自由に摂取できる動物飼育施設において飼育する。

卵巣切除した動物を、媒体（５０％ＤＭＳＯ、４０％ＰＢＳ、１０％エタノール媒体）、１７β−エストラジオール（２００ｎｇ／ｋｇ）または試験されるべき化合物を注射する群に無作為に分ける。さらなる動物を、被験化合物のアンタゴニスト特性を評価するために、１７β−エストラジオールの注射前１時間に被験化合物を注射する。皮下注射後６時間、動物を致死量のＣＯ_２で安楽死させ、その脳を採取し、そして凍結する。

動物から採取した組織を、−１６℃にて低温保持装置上で切断し、シラン被覆された顕微鏡用スライドに採取する。次いで、切断部が乗せられたスライドを、４２℃に保たれたスライド加温器上で乾燥させ、乾燥したスライドボックス中で−８０℃にて保存する。加工前に、乾燥したスライドボックスを、スライド上で凝集物形成を起させないため、即ち、組織およびＲＮＡ分解を最小限にするため、室温にまでゆっくり温める（−２０℃で１２〜１６時間；４℃で２時間；室温で１時間）。乾燥スライドを、金属ラック中に移し、４％パラホルムアルデヒド（ｐＨ９．０）中で５分間後固定し、上記のように加工する。

ラットのＰＲｃＤＮＡ９（リガンド結合ドメイン）の８１５ｂｐ断片を含むプラスミドを直鎖状にし、ラットＰＲｍＲＮＡの一部と相補的な３５−ＵＴＰ標識プローブを作製するために用いる。加工された切断部が乗せられたスライドを、リボプローブ（４〜６×１０６ＤＰＭ／スライド）および５０％ホルムアミドを含むハイブリダイゼーション混合液２０ｍｌでハイブリダイズさせ、５５℃の加湿されたチャンバー中で一晩インキュベートする。午前中に、スライドを、２×ＳＳＣ（０．１５ＭＮａＣｌ、０．０１５Ｍクエン酸ナトリウム；ｐＨ７．０）／１０ｍＭＤＴＴ中に沈められた金属ラックに配置する。そのラックを全て、大きな容器に移し、ゆっくり攪拌しながら室温で１５分間２×ＳＳＣ／１０ｍＭＤＴＴ中で洗浄する。次いでスライドをＲＮａｓｅ緩衝液中で３０分間３７℃にて洗浄し、ＲＮａｓｅＡ（２ｍｇ／ｍｌ）で３０分間３７℃にて処理し、そして室温の１×ＳＳＣ中で１５分間洗浄する。続いて、そのスライドを、非特異的な標識を取り除くために０．１×ＳＳＣ中で６５℃にて洗浄し（２×３０分）、室温の０．１×ＳＳＣ中で１５分間すすぎ、そしてアルコール：酢酸アンモニウムの勾配系列（７０％、９５％および１００％）を用いて脱水する。空気乾燥させたスライドをＸ線フィルムと３日間向かい合わせにし、次いで写真のように現像する。全ての動物からのスライドをハイブリダイズし、洗浄して露光し、そして状況による分析法間変化による違いを排除するために一緒に写真のように現像する。

実施例７１
ラット・ホットフラッシュ−ＣＮＳ効果
卵巣除去したメスの６０日齢の老齢のスプラグ−ダウレイ・ラットを手術後に入手する。その手術は、最初の処置前の最低８日に行われる。動物は、１２時間の明／暗周期下で飼育され、標準的なラットの食事および水が自由に与えられる。

２つの対照群は、いずれの研究においても含まれる。用量は、ごま油中の１０％ＤＭＳＯ（皮下研究）または塩水中の１．０％ツウィーン８０（経口研究）のいずれかにおいてｍｇ／ｋｇの平均群の体重に基づいて調製される。動物は、０．０１〜１０ｍｇ／平均群の体重ｋｇの範囲の用量で被験化合物を投与される。媒体およびエチニルエスタジオール（ＥＥ）対照（０．１ｍｇ／ｋｇ、皮下または０．３ｍｇ／ｋｇ、経口）対照群は、それぞれの試験において含まれる。化合物をそのアンタゴニスト活性について試験する場合、ＥＥは、それぞれ皮下または経口研究のために０．１または０．３ｍｇ／ｋｇで同時に投与される。被験化合物は、尾皮温度が測定される日まで投与される。

