JP2007525164A - インビトロフコシル化により処理された造血性幹細胞およびその使用法 - Google Patents
インビトロフコシル化により処理された造血性幹細胞およびその使用法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007525164A JP2007525164A JP2006509036A JP2006509036A JP2007525164A JP 2007525164 A JP2007525164 A JP 2007525164A JP 2006509036 A JP2006509036 A JP 2006509036A JP 2006509036 A JP2006509036 A JP 2006509036A JP 2007525164 A JP2007525164 A JP 2007525164A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hsc
- selectin
- amount
- binds
- treated
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 78
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 title abstract description 126
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 147
- 108010035766 P-Selectin Proteins 0.000 claims abstract description 118
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 claims abstract description 118
- 108010024212 E-Selectin Proteins 0.000 claims abstract description 111
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 claims abstract description 87
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 claims abstract description 61
- 102100034925 P-selectin glycoprotein ligand 1 Human genes 0.000 claims abstract description 56
- 108010001671 galactoside 3-fucosyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 40
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 101710137390 P-selectin glycoprotein ligand 1 Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102100023471 E-selectin Human genes 0.000 claims abstract 36
- 210000003995 blood forming stem cell Anatomy 0.000 claims description 165
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims description 138
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims description 138
- 101000777636 Homo sapiens ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Proteins 0.000 claims description 68
- 102100031585 ADP-ribosyl cyclase/cyclic ADP-ribose hydrolase 1 Human genes 0.000 claims description 53
- 239000010836 blood and blood product Substances 0.000 claims description 42
- 229940125691 blood product Drugs 0.000 claims description 42
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 30
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims description 28
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims description 28
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 claims description 25
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims description 23
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 20
- LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N GDP-L-fucose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N GDP-beta-L-fucose Chemical group O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N 0.000 claims description 18
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 claims description 15
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 claims description 12
- 108010019236 Fucosyltransferases Proteins 0.000 claims description 11
- 102000006471 Fucosyltransferases Human genes 0.000 claims description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 11
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 claims description 8
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 claims description 7
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 7
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 claims description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 6
- 201000005992 juvenile myelomonocytic leukemia Diseases 0.000 claims description 5
- 102100035277 4-galactosyl-N-acetylglucosaminide 3-alpha-L-fucosyltransferase FUT6 Human genes 0.000 claims description 4
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 4
- 102100035248 Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 4 Human genes 0.000 claims description 4
- 102100021333 Alpha-(1,3)-fucosyltransferase 7 Human genes 0.000 claims description 4
- 206010023249 Juvenile chronic myelomonocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007056 sickle cell anemia Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003446 ligand Substances 0.000 abstract description 24
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 19
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 abstract description 6
- 102000015689 E-Selectin Human genes 0.000 description 75
- 108010054395 P-selectin ligand protein Proteins 0.000 description 46
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 22
- 238000005096 rolling process Methods 0.000 description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 14
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 11
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 10
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 9
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical group O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 6
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 6
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 6
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 101100220044 Homo sapiens CD34 gene Proteins 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 238000011579 SCID mouse model Methods 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 3
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100034223 Golgi apparatus protein 1 Human genes 0.000 description 3
- 102100034405 Headcase protein homolog Human genes 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 101001066896 Homo sapiens Headcase protein homolog Proteins 0.000 description 3
- 101000622137 Homo sapiens P-selectin Proteins 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N alpha-Neup5Ac-(2->3)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@]3(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 3
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 3
- 108010073382 cysteine-rich fibroblast growth factor receptor Proteins 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- QGWNDRXFNXRZMB-UUOKFMHZSA-N GDP Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O QGWNDRXFNXRZMB-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 2
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000980898 Homo sapiens Cell division cycle-associated protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000622123 Homo sapiens E-selectin Proteins 0.000 description 2
- 108010092694 L-Selectin Proteins 0.000 description 2
- 102000016551 L-selectin Human genes 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 2
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 208000024340 acute graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 208000017760 chronic graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 2
- QGWNDRXFNXRZMB-UHFFFAOYSA-N guanidine diphosphate Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O QGWNDRXFNXRZMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000044493 human CDCA4 Human genes 0.000 description 2
- 102000051210 human SELE Human genes 0.000 description 2
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 238000012342 propidium iodide staining Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5-tetrahydroxy-6-[3,4,5-trihydroxy-6-[[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxyhexanal Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNMALANKTSRILL-LXENMSTPSA-N 3-[(2z,5e)-2-[[3-(2-carboxyethyl)-5-[(z)-[(3e,4r)-3-ethylidene-4-methyl-5-oxopyrrolidin-2-ylidene]methyl]-4-methyl-1h-pyrrol-2-yl]methylidene]-5-[(4-ethyl-3-methyl-5-oxopyrrol-2-yl)methylidene]-4-methylpyrrol-3-yl]propanoic acid Chemical compound O=C1C(CC)=C(C)C(\C=C\2C(=C(CCC(O)=O)C(=C/C3=C(C(C)=C(\C=C/4\C(\[C@@H](C)C(=O)N\4)=C\C)N3)CCC(O)=O)/N/2)C)=N1 NNMALANKTSRILL-LXENMSTPSA-N 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000013925 CD34 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108050003733 CD34 antigen Proteins 0.000 description 1
- 208000007209 Erythropoietic Porphyria Diseases 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108091005250 Glycophorins Proteins 0.000 description 1
- 102000028180 Glycophorins Human genes 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 1
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 1
- 208000030289 Lymphoproliferative disease Diseases 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010056886 Mucopolysaccharidosis I Diseases 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 208000037538 Myelomonocytic Juvenile Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 208000036365 Normal labour Diseases 0.000 description 1
- CIQHWLTYGMYQQR-QMMMGPOBSA-N O(4')-sulfo-L-tyrosine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 CIQHWLTYGMYQQR-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010000134 Vascular Cell Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023543 Vascular cell adhesion protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010068348 X-linked lymphoproliferative syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940119743 dextran 70 Drugs 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 125000002446 fucosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O1)C)* 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000017323 hematopoietic stem cell migration to bone marrow Effects 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007885 magnetic separation Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005063 microvascular endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 201000002273 mucopolysaccharidosis II Diseases 0.000 description 1
- 208000022018 mucopolysaccharidosis type 2 Diseases 0.000 description 1
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 208000002491 severe combined immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000011476 stem cell transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006107 tyrosine sulfation Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0006—Modification of the membrane of cells, e.g. cell decoration