４日の順応期間の後、動物は興味ある化合物（群）で１日に一度処置される。処置群あたり、１０匹の動物が存在する。化合物投与は、首筋に０．１ｍｌの皮下投与または０．５ｍｌの用量の経口投与のいずれかに拠る。処置の３日目に、モルヒネの小丸薬（７５ｍｇの硫酸モルヒネ）が皮下に埋め込まれる。処置の５日目に、１個または２個のさらなるモルヒネ小丸薬が埋め込まれる。８日に、およそ半分の動物は、ケタミンを注入され（８０ｍｇ／ｋｇ、筋肉内）、そしてマックラボ・データ・アクイシジョン・システム（MacLab Data Acquisition System）（ＡＰＩＩｎｓｔｕｒｍｅｎｔｓ、マサチューセッツ州、ミスフォールド）と連結された熱電対が尻尾の付け根からおよそ１インチの尾部にテープで巻き付けられる。この系は、尾皮温度の連続測定を可能とする。基礎温度が１５分間測定され、次いでナロキソン（１.０ｍｇ／ｋｇ）がモルヒネの効果を阻害するために皮下にて与えられ（０．２ｍｌ）、尾皮温度がその後１時間測定される。９日目に、残りの動物を準備し、同様に分析する。

実施例７２
単離されたラットの大動脈リングにおける血管運動神経の機能
スプラグ−ダウレイ・ラット（２４０〜２６０グラム）を４つの群：
１．正常な非卵巣切除（無傷）
２．卵巣切除された（ｏｖｅｘ）媒体処理
３．卵巣切除された１７β−エストラジオール処理（１ｍｇ／ｋｇ／日）
４．卵巣切除され、被験化合物（すなわち、１ｍｇ／ｋｇ／日）で処理される動物
に分ける。

動物は処置の前およそ３週に卵巣切除される。それぞれの動物は、１７β−エストラジオール硫酸塩または１％ツウィーン−８０を含む蒸留、脱イオン水中に懸濁された被験化合物のいずれかを胃菅栄養法により１ｍｇ／ｋｇ／日与えられる。媒体処理される動物は、薬物処理群で用いられた媒体の適当な容量が与えられる。

動物は、ＣＯ_２吸入および全採血により安楽死させる。その胸部大動脈を素早く取り出し、以下の成分（ｍＭ）：ＮａＣｌ（５４．７）、ＫＣｌ（５．０）、ＮａＨＣＯ_３（２５．０）、ＭｇＣｌ_２２Ｈ_２Ｏ（２．５）、Ｄ−グルコース（１１．８）およびＣａＣｌ_２（０．２）を含み、最終ｐＨを７．４についてＣＯ_２−Ｏ_２、９５％／５％で通気した３７℃の生理溶液中に移す。外膜を外部表面から取り出し、脈管を２〜３ｍｍの幅広いリングに切り分ける。リングは、１０ｍＬの組織浴槽にて一端をその浴槽の底面に取り付け、もう一端は力変換器に取り付けて吊るす。１グラムの静止張力をリングに加える。リングを１時間平衡に保ち、信号を取得し解析する。

平衡の後、リングをフェニレフリン（１０^−８〜１０^−４Ｍ）の増加濃度にさらし、張力を記録する。次いで、浴槽を新鮮な緩衝液で３回すすぐ。洗い流した後、２００ｍＭのＬ−ＮＡＭＥを組織浴槽に加え、３０分間平衡化させる。次いで、フェニレフリン濃度応答曲線を繰り返す。

実施例７３
８方向放射状迷路−認知増強
到着時の体重２００〜２５０ｇのオスのスプラグ−ダウレイ、ＣＤラット（チャールズリバー、キングストン、ＮＹ）を用いる。一週間、ラットを、自由に利用できる標準的な研究用の食事および水を備えたケージに６匹で飼育する。２２℃に維持された、隔離された部屋にて、ＡＭ６：００に明るくなる１２時間の明／暗周期で、飼育される。施設への順化の後、動物は個別に飼育され、８５％の自由摂食体重にて維持される。安定体重に達すると、ラットを８−方向放射状迷路に順化させる。