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0647—Haematopoietic stem cells; Uncommitted or multipotent progenitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K2035/124—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells the cells being hematopoietic, bone marrow derived or blood cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
本出願は、米国特許法119条第(e)項の下で、2003年4月18日に出願された米国仮出願番号60/463,778の利益を主張し、この出願は、本明細書中にその全体が参考として明確に援用される。
本発明のいくつかの局面は、国立衛生研究所により与えられた助成金5P5OHL54502の過程でなされた。従って、政府は、本発明のいくつかの局面において一部の権利を有する。
本発明は概して、造血性幹細胞の治療上の有用性を改善するために、造血性幹細胞(HSC)を処理する方法に関し、より詳細には、(これに限定されないが、)臍帯血に由来する造血性幹細胞を処理する方法に関連し、従って、造血性幹細胞が処理される。
本発明は、一実施形態において、HSCを処理する方法を企図し、この方法は、一定量のHSCまたはHSCの集団を提供する工程であって、このHSCの内の少なくともある量が、表面タンパク質CD38の発現を欠如するか、またはその発現が減少している工程、ならびに一定量のHSCまたはHSCの集団をインビトロで、α1,3フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理する工程であって、処理されたHSCが、P−セレクチンおよびE−セレクチンへの結合を増強する工程を包含する。さらに、HSCは代表的に、P−セレクチン糖タンパク質リガンド−1(PSGL−1)および/またはP−セレクチンもしくはE−セレクチンに有効に結合しない他のセレクチンリガンドを含むとして特徴付けられる。より詳細には、PSGL−1またはCD34+CD38low/−HSC上に存在する他のセレクチンリガンドは、フコシル化グリカン、特にO−グリカンを欠如するか、またはほとんど有さず、そして、例えば、NeuAcα2,3Galβ1,4GlcNAcを含むコア−2 O−グリカンを有し、GlcNAcへのα1,3結合中のフコースを欠如するPSGL−1を有する。HSCは、本明細書中に記載されるフコシル化の前の未処理状態では、骨髄の戻る能力が低減している。本発明の一実施形態において、HSCは、ヒト臍帯血に由来するが、フコシル化処理後の骨髄へ戻る能力が増強されているとして特徴付けられる限り、骨髄または末梢血に由来し得る。本明細書中に企図される方法において、α1,3フコシルトランスフェラーゼは、例えば、α1,3フコシルトランスフェラーゼIV、α1,3フコシルトランスフェラーゼVI、またはα1,3フコシルトランスフェラーゼVII、またはこれらの組合せであり得る。フコースドナーは、例えば、GDP−フコースであり得る。
本発明は、1つの実施形態において、HSCを処理する方法を意図し、この方法は、表面結合タンパク質CD38の発現を欠くかまたはCD38の減少した発現を有するHSCのある量もしくは集団を提供する工程、およびそのHSCの量もしくは集団をインビトロでα1,3フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理する工程を包含し、ここで、そのように処理されるHSCは、P−セレクチンまたはE−セレクチンに対する結合が処理していないHSCを超えて高められる。さらに、処理していないHSCは、代表的には、P−セレクチンまたはE−セレクチンに十分に結合しないPSGL−1または他のセレクチンリガンドを主に含むと特徴付けられる。CD38low/−HSCに生じるPSGL−1または他のセレクチンリガンドは、フコシル化グリカン(例えば、O−グリカン)を欠くかまたはフコシル化グリカンの減少した数を有し、そして例えば、PSGL−1(これは、NeuAcα2,3Galβ1,4GlcNAcを含むコアの2個のO−グリカンを有するが、GlcNAcに対するα1,3結合においてフコースを欠く)を有し得る。CD38low/−HSCは、フコシル化前のその処理されない状態において、低下した骨髄ホーミング能を有する。HSCの骨髄ホーミング能を高めるためのさらなるフコシル化を必要とするかもしくはそのようなフコシル化から利益を受けると特徴付けられる限りは、HSCは、骨髄または末梢血由来であり得るが、好ましくは、HSCは、ヒト臍帯血(CB)由来である。本明細書中で意図される方法において、上記α1,3フコシルトランスフェラーゼは、例えば、α1,3フコシルトランスフェラーゼIV、α1,3フコシルトランスフェラーゼVI、またはα1,3フコシルトランスフェラーゼVIIであり得る。上記フコースドナーは、例えば、GDP−フコースであり得る。
臍帯血サンプルを、Institutional Review Board of the Oklahoma Medical Research Foundation(OMRF)によって認可されたプロトコールに従って、通常の満期普通分娩から得た。1回の分娩あたり70〜100mlの臍帯血を採取した。クエン酸ナトリウムを、抗凝固薬として使用した。臍帯血を採取するための当該分野で公知の、任意の適切な方法(例えば、米国特許第6,440,010号(その全体が本明細書において参考として明白に援用される)に示される方法)が適切である。血液サンプルの上清内のCD34+細胞を、CD34単離ミニMACSキット(Miltenyi Biotec,Bergisch Gladbach,Germany)を用いて富化した。臍帯血をまず、当量の0.9%塩化ナトリウム中の6% デキストラン70(McGaw,Inc.,Irvine,CA)と混合した。2〜3時間の沈降の後、上清内の細胞を取り除き、2mM EDTAおよび0.5% ヒト血清アルブミン(HSA)を含有するHankの平衡化塩溶液(HBSS,Cellgro)中で1度洗浄した。汚染された赤血球を、FACS溶解溶液(BD Biosciences,San Jose,CA)中で溶解した。低密度単核細胞(MNC)を、Ficoll−Hypaque(d=1.077g/ml)にて250gで遠心分離した後に分離した。CD34+細胞を、製造業者の指示書に従ってCD34単離ミニMACSキットを使用して、MNC分画から精製した。単離されたCD34+細胞の精製は、フローサイトメトリーによって試験した場合、約96%であった(図1)。次いで、以下の実験を実施した。
この目的のために、三色染色を使用した。ミニMACS選別により富化した細胞を、ヒトIgGを用いてFcレセプターをブロッキングした後に、FITCに結合体化した抗CD34モノクローナル抗体(mAb、Miltenyi Biotec製のクローンAC136)、PEに結合体化した抗CD38 mAb(BD Pharminge,San Diego,CA)およびCy5に結合体化した抗PSGL−1モノクローナル抗体(BD Pharminge,San Diego,CA)と共にインキュベートした。洗浄した後、細胞を、FACScan(Becton Dickinson)上のフローサイトメトリーにより分析した。CellQuestプログラムを使用してデータを回収した。光散乱ゲート化事象を、蛍光強度の対数スケールにプロットした。実質的に全てのCD34+細胞がPSGL−1を発現し(図2A)、CD34+細胞の約30%がCD38の低い発現を有するか、または発現を有さず(図2B)、これは、始原前駆細胞の下位集団を表す。さらに、P−セレクチンに結合しないHSCの約25%は、CD34+およびCD38low/−である(図3)。これらの結果は、既存のデータを確証する。
PSGL−1またはCD34+細胞上の他のセレクチンリガンドに結合するコア2 O−グリカン上にフコースを導入するために、2〜4×106個の細胞を、0.5mLのHBSS/1% HSA中の1mM グアノシン二リン酸(GDP)−フコース(Calbiochem)、20mU/mL α1−3−フコシルトランスフェラーゼVI(FT−VI)(Calbiochem)、および10mMのMnCl2を用いて、5% CO2を含有する雰囲気下、37℃にて40分間処理した。この処理により、最大P−セレクチン結合により測定されるように、CD34+細胞におけるPSGL−1の最適なフコシル化を生じ、さらに、プロピジウムヨージド染色により試験した場合に、CD34+細胞に対して最小の毒性を生じる(図4)。
シアリルLewisxは、フコシル化エピトープである。抗sLexmAbであるHECA 452(ラットIgM、American Type Culture Collegtion[ATCC]製のハイブリドーマ)と共にインキュベートすることによって、本発明者らは、CD34+細胞においてsLexエピトープを試験した。結合したmAbを、ラットIgM(Caltag)に対してFITC結合体化ヤギF(ab)’2フラグメントを用いて検出した。図5Aにより示されるように、臍帯血から得られたCD34+細胞の26%が、低いフコシル化エピトープを発現するか、または発現しない。これらのデータは、CD34+細胞のサブセットが、適切にフコシル化されていないことを示す。インビトロα1,3−フコシル化が、CD34+細胞においてフコシル化エピトープを作製し得るかどうかを調べるために、本発明者らは、上記の方法を使用して、Mnの存在下で、CD34+細胞をFT−VIおよびGDP−フコースを用いて処理した後に、HECA 452で細胞を染色した。本発明者らは、HSCA 452染色により示されるように、インビトロα1,3−フコシル化が、臍帯血由来のCD34+細胞におけるsLexエピトープを劇的に増加したことを見出した(図5B)。
(臍帯血由来のCD34+細胞における可溶性P−セレクチンの結合特性の検証)
P−セレクチン結合アッセイについて、臍帯血由来のCD34+細胞を、Fcレセプターをブロッキングした後、抗CD34−PEおよびヒト血小板から単離したP−セレクチンと共にインキュベートした。P−セレクチンの結合を、FITC標識したS12(ヒトP−セレクチンに対するブロッキングしていないmAb)を用いて検出した。細胞のインキュベーションを、4℃にて20分間実施した。系列滴定後のP−セレクチンの飽和量を実験において使用した(図6)。コントロール実験において、細胞のP−セレクチンインキュベーションを、G1(P−セレクチンに対するブロッキングmAb)、PL1(PSGL−1に対するブロッキングmAb)、またはCa2+依存性のセレクチンリガンド相互作用を排除する10mM EDTAの存在下で実施した。フローサイトメトリー分析は、CD34+細胞(主にCD38low/−細胞を含む)の約27%が、P−セレクチンに結合しなかったことを示し、このことは、以前の刊行されたデータと一致する(図7A)(Hidalgo,A.,Weiss,L.A.,およびFrenette,P.S.Functional selectin ligands mediating human CD34+cell interaction with bone marrow endothelium are enhanced postnatally.Adhesion pathways mediating hematopoietic progenitor cell homing to bone marrow.J.Clin.Invest.110:559−569.2002)。図7Cは、P−セレクチンが、CD34+細胞上のPSGL−1に特異的に結合することを示した。これは、G1抗体およびPL1抗体、ならびにEDTAが、結合を無効にしたためである。
臍帯血由来のCD34+細胞を、まず、上記のようにGDP−フコースおよびFT−VIで処理し、次いで、抗CD34−PEおよびP−セレクチンの両方で染色した。P−セレクチンの結合を、FITC標識したmAb S12で検出した。外来性FT−VIでの処理が、ヒトP−セレクチンに対するCD34+細胞の結合を有意に増加した(図7B)。P−セレクチンに対する増強された結合は、α1,3−フコシル化の後のCD34+細胞における機能的PSGL−1の増加に起因した。なぜならば、この結合は、抗体G1およびPL1によって、そしてEDTAによってブロッキングされたからである(図7D)。インビトロα1,3−フコシル化についての最適な条件を見出すために、種々のインキュベーション時間およびFT−VI、GDP−フコースおよびMnの濃度を試験した(データ示さず)。条件(上掲)を、最大のP−セレクチン結合によって測定されるように、CD34+細胞におけるPSGL−1の最適なフコシル化を生じた全ての実験について選択し(図7B)、さらに、プロピジウムヨージド染色によって試験されるように、CD34+細胞に対して最小の毒性を生じた(図4)。
臍帯血由来のCD34+細胞を、さらなる処理のために2つの群に分けた。一方の群を、上記のようにGDP−フコースおよびFT−VIと共にインキュベートし、もう一方の群を、GDP−フコースなしのFT−VIで処理した(偽処理コントロール)。2群の細胞のP−セレクチン結合能を、以下に記載されるようなインビトロフローチャンバローリングアッセイシステム(flow chamber rolling assay system)を使用して比較した。ヒト血小板から単離したP−セレクチンを、平行プレートフローチャンバ内に固定した。125I標識した抗P−セレクチンmAb S12の結合により測定した場合に、145部位/μm2のP−セレクチン部位濃度を使用した。偽処理、またはFTVI処理のCD34+細胞(Hankの緩衝化塩溶液および0.5%ヒトアルブミン中106個/ml)を、1dyn/cm2の壁せん断応力の下でP−セレクチンについて灌流した。ローリング細胞の蓄積数を、画像分析システムに接続されたビデオ顕微鏡システムを用いて測定した。EDTA、ならびに抗体G1およびPL1がローリングを無効にし、ヒト血清アルブミンのみでコーティングしたプレート上ではローリングが見られなかったので、CD34+細胞は、ヒトP−セレクチン−PSGL−1相互作用により、Ca++依存性の様式でローリングした(図8)。偽処理CD34+細胞と比較して、約3倍多いFT−VI処理CD34+細胞が、P−セレクチンについてローリングした。
(CD由来のHSCに対する可溶性E−セレクチンの結合特性)
マウス可溶性E−セレクチン/ヒトIgMキメラ(E−セレクチン/IgM)を、流体相のE−セレクチン結合アッセイのために使用した。CD45/ヒトIgMキメラをネガティブコントロールとして使用した。細胞を、Fcレセプターをブロッキングした後に、E−セレクチン/IgMと共にインキュベートした。次いで、E−セレクチンの結合を、FITC標識したヤギ抗ヒトIgMポリクローナル抗体を用いて検出した。この細胞をまた、PE標識した抗CD34 mAb(BD Pharmingen,San Diego,CA)で染色した。インキュベーションを、4℃にて20分間実施した。系列滴定の後に、飽和量のE−セレクチンを実験に使用した。コントロール実験において、染色を、9A9(E−セレクチンに対するブロッキングmAb)、または10mM EDTA(Ca2+依存性セレクチンリガンドの相互作用を排除する)の存在下で実施した。フローサイトメトリー分析は、約25%のCD34+HSCがE−セレクチンに結合しなかったことを示した(図9A)。図9Cは、CD34+HSCのE−セレクチンとの相互作用が特異的であったことを示し、これは、mAb 9A9およびEDTAがこの相互作用を無効にしたからである。
CB由来のCD34+HSCを、2つの群に分けた。一方の群(2〜4×106個の細胞)を、0.5ml HBSS/1% HAS中の1mM GDP−フコース、20mU/ml FTVI(Calbiochem)および10mM MnCl2と共に、5% CO2を含有するインキュベーター内で、37℃にて40分間インキュベートした。もう一方の群を、GDP−フコースなしのFT−VIと共にインキュベートした(偽処理コントロール)。次いで、細胞を、抗CD34およびE−セレクチン/IgMの両方で染色した。外来性のα1,3−フコシルトランスフェラーゼ処理の後、CD34+HSCのE−セレクチンに対する結合は、75%から95%まで増加した(図9Aおよび9B)。E−セレクチンに対する増加した結合は、mAb 9A9およびEDTAにより評価したように、特異的であった(図9D)。図9Cおよび9Dに見られるAb 9A9およびEDTAのブロッキングの後の残りの結合は、ネガティブコントロールであるCD45/IgMで染色された細胞が、類似の特性を有した(データ示さず)ので、非特異的であった。
上記のように、HSCを2つの群に分け、フコシル化した。2つの群の細胞のE−セレクチン結合能を、インビトロフローチャンバローリングシステムを使用して比較した。簡単には、可溶性ヒトE−セレクチンを、平行プレートフローチャンバ内に固定した。125I標識された抗ヒトE−セレクチンmAb ES1の結合により測定した場合、200部位/μm2のE−セレクチン部位濃度を使用した。偽処理またはFT−VI処理したHSC(HBSSおよび0.5% HSA中106個/ml)を、異なるせん断力の下、E−セレクチンについて灌流した。ローリング細胞の蓄積数およびせん断応力を、画像分析システムに連結されたビデオ顕微鏡システムを用いて測定した。試験したせん断力において、偽処理HSCと比較して、約2〜3倍多いFT−VI処理HSCが、E−セレクチンについてローリングした(図10Aおよび10B)。FT−VI処理細胞はまた、より低い速度でローリングし、せん断力による剥離により抵抗性であった(図10Cおよび10D)。HSCのE−セレクチンとの相互作用は、特異的であった。これは、mAb ES1がローリングを無効にし、そしてHSAのみでコーティングしたプレートにおいては、ローリング見られなかったからである(図10B)。PSGL−1に対するP−セレクチンの結合をブロックするPL1は、E−セレクチンについてのHSCのローリングに影響を与えず(図10B)、これは、E−セレクチンが、PSGL−1についての他の部位、または他の細胞表面リガンドに対する結合によってローリングを媒介することを確認する。
(フコシル化HSCは、インビボで、骨髄において増強された移植を示す)
(方法)
インビトロ分析によって、GDP−フコースおよびFTVIで処理したCB HSCが、流体相におけるP−セレクチンおよびE−セレクチンの有意な増加を示し、異なる壁せん断力の下で、フコシル化なしのCB HSCと比較して、P−セレクチンおよびE−セレクチンでコーティングした表面上でよりよくローリングしたことが、本明細書において実証された。フコシル化CB HSCはさらに、インビボで、骨髄への改善されたホーミングおよび骨髄における改善された移植を有することが、本明細書において示される。非肥満糖尿病重症複合免疫不全(NOD/SCID)マウスは、ヒトのHSCのインビボ研究のための異種移植レシピエントとして十分に確立されている。本発明者らは、フコシル化されたかもしくはフコシル化されていないCB HSCを移植されたNOD/SCIDマウスにおいて、ヒト造血系移植を比較した。
フローサイトメトリーにより分析したように、フコシル化CB HSCを与えた、照射したNOD/SCIDマウスは、偽処理CB HSCを受けたマウスよりも、骨髄および末梢血におて、2〜3倍多いCD45陽性のヒト由来の造血細胞を有した(図11A)。フコシル化細胞を移植したマウスの骨髄におけるヒト造血前駆体の有意に改善された移植は、BFU−E、CFU−GMおよびCFU−GEMMの増加により実証されるように、多重系統であった(図11B)。注目すべきなのは、CB HSC由来のコロニーの大きさが、いずれのレシピエント群においても有意に異ならず(データは示さず)、このことは、フコシル化が、CB前駆体の増殖能を変化しなかったことを示す。従って、このインビボ研究は、FTVI処理したCB HSCが、偽処理細胞が有するよりも、NOD/SCIDマウスの骨髄に帰巣し、骨髄内に移植するより高い能力を有することを実証する。これらの結果は、本発明のHSCが、ヒトにおいて増強された骨髄移植を有することを示す。
本明細書中に記載されるフコシル化HSCは、種々の方法で使用され得る。例えば、これらの細胞は、ナイーブ(原始的)であるので、これらは、照射された被験体および/または化学療法に供された個体の骨髄を完全に再構築するために使用され得る。
Claims (73)
- HSCを処理する方法であって、該方法は、以下の工程:
一定量のHSC、少なくとも、表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したHSCの一部を提供する工程;および
該一定量のHSCをインビトロで、α1,3−フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理して、処理されたHSCを形成する工程であって、ここで該処理されたHSCは、P−セレクチンまたはE−セレクチンへの増強された結合を有する、工程、
を包含する、方法。 - 前記一定量のHSCを提供する工程において、前記表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したHSCの一部は、減少した骨髄ホーミング能力を有する、請求項1に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、ヒト臍帯血に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記ヒト臍帯血は、未分画量のヒト臍帯血である、請求項3に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、末梢血に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記末梢血は、未分画量の末梢血である、請求項5に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、骨髄に由来する、請求項1に記載の方法。