迷路の構造は、ＰｅｅｌｅおよびＢａｒｏｎ(Pharmacology, Biochemistry, and Behavior, 29:143-150, 1988)の構造からの改作である。迷路は７．５ｃｍの高さにまで持ち上げられ、それぞれが等距離にある、中心から８方向に放射状に伸びた通路に囲まれた中心領域から成る。それぞれの通路は５８ｃｍの長さで、１３ｃｍの高さがある。それぞれのセッションの開始前に、迷路の中心部に動物を閉じ込めるための透明なプレキシガラス製の円筒が装備される。迷路の各通路には、データ収集構成部分と交流し、次いでコンピューターと交流する３組の光電管を備えている。光電管は迷路内のラットの動きを追跡するために用いられる。各通路の端にある食料カップの上部に配置された小粒供給器は、通路の外部にある光電管が所定のセッションにおいて初めて始動したときに、２粒の４５ｍｇのチョコレート粒を供する。迷路は、各壁に視覚的な手がかりとして役立つ黒と白の幾何学的なポスターを有する試験室に配置される。全ての訓練および試験手順の間、白色雑音を聞かせる（〜７０ｄｂ）。

試験手順は、それぞれ５分または１０分続く日々のセクションを有する５つの段階から成る。１０秒の遅れが、ラットを迷路の中心部に置く時間と、円筒をセッションを開始するために開くときに生じる。第１段階のときに、食事制限された組のラットを、迷路の８つの通路の到る所にばらまかれた４５ｍｇのチョコレート食物小粒と共に、１０分間迷路に置く。第ＩＩ段階のときに、それぞれのラットは、別々に各通路の中間の光電管から食事カップまでにばらまかれた小粒と共に、１０分間迷路に置かれる。第ＩＩＩ段階のときに、それぞれのラットは、各通路の食事カップ内およびその付近にのみ配置された食事小粒と共に、１０分間迷路に置かれる。第ＩＶ段階のときに、それぞれのラットは、各通路から２粒の小粒を集めるために１０分間自由にされる。通路中に再度侵入することは誤りとみなす。ラットは、３日連続した訓練で全ての誤りが、２未満または２となる判定基準実績を達成するまでこの様式で毎日訓練される。順化および訓練の総時間はおよそ３週間である。

被験化合物を、リン酸緩衝生理食塩水中に調製し、１ｍｌ／ｋｇの容量で投与される。スコポラミンＨＢｒ（０．３ｍｇ／ｋｇ皮下注射）を損傷剤として与えると、誤謬率が増大する（記憶の喪失）。被験化合物を、いずれかの所定の試験日に最初の迷路試行前３０分に、スコポラミンと同時に腹膜内に与える。

被験化合物を評価するため、度重なる測定について８×８の均衡のとれたラテン方格を、少ない数の動物で高効率な実験効果を達成するために立案する。８つの実験セッション、１週間あたり２つが、各セッション内で無作為に８つの処置（媒体、スコポラミン、スコポラミンと組み合わされる３用量の被験化合物）と共に行われる。それぞれの処置は、同一回数で他のすべての処置を続けた。従って、全ての処置の残留効果を見積もることができ、直接の処置の効果から差し引くことができた。ＡＮＯＶＡに続いて、補正された平均においてダネットの両側検定を用いて多重比較を行う。

最初の試行の間の５分以内に４回正しい選択をしなかった動物、または第２の試行の終わりまでに全部で８回選択をしなかった動物は、そのセクションについては「時間切れ」であるとみなす。被験化合物を１回投薬より多く投与した後に「時間切れ」となった全ての動物は、分析から排除される。

実施例７４
神経防護作用
初代皮質ニューロン培養における時間依存的細胞死の抑制
初代皮質ニューロンは、Monyerら、1989, Brain Research 483:347-354に記載の種々の方法を用いて０〜１日齢のラットの脳から調製された。分散された脳組織をＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳ（プレグナント・ドナー・ウマ血清）にて３日間増殖させ、次いで汚染しているグリア細胞を取り除くため２日間、サイトシンアラビノサイド（ＡＲＣ）で処理した。５日目に、ＡＲＣ培地を取り除き、ＤＭＥＭ／１０％ＰＤＨＳに置換した。神経細胞をさらに使用前４〜７日間培養した。