- 前記骨髄は、未分画量の骨髄である、請求項7に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、前記表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したHSCの一部は、非フコシル化グリカンまたは非フコシル化O−グリカンを有するPSGL−1を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、前記表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したHSCの一部は、NeuAcα2,3Galβ1,4GIcNAcを含み、かつ該GlcNAcへのα1,3結合のフコースが存在しないかまたは適切なフコシル化を欠く他のグリカンを含む、コア−2O−グリカンを有するPSGL−1を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記処理されたHSCの少なくとも50%は、P−セレクチン結合アッセイにおいて所定の蛍光閾値を超えるP−セレクチン結合蛍光を有するか、またはE−セレクチン結合アッセイにおいて所定の蛍光閾値を超えるE−セレクチン結合蛍光を有する、請求項1に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記α1,3フコシルトランスフェラーゼは、α1,3フコシルトランスフェラーゼIV、α1,3フコシルトランスフェラーゼVI、またはα1,3フコシルトランスフェラーゼVIIである、請求項1に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記フコースドナーは、GDP−フコースである、請求項1に記載の方法。
- HSCの組成物であって、以下:
臍帯血に由来し、表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したCD34+HSCであって、ここで該CD34+HSCの少なくとも10%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、CD34+HSC;および
薬学的に受容可能なキャリア、
を含有する、組成物。 - 前記CD34+HSCの少なくとも25%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項14に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも50%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項14に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも75%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項14に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも90%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項14に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも95%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項14に記載の組成物。
- 血液学的疾患またはHSCの移植を要する他の状態を有する被験体を処置する方法であって、該方法は、一定量の請求項14に記載の組成物を、該血液学的疾患またはHSCの移植を要する他の状態を有する被験体に投与する工程を包含する、方法。
- 前記血液学的疾患は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、脊髄形成異常、慢性骨髄性白血病、若年性慢性骨髄性白血病、または鎌状赤血球貧血のうちの1つである、請求項20に記載の方法。
- 血液製剤であって、以下:
CD34+CD38low/−として特徴づけられる細胞を含むヒトHSCの集団であって、ここで該CD34+CD38low/−HSCの少なくとも10%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、ヒトHSCの集団、
を含む、血液製剤。 - 前記CD34+CD38low/−HSCの少なくとも25%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記CD34+CD38low/−HSCの少なくとも50%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記CD34+CD38low/−HSCの少なくとも75%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記CD34+CD38low/−HSCの少なくとも90%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記CD34+CD38low/−HSCの少なくとも95%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記ヒトHSCは、ヒト臍帯血に由来する、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記ヒトHSCは、末梢血由来である、請求項22に記載の血液製剤。
- 前記ヒトHSCは、骨髄由来である、請求項22に記載の血液製剤。
- 薬学的に受容可能なキャリアまたはビヒクルをさらに含む、請求項22に記載の血液製剤。
- 遊離のフコシルトランスフェラーゼまたは支持体に結合したフコシルトランスフェラーゼをさらに含む、請求項22に記載の血液製剤。
- 以下の工程:
一定量のHSC、少なくとも、表面タンパク質CD38の発現を欠くかまたはその発現が減少したHSCの一部を提供する工程;および
該一定量のHSCをインビトロで、α1,3−フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理して、処理されたHSCを生成する工程であって、ここで該処理されたHSCの少なくとも10%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、工程、
を包含する方法により生成される、血液製剤。 - 前記処理されたHSCの少なくとも25%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも50%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも75%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも90%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも95%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、ヒト臍帯血に由来する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、末梢血に由来する、請求項33に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、骨髄に由来する、請求項33に記載の血液製剤。
- HSCを処理する方法であって、該方法は、以下の工程:
一定量のHSCを提供する工程;および
該一定量のHSCをインビトロで、α1,3−フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理して、処理されたHSCを形成する工程であって、ここで該処理されたHSCは、P−セレクチンまたはE−セレクチンへの増強された結合を有する、工程、
を包含する、方法。 - 前記一定量のHSCを提供する工程において、該一定量のHSCの一部は、減少した骨髄ホーミング能力を有する、請求項42に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、ヒト臍帯血に由来する、請求項42に記載の方法。
- 前記ヒト臍帯血は、未分画量のヒト臍帯血である、請求項44に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、末梢血に由来する、請求項42に記載の方法。
- 前記末梢血は、未分画量の末梢血である、請求項46に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該HSCは、骨髄に由来する、請求項42に記載の方法。
- 前記骨髄は、未分画量の骨髄である、請求項48に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該一定量のHSCの一部は、非フコシル化グリカンまたは非フコシル化O−グリカンを有するPSGL−1を含む、請求項42に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを提供する工程において、該一定量のHSCの一部は、NeuAcα2,3Galβ1,4GIcNAcを含み、かつ該GlcNAcへのα1,3結合のフコースが存在しないかまたは適切なフコシル化を欠く他のグリカンを含む、コア−2O−グリカンを有するPSGL−1を含む、請求項42に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記処理されたHSCの少なくとも50%は、P−セレクチン結合アッセイにおいて所定の蛍光閾値を超えるP−セレクチン結合蛍光を有するか、またはE−セレクチン結合アッセイにおいて所定の蛍光閾値を超えるE−セレクチン結合蛍光を有する、請求項42に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記α1,3フコシルトランスフェラーゼは、α1,3フコシルトランスフェラーゼIV、α1,3フコシルトランスフェラーゼVI、またはα1,3フコシルトランスフェラーゼVIIである、請求項42に記載の方法。
- 前記一定量のHSCを処理する工程において、前記フコースドナーは、GDP−フコースである、請求項42に記載の方法。
- HSCの組成物であって、以下:
臍帯血に由来するCD34+HSCであって、ここで該CD34+HSCの少なくとも10%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、CD34+HSC;および
薬学的に受容可能なキャリア、
を含有する、組成物。 - 前記CD34+HSCの少なくとも25%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項55に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも50%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項55に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも75%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項55に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも90%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項55に記載の組成物。
- 前記CD34+HSCの少なくとも95%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項55に記載の組成物。
- 血液学的疾患またはHSCの移植を要する他の状態を有する被験体を処置する方法であって、該方法は、一定量の請求項55に記載の組成物を、該血液学的疾患またはHSCの移植を要する他の状態を有する被験体に投与する工程を包含する、方法。
- 前記血液学的疾患は、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、脊髄形成異常、慢性骨髄性白血病、若年性慢性骨髄性白血病、または鎌状赤血球貧血のうちの1つである、請求項61に記載の方法。
- 以下の工程:
一定量のHSCを提供する工程;および
該一定量のHSCをインビトロで、α1,3−フコシルトランスフェラーゼおよびフコースドナーで処理して、処理されたHSCを生成する工程であって、ここで該処理されたHSCの少なくとも10%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、工程、
を包含する方法により生成される、血液製剤。 - 前記処理されたHSCの少なくとも25%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも50%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも75%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも90%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記処理されたHSCの少なくとも95%は、P−セレクチンまたはE−セレクチンに結合する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、ヒト臍帯血に由来する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、末梢血に由来する、請求項63に記載の血液製剤。
- 前記一定量のHSCは、骨髄に由来する、請求項63に記載の血液製剤。
- 薬学的に受容可能なキャリアまたはビヒクルをさらに含む、請求項63に記載の血液製剤。
- 遊離フコシルトランスフェラーゼまたは支持体に結合したフコシルトランスフェラーゼをさらに含む、請求項63に記載の血液製剤。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US46378803P | 2003-04-18 | 2003-04-18 | |
US60/463,788 | 2003-04-18 | ||
US10/769,686 US7332334B2 (en) | 2003-04-18 | 2004-01-30 | Hematopoietic stem cells treated by in vitro fucosylation and methods of use |
US10/769,686 | 2004-01-30 | ||
PCT/US2004/006474 WO2004094619A2 (en) | 2003-04-18 | 2004-03-03 | Hematopoietic stem cells treated by in vitro fucosylation and methods of use |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007525164A true JP2007525164A (ja) | 2007-09-06 |
JP4699360B2 JP4699360B2 (ja) | 2011-06-08 |
Family
ID=33162373
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006509036A Expired - Fee Related JP4699360B2 (ja) | 2003-04-18 | 2004-03-03 | インビトロフコシル化により処理された造血性幹細胞およびその使用法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (7) | US7332334B2 (ja) |
EP (2) | EP2327760B1 (ja) |
JP (1) | JP4699360B2 (ja) |
AU (1) | AU2004233146B2 (ja) |
CA (2) | CA2522743C (ja) |
ES (2) | ES2415734T3 (ja) |
WO (1) | WO2004094619A2 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017525340A (ja) * | 2014-07-07 | 2017-09-07 | ターガザイム,アイエヌシー. | 治療的用途のためのフコシル化細胞の製造および凍結保存 |
Families Citing this family (44)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7332334B2 (en) | 2003-04-18 | 2008-02-19 | Oklahoma Medical Research Foundation | Hematopoietic stem cells treated by in vitro fucosylation and methods of use |
WO2005017115A2 (en) * | 2003-08-11 | 2005-02-24 | Mount Sinai School Of Medicine Of New York University | Cord blood-derived hematopoietic progenitor cells |
EP1756267A2 (en) | 2004-05-14 | 2007-02-28 | Becton, Dickinson and Company | Stem cell populations and methods of use |
US20060024825A1 (en) * | 2004-07-26 | 2006-02-02 | Medipost Co. Ltd. | Method of promoting expansion of stem cells |
WO2006068720A2 (en) * | 2004-11-12 | 2006-06-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Hematopoietic cell selectin ligand polypeptides and methods of use thereof |
CA2599274A1 (en) * | 2005-02-28 | 2006-09-08 | Regenetech, Inc. | Method of providing readily available cellular material derived from peripheral blood and a composition thereof |
US7927867B2 (en) * | 2005-03-31 | 2011-04-19 | Cascade Life Sciences, Inc. | Device for evaluating in vitro cell migration under flow conditions, and methods of use thereof |
FI20055398A0 (fi) | 2005-07-08 | 2005-07-08 | Suomen Punainen Risti Veripalv | Menetelmä solupopulaatioiden evaluoimiseksi |
US20070279206A1 (en) * | 2006-06-01 | 2007-12-06 | Singfield Joy S | Wireless car seat locator and child safety occupancy alert system |
US8084236B2 (en) * | 2006-06-02 | 2011-12-27 | Robert Sackstein | Compositions and methods for modifying cell surface glycans |
AU2014202669B2 (en) * | 2006-06-02 | 2016-05-12 | Robert Sackstein | Compositions and methods for modifying cell surface glycans |
FI20075030A0 (fi) * | 2007-01-18 | 2007-01-18 | Suomen Punainen Risti Veripalv | Menetelmä solujen modifioimiseksi |
CN101848991A (zh) * | 2007-08-08 | 2010-09-29 | 协和发酵麒麟株式会社 | 分离的细胞群 |
AU2008336249B2 (en) * | 2007-12-10 | 2015-01-29 | The University Of Queensland | Treatment and prophylaxis |
CN102076865B (zh) | 2008-05-02 | 2016-03-16 | 西雅图基因公司 | 用于制造核心岩藻糖基化降低的抗体和抗体衍生物的方法和组合物 |
ES2627043T3 (es) * | 2008-06-09 | 2017-07-26 | Targazyme, Inc. | Aumento de la eficacia de la terapia celular incluyendo tratamiento con alfa 1-3 fucoslitransferasa |
US20140161782A1 (en) | 2008-06-09 | 2014-06-12 | Targazyme, Inc. | Augmentation of cell therapy efficacy including treatment with alpha 1-3 fucoslytransferase |
WO2010004018A2 (en) * | 2008-07-11 | 2010-01-14 | Eth Zurich | Degradable microcapsules |
EP2166085A1 (en) | 2008-07-16 | 2010-03-24 | Suomen Punainen Risti Veripalvelu | Divalent modified cells |
US7908368B2 (en) * | 2008-09-23 | 2011-03-15 | International Business Machines Corporation | Method and apparatus for redirecting data traffic based on external switch port status |
JP5918235B2 (ja) | 2010-08-05 | 2016-05-18 | シアトル ジェネティクス,インコーポレーテッド | フコースアナログを用いるイン・ビボでのタンパク質フコシル化の阻害方法 |