対照の初代ニューロン培養物は、培養の１２から１８日の間に連続的な細胞死を示す。１２の培養物のうち、９日目にＤＭＥＭおよび１０％ＰＤＨＳ中で維持されている６つの培養物に被験化合物を加え、残りの培養物は対照として維持した後、１２日目と１６日目に酵素・酪酸脱水素酵素（ＬＤ）のレベルについて評価した。ＬＤは、Wroblewskiら、1955, Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 90:210-213による種々の方法を用いて検定した。ＬＤは、組織の生存力を決定するために、臨床および基礎研究の両方で一般的に用いられる細胞質の酵素である。培地のＬＤ増加は、細胞死と直接関係する。

低血糖により誘導される細胞毒性に対する神経防護作用
ＡＴＣＣから入手したＣ６グリア細胞は、ファルコン（ＦＡＬＣＯＮ）２５ｃｍ^２組織培養フラスコにて１×１０＜６＞細胞／ｍｌの濃度で、ＦＢＳを含むＲＰＭＩ培地中に撒いた。低血糖にする４時間前に、維持培地を棄て、単層を適当な培地にて２回洗浄し、次いで、無血清もしくは被験化合物を加えた無血清のいずれかにおいて３７℃で４時間インキュベートした。クレブスリンゲル・リン酸緩衝液を用いて、適当なグルコース処理を行う前に単層を洗浄した。ＲＰＭＩ培地は、２ｍｇグルコース／ｍｌを含み；フラスコは、それぞれ１００％グルコース（２ｍｇ／ｍｌ）、８０％グルコース（１．６ｍｇ／ｍｌ）、６０％グルコース（１．２ｍｇ／ｍｌ）または０％グルコース（緩衝液）もしくは被験化合物を補充されているものをそれぞれ受ける６つの群に分けた。全てのフラスコを２０時間インキュベートし、次いでトリプトファンブルーを利用して、全ての生細胞数および死細胞数について評価した。

興奮毒性アミノ酸に対する神経防護作用
ＳＫ−Ｎ−ＳＨ神経芽腫細胞を含む５枚の培養皿を被験化合物で処理し、５枚の培養皿をＲＰＭＩ培地で処理した。４時間後、全ての細胞をＮＭＤＡ（５００ｍｕＭ）で５分間処理した。次いで、全ての生細胞および死細胞を決定した。

酸素−グルコース欠乏に対する神経防護作用
アポトーシスを測定するための濃縮核分析：皮質ニューロンはＥ１８ラットの胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リジン（１０ｎｇ／ｍｌ）と血清で予め被覆された８ウェルチャンバースライドに密度１００，０００細胞／ウェルで培養する。細胞は、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭにて培養され、３７℃で１０％ＣＯ_２／９０％空気のインキュベーター中で維持される。翌日に、培養基をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭに交換することで、血清を取り除き、実験日までさらに培地交換をすることなくインキュベーター内で維持する。６日目に、スライドを、２つの群；対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群の細胞はグルコースおよび特注のＢ２７を含む（抗酸化物質を含まない）ＤＭＥＭを与える。ＯＧＤ群の細胞には、１５分間真空下で脱気した、特注のＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与える。細胞を気密チャンバー中で１０分間９０％Ｎ_２／１０％ＣＯ_２でフラッシュし、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤ細胞の両方を、特注のＢ２７を含むグルコース含有ＤＭＥＭ中に媒体（ＤＭＳＯ）または被験化合物のいずれかを含む培地に交換する。細胞を、３７℃のノルモキシ（normoxic）インキュベーターに戻す。２４時間後に、細胞を４％ＰＦＡで１０分間４℃で固定化し、トプロ（Topro）（蛍光核結合色素）で染色する。アポトーシスは、レーザー・スキャニング・サイトメーターを用いて濃縮核を測定することにより評価される。

細胞死の同定としてのＬＤＨ放出の測定：濃縮核は、Ｅ１８ラット胎児から調製し、ポリ−Ｄ−リジン（１０ｎｇ／ｍｌ）と血清で予め被覆された４８ウェル培養プレートに、１５０，０００細胞／ウェルの密度で撒く。細胞を、１０％ＦＣＳを含む高グルコースＤＭＥＭに撒き、１０％ＣＯ_２／９０％空気で３７℃のインキュベーターにて維持する。翌日、培養基をＢ２７補剤を含む高グルコースＤＭＥＭに交換することにより、血清を取り除く。６日目に、細胞を２つの群；対照群およびＯＧＤ群に分ける。対照群の細胞は、グルコースおよび特注のＢ２７（抗酸化物質を含まない）を含むＤＭＥＭを与える。ＯＧＤ群の細胞には、１５分間真空下で脱気した、特注のＢ２７を含むグルコース不含ＤＭＥＭを与える。細胞を、気密チャンバーにて９０％Ｎ_２／１０％ＣＯ_２で１０分間フラッシュし、３７℃で６時間インキュベートする。６時間後、対照およびＯＧＤ細胞の両方を、特注のＢ２７を含むグルコース含有ＤＭＥＭ中に媒体（ＤＭＳＯ）または被験化合物のいずれかを含む培地に交換する。細胞を、３７℃のノルモキシ・インキュベーターに戻す。２４時間後に、細胞死を、培養基中へのＬＤＨ（乳酸デヒドロゲナーゼ）の細胞放出を測定することにより評価する。ＬＤＨアッセイについて、培養基の一部５０μｌを９６ウェルプレートに移す。１４０μｌの０．１リン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．５）および１００μｌの０．２ｍｇ／ｍｌＮＡＤＨを加えた後、プレートを室温の暗所に２０分間放置する。反応は、１０μｌのピルビン酸ナトリウムを添加することにより開始させる。プレートを、サーモマックス（Thermomax）プレートリーダー（モレキュラー・デバイス（Molecular Devices））にて３４０ｎｍで素早く読み取る。ＮＡＤＨ濃度の指標である吸光度を、６秒毎に５分間記録し、ＮＡＤＨ消失速度を示す傾きを用いて、ＬＤＨ活性を計算する。
ＬＤＨ活性（Ｕ／ｍｌ）＝（ΔＡ／分）（ＴＣＦ）（２０）（０．０８３３）／（．７８）
ここに：０．０８３３＝比例定数
０．７８＝計器の光路長（ｃｍ）

実施例７５
ＨＬＡラット試験手順−クローン病および炎症性腸疾患
オスＨＬＡ−Ｂ２７ラットはタコニックから入手し、自由に食事（ＰＭＩラボ・ダイエット５００１）および水を摂取させる。研究の開始時、ラットは２２〜２６週齢である。

ラットは、以下に列記する製剤の１つを１日に１回、７日間皮下投薬される。それぞれの群は５匹のラットから成り、最後の投薬は安楽死の２時間前に投与される。
・媒体（５０％ＤＭＳＯ／５０％ダルベッコＰＢＳ）
・１７α−エチニル−β−エストラジオール（１０μｇ／ｋｇ）
・被験化合物

便の質を毎日観察し、以下の尺度：下痢＝３；軟らかい便＝２；正常な便＝１、に従って評価する。試験手順の最後に、血清を回収し、−７０℃で保存する。結腸の断片を、組織学的分析のために調製し、更なる切片をミエロペルオキシダーゼ活性について分析する。

以下の方法を用いて、ミエロペルオキシダーゼ活性を測定する。結腸組織を採取し、液体窒素中で急速冷凍する。全結腸の代表的な試料を用いて、試料間の整合性を確認する。組織を使用するまで−８０℃で保存する。次いで、組織の重量を量り（およそ５００ｍｇ）、１：１５ｗ／ｖの５ｍＭＨ_２ＫＰＯ_４（ｐＨ６）の洗浄緩衝液中にホモジナイズする。組織を、ソーヴァル（Sorvall）ＲＣ５Ｂ遠心機で４５分間、２〜８℃で２０，０００×ｇにて遠心沈殿させる。そして上清を棄てる。組織を再懸濁し、細胞内ＭＰＯを可溶化するのを助けるために１０ｍＭＥＤＴＡおよび０．５％ヘックス臭化アンモニウムを含む５０ｍＭＨ_２ＰＯ_４の２．５ｍｌ（１：５ｗ／ｖ）中にホモジナイズする。組織を液体窒素中で凍結し、３７℃の温浴槽中で溶解し、膜の溶解を確実に行うために１５秒間超音波処理する。この手順を３回繰り返す。次いで、試料を２０分間氷上で維持し、２〜８℃で１５分間１２，０００×ｇで遠心する。上清をこれらの工程に次いで分析する。

被験混合物を、反応管中で０．０００５％Ｈ_２Ｏ_２を含み、０．１６７Ｏ−ジアニシジン／ｍｌを含む５０ｍＭＨ_２ＰＯ_４を２．９ｍｌ加えることにより調製する。過酸化水素が分解されるときに、Ｏ−ジアニシジンが酸化され、４６０ｎｍに濃度依存的な様式で吸光する。混合物を２５℃で加熱する。組織の上清の百（１００）μＬを反応管に加え、２５℃で１分間インキュベートし、次いで１ｍｌを使い捨てのプラスチック製のキュベットに移す。ＯＤを４６０ｎｍで反応時間２分毎に、２．９ｍｌの反応混合物および１００μｌの０．５％臭化アンモニウム溶液を含むブランクに対して測定する。

酵素活性単位は、４６０の吸光と精製されたヒトＭＰＯ３１．１単位／バイアルで調製された標準曲線との比較により定量化される。ＭＰＯを再構築し、１０ｍＭＥＤＴＡおよび０．５％ヘックス臭化アンモニウムを含む５０ｍＭＨ_２ＰＯ４を用いて、４段階の既知濃度に連続的に希釈する。活性を決定するために、試料の吸光度をこの曲線に対して比較する。

組織学的分析を次のように行う。結腸組織を、１０％の中性緩衝ホルマリンに浸す。結腸の各標本を評価のために４つの試料に分ける。ホルマリン固定された組織を、パラフィン包埋のために真空浸透処理装置にて処理する。試料を５μｍに分割し、次いで、バウトン−スミス（Boughton-Smith）後に改良された尺度を用いたブラインド組織学的評価のためヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色する。得点付けを終えた後、試料を非ブラインド化し、データを表に記入し、複数の平均比較を用いるＡＮＯＶＡ直線モデリングにより分析する。

本明細書中で引用される全ての特許、刊行物および他の文献は、出典明示によりその全内容は本明細の一部とされる。

Claims

式：

［式中
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７およびＲ^８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシまたはハロゲンから選択され；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、−ＣＨＯ、アリール、フリル、チエニル、ピリミジニルまたはピリジニルであり；ただしＲ^１−Ｒ^８の少なくとも１つはＨ以外であり；
前記アルキル、アルコキシ、アルケニル、アリール、フリル、チエニル、ピリミジニルまたはピリジニル基のそれぞれは置換されていてもよい］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
Ｒ^４が水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ_２−Ｃ_７アルケニル、−ＣＨＯ、フェニル、フリル、チエニル、ピリミジニルおよびピリジニルから選択されるところの、請求項１記載の化合物。
Ｒ^４が水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ_２−Ｃ_７アルケニル、フリル、チエニルおよびピリジニルから選択されるところの、請求項１記載の化合物。
Ｒ^５、Ｒ^７およびＲ^８が、それぞれ独立して、水素またはハロゲンであるところの、請求項１〜３のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲンまたはヒドロキシルであるところの請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^６の少なくとも１つがヒドロキシルであるところの、請求項１〜５のいずれかに記載の化合物。
Ｒ^２およびＲ^６が、それぞれヒドロキシルであるところの、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物。
以下：
（ａ）５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｂ）８−クロロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｃ）７−クロロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｄ）７−ブロモ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｅ）３，９−ジヒドロキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−７−カルボニトリル；
（ｆ）７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｇ）７−ビニル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｈ）１２−ブロモ−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｉ）１２−クロロ−７−メトキシ−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｊ）７−メチル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｋ）７−［２−（ヒドロキシメチル）フェニル］−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｌ）７−フェニル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｍ）７−（２−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｎ）７−（３−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｏ）７−（４−トリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｐ）７−（４−メトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｑ）７−（４−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｒ）７−（４−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｓ）７−チエン−２−イル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｔ）７−チエン−３−イル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｕ）７−（３−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｖ）７−（３−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｗ）７−（３−メトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｘ）７−（２−クロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｙ）７−（３，４−ジフルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｚ）７−（４−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ａａ）７−（２−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｂｂ）７−（３，４−ジメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｃｃ）７−（４−シアノフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｄｄ）７−（３−フルオロ−４−メチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｅｅ）７−（３，４−ジメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｆｆ）７−（３−トリフルオロメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｇｇ）７−（３，５−ジフルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｈｈ）７−（３，５−ジクロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｉｉ）７−（３−メチル−４−フルオロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｊｊ）７−（３−フリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｋｋ）７−（２−フリル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール;
（ｌｌ）７−ブチル−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｍｍ）７−（３−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｎｎ）７−（４−メトキシ−３−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｏｏ）７−（ピリミジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｐｐ）７−（５−メトキシ−３−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｑｑ）７−（２−ピリジル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｒｒ）７−（３，４−ジクロロフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｓｓ）７−（４−メチルチオフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｔｔ）７−（４−シアノメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｕｕ）７−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｖｖ）７−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｗｗ）７−（４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｘｘ）７−（ナフチル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；
（ｙｙ）７−（４−エチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール；または
（ｚｚ）７−（３，５−ジメチルフェニル）−５Ｈ−ジベンゾ［ｃ，ｇ］クロメン−３，９−ジオール
のいずれかである、請求項１記載の化合物。
請求項１〜８のいずれかに記載の化合物および医薬担体を含む医薬組成物。
それを必要とする哺乳動物における骨粗鬆症の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における変形性関節症、低カルシウム血症、高カルシウム血症、パジェット病、骨軟化症、骨石灰脱失症、多発性骨髄腫または骨組織に有害な影響を及ぼす他の形態の癌の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における良性もしくは悪性の異常組織増殖の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
異常組織増殖が、前立腺肥大症、子宮平滑筋腫、乳癌、子宮内膜症、子宮内膜癌、多嚢胞性卵巣症候群、子宮内膜ポリープ、良性の乳房疾患、腺筋症、卵巣癌、黒色腫、疲れによる癌、大腸の癌またはＣＮＳ癌であるところの、請求項１２記載の方法。
それを必要とする哺乳動物におけるコレステロール、トリグリセリド、Ｌｐ（ａ）もしくはＬＤＬレベルの低下方法；または高コレステロール血症；高脂血症；心血管疾患；アテローム性動脈硬化症；抹消血管疾患；再狭窄もしくは血管痙攣の抑制方法；または免疫介在性の血管損傷に向かう細胞事象からの血管壁損傷の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における遊離基に誘発される病状の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における認知増強もしくは神経防護作用の提供方法；あるいは老人性痴呆、アルツハイマー病、認識衰退もしくは神経変性障害の処置方法または抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における炎症性腸疾患、潰瘍性直腸炎、クローン病、大腸炎；顔面潮紅、膣もしくは陰部の萎縮、萎縮性膣炎、膣の乾燥、そう痒症、性交疼痛症、排尿障害、頻尿、尿失禁、尿路感染症、血管運動症状；男性型禿頭症；皮膚萎縮；座瘡；II型糖尿病；不正子宮出血；または不妊症の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
それを必要とする哺乳動物における白血病、子宮内膜切除、慢性腎疾患もしくは慢性肝疾患または凝固疾患もしくは障害の抑制方法であって、前記哺乳動物に請求項１〜８のいずれかに記載の化合物の有効量を提供することを含む方法。
医薬として使用するための請求項１〜８のいずれかに記載の化合物。