EP2794626B3 (en) | 2011-12-22 | 2020-08-05 | GlycoMimetics, Inc. | E-selectin antagonist compounds |
MX363385B (es) | 2012-08-23 | 2019-03-20 | Seattle Genetics Inc | Métodos para el tratamiento de enfermedad de células falciformes y otras condiciones inflamatorias. |
US9867841B2 (en) | 2012-12-07 | 2018-01-16 | Glycomimetics, Inc. | Compounds, compositions and methods using E-selectin antagonists for mobilization of hematopoietic cells |
ES2754549T3 (es) | 2014-12-03 | 2020-04-20 | Glycomimetics Inc | Inhibidores heterobifuncionales de E-selectinas y receptores de quimioquinas CXCR4 |
CN106796477B (zh) | 2015-02-27 | 2018-05-29 | 株式会社藤仓 | 布线体、布线基板、布线构造体及触摸传感器 |
WO2017151708A1 (en) | 2016-03-02 | 2017-09-08 | Glycomimetics, Inc. | Methods for the treatment and/or prevention of cardiovescular disease by inhibition of e-selectin |
CN106106347B (zh) * | 2016-06-22 | 2019-06-14 | 广东药科大学 | 一种前列腺神经内分泌癌基因工程动物模型的构建方法及应用 |
US11433086B2 (en) | 2016-08-08 | 2022-09-06 | Glycomimetics, Inc. | Combination of T-cell checkpoint inhibitors with inhibitors of e-selectin or CXCR4, or with heterobifunctional inhibitors of both E-selectin and CXCR4 |
AU2017341065B2 (en) | 2016-10-07 | 2023-04-06 | Glycomimetics, Inc. | Highly potent multimeric E-selectin antagonists |
CA3054605A1 (en) | 2017-03-15 | 2018-09-20 | Glycomimetics, Inc. | Galactopyranosyl-cyclohexyl derivatives as e-selectin antagonists |
WO2019108750A1 (en) | 2017-11-30 | 2019-06-06 | Glycomimetics, Inc. | Methods of mobilizing marrow infiltrating lymphocytes and uses thereof |
AU2018395417B2 (en) | 2017-12-29 | 2023-07-13 | Glycomimetics, Inc. | Heterobifunctional inhibitors of E-selectin and galectin-3 |
EP3761994A1 (en) | 2018-03-05 | 2021-01-13 | GlycoMimetics, Inc. | Methods for treating acute myeloid leukemia and related conditions |
US11273179B2 (en) | 2018-03-12 | 2022-03-15 | Medeor Therapeutics, Inc. | Methods for treating non-cancerous disorders using hematopoietic cells |
US10881692B2 (en) | 2018-04-05 | 2021-01-05 | Medeor Therapeutics, Inc. | Compositions for establishing mixed chimerism and methods of manufacture thereof |
US10842821B2 (en) | 2018-04-05 | 2020-11-24 | Medeor Therapeutics, Inc. | Cellular compositions derived from prior organ donors and methods of manufacture and use thereof |
US11435350B2 (en) | 2018-09-18 | 2022-09-06 | Medeor Therapeutics, Inc. | Methods of analysis of blood from deceased donors |
US11813376B2 (en) | 2018-09-18 | 2023-11-14 | Medeor Therapeutics, Inc. | Cellular compositions derived from deceased donors to promote graft tolerance and manufacture and uses thereof |
US11845771B2 (en) | 2018-12-27 | 2023-12-19 | Glycomimetics, Inc. | Heterobifunctional inhibitors of E-selectin and galectin-3 |
CN110840914B (zh) * | 2019-11-23 | 2021-07-06 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗剂用于缓解或改善血管病变的方法 |
CN110882276B (zh) * | 2019-11-23 | 2021-07-06 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗组合物及治疗血管病变的方法 |
US20210317414A1 (en) * | 2020-04-14 | 2021-10-14 | Tzu Chi University | Methods for mobilizing stem cells |
CN112042597B (zh) * | 2020-07-22 | 2022-04-29 | 南京普恩瑞生物科技有限公司 | 一种双人源化肿瘤异种移植模型的构建方法 |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5004681B1 (en) * | 1987-11-12 | 2000-04-11 | Biocyte Corp | Preservation of fetal and neonatal hematopoietic stem and progenitor cells of the blood |
US5192553A (en) * | 1987-11-12 | 1993-03-09 | Biocyte Corporation | Isolation and preservation of fetal and neonatal hematopoietic stem and progenitor cells of the blood and methods of therapeutic use |
US5858752A (en) * | 1995-06-07 | 1999-01-12 | The General Hospital Corporation | Fucosyltransferase genes and uses thereof |
WO1997032025A1 (en) * | 1996-03-01 | 1997-09-04 | Regents Of The University Of Minnesota | Method for selective engraftment of drug-resistant hematopoietic stem cells |
US5919176A (en) * | 1996-05-14 | 1999-07-06 | Children's Hospital Medical Center Of Northern California | Apparatus and method for collecting blood from an umbilical cord |
WO1998055630A2 (en) * | 1997-06-06 | 1998-12-10 | The Governors Of The University Of Alberta | Alpha-1,3-fucosyltransferase of helicobacter pylori |
IL125532A0 (en) * | 1998-07-27 | 1999-03-12 | Yeda Res & Dev | Hematopoietic cell composition for use in transplantation |
WO2000014199A2 (en) * | 1998-09-03 | 2000-03-16 | Cummings Richard D | Fucosyltransferases, polynucleotides encoding fucosyltransferases, and transgenic mammals incorporating same |
US6508978B1 (en) | 2000-05-31 | 2003-01-21 | Callaway, Golf Company | Golf club head with weighting member and method of manufacturing the same |
JP4198990B2 (ja) * | 2000-10-18 | 2008-12-17 | ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド | 造血細胞のe−セレクチン/l−セレクチンリガンドポリペプチドおよびその使用法 |
US7332334B2 (en) | 2003-04-18 | 2008-02-19 | Oklahoma Medical Research Foundation | Hematopoietic stem cells treated by in vitro fucosylation and methods of use |
ES2348008T3 (es) | 2003-06-18 | 2010-11-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Transportador de fucosa. |
WO2005017115A2 (en) * | 2003-08-11 | 2005-02-24 | Mount Sinai School Of Medicine Of New York University | Cord blood-derived hematopoietic progenitor cells |
US20140161782A1 (en) | 2008-06-09 | 2014-06-12 | Targazyme, Inc. | Augmentation of cell therapy efficacy including treatment with alpha 1-3 fucoslytransferase |
ES2627043T3 (es) | 2008-06-09 | 2017-07-26 | Targazyme, Inc. | Aumento de la eficacia de la terapia celular incluyendo tratamiento con alfa 1-3 fucoslitransferasa |
WO2016007506A1 (en) | 2014-07-07 | 2016-01-14 | Targazyme, Inc. | Manufacture and cryopreservation of fucosylated cells for therapeutic use |
-
2004
- 2004-01-30 US US10/769,686 patent/US7332334B2/en active Active
- 2004-03-03 CA CA2522743A patent/CA2522743C/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-03 AU AU2004233146A patent/AU2004233146B2/en not_active Ceased
- 2004-03-03 ES ES04716880T patent/ES2415734T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-03 JP JP2006509036A patent/JP4699360B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-03-03 ES ES10181456.4T patent/ES2478717T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-03 WO PCT/US2004/006474 patent/WO2004094619A2/en active Application Filing
- 2004-03-03 EP EP10181456.4A patent/EP2327760B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-03-03 CA CA2816907A patent/CA2816907C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-03-03 EP EP04716880A patent/EP1668109B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-06-07 US US11/448,359 patent/US7776591B2/en active Active
-
2010
- 2010-02-17 US US12/707,481 patent/US8084255B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-11-17 US US12/948,489 patent/US8633021B2/en active Active
-
2013
- 2013-05-14 US US13/894,123 patent/US9511095B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2016
- 2016-07-27 US US15/221,196 patent/US20160331785A1/en not_active Abandoned
-
2017
- 2017-11-27 US US15/822,666 patent/US10799538B2/en not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JPN6010000128, Blood, vol.95, pp.478−486 (2000) * |
JPN6010000129, J.Clin.Invest., vol.110, pp.559−569 (2002) * |
JPN6010000130, J.Biol.Chem., vol.271, pp.3255−3264 (1996) * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2017525340A (ja) * | 2014-07-07 | 2017-09-07 | ターガザイム,アイエヌシー. | 治療的用途のためのフコシル化細胞の製造および凍結保存 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1668109A4 (en) | 2007-10-24 |
EP2327760A3 (en) | 2011-08-24 |
US20160331785A1 (en) | 2016-11-17 |
WO2004094619A3 (en) | 2007-04-19 |
US8084255B2 (en) | 2011-12-27 |
US9511095B2 (en) | 2016-12-06 |
US20110097308A1 (en) | 2011-04-28 |
CA2522743A1 (en) | 2004-11-04 |
US7332334B2 (en) | 2008-02-19 |
US20060228340A1 (en) | 2006-10-12 |
EP2327760A2 (en) | 2011-06-01 |
US20180078583A1 (en) | 2018-03-22 |
EP1668109A2 (en) | 2006-06-14 |
AU2004233146A1 (en) | 2004-11-04 |
CA2816907C (en) | 2016-07-05 |
CA2522743C (en) | 2013-08-06 |
US8633021B2 (en) | 2014-01-21 |
CA2816907A1 (en) | 2004-11-04 |
JP4699360B2 (ja) | 2011-06-08 |
WO2004094619A2 (en) | 2004-11-04 |
ES2478717T3 (es) | 2014-07-22 |
ES2415734T3 (es) | 2013-07-26 |
EP2327760B1 (en) | 2014-04-23 |
US20040209357A1 (en) | 2004-10-21 |
US20100150883A1 (en) | 2010-06-17 |
AU2004233146B2 (en) | 2006-11-30 |
EP1668109B1 (en) | 2013-01-02 |
US10799538B2 (en) | 2020-10-13 |
US7776591B2 (en) | 2010-08-17 |
US20130251688A1 (en) | 2013-09-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4699360B2 (ja) | インビトロフコシル化により処理された造血性幹細胞およびその使用法 | |
JP2016188242A (ja) | 細胞表面グリカンを修飾するための組成物および方法 | |
CN104093314A (zh) | 使用针对t/b细胞耗尽的特异性方案的用于稳定和长期植入的联合疗法 | |
US20110091434A1 (en) | Augmentation of cell therapy efficacy including treatment with alpha 1-3 fucosyltransferase | |
US20050118142A1 (en) | Cellular compositions which facilitate engraftment of hematopoietic stem cells while minimizing the risk of gvhd | |
AU2009255663B2 (en) | Human facilitating cells | |
US11976298B2 (en) | Augmentation of cell therapy efficacy including treatment with alpha 1,3 fucosyltransferase | |
AU2015213389A1 (en) | Human facilitating cells |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100106 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100331 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100407 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100430 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100629 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100928 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20100928 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20100929 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20101006 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101228 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110201 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110302 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4699360 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |